Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARELE MEDICALE
2005
Ghid naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale reprezint traducerea i adaptarea n limba
romn a lucrrii Laboratory biosafety manual ediia a III-a, Organizaia Mondial a Sntii, Geneva,
2004, completat cu Clasicarea agenilor biologici care reprezint traducerea Anexei III a Directivei
2000/54 a Parlamentului European i Consiliului din data de 18 Septembrie 2000, referitoare la protejarea
lucrtorilor mpotriva riscurilor presupuse de expunerea la ageni biologici la locul de munc.
Responsabilitatea pentru ediia n limba romn revine grupului de lucru.
Lucrarea n limba romn a fost realizat cu asistena tehnic din partea Uniunii Europene prin urmtoarele
proiecte Phare:
- RO-2002/000-586.04.11.01 Restructurarea Reelei de Centre Regionale HIV/SIDA cu
scopul de a mbunti activitile de prevenire i accesul la ngrijiri al persoanelor infectate HIV
- RO 0107.14 Creterea ecienei sistemului romnesc de supraveghere epidemiologic
i control ale bolilor transmisibile
Grup de lucru (n ordine alfabetic)
Daniela Bdescu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
Dana Brehar Cioec - Institutul de Sntate Public Timioara
Dan Butur - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
Andrei Aubert-Combiescu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i
Imunologie Cantacuzino
Elena Crucerescu - Institutul de Sntate Public Iai
Lenua Filipa - Direcia de Sntate Public Dolj
Silvia Filipiuc - Direcia de Sntate Public Suceava
Maria Hncu - Direcia de Sntate Public Galai
Carmen Hura - Institutul de Sntate Public Iai
Luminia Smaranda Iancu - Institutul de Sntate Public Iai
Gabriel Ionescu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
tefan Maximencu - Institutul de Sntate Public Cluj
Mihaela Mihailov - Direcia de Sntate Public Bacu
Eugenia Negu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
Daniela Piigoi Universitatea de Medicin i Farmacie Carol Davila Bucureti
Elena Schiopu - Direcia de Sntate Public Sibiu
Mariana Solomon - Direcia de Sntate Public Hunedoara
Ecaterina Texe - Direcia de Sntate Public Bihor
Olivia Vizitiu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
Coordonatorul ediiei: Gabriel Ionescu
Alese mulumiri coordonatorilor de proiecte: Marc Lejars, Rob Stevens, Barbara Pearcy
Ghid naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale
Ministerul Sntii, Romnia, 2005
ISBN 973-99-893-7-3
Tiprit n 700 exemplare
MINISTERUL SNTII
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARELE MEDICALE
2005
Aceast difereniere a aprut n ultima ediie a manualului OMS, ind generat de evoluia
evenimentelor din societatea uman n ultimul deceniu, care au impus ateniei omenirii problema riscurilor
bioteroriste.
O dicultate deosebit a fost ntlnit pentru traducerea del i corect n limba romn a
termenului anglo-saxon Containment (tradus n textele franceze de specialitate prin Connement).
Iniial, acest termen fusese tradus prin interdicie (vezi Manualul pentru bioprotecie n laborator publicat
n 1996 n revista Studii i Cercetri de Virusologie). Au mai fost de asemenea avute n vedere ca variante
posibile termeni ca ngrdire, restricie, izolare, dar s-a considerat c nici unul nu acoper integral
sensul n care este folosit termenul de containment (respectiv connement) n textele de specialitate
pentru a indica pstrarea, manipularea i transportul n condiii de securitate pentru lucrtori i pentru
mediul nconjurtor a microorganismelor cu risc patogen. Am convenit prin consens s adoptm n acest
scop termenul de securizare (respectiv adjectivul securizat) pentru a evita utilizarea unor locuiuni mai
mult sau mai puin lungi.
A fost preferat termenul de hot de lucru, respectiv hot de siguran biologic sau hot de
protecie chimic pentru traducerea termenului anglo-saxon cabinet (v. biological safety cabinet) n
locul variantelor incint sau ni utilizate n alte texte, considernd c hota a intrat mai degrab n
limba romn cu nelesul cel mai apropiat de cel desemnat de englezescul cabinet folosit n acest
context.
Suntem convini c s-ar putut gsi n numeroase locuri din Ghid formulri mai potrivite i
ateptm sugestiile cititorilor pentru a ameliora textul n vederea publicrii unor ediii viitoare. Aceste sugestii
i critici pot adresate Dr. Gabriel Ionescu, I.N.C.D.M.I. Cantacuzino, Splaiul Independenei 103, Bucureti,
fax 021 3184414, email: gionescu@cantacuzino.ro.
Considerm c datele cuprinse n Ghidul de biosiguran ar trebui s fac parte i ele, ca i
cele din cadrul capitolului mare al demersului de calitate, din curricula formrii profesionale a cadrelor
superioare, medii i ajuttoare care se dedic lucrului n laboratoare biomedicale. Bineneles c aceste
noiuni vor trebui prezentate, mprosptate i actualizate cu ocazia instructajelor iniiale i a celor periodice
din cadrul ecrui laborator.
Pornind de la toate considerentele de mai sus, considerm c Ghidul naional de biosiguran
pentru laboratoarele medicale va constitui un ndreptar indispensabil pentru activitatea tuturor
laboratoarelor biomedicale din Romnia.
Prof. Dr. Andrei Aubert-Combiescu
Prof. Dr. Marian Negu
II
Cuvnt nainte
III
Mulumiri
Elaborarea acestei a III-a ediii a Manualului de biosiguran n laborator a fost posibil prin contribuia
deosebit a urmtorilor :
Dr W. Emmett Barkley, Howard Hughes Medical Institute, Chevy Chase, MD, USA
Dr Murray L. Cohen, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA (pensionat)
Dr Ingegerd Kallings, Swedish Institute of Infectious Disease Control, Stockholm, Sweden
Ms Mary Ellen Kennedy, Consultant in Biosafety, Ashton, Ontario, Canada
Ms Margery Kennett, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne, Australia
(pensionat)
Dr Richard Knudsen, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta,
GA, USA
Dr Nicoletta Previsani, Biosafety programme, World Health Organization, Geneva, Switzerland
Dr Jonathan Richmond, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta,
GA, USA (pensionat)
Dr Syed A. Sattar, Faculty of Medicine, University of Ottawa, Ottawa, Ontario, Canada
Dr Deborah E. Wilson, Division of Occupational Health and Safety, Ofce of Research Services, National
Institutes of Health, Department of Health and Human Services, Washington, DC, USA
Dr Riccardo Wittek, Institute of Animal Biology, University of Lausanne, Lausanne, Switzerland
Asistena urmtorilor specialiti este, de asemenea, apreciat:
Ms Maureen Best, Ofce of Laboratory Security, Health Canada, Ottawa, Canada
Dr Mike Catton, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne, Australia
Dr Shanna Nesby, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA,
USA
Dr Stefan Wagener, Canadian Science Centre for Human and Animal Health, Winnipeg, Canada
Autorii i referenii doresc s mulumeasc, de asemenea, pentru contribuiile originale ale numeroilor
specialiti a cror munc a fost inclus n prima i a doua ediie a Manualului de biosiguran n laborator
precum i n publicaia Sigurana n laboratoarele din unitile de ngrijire a sntii, OMS, 1997.
IV
CUPRINS
Cuvnt nainte la ediia n limba romn
Cuvnt nainte
III
Mulumiri
IV
Cuprins
1. Principii generale
17
21
6. Biobazele
25
31
33
45
47
57
63
71
75
85
89
93
97
103
105
107
22. List-chestionar
109
Anexa 1 - Primul-ajutor
115
117
119
121
125
151
Bibliograe
163
V
1. PRINCIPII GENERALE
1. Principii generale
Introducere
Prezentul ghid se refer la pericolul infecios implicat de manipularea diferitelor microorganisme,
lund n considerare grupurile de risc crora le aparin (Grupurile de Risc OMS 1, 2, 3 i 4, vezi Anexa 6).
Aceast clasicare a grupurilor de risc este valabil doar pentru activitatea de laborator. Tabelul 1
descrie grupurile de risc.
Tabel 1. Clasicarea microorganismelor infecioase pe grupuri de risc
Grup de risc 1 (risc infecios individual sau comunitar sczut sau absent)
Microorganisme cu probabilitate minim de a provoca mbolnvire la om sau animal
Grup de risc 2 (risc individual moderat, risc comunitar sczut)
Ageni patogeni care pot provoca mbolnvire la om sau animal, dar este puin probabil s reprezinte
un pericol sever pentru personalul de laborator, comunitate, faun sau mediu. Expunerile n laborator
pot cauza infecii severe dar pentru care exist tratament ecace i msuri prolactice, iar riscul de
rspndire al infeciei este limitat.
Grup de risc 3 (risc individual ridicat, risc comunitar sczut)
Ageni patogeni care n mod obinuit provoac mbolnvire sever la om sau animal, dar, de regul,
nu se rspndesc de la un individ infectat la altul. Exist tratament ecace i msuri prolactice.
Grup de risc 4 (risc individual i comunitar ridicat)
Ageni patogeni care provoac, de regul, mbolnvire sever la om sau animal i care se pot
transmite spontan de la un individ la altul, direct sau indirect. Nu exist, n general, tratament ecace
i msuri prolactice.
Nivel de
biosiguran
Tip de laborator
Practici de laborator
GMT plus
Servicii de asisten
De baz - Nivel de
mbrcminte de
primar; diagnostic,
biosiguran 2
protecie i semn de
cercetare
pericol biologic
Securizat
Nivel de
biosiguran 3
Servicii speciale
de diagnostic,
cercetare
nalt securizat
- Nivel de
biosiguran 4
Similar cu nivelul 3
plus intrare etan,
Uniti pentru ageni
du la ieire,
patogeni periculoi
eliminare special a
deeurilor
GMT
Similar cu nivelul 2
plus mbrcminte
special, acces
controlat, ux de aer
direcionat
Echipamente de
protecie
Nici un fel; suprafa
de lucru deschis
Suprafa de lucru
deschis plus HSB
pentru producerea
eventual de aerosoli
HSB i/sau alte
dispozitive primare
pentru toate
activitile
HSB clasa a III-a sau
costum cu presiune
pozitiv combinat cu
HSB clasa a II-a,
autoclav cu dou ci
de acces (transmural),
aer ltrat
1. PRINCIPII GENERALE
de risc cruia i aparine microorganismul, dar i ali factori ce pot interveni. Pentru exemplicare, un
microorganism aparinnd grupului de risc 2 necesit n general localuri i utiliti, echipamente, practici
i proceduri pentru desfurarea n siguran a activitilor caracteristice Nivelului de biosiguran 2. Dac
totui anumite experimente sunt generatoare de aerosoli n concentraii mari, Nivelul de biosiguran 3
este mai indicat, asigurnd un grad superior de limitare a aerosolilor la spaiul de lucru al laboratorului.
Aprecierea nivelului de biosiguran necesar desfurrii unei anumite activiti este ghidat de judecata
profesional bazat pe evaluarea riscului, i nu doar pe desemnarea mecanic a unui nivel de biosiguran
a laboratorului dupa grupul de risc cruia i aparine microorganismul patogen care urmeaz a manipulat
(vezi Capitolul 2).
Tabelul 3 prezint principalele cerine pentru ecare nivel de biosiguran.
Tabel 3. Rezumat al cerinelor nivelelor de biosiguran
Izolarea(a) laboratorului
ncpere etanabil pentru decontaminare
Ventilaia:
- ux de aer direcionat spre interior
- sistem de ventilaie controlat
- evacuarea aerului prin ltre HEPA
Intrare cu u dubl
Sas (c)
Sas cu du
Anticamer
Anticamer cu du
Tratarea euenilor
Autoclav:
- n institutie/cldire
- n laborator
- cu acces dublu (transmural)
Hote de siguran biologic:
Capacitate de monitorizare a siguranei
personalului (e)
1
Nu
Nu
Nivel de biosiguran
2
3
Nu
Da
Nu
Da
4
Da
Da
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
De dorit
De dorit
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Da
Da
Da / Nu(b)
Da
Nu
Nu
Da
Da / Nu(d)
Da / Nu(d)
Da
Da
Da
Da
Da
Da
Da
Nu
Da
Da
Nu
Nu
Nu
Nu
Da
Nu
Nu
De dorit
Nu
Da
De dorit
De dorit
Da
De dorit
Da
Da
Da
Da
Da
Coloana vertebral a practicilor de biosiguran este evaluarea riscului. Dei exist o multitudine
de instrumente destinate a ajuta evaluarea riscului pentru o procedur sau pentru un experiment, cel mai
important component este reprezentat de evaluarea (judecata) profesional. Evaluarea riscului ar trebui
realizat de ctre specialitii cei mai familiarizai cu caracteristicile specice ale microorganismelor ce vor
utilizate, cu procedurile i echipamentele, cu animalele ce pot folosite ca model i cu echipamentele i
facilitile disponibile pentru o manipulare securizat. eful laboratorului sau investigatorul principal sunt
rspunztori pentru evaluarea adecvat i la timp, precum i pentru conlucrarea strns cu colectivul
de protecia muncii i personalul de biosiguran n vederea asigurrii echipamentului i facilitilor
necesare desfurrii activitii pentru care s-a fcut evaluarea. Dupa evaluarea iniial a riscului, acesta
se reevalueaz periodic i se revizuiete dac se consider necesar, lund n considerare acumularea de
noi date corelate cu problema gradului de risc i informaiile din literatura de specialitate.
Unul din cele mai utile instrumente pentru evaluarea riscului microbiologic este listarea grupurilor
de risc pentru agenii microbiologici (vezi Capitolul 1). Simpla referire la grupurile de risc pentru un anumit
agent microbian este insucient pentru evaluarea riscului. Ali factori ce vor trebui luai n considerare
sunt urmtorii:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
Pe baza informaiilor obinute prin evaluarea riscului, se stabilete nivelul de siguran biologic
necesar desfurrii activitii planicate, se selecteaz echipamentul corespunztor proteciei
personalului i procedurile operaionale standard (POS) ce vor include aspecte de siguran a muncii, cu
scopul desfurrii activitii n modul cel mai sigur posibil.
3. Laboratoarele de baz
Nivelele de Biosiguran 1 i 2
Acest ghid prezint cerinele minime pentru laboratoare clasicate pe toate nivelele de
biosiguran, care manipuleaz microorganisme din Grupurile de risc 1-4. Dei unele precauii pentru
anumite microorganisme din Grupul de risc 1 pot prea mai puin justicate, se recomand aplicarea lor
cu scopul nsuirii i promovrii practicilor microbiologice corecte.
Toate laboratoarele medicale (de sntate public sau de diagnostic clinic n ambulatorii, spitale,
etc) trebuie concepute conform unui Nivel de biosiguran 2 sau peste. Deoarece nici un laborator nu
are un control complet asupra probelor pe care le primete, personalul din laborator poate expus
la microorganisme din grupuri de risc superioare celor anticipate. Aceast posibilitate trebuie luat n
considerare cnd se elaboreaz planurile i politicile de biosiguran. De regul, precauiile standard
trebuie adoptate i aplicate ntotdeauna.
Regulile pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2, prezentate n acest manual,
sunt cuprinztoare i detaliate, ele ind fundamentale pentru toate laboratoarele, indiferent de nivelul de
biosiguran.
Recomandrile pentru laboratoarele securizate Nivel de biosiguran 3 i nalt securizate Nivel de biosiguran 4, care urmeaz (Capitolele 4 i 5), constituie de fapt modicri i suplimentri ale
acestor reguli, destinate lucrului cu ageni patogeni mai periculoi.
3.1. Codul de practici
Acest cod este o list a celor mai importante practici i proceduri de laborator care stau la baza
practicilor microbiologice corecte (good microbiological techniques = GMT). n multe laboratoare i
programe naionale n care acestea particip, acest cod se poate utiliza pentru elaborarea de reguli i
proceduri scrise pentru efectuarea n siguran a operaiunilor n laborator.
Fiecare laborator trebuie s adopte un manual de siguran sau de operaiuni care s identice
pericolele cunoscute sau poteniale precum i procedurile i practicile specice pentru eliminarea sau
reducerea la minimum a acestor pericole. GMT sunt fundamentale pentru sigurana activitilor de
laborator. Echipamentul special de laborator este un element suplimentar, care nu va putea ns niciodat
s nlocuiasc aplicarea procedurilor corecte. Cele mai importante concepte sunt enumerate mai jos.
3.1.1. Accesul
1. Sigla internaional de avertizare i inscripia Pericol biologic (Figura 1) trebuie s e aate pe uile
ncperilor unde sunt manipulate microorganisme aparinnd grupului de risc 2 sau mai mare.
2. Numai persoanele autorizate vor lsate s intre n zonele de lucru ale laboratorului.
3. Uile laboratorului trebuie s stea nchise.
4. Copiii nu trebuie autorizai sau lsai s intre n zonele de lucru ale laboratorului.
5. Accesul n biobaze trebuie s se fac numai pe baza unei autorizaii speciale.
6. Nu se admite accesul altor animale n afara celor folosite pentru activitile de laborator
3. Toate procedurile tehnice trebuie efectuate ntr-un mod care s reduc la minimum formarea de
aerosoli i picturi.
4. Folosirea acelor i seringilor hipodermice trebuie limitat. Ele nu trebuie folosite ca substituente ale
dispozitivelor de pipetare sau pentru oricare alt manoper ce nu reprezint injecii parenterale sau
aspirarea de uide de la animalele de laborator.
5. Toate stropirile accidentale i expunerile evidente sau posibile cu material infecios trebuie raportate
responsabilului laboratorului. Se va pstra o eviden scris a acestor accidente i incidente.
6. Se va elabora i aplica o procedur scris pentru curarea-inactivarea substanelor vrsate.
7. Lichidele contaminate trebuie decontaminate (chimic sau zic) naintea evacurii lor n reeaua de
canalizare. n funcie de riscul evaluat se poate dezvolta un sistem de tratare a acestor lichide.
8. Documentele ce urmeaz a scoase din laborator trebuie s e protejate pe toat perioada ct se a
n laborator, pentru a nu contaminate.
3.1.4. Zonele de lucru ale laboratorului
1. n laborator trebuie pstrat curenia i ordinea, eliminndu-se toate materialele care nu sunt
necesare pentru munca desfurat n laborator.
2. Suprafeele de lucru trebuie decontaminate dup ecare vrsare de materiale potenial periculoase
precum i la sfritul zilei de lucru.
3. Toate materialele contaminate, probele i culturile, trebuie decontaminate nainte de a ndeprtate
sau curate pentru refolosire.
4. Ambalarea i transportul trebuie s respecte reglementrile naionale i/sau internaionale n vigoare.
5. Ferestrele ce pot deschise trebuie prevzute cu plase/ecrane pentru insecte.
3.1.5. Managementul biosiguranei
1. eful de laborator (persoana care poart n mod direct responsabilitatea laboratorului) are obligaia
s asigure elaborarea i adoptarea unui plan de management al biosiguranei i ale unui manual de
siguran i operaiuni.
2. Responsabilul cu activitatea laboratorului (subordonat efului laboratorului) trebuie s asigure
instruirea periodic a personalului laboratorului n domeniul siguranei.
3. Personalul trebuie avertizat asupra pericolelor speciale i are obligaia s citeasc manualul de
siguran i operaiuni i s respecte procedurile i practicile standard. Responsabilul laboratorului
trebuie s se asigure c toi membrii personalului i-au nsuit aceste reguli. O copie a manualului de
siguran i operaiuni trebuie s existe permanent n laborator pentru a putea consultat n orice
moment.
4. Trebuie s existe un program de dezinsecie i deratizare.
5. Trebuie asigurate, n caz de necesitate, pentru toi membrii personalului, o evaluare medical adecvat,
supraveghere i tratament, i trebuie inute evidene medicale adecvate.
3.2. Conceperea structurii i facilitilor laboratorului
n proiectarea laboratorului i stabilirea efecturii anumitor activiti n spaiul acestuia, se va
acorda o atenie deosebit situaiilor despre care se tie c ridic probleme de siguran. Acestea sunt:
1. Formarea de aerosoli
2. Manipularea de volume mari i/sau de concentraii ridicate de microorganisme
3. Supraaglomerarea spaiului de lucru sau acumularea de prea multe echipamente
4. Infestarea cu roztoare i insecte
5. Accesul neautorizat
6. Circuit de lucru: folosirea anumitor probe sau a unor reactivi specici.
9
17. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de curent electric i un sistem de iluminare pentru
situaiile de urgen care s faciliteze ieirea din laborator. Un generator de rezerv este de dorit
pentru susinerea echipamentelor eseniale (incubatoare, hote de biosiguran, congelatoare, etc.) i
pentru ventilarea cutilor cu animale.
18. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de gaz. Buna ntreinere a instalaiei este obligatorie.
19. Laboratoarele i cldirile biobazelor sunt uneori inta vandalizrilor. Trebuie avute n vedere securitatea
zic i mpotriva incendiilor. Uile solide, ferestrele protejate i eliberarea controlat a cheilor de
acces sunt obligatorii. Alte msuri trebuie luate n considerare i aplicate dac este necesar pentru
creterea siguranei.
3.3. Echipamentele de laborator
mpreun cu procedurile i practicile corecte, utilizarea echipamentelor de siguran contribuie
la reducerea riscului. Acest capitol trateaz principiile de baz legate de echipamentele utilizate n toate
laboratoarele, indiferent de nivelul de biosiguran. Exigenele legate de echipamentul de laborator pentru
nivelele superioare de biosiguran sunt tratate n capitolele respective.
eful de laborator are obligaia ca, dup consultarea cu responsabilul cu biosigurana i colectivul
de siguran, s asigure ca echipamentul adecvat s e procurat i folosit corespunztor. Echipamentul
va ales lund n considerare cteva principii generale, de exemplu:
1. S e conceput astfel nct s previn sau s limiteze contactul dintre operator i materialul
infecios.
2. S e confecionat din materiale impermeabile la lichide, rezistente la coroziune i corespunztoare
ca structur.
3. S e confecionat astfel nct s nu aib asperiti, margini ascuite i pri mobile neprotejate.
4. S e proiectat, construit i instalat pentru a facilita operarea simpl i ntreinerea, curarea,
decontaminarea i testarea n vederea certicrii; ori de cte ori este posibil, se va evita utilizarea
sticlriei i a altor materiale casante.
Este util s se consulte n detaliu documentaia privind performanele i specicaiile de construcie
ale echipamentelor pentru a dobndi convingerea c prezint caracteristicile de siguran necesare (vezi
Capitolele 10 i 11).
3.3.1. Echipamente eseniale pentru asigurarea biosiguranei
1. Dispozitive de pipetare, pentru a evita pipetarea cu gura. Sunt disponibile diverse modele.
2. Hotele de biosiguran, ce trebuie folosite ori de cte ori:
- se manipuleaz materiale infecioase; aceste materiale pot centrifugate n spaiul deschis
al laboratorului dac se folosesc cupe de centrifug cu dispozitiv de securizare i dac sunt
introduse i descrcate ntr-o hot de biosiguran
- exist risc crescut de infecii aerogene
- se folosesc proceduri cu potenial ridicat de producere de aerosoli: centrifugarea, mojararea,
secionarea, agitarea sau mixarea viguroas, dezintegrarea sonic, deschiderea containerelor
cu material infecios cu presiune intern diferit de presiunea ambiant, inocularea intranazal a
animalelor i recoltarea de esuturi infectate de la animale i ou, etc.
12
3. Anse de transfer de unic folosin din plastic. Alternativ, n scopul reducerii producerii de aerosoli, n
interiorul hotei de biosiguran se pot folosi incineratoare electrice pentru anse de transfer.
4. Tuburi i acoane cu capace prevzute cu let.
5. Autoclave sau alte mijloace folosite pentru decontaminarea materialului infecios.
6. Pipete Pasteur de unic folosin din plastic, ori de cte ori este posibil, evitnd utilizarea celor din sticl.
7. Echipamentele precum autoclavele i hotele de biosiguran trebuie validate cu metode adecvate
nainte de a introduse n uz. Acestea trebuie recerticate la intervale regulate de timp, n acord cu
instruciunile productorului (vezi Capitolul 7).
3.4. Supravegherea strii de sntate a personalului
Autoritatea angajatoare, prin eful de laborator, este responsabil de asigurarea unei supravegheri
adecvate a strii de sntate a personalului laboratorului. Obiectivul acestei supravegheri este
monitorizarea strii de sntate n relaie cu factorul ocupaional. Activitile ce trebuie desfurate pentru
ndeplinirea acestor obiective sunt:
1. Imunizarea activ i pasiv ori de cte ori acest lucru este indicat (vezi Anexa 2).
2. Facilitarea depistrii precoce a infeciilor dobndite n laborator.
3. Excluderea indivizilor cu susceptibilitate crescut, ca de exemplu femeile nsrcinate sau persoanele
imunodeprimate, din locurile sau activitile de laborator cu periculozitate crescut.
4. Asigurarea personalului cu echipamente de protecie i proceduri ecace.
3.4.1. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz microorganisme
la Nivelul de biosiguran 1
Experiena activitii n acest tip de laboratoare arat c, n cazul manipulrii microorganismelor la
acest nivel, este improbabil producerea de mbolnviri ale oamenilor sau de afeciuni ale animalelor cu
importan sub raport veterinar. Se recomand, totui, efectuarea unui control medical nainte de angajare
la tot personalul, cu nregistrarea antecedentelor medicale. Se recomand raportarea prompt a strilor
de boal sau a accidentelor de laborator, iar ntreg personalul trebuie s e contient de importana
respectrii practicilor corecte microbiologice.
3.4.2. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz microorganisme
la Nivelul de biosiguran 2
1. Este necesar un control medical nainte de angajare. Ar trebui nregistrate antecedentele personale
medicale i evaluat starea de sntate n relaie cu factorul ocupaional.
2. nregistrrile privind mbolnvirile i absenele ar trebui pstrate de ctre eful laboratorului.
3. Femeile de vrst fertil ar trebui informate cu privire la riscul expunerii ftului prin factor ocupaional
la anumite microorganisme (ex. virusul rubeolic). Precauiile pentru protejarea ftului variaz n funcie
de microorganismele la care pot expuse viitoarele mame.
3.5. Pregtirea personalului
Erorile umane i tehnica decitar pot compromite i cele mai bune reguli i bariere de siguran
menite a proteja personalul laboratorului. Pe de alt parte, un personal contient de exigenele impuse
de regulile de siguran, bine informat pentru recunoaterea i stpnirea pericolelor din laborator, este
13
cheia prevenirii producerii acestor infecii, a incidentelor i accidentelor. n acest scop, instruirea continu
la locul de munc privind msurile de siguran este esenial. Un program ecace de siguran ncepe
cu conducerea laboratorului, care trebuie s se asigure c practicile i procedurile de siguran sunt
integrate n instruirea de baz a salariailor. Instructajul n ceea ce privete msurile de siguran trebuie
s e parte integrant a instruirii noilor salariai din laborator. Salariailor trebuie s li se prezinte codul
de practici i reglementrile locale, inclusiv manualul de siguran i de operaiuni. Se vor lua msuri
care s demonstreze c salariaii le-au citit i neles, spre exemplu, prin semntur. Responsabilii
laboratorului joac un rol cheie n pregtirea personalului n ceea ce privete tehnicile corecte de laborator.
Responsabilul cu biosigurana poate s sprijine procesul de instruire prin punerea la dispoziie a unei
documentaii specice i a altor mijloace ajuttoare (vezi Capitolul 21).
Instruirea personalului ar trebui s cuprind ntotdeauna informaii despre metodele sigure n
cazul procedurilor cu risc crescut, cu care ntreg personalul laboratorului se ntlnete n mod curent i
care implic :
1. Riscul de inhalare (ex. producerea de aerosoli) cu ocazia folosirii anselor, nsmnrii plcilor cu
agar, pipetrii, etalrii frotiurilor, deschiderii recipientelor ce conin culturi, recoltrii de probe de snge
/ ser, centrifugrii, etc.
2. Riscul de ingerare, cu ocazia manipulrii probelor, frotiurilor i culturilor.
3. Riscul de expunere percutan, prin folosirea seringilor i acelor.
4. Mucturi i zgrieturi n cazul manipulrii animalelor.
5. Manipularea sngelui i a altor produse patologice potenial periculoase.
6. Decontaminarea i eliminarea materialelor infecioase.
3.6. Manipularea deeurilor
Se consider deeuri toate materialele care se arunc.
n laboratoare, n desfurarea activitii cotidiene, decontaminarea deeurilor i eliminarea
nal a acestora sunt strns legate. Un numr foarte mic de materiale contaminate necesit ndeprtarea
efectiv din laborator sau distrugerea. Majoritatea sticlriei, instrumentelor i articolelor de mbrcminte
sunt refolosite sau reciclate. Principiul general ce trebuie s funcioneze este c toate materialele
infecioase vor decontaminate, autoclavate sau incinerate n laborator.
Principalele probleme care se pun, nainte de eliminarea oricriu obiect sau material din
laboratoarele ce lucreaz cu microorganisme potenial infecioase sau esuturi de la animale, sunt:
1. Au fost obiectele sau materialele respective ecient decontaminate sau dezinfectate printr-o procedur
autorizat?
2. Dac nu, au fost ele ambalate ntr-un mod autorizat pentru incinerare imediat la faa locului sau
pentru transfer ntr-o alt locaie cu posibiliti de incinerare?
3. Aruncarea obiectelor sau materialelor decontaminate implic eventual alte pericole adiionale,
biologice sau de alt tip, pentru cei care ndeplinesc procedurile de eliminare sau care ar putea veni n
contact cu obiectele eliminate n afara perimetrului respectiv?
3.6.1. Decontaminarea
Autoclavarea cu abur este metoda de elecie pentru toate procesele de decontaminare.
Materialele care urmeaz s e decontaminate i eliminate vor puse n containere adecvate (ex. saci
14
din plastic autoclavabil, cu coduri de culori care indic destinatia coninutului acestora pentru autoclavare
i/sau incinerare). Pot luate n consideraie i metode alternative doar dac acestea ndeprteaz i/sau
omoar microorganismele (pentru mai multe detalii vezi Capitolul 14).
3.6.2. Procedurile de manipulare i eliminare a materialelor contaminate i a deeurilor
Trebuie adoptat un sistem de identicare i de separare a materialelor infecioase i a containerelor
respective. Vor obligatoriu respectate reglementrile naionale i internaionale n domeniu. Categoriile
care se includ sunt urmtoarele:
1. Deeurile necontaminate (neinfecioase) care pot refolosite, reciclate sau eliminate ca deeuri
generale sau menajere
2. Obiectele ascuite (tietoare-neptoare) contaminate (ex. ace hipodermice, bisturie, cuite i cioburi
de sticl); acestea vor ntotdeauna colectate n containere rezistente la nepare-tiere, prevzute
cu capace i vor tratate ca infecioase.
3. Materialul contaminat destinat decontaminrii prin autoclavare urmat de splare i refolosire sau
reciclare.
4. Materialul contaminat destinat autoclavrii i eliminrii.
5. Materialul contaminat destinat incinerrii directe.
Obiectele ascuite
Dup utilizare, acele hipodermice nu trebuie reacoperite, tiate sau detaate din seringile de
unic folosin. ntregul ansamblu trebuie plasat n containerul pentru obiecte ascuite. Seringile de unic
folosin, folosite separat sau cu ace, trebuie plasate n containere i incinerate, cu autoclavare prealabil
dac este necesar.
Containerele pentru obiecte ascuite (tietoare-neptoare) trebuie s e rezistente la neparetiere i nu trebuie umplute la capacitatea maxim. Cnd sunt umplute pe , aceste containere trebuie
plasate n containere pentru deeuri infecioase i incinerate, cu autoclavare prealabil dac practica
laboratorului o necesit. Containerele pentru obiecte tietoare-neptoare nu trebuie aruncate n mediul
nconjurtor.
Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate autoclavrii i refolosirii
Se interzice curarea prealabil a oricrui material contaminat (potenial infecios) destinat
autoclavrii i refolosirii. Orice curare sau reparaie trebuie fcut doar dup autoclavare sau
dezinfecie.
Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate eliminrii
n afar de obiectele tietoare-neptoare, care au fost tratate mai sus, toate materialele
contaminate (potenial infecioase) trebuie autoclavate n containere etane, de exemplu saci de plastic
autoclavabil, colorai conform unui cod de culori, nainte de a eliminate. Dup autoclavare, materialul poate
plasat n containere de transfer ctre incinerator. Dac este posibil, materialele rezultate din activitile de
asisten medical nu trebuie eliminate n mediul extern, la rampele de depozitare a deeurilor, nici dup
decontaminare. Dac exist un incinerator disponibil la nivelul laboratorului, autoclavarea se poate omite:
deeurile contaminate trebuie plasate n containere speciale (de exemplu, saci cu culori corespunztoare
unui cod) i transportate direct la incinerator. Containerele de transfer refolosibile trebuie s nu prezinte
scurgeri i s aib capace etane.
15
Recipiente de colectare, preferabil incasabile, trebuie plasate la ecare punct de lucru. Cnd
se folosete un dezinfectant, deeurile materiale trebuie s rmn n contact direct cu acesta (ex.
neprotejate de bule de aer) un interval de timp corespunztor, n conformitate cu instruciunile de folosire
a dezinfectantului utilizat (vezi Capitolul 14). Containerele de colectare i transport vor decontaminate
i splate nainte de refolosire.
Incinerarea deeurilor contaminate trebuie s se fac n conformitate cu prevederile autoritilor
de sntate public i de protecie a mediului, ca i cu normele de biosiguran din laborator (vezi
seciunea despre incinerare n Capitolul 14).
3.7. Sigurana chimic, mpotriva incendiilor, electric, mpotriva radiaiilor i a echipamentelor
O bre/discontinuitate n sistemul de securizare al microorganismelor patogene poate rezultatul
indirect al unor accidente chimice, incendii, accidente electrice sau legate de radiaii.
Este esenial meninerea unor standarde ridicate de siguran n aceste domenii, n orice
laborator microbiologic. Reguli i regulamente de funcionare pentru toate aceste domenii trebuie elaborate
de autoritatea naional sau local competent, al crei sprijin trebuie solicitat n caz de necesitate.
Pericolele chimice, electrice, de incendiu i cele radioactive sunt tratate mai detaliat n Capitolele 15-17.
16
4. Laboratorul securizat
Nivelul de Biosiguran 3
19
1. Examenul medical al ntregului personal care lucreaz n laboratorul securizat - Nivel de biosiguran
3 este obligatoriu. Acesta include nregistrarea detaliat a antecedentelor medicale i un examen
medical intit asupra aspectelor legate de factorul ocupaional.
2. O prob de ser se recolteaz la angajare i se pstreaz ca referin pentru comparaii ulterioare.
3. Dup evaluarea clinic corespunztoare, salariatului examinat i se va nmna un card medical
de noticare (ex. aa cum apare n Figura 5) care dovedete c acesta lucreaz ntr-un laborator
securizat - Nivel de biosiguran 3. Cardul va cuprinde i o fotograe a posesorului cardului, va
avea o mrime care s-i permit a purtat ntr-un portmoneu i se va aa n permanen n posesia
acestuia.
(Fotograa posesorului)
.....................................
PENTRU ANGAJAT
Pstrai acest card asupra Dvs. In caz de boal febril neexplicat, prezentai acest card medicului Dvs. i anuntai pe unul
dintre cei de mai jos, n ordine.
_______________________________________________________________________
Dr.
Tel (serviciu):
Tel (acas)
_______________________________________________________________________
Dr.
Tel (serviciu):
Tel (acas)
20
Biosafety programme, Department of Communicable Disease Surveillance and Response, World Health Organization, 20 Avenue Appia,
1211 Geneva 27, Switzerland (http://www.who.int/csr/).
21
2. Accesul controlat. Laboratorul nalt securizat Nivel de Biosiguran 4 trebuie s e amplasat ntr-o
cldire separat sau ntr-o zon clar delimitat dintr-o cldire cu acces controlat. Intrarea i ieirea
personalului i a materialelor trebuie s se fac printr-un sas ce se nchide etan sau printr-un sistem
special de acces. La intrare, personalul trebuie s i schimbe complet mbrcmintea, iar nainte de
ieire trebuie s fac un du i abia dup aceea va mbrca hainele de strad.
3. Sistemul de control al aerului. n toate aceste incinte trebuie s se menin o presiune negativ. Att
aerul introdus ct i cel evacuat trebuie ltrat printr-un ltru HEPA. Exist diferene semnicative ntre
sistemele de ventilaie ale laboratoarelor cu hote de biosiguran clasa III i cele ale laboratoarelor cu
izolare n costume protectoare:
- Laboratorul cu hot de biosiguran clasa III. Alimentarea cu aer a hotei de siguran biologic
clasa III trebuie s se fac cu aerul din camer dup ce acesta a fost ltrat n prealabil
prin ltrul HEPA montat pe hot sau furnizat direct prin sistemul de asigurare cu aer. Aerul
evacuat din hota de siguran biologic clasa III trebuie ltrat prin dou ltre HEPA nainte
de a eliminat n afara laboratorului. Presiunea aerului din interiorul hotei va ntotdeauna
inferioar celei din restul laboratorului. Laboratorul cu hote trebuie dotat cu un sistem de
ventilaie propriu care s nu recircule aerul.
- Laboratorul cu izolare n costum de protecie. Sunt necesare sisteme proprii de alimentare
cu aer i evacuare a acestuia. Acestea sunt astfel echilibrate nct s genereze n spaiul
laboratorului o circulaie direcionat a aerului, dinspre zona cu cel mai mic spre cea cu cel
mai mare pericol potenial. Sistemul de evacuare a aerului trebuie s asigure meninerea
unei presiuni negative permanente n toate incintele. Se monitorizeaz presiunile difereniale
din interiorul laboratorului cu izolare n costum de protecie i dintre acesta i incintele
adiacente. Se monitorizeaz circulaia aerului n componentele sistemului de ventilaie.
De asemenea, va trebui s funcioneze un sistem de control pentru prevenirea creterii
presiunii n laborator. n zona unde este necesar purtarea costumului, n zona duurilor de
decontaminare, n sas-uri sau n camerele de decontaminare, aerul trebuie ltrat prin ltre
HEPA. Aerul din laborator va ltrat printr-o serie de dou ltre HEPA nainte de a eliminat
22
n spaiul din afara laboratorului. Alternativ, dup dubla ltrare prin ltre HEPA, aerul evacuat
poate recirculat, dar numai n interiorul laboratorului. Aerul evacuat din laboratorul de Nivel
de Biosiguran 4 cu izolare n costum protector nu va sub nici un motiv recirculat n alte
zone de lucru din afara laboratorului. Dac se opteaz pentru recircularea aerului n laborator
se impun precauii extreme. Se iau n considerare particularitile cercetrii desfurate,
caracteristicile echipamentului, ale substanelor chimice i ale altor materiale folosite n acest
tip de laborator, precum i speciile de animale folosite n timpul cercetrii.
Toate ltrele HEPA trebuie s e testate i certicate anual. Locaurile ltrelor HEPA sunt astfel
concepute nct s permit decontaminarea in situ a ltrelor nainte de ndeprtarea lor. Ca
alternativ, ltrele pot ndeprtate n containere sigilate, impermeabile pentru circulaia aerului,
urmnd ca ulterior s e decontaminate i/sau distruse prin incinerare.
4. Decontaminarea euenilor. Toi euenii din zona de utilizare a costumului protector, din camera i
duul de decontaminare sau din hota de biosiguran clasa III trebuie s e decontaminai nainte de
eliminarea nal. Metoda preferat este tratarea termic a acestora. Produsele reziduale pot necesita
o corectare a pH-ului la neutru nainte de eliminare. Apa folosit pentru duul personalului i toalet
poate evacuat direct n sistemul de canalizare, fr tratare prealabil.
5. Sterilizarea deeurilor i materialelor. Un autoclav cu dou ui trebuie s e accesibil din interiorul
laboratorului. Trebuie s existe i alte metode de decontaminare pentru echipamentul i produsele ce
nu suport sterilizare umed.
6. Ci de acces prevzute cu sas-uri trebuie asigurate de asemenea pentru probe, materiale i
animale.
7. Trebuie s existe circuite electrice special destinate de alimentare din reea precum i o surs
alternativ (generator) de energie electric.
8. Trebuie asigurate sisteme de canalizare securizate.
Avnd n vedere complexitatea ridicat din punct de vedere al proiectrii, realizrii construciei
i instalaiilor specice facilitilor pentru Nivelul de biosiguran 4, lucrarea de fa nu cuprinde o
reprezentare schematic a acesteia.
Datorit complexitii ridicate a activitii din laboratorul cu Nivel de biosiguran 4, trebuie elaborat
i testat prin exerciii de instruire un ghid detaliat de lucru. Suplimentar trebuie s e conceput un program
de aciune pentru situaiile de urgen (vezi Capitolul 13). Pentru pregtirea acestui program, trebuie
stabilite cooperri active cu autoritile naionale i locale de sntate. Vor cooptate alte servicii de
urgen, de exemplu pompieri, poliie i spitale special desemnate pentru primirea eventualelor urgene.
23
24
6. BIOBAZELE
6. Biobazele
Nivel de
securizare
n biobaza
acces limitat
mbrcminte de protecie i mnui
n aceast clasicare, factorii care in de agenii microbieni investigai / utilizai i care trebuie
luai n considerare sunt:
1.
2.
3.
4.
1.
2.
3.
4.
6. BIOBAZELE
11. Dup lucru, suprafeele de lucru trebuie decontaminate cu dezinfectante ecace (vezi Capitolul 14).
12. Vor prevzute cu HSB (clasele I i II) sau/i cuti izolatoare cu circuit separat de alimentare cu aer i
evacuare prin ltre HEPA pentru activitile potenial generatoare de aerosoli.
13. Trebuie s existe un autoclav n biobaz sau n imediata ei apropiere.
14. Materialele din aternutul animalelor trebuie s e ndeprtate n aa fel nct s se reduc la minimum
producerea de aerosoli i praf.
15. Toate dejectele, deeurile i aternutul animalelor trebuie decontaminate nainte de evacuare.
16. Folosirea instrumentelor neptoare/tietoare trebuie s e restricionat la minimum posibil. Obiectele
ascuite trebuie colectate n containere rezistente, prevzute cu capace, etichetate i tratate ca
infecioase.
17. Materialul destinat autoclavrii sau incinerrii trebuie s e transportat asigurat n containere nchise.
18. Dup folosire, cutile animalelor trebuie decontaminate.
19. Cadavrele animalelor trebuie incinerate.
20. n incinta biobazei trebuie purtate echipamente de protecie care nu vor purtate n afara acesteia. Se
vor folosi mnui de protecie corespunztoare.
21. Trebuie asigurate condiii pentru splarea minilor. Personalul trebuie s se spele pe mini nainte de
prsirea biobazei.
22. Toate rnirile, orict de mici, trebuie raportate i nregistrate.
23. Se interzice n incinta biobazei: consumul de alimente i buturi, fumatul i aplicarea de cosmetice.
24. Tot personalul trebuie instruit n mod corespunztor.
6.3. Biobaza cu nivel de biosiguran 3
Acest nivel de biosiguran se impune atunci cnd se lucreaz cu animale inoculate deliberat cu ageni
din grupul de risc 3 i/sau atunci cnd o evaluare a riscului impune acest lucru. Toate sistemele, practicile i
procedurile trebuie s e analizate i recerticate anual. Se aplic urmtoarele precauii de biosiguran:
1. Trebuie s e ndeplinite toate cerinele de la nivelurile de biosiguran 1 i 2 .
2. Accesul n biobaz trebuie s e controlat cu strictee.
3. Biobaza trebuie separat de alte zone ale laboratorului sau ale adpostului pentru animale printr-o
camer cu dou ui (anticamer).
4. n anticamer trebuie s existe condiii pentru splarea minilor.
5. n anticamer trebuie s existe, de asemenea, duuri.
6. Trebuie s se prevad un sistem de ventilare mecanic pentru a asigura un ux continuu de aer prin
toate camerele. Aerul evacuat trebuie s treac prin ltre HEPA nainte de a eliberat n atmosfer i nu
va recirculat. Sistemul trebuie proiectat i realizat astfel nct s previn inversri ale uxului de aer i
presurizri pozitive n oricare parte a biobazei.
7. Trebuie s existe un autoclav accesibil din zona securizat a biobazei. Deeurile contaminate microbian
trebuie autoclavate nainte de transferarea lor n alte zone ale biobazei.
8. Biobaza trebuie dotat cu un incinerator propriu permanent accesibil sau trebuie stabilite mpreun cu
autoritile modaliti alternative de evacuare a animalelor moarte n vederea incinerrii.
9. Animalele infectate cu microorganisme din grupul de risc 3 trebuie adpostite n cuti plasate n izolatoare
sau n camere cu guri de ventilaie plasate n spatele cutilor.
10. Materialele utilizate pentru aternutul animalelor ar trebui, pe ct este posibil, s nu genereze praf.
11. mbrcmintea de protecie purtat n incinta biobazei trebuie decontaminat nainte de splare.
12. Ferestrele trebuie s e nchise etan i rezistente la spargere.
13. Personalul care lucreaz n biobaz trebuie s e imunizat corespunztor.
27
6. BIOBAZELE
n cazul unor artropode, n special al insectelor zburtoare sunt necesare urmtoarele precauii
suplimentare.
1. Trebuie s se asigure ncperi separate pentru nevertebratele infectate i pentru cele care nu sunt
infectate.
2. ncperile trebuie s poat nchise etan atunci cnd se face dezinfecia prin fumigaie.
3. Trebuie s existe la ndemn spray-uri cu insecticide.
4. Trebuie s e asigurate instalaii de rcire, pentru a reduce, acolo unde este necesar, activitatea
nevertebratelor.
5. Accesul n complex trebuie s se fac printr-o anticamer avnd uile prevzute cu capcane pentru
insecte i ecrane de protecie mpotriva artropodelor.
6. Toate conductele de evacuare din sistemul de ventilaie i ferestrele care pot deschise trebuie s e
prevzute cu ecrane de protecie contra artropodelor.
7. Sifoanele de la chiuvete i cele din pardoseal nu trebuie lsate niciodat s se usuce asigurnd
obarier umed pentru a preveni evadarea nevertebratelor.
8. Toate deeurile trebuie decontaminate prin autoclavare, deoarece unele nevertebrate nu sunt omorte
de dezinfectani.
9. Trebuie s e meninut o eviden strict a numrului de forme larvare i adulte de artropode
zburtoare, trtoare i sritoare.
10. Containerele pentru cpue i acarieni trebuie plasate n tvi cu ulei.
11. Insectele zburtoare infectate sau potenial infectate trebuie s e nchise n cuti cu plas dubl.
12. Artropodele infectate sau potenial infectate trebuie s e manipulate pe platouri cu rcire (care le
amoresc), plasate la rndul lor n hote de biosiguran sau n izolatoare.
Pentru informaii suplimentare, consultai referinele bibliograce 3-6.
29
30
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.
41.
42.
WHO Biosafety programme, Department of Communicable Disease surveillance and Response, World Health Organization, 20 Avenue
Appia, 1211 Geneva, Switzerland (http://www.who.int/csr/)
34
Data:
ef Laborator:
Element evaluat
Laborator
Semnalizare adecvat pentru sursele de
UV, laser, surse de radioactivitate,etc
Ghid de Biosiguran adecvat, accesibil i
aplicat efectiv
Inscripionare/marcare corect
a echipamentelor: risc infecios,
radioactivitate, toxicitate
Proiectarea laboratorului
Conceput pentru a uor de curat
Comutator alternativ cu lumina pentru
sursele de UV din ncperi, accesibil i din
exterior
Fixarea solid a tuturor etajerelor / rafturilor
Blaturile meselor sunt impermeabile pentru
ap i rezistente la acizi, baze, solveni
organici i temperaturi ridicate
Iluminare adecvat
Existena unor spaii de depozitare
adecvate i corect utilizate
Cilindri cu gaze
Toi cilindrii cu gaze sunt pstrai n condiii
de siguran
Cilindrii de rezerv sunt pstrai cu
capacele de siguran montate
Gazele asxiante i/sau periculoase
sunt utilizate doar n incinte cu ventilaie
suplimentar
Prezena n laborator de cilindri cu gaze
supranumerari fa de necesiti i/sau
cilindri golii
Substane chimice
Substanele chimice inamabile sunt
depozitate n ncperi special destinate
acestora
Substanele generatoare de peroxizi
sunt inscripionate cu data intrrii i data
deschiderii
Substanele chimice sunt pstrate separat,
pe categorii
Da
35
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Substanele chimice periculoase sunt
depozitate la un nivel superior nivelului
ochilor.
Existena de substane chimice depozitate
pe pardoseal
Existena de containere cu substane
chimice neacoperite
Toate soluiile sunt etichetate corect ?
Se folosesc termometre cu mercur ?
Da
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Da
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Exist componente mobile neprotejate ale
echipamentelor ?
Da
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Da
Nu
NA
Observaii
39
Data:
ef Laborator:
Element evaluat
Da
Nu
NA
Observaii
Locaie:
Marc:
Tip:
Serie Nr.:
Element evaluat
Da
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Pentru ageni infecioi se utilizeaz seringi de
unic utilizare i/sau seringi cu ac nedetaabil
Cupele i rotoarele de centrifug se deschid numai
n HSB
Probele biologice cu risc infecios sunt transportate
n afara HSB n containere autorizate i n acord
cu reglementrile de transport
Da
Nu
NA
Observaii
Faciliti
Exist chiuvete pentru splarea minilor lng
ieirea din laborator
Nume, prenume auditor
..................................................................
Semntura
..................................................................
42
Data:
ef laborator
Element evaluat
Da
Faciliti
Laboratorul este separat de circulaia nerestricionat
din restul cldirii
Accesul controlat n laborator se face printr-o
anticamer ale crei ui se nchid automat, ind
interconectate (nu se poate deschide dect o singur
u la un moment dat)
Toate cile de acces n laborator se pot nchide etan
pentru decontaminare
Aerul exhaustat nu este recirculat i este evacuat n
exterior la distan de spaii locuite
Exist un sistem de ventilaie controlat pentru
monitorizarea direcionrii uxului de aer
Protecia personalului
n laborator se poart halate nchise la spate
Echipamentul individual de protecie este purtat doar
n incinta laboratorului
Sunt disponibile chiuvete cu robinete automate sau
manevrabile cu ajutorul pedalei / cotului
Protecia minilor
Sunt purtate cte dou perechi de mnui atunci
cnd se manipuleaz material contaminat biologic,
echipament potenial contaminat i la curenia
suprafeelor de lucru
Protecia respiratorie
Mijloace de protecie respiratorie sunt purtate de
ntreg personalul atunci cnd aerosolii nu sunt
reinui n siguran de HSB
43
Nu
N/A
Observaii
Practici
Asigurarea proteciei mucoaselor atunci cnd se
lucreaz cu material infecios n afara HSB
Personalul este instruit asupra pericolelor asociate
cu manipularea anumitor ageni microbieni
Personalului i se impune s citeasc i s urmeze
toate instruciunile privitoare la practicile i
procedurile din laborator, inclusiv cele din ghidul de
biosiguran
Personalul este instruit anual i ori de cte ori apar
modicri ale procedurilor
Toate deeurile contaminate microbian sunt
autoclavate nainte de a ndeprtate
44
Data auditului:..........................
instituiei. De asemenea, n cursul instruirii trebuie prezentate proceduri ce descriu rolul i responsabilitile
personalului n cazul producerii unei infraciuni de biosecuritate.
Un element central n cadrul msurilor ecace de biosecuritate n laborator, l constituie, de
asemenea, compatibilitatea profesional i etic de a lucra cu patogeni periculoi a tuturor persoanelor
autorizate a avea acces regulat la materialele cu regim special.
n rezumat, precauiile de biosecuritate trebuie s devin parte a activitilor de rutin din laborator,
chiar dac se aplic tehnici aseptice sau alte practici microbiologice sigure. Msurile de biosecuritate
n laborator nu trebuie s stnjeneasc schimbul ecient de materiale de referin, probe clinice i
epidemiologice i nici circulaia informaiilor adiacente necesare pentru bunul mers al investigaiilor clinice
i de sntate public. Managementul competent al biosecuritii nu trebuie s interfere n mod nepotrivit
cu activitatea de zi cu zi a personalului tiinic sau s e un impediment n desfurarea cercetrilor.
Trebuie pstrat accesul legitim la materialele importante pentru cercetare i diagnostic. Evaluarea
compatibilitii personalului, instruirea specic n materie de biosecuritate i respectarea procedurilor de
protecie fa de ageni patogeni constituie mijloace de cretere a nivelului de biosecuritate a laboratorului.
Toate aceste eforturi trebuie iniiate i meninute prin evaluri periodice ale riscurilor i ale ameninrilor i
printr-o revizuire i actualizare regulat a procedurilor. Trebuie vericat corespondena acestor proceduri
i instruciuni cu standardele naionale privind biosecuritatea laboratorului.
46
Hotele de siguran biologic (HSB) sunt destinate a proteja operatorul, mediul din laborator i
materialele de lucru fa de expunerea la aerosoli i picturi care se pot produce n cursul manipulrii
materialelor coninnd ageni infecioi, cum ar culturile primare, tulpinile de colecie i probele de
diagnostic. Aerosolii sunt produi de orice activitate care determin apariia de miniparticule sau stropi
de material lichid sau semilichid, cum ar agitarea, turnarea, amestecarea sau picurarea unui lichid
pe o suprafa sau ntr-un alt lichid. Activitile de laborator precum nsmnarea plcilor de agar prin
efectuarea de striuri paralele, inocularea acoanelor de culturi de celule cu o pipet, folosirea unei pipete
mono- sau multicanal pentru a distribui suspensii de ageni infecioi n plci de microcultur, efectuarea
de diluii n tuburi sau plci, omogenizarea i agitarea prin producerea de vrtej a materialelor infecioase,
centrifugarea lichidelor contaminate sau manipularea animalelor, pot genera aerosoli infecioi. Particulele
de aerosoli cu diametrul sub 5 m i picturile mici, cu diametrul de 5-100 m nu sunt vizibile cu ochiul liber.
Tehnicianul de laborator nu este, n general, avertizat asupra formrii acestor particule i asupra faptului
c ele pot inhalate sau pot contamina suprafee i materiale. HSB, folosite corect, sunt foarte eciente
n reducerea frecvenei infeciilor dobndite n laborator, evit contaminarea ncruciat a culturilor prin
expunere la aerosoli i protejeaz mediul.
Tabelul 8. Alegerea unei HSB n funcie de tipul de protecie dorit.
TIP DE PROTECIE
Protecia personalului fa de microorganisme
din Grupurile de Risc 1-3
HSB INDICAT
Clasa I, Clasa II, Clasa III
Clasa III
Clasa I, Clasa II
Protecia produselor
De-a lungul anilor, concepia clasic a HSB a suferit numeroase modicri. O modicare major
a constat n adugarea unui ltru de nalt ecien pentru particulele din aer (HEPA - High Efciency
Particulate Air) la sistemul de evacuare. Filtrul HEPA reine 99,97% din particulele cu diametrul de 0,3 m
i 99,99% din particulele cu dimensiuni mai mari sau mai mici. n acest fel, ltrul HEPA are capacitatea
de a reine ecient toi agenii infecioi cunoscui i de a asigura evacuarea din hot a unui aer complet
1
Denumiri echivalente : cabinet (incint) de siguran biologic - BSC (BioSafety Cabinet) sau post de securitate microbiologic
- PSM (poste de scurit microbiologique)
47
puricat de ori ce fel de microbi. A doua modicare de concepie a constat n direcionarea aerului ltrat
prin HEPA ctre suprafaa de lucru, protejnd-o pe aceasta i materialele cu care se lucreaz. Aceast
caracteristic este frecvent denumit protecia produsului. Aceste modicri au dus la apariia a trei clase
de HSB. Tipul de protecie conferit de ecare dintre ele este specicat n Tabelul 8.
Nota: Hotele cu ux de aer orizontal sau vertical (incinte de lucru cu aer puricat) nu sunt de fapt HSB
i nu trebuie folosite n locul acestora.
10.1. HSB de Clasa I
Figura 6 conine o prezentare schematic a HSB de Clasa I. Aerul din ncpere este preluat
printr-o deschiztur frontal cu o vitez minim de 0,38m/s, trece pe deasupra suprafeei de lucru i este
evacuat din hot prin conducta de evacuare. Fluxul de aer direcionat dinspre operator ctre conducta
de evacuare ndeprteaz particulele de aerosoli care pot generate la nivelul suprafeei de lucru.
Deschiztura frontal permite operatorului s ajung cu minile la suprafaa de lucru din interiorul hotei
i, n acelai timp, el poate s vad aceast suprafa printr-un panou frontal transparent. Acest panou
poate la rndul su ridicat complet pentru a permite accesul la suprafaa de lucru n scopul currii sau
n alte scopuri.
Aerul din hot este evacuat printr-un ltru HEPA: (a) n laborator i apoi n exterior prin sistemul
de aerisire al cldirii; (b) ctre exterior prin sistemul de evacuare a aerului din cldire; sau (c) direct n
exterior. Filtrul HEPA poate amplasat e n sistemul de evacuare al HSB e n cel al cldirii. Unele
HSB de Clasa I sunt echipate cu un ventilator propriu de evacuare, n timp ce altele folosesc ventilatorul
sistemului de evacuare a aerului din cldire.
HSB de Clasa I a fost prima HSB recunoscut ca atare i, datorit concepiei sale constructive
simple, este nc larg folosit n ntreaga lume. Ea prezint avantajul de a conferi protecie personalului i
mediului, dar poate folosit i pentru lucrul cu radionuclizi i substante chimice toxice volatile. Deoarece
aerul nesterilizat din ncpere ptrunde peste suprafaa de lucru prin deschiztura frontal, hota nu
asigur protecia produsului.
A: deschiztura frontal; B: panou frontal transparent; C: ltru HEPA de evacuare; D: spaiul de evacuare.
48
49
A: deschiztura frontal; B: panou frontal transparent mobil; C: ltrul HEPA de evacuare; D: conducta comun
posterioar; E: ltrul HEPA de alimentare; F: ventilator suant.
A=deschiderea frontal, B=panoul frontal transparent, C=ltrul HEPA de evacuare, D=ltrul HEPA de alimentare,
E=spaiul de evacuare cu presiune negativ, F=ventilatoare, G=ltrul HEPA de alimentare. Este necesar conectarea
evacurii HSB la sistemul general de evacuare a aerului din cldire.
50
Viteza de intrare
m/s
I*
% de aer
Sistem de evacuare
recirculat
evacuat
0,36
100
conduct rigid
IIA1
0,38 0,51
70
30
0,51
70
30
IIB1*
0,51
30
70
conduct rigid
IIB2*
0,51
100
conduct rigid
III*
nu se aplic**
100
conduct rigid
* Toate conductele contaminate sunt sub presiune negativ sau sunt nconjurate de alte conducte sau
spaii cu presiune negativ
** Panoul frontal cu mnui este xat n deschiztura frontal.
10.3. HSB de Clasa III
Acest tip de hot (Fig.9) ofer cel mai nalt nivel de protecie a personalului i este folosit, n
special, pentru lucrul cu ageni din Grupul de Risc 4. Orice comunicare ntre interiorul i exteriorul hotei
este blocat n ambele sensuri, printr-un sistem etan. Aerul de alimentare este ltrat HEPA (devenind
astfel steril), iar aerul evacuat trece prin dou ltre HEPA succesive pentru decontaminare. Fluxul de aer
este meninut printr-un sistem de ventilaie special conceput, amplasat la exteriorul hotei, care menine
interiorul hotei sub presiune negativ (de aproximativ 124,5 Pa). Accesul la suprafaa de lucru se face
prin intermediul unor mnui de cauciuc foarte rezistente, care fac corp comun cu un panou frontal xat
etan.
HSB de Clasa III trebuie s aib ataat un compartiment de trecere, sterilizabil i echipat cu ltre HEPA de
evacuare, prin care se scot obligatoriu toate materialele care s-au introdus i s-au gsit n hot n timpul
lucrului n vederea sterilizrii lor. Hota poate conectat la un autoclav cu dou ui, pentru a decontamina
toate materialele care sunt introduse sau scoase din hot. Panoul frontal poate prevzut cu mai multe
perechi de mnui pentru a extinde suprafaa de lucru. HSB de Clasa III sunt recomandate pentru lucrul
n laboratoarele cu Nivel de Biosiguran 3 i 4.
10.4. Conexiunile pentru evacuarea aerului din hota de siguran biologic.
Hotele de siguran biologic de Clasa II tip A1 i tip A2 conectate ctre exterior sunt prevzute
cu un tub exibil de tip manon sau cu un capion (ca tubul/conducta de evacuare de la hota de
buctrie), n care este presiune negativ. Acesta este xat pe traiectul de evacuare al hotei i conduce
aerul din hot, decontaminat prin ltrare HEPA, spre conductele generale de evacuare a aerului din
cldire. ntre manon i traiectul de evacuare al hotei se pstreaz o mic fant de 2,5 cm diametru.
Aceast mic deschiztur permite i absorbia aerului din ncpere ctre sistemul de evacuare a aerului
din cldire. Capacitatea sistemului de evacuare a aerului din cldire trebuie s e sucient pentru
eliminarea att a aerului din camer, ct i a aerului din HSB. Manonul de conexiune trebuie s e uor de
scos sau s e conceput n aa fel nct s permit efectuarea testelor operaionale asupra hotei.
51
n general, funcionarea unei HSB conectate prin manon nu este inuenat prea mult de uctuaiile
uxului de aer din cldire.
HSB de Clasa II tip B1 i tip B2 sunt prevzute cu conducte de evacuare rigide, de tipul celor
conectate etan, (fr nici o deschiztur), la sistemul de evacuare al aerului din cldire sau, mai bine, la
un sistem de evacuare special destinat, cu presiune negativ. Sistemul de evacuare al aerului din cldire
trebuie s e perfect adaptat la cerinele de ux specicate de productor, referitoare la volum, precum
i la presiunea static. Certicarea unei HSB cu conduct rigid necesit mai mult timp de lucru dect
cea a unei HSB care recircul aerul din ncpere sau care are conexiune prin manon deoarece trebuie
validat i etaneizarea perfect.
Figura 9. Reprezentare schematic a unei HSB de Clasa III (panou frontal cu mnui):
Substanele chimice toxice sau volatile nu trebuie manipulate n HSB care recircul aerul de
evacuare prin ncpere, cum ar cele de Clasa I care nu au conducte de comunicare cu sistemul de
evacuare al cldirii, sau cele de Clasa II tip A1 sau tip A2. HSB de Clasa II tip B1 sunt acceptabile pentru
lucrul timp de cteva minute cu radionuclizi i substane toxice/volatile. Hotele de Clasa II tip B2, numite
i hote cu evacuare complet, se impun atunci cnd se manipuleaz radionuclizi i substane chimice
volatile n cantiti mari.
Operatorii
Dac HSB nu sunt folosite corect, protecia oferit de ele poate mult diminuat. Operatorii
trebuie s aib grij s menin integritatea uxului de aer care ptrunde prin deschiztura frontal, atunci
cnd i mic braele spre interiorul sau exteriorul hotei, n timpul lucrului. Micrile braelor trebuie fcute
lent, perpendicular pe deschiztura frontal. Materialele din hot vor manipulate dup un minut de la
introducerea braelor, pentru a permite acomodarea i pentru a mtura cu aer steril suprafaa minilor i
a braelor. Numrul micrilor fcute prin deschiztura frontal trebuie redus, plasnd n interiorul hotei
toate materialele necesare nainte de nceperea lucrului.
Plasarea materialelor
Grila frontal de captare a aerului din HSB din clasa II nu trebuie s e blocat cu hrtie,
echipamente sau alte obiecte. Suprafaa materialelor care vor plasate n hot trebuie decontaminat
cu alcool de 70. Zona de lucru din hot se poate acoperi cu prosoape de hrtie absorbant, mbibate
sau nu cu dezinfectant, pentru a reine eventuale scurgeri i stropi. Toate materialele trebuie plasate
n hot spre marginea posterioar a suprafeei de lucru, ct mai n spate posibil, fr a bloca grilajul
posterior. Echipamentele generatoare de aerosoli (de ex. mixere, centrifugi etc.) trebuie aezate spre
partea posterioar a hotei. Deeurile colectate pe categorii n recipiente speciale (precum sacii de
colectare pentru materialele contaminate, recipientele cu vrfuri de pipete folosite, recipientele cu probe,
etc.) trebuie plasate ntr-o latur a hotei. Fluxul de operaii trebuie s se desfoare dinspre zona curat
spre zona contaminat a suprafeei de lucru.
Pungile de colectare pentru deeuri periculoase sau containerele i recipientele pentru colectarea
deeurilor tietoare - neptoare ( ex. vrfuri de pipete ), care urmeaz s e autoclavate, nu trebuie
plasate n afara hotei. Micrile repetate nuntru/n afar, fcute pentru utilizarea acestor containere, pot
ntrerupe bariera de aer a hotei i pot compromite att protecia personalului, ct i pe cea a produselor.
53
Operare i ntreinere
Majoritatea HSB sunt concepute pentru a utilizate non-stop, iar inspectorii consider c folosirea
continu este util i pentru controlul nivelului particulelor de praf i al altor particule din laborator. HSB de
Clasa II tip A1 i A2 cu evacuare spre ncpere sau cu conectare prin manon la o conduct proprie de
evacuare pot oprite n perioadele n care nu sunt folosite. Alte tipuri, precum HSB de Clasa II-B1 i B2,
prevzute cu instalaii cu conduct rigid, necesit un ux de aer permanent cu presiune negativ, pentru
a menine echilibrul cu aerul din ncpere. Hotele trebuie pornite cu cel puin 5 minute nainte de a ncepe
lucrul i oprite dup cel puin 5 minute de la terminarea lucrului, pentru a permite hotei s se curee,
adic pentru a permite aerului contaminat s e evacuat din hot.
Orice reparaie a HSB trebuie fcut de ctre un tehnician calicat (autorizat). Orice disfuncie
n operare trebuie raportat i reparat nainte de a relua utilizarea HSB. nainte de orice reparaie sau
control (inspecie), HSB trebuie s e dezinfectate.
Radiaiile ultraviolete
Folosirea radiaiilor ultraviolete n HSB nu este necesar. Dac se folosesc, lmpile UV trebuie
curate sptmnal pentru a nltura praful care reduce efectul germicid al radiaiei. Intensitatea
radiaiei UV trebuie vericat la ecare recerticare a hotei, pentru a vedea dac emisia de UV este
corespunztoare. Lmpile UV trebuie nchise n timpul lucrului sau cnd exist persoane n ncpere,
pentru protecia ochilor i a pielii de expuneri nedorite, dar pot lsate s funcioneze dac panoul frontal
transparent este nchis.
Flacra deschis
Trebuie evitat folosirea crii deschise n mediul aproape steril din interiorul HSB. Aceasta
poate modica traseul uxului de aer i poate periculoas atunci cnd se utilizeaza substane volatile
sau inamabile. De asemenea, utilizarea crii deschise poate afecta ltrele HEPA. Pentru a steriliza
ansele bacteriologice, exist micro-arztoare electrice sau cu gaz.
Scurgerile / stropirile
Instruciunile privind conduita de urmat n cazul producerii unor scurgeri sau stropiri cu lichide
contaminate trebuie citite i nsuite de ntregul personal al laboratorului; un exemplar va aat la loc
vizibil. n cazul n care are loc o scurgere de material contaminat n interiorul HSB, curarea trebuie
nceput imediat, n timp ce hota continu s funcioneze. Se va folosi un dezinfectant ecace, care va
aplicat n aa fel nct generarea de aerosoli s e ct mai redus. Toate materialele care au venit n
contact cu substana vrsat trebuie dezinfectate i/sau autoclavate.
Certicarea
Funcionalitatea i integritatea ecrei HSB trebuie supus unui control de certicare dup
standarde naionale i internaionale, att n momentul instalrii, ct i ulterior, n mod periodic, control
fcut de tehnicieni calicai (autorizai), n conformitate cu instruciunile productorului. Evaluarea
ecacitii hotei trebuie s cuprind : teste de integritate a hotei, a ltrelor HEPA, prolul vitezei uxului
descendent de aer i cel al vitezei aerului care ptrunde, raportul presiune negativ/ventilaie, analiza cu
fum a uxului de aer, vericarea sistemelor de alarm i de interblocare. Pot fcute i testri opionale
pentru scurgeri de curent, intensitatea luminii, intensitatea radiaiilor UV, nivelul zgomotelor i vibraiilor.
Aceste teste necesit echipamente i aptitudini speciale, de aceea este recomandat ca ele s e executate
de personal calicat.
54
Curarea i dezinfecia
Toate obiectele din interiorul HSB, inclusiv aparatura, trebuie decontaminate la suprafa i
scoase din hot dup terminarea lucrului, deoarece resturile de medii de cultur favorizeaz creterea
germenilor.
Suprafeele interioare ale HSB trebuie decontaminate nainte i dup ecare utilizare.
Suprafaa de lucru i pereii interiori trebuie terse cu un dezinfectant care s distrug toate
microorganismele care s-ar putea aa n hot. La sfritul zilei de lucru, decontaminarea nal a
suprafeelor trebuie s includ i pe cea a suprafeei de lucru, a prilor laterale i posterioare i a feei
interioare a panoului frontal transparent. Se va folosi o soluie clorigen sau alcool de 70, dac sunt
active pe microorganismele manipulate. Dac se folosete un dezinfectant coroziv, cum sunt soluiile
clorigene, este necesar o cltire ulterioar cu ap steril.
Se recomand ca HSB s e lsat n funciune. Dac nu, nainte de a oprit, trebuie lsat s
funcioneze cel puin 5 minute pentru evacuarea aerului contaminat din interior.
Decontaminarea
HSB trebuie decontaminate nainte de operaiuni precum schimbarea ltrelor sau mutarea
hotei. Cea mai utilizat metod de decontaminare este cea prin fumigaie cu formaldehid gazoas.
Decontaminarea HSB trebuie realizat de ctre personal calicat.
Alarme
HSB pot echipate cu unul sau dou tipuri de alarme. Alarma conectat cu panoul frontal
transparent se gsete numai la HSB cu panou mobil. Alarma se declaneaz ori de cte ori operatorul
a aezat panoul ntr-o poziie incorect. Aciunea corectiv const n poziionarea corect a panoului.
Alarma acionat de uxul de aer semnaleaz perturbarea uxului normal de aer n hot, care poate
reprezenta un pericol imediat pentru operator sau pentru produs. Cnd se declaneaz acest din urm
tip de alarm, se oprete imediat lucrul i se anun responsabilul de laborator. Detalii suplimentare se
gsesc n crile tehnice ale hotelor. Personalul trebuie instruit i asupra acestor aspecte.
Informaii suplimentare
Alegerea tipului adecvat de HSB, instalarea, folosirea corespunztoare i certicarea anual
a operrii HSB sunt procese complexe. Se recomand ca aceste procese s se desfoare sub
supravegherea unor specialiti bine instruii i cu experien n materie de biosiguran; acetia trebuie
s e familiarizai cu literatura recomandat n capitolul de Bibliograe i trebuie s fost instruii asupra
tuturor aspectelor privind HSB. Operatorii trebuie s urmat forme speciale de instruire pentru operarea
i utilizarea HSB.
55
56
Deoarece aerosolii reprezint o important surs de infecie, trebuie luate msuri pentru a reduce
formarea i rspndirea acestora. Aerosoli periculoi pot aprea n cursul unor variate operaiuni de
laborator, de ex: amestecare, triturare, agitare, ultrasonare, centrifugare de material infecios. Ca urmare,
chiar dac se folosete echipament de siguran, se recomand ca aceste operaiuni s se efectueze, pe
ct posibil, ntr-o HSB (Capitolul 7). Datele privind HSB, utilizarea i testarea acestora, sunt prezentate n
Capitolul 10. Simpla utilizare a echipamentului de siguran confer protecie doar dac operatorul este
bine instruit i folosete tehnici corecte. Echipamentul trebuie vericat cu regularitate pentru a garanta
performane constante de protecie.
Tabelul 10 conine o list a echipamentelor destinate eliminrii sau reducerii unor pericole i
denete succint caracteristicile lor de siguran. Detalii suplimentare pentru multe din aceste echipamente
sunt redate n paginile urmtoare. Alte informaii privind utilizarea corect a acestor echipamente se
regsesc n Capitolul 12.
Informaii referitoare la echipamentele i operaiunile care pot genera pericole sunt prezentate n
Anexa 4.
Tabel 10. Echipamente de biosiguran
Echipament
Hot de securitate
biologic
(HSB)
Clasa I
Pericole vizate
Clasa II
Aerosoli i
stropi
Clasa III
Aerosoli i
stropi
Aerosoli i
stropi
Dispozitive de
pipetare
Aerosoli i
stropi
Stropi de substane
chimice
Pipetarea cu gura,
(ingestia de patogeni,
inhalarea de aerosoli
produi prin aspirarea
cu pipeta, picurarea de
lichid, contaminarea
captului de suciune al
pipetei )
57
Echipament
Microarztoare
pentru anse
Anse de unic
folosin
Pericole vizate
Stropi din ansele de
transfer
Recipiente sigure
pentru colectarea
i transportul
materialelor
infecioase n
vederea sterilizrii
Containere pentru
obiecte tietoare/
neptoare
Containere de
transport ntre
laboratoare sau
instituii.
Aerosoli, mprtiere i
scurgere
Autoclave manuale
sau automate
Materiale infecioase
(decontaminare n
vederea eliminrii sau
reutilizrii)
Aerosoli i scurgeri
Recipiente cu capac
nurubat
Dispozitiv de
protecie a instalaiei
de vid
Autoclavabil.
Robust, rezistent la nepare/tiere
Contaminare
accidental cu
microorganisme.
Robust.
Containere primare i secundare impermeabile
pentru lichide
Conin materiale absorbante pentru reinerea
lichidelor vrsate.
Model aprobat
Sterilizare ecace prin cldur
Contaminarea cu
aerosoli sau lichide a
sistemului de vacuum al
laboratorului
Securizare ecace
Filtre tip cartu pentru a mpiedica trecerea de
aerosoli (mrimea particulelor cu dimensiunea de
0,45 m).
Recipiente cu dezinfectante adecvate, utilizate
drept capcane de vid . Dispozitiv de cauciuc
(supap) pentru a nchide automat vacuumul cnd
recipientul este plin.
ntreg dispozitivul este autoclavabil
59
Pericole vizate
Halate, costume
i salopete de
laborator
Contaminarea hainelor
ncheiate la spate.
S acopere hainele de strad
oruri de plastic
Contaminarea hainelor
nclminte
Impact i stropire
Fr decupare n fa
Ochelari de
protecie
Impact i stropire
Ochelari de lucru
Impact
Ecrane
protectoare
pentru fa
Impact i stropire
S protejeze ntreaga fa
S e uor de ndeprtat n caz de accident
Dispozitive
de protecie
respiratorie
Inhalare de aerosoli
Mnui
Contact direct cu
microorganismele
Tiere
Plas metalic
numai dinspre partea anterioar; lentilele sunt confecionate din material incasabil ind curbate sau cu
aprtori laterale. Ochelarii de protecie ar trebui purtai peste ochelarii de vedere sau peste lentilele
de contact, care nu confer protecie mpotriva pericolelor biologice sau chimice. Ecranele pentru fa
(vizoare) sunt confecionate din material plastic incasabil, protejeaz ntreaga fa i se xeaz pe cap cu
o band sau bonet.
Dispozitive de protecie respiratorie
Protecia respiratorie este necesar cnd se execut proceduri cu mare periculozitate
(ex. curarea unei deversri de material infecios).
Alegerea tipului de dispozitiv depinde de tipul de pericol. Exist dispozitive la care se pot monta
diferite tipuri de ltre : pentru protecie mpotriva diferitelor gaze, vapori, particule sau microorganisme.
Este absolut necesar ca ltrul s e montat la dispozitivul de protecie respiratorie potrivit.
Pentru a obine o protecie maxim, dispozitivul ar trebui adaptat pentru faa ecrei persoane
i testat pentru ecacitate. Aparatele de asisten respiratorie cu containere proprii, cu butelie de aer,
ofer protecie total. Mtile de tip chirurgical sunt utile numai pentru protecia pacientului, dar nu ofer
protecie operatorului. Pentru protecia mpotriva agenilor biologici au fost concepute i dispozitive de
unic folosin (ISO 13.340.30).
Dispozitivele de protecie respiratorie nu trebuie purtate n afara spaiului laboratorului.
Mnui
Minile pot contaminate n timpul lucrului n laborator. De asemenea pot rnite de obiecte
ascuite. Pentru munca obinuit de laborator precum i pentru manipularea de ageni infecioi, snge
i uide biologice, se folosesc mnui chirurgicale de unic folosin, avizate pentru uz microbiologic,
confecionate din latex, vinil sau nitril. Pot folosite i mnui reutilizabile, dar trebuie acordat atenie
splrii, scoaterii, currii i dezinfeciei lor corecte.
Mnuile se scot i minile se spal bine dup manipularea de material infecios, dup lucrul la
o HSB sau nainte de prsirea laboratorului. Mnuile de unic folosin utilizate se ndeprteaz odat
cu deeurile infecioase.
Au fost semnalate reacii alergice de tip dermatit i de hipersensibilitate imediat la personalul
din laborator i la ali lucrtori care au purtat mnui din latex, mai ales din cele cu pudr. De aceea ar
trebui s e disponibile i alte tipuri de mnui dect cele din latex cu pudr.
Mnuile din plas de oel inoxidabil ar trebui folosite cnd exist o expunere potenial la
instrumente tioase, ex. examinri postmortem. Astfel de mnui protejeaz mpotriva tierii, dar nu i a
neprii.
Mnuile nu trebuie purtate n afara spaiului laboratorului.
Pentru alte informaii consultai indicaiile bibliograce 12, 17 i 18.
61
62
7. Pipetele contaminate vor imersate complet ntr-un dezinfectant adecvat, aat ntr-un container incasabil.
Ele trebuie lsate n dezinfectant atta timp ct este necesar nainte de a scoase din laborator.
8. Containerul pentru pipete folosite trebuie plasat n interiorul HSB, nu n afara ei.
9. Seringile cu ace hipodermice nu trebuie utilizate pentru pipetare.
10. Trebuie utilizate dispozitive speciale pentru deschiderea acoanelor prevzute cu capsule cu septuri
de cauciuc care s permit apoi utilizarea pipetelor, evitndu-se utilizarea n acest scop a acelor
hipodermice i a seringilor.
11. Pentru a evita dispersia picturilor de material infecios din pipet, pe suprafaa de lucru va aezat
un material absorbant ; dup utilizare acesta va evacuat ca material infecios.
12.3. Evitarea dispersiei materialului infecios
1. Pentru evitarea pierderii premature a ncrcturii sale, inelul ansei bacteriologice trebuie s aib un
diametru de 2-3 mm i trebuie s e complet nchis. Firul ansei nu trebuie s e mai lung de 6 cm
pentru a reduce vibraia.
2. Riscul stropirii cu material infecios cu ocazia sterilizrii ansei la acra becului Bunsen poate
evitat prin utilizarea pentru sterilizare a unui microarztor electric. Sunt de preferat ansele de unic
folosin, care nu au nevoie de sterilizare.
3. Trebuie luate msuri de precauie atunci cnd se usuc probele de sput pentru a evita formarea de
aerosoli.
4. Probele i culturile a cror utilizare s-a ncheiat i care trebuie autoclavate i / sau evacuate, trebuie
plasate n containere impermeabile, ex. saci speciali pentru deeuri de laborator. Partea de sus a
sacilor trebuie nchis etan (ex. cu band adeziv martor de autoclavare) nainte de plasarea lor n
containerele pentru deeuri infecioase.
5. Locul de munc trebuie decontaminat cu dezinfectante corespunztoare la sfritul ecrei etape i
zile de lucru.
Pentru informaii suplimentare vezi referina (12).
12.4. Utilizarea Hotelor de Siguran Biologic
1. Modul de utilizare i limitele de siguran ale HSB trebuie aduse la cunotina tuturor utilizatorilor
poteniali (vezi capitolul 10) pe baza standardelor naionale i a literaturii de specialitate. Protocoale
scrise sau ghiduri de operare/de siguran trebuie puse la dispoziia personalului. Trebuie s e clar,
n mod particular, c HSB nu protejeaz pe cel ce lucreaz n caz de spargere, vrsare sau tehnici
greite de manipulare.
2. HSB trebuie utilizat numai dac funcioneaz corect.
3. Panoul frontal transparent de sticl nu trebuie deschis n timpul lucrului.
4. Aparatele i volumele de materiale utilizate n HSB trebuie s e reduse la minimum. Circulaia aerului
n partea din spate a incintei HSB nu trebuie blocat.
5. Becurile Bunsen nu trebuie utilizate n hot. Cldura produs perturb uxul de aer i poate avaria ltrele.
Microarztoarele electrice sunt permise, dar ansele de unic ntrebuinare utilizare sunt de preferat.
6. ntreaga activitate din HSB trebuie s se desfoare n centrul sau n partea posterioar a ariei de
lucru, bine vizibil prin panoul frontal de sticl.
7. Tracul n spatele operatorului trebuie s e minim.
8. Operatorul nu trebuie s perturbe uxul de aer prin micri repetate de du-te vino ale braelor.
9. Grilele frontale de admisie a aerului nu trebuie blocate cu foi, caiete, pipete sau alte materiale
deoarece aceste ntreruperi ale uxului de aer pot determina contaminarea materialului i expunerea
operatorului.
10. Suprafaa HSB trebuie tears cu dezinfectante adecvate dup ecare etap de lucru i la sfritul
programului de lucru.
64
11. Ventilarea HSB trebuie pornit cu minimum 5 minute nainte de nceperea lucrului i oprit dup
minimum acelai interval de la terminarea lucrului n HSB.
12. Documentele de lucru nu trebuie puse niciodat n interiorul HSB.
Pentru alte informaii vezi capitolul 10.
12.5. Evitarea ingestiei de material infecios i a contactului cu pielea i ochii
1. Particulele mari i picturile cu diametrul mai mare de 5 m, aprute n timpul manipulrii materialului
microbiologic, trebuie ndeprtate rapid de pe suprafaa de lucru i de pe minile operatorului. Trebuie
purtate mnui de unic folosin. Lucrtorii din laborator trebuie s evite atingerea gurii, ochilor i a
feei.
2. Este interzis depozitarea i consumul de alimente i butur n laborator.
3. Este interzis introducerea n gur a oricror obiecte (creioane, pixuri, gum de mestecat)
4. Este interzis aplicarea cosmeticelor n laborator;
5. Faa, ochii i gura trebuie protejate cu un ecran sau prin alte modaliti, n timpul oricrei operaii care
se poate solda cu mprocarea de material infecios.
12.6. Evitarea injectrii de material infecios
1. Inocularea accidental ca urmare a rnilor provocate de sticla spart sau ciobit, poate evitat prin
creterea ateniei n timpul procedurilor de lucru. Obiectele din sticl ar trebui nlocuite cu cele din
material plastic, ori de cte ori este posibil.
2. Injectarea se poate produce accidental prin nepare cu ace de sering, pipete Pasteur din sticl i
cioburi de sticl.
3. Accidentele prin nepare cu acul pot reduse prin: a) reducerea utilizrii seringilor i acelor (exist
dispozitive simple pentru deschiderea acoanelor nchise cu capsul i dop de cauciuc, astfel nct
pot folosite pipete n locul seringilor cu ac) ; b) utilizarea unor dispozitive de siguran mpotriva
neprii atunci cnd seringile i acele sunt absolut necesare.
4. Acele nu trebuie niciodat reacoperite cu capacul de protecie. Ele nu se desprind de sering ci se
arunc mpreun cu seringa ntr-un container special, rezistent la nepare, prevzut cu capac.
5. Pipetele Pasteur de plastic ar trebui s nlocuiasc pipetele de sticl.
12.7. Separarea serului
1. Aceast operaiune trebuie efectuat numai de personal bine instruit / calicat.
2. Trebuie folosite mnui i trebuie protejai ochii i mucoasele.
3. Aerosolii i stropirile pot evitate sau reduse la minim numai printr-o bun tehnic de laborator.
Sngele i serul trebuie pipetate cu atenie. Este interzis pipetarea cu gura.
4. Dup utilizare, pipetele trebuie imersate complet n dezinfectantul corespunztor i meninute ct
este necesar, nainte de evacuare sau splare i sterilizare pentru reutilizare.
5. Tuburile (vacutainerele) care au coninut probele utilizate, coninnd cheaguri de snge, etc trebuie
introduse (cu dopul pus) ntr-un container impermeabil n vederea autoclavrii i/sau incinerrii.
6. Trebuie s existe la ndemn dezinfectante adecvate pentru curarea stropilor i lichidelor vrsate
(vezi Capitolul 14).
12.8. Utilizarea centrifugii
1. Performanele mecanice bune sunt o condiie primordial pentru utilizarea centrifugilor n condiii de
siguran microbiologic.
2. Centrifuga trebuie utilizat cu respectarea instruciunilor productorului.
65
3. Centrifuga trebuie plasat astfel nct lucrtorii s poat vedea n interiorul cuvei acesteia pentru a
putea xa corect suporturile pentru cupe i cupele cu probe.
4. Tuburile de centrifug i containerele cu probe care urmeaz a centrifugate trebuie s e confectionae din
sticl groas sau preferabil din plastic i trebuie vericate pentru absena defectelor nainte de utilizare.
5. Cupele de centrifug i containerele cu probe trebuie bine astupate/acoperite (de preferat cu capace
cu let).
6. Cupele trebuie ncrcate, echilibrate, nchise i deschise ntr-o HSB.
7. Suporii pentru cupele de centrifug trebuie grupai cte doi, dup greutate i echilibrai corect cu
cupele n poziie.
8. Trebuie respectat (conform instruciunilor din manualul de utilizare) spaiul dintre nivelul lichidului
centrifugat i gura cupei.
9. Apa distilat sau alcoolul (propanol 70%) pot utilizate pentru echilibrarea cupelor goale. Soluiile
saline (ser ziologic) sau de hipoclorit nu pot utilizate deoarece sunt corozive.
10. Numai tuburile de centrifug sau supori pentru cupe cu nchidere etan (cupe de siguran) trebuie
utilizate cnd se lucreaz cu microorganisme din grupele de risc 3 i 4.
11. La folosirea rotoarelor de centrifug angulare trebuie avut grij ca tuburile s nu e suprancrcate
pentru a evita scurgerile.
12. Cuva centrifugii trebuie controlat zilnic, pentru a verica eventuala apariie de urme de culoare
sau murdrie la nivelul corespunznd rotorului. n caz de murdrie evident, trebuie reevaluate
protocoalele de centrifugare.
13. Rotorul centrifugii i suporii pentru cupe trebuie examinate zilnic pentru a depista eventualele corodri
sau suri.
14. Rotorul, suporturile pentru cupe i cuva centrifugii trebuie decontaminate dup ecare utilizare.
15. Dup utilizarea centrifugii, suporii pentru cupe trebuie pstrai (cu deschiderea n jos) pentru scurgerea
lichidului de echilibrare.
16. n timpul funcionrii unei centrifugi pot ejectai din aceasta aerosoli infecioi. Aceste particule
circul cu vitez prea mare pentru a putea reinute de uxul de aer al HSB dac centrifuga este
plasat ntr-o hot tradiional cu deschidere frontal de Clasa I sau de Clasa II. Izolarea centrifugilor
n HSB de Clasa III previne dispersarea n afara hotei a aerosolilor produi. Totui, o tehnic corect
de centrifugare i folosirea cupelor sau suporilor cu capace etane asigur o protecie adecvat
mpotriva aerosolilor i particulelor infecioase dispersate.
12.9. Utilizarea omogenizatoarelor, agitatoarelor, mixerelor/blenderelor i aparatelor de
ultrasonare
1. Omogenizatoarele obinuite (mixere de buctrie) nu pot utilizate n laborator deoarece pot genera
scurgeri i aerosoli. Blenderele i dispozitivele de tiere special concepute pentru laborator sunt mai
sigure.
2. Cupele si capacele sau sticlele trebuie pstrate n bune condiii, fr defecte. Capacele trebuie s
aib garnitura bun i s poat bine nletate.
3. Presiunea n vas crete n timpul operaiilor de omogenizare, amestecare i ultrasonare. Aerosolii
coninnd material infecios se pot strecura ntre capac i vas. Vasele din plastic, n special cele din
politetrauoroetilen (PTFE), sunt recomandate deoarece sticla se poate sparge, elibernd material
infecios i poate rni operatorul.
4. n timpul funcionrii, omogenizatoarele, agitatoarele i aparatele de ultrasonare trebuie acoperite cu
un ecran/clopot rezistent, din plastic transparent, ce se dezinfecteaz dup utilizare. Atunci cnd este
posibil, aceste aparate trebuie utilizate sub ecranele lor de plastic, n HSB.
5. La sfritul operaiilor, containerele trebuie deschise ntr-o HSB.
6. Cei ce lucreaz cu aparate de ultrasonare vor utiliza cti de protecie.
66
67
14. Filtrele HEPA trebuie incinerate la minimum 1000C dup scoatere. Aciunile recomandate nainte de
incinerare :
a. pulverizarea cu lac de pr spray a feei expuse a ltrului, nainte de a-l scoate ;
b. acoperirea ltrului cu un sac de plastic n momentul scoaterii ;
c. scoaterea ltrului HEPA din camera de lucru astfel nct restul hotei s nu e contaminat.
15. Instrumentarul trebuie inut n soluie de hipoclorit de sodiu coninnd clor liber 20g/l (2%) timp de 1
or, apoi cltit bine cu ap naintea autoclavrii.
16. Instrumentarul ce nu poate autoclavat se cur prin splare repetat cu soluie de hipoclorit de
sodiu coninnd clor liber 20g/l (2%) timp de > 1 or. Cltirea instrumentarului este necesar pentru
ndeprtarea hipocloritului de sodiu rezidual.
Pentru orice alte informaii privind manipularea agenilor neconvenionali vezi referinele
12, 26 i 27.
70
Fiecare laborator care lucreaz cu materiale infecioase trebuie s instituie msuri de siguran
adaptate gradului de periculozitate al organismelor i animalelor manipulate. Existena unui plan scris
pentru msurile de aplicat n caz de accidente n laborator sau n biobaz este o necesitate n orice
instituie care manipuleaz sau gzduiete microorganisme din grupurile de risc 3 sau 4 (laborator de
biosiguran securizat - nivelul 3 i laborator nalt securizat - nivelul 4). Autoritile sanitare locale i/sau
naionale trebuie s se implice n elaborarea planurilor de intervenie n caz de accidente.
13.1. Planul de intervenie n caz de accidente
Planul de intervenie n caz de accidente trebuie s cuprind proceduri operaionale privind:
1. precauii pentru prevenirea i limitarea urmrilor dezastrelor naturale, de exemplu: incendii, inundaii,
cutremure i explozii
2. evaluarea riscului de contaminare biologic
3. conducerea i coordonarea aciunilor n caz de expunere la accidente i al celor de decontaminare
4. evacuarea de urgen a populaiei i a animalelor din zona afectat
5. tratamentul medical de urgen al rniilor i al persoanelor expuse la infecii
6. supravegherea medical a persoanelor expuse
7. organizarea adecvat a spitalizrii persoanelor expuse
8. msurile de investigaie epidemiologic
9. continuarea operaiunilor dup incident
n alctuirea acestui plan trebuie incluse urmtoarele obiective:
1. identicarea organismelor cu risc crescut
2. localizarea ariilor de risc maxim, de exemplu: laboratoare, spaiile de depozitare, biobazele
3. identicarea personalului i a populaiei la risc
4. nominalizarea personalului cu responsabiliti i a atribuiilor acestuia, de ex: persoana responsabil
de biosiguran, personalul de securitate, autoritatea local de sntate, medici, microbiologi, veterinari,
epidemiologi i serviciile de pompieri i poliie
5. listele cu unitile medicale ce pot asigura tratamentul i izolarea persoanelor expuse sau infectate
6. transportul persoanelor expuse sau infectate
7. listele cu sursele de seruri imune, vaccinuri, medicamente, echipamente speciale i materiale consumabile
8. aprovizonarea cu echipament de urgen, de ex.: mbrcminte de protecie, dezinfectante, truse
personale pentru tratarea contaminrilor cu substante chimice i biologice, echipament i materiale
pentru decontaminare.
13.2. Msuri de urgen pentru laboratoarele de microbiologie
Rni prin nepare, tiere i zgriere
Individul afectat trebuie s scoat mbrcmintea de protecie, s se spele pe mini i pe prile
afectate, s aplice dezinfectantul corespunztor i s solicite asisten medical dac este nevoie. Cauza
rnii i microorganismele implicate trebuie raportate i se vor pstra consemnri medicale complete i
conforme cu cele ntmplate.
Ingestia accidental de produse potenial periculoase
71
Pompierii i alte instituii trebuie implicate n elaborarea planurilor de intervenie n caz de urgen.
Acetia trebuie informai dinainte care ncperi conin materiale potenial infecioase. Este recomandabil
ca aceste servicii s viziteze laboratorul pentru a cunoate planul i interiorul acestuia.
Dup un dezastru natural, serviciile de urgen local sau naional trebuie prevenite asupra
pericolelor poteniale din cldirile laboratorului i/sau din mprejurimile acestora. Personalul acestor
servicii poate intra n laborator numai nsoit de un angajat instruit al laboratorului. Materialele infecioase
trebuie colectate n cutii impermeabile pentru lichide sau n saci groi de unic folosin. Recuperarea
sau eliminarea trebuie decise de personalul responsabil cu biosigurana, pe baza informaiilor de la locul
accidentului.
Serviciile de urgen: persoanele de contact
Lng telefoanele din instituie trebuie aate numerele de telefon i adresele urmtoare:
1. Laboratorul sau instituia (adresa i locaia s-ar putea s nu e cunoscut n detaliu de ctre cel care
sun sau serviciul apelat)
2. Directorul instituiei
3. eful laboratorului
4. Responsabilul cu biosigurana
5. Pompierii
6. Spitalul sau serviciul de ambulan sau personalul medical (numele clinicii, departamentele, i/sau
personalul medical dac este posibil)
7. Poliia
8. Responsabilul pentru probleme medicale al instituiei (laboratorului)
9. Tehnicianul ef
10. Serviciile de ap, gaz i electricitate
Echipament de urgen
Pentru cazurile de urgen trebuie s existe la ndemn urmtorul echipament de protecie:
1. Trusa de prim ajutor care s includ antidoturi universale i speciale
2. Extinctoare, pturi ignifuge
n funcie de circumstanele locale, se recomand i urmtorul echipament de urgen care poate
adaptat n funcie de particularitile locale:
1. mbrcminte complet pentru protecie (salopet, mnui, echipament de protecie a capului (glugi),
acestea ind utilizate n cazul incidentelor cu microorganisme din grupurile de risc 3 i 4)
2. masc respiratorie cu ltre specice chimice i pentru particule
3. aparat de dezinfecie a camerei, de exemplu: spray i vaporizator cu formaldehid
4. targ
5. unelte, de ex.: ciocan, topor, chei mecanice, urubelni, scar, frnghie
6. echipamente i ae/pancarte pentru delimitarea zonei de pericol.
Pentru alte informaii vezi referinele 12 i 28.
73
74
Cunotinele de baz privind dezinfecia i sterilizarea sunt extrem de importante pentru sigurana
biologic n laborator. Din moment ce obiectele puternic contaminate nu pot dezinfectate ecient i nici
sterilizate cu uurin, este la fel de important i nelegerea principiilor precurrii, operaie anterioar
dezinfeciei. Din acest punct de vedere, capitolul de fa este dedicat principiilor generale care se aplic
tuturor claselor de microorganisme patogene, cu excepia notabil a prionilor.
Cerinele specice pentru decontaminare vor depinde de tipul activitii i de tipul de agent(i)
infecios(i) cu care se lucreaz. Prin urmare, este necesar s e folosite informaiile generale prezentate
aici, pentru a elabora att proceduri standard ct i msuri specice adaptate particularitilor de
periculozitate din ecare laborator.
Timpii de contact pentru dezinfectante sunt specici pentru ecare substan, sunt precizai n
prospectele produselor i vor utilizai conform indicaiilor productorilor.
14.1. Deniii
n procesele de decontaminare i sterilizare n condiii de siguran biologic sunt utilizai numeroi
termeni. Dintre acetia enumerm pe cei mai frecvent utilizai:
Antimicrobian - un agent care omoar microorganismele sau le suprim creterea i
multiplicarea.
Antiseptic o substan care inhib creterea i dezvoltarea microorganismelor fr s le omoare
neaprat. Antisepticele se aplic uzual pe suprafaa corpului.
Biocid un termen general care se aplic oricrui agent care ucide organismele.
Germicid chimic o substan chimic sau un amestec de substane chimice utilizat pentru
omorrea microorganismelor.
Decontaminare orice proces utilizat pentru ndeprtarea i/sau omorrea microorganismelor.
Acelai termen se aplic i pentru ndeprtarea sau neutralizarea substanelor chimice periculoase
i a materialelor radioactive.
Dezinfectant o substan chimic sau un amestec de substane chimice utilizate pentru
omorrea microorganismelor, dar nu neaprat i a sporilor acestora. Dezinfectantele sunt de
obicei aplicate pe suprafee sau obiecte inerte.
Dezinfecie metodele zice sau chimice utilizate pentru omorrea microorganismelor, dar nu
neaprat i a sporilor acestora.
Microbicid o substan chimic sau un amestec de substane chimice care omoar
microorganismele. Acest termen se utilizeaz adesea n loc de biocid, germicid, sau
antimicrobian.
Sporocid - o substan chimic sau un amestec de substane chimice care omoar
microorganismele i sporii.
Sterilizare proces care omoar i/sau ndeprteaz toate clasele de microorganisme i sporii.
14.2. Precurarea i curarea materialelor de laborator
n termeni practici, curarea este ndeprtarea murdriei, materiilor organice si a coloranilor.
Curarea include perierea, aspirarea sau curarea de praf uscat, splarea sau tergerea umed cu
ap i spun sau detergent.
75
Acolo unde riscul de contaminare cu microorganisme patogene este crescut i este necesar
decontaminarea, precurarea este o manevr de rutin. Aceasta este necesar deoarece petele i
murdrirea cu substane organice pot forma un scut de protecie pentru microorganisme i astfel interfer
cu aciunea distrugtoare a decontaminanilor (antiseptice, germicide chimice i dezinfectani).
n aceste cazuri, precurarea este esenial pentru a asigura o dezinfecie sau sterilizare
corespunztoare. Se tie c multe produse germicide sunt eciente numai asupra materialelor precurate.
Precurarea trebuie efectuat cu precauii deosebite, pentru a evita expunerea la ageni patogeni.
Dup precurare, pentru curarea i dezinfecia propriu-zis trebuie s e aplicate substane
chimice cu aciune germicid.
Pentru precurare i dezinfecie este important s se utilizeze substane germicide chimice
compatibile ntre ele. Adeseori se folosesc n aceste scopuri aceleai substane.
14.3. Germicidele chimice
Multe tipuri de substane chimice pot utilizate ca dezinfectante i/sau antiseptice. Numrul
produselor comercializate este n continu cretere. Compoziiile acestora trebuie selectate cu grij n
funcie de nevoile specice.
Activitatea germicid a multor substane chimice este rapid i ecient la temperaturi nalte. n
acelai timp ns, temperaturile nalte pot accelera evaporarea i degradarea substanelor folosite.
Multe germicide pot duntoare oamenilor, animalelor i mediului nconjurtor. De aceea
trebuie alese, manipulate, depozitate i evacuate cu foarte mult grij, respectndu-se recomandrile
productorului. Pentru sigurana personalului se impune utilizarea de mnui, halate i ochelari de
protecie, atunci cnd se prepar soluiile diluate ale acestor germicide.
De regul, germicidele chimice nu sunt recomandate pentru curarea de rutin a podelelor,
pereilor, echipamentelor i mobilierului. Ele pot totui utilizate n cazuri excepionale, cum ar focarele
de boli infecioase.
Utilizarea corespunztoare a germicidelor chimice contribuie la sigurana locului de munc, prin
reducerea riscului de expunere a personalului i a mediului la agenii infecioi.
Pe ct posibil, numrul germicidelor chimice utilizate va limitat din raiuni economice, de
simplicare a aprovizionrii i inventarului i pentru limitarea polurii mediului.
Clasele cele mai utilizate de germicide chimice sunt descrise n cele ce urmeaz, cu prezentarea
informaiilor generale n ceea ce privete utilizarea i sigurana manipulrii. Concentraiile germicide sunt
redate n termeni de greutate pe volum (g/v), cu unele excepii menionate la locul potrivit. Tabelul 12
rezum diluiile de lucru recomandate pentru compuii care degaj clor.
Tabel 12. Diluiile recomandate ale produselor pe baz de clor
Condiii curatea)
Condiii murdrieb)
0,1% (1g/l)
0,5% (5g/l)
20 ml/l
100 ml/l
1,4 g/l
7,0 g/l
1,7 g/l
8,5 g/l
o tablet /litru
4 tablete/litru
20 g/l
20 g/l
76
Dioxidul de clor
Dioxidul de clor (ClO2) este un germicid puternic cu aciune imediat, adesea activ la concentraii
mai joase dect cele de hipoclorit recomandate. Dioxidul de clor este instabil sub forma de gaz i se
descompune n clor gazos (Cl2) i oxigen gazos (O2), cu degajare de cldur. Totui, dioxidul de clor este
solubil n ap i este stabil sub forma de soluie apoas. El se poate obine e prin amestecarea de acid
clorhidric i clorit de sodiu (NaClO2), e se poate comanda sub forma de soluie apoas stabilizat, care
este activat n momentul folosirii.
Dintre biocidele cu efect oxidant, dioxidul de clor este oxidantul cel mai selectiv. Ozonul i clorul
sunt mult mai reactive dect dioxidul de clor i se vor consuma mai rapid n cazul deeurilor care conin
substante organice n cantitate mare ; el reacioneaz selectiv, n special asupra compuilor sulfurici,
aminelor secundare i teriare i asupra altor compui organici intens redui. Ca urmare, folosind dioxid
de clor se poate asigura o cantitate mai stabil de clor rezidual cu doze mult mai mici dect dac s-ar
folosit clor sau ozon. Dac se recurge la un sistem adecvat de generare a sa, dioxidul de clor poate
folosit cu mai mult ecacitate dect clorul sau ozonul n prezena unor ncrcturi organice importante,
tocmai datorit selectivitii aciunii sale.
Formaldehida
Formaldehida (HCHO) este un gaz care distruge microorganismele i sporii acestora, la
temperaturi mai mari de 20C. Formaldehida nu este activ fa de prioni, are o vitez de aciune relativ
redus i necesit o umiditate relativ mai mare de 70%. Este vndut, e sub form de polimer solid
(para-formaldehid), ca fulgi sau tablete, e ca formol - o soluie a gazului n ap de aproximativ 370 g/l
(37%), coninnd metanol (100 ml/l) ca stabilizator. Ambele forme sunt nclzite pentru a elibera gazul,
care este utilizat pentru decontaminarea i dezinfecia spaiilor nchise, cum ar hotele de biosiguran
(HSB) i alte incinte sau ncperi (vezi mai jos seciunea intitulat Decontaminarea spaiului nconjurtor).
Formaldehida (5% formol n ap) poate utilizat ca dezinfectant lichid.
Formaldehida este suspectat a cancerigen. Are un miros neptor, iar vaporii si pot irita
ochii i mucoasele. De aceea, trebuie depozitat i utilizat n nie speciale de protecie chimic (hote
chimice) sau ncperi foarte bine aerisite.
naintea utilizrii trebuie consultate regulile i normele naionale de folosire precum i precauiile ce in de
sigurana chimic.
Glutaraldehida
Ca i formaldehida, glutaraldehida (OHC(CH2)3CHO) este de asemenea activ mpotriva formelor
vegetative ale bacteriilor, sporilor, ciupercilor, precum i a viruilor ce conin lipide, dar i a celor fr
lipide. Este necoroziv i reacioneaz mai rapid dect formaldehida. Cu toate acestea, sunt necesare
cteva ore pentru a distruge sporii bacterieni.
n general, este furnizat ca o soluie cu concentraie de aprox. 20 g/l (2%). Majoritatea acestor
produse trebuie activate (alcalinizate) nainte de utilizare, prin adugare de bicarbonat, furnizat mpreun
cu produsul. Soluia activat poate utilizat timp de 1-4 sptmni de la preparare, n funcie de activare,
condiiile i frecvena utilizrii. Baghetele de scufundat n soluie pentru a aa dac mai este activ,
furnizate de unii productori, dau numai indicaii orientative. Soluiile de glutaraldehid trebuie aruncate,
dac devin tulburi.
Glutaraldehida este toxic i iritant pentru piele i mucoase; de aceea, contactul cu acestea
trebuie evitat. Glutaraldehida se utilizeaz numai sub ni (hot) sau n spaii bine aerisite. Nu este
recomandat sub form pulverizat sau soluii pentru decontaminarea suprafeelor din mediu.
naintea utilizrii trebuie consultate regulile i normativele naionale de folosire precum i
precauiile ce in de sigurana chimic.
78
Compuii fenolici
Compuii fenolici, un grup larg de ageni au fost printre primele germicide folosite. n ciuda acestui
fapt, anumite probleme recente pe care le ridic sigurana utilizrii lor, recomand restrngerea folosirii.
Sunt activi mpotriva formelor vegetative ale bacteriilor i asupra virusurilor ce conin lipide. n cazul unei
formulri corespunztoare, compuii fenolici prezint activitate i mpotriva mycobacteriilor. Nu sunt activi
mpotriva sporilor, iar activitatea asupra virusurilor non-lipidice (nenvelite sau nude) este variabil. Muli
produi fenolici sunt utilizai pentru decontaminarea suprafeelor de lucru i a celor ambientale; triclosanul
i cloro-xylenolul fac parte din soluiile antiseptice cele mai utilizate.
Triclosanul se regsete frecvent n produsele destinate splrii minilor. El este activ cu
precdere mpotriva bacteriilor vegetative i nu este duntor pielii i mucoaselor. Cu toate acestea,
studiile de laborator au demonstrat c bacteriile care au devenit rezistente la concentraii mici de triclosan,
prezint de asemenea rezisten la unele antibiotice. Importana acestei descoperiri pentru utilizarea
fenolilor n teren nu a fost nc evaluat.
Anumii compusi fenolici sunt sensibili i pot inactivai de srurile din apa dur; de aceea se
recomand ca diluarea lor s se fac cu ap distilat sau ap deionizat.
Compuii fenolici nu sunt recomandai pentru suprafeele care vin n contact cu mncarea, i nici
pentru spaiile destinate copiilor mici (pot absorbii de cauciuc i pot ptrunde n piele). Se vor respecta
i reglementrile de siguran chimic.
Compuii de amoniu cuaternari
Multe tipuri de compui de amoniu cuaternari sunt utilizai sub form de amestecuri i deseori
n combinaie cu alte substane germicide, cum ar alcoolul. Acetia prezint o bun activitate mpotriva
formelor vegetative ale bacteriilor i a virusurilor lipidice. Anumite tipuri (ex. clorura de benzalconiu) sunt
folosite ca antiseptice.
Activitatea germicid a anumitor tipuri de compui de amoniu cuaternari este considerabil redus
de ctre substanele organice, apa cu duritate mare sau de detergenii anionici. Prin urmare, atunci cnd
se intenioneaz utilizarea acestor produi pentru dezinfecie, este necesar alegerea cu grij a produselor
pentru precurare. Unele bacterii potenial patogene se pot dezvolta n soluiile de compui cuaternari de
amoniu. Datorit biodegradabilitii reduse, aceti compui se pot acumula n mediul nconjurtor.
Alcoolii
i depozitarea adecvat a etanolului n laborator pentru a se evita utilizarea acestuia n alte scopuri dect
cele de dezinfectare. Sticlele cu soluii pe baz de etanol trebuie s e etichetate vizibil, pentru a evita
autoclavarea din greeal.
Iodul i substanele iodate
Aciunea acestor dezinfectani este similar cu cea a clorului, dei sunt n general mai puin
inhibai de substanele organice. Iodul poate pta suprafeele de lucru i esturile i, n general, nu
este recomandat ca dezinfectant. Pe de alt parte, soluiile iodate i tincturile sunt antiseptice bune. n
general, antisepticele pe baz de iod nu sunt recomandate pentru ustensilele medicale i stomatologice.
Iodul nu trebuie utilizat pe obiectele din aluminiu sau cupru.
Iodul poate toxic. Produsele organice pe baz de iod trebuie depozitate la 4 - 10C pentru a
mpiedica dezvoltarea n ele a unor bacterii potenial nocive.
Peroxidul de hidrogen i peracizi
Ca i cloramina, peroxidul de hidrogen (H2O2) i peracizii sunt oxidani puternici i germicide
puternice, cu spectru larg de aciune. De asemenea, aceste produse sunt mai puin duntoare dect
cloramina att pentru oameni ct i pentru mediul nconjurtor. Peroxidul de hidrogen este furnizat e ca
soluie gata de utilizare n concentraie 3%, e ca soluie apoas de concentraie 30 %, care trebuie diluat
ulterior cu ap distilat, de 5 pn la 10 ori volumul su. Cu toate acestea, soluiile de peroxid de hidrogen
cu concentraie 3-6%, sunt relativ lente i cu aciune germicid limitat. Produsele disponibile la ora
actual conin stabilizatori speciali ai concentraiei de peroxid de hidrogen, ceea ce duce la accelerarea
aciunii germicide i le face mai putin corozive.
Peroxidul poate utilizat pentru decontaminarea suprafeelor de lucru, a meselor de laborator
i a hotelor de biosiguran. Soluiile n concentraie mai ridicat pot utilizate pentru dezinfectarea
instrumentarului medical sau stomatologic sensibil la cldur. Utilizarea peroxidului de hidrogen vaporizat
sau a acidului peracetic (CH3COOOH) pentru decontaminarea instrumentelor (dispozitivelor) medicale /
chirurgicale termosensibile necesit un echipament adecuat.
Peroxidul de hidrogen i peracizii pot avea aciune coroziv asupra metalelor cum ar aluminiul,
cuprul, alama i zincul i pot de asemenea decolora esturile, prul, pielea i mucoasele. Articolele tratate
cu aceste substane trebuie cltite riguros cu ap, nainte de a veni n contact cu ochii i mucoasele.
Aceste substane trebuie depozitate n spaii protejate de cldur i lumin.
14.4. Decontaminarea mediului de lucru (laboratorului)
Decontaminarea laboratorului, a mobilierului i a echipamentului acestuia necesit o combinaie
de dezinfectani lichizi i gazoi. Suprafeele pot decontaminate prin utilizarea unor soluii de hipoclorit
de sodiu coninnd 1g/l clor activ. Soluii mai puternice cu o concentraie de 5g/l sunt recomandate pentru
decontaminarea suprafeelor cu risc crescut. Pentru decontaminarea spaiului de lucru soluii coninnd
3% peroxid de hidrogen pot utilizate ca nlocuitori pentru soluiile de nlbitor.
ncperile i echipamentele pot decontaminate prin fumigare cu gaz de formaldehid, generat
prin nclzirea para-formaldehidei sau prin erberea unei soluii de formol. Procedeul este foarte periculos
i necesit personal special instruit. n aceste situaii ferestrele i uile laboratorului trebuie sigilate mai
nti cu band adeziv sau cu produse similare, nainte de eliberarea gazului. Fumigarea trebuie s e
efectuat la o temperatur ambiental de minim 21C i la o umiditate relativ de 70% (vezi seciunea
privind decontaminarea hotelor de biosiguran, mai jos).
Dup fumigare incinta trebuie s e foarte bine aerisit i abia apoi va permis accesul
personalului. Persoanele care trebuie totui s ptrund n aceste spaiii, o pot face numai dac poart
aparate de protecie respiratorie adecvate. Bicarbonatul de amoniu, sub form gazoas, poate utilizat
pentru neutralizarea formaldehidei.
80
Este ecace i fumigarea spaiilor foarte mici cu vapori de peroxid de hidrogen, dar pentru aceast
metod trebuie s se utilizeze un echipament adecvat.
14.5. Decontaminarea hotelor de biosiguran
Pentru decontaminarea hotelor de biosiguran de clas 1 i clas 2 exist echipament special,
portabil, pentru generarea, circularea i neutralizarea formaldehidei gazoase. n lipsa acestor echipamente
specializate, se pot folosi 2 tigi plasate pe 2 plite (reouri) electrice aezate n hot, care conin una
para-formaldehid (sucient pentru a obine o concentraie nal de 0,8 % para-formaldehid n aerul
din hot), i cealalt bicarbonat de amoniu (cu 10% mai mult dect para-formaldehida). Plitele sunt
conectate la curent electric n afara hotei, astfel nct conectarea i deconectarea plitelor s se fac din
exterior. Dac umiditatea relativ se situeaz sub 70%, n hot trebuie s e amplasat i un vas deschis
cu ap erbinte. Panoul frontal se etaneizeaz cu band adeziv solid (de ex. cea folosit pentru
conducte). Se lipete o folie groas de plastic peste deschiderea hotei, xnd-o etan de jur mprejur inclusiv n jurul relor electrice care ptrund n hot spre cele dou plite - ; n acelai mod se etaneizeaz
i racordul hotei la gura de exhaustare, evitndu-se astfel orice scpare a formaldehidei gazoase n
atmosfera laboratorului.
Se deschide ntreruptorul pentru formaldehid, care este apoi nchis dup ce s-a evaporat paraformaldehida. Incinta va rmne nchis cel puin 6 ore. Se pornete apoi a doua plit pentru evaporarea
bicarbonatului de amoniu. Dup aceea, se deconecteaz a doua plit i se pornete ventilatorul hotei
de dou ori cte dou secunde, permind astfel circulaia gazului degajat de bicarbonatul de amoniu n
ntreaga hot. Ulterior, dup cel puin 30 min, etanrile de la panoul frontal i conducta de exhaustare
pot ndeprtate, iar hota poate din nou folosit, dup o curare prealabil.
14.6. Splarea minilor /decontaminarea minilor
Atunci cnd este posibil, trebuie purtate mnui adecvate n timpul manipulrii materialelor care
prezint risc biologic. Cu toate acestea, purtarea mnuilor nu nlocuiete necesitatea splrii pe mini a
personalului din laborator. Minile trebuie splate dup manipularea materialelor sau animalelor cu risc
biologic i nainte de ieirea din laborator.
n multe situaii, splarea insistent a minilor cu spun obinuit i cu ap este sucient pentru
a le decontamina, dar se recomand, totui, utilizarea spunurilor germicide pentru situaii cu risc biologic
crescut. Minile trebuie spunite foarte bine, iar splarea se face printr-o frecare riguroas, care trebuie
s dureze minim 10 secunde, urmat de cltire din abunden cu ap curat i apoi uscate cu erveele
de hrtie sau un prosop curat (se pot folosi usctoarele de mini cu aer cald cnd exist la ndemn).
Se recomand instalarea n acest scop de robinete acionate cu cotul sau cu piciorul. Unde
acestea nu exist, se recomand utilizarea unui prosop de hrtie sau textile pentru nchiderea robinetului,
pentru a evita contaminarea minii proaspt splate.
Aa cum s-a menionat mai sus, atunci cnd nu este posibil splarea adecvat a minilor, se
poate recurge la frecarea lor cu soluii pe baz de alcool, pentru decontaminare.
14.7. Dezinfecia prin cldur i sterilizarea
Cel mai utilizat agent zic pentru decontaminare este cldura.
Cldura uscat (care este total non-coroziv) este utilizat pentru multe materiale din laborator,
care pot suporta temperaturi de 160C sau mai nalte, timp de 2-4 ore. Arderea sau incinerarea (vezi
mai jos) este, de asemenea, o form de cldur uscat. Autoclavarea este preferabil altor metode de
sterilizare deoarece genereaz cldur umed, care este mai ecient dect cldura uscat.
Fierberea nu garanteaz distrugerea tuturor microorganismelor i a agenilor patogeni, dar poate
folosit ca un procedeu minim de dezinfecie, atunci cnd alte metode (ex. dezinfecie chimic, sterilizare
prin autoclavare) nu pot efectuate.
81
82
Transportul materialelor infecioase i potenial infecioase face obiectul unor reglementri stricte
naionale i internaionale. Aceste reglementri descriu modalitile corecte de utilizare a materialelor de
ambalare precum i alte cerine legate de transport.
Personalul laboratorului trebuie s expedieze substanele infecioase n acord cu reglementrile
de transport n vigoare, urmrindu-se prin aceasta :
1. reducerea probabilitii de deteriorare a ambalajului i de producere a unor scurgeri i astfel
2. reducerea riscului de apariie a infeciilor
3. mbuntirea ecienei sistemului de expediere a coletelor
15.1. Reglementrile internaionale pentru transport
Reglementrile internaionale privind transportul materialelor infecioase (pe orice cale) se bazeaz
pe modelul reglementrilor ONU - Regulations on the Transport of Dangerous Goods (40), elaborat de
Comitetul de Experi ONU pentru Transportul Mrfurilor Periculoase (United Nations Committee of Experts
on the Transport of Dangerous Goods (UNCETDG)). Pentru a dobndi putere de lege, reglementrile
ONU trebuie s e introduse n reglementrile naionale i internaionale de ctre autoritile competente
(de ex. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air (41) of the International
Civil Aviation Organization (ICAO) pentru transportul aerian i European Agreement concerning the
International Carriage of Dangerous Goods by Road (ADR) (42).
Asociaia Internaional de Transport Aerian (IATA) public n ecare an Ghidul de transport al
substantelor infecioase (Infectious Substances Shipping Guidelines) (43). Ghidul IATA trebuie s respecte
Instruciunile tehnice ale ICAO (Technical Instructions) ca standard minim, dar poate impune restricii
suplimentare. Ghidul IATA trebuie urmat ori de cte ori transportul este efectuat de membrii IATA .
De cnd Reglementrile ONU au devenit un set dinamic de recomandri, care este amendat bianual,
cititorul trebuie s consulte i s aplice cele mai recente reglementri naionale i internaionale.
OMS furnizeaz sugestii i expertiz grupului de experi ai ONU (UNCETDG). Schimbri majore
ale reglementrilor privind transportul legate de transportul substanelor infecioase au fost introduse n
ediia a 13-a (2003) a Modelului Reglementrilor ONU. Aceste amendamente pot consultate pe larg n
documentele OMS (44).
Reglementrile internaionale nu sunt concepute pentru a se substitui celor naionale sau locale.
Totui, n situaiile n care nu exist reglementri pe plan naional, se vor respecta cele internaionale.
Este important de menionat c, n plus, transportul internaional al substanelor infecioase se
supune de asemenea i este subiect al reglementrilor naionale privind importul i exportul.
15.2. Sistemul ambalajului triplu
Sistemul ambalajului triplu este utilizat pentru transportul substanelor infecioase sau potenial
infecioase (Figura 11). Acest sistem de ambalare const n 3 straturi : container primar, ambalaj secundar
i ambalaj extern.
Containerul primar, care conine proba, trebuie s e nchis etan, impermeabil pentru lichide
i etichetat corespunztor coninutului. El trebuie s e nvelit n sucient material absorbant pentru a
absorbi integral lichidele pe care le conine n caz de spargere sau scurgere.
85
Ambalajul secundar etaneizat i impermeabil pentru lichide este folosit pentru a proteja
containerul(erele) primar(e). Mai multe containere primare pot introduse ntr-un singur ambalaj secundar.
Exist diverse reglementri care stabilesc limite privind volumul i/sau greutatea materialelor infecioase
incluse ntr-un colet.
Ambalajul extern protejeaz ambalajul secundar de deteriorri zice n timpul transportului.
Formularele cu date despre probe, scrisorile i alte tipuri de informaii care identic sau descriu proba,
expeditorul i destinatarul, precum i orice alte documente solicitate trebuie s e furnizate n conformitate
cu ultimele reglementri n vigoare.
Modelul de reglementri (Model Regulations) al Naiunilor Unite descrie 2 tipuri diferite de sisteme
cu triplu ambalaj pentru transport. Sistemul obinuit de ambalaj triplu se folosete pentru transportul a
diferite materiale infecioase; totui microrganismele cu risc crescut trebuie transportate conform unor
reglementri mai stricte. Pentru mai multe detalii despre utilizarea diferitelor ambalaje corespunztoare
materialelor transportate, se recomand consultarea reglementrilor naionale i internaionale pentru
prevederile aplicabile.
15.3. Procedura de curare/tratare n cazul vrsrii materialului infecios
n cazul vrsrii de material infecios sau potenial infecios trebuie aplicat urmtoarea
procedur :
1. Se vor purta mnui, mbrcminte de protecie, inclusiv ochelari i scut transparent pentru protecia
feii, dac este cazul.
2. Se va acoperi materialul vrsat cu o crp sau cu prosoape de hrtie pentru a-l reine.
3. Se va turna dezinfectantul corespunztor peste materialul absorbant folosit i peste zona din imediata
vecintate (n general, soluie de cloramin 5% ; pentru vrsri n timpul transportului cu avionul trebuie
utilizate dezinfectante pe baz de compui cuaternari de amoniu).
4. Se va aplica dezinfectantul concentric i centripet, dinspre marginea zonei spre interior.
5. Dup timpul de aciune corespunztor (ex. 30 minute), se ndeprteaz materialele absorbante. Dac
exist cioburi de sticl sau alte obiecte ascuite se va utiliza un fra sau o bucat de carton rigid
pentru strngerea acestora i punerea lor ntr-un container pentru obiecte ascuite.
6. Se va cura i dezinfecta aria contaminat (dac este necesar, se vor repeta etapele 2 - 5).
7. Se vor evacua materialele contaminate ntr-un container pentru deeuri impermeabil, rezistent la
nepare.
8. Dup dezinfectare, se va informa autoritatea competent c locul a fost decontaminat.
86
88
Tehnologia ADN recombinant realizeaz combinarea de material genetic provenit din diferite surse,
contribuind astfel la crearea unor organisme modicate genetic (OMG) care s-ar putea s nu existat
pn acum n natur.
La nceput, cercettorii din domeniul biologiei moleculare au fost ngrijorai de faptul c aceste
organisme ar putea avea proprieti imprevizibile i nedorite, constituind un risc biologic dac ar ajunge
n afara laboratorului. Aceast ngrijorare a constituit obiectul dezbaterilor de la conferina tiinic
desfurat n 1975 la Asilomar (SUA). Aici s-au dezbtut probleme de siguran i a fost propus primul
ghid privitor la tehnologia ADN recombinant. Experiena obinut prin cercetarea din urmtorii 25 de ani a
demonstrat c ingineria genetic poate condus ntr-o manier nepericuloas atunci cnd se evalueaz
corect riscul i se aplic msuri de siguran adecvate.
Prin intermediul tehnologiei ADN recombinant sau ingineriei genetice s-au clonat, iniial, segmente
de ADN n gazde bacteriene, pentru a supraexprima produii genici specici necesari pentru diverse studii.
Moleculele de ADN recombinant au fost, de asemenea, folosite pentru a crea OMG, precum animale
transgenice i knock-out i plante transgenice.
Tehnologia ADN recombinant are deja un impact enorm asupra biologiei i a medicinei i probabil
va cpta o inuen i mai mare odat cu cunoaterea secvenei nucleotidice a ntregului genom uman.
Folosind tehnologia ADN recombinant vor putea studiate zeci de mii de gene cu funcii nc necunoscute.
Terapia genic ar putea deveni o metod curent pentru tratarea anumitor boli i folosind tehnici de
inginerie genetic ar putea construii noi vectori de transfer genic. De asemenea, plantele transgenice
produse prin tehnologia ADN recombinant ar putea ajunge s joace un rol din ce n ce mai important n
agricultura modern.
Experienele implicnd construirea sau folosirea OMG nu trebuie fcute dect dup evaluarea
bioriscului. Proprietile patogene sau alte riscuri poteniale asociate acestor organisme pot reprezenta
proprieti noi, insucient caracterizate. Trebuie evaluate proprietile organismului donor, natura
secvenelor de ADN care vor transferate, proprietile organismului receptor i ale mediului nconjurtor.
Aceti factori vor trebui s ajute la stabilirea nivelului de biosiguran necesar pentru manipularea cu un
minimum de riscuri a OMG rezultate i la identicarea sistemelor de securizare biologic i zic la care
va trebui s se apeleze.
16.1. Criterii de biosiguran pentru sistemele biologice de expresie
Sistemele biologice de expresie sunt alctuite din vectori i celule gazd. Pentru a prezenta
ecien i siguran n folosire ele trebuie s satisfac o serie de criterii. Un exemplu de asemenea
sistem biologic de expresie este plasmidul pUC18. Frecvent utilizat ca vector de clonare n combinaie cu
celule de Escherichia coli K12, plasmidul pUC18 a fost secvenializat n ntregime. Toate genele necesare
pentru exprimarea n alte bacterii au fost ndeprtate din plasmidul su precursor, pBR322. E. coli K12 este
o tulpin nepatogen care nu poate coloniza intestinul oamenilor sntoi sau al animalelor. Experienele
de inginerie genetic de rutin pot desfurate n siguran pe sistemul E. coli K12/pUC18 n condiiile
unui nivel de biosiguran 1, cu condiia ca produii de expresie ai lanului de ADN strin inserat s nu
impun niveluri de biosiguran mai nalte.
89
1.
2.
3.
4.
5.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
92
Substane incompatibile
- Metale alcaline
(sodiu, potasiu, cesiu i litiu)
- Halogeni
mbrcminte de protecie (ex: mnui groase din cauciuc; galoi sau cizme de cauciuc) aparat
pentru asisten/protecie respiratorie
Lopei i frae
Pense pentru culegerea fragmentelor de sticl
tergtor de pardoseal (mop), crpe i prosoape de hrtie
Glei
Sod de rufe (carbonat de sodiu, Na2CO3) sau bicarbonat de sodiu ( NaHCO3), pentru neutralizarea
acizilor
Nisip
Detergent neinamabil
n cazul unei deversri accidentale a unei substane chimice periculoase trebuie luate
urmtoarele msuri:
Noticarea evenimentului ctre responsabilul cu biosigurana si evacuarea din zon a personalului
care nu este necesar.
Examinarea i acordarea de ngrijiri medicale persoanelor care ar putut contaminate.
Dac lichidul deversat este inamabil, se vor stinge toate focurile deschise, se vor nchide sursele
de gaze din ncperea respectiv i din zonele adiacente i se vor opri echipamentele electrice
care pot genera scntei.
Evitarea inhalrii de vapori din lichidul deversat.
Se va conecta ventilaia de aerisire, dac operaiunea este lipsit de pericole.
Se va asigura necesarul de materiale i echipamente (vezi mai sus !) pentru a ndeprta substana
chimic deversat.
n eventualitatea unei deversri chimice masive, ncperea trebuie evacuat i ferestrele vor
deschise dac este posibil. Dac materialul deversat este inamabil, trebuie stinse toate focurile
deschise din ncperea respectiv i din cele adiacente; vor oprite toate echipamentele electrice care
genereaz scntei.
17.8. Gazele comprimate i licheate
Informaii privind condiiile de pstrare a gazelor comprimate i licheate sunt prezentate n
Tabelul 14.
95
Condiii de pstrare
nu trebuie incinerai
Valva principal de presiune nalt trebuie s e nchis cnd echipamentul nu este utilizat i cnd n ncpere
nu este personal care lucreaz
b.
Camerele n care sunt folosii sau pstrai cilindri cu gaze inamabile trebuie marcate prin ae de avertizare
pe ui.
a.
96
97
Se utilizeaz pentru:
Nu se va utiliza pentru:
Ap
Pulbere uscat
Lichide inamabile
Incendii electrice
Spum
* Stingtoarele cu ap sunt propulsate de dioxidul de carbon; stingtoarele cu dioxid de carbon i pulbere trebuie
manipulate cu grij deoarece fora jetului poate mprtia materiale arznde; ncperile trebuie bine ventilate dup
utilizarea stingtoarelor care utilizeaz / genereaz dioxid de carbon.
Distana. Doza per unitatea de timp este funcie de inversul ptratului distanei pn la surs, pentru
cele mai multe radiaii i X :
Doza per unitatea de timp = constant x 1 / distana2 ;
Exemplu : Dublarea distanei pn la surs va duce la o reducere a expunerii la n acelai interval
de timp. Se pot utiliza diferite sisteme sau dispozitive pentru creterea distanei de manipulare dintre
operator i sursa radioactiv cleti, pense, brae articulate, dispozitive de pipetare, etc.
De notat c o reducere mic a distanei va duce la o reducere mare a dozei efectiv primite.
99
3.
Bariera. Ecranarea, adic amplasarea ntre operatori sau alte persoane din laborator i surs a
unor scuturi / bariere care absorb sau atenueaz energia radiaiilor va limita expunerea. Alegerea
i grosimea materialelor din care sunt confecionate scuturile depind de abilitatea/capacitatea de
penetrare (tipul i energia)radiaiilor. Bariere din material acrilic, ln sau metale uoare, n grosime
de 1,3-1,5 cm se utilizeaz pentru particulele de energie nalt, n timp ce scuturi de plumb, cu
densitate nalt, se utilizeaz pentru oprirea radiaiilor de energie nalt i X .
4.
Substituia. Nu se vor utiliza materiale bazate pe radionuclizi, dac sunt disponibile se poate recurge
la alte tehnici n acelai scop. Dac substituia nu este posibil, se vor alege radionuclizii cu puterea
de penetrare sau energia cea mai sczut.
Se vor alctui planuri de intervenie n caz de urgen i se vor face periodic exerciii de
aplicare ;
n cazuri de urgen, se va asigura n primul rnd asistena persoanelor rnite;
Ariile contaminate se vor cura i decontamina cu mult grij ;
Se solicit asistena responsabilului cu biosigurana ;
Se vor consemna i arhiva toate raportrile de incidente.
101
102
Asigurarea unei decontaminri corespunztoare, n urma unor scurgeri sau a altor incidente implicnd
materiale infecioase;
Asigurarea gestionrii corecte a deeurilor;
Asigurarea unei decontaminri corespunztoare a echipamentelor nainte de a supuse unor operaii
de reparaii sau ntreinere periodic;
Meninerea interesului comunitii privind problemele de sntate i de mediu;
Stabilirea de proceduri adecvate pentru intrarea / ieirea n/din laborator a materialelor infecioase
patogene n conformitate cu reglementrile naionale;
Analizarea aspectelor de biosiguran din toate planurile, protocoalele i procedurile operaionale din
activitile de cercetare care implic lucrul cu ageni infecioi, nainte de nceperea efectiv a acestor
activiti;
Instituirea unui sistem de intervenie n caz de situaii de urgen.
Comitetul de biosiguran trebuie s solicite sfatul responsabililor pentru siguran din diferitele
departamente (ex. specialiti n radioprotecie, securitatea muncii n industrie, prevenirea incendiilor, etc.),
iar n unele situaii se poate solicita asistena unor experi independeni din diferite domenii apropiate de
activitate, a autoritilor locale i a organismelor naionale de reglementare. Participarea unor membri
ai comunitilor locale poate de asemenea util, mai ales dac exist chestiuni controversate n
dezbatere.
104
105
106
Un program continuu de instruire privind protecia la locul de munc este esenial pentru
meninerea vigilenei personalului laboratorului i a personalului auxiliar n domeniul biosiguranei. ei
de laborator, cu ajutorul responsabilului cu biosigurana i a altor persoane calicate au un rol cheie n
instruirea personalului. Eciena instruirii privind biosigurana, de fapt ntreaga instruire privind protecia
personal i meninerea sntii, depinde de implicarea echipei de conducere, de factori motivaionali,
instructajul profesional iniial adecvat, relaiile de comunicare bune i, n ultim instan, de elurile i
obiectivele instituiei. n cele ce urmeaz vor prezentate elementele critice ale unui program ecace de
instruire privind biosigurana.
1. Evaluarea necesitilor
Acest proces include denirea sarcinilor identicate, n ordinea importanei lor (frecven, grad de
risc, complexitate) i anumite detalii privind etapele ce trebuie parcurse pentru realizarea acestora.
2. Stabilirea obiectivelor instruirii
Acestea sunt deprinderi corecte pe care cel instruit va trebui s demonstreze, dup instruire, c
i le-a nsuit, n timpul muncii. Obiectivele pot preciza condiiile n care se desfoar anumite activiti
sau deprinderi i nivelul cerut de competen.
3. Precizarea coninutului i mijloacelor de desfurare a instruirii.
Coninutul este reprezentat de cunotinele sau aptitudinile pe care persoanele instruite trebuie
s i le nsueasc i care s-i permit atingerea obiectivelor urmrite n materie de comportament.
Acele persoane, care-i cunosc cel mai bine profesia i cerinele acesteia, sunt cele mai n msur
pentru a deni coninutul programului de instruire privind biosigurana. Alte metode folosite trebuie s se
concentreze pe includerea unor exerciii menite a nlesni rezolvarea problemelor sau pe imaginarea unor
mijloace educative menite s duc la corectarea greelilor constatate la aplicarea unor tehnici. Nu este
evident c o anumit metod de nvare (lectur, cursuri televizate, programe pe calculator, cursuri video
interactive etc.) este mai bun dect alta. Foarte multe depind de necesitile specice ale instructajului,
de componena grupului care este instruit, etc.
4. Stabilirea diferenelor individuale de instruire
Instruirea efectiv trebuie s in seama de particularitile i calitile persoanelor instruite.
Indivizii i grupurile pot diferi n ceea ce privete aptitudinile, gradul de instruire, cultur, limba vorbit
i nivelul deprinderilor profesionale preexistente instruirii. Modul n care este perceput programul de
instruire de ctre participani, ca un mijloc de a-i mbuntii performanele profesionale sau securitatea
personal, va inuena substanial modalitatea de instruire. Unii nva mai bine prin metoda vizual, alii
prin practica direct, alii prin studierea unor materiale scrise.
Cursurile trebuie s se adreseze n egal msur angajailor cu probleme speciale, de aceea
trebuie adaptate, de exemplu pentru cei cu defecte de auz. n plus, se recomand ca toi cei care concep i
desfoar programe de instruire pe probleme de biosiguran, s e familiarizai cu metodele, principiile
de pedagogie pentru nvare n cazul adulilor.
107
108
110
7.Cilindrii (buteliile) cu gaz licheat i rezervoarele de produse petroliere lichide sunt ferite de sursele de
cldur ?
8. Personalul este corect instruit pentru a folosi i transporta corect gazele comprimate i licheate ?
Pericole de natur electric
1. Toate instalaiile electrice noi, nlocuirile, modicrile i reparaiile sunt fcute n conformitate cu normele
naionale de siguran ?
2. Instalaia electric are mpmntare ?
3. Sunt protejate toate circuitele din laborator cu sigurane, sigurane de mpmntare i dispozitive de
deconectare de la reea ?
4. Dispozitivele electrice existente sunt avizate pentru a folosite n laborator ?
5. Cordoanele electrice ale aparatelor au lungime adecvat (sunt contraindicate cablurile prea lungi), sunt
n bun stare i lipsite de uzuri, crpturi i tieturi ?
6. Este ecare priz destinat unui singur aparat ? (nu se recomand folosirea de prize multiple)
Echipamentul de protecie pentru personal
1. Exist echipament de protecie specic pentru ntreg personalul, ex. mnui, halate, oruri, salopete
?
2. Exist echipament special pentru lucrul cu substane chimice, radioactive i cancerigene (soruri de
cauciuc, mnui pentru chimicale); exist mnui rezistente la cldur pentru descrcarea autoclavelor
i pupinelelor ?
3. Exist ochelari de protecie, mti, scuturi (vizoare) tranparente pentru fa ?
4. Exist dispozitive pentru splarea ochilor ?
5. Exista duuri pentru situaii de urgen ?
6. Protecia mpotriva radiaiilor se realizeaz conform standardelor naionale i internaionale, inclusiv
existena dozimetrelor ?
7. Exist mti de gaze curate, dezinfectate i controlate cu regularitate; sunt ele pstrate la ndemn
i n condiii igienice ?
8. Exist ltre corespunztoare tipurilor de mti (ex: ltre HEPA pentru microorganisme, ltre adecvate
pentru gaze sau particule ?
9. Mtile de gaze individuale au fost testate pentru etaneitate pe faa persoanelor respective ?
Protecia i starea de sntate a personalului
1. Exist un serviciu de medicin profesional pentru personal ?
2. Trusele de prim ajutor sunt plasate n locuri accesibile ?
3. Exist personal calicat pentru a acorda primul ajutor ?
4. Acetia sunt instruii pentru a face fa situaiilor de urgen specice laboratorului (contact cu substane
corozive, ingestie accidental de substane toxice sau infectante) ?
5. Personalul auxiliar (de ex. personalul care face curenia i cel administrativ) a fost instruit asupra riscurilor
poteniale pe care le prezint laboratorul i materialele pe care le manipuleaz ?
6. Sunt aate anunuri vizibile cuprinznd numele persoanelor care pot acorda primul ajutor i telefoanele
serviciilor de urgen ?
7. Femeile de vrst fertil sunt informate despre riscurile i consecinele posibile pe care le implic lucrul
cu substane carcinogene, mutagene, teratogene i cu bacterii ?
8. Femeile de vrst fertil care bnuiesc sau sunt sigure c sunt nsrcinate tiu c trebuie s-i informeze
ei n scopul eventualei schimbri a locului de munc pe perioada sarcinii ?
9. Exist un program de imunizri adaptat specicului laboratorului ?
10. Se efectueaz teste cutanate i radiologice pentru cei care lucreaz n condiii de risc TBC sau alte
112
114
ANEXA 1
Anexa 1
Primul-ajutor
Primul ajutor n caz de expunere accidental la material real / potenial infecios const n
aplicarea imediat dup eveniment, de ctre o persoan avizat, a tratamentului medical adecvat, chiar
la locul producerii accidentului.
Primul ajutor se acord respectnd metoda aprobat pentru o anumit expunere, urmnd ca
ngrijirile s e continuate de ctre un medic de specialitate pentru tratarea consecinelor accidentului.
Echipamentul minim necesar pentru acordarea primului ajutor const n:
1. Trusa de prim-ajutor,
2. mbrcminte de protecie i echipament de siguran pentru persoana care asigur primul
ajutor,
3. Echipament de irigare ocular.
1. Trusa de prim-ajutor
Trusa de prim-ajutor va confecionat din materiale care s asigure protecia coninutului
mpotriva prafului i a umiditii. Trusa va pstrat la loc vizibil, uor de recunoscut i de accesat. Prin
convenie internaional, trusa de primajutor este identicat printr-o etichet cu o cruce alb pe fond
verde.
Trusa de prim-ajutor trebuie s conin:
1. Instruciuni generale de utilizare i lista de inventar a acesteia
2. Comprese sterile de diferite dimensiuni, n ambalaje individuale
3. Comprese sterile oculare cu bandaje de ataare
4. Comprese triunghiulare
5. Comprese sterile de acoperire a rnilor
6. Ace cu siguran
7. Fee sterile simple
8. Ghid / manual de acordare a primului-ajutor calicat, de exemplu, editat de Crucea Roie
Internaional.
2. Echipamentul pentru protecia celui care acord primul-ajutor
1. Piesa pentru respiraia gur-la-gur
2. Mnui de cauciuc i alte mijloace de protecie mpotriva expunerii la snge.
3. Trusa de curenie/neutralizare a dispersrilor de snge (vezi Capitolul 14).
3. Echipamentul de irigare ocular
Echipamentul de irigare ocular trebuie s e la ndemn, iar personalul bine instruit pentru
utilizarea sa corect.
115
116
ANEXA 2
Anexa 2
Imunizarea personalului
Evaluarea riscurilor pe care le implic lucrul cu diferii ageni microbieni trebuie s fac obiectul
unor discuii amnunite cu specialitii n domeniu.
Disponibilitatea i existena autorizaiilor de punere pe piaa local, avizarea de ctre Ministerul
Sntii i utilitatea unor vaccinuri i/sau medicamente (n special antibiotice) pentru cazurile de expunere
accidental trebuie s e evaluate i luate n considerare atunci cnd se intenioneaz a se lucra cu
anumii ageni microbieni.
De asemenea, screening-ul serologic prealabil al personalului expus la un anumit risc infecios
(cnd este disponibil un vaccin specic) se impune naintea unei vaccinri, deoarece poate depista starea
de imunitate dobndit (vaccinri, infecii anterioare) a unei pri a personalului pentru care vaccinarea
este inutil.
Dac un vaccin / anatoxin este avizat de Ministerul Sntii i este disponibil, vaccinarea
personalului va efectuat abia dupa evaluarea riscului unei posibile expuneri accidentale i dup
evaluarea clinic a strii de sntate a personalului vizat.
Va luat n considerare i existena / accesibilitatea la servicii clinice de specialitate pentru
managementul cazurilor posibile de expuneri accidentale la ageni microbieni.
117
118
ANEXA 3
Anexa 3
119
120
ANEXA 4
Anexa 4
Riscul
Ace de sering
Inoculare
accidental,
aerosoli, stropire
Centrifuga
Aerosoli, stropire i
spargerea cupelor
Echipament
Riscul
Ultracentrifuga
Aerosoli, stropire i
spargerea cupelor
Exicatoare
pentru
anaerobioz
Explozie, rspndire
de materiale
infecioase
Desicatoare
Implozie,
dispersarea
fragmentelor de
sticl i materiale
infecioase
Omogenizatoare, aparate
pentru
fragmentarea
esuturilor
Aerosoli, scurgeri
i spargeri ale
containerului
Sonicatoare
i bi cu
ultrasunete
Aerosoli, tulburri
auditive, dermatite
Agitatoare
pentru culturi,
shakere,
mixere
Aerosoli, stropire,
vrsare
Liolizatoare
Aerosoli i
contaminare prin
contact direct
Bi de ap
Creterea
Asigurai curarea i dezinfecia periodic
microorganismelor
Nu utilizai azida de sodiu pentru a preveni creterea
Formarea de
microorganismelor
compui explozivi ai
azidei de sodiu cu
anumite metale
122
ANEXA 4
Cauza accidentului
Creterea necontrolat
a temperaturii.
Electrocutri
mpmntare
defectuoas
Respectarea standardelor
naionale
Utilizare improprie
Accidente de centrifugare
Neechilibrarea cupelor
Instruirea i supravegherea
personalului
Explozia incubatoarelor
pentru anaerobioz
Instruirea i supravegherea
personalului
Transportul impropriu al
azotului lichid
Explozie n frigidere de uz
casnic
Chimicale periculoase
depozitate n containere
nerezistente la aprindere i explozii. Ex :
eter n recipient cu dop
nurubat care permite
scurgerea
Adaptare improprie
ntreinere incorect
Foc n am-fotometru
123
124
ANEXA 5
Anexa 5
Aceast anex cuprinde informaii de baz cu privire la sntate i siguran, informaii i precauii
de protecie referitoare la o list selectat de substane chimice folosite n mod obinuit n laboratoarele
de sntate public i n cele de cercetare medical. Aceast list nu este exhaustiv, absena din ea a
unei anumite substane chimice nu implic i faptul c aceasta nu este periculoas. Toate substanele
chimice din laborator trebuie manipulate cu atenie i de o manier care s minimalizeze riscurile de
expunere.
125
126
HCCH
Acetilena
Asxiant ; cauzeaz
Gaz incolor, cu
miros slab eteric
degerturi la contactul
sau de usturoi;
cu pielea.
se livreaz n
containere sub
presiune, dizolvat
n aceton ;
punct topire -81C,
sublimeaz la -84C
Lichid incolor
sau gaz cu miros
neptor, arom de
fructe;
punct topire-121C,
punct erbere
21C.
Acetaldehida
CH3CHO
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Deosebit de
inamabil ;
interval inamabil 2,5100%.
Extrem de inamabil ;
amestecul vapori / aer
este explozibil ;
punct de aprindere
-39C, interval
inamabil 4-57%.
PERICOLE DE FOC
PRECAUII DE SIGURAN
Agent
puternic
reductor ;
reacioneaz violent cu oxidanii
i cu orurile i clorurile n
prezena luminii. Reacioneaz
cu cuprul, argintul i mercurul
sau cu srurile acestora, formnd
compui sensibili la ocuri (pericol
de explozii).
INCOMPATIBILITI CHIMICE
ALTE PERICOLE
Iritare a cilor
respiratorii, a ochilor i
pielii. Expunerea poate
determina convulsii,
pierderea cunotinei,
intoxicare cu cianuri.
Lichid incolor cu
miros aromatic;
punct topire -46C,
punct erbere 82C.
Lichid incolor cu
miros neptor ;
punct topire 17C,
punct erbere
118C ;
miscibil cu apa.
Acetona
127
CH3CO2H
Acid acetic
CH3CN
Acetonitril
CH3COCH3
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Inamabil ;
punct de aprindere
40C,
interval inamabil 5,416%.
Deosebit de
inamabil ;
punct de aprindere
12,8C, limite
explozibile 3,0-16%.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Reacioneaz violent cu oxidanii
(acid cromic i acid nitric) i cu
cloroformul n prezena bazelor.
Incompatibil
cu
amestecuri
concentrate de acid sulfuric i
nitric.
PRECAUII DE SIGURAN
Recipientele care o conin
se stocheaz n zone bine
ventilate, la distan de surse
de foc. Se va evita inhalarea
vaporilor. Se manipuleaz
cu protecie respiratorie i
ocular.
Deosebit de
inamabil ;
punct de aprindere
- 18C,
limite explozibile 2,212,8%.
PERICOLE DE FOC
Se stocheaz
n recipiente i
vase mari, cu
mpmntare
pentru a preveni
acumulrile i
descrcrile de
electricitate static.
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
PROPRIETI
FIZICE
Lichid incolor,
vscos sau cristale
albe higroscopice ;
punct topire 42C,
se descompune
sub punctul de
erbere la 213C ;
solubil n ap.
Acid fosforic
128
H3PO4
CrO3
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Acid cromic
SUBSTANE
CHIMICE
Se descompune la
temperaturi de peste
250C n oxid cromic
i oxigen, cu pericol
crescut de aprindere.
Numeroase reaciii pot
genera pericole.
PERICOLE DE FOC
Se previne contactul cu
tegumentele i ochii, i
inhalarea prafului n. Se
lucreaz n spaii cu ventilaie,
exhaustare local sau protecie
respiratorie.
PRECAUII DE SIGURAN
INCOMPATIBILITI CHIMICE
La foc elibereaz
vapori i gaze
foarte toxice.
ALTE PERICOLE
129
HClO4
HO2CCO2H
Agent puternic
oxidant. Nu este
combustibil, dar
stimuleaz combustia
altor substane.
Combustibil. Produce
gaze iritante sau
toxice prin expunere
la foc.
Cristale incolore ;
solubil n ap ;
punct topire 190C ;
se descompune.
Acid oxalic
HNO3
Oxidant ; contactul cu
materiale combustibile
poate produce foc.
Elibereaz gaze toxice
prin expunere la foc.
Lichid fumegnd
incolor sau galben
pal ;
punct topire -42C,
punct erbere 83C
-121C; miscibil cu
apa.
Acid nitric
(50-70%)
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Agent puternic
oxidant ; poate
forma produi
explozivi dac vine
n contact cu mai
multe materiale
anorganice
sau organice ;
contamineaz
pardoselile de lemn,
bncile, etc. Poate
exploda la percuie.
Acidul nitric
concentrat este
implicat n mai
multe reacii
periculoase
dect oricare alt
substan chimic.
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Soluia concentrat
(15%) coroziv ,
cauzeaz arsuri severe ;
vaporii sunt foarte
corozivi prin inhalare ;
soluiile diluate sunt
iritante pentru ochi i
piele ; cauzeaz arsuri
i dermatite.
Cristale galbene,
umezite cu ap
sau dizolvate n
alcool ;
punct topire
122C, puin
solubil n ap.
Lichid vscos,
incolor, inodor ;
punct topire
10C,
punct erbere
340C (cu
descompunere).
Cristale albe
higroscopice,
cu miros
ptrunztor ;
punct topire
58C,
punct erbere
197,5C;
solubil n ap,
etanol, dietileter.
Acid picric
Acid sulfuric
Acid triclor
acetic
130
CCl3COOH
H2SO4
C6H2 (NO2)3OH
2,4,6, trinitrofenol
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Nu este combustibil.
Poate emana gaze
toxice prin expunere
la foc.
Exploziv cnd se
usuc.
PERICOLE DE FOC
Reacioneaz
violent
cu
amestecuri de cupru / dimetil
sulfoxid i n contact cu baze,
ageni oxidani puternici i metale
precum erul, zincul, aluminiul.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
pielea
Se stocheaz
n spaii uscate.
Soluiile apoase
concentrate se
pot descompune
violent.
Dac se adaug
acid concentrat n
ap poate aparea
erbere localizat.
Coloreaz
n galben.
ALTE PERICOLE
Lcrimare. Iritaie
sever respiratorie ;
edem pulmonar la
nivele ridicate de
expunere.
Efectele pot tardive.
Lichid incolor
sau galben, cu
miros neptor,
dezagreabil;
punct topire -87C,
punct erbere 53C
Lichid incolor cu
miros neptor ;
Pentru forma
gazoas:
punct topire -78C,
punct erbere -33C ;
Pentru soluie 25%:
punct topire -58C,
punct erbere 38C ;
miscibil cu apa.
Lichid incolor cu
miros puternic
neptor de oet ;
punct topire -73C,
punct erbere 139C.
Acroleina
131
(CH3CO) 2O
Anhidrida
acetic
amoniacale)
Amoniac
(Soluii
CH2=CHCHO
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Oxidani, acizi, alcali, amoniac,
amine. Polimerizeaz rapid dac
procesul nu este inhibat, n mod
obinuit cu hidrochinon. Poate
forma n timp peroxizi sensibili la
ocuri (pericol de explozii).
Reacioneaz violent cu metale
grele, cum ar mercurul i
srurile acestuia formnd produi
explozivi.
Se va evita contactul cu
tegumentele sau cu ochii. Se
lucreaz n nia de protecie
chimic sau cu o bun
ventilaie.
Se stocheaz n recipiente
nchise etan. n cazul
contactului cu ochii, se spal
imediat cu ap i se solicit
asisten
medical.
Se
lucreaz n nia de protecie
chimic, cu mnui din
cauciuc sau plastic i ochelari
de protecie chimic.
Extrem de inamabil ;
punct de aprindere 26C, limite explozibile
2,8-31%.
Inamabil, dezvolt
prin expunere la
foc vapori sau gaze
iritante sau toxice ;
punct de aprindere
49C,
limite inamabile 2,710,3%.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
PERICOLE DE FOC
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Nu este combustibil,
cu excepia pulberii.
Vtmtor n caz de
ingestie, inhalare sau
contact cu pielea. Poate
cauza iritaie a ochilor
sau a pielii. Posibil
carcinogen.
Metal alb, se
nnegrete dac
este expus la
ozon, hidrogen
sulfurat sau sulf ;
punct topire
962C,
punct erbere
2212C.
Argint
Auramina
132
4,4-Carbonoimidoil bis
(N, N-dimetilenzenamina)
Ag
C6H5NH2
Combustibil;
punct de aprindere
70C, interval exploziv
1,2-11%.
Cianoz cauzat de
methemoglobinemie.
Iritaie a ochilor i pielii.
Poate absorbit prin
piele; expuneri repetate
sau prelungite pot cauza
sensibilizare.
Lichid uleios, de la
incolor la cafeniu,
cu miros de amine
aromatice ;
punct topire -6C,
punct erbere
185C.
Anilina
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se stocheaz n recipiente
nchise etan, n spaii
separate de oxidani. Se
previne contactul cu pielea
sau cu ochii. Se lucreaz n
spaii cu ventilaie local sau
protecie respiratorie, mnui
i mbrcminte de protecie,
scuturi transparente pentru
fa.
Se lucreaz cu exhaustarea
local a aerului, cu mnui
i ochelari de protecie sau
protecia ochilor combinat cu
protecie respiratorie pentru
pulberi sau gaze toxice.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Combustibil, produce
gaze toxice prin
expunere la foc.
Pudr galben
deschis ;
punct topire 128C,
punct erbere
400C ;
puin solubil n
ap, dar foarte
solubil n acizi sau
solveni organici.
Benzidina
133
C6H6
Deosebit de
inamabil ;
punct de aprindere
-11C, interval
inamabil 1,3-8%.
Inhalarea vaporilor
afecteaz SNC cauznd
vertij i cefalee, iar la
concentraii mai mari
pierderea cunotinei i
moarte. Risc de anemie
aplastic, leucemie,
leziuni hepatice dup
expunere prelungit
sau cronic. Poate
absorbit prin piele.
Se descompune
exploziv cnd este
nclzit peste punctul
de topire. Elibereaz
gaze toxice cnd
este nclzit ; nu se
folosete apa pentru
stingerea focului.
PERICOLE DE FOC
Lichid incolor,
volatil, cu
miros aromatic
caracteristic ;
punct topire 6C,
punct erbere
80C.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Benzen
SUBSTANE
CHIMICE
Se stocheaz recipientele n
spaii bine ventilate, la distan
de sursele de foc. Se lucreaz
n nia de protecie chimic sau
n hote cu ventilaie adecvat;
cu protecie ocular i mnui
din PVC sau nitril. Se previne
formarea de acumulri sau
descrcri electrostatice, prin
mpmntare.
Se evit orice tip de expunere.
Se lucreaz cu protecia
ochilor i a pielii, n nia de
protecie chimic cu ventilaie
de exhaustare.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane. Multe
reacii pot cauza
foc sau explozie.
nclzirea poate
cauza creterea
presiunii cu risc de
ardere.
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane.
Lichid fumegnd,
rou-maroniu, cu
miros neptor ;
punct topire -7,2C,
punct erbere
58,8C.
Gaz galben-verzui,
cu miros neptor,
punct topire -101C,
punct erbere -34C.
134
Cl2
Clor
Br2
Brom
NaHSeO3
Pulbere cristalin,
alb, incolor ;
Solubil n ap.
Biselenit de
sodiu
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se lucreaz n condiii de
sistem nchis i ventilaie;
cu mnui izolatoare i
mbrcminte de protecie,
ochelari de protecie sau
protecie ocular combinat
cu protecie respiratorie.
Se manipuleaz purtnd
mbrcminte de protecie.
PRECAUII DE SIGURAN
Ageni oxidani.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
ALTE PERICOLE
Lichid incolor
volatil cu miros
caracteristic ;
punct topire -63C,
punct erbere 61C. ;
puin solubil n ap.
Cristale incolore
sau albe, cu miros
neptor ;
punct topire 52C,
punct erbere 61C.
Cloroform
Cianobrom
135
BrCN
Bromcian
CHCl2
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Nu este combustibil
dar formeaz gaz
inamabil la nclzire.
Prin expunere la foc
produce emanaii
gazoase iritante sau
toxice.
PERICOLE DE FOC
ALTE PERICOLE
Dac se nclzete
pn la descompunere formeaz
fosgen gaz. Atac
materialele plastice
i cauciucul.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Baze tari; unele metale cum ar
aluminiul sau magneziul, zincul
pulbere ; oxidani puternici.
Se lucreaz n ni de protecie
chimic purtnd mbrcminte
de protecie, mnui din nitril
i protecie ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
ANEXA 5
136
Inhalarea
emanaiilor
gazoase de cupru poate
cauza febra fumurilor
de metal .
Solid roiatic,
lucios, maleabil,
inodor ; pudra roie
devine verde dup
expunerea la aer i
umezeal;
punct topire
1083C,
punct erbere
2567C.
Cupru
Cu
(A-J)
Pudr alb ;
punctul de topire
variaz.
Citochalazina
Combustibil.
Pudr alb
cristalin cu miros
de migdale ;
punct topire
563C,
punct erbere
1496C;
foarte solubil n
ap.
Cianura de
sodiu
NaCN
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Elibereaz, n contact cu acizii
sau cu apa ce conine dioxid de
carbon dizolvat, gaze deosebit de
toxice de acid cianhidric (HCN).
Poate forma amestecuri explozive
cu nitriii.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Se lucreaz cu exhaustare
local a aerului sau protecie
respiratorie, cu mnui i
ochelari de protecie .
Se va evita inhalarea de
pulberi; se foloseste protecie
respiratorie. Se evit contactul
cu ochii sau pielea ; n cazul
contactului cu pielea se
spal imediat cu ap i se
ndeprteaz mbrcmintea
contaminat. Se lucreaz cu
ochelari de protecie chimic
i mnui din cauciuc sau
plastic. Se pstreaz sub
cheie, n spaii ventilate.
PRECAUII DE SIGURAN
Se trateaz stropii
de soluie cu
nlbitor pulbere
(hipoclorit de sodiu)
i se las n contact
24 ore. Substana
solid vrsat se
terge cu grij cu
o lavet care se
va scufunda apoi
n ap cu nlbitor
pulbere; se las 24
ore nainte de a
aruncat. n laborator
se pstreaz la
ndemn antidotul
cianurii.
ALTE PERICOLE
137
6 3
2 2
Pulbere cristalin
2,4-Dinitrofenil-hidrazina portocalie-roiatic ;
punct topire 200C,
puin solubil n ap.
C H (NO ) -
NHNH2
1-Hidrazin-2,4dinitro-benzen
CH3)2NH
Dimetilamina
Lichid incolor,
foarte volatil, cu
miros dulceag
caracteristic ;
punct topire -161C,
punct erbere 34C ;
puin solubil n ap.
Dietil eter
C2H5OC2H5
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Foarte inamabil ;
punct de aprindere 25C, limite inamabile
2,8-14% .
Foarte inamabil ca
soluie,
punct de aprindere
-18C.
Foarte inamabil ;
punct de aprindere 45C, interval inamabil
1,7-48%.
PERICOLE DE FOC
Se pstreaz recipientele
n spaii bine ventilate, la
distan de sursele de foc, n
containere cu mpmntare
pentru a preveni acumulrile
i descrcrile de electricitate
static. Se lucreaz n nia de
protecie chimic, cu mnui
din nitril pentru a preveni
degresarea pielii.
Se ine la distan de sursele
de foc ; n cazul contactului
cu ochii se spal imediat i se
solicit asisten medical. Se
lucreaz n nia de protecie
chimic, cu mnui din nitril i
ochelari de protecie chimic.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Lichid incolor cu
miros caracteristic ;
punct topire 12C,
punct erbere
101C .
Dioxan
Risc de asxiere n
spaii nchise sau prost
ventilate ; contactul cu
forma solid de ghea
carbonic cauzeaz
degerturi
Dioxid de
carbon
(solid ; ghea
carbonic,
ghea uscat)
CO2
C4H8O2
Dietilen dioxid
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane ; poate
exploda cnd este
nclzit, la expunerea
la soare sau cnd este
expus la ocuri sau
scntei.
Foarte inamabil ;
posibil aprinderea la
distan ; ca rezultat
al curgerii, agitrii,
etc, pot generate
ncrcri electrostatice.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz n condiii de
sistem nchis cu ventilaie,
cu mnui izolatoare i
mbrcminte de protecie,
ochelari de protecie sau
protecie ocular combinat
cu protecie respiratorie.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Se manipuleaz cu mnui
izolatoare. Se depoziteaz
numai n camere sau spaii
ventilate, n containere
deschise.
Se lucreaz cu ventilaie cu
exhaustare local. Se vor evita
acra deschis, scnteile,
fumatul sau contactul cu
oxidanii
sau
suprafee
erbini. Nu se folosete aer
comprimat pentru umplere,
evacuare sau manipulare ;
se folosesc dispozitive ce nu
produc scntei. Se lucreaz
cu mnui i mbrcminte
de protecie, scut transparent
pentru fa sau protecia
ochilor combinat cu protecie
respiratorie.
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
138
139
C6HcOH
Fenol
Etanolamina
Cristale incolore
sau roz pal,
cu miros
caracteristic ;
punct topire
41C,
punct erbere
182C ;
solubil n ap.
Lichid vscos,
incolor, nevolatil,
H2NCH2CH2OH cu miros
2-Amino-etanol amoniacal;
punct topire 10C,
punct erbere
171C ;
miscibil cu apa.
CH3CH2OH
Substanele i vaporii
sunt corozivi pentru ochi,
piele i tractul respirator,
cauznd arsuri severe ;
se absoarbe prin piele.
Tulburri ale SNC,
com. Afecteaz rinichii
i catul. Simptomele
includ dureri abdominale,
vrsturi, diaree, iritaii
ale pielii, dureri oculare.
Contactul prelungit cu
soluii diluate poate
cauza dermatite.
Lichid incolor,
Duntor dac este
volatil, cu miros n nghiit. Iritant pentru
caracteristic ;
ochi. Poate afecta SNC.
punct topire -117C,
punct erbere
79C ;
miscibil cu apa.
Etanol
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Punct de aprindere
80C ;
interval inamabil
1,7-6%.
Punctul de aprindere
85C.
Foarte inamabil ;
punct de aprindere
12C, limite inamabile
3-19% .
PERICOLE DE FOC
Reacioneaz cu oxidanii
puternici.
Se pstreaz n recipiente
bine nchise, la distan de
sursele de foc.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Lichid incolor cu
miros neptor;
punct erbere 96C;
miscibil cu apa.
Formaldehida
soluie
(37-41%
formaldehid
cu 11-14%
metanol)
140
H2S
Hidrogen
sulfurat
HCHO
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Foarte inamabil ;
limite explozibile
4,3-46%.
Punctul de aprindere
50C.
Se lucreaz cu ventilaie cu
exhaustare local. Se poart
ochelari de protecie sau
protecie ocular combinat
cu protecie respiratorie.
Se lucreaz n nia de
protecie chimic sau spaii
bine ventilate, cu mnui din
cauciuc sau plastic i protecie
ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
PERICOLE DE FOC
viguros
cu
Poate reaciona
oxidanii.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Acuitatea olfactiv
scade rapid i nu
se poate pune
baz pe aceasta
pentru avertizarea
asupra continurii
prezenei gazului.
Soluia concentrat
de formaldehid
devine
tulbure
dac este stocat
sub 21C i trebuie
stocat la 21-25C.
Soluia
diluat
(1-5%) i soluia de
concentraie medie
(5-25%) pstreaz
multe
dintre
pericolele formei
concentrate.
ALTE PERICOLE
Fulgi, pulbere,
pastile sau bare ;
punct topire
360C,
punct erbere
1320C;
foarte solubil n
ap.
Fulgi, pulbere,
pastile sau bare ;
punct topire
318C,
punct erbere
1390C;
solubil n ap.
Soluie incolor
sau galben pal,
cu miros de clor ;
miscibil cu apa.
Hidroxidul de
potasiu
Hidroxidul de
sodiu
Hipoclorit de
sodiu,
soluie
(10-14%clor)
141
NaOCl
NaOH
KOH
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Oxidant puternic.
Poate elibera gaze
toxice prin expunerea
la foc.
Nu este combustibil.
Contactul cu umezeala
sau apa poate
genera sucient
cldur pentru a
aprinde substanele
combustibile.
PERICOLE DE FOC
Se stocheaz n
recipiente nchise
etan, n spaii
uscate.
Pe parcursul stocrii
pierde treptat
clorul ; soluiile
diluate folosite ca
dezinfectant se
deterioreaz rapid.
Se pstreaz la
distan de acizi, n
spaii ntunecoase,
rcoroase, bine
ventilate.
ALTE PERICOLE
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
ANEXA 5
142
CH3OH
Metanol
Hg
(argint viu)
Se pstreaz n recipiente
bine nchise, la distan de
orice surs de foc. Se evit
inhalarea vaporilor i contactul
cu pielea. Se lucreaz n nia
de protecie chimic sau
n spaii bine ventilate, cu
mnui din cauciuc sau plastic
i protecie ocular.
Afecteaz SNC,
determinnd pierderea
cunotinei ; iritant pentru
mucoase. Expunerea
cronic poate leza retina
i nervul optic. Contactul
prelungit cu tegumentele
poate cauza dermatita.
Poate absorbit prin
piele.
Lichid incolor,
volatil, cu miros
caracteristic ;
punct topire -98C
punct erbere 65C;
miscibil cu apa.
Deosebit de
inamabil ;
punct de aprindere
-16C, intervalul
inamabil 7-37% .
Acetilena,
acidul
fulminic.
Reacioneaz cu amoniacul,
azidele i oxidul de etilen,
pentru a forma produi explozivi.
Reacioneaz violent cu bromul.
Formeaz amalgamuri cu multe
metale.
Se pstreaz n recipiente
bine nchise. Se lucreaz n
nia de protecie chimic sau
n spaii bine ventilate. Se vor
preveni stropirile. Se poart
mnui din nitril.
Nu este combustibil.
Prin expunere la foc
eman gaze iritante
sau toxice.
Lichid argintiu
greu ;
punct topire -39C
punct erbere
357C;
insolubil n ap.
Mercur
I2
Iritant al ochilor, al
tractului respirator i
al pielii. Expunerea
repetat poate cauza
sensibilizarea pielii.
Poate afecta tiroida.
Iod
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE SIGURAN
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Recipientele
se
stocheaz i se
manipuleaz pe tvi
de siguran pentru
a preveni stropirile;
picturile rspndite
se absorb ntr-un
acon de aspirare
cu un tub capilar i
conectat cu o pomp
de vid; suprafeele
stropite se trateaz
cu praf de zinc pentru
a forma un amalgam.
ALTE PERICOLE
Combustibil
Inamabil,
combustibil solid;
punct de aprindere
39C.
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane.
Substan solid
galben-pal, ce se
descompune nainte
de topire la 121C.
Livrat n recipiente de
tip spray 0,5% soluie
n butanol ; solubil
n ap.
Naftilamina
( si )
Ninhidrina
C9H6O4
C10H9N
N-fenil naftilamina
i N-fenil-naftilamina
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
143
Se va evita dispersia
pulberilor. Se respect
strict regulile de igien. Se
manipuleaz cu mnui din
cauciuc sau plastic i scut
transparent pentru fa sau
protecia ochilor combinat
cu protecie respiratorie. n
caz de contact cu ochii, se
spal cu ap i se solicit
asisten medical.
Contactul cu pielea
determin apariia
unei culori violete
persistente.
ALTE PERICOLE
Utilizarea sa este
interzis sau
controlat legal n
multe ri.
Soluiile
amoniacale
pot
precipita exploziv nitratul de
argint n prezena bazelor sau a
glucozei. Poate forma compui
explozivi cu etanolul i poate
cauza polimerizarea exploziv
a acrilonitrilului. Poate cauza
explozie cu aprindere dac este
amestecat cu crbune, magneziu,
fosfor sau sulf.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE
SIGURAN
ANEXA 5
144
La concentraie foarte
Gaz incolor
ridicat, iritant pentru
comprimat ;
punct topire -218,4C, tractul respirator.
punct erbere -183C .
Oxigen
P2O5
Pentoxid de
fosfor
O2
Methemoglobinemie
cu cianoz, leziune
hepatic; simptomele
includ cianoza buzelor
sau a unghiilor, cianoza
pielii, vertij, grea,
vrsturi,
astenie,
pierderea cunotinei.
Se absoarbe prin piele.
Lichid uleios,
galben pal, cu miros
caracteristic ;
punct topire 6C,
punct erbere 211C.
Nitrobenzen
C6H5NO2
PERICOLE DE FOC
SUBSTANE
CHIMICE
Se lucreaz cu exhaustare
local a aerului pentru
protecie, cu mnui i
mbrcminte de protecie,
cu scut transparent pentru
fa sau protecia ochilor
combinat cu protecie
respiratorie.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Se lucreaz cu ventilaie
cu exhaustare local sau
protecie respiratorie, cu
mnui, mbrcminte i
ochelari de protecie.
PRECAUII DE
SIGURAN
ALTE PERICOLE
Coroziv la concentraii
mari (60%), precum i
la concentraii sczute
(6%) n cazul contactului
prelungit cu pielea.
Soluiile diluate sunt
iritante pentru ochi,
tractul respirator i piele.
Afecteaz SNC
determinnd ameeal,
cefalee, grea, dispnee,
pierderea cunotinei.
Poate absorbit prin
piele cauznd roea
i senzaie de arsur.
Ingestia determin dureri
abdominale, diaree,
vrsturi, astenie.
Expunerea repetat
afecteaz catul i rinichii.
Cristal purpuriu ;
punct topire
240C (se
descompune).
Se dizolv uor n
ap.
Lichid incolor ;
punct topire -39C
(70%),
punct erbere
125C
(70%);
miscibil cu apa ;
este furnizat sub
form de soluie
concentrat n
variate concentraii.
Lichid incolor,
cu miros
caracteristic ;
punct topire
42C,
punct erbere
115C.
Permanganat
de potasiu
Peroxid de
hidrogen
Piridina
145
C5H5N
H2O2
KMnO4
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Deosebit de inamabil ;
punct de aprindere 20C,
limitele explozibile 1,812,4%.
Produce gaze iritante sau
toxice prin expunere la
foc. Vaporii/amestecurile
sunt explozibile.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz cu ventilaie
cu exhaustare local sau
cu protecie respiratorie; cu
mnui i mbrcminte de
protecie.
n cazul contactului cu
pielea, se spal din
abunden cu ap. Dac
concentraia
depete
20% se impune protecie cu
mnui din nitril i protecie
ocular.
Se
lucreaz
purtnd
mbrcminte de protecie,
protecie ocular i ltru
respirator dac se produce
praf.
PRECAUII DE
SIGURAN
Reacioneaz
violent
sau
exploziv dac este amestecat
cu o larg varietate de compui
anorganici sau organici sau cu
pulberi de metale.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Lichid incolor cu
miros alcoolic ;
punct topire -89C,
punct erbere
82C;
miscibil cu apa.
Solid inodor n
diferite forme, solid
amorf cafeniurocat nchis pn
la negru albstrui
sau cristale roii
transparente
sau cristale gri
metalizat pn la
negru ;
punct topire 170
- 217C,
punct erbere
685C.
Propan-2-ol
Seleniu
Telurit de
potasiu
146
K2TeO3
Se
(CH3)2CHOH
izopropanol
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Combustibil. Produce
gaze iritante sau
toxice prin expunere
la foc.
Foarte inamabil ;
punct de aprindere
112C, interval
inamabil
2,3-12,7% .
PERICOLE DE FOC
Se manipuleaz purtnd
mbrcminte de protecie.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Se pstreaz n recipiente
nchise etan, la distan de
sursele de foc. Se lucreaz
n nia de protecie chimic,
cu mnui din nitril i protecie
ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
Soluia apoas
70-85% de
propan-2-ol,
utilizat ca spray
dezinfectant,
rmne un pericol
de incendiu i nu
trebuie utilizat
n vecintatea
surselor de foc.
ALTE PERICOLE
147
OsO4
Tetraoxid de
osmiu
Tetrametilen
oxid
Deosebit de inamabil ;
poate forma peroxizi
explozivi ; punct de
aprindere -14C. Apa
poate s nu e ecace
n
stingerea
unui
incendiu cu implicarea
tetrahidrofuranului, dar
poate utilizat pentru a
rci recipientele expuse
la foc.
PERICOLE DE FOC
Nu este combustibil. Prin
expunere la foc produce
vapori sau gaze iritante
sau toxice.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se lucreaz cu ventilaie, cu
exhaustarea local a aerului
sau cu protecie respiratorie,
mnui i ochelari de
protecie.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
PRECAUII DE
SIGURAN
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Combustibil.
Elibereaz gaze
iritante sau toxice prin
expunere la foc.
Combustibil n condiii
particulare.
Cristale incolore ;
punct topire 131C,
punct erbere
200C;
puin solubil n ap.
148
Lichid incolor, cu
miros caracteristic ;
punct topire -73C,
punct erbere 87C.
CHClCCl2
Tricloretilen
(C6H3-(3CH3)(4NH2)) 2
3,3 - Dimetil(1,1 - bifenil)
4,4 - diamina
o Toluidina
C7H8
Metilbenzen
Foarte inamabil;
vaporii pot cauza
aprindere ;
punct de aprindere
4C, interval inamabil
1,4-7%. Stingerea n
cazul focurilor mici
se face cu: substane
chimice uscate, dioxid
de carbon, spum,
vapori de ap sau gaz
inert (nitrogen).
Lichid incolor cu
miros caracteristic ;
punct topire -95C,
punct erbere
111C;
nu este miscibil cu
apa.
Toluen
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Se evit contactul ; se
lucreaz cu protecie ocular
i cu mnui.
Se descompune n contact cu
suprafee ncinse sau acr,
formnd gaze toxice i corozive
(fosgen, acid clorhidric). Se
descompune n contact cu alcali
puternici producnd diclor-acetilena;
reacioneaz violent cu pulberi de
metale precum aluminiu, bariu,
magneziu sau titan; se descompune
ncet n prezena luminii i a umezelii,
formnd acid clorhidric.
Ageni oxidani.
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Xilen
(izomeri mixti)
Lichid incolor cu
miros aromatic ;
punct topire -95C
la -13C,
C6H4(CH3)2
punct erbere 136
Dimetil-benzen - 145C ;
insolubil n ap.
SUBSTANE
CHIMICE
PERICOLE DE FOC
Lichid inamabil ;
Poate afecta SNC,
conducnd la cefalee,
Punct de aprindere
ameeal, astenie
27-32C.
i grea. Lichidul i
vaporii irit ochii, pielea,
mucoasele i tractul
respirator. Vtmtor i
prin ingestie. Degreseaz
pielea prin contact
prelungit. Afectare
neurologic nespecic.
Expunerea poate
amplica pierderea de auz
cauzat de expunerea
la zgomote. Teste pe
animale sugereaz
toxicitate pentru funcia
reproductiv uman i
pentru cretere.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Se evit contactul cu ochii. Se
manipuleaz cu mnui din
nitril i protecie ocular. Se
stocheaz n recipiente bine
nchise, la distan de surse
de aprindere.
PRECAUII DE SIGURAN
INCOMPATIBILITI CHIMICE
Poate conine
etil-benzen
ca impuritate.
Etilbenzenul
este un posibil
carcinogen uman.
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
149
150
ANEXA 6
Anexa 6
Se vor evalua msurile de securizare ce vor aplicate acestor ageni, innd cont de natura
activitilor specice implicate i de cantitatea agenilor respectivi, determinndu-se dac, n anumite
circumstane particulare, se poate renuna la unele din aceste msuri.
9. Cerinele de securizare care decurg din clasicarea paraziilor se vor aplica numai la stadiile
din ciclul de via al parazitului care pot infecioase pentru om la locul de munc.
10. Aceasta list conine, de asemenea, indicaii separate pentru agenii biologici care pot provoca
reacii alergice sau toxice, atunci cnd este disponibil un vaccin ecace sau cnd se recomand ca lista
lucrtorilor expui s e pstrat mai mult de 10 ani.
Aceste indicaii sunt ilustrate prin urmtoarele litere:
A: Posibile reacii alergice
D: Lista lucrtorilor expui la acest agent biologic trebuie pstrat mai mult de 10 ani de
la ncetarea ultimei expuneri cunoscute
T: Producerea de toxine
V: Vaccin ecace disponibil
Efectuarea vaccinrii preventive trebuie s respecte codul de practic menionat n Anexa VII a
Directivei.
BACTERII i organisme similare
NB: Pentru agenii biologici din list, meniunea spp indic i alte specii cunoscute ca patogene pentru om.
Agent biologic
Clasicare
Actinobacillus actinomycetemcomitans
2
Actinomadura madurae
2
2
Actinomadura pelletieri
Actinomyces gerencseriae
2
Actinomycesis israelii
2
2
Actinomyces pyogenes
Actinomyces spp.
2
Arcanobacterium haemolyticum (Corynebacterium haemolyticum) 2
Bacillus anthracis
3
Bacteroides fragilis
2
2
Bartonella bacillifonnis
Bartonella quintana (Rochalimaea quintana)
2
Bartonella (Rochalimaea) spp.
2
Bordetella bronchiseptica
2
Bordetella parapertussis
2
Bordetella pertussis
2
Borrelia burgdorferi
2
2
Borrelia duttonii
Borrelia recurrentis
2
Borrelia spp.
2
3
Brucella abortus
Brucella canis
3
3
Brucella melitensis
Brucella suis
3
152
Observaii
ANEXA 6
3
3
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
T
T, V
T, V
3
2
3
2
2
2
3
2
2
3(**)
2
2
2
2
3
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
3(**)
3
3(**)
3
3
3
3
Mycobacterium africanum
Mycobacterium avium/intracellulare
Mycobacterium bovis (exceptnd tulpina BCG)
Mycobacterium chelonae
Mycobacterium fortuitum
Mycobacterium kansasii
Mycobacterium leprae
Mycobacterium malmoense
Mycobacterium marinum
Mycobacterium microti
Mycobacterium paratuberculosis
Mycobacterium scrofulaceum
Mycobacterium simiae
Mycobacterium szulgai
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium ulcerans
Mycobacterium xenopi
Mycoplasma caviae
Mycoplasma hominis
Mycoplasma pneumoniae
Neisseria gonorrhoeae
Neisseria meningitidis
Nocardia asteroides
Nocardia brasiliensis
Nocardia farcinica
Nocardia nova
Nocardia otitidiscaviarum
Pasteurella multocida
Pasteurella spp.
Peptostreptococcus anaerobius
Plesiomonas shigelloides
Porphyromonas spp.
Prevotella spp.
Proteus mirabilis
Proteus penneri
Proteus vulgaris
Providencia alcalifaciens
Providencia rettgeri
Providencia spp.
Pseudomonas aeruginosa
Rhodococcus equi
Rickettsia akari
Rickettsia canada
Rickettsia conorii
Rickettsia montana
Rickettsia typhi (Rickettsia mooseri)
Rickettsia prowazekii
Rickettsia rickettsii
Rickettsia tsutsugamushi
154
V
V
ANEXA 6
Rickettsia spp.
Salmonella arizonae
Salmonella enteritidis
Salmonella typhimurium
Salmonella paratyphi A, B, C
Salmonella typhi
Salmonella (alte serotipuri)
Serpulina spp.
Shigella boydii
Shigella dysenteriae (Tip 1)
Shigella dysenteriae, altele dect Tip 1
Shigella exneri
Shigella sonnei
Staphylococcus aureus
Streptobacillus moniliformis
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes
Streptococcus suis
Streptococcus spp.
Treponema carateum
Treponema pallidum
Treponema pertenue
Treponema spp.
Vibrio cholerae (inclusiv El Tor)
Vibrio parahaemolyticus
Vibrio spp.
Yersinia enterocolitica
Yersinia pestis
Yersinia pseudotuberculosis
Yersinia spp.
(**) Vezi paragraful 8 al notelor introductive.
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
3 (**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
VIRUSURI (*)
Clasicare
2
Agent biologic
Adenoviridae
Arenaviridae
Complexul LCM-Lassa virus (arena virusuri ale lumii vechi):
Virusul Lassa
Virusul coriomeningitei limfocitare (tulpini neurotrope)
Virusul coriomeningitei limfocitare (alte tulpini)
Virusul Mopeia
Alte virusuri ai complexului LCM-Lassa
Complexul Tacaribe-Virus (arena virusuri ale lumii noi):
Virusul Guanarito
Virusul Junin
Virusul Sabia
Virusul Machupo
Virusul Flexal
Alte virusuri ale complexului Tacaribe
155
4
3
2
2
2
4
4
4
4
3
2
V
V
Observaii
Astroviridae
Bunyaviridae
Belgrade (cunoscut i ca Dobrava)
Bhanja
Virusul Bunyamwera
Germiston
Virusul Oropouche
Sin Nombre (fostul Muerto Canyon)
Virusul encefalitei de California
Hantavirusuri:
Hantaan (febra hemoragic de Coreea)
Virusul Seoul
Virusul Puumala
Virusul Prospect Hill
Alte hantavirusuri
Nairovirusuri:
Virusul febrei hemoragice de Crimeea-Congo
Virusul Hazara
Flebovirusuri:
Febra Valley Rift
Febra mutei-de-nisip
Virusul Toscana
Alte bunyaviridae cunoscute ca ind patogene
Caliciviridae
Virusul Hepatitei E
Virusul Norwalk
Alte Caliciviridae
Coronaviridae
Filoviridae
Virusul Ebola
Virusul Marburg
Flaviviridae
Encefalita de Australia (Encefalita Murray Valley)
Virusul encefalitei Central-Europene
transmis prin cpu
Absettarov
Hanzalova
Hypr
Kumlinge
Virusul Dengue tip 1-4
Virusul Hepatitei C
Virusul Hepatitei G
Virusul encefalitei japoneze B
Kyasanur Forest
Louping ill
Omsk (a)
Powassan
Rocio
Encefalita de primvar-var rus (TBE) (a)
156
2
3
2
2
2
3
3
2
3
3
2
2
2
4
2
3
2
2
2
3(**)
2
2
2
4
4
3
3 (**)
3
3
3
3
3
3(**)
3(**)
3
3
3(**)
3
3
3
3
D
D
V
V
V
V
ANEXA 6
Encefalita de St Louis
Virusul Wesselsbron
Virusul febrei West Nile
Febra galben
Alte avivirusuri cunoscute ca ind patogene
Hepadnaviridae
Virusul Hepatitei B
Virusul Hepatitei D (Delta) (b)
Herpesviridae
Citomegalovirus
Virusul Epstein-Barr
Herpesvirus simiae (Virusul B)
Virusul Herpes simplex, tipurile 1 i 2
Herpesvirus varicella-zoster
Virusul limfotrop B uman (HBLV-HHV6)
Virusul herpes uman 7
Virusul herpes uman 8
Orthomyxoviridae
Virusurile gripale tip A, B i C
Orthomyxoviridae transmise prin capu: Dhori i Thogoto
Papovaviridae
Virusurile BK i JC
Papillomavirusuri umane
Paramyxoviridae
Virusul pojarului
Virusul oreionului
Virusul bolii Newcastle
Virusurile paragripale tipurile 1 - 4
Virusul respirator sinciial
Parvoviridae
Parvovirusul uman (B 19)
Picornaviridae
Virusul conjuctivitei hemoragice acute (AHC)
Virusul Coxsackie
Echo virusuri
Virusul Hepatitei A (enterovirusul uman tip 72)
Poliovirusuri
Rinovirusuri
Poxviridae
Virusul Buffalopox (e)
Virusul variolei taurinelor
Virusul Elephantpox (f)
Virusul Milkers node
Molluscum contagiosum virus
Virusul Monkeypox
Virusul Orf 2
Virusul Rabbitpox (g)
Virusul Vaccinia
Virusul variolei (major i minor)
157
3
3(**)
3
3
2
3(**)
3(**)
V, D
V, D
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
V(c)
2
2
D(d)
D(d)
2
2
2
2
2
V
V
2
2
2
2
2
2
2
V
V
2
2
2
2
2
3
2
2
4
4
2
2
2
2
2
3(**)
3(**)
3(**)
3(**)
2
3
2
3(**)
3(**)
3
3(**)
3
2
2
2
2
3(**)
3
3
2
2
2
V
V
V
4
3(**)
3(**)
3(**)
D(d)
D(d)
3(**)
3(**)
3(**)
D(d)
D(d)
D(d)
ANEXA 6
(b) Virusul hepatitei D reprezint un agent patogen pentru lucrtori doar n prezena unei infecii simultane
sau secundare cauzat de virusul hepatitei B.
Vaccinarea contra virusului hepatitei B va proteja deci lucrtorii care nu sunt afectai de virusul hepatitei
B, mpotriva virusului hepatitei D (Delta).
(c) Numai pentru tipurile A i B.
(d) Recomandat pentru activitile care implic contactul direct cu aceti ageni .
(e) Sunt identicate dou virusuri: unul de tip buffalopox iar cellalt o variant a virusului Vaccinia.
(f) Variant a virusului cowpox.
(g) Varianta a virusului Vaccinia.
(h) n prezent, nu exist dovezi de boal la om provocat de alte retrovirusuri de origine simian. Ca msur
de precauie, pentru activitile cu risc de expunere la acetia, se recomand securizare de nivel 3.
(i) Nu exist dovezi de infecii provocate la om de ageni responsabili pentru alte encefalopatii spongiforme
transmisibile animale. Cu toate acestea, ca msur de precauie pentru lucrrile de laborator, se recomand
msuri de securizare pentru agenii inclui n grupa de risc 3 (**), cu excepia lucrrilor de laborator care
implic un agent scrapie pentru care nivelul de securizare 2 este sucient.
Agent biologic
Acanthamoeba castellani
Ancylostoma duodenale
Angiostrongylus cantonensis
Angiostrongylus costaricensis
Ascaris lumbricoides
Ascaris suum
Babesia divergens
Babesia microti
Balantidium coli
Brugia malayi
Brugia pahangi
Capillaria philippinensis
Capillaria spp.
Clonorchis sinensis
Clonorchis viverrini
Cryptosporidium parvum
Cryptosporidium spp.
Cyclospora cayetanensis
Dipetalonema streptocerca
Diphyllobothrium latum
Dracunculus medinensis
Echinococcus granulosus
Echinococcus multilocularis
Echinococcus vogeli
Entamoeba histolytica
Fasciola gigantica
Fasciola hepatica
Fasciolopsis buski
Giardia lamblia (Giardia intestinalis)
Hymenolepis diminuta
Hymenolepis nana
PARAZII
159
Clasicare
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
3(**)
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
Observaii
A
A
3(**)
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
2
2
2
3(**)
3
2
Leishmania brasiliensis
Leishmania donovani
Leishmania ethiopica
Leishmania mexicana
Leishmania peruviana
Leishmania tropica
Leishmania major
Leishmania spp.
Loa loa
Mansonella ozzardi
Mansonella perstans
Naegleria fowleri
Necator americanus
Onchocerca volvulus
Opisthorchis felineus
Opisthorchis spp.
Paragonimuswes termani
Plasmodium falciparum
Plasmodium spp. (human and simian)
Sarcocystis suihominis
Schistosoma haematobium
Schistosoma intercalatum
Schistosoma japonicum
Schistosoma mansoni
Schistosoma mekongi
Strongyloides stercoralis
Strongyloides spp.
Taenia saginata
Taenia solium
Toxocara canis
Toxoplasma gondii
Trichinella spiralis
Trichuris trichiura
Trypanosoma brucei brucei
Trypanosoma brucei gambiense
Trypanosoma brucei rhodesiense
Trypanosoma cruzi
Wuchereria bancrofti
(**) Vezi paragraful 8 al notelor introductive.
FUNGI
Agent biologic
Aspergillus fumigatus
Blastomyces dermatitidis (Ajellomyces dermatitidis )
Candida albicans
Candida tropicalis
Cladophialophora bantiana (fosta: Xylohypha bantiana,
Cladosporium bantianum sau trichoides)
Coccidioides imitis
160
Clasicare
2
3
2
2
3
3
Observaii
A
A
ANEXA 6
161
2
2
2
2
2
2
3
3
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
A
A
162
BIBLIOGRAFIE
Bibliograe
BIBLIOGRAFIE
38. Infection control guidelines for hand washing, cleaning, disinfection and sterilization in health care,
2nd ed. Ottawa, Laboratory Centre for Disease Control, Health Canada, 1998.
39. Springthorpe VS, Sattar SA. Chemical disinfection of virus-contaminated surfaces. CRC Critical
Reviews in Environmental Control, 1990, 20:169229.
40. Recommendations on the transport of dangerous goods, 13th revised edition, New York and Geneva,
United Nations, 2003, (http://www.unece.org/trans/danger/publi/unrec/rev13/ 13les_e.html).
41. Technical instructions for the safe transport of dangerous goods by air, 20032004 Edition. Montreal,
International Civil Aviation Organization, 2002.
42. Economic Commission for Europe Inland Transport Committee. Restructured ADR applicable as
from 1 January 2003. New York and Geneva, United Nations, 2002, (http://www.unece.org/trans/
danger/publi/adr/adr2003/ContentsE.html).
43. Infectious substances shipping guidelines. Montreal, International Air Transport Association,2003,
(http://www.iata.org/ads/issg.htm).
44. Transport of Infectious Substances. Geneva, World Health Organization, 2004, (http://www.who.int/
csr/resources/publications/WHO_CDS_CSR_LYO_2004_9/en/).
45. Berg P et al. Asilomar conference on recombinant DNA molecules. Science, 1975, 188:991994.
46. European Council. Council Directive 98/81/EC of 26 October 1998 amending Directive90/219/EEC
on the contained use of genetically modied microorganisms. Ofcial Journal, 1998, L330:1331.
47. OMalley BW Jr et al. Limitations of adenovirus-mediated interleukin-2 gene therapy for oral cancer.
Laryngoscope, 1999, 109:389395.
48. World Health Organization. Maintenance and distribution of transgenic mice susceptible to human
viruses: memorandum from a WHO meeting. Bulletin of the World Health Organization, 1993,
71:497502.
49. Furr AK. CRC handbook of laboratory safety, 5th ed. Boca Raton, FL, CRC Press, 2000.
50. Lenga RE. The Sigma-Aldrich Library of Chemical Safety Data, 2nd ed. Milwaukee, WI, Aldrich
Chemical Company, 1988.
51. Lewis RJ. Saxs dangerous properties of industrial materials, 10th ed. Toronto, John Wiley and Sons,
1999.
52. DIRECTIVE 2000/54/EC of The European Parliament and of The Council of 18 September 2000
on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh
individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC)
165
166