Ghid National de Biosiguranta Pentru Laboratoare

0LQLVWHUXO6QWLLDO5HSXEOLFLL0ROGRYD
&HQWUXO1DLRQDOGH6QWDWH3XEOLF
*+,'1$,21$/
DE BIOSIGURAN
PENTRU LABORATOARE
&KLLQX
3UH]HQWXO*KLGHVWHRWUDQVSXQHUHDFHOHLGHDWUHLDHGLLLDSXEOLFDLHL206Laboratory Biosafety
0DQXDO DSUXWH vQ DQXO FRPSOHWDW FX XQHOH SUHYHGHUL FRQLQXWH vQ 'LUHFWLYD &RPLVLHL
Europene nr. 2000/54.
OrganL]DLD0RQGLDOD6QWLL
Toate drepturile rezervate.
'HQXPLULOH IRORVLWH L SUH]HQWDUHD PDWHULDOXOXLvQSXEOLFDLLOHVDOHQXLPSOLFH[SULPDUHDQLFLXQHL
RSLQLLGLQSDUWHD2UJDQL]DLHL0RQGLDOHD6QWLLSULYLQGVWDWXWXOMXULGLFDOYUHXQHLULWHULWRULX
RUDVDX]RQRULDODXWRULWLORUDFHVWRUDVDXSULYLQGGHOLPLWDUHDIURQWLHUHORUVDXJUDQLHORUDFHVWRUD
/LQLLOHSXQFWDWHGHSHKULUHSUH]LQWJUDQLHOHDSUR[LPDWLYHDVXSUDFURUD s-aUSXWHDVQXH[LVWH
un acord deplinWRWXL
0HQLRQDUHD FRPSDQLLORU VSHFLILFH VDX D DQXPLWRU SURGXVH DOH SURGXFWRULORU QX LPSOLF IDSWXO F
DFHVWHDVXQWDYL]DWHVDX UHFRPDQGDWHGHFWUH2UJDQL]DLD0RQGLDOD6QWLSUHIHUHQLDOIDGH
DOWHSURGXVHDVHPQWRDUHGDUFDUHQXDXIRVWPHQLRQDWH(URULOHLRPLVLXQLOHIDFH[FHSLHQXPHOH
produselor proprietare fiind specificate cu majuscule.
2UJDQL]DLD 0RQGLDO D 6QWLL D OXDW WRDWH PVXULOH FD LQIRUPDLLOH GLQ DFHDVW SXEOLFDLH V ILH
verificate. Materialul publicat este distribuit fU JDUDQLL GH QLFL XQ WLS GLUHFWH VDX LQGLUHFWH
5HVSRQVDELOLWDWHD SHQWUX LQWHUSUHWDUHD L XWLOL]DUHD DFHVWXL PDWHULDO UHYLQH FLWLWRUXOXL 2UJDQL]DLD
0RQGLDO D 6QWLL QX YD IL UVSXQ]WRDUH SHQWUX QLFL R GDXQ VXIHULW FD UH]XOWDW DO XWLOL]ULL
acestora.
Grupul de lucru SHQWUXUHGDFWDUHWHKQLFvQRUGLQHDDOIDEHWLF
Cojocaru Radu,
GUvQPHGLFLQ
Dmitrienco Valeria,
GUvQPHGLFLQ
*KHRUJKLD6WHOD,
GUvQPHGLFLQ
Ghidirim Victoria,
GUvQPHGLFLQ
Halacu Ala
Melnic Anatol
GUvQPHGLFLQ
6FRIHUD3HWUX
GUvQPHGLFLQ
Prudnicionoc Svetlana
Spnu Constantin
GUKDELOLWDWvQPHGLFLQ,
profesor universitar
&HQWUXOGH(SLGHPLRORJLHD%ROLORU([WUHPGH3HULFXORDVHL
6HFXULWDWH%LRORJLF, CNSP
&HQWUXOGHSURILOD[LHLFRPEDWHre SIDA, CNSP
9LFHGLUHFWRUvQSUREOHPHGHHSLGHPLRORJLHJHQHUDO, CNSP
/DERUDWRUXOGHSROLRPLHOLWLHQWHURYLUR]H&1SP
/DERUDWRUXOGHUHIHULQvQGLDJQRVWLFXO+9L+,9SIDA, CNSP
6HFLDHSLGHPLRORJLHJHQHUDO&1SP
/DERUDWRUXOLQIHFLLUHVSLUDWRULLYLUDOH&1SP
/DERUDWRUXOEDFWHULRORJLHVDQLWDU&1SP
Coordonator:
Vicedirector n probleme de WLLQ, CNSP
([DPLQDWH L DSUREDWH VSUH HGLWDUH GH &RQVLOLXO GH ([SHUL DO 0LQLVWHUXOXL 6QWLL DO
Republicii Moldova, Proces Verbal Nr. 3 din 04 iunie 2010
Cuvnt nainte
Organizaia Mondial a Sntii (OMS) a recunoscut de mult timp c sigurana i, n particular, sigurana biologic
reprezint probleme importante pe plan internaional. OMS a publicat prima ediie a Manualului de biosiguran n
laborator n anul 1993. Acest manual a ncurajat statele s accepte i s implementeze noiunile de baz privind
sigurana biologic i s elaboreze coduri naionale de practic pentru manipularea n condiii de siguran a
microorganismelor patogene n laboratoarele aflate pe teritoriile lor. Din anul 1983, multe ri au urmat ndrumrile din
acest manual pentru a elabora astfel de coduri de practic. A doua ediie a manualului a fost publicat n 1993.
OMS continu s dein un rol coordonator n probleme legate de biosiguran la nivel internaional prin aceast a III-a
ediie a manualului n care sunt abordate sigurana i securitatea biologic cu care ne confruntm n acest mileniu.
Cea de-a III-a editie subliniaz importana responsabilitii personale. Au fost adaugate noi capitole privind evaluarea
riscului, utilizarea n siguran a tehnologiei ADN recombinant si transportul materialelor infecioase. Recentele
evenimente pe plan mondial au dezvluit noi ameninri pentru sntatea public prin utilizarea ru intenionat i
eliberarea n mediul nconjurtor de ageni microbieni i toxine. De aceea, cea de-a III-a ediie introduce conceptele
privind biosecuritatea protejarea materialului microbiologic mpotriva furtului, pierderii sau al diversiunii, care pot
conduce la utilizarea neadecvat a acestor ageni i la afectarea sntii publice.. Aceast ediie include i informaii
privind sigurana cuprinse n publicaia OMS din 1997 Sigurana n laboratoarele din unitile sanitare (1).
A III-a ediie a Manualului OMS de biosiguran n laborator constituie un preios material de referin i un ghid pentru
naiunile care sunt contiente de necesitatea de a elabora i stabili coduri naionale de practic pentru securizarea
materialului microbiologic, asigurnd n plus disponibilitatea acestuia pentru scopuri clinice, de cercetare i
epidemiologice.
Dr A. Asamoa-Baah
Assistant Director-General
Communicable Diseases
World Health Organization
Geneva, Switzerland
iii
iii
Mulumiri
Elaborarea acestei a III-a ediii a Manualului de biosiguran n laborator a fost posibil prin
contribuia deosebit a urmtorilor :
Dr W. Emmett Barkley, Howard Hughes Medical Institute, Chevy Chase, MD, USA
Dr Murray L. Cohen, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA (pensionat)
Dr Ingegerd Kallings, Swedish Institute of Infectious Disease Control, Stockholm, Sweden
Ms Mary Ellen Kennedy, Consultant in Biosafety, Ashton, Ontario, Canada
Ms Margery Kennett, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne,
Australia (pensionat)
Dr Richard Knudsen, Office of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention,
Atlanta, GA, USA
Dr Nicoletta Previsani, Biosafety programme, World Health Organization, Geneva, Switzerland
Dr Jonathan Richmond, Office of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention,
Atlanta, GA, USA (pensionat)
Dr Syed A. Sattar, Faculty of Medicine, University of Ottawa, Ottawa, Ontario, Canada
Dr Deborah E. Wilson, Division of Occupational Health and Safety, Office of Research Services,
National Institutes of Health, Department of Health and Human Services, Washington, DC, USA
Dr Riccardo Wittek, Institute of Animal Biology, University of Lausanne, Lausanne, Switzerland
Asistena urmtorilor specialiti este, de asemenea, apreciat:
Ms Maureen Best, Office of Laboratory Security, Health Canada, Ottawa, Canada
Dr Mike Catton, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne, Australia
Dr Shanna Nesby, Office of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention,
Atlanta, GA, USA
Dr Stefan Wagener, Canadian Science Centre for Human and Animal Health, Winnipeg, Canada
Autorii i referenii doresc s mulumeasc, de asemenea, pentru contribuiile originale ale
numeroilor specialiti a cror munc a fost inclus n prima i a doua ediie a Manualului de
biosiguran n laborator precum i n publicaia Sigurana n laboratoarele din unitile de ngrijire
a sntii, OMS, 1997.
iv
iv
CUPRINS
Cuvnt nainte .................................................................................................................
iii
Mulumiri .......................................................................................................................... iv
Cuprins ............................................................................................................................
1. Principii generale .........................................................................................................
2. Evaluarea riscului microbiologic ..................................................................................
3. Laboratoarele de baz Nivelele de Biosiguran 1 i 2 ............................................
4. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3 .......................................................
17
5. Laboratorul nalt securizat Nivelul de Biosiguran 4 ...............................................
21
6. Biobazele ..................................................................................................................... 25
7. Recomandri pentru calificarea laboratorului/facilitilor acestuia ..............................
31
8. Recomandri pentru certificarea laboratorului/facilitilor acestuia .............................
33
9. Conceptul de biosecuritate n laborator ....................................................................... 45

10. Hotele de siguran biologic ....................................................................................
47
11. Echipamente de siguran ......................................................................................... 57

12. Practici microbiologice corecte. Tehnici de laborator ................................................
63
13. Planuri pentru evenimente neprevzute i msuri de urgen .................................
71
14. Dezinfecia i sterilizarea ........................................................................................... 75

15. Noiuni introductive privind transportul materialelor infecioase 87
16. Biosigurana i tehnologia ADN recombinant ........................................................... 91
17. Substane chimice periculoase .................................................................................. 95
18. Pericole adiionale n laborator .................................................................................. 99
19. Responsabilul cu biosigurana i comitetul de biosiguran ...................................... 105
20. Reguli de siguran pentru personalul auxiliar ..........................................................
107
21. Programele de instruire .............................................................................................
109
22. List-chestionar .........................................................................................................
111
Anexa 1 - Primul-ajutor .................................................................................................... 117

Anexa 2 - Imunizarea personalului ............................ 119
Anexa 3 - Centre colaboratoare ale OMS n domeniul biosiguranei ..............................
121
Anexa 4 - Sigurana microbiologic a echipamentelor ........................... 123

Anexa 5 - Substanele chimice: pericole i precauii .......................................................
127
Anexa 6 - Lista agenilor biologici . 153

Bibliografie 164
165
1. Principii generale
Introducere
Prezentul ghid se refer la pericolul infecios implicat de manipularea diferitelor
microorganisme, lund n considerare grupurile de risc crora le apartin (Grupurile de Risc
OMS 1, 2, 3 i 4, vezi Anexa 6). Aceast clasificare a grupurilor de risc este valabil doar
pentru activitatea de laborator. Tabelul 1 descrie grupurile de risc.
Tabel 1. Clasificarea microorganismelor infecioase pe grupuri de risc
Grup de risc 1 (risc infecios individual sau comunitar sczut sau absent)
Microorganisme cu probabilitate minim de a provoca mbolnvire la om sau animal
Grup de risc 2 (risc individual moderat, risc comunitar sczut)
Ageni patogeni care pot provoca mbolnvire la om sau animal, dar este puin probabil s
reprezinte un pericol sever pentru personalul de laborator, comunitate, faun sau mediu.
Expunerile n laborator pot cauza infecii severe dar pentru care exist tratament eficace i msuri
profilactice, iar riscul de rspndire al infeciei este limitat.
Grup de risc 3 (risc individual ridicat, risc comunitar sczut)
Ageni patogeni care n mod obinuit provoac mbolnvire sever la om sau animal, dar, de
regul, nu se rspndesc de la un individ infectat la altul. Exist tratament eficace i msuri
profilactice.
Grup de risc 4 (risc individual i comunitar ridicat)
Ageni patogeni care provoac, de regul, mbolnvire sever la om sau animal i care se pot
transmite spontan de la un individ la altul, direct sau indirect. Nu exist, n general, tratament
eficace i msuri profilactice.
Din punctul de vedere al biosiguranei, laboratoarele se clasific astfel :
-
de baz - Nivel de biosiguran 1
de baz - Nivel de biosiguran 2
securizat - Nivel de biosiguran 3
inalt securizat - Nivel de biosiguran 4
Aceast clasificare are la baz un complex de caracteristici ce se refer la proiectarea

i construcia laboratorului, nivelul de securizare, dotarea cu echipamente, practicile i
procedurile operaionale pe care le implic manipularea microorganismelor din diferite grupuri
de risc. Fr a fi exhaustiv, Tabelul 2 prezint corespondena dintre grupul de risc n care se
ncadreaz microorganismul i nivelul de biosiguran al laboratorului n care acesta se
manipuleaz.
11
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(N758
LABORATOARE
Tabel 2. Relaia dintre grupurile de risc i nivelele de biosiguran

Grup de
Nivel de
Tip de laborator
Practici de laborator
risc
biosiguran
De baz - Nivel de Invmnt,
1
GMT
biosiguran 1
cercetare
2
GMT plus
Servicii de asisten
De baz - Nivel de
mbrcminte de
primar; diagnostic,
biosiguran 2
protectie i semn de
cercetare
pericol biologic
Similar cu nivelul 2
plus mbrcminte
special, acces
controlat, flux de aer
direcionat
Securizat
Nivel de
biosiguran 3
Inalt securizat Nivel de

biosiguran 4
Servicii speciale de
diagnostic,
cercetare
Similar cu nivelul 3
plus intrare etans,
Uniti pentru ageni
du la ieire,
patogeni periculoi
eliminare special a
deeurilor
Echipamente de
protectie
Nici un fel; suprafa
de lucru deschis
Suprafa de lucru
deschis plus HSB
pentru producerea
eventuala de aerosoli
HSB i/sau alte
dispozitive primare
pentru toate
activitile
HSB clasa a III-a sau
costum cu presiune
pozitiv combinat cu
HSB clasa a II-a,
autoclav cu dou ci
de acces
(transmural),
aer filtrat
GMT = Good Microbiological Techniques (practici microbiologice corecte)

HSB = Hot de siguran biologic
OMS recomand elaborarea la nivel naional sau regional a unei clasificri a
microorganismelor, pe baza grupurilor de risc, lund n considerare urmtoarele :
1. Patogenicitatea microorganismului.
2. Modul de transmitere i tipul de gazd caracteristice microorganismului, elemente ce
pot fi influenate de nivelul de imunitate al populaiei, densitatea i mobilitatea
populaiei gazd, prezena vectorilor i de nivelul de igien a mediului.
3. Posibilitile locale de aplicare a unor msuri preventive eficace. Acestea pot include :
profilaxia prin imunizare activ (vaccinare) sau pasiv (administrare de antiseruri /
imunoglobuline specifice); aplicarea de msuri sanitare, ca de exemplu cele privind
igiena alimentelor i a apei; controlul rezervorului animal sau al vectorilor reprezentai
de artropode.
4. Posibilitile de administrare a unor tratamente eficace. Acestea pot include:
imunizarea pasiv, vaccinarile postexpunere, folosirea de antibiotice, antivirale i
ageni chimioterapici, lund n considerare i posibilitatea emergenei de tulpini
rezistente la acestea.
n Anexa 6 este prezentat clasificarea agenilor biologici conform Anexei III a
Directivei 2000/54/CE a Parlamentului European i Consiliului, din data de 18 Septembrie
2000, referitoare la protejarea lucrtorilor mpotriva riscurilor pe care le implic expunerea la
ageni biologici la locul de munc.
Desemnarea nivelului de biosiguran pentru lucrul n laborator trebuie s se bazeze
pe evaluarea riscului. Pentru stabilirea nivelului corect de biosiguran, evaluarea va lua n
2 2
principii generale
1. PRINCIPII
GENERALE
considerare grupul de risc cruia i aparine microorganismul, dar i ali factori ce pot interveni.
Pentru exemplificare, un microorganism aparinnd grupului de risc 2 necesit n general
localuri i utiliti, echipamente, practici i proceduri pentru desfurarea n siguran a
activitilor caracteristice Nivelului de biosiguran 2. Dac totui anumite experimente sunt
generatoare de aerosoli n concentraii mari, Nivelul de biosiguran 3 este mai indicat,
asigurnd un grad superior de limitare a aerosolilor la spaiul de lucru al laboratorului.
Aprecierea nivelului de biosiguran necesar desfurrii unei anumite activiti este ghidat de
judecata profesional bazat pe evaluarea riscului, i nu doar pe desemnarea mecanic a unui
nivel de biosiguran a laboratorului dupa grupul de risc cruia i aparine microorganismul
patogen care urmeaz a fi manipulat (vezi Capitolul 2).
Tabelul 3 prezint principalele cerine pentru fiecare nivel de biosiguran.
Tabel 3. Rezumat al cerinelor nivelelor de biosiguran
Nivel de biosiguran
2
3
Nu
Da
Nu
Da
1
4
Izolarea(a) laboratorului
Nu
Da
ncpere etanabil pentru
Nu
Da
decontaminare
Ventilaia:
- flux de aer direcionat spre interior
Nu
De dorit
Da
Da
- sistem de ventilaie controlat
Nu
De dorit
Da
Da
- evacuarea aerului prin filtre HEPA
Nu
Nu
Da / Nu(b)
Da
Intrare cu u dubl
Nu
Nu
Da
Da
Sas (c)
Nu
Nu
Nu
Da
Sas cu du
Nu
Nu
Nu
Da
Anticamer
Nu
Nu
Da
Da
Anticamer cu du
Nu
Nu
Da / Nu(d)
Nu
Tratarea efluenilor
Nu
Nu
Da / Nu(d)
Da
Autoclav:
- n institutie/cldire
Da
Da
Da
Da
- n laborator
Nu
Nu
De dorit
Da
- cu acces dublu (transmural)
Nu
Nu
De dorit
Da
Hote de siguran biologic:
Nu
De dorit
Da
Da
Capacitate de monitorizare a siguranei
Nu
Nu
De dorit
Da
personalului (e)
(a) Izolarea fizic i funcional a laboratorului de circulaia general a personalului.
(b) Depinde de locul de evacuare (vezi Capitolul 4).
(c) Sas - Incint prevzut cu dou sau mai multe ui interpus ntre dou sau mai multe
ncperi (de exemplu cu presiuni diferite), pentru a controla fluxul de aer ntre acestea.
Un sas poate fi proiectat i utilizat, fie pentru personal, fie pentru materiale sau probe.
(d) Depinde de agenii microbieni manipulai n laborator.
(e) De exemplu, fereastr de vizualizare, sistem de supraveghere video, dou ci de
comunicare
n consecin, stabilirea nivelului de biosiguran ia n consideraie microorganismul
(agentul patogen) folosit, facilitile disponibile, echipamentele i procedurile necesare
desfurrii activitii de laborator n condiii de siguran.
33
2. Evaluarea riscului microbiologic
Coloana vertebral a practicilor de biosiguran este evaluarea riscului. Dei exist o

multitudine de instrumente destinate a ajuta evaluarea riscului pentru o procedur sau pentru
un experiment, cel mai important component este reprezentat de evaluarea (judecata)
profesional. Evaluarea riscului ar trebui realizat de ctre specialitii cei mai familiarizai cu
caracteristicile specifice ale microorganismelor ce vor fi utilizate, cu procedurile i
echipamentele, cu animalele ce pot fi folosite ca model i cu echipamentele i facilitile
disponibile pentru o manipulare securizat. eful laboratorului sau investigatorul principal sunt
rspunztori pentru evaluarea adecvat i la timp, precum i pentru conlucrarea strns cu
colectivul de protecia muncii i personalul de biosiguran n vederea asigurrii echipamentului
i facilitilor necesare desfurrii activitii pentru care s-a fcut evaluarea. Dupa evaluarea
iniial a riscului, acesta se reevalueaz periodic i se revizuiete dac se consider necesar,
lund n considerare acumularea de noi date corelate cu problema gradului de risc i
informaiile din literatura de specialitate.
Unul din cele mai utile instrumente pentru evaluarea riscului microbiologic este listarea
grupurilor de risc pentru agenii microbiologici (vezi Cap. 1). Simpla referire la grupurile de risc
pentru un anumit agent microbian este insuficient pentru evaluarea riscului. Ali factori ce vor
trebui luai n considerare sunt urmtorii:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
Patogenitatea agentului infecios i doza infectant

Consecinele posibile ale expunerii
Calea natural de infectare
Alte ci de transmitere, rezultate n urma manipulrii n laborator (parenteral, aerian,
ingerare)
Stabilitatea agentului infecios n mediul extern
Concentraia agentului infecios i volumul de material concentrat ce se manipuleaz
Disponibilitatea unei gazde adecvate/susceptibile (umane sau animale)
Informaii disponibile din studii pe animale, raportri privind infecii dobndite n
laborator (profesionale) sau raportri de cazuri clinice
Intenia de a utiliza anumite tehnici in laborator (ultrasonarea, aerosolizarea,
centrifugarea, etc)
Orice manipulare genetic a microorganismului care poate duce la extinderea gamei
de gazde susceptibile sau poate modifica sensibilitatea acestuia la terapiile
considerate eficace
Accesul efectiv la msuri profilactice sau terapeutice eficace.
Pe baza informaiilor obinute prin evaluarea riscului, se stabileste nivelul de siguran

biologic necesar desfurrii activitii planificate, se selecteaz echipamentul corespunztor
proteciei personalului i procedurile operaionale standard (POS) ce vor include aspecte de
siguran a muncii, cu scopul desfurrii activitii n modul cel mai sigur posibil.
5
ghid DE
naional
de biosiguran
laboratoare
GHID NAIONAL
BIOSIGURAN
3(1758pentru
LABORATOARE
Probe despre care exist informaii limitate

Procedurile de evaluare a riscului descrise mai sus se aplic cu succes atunci cnd
dispunem de suficiente informaii . Sunt ns situaii cnd informaiile existente sunt
insuficiente pentru a permite o evaluare corect a riscului, cum este cazul probelor clinice sau
al celor epidemiologice colectate pe teren. n aceste situaii este prudent s se adopte o
atitudine precaut n manipularea probelor.
1. Precauiile standard (3) trebuie respectate ntotdeauna i se vor folosi barierele de
protecie (mnui, halate, protecie ocular), ori de cte ori probele provin de la
pacieni.
2. Aplicarea practicilor si procedurilor pentru Nivelul de biosiguran 2 trebuie s
reprezinte cerina minim pentru manipularea probelor.
3. Transportul probelor trebuie s respecte regulile si reglementrile naionale i/sau
internaionale.
Anumite informaii pot fi de mare ajutor pentru a uura determinarea riscului de
manipulare a acestor probe :
1. Datele medicale privind pacientul
2. Datele epidemiologice (date de morbiditate si mortalitate, calea de transmitere
suspectat, alte date privind investigarea focarului)
3. Informaii privind originea geografic a probei.
n cazul unor episoade epidemice de origine necunoscut, se pot elabora ad hoc
ghiduri adecvate, care s fie difuzate/publicate de autoritile naionale competente i/sau OMS
prin World Wide Web (aa cum s-a procedat n anul 2003, n condiiile emergenei sindromului
respirator acut sever (SARS)), ghiduri care s indice modalitatea de transport a probelor i
nivelul de biosiguran ce se impune n procesul de analiz a acestora.
Evaluarea riscului i microorganismele modificate genetic
O discuie detaliat privind evaluarea riscului n cazul microorganismelor modificate
genetic (genetically modified organisms = GMOs) este prezentat n Capitolul 16.
6
3. Laboratoarele de baz
Nivelele de Biosiguran 1 i 2
Acest ghid prezint cerinele minime pentru laboratoare clasificate pe toate nivelele de
biosiguran, care manipuleaz microorganisme din Grupurile de risc 1-4. Dei unele precauii
pentru anumite microorganisme din Grupul de risc 1 pot prea mai puin justificate, se
recomand aplicarea lor cu scopul nsuirii i promovrii practicilor microbiologice corecte.
Toate laboratoarele medicale (de sntate public sau de diagnostic clinic n
ambulatorii, spitale, etc) trebuie concepute conform unui Nivel de biosiguran 2 sau peste.
Deoarece nici un laborator nu are un control complet asupra probelor pe care le primete,
personalul din laborator poate fi expus la microorganisme din grupuri de risc superioare celor
anticipate. Aceast posibilitate trebuie luat n considerare cnd se elaboreaz planurile i
politicile de biosiguran. De regul, precauiile standard trebuie adoptate i aplicate
ntotdeauna.
Regulile pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2, prezentate n
acest manual, sunt cuprinztoare i detaliate, ele fiind fundamentale pentru toate laboratoarele,
indiferent de nivelul de biosiguran.
Recomandrile pentru laboratoarele securizate Nivel de biosiguran 3 i nalt
securizate - Nivel de biosiguran 4, care urmeaz (Capitolele 4 i 5), constituie de fapt
modificri i suplimentri ale acestor reguli, destinate lucrului cu ageni patogeni mai periculoi.
3.1. Codul de practici
Acest cod este o list a celor mai importante practici i proceduri de laborator care stau
la baza practicilor microbiologice corecte (good microbiological techniques = GMT). n multe
laboratoare i programe naionale n care acestea particip, acest cod se poate utiliza pentru
elaborarea de reguli i proceduri scrise pentru efectuarea n siguran a operaiunilor n
laborator.
Fiecare laborator trebuie s adopte un manual de siguran sau de operaiuni care s
identifice pericolele cunoscute sau poteniale precum i procedurile i practicile specifice pentru
eliminarea sau reducerea la minimum a acestor pericole. GMT sunt fundamentale pentru
sigurana activitilor de laborator. Echipamentul special de laborator este un element
suplimentar, care nu va putea ns niciodat s nlocuiasc aplicarea procedurilor corecte.
Cele mai importante concepte sunt enumerate mai jos.
3.1.1. Accesul
1. Sigla internationala de avertizare si inscriptia Pericol biologic (Figura 1) trebuie s fie
afiate pe uile ncperilor unde sunt manipulate microorganisme aparinnd grupului de
risc 2 sau mai mare.
2. Numai persoanele autorizate vor fi lsate s intre n zonele de lucru ale laboratorului.
3. Uile laboratorului trebuie s stea nchise.
4. Copiii nu trebuie autorizai sau lsai s intre n zonele de lucru ale laboratorului.
5. Accesul n biobaze trebuie s se fac numai pe baza unei autorizaii speciale.
6. Nu se admite accesul altor animale n afara celor folosite pentru activitile de laborator
7
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
PERICOL BIOLOGIC
ACCESUL PERMIS NUMAI PERSONALULUI AUTORIZAT
Nivel de biosiguran ....................................................................
Responsabil ..................................................................................
n caz de urgen telefonai ..........................................................
Tel. serviciu ............................ Tel. acas ....................................
Autorizarea pentru acces se obine
de la responsabilul nominalizat mai sus
Figura 1. Sigla de pericol biologic
3.1.2. Protecia individual a personalului
1. Salopetele de laborator, halatele sau uniformele trebuie purtate tot timpul ct se lucreaz n
laborator.
2. Mnui corespunztoare de protecie trebuie purtate n timpul tuturor procedurilor care pot
implica contactul direct sau accidental cu snge, cu alte umori sau fluide ale organismului,
cu alte materiale potenial infecioase sau cu animale infectate. Dup utilizare, mnuile se
scot aseptic i se spal minile.
3. Personalul trebuie s se spele pe mini dup manipularea materialelor infecioase i a
animalelor infectate i nainte de prsirea zonei de lucru a laboratorului.
4. Ochelarii de protecie, ecranele de protecie facial sau alte dispozitive de protecie trebuie
purtate ori de cte ori este necesar protecia ochilor i a feei de stropi, obiecte impactante
i surse artificiale de radiaii ultraviolete.
5. Este interzis purtarea mbrcminii protectoare de laborator n afara laboratorului, de
exemplu n cantine, camere de oficiu, biblioteci, toalete, etc.
6. nclmintea decupat n partea din fa (sandale) este improprie purtrii n laborator.
7. Consumul de alimente, buturi, machiajul i manipularea lentilelor de contact sunt interzise
n zonele de lucru ale laboratorului.
8. Depozitarea de alimente sau buturi oriunde n zona de lucru a laboratorului este interzis.
9. mbrcmintea i nclmintea de protecie ce a fost utilizat n laborator nu trebuie s fie
depozitat n aceleai dulapuri cu mbrcmintea i nclmintea de strad.
3.1.3. Procedurile
1. Pipetarea cu gura este strict interzis.
2. Nici un material nu trebuie dus la gur. Etichetele nu trebuie umectate cu limba nainte de
lipire.
3. Toate procedurile tehnice trebuie efectuate ntr-un mod care s reduc la minimum
formarea de aerosoli i picturi.
88
3. LaboratoareleDE
deBAZ
baz nivelele
1 i12 I 2
3. LABORATOARELE
NIVELELEde
DEbiosiguran
BIOSIGURAN
4. Folosirea acelor i seringilor hipodermice trebuie limitat. Ele nu trebuie folosite ca

substituente ale dispozitivelor de pipetare sau pentru oricare alt manoper ce nu
reprezint injecii parenterale sau aspirarea de fluide de la animalele de laborator.
5. Toate stropirile accidentale i expunerile evidente sau posibile cu material infecios trebuie
raportate responsabilului laboratorului. Se va pstra o eviden scris a acestor accidente i
incidente.
6. Se va elabora i aplica o procedur scris pentru curarea-inactivarea substanelor
vrsate.
7. Lichidele contaminate trebuie decontaminate (chimic sau fizic) naintea evacurii lor n
reeaua de canalizare. n funcie de riscul evaluat se poate dezvolta un sistem de tratare a
acestor lichide.
8. Documentele ce urmeaz a fi scoase din laborator trebuie s fie protejate pe toat perioada
ct se afl n laborator, pentru a nu fi contaminate.
3.1.4. Zonele de lucru ale laboratorului
1. n laborator trebuie pstrat curenia i ordinea, eliminndu-se toate materialele care nu
sunt necesare pentru munca desfurat n laborator.
2. Suprafeele de lucru trebuie decontaminate dup fiecare vrsare de materiale potenial
periculoase precum i la sfritul zilei de lucru.
3. Toate materialele contaminate, probele i culturile, trebuie decontaminate nainte de a fi
ndeprtate sau curate pentru refolosire.
4. Ambalarea i transportul trebuie s respecte reglementrile naionale i/sau internaionale
n vigoare.
5. Ferestrele ce pot fi deschise trebuie prevzute cu plase/ecrane pentru insecte.
3.1.5. Managementul biosiguranei
1. eful de laborator (persoana care poart n mod direct responsabilitatea laboratorului) are
obligaia s asigure elaborarea i adoptarea unui plan de management al biosiguranei i
ale unui manual de siguran i operaiuni.
2. Responsabilul cu activitatea laboratorului (subordonat efului laboratorului) trebuie s
asigure instruirea periodic a personalului laboratorului n domeniul siguranei.
3. Personalul trebuie avertizat asupra pericolelor speciale i are obligaia s citeasc manualul
de siguran i operaiuni i s respecte procedurile i practicile standard. Responsabilul
laboratorului trebuie s se asigure c toi membrii personalului i-au nsuit aceste reguli. O
copie a manualului de siguran i operaiuni trebuie s existe permanent n laborator
pentru a putea fi consultat n orice moment.
4. Trebuie s existe un program de dezinsecie i deratizare.
5. Trebuie asigurate, n caz de necesitate, pentru toi membrii personalului, o evaluare
medical adecvat, supraveghere i tratament, i trebuie inute evidene medicale
adecvate.
3.2. Conceperea structurii i facilitilor laboratorului
n proiectarea laboratorului i stabilirea efecturii anumitor activiti n spaiul acestuia,
se va acorda o atenie deosebit situaiilor despre care se tie c ridic probleme de siguran.
Acestea sunt:
1. Formarea de aerosoli
2. Manipularea de volume mari i/sau de concentraii ridicate de microorganisme
3. Supraaglomerarea spaiului de lucru sau acumularea de prea multe echipamente
9
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
4. Infestarea cu roztoare i insecte

5. Accesul neautorizat
6. Circuit de lucru: folosirea anumitor probe sau a unor reactivi specifici.
Exemple de design pentru laboratoare cu Nivel de biosiguran 1 i 2 sunt prezentate
n Figura 2 i, respectiv, 3.
Figura 2. Laborator cu nivel de biosiguran 1

(prin amabilitatea CUH2A, Princeton, NJ, USA).
3.2.1. Caracteristici de proiectare:
1. Trebuie asigurat un spaiu suficient pentru desfurarea n siguran a muncii de laborator
i pentru curenie i ntreinere
2. Pereii, tavanele i pavimentele trebuie s fie netede, uor de curat, impermeabile la
lichide i rezistente la substanele chimice i dezinfectantele folosite uzual n laborator.
Pavimentele nu trebuie s fie alunecoase.
3. Suprafaa meselor de lucru trebuie s fie impermeabil la ap, rezistent la dezinfectante,
acizi, baze, solveni organici i la cldur.
4. Iluminatul trebuie s fie adecvat pentru desfurarea tuturor activitilor. Reflexiile i
strlucirile nedorite trebuie evitate.
5. Mobilierul de laborator trebuie s fie rezistent. Spaiile deschise ntre i sub mese, hote i
echipamente trebuie s fie accesibile pentru curenie.
6. Trebuie prevzute spaii de depozitare adecvate pentru materialele de folosin imediat,
prevenind astfel aglomerarea acestora pe mesele de lucru i n spaiile libere dintre
acestea. Trebuie de asemenea prevzute spaii suplimentare pentru depozitarea pe
termen lung, localizate corespunztor n afara zonelor de lucru.
7. Trebuie asigurate spaii i faciliti adecvate pentru manipularea i depozitarea n siguran
a solvenilor, materialelor radioactive, a gazelor comprimate i lichefiate.
1
10
3. LaboratoareleDE
deBAZ
baz NIVELELE
nivelele de
1 i12I 2
3. LABORATOARELE
DEbiosiguran
BIOSIGURAN
Figura 3. Laborator cu nivel de biosiguran 2

Procedurile care genereaz aerosoli se execut n Hota de siguran
biologic. Uile sunt meninute nchise i marcate cu semne de pericol
adecvate. Deeurile potenial contaminate sunt colectate separat de restul
deeurilor.
8. Spaiile pentru pstrarea mbrcminii i nclmintei de strad i a obiectelor personale
trebuie asigurate n afara zonelor de lucru.
9. Spaiile pentru mncat, but i odihn trebuie asigurate n afara zonelor de lucru.
10. Chiuvete cu ap curent pentru splarea minilor, trebuie s existe n fiecare ncpere a
laboratorului, preferabil lng ua de ieire.
11. Uile trebuie s aib geamuri sau vizoare, s fie conforme cu normele de protecie contra
incendiilor i, de preferat, s se nchid singure.
12. Pentru Nivelul de biosiguran 2 trebuie ca un autoclav sau alte mijloace de decontaminare
s fie accesibile n imediata apropiere a laboratorului.
13. Sistemele de securitate trebuie s cuprind protecia mpotriva focului, urgenelor electrice,
s prevad duuri de urgen i faciliti pentru splarea ochilor.
14. Trebuie s existe zone sau camere de prim ajutor echipate adecvat i accesibile (vezi Anexa 1).
15. La proiectarea de faciliti noi, trebuie luat n considerare asigurarea de sisteme mecanice
de ventilaie, care s asigure un flux de aer direcionat spre interior, fr recirculare. Dac
nu exista ventilaie mecanic, ferestrele trebuie s se poat deschide i trebuie prevzute
cu plase pentru insecte.
16. Aprovizionarea cu ap curent de bun calitate este esenial. Nu trebuie s existe
interconectri ale surselor de ap ale laboratorului cu cele de aprovizionare cu ap
potabil. Un dispozitiv anti-reflux trebuie s protejeze sistemul public de aprovizionare cu
ap.

11
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
17. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de curent electric i un sistem de iluminare
pentru situaiile de urgen care s faciliteze ieirea din laborator. Un generator de rezerv
este de dorit pentru susinerea echipamentelor eseniale (incubatoare, hote de
biosiguran, congelatoare, etc.) i pentru ventilarea cutilor cu animale.
18. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de gaz. Buna ntreinere a instalaiei este
obligatorie.
19. Laboratoarele i cldirile biobazelor sunt uneori inta vandalizrilor. Trebuie avute n
vedere securitatea fizic i mpotriva incendiilor. Uile solide, ferestrele protejate i
eliberarea controlat a cheilor de acces sunt obligatorii. Alte msuri trebuie luate n
considerare i aplicate dac este necesar pentru creterea siguranei.
3.3. Echipamentele de laborator
mpreun cu procedurile i practicile corecte, utilizarea echipamentelor de siguran
contribuie la reducerea riscului. Acest capitol trateaz principiile de baz legate de
echipamentele utilizate n toate laboratoarele, indiferent de nivelul de biosiguran. Exigenele
legate de echipamentul de laborator pentru nivelele superioare de biosiguran sunt tratate n
capitolele respective.
eful de laborator are obligaia ca, dup consultarea cu responsabilul cu biosigurana
i colectivul de siguran, s asigure ca echipamentul adecvat s fie procurat i folosit
corespunztor. Echipamentul va fi ales lund n considerare cteva principii generale, de
exemplu:
1. S fie conceput astfel nct s previn sau s limiteze contactul dintre operator i
materialul infecios
2. S fie confecionat din materiale impermeabile la lichide, rezistente la coroziune i
corespunztoare ca structur.
3. S fie confecionat astfel nct s nu aib asperiti, margini ascuite i pri mobile
neprotejate
4. S fie proiectat, construit i instalat pentru a facilita operarea simpl i ntreinerea,
curarea, decontaminarea i testarea n vederea certificrii; ori de cte ori este posibil, se
va evita utilizarea sticlriei i a altor materiale casante.
Este util s se consulte n detaliu documentaia privind performanele i specificaiile
de construcie ale echipamentelor pentru a dobndi convingerea c prezint caracteristicile de
siguran necesare (vezi Capitolele 10 i 11).
3.3.1. Echipamente eseniale pentru asigurarea biosiguranei
1. Dispozitive de pipetare, pentru a evita pipetarea cu gura. Sunt disponibile diverse modele.
2. Hotele de biosiguran, ce trebuie folosite ori de cte ori:
- se manipuleaz materiale infecioase; aceste materiale pot fi centrifugate n spaiul
deschis al laboratorului dac se folosesc cupe de centrifug cu dispozitiv de securizare
i dac sunt introduse i descrcate ntr-o hot de biosiguran
- exist risc crescut de infecii aerogene
- se folosesc proceduri cu potenial ridicat de producere de aerosoli: centrifugarea,
mojararea, secionarea, agitarea sau mixarea viguroas, dezintegrarea sonic,
deschiderea containerelor cu material infecios cu presiune intern diferit de
presiunea ambiant, inocularea intranazal a animalelor i recoltarea de esuturi
infectate de la animale i ou, etc.
1
12
3. LaboratoareleDE
deBAZ
baz nivelele
1 i12 I 2
3. LABORATOARELE
NIVELELEde
DEbiosiguran
BIOSIGURAN
3. Anse de transfer de unic folosin din plastic. Alternativ, n scopul reducerii producerii de
aerosoli, n interiorul hotei de biosiguran se pot folosi incineratoare electrice pentru anse
de transfer.
4. Tuburi i flacoane cu capace prevzute cu filet.
5. Autoclave sau alte mijloace folosite pentru decontaminarea materialului infecios
6. Pipete Pasteur de unic folosin din plastic, ori de cte ori este posibil, evitnd utilizarea
celor din sticl
7. Echipamentele precum autoclavele i hotele de biosiguran trebuie validate cu metode
adecvate nainte de a fi introduse n uz. Acestea trebuie recertificate la intervale regulate
de timp, n acord cu instruciunile productorului (vezi Capitolul 7).
3.4. Supravegherea strii de sntate a personalului
Autoritatea angajatoare, prin eful de laborator, este responsabil de asigurarea unei
supravegheri adecvate a strii de sntate a personalului laboratorului. Obiectivul acestei
supravegheri este monitorizarea strii de sntate n relaie cu factorul ocupaional. Activitile
ce trebuie desfurate pentru ndeplinirea acestor obiective sunt:
1. Imunizarea activ i pasiv ori de cte ori acest lucru este indicat (vezi Anexa 2)
2. Facilitarea depistrii precoce a infeciilor dobndite n laborator
3. Excluderea indivizilor cu susceptibilitate crescut, ca de exemplu femeile nsrcinate sau
persoanele imunodeprimate, din locurile sau activitile de laborator cu periculozitate
crescut
4. Asigurarea personalului cu echipamente de protecie i proceduri eficace.
3.4.1. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz
microorganisme la Nivelul de biosiguran 1
Experiena activitii n acest tip de laboratoare arat c, n cazul manipulrii
microorganismelor la acest nivel, este improbabil producerea de mbolnviri ale oamenilor sau
de afeciuni ale animalelor cu importan sub raport veterinar. Se recomand, totui, efectuarea
unui control medical nainte de angajare la tot personalul, cu nregistrarea antecedentelor
medicale. Se recomand raportarea prompt a strilor de boal sau a accidentelor de
laborator, iar ntreg personalul trebuie s fie contient de importana respectrii practicilor
corecte microbiologice.
3.4.2. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz
microorganisme la Nivelul de biosiguran 2
1. Este necesar un control medical nainte de angajare. Ar trebui nregistrate antecedentele
personale medicale i evaluat starea de sntate n relaie cu factorul ocupaional.
2. nregistrrile privind mbolnvirile i absenele ar trebui pstrate de ctre eful laboratorului
3. Femeile de vrst fertil ar trebui informate cu privire la riscul expunerii ftului prin factor
ocupaional la anumite microorganisme (ex. virusul rubeolic). Precauiile pentru protejarea
ftului variaz n funcie de microorganismele la care pot fi expuse viitoarele mame.
3.5. Pregtirea personalului
Erorile umane i tehnica deficitar pot compromite i cele mai bune reguli i bariere de
siguran menite a proteja personalul laboratorului. Pe de alt parte, un personal contient de
exigenele impuse de regulile de siguran, bine informat pentru recunoaterea i stpnirea
pericolelor din laborator, este cheia prevenirii producerii acestor infecii, a incidentelor i
1
13
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
accidentelor. n acest scop, instruirea continu la locul de munc privind msurile de siguran
este esenial. Un program eficace de siguran ncepe cu conducerea laboratorului, care
trebuie s se asigure c practicile i procedurile de siguran sunt integrate n instruirea de
baz a salariailor. Instructajul n ceea ce privete msurile de siguran trebuie s fie parte
integrant a instruiriii noilor salariai din laborator. Salariailor trebuie s li se prezinte codul de
practici i reglementarile locale, inclusiv manualul de siguran i de operaiuni. Se vor lua
msuri care s demonstreze c salariaii le-au citit i neles, spre exemplu, prin semntur.
Responsabilii laboratorului joac un rol cheie n pregtirea personalului n ceea ce privete
tehnicile corecte de laborator. Responsabilul cu biosigurana poate s sprijine procesul de
instruire prin punerea la dispoziie a unei documentaii specifice i a altor mijloace ajuttoare
(vezi Capitolul 21).
Instruirea personalului ar trebui s cuprind ntotdeauna informaii despre metodele
sigure n cazul procedurilor cu risc crescut cu care ntreg personalul laboratorului se ntlnete
n mod curent i care implic :
1. Riscul de inhalare (ex. producerea de aerosoli) cu ocazia folosirii anselor, nsmnrii
plcilor cu agar, pipetrii, etalrii frotiurilor, deschiderii recipientelor ce conin culturi,
recoltrii de probe de snge / ser, centrifugrii, etc.
2. Riscul de ingerare, cu ocazia manipularii probelor, frotiurilor i culturilor
3. Riscul de expunere percutan, prin folosirea seringilor i acelor
4. Muscturi i zgrieturi n cazul manipulrii animalelor
5. Manipularea sngelui i a altor produse patologice potenial periculoase
6. Decontaminarea i eliminarea materialelor infecioase
3.6. Manipularea deeurilor
Se consider deeuri toate materialele care se arunc.
n laboratoare, n desfurarea activitii cotidiene, decontaminarea deeurilor i
eliminarea final a acestora sunt strns legate. Un numr foarte mic de materiale contaminate
necesit ndeprtarea efectiv din laborator sau distrugerea. Majoritatea sticlriei,
instrumentelor i articolelor de mbrcminte sunt refolosite sau reciclate. Principiul general ce
trebuie s funcioneze este c toate materialele infecioase vor fi decontaminate, autoclavate
sau incinerate n laborator.
Principalele probleme care se pun, nainte de eliminarea oricriu obiect sau material
din laboratoarele ce lucreaz cu microorganisme potenial infecioase sau esuturi de la
animale, sunt:
1. Au fost obiectele sau materialele respective eficient decontaminate sau dezinfectate printro procedur autorizat?
2. Dac nu, au fost ele ambalate ntr-un mod autorizat pentru incinerare imediat la faa
locului sau pentru transfer ntr-o alt locaie cu posibiliti de incinerare?
3. Aruncarea obiectelor sau materialelor decontaminate implic eventual alte pericole
adiionale, biologice sau de alt tip, pentru cei care ndeplinesc procedurile de eliminare sau
care ar putea veni n contact cu obiectele eliminate n afara perimetrului respectiv?
3.6.1. Decontaminarea
Autoclavarea cu abur este metoda de elecie pentru toate procesele de
decontaminare. Materialele care urmeaz s fie decontaminate i eliminate vor fi puse n
containere adecvate (ex. saci din plastic autoclavabil, cu coduri de culori care indic destinatia
coninutului acestora pentru autoclavare i/sau incinerare). Pot fi luate n consideraie i
1
14
3. LaboratoareleDE
deBAZ
baz NIVELELE
nivelele de
1 i12I 2
3. LABORATOARELE
DEbiosiguran
BIOSIGURAN
metode alternative doar dac acestea ndeprteaz i/sau omoar microorganismele (pentru
mai multe detalii vezi Capitolul 14).
3.6.2. Procedurile de manipulare i eliminare a materialelor contaminate i a deeurilor
Trebuie adoptat un sistem de identificare i de separare a materialelor infecioase i a
containerelor respective. Vor fi obligatoriu respectate reglementrile naionale i internaionale
n domeniu. Categoriile care se includ sunt urmtoarele:
1. Deeurile necontaminate (neinfecioase) care pot fi refolosite, reciclate sau eliminate ca
deeuri generale sau menajere
2. Obiectele ascuite (tietoare-neptoare) contaminate (ex. ace hipodermice, bisturie, cuite
i cioburi de sticl); acestea vor fi ntotdeauna colectate n containere rezistente la
nepare-tiere, prevzute cu capace i vor fi tratate ca infecioase.
3. Materialul contaminat destinat decontaminrii prin autoclavare urmat de splare i
refolosire sau reciclare.
4. Materialul contaminat destinat autoclavrii i eliminrii.
5. Materialul contaminat destinat incinerrii directe.
Obiectele ascuite
Dup utilizare, acele hipodermice nu trebuie reacoperite, tiate sau detaate din
seringile de unic folosin. ntregul ansamblu trebuie plasat n containerul pentru obiecte
ascuite. Seringile de unic folosin, folosite separat sau cu ace, trebuie plasate n containere
i incinerate, cu autoclavare prealabil dac este necesar.
Containerele pentru obiecte ascuite (tietoare-neptoare) trebuie s fie rezistente la
nepare-tiere i nu trebuie umplute la capacitatea maxim. Cnd sunt umplute pe , aceste
containere trebuie plasate n containere pentru "deeuri infecioase" i incinerate, cu
autoclavare prealabil dac practica laboratorului o necesit. Containerele pentru obiecte
tietoare-neptoare nu trebuie aruncate n mediul nconjurtor.
Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate autoclavrii i refolosirii
Se interzice curarea prealabil a oricrui material contaminat (potenial infecios)
destinat autoclavrii i refolosirii. Orice curare sau reparaie trebuie fcut doar dup
autoclavare sau dezinfecie.
Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate eliminrii
n afar de obiectele tietoare-neptoare, care au fost tratate mai sus, toate
materialele contaminate (potenial infecioase) trebuie autoclavate n containere etane, de
exemplu saci de plastic autoclavabil, colorai conform unui cod de culori, nainte de a fi
eliminate. Dup autoclavare, materialul poate fi plasat n containere de transfer ctre
incinerator. Dac este posibil, materialele rezultate din activitile de asisten medical nu
trebuie eliminate n mediul extern, la rampele de depozitare a deeurilor, nici dup
decontaminare. Dac exist un incinerator disponibil la nivelul laboratorului, autoclavarea se
poate omite: deeurile contaminate trebuie plasate n containere speciale (de exemplu, saci cu
culori corespunztoare unui cod) i transportate direct la incinerator. Containerele de transfer
refolosibile trebuie s nu prezinte scurgeri i s aib capace etane.
Recipiente de colectare, preferabil incasabile, trebuie plasate la fiecare punct de lucru.
Cnd se folosete un dezinfectant, deeurile materiale trebuie s rmn n contact direct cu
acesta (ex. neprotejate de bule de aer) un interval de timp corespunztor, n conformitate cu
instruciunile de folosire a dezinfectantului utilizat (vezi Capitolul 14). Containerele de colectare
i transport vor fi decontaminate i splate nainte de refolosire.
1
15
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Incinerarea deeurilor contaminate trebuie sa se fac n conformitate cu prevederile

autoritilor de sntate public i de protecie a mediului, ca i cu normele de biosiguran din
laborator (vezi seciunea despre incinerare n Capitolul 14).
3.7. Sigurana chimic, mpotriva incendiilor, electric, mpotriva radiaiilor i a
echipamentelor
O bre/discontinuitate n sistemul de securizare al microorganismelor patogene poate
fi rezultatul indirect al unor accidente chimice, incendii, accidente electrice sau legate de
radiaii.
Este esenial meninerea unor standarde ridicate de siguran n aceste domenii, n
orice laborator microbiologic. Reguli i regulamente de funcionare pentru toate aceste domenii
trebuie elaborate de autoritatea naional sau local competent, al crei sprijin trebuie solicitat
n caz de necesitate. Pericolele chimice, electrice, de incendiu i cele radioactive sunt tratate
mai detaliat n Partea a IV a acestui manual (Capitolele 15-17).

16
4. Laboratorul securizat
Nivelul de Biosiguran 3
Laboratorul securizat Nivel de biosiguran 3 este proiectat i echipat pentru lucrul cu

microorganisme din Grupa de risc 3, i cu volume sau concentraii mari de microorganisme din
Grupa de risc 2 care implic un risc de diseminare sub forma de aerosoli. Securizarea cu Nivel
de biosiguran 3 necesit ntrirea programelor operaionale i de siguran peste cele
descrise pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2 (vezi Capitolul 3).
Regulile descrise n acest capitol sunt prezentate sub forma de suplimentri la cele
pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2, care trebuie prin urmare aplicate
naintea celor specifice pentru laboratoarele securizate Nivel de biosiguran 3. Principalele
adugiri i modificri se refer la:
1. Codul de practici
2. Designul (concepia structural i funcional) i facilitile laboratorului
3. Supravegherea strii de sntate a personalului.
Laboratoarele din aceast categorie trebuie nregistrate la autoritile naionale i
regionale din domeniul sanitar.
Se aplic codul de practici pentru laboratoarele de baz - Nivel de biosiguran 1 si 2,
excepie fcnd situaiile unde apar modificri dup cum urmeaz :
1. Sigla international de avertizare i inscripia Pericol biologic afiate pe uile de acces,
vor trebui s fie nsoite de menionarea nivelului de biosiguran, de numele
responsabilului din laborator ce controleaz accesul, i s precizeze condiiile de intrare n
acest perimetru (ex. imunizarea prealabil).
2. mbrcmintea de protecie de laborator trebuie s fie de tipul : halate care se nchid la
spate sau care se ncheie prin nfurare, costume sau salopete, bonete, iar acolo unde
este necesar huse protectoare pentru inclminte sau inclminte special. Nu sunt
acceptate halatele de laborator cu nasturi in fa sau cu mneci scurte. Imbrcmintea de
laborator nu trebuie purtat n afara acestuia i trebuie decontaminat nainte de splare.
Atunci cnd se lucreaz cu anumii ageni (ex. ageni zoonotici, patogeni vegetali), este
obligatoriu s se nlocuiasc mbrcmintea de strad cu mbrcminte de laborator,
destinat exclusiv acestui scop.
3. Manipularea deschis a tuturor materialelor potenial infecioase trebuie s se execute in
hote de siguran biologic sau n orice alt incint de izolare primar (vezi Capitolul 10).
4. Echipamentul de protecie respiratorie este necesar pentru anumite proceduri de laborator
sau n cazul lucrului cu animale infectate cu anumii patogeni (vezi Capitolul 11).
4.2. Designul i facilitile laboratorului
Se aplic design-ul i facilitile laboratorului de baz - Nivel de biosiguran 1 i 2, cu
urmtoarele modificri :
1
17
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
1. Laboratorul trebuie s fie separat de zonele cu trafic nerestricionat din cldire. O separare
suplimentar se poate realiza prin plasarea laboratorului fie la captul nchis al unui coridor
fie prin construirea unei separaii i a unei ui, sau accesul printr-o anticamer (ex. intrarea
printr-o u dubl sau printr-un laborator de baz Nivel de biosiguran 2), delimitnd o
zon special proiectat pentru meninerea unei diferene de presiune ntre spaiul
laboratorului i spaiile adiacente acestuia. Anticamera trebuie s aibe faciliti de separare
a mbrcminii curate de cea contaminat i, daca este necesar, un du.
2. Uile anticamerei trebuie s se blocheze alternativ (recomandabil automat), astfel nct o
singur u s fie deschis la un moment dat. Se poate asigura o ieire de siguran
pentru situaiile de urgen, reprezentat de un panou de sticl ce se poate sparge la
nevoie.
3. Suprafaa pereilor, a pardoselilor si tavanelor trebuie s fie rezistent la ap i uor de
curat. Deschiderile aprute n aceste suprafee (ex. de trecerea evilor instalaiilor),
trebuie etaneizate pentru a facilita decontaminarea ncperilor respective.
4. Camera laboratorului trebuie s poata fi inchis etan pentru decontaminare. Sistemele de
ventilaie trebuie construite astfel nct s permit decontaminarea gazoas.
5. Ferestrele trebuie s fie nchise etan i incasabile.
6. Lng fiecare u de ieire trebuie prevzut o chiuvet pentru splarea minilor, a crei
surs de ap s nu fie acionat cu mna.
7. Trebuie s existe un sistem de ventilaie care s menin un flux de aer direcionat ctre
interiorul laboratorului. Trebuie s fie instalat un sistem de monitorizare, cu sistem de
atenionare vizual cu sau fr alarm, astfel nct personalul s se poata asigura c se
menine direcionarea corect a fluxului de aer spre interiorul laboratorului.
8. Sistemul de ventilaie al cldirii trebuie construit astfel nct aerul din laboratorul securizat Nivel de biosiguran 3 s nu fie recirculat spre alte zone ale cldirii. Aerul poate fi filtrat
prin filtre HEPA (High Efficiency Particulate Air), recondiionat i recirculat n interiorul
laboratorului. Cnd aerul din laborator (altul dect cel din hotele de biosiguran) este
eliminat n afara cldirii, acesta trebuie evacuat la distan de cldiri locuite sau de zonele
de ventilaie. n funcie de agentul biologic manipulat, aerul poate fi eliminat prin filtre
HEPA. Se recomand un sistem de control al nclzirii, ventilaiei i aerului condiionat
(HVAC = heating, ventilation and air-conditioning), cu scopul prevenirii instalrii unei
presiuni pozitive n laborator. Se recomand, de asemenea, instalaii de alarm sonor sau
vizual care s atrag atenia personalul asupra defectrii sistemului HVAC.
9. Toate filtrele HEPA trebuie instalate astfel nct s permit decontaminarea gazoas i
verificarea acestora.
10. Hotele de siguran biologic trebuie amplasate la distan de zona de circulaie i n afara
zonei de intersectare a curenilor de aer formai ntre u i sistemul de ventilaie (vezi
Cap. 10).
11. Evacuarea aerului din hotele de biosiguran clasa I sau II (vezi Cap. 10), trecut prin filtre
HEPA, trebuie fcut astfel nct s se evite interferena cu fluxul aerian al hotei sau al
sistemului de ventilaie a cldirii.
12. Un autoclav pentru decontaminarea deeurilor contaminate trebuie s fie disponibil n
laboratorul securizat. Dac pentru decontaminare i eliminare deeurile infecioase trebuie
transportate n afara laboratorului securizat, ele vor fi transportate n containere sigilate,
incasabile i etane la scurgeri, n conformitate cu regulamentele naionale sau
internaionale, dupa caz.
13. Sistemul de aprovizionare cu ap trebuie prevzut cu dispozitive anti-reflux.
14. Design-ul facilitilor i procedurile operaionale pentru laboratoarele securizate Nivel de
biosiguran 3 trebuie documentate (s constituie obiectul unor documente).

18
4. LaboratorulSECURIZAT
securizat Nivelul
3 3
4. LABORATORUL
NIVELULde
DEBiosiguran
BIOSIGURAN
Un exemplu de design pentru laboratorul de Nivel de biosiguran 3 este prezentat n

Figura 4.
Figura 4. Laborator cu Nivel de biosiguran 3.

Laboratorul este separat de traficul general si intrarea se face printr-o
anticamer (intrare cu u dubl sau prin laboratorul cu nivel de
biosiguran 2) sau printr-un sas. Un autoclav pentru decontaminarea
deeurilor naintea eliminrii este disponibil n interiorul laboratorului. O
chiuvet a crei surs de ap s nu fie acionat cu mna este disponibil.
Fluxul de aer este direcionat spre interiorul laboratorului i toate activitile
cu materiale infecioase se desfoar n hot de siguran biologic.
Dotarea cu echipamente a laboratorului
Principiile pentru selectarea echipamentelor de laborator, inclusiv pentru hotele de
siguran biologic (vezi Capitolul 10), sunt aceleai ca pentru laboratoarele de baz Nivel de
biosiguran 2. n orice situaie, n cazul Nivelului de biosiguran 3, manipularea tuturor
materialelor potenial infecioase trebuie s se fac ntr-o hot de biosiguran sau n alt
incint de izolare primar.
O atenie special trebuie s se acorde anumitor echipamente, precum centrifuga,
care necesit accesorii adiionale, de exemplu cuve sau rotoare etane. Unele centrifugi sau
alte tipuri de echipamente, cum ar fi instrumentele folosite la separarea celulelor infectate, pot
necesita n plus, pentru o securizare eficace, o ventilaie proprie de evacuare cu filtru HEPA.
4.3. Supravegherea strii de sntate a personalului
Obiectivul programelor de sntate i supraveghere a strii de sntate a personalului
pentru laboratoarele de baz - Nivel de biosiguran 1 i 2 se aplic i n cazul laboratoarelor
securizate - Nivel de biosiguran 3 i 4, cu urmtoarele modificri :

19
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
1. Examenul medical al ntregului personal care lucreaz n laboratorul securizat - Nivel de

biosiguran 3 este obligatoriu. Acesta include nregistrarea detaliat a antecedentelor
medicale i un examen medical intit asupra aspectelor legate de factorul ocupaional.
2. O prob de ser se recolteaz la angajare i se pstreaz ca referin pentru comparaii
ulterioare.
3. Dup evaluarea clinic corespunztoare, salariatului examinat i se va nmna un card
medical de notificare (ex. aa cum apare n Figura 5) care dovedete c acesta lucreaz
ntr-un laborator securizat - Nivel de biosiguran 3. Cardul va cuprinde i o fotografie a
posesorului cardului, va avea o mrime care s-i permit a fi purtat ntr-un portmoneu i se
va afla n permanen n posesia acestuia.
A. Fata anterioar a cardului
CARD MEDICAL DE NOTIFICARE
NUME_______________________________
_____________________________________
(Fotografia posesorului)
.....................................
PENTRU ANGAJAT
Pstrai acest card asupra Dvs. In caz de boal febril neexplicat, prezentai acest card medicului Dvs. i anuntai pe
unul dintre cei de mai jos, n ordine.
_____________________________________________________________________
Dr.
Tel (serviciu):
Tel (acas)
_______________________________________________________________________
Dr.
Tel (serviciu):
Tel (acas)
B. Fata posterioar a cardului

PENTRU MEDIC
Posesorul acestui card lucreaz la: _____________________________________________ ntr-o zon unde se

manipuleaz virusuri patogene, rickettsii, bacterii, protozoare sau helmini. n eventualitatea unei boli febrile
inexplicabile, v rugm contactai angajatorul pentru informaii asupra agenilor patogeni la care acest angajat ar fi
putut fi expus.
Denumirea laboratorului:___________________________________________________
Adresa:_________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Tel:____________________________________________________________________
Figura 5. Format recomandat pentru cardul medical de notificare
20
5. Laboratorul nalt securizat

Nivelul de Biosiguran 4
Laboratorul nalt securizat Nivel de biosiguran 4 este destinat lucrului cu

microorganisme din Grupa de risc 4. nainte ca un asemenea laborator sa fie construit i pus in
funciune, sunt necesare consultri cu instituiile care au experiena operrii cu laboratoare
similare. Aceste laboratoare trebuie s fie sub controlul autoritilor naionale sau a altor
autoriti sanitare corespunztoare. Pentru informaii suplimentare, instituiile ce i propun
dezvoltarea unui laborator cu Nivel de biosiguran 4, ar trebui s contacteze Programul
O.M.S. de Biosiguran1.
Se aplic codul de practici al Nivelului de biosiguran 3, cu urmtoarele modificri:
1. Se aplic regula lucrului in doi, conform creia se interzice desfurarea activitii de
ctre o singur persoan n incinta laboratorului nalt securizat.
2. Este necesar schimbarea complet a mbrcminii i nclmintei nainte de intrarea
n i dup ieirea din laborator.
3. Personalul trebuie instruit pentru aplicarea procedurilor de scoatere de urgen din
laborator a celor ce au suferit accidente sau sunt bolnavi.
4. Trebuie asigurate mijloace de comunicare de rutin i pentru situaii de urgen, ntre
personalul ce lucreaz n laboratorul nalt securizat Nivel de biosiguran 4 i
personalul ajuttor, aflat n afara laboratorului.
5.2. Design-ul si facilitile laboratorului
Caracteristicile laboratorului securizat - Nivel de biosiguranta 3 se aplic i n cazul
laboratorului nalt securizat - Nivel de biosiguran 4, cu urmtoarele adugiri:
1. Securizare primar. Trebuie s existe un sistem eficient de securizare primar
reprezentat de unul sau o combinaie a urmtoarelor elemente:
- Laboratorul cu hot de biosiguran clasa III. Este necesar trecerea prin minim
dou ui nainte de a intra n camera ce conine hota (hotele) de siguran
biologic clasa III (camera cu hote). n aceast configuraie a laboratorului, hota de
siguran biologic clasa III asigur securizarea primar. Este de asemenea
necesar existena unui du pentru personal, cu camere de schimbare a
mbrcminii/nclmintei la intrare i ieire. Materialele i consumabilele ce nu
sunt aduse n camera cu hote prin zona de trecere vor fi introduse printr-un
autoclav cu dou ui sau printr-o camer cu fumigaie. Odat ce ua exterioar a
fost nchis etan, personalul din laborator poate deschide ua interioar pentru a
trece materialele. Uile autoclavului sau ale camerei de fumigaie sunt prevzute
cu un sistem de blocare alternativ astfel nct ua exterioar s nu se poat
deschide dect dac autoclavul a realizat un ciclu de sterilizare sau camera de
fumigaie a realizat un ciclu de decontaminare (vezi Capitolul 10).
1
Biosafety programme, Department of Communicable Disease Surveillance and Response, World Health Organization, 20
Avenue Appia, 1211 Geneva 27, Switzerland (http://www.who.int/csr/).
1
21
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
- Laboratorul cu izolare n costum protector. Laboratorul cu izolare n costum

protector cu sistem autonom de respiraie (tip scafandru), difer semnificativ ca
design i faciliti de laboratorul de Nivel de Biosiguran 4 dotat cu hote de
siguran biologic clasa III. Camerele laboratorului cu izolare n costum protector
sunt astfel dispuse nct s direcioneze trecerea personalului prin zona de
dezechipare-echipare i decontaminare, nainte de a intra n spaiul unde se
manipuleaz material infecios.
Accesul n laboratorul cu izolare n costum protector se face printr-un sas cu ui
etane interblocante.
Costumul de protecie tip scafandru este alctuit dintr-o singur pies, este
presurizat pozitiv i alimentat cu aer printr-un filtru HEPA. Alimentarea cu aer a
costumului se realizeaz printr-un sistem prevzut cu dou surse independente
de aer, una fiind destinat cazurilor de urgen.
Trebuie s existe un du special pentru decontaminarea costumului de protecie
care s fie folosit de personalul ce prsete zona securizat a laboratorului.
De asemenea trebuie s existe un du separat pentru personal, intercalat ntre
camera (box) de dezbrcare de hainele purtate n laborator i cea de mbrcare
cu hainele purtate n spaiile din afara laboratorului.
Trebuie s se asigure o modalitate de avertizare a personalului ce lucreaz n
laboratorul cu izolare n costum protector pentru situaiile n care apar defeciuni n
sistemul mecanic sau de alimentare cu aer (vezi Capitolul 10).
2. Accesul controlat. Laboratorul nalt securizat Nivel de Biosiguran 4 trebuie s fie
amplasat ntr-o cldire separat sau ntr-o zon clar delimitat dintr-o cldire cu acces
controlat. Intrarea i ieirea personalului i a materialelor trebuie s se fac printr-un sas
ce se nchide etan sau printr-un sistem special de acces. La intrare personalul trebuie s
i schimbe complet imbrcmintea, iar nainte de ieire trebuie s fac un du i abia
dup aceea va mbrca hainele de strad.
3. Sistemul de control al aerului. In toate aceste incinte trebuie s se menin o presiune
negativ. Att aerul introdus ct i cel evacuat trebuie filtrat printr-un filtru HEPA. Exist
diferene semnificative ntre sistemele de ventilaie ale laboratoarelor cu hote de
biosiguran clasa III i cele ale laboratoarelor cu izolare n costume protectoare:
- Laboratorul cu hot de biosiguran clasa III. Alimentarea cu aer a hotei de
siguran biologic clasa III trebuie s se fac cu aerul din camer dup ce acesta
a fost filtrat n prealabil prin filtrul HEPA montat pe hot sau furnizat direct prin
sistemul de asigurare cu aer. Aerul evacuat din hota de siguran biologic clasa
III trebuie filtrat prin dou filtre HEPA nainte de a fi eliminat n afara laboratorului.
Presiunea aerului din interiorul hotei va fi ntotdeauna inferioar celei din restul
laboratorului. Laboratorul cu hote trebuie dotat cu un sistem de ventilaie propriu
care s nu recircule aerul.
- Laboratorul cu izolare n costum de protector. Sunt necesare sisteme proprii de
alimentare cu aer i evacuare a acestuia. Acestea sunt astfel echilibrate nct s
genereze n spaiul laboratorului o circulaie directionat a aerului, dinspre zona cu
cel mai mic spre cea cu cel mai mare pericol potenial. Sistemul de evacuare a
aerului trebuie s asigure meninerea unei presiuni negative permanente n toate
incintele. Se monitorizeaza presiunile difereniale din interiorul laboratorului cu
izolare n costum de protecie i dintre acesta i incintele adiacente. Se
monitorizeaz circulaia aerului n componentele sistemului de ventilaie. De
asemenea, va trebui s funcioneze un sistem de control pentru prevenirea
creterii presiunii n laborator. n zona unde este necesar purtarea costumului, n
2
22
5. Laboratorul
naltSECURIZAT
securizat Nivelul
4 4
5. LABORATORUL
NALT
NIVELULde
DEBiosiguran
BIOSIGURAN
4.
5.
6.
7.
8.
zona duurilor de decontaminare, n sas-uri sau n camerele de decontaminare,

aerul trebuie filtrat prin filtre HEPA. Aerul din laborator va fi filtrat printr-o serie de
dou filtre HEPA nainte de a fi eliminat n spaiul din afara laboratorului. Alternativ,
dup dubla filtrare prin filtre HEPA, aerul evacuat poate fi recirculat, dar numai n
interiorul laboratorului. Aerul evacuat din laboratorul de Nivel de Biosiguran 4 cu
izolare n costum protector nu va fi sub nici un motiv recirculat n alte zone de lucru
din afara laboratorului. Dac se opteaz pentru recircularea aerului n laborator se
impun precauii extreme. Se iau n considerare particularitile cercetrii
desfurate, caracteristicile echipamentului, ale substanelor chimice i ale altor
materiale folosite n acest tip de laborator, precum i speciile de animale folosite n
timpul cercetrii.
Toate filtrele HEPA trebuie s fie testate i certificate anual. Locaurile filtrelor HEPA sunt
astfel concepute nct s permit decontaminarea in situ a filtrelor nainte de ndeprtarea
lor. Ca alternativ, filtrele pot fi indeprtate n containere sigilate, impermeabile pentru
circulaia aerului, urmnd ca ulterior s fie decontaminate i/sau distruse prin incinerare.
Decontaminarea efluenilor. Toti efluenii din zona de utilizare a costumului protector, din
camera si duul de decontaminare sau din hota de biosiguran clasa III trebuie s fie
decontaminai nainte de eliminarea final. Metoda preferat este tratarea termic a
acestora. Produsele reziduale pot necesita o corectare a pH-ului la neutru nainte de
eliminare. Apa folosit pentru duul personalului i toalet poate fi evacuat direct n
sistemul de canalizare, fr tratare prealabil.
Sterilizarea deeurilor i materialelor. Un autoclav cu dou ui trebuie s fie accesibil
din interiorul laboratorului. Trebuie s existe i alte metode de decontaminare pentru
echipamentul i produsele ce nu suport sterilizare umed.
Ci de acces prevzute cu sas-uri trebuie asigurate de asemenea pentru probe,
materiale i animale.
Trebuie s existe circuite electrice special destinate de alimentare din reea precum i o
surs alternativ (generator) de energie electric.
Trebuie asigurate sisteme de canalizare securizate.
Avnd n vedere complexitatea ridicat din punct de vedere al proiectrii, realizrii

construciei i instalaiilor specifice facilitilor pentru Nivelul de biosiguran 4, lucrarea de fa
nu cuprinde o reprezentare schematic a acesteia.
Datorit complexitii ridicate a activitii din laboratorul cu Nivel de biosiguran 4,
trebuie elaborat i testat prin exercitii de instruire un ghid detaliat de lucru. Suplimentar trebuie
s fie conceput un program de aciune pentru situaiile de urgen (vezi Capitolul 13). Pentru
pregtirea acestui program, trebuie stabilite cooperri active cu autoritile nationale i locale
de sntate. Vor fi cooptate alte servicii de urgen, de exemplu pompieri, poliie i spitale
special desemnate pentru primirea eventualelor urgene.
3
23
6. Biobazele
Personalul laboratoarelor care folosesc animale n scopuri experimentale i de

diagnostic are obligaia legal i moral de a evita producerea unor dureri sau suferine inutile
animalelor. Animalelor trebuie s le fie asigurat un adpost igienic i confortabil i s li se ofere
suficient hran de calitate i ap. La sfritul experimentului, animalele trebuie s fie tratate
cu omenie.
Din motive de biosiguran, biobaza trebuie s fie o unitate separat i independent.
Dac biobaza funcioneaz n aceeai cldire cu laboratorul, aceasta trebuie s fie izolat de
zona n care publicul are acces nerestricionat. De asemenea, biobaza trebuie s dispun de
mijloace proprii i condiii adecvate pentru decontaminare i deparazitare.
n funcie de grupul de risc al microorganismelor manipulate, Biobazele pot fi clasificate
n 4 niveluri de biosiguran (Tabelul 4).
Tabel 4. Nivelele de securizare ale biobazelor - rezumat al practicilor i echipamentelor
de biosiguran
Nivel de
Grupul de risc
securizare
Practici i echipamente de siguran
(microorganisme)
n biobaza
- acces limitat
1
1
- mbrcminte de protecie i mnui
Practicile de la nivelul 1 plus :
- semne de avertizare asupra pericolului
- HSB clasa I sau II pentru activitile care
2
2
genereaz aerosoli
- decontaminarea reziduurilor i cutilor nainte
de splare
Practicile de la nivelul 2, plus :
- acces controlat
3
3
- HSB i haine de protecie speciale pentru
toate activitile
Practicile de la nivelul 3 plus :
- acces strict limitat
- schimbarea hainelor nainte de intrare
- HSB clasa III sau costume de protecie cu
4
4
presiune pozitiv
- du la ieire
- decontaminarea tuturor deeurilor naintea
evacurii
HSB (BSC, Biological Safety Cabinet): Hot de siguran biologic
n funcie de evaluarea riscului i de grupul de risc n care se ncadreaz agenii
microbieni cu care se lucreaz, biobazele, ca i laboratoarele, pot fi clasificate n patru
categorii: Biobaza cu nivel 1, 2, 3 i 4 de biosiguran.

25
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
n aceast clasificare, factorii care in de agenii microbieni investigai / utilizai i

care trebuie luai n considerare sunt:
1. Calea normal de transmitere
2. Volumele i concentraiile de ageni microbieni utilizate
3. Calea de inoculare
4. Dac i pe ce cale sunt excretai aceti ageni
Factorii care in de animalele utilizate n laborator i care trebuie luai n considerare
sunt:
1. Comportamentul natural al animalelor (de exemplu: agresivitatea, tendina de a muca i
zgria).
2. Ecto- i endoparaziii naturali ai animalelor
3. Infeciile zoonotice la care sunt susceptibile
4. Diseminarea posibil de alergeni.
Ca i n cazul laboratoarelor, cerinele de proiectare, construcie, echipament i
precauii cresc n exigen n funcie de Nivelul de biosiguran din biobaza. Acestea sunt
descrise detaliat mai jos i prezentate rezumativ n Tabelul 4. Aceste cerine au un caracter
aditiv, astfel nct fiecare nivel superior incorporeaz i cerinele nivelurilor inferioare.
6.1. Biobaza cu nivel de biosiguran 1
Este destinat gzduirii i ntreinerii majoritii animalelor dup carantinare (cu
excepia primatelor, n privina crora trebuie consultat legislaia naional n materie) i a
celor inoculate deliberat cu ageni microbieni din grupul de risc 1.
1. Se impune ca activitatea s rspund cerinelor unor bune tehnici de microbiologie (GMT,
Good Microbiological Techniques).
2. Responsabilul biobazei trebuie s stabileasc regulile, procedurile si protocoalele pentru
toate operaiunile i pentru accesul la vivarium.
3. Trebuie instituit un program adecvat de supraveghere medical a personalului.
4. Trebuie redactat, aprobat i aplicat un manual de biosiguran.
Este destinat lucrului cu animale inoculate cu microorganisme din grupul de risc 2. Se
aplic urmtoarele precauii de siguran:
1. Trebuie s fie ndeplinite toate cerinele de la nivelul de biosiguran 1.
2. Semnele de avertizare asupra pericolului biologic trebuie s fie afiate pe ui i alte locuri
potrivite (cuti, recipiente, etc) cu precizarea agenilor infecioi folosii.
3. Biobaza trebuie astfel conceput nct s fie uor de curit i ntreinut.
4. Uile trebuie s se deschid spre interior i s se nchid singure.
5. nclzirea, ventilarea i iluminatul trebuie s fie corespunztoare.
6. Dac se instaleaz ventilaie mecanic, aerul trebuie s circule spre interior. Aerul evacuat
trebuie scos n exterior i nu trebuie s fie recirculat n nici o parte a cldirii.
7. Accesul va fi permis numai persoanelor autorizate.
8. n biobaz trebuie admise numai animalele destinate uzului experimental.
9. Trebuie s existe un program de supraveghere i combatere a insectelor i roztoarelor.
10. Dac exist ferestre, acestea trebuie s fie asigurate, incasabile, iar dac se deschid,
trebuie s fie prevzute cu plase de protecie mpotriva artropodelor.
11. Dup lucru, suprafeele de lucru trebuie decontaminate cu dezinfectante eficace (vezi
Capitolul 14).
2
26
Biobazele
6.6.BIOBAZELE
12. Vor fi prevzute cu HSB (clasele I i II) sau/i cuti izolatoare cu circuit separat de
alimentare cu aer i evacuare prin filtre HEPA pentru activitile potenial generatoare de
aerosoli.
13. Trebuie sa existe un autoclav n biobaz sau n imediata ei apropiere.
14. Materialele din aternutul animalelor trebuie s fie indeprtate n aa fel nct s se reduc
la minimum producerea de aerosoli i praf.
15. Toate dejectele, deeurile i aternutul animalelor trebuie decontaminate nainte de
evacuare.
16. Folosirea instrumentelor neptoare/tietoare trebuie s fie restricionat la minimum
posibil. Obiectele ascuite trebuie colectate n containere rezistente, prevzute cu capace,
etichetate i tratate ca infecioase.
17. Materialul destinat autoclavrii sau incinerrii trebuie s fie transportat asigurat n
containere nchise.
18. Dup folosire, cutile animalelor trebuie decontaminate.
19. Cadavrele animalelor trebuie incinerate.
20. n incinta biobazei trebuie purtate echipamente de protecie care nu vor fi purtate n afara
acesteia. Se vor folosi mnui de protecie corespunztoare.
21. Trebuie asigurate condiii pentru splarea minilor. Personalul trebuie s se spele pe mini
nainte de prsirea biobazei.
22. Toate rnirile, orict de mici, trebuie raportate i nregistrate.
23. Se interzice n incinta biobazei: consumul de alimente i buturi, fumatul i aplicarea de
cosmetice.
24. Tot personalul trebuie instruit n mod corespunztor.
Acest nivel de biosiguran se impune atunci cnd se lucreaz cu animale inoculate
deliberat cu ageni din grupul de risc 3 i/sau atunci cnd o evaluare a riscului impune acest
lucru. Toate sistemele, practicile i procedurile trebuie s fie analizate i recertificate anual. Se
aplic urmtoarele precauii de biosiguran:
1. Trebuie s fie ndeplinite toate cerinele de la nivelurile de biosiguran 1 i 2 .
2. Accesul n biobaz trebuie s fie controlat cu strictee.
3. Biobaza trebuie separat de alte zone ale laboratorului sau ale adpostului pentru animale
printr-o camer cu dou ui (anticamer).
4. n anticamer trebuie s existe condiii pentru splarea minilor.
5. n anticamer trebuie s existe, de asemenea, duuri.
6. Trebuie s se prevad un sistem de ventilare mecanic pentru a asigura un flux continuu
de aer prin toate camerele. Aerul evacuat trebuie s treac prin filtre HEPA nainte de a fi
eliberat n atmosfer i nu va fi recirculat. Sistemul trebuie proiectat i realizat astfel nct
s previn inversri ale fluxului de aer i presurizri pozitive n oricare parte a biobazei.
7. Trebuie s existe un autoclav accesibil din zona securizat a biobazei. Deeurile
contaminate microbian trebuie autoclavate nainte de transferarea lor in alte zone ale
biobazei.
8. Biobaza trebuie dotat cu un incinerator propriu permanent accesibil sau trebuie stabilite
mpreun cu autoritile modaliti alternative de evacuare a animalelor moarte n vederea
incinerrii.
9. Animalele infectate cu microorganisme din grupul de risc 3 trebuie adpostite n cuti
plasate n izolatoare sau n camere cu guri de ventilaie plasate n spatele cutilor.
10. Materialele utilizate pentru aternutul animalelor ar trebui, pe ct este posibil, s nu
genereze praf.

27
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
11. Imbrcmintea de protecie purtat n incinta biobazei trebuie decontaminat nainte de

splare.
12. Ferestrele trebuie s fie nchise etan i rezistente la spargere.
13. Personalul care lucreaza n biobaz trebuie s fie imunizat corespunztor.
n mod firesc, activitatea n aceste biobaze este legat de cea din laboratoarele nalt
securizate de nivel 4, iar reglementrile naionale i regulamentele locale trebuie armonizate i
aplicate n ambele locaii unitar. Dac activitile trebuie s se desfoare n laboratoare cu
izolare n costume speciale tip scafandru vor fi elaborate i aplicate practici i proceduri
adiionale care vor suplimenta prevederile descrise n CDSLWROXO 5.
1. Trebuie ndeplinite toate cerinele pentru biobazele cu nivelurile de biosiguran 1, 2 i 3.
2. Accesul trebuie s fie strict controlat; numai personalul desemnat de eful biobazei poate
avea acces.
3. Nu trebuie permis activitatea individual; trebuie aplicat regula accesului i lucrului n doi.
4. Personalul trebuie s fie foarte bine instruit n domeniul microbiologic i s fie avizat n
privina pericolelor implicate de munca sa i a precauiilor necesare.
5. Sectoarele destinate adpostirii animalelor infectate cu microorganisme din grupul de risc 4
trebuie s respecte aceleai criterii de securizare descrise i aplicate pentru laboratoarele nalt
securizate, nivel de biosiguran 4.
6. Intrarea din sectorul curat n aria cu acces restricionat ale biobazei se va face printr-o
anticamer-sas dotat cu faciliti de schimbare a vestimentaiei i de du.
7. La nceputul zilei de lucru, personalul biobazei va schimba hainele de strad cu echipament
special de protecie. La plecare, echipamentul de lucru va fi dezbrcat i autoclavat.
Vestimentaia de strad va fi reluat dup efectuarea prealabil a unui du.
8. Biobaza cu nivel 4 de biosiguran trebuie ventilat printr-un sistem de exhaustare prevzut
cu filtre HEPA care asigur o presiune negativ n aria / incintele de risc (fluxul de aer este
direcionat centripet, ctre ariile de risc maxim).
9. Sistemul de ventilaie trebuie proiectat astfel nct s previn inversrile de sens ale fluxului
de aer i presurizarea pozitiv n ariile de risc.
10. Schimbul de materiale dintre aria cu risc i restul facilitii se va face printr-un autoclav cu
dublu acces (transmural) avnd extremitatea curat ntr-o camer din afara ariei restricionate.
11. Pentru transferul materialelor neautoclavabile, va fi prevzut o modalitate de acces cu sas
avnd extremitatea curat ntr-o camer din afara ariei restricionate. Materialele contaminate
nu vor prsi aria de risc dect dup un tratament adecvat de inactivare / sterilizare.
12. Toate manipulrile de animale infectate cu microorganisme din grupul de risc 4 se vor efectua
n condiiile prevzute pentru laboratorul de nalt securizare - cu nivel de biosiguran 4.
13. Toate animalele vor fi adpostite n izolatoare.
14. Materialele provenite din aternutul animalelor i dejectele vor fi autoclavate nainte de a fi
evacuate din biobaz.
15. Personalul biobazei va fi supravegheat medical.
6.5. Nevertebratele
Ca i n cazul vertebratelor, nivelul de biosiguran al biobazei va fi determinat de
grupul de risc al agenilor investigai sau de rezultatul unei evaluri a riscului.
Nevertebratele folosite n scopuri experimentale n laboratoare sunt de obicei
rezervoare sau vectori de patogeni, sau, aa cum se ntmpl n investigaiile ecologice i
ambientale, pot fi infectate ntmpltor cu patogeni ingerai odat cu hrana.

28
Biobazele
6.6.BIOBAZELE
n cazul unor artropode, n special al insectelor zburtoare sunt necesare urmtoarele

precauii suplimentare.
1. Trebuie s se asigure ncperi separate pentru nevertebratele infectate i pentru cele care
nu sunt infectate.
2. ncperile trebuie s poat fi nchise etan atunci cnd se face dezinfecia prin fumigaie.
3. Trebuie s existe la ndemn spray-uri cu insecticide.
4. Trebuie s fie asigurate instalaii de rcire, pentru a reduce, acolo unde este necesar,
activitatea nevertebratelor.
5. Accesul n complex trebuie s se fac printr-o anticamer avnd uile prevzute cu
capcane pentru insecte i ecrane de protecie mpotriva artropodelor.
6. Toate conductele de evacuare din sistemul de ventilaie i ferestrele care pot fi deschise
trebuie s fie prevzute cu ecrane de protecie contra artropodelor.
7. Sifoanele de la chiuvete i cele din pardoseal nu trebuie lsate niciodat s se usuce
asigurnd obarier umed pentru a preveni evadarea nevertebratelor.
8. Toate deeurile trebuie decontaminate prin autoclavare, deoarece unele nevertebrate nu
sunt omorte de dezinfectani.
9. Trebuie s fie mentinut o eviden strict a numrului de forme larvare i adulte de
artropode zburtoare, trtoare i sritoare.
10. Containerele pentru cpue i acarieni trebuie plasate n tvi cu ulei.
11. Insectele zburtoare infectate sau potenial infectate trebuie s fie nchise n cuti cu plas
dubl.
12. Artropodele infectate sau potenial infectate trebuie s fie manipulate pe platouri cu rcire
(care le amoresc), plasate la rndul lor n hote de biosiguran sau n izolatoare.
Pentru informaii suplimentare, consultai referinele bibliografice 3-6.
29
7. Recomandri pentru calificarea

laboratorului/facilitilor acestuia
Calificarea laboratorului/facilitilor acestuia poate fi definit ca un proces sistematic de

examinare i documentare, ce demonstreaz c elementele de structur ale laboratorului,
precum i ale sistemelor i/sau componentelor de sistem au fost instalate, inspectate i testate
din punctul de vedere al funcionrii n concordan cu standardele naionale i internaionale.
Laboratoarele concepute s corespund Nivelelor de biosiguran de la 1 la 4, au
exigene de calificare diferite cu nivel cresctor de complexitate. Condiiile geografice i
climaterice, cum ar fi umiditatea sau temperaturile extreme, pot de asemenea influena
structura laboratorului, i prin aceasta exigenele de calificare ale acestuia. Odat cu
ncheierea procesului de calificare, componentele semnificative de structur i sistemele anex
vor fi fost supuse operrii n condiii variate inclusiv de lucru n condiii limit logic posibile, i
abia dup aceea vor fi fost aprobate.
Procesul de calificare i criteriile de acceptare vor trebui s fie stabilite nc din faza de
concepie a proiectului de construcie sau renovare. Prin cunoaterea de la bun nceput a
exigenelor calificrii, arhitecii, inginerii, personalul nsrcinat cu sigurana i cu evaluarea
sntii, precum i personalul laboratorului, vor putea nelege mai bine performanele ce
trebuie atinse de laboratorul n cauz.
Procesul de calificare furnizeaz instituiei i comunitii n cadrul creia funcioneaz,
un grad mai mare de ncredere n faptul c elementele de structur, sistemele electrice,
mecanice, de canalizare, sistemele de izolare i decontaminare precum i sistemele de
securitate i alarm vor funciona dup cum au fost proiectate, asigurnd manipularea
securizat n laborator sau n biobaz a oricrui microorganism potenial periculos.
Activitile de calificare se realizeaz n general nc din faza de proiectare,
continundu-se n timpul construciei i instalrii laboratorului i a facilitilor acestuia, precum
i n perioada de garanie, care trebuie s acopere un an din momentul drii n folosin.
Agentul ce realizeaz calificarea acioneaz ca un avocat pentru instituia ce
construiete sau renoveaz laboratorul i trebuie considerat ca un membru al echipei de
concepie, implicarea lui nc de la nceputul concepiei proiectului fiind esenial. n unele
situaii, instituia poate aciona ca propriul su agent de calificare. n cazul unor faciliti de
laborator mai complexe (Nivel de biosiguran 3 sau 4), instituia poate apela la serviciile unui
agent de calificare din afara instituiei, cu experien demonstrat n realizarea cu succes a
calificrii laboratoarelor i biobazelor cu nivele complexe de biosiguran. Cnd se apeleaz la
un agent independent de calificare, instituia continu s rmn i ea un membru al echipei de
calificare. Se recomand ca pe lng agentul de calificare, din echip s fac parte i
responsabilul cu sigurana de la nivelul instituiei, responsabilul de proiect, managerul
programului i un reprezentant al serviciului tehnic de intreinere i intervenie.
n continuare este prezentat o list a sistemelor laboratorului i a componentelor ce
pot fi incluse n planul de calificare, pentru testarea funcionrii corelat cu gradul de securizare
a facilitilor ce urmeaz a fi construite sau renovate. Lista nu este exhaustiv. n mod evident,
planul efectiv de calificare trebuie s reflecte complexitatea laboratorului vizat.
1. Sisteme de automatizare ce aparin cldirii, incluznd posibilitile de monitorizare i
control de la distan
2. Sisteme electronice de supraveghere i detecie
1
31
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.
41.
42.
ncuietori electronice de securitate i dispozitive de recunoatere

Sisteme de nclzire, ventilaie (alimentare i evacuare) i instalaii de aer condiionat
Sisteme de filtrare HEPA
Sisteme de decontaminare a filtrelor HEPA
Sisteme de control ale nclzirii, ventilaiei, aerului condiionat, evacurii aerului i al
sas-urilor
Etaneitatea vanelor/robineilor de aer
Sisteme de frig ale laboratorului
Generatoare de abur i ap cald
Sisteme de protecie i alarm contra incendiilor
Sisteme de prevenire a refulrii apelor uzate
Sisteme de tratare a apei (ex. revers-osmoza, distilarea apei)
Sisteme de tratare i neutralizare a lichidelor rezultate din activiti specifice
Sisteme de canalizare
Sisteme de decontaminare chimic
Sistem de asigurare cu diverse gaze utilizate n laborator
Sisteme de respiraie autonom
Sisteme de aer tehnic (vid, aer comprimat etc.)
Verificarea diferenelor de presiune n laboratoare i n zonele adiacente
Reelele informatice locale i sistemele de date computerizate
Asigurarea cu electricitate din reea
Surse alternative de electricitate pentru situaii de avarie
Surse nentreruptibile de electricitate (UPS)
Sisteme de iluminare n caz de avarie/urgen
Semnalizarea luminoas a ieirilor de urgen
Sisteme de etanare acionate electric i mecanic
Reeaua telefonic
Sistemul de control al interblocrii uilor sas-urilor
Etaneizarea uilor
Etaneizarea ferestrelor i vizoarelor de siguran
Ieiri de urgen prin penetrarea barierelor
Verificarea integritii structurale a pavimentelor, pereilor i tavanelor
Verificarea integritii straturilor protectoare ale pavimentelor, pereilor i tavanelor
Funcionarea sistemelor de izolare i presurizare ale spaiilor ce nconjoar laboratorul
nalt securizat - Nivel de biosiguran 4
Hote de biosiguran
Autoclave
Sisteme de azot lichid i alarmele aferente
Sisteme de detectare a scurgerilor de ap (ex. n cazul inundrii zonelor securizate)
Duuri de decontaminare i sisteme chimice adiionale
Dispozitive de splare a cutilor animalelor i de neutralizare a efluenilor
Managementul deeurilor
232
8. Recomandri pentru certificarea

Laboratoarele reprezint un mediu complex i dinamic. n zilele noastre, laboratoarele

de cercetri biomedicale i laboratoarele de diagnostic medical i cele de sntate public
trebuie s se adapteze cu rapiditate la continua cretere a necesitilor de sntate ale
populaiei i presiunilor acesteia. Un exemplu n acest sens este reprezentat de necesitatea
ajustrii prioritilor laboratoarelor astfel nct acestea s fac fa provocrilor reprezentate de
bolile infecioase emergente si reemergente. Pentru a se asigura c acest proces de adaptare
i meninere se realizeaz prompt i de o manier corespunztoare i sigur, att laboratoarele
de cercetri ct i cele medicale trebuie certificate cu regularitate. Certificarea laboratoarelor
ajut la garantarea faptului c:
1. Se exercit un control tehnic corespunztor iar funcionarea este n concordan cu
caracteristicile proiectate
2. Exist i se aplic un control administrativ adecvat al spaiilor i protocoalelor specifice
3. Echipamentul de protecie personal este corespunztor cu activitile desfurate
4. Decontaminarea reziduurilor i materialelor a fost conceput corespunztor i se aplic
proceduri corecte de tratare i manipulare a deeurilor
5. Se aplica proceduri corecte pentru sigurana general a laboratorului, incluznd
sigurana fizic, electric i chimic.
Certificarea laboratoarelor difer de activitile de calificare a laboratoarelor (Capitolul 7) n
cteva direcii importante. Certificarea laboratoarelor este un proces sistematic de examinare a
tuturor caracteristicilor i proceselor cu relevan pentru sigurana laboratorului (control tehnic,
echipament de protecie individual i control administrativ). Sunt de asemenea examinate
practicile i procedurile de biosiguran. Certificarea laboratorului este o activitate continu de
meninere a calitii i siguranei, care se desfoar planificat.
Activitile de certificare a laboratoarelor pot fi conduse de personal adecvat instruit i
de ctre specialiti din domeniul sntii i biosiguranei. Instituiile pot angaja personal cu
pregtire corespunztoare pentru efectuarea de audituri, activiti de supraveghere i inspecie
(aceti termeni pot fi similari) asociate cu procesul de certificare. Instituiile pot lua n
considerare sau li se poate solicita s angajeze teri care s furnizeze aceste servicii.
Laboratoarele de cercetri biomedicale i cele medicale pot dezvolta instrumente de
auditare, supraveghere sau inspecie pentru a asigura consistena procesului de certificare.
Aceste instrumente trebuie s fie suficient de flexibile pentru a permite existena diferenelor
fizice i procedurale dintre laboratoare, rezultate din tipul de activitate pe care o desfoar
fiecare laborator, dar n acelai timp s ofere o abordare unitar n cadrul instituiei. Trebuie
acordat atenie faptului ca aceste instrumente s fie folosite numai de ctre un personal
instruit corespunztor, precum i faptului c ele nu reprezint un substitut pentru evaluarea
profesional a biosiguranei. Exemple ale unor asemenea instrumente sunt prezentate n
Tabelele 5-7.
Informaiile rezultate n urma auditului, supravegherii sau inspeciei trebuie discutate cu
personalul laboratorului i cu conducerea. Se stabilesc responsabiliti individuale pentru a se
garanta c se aplic aciuni corective pentru toate deficienele identificate n procesul de audit.
Certificarea laboratorului nu se va acorda i laboratorul nu va fi declarat funcional pn cnd
nu vor fi fost tratate corespunztor toate deficienele identificate.

33
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Complexitatea operaiilor laboratorului cu Nivel de biosiguran 4 depete scopul

acestui ghid. Pentru mai multe detalii i informaii, se poate consulta Programul O.M.S. de
Biosiguran1 (vezi de asemenea Anexa 3).
(1)WHO
Biosafety programme, Department of Communicable Disease surveillance and Response, World Health
Organization, 20 Avenue Appia, 1211 Geneva, Switzerland (http://www.who.int/csr/)

34
8. Recomandri
pentru
certificarea LABORATORULUI/FACILITILOR
8. RECOMANDRI
PENTRU
CERTIFICAREA
ACESTUIA
Tabel 5. Laboratorul de baz Nivel de Biosiguran 1. Chestionar pentru evaluarea

biosiguranei
Locaie laborator:
Data:
ef Laborator:
Element evaluat
Laborator
Semnalizare adecvat pentru sursele de
UV, laser, surse de radioactivitate,etc
Ghid de Biosiguran adecvat, accesibil
i aplicat efectiv
Inscripionare/marcare corect a
echipamentelor: risc infecios,
radioactivitate, toxicitate
Proiectarea laboratorului
Conceput pentru a fi uor de curat
Comutator alternativ cu lumina pentru
sursele de UV din ncperi, accesibil i
din exterior
Fixarea solid a tuturor etajerelor /
rafturilor
Blaturile meselor sunt impermeabile
pentru ap i rezistente la acizi, baze,
solveni organici i temperaturi ridicate
Iluminare adecvat
Existena unor spaii de depozitare
adecvate i corect utilizate
Cilindri cu gaze
Toi cilindrii cu gaze sunt pstrai n
condiii de siguran
Cilindrii de rezerv sunt pstrai cu
capacele de siguran montate
Gazele asfixiante i/sau periculoase sunt
utilizate doar n incinte cu ventilaie
suplimentar
Prezena n laborator de cilindri cu gaze
supranumerari fa de necesiti i/sau
cilindri golii
Substane chimice
Substanele chimice inflamabile sunt
depozitate n ncperi special destinate
acestora
Substanele generatoare de peroxizi
sunt inscripionate cu data intrrii i data
deschiderii
Substanele chimice sunt pstrate
separat, pe categorii
Da Nu
3
35
NA Observaii
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Element evaluat
Substanele chimice periculoase sunt
depozitate la un nivel superior nivelului
ochilor.
Existena de substane chimice
depozitate pe pardoseal
Existena de containere cu substane
chimice neacoperite
Toate soluiile sunt etichetate corect ?
Se folosesc termometre cu mercur ?
Frigidere / congelatoare/ camere
frigorifice
Sunt prezente n ele alimente pentru
consum uman
Materialele inflamabile se afl numai n
uniti echipate anti-deflagraie
Prezena etichetelor externe de
avertizare pe echipamentele care conin
substane carcinogene, radioactive,
toxice, i/sau elemente care implic
pericol biologic.
Camerele frigorifice sunt prevzute cu
dispozitive de siguran care s permit
deschiderea uilor din interior
Echipament electric
Prezena de cabluri prelungitoare ntre
echipament i priz
Prize i aparate cu mpmntare i
polaritate corecte
Existena de conectri electrice n
apropierea chiuvetelor, sub duuri, etc
Existena de echipamente cu cabluri
electrice care prezint semne de
deteriorare
Existena de prize sau conductori
electrici suprasolicitai
Existena de cabluri electrice montate pe
pardoseal
Existena de sigurane electrice
adecvate n circuite
Prizele electrice plasate lng surse de
ap respect reglementrile naionale
Existena de cabluri electrice cu
mpmntare
Existena de surse de nclzire electrice
mobile n ncperi
Da Nu

36
NA Observaii
8. Recomandri
pentru
8. RECOMANDRI
PENTRU
CERTIFICAREA
ACESTUIA
Element evaluat
Echipament de protecie individual
pentru personal
Posibilitatea efecturii lavajului ocular n
laborator
Existena duurilor de siguran
Echipament de protecie individual
disponibil : mnui, halate, ochelari
Purtarea corect a echipamentului de
protecie (halate, oruri, bonet, etc)
Echipamentul de protecie individual nu
este purtat n afara laboratorului
Existena echipamentului de protecie
individual pentru activitatea de stocaj
criogenic
Managementul deeurilor
Existena de indicii care probeaz
depozitarea incorect a deeurilor
Deeurile sunt sortate i depozitate n
containere separate ?
Existena de containere cu deeuri
chimice etichetate, marcate, datate i
pstrate nchise
Containerele cu deeuri chimice sunt
manipulate i depozitate corect ?
Containerele pentru obiecte
neptoare/tietoare sunt utilizate i
ndeprtate n mod corect ?
Pardoseala nu prezint urme de deeuri
Procedurile de ndeprtare a deeurilor
sunt afiate n laborator
Programe de siguran i sntate
ocupaional
S-a fcut comunicarea riscului?
Asigurarea proteciei cilor respiratorii
Asigurarea proteciei auzului
Monitorizarea formaldehidei
Monitorizarea etilen dioxidului
Monitorizarea gazelor anestezice
Controale tehnice generale
Fluxul de aer din laborator nu este
orientat ctre celelalte sectoare de
activitate, coridoare, oficiu, vestiar,
birouri
Exist chiuvete i sifoane de pardoseal
ce permit refularea aerului din canalizare ?
Sunt disponibile chiuvete pentru
splarea minilor oriunde trebuie ?
Da Nu

37
NA Observaii
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Element evaluat
Exist componente mobile neprotejate
ale echipamentelor ?
Instalaia de vid este prevzut cu filtre
i dispozitive care impiedic rupturile de
vid (capcane de vid) la nivelul meselor
de lucru ?
Exist pericol de refluare n reeaua de
alimentare cu ap ?
Existena unor echipamente de distilare
a apei n bun stare de funcionare
Program activ i efectiv de control al
roztoarelor i artropodelor
Practici i proceduri generale
Se pstreaz alimente pentru consumul
uman n aria laboratorului ?
Cuptoarele cu microunde din laborator
sunt n mod clar etichetate: Doar pentru
uz de laborator. Este interzis
prepararea alimentelor!
Consumul de alimente i buturi,
fumatul, aplicarea de cosmetice n
incinta laboratorului
Recipientele de sticl aflate sub presiune
sunt protejate
Este interzis pipetarea cu gura
Exist i sunt folosite dispozitive
mecanice de pipetare
mbrcmintea de protecie pentru
laborator este pstrat separat de
mbrcmintea de strad
Gospodrirea general a laboratorului
Existena unor recipiente de sticl
pstrate pe pardoseal
Se constat erori evidente potenial
periculoase
Existena unor materiale absorbante
curate disponibile la posturile de lucru
Cioburile de sticl sunt manipulate cu
mijloace mecanice: perie, fra, pens
Protecia mpotriva incendiilor
Capetele de stropire (sprinklere) sunt
libere i degajate
Deschiderile din tavan, paviment, perei
sunt lsate libere
Exist cabluri sau tubulaturi care trec
prin spaiul deschiderii uilor
Lime minim de 1m a uilor
laboratorului
Da Nu

38
NA Observaii
8. Recomandri
pentru
certificareaLABORATORULUI/FACILITILOR
8. RECOMANDRI
PENTRU
CERTIFICAREA
ACESTUIA
Element evaluat
Depozitare de materiale peste conducte,
hidrani sau instalaia de semnalizare
luminoas
Depozitarea n laborator a unor
substane inflamabile n exces
Bi termostatate
Existena unor sisteme de oprire
automat n caz de nivel prea sczut al
apei i/sau supranclzire
Confecionate din materiale
necombustibile
Da Nu
NA Observaii
Data auditului:..........................
Nume, prenume auditor

..................................................................
Semntura
..................................................................

39
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Tabelul 6. Laboratorul de baz Nivel de Biosiguran 2. Chestionar pentru evaluarea

Biosiguranei
Acest formular se folosete nsoit obligatoriu de formularul pentru evaluarea biosiguranei n
Laboratorul de baz - Nivel de Biosiguran 1 (vezi Tabelul 5)
Locaie laborator:
Data:
ef Laborator:
Element evaluat
Hota de Biosiguran (HSB)
Certificare n ultimele 12 luni
Suprafaa HSB este curat cu un
dezinfectant adecvat dup fiecare utilizare
Grila frontal i filtrele de exhaustare sunt
lsate libere
Se utilizeaz flacr deschis n interiorul
hotei
Liniile de vacuum sunt echipate cu filtre n serie
i cu capcane cu dezinfectant
Performanele HSB sunt afectate de
amplasarea hotei sau de cureni de aer
HSB este utilizat ori de cte ori exist riscul
potenial de formare a aerosolilor
Laboratorul
Acces limitat / restricionat. Permisiune de a
intra doar pentru personalul laboratorului
Acces limitat doar pentru personalul avizat
asupra tuturor pericolelor poteniale
Sigla de Pericol biologic este afiat n mod
corespunztor pe ua laboratorului
- Sigla este insoit de nscrierea unor
informaii precise i actuale
- Sigla i informaiile sunt lizibile i
nedeteriorate
Toate uile sunt meninute nchise
Decontaminarea
Decontaminanii utilizai sunt activi asupra
agenilor microbieni manipulai n laborator
Toate accidentele i mprtierile (stropiri,
deversri) care implic material infecios sunt
raportate efului de laborator
Folosirea unor decontaminanti adecvai pentru
neutralizarea materialului infecios mprtiat
Suprafeele de lucru sunt decontaminate
nainte i dup fiecare procedur, zilnic i dup
fiecare mprtiere accidental

40
Da
Nu NA
Observaii
Locaie:
Marc:
Tip:
Serie Nr.:
8. Recomandri
pentru
8. RECOMANDRI
PENTRU
CERTIFICAREA
ACESTUIA
Element evaluat
Manipularea deeurilor contaminate
Containerele pentru deeuri potenial
infecioase sunt folosite corect
infecioase nu sunt umplute pn la refuz
infecioase sunt corect etichetate i nchise
Culturile i deeurile obinuite sunt
decontaminate corect nainte de evacuare
Materialele care se decontamineaz n afara
laboratorului sunt transportate n containere
etane,nchise i rezistente, n concordan cu
procedurile locale i reglementrile naionale
Deeurile mixte sunt decontaminate din punct
de vedere biologic nainte de a fi eliminate ca
deeuri chimice i/sau radiologice
Protecia personalului
Personalul laboratorului este informat periodic
asupra imunizrilor/testrilor corespunztoare
agenilor microbieni manipulai
Contactarea unor servicii medicale adecvate
pentru examene de bilan periodic,
supraveghere i tratament pentru expunerile
profesionale
Materialele i echipamentele contaminate
biologic se manipuleaz cu mnui
Protecia feei ori de cte ori se lucreaz cu
material contaminat biologic n afara hotelor de
biosiguran
Splarea minilor :
- dup ndeprtarea mnuilor
- dup lucrul cu ageni infecioi
- nainte de a prsi laboratorul
Sunt disponibili ageni antimicrobieni pentru un
prim ajutor prompt
Practici
Utilizarea HSB ori de cte ori exist riscul
potenial de a fi generai aerosoli, respectiv
mprtieri accidentale
Existena unui ghid de biosiguran corect
elaborat i aplicat
Personalul citete, revede (cel puin anual) i
aplic instruciunile privind practicile i
procedurile de laborator, inclusiv pe cele
cuprinse n ghidul de biosiguran
Procedurile sunt aplicate n practic astfel nct
s se reduc la minimum formarea de aerosoli
i/sau de dispersii accidentale

41
Da
Nu NA
Observaii
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Element evaluat
Pentru ageni infecioi se utilizeaz seringi de
unic utilizare i/sau seringi cu ac nedetaabil
Cupele i rotoarele de centrifug se deschid
numai n HSB
Probele biologice cu risc infecios sunt
transportate n afara HSB n containere
autorizate i n acord cu reglementrile de
transport
Faciliti
Exist chiuvete pentru splarea minilor lng
ieirea din laborator
Nume, prenume auditor
..................................................................
Semntura
..................................................................
Da
Nu NA
Observaii
Data auditului :......................

42
8. Recomandri
pentru
8. RECOMANDRI
PENTRU
CERTIFICAREA
ACESTUIA
Tabel 7. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3. Chestionar pentru evaluarea

biosiguranei
Acest formular se foloseste nsoit obligatoriu de formularele pentru evaluarea biosiguranei n
Laboratoarele de baz - Nivel de Biosiguran 1 i 2 (Vezi Tabelele 5 i 6)
Locaie laborator:
Data:
ef laborator
Element evaluat
Da
Faciliti
Laboratorul este separat de circulaia
nerestricionat din restul cldirii
Accesul controlat n laborator se face printr-o
anticamer ale crei ui se nchid automat, fiind
interconectate (nu se poate deschide dect o
singur u la un moment dat)
Toate cile de acces n laborator se pot nchide
etan pentru decontaminare
Aerul exhaustat nu este recirculat i este evacuat
n exterior la distan de spaii locuite
Exist un sistem de ventilaie controlat pentru
monitorizarea direcionrii fluxului de aer
Protecia personalului
In laborator se poart halate nchise la spate
Echipamentul individual de protecie este purtat
doar n incinta laboratorului
Sunt disponibile chiuvete cu robinete automate
sau manevrabile cu ajutorul pedalei / cotului
Protecia minilor
Sunt purtate cte dou perechi de mnui atunci
cnd se manipuleaz material contaminat
biologic, echipament potenial contaminat i la
curenia suprafeelor de lucru
Protecia respiratorie
Mijloace de protecie respiratorie sunt purtate de
ntreg personalul atunci cnd aerosolii nu sunt
reinui n siguran de HSB
Practici
Asigurarea proteciei mucoaselor atunci cnd se
lucreaz cu material infecios n afara HSB
Personalul este instruit asupra pericolelor
asociate cu manipularea anumitor ageni
microbieni
Personalului i se impune s citeasc i s urmeze
toate instruciunile privitoare la practicile i
procedurile din laborator, inclusiv cele din ghidul
de biosiguran

43
Nu
N/A
Observaii
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Element evaluat
Personalul este instruit anual i ori de cte ori
apar modificri ale procedurilor
Toate deeurile contaminate microbian sunt
autoclavate nainte de a fi ndeprtate
Da
Nume, prenume auditor..............................................

Semntura...................................................................

44
Nu
N/A
Observaii
Data auditului:..........................
9. Conceptul de biosecuritate n laborator
Ghidurile privind biosigurana n laborator s-au concentrat n mod traditional pe

formularea de recomandri generale pentru protejarea celor care lucreaz n laborator. Aceste
ghiduri subliniau rolul practicilor corecte microbiologice, al echipamentelor de securizare, al
unor faciliti concepute, utilizate i ntreinute corespunztor, al msurilor administrative
pentru reducerea riscului de accidente sau mbolnvirii personalului. Ca o consecin a acestui
mod de abordare au fost neglijate riscurile pentru mediu i comunitate. n zilele noastre a
aprut necesitatea extinderii conceptului tradiional de biosiguran, prin includerea msurilor
de biosecuritate n laborator. Evenimentele produse la nivel mondial n trecutul recent
subliniaz necesitatea protejriii laboratoarelor i a materialelor pe care acestea le dein,
pentru a nu putea fi utilizate intenionat impotriva sanatatii populatiei si a faunei, a agriculturii
sau a mediului. nainte de a defini nevoile de biosecuritate ale laboratorului, este important s
se nteleag deosebirea dintre noiunile de biosiguran n laborator i biosecuritate n
laborator.
Conceptul de biosiguran n laborator se folosete pentru a descrie principiile de
securizare, tehnologiile i regulile ce trebuie urmate pentru a preveni expunerea neintenionat
la ageni patogeni i toxine sau eliberarea lor accidental n mediu.
Conceptul de biosecuritate n laborator se refer la msuri de securitate luate la nivel
instituional i personal cu scopul prevenirii diversiunilor/atentatelor sau a eliberrii intenionate
de patogeni sau toxine precum i pentru prevenirea pierderii, furtului sau folosirii greite a
acestora.
Practicile eficace de biosiguran stau de fapt la baza msurilor de biosecuritate n
laborator. Prin evaluarea riscului, realizat ca parte integrant a programului de biosiguran al
instituiei, se obin informaii despre tipurile de microorganisme manipulate, localizarea lor
fizic, personalul care solicit acces la ele i se identific persoanele responsabile pentru
pstrarea lor. Aceste informaii pot fi utilizate pentru a aprecia dac o instituie posed material
biologic ce poate prezenta interes pentru cei ce doresc a-l utiliza n mod impropriu.
Pentru fiecare sector din laborator trebuie elaborat i aplicat un program specific de
biosecuritate n acord cu caracteristicile facilitii respective, cu tipul de activitate desfurat i
cu condiiile locale. n consecin, msurile de biosecuritate n laborator trebuie s fie
reprezentative pentru variatele necesiti ale instituiei i ar fi de dorit s cuprind i contribuii
din partea directorului tiinific, a responsabilului cu biosigurana, a personalului tiinific al
laboratorului, a personalului de intreinere, a personalului responsabil cu tehnologia informaiei
i a consilierilor juridici i personalului de securitate, dac este cazul.
Msurile de biosecuritate n laborator trebuie s se bazeze pe un program cuprinztor
de inventariere a agenilor patogeni i a toxinelor, incluznd o eviden la zi ce va cuprinde i
locul de stocare, identificarea personalului ce are acces la acestea, descrierea utilizrii lor,
documentarea transferului intern (n i ntre diferitele sectoare ale laboratorului) i extern,
precum i orice inactivare i/sau eliminare de materiale. De asemenea, trebuie stabilit la nivel
instituional un protocol de biosecuritate n laborator pentru identificarea, raportarea,
investigarea i remedierea breelor din sistemul de biosecuritate al laboratorului, incluznd i
eventualele neconcordane rezultate din activitatea de inventariere. Implicarea, rolurile i
responsabilitile autoritilor de sntate public i ale celor de securitate n cazul unei
infraciuni de biosecuritate trebuie s fie clar definite.
ntregul personal trebuie instruit n domeniul biosecuritii n laborator, instruire
distinct de cea din domeniul biosiguranei. Aceast instruire trebuie s ajute personalul s

45
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
neleag necesitatea de protecie pentru astfel de materiale i raionamentul pe care se

bazeaz msurile specifice de biosecuritate i trebuie s includ o trecere n revist a
standardelor naionale relevante i a procedurilor specifice ale instituiei. De asemenea, n
cursul instruirii trebuie prezentate proceduri ce descriu rolul i responsabilitile personalului n
cazul producerii unei infraciuni de biosecuritate.
Un element central n cadrul msurilor eficace de biosecuritate n laborator, l
constituie, de asemenea, compatibilitatea profesional i etic de a lucra cu patogeni periculoi
a tuturor persoanelor autorizate a avea acces regulat la materialele cu regim special.
n rezumat, precauiile de biosecuritate trebuie s devin parte a activitilor de rutin
din laborator, chiar dac se aplic tehnici aseptice sau alte practici microbiologice sigure.
Msurile de biosecuritate n laborator nu trebuie s stnjeneasc schimbul eficient de materiale
de referin, probe clinice i epidemiologice i nici circulaia informaiilor adiacente necesare
pentru bunul mers al investigaiilor clinice i de sntate public. Managementul competent al
biosecuritii nu trebuie s interfere n mod nepotrivit cu activitatea de zi cu zi a personalului
tiinific sau s fie un impediment n desfurarea cercetrilor. Trebuie pstrat accesul legitim
la materialele importante pentru cercetare i diagnostic. Evaluarea compatibilitii personalului,
instruirea specific n materie de biosecuritate i respectarea procedurilor de protecie fa de
ageni patogeni constituie mijloace de cretere a nivelului de biosecuritate a laboratorului.
Toate aceste eforturi trebuie iniiate i meninute prin evaluri periodice ale riscurilor i ale
ameninrilor i printr-o revizuire i actualizare regulat a procedurilor. Trebuie verificat
corespondena acestor proceduri i instruciuni cu standardele naionale privind biosecuritatea
laboratorului.

46
10. Hotele de siguran biologic1
Hotele de siguran biologic (HSB) sunt destinate a proteja operatorul, mediul din
laborator i materialele de lucru fa de expunerea la aerosoli i picturi care se pot produce n
cursul manipulrii materialelor coninnd ageni infecioi, cum ar fi culturile primare, tulpinile de
colecie i probele de diagnostic. Aerosolii sunt produi de orice activitate care determin
apariia de miniparticule sau stropi de material lichid sau semilichid, cum ar fi agitarea,
turnarea, amestecarea sau picurarea unui lichid pe o suprafa sau ntr-un alt lichid. Activitile
de laborator precum nsmnarea plcilor de agar prin efectuarea de striuri paralele,
inocularea flacoanelor de culturi de celule cu o pipet, folosirea unei pipete mono- sau
multicanal pentru a distribui suspensii de ageni infecioi n plci de microcultur, efectuarea
de diluii n tuburi sau plci, omogenizarea i agitarea prin producerea de vrtej a materialelor
infecioase, centrifugarea lichidelor contaminate sau manipularea animalelor, pot genera
aerosoli infecioi. Particulele de aerosoli cu diametrul sub 5m i picturile mici, cu diametrul
de 5-100m nu sunt vizibile cu ochiul liber. Tehnicianul de laborator nu este, n general,
avertizat asupra formrii acestor particule i asupra faptului c ele pot fi inhalate sau pot
contamina suprafee i materiale. HSB, folosite corect, sunt foarte eficiente n reducerea
frecvenei infeciilor dobndite n laborator, evit contaminarea ncruciat a culturilor prin
expunere la aerosoli i protejeaz mediul.
Tabelul 8. Alegerea unei HSB n funcie de tipul de protecie dorit.
TIP DE PROTECIE
HSB INDICAT
Protecia personalului fa de microorganisme Clasa I, Clasa II, Clasa III
din Grupurile de Risc 1-3
Protecia personalului fa de microorganisme
din Grupul de Risc 4, manipulare din exterior, Clasa III
prin panou cu mnui
Protecia personalului fa de microorganisme
din Grupul de Risc 4, laborator cu izolare n
Clasa I, Clasa II
costum protector (tip scafandru)
Protecia produselor
Clasa II, Clasa III cu flux laminar
Protecia fa de radionuclizi volatili i
Clasa II B1, Clasa II A2 cu evacuare spre
protecie chimic, expunere de ordinul
exterior
minutelor
Protecie fa de radionuclizi volatili i
Clasa I, Clasa II B2, Clasa III
protecie chimic
De-a lungul anilor, concepia clasic a HSB a suferit numeroase modificri. O
modificare major a constat n adugarea unui filtru de nalt eficien pentru particulele din aer
(HEPA - High Efficiency Particulate Air) la sistemul de evacuare. Filtrul HEPA reine 99,97%
din particulele cu diametrul de 0,3m si 99,99% din particulele cu dimensiuni mai mari sau mai
mici. In acest fel, filtrul HEPA are capacitatea de a reine eficient toi agenii infecioi cunoscui
i de a asigura evacuarea din hot a unui aer complet purificat de ori ce fel de microbi. A doua
modificare de concepie a constat n direcionarea aerului filtrat prin HEPA ctre suprafaa de
1
Denumiri echivalente : cabinet (incint) de siguran biologic - BSC (BioSafety Cabinet) sau post de securitate
microbiologic - PSM (poste de scurit microbiologique)

47
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
lucru, protejnd-o pe aceasta i materialele cu care se lucreaz. Aceast caracteristic este

frecvent denumit protecia produsului. Aceste modificri au dus la apariia a trei clase de HSB.
Tipul de protecie conferit de fiecare dintre ele este specificat n Tabelul 8.
Nota: Hotele cu flux de aer orizontal sau vertical (incinte de lucru cu aer purificat) nu sunt de
fapt HSB i nu trebuie folosite n locul acestora.
10.1. HSB de Clasa I
Figura 6 conine o prezentare schematic a HSB de Clasa I. Aerul din ncpere este
preluat printr-o deschiztur frontal cu o vitez minim de 0,38m/s, trece pe deasupra
suprafeei de lucru i este evacuat din hot prin conducta de evacuare. Fluxul de aer
direcionat dinspre operator ctre conducta de evacuare ndeprteaza particulele de aerosoli
care pot fi generate la nivelul suprafeei de lucru. Deschiztura frontal permite operatorului s
ajung cu minile la suprafaa de lucru din interiorul hotei i, n acelai timp, el poate s vad
aceast suprafa printr-un panou frontal transparent. Acest panou poate fi la rndul su ridicat
complet pentru a permite accesul la suprafaa de lucru n scopul currii sau n alte scopuri.
Aerul din hot este evacuat printr-un filtru HEPA: (a) n laborator i apoi n exterior prin
sistemul de aerisire al cldirii; (b) ctre exterior prin sistemul de evacuare a aerului din cldire;
sau (c) direct n exterior. Filtrul HEPA poate fi amplasat fie n sistemul de evacuare al HSB fie
n cel al cladirii. Unele HSB de Clasa I sunt echipate cu un ventilator propriu de evacuare, n
timp ce altele folosesc ventilatorul sistemului de evacuare a aerului din cldire.
HSB de Clasa I a fost prima HSB recunoscut ca atare i, datorit concepiei sale
constructive simple, este nc larg folosit n ntreaga lume. Ea prezint avantajul de a conferi
protecie personalului i mediului, dar poate fi folosit i pentru lucrul cu radionuclizi i
substante chimice toxice volatile. Deoarece aerul nesterilizat din ncpere ptrunde peste
suprafaa de lucru prin deschiztura frontal, hota nu asigur protecia produsului.
Figura 6. Reprezentare schematic a HSB de Clasa I
A: deschiztura frontal; B: panou frontal transparent; C: filtru HEPA de evacuare; D: spaiul de evacuare.

48
HoteleDE
deSIGURAN
siguran biologic
10.10.
HOTELE
BIOLOGIC
10.2. HSB de Clasa II

Pe msur ce s-a extins utilizarea culturilor de celule i esuturi n scopul cultivrii
virusurilor sau pentru alte scopuri, s-a ajuns la concluzia c nu este admisibil ca aerul nesteril
din ncpere s ajung pe suprafaa de lucru. HSB de Clasa II au fost concepute nu numai
pentru a proteja personalul, ci i pentru a proteja materialele de pe suprafaa de lucru de aerul
contaminat din ncpere. HSB de Clasa II, cu cele patru tipuri (A1, A2, B1 si B2), difer de cele
de clasa I prin faptul c permit doar accesul unui aer steril, filtrat prin filtre HEPA, la nivelul
suprafeei de lucru. HSB de clasa II poate fi utilizat atunci cnd se lucreaz cu ageni
infecioi din Grupurile de Risc 2 i 3. HSB de Clasa II pot fi folosite n cazul lucrului cu ageni
infecioi din Grupul de Risc 4 doar dac se folosesc costume de izolare cu presiune pozitiv
(tip scafandru).
x
HSB de Clasa II tipul A1
HSB de Clasa II tip A1 este prezentat n Fig. 7. Un ventilator intern absoarbe aer din
ncpere (aer de alimentare) n interiorul hotei prin deschiztura frontal i apoi prin grilajul de
captare frontal. Viteza de ptrundere a aerului trebuie s fie de cel puin 0,38 m/s la nivelul
deschizturii frontale. Apoi, aerul de alimentare trece printr-un filtru HEPA de alimentare,
urmnd s fie trimis n jos, ctre suprafaa de lucru. Pe msur ce coboar, fluxul de aer se
desparte la aproximativ 6-18 cm deasupra suprafeei de lucru, jumtate din flux trecnd prin
grilajul frontal de evacuare i jumtate prin grilajul posterior de evacuare. Toate particulele de
aerosoli generate la nivelul suprafeei de lucru sunt imediat captate de fluxul descendent de
aer, care trece apoi prin grilajele de evacuare frontal i posterior, oferindu-se astfel cel mai nalt
nivel de protecie a produselor. Aerul este apoi descrcat prin conducta comun posterioar n
spaiul dintre filtrele de alimentare i de evacuare, plasate n partea superioar a hotei. Datorit
diferenei de mrime dintre aceste filtre, aproximativ 70% din fluxul de aer este recirculat prin
filtrul de alimentare, pentru a ajunge napoi n zona de lucru; restul de 30% trece prin filtrul de
evacuare pentru a ajunge n ncperea de lucru sau la exterior.
Aerul din HSB de Clasa II A1 poate fi recirculat ctre ncpere sau evacuat ctre
exteriorul cldirii, prin conectare etan fie la o conduct special destinat, fie la sistemul
general de evacuare a aerului din cldire.
Recircularea aerului de evacuare n ncperea de lucru prezint avantajul reducerii
costurilor de nclzire ale cldirii, deoarece aerul cald sau rece din ncpere nu trece n mediul
extern. Conectarea la un sistem de conducte de evacuare permite, de asemenea, folosirea
unor asemenea HSB n cazul lucrului cu radionuclizi volatili i cu substane chimice toxice
volatile (Tabelul 8).
x
HSB de Clasa II tip A2 ventilate la exterior, tip B1 i tip B2
HSB de Clasa II tip A2 ventilate ctre exterior, tip B1 (Fig.8) i tip B2 - sunt variante ale
tipului IIA1, iar caracteristicile lor, precum i cele ale HSB de Clasa I i de Clasa III, sunt
prezentate n Tabelul 9. Fiecare variant de HSB este adecvat utilizrii n scopuri specializate
(vezi Tabelul 8). Aceste HSB difer ntre ele prin mai multe aspecte:
- viteza de ptrundere a aerului prin deschiztura frontal;
- cantitatea de aer recirculat la nivelul suprafeei de lucru i eliminat din hot;
- sistemul de evacuare, care poate elimina aerul din hot ctre ncpere sau ctre
exterior, printr-un sistem de evacuare special destinat sau prin sistemul general de
evacuare a aerului din cldire;
- caracteristicile de presiune (conductele contaminate biologic i spaiul de evacuare
sunt fie sub presiune negativ, fie nconjurate de alte spaii i conducte sub presiune
negativ).

49
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Figura 7. Reprezentare schematic a unei HSB de Clasa II A1
A: deschiztura frontal; B: panou frontal transparent mobil; C: filtrul HEPA de evacuare; D: conducta
comun posterioar; E: filtrul HEPA de alimentare; F: ventilator suflant.
Figura 8. Reprezentare schematic a unei HSB Clasa II tip B1
A=deschiderea frontal, B=panoul frontal transparent, C=filtrul HEPA de evacuare, D=filtrul HEPA de
alimentare, E=spaiul de evacuare cu presiune negativ, F=ventilatoare, G=filtrul HEPA de alimentare.
Este necesar conectarea evacurii HSB la sistemul general de evacuare a aerului din cldire.

50
HoteleDE
de SIGURAN
siguran biologic
10.10.HOTELE
BIOLOGIC
Descrierea complet a diferitelor HSB de Clasa II A i B poate fi obinut consultnd

referinele bibliografice (7) i (8) precum i crile tehnice ale echipamentelor.
Tabelul 9. Diferene ntre HSB de Clasa I, II si III
% de aer
Viteza de intrare
HSB
m/s
recirculat evacuat
I*
0,36
0
100
IIA1
0,38 0,51
70
30
IIA2 cu ventilare spre
exterior *
0,51
70
30
IIB1*
0,51
30
70
IIB2*
0,51
0
100
III*
nu se aplic**
0
100
* Toate conductele contaminate sunt sub presiune negativ sau
conducte sau spaii cu presiune negativ
** Panoul frontal cu mnui este fixat n deschiztura frontal.
Sistem de evacuare
conduct rigid
spre ncpere sau
prin conduct
special
spre ncpere sau
prin conduct
special
conduct rigid
conduct rigid
conduct rigid
sunt nconjurate de alte
10.3. HSB de Clasa III

Acest tip de hot (Fig.9) ofer cel mai nalt nivel de protecie a personalului i este
folosit, n special, pentru lucrul cu ageni din Grupul de Risc 4. Orice comunicare ntre interiorul
i exteriorul hotei este blocat n ambele sensuri, printr-un sistem etan. Aerul de alimentare
este filtrat HEPA (devenind astfel steril), iar aerul evacuat trece prin dou filtre HEPA succesive
pentru decontaminare. Fluxul de aer este meninut printr-un sistem de ventilaie special
conceput, amplasat la exteriorul hotei, care menine interiorul hotei sub presiune negativ (de
aproximativ 124,5 Pa). Accesul la suprafaa de lucru se face prin intermediul unor mnui de
cauciuc foarte rezistente, care fac corp comun cu un panou frontal fixat etan.
HSB de Clasa III trebuie s aib ataat un compartiment de trecere, sterilizabil i echipat cu
filtre HEPA de evacuare, prin care se scot obligatoriu toate materialele care s-au introdus i sau gsit n hot n timpul lucrului n vederea sterilizrii lor. Hota poate fi conectat la un
autoclav cu dou ui, pentru a decontamina toate materialele care sunt introduse sau scoase
din hot. Panoul frontal poate fi prevzut cu mai multe perechi de mnui pentru a extinde
suprafaa de lucru. HSB de Clasa III sunt recomandate pentru lucrul n laboratoarele cu Nivel
de Biosiguran 3 i 4.
10.4. Conexiunile pentru evacuarea aerului din hota de siguran biologic.
Hotele de siguran biologic de Clasa II tip A1 i tip A2 conectate ctre exterior sunt
prevzute cu un tub flexibil de tip manon sau cu un capion (ca tubul/conducta de
evacuare de la hota de buctrie), n care este presiune negativ. Acesta este fixat pe traiectul
de evacuare al hotei i conduce aerul din hot, decontaminat prin filtrare HEPA, spre
conductele generale de evacuare a aerului din cldire. Intre manon i traiectul de evacuare al
hotei se pstreaz o mic fant de 2,5 cm diametru. Aceast mic deschiztur permite i
absorbia aerului din ncpere ctre sistemul de evacuare a aerului din cldire. Capacitatea
sistemului de evacuare a aerului din cldire trebuie s fie suficient pentru eliminarea att a
aerului din camer, ct i a aerului din HSB. Manonul de conexiune trebuie s fie uor de scos sau
s fie conceput n aa fel nct s permit efectuarea testelor operaionale asupra hotei.
5
51
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
n general, funcionarea unei HSB conectate prin manon nu este influenat prea mult de
fluctuaiile fluxului de aer din cldire.
HSB de Clasa II tip B1 i tip B2 sunt prevzute cu conducte de evacuare rigide, de
tipul celor conectate etan, (fr nici o deschiztur), la sistemul de evacuare al aerului din
cldire sau, mai bine, la un sistem de evacuare special destinat, cu presiune negativ. Sistemul
de evacuare al aerului din cldire trebuie s fie perfect adaptat la cerinele de flux specificate
de productor, referitoare la volum, precum i la presiunea static. Certificarea unei HSB cu
conduct rigid necesit mai mult timp de lucru dect cea a unei HSB care recircul aerul din
ncpere sau care are conexiune prin manon deoarece trebuie validat i etaneizarea
perfect.
Figura 9. Reprezentare schematic a unei HSB de Clasa III (panou frontal cu mnui):
A: guri pentru montarea de mnui de lungimea braelor; B: panou frontal transparent;

C: filtre HEPA duble pentru evacuare; D: filtru HEPA de alimentare cu aer;
E: autoclav cu dou intrri sau compartiment de trecere; F: container (tanc) pentru deeuri chimice.
Se impune conectarea sistemului de evacuare al hotei la un sistem independent de cel de evacuare a
aerului din cldire.
10.5. Alegerea unei hote de siguran biologic

HSB trebuie aleas, n primul rnd, n funcie de tipul de protecie necesar: protecia
produselor, protecia personalului fa de microorganisme din Grupurile de Risc 1-4 i fa de
expunere la radionuclizi si substane chimice toxice/volatile sau o combinaie a acestora,
precum i protecia mediului nconjurtor. Tabelul 8 arat care HSB este recomandat pentru
fiecare tip de protecie.

52
HoteleDE
deSIGURAN
siguran biologic
10.10.
HOTELE
BIOLOGIC
Substanele chimice toxice sau volatile nu trebuie manipulate n HSB care recircul
aerul de evacuare prin ncpere, cum ar fi cele de Clasa I care nu au conducte de comunicare
cu sistemul de evacuare al cldirii, sau cele de Clasa II tip A1 sau tip A2. HSB de Clasa II tip
B1 sunt acceptabile pentru lucrul timp de cteva minute cu radionuclizi i substane
toxice/volatile. Hotele de Clasa II tip B2, numite i hote cu evacuare complet, se impun atunci
cnd se manipuleaz radionuclizi i substane chimice volatile n cantiti mari.
10.6. Folosirea HSB n laborator
x
Amplasarea
Viteza de intrare a fluxului de aer prin deschiztura frontal n HSB este de aproximativ
0,45 m/s. La aceast vitez, fluxul de aer direcionat i menine cu greu integritatea i poate fi
ntrerupt de ctre curenii de aer generai de micrile persoanelor n jurul HSB, de ferestrele
deschise, de sistemele de alimentare cu aer, de nchisul i deschisul uilor. HSB trebuie
amplasate ntr-un loc ferit de trafic i de cureni de aer potenial perturbatori. Oricnd este
posibil, se va lsa un spaiu liber de 30 cm n spatele i n prile laterale ale hotei pentru a
permite un acces uor pentru intreinere. Este necesar pstrarea unui spaiu liber de 30-35
cm deasupra hotei, pentru a permite msurarea exact a vitezei aerului prin filtrul de evacuare
i pentru a schimba filtrele.
x
Operatorii
Daca HSB nu sunt folosite corect, protecia oferit de ele poate fi mult diminuat.
Operatorii trebuie s aib grij s menin integritatea fluxului de aer care ptrunde prin
deschiztura frontal, atunci cnd i mic braele spre interiorul sau exteriorul hotei, n timpul
lucrului. Micrile braelor trebuie fcute lent, perpendicular pe deschiztura frontal.
Materialele din hot vor fi manipulate dup un minut de la introducerea braelor, pentru a
permite acomodarea i pentru a mtura cu aer steril suprafaa minilor i a braelor. Numrul
micrilor fcute prin deschiztura frontal trebuie redus, plasnd n interiorul hotei toate
materialele necesare nainte de nceperea lucrului.
x
Plasarea materialelor
Grila frontal de captare a aerului din HSB din clasa II nu trebuie s fie blocat cu
hrtie, echipamente sau alte obiecte. Suprafaa materialelor care vor fi plasate n hot trebuie
decontaminat cu alcool de 70. Zona de lucru din hot se poate acoperi cu prosoape de
hrtie absorbant, imbibate sau nu cu dezinfectant, pentru a reine eventuale scurgeri i stropi.
Toate materialele trebuie plasate n hot spre marginea posterioar a suprafeei de lucru, ct
mai n spate posibil, fr a bloca grilajul posterior. Echipamentele generatoare de aerosoli (de
ex. mixere, centrifugi etc.) trebuie aezate spre partea posterioar a hotei. Deeurile colectate
pe categorii n recipiente speciale (precum sacii de colectare pentru materialele contaminate,
recipientele cu vrfuri de pipete folosite, recipientele cu probe, etc.) trebuie plasate ntr-o latur
a hotei. Fluxul de operaii trebuie s se desfoare dinspre zona curat spre zona contaminat
a suprafeei de lucru.
Pungile de colectare pentru deeuri periculoase sau containerele i recipientele pentru
colectarea deeurilor tietoare - neptoare ( ex. vrfuri de pipete ), care urmeaz s fie
autoclavate, nu trebuie plasate n afara hotei. Micrile repetate nuntru/n afar, fcute pentru
utilizarea acestor containere, pot ntrerupe bariera de aer a hotei i pot compromite att
protectia personalului, ct i pe cea a produselor.

53
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Operare i ntreinere
Majoritatea HSB sunt concepute pentru a fi utilizate non-stop, iar inspectorii consider
c folosirea continu este util i pentru controlul nivelului particulelor de praf i al altor
particule din laborator. HSB de Clasa II tip A1 i A2 cu evacuare spre ncpere sau cu
conectare prin manon la o conduct proprie de evacuare pot fi oprite n perioadele n care nu
sunt folosite. Alte tipuri, precum HSB de Clasa II-B1 i B2, prevzute cu instalaii cu conduct
rigid, necesit un flux de aer permanent cu presiune negativ, pentru a menine echilibrul cu
aerul din ncpere. Hotele trebuie pornite cu cel puin 5 minute nainte de a ncepe lucrul i
oprite dup cel puin 5 minute de la terminarea lucrului, pentru a permite hotei s se curee,
adic pentru a permite aerului contaminat s fie evacuat din hot.
Orice reparaie a HSB trebuie fcut de ctre un tehnician calificat (autorizat). Orice
disfuncie n operare trebuie raportat i reparat nainte de a relua utilizarea HSB. nainte de
orice reparaie sau control (inspecie), HSB trebuie s fie dezinfectate.
x
Radiaiile ultraviolete
Folosirea radiaiilor ultraviolete n HSB nu este necesar. Dac se folosesc, lmpile UV

trebuie curate sptmnal pentru a nltura praful care reduce efectul germicid al radiaiei.
Intensitatea radiaiei UV trebuie verificat la fiecare recertificare a hotei, pentru a vedea dac
emisia de UV este corespunztoare. Lmpile UV trebuie nchise n timpul lucrului sau cnd
exist persoane n ncpere, pentru protecia ochilor i a pielii de expuneri nedorite, dar pot fi
lsate s funcioneze dac panoul frontal transparent este nchis.
x
Flacra deschis
Trebuie evitat folosirea flcrii deschise n mediul aproape steril din interiorul HSB.
Aceasta poate modifica traseul fluxului de aer i poate fi periculoas atunci cnd se utilizeaza
substane volatile sau inflamabile. De asemenea, utilizarea flcrii deschise poate afecta filtrele
HEPA. Pentru a steriliza ansele bacteriologice, exist micro-arztoare electrice sau cu gaz.
x
Scurgerile / stropirile
Instruciunile privind conduita de urmat n cazul producerii unor scurgeri sau stropiri cu
lichide contaminate trebuie citite i nsuite de ntregul personal al laboratorului; un exemplar
va fi afiat la loc vizibil. n cazul n care are loc o scurgere de material contaminat n interiorul
HSB, curarea trebuie nceput imediat, n timp ce hota continu s funcioneze. Se va folosi
un dezinfectant eficace, care va fi aplicat n aa fel nct generarea de aerosoli s fie ct mai
redus. Toate materialele care au venit n contact cu substana vrsat trebuie dezinfectate
i/sau autoclavate.
x
Certificarea
Funcionalitatea i integritatea fiecrei HSB trebuie supus unui control de certificare

dup standarde naionale i internaionale, att n momentul instalrii, ct i ulterior, n mod
periodic, control fcut de tehnicieni calificai (autorizai), n conformitate cu instruciunile
productorului. Evaluarea eficacitii hotei trebuie s cuprind : teste de integritate a hotei, a
filtrelor HEPA, profilul vitezei fluxului descendent de aer i cel al vitezei aerului care ptrunde,
raportul presiune negativ/ventilaie, analiza cu fum a fluxului de aer, verificarea sistemelor de
alarm i de interblocare. Pot fi fcute i testri opionale pentru scurgeri de curent, intensitatea
luminii, intensitatea radiaiilor UV, nivelul zgomotelor i vibraiilor. Aceste teste necesit
echipamente i aptitudini speciale, de aceea este recomandat ca ele s fie executate de
personal calificat.

54
HoteleDE
deSIGURAN
siguran biologic
10.10.
HOTELE
BIOLOGIC
Curarea i dezinfecia
Toate obiectele din interiorul HSB, inclusiv aparatura, trebuie decontaminate la

suprafa i scoase din hot dup terminarea lucrului, deoarece resturile de medii de cultur
favorizeaz creterea germenilor.
Suprafeele interioare ale HSB trebuie decontaminate nainte i dup fiecare utilizare.
Suprafaa de lucru i pereii interiori trebuie terse cu un dezinfectant care s distrug
toate microorganismele care s-ar putea afla n hot. La sfritul zilei de lucru, decontaminarea
final a suprafeelor trebuie s includ i pe cea a suprafeei de lucru, a prilor laterale i
posterioare i a feei interioare a panoului frontal transparent. Se va folosi o soluie clorigen
sau alcool de 70, dac sunt active pe microorganismele manipulate. Dac se folosete un
dezinfectant coroziv, cum sunt soluiile clorigene, este necesar o cltire ulterioar cu ap
steril.
Se recomand ca HSB s fie lsat n funciune. Dac nu, nainte de a fi oprit, trebuie
lsat s funcioneze cel puin 5 minute pentru evacuarea aerului contaminat din interior.
x
Decontaminarea
HSB trebuie decontaminate nainte de operaiuni precum schimbarea filtrelor sau

mutarea hotei. Cea mai utilizat metod de decontaminare este cea prin fumigaie cu
formaldehid gazoas. Decontaminarea HSB trebuie realizat de ctre personal calificat.
x
Echipamentul de protecie individual
Echipamentele de protecie trebuie purtate ntotdeauna cnd se lucreaz la HSB. n

laboratoarele cu Nivel de Biosiguran 1 i 2 se pot folosi halate obinuite. n laboratoarele cu
Nivel de Biosiguran 3 i 4, se asigur o protecie bun cu halate cu faa din material rezistent,
care se ncheie la spate (cu excepia laboratoarelor cu izolare n costum protector). Mnuile
se vor purta peste mnecile halatului i nu sub ele. Pentru protecia ncheieturilor minii se
recomand purtarea de halate cu manete elastice. Pentru unele tehnici este necesar portul
mtii i al ochelarilor de protecie.
x
Alarme
HSB pot fi echipate cu unul sau dou tipuri de alarme. Alarma conectat cu panoul
frontal transparent se gsete numai la HSB cu panou mobil. Alarma se declaneaz ori de
cte ori operatorul a aezat panoul ntr-o poziie incorect. Aciunea corectiv const n
poziionarea corect a panoului. Alarma acionat de fluxul de aer semnaleaz perturbarea
fluxului normal de aer n hot, care poate reprezenta un pericol imediat pentru operator sau
pentru produs. Cnd se declaneaz acest din urm tip de alarm, se oprete imediat lucrul i
se anun responsabilul de laborator. Detalii suplimentare se gsesc n crile tehnice ale
hotelor. Personalul trebuie instruit i asupra acestor aspecte.
x
Informaii suplimentare
Alegerea tipului adecvat de HSB, instalarea, folosirea corespunztoare i certificarea

anual a operrii HSB sunt procese complexe. Se recomand ca aceste procese s se
desfoare sub supravegherea unor specialiti bine instruii i cu experien n materie de
biosiguran; acetia trebuie s fie familiarizai cu literatura recomandat n capitolul de
Bibliografie i trebuie s fi fost instruii asupra tuturor aspectelor privind HSB. Operatorii
trebuie s fi urmat forme speciale de instruire pentru operarea i utilizarea HSB.

55
11. Echipamente de siguran
Deoarece aerosolii reprezint o important surs de infecie, trebuie luate msuri

pentru a reduce formarea i rspndirea acestora. Aerosoli periculoi pot aprea n cursul unor
variate operaiuni de laborator, de ex: amestecare, triturare, agitare, ultrasonare, centrifugare
de material infecios. Ca urmare, chiar dac se folosete echipament de siguran, se
recomand ca aceste operaiuni s se efectueze, pe ct posibil, ntr-o HSB (Capitolul 7).
Datele privind HSB, utilizarea i testarea acestora, sunt prezentate n Capitolul 10. Simpla
utilizare a echipamentului de siguran confer protecie doar dac operatorul este bine instruit
i folosete tehnici corecte. Echipamentul trebuie verificat cu regularitate pentru a garanta
performane constante de protecie.
Tabelul 10 conine o list a echipamentelor destinate eliminrii sau reducerii unor
pericole i definete succint caracteristicile lor de siguran. Detalii suplimentare pentru multe
din aceste echipamente sunt redate n paginile urmtoare. Alte informaii privind utilizarea
corect a acestor echipamente se regsesc n Capitolul 12.
Informaii referitoare la echipamentele i operaiunile care pot genera pericole sunt
prezentate n Anexa 4.
Tabel 10. Echipamente de biosiguran
Echipament
Pericole vizate
Hot de securitate
biologic
Aerosoli i
(HSB)
stropi
Clasa I
Clasa II
Aerosoli i
stropi
Clasa III
Aerosoli i
stropi
Izolator din folie

Aerosoli i
flexibil cu presiune stropi
negativ
Ecran de protecie Stropi de substane
chimice
Dispozitive de
Pipetarea cu gura,
pipetare
(ingestia de patogeni,
inhalarea de aerosoli
produi prin aspirarea
cu pipeta, picurarea
de lichid, contaminarea captului de
suciune al pipetei )
Caracteristici care confer siguran

Flux minim de aer orientat spre interiorul hotei
de la nivelul fantei de acces pentru lucru
(vitez redus de acces frontal al aerului)
Filtrare adecvat a aerului eliminat
Nu asigura protecia produsului
Flux minim de aer orientat spre interiorul hotei
de la nivelul fantei de acces pentru lucru
(viteza redus de acces frontal al aerului)
Filtrare adecvat a aerului eliminat
Asigur protecia produsului
Nivel maxim de securizare
Asigur protecia produsului dac este
prevzut cu flux de aer laminar
Nivel maxim de securizare
Ecran ntre operator i aria de lucru
Uor de folosit.
Controlul contaminrii captului de suciune al
pipetei, protejnd utilizatorul, dispozitivul de
pipetare i instalaia de vacuum.
Se poate steriliza.
Evit scurgerile din pipet.

57
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Echipament
Microarztoare
pentru anse
Anse de unic
folosin
Pericole vizate
Stropi din ansele de
transfer
Recipiente sigure
pentru colectarea i
transportul
materialelor
infecioase n
vederea sterilizrii
Containere pentru
obiecte tietoare/
neptoare
Containere de
transport ntre
laboratoare sau
instituii.
Aerosoli, mprtiere
i scurgere
Autoclave manuale
sau automate
Materiale infecioase
(decontaminare n
vederea eliminrii sau
reutilizrii)
Aerosoli i scurgeri
Recipiente cu
capac nurubat
Dispozitiv de
protecie a
instalaiei de vid

Arztorul cu gaz sau electric este introdus ntrun tub de sticl sau ceramic, deschis la gur
Ansele de unic folosin nu impun tratament
termic
Recipient impermeabil nchis cu capac
Robustee mecanic
Autoclavabil
Rni prin nepare.
Autoclavabil.
Robust, rezistent la nepare/tiere
Contaminare
accidental cu
microorganisme.
Robust.
Containere primare i secundare
impermeabile pentru lichide
Conin materiale absorbante pentru reinerea
lichidelor vrsate.
Model aprobat
Sterilizare eficace prin cldur
Contaminarea cu
aerosoli sau lichide a
sistemului de vacuum
al laboratorului
Securizare eficace
Filtre tip cartu pentru a mpiedica trecerea de
aerosoli (mrimea particulelor cu dimensiunea
de 0,45 Pm).
Recipiente cu dezinfectante adecvate, utilizate
drept capcane de vid . Dispozitiv de
cauciuc (supap) pentru a nchide automat
vacuumul cnd recipientul este plin.
ntreg dispozitivul este autoclavabil
11.1. Izolatoare din folie flexibil cu presiune negativ

Izolatorul din folie flexibil cu presiune negativ este un dispozitiv de izolare primar de
sine stttor, care confer protecie maxim mpotriva materialelor biologice periculoase. Poate
fi montat pe un suport mobil. Spaiul de lucru este n ntregime nchis ntr-un nvelis din PVC
transparent suspendat de un cadru de oel. n interiorul izolatorului se menine permanent o
presiune inferioar celei atmosferice. Admisia aerului se face printr-un filtru HEPA i evacuarea
prin 2 filtre HEPA, evitndu-se astfel necesitatea evacurii aerului n afara cldirii. Izolatorul
poate fi dotat cu incubator, microscop i alte echipamente (centrifugi, cuti pentru animale,
surse de cldur, etc). Materialele sunt introduse i scoase din izolator prin ci speciale de
acces pentru materiale i probe, fr a compromite sigurana microbiologic.
Manipularea n interiorul izolatorului se face prin intermediul unor mneci cu mnui
prevzute la rndul lor cu mnui de unic folosin.
Presiunea din interiorul izolatorului este monitorizat cu ajutorul unui manometru.

58
Echipamente DE
de siguran
11.11.
ECHIPAMENTE
SIGURAN
Acest tip de izolator este folosit pentru lucrul cu microorganisme periculoase (Grupul de Risc 3
sau 4) pe teren, acolo unde nu exist posibilitatea instalrii i utilizrii unei HSB convenionale.
11.2. Dispozitive de pipetare
Dispozitivul de pipetare trebuie folosit ntotdeauna atunci cnd se pipeteaz. Este
strict interzis pipetarea cu gura.
Importana dispozitivelor de pipetare nu trebuie subapreciat. Cele mai frecvente
pericole asociate cu pipetarea sunt rezultatul aspirrii cu gura. Aspirarea i ingestia de
materiale sunt cunoscute a fi cauza a numeroase infecii de laborator.
Germeni patogeni mai pot fi transferai i prin degete contaminate puse pe captul de suciune
al pipetei. Un risc mai puin cunoscut este inhalarea de aerosoli rezultai prin aspirare. Un dop
de vat nu constituie un filtru microbian eficace la presiune negativ sau pozitiv i anumite
particule pot trece prin el. Un dop de vat prea dens poate determina o pipetare violent,
urmat de aspirarea dopului, a unor aerosoli i chiar a lichidului. Ingestia de patogeni este
evitat prin folosirea dispozitivelor de pipetare.
Aerosoli se mai pot forma i prin picurarea unui lichid din pipet pe suprafaa de lucru,
prin aspirare i barbotare sau cnd se sufl ultima pictur din pipet. Inhalarea aerosolilor a
cror producere nu poate fi evitat n cursul operaiunilor de pipetare poate fi ns prevenit
prin lucrul ntr-o HSB.
Dispozitivele pentru pipetare trebuie alese cu grij. Tipul utilizat nu trebuie s genereze
riscuri suplimentare i trebuie s fie uor de sterilizat i curat. Conuri de prelevare prevzute
cu filtru trebuie folosite ori de cte ori se manipuleaz microorganisme i culturi celulare.
Pipetele cu capetele de suciune ciobite sau rupte nu trebuie folosite deoarece deterioreaz
lcaul dispozitivelor de pipetare i prin aceasta genereaz pericole.
11.3. Omogenizatoare, agitatoare, mixere i aparate de ultrasonare
Mixerele de buctrie nu sunt etane i elibereaz aerosoli. Se vor folosi doar cele
special concepute pentru uzul n laboratoare, care prin construcie reduc sau evit eliberarea
de aerosoli. Omogenizatoarele nchise de tip stomacher disponibile n prezent pentru
prelucrarea de volume mici sau mari, pot genera i ele aerosoli.
Omogenizatoarele folosite pentru microorganisme din Grupul de Risc 3 vor fi ncrcate
i deschise numai n HSB. Aparatele de ultrasonare pot genera, de asemenea, aerosoli. Ele
trebuie manipulate in HSB sau acoperite/ecranate n timpul folosirii. Capacele i exteriorul
aparatelor de ultrasonare trebuie decontaminate dup folosire.
11.4. Anse de unic folosin
Avantajul anselor de unic folosin este c nu trebuie sterilizate i pot fi folosite n
HSB unde becurile Bunsen i microarztoarele perturb fluxul de aer.
Dup folosire, ansele trebuie plasate n dezinfectant i evacuate ca orice material
contaminat (vezi Capitolul 3).
11.5. Microarztoare
Microarztoarele cu gaz sau electrice sunt prevzute cu ecrane de sticl borosilicat
sau ceramice, ceea ce reduce formarea stropilor i dispersia materialului infecios n momentul
sterilizrii anselor. Microarztoarele modific totui circuitul aerului i de aceea trebuie plasate
n HSB ct mai n spate.

59
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
11.6. mbrcminte i echipament de protecie individual

mbrcmintea i echipamentul de protecie individual constituie o barier care
reduce riscul de expunere la aerosoli, stropiri i inoculri accidentale i vor fi alese n funcie de
specificul activitii desfurate. mbrcmintea de protecie trebuie purtat ori de cte ori se
lucreaz n laborator. La prsirea laboratorului, mbrcmintea de protecie se ndeprteaz i
se spal minile.
Tabelul 11 prezint cteva tipuri de echipamente de protecie individual folosite n
laborator i protecia pe care o confer.
Tabel 11. Echipament de protecie personal
Echipament
Pericole vizate
Halate, costume Contaminarea hainelor ncheiate la spate.
i salopete de
S acopere hainele de strad
laborator
oruri de
Contaminarea hainelor Impermeabile pentru lichide
plastic
nclminte
Impact i stropire
Fr decupare n fa
Ochelari de
Impact i stropire
Lentile rezistente la impact (pot fi optic corectoare
protecie
sau aplicate peste ochelari)
Aprtori laterale
Ochelari de
Impact
Lentile rezistente la impact, optic corectoare
lucru
Aprtori laterale
Ecrane
Impact i stropire
S protejeze ntreaga fa
protectoare
S fie uor de ndeprtat n caz de accident
pentru fa
Dispozitive de
Inhalare de aerosoli
Modele variate: de unic folosin ; purificatoare de
protecie
aer ce acoper jumtate sau ntreaga fa ; masc
respiratorie
sau glug cu purificator de aer asistat mecanic;
aparat de respiraie asistat
Mnui
Contact direct cu
De unic folosin, avizate pentru uz microbiologic,
microorganismele
confecionate din latex, vinil sau nitril
Protecia minii
Tiere
Plas metalic
mbrcminte de laborator, halate, oruri

Halatele de laborator ar trebui s se ncheie pn sus. Modelele de halate cu mnec
lung, nchise la spate i salopetele confer o protecie mai bun dect halatele i bluzele
obinuite i sunt de preferat n laboratoarele de microbiologie sau pentru lucrul la HSB.
orurile purtate peste halate ofer o protecie suplimentar fa de stropirea cu substane
chimice sau materiale biologice, cum ar fi snge sau culturi n mediu lichid. Trebuie prevzut
o spltorie pentru echipamentul de lucru, situat n laborator sau n vecintatea acestuia.
Ochelari de protecie, ochelari de lucru i ecrane protectoare pentru fa
Alegerea echipamentului de protejare a ochilor sau a feei depinde de activitatea
desfurat. Ochelarii de lucru cu sau fr dioptrii vor fi confecionai cu rame speciale n care

60
Echipamente de
11.11.ECHIPAMENTE
DE siguran
SIGURAN
lentilele se monteaz numai dinspre partea anterioar; lentilele sunt confecionate din material
incasabil fiind curbate sau cu aprtori laterale. Ochelarii de protecie ar trebui purtai peste
ochelarii de vedere sau peste lentilele de contact, care nu confer protecie mpotriva
pericolelor biologice sau chimice. Ecranele pentru fa (vizoare) sunt confecionate din material
plastic incasabil, protejeaz ntreaga fa i se fixeaz pe cap cu o band sau bonet.
Dispozitive de protecie respiratorie
Protecia respiratorie este necesar cnd se execut proceduri cu mare periculozitate
(ex. curarea unei deversri de material infecios)
Alegerea tipului de dispozitiv depinde de tipul de pericol. Exist dispozitive la care se
pot monta diferite tipuri de filtre : pentru protecie mpotriva diferitelor gaze, vapori, particule
sau microorganisme. Este absolut necesar ca filtrul s fie montat la dispozitivul de protecie
respiratorie potrivit.
Pentru a obine o protecie maxim, dispozitivul ar trebui adaptat pentru faa fiecrei
persoane i testat pentru eficacitate. Aparatele de asisten respiratorie cu containere proprii,
cu butelie de aer, ofer protecie total. Mtile de tip chirurgical sunt utile numai pentru
protecia pacientului, dar nu ofer protecie operatorului. Pentru protecia mpotriva agenilor
biologici au fost concepute i dispozitive de unic folosin (ISO 13.340.30).
Dispozitivele de protecie respiratorie nu trebuie purtate n afara spaiului laboratorului.
Mnui
Minile pot fi contaminate n timpul lucrului n laborator. De asemenea pot fi rnite de
obiecte ascuite. Pentru munca obinuit de laborator precum i pentru manipularea de ageni
infecioi, snge i fluide biologice, se folosesc mnui chirurgicale de unic folosin, avizate
pentru uz microbiologic, confecionate din latex, vinil sau nitril. Pot fi folosite i mnui
reutilizabile, dar trebuie acordat atenie splrii, scoaterii, currii i dezinfeciei lor corecte.
Mnuile se scot i minile se spal bine dup manipularea de material infecios, dup
lucrul la o HSB sau nainte de prsirea laboratorului. Mnuile de unic folosin utilizate se
ndeprteaz odat cu deeurile infecioase.
Au fost semnalate reacii alergice de tip dermatit i de hipersensibilitate imediat la
personalul din laborator i la ali lucrtori care au purtat mnui din latex, mai ales din cele cu
pudr. De aceea ar trebui s fie disponibile i alte tipuri de mnui dect cele din latex cu
pudr.
Mnuile din plas de oel inoxidabil ar trebui folosite cnd exist o expunere
potenial la instrumente tioase, ex. examinri postmortem. Astfel de mnui protejeaz
mpotriva tierii, dar nu i a neprii.
Mnuile nu trebuie purtate n afara spaiului laboratorului.
Pentru alte informaii consultai indicaiile bibliografice 12, 17 i 18.

61
12. Tehnici de laborator
Eroarea uman, tehnicile defectuoase de laborator i folosirea incorect a

echipamentelor sunt cauzele majoritii accidentelor de laborator i infeciilor aprute la locul
de munc. Acest capitol ofer un compendiu de metode tehnice care sunt indicate pentru a
evita sau minimaliza problemele de aceast natur cel mai frecvent raportate.
12.1. Manipularea n siguran a probelor n laborator
Recoltarea, transportul si manipularea necorespunztoare a probelor n laborator
prezint risc de infecie pentru personalul implicat.
Containerele pentru probe
Containerele pentru probe pot fi din sticl sau preferabil din plastic. Ele trebuie s fie
rezistente i nu trebuie s permit scurgerea materialului din ele cnd capacul sau dopul este
corect aplicat. Nimic din materialul recoltat nu trebuie s rmn n afara containerului.
Containerele trebuie corect etichetate pentru o identificare uoar. Documentele de nsoire nu
trebuie nfurate n jurul containerului, ci plasate separat, preferabil ntr-un nveli
impermeabil.
Transportul probelor n laborator
Pentru evitarea scurgerilor accidentale sau a vrsrii probelor, trebuie utilizate
containere secundare, cum sunt cutiile cu stative, astfel nct recipientele cu probe s rmn
n picioare atunci cnd containerele sunt manipulate corect. Containerele secundare pot fi din
metal sau plastic, trebuie s fie autoclavabile sau s fie rezistente la aciunea dezinfectanilor
chimici, iar capacul ar trebui s fie prevzut cu o garnitur. Ele trebuie decontaminate regulat.
Primirea probelor
Laboratorul care primete un mare numr de probe trebuie s aib o ncpere
separat sau un spaiu special pentru acest scop.
Deschiderea pachetelor
Personalul care primete i despacheteaz probele trebuie s fie contient de
potenialul pericol asupra strii de sntate i trebuie instruit s adopte precauiile standard (2),
n special cnd se confrunt cu spargerea sau vrsarea containerelor. Containerele primare cu
probe ar trebui deschise ntr-o HSB. Trebuie s existe dezinfectante la ndemn.
12.2. Utilizarea pipetelor i a dispozitivelor de pipetare
1. Dispozitivul de pipetare trebuie utilizat ntotdeauna. Pipetarea cu gura este interzis.
2. Toate pipetele trebuie s aib filtru de vat pentru a reduce contaminarea dispozitivului de
pipetare.
3. Nu trebuie suflat niciodat ntr-un lichid care conine ageni infecioi.
4. Materialul infecios nu trebuie niciodat amestecat prin aspirare i expulzare alternant,
prin pipet
5. Lichidele nu trebuie niciodat expulzate forat din pipete.
6. Pipetele gradate neterminal sunt preferabile altor tipuri de pipete deoarece nu necesit
expulzarea ultimei picturi.

63
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
7. Pipetele contaminate vor fi imersate complet ntr-un dezinfectant adecvat, aflat intr-un
container incasabil. Ele trebuie lsate n dezinfectant atta timp ct este necesar nainte de
a fi scoase din laborator.
8. Containerul pentru pipete folosite trebuie plasat n interiorul HSB, nu n afara ei.
9. Seringile cu ace hipodermice nu trebuie utilizate pentru pipetare.
10. Trebuie utilizate dispozitive speciale pentru deschiderea flacoanelor prevzute cu capsule
cu septuri de cauciuc care s permit apoi utilizarea pipetelor, evitndu-se utilizarea n
acest scop a acelor hipodermice i a seringilor.
11. Pentru a evita dispersia picturilor de material infecios din pipet, pe suprafaa de lucru va
fi aezat un material absorbant ; dup utilizare acesta va fi evacuat ca material infecios.
12.3. Evitarea dispersiei materialului infecios
1. Pentru evitarea pierderii premature a ncrcturii sale, inelul ansei bacteriologice trebuie s
aib un diametru de 2-3 mm i trebuie s fie complet nchis. Firul ansei nu trebuie s fie
mai lung de 6 cm pentru a reduce vibraia.
2. Riscul stropirii cu material infecios cu ocazia sterilizrii ansei la flacra becului Bunsen
poate fi evitat prin utilizarea pentru sterilizare a unui microarztor electric. Sunt de preferat
ansele de unic folosin, care nu au nevoie de sterilizare.
3. Trebuie luate msuri de precauie atunci cnd se usuc probele de sput pentru a evita
formarea de aerosoli.
4. Probele i culturile a cror utilizare s-a ncheiat i care trebuie autoclavate i / sau
evacuate, trebuie plasate n containere impermeabile, ex. saci speciali pentru deeuri de
laborator. Partea de sus a sacilor trebuie nchis etan (ex. cu band adeziv martor de
autoclavare) nainte de plasarea lor n containerele pentru deeuri infecioase.
5. Locul de munc trebuie decontaminat cu dezinfectante corespunztoare la sfritul fiecrei
etape i zile de lucru.
Pentru informaii suplimentare vezi referina (12).
12.4. Utilizarea Hotelor de Siguran Biologic
1. Modul de utilizare i limitele de siguran ale HSB trebuie aduse la cunotina tuturor
utilizatorilor poteniali (vezi capitolul 10) pe baza standardelor naionale i a literaturii de
specialitate. Protocoale scrise sau ghiduri de operare/de siguran trebuie puse la
dispoziia personalului. Trebuie s fie clar, n mod particular, c HSB nu protejeaz pe cel
ce lucreaz n caz de spargere, vrsare sau tehnici greite de manipulare.
2. HSB trebuie utilizat numai dac funcioneaz corect.
3. Panoul frontal transparent de sticl nu trebuie deschis n timpul lucrului.
4. Aparatele i volumele de materiale utilizate n HSB trebuie s fie reduse la minimum.
Circulaia aerului n partea din spate a incintei HSB nu trebuie blocat.
5. Becurile Bunsen nu trebuie utilizate n hot. Cldura produs perturb fluxul de aer i
poate avaria filtrele. Microarztoarele electrice sunt permise, dar ansele de unic
ntrebuinare utilizare sunt de preferat.
6. ntreaga activitate din HSB trebuie s se desfoare n centrul sau n partea posterioar a
ariei de lucru, bine vizibil prin panoul frontal de sticl.
7. Traficul n spatele operatorului trebuie s fie minim.
8. Operatorul nu trebuie s perturbe fluxul de aer prin micri repetate de du-te vino ale
braelor.
9.
Grilele frontale de admisie a aerului nu trebuie blocate cu foi, caiete, pipete sau alte
materiale deoarece aceste ntreruperi ale fluxului de aer pot determina contaminarea
materialului i expunerea operatorului.

64
TehniciDE
de LABORATOR
laborator
12.12.TEHNICI
10. Suprafaa HSB trebuie tears cu dezinfectante adecvate dup fiecare etap de lucru i la
sfritul programului de lucru.
11. Ventilarea HSB trebuie pornit cu minimum 5 minute nainte de nceperea lucrului i oprit
dup minimum acelai interval de la terminarea lucrului n HSB.
12. Documentele de lucru nu trebuie puse niciodat n interiorul HSB.
Pentru alte informaii vezi capitolul 10.
12.5. Evitarea ingestiei de material infecios i a contactului cu pielea i ochii
1. Particulele mari i picturile cu diametrul mai mare de 5 m, aprute n timpul manipulrii
materialului microbiologic, trebuie ndeprtate rapid de pe suprafaa de lucru i de pe
minile operatorului. Trebuie purtate mnui de unic folosin. Lucrtorii din laborator
trebuie s evite atingerea gurii, ochilor i a feei.
2. Este interzis depozitarea i consumul de alimente i butur n laborator.
3. Este interzis introducerea n gur a oricror obiecte (creioane, pixuri, gum de mestecat)
4. Este interzis aplicarea cosmeticelor n laborator;
5. Faa, ochii i gura trebuie protejate cu un ecran sau prin alte modaliti, n timpul oricrei
operaii care se poate solda cu mprocarea de material infecios.
12.6. Evitarea injectrii de material infecios
1. Inocularea accidental ca urmare a rnilor provocate de sticla spart sau ciobit, poate fi
evitat prin creterea ateniei n timpul procedurilor de lucru. Obiectele din sticl ar trebui
nlocuite cu cele din material plastic, ori de cte ori este posibil.
2. Injectarea se poate produce accidental prin nepare cu ace de sering, pipete Pasteur din
sticl i cioburi de sticl.
3. Accidentele prin nepare cu acul pot fi reduse prin: a) reducerea utilizrii seringilor si
acelor (exist dispozitive simple pentru deschiderea flacoanelor nchise cu capsul i dop
de cauciuc, astfel nct pot fi folosite pipete n locul seringilor cu ac) ; b) utilizarea unor
dispozitive de siguran mpotriva neprii atunci cnd seringile i acele sunt absolut
necesare.
4. Acele nu trebuie niciodat reacoperite cu capacul de protecie. Ele nu se desprind de
sering ci se arunc mpreun cu seringa ntr-un container special, rezistent la nepare,
prevzut cu capac.
5. Pipetele Pasteur de plastic ar trebui s nlocuiasc pipetele de sticl.
12.7. Separarea serului
1. Aceast operaiune trebuie efectuat numai de personal bine instruit / calificat.
2. Trebuie folosite mnui i trebuie protejai ochii i mucoasele.
3. Aerosolii i stropirile pot fi evitate sau reduse la minim numai printr-o bun tehnic de
laborator. Sngele i serul trebuie pipetate cu atenie. Este interzis pipetarea cu gura.
4. Dupa utilizare, pipetele trebuie imersate complet n dezinfectantul corespunztor i
meninute ct este necesar, nainte de evacuare sau splare i sterilizare pentru reutilizare.
5. Tuburile (vacutainerele) care au coninut probele utilizate, coninnd cheaguri de snge,
etc trebuie introduse (cu dopul pus) ntr-un container impermeabil n vederea autoclavrii
i/sau incinerrii.
6. Trebuie s existe la ndemn dezinfectante adecvate pentru curarea stropilor i
lichidelor vrsate (vezi Capitolul 14).

65
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
12.8. Utilizarea centrifugii

1. Performanele mecanice bune sunt o condiie primordial pentru utilizarea centrifugilor n
condiii de siguran microbiologic.
2. Centrifuga trebuie utilizat cu respectarea instruciunilor productorului.
3. Centrifuga trebuie plasat astfel nct lucrtorii s poat vedea n interiorul cuvei acesteia
pentru a putea fixa corect suporturile pentru cupe i cupele cu probe.
4. Tuburile de centrifug i containerele cu probe care urmeaz a fi centrifugate trebuie s fie
confectionae din sticl groas sau preferabil din plastic i trebuie verificate pentru absena
de defecte nainte de utilizare.
5. Cupele de centrifug i containerele cu probe trebuie bine astupate/acoperite (de preferat
cu capace cu filet).
6. Cupele trebuie ncrcate, echilibrate, nchise i deschise ntr-o HSB.
7. Suporii pentru cupele de centrifug trebuie grupai cte doi, dup greutate i echilibrai
corect cu cupele n poziie.
8. Trebuie respectat (conform instruciunilor din manualul de utilizare) spaiul dintre nivelul
lichidului centrifugat i gura cupei.
9. Apa distilat sau alcoolul (propanol 70%) pot fi utilizate pentru echilibrarea cupelor goale.
Soluiile saline (ser fiziologic) sau de hipoclorit nu pot fi utilizate deoarece sunt corozive.
10. Numai tuburile de centrifug sau supori pentru cupe cu nchidere etan (cupe de
siguran) trebuie utilizate cnd se lucreaz cu microorganisme din grupele de risc 3 i 4.
11. La folosirea rotoarelor de centrifug angulare trebuie avut grij ca tuburile s nu fie
suprancrcate pentru a evita scurgerile.
12. Cuva centrifugii trebuie controlat zilnic, pentru a verifica eventuala apariie de urme de
culoare sau murdrie la nivelul corespunznd rotorului. n caz de murdrie evident,
trebuie reevaluate protocoalele de centrifugare.
13. Rotorul centrifugii i suporii pentru cupe trebuie examinate zilnic pentru a depista
eventualele corodri sau fisuri.
14. Rotorul, suporturile pentru cupe i cuva centrifugii trebuie decontaminate dup fiecare utilizare.
15. Dup utilizarea centrifugii, suporii pentru cupe trebuie pstrai (cu deschiderea n jos)
pentru scurgerea lichidului de echilibrare.
16. n timpul funcionrii unei centrifugi pot fi ejectai din aceasta aerosoli infecioi. Aceste
particule circul cu vitez prea mare pentru a putea fi reinute de fluxul de aer al HSB dac
centrifuga este plasat ntr-o hot tradiional cu deschidere frontal de Clasa I sau de
Clasa II. Izolarea centrifugilor n HSB de Clasa III previne dispersarea n afara hotei a
aerosolilor produi. Totui, o tehnic corect de centrifugare i folosirea cupelor sau
suporilor cu capace etane asigur o protecie adecvat mpotriva aerosolilor i
particulelor infecioase dispersate.
12.9. Utilizarea omogenizatoarelor, agitatoarelor, mixerelor/blenderelor i aparatelor de
ultrasonare
1. Omogenizatoarele obinuite (mixere de buctrie) nu pot fi utilizate n laborator deoarece
pot genera scurgeri i aerosoli. Blenderele i dispozitivele de tiere special concepute
pentru laborator sunt mai sigure.
2. Cupele si capacele sau sticlele trebuie pstrate n bune condiii, fr defecte. Capacele
trebuie s aiba garnitura bun i s poat fi bine nfiletate.
3. Presiunea n vas crete n timpul operaiilor de omogenizare, amestecare i ultrasonare.
Aerosolii coninnd material infecios se pot strecura ntre capac i vas. Vasele din plastic,
n special cele din politetrafluoroetilen (PTFE), sunt recomandate deoarece sticla se poate
sparge, elibernd material infecios i poate rni operatorul.

66
Tehnici DE
de laborator
12.12.TEHNICI
LABORATOR
4. In timpul funcionrii, omogenizatoarele, agitatoarele i aparatele de ultrasonare trebuie

acoperite cu un ecran/clopot rezistent, din plastic transparent, ce se dezinfecteaz dup
utilizare. Atunci cnd este posibil, aceste aparate trebuie utilizate sub ecranele lor de
plastic, n HSB.
5. La sfritul operaiilor, containerele trebuie deschise ntr-o HSB.
6. Cei ce lucreaz cu aparate de ultrasonare vor utiliza cti de protecie.
12.7. Utilizarea mojarelor i a omogenizatoarelor de esuturi
1. Dac se utilizeaz mojare/omogenizatoare din porelan/sticl, mna cu care se in trebuie
protejat cu mnu i un tampon de vat sau orice alt material absorbant. Mojarele din
plastic (PTFE) sunt mai sigure.
2. Mojararea i deschiderea omogenizatoarelor trebuie efectuat n HSB.
12.8. Utilizarea i ntreinerea frigiderelor i congelatoarelor
1. Frigiderele, congelatoarele i lzile cu ghea carbonic trebuie dezgheate i curate
periodic, iar fiolele, eprubetele etc. care s-au spart n timpul stocrii trebuie ndeprtate. n
timpul currii se vor folosi mti de protectie i mnui groase de cauciuc. Dup curare,
suprafeele interioare trebuie dezinfectate.
2. Toate containerele pstrate n frigider trebuie inscripionate clar cu denumirea stiinific a
materialului coninut, data stocrii i numele celui care a fcut stocarea. Materialele
nvechite i neinscripionate vor fi autoclavate i indeprtate.
3. Trebuie inut un inventar al tuturor materialelor pstrate n congelator.
4. Soluiile inflamabile nu trebuie stocate n frigider, dac acesta nu este rezistent la explozie..
Notie de avertizare n acest sens trebuie afiate pe ua frigiderului.
12.9. Deschiderea fiolelor coninnd material infecios liofilizat
Fiolele care conin material infecios liofilizat trebuie deschise cu precauie deoarece
coninutul poate s fie la o presiune sczut i deschiderea poate provoca o ptrundere brusc
de aer n interiorul fiolei, cu dispersia unei pri din coninut n atmosfera nconjurtoare. Fiolele
trebuie deschise ntotdeauna ntr-o HSB.
Sunt recomandate urmtoarele proceduri pentru deschiderea fiolelor:
1. Inti se decontamineaz suprafaa exterioar a fiolei.
2. Se pilete gtul fiolei la nivelul mijlocului dopului de bumbac sau celuloz dac fiola e
prevzut cu un astfel de dop.
3. Fiola se ine n vat mbibat cu alcool pentru a proteja mna de rnire, n momentul
deschiderii fiolei.
4. Vrful fiolei (cu eventualul dop) se ndeprteaz cu atenie i se consider a fi material
contaminat.
5. Daca dopul rmne n interior se ndeprteaz cu o pens steril.
6. Se adaug lichidul de reconstituire ncet pentru a mpiedica formarea spumei n fiol.
12.10. Pstrarea fiolelor coninnd material infecios
Fiolele coninnd material infecios nu trebuie niciodat introduse n azot lichid pentru
c cele fisurate sau nchise imperfect pot exploda la scoatere. Dac este recomandat
pstrarea la o temperatur foarte joas, fiolele pot fi stocate numai n faza gazoas, deasupra
azotului lichid. n caz contrar, materialul infecios trebuie pstrat n congelatoare sau n ghea
carbonic. Personalul de laborator trebuie s-i protejeze ochii i minile cnd scoate fiolele
stocate la temperatur joas.

67
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Suprafaa fiolelor pstrate n acest mod trebuie dezinfectat cnd fiolele sunt scoase
de la conservare.
12.11. Precauii standard privind sngele i alte lichide biologice, esuturi, secreii sau excreii.
Precauiile standard (care includ precauiile universale [19]) sunt destinate reducerii riscului
transmiterii microorganismelor din surse de infecie att cunoscute ct i necunoscute (2).
Colectarea, etichetarea i transportul probelor
1. Precauiile universale trebuie respectate ntotdeauna: se va lucra de fiecare dat cu
mnui de protecie.
2. Sngele trebuie recoltat de la pacieni i animale de ctre personal instruit.
3. Pentru flebotomie, acele clasice i sistemele cu sering trebuie nlocuite cu dispozitive de
unic folosin cu vid care permit recoltarea direct a sngelui n recipiente nchise de
transport sau de cultur i care fac imposibil reutilizarea acului.
Tuburile trebuie plasate n containere speciale pentru transportul ctre laborator (vezi capitolul
15 pentru cerinele de transport) i n cadrul laboratorului (vezi seciunea Transportul probelor
n laborator din acest capitol). Formularele de solicitare a prestaiilor de laborator trebuie
plasate separat n containerul de transport (n plicuri sau pungi impermeabile).
4. Personalul care face recepia probelor NU trebuie s deschid aceste plicuri .
Deschiderea tuburilor cu probe i repartizarea coninutului
1. Tuburile cu probe trebuie deschise ntr-o HSB .
2. Este obligatoriu s se foloseasc mnui. De asemenea, este recomandat protecia
ochilor i a mucoaselor (ochelari de protecie sau ecrane de protejare a feii).
3. mbrcmintea de protecie trebuie completat cu un or de plastic.
4. Dopul trebuie apucat printr-o bucat de hrtie sau tifon pentru a preveni mprocarea
(stropirea).
Sticlria i obiectele tietoare/neptoare (acele, seringile, acele hipodermice, pipetele
Pasteur)
Ori de cte ori este posibil, plasticul trebuie s nlocuiasc sticla. Vor fi folosite numai
obiectele din sticl special de laborator (borosilicat) i orice articol ciobit sau crpat trebuie
nlturat.
Nu vor fi utilizate pentru pipetare acele de sering (vezi i seciunea Evitarea
injectrii de material infecios din acest capitol).
Lamele i frotiurile pentru microscopie
Fixarea i colorarea frotiurilor de snge, sput, materii fecale pentru microscopie nu
omoar obligatoriu toate organismele sau virusurile de pe frotiu. Aceste obiecte trebuie
manipulate cu pensa, depozitate corespunztor i decontaminate i/sau autoclavate naintea
evacurii.
Echipamentul automatizat (aparate de ultrasonare, mixere, vortex-uri)
1. Echipamentul trebuie s fie de tip nchis, pentru a preveni dispersia picturilor mici i a
aerosolilor.
2. Reziduurile trebuie colectate n vase nchise n vederea autoclavrii i/sau evacurii
3. Echipamentul trebuie dezinfectat dup fiecare utilizare, urmnd instruciunile productorului.
6
68
TehniciDE
de LABORATOR
laborator
12.12.TEHNICI
esuturile
1. Formolul trebuie folosit ca fixator.
2. Secionarea probelor congelate trebuie evitat. Dac este necesar, criostatul trebuie s fie
ecranat, iar operatorul s poarte un ecran de protecie facial.
Pentru decontaminare, temperatura instrumentului trebuie s fie ridicat la cel puin
20q Celsius.
Decontaminarea
mare.
Pentru decontaminare se recomandte hipocloritul i dezinfectantele n concentraie
Soluiile de hipoclorit proaspt preparate trebuie s conin clor 1 g/l pentru uz general
i 5 g/l pentru decontaminarea sngelui.
Glutaraldehida poate fi folosit pentru decontaminarea suprafeelor (vezi Capitolul 14).
12.12. Precauii privind materialele ce ar putea conine prioni
Prionii (desemnai i ca virusuri lente) sunt asociai cu encefalopatiile spongiforme

transmisibile (TSE), cum ar fi maladia Creutzfeldt-Jakob (CJD, inclusiv noua variant,
sindromul Gerstmann -Straussler Scheinker), insomnia letal familial i boala Kuru la om,
Boala oii i caprei nebune, encefalopatia spongiform bovin (BSE) i alte encefalopatii
transmisibile la cprioare, elani i nurci. Dei CJD se transmite la om, nu este dovedit apariia
bolii n laborator ca urmare a manipulrii acestor ageni infecioi. Totui sunt necesare
precauii legate de manipularea materialului infecios sau potenial infecios provenind de la
oameni i animale.
Selectarea nivelului de biosiguran cnd se lucreaz cu materiale asociate TSE va
depinde de natura agentului i de probele de studiat i trebuie decis cu consultarea autoritii
naionale. Concentraia cea mai mare de prioni se gsete n esutul sistemului nervos central.
Studii pe animale sugereaz c se pot gsi concentraii ridicate de prioni i n splin, timus,
noduli limfatici i plmni. Studii recente arat c prionii din muchii scheletici i ai limbii pot
prezenta de asemenea un risc infectios potenial.
Deoarece inactivarea complet a prionilor este greu de realizat, este important s se
pun accent pe folosirea instrumentarului de unic folosin ori de cte ori este posibil i s se
foloseasc materiale de unic folosin pentru protecia suprafeei de lucru a HSB.
Principala precauie este prevenirea ingestiei de material contaminat sau neparea pielii celor
care lucreaz n laborator.
Deoarece prionii nu sunt somoris prin metodele obinuite de dezinfecie i sterilizare
din laborator, trebuie luate urmtoarele precauii suplimentare :
1. Folosirea de echipamente special destinate, care nu sunt folosite i n alte laboratoare,
este insistent recomandat.
2. Trebuie folosit mbrcminte de protecie de unic folosin (halate, oruri), precum i
mnui ( pentru anatomopatologi mnui din plas de oel, ntre dou de cauciuc ).
3. Este insistent recomandat folosirea obiectelor de unic utilizare din plastic ce pot fi tratate
i evacuate ca deeuri uscate (vezi mai jos)
4. Dispozitivele de procesare a esuturilor nu se utilizeaz din cauza problemelor pe care le
ridic dezinfecia lor. n locul lor se utilizeaz borcane i pahare de plastic.
5. Toate manipulrile se fac n HSB.
6. Trebuie avut mult grij pentru evitarea producerii de aerosoli, ingestiei accidentale i
tierii sau neprii pielii.

69
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
7. esuturile fixate cu formol trebuie considerate n continuare infecioase, chiar dup

expunere ndelungat la aciunea formolului.
8. Probele histologice coninnd prioni sunt n mare msur inactivate dup expunerea la
acid formic 96% timp de 1or.
9. Deeurile, inclusiv mnuile, halatele i orurile de unic folosin, trebuie autoclavate
folosind un sterilizator cu aburi la 134-137qC pentru un singur ciclu de 18 min sau 6 cicluri
succesive a cte 3 min. fiecare, apoi incinerate.
10. Instrumentarul reutilizabil (cum ar fi mnuile din plas de oel) trebuie colectate pentru
decontaminare.
11. Reziduurile lichide infecioase contaminate cu prioni trebuie tratate cu soluie de hipoclorit
de sodiu coninnd clor liber n concentraie final de 20g/l (2%) timp de 1 or
12. Procedura de vaporizare cu paraformaldehid nu diminueaz titrul prionilor iar acetia
sunt rezisteni la radiaiile UV. Cu toate acestea, hota trebuie decontaminat prin metode
standard (ex. formaldehid gazoas) pentru inactivarea altor microorganisme ce pot fi
prezente.
13. HSB contaminate cu prioni i celelalte suprafee pot fi decontaminate cu hipoclorit de sodiu
20g/l (2%) timp de 1 or .
14. Filtrele HEPA trebuie incinerate la minimum 1000qC dup scoatere. Aciunile recomandate
nainte de incinerare :
a. pulverizarea cu lac de pr spray a feei expuse a filtrului, nainte de a-l scoate ;
b. acoperirea filtrului cu un sac de plastic n momentul scoaterii ;
c. scoaterea filtrului HEPA din camera de lucru astfel nct restul hotei s nu fie
contaminat.
15. Instrumentarul trebuie inut n soluie de hipoclorit de sodiu coninnd clor liber 20g/l (2%)
timp de 1 or, apoi cltit bine cu ap naintea autoclavrii.
16. Instrumentarul ce nu poate fi autoclavat se cur prin splare repetat cu soluie de
hipoclorit de sodiu coninnd clor liber 20g/l (2%) timp de > 1 or. Cltirea instrumentarului
este necesar pentru ndeprtarea hipocloritului de sodiu rezidual.
Pentru orice alte informaii privind manipularea agenilor neconvenionali vezi
referinele 12, 26 i 27.

70
13. Planuri pentru intervenii n caz de accidente i

msuri de urgen
Fiecare laborator care lucreaz cu materiale infecioase trebuie s instituie msuri de

siguran adaptate gradului de periculozitate al organismelor i animalelor manipulate.
Existena unui plan scris pentru msurile de aplicat n caz de accidente n laborator sau n
biobaz este o necesitate n orice instituie care manipuleaz sau gzduiete microorganisme
din grupurile de risc 3 sau 4 (laborator de biosiguran securizat - nivelul 3 i laborator nalt
securizat - nivelul 4). Autoritile sanitare locale i/sau naionale trebuie s se implice n
elaborarea planurilor de intervenie n caz de accidente.
13.1. Planul de intervenie n caz de accidente
Planul de intervenie n caz de accidente trebuie s cuprind proceduri operaionale
privind:
1. precauii pentru prevenirea i limitarea urmrilor dezastrelor naturale, de exemplu: incendii,
inundaii, cutremure i explozii
2. evaluarea riscului de contaminare biologic
3. conducerea i coordonarea aciunilor n caz de expunere la accidente i al celor de
decontaminare
4. evacuarea de urgen a populaiei i a animalelor din zona afectat
5. tratamentul medical de urgen al rniilor i al persoanelor expuse la infecii
6. supravegherea medical a persoanelor expuse
7. organizarea adecvat a spitalizrii persoanelor expuse
8. msurile de investigaie epidemiologic
9. continuarea operaiunilor dup incident
n alctuirea acestui plan trebuie incluse urmtoarele obiective:
1. identificarea organismelor cu risc crescut
2. localizarea ariilor de risc maxim, de exemplu: laboratoare, spaiile de depozitare, biobazele
3. identificarea personalului i a populaiei la risc
4. nominalizarea personalului cu responsabiliti i a atribuiilor acestuia, de ex: persoana
responsabil de biosiguran, personalul de securitate, autoritatea local de sntate, medici,
microbiologi, veterinari, epidemiologi i serviciile de pompieri i poliie
5. listele cu unitile medicale ce pot asigura tratamentul i izolarea persoanelor expuse sau infectate
6. transportul persoanelor expuse sau infectate
7. listele cu sursele de seruri imune, vaccinuri, medicamente, echipamente speciale i
materiale consumabile
8. aprovizonarea cu echipament de urgen, de ex.: mbrcminte de protecie, dezinfectante,
truse personale pentru tratarea contaminrilor cu substante chimice i biologice, echipament i
materiale pentru decontaminare.
13.2. Msuri de urgen pentru laboratoarele de microbiologie
Rni prin nepare, tiere i zgriere
Individul afectat trebuie s scoat mbrcmintea de protecie, s se spele pe mini i
pe prile afectate, s aplice dezinfectantul corespunztor i s solicite asisten medical dac
71
71
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARE
este nevoie. Cauza rnii i microorganismele implicate trebuie raportate, i se vor pstra
consemnri medicale complete i conforme cu cele ntmplate.
Ingestia accidental de produse potenial periculoase
mbrcmintea de protecie trebuie s fie nlturat i trebuie solicitat asisten
medical. Identificarea produsului ingerat i circumstanele n care s-a petrecut incidentul
trebuie raportate. Se vor pstra consemnri medicale complete i conforme cu cele ntmplate
trebuie.
Eliberarea de aerosoli potenial periculoi (n exteriorul unei HSB)
Toate persoanele trebuie imediat evacuate din aria contaminat i orice persoan
expus trebuie supus unui control medical. eful laboratorului i persoana rspunztoare de
biosiguran trebuie informai imediat. Nimeni nu trebuie s intre n camer pentru o perioad
de timp corespunztoare (ex. 1 or), pentru a permite evacuarea aerosolilor i depunerea
particulelor mai grele.
Dac laboratorul nu are sistem central de evacuare a aerului, intrarea n laborator
trebuie amnat (ex. pentru 24 h).
Trebuie afiate semnalizri care s indice c intrarea este interzis. Dup timpul
necesar trebuie efectuat decontaminarea, care va fi supervizat de responsabilul cu
biosigurana. Pentru acest scop trebuie purtat mbrcminte de protecie i dispozitiv pentru
protecie respiratorie.
Recipiente sparte si substane infecioase vrsate
Recipientele contaminate cu substane infecioase care s-au spart i substanele
infecioase rspndite trebuie acoperite cu crpe sau prosoape de hrtie. Dezinfectantul se
toarn peste acestea i se las att ct este necesar. Crpele sau prosoapele de hrtie
precum i obiectele sparte pot fi apoi ndeprtate; fragmentele de sticl trebuie apucate i
ndeprtate cu pense. Suprafaa contaminat trebuie apoi tears cu dezinfectant. Dac a fost
utilizat un fra pentru ndeprtarea obiectelor sparte, acesta trebuie autoclavat sau imersat
ntr-un dezinfectant corespunztor. Crpele, prosoapele de hrtie i tampoanele utilizate pentru
curare trebuie aruncate n containerul pentru deeuri contaminate. Pentru toate aceste
proceduri trebuie folosite mnui de protecie.
Dac formularele i alte materiale tiprite sau scrise au fost contaminate, informaia
trebuie copiat n alte formulare iar originalele trebuie aruncate n containerul pentru deeuri
contaminate.
Spargerea eprubetelor cu material potenial infecios n centrifugi fr cupe sau supori
nchii etan
Dac n timpul centrifugrii se sparge eprubeta sau se suspecteaz spargerea
acesteia, centrifuga se va opri i se va lsa n repaus, nchis (ex. pentru 30 minute) pentru a
permite depunerea.
Dac se observ spargerea dup terminarea centrifugrii, capacul trebuie nchis
imediat la loc i lsat astfel (ex. pentru 30 minute). n ambele cazuri trebuie informat persoana
responsabil cu biosigurana.
Pentru operaiunile ulterioare trebuie purtate mnui din cauciuc gros, acoperite dac
este necesar cu mnui de unic folosin. Pentru a ndeprta cioburile de sticl se utilizeaz
pense sau pense cu tampon de vat.
Toate eprubetele sparte, cioburile de sticl, cupele, suporii pentru cupe i rotorul
centrifugii trebuie introduse ntr-un dezinfectant necoroziv cunoscut a fi activ mpotriva
72
72
13. Planuri
pentru
interveniiN
n CAZ
caz de
i msuri
de urgen
13. PLANURI
PENTRU
INTERVENII
DEaccidente
ACCIDENTE
I MSURI
DE URGEN
microorganismului implicat (vezi Capitolul 14). Eprubetele cu dop nesparte se pun n

dezinfectant ntr-un vas separat. Cuva centrifugii trebuie curat cu acelai tip de
dezinfectant, utilizat n diluia necesar, apoi tears din nou, splat cu ap i uscat. Toate
materialele care au fost folosite pentru curare trebuie tratate ca deeuri infecioase.
Spargerea eprubetelor n cupele nchise etan
Toate cupele de centrifug care se nchid etan trebuie umplute i golite ntr-o HSB.
Dac se suspecteaz o spargere n interiorul suportului pentru cupe nchis etans, capacul
acesteia trebuie deurubat puin, iar cupa trebuie autoclavat. Alternativ, se poate face o
dezinfecie chimic a cupei i a suportului.
Incendiile i dezastrele naturale
Pompierii i alte instituii trebuie implicate n elaborarea planurilor de intervenie n caz
de urgen. Acetia trebuie informai dinainte care ncperi conin materiale potenial
infecioase. Este recomandabil ca aceste servicii s viziteze laboratorul pentru a cunoate
planul i interiorul acestuia.
Dup un dezastru natural, serviciile de urgen local sau naional trebuie prevenite
asupra pericolelor poteniale din cldirile laboratorului i/sau din mprejurimile acestora.
Personalul acestor servicii poate intra n laborator numai nsoit de un angajat instruit al
laboratorului. Materialele infecioase trebuie colectate n cutii impermeabile pentru lichide sau
n saci groi de unic folosin. Recuperarea sau eliminarea trebuie decise de personalul
responsabil cu biosigurana, pe baza informaiilor de la locul accidentului.
Serviciile de urgen: persoanele de contact
Lng telefoanele din instituie trebuie afiate numerele de telefon i adresele
urmtoare:
1. Laboratorul sau instituia (adresa i locaia s-ar putea s nu fie cunoscut n detaliu de
ctre cel care sun sau serviciul apelat)
2. Directorul instituiei
3. eful laboratorului
4. Responsabilul cu biosigurana
5. Pompierii
6. Spitalul sau serviciul de ambulan sau personalul medical (numele clinicii,
departamentele, i/sau personalul medical dac este posibil)
7. Poliia
8. Responsabilul pentru probleme medicale al instituiei (laboratorului)
9. Tehnicianul ef
10. Serviciile de ap, gaz i electricitate
Echipament de urgen
Pentru cazurile de urgen trebuie s existe la ndemn urmtorul echipament de
protecie:
1. Trusa de prim ajutor care s includ antidoturi universale i speciale
2. Extinctoare, pturi ignifuge
n funcie de circumstanele locale, se recomand i urmtorul echipament de urgen
care poate fi adaptat n funcie de particularitile locale:
73
73
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARE
1. mbrcminte complet pentru protecie (salopet, mnui, echipament de protecie a

capului (glugi), acestea fiind utilizate n cazul incidentelor cu microorganisme din grupurile de
risc 3 i 4)
2. masc respiratorie cu filtre specifice chimice i pentru particule
3. aparat de dezinfecie a camerei, de exemplu: spray i vaporizator cu formaldehid
4. targ
5. unelte, de ex.: ciocan, topor, chei mecanice, urubelni, scar, frnghie
6. echipamente i afie/pancarte pentru delimitarea zonei de pericol.
Pentru alte informaii vezi referinele 12 i 28.
74
74
14. Dezinfecia i sterilizarea
Cunotinele de baz privind dezinfecia i sterilizarea sunt extrem de importante

pentru sigurana biologic n laborator. Din moment ce obiectele puternic contaminate nu pot fi
dezinfectate eficient i nici sterilizate cu uurin, este la fel de important i nelegerea
principiilor precurrii, operaie anterioar dezinfeciei. Din acest punct de vedere, capitolul de
fa este dedicat principiilor generale care se aplic tuturor claselor de microorganisme
patogene, cu excepia notabil a prionilor.
Cerinele specifice pentru decontaminare vor depinde de tipul activitii i de tipul de
agent(i) infecios(i) cu care se lucreaz. Prin urmare, este necesar s fie folosite informaiile
generale prezentate aici, pentru a elabora att proceduri standard ct i msuri specifice
adaptate particularitilor de periculozitate din fiecare laborator.
Timpii de contact pentru dezinfectante sunt specifici pentru fiecare substan, sunt
precizai n prospectele produselor i vor fi utilizai conform indicaiilor productorilor.
14.1. Definiii
n procesele de decontaminare i sterilizare n condiii de siguran biologic sunt
utilizai numeroi termeni. Dintre acetia enumerm pe cei mai frecvent utilizai:
x Antimicrobian - un agent care omoar microorganismele sau le suprim creterea i
multiplicarea.
x Antiseptic o substan care inhib creterea i dezvoltarea microorganismelor fr s
le omoare neaprat. Antisepticele se aplic uzual pe suprafaa corpului.
x Biocid un termen general care se aplic oricrui agent care ucide organismele.
x Germicid chimic o substan chimic sau un amestec de substane chimice utilizat
pentru omorrea microorganismelor.
x Decontaminare orice proces utilizat pentru ndeprtarea i/sau omorrea
microorganismelor. Acelai termen se aplic i pentru ndeprtarea sau neutralizarea
substanelor chimice periculoase i a materialelor radioactive.
x Dezinfectant o substan chimic sau un amestec de substane chimice utilizate
pentru omorrea microorganismelor, dar nu neaprat i a sporilor acestora.
Dezinfectantele sunt de obicei aplicate pe suprafee sau obiecte inerte.
x Dezinfecie metodele fizice sau chimice utilizate pentru omorrea microorganismelor,
dar nu neaprat i a sporilor acestora.
x Microbicid o substan chimic sau un amestec de substane chimice care omoar
microorganismele. Acest termen se utilizeaz adesea n loc de biocid, germicid, sau
antimicrobian.
x Sporocid - o substan chimic sau un amestec de substane chimice care omoar
microorganismele i sporii.
x Sterilizare proces care omoar i/sau ndeprteaz toate clasele de microorganisme
i sporii.
14.2. Precurarea i curarea materialelor de laborator
n termeni practici, curarea este ndeprtarea murdriei, materiilor organice si a
coloranilor. Curarea include perierea, aspirarea sau curarea de praf uscat, splarea sau
tergerea umed cu ap i spun sau detergent.

75
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Acolo unde riscul de contaminare cu microorganisme patogene este crescut i este

necesar decontaminarea, precurarea este o manevr de rutin. Aceasta este necesar
deoarece petele i murdrirea cu substane organice pot forma un scut de protecie pentru
microorganisme, i astfel interfer cu aciunea distrugtoare a decontaminanilor (antiseptice,
germicide chimice si dezinfectani).
n aceste cazuri, precurarea, este esenial pentru a asigura o dezinfecie sau
sterilizare corespunztoare. Se tie c multe produse germicide sunt eficiente numai asupra
materialelor precurate. Precurarea trebuie efectuat cu precauii deosebite, pentru a evita
expunerea la ageni patogeni.
Dup precurare, pentru curarea i dezinfecia propriu-zis trebuie s fie aplicate
substane chimice cu aciune germicid.
Pentru precurare i dezinfecie este important s se utilizeze substane germicide
chimice compatibile ntre ele. Adeseori se folosesc n aceste scopuri aceleai substane.
14.3. Germicidele chimice
Multe tipuri de substane chimice pot fi utilizate ca dezinfectante i/sau antiseptice.
Numrul produselor comercializate este n continu cretere. Compoziiile acestora trebuie
selectate cu grij n funcie de nevoile specifice.
Activitatea germicid a multor substane chimice este rapid i eficient la temperaturi
nalte. n acelai timp ns, temperaturile nalte pot accelera evaporarea i degradarea
substanelor folosite.
Multe germicide pot fi duntoare oamenilor, animalelor i mediului nconjurtor. De
aceea trebuie alese, manipulate, depozitate i evacuate cu foarte mult grij, respectndu-se
recomandrile productorului. Pentru sigurana personalului se impune utilizarea de mnui,
halate i ochelari de protecie, atunci cnd se prepar soluiile diluate ale acestor germicide.
De regul, germicidele chimice nu sunt recomandate pentru curarea de rutin a
podelelor, pereilor, echipamentelor i mobilierului. Ele pot fi totui utilizate n cazuri
excepionale, cum ar fi focarele de boli infecioase.
Utilizarea corespunztoare a germicidelor chimice contribuie la sigurana locului de
munc, prin reducerea riscului de expunere a personalului i a mediului la agenii infecioi.
Pe ct posibil, numrul germicidelor chimice utilizate va fi limitat din raiuni economice,
de simplificare a aprovizionrii i inventarului i pentru limitarea polurii mediului.
Clasele cele mai utilizate de germicide chimice sunt descrise n cele ce urmeaz, cu
prezentarea informaiilor generale n ceea ce privete utilizarea i sigurana manipulrii.
Concentraiile germicide sunt redate n termeni de greutate pe volum (g/v), cu unele excepii
menionate la locul potrivit. Tabelul 12 rezum diluiile de lucru recomandate pentru compuii
care degaj clor.
Tabel 12. Diluiile recomandate ale produselor pe baz de clor
Condiii murdrieb)
Condiii curatea)
Concentraie de clor necesar
0,1% (1g/l)
0,5% (5g/l)
Soluie de hipoclorit de Na (5% Cl)
20 ml/l
100 ml/l
Hipoclorit de Ca (70% Cl)
1,4 g/l
7.0 g/l
Diclor-izocianurat de Na pudr (60% Cl)
1,7 g/l
8,5 g/l
Diclor-izocianurat de Na tablete (1,5 g Cl/tablet)
o tablet /litru
4 tablete/litru
Cloramina (25% Cl) c)
20 g/l
20 g/l
a) Dup precurare (ndeprtarea grosului materialului organic (ex. snge)
b) Se toarn peste materialul organic (ex. snge nainte de ndeprtarea acestuia)
c) Vezi textul

76
Dezinfecia I
i sterilizarea
14.14.
DEZINFECIA
STERILIZAREA
Clorul (hipoclorit de Na)

Clorul este un oxidant puternic i rapid, cu spectru larg de utilizare. Este comercializat
n mod normal, ca nlbitor: o soluie de hipoclorit de Na (NaOCl), care poate fi diluat cu ap
pentru a obine soluii de diferite concentraii.
Soluia clorinat, n mod special sub forma de nlbitor, este foarte alcalin i poate fi
corosiv pentru metal. Aciunea sa este redus considerabil de unele substane organice
(proteine). Pstrarea soluiilor stoc sau de lucru se va face n containere nchise, deoarece
cnd acestea sunt deschise, mai ales la temperaturi crescute elibereaz Clorul, reducndu-se
potenialul lor germicid. Frecvena cu care aceste soluii de nlbire trebuie rennoite, depinde
de concentraia lor iniial, de mrimea i tipul recipientelor n care sunt inute (de ex. cu sau
fr capac etan), frecvena i condiiile utilizrii, de condiiile de mediu. Ca regul general se
recomand ca soluiile de hipoclorit utilizate pentru materiale murdrite cu cantiti importante
de substane organice s fie schimbate la fiecare 24 de ore cu altele proaspete, n timp ce
soluiile folosite mai rar pot fi schimbate mai rar (la cel mult o sptmn).
Un dezinfectant de uz general pentru toate scopurile laboratorului trebuie s aib o
concentraie de 1 g/l clor disponibil. O soluie mai puternic, coninnd 5 g/l clor disponibil este
recomandat pentru decontaminarea suprafeelor contaminate, n prezena de materii
organice. Soluia de hipoclorit de Na, ca nlbitor casnic, conine 50 g/l clor i trebuie diluat
1:50 sau 1:10 pentru a obine concentraii finale de 1 g/l i, respectiv, de 5 g/l, respectiv.
Soluiile industriale de nlbitor au o concentraie de hipoclorit de Na apropiat de 120 g/l i
trebuie diluate corespunztor pentru a se obine concentraiile indicate mai sus.
Granulele sau tabletele de hipoclorit de Ca (Ca(ClO)2) conin de obicei, peste 70% Cl
disponibil. Soluiile preparate din tablete sau granule coninnd 1,4 g/l i 7,0 g/l, trebuie s aib
concentraii de Clor de 1 g/l i respectiv 5 g/l.
nlbitorul nu este recomandat ca antiseptic, dar poate fi utilizat pe scar larg ca
dezinfectant de uz general i pentru obiectele nemetalice. n condiii de urgen, nlbitorul
poate fi utilizat pentru dezinfectarea apei potabile, ntr-o concentraie final de Cl disponibil de
1-2 mg/l.
Clorul gazos este foarte toxic. Soluiile clorinate trebuie depozitate i utilizate numai n camere
bine aerisite. De asemenea, ele nu trebuie amestecate cu acizi, pentru c elibereaz foarte
repede clorul gazos. Multe derivate de clor pot fi vtmtoare pentru om i mediul
nconjurtor, de aceea trebuie evitat utilizarea abuziv a acestora, n special a hipocloritului
de sodiu.
Diclorizocianuratul de Na
Diclorizocianuratul de Na (NaDCC) sub form de pulbere conine 60 % clor. Soluiile
preparate cu NaDCC pulbere la 1,7 g/l i 8,5 g/l conin 1 g/l sau respectiv 5 g/l clor. Tabletele
de NaDCC conin echivalentul a 1,5 g Cl / tablet. Prin dizolvarea unei tablete sau a 4 tablete
ntr-un litru de ap, se vor obine concentraiile de lucru: 1 g/l sau 5 g/l. NaDCC sub form de
pulbere sau tablete este foarte uor i sigur de depozitat. NaDCC poate fi aplicat ca atare (n
stare solid) pe petele de snge sau alte lichide contaminate, lsndu-l cel puin 10 minute
nainte de a fi ndeprtat.
Cloraminele
Cloraminele sunt disponibile sub form de pulbere coninnd aproximativ 25% clor.
Cloraminele elibereaz clor ntr-o proporie mai mic dect hipocloritul. Prin urmare pentru o
eficien echivalent cu cea a hipocloritului se impun concentraii iniiale superioare de
cloramin. Pe de alt parte ns, soluiile de cloramin nu sunt inactivate de materia organic,

77
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
n aceeai msur ca soluiile de hipoclorit. Se recomand utilizarea concentraiei de 20 g/l

pentru ambele situaii: pe suprafee curate i suprafee murdare.
Soluiile de cloramin sunt n principiu inodore. Cu toate acestea, obiectele nmuiate n
aceste soluii trebuie cltite insistent, pentru a fi ndeprtat orice urm de substan adjuvant
adugat de productori pulberii de cloramin T (sodium tosylchloramid).
Dioxidul de clor
Dioxidul de clor (ClO2) este un germicid puternic cu aciune imediat, adesea activ la
concentraii mai joase dect cele de hipoclorit recomandate. Dioxidul de clor este instabil sub
forma de gaz i se descompune n clor gazos (Cl2) i oxigen gazos (O2), cu degajare de
cldur. Totui, dioxidul de clor este solubil n ap i este stabil sub forma de soluie apoas. El
se poate obine fie prin amestecarea de acic clorhidric i clorit de sodiu (NaClO2), fie se poate
comanda sub forma de soluie apoas stabilizat, care este activat n momentul folosirii.
Dintre biocidele cu efect oxidant, dioxidul de clor, este oxidantul cel mai selectiv.
Ozonul i clorul sunt mult mai reactive dect dioxidul de clor i se vor consuma mai rapid n
cazul deeurilor care conin substante organice n cantitate mare ; el reacioneaza selectiv, n
special asupra compuilor sulfurici, aminelor secundare i teriare i asupra altor compui
organici intens redui. Ca urmare, folosind dioxid de clor se poate asigura o cantitate mai
stabil de clor rezidual cu doze mult mai mici dect dac s-ar fi folosit clor sau ozon. Dac se
recurge la un sistem adecvat de generare a sa, dioxidul de clor poate fi folosit cu mai mult
eficacitate dect clorul sau ozonul n prezena unor ncrcturi organice importante, tocmai
datorit selectivitii aciunii sale.
Formaldehida
Formaldehida (HCHO) este un gaz care distruge microorganismele i sporii acestora,
la temperaturi mai mari de 20C. Formaldehida nu este activ fa de prioni, are o vitez de
aciune relativ redus i necesit o umiditate relativ mai mare de 70%. Este vndut, fie sub
form de polimer solid ( para-formaldehid), ca fulgi sau tablete, fie ca formol - o soluie a
gazului n ap de aproximativ 370 g/l (37%), coninnd metanol (100 ml/l) ca stabilizator.
Ambele forme sunt nclzite pentru a elibera gazul, care este utilizat pentru decontaminarea i
dezinfecia spaiilor nchise, cum ar fi hotele de biosiguran (HSB) i alte incinte sau ncperi
(vezi mai jos seciunea intitulat Decontaminarea spaiului nconjurtor). Formaldehida (5%
formol n ap) poate fi utilizat ca dezinfectant lichid.
Formaldehida este suspectat a fi cancerigen. Are un miros neptor, iar vaporii si
pot irita ochii i mucoasele. De aceea, trebuie depozitat i utilizat n nie speciale de
protecie chimic (hote chimice) sau ncperi foarte bine aerisite.
naintea utilizrii trebuie consultate regulile i normele naionale de folosire precum i
precauiile ce in de sigurana chimic.
Glutaraldehida
Ca i formaldehida, glutaraldehida (OHC(CH2)3CHO) este de asemenea activ
mpotriva formelor vegetative ale bacteriilor, sporilor, ciupercilor, precum i a viruilor ce conin
lipide, dar i a celor fr lipide. Este necoroziv i reacioneaz mai rapid dect formaldehida.
Cu toate acestea, sunt necesare cteva ore pentru a distruge sporii bacterieni.
n general, este furnizat ca o soluie cu concentraie de aprox. 20 g/l (2%). Majoritatea
acestor produse trebuie activate (alcalinizate) nainte de utilizare, prin adugare de
bicarbonat, furnizat mpreun cu produsul. Soluia activat poate fi utilizat timp 1- 4 sptmni
de la preparare, n funcie de activare, condiiile i frecvena utilizrii. Baghetele de scufundat n

78
Dezinfecia i
14.14.DEZINFECIA
I sterilizarea
STERILIZAREA
soluie pentru a afla dac mai este activ, furnizate de unii productori, dau numai indicaii
orientative. Soluiile de glutaraldehid trebuie aruncate, dac devin tulburi.
Glutaraldehida este toxic i iritant pentru piele i mucoase; de aceea, contactul cu
acestea trebuie evitat. Glutaraldehida se utilizeaz numai sub ni (hot) sau n spaii bine
aerisite. Nu este recomandat sub form pulverizat sau soluii pentru decontaminarea
suprafeelor din mediu.
naintea utilizrii trebuie consultate regulile i normativele naionale de folosire precum
i precauiile ce in de sigurana chimic.
Compuii fenolici
Compuii fenolici, un grup larg de ageni au fost printre primele germicide folosite. n
ciuda acestui fapt, anumite probleme recente pe care le ridic sigurana utilizrii lor,
recomand restrngerea folosirii. Sunt activi mpotriva formelor vegetative ale bacteriilor i
asupra virusurilor ce conin lipide. n cazul unei formulri corespunztoare, compuii fenolici
prezint activitate i mpotriva mycobacteriilor. Nu sunt activi mpotriva sporilor, iar activitatea
asupra virusurilor non-lipidice (nenvelite sau nude) este variabil. Muli produi fenolici sunt
utilizai pentru decontaminarea suprafeelor de lucru i a celor ambientale; triclosanul i cloroxylenolul fac parte din soluiile antiseptice cele mai utilizate.
Triclosanul se regsete frecvent n produsele destinate splrii minilor. El este activ
cu precdere mpotriva bacteriilor vegetative i nu este duntor pielii i mucoaselor. Cu toate
acestea, studiile de laborator au demonstrat c bacteriile care au devenit rezistente la
concentraii mici de triclosan, prezint de asemenea rezisten la unele antibiotice. Importana
acestei descoperiri pentru utilizarea fenolilor n teren nu a fost nc evaluat.
Anumiti compusi fenolici sunt sensibili si pot fi inactivati de srurile din apa dur; de
aceea se recomand ca diluarea lor s se fac cu ap distilat sau ap deionizat.
Compuii fenolici nu sunt recomandai pentru suprafeele care vin n contact cu
mncarea, precum i pentru spaiile destinate copiilor mici (pot fi absorbii de cauciuc i pot
ptrunde n piele). Se vor respecta i reglementrile de siguran chimic.
Compuii de amoniu cuaternari
Multe tipuri de compui de amoniu cuaternari sunt utilizai sub form de amestecuri i
deseori n combinaie cu alte substane germicide, cum ar fi alcoolul. Acetia prezint o bun
activitate mpotriva formelor vegetative ale bacteriilor i a virusurilor lipidice. Anumite tipuri (ex.
clorura de benzalconiu) sunt folosite ca antiseptice.
Activitatea germicid a anumitor tipuri de compui de amoniu cuaternari este
considerabil redus de ctre substanele organice, apa cu duritate mare sau de detergenii
anionici. Prin urmare atunci cnd se intenioneaz utilizarea acestor produi pentru dezinfecie
este necesar alegerea cu grij a produselor pentru precurare. Unele bacterii potenial
patogene se pot dezvolta n soluiile de compui cuaternari de amoniu. Datorit
biodegradabilitii reduse, aceti compui se pot acumula n mediul nconjurtor.
Alcoolii
Etanolul (C2H5OH) i 2-propanolul (izopropil alcoolul, (CH3)2CHOH) au proprieti
dezinfectante similare. Ei sunt activi mpotriva formelor vegetative ale bacteriilor, ciupercilor
precum i mpotriva virusurilor lipidice (nvelite), dar nu i mpotriva sporilor. Aciunea lor
mpotriva virusurilor nude este variabil. Pentru o mai mare eficien alcoolii trebuie utilizai la o
concentraie de aproximativ 70% (v/v) n soluie apoas. Concentraiile mai mici sau mai mari

79
ghid naional
de biosiguran
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758pentru
LABORATOARE
pot s nu aib aceeai aciune germicid. Soluiile alcoolice nu las nici un reziduu pe
suprafeele de lucru sau pe obiectele tratate, ceea ce reprezint un avantaj major.
Amestecurile cu alte substane chimice sunt de asemenea mai eficiente dect alcoolul
singur, de exemplu: alcool 70% (v/v) cu 100 g/l formaldehid sau alcool coninnd 2 g/l clor.
O soluie alcoolic de 70% (v/v) etanol poate fi utilizat pentru piele, suprafee de
lucru ale meselor de laborator i din hotele de biosiguran, precum i pentru imersarea
diferitelor instrumente chirurgicale. Deoarece etanolul usuc pielea, adeseori se amestec cu
substane emoliente. Frecarea/splarea minilor cu alcool este recomandat pentru
decontaminarea minilor uor murdare, n situaiile n care splatul minilor nu este posibil.
Oricum trebuie avut n minte c etanolul este ineficient mpotriva sporilor i poate s nu
distrug toate tipurile de virusuri nude.
Alcoolii sunt substane volatile, uor inflamabile i este bine s nu fie utilizate lng
flcri deschise. Soluiile de lucru trebuie s fie depozitate n containere adecvate pentru a
mpiedica evaporarea alcoolilor. Acetia pot ntri cauciucul i dizolv anumite tipuri de lipici.
Este foarte important inventarierea i depozitarea adecvat a etanolului n laborator pentru a
se evita utilizarea acestuia n alte scopuri dect cele de dezinfectare. Sticlele cu soluii pe baz
de etanol trebuie s fie etichetate vizibil, pentru a evita autoclavarea din greeal.
Iodul i substanele iodate
Aciunea acestor dezinfectani este similar cu cea a clorului, dei sunt n general mai
putin inhibai de substanele organice. Iodul poate pta suprafeele de lucru i esturile i n
general nu este recomandat ca dezinfectant. Pe de alt parte, soluiile iodate i tincturile sunt
antiseptice bune. n general, antisepticele pe baz de iod nu sunt recomandate pentru
ustensilele medicale i stomatologice. Iodul nu trebuie utilizat pe obiectele din aluminiu sau
cupru.
Iodul poate fi toxic. Produsele organice pe baz de iod trebuie depozitate la 4 - 10C
pentru a mpiedica dezvoltarea n ele a unor bacterii potenial nocive.
Peroxidul de hidrogen i peracizi
Ca i cloramina, peroxidul de hidrogen (H2O2) i peracizii sunt oxidani puternici i
germicide puternice cu spectru larg de aciune. De asemenea, acestea produse sunt mai puin
duntoare dect cloramina att pentru oameni ct i pentru mediul nconjurtor. Peroxidul de
hidrogen este furnizat fie ca soluie gata de utilizare n concentraie 3%, fie ca soluie apoas
de concentraie 30 %, care trebuie diluat ulterior cu ap distilat, de 5 pn la 10 ori volumul
su. Cu toate acestea soluiile de peroxid de hidrogen cu concentraie 3-6%, sunt relativ lente
i cu aciune germicid limitat. Produsele disponibile la ora actual conin stabilizatori speciali
ai concentraiei de peroxid de hidrogen , ceea ce duce la accelerarea aciunii germicide i le
face mai putin corozive.
Peroxidul poate fi utilizat pentru decontaminarea suprafeelor de lucru, a meselor de
laborator i a hotelor de biosiguran. Soluiile n concentraie mai ridicat pot fi utilizate pentru
dezinfectarea instrumentarului medical sau stomatologic sensibil la cldur. Utilizarea
peroxidului de hidrogen vaporizat sau a acidului peracetic (CH3COOOH) pentru
decontaminarea instrumentelor (dispozitivelor) medicale / chirurgicale termosensibile necesit
un echipament adecuat.
Peroxidul de hidrogen i peracizii pot avea aciune coroziv asupra metalelor cum ar fi
aluminiul, cuprul, alama i zincul i pot de asemenea decolora esturile, prul, pielea i
mucoasele. Articolele tratate cu aceste substane trebuie cltite riguros cu ap, nainte de a
veni n contact cu ochii i mucoasele. Aceste substane trebuie depozitate n spaii protejate de
cldur i lumin.

80
Dezinfecia I
i sterilizarea
14.14.
DEZINFECIA
STERILIZAREA
14.4. Decontaminarea mediului de lucru (laboratorului)

Decontaminarea laboratorului, a mobilierului i a echipamentului acestuia necesit o
combinaie de dezinfectani lichizi i gazoi. Suprafeele pot fi decontaminate prin utilizarea
unor soluii de hipoclorit de sodiu coninnd 1g/l clor activ. Soluii mai puternice cu o
concentraie de 5g/l sunt recomandate pentru decontaminarea suprafeelor cu risc crescut.
Pentru decontaminarea spaiului de lucru soluii coninnd 3% peroxid de hidrogen pot fi
utilizate ca nlocuitori pentru soluiile de nlbitor.
ncperile i echipamentele pot fi decontaminate prin fumigare cu gaz de formaldehid,
generat prin nclzirea para-formaldehidei sau prin fierberea unei soluii de formol. Procedeul
este foarte periculos i necesit personal special instruit. n aceste situaii ferestrele i uile
laboratorului trebuie sigilate mai nti cu band adeziv sau cu produse similare, nainte de
eliberarea gazului. Fumigarea trebuie s fie efectuat la o temperatur ambiental de minim de
21C i la o umiditate relativ de 70% (vezi seciunea privind decontaminarea hotelor de
biosiguran, mai jos).
Dup fumigare incinta trebuie s fie foarte bine aerisit i abia apoi va fi permis
accesul personalului. Persoanele care trebuie totui s ptrund n aceste spaiii, o pot face
numai dac poart aparate de protecie respiratorie adecvate. Bicarbonatul de amoniu, sub
form gazoas, poate fi utilizat pentru neutralizarea formaldehidei.
Este eficace i fumigarea spaiilor foarte mici cu vapori de peroxid de hidrogen, dar
pentru aceast metod trebuie s se utilizeze un echipament adecvat.
14.5. Decontaminarea hotelor de biosiguran
Pentru decontaminarea hotelor de biosiguran de clas 1 i clas 2 exist echipament
special portabil pentru generarea, circularea i neutralizarea formaldehidei gazoase. n lipsa
acestor echipamente specializate, se pot folosi 2 tigi plasate pe 2 plite (reouri) electrice
aezate n hot, care conin una para-formaldehid (suficient pentru a obine o concentraie
final de 0,8 % para-formaldehid n aerul din hot), i cealalt bicarbonat de amoniu (cu 10%
mai mult dect para-formaldehida). Plitele sunt conectate la curent electric n afara hotei, astfel
nct conectarea i deconectarea plitelor s se fac din exterior. Dac umiditatea relativ se
situeaz sub 70%, n hot trebuie s fie amplasat i un vas deschis cu ap fierbinte. Panoul
frontal se etaneizeaz cu band adeziv solid (de ex. cea folosit pentru conducte). Se
lipete o folie groas de plastic peste deschiderea hotei, fixnd-o etan de jur mprejur inclusiv n jurul firelor electrice care ptrund n hot spre cele dou plite - ; n acelai mod se
etaneizeaz i racordul hotei la gura de exhaustare, evitndu-se astfel orice scpare a
formaldehidei gazoase n atmosfera laboratorului.
Se deschide ntreruptorul pentru formaldehid, care este apoi nchis dup ce s-a
evaporat para-formaldehida. Incinta va rmne nchis cel putin 6 ore. Se pornete apoi a
doua plit pentru evaporarea bicarbonatului de amoniu. Dup aceea, se deconecteaz a doua
plit i se pornete ventilatorul hotei de dou ori cte dou secunde, permind astfel circulaia
gazului degajat de bicarbonatul de amoniu n ntreaga hot. Ulterior, dup cel puin 30 min,
etanrile de la panoul frontal i conducta de exhaustare pot fi ndeprtate, iar hota poate fi din
nou folosit, dup o curare prealabil.
14.6. Splarea minilor /decontaminarea minilor
Atunci cnd este posibil, trebuie purtate mnui adecvate n timpul manipulrii
materialelor care prezint risc biologic. Cu toate acestea, purtarea mnuilor, nu nlocuiete
necesitatea splrii pe mini a personalului din laborator. Minile trebuie splate dup
manipularea materialelor sau animalelor cu risc biologic i nainte de ieirea din laborator.

81
ghidDE
naional
de biosiguran
laboratoare
GHID NAIONAL
BIOSIGURAN
3(1758 pentru
LABORATOARE
n multe situaii splarea insistent a minilor cu spun obinuit i cu ap este

suficient pentru a le decontamina, dar se recomand, totui, utilizarea spunurilor germicide
pentru situaii cu risc biologic crescut. Minile trebuie spunite foarte bine, iar splarea se face
printr-o frecare riguroas, care trebuie s dureze minim 10 secunde, urmat de cltire din
abunden cu ap curat i apoi uscate cu erveele de hrtie sau un prosop curat (se pot
folosi usctoarele de mini cu aer cald cnd exist la ndemn).
Se recomand instalarea n acest scop de robinete acionate cu cotul sau cu piciorul.
Unde acestea nu exist, se recomand utilizarea unui prosop de hrtie sau textile pentru
nchiderea robinetului pentru a evita contaminarea minii proaspt splate.
Aa cum s-a menionat mai sus, atunci cnd nu este posibil splarea adecvat a
minilor, se poate recurge la frecarea lor cu soluii pe baz de alcool pentru decontaminare.
14.7. Dezinfecia prin cldur i sterilizarea
Cel mai utilizat agent fizic pentru decontaminare este cldura.
Cldura uscat (care este total non-coroziv) este utilizat pentru multe materiale din
laborator, care pot suporta temperaturi de 160C sau mai nalte timp de 2-4 ore. Arderea sau
incinerarea (vezi mai jos) este de asemenea o form de cldur uscat. Autoclavarea este
preferabil altor metode de sterilizare deoarece genereaz cldur umed, care este mai
eficient dect cldura uscat.
Fierberea nu garanteaz distrugerea tuturor microorganismelor i a agenilor patogeni,
dar poate fi folosit ca un procedeu minim de dezinfecie, atunci cnd alte metode (ex.
dezinfecie chimic, sterilizare prin autoclavare) nu pot fi efectuate.
Obiectele sterilizate trebuie manipulate i depozitate astfel nct s rmn
necontaminate pn la urmtoarea utilizare.
14.7.1. Autoclavarea
Cea mai eficient i mai sigur metod de sterilizare pentru materialele din laborator
este cea cu vapori saturai sub presiune i anume autoclavarea. Pentru majoritatea scopurilor,
urmtoarele cicluri vor asigura sterilizarea n autoclavele ncrcate corect (este indicat timpul
necesar pentru omorrea bacteriilor dup atingerea a diverse temperaturi):
1. 3 minute la 134C
2. 10 minute la 126C
3. 15 minute la 121C
4. 25 minute la 115C.
Exemple de autoclave:
x Autoclave cu evacuare gravitaional a aerului. Figura 10 prezint schema
general de construcie a autoclavelor cu evacuare gravitaional. Vaporii intr
n compartimentul de sterilizare sub presiune i deplaseaz aerul, mai greu,
printr-o valv, n compartimentul de drenaj, echipat cu filtru HEPA.
x Autoclave cu pre-vacuum. Aceste instalaii permit ndeprtarea aerului din
camer nainte de intrarea vaporilor. Aerul este evacuat printr-o valv echipat
cu filtru HEPA. La sfritul ciclului aburii sunt evacuai automat. Aceste
autoclave pot funciona la 134C, iar ciclul de sterilizare poate fi redus la 3
minute. Ele nu pot fi utilizate pentru sterilizarea lichidelor din cauza
vacuumului, dar sunt ideale pentru obiectele poroase.
x Autoclave cu surs de nclzire proprie. Acestea vor fi utilizate numai atunci
cnd nu sunt disponibile autoclave cu evacuare gravitaional sau alte tipuri de
autoclav. Acestea sunt ncrcate vertical i sunt nclzite cu gaz, electricitate
882
14.
i I
sterilizarea
14.Dezinfecia
DEZINFECIA
STERILIZAREA
sau alte tipuri de combustibil. Vaporii sunt generai prin nclzirea apei de la
baza vasului, iar aerul este mpins n sus i eliminat prin intermediul unui
orificiu de evacuare. Atunci cnd tot aerul a fost nlturat, se nchide valva
orificiului de evacuare i se reduce aportul de cldur. Temperatura i
presiunea cresc, apoi, pn cnd valva de siguran acioneaz la un nivel
prestabilit anterior. Acesta este momentul din care se consider c ncepe de
fapt sterilizarea. La sfritul ciclului, sursa de cldur se nchide i se
ateapt scderea temperaturii pn la 80C sau chiar mai jos, nainte de
deschiderea capacului.
Figura 10. Schema autoclavului gravitaional

ncrcarea autoclavului
Materialele trebuie mpachetate si aranjate cu grij n compartimentul de sterilizare sau
n coul autoclavului pentru a permite ptrunderea i circulaia aburului printre obiecte precum
i eliminarea aerului. Ambalajele saci autoclavabili, containere, cutii, etc. - trebuie s permit
aburului s ptrund pn la coninutul acestora.
Precauii n utilizarea autoclavului
Pericolele inerente mnuirii recipientelor sub presiune pot fi minimizate prin
respectarea urmtoarelor reguli:
1. Responsabilitatea pentru efectuarea acestor operaii trebuie atribuit numai unor
persoane special instruite.
2. Programul de intreinere periodic trebuie s cuprind msuri preventive cum sunt
inspeciile periodice ale compartimentului de sterilizare al autoclavului, ale uilor,
83
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
valvelor, supapelor, robinetelor i instrumentelor de msur, controlul fiind efectuat de

persoane special instruite i autorizate n acest scop.
Vaporii trebuie sa fie saturai i s nu conin substane chimice (de exemplu inhibitori
ai coroziunii) care ar putea contamina obiectele ce urmeaz a fi sterilizate.
Toate materialele care urmeaz a fi sterilizate, trebuie s fie puse n containere care s
permit eliminarea complet a aerului i ptrunderea nestnjenit a cldurii, respectiv
a aburului; camera nu trebuie ncrcat la refuz, iar vaporii trebuie s ajung uniform n
toate colurile compartimentului de sterilizare.
Pentru autoclavele care nu sunt prevzute cu dispozitiv de blocare a uilor, care s
previn deschiderea acestora, ct vreme compartimentul de sterilizare este sub
presiune robinetul principal de admisie pentru aburi trebuie nchis, iar temperatura
trebuie s scad sub 80C, nainte ca ua (capacul) s fie deschise.
Cnd se autoclaveaz lichide, dup ncheierea sterilizrii se va aplica un program de
evacuare lent a aburului pentru a evita fierberea lichidelor n momentul deschiderii
autoclavului; recipientele vor fi umplute pn la cel mult 75% din volum.
Operatorul trebuie s poarte mnui adecvate i scut transparent de protecie a feei
cnd deschide autoclavul, chiar dac temperatura a sczut sub 80C.
Pentru monitorizarea performanelor autoclavului, indicatorii biologici sau
termocuplurile trebuie amplasate n centrul ncrcturii. Este preferabil monitorizarea
permanent cu termocupluri i dispozitive de nregistrare amplasate n zonele cele mai
critice ale ncrcturii, pentru a determina ciclurile de operare cele mai potrivite.
Daca autoclavul este prevzut cu filtru pe canalul de scurgere al compartimentului de
sterilizare al autoclavului, acesta trebuie ndeprtat i curat zilnic.
Trebuie verificat ca supapa de siguran s nu fie blocat de hrtie sau alte materiale
n momentul ncrcrii aparatului.
14.8. Incinerarea
Incinerarea este util pentru ndeprtarea cadavrelor de animale, precum i pentru
ndeprtarea pieselor anatomice sau altor deeuri de laborator, care au fost sau nu
decontaminate anterior (vezi seciunea Evacuarea materialelor contaminate n Capitolul 3).
Incinerarea materialelor infecioase poate constitui o alternativ a autoclavrii, numai dac
incineratorul este sub controlul laboratorului.
Incinerarea corect necesit un control eficient al temperaturii i o camera de ardere
secundar. Multe incineratoare, n special cele cu o singur camer de combustie nu sunt
corespunztoare pentru lucrul cu materiale infecioase, cadavre de animale i materiale
plastice. Astfel de materiale ar putea s nu fie complet distruse, iar ceea ce se elimin prin
coul incineratorului ar putea polua atmosfera cu microorganisme, substane chimice toxice i
fum. Exist totui mai multe configuraii satisfctoare pentru camerele de combustie; ideal ar fi
ca n camera principal temperaturile s fie de minim 800C iar n camera secundar, de
minim 1000C.
Materialele pregtite pentru incinerare, chiar dac au fost decontaminate anterior, vor fi
transportate n saci, preferabil de plastic. Operatorii incineratorului trebuie s primeasc
instruciuni clare n ceea ce privete ncrcarea incineratorului i controlul temperaturii. Nu
trebuie uitat c funcionarea corespunztoare a incineratorului depinde foarte mult de
amestecul corect de materiale care urmeaz a fi incinerate.
Exist preocupri active referitoare la impactul negativ asupra mediului nconjurtor al
incineratoarelor existente sau n curs de montare. n acest sens, se fac eforturi continue pentru
a realiza i instala incineratoare mai eficiente din punct de vedere energetic i care s respecte
integral normele de protecie a mediului nconjurtor.
84
14.
i I
sterilizarea
14.Dezinfecia
DEZINFECIA
STERILIZAREA
14.9. ndeprtarea deeurilor

ndeprtarea deeurilor medicale i de laborator face obiectul a diverse reglementri
regionale, naionale i internaionale.
naintea elaborrii i aplicrii unor programe pentru manipularea, transportul i
evacuarea deeurilor cu risc biologic potenial este obligatoriu s fie consultate versiunile la zi
ale reglementrilor amintite. n general, cenua de la incineratoare poate fi manipulat ca orice
alte resturi menajere, ndeprtarea acesteia fiind efectuat de firmele de salubritate. Deeurile
decontaminate prin autoclavare pot fie s fie incinerate n afara incintei instituiei, fie s fie
evacuate la locurile special amenajate pentru aruncarea gunoaielor (vezi Capitolul 3).
Pentru alte informaii vezi referinele 13 i 29-39.
85
15. Noiuni introductive privind transportul

materialelor infecioase
Transportul materialelor infecioase i potenial infecioase face obiectul unor

reglementri stricte naionale i internaionale. Aceste reglementri descriu modalitile corecte
de utilizare a materialelor de ambalare precum i alte cerine legate de transport.
Personalul laboratorului trebuie s expedieze substanele infecioase n acord cu
reglementrile de transport n vigoare, urmrindu-se prin aceasta :
1. reducerea probabilitii de deteriorare a ambalajului i producere a unor de scurgeri i astfel
2. reducerea riscului de apariie a infeciilor
3. mbuntirea eficienei sistemului de expediere a coletelor
15.1. Reglementrile internaionale pentru transport
Reglementrile internaionale privind transportul materialelor infecioase (pe orice cale)
se bazeaza pe modelul reglementrilor ONU - Regulations on the Transport of Dangerous
Goods (40), elaborat de Comitetul de Experi ONU pentru Transportul Mrfurilor Periculoase
(United Nations Committee of Experts on the Transport of Dangerous Goods (UNCETDG)).
Pentru a dobndi putere de lege, reglementrile ONU trebuie s fie introduse n reglementrile
naionale i internaionale de ctre autoritile competente (de ex. Technical Instructions for
the Safe Transport of Dangerous Goods by Air (41) of the International Civil Aviation
Organization (ICAO) pentru transportul aerian i European Agreement concerning the
International Carriage of Dangerous Goods by Road (ADR) (42).
Asociaia Internaional de Transport Aerian (IATA) public n fiecare an Ghidul de
transport al substantelor infecioase (Infectious Substances Shipping Guidelines) (43). Ghidul
IATA trebuie s respecte Instruciunile tehnice ale ICAO (Technical Instructions) ca standard
minim dar poate impune restricii suplimentare. Ghidul IATA trebuie urmat ori de cte ori
transportul este efectuat de membrii IATA .
De cnd Reglementrile ONU au devenit un set dinamic de recomandri, care este
amendat bianual, cititorul trebuie s consulte i s aplice cele mai recente reglementri
naionale i internaionale.
OMS furnizeaz sugestii i expertiz grupului de experi ai ONU (UNCETDG).
Schimbri majore ale reglementrilor privind transportul legate de transportul substanelor
infecioase au fost introduse n ediia a 13-a (2003) a Modelului Reglementrilor ONU. Aceste
amendamente pot fi consultate pe larg n documentele OMS (44).
Reglementrile internaionale nu sunt concepute pentru a se substitui celor naionale
sau locale. Totui, n situaiile n care nu exist reglementri pe plan naional, se vor respecta
cele internaionale.
Este important de menionat c, n plus, transportul internaional al substanelor
infecioase se supune de asemenea i este subiect al reglementrilor naionale privind
importul i exportul.
15.2. Sistemul ambalajului triplu
Sistemul ambalajului triplu este utilizat pentru transportul substanelor infecioase sau
potenial infecioase (Figura 11). Acest sistem de ambalare const n 3 straturi : container
primar, ambalaj secundar i ambalaj extern.

87
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Containerul primar, care conine proba, trebuie s fie nchis etan, impermeabil pentru
lichide i etichetat corespunztor coninutului. El trebuie s fie nvelit n suficient material
absorbant pentru a absorbi integral lichidele pe care le conine n caz de spargere sau
scurgere.
Ambalajul secundar etaneizat i impermeabil pentru lichide este folosit pentru a
proteja containerul(erele) primar(e). Mai multe containere primare pot fi introduse ntr-un singur
ambalaj secundar. Exist diverse reglementri care stabilesc limite privind volumul i/sau
greutatea materialelor infecioase incluse ntr-un colet.
Ambalajul extern protejeaz ambalajul secundar de deteriorri fizice n timpul
transportului. Formularele cu date despre probe, scrisorile i alte tipuri de informaii care
identific sau descriu proba, expeditorul i destinatarul, precum i orice alte documente
solicitate trebuie s fie furnizate n conformitate cu ultimele reglementri n vigoare.
Modelul de reglementri (Model Regulations) al Naiunilor Unite descrie 2 tipuri diferite
de sisteme cu triplu ambalaj pentru transport. Sistemul obinuit de ambalaj triplu se folosete
pentru transportul a diferite materiale infecioase; totui microrgansimele cu risc crescut trebuie
transportate conform unor reglementri mai stricte. Pentru mai multe detalii despre utilizarea
diferitelor ambalaje corespunztoare materialelor transportate, se recomand consultarea
reglementrilor naionale i internaionale pentru prevederile aplicabile.
15.3. Procedura de curare/tratare n cazul vrsrii materialului infecios
n cazul vrsrii de material infecios sau potenial infecios trebuie aplicat urmtoarea
procedur :
1. Se vor purta mnui, mbrcminte de protecie, inclusiv ochelari i scut transparent pentru
protecia feii, dac este cazul.
2. Se va acoperi materialul vrsat cu o crp sau cu prosoape de hrtie pentru a-l reine.
3. Se va turna dezinfectantul corespunztor peste materialul absorbant folosit i peste zona din
imediata vecintate (n general, soluie de cloramin 5% ; pentru vrsri n timpul
transportului cu avionul trebuie utilizate dezinfectante pe baz de compui cuaternari de
amoniu).
4. Se va aplica dezinfectantul concentric i centripet, dinspre marginea zonei spre interior.
5. Dup timpul de aciune corespunztor (ex. 30 minute), se ndeprteaz materialele
absorbante. Daca exist cioburi de sticl sau alte obiecte ascuite se va utiliza un fra sau
o bucat de carton rigid pentru strngerea acestora i punerea lor ntr-un container pentru
obiecte ascuite.
6. Se va cura i dezinfecta aria contaminat (dac este necesar, se vor repeta etapele 2 - 5).
7. Se vor evacua materialele contaminate ntr-un container pentru deeuri impermeabil,
rezistent la nepare.
8. Dup dezinfectare, se va informa autoritatea competent c locul a fost decontaminat.

88
15. Noiuni
introductivePRIVIND
privind TRANSPORTUL
transportul materialelor
infecioase
15. NOIUNI
INTRODUCTIVE
MATERIALELOR
INFECIOASE
Ambalarea i etichetarea substanelor infecioase din categoria A
Ambalarea i etichetarea substanelor infecioase din categoria B
Figura 11. Exemple de sisteme de triplu ambalaj

(prin amabilitatea, IATA, Montreal Canada)

89
16. Biosigurana i tehnologia ADN recombinant
Tehnologia ADN recombinant realizeaz combinarea de material genetic provenit din

diferite surse, contribuind astfel la crearea unor organisme modificate genetic (OMG) care s-ar
putea s nu fi existat pn acum n natur.
La nceput, cercettorii din domeniul biologiei moleculare au fost ngrijorai de faptul c
aceste organisme ar putea avea proprieti imprevizibile i nedorite, constituind un risc biologic
dac ar ajune n afara laboratorului. Aceast ngrijorare a constituit obiectul dezbaterilor de la
conferina tiinific desfurat n 1975 la Asilomar (SUA). Aici s-au dezbtut probleme de
siguran i a fost propus primul ghid privitor la tehnologia ADN recombinant. Experiena
obinut prin cercetarea din urmtorii 25 de ani a demonstrat c ingineria genetic poate fi
condus ntr-o manier nepericuloas atunci cnd se evalueaz corect riscul i se aplic
msuri de siguran adecvate.
Prin intermediul tehnologiei ADN recombinant sau ingineriei genetice s-au clonat,
iniial, segmente de ADN n gazde bacteriene, pentru a supraexprima produii genici specifici
necesari pentru diverse studii. Moleculele de ADN recombinant au fost de asemenea folosite
pentru a crea OMG, precum animale transgenice i knock-out i plante transgenice.
Tehnologia ADN recombinant are deja un impact enorm asupra biologiei i a medicinei
i probabil va cpta o influen i mai mare odat cu cunoaterea secvenei nucleotidice a
ntregului genom uman. Folosind tehnologia ADN recombinant vor putea fi studiate zeci de mii
de gene cu funcii nc necunoscute. Terapia genic ar putea deveni o metod curent pentru
tratarea anumitor boli i folosind tehnici de inginerie genetic ar putea fi construii noi vectori de
transfer genic. De asemenea, plantele transgenice produse prin tehnologia ADN recombinant
ar putea ajunge s joace un rol din ce n ce mai important n agricultura modern.
Experienele implicnd construirea sau folosirea OMG nu trebuie fcute dect dup
evaluarea bioriscului. Proprietile patogene sau alte riscuri poteniale asociate acestor
organisme pot reprezenta proprieti noi, insuficient caracterizate. Trebuie evaluate
proprietile organismului donor, natura secvenelor de ADN care vor fi transferate, proprietile
organismului receptor i ale mediului nconjurtor. Aceti factori vor trebui s ajute la stabilirea
nivelului de biosiguran necesar pentru manipularea cu un minimum de riscuri a OMG
rezultate i la identificarea sistemelor de securizare biologic i fizic la care va trebui s se
apeleze.
16.1. Criterii de biosiguran pentru sistemele biologice de expresie
Sistemele biologice de expresie sunt alctuite din vectori i celule gazd. Pentru a
prezenta eficien i siguran n folosire ele trebuie s satisfac o serie de criterii. Un exemplu
de asemenea sistem biologic de expresie este plasmidul pUC18. Frecvent utilizat ca vector de
clonare n combinaie cu celule de Escherichia coli K12, plasmidul pUC18 a fost secvenializat
n ntregime. Toate genele necesare pentru exprimarea n alte bacterii au fost ndeprtate din
plasmidul su precursor, pBR322. E. coli K12 este o tulpin nepatogen care nu poate
coloniza intestinul oamenilor sntoi sau al animalelor. Experienele de inginerie genetic de
rutin pot fi desfurate n siguran pe sistemul E. coli K12/pUC18 n condiiile unui nivel de
biosiguran 1, cu condiia ca produii de expresie ai lanului de ADN strin inserat s nu
impun niveluri de biosiguran mai nalte.
1
91
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
16.2. Criterii de biosiguran pentru vectorii de expresie

Niveluri mai nalte de biosiguran pot fi necesare cnd :
1. expresia secvenelor de ADN derivate din organisme patogene poate spori virulena OMG,
2. insuficienta caracterizare a anumitor secvene de ADN inserate, ca de exemplu cu ocazia
preparrii unor biblioteci de ADN genomic pornind de la microorganisme patogene,
3. produii genici sunt potenial activi farmacologic,
4. produii genici codific toxine.
16.3. Vectori virali pentru transfer genic
Vectorii virali, cum sunt vectorii de adenovirus, sunt folosii pentru transferul genelor n
alte celule. Acestor vectori le lipsesc anumite gene de replicare viral, fiind capabili de
propagare numai n liniile celulare care compenseaz defectul respectiv.
Stocurile de asemenea vectori pot fi contaminante cu virusuri capabile de replicare,
aprute prin evenimente rare de recombinare spontan la nivelul liniilor celulare n care au fost
propagai sau printr-o insuficient purificare. Aceti vectori trebuie manipulai respectnd
acelai nivel de biosiguran ca i acela aplicat n cazul adenovirusurilor parentale din care
deriv.
16.4. Animale transgenice si knock-out
Animalele care poart material genetic strin (animale transgenice) trebuie manipulate
n condiii de securizare corespunztoare caracteristicilor produilor genelor strine n cauz.
Animalele cu deleii intite pentru anumite gene (animale knock-out) nu comport n general
riscuri biologice particulare.
Printre exemplele de animale transgenice se includ i animalele care exprim receptori
pentru virusuri care n mod normal sunt incapabile s infecteze speciile respective. Dac
aceste animale scap din laborator sau din biobaz i transmit transgena populaiei de animale
slbatice se poate genera teoretic un rezervor animal pentru virusul n cauz.
Aceasta posibilitate a fost discutat n cazul poliovirusului i este relevant n special
n contextul eradicrii poliomielitei. oareci transgenici exprimnd receptorul pentru poliovirusul
uman, obinui n diferite laboratoare, devin sensibili la infecia cu poliovirus pe diverse ci de
inoculare a acestuia, iar boala declanat este clinic i histopatologic similar cu poliomielita
uman. Totui, modelul oarece difer de om prin aceea c poliovirusul administrat oral fie c
nu se replic deloc la nivelul tractului digestiv, fie se replic ineficient. Astfel, este puin
probabil ca asemenea oareci transgenici evadai din laborator n populaia slbatic s poat
conduce la aparitia unui nou rezervor natural de poliovirus.
Acest exemplu subliniaz faptul c pentru fiecare linie nou de animal transgenic
trebuie studiate n detaliu cile prin care poate fi infectat animalul respectiv, mrimea inocului
necesar producerii infeciei i amploarea eliminrii de virus de ctre animalele infectate. n plus,
trebuie luate toate msurile pentru a asigura izolarea acestor oareci transgenici.
16.5. Plante transgenice
Plantele transgenice care exprim gene ce confer toleran la ierbicide sau rezisten
la insecte duntoare sunt un subiect curent de controvers n multe pri ale lumii. Discuiile
se refer la inocuitatea alimentelor derivate din aceste plante i la consecinele ecologice pe
termen lung ale cultivrii lor.
Plantele transgenice exprimnd gene de origine animal sau uman sunt folosite
pentru a elabora produi cu aplicaie medical i nutriional. Se impune o evaluare atent a
riscului pentru stabileirea nivelului corect de biosiguran n cazul producerii acestor plante.
2
92
16. BiosiguranaIiTEHNOLOGIA
tehnologia adn
16. BIOSIGURANA
ADNrecombinant
RECOMBINANT
16.5. Evaluarea riscului pentru OMG

Evaluarea riscului pentru lucrul cu OMG trebuie s in cont de caracteristicile
organismelor donoare i receptoare, gazd. Exemple privind aceste caracteristici sunt
prezentate n continuare.
Riscuri rezultate direct din gena inserat (organismul donor)
Analiza este necesar n situaii n care produsul genei inserate are proprieti
biologice i
farmacologice cunoscute, care pot fi duntoare, cum ar fi de exemplu:
1. toxine
2. citokine
3. hormoni
4. factori de reglare a expresiei genice
5. factori de virulen sau stimulatori
6. secvene din oncogene
7. rezistena la antibiotice
8. alergeni.
n analizarea acestor cazuri trebuie s se includ i o evaluare a pragului de exprimare
necesar pentru manifestarea activitii biologice sau farmacologice.
x
x
1.
2.
3.
4.
5.
Riscuri associate cu receptorul (gazda)

Sensibilitatea gazdei
Patogenitatea tulpinii gazd incluznd virulena, infectivitatea i producia de toxine
Modificarea spectrului de gazde
Statusul imun al receptorului
Consecinele expunerii.
Riscuri generate de modificarea unor caractere de patogenitate existente
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Multe modificri nu implic gene ai cror produi au o nocivitate intrinsec, dar pot
aprea efecte adverse ca rezultat al modificrii unor caractere existente, patogene sau
nepatogene. Modificarea genelor normale poate influena patogenitatea. n ncercarea
de a identifica aceste riscuri poteniale trebuie rspuns la urmtoarele ntrebri (lista nu
este exhaustiv) :
s-a produs o cretere a infectivitii sau patogenitii ?
orice mutaie duntoare pentru receptor poate fi anihilat ca urmare a inseriei unei
gene strine ?
gena strin codific un determinant de patogenicitate provenit de la alt organism ?
dac ADN strin include un determinant de patogenitate, se poate anticipa c aceast
gen va contribui la patogenitatea OMG ?
exist vreun tratament ?
va fi afectat sensibilitatea OMG la antibiotice sau la alte forme de tratament ca
urmare a modificrii genetice ?
se poate eradica OMG ?
16.6. Alte consideraii

Problema utilizrii de animale sau plante ntregi n scopuri experimentale necesit de
asemenea o atenie deosebit. Cercettorii trebuie s se supun regulilor, restriciilor i
cerinelor lucrului cu OMG aplicate n ara n care se afl i de instituiile acesteia.
3
93
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
rile pot avea autoriti naionale care stabilesc ghiduri de lucru cu OMG i care pot
ajuta cercettorii s-i ncadreze munca n nivelul de biosecuritate corespunztor. n unele
cazuri clasificarea poate diferi ntre ri sau rile pot decide s clasifice cerinele de
biosiguran ntr-un nivel mai sczut sau mai nalt n funcie de apariia unor noi informaii
referitoare la un anumit sistem vector/gazd.
Evaluarea riscului este un proces dinamic care ine cont de noile performane i de
progresele tiinei. Evalurile corecte ale riscurilor vor permite omenirii s se bucure n anii ce
vin de roadele tehnologiei ADN recombinant.
4
94
17. Substane chimice periculoase
Personalul din laboratoarele de microbiologie nu este expus numai unor

microorganisme patogene, ci i unor substane chimice periculoase. De aceea este vital
cunoaterea exact a efectelor toxice ale acestor substane chimice, a cilor de expunere, ct
i a pericolului care poate fi asociat cu manipularea i depozitarea acestora (Anexa 5).
Fiele ce cuprind precauiile recomandate n mnuirea acestor substane, precum i
alte informaii suplimentare care descriu pericolul pe care l implic utilizarea unei anumite
substane chimice, disponibile de la productori i/sau de la distribuitori, trebuie s fie prezente
i uor accesibile n laboratoarele n care aceste substane sunt utilizate, de exemplu prin
includerea lor n Ghidul de biosiguran sau n Manualul cu procedurile specifice de lucru.
17.1. Definiii i clasificri
Substanele chimice periculoase sunt adeseori definite i clasificate n funcie de fia
reglementar de nsoire pentru transportul bunurilor periculoase sau n funcie de riscurile i
gradele de periculozitate pe care acestea le prezint. Ele pot fi mprite n funcie de gradul de
reactivitate, instabilitate, riscul de incendiu sau riscul pentru sntate sau n funcie de efectele
toxice.
17.2. Ci de expunere
Exist mai multe ci de expunere la substane chimice periculoase :
1. Inhalare
2. Contact direct
3. Ingestie
4. nepare
5. Prin leziuni cutanate
17.3. Depozitarea substanelor chimice
zilnic.
n laborator se va depozita doar o cantitate minim de chimicale, necesar pentru uzul
Stocurile de rezerv trebuie pstrate n ncperi/cldiri avnd n mod expres aceast

destinaie, dotate cu pardoseal din beton i praguri ctre exterior pentru a reine deversrile
accidentale. Substanele inflamabile trebuie depozitate separat, n cldiri situate la oarecare
distan. Pentru prevenirea aprinderii vaporilor inflamabili i explozivi de la scnteile contactelor
electrice, ntreruptoarele trebuie plasate n afara ncperii iar corpurile de iluminat vor fi
protejate cu globuri etane.
Substanele chimice nu se depoziteaz n ordine alfabetic, pentru c astfel
substane chimice incompatibile (vezi lista de mai jos !) pot ajunge n proxima vecintate, iar
unele substane chimice periculoase pot fi plasate pe rafturi nalte. Toate recipientele mari de
sticl i toate recipientele coninnd acizi/baze puternice trebuie depozitate la nivelul pardoselii
i plasate n tvi (pentru prevenirea mprtierii accidentale). Trebuie asigurate suporturi
protectoare pentru transportul recipientelor mari de sticl i dispozitive de sifonare pentru
umplerea unor recipiente mai mici din containere. Scrile mobile sunt indispensabile acolo
unde exist rafturi nalte.

95
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
17.4. Reguli generale privind incompatibilitile chimice

Substanele figurate mai jos, n coloana din stnga a Tabelului 13, trebuie astfel
depozitate i manipulate nct s nu poat veni n contact accidental cu substanele enumerate
n dreptul lor n coloana din dreapta.
Tabelul 13. Reguli generale pentru incompatibiliti chimice
Categoria de substane
- Metale alcaline
(sodiu, potasiu, cesiu i litiu)
Substane incompatibile
- Dioxid de carbon, hidrocarburi clorurate, ap
- Halogeni
- Amoniac, acetilen, hidrocarburi
- Acid acetic, hidrogen sulfurat,

anilin, hidrocarburi, acid sulfuric
- Ageni oxidani (acid cromic, acid azotic, peroxizi,

permanganai)
17.5. Efecte toxice ale substanelor chimice

Este binecunoscut faptul c unele substane chimice au efecte adverse asupra
sntii celor care le manipuleaz sau inhaleaz vaporii acestora. In afara substanelor
reputate ca toxicitate i ncadrate ca otrvuri, un numar de substane chimice sunt cunoscute a
avea variate efecte toxice. Aparatul respirator, sngele, ficatul, rinichii i aparatul gastrointestinal, ca i alte organe i esuturi pot fi afectate n diverse grade. Unele substane chimice
sunt cunoscute pentru efectele carcinogene sau teratogene.
Unii vapori de solveni sunt toxici cnd sunt inhalai. In afar de efectele toxice
propriu-zise, expunerea la vaporii toxici poate determina i efecte secundare, ca, de exemplu,
lipsa de coordonare, slbiciune i alte simptome similare, care pot duce la producerea de
accidente.
Expunerea prelungit sau repetat la solveni organici n faz lichid, poate duce la
afeciuni ale pielii, datorit degresrii acesteia; au mai fost semnalate reacii alergice sau efecte
corozive.
Pentru informaii detaliate asupra efectelor toxice ale substanelor chimice, se va
consulta Anexa 5.
17.6. Substane chimice explozive
Azidele, adesea utilizate n compoziia soluiilor antibacteriene, nu trebuie s vin n
contact cu plumbul sau cuprul (de ex. n instalaiile sanitare de evacuare). Azida de cupru va
exploda violent chiar i la un impact de mic intensitate.
Eterii imbtrnii sau uscai sub form de cristale sunt extrem de instabili i potenial
explozivi.
Acidul percloric, dac se usuc pe lemnrie, ceramic sau esturi va exploda i va
arde la impact.
Acidul picric i picraii detoneaz la cldur i impact.
17.7. Vrsarea accidental de substane chimice
Majoritatea productorilor de reactivi chimici de laborator public diagrame / postere
care descriu modalitile de aciune n caz de vrsri accidentale de substane chimice. Pe
pia sunt disponibile diagrame i truse de intervenie. Postere/afie adecvate trebuie expuse
n locuri vizibile din laborator. De asemenea, vor fi procurate materiale cum sunt:
x Truse pentru decontaminare chimic

96
substaneCHIMICE
chimice periculoase
17.17.
SUBSTANTE
PERICULOASE
x
x
x
x
x
x
x
x
mbrcminte de protecie (ex: mnui groase din cauciuc; galoi sau cizme de
cauciuc) aparat pentru asisten/protecie respiratorie
Lopei i frae
Pense pentru culegerea fragmentelor de sticl
tergtor de pardoseal (mop), crpe i prosoape de hrtie
Glei
Sod de rufe (carbonat de sodiu, Na2CO3) sau bicarbonat de sodiu ( NaHCO3), pentru
neutralizarea acizilor
Nisip
Detergent neinflamabil
n cazul unei deversri accidentale a unei substane chimice periculoase trebuie luate
urmtoarele msuri:
x Notificarea evenimentului ctre responsabilul cu biosigurana si evacuarea din zon a
personalului care nu este necesar.
x Examinarea i acordarea de ngrijiri medicale persoanelor care ar fi putut fi
contaminate.
x Dac lichidul deversat este inflamabil, se vor stinge toate focurile deschise, se vor
nchide sursele de gaze din ncperea respectiv i din zonele adiacente i se vor opri
echipamentele electrice care pot genera scntei.
x Evitarea inhalrii de vapori din lichidul deversat.
x Se va conecta ventilaia de aerisire, dac operaiunea este lipsit de pericole.
x Se va asigura necesarul de materiale i echipamente (vezi mai sus !) pentru a
ndeprta substana chimic deversat.
n eventualitatea unei deversri chimice masive, ncperea trebuie evacuat i
ferestrele vor fi deschise dac este posibil. Dac materialul deversat este inflamabil, trebuie
stinse toate focurile deschise din ncperea respectiv i din cele adiacente; vor fi oprite toate
echipamentele electrice care genereaz scntei.
17.8. Gazele comprimate i lichefiate
Informaii privind condiiile de pstrare a gazelor comprimate i lichefiate sunt prezentate n
Tabelul 14.

97
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Tabelul 14. Pstrarea gazelor comprimate i lichefiate

Container
Condiii de pstrare
Cilindrii cu gaze comprimate sau buteliile cu
x fixai n mod solid de perete ( colier / lan)
a,b
gaze lichefiate
sau prin intermediul unui suport solid, n
aa fel nct s nu poat fi dislocate
accidental
x transportai cu capacele proprii montate i
sprijinite pe inele de cauciuc
x cilindrii de rezerv trebuie depozitai ntr-o
alt cldire, la distan de laborator. Acest
loc trebuie inut ncuiat i semnalizat ca
atare printr-un afi.
x nu trebuie s fie plasai n vecintatea
surselor de cldur, a focurilor deschise
sau lng echipamentele electrice care
genereaz scntei i trebuie evitat
expunerea lor la lumina solar direct.
Cilindrii mici (de unic utilizare) cu gazea,b
x nu trebuie incinerai
Valva principal de presiune nalt trebuie s fie nchis cnd echipamentul nu este utilizat i
cnd n ncpere nu este personal care lucreaz
b. Camerele n care sunt folosii sau pstrai cilindri cu gaze inflamabile trebuie marcate prin afie de
avertizare pe ui.
a.
Pentru informaii suplimentare vezi referinele bibliografice 1 i 49-51, precum i Anexa 5.

98
18. Pericole adiionale n laborator
Personalul laboratoarelor se poate confrunta cu pericole generate de diverse forme de

energie: foc, electricitate, radiaii sau zgomot. Informaiile de baz despre fiecare sunt
prezentate n acest capitol.
18.1. Pericolul de incendiu
Strnsa cooperare dintre responsabilul cu biosigurana i responsabilul local cu
prevenirea incendiilor este esenial. n afar de pericolele chimice, trebuie luate n
considerare i efectele unui incendiu sub raportul unei posibile diseminri de material infecios.
n funcie de aceasta se poate stabili dac este mai bine ca focul s fie stins sau izolat (limitat).
Este de dorit colaborarea cu responsabilii locali pentru prevenirea incendiilor, pentru
instruirea personalului de laborator cu privire la prevenirea incendiilor, intervenia imediat n
caz de incendiu i utilizarea corect a echipamentului de intervenie mpotriva incendiilor.
Avertizrile de incendiu, instruciunile i cile de evacuare trebuie afiate la vedere, n
fiecare ncpere, pe coridoare i ci de acces.
Cele mai frecvente cauze de incendiu n laboratoare sunt:
1. Suprancrcarea reelei electrice
2. Intreinerea necorespunztoare a reelei/echipamentelor electrice, de ex. izolaia
necorespunztoare i deteriorat a cablurilor
3. Lungimea excesiv a tubulaturii pentru gaze i a cablurilor i prelungitoarelor electrice
aparente
4. Echipamente lsate inutil n funciune
5. Echipamente care nu au fost concepute s funcioneze ntr-un laborator
6. Focul deschis
7. Conductele pentru gaze deteriorate
8. Stocarea / manipularea necorespunztoare a materialelor inflamabile sau explozivbile
9. Pstrarea mpreun a unor chimicale incompatibile
10. Funcionarea unor echipamente generatoare de scntei n atmosfer de substane sau
vapori inflamabili
11. Ventilatie insuficient sau inadecvat.
Echipamentul de intervenie mpotriva incendiilor trebuie plasat lng uile ncperilor i
n puncte strategice de pe coridoare i ci de acces. Acest echipament va include furtunuri,
glei cu ap i nisip i un stingtor de incendiu. Extinctoarele trebuie inspectate regulat i
ntreinute corespunztor; trebuie s nu fie depit perioada de valabilitate, inscrisa pe
extinctor. Utilizrile diferitelor tipuri de stingtoare de incendiu sunt prezentate n Tabelul 15.

99
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Tabel 15. Tipuri de stingtoare de incendiu i utilizarea acestora

Tip*
Se utilizeaz pentru:
Nu se va utiliza pentru:
Ap
Hrtie, lemn, esturi
Incendii electrice, lichide
inflamabile, metale arznde
Dioxid de carbon ( CO2 )
Lichide i gaze inflamabile, Metale alcaline, hrtie

incendii electrice
Pulbere uscat
Lichide i gaze inflamabile, Echipament reutilizabil, instrumetale alcaline,

mente (rezidiile sunt foarte
greu de nlturat)
incendii electrice
Spum
Lichide inflamabile
Incendii electrice
* Stingatoarele cu ap sunt propulsate de dioxidul de carbon; stingtoarele cu dioxid de carbon i

pulbere trebuie manipulate cu grij deoarece fora jetului poate mprtia materiale arznde; ncperile
trebuie bine ventilate dup utilizarea stingtoarelor care utilizeaz / genereaz dioxid de carbon.
Pentru informaii suplimentare consultai referina 49.

18.2. Pericole datorate curentului electric
ocul electric pune n pericol viaa; defeciunile electrice pot cauza incendii. De aceea
este esenial ca toate instalaiile i echipamentele electrice s fie inspectate i testate cu
regularitate, inclusiv mpmntarea de electricieni calificai. Personalul de laborator nu trebuie
sa efectueze nici un fel de reparaie a echipamentului electric.
Chiar tensiuni de alimentare joase pot fi uneori periculoase. Trebuie luate ntotdeauna
precauiuni pentru a asigura ntre sursa de alimentare i echipament sigurane calibrate corect.
ntreruptoarele de circuit i releele de deconectare n caz de absen a mpmntrii trebuie
incluse n circuitele electrice ale laboratoarelor.
Nota. ntreruptoarele de circuit nu protejeaz personalul; ele au scopul de a evita
supranclzirea conductorilor i astfel previn incendiile. mpmntarea i releele de
deconectare n caz de absen a acesteia au scopul de a proteja personalul de ocurile
electrice.
Toate echipamentele electrice de laborator trebuie s fie prevzute cu mpmntare,
preferabil cu techere cu trei borne. Echipamentele care nu prezint mpmntare din
construcie trebuie mpmntate separat. Un echipament fr mpmntare poate deveni
periculos prin apariia accidental a unui contact electric accidental nedetectat.
Toate echipamentele electrice trebuie s fie conforme cu standardele i codurile
naionale de siguran electric.
18.3. Zgomotul
Zgomotul excesiv are efect insidios n timp. Unele tipuri de echipamente de laborator,
cum ar fi anumite tipuri de aparatur cu laser, precum i facilitile pentru creterea i
ntreinerea animalelor de laborator pot expune personalul la zgomote excesive. Trebuie
monitorizat producerea de zgomote pentru identificarea pericolelor ce ar putea fi reprezentate
de acestea. Acolo unde datele concrete o justific, se pot crea bariere fonice n jurul
echipamentelor productoare de zgomot sau ntre zonele zgomotoase i alte zone ale
laboratorului. De asemenea, atunci cnd nu se poate reduce nivelul zgomotelor i personalul
laboratorului este supus constant unor surse sonice nocive se poate recurge la utilizarea unor
protecii pentru urechi i se va instaura un program de monitorizare medical a efectelor
zgomotelor asupra celor supui cronic la efectul lor.

100
PericoleADIIONALE
adiionale n
18.18.
PERICOLE
N laborator
LABORATOR
18.4. Radiaiile ionizante

Radioprotecia are ca obiect protejarea oamenilor mpotriva efectelor duntoare ale
radiaiilor ionizante, care includ :
1. Efecte somatice, cum sunt simptomele clinice care apar la indivizii expui. Printre efectele
somatice se numr cancere induse de radiaii (leucemii i cancere osoase, de plmni i
ale pielii), care pot debuta la muli ani de la iradiere, precum i efecte mai puin severe
afectri ale pielii, cderea prului, tulburri hematologice sau gastrointestinale, precum i
formarea de cataract.
2. Efecte ereditare, cum sunt simptomele observate la descendenii indivizilor expui.
Efectele ereditare ale expunerii gonadelor includ alterri cromosomiale i mutaii genice.
Iradierea celulelor germinale din gonade cu doze mari de radiaii pot duce de asemenea la
moarte celular, ceea ce conduce la infertilitate n cazul ambelor sexe sau la modificri ale
ciclului menstrual la femei. Expunerea la radiaii a ftului n curs de dezvoltare, cu
deosebire n sptmnile 8-15 de sarcin, pot crete riscurile de malformaii congenitale,
de retardare mental sau de cancere induse de radiaii care apar mai trziu n viaa
extrauterin.
18.4.1. Principiile activitilor de radioprotecie
Pentru a limita efectele nocive ale radiaiilor ionizante, utilizarea de radioizotopi va
trebui s aibe loc n condiii controlate i va trebui s se conformeze standardelor naionale
corespunztoare. Protejarea fa de radiaii va trebui s fie condus pe baza urmtoarelor
patru principii:
1. Reducerea la minimum a timpului de expunere la radiaii ;
2. Creterea la maximum a distanei pn la sursa de radiaii ;
3. Ecranarea sursei de radiaii cu un scut radioopac;
4. Substituirea utilizrii radionuclizilor cu tehnici non-radiometrice.
18.4.2. Activitile de protecie cuprind urmtoarele :
1.
Timpul. Durata de expunere cu ocazia manipulrii materialelor radioactive poate fi redus

prin :
x Recurgerea la practicarea, n perioada de formare, a unor tehnici non-radiometrice;
abia dup stpnirea acestora se vor folosi radionuclizi;
x Practicarea tehnicilor radiometrice fr grab, n mod ordonat i la momentul oportun;
x Returnarea n spaiul de depozitare a surselor radioactive, imediat dup lucru;
x Evacuarea din laborator a rezidiilor radioactive la intervale ct mai frecvente;
x Rmnerea n aria radioactiv numai timpul strict necesar;
x Supravegherea ndeaproape a utilizrii timpului i a planificrii corespunztoare a
operaiunilor de laborator care presupun manipulri de substane radiactive
Cu ct timpul petrecut n cmpul de radiaii este mai redus, cu att doza de radiaii
primit de o persoan este mai redus, dup cum reiese din ecuaia:
Doza = doza per unitatea de timp x timpul
2.
Distana. Doza per unitatea de timp este funcie de inversul ptratului distanei pn la
surs, pentru cele mai multe radiaii J i X :
Doza per unitatea de timp = constant x 1 / distana2 ;

101
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Exemplu : Dublarea distanei pn la surs va duce la o reducere a expunerii la n

acelai interval de timp. Se pot utiliza diferite sisteme sau dispozitive pentru creterea
distanei de manipulare dintre operator i sursa radioactiv cleti, pense, brae
articulate, dispozitive de pipetare, etc.
De notat c o reducere mic a distanei va duce la o reducere mare a dozei efectiv
primite.
3.
Bariera. Ecranarea, adic amplasarea ntre operatori sau alte persoane din laborator i
surs a unor scuturi / bariere care absorb sau atenueaz energia radiaiilor va limita
expunerea. Alegerea i grosimea materialelor din care sunt confecionate scuturile depind
de abilitatea/capacitatea de penetrare (tipul i energia)radiaiilor. Bariere din material
acrilic, ln sau metale uoare, n grosime de 1,3-1,5 cm se utilizeaz pentru particulele
de energie nalt, n timp ce scuturi de plumb, cu densitate nalt se utilizeaz pentru
oprirea radiaiilor de energie nalt J i X .
4.
Substituia. Nu se vor utiliza materiale bazate pe radionuclizi, dac sunt disponibile se

poate recurge la alte tehnici n acelai scop. Dac substituia nu este posibil, se vor
alege radionuclizii cu puterea de penetrare sau energia cea mai sczut.
18.4.3. Proceduri de siguran n timpul lucrului cu radionuclizi

n stabilirea regulilor de lucru cu substane radioactive trebuie luate n considerare
urmtoarele patru domenii:
1. Aria de lucru cu radionuclizi
x substanele radioactive se vor utiliza numai n zone special destinate ;
x nu este permisa prezena dect a persoanelor strict necesare;
x se va utiliza echipament de protecie personal (halate, ochelari de protecie, mnui de
unic folosin );
x se va monitoriza expunerea la radiaii a personalului ;
Laboratoarele n care se manipuleaz radioizotopi vor fi astfel concepute i amenajate
nct s permit restrngerea ariilor de lucru efectiv i s simplifice la maximum curarea
i decontaminarea. Aria de lucru cu radionuclizi trebuie s fie amplasat ntr-o ncpere
mic adiacent spaiilor principale ale laboratorului sau ntr-o arie special destinat n
interiorul laboratorului dar separat de alte activiti. Semne de averizare reprezentnd
sigla internaional pentru pericolul radioactiv vor fi afiate la intrarea n aria cu radiaii
(Figura 12).
2. Masa de lucru
x Se va lucra n tvi n care a fost aternut hrtie absorbant de unic utilizare ;
x Se vor limita cantitile de radionuclizi utilizate ;
x Se vor monta ecrane (scuturi) de radiaii pe mesele de lucru i n ariile de colectare de
deeuri radioactive ;
x Containerele cu deeuri radioactive vor fi marcate cu sigla de radiaii, precum i cu
identitatea radionuclidului, activitatea lui i data testrii ;
x Se vor utiliza detectoare/contoare de radiaii pentru monitorizare ariilor de lucru,
echipamentelor de protecie personal i a minilor, dup terminarea lucrului ;

102
PericoleADIIONALE
adiionale N
n laborator
18. 18.
PERICOLE
LABORATOR
3. Zona de depozitare a deeurilor radioactive

x Deeurile radioactive vor fi evacuate frecvent din aria de lucru ;
x Pentru transportul deeurilor se vor utiliza containere cu ecranare corespunztoare.
4. nregistrrile i interveniile de urgen.
x
x
x
x
x
x
x
Se vor realiza i pstra consemnri detaliate privind utilizarea i evacuarea

materialelor radioactive ;
Se vor analiza nregistrrile dozimetrice pentru materialele care depesc normele
admise.
Se vor alctui planuri de intervenie n caz de urgen i se vor face periodic exerciii
de aplicare ;
n cazuri de urgen, se va asigura n primul rnd asistena persoanelor rnite;
Ariile contaminate se vor cura i decontamina cu mult grij ;
Se solicit asistena responsabilului cu biosigurana ;
Se vor consemna i arhiva toate raportrile de incidente;
Figura 12. Simbolul internaional pentru pericol de radiaii

103
19. Responsabilul cu biosigurana i comitetul de

biosiguran
Este esenial ca fiecare laborator s aib stabilit o politic atotcuprinztoare, un ghid

de biosiguran precum i programe de aciune pentru aplicarea lor. Responsabilitatea pentru
acestea revine directorului / efului instituiei sau al laboratorului, care poate delega unele
sarcini responsabilului pentru biosiguran sau altui personal specializat.
Sigurana muncii n laborator este totodat responsabilitatea tuturor, de la efi i
tehnicieni superiori pn la ultimul angajat al laboratorului; fiecare membru al personalului este
responsabil att pentru propria siguran ct i pentru cea a colegilor de lucru. Fiecare angajat
este obligat s-i desfoare activitatea n condiii de siguran i s raporteze superiorului
orice incident, aciune sau situaie periculoas.
Este de dorit s se efectueze periodic audituri pe linia proteciei muncii prin specialiti
proprii sau din afara instituiei.
19.1. Responsabilul cu biosigurana
Oriunde este posibil trebuie numit un responsabil cu biosigurana pentru a asigura c
politicile i programele sunt aplicate cu consecven n tot laboratorul. Responsabilul cu
biosigurana i execut atribuiile n numele efului instituiei sau al laboratorului. n unitile
mici, responsabilul cu biosigurana poate fi un microbiolog sau un membru al personalului
tehnic care ndeplinete i aceste atribuii, fiind prevzut c le consacr o anumit parte din
timpul su de lucru.
Indiferent de gradul de implicare n munca de biosiguran, persoana desemnat
trebuie s aib competena profesional necesar pentru iniierea, monitorizarea i aprobarea
unor activiti specifice, n concordan cu procedurile generale de biosecurizare i
biosiguran.
Responsabilul cu biosigurana trebuie s cunoasc i s aplice legile, reglementrile i
ghidurile naionale i internaionale relevante; de asemenea trebuie s asiste laboratorul n
elaborarea propriilor proceduri operaionale standard. Persoana desemnat trebuie s aib o
pregtire de baz n microbiologie, i cunotine de biochimie, biologie i fizic. Sunt de dorit
cunotine despre practici de laborator, clinice i de biosiguran, inclusiv despre echipamente
de securizare i informaii tehnologice relevante pentru proiectarea, operarea i ntreinerea
facilitilor. Persoana respectiv trebuie s fie capabil s comunice eficient cu personalul
administrativ, tehnic i din serviciile auxiliare.
Activitile responsabilului cu biosigurana trebuie s includ urmtoarele:
x
x
x
x
Consultan tehnic, privind biosigurana i biosecuritatea;

Efectuarea de audituri interne periodice n domeniul biosiguranei, avnd ca obiect
metodele, procedurile i protocoalele de lucru, agenii biologici, materialele i
echipamentele;
Discutarea nclcrilor protocoalelor sau procedurilor de biosiguran cu persoanele n
cauz;
Verificarea faptului c toi membrii personalului au fost instruii corespunztor n probleme
de biosiguran;
1
105
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(N758
LABORATOARE
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
Asigurarea unui program de educaie continu n domeniul biosiguranei;

Investigarea tuturor incidentelor care implic o posibil diseminare de materiale infectate
sau toxice i raportarea celor constatate i a recomandrilor catre eful de laborator i
Comitetul de biosiguran;
Conlucrarea cu personalul medical n legtur cu posibilele infecii dobndite n laborator;
Asigurarea unei decontaminri corespunztoare, n urma unor scurgeri sau a altor
incidente implicnd materiale infecioase;
Asigurarea gestionrii corecte a deeurilor;
Asigurarea unei decontaminri corespunztoare a echipamentelor nainte de a fi supuse
unor operaii de reparaii sau ntreinere periodic;
Meninerea interesului comunitii privind problemele de sntate i de mediu;
Stabilirea de proceduri adecvate pentru intrarea / ieirea n/din laborator a materialelor
infecioase patogene n conformitate cu reglementrile naionale;
Analizarea aspectelor de biosiguran din toate planurile, protocoalele i procedurile
operaionale din activitile de cercetare care implic lucrul cu ageni infecioi, nainte de
nceperea efectiv a acestor activiti;
Instituirea unui sistem de intervenie n caz de situaii de urgen.
19.2. Comitetul de biosiguran

Trebuie nfiinat un comitet de biosiguran pentru a elabora politicile instituionale n
materie de biosiguran i codurile de practici n domeniu. Comitetul de biosiguran trebuie de
asemenea s analizeze protocoalele de cercetare care implic utilizarea de ageni infecioi,
animale de laborator, ADN recombinant i materiale modificate genetic. Alte funcii ale
comitetului pot include evaluarea riscurilor, formularea unor noi politici de biosiguran i
arbitrajul n disputele referitoare la probleme de biosiguran.
Componena comitetului de biosiguran trebuie s reflecte diversele arii de activitate i
nivelul de competen tiintific ale instituiei.
Componena de baz a unui comitet de siguran ar trebui s includ :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Responsabilul (ii) cu biosigurana;

Personal tiinific;
Personal medical;
Veterinar (i) (dac se lucreaz cu animale);
Reprezentani ai personalului tehnic;
Reprezentani ai conducerii laboratorului.
Comitetul de biosiguran trebuie s solicite sfatul responsabililor pentru siguran din

diferitele departamente (ex. specialiti n radioprotecie, securitatea muncii n industrie,
prevenirea incendiilor, etc.), iar n unele situaii se poate solicita asistena unor experi
independeni din diferite domenii apropiate de activitate, a autoritilor locale i a organismelor
naionale de reglementare. Participarea unor membri ai comunitilor locale poate fi de
asemenea util, mai ales dac exist chestiuni controversate n dezbatere.

106
20. Reguli de siguran pentru personalul auxiliar
ntr-un laborator, desfurarea activitii n condiii optime i de siguran depinde, n

mare msur, de personalul auxiliar i, de aceea, este esenial ca acesta s fie bine instruit
asupra regulilor de siguran care trebuie respectate pentru o astfel de activitate.
20.1 Personalul tehnic i de ntreinere a cldirii
Personalul tehnic care se ocup cu ntreinerea i repararea cldirii, instalaiilor i
echipamentelor trebuie s aib anumite cunotine legate de natura activitii laboratorului
respectiv, s cunoasc normele i procedurile de biosiguran.
Testarea echipamentului dup verificare trebuie fcut i/sau supravegheat de
responsabilul cu biosigurana (de exemplu: testarea eficienei HSB dup instalarea unor filtre
noi).
Laboratoarele sau instituiile care nu au tehnicieni i servicii de ntreinere proprii,
trebuie s-i asigure colaborarea cu tehnicieni abilitai existeni n localitate pe care s i pun
la curent cu dotarea i condiiile de lucru din laborator.
Inginerii i personalul de ntreinere vor avea acces n laboratoarele cu grad de
biosiguran de Nivel 3 sau de Nivel 4 numai cu aprobarea i sub supravegherea
responsabilului cu biosigurana i/sau a efului laboratorului.
20.2. Personalul responsabil cu meninerea cureniei
n laboratoarele cu grad de biosiguran de Nivel 3 i Nivel 4, curenia este de
preferat s fie fcut de personalul laboratorului. Personalul angajat pentru curenie va avea
acces n laboratoarele de Nivel 3 sau de Nivel 4 numai cu aprobarea i sub supravegherea
responsabilului cu biosigurana i/sau a efului laboratorului.
1
107
21. Programele de instruire
Un program continuu de instruire privind protecia la locul de munc este esenial

pentru meninerea vigilenei personalului laboratorului i a personalului auxiliar n domeniul
biosiguranei. efii de laborator, cu ajutorul responsabilului cu biosigurana i a altor persoane
calificate au un rol cheie n instruirea personalului. Eficiena instruirii privind biosigurana, de
fapt ntreaga instruire privind protecia personal i meninerea sntii, depinde de implicarea
echipei de conducere, de factori motivaionali, instructajul profesional iniial adecvat, relaiile de
comunicare bune i, n ultim instan, de elurile i obiectivele instituiei. n cele ce urmeaz
vor fi prezentate elementele critice ale unui program eficace de instruire privind biosigurana.
1. Evaluarea necesitilor
Acest proces include definirea sarcinilor identificate, n ordinea importanei lor
(frecven, grad de risc, complexitate) i anumite detalii privind etapele ce trebuie parcurse
pentru realizarea acestora.
2. Stabilirea obiectivelor instruirii
Acestea sunt deprinderi corecte pe care cel instruit va trebui s demonstreze, dup
instruire, c i le-a nsuit, n timpul muncii. Obiectivele pot preciza condiiile n care se
desfoar anumite activiti sau deprinderi i nivelul cerut de competen.
3. Precizarea coninutului i mijloacelor de desfurare a instruirii.
Coninutul este reprezentat de cunotinele sau aptitudinile pe care persoanele
instruite trebuie s i le nsueasc i care s-i permit atingerea obiectivelor urmrite n
materie de comportament. Acele persoane, care-i cunosc cel mai bine profesia i cerinele
acesteia, sunt cele mai n msur pentru a defini coninutul programului de instruire privind
biosigurana. Alte metode folosite trebuie s se concentreze pe includerea unor exerciii menite
a nlesni rezolvarea problemelor sau pe imaginarea unor mijloace educative menite s duc la
corectarea greelilor constatate la aplicarea unor tehnici. Nu este evident c o anumit metod
de nvare (lectur, cursuri televizate, programe pe calculator, cursuri video interactive etc.)
este mai bun dect alta. Foarte multe depind de necesitile specifice ale instructajului, de
componena grupului care este instruit, etc.
4. Stabilirea diferenelor individuale de instruire
Instruirea efectiv trebuie s in seama de particularitile i calitile persoanelor
instruite. Indivizii i grupurile pot diferi n ceea ce privete aptitudinile, gradul de instruire,
cultur, limba vorbit i nivelul deprinderilor profesionale preexistente instruirii. Modul n care
este perceput programul de instruire de ctre participani, ca un mijloc de a-i mbuntii
performanele profesionale sau securitatea personal, va influena substanial modalitatea de
instruire. Unii nva mai bine prin metoda vizual, alii prin practica direct, alii prin studierea
unor materiale scrise.
Cursurile trebuie s se adreseze n egal msur angajailor cu probleme speciale, de
aceea trebuie adaptate, de exemplu pentru cei cu defecte de auz. In plus, se recomand ca toi
cei care concep i desfoar programe de instruire pe probleme de biosiguran, s fie
familiarizai cu metodele principiile de pedagogie pentru nvare n cazul adulilor.
1
109
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
5. Adaptarea modalitilor de instruire

Modalitile de instruire: curs, proiecii, materiale scrise, etc. nu trebuie s vin n
conflict, s genereze reacii negative sau s nu fie adaptate temei abordate. De exemplu, dac
scopul activitii de instruire este acela de a dezvolta capacitatea de rezolvare a problemelor
survenite, atunci ar trebui s fie stimulat mai mult gndirea/judecata/reacia prompt n
cunotin de cauz, dect memorizarea mecanic. Instruirea ar trebui s stimuleze un
comportament practic i/sau un feedback corespunztor (pozitiv/precis/credibil). n plus,
programele de instruire care furnizeaz informaii pentru practic, n condiii similare celor de la
locul de munc, vor stimula transferul deprinderilor i cunotinelor dobndite la actualul loc de
munc.
6. Evaluarea instruirii
Aceasta furnizeaz informaii care ajut s se aprecieze n ce msur instruirea a avut
efectul scontat. Evalurile instruirilor sunt n general de patru feluri:
- evaluarea reaciei cursanilor la tematica i coninutul instructajului
- estimarea cunotinelor asimilate i/sau a noilor performane ale cursanilor
- estimarea schimbrilor de comportament la locul de munc
- evaluarea unor rezultate tangibile obinute n raport cu obiectivele i elurile
organizatorilor
Cea mai complet evaluare a instruirii presupune cumularea celor patru modaliti
menionate.
Cea mai puin eficient metod de evaluare este s se ia n cosiderare numai reacia
cursanilor la tematica instructajului, deoarece aceasta poate s nu coincid cu aplicarea la
locul munc a informaiilor primite i deci cu eficacitatea real a instructajului. Aceasta nu
trebuie s constituie unicul criteriu pentru aprecierea eficienei.
7. Revizuirea instruirii
Evaluarea unei instruirii arat rareori c un program de instruire a avut succes deplin
sau a fost un eec total, datorit utilizrii unui numr mare de criterii pentru msurarea
rezultatelor. De obicei, datele indic o mai bun nelegere, reinere sau aplicare a unor pri
din curs, comparativ cu altele. Diferenele sau lipsurile n cunotinele sau competenele care ar
fi trebuit s fie nsuite n timpul instruirii, arat necesitatea unei prelungiri a timpului de
instruire, a folosirii unor tehnici alternative sau a unor instructori mai eficieni.
OMS furnizeaz o gam variat de materiale pentru instruirea n domeniul siguranei
microbiologice.

110
22. Lista de examinare privind sigurana
Prezenta list-chestionar de examinare este destinat s serveasc la evaluarea

preocuprilor unui laborator biomedical dat n domeniul biosiguranei i al biosecuritii.
ncperile n care este instalat laboratorul
1. S-au respectat criteriile de calificare i certificare atunci cnd s-a construit, respectiv cnd
s-a reevaluat localul ?
2. Localul corespunde cerinelor naionale i locale pentru construcii, inclusiv cele referitoare la
precauiile n caz de dezastre naturale, acolo unde este cazul ?
3. Cile de acces sunt bine semnalate si accesibile ?
4. Localul este curat ?
5. Exista vicii de structur la nivelul pardoselii ?
6. Pardoseala si scrile sunt netede, uniforme i nealunecoase ?
7. Spaiul de lucru permite realizarea activitilor n condiii de siguran ?
8. Spaiile de acces i coridoarele sunt adecvate pentru deplasarea persoanelor i a unor
echipamente de mari dimensiuni ?
9. Mesele de lucru, mobilierul si instalaiile sunt n stare bun ?
10.Suprafeele de lucru sunt rezistente la solveni i substane corozive ?
11. Exista cte o chiuvet pentru splarea minilor n fiecare camer ?
12. Cldirile sunt construite i ntreinute astfel nct s previn ptrunderea i cuibrirea
roztoarelor i insectelor ?
13. Prile expuse ale conductelor de abur i ap fierbinte sunt izolate sau mascate pentru a
asigura protecia personalului ?
14. Exist un generator electric autonom pentru cazurile de ntrerupere a curentului ?
15. Poate fi restricionat accesul n laborator, acesta fiind permis numai persoanelor autorizate ?
16. A fost fcut o evaluare a riscului pentru a se asigura c echipamentul i facilitile sunt
adecvate pentru desfurarea activitilor prevzute ?
Facilitile i condiiile de depozitare
1. Locurile de depozitare, rafturile, etc sunt astfel amenajate nct materialele depozitate s nu
alunece sau s cad ?
2. Se pstreaz curenia, se evit acumularea de gunoaie, de materiale i obiecte de prisos
ce pot reprezenta pericol de accidentare, incendiu sau explozie ?
3. Congelatoarele i spaiile de depozitare se pot ncuia ?
Instalatii sanitare si dependinte pentru personal.
1. ncperile i dotrile sunt meninute curate, n ordine i corespunztoare din punct de
vedere sanitar ?
2. Exist ap potabil ?
3. WC urile i duurile sunt adecvate, curate, n bun stare ? Exist WC-uri i duuri separate
pentru brbai i femei ?
4. Exista ap rece, cald, spun i prosoape ?
5. Sunt vestiare pentru brbai i femei ?
6. Exist spaii (de ex.dulapuri) individuale pentru hainele de strad ?
1
111
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
7. Exista o camer n care se poate mnca, bea cafea etc ?

8. Nivelul zgomotului este acceptabil ?
9. Depozitarea i evacuarea gunoiului menajer se face n mod corespunztor ?
nclzire i ventilaie
1. Temperatura la locul de munc este n limitele confortului termic ?
2 .Ferestrele sunt protejate de soare prin jaluzele ?
3. Este asigurat o ventilaie adecvat (ex: minimum 6 schimburi ale aerului /or), mai ales n
camerele cu sistem mecanic de ventilaie ?
4. Sistemul de ventilatie este prevzut cu filtre HEPA ?
5. Ventilaia mecanic perturb fluxul de aer laminar n interiorul sau n jurul hotelor de
securitate biologic sau al hotelor de protecie chimic ?
Iluminare
1. Iluminarea este adecvat (ex. 300 400 lx.) ?
2. Exist iluminare local la nivelul meselor de lucru ?
3. Este asigurat o iluminare uniform, fr locuri ntunecoase sau slab luminate n ncperi
sau pe coridoare ?
4. Lmpile fluorescente sunt dispuse paralel cu mesele de lucru ?
5. Lumina lmpilor fluorescente este corespunztoare cromatic (compensat) ?
Servicii
1. Este fiecare ncpere a laboratorului prevzut cu suficiente chiuvete, ap, prize de
electricitate i guri de gaz pentru a permite desfurarea activitii n condiii de securitate ?
2. Exist programe adecvate de ntreinere curent i inspecie periodic pentru sigurane,
prize, instalaii de iluminat, cabluri, conducte, etc. ?
3. Defeciunile sunt remediate n timp optim ?
4. Exist un serviciu tehnic propriu de reparaii i ntreinere, cu personal calificat, care s aib
cunotinte referitoare la activitatea specific de laborator ?
5. Accesul personalului de ntreinere n diferite zone ale laboratorului este controlat i
consemnat ?
6. Dac nu exist un serviciu tehnic i de ntreinere propriu, au fost contactate firme de
reparaii i ntreinere care s se fi familiarizat cu echipamentele i activitatea din laborator ?
7. Exist o unitate pentru ntreinerea cureniei ?
8. Accesul personalului pentru curenie n diferite zone ale laboratorului este controlat i
consemnat ?
9. Sunt asigurate serviciile IT n condiii de securizare ?
Msuri de biosecuritate
1. A fost fcut o evaluare calitativ a riscurilor pentru care este necesar un sistem de alarm ?
2. S-a fcut o evaluare a riscurilor i au fost stabilite planuri de intervenie conform
prioritilor ?
3. Intreaga cldire rmne ncuiat n afara programului de lucru ?
4. Uile i ferestrele sunt asigurate mpotriva spargerilor ?
5. Accesul n ncperile n care se afl materiale periculoase sau aparatur scump este
controlat i consemnat ?
6. n afara programului aceste ncperi sunt ncuiate ?
2
112
listaDE
deEXAMINARE
examinare privind
22.22.
LISTA
PRIVINDsigurana
SIGURANA
Prevenirea i combaterea incendiilor

1. Exist un sistem de alarm n caz de incendiu ?
2. Ieirile de incendiu sunt accesibile ?
3. Sistemul de detectare a incendiilor exist, funcioneaz i este testat periodic ?
4. Exist monitorizare din partea echipelor de pompieri ?
5. Ieirile sunt semnalizate luminos n mod adecvat ?
6. Drumul ctre ieire este marcat atunci cnd nu este evident ?
7. Toate ieirile sunt, accesibile i descuiate n timpul programului ?
8. Exist ieiri ascunse de elemente de decor, mobil sau aparatur ?
9. Accesul ctre ieiri este asigurat n aa fel nct s nu fie necesar traversarea unor zone
periculoase ?
10. Toate ieirile conduc spre spaii deschise ?
11. Coridoarele, spaiile de trecere i holurile sunt libere i fr obiecte care s mpiedice
deplasarea personalului i folosirea mijloacelor destinate stingerii incendiilor ?
12. Echipamentul pentru stingerea incendiilor este uor de identificat printr-un cod de culori
adecvat ?
13. Stingtoarele de incendiu portabile sunt ncrcate cu regularitate, funcioneaz i se afl n
permanen n locurile special desemnate ?
14. ncperile cu risc potenial de incendiu sunt echipate cu stingtoare i/sau echipamente
contra incendiilor ?
15. n cazul n care ntr-o ncpere se folosesc lichide i gaze inflamabile, ventilatia mecanic
este suficient pentru a elimina vaporii inainte de atingerea unei concentraii periculoase ?
16. Personalul este instruit pentru a interveni n caz de incendiu ?
Stocarea lichidelor inflamabile
1. Depozitul de lichide inflamabile este separat de cldirea principal ?
2. Depozitul de substane inflamabile este clar semnalizat ca zon cu risc de incendiu ?
3. Are un sistem de ventilaie propriu, care s fie separat de cldirea principal ?
4. Comutatoarele electrice sunt protejate sau plasate n afara depozitului ?
5. Instalaia de iluminat este asigurat mpotriva aprinderii eventualilor vapori prin scnteie ?
6. Lichidele inflamabile sunt pstrate n containere adecvate, ventilate, construite din materiale
neinflamabile ?
7. Coninutul containerelor este corect menionat pe etichet ?
8. Stingtoarele, pturile ignifuge i alte echipamente contra incendiilor exist i sunt plasate n
afara, dar n imediata apropiere a depozitului ?
9. Inscripiile care interzic fumatul se afl la vedere n afara i n interiorul depozitului de lichide
inflamabile ?
10. n laborator sunt stocate numai cantiti minime de substane inflamabile ?
11. Sunt acestea inute n spaii special amenajate, destinate substanelor inflamabile ?
12. Aceste spaii poart inscripiile Lichide inflamabile-Pericol de incendiu ?
13. Personalul este instruit pentru manipularea i folosirea corect a lichidelor inflamabile ?
Gazele comprimate i lichefiate
1.Containerele pentru gaz sunt corect etichetate i marcate cu coduri de culoare adecvate ?
2. Cilindrii cu gaz comprimat i valvele acestora pentru presiune nalta i reductorii de presiune
sunt inspectai periodic ?
3.Valvele de reducie sunt ntreinute corespunztor ?
4. Indicatorul de presiune este conectat cnd cilindrul se afl n funciune ?
5. Capacul de protecie este pus n timpul transportului sau cnd cilindrul nu funcioneaz ?
3
113
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
6. Cilindrii cu gaz comprimat sunt depozitai corespunztor, astfel nct s nu cad n cazul
unor dezastre naturale ?
7.Cilindrii (buteliile) cu gaz lichefiat i rezervoarele de produse petroliere lichide sunt ferite de
sursele de cldur ?
8. Personalul este corect instruit pentru a folosi i transporta corect gazele comprimate i
lichefiate ?
Pericole de natur electric
1. Toate instalaiile electrice noi, nlocuirile, modificrile i reparaiile sunt fcute n conformitate
cu normele naionale de siguran ?
2. Instalaia electric are mpmntare ?
3. Sunt protejate toate circuitele din laborator cu sigurane, sigurane de mpmntare i
dispozitive de deconectare de la reea ?
4. Dispozitivele electrice existente sunt avizate pentru a fi folosite n laborator ?
5. Cordoanele electrice ale aparatelor au lungime adecvat (sunt contraindicate cablurile prea
lungi), sunt n bun stare i lipsite de uzuri, crpturi i tieturi ?
6. Este fiecare priz destinat unui singur aparat ? (nu se recomand folosirea de prize
multiple)
Echipamentul de protecie pentru personal
1. Exist echipament de protecie specific pentru ntreg personalul, ex. mnui, halate, oruri,
salopete ?
2. Exist echipament special pentru lucrul cu substane chimice, radioactive i cancerigene
(soruri de cauciuc, mnui pentru chimicale); exist mnui rezistente la cldur pentru
descrcarea autoclavelor i pupinelelor ?
3. Exist ochelari de protecie, mti, scuturi (vizoare) tranparente pentru fa ?
4. Exist dispozitive pentru splarea ochilor ?
5. Exista duuri pentru situaii de urgen ?
6. Protecia mpotriva radiaiilor se realizeaz conform standardelor naionale i internaionale,
inclusiv existena dozimetrelor ?
7. Exist mti de gaze curate, dezinfectate i controlate cu regularitate; sunt ele pstrate la
ndemn i n condiii igienice ?
8. Exist filtre corespunztoare tipurilor de mti (ex: filtre HEPA pentru microorganisme, filtre
adecvate pentru gaze sau particule ?
9. Mtile de gaze individuale au fost testate pentru etaneitate pe faa persoanelor respective ?
Protecia i starea de sntate a personalului
1. Exist un serviciu de medicin profesional pentru personal ?
2. Trusele de prim ajutor sunt plasate n locuri accesibile ?
3. Exist personal calificat pentru a acorda primul ajutor ?
4. Acetia sunt instruii pentru a face fa situaiilor de urgen specifice laboratorului (contact
cu substane corozive, ingestie accidental de substane toxice sau infectante) ?
5. Personalul auxiliar (de ex. personalul care face curenia i cel administrativ) a fost instruit
asupra riscurilor poteniale pe care le prezint laboratorul i materialele pe care le manipuleaz ?
6. Sunt afiate anunuri vizibile cuprinznd numele persoanelor care pot acorda primul ajutor i
telefoanele serviciilor de urgen ?
7. Femeile de vrst fertil sunt informate despre riscurile i conscinele posibile pe care le
implic lucrul cu substane carcinogene, mutagene, teratogene i cu bacterii ?
4
114
listaDE
deEXAMINARE
examinare privind
22.22.
LISTA
PRIVINDsigurana
SIGURANA
8. . Femeile de vrst fertil care bnuiesc sau sunt sigure c sunt nsrcinate tiu c trebuie
s-i informeze efii n scopul eventualei schimbri a locului de munc pe perioada sarcinii ?
9. Exist un program de imunizri adaptat specificului laboratorului ?
10. Se efectueaz teste cutanate i radiologice pentru cei care lucreaz n condiii de risc TBC
sau alte teste specifice pentru alte infecii ?
11. Exist o eviden a bolilor profesionale i a accidentelor de munc ?
12. Exist semnale, sigle i afie de avertizare pentru prevenirea i reducerea riscului de
accidente ?
13. Personalul este instruit pentru respectarea precauiilor de biosiguran ?
14. Personalul este ncurajat s raporteze expunerile poteniale ?
Echipamentul de laborator
1. ntregul echipament a fost certificat ca sigur pentru folosire autorizat sub raportul folosirii n
condiii de securitate ?
2. Exist proceduri scrise pentru decontaminarea echipamentului nainte de a fi supus
operaiunilor de ntreinere ?
3. Hotele de siguran biologic i hotele de protecie chimic sunt ntreinute i verificate
periodic ?
4. Autoclavele i alte aparate care funcioneaz sub presiune sunt verificate periodic ?
5. Rotoarele i port-cuvele centrifugilor sunt verificate periodic ?
6. Filtrele HEPA sunt nlocuite periodic ?
7. Se folosesc pipete n locul acelor de sering ?
8. Sticlria ciobit sau crpat este ntotdeauna aruncat i nu refolosit ?
9. Exist containere speciale pentru sticlria spart ?
10. Se foloseste de preferin material plastic n locul sticlriei ori de cte ori este posibil ?
11. Se folosesc containere speciale pentru obiecte neptoare/ tietoare folosite ?
Materiale infecioase
1. Primirea probelor se face n condiii de securitate ?
2. Se pstreaz nregistrri ale probelor recepionate ?
3. Probele sunt despachetate n hota de siguran biologic cu grija i atenia cuvenite pentru a
evita spargerea i scurgerea/stropirea ?
4. Se folosesc mnui i alte echipamente de protecie pentru despachetarea probelor ?
5.Personalul este instruit n ceea ce privete transportul produselor infecioase conform
legislaiei naionale i/sau internaionale ?
6. Este meninut ordinea i curenia pe mesele de lucru ?
7. ndeprtarea materialelor infecte se face cel puin o dat pe zi, iar tratarea i evacuarea lor
se face fr riscuri pentru personal i pentru mediul nconjurtor ?
8. Au fost instruii toi membrii laboratorului asupra procedurilor de urmat n cazul n care se
produce spargerea i mprtierea de culturi microbiene i materiale infecioase ?
9. Eficacitatea sterilizrii este controlat prin utilizarea de indicatori fizici, chimici i biologici ?
10. Exist o procedur scris pentru decontaminarea cu regularitate a centrifugilor ?
11. Cupele sau suporii pentru cupe ai centrifugilor sunt prevzui cu capace etane ?
12. Se folosesc curent i corect dezinfectanii indicai ?
13. Personalul care lucreaz n laboratoare cu nivel de biosecuritate 3 i 4 este pregtit n mod
corespunztor prin instructaje speciale ?
Chimicale i substane radioactive
1. Chimicalele incompatibile ntre ele sunt stocate i manipulate separat ?
5
115
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(N758
LABORATOARE
2. Sunt toate chimicalele etichetate corect cu menionarea denumirii corecte i avertizare

asupra pericolelor legate de manipulare ?
3. Sunt expuse la vedere afie de avertizare cu privire la riscul de accidentare legat de
manipularea unor chimicale ?
4. Exista truse pentru curarea/neutralizarea chimicalelor vrsate ?
5. Personalul este instruit cu privire la msurile ce trebuie luate n cazul scurgerilor sau vrsrii
de chimicale periculoase ?
6. Substanele inflamabile sunt depozitate corect i n siguran n cantiti minime n locuri
securizate ?
7. Exist crucioare/suporturi pentru transportul sticlelor ?
8. Exist un responsabil cu protecia mpotriva radiaiilor, sau un manual de referin la
ndemna personalului, spre consultare ?
9. Personalul este instruit corespunztor pentru lucrul cu substane radioactive ?
10. Exist evidene i nregistrri corecte ale stocurilor i consumurilor de substane radioactive
folosite ?
11. Exist ecrane de protecie mpotriva radiaiilor ?
12. Este monitorizat gradul de iradiere al personalului ?
6
116
Anexa 1
Primul-ajutor
Primul ajutor n caz de expunere accidental la material real / potenial infecios const
n aplicarea imediat dup eveniment, de ctre o persoan avizat, a tratamentului medical
adecvat chiar la locul producerii accidentului.
Primul ajutor se acord respectnd metoda aprobat pentru o anumit expunere,
urmnd ca ngrijirile s fie continuate de ctre un medic de specialitate pentru tratarea
consecinelor accidentului.
Echipamentul minim necesar pentru acordarea primului ajutor const n:
1. Trusa de prim-ajutor,
2. mbrcminte de protecie i echipament de siguran pentru persoana care asigur
primul ajutor,
3. Echipament de irigare ocular.
1. Trusa de prim-ajutor
Trusa de prim-ajutor va fi confecionat din materiale care s asigure protecia
coninutului mpotriva prafului i a umiditii. Trusa va fi pstrat la loc vizibil, uor de
recunoscut i de accesat. Prin convenie internaional, trusa de primajutor este identificat
printr-o etichet cu o cruce alb pe fond verde.
Trusa de prim-ajutor trebuie s conin:
1. Instruciuni generale de utilizare i lista de inventar a acesteia
2. Comprese sterile de diferite dimensiuni n ambalaje individuale
3. Comprese sterile oculare cu bandaje de ataare
4. Comprese triunghiulare
5. Comprese sterile de acoperire a rnilor
6. Ace cu siguran
7. Fee sterile simple
8. Ghid / manual de acordare a primului-ajutor de calitate, de exemplu, editat de Crucea
Roie Internaional.
2. Echipamentul pentru protecia celui care acord primul-ajutor
1. Piesa pentru respiraia gur-la-gur
2. Mnui de cauciuc i alte mijloace de protecie mpotriva expunerii la snge.
3. Trusa de curenie/neutralizare a dispersrilor de snge (vezi Capitolul 14).
3. Echipamentul de irigare ocular
Echipamentul de irigare ocular trebuie s fie la ndemn, iar personalul bine instruit
pentru utilizarea sa corect.
117
117
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
Procedurile de prim ajutor dup expunerea accidental la material infecios

1. neparea, tierea, zgrierea, abraziunea accidental
x
x
x
x
Consider ca fiind un risc de expunere semnificativ orice leziune cu corpuri ascuite,

tioase, chiar dac nu sunt urme de snge vizibile la locul leziunii i tegumentul nu
pare a fi fost lezat serios.
Spal imediat abundent zona afectat cu un jet de ap, apoi cu ap i spun.
Dezinfecteaz zona cu un antiseptic activ, eficient, proaspt preparat; aplic un
pansament steril dac este necesar.
Raporteaz incidentul efului de laborator i medicului epidemiolog-infecionist.
2. Contactul accidental cu material infecios

Categoria include orice contact neprotejat al tegumentului prezentnd soluii de
continuitate, a mucoasei bucale, nazale sau a globului ocular cu material potenial infecios.
x Spal abundent imediat zona tegumentar cu jet de ap i spun. Folosete doar ap
pentru cavitatea bucal i, respectiv, ser fiziologic steril pentru globul ocular.
x Raporteaz imediat incidentul efului de laborator i medicului epidemiolog /
infecionist.
3. Aciuni imediate dup expunerea accidental
Indiferent de potenialii ageni microbieni patogeni, coninui de materialul infecios
implicat n expunerea accidental potenial infectant, se impun cteva msuri imediate:
x Se va preleva o prob de snge de la accidentat pentru testri de baz (afirmarea /
infirmarea unei / unor infecii preexistente accidentului cu etiologie: HBV +/- HDV,
HCV, HIV, Treponema pallidum, etc.).
x O contraprob de ser se va pstra n congelator pentru investigaii suplimentare.
x Se va preleva (dac este posibil) o prob de snge de la subiectul de la care provine
materialul biologic potenial infectios (teste paralele cu accidentatul).
Raiunea pentru care se fac aceste prelevri este de :
o a stabili caracterul profesional / neprofesional al unei / unor imbolnviri ulterioare;
o a se adopta o atitudine terapeutic imediat, raional i eficient fa de
accidentat;
o a stabili durata de urmrire/ supraveghere clinic i de laborator a accidentatului (n
general, pe durata maxim de incubaie a agentului/ agenilor infecioi potenial / real
existeni n materialul infecios implicat n accident.
x n cursul investigrii unei izbucniri epidemice, trebuie stabilite proceduri adecvate,
specifice de prevenie i tratament i de urmrire pe durata maxim de incubare
(pentru agentul etiologic incriminat) a personalului implicat n aciune.
x n cursul unei izbucniri epidemice suspectate de a fi o febr hemoragic, personalul
implicat n investigarea focarului va fi monitorizat de dou ori pe zi, timp de trei
sptmni pentru starea general i temperatur.
x Dac un detaliu procedural este identificat drept cauza generatoare a accidentului,
este necesar a se ntreprinde o aciune corectiv.
118
118
Anexa 2
Imunizarea personalului
Evaluarea riscurilor pe care le implic lucrul cu diferii ageni microbieni trebuie s fac
obiectul unor discuii amnunite cu specialitii n domeniu.
Disponibilitatea i existena autorizaiilor de punere pe pia local, avizarea de ctre
Ministerul Sntii i utilitatea unor vaccinuri i/sau medicamente (n special antibiotice) pentru
cazurile de expunere accidental trebuie s fie evaluate i luate n considerare atunci cnd se
intenioneaz a se lucra cu anumii ageni microbieni.
De asemenea, screening-ul serologic prealabil al personalului expus la un anumit risc
infecios (cnd este disponibil un vaccin specific) se impune naintea unei vaccinri, deoarece
poate depista starea de imunitate dobndit (vaccinri, infecii anterioare) a unei pri a
personalului pentru care vaccinarea este inutil.
Dac un vaccin / anatoxin este avizat de Ministerul Sntii i este disponibil,
vaccinarea personalului va fi efectuat abia dupa evaluarea riscului unei posibile expuneri
accidentale i dup evaluarea clinic a strii de sntate a personalului vizat.
Va fi luat n considerare i existena / accesibilitatea la servicii clinice de specialitate pentru
managementul cazurilor posibile de expuneri accidentale la ageni microbieni.
119
119
Anexa 3
Centre colaboratoare ale OMS n domeniul

biosiguranei
Informaii n privina cursurilor de instruire i a materialelor informative de profil

disponibile pot fi obinute prin solicitare n scris de la oricare dintre urmtoarele:
Biosafety programme, Department of Communicable Disease Surveillance and
Response, World Health Organization, 20 Avenue Appia, 1211 Geneva 27, Switzerland
(http://www.who.int/csr/).
WHO Collaborating Centre for Biological Safety, Swedish Institute for Infectious
Disease Control, Nobels Vg 18, S-171 82 Solna, Sweden
(http://www.smittskyddsinstitutet.se/English/english.htm).
WHO Collaborating Centre on Biosafety Technology and Consultative Services, Office
of Laboratory Security, Health Canada, 100 Colonnade Road, Loc.: 6201A, Ottawa, Ontario,
Canada K1A 0K9 (http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl).
WHO Collaborating Centre for Applied Biosafety Programmes and Training, Office of
Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, 1600 Clifton Road, Mailstop
F05, Atlanta, GA 30333, USA (http://www.cdc.gov/).
WHO Collaborating Centre for Applied Biosafety Programmes and Research, Division
of Occupational Health and Safety, Office of Research Services, National Institutes of Health,
Department of Health and Human Services, 13/3K04 13 South Drive MSC 5760, Bethesda, MD
20892-5760, USA http://www.nih.gov/).
WHO Collaborating Centre for Biosafety, Victorian Infectious Diseases Reference
Laboratory, 10 Wreckyn St, Nth Melbourne, Victoria 3051, Australia. Postal Address:Locked
Bag 815, PO Carlton Sth, Victoria 3053, Australia (http://www.vidrl.org.au/).
121
121
Anexa 4
Sigurana microbiologic a echipamentelor
n cursul utilizrii, anumite echipamente pot genera pericole de contaminare

microbiologic.
Alte echipamente sunt concepute special pentru a preveni sau reduce riscurile de
contaminare microbiologic (vezi Capitolul 11).
Echipamente care pot genera pericole de contaminare microbiologic
n Tab. A4-1 sunt cuprinse echipamentele i operaiunile care pot genera pericole de
contaminare microbiologic precum i sugestii privind modul n care pot fi eliminate sau reduse
aceste riscuri.
Tabel A4-1. Echipamente i operaiuni care pot genera pericole
Echipament
Riscul
Msuri de eliminare sau reducere a riscului
Ace de
sering
Inoculare
accidental,
aerosoli, stropire
Centrifuga
Aerosoli, stropire
i spargerea
cupelor
x Nu reacoperii acele i nu retezai acele

x Folositi seringi cu sistem tip baionet de blocare a
acului sau seringi de unic utilizare la care acul este
parte integrant a seringii pentru a preveni detaarea
acului de sering.
x Folositi tehnici corecte de laborator, ex :
- umplei seringa cu atenie pentru a reduce la minimum
cantitatea de bule de aer sau formarea de spum n
inocul
- evitai folosirea seringilor pentru a amesteca lichide
infecioase; dac totui le folosii asigurai-v c vrful
acului este imersat n lichid i evitai expulzarea din
sering cu for excesiv
- nfurai acul i amboul ntr-un tampon de vat
imbibat n dezinfectantul corespunztor nainte de a
extrage acul din capacul/dopul de cauciuc al unui flacon
- eliminai excesul de lichid i bulele de aer innd
seringa vertical ntr-un tampon de vat imbibat n
dezinfectant sau ntr-un flacon
x Efectuai toate operaiunile cu material infecios ntr-o HSB
x Imobilizai animalele n timpul inoculrii. Folosii ace
boante sau canule pentru inocularea intranazal sau
oral. Lucrai ntr-o HSB.
x Autoclavai acele de sering dup utilizare i
asigurai-v c evacuarea lor se face corect. Dac acul
i seringa nu formeaz un dispozitiv unitar, nu le
dezasamblai nainte de autoclavare
x Folosii cupe cu capac sau rotoare cu capac etan.
Deschidei cupele sau rotoarele dup ce aerosolii s-au
depus (30 min) sau n HSB
123
123
ghid naional
de biosiguran
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRUpentru
LABORATOARE
Echipament
Riscul
Msuri de eliminare sau reducere a riscului
Ultracentrifuga
Aerosoli, stropire
i spargerea
cupelor
Exicatoare
pentru
anaerobioz
Desicatoare
Explozie, rspndire de materiale

infecioase
Implozie,
dispersarea
fragmentelor de
sticl i materiale
infecioase
Aerosoli, scurgeri
i spargeri ale
containerului
x Instalai un filtru HEPA ntre centrifug i pompa de vid

x nregistrai orele de functionare pentru fiecare rotor i
respectai un program preventiv de supraveghere a
funcionrii (service) pentru a reduce riscul unor
defeciuni mecanice.
x Umplei i golii cupele ntr-o HSB
x Asigurai-v de integritatea capsulei din srm din
jurul catalizatorului
Omogenizatoare, aparate
pentru
fragmentarea
esuturilor
Sonicatoare i
bi cu
ultrasunete
Agitatoare
pentru culturi,
shakere,
mixere
Liofilizatoare
Bi de ap
x Aezai-le ntr-o cuc rezistent din plas de srm
x Efectuai operaiunile i deschidei echipamentul n

HSB
x Folosii modele special concepute care previn
scurgeri pe la garniturile pieselor rotative sau ale
capacelor sau folosii aparate cu incinte etane
x nainte de a deschide omogenizatorul ateptai 30
min, pentru a permite aerosolilor s se depun.
Refrigerarea condenseaz aerosolii
x Dac folosii un omogenizator manual, nfurai
tubul ntr-un material absorbant
Aerosoli, tulburri x Efectuai operaiunile i deschidei echipamentul n
auditive, dermatite HSB
x Asigurai izolarea mpotriva ultrasunetelor
x Utilizai mnui pentru a v proteja mpotriva
efectelor chimice ale detergenilor
Aerosoli, stropire
x Efectuai operatiunile n HSB sau n nie speciale
vrsare
x Utilizai pentru culturi recipiente solide, nchise etan,
cu capac nurubat, prevzute cu filtre protectoare dac
este necesar, i bine securizate.
Aerosoli i
x Utilizai filtre de aer pentru a proteja dispozitivul de vid
contaminare prin
x Utilizai o metod eficient de decontaminare, de ex.
contact direct
chimic
x Asigurai-v de existena unor capcane pentru
umezeal i a unui condensator de vapori.
x Inspectai atent toate recipientele din sticl pentru vid
pentru a observa eventuale zgrieturi sau crpturi
Utilizai numai sticlrie special conceput pentru vid
Creterea
x Asigurai curarea i dezinfecia periodic
microorganismelor x Nu utilizai azida de sodiu pentru a preveni creterea
Formarea de
microorganismelor
compui explozivi
ai azidei de sodiu
cu anumite metale
124
124
Anexa
4. siguranaMICROBIOLOGIC
microbiologic aAechipamentelor
Anexa
4. SIGURANA
ECHIPAMENTELOR
Pe lng riscurile microbiologice, riscurile produse de echipament trebuie anticipate i

prevenite. Tabelul A4-2 prezint cteva cauze ale accidentelor generate de echipamente.
Tabel A4-2. Cauze mai frecvente ale accidentelor generate de echipamente
Accident
Cauza accidentului
Msuri de reducere sau eliminare
a riscului
Concepere sau construcie greit
Fire electrice in incubatoare Creterea necontrolat x Respectarea standardelor
a temperaturii.
naionale
Electrocutri
mpmntare
defectuoas
Utilizare improprie
Accidente de centrifugare
Neechilibrarea cupelor
x Instruirea i supravegherea
personalului
Explozia incubatoarelor
Utilizarea unui gaz
x Instruirea i supravegherea
pentru anaerobioza
necorespunztor
personalului
Adaptare improprie
Explozie n recipiente sub
Transportul impropriu al x Utilizarea unui echipament
vid de uz casnic
azotului lichid
corespunztor
Explozie n frigidere de uz Chimicale periculoase x Pstrarea solvenilor i extractelor
casnic
depozitate in containere cu punct de aprindere sczut numai
nerezistente la aprin- n frigidere i containere rezistente
dere i explozii. Ex : eter la aprindere i explozii
n recipient cu dop
nurubat care permite
scurgerea
ntreinere incorect
Foc n flam-fotometru
Incorecta reasamblare a x Instruirea i supravegherea
componentelor cu ocazia personalului
reparaiilor i operaiunilor
de ntreinere
125
125
ANEXA 5
Substanele chimice: pericole

i precauii
Aceast anex cuprinde informaii de baz cu privire la sntate i siguran, informaii
i precauii de protecie referitoare la o list selectat de substane chimice folosite n mod
obinuit n laboratoarele de sntate public i n cele de cercetare medical. Aceast list nu
este exhaustiv, absena din ea a unei anumite substane chimice nu implic i faptul c
aceasta nu este periculoas. Toate substanele chimice din laborator trebuie manipulate cu
atenie i de o manier care s minimalizeze riscurile de expunere.
127
127
Cristale albe,
delicvescente ;
punct topire
110C;
foarte solubil n
ap.
Extrem de toxic prin
ingestie, cu posibil efect
cumulativ. Afecteaz
sistemul nervos i
cardiovascular.
Vtmtor n caz de
contact cu ochii sau cu
pielea.
Iritaie moderat a
ochilor
i
tractului
respirator.
Afecteaz
SNC, tractul respirator,
rinichii.
Posibil
carcinogen.
Lichid incolor sau

gaz cu miros
neptor, arom
de fructe;
punct topire 121C,
punct fierbere
21C.
Acetaldehida
CH3CHO
Acetat de
taliu
TIC2H3O2
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Tabel A5-1. Substane chimice: pericole i precauii
Extrem de inflamabil ;
amestecul vapori / aer
este explozibil ;
punct de aprindere 39C, interval
inflamabil 4-57%..
PERICOLE DE FOC
128
Se pstreaz n recipiente
bine nchise. Se lucreaz n
nia de protecie chimic, n
hot sau cu ventilaie cu
exhaustarea aerului ; cu
mbrcminte de protecie
incluznd filtru respirator
pentru pulberi, ochelari de
protecie chimic, mnui din
cauciuc sau plastic, protecia
ochilor.
Se vor evita flacra deschis,

scnteile, fumatul, contactul
cu suprafee fierbini. Se
stocheaz
n
recipiente
nchise ermetic, la distan de
oxidani; se stocheaz doar
dac este stabilizat. Se va
lucra n nia de protectie
chimic sau n spaii bine
ventilate, cu mnui din
cauciuc, ochelari de protecie
i protecie respiratorie.
PRECAUII DE SIGURAN
n contact cu aerul poate forma
peroxizi
explozibili.
Poate
polimeriza sub influena acizilor,
materialelor alcaline,n prezena
urmelor de metale. Agent puternic
reductor, reacioneaz violent cu
oxidanii, cu variate substane
organice, cu halogenii, acidul
sulfuric i amine.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
ALTE PERICOLE
ghid
naional
biosiguranPENTRU
pentru LABORATOARE
laboratoare
GHID
NAIONAL
DEde
BIOSIGURAN
Asfixiant ; cauzeaz
degerturi la contactul
cu pielea.
Uoar iritaie a ochilor,

nasului i gtului.
Inhalarea poate cauza
ameeli, narcoz i
com.
Iritare a cilor
respiratorii, a ochilor i
pielii. Expunerea poate
determina convulsii,
pierderea cunotinei,
intoxicare cu cianuri.
Gaz incolor, cu
miros slab eteric
sau de usturoi ; se
livreaz n
containere sub
presiune, dizolvat
n aceton ;
punct topire -81C,
sublimeaz la
-84C.
Lichid incolor
volatil cu miros
dulceag ;
punct topire -95C,
punct fierbere
56C ;
miscibil cu apa.
Lichid incolor cu
miros aromatic;
punct topire -46C,
punct fierbere
82C.
Acetilena
HCCH
Acetona
CH3COCH3
Acetonitril
CH3CN
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
129
Deosebit de
inflamabil ;
punct de aprindere
12,8C, limite
explozibile 3,0-16%.
Deosebit de
inflamabil ;
punct de aprindere 18C,
limite explozibile 2,212,8%.
Deosebit de
inflamabil ;
interval inflamabil 2,5100%.
PERICOLE DE FOC

scnteile, fumatul i contactul
cu oxidani. Se manipuleaz
numai n spaii fr surs de
foc. Se stocheaz n
recipiente nchise etan,
separat de oxidani. Se
lucreaz cu ventilaie de
exhaustare. Se evit contactul
cu pielea, ochii i mucoasele.
Se folosete protecie respiratorie i mnui din cauciuc.
Recipientele care o conin se

stocheaz n zone bine
ventilate, la distan de surse
de foc. Se va evita inhalarea
vaporilor. Se manipuleaz cu
protecie
respiratorie
i
ocular.
Pentru protecia pielii se

folosesc mnui izolatoare,
ochelari de protecie i scuturi
transparente pentru fa. Se
vor evita flacra deschis,
scnteile i fumatul. Se
lucreaz cu ventilaie local
de exhaustare, echipamente
electrice i sisteme de
iluminare protejate contra
exploziei.
PRECAUII DE SIGURAN
Reacioneaz cu soluii apoase

acide i bazice, producnd gaze
i vapori toxici. Reacioneaz cu
oxidani puternici. Atac anumite
feluri de plastic, cauciuc i
esturi. Descompunerea prin
ardere produce acid cianhidric i
oxizi de azot.
Reacioneaz violent cu oxidanii

(acid cromic i acid nitric) i cu
cloroformul n prezena bazelor.
Incompatibil
cu
amestecuri
concentrate de acid sulfuric i
nitric.
Agent
puternic
reductor ;
reacioneaz violent cu oxidanii i
cu florurile i clorurile n prezena
luminii. Reacioneaz cu cuprul,
argintul i mercurul sau cu
srurile
acestora,
formnd
compui sensibili la ocuri (pericol
de explozii).
Se stocheaz n
recipiente i vase
mari, cu mpmntare pentru a
preveni
acumulrile i descrcrile de electricitate
static.
ALTE PERICOLE
Anexa
5. substanele
chimice:
pericole
i precauii
ANEXA
5. SUBSTANELE
CHIMICE:
PERICOLE
I PRECAUII
Coroziv; produce arsuri

severe; vaporii sunt
iritani. Efectele pot fi
tardive.
Lichid incolor cu
miros neptor ;
punct topire 17C,
punct fierbere
118C ;
miscibil cu apa.
Lichid incolor,
fumegnd, cu
miros neptor ;
punct fierbere 121C ;
miscibil cu apa.
Fulgi sau pudr

rou-nchis utilizat
frecvent n soluie
apoas ;
punct topire 197C.
Acid acetic
CH3CO2H
Acid
clorhidric
(10-37%)
HCl
Acid cromic
CrO3
Iritant pentru ochi, piele i

tractul
respirator.
Contactul prelungit sau
repetat cu pielea poate
cauza dermatite, ulcer
cromic i sensibilizare a
pielii. Inhalarea poate
cauza reacii de tip astmatiform. Poate produce
perforare a septului nazal.
Carcinogen pentru om.
Coroziv pentru ochi,

sistemul respirator i
piele ; inhalarea repetat
a vaporilor poate cauza
bronit cronic.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se descompune la
temperaturi de peste
250C n oxid cromic i
oxigen, cu pericol
crescut de aprindere.
Numeroase reaciii pot
genera pericole.
Inflamabil ;
punct de aprindere
40C,
interval inflamabil 5,416%.
PERICOLE DE FOC
130
Se previne contactul cu
tegumentele i ochii, i
inhalarea prafului fin. Se
lucreaz n spaii cu ventilaie,
exhaustare
local
sau
Se va evita
inhalarea
vaporilor; se asigur protecie
respiratorie. n caz de contact
cu ochii, se cltete imediat
cu ap i se solicit asisten
medical; n caz de contact cu
pielea, se spal imediat cu
ap din abunden. Se
lucreaz n nia de protecie
chimic, cu mnui din
cauciuc sau plastic i protecie
ocular (ochelari de lucru sau
ochelari de protecie)
Se va evita inhalarea
vaporilor. n cazul contactului
cu ochii se cltete imediat cu
ap i se solicit asisten
medical. Se manipuleaz cu
mnui din nitril i cu
asigurarea proteciei oculare.
PRECAUII DE SIGURAN
In soluie apoas este un acid

puternic ce reacioneaza cu
bazele i este coroziv. Oxidant
puternic,
reacioneaz
cu
substane combustibile, materiale
organice sau alte materiale uor
oxidabile (hrtie, lemn, sulf,
aluminiu , plastic, etc.). Coroziv
pentru metale.
Reacioneaza violent cu bazele

(solide i soluii concentrate),
exploziv
n
contact
cu
permanganatul de potasiu solid.
La contactul cu numeroase
metale genereaz gaze toxice
sau explozive.
Reacioneaz violent sau exploziv

cu oxidanii.
La foc elibereaz
emanaii de vapori
i gaze foarte
toxice.
ALTE PERICOLE
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARE
PROPRIETI
FIZICE
Lichid incolor,
vscos sau cristale
albe higroscopice ;
punct topire 42C,
se descompune
sub punctul de
fierbere la 213C ;
solubil n ap.
Lichid fumegnd
incolor sau
galben pal ;
punct topire -42C,
punct fierbere 83C
-121C; miscibil cu
apa.
Cristale incolore ;
solubil n ap ;
punct topire
190C ;
se descompune.
SUBSTANE
CHIMICE
Acid fosforic
H3PO4
Acid nitric
(50-70%)
HNO3
Acid oxalic
HO2CCO2H
131
Vtmtor dac vine n

contact cu pielea sau
este ingerat. Pulberea
irit tractul respirator i
ochii. Solutia irit ochii i
poate cauza arsuri ale
pielii.
Coroziv, cauzeaz arsuri

severe ale ochilor sau
pielii. Inhalarea vaporilor
poate cauza edem
pulmonar.

ale pielii i ochilor.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Combustibil. Produce
gaze iritante sau toxice
prin expunere la foc.
Oxidant ; contactul cu
materiale combustibile
poate produce foc.
Elibereaz gaze toxice
Atac multe metale

producnd hidrogen.
PERICOLE DE FOC
Se evit contactul cu pielea i

ochii ; se manipuleaz cu
protecia ochilor i cu mnui.
Se evit inhalarea vaporiilor ;

se
folosete
protecie
respiratorie. n caz de contact
cu ochii se spal imediat i se
solicit asisten medical; n
caz de contact cu pielea, se
spal
imediat;
se
ndeprteaza mbrcmintea
contaminat. Se lucreaz n
nia de protecie chimic, cu
mnui din PVC, or de
plastic i ochelari de protecie.
In caz de contact cu ochii, se

cltete cu ap i se solicit
asisten
medical. Se
lucreaz cu mnui din nitril i
protecie ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
Ageni oxidani; de asemenea

argintul i mercurul i compuii
acestora.
Acid acetic, acid cromic, acid

hidrocianic, anilin, carbon,
hidrogen sulfurat, baze, metale i
multe alte substane.
Acidul
nitric
concentrat
este
implicat n mai
multe
reacii
periculoase dect
oricare
alt
substan chimic.
ALTE PERICOLE
Anexa 5. substanele chimice: pericole i precauii
132
Toxic prin ingestie,

inhalare sau contact cu
pielea. Ingestia poate
produce cefalee, grea.
Iritant pentru ochi.
Cristale galbene,
umezite cu ap
sau dizolvate n
alcool ;
punct topire
122C,
puin solubil n ap.
Lichid vscos,
incolor, inodor ;
punct topire 10C,
punct fierbere
340C (cu
descompunere).
Acid picric
C6H2
(NO2)3OH
2,4,6, trinitrofenol
Acid sulfuric
H2SO4
Soluia concentrat
(15%) coroziv ,
cauzeaz arsuri severe ;
vaporii sunt foarte
corozivi prin inhalare ;
soluiile diluate sunt
iritante pentru ochi i
piele ; cauzeaz arsuri i
dermatite.

severe ale ochilor i
pielii; de asemenea dac
este ingerat. Vaporii sunt
corozivi pentru ochi,
piele i tractul respirator.
Inhalarea vaporilor poate
cauza edem pulmonar.
Lichid incolor ;
miscibil cu apa.
Acid percloric
HClO4
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Poate emana gaze

toxice prin expunerea
la foc. Nu este
combustibil. Multe
reacii pot cauza foc
sau explozie. Diluarea
cu ap genereaz
cldur i poate apare
fierberea. ntotdeauna
se adaug acidul n
ap, niciodata nu se
adaug ap n acid.
Exploziv cnd se
ususc.
Agent puternic oxidant.

Nu este combustibil,
dar stimuleaz
combustia altor
substane.
PERICOLE DE FOC
n caz de contact cu ochii se

cltete imediat i se solicit
asisten medical; n cazul
contactului cu pielea se spal
imediat i se nltur
mbrcmintea contaminat.
Se manipuleaz cu mnui
din
nitril,
asigurndu-se
protecia ochilor i a feei. Nu
trebuie s vin n contact cu
substane inflamabile.
Se menine tot timpul umezit

cu ap sau se folosete doar
n soluie alcoolic.
Se va
evita inhalarea
vaporilor i orice alt
expunere ; se lucreaz cu
mbrcminte de protecie,
incluznd mnui din nitril,
protecia ochilor i protecia
feei. Soluiile fierbini se
manipuleaz n nia de
protecie chimic sau sub
hot.
PRECAUII DE SIGURAN
Este un desicant oxidativ puternic

i reacioneaz violent cu muli
reactivi
incluznd
compui
organici ai azotului, permanganat
de potasiu, alcali metalici i
perclorai, materiale combustibile,
oxidani, amine, baze, ap, exces
de cldur i
majoritatea
metalelor.
Formeaz sruri cu numeroase

metale, care sunt mult mai
explozive dect acidul n sine.n
contact cu cimentul poate forma
picratul de calciu, care este un
exploziv sensibil la frecare. Poate
reaciona cu ageni reductori.
Materiale combustibile i ageni

reductori ; anhidrida acetic,
bismut i aliajele acestuia, alcool,
metal, hrtie, lemn i alte
materiale organice.
Dac se adaug
acid concentrat n
ap poate aparea
fierbere localizat.
Coloreaz pielea n
galben.
Agent
puternic
oxidant ;
poate
forma
produi
explozivi dac vine
n contact cu mai
multe
materiale
anorganice
sau
organice ;
contamineaz
pardoselile
de
lemn, bncile, etc.
Poate exploda la
percuie.
ALTE PERICOLE
ghid naional de biosiguran pentru laboratoare
Lcrimare. Iritaie sever

respiratorie ; edem
pulmonar la nivele
ridicate de expunere.
Efectele pot fi tardive.

tract respirator i piele
sau n cazul ingestiei;
cauzeaz edem
pulmonar n cazul
expunerii masive la gaze
sau vapori.
Iritaie sever a ochilor i

a tractului respirator
superior; aciune
coroziv. Efectele pot fi
tardive.
Lichid incolor sau

galben, cu miros
neptor,
dezagreabil;
punct topire -87C,
punct fierbere 53C
Lichid incolor cu
miros neptor ;
Pentru forma
gazoas:
punct topire -78C,
punct fierbere 33C ;
pentru soluie 25%:
punct topire -58C,
punct fierbere 38C
miscibil cu apa.
Lichid incolor cu
miros puternic
neptor de oet ;
punct topire -73C,
punct fierbere 139C
Acroleina
CH2=CHCHO
Amoniac
(Soluii
amoniacale)
Anhidrida
acetic
(CH3CO) 2O
PERICOLE PENTRU
SNTATE
severe pentru ochi,
piele, tractul respirator.
PROPRIETI
FIZICE
Cristale albe
higroscopice, cu
miros ptrunztor ;
punct topire 58C,
punct fierbere
197,5C;
solubil n ap,
etanol, dietileter.
SUBSTANE
CHIMICE
Acid triclor
acetic
CCl3COOH
133
Inflamabil, dezvolt prin
expunere la foc vapori
sau gaze iritante sau
toxice ; punct de apridere 49C, limite
inflamabile 2,7-10,3%.
Sub forma de gaze

amoniacale ;
interval inflamabil 1528%.

scnteile, fumatul. Se previne
contractul cu pielea sau ochii.
Se stocheaz n recipiente
nchise etan. n cazul
contactului cu ochii, se spal
imediat cu ap i se solicit
asisten
medical.
Se
chimic, cu mnui din
cauciuc sau plastic i ochelari
de protecie chimic.
Se va evita contactul cu
tegumentele sau cu ochii. Se
chimic sau cu o bun
ventilaie.
Se evit contactul cu ochii i

pielea ; se lucreaz cu mnui
din cauciuc sau plastic i
ochelari de protecie chimic
sau scut transparent pentru
protecia feii combinat cu
protecie respiratorie. n caz
de contact cu ochii, se
cltete imediat i se solicit
asisten medical.
Nu este
combustibil.Poate
emana gaze toxice
Extrem de inflamabil ;
punct de aprindere 26C, limite explozibile
2,8-31%.
PRECAUII DE SIGURAN
PERICOLE DE FOC
Reacioneaz violent cu apa n

fierbere, cu aburii, oxidanii
puternici, alcooli, amine, baze
puternice i multe alte substane
chimice. Atac multe metale n
prezena apei
Reacioneaz violent cu metale

grele, cum ar fi mercurul i
srurile acestuia formnd produi
explozivi.
Oxidani, acizi, alcali, amoniac,

amine. Polimerizeaz rapid dac
procesul nu este inhibat, n mod
obinuit cu hidrochinon. Poate
forma n timp peroxizi sensibili la
ocuri (pericol de explozii).
Reacioneaz
violent
cu
amestecuri de cupru / dimetil
sulfoxid i n contact cu baze,
ageni oxidani puternici i metale
precum fierul, zincul, aluminiul.
Se stocheaz n
spaii
uscate.
Soluiile
apoase
concentrate se pot
descompune
violent.
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Lichid uleios, de la
incolor la cafeniu,
cu miros de amine
aromatice ;
punct topire -6C,
punct fierbere
185C.
Metal alb, se
nnegrete dac
este expus la ozon,
hidrogen sulfurat
sau sulf ;
punct topire
962C,
punct fierbere
2212C.
Fulgi sau pudr

galben ;
punct topire
136C ;
insolubil n ap.
SUBSTANE
CHIMICE
Anilina
C6H5NH2
Argint
Ag
Auramina
4,4-Carbonoimidoil bis
(N, N-dimetilbenzenamina)
134
Vtmtor n caz de
ingestie, inhalare sau
contact cu pielea. Poate
cauza iritaie a ochilor
sau a pielii. Posibil
carcinogen.
Inhalarea unei cantiti

mari de vapori de argint
metalic poate cauza
afectarea plmnilor cu
edem pulmonar. Poate
cauza colorarea grialbstruie a ochilor,
nasului, gtului i pielii,
n condiiile expunerii
ndelungate sau repetate
(argiria).
Cianoz cauzat de
methemoglobinemie.
Iritaie a ochilor i pielii.
Poate fi absorbit prin
piele; expuneri repetate
sau prelungite pot cauza
sensibilizare.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
cu excepia pulberii.
Combustibil;
punct de aprindere
70C, interval exploziv
1,2-11%.
PERICOLE DE FOC
Se evit contactul cu pielea

sau inhalarea pulberii. Se
manipuleaz cu mnui din
cauciuc sau plastic i cu
ochelari de protecie chimic.
Se lucreaz n nia de
protecie chimic sau cu filtru
respirator pentru praf.
Se lucreaz cu exhaustarea
local a aerului, cu mnui i
ochelari de protecie sau
protecia ochilor combinat cu
protecie respiratorie pentru
pulberi sau gaze toxice.
Se stocheaz n recipiente
nchise etan, n spaii
separate de oxidani. Se
previne contactul cu pielea
sau cu ochii. Se lucreaz n
spaii cu ventilaie local sau
protecie respiratorie, mnui
i mbrcminte de protecie,
scuturi transpa-rente pentru
fa.
PRECAUII DE SIGURAN
Ageni puternic oxidani.
Incompatibil
cu
acetilena,
compuii de amoniu, acidul oxalic
i acidul tartric.
Oxidani puternici, acizi tari.
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Solid, cristalin,
incolor ;
punct topire
300C;
solubil n ap.
Lichid incolor,
volatil, cu miros
aromatic
caracteristic ;
punct topire 6C,
punct fierbere
80C.
Pudr galben
deschis ;
punct topire
128C,
punct fierbere
400C ;
puin solubil n
ap, dar foarte
solubil in acizi sau
solveni organici.
SUBSTANE
CHIMICE
Azida de
sodiu
N3Na
Benzen
C6H6
Benzidina
1,1- Bifenil4,4 -diamina
135

piele. Poate cauza
cancer de vezicul
biliar. Se evit orice tip
de expunere.
Inhalarea vaporilor
afecteaz SNC cauznd
vertij i cefalee, iar la
concentraii mai mari
pierderea cunotinei i
moarte. Risc de anemie
aplastic, leucemie,
leziuni hepatice dup
expunere prelungit sau
cronic. Poate fi absorbit
prin piele.
Foarte toxic prin

contact cu pielea ;
poate cauza arsuri.
Praful i soluia irit ochii
i pielea ; poate fi
absorbit prin piele.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Combustibil, produce
gaze toxice prin
expunere la foc.
Deosebit de
inflamabil ;
inflamabil 1,3-8%.
Se descompune
exploziv cnd este
nclzit peste punctul
de topire. Elibereaz
gaze toxice cnd este
nclzit ; nu se
folosete apa pentru
stingerea focului.
PERICOLE DE FOC
Se evit ori ce tip de

expunere. Se lucreaz cu
protecia ochilor i a pielii, n
nia de protecie chimic cu
ventilaie de exhaustare.
Se stocheaz recipientele n
spaii bine ventilate, la
distan de sursele de foc. Se
chimic sau n hote cu
ventilaie
adecvat;
cu
protecie ocular i mnui din
PVC sau nitril. Se previne
formarea de acumulri sau
descrcri electrostatice, prin
mpmntare.
In caz de contact cu pielea, se

spal imediat. Se evit
inhalarea
pulberii.
Se
cauciuc sau plastic i cu
protecie ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
In multe ri, utilizarea sa este

interzis sau controlat prin lege.
Poate reaciona violent cu

oxidanii, incluznd acidul cromic,
permanganatul de potasiu i
oxigenul lichid.
Reacioneaz exploziv cu bromul,

sulfura de carbon i clorura de
crom.
Sub forma solid
reacioneaz cu metale grele,
incluznd cuprul, plumbul i
mercurul, formnd sruri metalice
ale azidelor, compui explozivi. La
contactul cu un acid, elibereaz
gaze deosebit de toxice sau
explozive.
ALTE PERICOLE
Lichid fumegnd,
rou-maroniu, cu
miros neptor ;
punct topire -7,2C,
punct fierbere
58,8C.
Brom
Br2
Gaz galben-verzui,
cu miros ineptor,
punct topire 101C,
punct fierbere 34C.
Pulbere cristalin,
alb, incolor ;
Solubil n ap.
Biselenit de
sodiu
NaHSeO3
Clor
Cl2
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
136

piele i tractul respirator.
Inhalarea de gaz poate
cauza
pneumopatie,
edem pulmonar conducnd la sindrom de
disfuncie reactiv a
cilor aeriene. Evaporarea rapid a clorului
lichid poate cauza
degerturi. Expunerea
masiv poate cauza
moarte. Efectele pot fi
tardive; se recomand
supraveghere medical.
Coroziv. Vaporii sunt

corozivi pentru ochi i
pentru tractul respirator ;
inhalarea poate cauza
edem pulmonar i poate
afecta SNC. Contactul
cu ochii poate cauza
tulburri de vedere,
roea, durere, arsuri
severe ale esuturilor.
Toxic prin ingestie i

inhalare de pulberi ;
posibil pericol prin efecte
cumulative. Teratogen
experimental. Contactul
prelungit cu pielea
cauzeaz dermatit.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane.
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane. Multe
sau explozie.
nclzirea poate cauza
creterea presiunii cu
risc de ardere.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz n condiii de
sistem nchis i ventilaie; cu
mnui
izolatoare
i
protecie ocular combinat
cu protecie respiratorie.
Se utilizeaz n sistem nchis

i cu ventilaie. Se lucreaz cu
mnui i mbrcminte de
protecie,
ochelari
de
protecie, scut transparent
pentru fa sau protecia
ochilor combinat cu protecie
respiratorie.
Se manipuleaz purtnd
mbrcminte de protecie.
PRECAUII DE SIGURAN
Soluia apoas este un acid

puternic, reacioneaz violent cu
bazele i muli compui organici:
acetilen, butadien, benzen i
alte fraciuni petroliere, amoniac,
hidrogen, carbur de sodiu,
terebentin i pulberi metalice
fine, genernd pericol de foc i
explozie.
Oxidant puternic, reacioneaz

violent
cu
materialele
combustibile i reductoare.
Reacioneaz violent cu soluia
apoas de amoniac, cu oxidani,
metale, compui organici i fosfor.
Ageni oxidani.
Atac multe metale

n prezena apei.
Atac materialele
plastice, cauciucul
i esturile.
Atac unele feluri

de plastic, cauciuc
i esturi.
ALTE PERICOLE
Afecteaz ochii, pielea i

tractul respirator;
inhalarea vaporilor poate
cauza edem pulmonar
genernd convulsii,
pierderea cunotinei,
insuficien respiratorie,
moarte.
Cristale incolore
sau albe, cu miros
neptor ;
punct topire 52C,
punct fierbere
61C.
Cianobrom
Bromcian
BrCN
Vtmtor prin inhalare,

ingestie i contact cu
pielea ; iritant pentru
piele. Poate cauza
afectare hepatic, renal
i a SNC conducnd la
cefalee, grea, icter
slab, inapeten,
confuzie. Expunerea
prelungit sau cronic sa dovedit carcinogen la
animale ; suspect a fi
carcinogen la om.
Lichid incolor
volatil cu miros
caracteristic ;
punct topire -63C,
punct fierbere
61C. ;
puin solubil n ap.
Cloroform
CHCl2
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Nu este combustibil
dar formeaz gaz
inflamabil la nclzire.
Prin expunere la foc
produce emanaii
gazoase iritante sau
toxice.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz n sistem nchis

cu ventilaie ; cu mnui i
ochelari de siguran, cu scut
transparent pentru protecia
feii sau protecia ochilor
combinat
cu
protecie
respiratorie.
Se lucreaz n ni de
protecie chimic purtnd
mnui din nitril i protecie
ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
Se descompune prin nclzire i

la contactul cu acizii producnd
acid cianhidric, foarte toxic i
inflamabil, i acid bromhidric,
foarte coroziv. Reacioneaz cu
oxidani puternici. Reacioneaz
ncet cu apa i umezeala
producnd acid bromhidric i acid
cianhidric. Atac multe metale n
prezena apei.
Baze tari; unele metale cum ar fi

aluminiul sau magneziul, zincul
pulbere ; oxidani puternici.
Dac se nclzete
pn la descompunere formeaz
fosgen gaz. Atac
materialele plastice
i cauciucul.
ALTE PERICOLE
137
138
Pudr alb ;
punctul de topire
variaz.
Solid roiatic,
lucios, maleabil,
inodor ; pudra roie
devine verde dup
expunerea la aer i
umezeal;
punct topire 1083C
punct fierbere
2567C.
Cupru
Cu
Pudr alb
cristalin cu miros
de migdale ;
punct topire
563C,
punct fierbere
1496C;
foarte solubil n
ap.
Cianura de
sodiu
NaCN
Citochalazina
(A-J)
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Inhalarea emanaiilor
gazoase de cupru poate
cauza febra fumurilor
de metal .
Toxic prin ingestie,

inhalare sau absorbie
prin piele. Poate cauza
malformaii congenitale
la ft.
Extrem de toxic prin

contact cu pielea ; iritant
sever pentru ochi. Poate
fi absorbit prin piele.
Expunerea repetat
poate afecta tiroida.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Combustibil.
Poate elibera gaze

toxice prin expunere la
foc.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz cu exhaustare
local a aerului sau protecie
respiratorie, cu mnui i
ochelari de protecie .
Se evit contactul cu ochii,

pielea i mbrcmintea. Se
vor purta ochelari de protecie
chimic i mnui din cauciuc
sau plastic.
Se va evita inhalarea de
pulberi; se foloseste protecie
respiratorie. Se evit contactul
cu ochii sau pielea ; n cazul
contactului cu pielea se spal
imediat cu ap i se
ndeprteaz mbrcmintea
contaminat. Se lucreaz cu
ochelari de protecie chimic
i mnui din cauciuc sau
plastic. Se pstreaz sub
cheie, n spaii ventilate.
PRECAUII DE SIGURAN
Formeaz cu compuii acetilenici,

etilen oxid azid i peroxidul de
oxigen, produi sensibili la ocuri.
Reacioneaz
cu
oxidanii
puternici, cum ar fi cloraii,
bromaii sau iodaii, genernd
pericol de explozie.
Ageni puternic oxidani.
Elibereaz, n contact cu acizii

sau cu apa ce conine dioxid de
carbon dizolvat, gaze deosebit de
toxice de acid cianhidric (HCN).
Poate forma amestecuri explozive
cu nitriii.
Se trateaz stropii
de soluie cu
nlbitor pulbere
(hipoclorit
de
sodiu) i se las n
contact 24 ore.
Substana solid
vrsat se terge
cu grij cu o lavet
care
se
va
scufunda apoi n
ap cu nlbitor
pulbere; se las 24
ore nainte de a fi
aruncat. n laborator
se pstreaz la
ndemn antidotul
cianurii.
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Lichid incolor,
foarte volatil, cu
miros dulceag
caracteristic ;
punct topire 161C,
punct fierbere
34C ;
puin solubil n ap.
Gaz lichefiat
incolor i volatil, cu
miros neptor ;
punct topire -93C,
punct fierbere 7C ;
miscibil cu apa.
Pulbere cristalin
portocalieroiatic ;
punct topire 200C,
puin solubil n ap.
SUBSTANE
CHIMICE
Dietil eter
C2H5OC2H5
Dimetilamina
CH3)2NH
2,4-Dinitrofenilhidrazina
C6H3(NO2)2 NHNH2
1-Hidrazin2,4-dinitrobenzen
139
Iritant pemtru piele i

ochi. Vtmtor prin
ingestie, inhalare i
contact cu pielea.
Iritaie sever a ochilor i

sistemului respirator;
inhalarea poate cauza
edem pulmonar.
Evaporarea rapid poate
cauza degerturi.
Soluiile sunt corozive
pentru piele i ochi.
Iritant pentru ochi i

tractul respirator. Poate
afecta SNC cauznd
somnolen i pierderea
cunotinei. Inhalarea
repetat poate cauza
dependen.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Foarte inflamabil ;
punct de aprindere 25C, limite inflamabile
2,8-14% .
Foarte inflamabil ca
soluie,
punct de aprindere 18C.
Foarte inflamabil ;
inflamabil 1,7-48%.
PERICOLE DE FOC
Se pstreaz umed pentru a

reduce riscul de explozie. Se
manipuleaz
cu
filtru
respirator pentru praf, mnui
Se ine la distan de sursele

de foc ; n cazul contactului cu
ochii se spal imediat i se
solicit asisten medical. Se
chimic, cu mnui din nitril i
Se pstreaza recipientele n
spaii bine ventilate, la
distan de sursele de foc ; n
containere cu mpmntare
pentru a preveni acumulrile
i descrcrile de electricitate
static. Se lucreaz n nia de
protecie chimic, cu mnui
din nitril pentru a preveni
degresarea pielii.
PRECAUII DE SIGURAN
Poate reaciona violent cu

compuii oxidani i reductori.
Poate reaciona cu oxidanii i cu

mercurul.
Expunerea la aer i lumin poate

conduce la formarea de peroxizi
explozivi. Poate reaciona violent
cu oxidanii i halogenii.
ALTE PERICOLE
140
Solid, alb
translucent la 79C ;
Sublimeaz la gaz
la temperatura
mediului ambiant.
Gaz de la galben la
rou sau lichid
rou- maroniu ;
punct topire -59C,
punct fierbere
10C.
Dioxid de clor
ClO2
Lichid incolor cu
miros caracteristic ;
punct topire 12C,
punct fierbere
101C .
Dioxan
C4H8O2
Dietilen
dioxid
Dioxid de
carbon
(solid ;
ghea
carbonic,
ghea
uscat) CO2
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Iritant sever pentru ochi,

piele i tractul respirator;
inhalarea gazului poate
Efectele pot fi tardive; se
recomand
supraveghere medical.
Risc de asfixiere n spaii

nchise sau prost
ventilate ; contactul cu
forma solid de ghea
carbonic cauzeaz
degerturi

afecta SNC cauznd
cefalee; grea, tuse,
durere de gt, dureri
abdominale, ameeal,
somnolen, vom,
pierderea cunotinei.
piele. Afecteaz rinichii
i ficatul. Probabil
carcinogen pentru om.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane ; poate
exploda cnd este
nclzit, la expunerea
la soare sau cnd este
expus la ocuri sau
scntei.
Foarte inflamabil ;
posibil aprinderea la
distan ; ca rezultat al
curgerii, agitrii, etc,
pot fi generate
ncrcri
electrostatice.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz n condiii de
sistem nchis cu ventilaie. ; cu
mnui
izolatoare
i
izolatoare. Se depoziteaz
numai n camere sau spaii
ventilate,
n
containere
deschise.
Se lucreaz cu ventilaie cu
exhaustare local. Se vor
evita
flacra
deschis,
scnteile,
fumatul
sau
contactul cu oxidanii sau
suprafee fierbini. Nu se
folosete aer comprimat
pentru umplere, evacuare sau
manipulare ; se folosesc
dispozitive ce nu produc
scntei. Se lucreaz cu
mnui i mbrcminte de
protecie, scut transparent
pentru fa sau protecia
ochilor combinat cu protecie
respiratorie.
PRECAUII DE SIGURAN
Oxidant puternic ; reacioneaz

violent
cu
materialele
combustibile sau reductoare.
Reacioneaz violent cu fosforul,
hidroxidul de potasiu, sulful,
amoniacul, metanul, fosfina i
hidrogenul sulfurat.
Alcali metalici, baze puternice.
Poate forma peroxizi explozivi.

Reacioneaz viguros cu oxidanii
puternici i acizii tari concentrai.
Reacioneaza exploziv cu unii
catalizatori. Atac multe feluri de
plastic.
ALTE PERICOLE
Cristale incolore
sau roz pal, cu
punct topire 41C,
punct fierbere
182C ;
solubil n ap.
Fenol
C6HcOH
Etanolamina
H2NCH2CH2O
H
2-Aminoetanol
Etanol
CH3CH2OH
PROPRIETI
FIZICE
Lichid incolor,
volatil, cu miros fin
caracteristic ;
punct topire 117C,
punct fierbere
79C ;
miscibil cu apa.
Lichid vscos,
incolor, nevolatil,
cu miros
amoniacal ;
punct topire 10C,
punct fierbere
171C ;
miscibil cu apa.
SUBSTANE
CHIMICE
Substanele i vaporii
sunt corozivi pentru ochi,
piele i tractul respirator,
cauznd arsuri severe ;
se absoarbe prin piele.
Tulburri ale SNC,
com. Afecteaz rinichii
i ficatul. Simptomele
includ dureri
abdominale, vrsturi,
diaree, iritaii ale pielii,
dureri oculare. Contactul
prelungit cu soluii
diluate poate cauza
dermatite.

tractul respirator i piele.
Poate cauza
sensibilizarea pielii.
Duntor dac este

nghiit. Iritant pentru
ochi. Poate afecta SNC.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Punct de aprindere
80C ;
interval inflamabil1,76%.
Punctul de aprindere
85C.
Foarte inflamabil ;
punct de aprindere
12C, limite inflamabile
3-19% .
PERICOLE DE FOC
Se va evita inhalarea
vaporilor,
se
folosete
protecie respiratorie. Se evit
contactul cu ochii i pielea. Se
lucreaz cu mnui din nitril i
protecie ocular. n cazul
contactului cu ochii se spal
imediat cu ap i se solicit
asisten medical. In cazul
contactului cu pielea, se
indeprteaz mbrcmintea
contaminat i se terge zona
contaminat cu glicerol,
polietilen glicol 300 sau un
amestec de polietilen glicol
lichid (70%) i spirt metilat
(30%) i apoi se cltete cu
ap.
protecie ocular
bine nchise, la distan de
sursele de foc.
PRECAUII DE SIGURAN
Reacioneaz
cauznd foc
explozie.
cu
oxidanii
i pericol de
Reacioneaz cu oxidanii
puternici.

puternici.
ALTE PERICOLE
141
Lichid incolor cu
miros neptor;
punct fierbere
96C ;
miscibil cu apa.
Formaldehida
soluie
(37-41%
formaldehid
cu 11-14%
metanol)
HCHO
Soluie incolor
sau galben pal, cu
miros neptor ;
punct topire -14C,
punct fierbere
189C ;
miscibil cu apa.
Gaz incolor cu
miros neplcut,
puternic, de ou
stricate;
punct topire -85C,
punct fierbere 60C .
Glutaraldehida
Hidrogen
sulfurat
H2S
OHC(CH2)3CHO
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
142
Poate afecta SNC

cauznd cefalee,
ameeala, tuse, durere
n gt, grea, dispnee,
pierderea cunotinei i
moarte. Inhalarea poate
Roea, dureri, arsuri
profunde, severe ale
ochilor.
Iritant puternic pentru

ochi i piele; iritant al
tractului respirator.
Expunerea prelungit la
vapori poate cauza
simptome de tip
astmatiform,
conjunctivit, laringit,
bronsit sau
bronhopneumonie.
Contactul cu pielea
poate cauza
sensibilizare. Posibil risc
de afectare ireversibil a
strii de sntate.
Posibil carcinogen.
Iritant sever pentru ochi
i tractul respirator
superior ; expunerea
prelungit prin inhalare
sau contactul cu pielea
pot cauza sensibilizare.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Foarte inflamabil ;
limite explozibile 4,346%.
Punctul de aprindere
50C.
PERICOLE DE FOC
exhaustare local. Se poart
Se lucreaz n nia de
protecie chimic sau spaii
bine ventilate, cu mnui din
ocular.
Se lucreaz purtnd haine de

protecie de tipul orului de
cauciuc,
mnuilor
din
cauciuc sau plastic, i ochelari
de protecie chimic ; n nia
de protecie chimic sau n
spaii bine ventilate.
PRECAUII DE SIGURAN
viguros
cu
Oxidani puternici i acid nitric

puternic. Atac multe metale i
materiale plastice.
Poate reaciona
oxidanii.
Poate reaciona viguros cu

oxidanii, cu nitrometanul formnd
produi explozivi ; cu acidul
clorhidric formnd bis(clormetil)
eter, un puternic carcinogen.
Acuitatea olfactiv
scade rapid i nu
se poate pune
baz pe aceasta
pentru avertizarea
asupra continurii
prezenei gazului.
Este livrat frecvent

sub forma de
soluie apoas n
diferite
concentraii, adiionat cu stabilizatori
pentru creterea
stabilitii.
Soluia concentrat
de formaldehid
devine
tulbure
dac este stocat
sub 21C i trebuie
stocat la 21-25C.
Soluia diluat (15%) i soluia de
concentraie medie
(5-25%) pstreaz
multe
dintre
pericolele formei
concentrate.
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Fulgi, pulbere,
pastile sau bare ;
punct topire
360C,
punct fierbere
1320C;
foarte solubil n
ap.
Fulgi, pulbere,
pastile sau bare ;
punct topire
318C,
punct fierbere
1390C;
solubil n ap.
Solutie incolor
sau galben pal, cu
miros de clor ;
miscibil cu apa.
SUBSTANE
CHIMICE
Hidroxidul de
potasiu
KOH
Hidroxidul de
sodiu
NaOH
Hipoclorit de
sodiu, soluie
(10-14%clor)
NaOCl
143
Coroziv pentru ochi i

piele ; coroziv prin
ingestie, pentru tractul
respirator ; inhalarea
poate cauza edem
pulmonar. Expunerea
repetat poate cauza
Solid sau soluie

concentrat. Inhalarea
pulberii afecteaz tractul
respirator, pn la edem
pulmonar. Coroziv prin
ingestie. Soluia diluat
este iritant pentru ochi
i poate cauza leziuni
severe n condiiile unui
contact prelungit.
Coroziv pentru tractul

respirator, ochi i piele;
inhalarea prafului
cauzeaz edem
pulmonar.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Oxidant puternic.
Poate elibera gaze
toxice prin expunerea
la foc.
Nu este combustibil.
Contactul cu umezeala
sau apa poate genera
suficient cldur
pentru a aprinde
substanele
combustibile.
PERICOLE DE FOC
n cazul contactului cu ochii se

cltete imediat cu ap i se
spal imediat. Se evit
inhalarea
vaporiilor,
se
folosete
protecie
respiratorie. Se manipuleaz
n spaii bine ventilate, cu
mnui din cauciuc sau plastic
i cu protecie pentru ochi.
In cazul contactului cu ochii,

se cltete imediat i se
cazul contactului cu pielea, se
spal imediat cu ap i se
indeprteaz mbrcmintea
contaminat. Se lucreaz cu
i cu protecie ocular chiar n
cazul soluiilor diluate.
In caz de contact cu ochii, se

spal imediat cu ap i se
solicit asisten medical ; n
spal imediat ; se inltur
mbrcmintea contaminat.
Se lucreaz cu mnui din
ocular chiar n cazul soluiilor
diluate.
PRECAUII DE SIGURAN
Elibereaz gaze foarte toxice n

contact cu acizii. Poate reaciona
viguros cu produii combustibili i
reductori. Poate reaciona cu
compui ai azotului formnd
compui N-cloro explozivi. Poate
reaciona violent cu metanolul.
Elibereaz o cantitate crescut de

cldur atunci cnd este
amestecat cu apa. Reacioneaz
viguros cu amestecul cloroform
metanol i cu acizii puternici.
Reacioneaz violent cu acizii, cu

nitrobenzenul i cu muli ali
detergeni. Elibereaz o cantitate
crescut de energie termic cnd
se amestec cu apa. Se
pstreaz n recipiente nchise
etan.
Pe
parcursul
stocrii
pierde
treptat
clorul ;
soluiile
diluate
folosite
ca
dezinfectant
se
deterioreaz rapid.
Se pstreaz la
distan de acizi, n
spaii ntunecoase,
rcoroase,
bine
ventilate.
Se stocheaz n
recipiente inchise
etan, n spaii
uscate.
Atac unele metale

(aluminiu,
zinc,
cositor) n condiii
de umezeal.
ALTE PERICOLE
Iritant al ochilor, al
tractului respirator i al
pielii. Expunerea
repetat poate cauza
Poate afecta tiroida.
Solid negru
albstrui, cristalin,
cu miros
caracteristic ;
punct topire 114C,
punct fierbere
184C ;
practic insolubil n
ap.
Lichid argintiu
greu ;
punct topire -39C
punct fierbere
357C;
insolubil n ap.
Iod
I2
Mercur
Hg
(argint viu)

piele. Expunerea
repetat poate afecta
rinichii i SNC; poate
cauza vrsturi, diaree,
cefalee, grea,
inflamarea gingiilor,
cderea dintilor.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
eman gaze iritante
sau toxice.
Nu este combustibil
dar poate stimula
combustia altor
substane. Multe
sau explozie. Prin
expunere la foc eman
gaze iritante sau
toxice.
PERICOLE DE FOC
bine nchise. Se lucreaz n
nia de protecie chimic sau
n spaii bine ventilate. Se vor
preveni stropirile. Se poart
mnui din nitril.
Se va evita inhalarea vaporilor

i se va evita contactul cu
ochii. Se lucreaz cu mnui
din nitril.
PRECAUII DE SIGURAN
Acetilena,
acidul
fulminic.
Reacioneaz cu amoniacul,
azidele i oxidul de etilen, pentru
a forma produi explozivi.
Reacioneaz violent cu bromul.
Formeaz amalgamuri cu multe
metale.
Reacioneaz violent cu metalele,

incluznd aluminiul, potasiul i
sodiul i amestecul etanol/fosfor,
acetilen i amoniac.
Recipientele
se
stocheaz i se
manipuleaz
pe
tvi de siguran
pentru a preveni
stropirile ; picturile
rspndite
se
absorb
ntr-un
flacon de aspirare
cu un tub capilar i
conectat cu o
pomp de vid;
suprafeele stropite
se trateaz cu praf
de zinc pentru a
forma un amalgam.
ALTE PERICOLE
144
145
Ninhidrina
C9H6O4
Naftilamina
( si )
C10H9N
N-fenil naftilamina i
N-fenil-naftilamina
Metanol
CH3OH
SUBSTANE
CHIMICE
: punct topire
113C,
punct fierbere
305C;
putin solubil n
ap, dar
hidroclorura este
solubil n ap.
Substan solid
galben-pal, ce se
descompune
nainte de topire la
121C. Livrat n
recipiente de tip
spay 0,5% soluie
n butanol ; solubil
n ap.
Cristale de la alb la
roz, cu miros
caracteristic ;
: punct topire
50C,
punct fierbere
301C;
PROPRIETI
FIZICE
Lichid incolor,
volatil, cu miros
caracteristic ;
punct topire -98C
punct fierbere
65C;
miscibil cu apa.
Vtmtor prin ingestie

i inhalare. Iritant pentru
ochi, sistemul respirator
i piele. Expunerea
repetat poate cauza
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Afecteaz SNC,
determinnd pierderea
cunotinei ; iritant
pentru mucoase.
Expunerea cronic
poate leza retina i
nervul optic. Contactul
prelungit cu tegumentele
poate cauza dermatita.
piele.
Ambele forme sunt
foarte toxice dac sunt
inhalate, ingerate sau
vin n contact cu pielea.
Carcinogen pentru om,
producnd cancer de
vezicul biliar.
Experimental, este
mutagen i teratogen.
Se absoarbe prin piele.
Inflamabil, combustibil
solid; punct de
aprindere 39C.
Se evit inhalarea spray-ului

sau vaporilor i contactul cu
ochii. Se manipuleaz cu
i ochelari de protecie
chimic.
Se evit ori ce fel de

expunere ; se manipuleaz
purtnd mbrcminte de
protecie, n nia de protecie
chimic sau sub hot, sau cu
ventilaie de exhaustare .
bine nchise, la distan de
orice surs de foc. Se evit
inhalarea vaporilor i contactul
cu pielea. Se lucreaz n nia
de protecie chimic sau n
spaii bine ventilate, cu
i protecie ocular.
Deosebit de
inflamabil ;
punct de aprindere 16C, intervalul
inflamabil 7-37% .
Combustibil
PRECAUII DE SIGURAN
PERICOLE DE FOC
oxidanii. Reaciile cu magneziul
sau bromul pot fi violente, iar cele
cu oxidani puternici, cloroform
sau sodiu pot fi explozive.
Contactul cu pielea
determin apariia
unei culori violete
persistente.
Utilizarea sa este
interzis
sau
controlat legal n
multe ri.
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Cristale albe ;
punct topire
212C,
punct fierbere
444C;
solubil n ap.
Lichid uleios,
galben pal, cu
punct topire 6C,
punct fierbere
211C.
Gaz incolor
comprimat ;
punct topire 218,4C,
punct fierbere 183C .
SUBSTANE
CHIMICE
Nitrat de
argint
AgNO3
Nitrobenzen
C6H5NO2
Oxigen
O2
146
La concentraie foarte
ridicat, iritant pentru
tractul respirator.
Methemoglobinemie cu
cianoz, leziune
hepatic; simptomele
includ cianoza buzelor
sau a unghiilor, cianoza
pielii, vertij, grea,
vrsturi, astenie,
pierderea cunotinei. Se
absoarbe prin piele.
Poate cauza iritaii

severe i arsuri ale
ochilor i pielii. Coroziv
prin ingestie. Poate
cauza colorarea roualbstruie a pielii n
cazul expunerii
prelungite sau repetate
(argiria).
PERICOLE PENTRU
SNTATE
dar stimuleaz
combustia altor
substane. nclzirea
crete presiunea n
recipiente, cu risc de
explozie.
Combustibil ; risc de
foc i explozie ;
punct de aprindere
88.
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane.
PERICOLE DE FOC
Se vor evit flacra deschis,

sursele de scntei, fumatul,
contactul
cu
substane
inflamabile.
exhaustare
local
sau
protecie respiratorie, cu
mnui, mbrcminte i
ochelari de protecie.
Se va evita dispersia
pulberilor. Se respect strict
regulile de igien. Se
cauciuc sau plastic i scut
transparent pentru fa sau
protecia ochilor combinat cu
protecie respiratorie. n caz
de contact cu ochii, se spal
cu ap i se solicit asisten
medical.
PRECAUII DE SIGURAN
Oxidant puternic, reacioneaz cu

materialele
combustibile
i
reductoare, cauznd pericol de
foc sau explozie. Reacioneaz cu
uleiuri, grsimi, hidrogen, i
lichide, solide i gaze inflamabile.
Prin
combustie
genereaz
emanaii gazoase corozive,
incluznd
oxizi
de
azot.
puternici i agenii reductori,
cauznd pericol de foc i
explozie.
Atac
materialele
plastice. Formeaz substane sau
amestecuri explozive (instabile
termic) cu muli compui organici
i anorganici.
Soluiile amoniacale pot precipita

exploziv nitratul de argint n
prezena bazelor sau a glucozei.
Poate forma compui explozivi cu
etanolul
i
poate
cauza
polimerizarea
exploziv
a
acrilonitrilului.
Poate
cauza
explozie cu aprindere dac este
amestecat cu crbune, magneziu,
fosfor sau sulf.
ALTE PERICOLE
Coroziv dac este

nghiit sau dac praful
este inhalat. Deosebit de
iritant pentru ochi i
tractul respirator,
inhalarea prafului poate
Coroziv la concentraii
mari (60%), precum i la
concentraii sczute
(6%) n cazul contactului
prelungit cu cu pielea.
Soluiile diluate sunt
iritante pentru ochi,
tractul respirator i piele.
Cristal pupuriu ;
punct topire 240C
(se descompune).
Se dizolv uor n
ap.
Lichid incolor ;
punct topire -39C
(70%),
punct fierbere
125C
(70%);
miscibil cu apa ;
este furnizat sub
form de soluie
concentrat n
variate
concentraii.
Permanganat
de potasiu
KMnO4
Peroxid de
hidrogen
H2O 2

piele, tractul respirator,
producnd durere n gt,
tuse, senzaie de arsur,
dispnee, arsuri ale pielii,
durere, vezicule, arsuri
oculare. Inhalarea poate
Ingestia poate cauza
crampe abdominale,
senzaie de arsur,
diaree, disfagii, vrsturi.
Cristale sau
pulbere alb,
higroscopic ;
punct topire
340C,
punct de sublimare
360C.
Pentoxid de
fosfor
P2O5
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
147
Agent oxidant ;
contactul cu materiale
combustibile poate
provoca foc.
Agent oxidant puternic;

poate aprinde
materialele
combustibile.
dar stimuleaz
combustia altor
substane. Multe
reacii pot provoca foc
sau explozie.
PERICOLE DE FOC
In cazul contactului cu pielea,

se spal din abunden cu
ap.
Dac
concentraia
depete 20% se impune
protecie cu mnui din nitril i
protecie ocular.
Se
lucreaz
purtnd
protecie ocular i filtru
respirator dac se produce
praf.
Se lucreaz cu exhaustare
local a aerului pentru
protecie, cu mnui i
mbrcminte de protecie, cu
scut transparent pentru fa
sau
protecia
ochilor
combinat
cu
protecie
respiratorie.
PRECAUII DE SIGURAN
Reacioneaz viguros cu o gam

variat de substane chimice,
incluznd oxidani i baze. Atac
majoritatea metalelor i srurile
acestora, lichidele inflamabile i
alte
materiale
combustibile
(hrtie, textile), aniline i
nitrometan.
Reacioneaz violent sau exploziv

dac este amestecat cu o larg
varietate de compui anorganici
sau organici sau cu pulberi de
metale.
Soluia apoas este un acid

puternic ; reacioneaz violent cu
bazele
i
este
coroziv.
Reacioneaz violent cu acidul
percloric, cauznd pericol de foc
i explozie. Reacioneaz violent
cu apa formnd acid fosforic.
Atac multe metale n prezena
apei.
Se poate
descompune
genernd oxigen
liber, determinnd
creterea presiunii
n container. Se
pstreaz n locuri
ntunecoase i reci.
Nu se folosesc
recipiente sau
echipamente din
metal, ex. bronz,
cupru, fier.
ALTE PERICOLE
148
Iritant pentru piele i

ochi. Inhalarea prafului
poate cauza edem
pulmonar. Expunerea
repetat poate cauza
cderea unghiilor,
afectare gastrointestinal.
Lichid incolor cu
miros alcoolic ;
punct topire -89C,
punct fierbere
82C ;
miscibil cu apa.
Solid inodor n
diferite forme, solid
amorf cafeniurocat nchis pn
la negru albstrui,
sau cristale roii
transparente, sau
cristale gri
metalizat pn la
negru ; punct topire
170 217C,
punct fierbere 685C.
Propan-2-ol
(CH3)2CHOH
izopropanol
Seleniu
Se
Afecteaz SNC
determinnd ameeal,
cefalee, grea, dispnee,
pierderea cunotinei.
piele cauznd roea i
senzaie de arsur.
Ingestia determin dureri
abdominale, diaree,
vrsturi, astenie. Expunerea repetat afecteaz
ficatul i rinichii.
afecta SNC cauznd
cefalee, ameeal,
grea, vrsturi i
com.
Lichid incolor, cu
punct topire 42C,
punct fierbere
115C.
Piridina
C5H5N
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Combustibil. Produce
gaze iritante sau toxice
Foarte inflamabil ;
punct de aprindere
112C, interval
inflamabil
2,3-12,7% .
Deosebit de
inflamabil ;
punct de aprindere
20C, limitele
explozibile 1,8-12,4%.
Produce gaze iritante
sau toxice prin
expunere la foc.
Vaporii/amestecurile
sunt explozibile.
PERICOLE DE FOC
cu
cu
cu
de
Se va evita dispersia pulberii.

Se urmrete respectarea
strict a igienei. Se lucreaz
cu ventilaie cu exhaustare
local,
cu
mnui,
mbrcminte i ochelari de
protecie.
nchise etan, la distan de
sursele de foc. Se lucreaz n
nia de protecie chimic, cu
mnui din nitril i protecie
ocular.
Se lucreaz cu ventilaie
exhaustare local sau
protecie respiratorie ;
mnui i mbrcminte
protecie.
PRECAUII DE SIGURAN

i acizii puternici. Reacioneaz
cu apa la 50C formnd hidrogen
i acid selenios inflamabile.
Reacioneaz cu incandescen
dup o nclzire uoar n contact
cu fosforul i metale precum
nichelul, potasiul, platina, sodiul i
zincul.

oxidani, pentru a forma peroxizi
instabili n cazul expunerii
prelungite la aer i lumin.

puternici i acizii tari.
Soluia apoas
70-85%
de
propan-2-ol,
utilizat ca spray
dezinfectant,
rmne un pericol
de incendiu i nu
trebuie utilizat n
vecintatea
surselor de foc.
ALTE PERICOLE
Lichid incolor cu
miros eteric
caracteristic ;
punct topire -23C,
punct fierbere
76,5C.
Tetraclorura
de carbon
CCl4
Lichid incolor cu
punct topire 108,5C,
punct fierbere 66C
.
Cristale albe,
foarte solubile n
ap.
Telurit de
potasiu
K2TeO3
Tetrahidrofur
an
C4H8O
Dietilen oxid
Tetrametilen
oxid
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
149
Inhibitor pentru SNC,

cauzeaz narcoza.
Iritant pentru ochi, piele
i tractul respirator.

piele ; expunerea
prelungit poate cauza
dermatite. Iritant ocular.
Poate cauza leziuni
hepatice sau renale,
tulburri ale SNC
reprezentate de cefalee,
grea, icter slab,
inapeten i confuzie.
Carcinogen pentru
animale.
Toxic prin ingestie sau

inhalarea de praf. Iritant
pentru piele i ochi.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Deosebit de
inflamabil ; poate
forma peroxizi
explozivi ; punct de
aprindere -14C. Apa
poate s nu fie eficace
n stingerea unui
incendiu cu implicarea
tetrahidrofuranului, dar
poate fi utilizat pentru
a rci recipientele
expuse la foc.
produce vapori sau
gaze iritante sau
toxice.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz cu ventilatie, cu
exhaustarea local a aerului,
sau cu protecie respiratorie,
mnui i ochelari de
protecie.
Se evit ori ce contact. Se

lucreaz cu ventilaie, cu
exhaustare
local
sau
protecie respiratorie ; cu
mnui
din
nitril
i
scut transparent pentru fa
sau
protecia
ochilor
combinat
cu
protecie
respiratorie.
Se manipuleaz purtnd
mbrcminte de protecie.
PRECAUII DE SIGURAN

puternici, bazele tari i unele
halogenuri ale metalelor, cauznd
pericol de foc i explozie. Atac
unele forme de plastic, cauciucul
i testurile. Tetrahidrofuranul
poate polimeriza n prezena
inhibitorilor cationici. Contactul cu
hidroxid de calciu poate cauza
explozie.
La contactul cu suprafee fierbini

sau flacr, se descompune
formnd vapori i gaze toxice i
corozive (acid clorhidric, clor,
fosgen). Reacioneaz cu unele
metale cum ar fi aluminiu,
magneziu, zinc.
ALTE PERICOLE
Inhibitor pentru SNC.

Iritant pentru ochi,
mucoase i piele. La om,
expunerea repetat
poate fi toxic pentru
funcia reproductoare i
pentru dezvoltare.
Lichid incolor cu
punct topire -95C,
punct fierbere
111C;
nu este miscibil cu
apa.
Toluen
C7H8
Metilbenzen
Foarte toxic prin

inhalare, ingestie i
contact cu pielea,
provocnd arsuri i
iritaie severe. Sub
forma de vapori, solid
sau n soluie este
coroziv pentru piele i
tractul respirator.
Inhalarea poate cauza
edem pulmonar.
Cristale galben pal,

cu miros neptor ;
punct topire 40C,
punct fierbere
130C ;
sublimeaz sub
punctul de
fierbere ; solubil n
ap.
Tetraoxid de
osmiu
OsO4
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Foarte inflamabil;
vaporii pot cauza
aprindere ;
punct de aprindere
4C, interval inflamabil
1,4-7%. Stingerea n
cazul focurilor mici se
face cu: substane
chimice uscate, dioxid
de carbon, spum,
vapori de ap sau gaz
inert (nitrogen).
Agent oxidant puternic.

Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane.
PERICOLE DE FOC
bine inchise, la distan de
sursele
de
aprindere ;
Recipientele s fie cu
mpmntare pentru a preveni
acumulrile i descrcrile de
electricitate static. Se va
evita inhalarea vaporilori ; se
folosete
protecie
respiratorie. Se lucreaz n
n spaii bine ventilate. Se
poart mnui din nitril.
Se pstreaz containerele
bine nchise, n spaii bine
ventilate. Forma solid sau
soluiile se manipuleaz n
hot, cu ochelari i mnui de
protecie. Prepararea soluiei:
se adaug o fiol nedesfcut
la volumul propus de ap, se
astup i se agit puternic
pn la spargerea fiolei.
PRECAUII DE SIGURAN
Poate reactiona cu acizii tari,

alcali i oxidani.
ALTE PERICOLE
150
Tricloretilen
CHClCCl2
o Toluidina
(C6H3-(3CH3)-(4NH2)) 2
3,3 - Dimetil- (1,1 - bifenil)
4,4 - diamina
SUBSTANE
CHIMICE
Lichid incolor, cu
punct topire -73C,
punct fierbere
87C.
Cristale incolore ;
punct topire
131C,
punct fierbere
200C;
puin solubil n
ap.
PROPRIETI
FIZICE
Iritant pentru ochi, piele;

expunerea prelungit
poate cauza dermatit i
poate afecta SNC
conducnd la pierderea
memoriei. Poate afecta
ficatul i rinichii. Probabil
carcinogen uman.
Vtmtoare prin
contact cu pielea sau
prin ingestie. Pulberea
irit tractul respirator i
ochii. Probabil
carcinogen uman.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Combustibil n condiii
particulare.
Combustibil.
Elibereaz gaze
iritante sau toxice prin
expunere la foc.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz cu ventilaie sau

cu exhaustare local ; cu
mnui, ochelari de siguran
sau alte mijloace de protecie
a ochilor combinat cu
Se evit contactul ; se
lucreaz cu protecie ocular
i cu mnui.
PRECAUII DE SIGURAN
Se descompune n contact cu
suprafee ncinse sau flacr,
formnd gaze toxice i corozive
(fosgen, acid clorhidric). Se
descompune n contact cu alcali
puternici
producnd
dicloracetilena; reacioneaz violent cu
pulberi de metale precum
aluminiu, bariu, magneziu sau
titan; se descompune ncet n
prezena luminii i a umezelii,
formnd acid clorhidric.
Ageni oxidani.
ALTE PERICOLE
151
Lichid incolor cu
miros aromatic ;
punct topire -95C
la -13C,
punct fierbere 136
- 145C ;
insolubil n ap.
Xilen (izomeri
mixti)
C6H4(CH3)2
Dimetilbenzen
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Poate afecta SNC,

conducnd la cefalee,
ameeal, astenie i
grea. Lichidul i vaporii
irit ochii, pielea,
mucoasele i tractul
respirator. Vtmtor i
prin ingestie.
Degreseaz pielea prin
contact prelungit.
Afectare neurologic
nespecific. Expunerea
poate amplifica
pierderea de auz
cauzat de expunerea la
zgomote. Teste pe
animale sugereaz
toxicitate pentru funcia
reproductiv uman i
pentru cretere.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Lichid inflamabil ;
Punct de aprindere 2732C.
PERICOLE DE FOC
Se evit contactul cu ochii. Se
nitril i protecie ocular. Se
stocheaz n recipiente bine
nchise, la distan de surse
de aprindere.
PRECAUII DE SIGURAN
Poate conine etilbenzen ca

impuritate.
Etilbenzenul este
un posibil
carcinogen uman.
ALTE PERICOLE
152
Anexa 6
Lista agenilor biologici

CONFORM ANEXEI III ( CLASIFICAREA COMUNITII)
din :
DIRECTIVA 2000/54/CE A PARLAMENTULUI EUROPEAN I CONSILIULUI
din data de 18 Septembrie 2000
referitoare la protejarea lucrtorilor mpotriva riscurilor presupuse de expunerea la ageni biologici
la locul de munc
Note introductive
umane.
1. n lista de clasificare sunt introdui doar agenii care sunt cunoscui a infecta fiinele
Acolo unde este cazul, sunt furnizai indicatori ai potenialului toxic i alergic al acestor
ageni. Agenii patogeni despre care se tie c nu afecteaz omul sunt exclui. n ntocmirea
acestei liste nu au fost luate n considerare microorganismele modificate genetic.
2. Lista agenilor clasificai are la baza efectul acestor ageni asupra lucrtorilor
sntoi.
Nu se acord deosebit atenie efectelor particulare asupra celor a cror
susceptibilitate poate fi afectat dintr-un motiv sau altul, cum ar fi existena unei boli, tratament,
imunitate compromis, sarcin sau alptare.
Riscurile suplimentare implicate de aceti lucrtori vor fi luate n considerare n
evaluarea riscului cerut de Directiv (52).
n anumite procese industriale, lucrri de laborator sau lucrri cu animale care implic
expunerea efectiv sau potenial la ageni biologici din grupele 3 sau 4, msurile tehnice de
precauie trebuie s respecte Articolul 16 al prezentei Directive.
3. Agenii biologici ce nu au fost inclui n lista n grupele 2 - 4 nu sunt inclui implicit n
grupa 1.
Pentru agenii care au mai multe specii cunoscute ca ageni patogeni pentru om, lista
va include acele specii care sunt cele mai frecvente cauze ale bolilor, alturi de o referin
general la faptul c i alte specii ale aceluiai gen pot afecta sntatea.
Cnd n list se menioneaz un gen ntreg, se subnelege c speciile i tulpinile care
sunt non-patogene au fost excluse.
4. Atunci cnd o tulpin este atenuat sau i-a pierdut genele de virulen, securizarea
necesar pentru tulpina parental nu mai trebuie aplicat, subiect al evalurii corespunztoare
a riscului la locul de munc.
Acesta este cazul, de ex., cnd o astfel de tulpin este utilizat ca un produs sau parte
a unui produs n scopuri profilactice sau terapeutice.
5. Terminologia agenilor clasificai utilizat pentru a ntocmi aceasta list reflect i
este n conformitate cu cele mai recente acorduri internaionale legate de taxonomia si
terminologia agenilor la momentul ntocmirii sale.
sale.
6. Lista agentilor biologici clasificai reflect nivelul de cunotinte la momentul ntocmirii

Ea va fi reactualizat imediat ce nu va mai reflecta cel mai recent nivel de cunotinte.
151
153
ghid naional
de biosiguran
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU pentru
LABORATOARE
7. Statele Membre se vor asigura ca toi viruii ce au fost deja izolai la oameni i care
nu au fost evaluai i inclui n aceasta Anex vor fi clasificai cel puin la grupa 2, cu excepia
cazului n care Statele Membre dein dovada c este improbabil ca acetia s cauzeze boli n
rndul oamenilor.
8. Anumii ageni biologici clasificai n grupa 3, care sunt nsoii de dou asteriscuri
(**), pot prezenta un risc limitat de infecie pentru lucrtori, ntruct n mod obinuit ei nu sunt
infecioi pe calea aerului.
Statele Membre vor determina msurile de securizare ce vor fi aplicate unor astfel de
ageni, innd cont de natura activitilor specifice implicate i de cantitatea agenilor respectivi,
determinndu-se dac, n condiii particulare, unele dintre aceste msuri pot fi excluse.
9. Condiiile necesare izolrii conform clasificrii paraziilor se vor aplica doar n stagiile
de via ale paraziilor n care acetia pot cauza infecii oamenilor la locul de munc.
10. Aceasta list ofera de asemenea un indiciu separat pentru cazurile n care agenii
biologici pot cauza reacii alergice sau toxice, n care se dispune de un vaccin eficient, sau
dac se recomand ca lista lucrtorilor expui s fie pstrat mai mult de 10 ani.
Aceti indicatori sunt ilustrai prin urmtoarele litere:
A: Posibile efecte alergice
D: Lista lucrtorilor expui la acest agent biologic trebuie pstrat mai mult de
10 ani de la ncheierea ultimei expuneri cunoscute
T: Producerea de toxine
V: Vaccin eficient disponibil
Efectuarea vaccinrii preventive trebuie s respecte codul de practic menionat n
Anexa VII.
BACTERII i organisme similare
NB: Pentru agenii biologici din list, spp. indic i alte forme care sunt ageni patogeni pentru
oameni.
Agent biologic (Clasificare) Observatii
Actinobacillusactinomycetemcomitans
Actinomadura madurae
Actinomadura pelletieri
Actinomycesgerencs eriae
Actinomycesis raelii
Actinomycespyogenes
Actinomyces spp.
Arcanobacterium haemolyticum
(Corynebacterium haenolyticum)
Bacillusanthracis
Bacteroidesfragilis
Bartonella bacillifonnis
Bartonella quintana (Rochalimaea quintana)
Bartonella (Rochalinea) spp.
Bordetella bronchiseptica
Bordetella parapertussis
Bordetella pertussis
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
152
154
Anexa
biologici
Anexa6.6.Lista
LISTAagenilor
AGENILOR
BIOLOGICI
Borrelia burgdorferi
Borrelia duttonii
Borrelia recurrentis
Borrelia spp.
Brucella abortus
Brucella canis
Brucella melitensis
Brucella suis
Burkholderia mallei (Pseudomonas mallei)
Burkholderia pseudomallei (Pseudomonas pseudomallei)
Campylobacter fetus
Campylobacter jejuni
Campylobacter spp.
Cardiobacterium hominis
Chlamydia pneumoniae
Chlamydia trachomatis
Chlamydia psittaci (tulpini aviare)
Chlamydia psittaci (alte forme)
Clostridium botulinum
Clostridium perfringens
Clostridium tetani
Clostridium spp.
Corynebacterium diphtheriae
Corynebacterium minutissimum
Corynebacterium pseudotuberculosis
Corynebacterium spp.
Coxiella burnetii
Edwardsiella tarda
Ehrlichia sennetsu (Rickettsia sennetsu)
Ehrlichia spp.
Eikenella corrodens
Enterobacter aerogenes/cloacae
Enterobacter spp.
Enterococcus spp.
Erysipelothrix rhusiopathiae
Escherichia coli (cu exceptia formelor non-patogene)
Escherichia coli, formele verocitotoxigene
(de ex. O157:H7 sau O103)
Flavobacterium meningosepticum
Fluoribacter bozemanae (Legionella)
Francisella tularensis (Tip A)
Francisella tularensis (Tipe B)
Fusobacterium necrophorum
Gardnerella vaginalis
Haemophilusducreyi
Haemophilusinfluenzae
Haemophilus spp.
Helicobacter pylori
Klebsiella oxytoca
Klebsiella pneumoniae
153
155
2
2
2
2
3
3
3
3
3
3
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
T
T, V
T, V
ghid naional
de biosiguran
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU pentru
LABORATOARE
Klebsiella spp.
Legionella pneumophila
Legionella spp.
Leptospira interrogans (toate serovars)
Listeria monocytogenes
Listeria ivanovii
Morganella morganii
Mycobacterium africanum
Mycobacterium avium/intracellulare
Mycobacterium bovis (exceptnd forma BCG)
Mycobacterium chelonae
Mycobacterium fortuitum
Mycobacterium kansasii
Mycobacterium leprae
Mycobacterium malmoense
Mycobacterium marinum
Mycobacterium microti
Mycobacterium paratuberculosis
Mycobacterium scrofulaceum
Mycobacterium simiae
Mycobacterium szulgai
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium ulcerans
Mycobacterium xenopi
Mycoplasma caviae
Mycoplasma hominis
Mycoplasma pneumoniae
Neisseria gonorrhoeae
Neisseria meningitidis
Nocardia asteroides
Nocardia brasiliensis
Nocardia farcinica
Nocardia nova
Nocardia otitidiscaviarum
Pasteurella multocida
Pasteurella spp.
Peptostreptococcus anaerobius
Plesiomonas shigelloides
Porphyromonas spp.
Prevotella spp.
Proteusmirabilis
Proteuspenneri
Proteusvulgaris
Providencia alcalifaciens
Providencia rettgeri
Providencia spp.
Pseudomonas aeruginosa
Rhodococcusequi
Rickettsia akari
Rickettsia canada
2
2
2
2
2
2
2
3
2
3
2
2
2
3
2
2
3(**)
2
2
2
2
3
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
3(**)
154
156
V
V
Anexa6.6.LISTA
Lista AGENILOR
agenilor biologici
Anexa
BIOLOGICI
3
3(**)
3
3
3
3
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
3 (**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
Rickettsia conorii
Rickettsia montana
Rickettsia typhi (Rickettsia mooseri)
Rickettsia prowazekii
Rickettsia rickettsii
Rickettsia tsutsugamushi
Rickettsia spp.
Salmonella arizonae
Salmonella enteritidis
Salmonella typhimurium
Salmonella paratyphi A, B, C
Salmonella typhi
Salmonella (alte serovars)
Serpulina spp.
Shigella boydii
Shigella dysenteriae (Tip 1)
Shigella dysenteriae, altele dect Tip 1
Shigella flexneri
Shigella sonnei
Staphylococcusaureus
Streptobacillusmoniliformis
Streptococcuspneumoniae
Streptococcuspyogenes
Streptococcus suis
Streptococcus spp.
Treponema carateum
Treponema pallidum
Treponema pertenue
Treponema spp.
Vibrio cholerae (inclusiv El Tor)
Vibrio parahaemolyticus
Vibrio spp.
Yersinia enterocolitica
Yersinia pestis
Yersinia pseudotuberculosis
Yersinia spp.
(**) Vezi paragraful 8 al notelor introductive.
VIRUSURI (*)
Agent biologic
Adenoviridae
Arenaviridae
Complexul de virusi LCM-Lassa (virusii lumii vechi):
Virusul Lassa
Limfocitic (forme)
Virusul coriomeningitei limfocitice
(alte forme)
Virusul Mopeia
Alti virusi ai complexului LCM-Lassa
Complexul de virusi Tacaribe-Virus (virusii lumii noi):
155
157
Clasificare
2
4
3
2
2
2
V
V
Observatii
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARE
Virusul Guanarito
Virusul Junin
Virusul Sabia
Virusul Machupo
Virusul Flexal
Alti virusi ai complexului Tacaribe
Astroviridae
Bunyaviridae
Belgrade (cunoscut si ca Dobrava)
Bhanja
Virusul Bunyamwera
Germiston
Virusul Oropouche
Sin Nombre (fostul Muerto Canyon)
Virusul encefalitei Californiene
Hantavirusi:
Hantaan (febra hemoragica coreeana)
Virusul Seoul
Virusul Puumala
Virusul Prospect Hill
Alti hantavirusi
Nairovirusi:
Febra hemoragica Crimean-Congo
Virusul Hazara
Flebovirusi:
Febra Rift Valley
Febra mustei-de-nisip
Virusul Toscana
Alti bunyaviridae patogeni
Caliciviridae
Virusul Hepatitei E
Virusul Norwalk
Alti Caliciviridae
Coronaviridae
Filoviridae
Virusul Ebola
Virusul Marburg
Flaviviridae
Encefalita Australiana
(Encefalita Murray Valley)
Virusul encefalitei capusei Central-Europene
Absettarov
Hanzalova
Hypr
Kumlinge
Virusul Dengue tip 1-4
Virusul Hepatitei C
Virusul Hepatitei G
Virusul encefalitei japoneze B
Kyasanur Forest
4
4
4
4
3
2
2
3
2
2
2
3
3
2
3
3
2
2
2
4
2
3
2
2
2
3(**)
2
2
2
4
4
3
3 (**)
3
3
3
3
3
3(**)
3(**)
3
3
156
158
D
D
V
V
Anexa6.6.LISTA
Lista AGENILOR
agenilor biologici
Anexa
BIOLOGICI
Louping ill
Omsk (a)
Powassan
Rocio
Encefalita ruseasca primavara-vara (TBE) (a)
Encefalita St Louis
Virusul Wesselsbron
Virusul febrei West Nile
Febra galbena
Alti flavivirusi patogeni
Hepadnaviridae
Virusul Hepatitei B
Virusul Hepatitei D (Delta) (b)
Herpesviridae
Citomegalovirus
Virusul Epstein-Barr
Herpesvirus simiae (Virusul B)
Virusul Herpes simplex tipurile 1 si 2
Herpesvirus varicella-zoster
Virusul B-limfotropic uman (HBLV-HHV6)
Virusul herpes uman 7
Virusul herpes uman 8
Orthomyxoviridae
Virusurile gripale tip A, B i C
Orthomyxoviridae capuei: Dhori i Thogoto
Papovaviridae
Virusurile BK i JC
Papillomavirusuri umane
Paramyxoviridae
Virusul pojarului
Virusul oreionului
Virusul bolii Newcastle
Virusurile paragripale tipurile 1 - 4
Virusul respirator synciial
Parvoviridae
Parvovirusul uman (B 19)
Picornaviridae
Virusul conjuctivitei hemoragice acute (AHC)
Virusul Coxsackie
Echo virusuri
Virusul Hepatitei A
(enterovirusul uman tip 72)
Poliovirusuri
Rinovirusuri
Poxviridae
Virusul Buffalopox (e)
Virusul variola taurinelor
Virusul Elephantpox (f)
Virusul Milkers' node
Molluscum contagiosum virus
3(**)
3
3
3
3
3
3(**)
3
3
2
V
V
3(**)
3(**)
V, D
V, D
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
V(c)
2
2
D(d)
D(d)
2
2
2
2
2
V
V
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
157
159
V
V
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARE
Virusul Monkeypox
3
Virusul Orf 2
Virusul Rabbitpox (g)
2
Virusul variolei
2
Virusul Variola (major i minor)
4
Virusul Whitepox (Variola virus)
4
Virusul Yatapox (Tana & Yaba)
2
Reoviridae
Coltivirus
2
Rotavirusi umani
2
Orbivirusi
2
Reuvirusi
2
Retroviridae
Virusurile imunodeficienei umane
3(**)
Virusurile limfotropice ale celulelor T umane
(HTLV), tipurile 1 i 2
3(**)
SIV (h)
3(**)
Rhabdoviridae
Virusul rabiei
3(**)
Virusul stomatitei veziculare
2
Togaviridae
Alfavirusuri
Encefalomielita cabalin estic
3
Virusul Bebaru
2
Virusul Chikungunya
3(**)
Virusul luncii
3(**)
Virusul Mayaro
3
Virusul Mucambo
3(**)
Virusul Ndumu
3
Virusul O'nyong-nyong
2
Virusul Ross River
2
Virusul Semliki Forest
2
Virusul Sindbis
2
Virusul Tonate
3(**)
Encefalomielita cabalin venezuelean
3
Encefalomielita cabalina vestic
3
Alte alfavirusuri cunoscute
2
Rubivirus (rubeola)
2
Toroviridae
2
Virusuri neclasificate
Virusul pojarului cabalin
4
Virusi hepatitici nc neidentificai
3(**)
Ageni neconvenionali asociai cu encefalopatiile spongiforme transmisibile
(TSEs)
Boala Creutzfeldt-Jakob
3(**)
Variant Creutzfeldt-Jakob disease
3(**)
Encefalopatia spongiforma bovin (BSE) i alte encefalopatii spongiforme
animale (i)
3(**)
Sindromul Gerstmann-Strussler-Scheinker
3(**)
Kuru
3(**)
158
160
V
V
D
D
V
V
V
V
D
D(d)
D(d)
D(d)
D(d)
D(d)
Anexa6.6.LISTA
Lista AGENILOR
agenilor biologici
Anexa
BIOLOGICI
(*) Vezi paragraful 7 al notelor introductive.

(**)Vezi paragraful 8 al notelor introductive.
(a) Encefalita cpuei.
(b) Virusul hepatitei D reprezint un agent patogenic pentru lucrtori doar n prezena unei
infecii simultane sau secundare cauzat de virusul hepatitei B.
Vaccinarea contra virusului hepatitei B va proteja deci lucrtorii care nu sunt afectai de virusul
hepatitei B mpotriva virusului hepatitei D (Delta).
(c) Doar pentru tipurile A i B.
(d) Recomandat pentru lucrrile care implic contactul direct cu aceti ageni .
(e) Sunt identificate dou virusuri: unul de tip buffalopox iar cellalt o variant a virusului
Vaccinia.
(f) Variant a virusului cowpox.
(g) Varianta a Vaccinia.
(h) n prezent, la fiine umane nu exist probe ale bolilor provocate de retrovirui de origine
simian. Ca msur de precauie, pentru ei se recomand izolare de gradul al treilea.
(i) La fiinele umane nu exist probe ale infeciilor cauzate de ageni responsabili pentru alte
encefalopatii spongiforme transmisibile animale. Cu toate acestea, ca msur de precauie
pentru lucrrile de laborator se recomand msuri de izolare pentru agenii inclui n grupa de
risc 3 (**), cu excepia lucrrilor de laborator care implic un agent scrapie pentru care nivelul
de izolare 2 este suficient.
Acanthamoeba castellani
Ancylostoma duodenale
Angiostrongylus cantonensis
Angiostrongylus costaricensis
Ascaris lumbricoides
Ascaris suum
Babesia divergens
Babesia microti
Balantidium coli
Brugia malayi
Brugia pahangi
Capillaria philippinensis
Capillaria spp.
Clonorchis sinensis
Clonorchis viverrini
Cryptosporidium parvum
Cryptosporidium spp.
Cyclospora cayetanensis
Dipetalonema streptocerca
Diphyllobothrium latum
Dracunculus medinensis
Echinococcus granulosus
Echinococcus multilocularis
Echinococcus vogeli
Entamoeba histolytica
Fasciola gigantica
Fasciola hepatica
PARAZII
159
161
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
3(**)
3(**)
2
2
2
A
A
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARE
2
2
2
2
3(**)
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
2
2
2
3(**)
3
2
Fasciolopsis buski
Giardia lamblia (Giardia intestinalis)
Hymenolepis diminuta
Hymenolepis nana
Leishmania brasiliensis
Leishmania donovani
Leishmania ethiopica
Leishmania mexicana
Leishmania peruviana
Leishmania tropica
Leishmania major
Leishmania spp.
Loa loa
Mansonella ozzardi
Mansonella perstans
Naegleria fowleri
Necator americanus
Onchocerca volvulus
Opisthorchis felineus
Opisthorchis spp.
Paragonimuswes termani
Plasmodium falciparum
Plasmodium spp. (human and simian)
Sarcocystis suihominis
Schistosoma haematobium
Schistosoma intercalatum
Schistosoma japonicum
Schistosoma mansoni
Schistosoma mekongi
Strongyloides stercoralis
Strongyloides spp.
Taenia saginata
Taenia solium
Toxocara canis
Toxoplasma gondii
Trichinella spiralis
Trichuris trichiura
Trypanosoma brucei brucei
Trypanosoma brucei gambiense
Trypanosoma brucei rhodesiense
Trypanosoma cruzi
Wuchereria bancrofti
(**) Vezi paragraful 8 al notelor introductive.
FUNGI
Aspergillus fumigatus
Blastomyces dermatitidis (Ajellomyces dermatitidis )
Candida albicans
Candida tropicalis
Cladophialophora bantiana (fosta: Xylohypha bantiana,
160
162
2
3
2
2
A
A
Anexa6.6.LISTA
Lista AGENILOR
agenilor biologici
Anexa
BIOLOGICI
Cladosporium bantianum sau trichoides)

Coccidioides imitis
Cryptococcus neoformans var. Neofonnans
(Filobas idiella neofonnans var. neofonnans)
Cryptococcus neoformans var. gattii
(Filobasidiella bacillispora)
Emmonsia parva var. parva
Emmonsia parva var. crescens
Epidermophyton floccosum
Fonsecaea compacta
Fonsecaea pedrosoi
Histoplasma capsulatum var. capsulatum
(Ajellomyces capsulatus)
Histoplasma capsulatum duboisii
Madurella grisea
Madurella mycetomatis
Microsporum spp.
Neotestudina rosatii
Paracoccidioides brasiliensis
Penicillium marneffei
Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii)
Scedosporium prolificans (inflatum)
Sporothrix schenckii
Trichophyton rubrum
Trichophyton spp.
161
163
3
3
2
2
2
2
2
2
3
3
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
A
A
Bibliografie
1. Safety in health-care laboratories. Geneva, World Health Organization, 1997,

(http://whqlibdoc.who.int/hq/1997/WHO_LAB_97.1.pdf).
2. Garner JS, Hospital Infection Control Practices Advisory Committee. Guideline for isolation
precautions in hospitals. American Journal of Infection Control, 1996, 24:2452,
(http://www.cdc.gov/ncidod/hip/isolat/isolat.htm).
3. Hunt GJ, Tabachnick WJ. Handling small arbovirus vectors safely during biosafety level 3
containment: Culicoides variipennis sonorensis (Diptera: Ceratopogonidae) and exotic
bluetongue viruses. Journal of Medical Entomology, 1996, 33:271277.
4. National Research Council. Occupational health and safety in the care and use of research
animals. Washington, DC, National Academy Press, 1997.
5. Richmond JY, Quimby F. Considerations for working safely with infectious disease agents in
research animals. In: Zak O, Sande MA, eds. Handbook of animal models of infection.
London, Academic Press, 1999:6974.
6. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, 4th ed. Washington, DC, United
States Department of Health and Human Services/Centers for Disease Control and
Prevention/National Institutes of Health, 1999.
7. Class II (laminar flow) biohazard cabinetry. Ann Arbor, MI, National Sanitation
Foundation,2002 (NSF/ANSI 492002).
8. Richmond JY, McKinney RW. Primary containment for biohazards: selection, installationand
use of biological safety cabinets, 2nd ed. Washington, DC, United States Department of
Health and Human Services/Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes
of Health, 2000.
9. Microbiological safety cabinets. Recommendations for information to be exchanged between
purchaser, vendor and installer and recommendations for installation. London, British
Standards Institution, 1992 (Standard BS 57262:1992).
10. Microbiological safety cabinets. Recommendations for selection, use and maintenance.
London, British Standards Institution, 1992 (Standard BS 57264:1992).
11. Biological containment cabinets (Class I and II): installation and field testing. Toronto,
Canadian Standards Association, 1995 (Standard Z316.395 (R2000)).
12. Collins CH, Kennedy DA. Laboratory acquired infections: history, incidence, causes and
prevention,
4th ed. Oxford, Butterworth-Heinemann, 1999.
13. Health Canada. Laboratory biosafety manual, 2nd ed. Ottawa, Minister of Supply and
Services
Canada, 1996.
14. Biological safety cabinets biological safety cabinets (Class I) for personnel and
environment protection. Sydney, Standards Australia International, 1994 (Standard AS
2252.11994).
15. Biological safety cabinets laminar flow biological safety cabinets (Class II) for personnel,
environment and product protection. Sydney, Standards Australia International, 1994
(Standard AS 2252.21994).
1
164
ghid naional
de biosiguran
pentru
laboratoare
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
3(1758
LABORATOARE
16. Standards Australia/Standards New Zealand. Biological safety cabinets installation and
use. Sydney, Standards Australia International, 2000 (Standard AS/NZS 2647:2000).
17. Advisory Committee on Dangerous Pathogens. Guidance on the use, testing and
maintenance
of laboratory and animal flexible film isolators. London, Health and Safety Executive, 1990.
18. Standards Australia/Standards New Zealand. Safety in laboratories microbiological
aspects and containment facilities. Sydney, Standards Australia International, 2002
(Standard AS/NZS 2243.3:2002).
19. Centers for Disease Control and Prevention. Recommendations for prevention of HIV
transmission in health-care settings. Morbidity and Mortality Weekly Report, 1987, 36
(Suppl. 2):1S18S.
20. Bosque PJ et al. Prions in skeletal muscle. Proceedings of the National Academy of
Sciences of the United States of America, 2002, 99:38123817.
21. Bartz JC, Kincaid AE, Bessen RA. Rapid prion neuroinvasion following tongue infection.
Journal of Virology, 2003, 77:583591.
22. Thomzig A et al. Widespread PrPSc accumulation in muscles of hamsters orally infected
with scrapie. EMBO Reports, 2003, 4:530533.
23. Glatzel M et al. Extraneural pathologic prion protein in sporadic Creutzfeld-Jakob disease.
New England Journal of Medicine, 2003, 349:18121820.
24. Brown P, Wolff A, Gajdusek DC. A simple and effective method for inactivating virus
infectivity in formalin-fixed tissue samples from patients with Creutzfield-Jakob disease.
Neurology, 1990, 40:887890.
25. Taylor DM et al. The effect of formic acid on BSE and scrapie infectivity in fixed and unfixed
brain-tissue. Veterinary Microbiology, 1997, 58:167174.
26. Safar J et al. Prions. In: Richmond JY, McKinney RW, eds. Biosafety in microbiological and
biomedical laboratories, 4th ed. Washington, DC, United States Department of Health and
Human Services, 1999:134143.
27. Bellinger-Kawahara C et al. Purified scrapie prions resist inactivation by UV irradiation.
Journal of Virology, 1987, 61:159166.
28. Health Services Advisory Committee. Safe working and the prevention of infection in
clinical
laboratories. London, HSE Books, 1991.
29. Russell AD, Hugo WB, Ayliffe GAJ. Disinfection, preservation and sterilization, 3rd ed.
Oxford,
Blackwell Scientific, 1999.
30. Ascenzi JM. Handbook of disinfectants and antiseptics. New York, NY, Marcel Dekker,
1996.
31. Block SS. Disinfection, sterilization & preservation, 5th ed. Philadelphia, PA, Lippincott
Williams & Wilkins, 2001.
32. Rutala WA. APIC guideline for selection and use of disinfectants. 1994, 1995, and 1996
APIC Guidelines Committee. Association for Professionals in Infection Control and
Epidemiology, INC. American Journal of Infection Control, 1996, 24:313342.
33. Sattar SA, Springthorpe VS, Rochon M. A product based on accelerated and stabilized
hydrogen peroxide: evidence for broad-spectrum germicidal activity. Canadian Journal of
Infection Control, 1998, 13:123130.
34. Schneider PM. Emerging low temperature sterilization technologies. In: Rutala WA, eds.
Disinfection & sterilization in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:7992.

165
Bibliografie
BIBLIOGRAFIE
35. Springthorpe VS. New chemical germicides. In: Rutala WA, eds. Disinfection & sterilization
in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:273280.
36. Steelman VM. Activity of sterilization processes and disinfectants against prions. In: Rutala
WA, eds. Disinfection & sterilization in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:255
271.
37. Taylor DM. Transmissible degenerative encephalopathies: inactivation of the
unconventional causal agents. In: Russell AD, Hugo WB, Ayliffe GAJ, eds. Disinfection,
preservation and sterilization, 3rd ed. Oxford, Blackwell Scientific, 1999:222236.
38. Infection control guidelines for hand washing, cleaning, disinfection and sterilization in
health care, 2nd ed. Ottawa, Laboratory Centre for Disease Control, Health Canada, 1998.
39. Springthorpe VS, Sattar SA. Chemical disinfection of virus-contaminated surfaces. CRC
Critical Reviews in Environmental Control, 1990, 20:169229.
40. Recommendations on the transport of dangerous goods, 13th revised edition, New York
and Geneva, United Nations, 2003, (http://www.unece.org/trans/danger/publi/unrec/rev13/
13files_e.html).
41. Technical instructions for the safe transport of dangerous goods by air, 20032004 Edition.
Montreal, International Civil Aviation Organization, 2002.
42. Economic Commission for Europe Inland Transport Committee. Restructured ADR
applicable as from 1 January 2003. New York and Geneva, United Nations, 2002,
(http://www.unece.org/trans/danger/publi/adr/adr2003/ContentsE.html).
43. Infectious substances shipping guidelines. Montreal, International Air Transport
Association,2003, (http://www.iata.org/ads/issg.htm).
44. Transport of Infectious Substances. Geneva, World Health Organization, 2004,
(http://www.who.int/csr/resources/publications/WHO_CDS_CSR_LYO_2004_9/en/).
45. Berg P et al. Asilomar conference on recombinant DNA molecules. Science, 1975,
188:991994.
46. European Council. Council Directive 98/81/EC of 26 October 1998 amending
Directive90/219/EEC on the contained use of genetically modified microorganisms. Official
Journal, 1998, L330:1331.
47. OMalley BW Jr et al. Limitations of adenovirus-mediated interleukin-2 gene therapy for oral
cancer. Laryngoscope, 1999, 109:389395.
48. World Health Organization. Maintenance and distribution of transgenic mice susceptible to
human viruses: memorandum from a WHO meeting. Bulletin of the World Health
Organization, 1993, 71:497502.
49. Furr AK. CRC handbook of laboratory safety, 5th ed. Boca Raton, FL, CRC Press, 2000.
50. Lenga RE. The Sigma-Aldrich Library of Chemical Safety Data, 2nd ed. Milwaukee, WI,
Aldrich Chemical Company, 1988.
51. Lewis RJ. Saxs dangerous properties of industrial materials, 10th ed. Toronto, John Wiley
and Sons, 1999.
52. DIRECTIVE 2000/54/EC of The European Parliament and of The Council of 18 September
2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work
(seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC)

166

Ghid National de Biosiguranta Pentru Laboratoare

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Ghid National de Biosiguranta Pentru Laboratoare

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

0LQLVWHUXO6QWLLDO5HSXEOLFLL0ROGRYD

1. Principii generale .........................................................................................................

2. Evaluarea riscului microbiologic ..................................................................................

3. Laboratoarele de baz Nivelele de Biosiguran 1 i 2 ............................................

4. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3 .......................................................

5. Laboratorul nalt securizat Nivelul de Biosiguran 4 ...............................................

8. Recomandri pentru certificarea laboratorului/facilitilor acestuia .............................

9. Conceptul de biosecuritate n laborator ....................................................................... 45

11. Echipamente de siguran ......................................................................................... 57

13. Planuri pentru evenimente neprevzute i msuri de urgen .................................

14. Dezinfecia i sterilizarea ........................................................................................... 75

21. Programele de instruire .............................................................................................

22. List-chestionar .........................................................................................................

Anexa 1 - Primul-ajutor .................................................................................................... 117

Anexa 4 - Sigurana microbiologic a echipamentelor ........................... 123

Anexa 6 - Lista agenilor biologici . 153

de baz - Nivel de biosiguran 1

de baz - Nivel de biosiguran 2

securizat - Nivel de biosiguran 3

inalt securizat - Nivel de biosiguran 4

Aceast clasificare are la baz un complex de caracteristici ce se refer la proiectarea

Tabel 2. Relaia dintre grupurile de risc i nivelele de biosiguran

Inalt securizat Nivel de

GMT = Good Microbiological Techniques (practici microbiologice corecte)

2. Evaluarea riscului microbiologic

Coloana vertebral a practicilor de biosiguran este evaluarea riscului. Dei exist o

Patogenitatea agentului infecios i doza infectant

Pe baza informaiilor obinute prin evaluarea riscului, se stabileste nivelul de siguran

Probe despre care exist informaii limitate

4. Folosirea acelor i seringilor hipodermice trebuie limitat. Ele nu trebuie folosite ca

4. Infestarea cu roztoare i insecte

Figura 2. Laborator cu nivel de biosiguran 1

Figura 3. Laborator cu nivel de biosiguran 2

Incinerarea deeurilor contaminate trebuie sa se fac n conformitate cu prevederile

Laboratorul securizat Nivel de biosiguran 3 este proiectat i echipat pentru lucrul cu

Un exemplu de design pentru laboratorul de Nivel de biosiguran 3 este prezentat n

Figura 4. Laborator cu Nivel de biosiguran 3.

1. Examenul medical al ntregului personal care lucreaz n laboratorul securizat - Nivel de

B. Fata posterioar a cardului

Posesorul acestui card lucreaz la: _____________________________________________ ntr-o zon unde se

Figura 5. Format recomandat pentru cardul medical de notificare

5. Laboratorul nalt securizat

Laboratorul nalt securizat Nivel de biosiguran 4 este destinat lucrului cu

- Laboratorul cu izolare n costum protector. Laboratorul cu izolare n costum

zona duurilor de decontaminare, n sas-uri sau n camerele de decontaminare,

Avnd n vedere complexitatea ridicat din punct de vedere al proiectrii, realizrii

Personalul laboratoarelor care folosesc animale n scopuri experimentale i de

n aceast clasificare, factorii care in de agenii microbieni investigai / utilizai i

11. Imbrcmintea de protecie purtat n incinta biobazei trebuie decontaminat nainte de

n cazul unor artropode, n special al insectelor zburtoare sunt necesare urmtoarele

7. Recomandri pentru calificarea

Calificarea laboratorului/facilitilor acestuia poate fi definit ca un proces sistematic de

ncuietori electronice de securitate i dispozitive de recunoatere

8. Recomandri pentru certificarea

Laboratoarele reprezint un mediu complex i dinamic. n zilele noastre, laboratoarele

Complexitatea operaiilor laboratorului cu Nivel de biosiguran 4 depete scopul

Tabel 5. Laboratorul de baz Nivel de Biosiguran 1. Chestionar pentru evaluarea

Nume, prenume auditor

Tabelul 6. Laboratorul de baz Nivel de Biosiguran 2. Chestionar pentru evaluarea

Data auditului :......................

Tabel 7. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3. Chestionar pentru evaluarea

Nume, prenume auditor..............................................

9. Conceptul de biosecuritate n laborator