Rezumat Teza 10.08.2016 PDF

CONTRIBUII LA CERCETAREA
UNOR GEMODERIVATE UTILIZATE

N FITOTERAPIA AFECIUNILOR RESPIRATORII
REZUMAT TEZA
CUPRINS
PARTE GENERAL ................................................................................................................. 1
Criterii care au stat la baza alegerii temei de cercetare ................................................................. 1
1.1. Frecvena crescut a afeciunilor respiratorii ................................................................. 1
1.2. Utilizarea gemoterapicelor n practica medical ............................................................... 2
1.3. Lipsa unor cercetri tiinifice a gemoterapicelor .............................................................. 3
1.4. Stadiul cunoaterii temei abordate pe plan internaional i naional a cercetrii n
domeniu .................................................................................................................................. 3
2. Obiectivele cercetrii........................................................................................................... 3
2. OBINEREA GEMOTERAPICELOR CERCETATE ........................................................... 4
2.1. Obinerea gemoterapicelor folosite n cercetarea clinic (procedeu PlantExtract) ........... 4
2.2. Produsele vegetale utilizate la obinerea unor gemoderivate folosite n experimentul
clinic ....................................................................................................................................... 5
2.2.1. RIBES NIGRUM L. ................................................................................................... 5
2.2.1.1. Denumiri populare .............................................................................................. 5
2.2.1.2. Compoziie chimic .......................................................................................... 5
2.2.1.3. Cercetri farmacologice anterioare ...................................................................... 5
2.2.1.4. Organotropism i posologie ............................................................................... 5
2.2.2. ROSA CANINA L....................................................................................................... 6
2.2.2.1. Denumiri populare .............................................................................................. 6
2.2.2.4. Organotropism i posologie ............................................................................... 7
2.2.3. BETULA PUBESCENS EHRH ................................................................................ 7
2.2.3.1. Denumire popular ............................................................................................. 7
2.2.3.4 Organotropism i posologie ................................................................................ 8
2.3. Alte produse gemoterapice utilizate n tratament .............................................................. 8
2.3.1. Extract de clin (Viburnum lantana L.DH1) .............................................................. 8
2.3.2. Extract de carpen (Carpinus betulus L.) ..................................................................... 8
2.3.3.Tinctura de propolis .................................................................................................... 9
1
2.4. Alte preparate utilizate n studiul clinic............................................................................. 9

CERCETRI PERSONALE ......................................................................................................11
3. CONTROLUL CALITII GEMOTERAPICELOR SUPUSE CERCETRII .....................11
3.1. Analiza compuilor sterolici...........................................................................................11
3.1.1. Material i metod...................................................................................................11
3.1.2. Rezultate i discuii ...............................................................................................12
3.1.3. Concluzii ..................................................................................................................12
3.2. Analiza compuilor polifenolici prin LC i MS .............................................................12
3.2.1. Material i metod...................................................................................................13
3.2.3.Concluzii ...................................................................................................................14
3.3. Determinarea aciunii antioxidante prin DPPH Ribes nigrum L., Rosa canina L.,
Betula pubescens Ehrh., Carpinus betulus L., Viburnum lantana L.i Propolis tinctura ........16
3.4. Activitatea antibacterian a gemoterapicelor supuse cercetrii .........................................16
4. Experiment clinic ...................................................................................................................17
4.1. Studiu privind eficacitatea gemoterapicelor menionate n afeciunile respiratorii .......17
4.1.1. Justificarea i protocolul studiului ...........................................................................17
4.1.2. Metodologia cercetrii ..............................................................................................18
4.1.4. Studiu clinic cu extract de Ribes nigrum L. - DH1 (Plantextract Cluj-Napoca) ..........20
4.1.5. Studiu clinic cu extract din mldie de mce - (Rosa canina DH1) i muguri de
mesteacn pufos (Betula pubescens DH1) ..........................................................................23
4.2. Evaluri comparative ale tratamentelor efectuate pe cele dou loturi martor ....................27
4.3. Analiza unui simptom clinic tusea la administrarea unor gemoterapice (gemoderivate)
- RN, RC. ...............................................................................................................................28
4.4. Rezultate analitice ...........................................................................................................28
4.4.1. Repartizarea pe grup de vrst a eantioanelor de subieci ...................................29
4.4.2. Repartiia pe sexe a eantionului de subieci ........................................................29
4.4.3. Repartiia pe boli i grupe de de vrst a eantionului de subieci .......................29
4.5. Discuii integrative ........................................................................................................32
4.6. Limitele studiului ............................................................................................................33
5. CONCLUZII GENERALE I PERSPECTIVE .....................................................................33
6. BIBLIOGRAFIE SELECTIV ..............................................................................................40
PARTE GENERAL
Dintre activitile omeneti, activitatea terapeutic a fost ntotdeauna un subiect
extrem de controversat deoarece medicina reprezint una dintre primele expresii raionale ale
luptei pentru supravieuire.
De aceea, de-a lungul timpului s-au dezvoltat numeroase procedee terapeutice, dintre
care enumerm: fitoterapia (gemoterapia), aromaterapia, apiterapia etc. Se poate afirma c
fitoterapia este contemporan cu apariia omului, resursele naturale reprezentnd un vast
cmp de cercetare, dar i un izvor de binefacere pentru specia uman.
Evaluarea compoziiei chimice (calitative i cantitative) a fost posibil datorit
evoluiei tehnologiei n domeniul aparaturii de control (detectarea constituenilor chimici n
concentraie de 10-9). Astfel s-a dezvoltat cromatografia in strat subire, (CSS) i de lichide
(HPLC = High performance liquid cromatography), cuplat sau nu cu spectrometria de mas
(HPLC/MS) care au permis ulterior depistarea i cuantificarea principiilor active, precum i
msurarea unor constante biochimice umane.
Criterii care au stat la baza alegerii temei de cercetare
1.1. frecvena crescut a afeciunilor respiratorii;
1.2. utilizarea gemoterapicelor n practica medical;
1.3. lipsa unor cercetri tiinifice a gemoterapicelor utilizate n tratament (norme de
calitate bazate pe concentraia principiilor active).
1.4. stadiul cunoaterii temei abordate pe plan internaional i naional al cercetrii n
domeniu
1.1. Frecvena crescut a afeciunilor respiratorii
Sezonul rece se caracterizeaz prin frecvena mare a afeciunilor cilor respiratorii.
Acestea sunt foarte sensibile la variaiile factorilor atmosferici, respectiv temperatura
mediului ambiant, umiditatea, curenii de aer i poluanii, pentru a nu enumera dect civa
dintre ei.
Potrivit datelor furnizate de Societatea romn de pneumologie, n Romnia exist n jur
de dou milioane de pacieni diagnosticai cu astm i bronit cronic respectiv BPOC, dar
aceast cifr este departe de a reprezenta o numratoare final, din cauz c majoritatea celor
care au BPOC sunt fumtori.
Conform reprezentanilor Societii romne de alergologie i imunologie clinic, 7080 % dintre cei care sufer de alergii, prezint i boli asociate, precum astmul bronic. De
altfel, incidena acestor afeciuni a crescut considerabil n ultimii ani, potrivit unui comunicat
Centrofarm (remis Ziare.com-25.febr.2009).
1.2. Utilizarea gemoterapicelor n practica medical
a. Frecven a reaciilor adverse ale medicaiei alopate
Utilizarea pe scar larg a antibioticelor n tratamentul formelor acute de boal (viroze
respiratorii, rinite alergice, astm bronic, BPOC) a dus la apariia n timp a rezistenei la
antibiotice, urmarea fiind necesitatea descoperirii unor substane chimice mai puternice, cu
apariia concomitent a unor reacii de intoleran a pacienilor, cele mai frecvente situaii
observate n compartimentele UPU fiind alergodermiile i reaciile digestive de tip: greuri,
vrsturi, dureri abdominale, etc.(232, 272, 282).
b.Recomandrile tip prospect ale gemoterapicelor
n ultimii ani apariia pe pia a multor preparate denumite gemoterapice, sau
gemoderivate, impune o cercetare mai amnunit a compuilor chimici activi n vederea
standardizrii lor, pentru a asigura calitatea i reproductibilitatea rezultatelor. Toate
determinrile s-au efectuat pe MG=DH1.
A. Ribes nigrumL. MG=DH 1 - antialergic i antiinflamator natural:
- sindroame alergice: scderea incidenei i ameliorarea sindroamelor alergice;
- sindroame inflamatorii: la nivel local i general, n special cele de la nivelul
articulaiilor;
- sistem respirator: infecii gripale acute i cronice, stri febrile, rinite.
Aciuni stipulate n prospecte: stimuleaz secreia corticosteroizilor, efect cortizon-like
(fr efectele secundare ale cortizonului de sintez), stimulator al imunitii (198).
B. Rosa canina L. vitamin C natural, antiinflamator, antialergic, vitaminizant
Pe sistem imunitar induce scderea incidenei infeciilor respiratorii (profilactic);
amelioreaz simptomele din infecii acute i cronice ale cilor respiratorii precum i
tulburrile de cretere ale copiilor cauzate de infeciile recidivante ale sistemului respirator.
Aciune general: antiinflamator i antialergic, remediu al tulburrilor inflamatorii
recidivante, vitaminizant (198).
C. Betula pubescens Ehrh. - antiinflamator, este un drenor excelent al esuturilor
infiltrate cu exces de reziduri metabolice, stimuleaz reaciile catabolice, acionnd asupra
funciilor detoxifiante hepatice.
- metabolism general - eliminarea toxinelor i fortificarea organismului;
- sistem respirator - ameliorarea simptomelor din infecii acute i cronice
- sistem osteo-articular - remineralizarea oaselor i ameliorarea durerilor articulare
- cavitate bucal- ameliorarea simptomelor din afeciuni gingivale (198).
2
D. Carpinus betulus L.- remediu biologic important, antihemoragic, indispensabil n

cazul unui sindrom trombocitopenic, sindroame de insuficien hepatic nsoite de
tulburri ale crazei hematice (anemie, trombocitopenie).
Este un bun antiinflamator sindroame respiratorii spastice i tusigene, tuse spastic,
sindroame rinosinusale bronhice, bronite acute i cronice (198, 240).
E. Viburnum lantana L.- reglator neurovegetativ, spasmolitic i antialergic al cilor
respiratorii fiind indicat n astmul simplu i intricat n toate formele de dispnee astmatiform
[teren tuberculinic dr. Tetau M.(249)]. Este remediul strilor alergice cronice decompensate
(198).
1.3. Lipsa unor cercetri tiinifice a gemoterapicelor
Preparatele gemoterapice se utilizeaz doar tradiional, de aici necesitatea fundamentrii
tiinifice prin elaborarea unor norme de calitate bazate pe coninutul n principii active i a
mecanismului de aciune, care s le confirme calitile terapeutice.
1.4. Stadiul cunoaterii temei abordate pe plan internaional i naional a
cercetrii n domeniu
La nivel naional si internaional gemoterapia se practic cu produse care nu sunt
standardizate n principii active, rspunztoare de aciunea terapeutic. Nu se pune accent pe
cantitatea de principii active, care trebuie sa fie constant, ci pe raportul produs vegetal/
gemoterapic (1/10 din tinctura mam).
Prospectele asociate confund compoziia chimic a produselor vegetale din care se
obin cu compoziia gemoterapicelor. Gemoterapicele s-au utilizat pn n prezent doar n
baza practicii tradiionale, fr verificare farmacologic sau clinic, dei metoda este destul
de larg utilizat n diverse ri: Frana, Italia, Germania, Marea Britanie, etc.
Dezavantaje
Reproductibilitatea rezultatelor nu este posibil, de aici rspunsuri diferite ale
pacienilor la arje diferite din acelai preparat.
Nu se poate stabili o corelaie ntre compoziia chimic i aciunea preparatului,
necunoscndu-se cantitatea principiilor active din gemoterapicul utilizat.
2. Obiectivele cercetrii
Fundamentarea tiinific a utilizrii gemoterapicelor obinute din Ribes nigrum L.,
Rosa canina L., Betula pubescens Ehrh., Viburnum lantana L., Carpinus betulus L., folosite
n tratamentul unor afeciuni respiratorii;
- cercetarea compoziiei chimice n vederea standardizrii lor;
- completarea normei de calitate a gemoterapicelor supuse cercetrii cu precizarea

coninutului n derivai polifenolici (acizi fenol-carboxilici), flavone, triterpene-steroli prin
cercetri HPLC, HPLC/SM.
- verificarea in vitro a aciunii antimicrobiene i antioxidante;
- fundamentarea tiinific a unora din utilizri (antibacterian, antioxidant) prin
determinarea activitii antibacteriene (Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes,
Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli) i antioxidante (prin metoda DPPH).
- verificarea clinic a beneficiilor terapeutice pe loturi de bolnavi i precizarea mecanismului
de aciune.
2. OBINEREA GEMOTERAPICELOR CERCETATE

2.1. Obinerea gemoterapicelor folosite n cercetarea clinic (procedeu
PlantExtract)
Stabilirea perioadei de recoltare funcie de calitatea materiei prime i alegerea
solventului adecvat pentru extragerea principiilor active.
Maceratele glicerinice sunt preparate lichide din fitocomplexe de plante medicinale,
care rezult prin extracia materiei prime de origine vegetal, soluie care extrage complet
componenii vegetali fr denaturarea principiilor active coninute n plant. Materia prim
(muguri, rdcini, sau mldie), este recoltat ctre sfritul iernii sau nceputul primverii,
perioade n care au o concentraie maxim de principii vitale. Produsele vegetale sunt
recoltate neaprat proaspete din habitatul natural evitnd recoltarea n perioade climatice care
ar putea determina deteriorarea plantei. Este important s fie exclus prezena ierbicidelor i
insecticidelor. Recoltarea adecvat a produselor vegetale constituie cea mai bun garanie
pentru conservarea proprietilor principiilor active coninute n ele. Odat recoltate,
produsele vegetale trebuie supuse preparrii remediilor n urmtoarele 48 de ore. Gemoterapia
utilizeaz extracte de esuturi vegetale proaspete n prim diluie decimal Hahnemanian.
Maceratul glicerinic propriu-zis este diluat n proporie de 1:10, cu un amestec de ap,
alcool, glicerin, (20:30:50). Astfel, 100 ml macerat glicerinic DH1 corespund la 0,5g s.u. La
finalul procesului de preparare, tincturile mam sunt controlate prin probe organoleptice
(miros, gust, culoare), probe fizice(stabilirea densitii, gradului alcoolului, eventuale
reziduuri), probe chimice pentru controlul principiilor active din tincturile mam, prin
spectrofotometrie, dozarea principiilor active. Gemoterapicele sunt conservate n recipiente de
sticl brune depozitate n locuri nchise, ferite de lumin (198).
Proces tehnologic i controlul calitii (PlantExtract).
Ca orice productor i Plantextract Cluj-Napoca dispune de un laborator de control al

calitii produselor elaborate (101, 102, 104, 105). n cazul de fa controlul const n:
-controlul calitii materiilor prime;
- controlul calitii produsului finit.
2.2. Produsele vegetale utilizate la obinerea unor gemoderivate folosite n
experimentul clinic
2.2.1. RIBES NIGRUM L.
2.2.1.1. Denumiri populare
Denumiri populare n lb. romn: Agri-negru, coacz-neagr, pomioar-neagr,
smordin, smordina-neagr, strugurei-negri, struguri negri (25, 90).
ncadrare sistematic: regn - Plantae, ncrengatur - Magnoliophyta, clasa
Magnoliopsida, ordin - Saxifragales, familia - Grossulariaceae, gen- Ribes, specia Ribes
nigrum.
2.2.1.2. Compoziie chimic
Mugurii - au concentraii mai mari de heterozide fenolice, vitamin C = 107mg/g i de
aminoacizi, mai ales arginin, prolin si alanin. Concentraiile de arginin din muguri sunt de
5,7mg/g, n timp ce n frunze sunt de 0,77mg/g. (25, 88, 90, 198).
2.2.1.3. Cercetri farmacologice anterioare
Ribes nigrum L. conine diverse tipuri de acizi fenolici cu un efect antioxidant puternic,
care le confer posibilitatea de utilizare la scar larg ca un produs tip supliment alimentar.
Cercetarea acestora s-a efectuat prin spectroscopie i HPLC pentru a diferenia procentul de
acizi fenolici n plante slbatice i din culturi convenionale (7,31). Alte cercetri efectuate n
Japonia au demostrat efectul antiviral [virusul gripal A, B, herpes simplex-1(238)]. Acest
efect a fost evideniat prin cromatografie pe fraciile D pn la G separate care au dovedit
efectul antiviral potent mpotriva virusurilor gripale A i B.
Studiile recente au artat c substanele de tip flavonoide sunt potenate de frecvena
derivailor polifenolici (picnogenol, proantocianidine) (31, 48, 146 ,148). Prin acest test s-a
demostrat c maceratul glicerinic din muguri de coacz negru produce inhibiie de 70-90% la
doze cuprinse ntre 50-250mg/kg corp, fa de administrarea de indometacin care nu produce
o inhibiie mai mare de 70% la nivelul procesului inflamator (198).
2.2.1.4. Organotropism i posologie
Aciunea gemoterapicului Ribes nigrum L. DH1, este direcionat n mod deosebit
asupra glandelor suprarenale, determinnd eliberarea de substane cu aciune antiinflamatorie
i antialergic, comportndu-se ca un cortizon natural, aciune cortizon - like. Experimental,
5
activeaz i stimuleaz 11-oxi-steroizii i determin creterea nivelului corticosteroizilor, care

sunt activatori ai rspunsului endogen n procesele de inflamaie; printre altele, mugurii de
Ribes nigrum L. previn i inhib procesele inflamatorii i prin aciune inhibitorie direct
asupra catenelor enzimatice care produc prostanoizi.
Posologie - conform prospectului
Aduli i copii peste 7 ani: n general cte 2 mL, n puin ap, de 2-3 ori pe zi, nainte
de mese,copiii sub 7 ani cte 1pic/kgcorp.
2.2.2. ROSA CANINA L.
2.2.2.1. Denumiri populare
Mcie, cacadr, clcdriu, cecadar, cascadin, , mrcinele cioarei, mrcinele
coofanei, mosmon, rsur, rug de mce, rug slbatic, rugul-vacii, ruja, rujit, scoabe,
scochin, scoru nemesc, sipic, suie, trandafir, trandafir de cmp, trandafir slbatic, tuf de
rug, zgorghin, ciucuri de mrcine-fructele (25).
ncadrare
sistematic: Regn: Plantae;
subregn: Cormobionta,
ncrengtura:
Magnoliophyta, Angiospermatophyta, Clas: Magnoliatae, ordin: Rosales, familie: Rosaceae;

Subfamilile: Rosoideae, gen: Rosa, specie: Rosa canina (https://ro.wikipedia.org/wiki/Regn)
Valoarea nutritiv i terapeutic a mceelor este dat de coninutul n vitamina C,
carotenoide (beta caroten, licopen i izomeri ai rubixantinelor), dintre care unele sunt
provitamine A, vitaminele E, K, PP, D, B1,B2, zaharuri simple, acid malic, pectine.
Florile (petalele) sunt bogate n uleiuri volatile (geraniol, citronelol, eugenol), cear,
acid galic, flavonoide galbene i antociani de culoare roie nchis.
Fructele (bacele) conin vitamine, (acid ascorbic 0,5%, vitamina A, vitamina E),
aluminiu, vanilin, polifenoli (flavonoide, pn la 0,3% i 1-2,5% taninuri), n special
leucoantociani i catechine, acizi organici (9,8% acid malic, 3% acid citric ), 5% acid
galic,18-28% carbohidrai (glucoz, zahr invertit, zaharoz, alte zaharuri), 4% pectine,
mircin, sruri minerale, 2,7% proteine, complexe asemnatoare auxinei, ulei gras n semine,
saponine (88, 198).
Dr. Robin Christensen i colab. de la spitalul Frederikberg (Danemarca) i Universitatea
din Copenhaga au demonstrat efectul mceului asupra osteoartritelor; studiul a inclus 306
pacieni crora li s-a administrat Rosa canina L. Rezultatele au evideniat rspunsul pozitiv
antiinflamator prin administrarea o perioad mai lung de timp a extractului de mcee. (39,
41, 43).
n 2001 Ross Nagel i Willich de la Univ. Humbold din Berlin au fost primii care au
demostrat experimental, c Rosa canina poate inhiba stresul oxidativ; reducerea semnificativ
a durerii a dus la mbuntairea mobilitii articulare (273).
2.2.2.4. Organotropism i posologie
Rosa canina L. este remediul inflamaiei localizate, recidivante. Are organotropism
pentru sistemul reticuloendotelial, cile respiratorii superioare i schelet.
Experimental reechilibreaz profilul proteic. Asupra metabolismului proteic crete
albuminele i scade alfa-1 i alfa-2 globulinele, reduce alfa-2 euglobulinele i reechilibreaz
gama globulinele. Asupra metabolismului lipidic i lipoproteic posed o uoar activitate
ambivalent asupra beta-lipoproteinelor (198).
2.2.3. BETULA PUBESCENS EHRH.
2.2.3.1. Denumire popular - mesteacn pufos, mestecna (25, 88).
ncadrare sistematic: Regn: Plantae,subregn: Tracheobionta, superdiviziune:
Spermatophyta,diviziune: Magnoliophyta,clas: Magnoliopsida, subclas: Hamamelidae,
ordin: Fagales, familia: Betulaceae, gen Betula, specii: Betula aetnensis Rafin., Betula nana
L., Betula pendula Roth, (luirig.altervista.org/schedeit/ae/betula_pubescens.htm)
Frunzele conin acid betulinic, acid tanic (8-9%), tanin (5-9%), glucoza (8-9%) i urme
de alcaloid; un ulei eteric esenial (0,04-0,05%), esterul butilic al acidului betuloretic;
saponine (3,2%), mici procente din acid nicotinic, mircetin-3-digalactozid cu agliconul su
numit miricetin, derivai ai acidului cafeic (acid clorogenic), acid ascorbic (0,3%) (9, 15, 58,
59).
Rdcina conine betulina, acid betulinic, betulalbumina (288).
Amenii; contin fenoli (6%); crezol, catecol, pirogalol, 5-propil pirogalol, dimetil eter,
5-metil-pirogaloldimetileter.
Sunt prezente printre altele triterpene i saponine: betulina i betulinol, flavonoide,
digalactozide, tip miricetin, cumarine (scoar), fenolglucozide, antociani, alantoina i acizi
grai (198).
Unii autori (E. Steineggr, R, Hansel 1963) - atribuie ndeosebi saponinelor activitatea
terapeutic a produsului ns acestea se gsesc n cantitate de circa 3% i sunt ntrecute de cea
a flavonoidelor (57); acestea sunt reprezentate de hiperozid, qercitin, miricetol 3digalactozid, 5-hidroxi-7,4-dimetoxiflavon, catehine (A. Elbanovwska, F. Kaczmarek, 1966), dar
la aceast aciune mai particip sinergic i unele componente terpenoidice (62).
2.2.3.4 Organotropism i posologie

Betula pubescens Ehrh. stimuleaz reaciile catabolice ale acidului uric, ureei,
colesterolului, acioneaz asupra funciilor detoxifiante hepatice prin intermediul activrii
macrofagelor (celule Kupfer hepatice). Pe planul reaciei inflamatorii Betula pubescens Ehrh.
este remediul fazei inflamaiei exudative atunci cnd exist o tendin de cronicizare n
evoluia procesului inflamator, el dominnd mai bine fenomenele patologice ale peretelui
vascular (198).
Posologie
Mod de administrare: cte 50 picturi (2 mL), n puin ap, de 1-2 ori, nainte de mas.
n caz de asociere cu alte gemopreparate se recomand 50-75 picturi (2-3 mL) n puin ap,
o dat pe zi.
2.3. Alte produse gemoterapice utilizate n tratament
Deoarece studiile clinice efectuate pe pacieni au impus utilizarea i a altor produse
gemoterapice, este nevoie s detailiem cteva caracteristici generale ale unor preparate care
au fcut obiectul studiului farmacognozic. Fr a intra n foarte multe detalii descriptive, voi
sistematiza cteva aspecte generale importante pentru studiu.
2.3.1. Extract de clin (Viburnum lantana L.- DH1)
Denumire popular - drmoz.
Componentele sale principale sunt salicozide, n frunze sunt prezeni tanini, gume,
enzime i sruri ale unor acizi organici. n scoar au fost izolai: 1,97% taninuri acid
formic i valerianic, urme de acid salicilic, amidon, proteine (2,4%), dextrin, pentozani (16
%), zaharoz, o rin acid (6,5%) care prin saponificare produce acid valerianic,
heptacozan, sitosterin. Au mai fost identificate printre altele, urmtoarele substane: un ulei
volatil (0,3%), pectin, potasiu, zaharoz, viburnin (substan amar cu compoziie
nedefinit) i n rdcini acidul valerianic (3, 198, 250).
2.3.2. Extract de carpen (Carpinus betulus L.)
Denumiri populare: carpan, carpin, garnita, mustaret.
Componenii i principiile active nu sunt nc bine cunoscui, frunzele conin
taninuri, cear i sruri minerale (198).
Utilizri terapeutice
Gemoterapia utilizeaz mugurii de carpen ca un remediu cu proprieti
antihemoragice, n afeciuni rinofaringiene i pulmonare recidivante; are proprieti de
cicatrizare i ameliorare a spasmelor (44, 239).
2.3.3.Tinctura de propolis
Originea vegetal a propolisului a fost afirmat de catre Rosch, Vansell, Bisson, Lavie
i citat de Neacu C.(180).
Compoziia chimic a propolisului
Cercetrile au dus la identificarea prin HPLC a flavonelor: crizina, tectocrizina,
galangin, izalpin, ramnocitrin, quercitrin, pinostrobina - (Popravco et al.) (205) i acizi
fenolcarboxilici, caracterizai prin activitate antibacterian pe Staphylococcus aureus,
Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa (12, 76, 150).
Grupele majore de substane existente n propolis: 55% rini i balsamuri; 7,5% 35% ceruri de natur vegetal cu solubilitai diferite n alcool i solveni apolari; 10%
uleiuri volatile; 5% polen; 5% acizi grai; microelemente: Fe, Zn, Cu, Co, Mn, Al, Ag, Mg,
Si, Ti, Mo.
Flavonoidele prezint proprieti antimicotice i antibacteriene, confirmate
experimental pe animale (Papay V. et al., 1985) (192). Deoarece flavonoidele din compoziia
tincturii de propolis are multiple aciuni terapeutice, cercettorii au extins investigaiile n
numeroase afeciuni: cardiace, respiratorii, dermatologice, stomatologice (L. Serafim Apiterapia n Romnia) (220).
2.4. Alte preparate utilizate n studiul clinic
O scurt trecere n revist a acestora evideniaz tropismul lor pe aparatul respirator.
Am considerat util menionarea acestor preparate, deoarece ele au intrat de-a lungul
timpului n diversele scheme de tratament pe care le-am utilizat n mod personalizat la
pacieni cu patologie respiratorie (2 4 - 6 luni). Dei ele nu au fcut obiectul acestei
cercetri, este important cunoaterea lor, pentru a demonstra variabilitatea care exist n
natur, oferindu-ne multiple posibiliti de tratament.
1. Extract din muguri de alun (Corylus avellana) D1
2. Ashwagandha
3. Baraka ( ulei din semine de negrilic Nigella sativa)
4. Bettarax forte ( Rotta Natura ) conine trei frai ptai Viola tricolor, frunze
de mesteacn Betula pendula, frunze de coada oricelului Achillea milefolium.
5. Extract de brad (Abies pectinata-DH1)
6.
Giardinophyt-extracte
vegetale
de
cimbru
(Thymus
vulgaris),
vetrice
(Chrysanthemum vulgare), semine de mrar (Anethum graveolens), cuioare (Eugenia

caryophyllata) i extract de propolis.
7. Extract de Lemn cinesc (Ligustrum vulgare DH1)
8. Meridianul trei focare - ctin alb (Hippophae rhamnoides), coacz negru (Ribes
nigrumL.), coada-racului (Potentilla anserina), coada-oricelului (Achillea millefolium),
iarba-mare (Inula helenium), lemn-dulce (Glycyrrhiza glabra),pir (Agropyron repens), revent
(Rheum officinale ), soc (Sambucus nigra), splinua (Solidago virgaurea), alcool etilic
alimentar (72).
9. Meridianul plmn (Acupunctura lichid): angelic (Angelica archangelica),
cimbru de grdin (Satureja hortensis), coada-calului (Equisetum arvense), ghimbir (Zingiber
officinalis),iarb-mare (Inula helenium), mutar alb (Sinapis alba), ptlagin (Plantago
major), plmnric (Pulmonaria officinalis), podbal (Tussilago farfara), rozmarin
(Rosmarinus officinalis), salvie (Salvia officinalis), scortioar (Cinnamomum cassia), alcool
etilic alimentar. Indicaii: se recomand ca adjuvant n: amigdalit, faringit, laringit,
traheit, bronit, astm bronic, tuse, silicoz (conform prospect).
10. Extract de merior DH1 ( Vaccinium vitis idaea DH1) - Nivele de
aciune: intestin, ci urinare, aparat osteoarticular, vase arteriale, aparat genital feminin i
masculin.
11. Poligemma sinusuri (Plantextract Cluj-Napoca)
Combinaie de extracte gemoterapice din muguri de Ribes nigrum L, Carpinus betulus
L., Betulus pubescens Ehrh, Alnus glutinosa.
12. Extract porumbar (Prunus spinosa DH1) - Nivele de aciune: ax hipotalamohipofizo-suprarenalian, ochi, aparat cardio-vascular, rinichi, plmni, piele, uter.
13. Respiral forte - Extract muguri plop (Populus nigra), Propolis, ulei esenial de
ment (Mentha piperita), ulei esenial de eucalipt (Eucalyptus globulus), ulei esenial de
pin (Pinus sylvestris), ulei esenial de cimbru de cultur (Thymus vulgaris), ulei esenial
detea-tree(Melaleuca alternifolia) arbore de ceai (DACIA PLANT).
Aceste preparate au fcut parte din terapia pacienilor de-a lungul celor 6 luni de
tratament,fiind necesar introducerea lor datorit unor situaii particulare ale subiecilor.
10
CERCETRI PERSONALE
3. CONTROLUL CALITII GEMOTERAPICELOR SUPUSE
CERCETRII
3.1. Analiza compuilor sterolici
Cercetrile noastre au constat n analize tip HPLC i LC-MS a sterolilor, flavonelor
i acizilor fenolcarboxilici (AFC), deoarece sterolii sunt menionai n literatura de
specialitate ca avnd proprieti antiinflamatoare (1, 24, 31, 37, 119), flavonele i AFC antioxidante.
3.1.1. Material i metod
Probele utilizate n studiu sunt reprezentate de gemoterapicele PlantExtract Cluj
Napoca: Ribes nigrum DH1 (RN), Rosa canina DH1 (RC), Betula pubescens DH1 (BP),
Tinctura propolis (P), Viburnum lantana DH1 (VL), Carpinus betulus DH1(CB).
Pentru analiza sterolilor din gemoterapicele DH1 - RN, RC, BP, VL, CB, i P s-a
folosit cromatografia de lichide de nalt performan cuplat cu spectrometria de mas LC/MS (5, 11, 16, 24, 193, 204).
Standarde: pentru determinarea cantitativ a sterolilor au fost utilizate ca standarde,
beta-sitosterolul, stigmasterolul, campesterolul, ergosterolul i brasicasterolul.
Aparatura: HPLC cuplat cu spectrometru de mas; HP 1100 Series binary pump;
autosampler HP 1100 Series; termostat HP 1100 Series; spectrometru de masa Agilent Ion
Trap 1100 SL
Condiiile de lucru HPLC: Coloana analitic : Zorbax SB-C18 100 mm x 3.0 mm
i.d., 5 m; faza mobil: amestec metanol: acetonitril 10:90 (v/v), eluie izocratic; debitul: 1
ml/min, temperatura: 45C; detecia MS/MS, mod MRM; volumul de injectare: 5 l
Condiiile de lucru MS: Sursa de ioni: APCI (atmosferic pressure chemical
ionisation); mod ionizare: pozitiv, nebulizator: azot, presiune 60 psi;Vaporizare 400C; Gaz
de uscare: azot, debit 7 L/min, temperatura 325C;potenial capilara: -4000V; mod analiz:
monitorizare ioni specifici ai sterolilor
n condiiile cromatografice anterioare, timpii de retenie ai sterolilor analizai
sunt: 2,4 minute pentru ergosterol, 3,7 min att pentru stigmasterol ct i pentru campesterol
(coeluie) si 4,2 minute pentru sitosterol.
Metoda MS
Deoarece n condiiile de ionizare toi sterolii pierd o molecul de ap, ionii
detectai de spectrometru sunt ntotdeauna de forma [M-H2O+H]+. Detecia MS a pus n
11
eviden ionii - printe ai sterolilor analizai (ioni printe = ioni care se formeaz dup
ionizarea substanei, nainte de o eventuala fragmentare).
3.1.2. Rezultate i discuii
Toate gemoterapicele cercetate conin doar beta-sitosterol. ntruct cercetarea
prezenei acestor derivai s-a extins asupra altor gemoterapice utilizate n fitoterapie (VL,
CB) i asupra tincturii de propolis, semnalm absena
tuturor sterolilor cercetai n
gemoterapicul de carpen (Carpinus betulus) i prezena n mici cantiti doar a betasitosterolului n gemoterapicul de clin (Viburnum lantana L.) (2,033g/mL). Tinctura de
propolis cercetat conine 1,516 g/mL betasitosterol. ntruct compoziia chimic a
propolisului este influenat de numeroi factori pedo-climatici i de speciile vizitate de
albine n scopul recoltrii lui, coninutul n fitosteroli ar putea fi variabil (51, 75, 122).
Cea mai mare cantitate de betasitosterol se gsete n gemoterapicul obinut din
coacz negru (21,598g/mL). n celelalte gemoterapice cercetate cantitile de betasitosterol
sunt destul de apropiate n mesteacn pufos-17,251 g/mL, n mce - 15,859 g/mL.
3.1.3. Concluzii
Gemoterapicele DH1 de Ribes nigrum L.,Betula pubescens Ehrh. i Rosa canina L.
conin beta-sitosterol n cantiti suficient de mari pentru a putea contribui la efectul
antiinflamator (188).Concentraiile de steroli determinate sunt prezentate n tabelul I
(concentraiile in cont de diluia efectuat i sunt exprimate n g/mL).
Tabelul I. Concentraiile sterolilor n probele analizate
BetaProba
Ergosterol
Stigmasterol
Sitosterol
Campesterol
Brassicasterol
Concentratie (g/ml)
x1
0,000
0,000
15,859
0,000
0,000
x2
0,000
0,000
17,251
0,000
0,000
x3
0,000
0,000
21,598
0,000
0,000
x4
0,000
0,000
1,516
0,000
0,000
x5
0,000
0,000
2,033
0,000
0,000
x6
0,000
0,000
0,000
0,000
0,000
Legend: x1= mace; x2=mesteacn pufos DH1; x3=coacz negru DH1; x4=propolis tinctur; x5=clin DH1;
x6=carpen DH1.
3.2. Analiza compuilor polifenolici prin LC i MS

Pentru analiza compuilor polifenolici din gemoterapicele supuse cercetrii,
s-a
folosit cromatografia de lichide de nalt performana cuplat cu spectrometria de masa

(LC/MS).
12
3.2.1. Material i metod

Se poate aplica pentru analiza calitativ a 18 compui i cantitativ pentru 14
compui.
Standarde: au fost utilizate standarde de compui polifenolici: acizi fenolici (cafeic,
clorogenic, caftaric, gentizic, ferulic, sinapic, paracumaric), glicozide ale quercetinei
(quercitrin, hiperozide, izoquercitin, rutin) i agliconi flavonici (quercetin, miricetin, fisetin,
patuletina, luteolin, kaempferol, apigenin).
Analiza compuilor polifenolici prin detecie UV

Compuii au fost detectai la lungimea de und corespunztoare maximului lor de
absorbie din spectrul UV, acizii polifenolcarboxilici la =330 nm iar flavonoidele i
agliconii acestora la =370 nm (fig.1).
Analiza polifenolilor prin detecie MS
Prelucrarea probelor de analizat
Au fost analizate n paralel dou probe din fiecare gemoterapic, una ca atare iar
cealalt hidrolizat. S-a practicat hidroliza pentru ndeprtarea catenei glucidice n cazul
flavonelor.
Fig. 1. Cromatograma unui amestec de 18 polifenoli, detecie UV la =330 i =370 nm
Deoarece unii agliconi flavonici sau unii acizi polifenol-carboxilici nu se afl n stare
liber, ci legat(glicozide, esteri, etc.), pentru scindarea hidrolitic a esterilor acizilor fenolcarboxilici, s-a practicat hidroliza acid care va duce la eliberarea acestor compui din forma
legat i ar aduce mai multe informaii despre polifenolii produsului cercetat. Deoarece, n
timpul hidrolizei pot avea loc procese de oxidare a polifenolilor, analiza are mai mult valoare
calitativ dect cantitativ.
13
Hidroliza se face dup urmatorul protocol: o parte extract se dilueaz cu o parte

soluie HCl 2 N i se menine pe baia de ap la 80 C timp de 60 min. Se corecteaz
volumul de lichid evaporat n timpul hidrolizei prin adugarea unei cantitai corespunztoare
de ap distilat i se injecteaz n sistemul cromatografic. Rezultatele sunt cuprinse n tabelul
III.
n RC, BP, RN predomin heterosidele quercetolului exprimate n g/mL (147,875
quercitrin, 28,392 hiperozid, 22,542 isoquercitrin n RC; 16,111 isoquercitrin, 1,714
rutozid i 10,826 quercitrin n BP) i agliconii (5,294quercetol,1,146 kaempferol, n RN).
Ca acizi fenol-carboxilici predomin acidul p-cumaric (1,464 n RC; 56,132 n BP;
13,742 n RN). Cantitatea de acid cafeic/acid clorogenic, dupa separare, a fost de: 1,48/41,00
n RC; 1,38/13,90 n BP; 18,43/16,09 n RN; 282,7/3,12 n P; 0,17/1,67 n VL i
neidentificabil /5,44 n CB (189) (tabel II).
3.2.3.Concluzii
Metodele de determinare cantitativ prin HPLC/MS sunt reproductibile i ca atare
propunem introducerea lor n metodologia de determinare a calitii gemoterapicelor
respective. Limitele urmeaz a fi precizate n urma mai multor determinri.
Tabel II Determinare cantitativ a acidului cafeic i clorogenic

Acid cafeic
Acid clorogenic (g/mL)
Ioni specifici de identificare
Produs
(g/mL)
(m/z)
282,70
3,12
RN
18,43
16,09
BP
1,38
13,90
Acid cafeic: m/z 179 > m/z 135
CB
NF
5,44
Acid clorogenic:m/z 353 > m/z 191
RC
1,48
41,00
VL
0,17
1,67
14
Tabel III Coninutul n polifenoli al gemoterapicelor i tincturii de propolis (g/mL)

Compui
m/z
RT SD (min)
RN
BP
CB
RC
VL
polifenolici
NH / H
acid p-
163
9,48 0,08
Coumaric
acid ferulic
acid sinapic
Hiperozid
Isoquercitrin
Rutin
Myricetin
Quercitrin
Quercetin
Luteolin
Kaempferol
Apigenin
193
223
463
463
609
317
447
301
285
285
279
12,8 0,10
14,30,10
19,32 0,12
19,60 0,10
20,20 0,15
21,13 0,12
23,64 0,13
26,80 0,15
29,100,19
32,48 0,17
33,100,15
196,48
13,74
56,13
NF
1,46
NF
222,48
11,03
46,74
2,68
9,34
NF
154,0
6,82
3,33
NF
NF
NF
198,19
6,27
6,97
NF
NF
NF
NF
0,71
NF
NF
NF
NF
NF
0,17
2,18
NF
NF
NF
NF
19,99
70,46
4,12
28,39
NF
NF
NF
NF
NF
NF
NF
NF
71,54
16,11
NF
22,54
NF
NF
NF
NF
NF
NF
NF
NF
27,57
1,74
NF
14,36
NF
NF
NF
NF
NF
NF
NF
4,58
2,27
NF
NF
NF
NF
3,32
11,14
0,26
NF
0,97
NF
1,47
11,58
10,82
19,42
147,87
NF
NF
NF
NF
NF
NF
NF
14,11
5,29
4,31
NF
2,98
NF
4,09
44,16
29,52
3,1
76,37
NF
2,59
0,46
NF
NF
NF
NF
1,21
NF
NF
0,38
NF
NF
14,49
1,14
57,08
NF
0,35
NF
2,02
7,3
14,23
0,56
16,66
NF
9,78
NF
22,33
NF
NF
NF
5,471
NF
8,80
NF
NF
NF
Not: NF-not found, sub limita de detecie
15
3.3. Determinarea aciunii antioxidante prin DPPH Ribes nigrum L., Rosa canina L.,
Betula pubescens Ehrh., Carpinus betulus L., Viburnum lantana L. i Propolis tinctura
S-a utilizat radicalul liber DPPH (difenil-picril hidrazina) pentru a evalua abilitatea de a dona
un atom de hidrogen a remediilor gemoterapice i a antioxidanilor sintetici, quercetin i BHT
(butil-hidroxi-toluen). Rezultatele sunt exprimate n concentraie inhibitorie 50% (IC50). Toate
mostrele au redus radicalul DPPH n moduri diferite. Cu ct valoarea IC50 este mai mic, cu att un
produs are activitate antioxidant mai bun (16, 17, 53, 65, 119, 125, 126, 136). Tabelul IV
evideniaz potenialul antioxidant al produselor cercetate.
Tabel IV Potenialul antioxidant al produselor cercetate

Sample
IC50 (g/mL)
Sample
IC50 (g/mL)
2,79 0.08
RC
5,81 0,12
RN
19,52 1.28
VL
30,08 2,14
BP
16,39 1.46
Quercetin
5,59 0,13
CB
28,71 1.84
BHT
15,88 1,06
Concluzii
Tinctura de propolis prezint cea mai puternic aciune antioxidant (IC50= 2,79
g/mL). Lund n considerare rezultatele, se poate evidenia efectul antioxidant n
urmtoarea ordine cresctoare: VL <CB <RN <BP
<BHT <RC
< quercetin<P.
Proantocianidinele, flavonoidele i acidul ascorbic coninute n fructele de Rosa canina L. i

imprim cele mai bune proprieti antioxidante mpotriva HOCI i H2O2.
Aceast metod este reproductibil i accesibil laboratoarelor de profil (189).
Rezultatele sunt n concordan cu cercetrile lui Daels-Rakotoarison et al.(2002),
(56) care a raportat valori ale IC50 de 5,73 g/mL, 1,33 g/mL i 2,33 g/mL pentru anionul
superoxid, acid hipocloros i peroxidul de hidrogen efectuate prin metoda cell-free pentru
evaluarea activitii antioxidante.
3.4. Activitatea antibacterian a gemoterapicelor supuse cercetrii
S-au utilizat
bacterii gram pozitive - Staphylococcus aureus (ATCC 49444) i
Listeria monocytogenes (ATCC 19114) i bacterii gram negative - Pseudomonas aeruginosa

(ATCC 27853), Escherichia coli (ATCC 25922). Toate microorganismele testate au fost
obinute de la laboratorul de biotehnologii alimentare, Universitatea de tiine Agricole i
Medicin Veterinar Cluj-Napoca, Romnia. Bacteriile au fost cultivate pe mediu de cultur
16
Muller-Hinton Agar. Acestea au fost depozitate la 4C i subcultivate o dat pe lun. Pentru

evaluarea activitii antimicrobiene, extractul obinut se evapor la sec, sub presiune redus
la 30 C i resuspendat n 1 mL de ap bidistilat. Date tehnice cu privire la aceast metod
au fost deja publicate (43, 56, 150, 216, 219).
S-au determinat doi parametri: concentraiile minime inhibitorii (CMI) i
concentraiile minime bactericide (CMB). Acestea sunt redate n tabelul V.
Tabel V. Rezultatul efectului antibacterian in vitro
Germeni
Antibiotic
Standard
CMI/CMB(mg/mL)
Streptomycin
RN
BP
CB
RC
VL
Staphylococcus
0,03
0,014
0,93
0,23
1,87
0,46
7,5
aureus
0,06
0,029
1,87
0,46
3,74
0,93
15
Listeria
0,015
0,014
1,87
0,93
7,5
0,11
7,5
monocytogenes
0,03
0,029
3,75
1,87
15
0,23
15
Pseudomonas
0,06
0,23
0,93
0,93
0,93
0,93
1,87
aeruginosa
0,03
0,46
1,87
1,87
3,74
1,87
7,5
0,12
0,46
1,87
1,87
3,75
3,75
3,75
0,12
0,93
3,75
3,75
7,5
7,5
7,5
Escherichia coli
Concluzii
Staphylococcus aureus este tulpina bacterian cea mai sensibil la aciunea P, BP,
RC. P i RN au prezentat i un efect inhibitor fa de Listeria monocytogenes. P prezint
cea mai bun activitate
mpotriva tulpinilor bacteriene Pseudomonas aeruginosa i
Escherichia coli (189).
4. Experiment clinic
Sistemul imunitar poate ntmpina dificulti n procesul de aprare, mai ales n
zonele urbane, adic acolo unde colectivitile de aduli sau copii sunt populate de
microorganisme (bacterii,virusuri) i unde stresul emoional sau/i fizic este mai intens
dect cel din zonele rurale (35).
4.1. Studiu privind eficacitatea gemoterapicelor menionate n

afeciunile respiratorii
4.1.1. Justificarea i protocolul studiului
Studiul este orientat spre cteva afeciuni respiratorii la copii, adolesceni i aduli
(viroze repetate - VR, bronite - B, astm bronic - AB, rinite alergice - RA, alergodermii 17
A). Terapia clasic a acestor afeciuni, cuprinde att tratament alopat menionat, dar i
posibilitatea unor terapii noi, de tipul gemoterapiei (Propolis - P, Ribes nigrum DH1 - RN,
Rosa canina DH1- RC, Viburnum lantana DH1 -VL, Carpinus betulus DH1- CB i Betula
pubescens EHRH.-BP).
Scopul acestui studiu const n verificarea eficacitaii administrrii unor
gemoterapice (gemoderivate) pe o perioad de 2-4 sau 2-6 luni, separat sau n paralel cu
medicaia alopat. Alegerea gemoderivatelor s-a bazat pe confirmarea proprietilor
antiinflamatorii, antioxidante i antimicrobiene dovedite prin cercetrile anterioare (188,
189).
Rezultatele acestui studiu ar putea fi folosite n noi protocoale terapeutice de abordare
integrativ a pacientului.
4.1.2. Metodologia cercetrii
Studiul s-a desfurat pe o perioad de 6 luni, ntre 1 mai 2011 i 31 noiembrie 2011,
fiind efectuat de medicul investigator Dr. Orodan Leucian Mihaela n cabinetul Apimedica
Arad.
A. Pregtirea studiului
Const n alegerea gemoterapicelor, a populaiei studiate i a metodei de lucru.
Gemoterapicele utilizate n tratament: Propolis - P, Ribes nigrum DH1 - RN, Rosa
canina DH1- RC, Viburnum lantana DH1 -VL, Carpinus betulus DH1- CB, Betula pubescens
EHRH.-BP.
Alegerea subiecilor i metoda de eantionare
Subiecii au provenit dintre pacienii care s-au adresat cabinetului Apimedica - Dr.
Orodan Leucian Mihaela din Arad, unde li s-au prescris combinaii de gemoderivate
(gemoterapice). Aceti pacieni cu vrste cuprinse ntre 3 luni i 68 de ani au fost
introdui n studiu pe msura prezentrii la cabinet, unii dintre ei folosind anterior diverse
terapii alopate, care nu au fost eficiente n privina suferinelor acuzate.
De aceea, eantionarea lor s-a practicat n mod secvenial. Pentru desfurarea
studiului, s-a urmrit ca fiecare eantion s conin n medie 30 de pacieni. Acest aspect
nu a putut fi ndeplinit, deoarece pe grupa de vrst sub 20 de ani, adresabilitatea a fost n
perioada respectiv, foarte mare. De aceea subiecii, n numr total de 131, au fost
repartizai pe grupe de vrst:
Grup vrst sub 20 de ani : 61 pacieni, grup vrst 20 29 de ani : 19
pacieni,grup vrst 30 59 de ani : 28 pacieni, grup vrst peste 60 de ani : 23 pacieni
18
S-au mai efectuat nc 5 loturi de pacieni care au cuprins : rinita alergic : 61

pacieni,viroze repetate : 31 pacieni, bronite repetate : 29 pacieni, alergodermie : 3
pacieni, astm bronic : 7 pacieni.
Datorit mijloacelor financiare limitate, ca martor am folosit 2 loturi cu un numr mai
mic de subieci (lot M1 = 17, lot M2 = 16) pe subieci considerai a fi sntoi, crora leam determinat anumii parametri menionai de literatura de specialitate ca fiind
influenai de administrarea anumitor fitopreparate :
M1-cortizol seric la cei tratai cu RN
M2- IgE i eozinofilia la cei tratai cu RC i BP
Un alt aspect inut sub observaie a fost atenuarea sau dispariia tusei dup
administrarea gemoderivatelor M3.
B. Metoda de studiu
Examinarea clinic
Prima etap a constat n examinarea pe aparate a subiecilor, informarea asupra
tratamentului (chestionar informat), analizele biochimice utile (VSH, fibrinogen, protein C
reactiv, hemoleucogram cu formul leucocitar).
Aplicarea tratamentelor specifice gemoderivate, urmate de monitorizarea efectelor
Tratamentul a constat n administrarea unor gemoterapice subiecilor pe de-o parte,
pentru a observa modificarea unor constante biochimice, respectiv modificarea/dispariia
simptomelor clinice (tuse, rinoree). Timpul de administrare a fost ntre 6 sptmni 2 luni,
n funcie de simptomele prezentate.
Prelucrarea rezultatelor
Culegerea i gruparea datelor s-a fcut pe categorii de variabile. n urma prelucrrii
preliminare, s-au obinut indicatori primari sub forma valorilor biochimice obinute
(cortizol seric, IgE, eozinofilie). Pe baza acestora s-au evideniat unele aspecte de ansamblu
legate de aciunea preparatelor supuse cercetrii i reproductibilitatea rezultatelor.
C. Materiale utilizate n studiu
S-au utilizat extracte gemoterapice, productor PlantExtract Cluj-Napoca : RN, RC,
CB, P ,VL, BP, n doz unic de 2 mL la aduli, respectiv o pictur/kg corp la sugar i
copii pn la 7 ani.
D. Obinerea consimmntului informat
Subiecilor li s-a cerut s completeze un chestionar cu ntrebri referitoare la nume,
prenume, sex, adres, fumat, antecedente personale, antecedente patologice, diagnostic
cunoscut, boli asociate (Anexa I).
19

ntruct s-au utilizat mai multe gemoterapice n protocolul de tratament, era necesar s
obiectivm aciunea gemoterapicului pe constante biochimice, motiv pentru care s-a trecut la
un studiu pe 2 loturi de 17/16 subieci crora li s-au administrat extracte de Ribes nigrum L.,
respectiv combinaia Rosa canina L. i Betula pubescens Ehrh., pe o perioad de 6
sptmni.
Scopul acestui studiu care s-a efectuat cu mijloace financiare proprii, a fost de a
demonstra modificarea unor constante biochimice de ctre diluia decimal Hahnemanian.
Numrul subiecilor a fost mic, astfel nct nu s-au putut obine date statistice clare.
S-au ales cortizolul seric, IgE, eozinofilele acestea fiind markeri specifici ai inflamaiei i
alergiei. S-au ales aceste constante deoarece pacienii nu prezentau modificri ale
constantelor menionate anterior, ei fiind considerai de la nceput aparent sntoi.
Pornind de la datele obinute anterior prin studiile farmacologice efectuate, am parcurs
urmtorii pai :
4.1.4. Studiu clinic cu extract de Ribes nigrum L. - DH1 (Plantextract ClujNapoca)
Material i metode
Lotul M1 17 subieci care nu prezentau afeciuni cunoscute sau asociate i nu
utilizau alte tratamente complementare sau alopate. Examenul clinic i probele de laborator
nu au evideniat modificri. Sngele s-a recoltat la aceiai or (7-7.30). Pacienii nu
foloseau alte tratamente, pentru a observa diferenele care apar prin utilizarea
gemoterapicului.
Conform indicaiilor menionate n literatur, (sindroame alergice, sindroame
inflamatorii-local/general, aparat respirator), (143, 175, 179) am realizat un studiu clinic pe
lotul M1 administrndu-le RN macerat glicerinic n doz de 2mL la aduli, respectiv
1pic/kgcorp n cazul copiilor pn n 10 ani timp de 6 sptmni.
Rezultate i discuii
Avnd n vedere c valorile au sczut la 9 dintre pacieni i au crescut la 6, nu se
poate trage o concluzie unitara, cum c tratamentul cu gemoterapic de coacz negru ar scdea
valorile cortizolemiei.
Se observ ns c ele tind s se situeze n nite limite cu variaii mai mici dup
tratament (anterior de tratament ntre 5,8 si 16, dup tratament ntre 6 i 14,5).
Lund n considerare limitele normale (conf. Synevo 6,2-19,43 mg/dLintre orele 7-10
dimineaa) se poate trage concluzia c mai degrab normalizeaz valorile cortizolemiei
20
tinznd s o creasc la cei cu valori mici i s o scad la cei cu valori mari, acesta fiind
punctul esenial al tratamentului.
Tabel VI. Lot M1 - Valorile cortizolului seric sub tratament cu Ribes nigrum L.
Nume, prenume,
vrsta
B.L. 58
C.R. 44
L.C. 42
C.M. 42
B.G. 11
B.S. 5
D.I. 12
C.O. 13
C.T. 12
Z.T. 16
Z.C. 5
G.O. - 58
T.O. 3
M.L. 21
L.C. 78
P.S. 49
B.B -18
Valori Cortizol seric

Valori nainte de
Valori dup
tratament
tratament
13,50
11,60
14,90
10,20
11,10
8,50
13,50
13,50
11,70
12,60
14,50
14,50
12,00
9,50
13,50
11,60
9,00
7,30
5,80
6,00
9,30
7,00
11,40
10,40
13,30
13,70
16,00
13,90
8,30
11,30
11,20
12,70
6,90
9,70
Diferene cortizol
seric
1,90
4,70
2,60
0,00
-0,90
0,00
2,50
1,90
1,70
-0,20
2,30
1,00
-0,40
2,10
-3,00
-1,50
-2,80
Ipoteza 1. RN scade valorile cortizolului

Media valorilor cortizolului seric pre-tratament este 11,52, iar abaterea standard de
2,87. Valorile limit nregistrate sunt situate ntre 5,80 i 16,00. Media valorilor cortizolului
seric post-tratament este de 10,82 cu o abatere standard de 2,57, valorile extreme fiind 6,00 i
14,50.
Analiza distribuiilor, prin metoda Kolmnogorov-Smirnov pentru un eantion indic
urmtoarele:
-
pre-tratament: Z = 0,607 la p = 0,855
post-tratament: Z = 0,446 la p=0,989.

Deoarece p>0,05 n ambele cazuri, putem conchide c distribuia nu este semnificativ
diferit de o distribuie normal, de tip gaussian.
21
Diferente Cortizol seric

6,00
4,70
5,00
4,00
3,00
2,00
2,60
2,50
1,90
2,30
1,90
2,10
1,70
1,00
1,00
9
0,00
0,00
0,00
-0,20
-1,00
-0,40
-0,90
-1,50
-2,00
-3,00
-3,00
-4,00
-2,80
10 11 12 13 14 15 16 17
Diferente Cortizol seric 1,9 4,7 2,6 0,0 -0,9 0,0 2,5 1,9 1,7 -0,2 2,3 1,0 -0,4 2,1 -3,0 -1,5 -2,8
Fig. 2. Lot M1 - Diferenele cortizolului seric
Distribuiile fiind normale vom utiliza testul t pentru msurtori repetate.

Rezultatele obinute sunt: t(16)=1,403 la p=0,09 (test unilateral). Deoarece p>0,05,
pragul de eroare minim admis, rezult c diferenele n ceea ce privete cortizolul seric pre i
post-tratament nu sunt semnificative statistic.
Nivelele cortizolului seric post-tratament nu sunt semnificativ mai sczute comparativ
cu cele pre-tratament. Exist un risc de eroare prea ridicat pentru a susine c efectele obinute
sunt semnificative i c ele s-ar datora tratamentului aplicat.
Ipoteza se respinge.
A interpreta scderea cortizolului, dac este la un subiect sntos cu valori crescute
sau la limita superioar anterior, ca fiind un rspuns tip feedback negativ pe bucla secreiei
endogene de cortizol, adic scade secreia endogen datorit suplimentrii cu "efect cortizollike" prin administrarea de coacz negru, posibil ca toleran mai bun la stres, sau efect de
feedback pozitiv, la subiecii cu valori serice sczute bazal. n aceast situaie ar fi fost
interesant s se determine valorile cortizolemiei la 2 sptmani pentru a surprinde momentul
creterii sau scderii
valorilor cortizolemiei. Din lipsa suportului financiar acest experiment nu a fost efectuat
considernd c 6 sptmani ar fi un timp optim pentru a trage nite concluzii.
22
Concluzii
Ribes nigrum - macerat glicerinic influeneaz secreia de cortizol dar nu putem
trage o concluzie unitar privind creterea sau scderea acestor valori i prin ce mecanism
are loc aceast variaie.
4.1.5. Studiu clinic cu extract din mldie de mce - (Rosa canina DH1) i
muguri de mesteacn pufos (Betula pubescens DH1)
Lot M2 - 16 subieci crora li s-a administrat RC i BP timp de 6 sptmni. S-au
determinat valorile Ig E i valorile eozinofiliei la nceput i la 6 sptmni dup
administrarea preparatelor.
Tabel VII. Lot M2 - Valorile IgE sub tratament cu RC i BP
Nume,prenume,
vrsta
M.A. - 3
M.AL. - 4
M.B - 14
C.B. - 15
C.A. - 17
D.V. - 53
D.I. - 12
F.M. - 36
K.E. - 5
G.L. - 8
M.P. - 4
M.V. - 35
N.B. -14
B.L. - 45
G.E. -14
N.F. - 25
Valori IgE
Valori nainte
Valori dup
de tratament
tratament
35,00
36,90
25,00
25,00
25,00
25,50
63,50
59,80
25,00
29,00
25,00
86,80
34,20
39,40
25,00
31,20
12,30
25,00
55,00
90,60
139,00
442,40
68,30
89,10
747,70
875,10
54,20
61,60
139,00
156,20
25,00
29,00
Diferene IgE
-1,90
0,00
-0,50
3,70
-4,00
-61,80
-5,20
-6,20
-12,70
-35,60
-303,40
-20,80
-127,40
-7,40
-17,20
-4,00
Valorile IgE cresc la 14 pacieni, scad la 1 pacient, n timp ce n cazul unui pacient
valorile IgE nu se modific (fig.2, tabel VII).
Dintre cei 16 pacienti tratai, 14 au avut valori mai mari dup tratament, 1 a fost
staionar i 1 a prezentat valori mai mici - prin urmare este oarecum clar c tratamentul a
crescut per ansamblu valorile IgE la aceti pacieni.
RC i BP sunt nite stimulante imune uoare i oarecum nespecifice - deci e normal
intr-o oarecare masur s creasc valorile unor anticorpi, fie ei i de tip IgE, discuie care sar putea face i n cazul unor pacieni cu parazitoze, la care reactivitatea IgE este semn de
reactivitate fa de parazit (29, 87).
23
Diferente IgE
50.00
0.00-0.503.70
0.00
-1.90
-4.00
-5.20-6.20
-12.70
-50.00
-20.80
-4.00
-7.40
-17.20
-35.60
-61.80
-100.00
-127.40
-150.00
-200.00
-250.00
-300.00
-303.40
-350.00
10 11 12 13 14 15 16 17
Diferente IgE -1.9 0.00-0.5 3.70 -4.0 -61. -5.2 -6.2 -12. -35. -30 -20. -12 -7.4 -17. -4.0
Fig. 3. Diferene IgE n urma tratamentului cu RC i BP
Determinrile de IgE s-au efectuat n perioada august-septembrie, aceste fapte putnd

interfera cu interpretarea rezultatelor - un pacient alergic n sezon avnd valori n cretere ale
IgE dar acetia nu acuzau fenomene de tip alergic cunoscute.
Deasemenea, un pacient alergic la polen de Betulaceae - din care face parte i
mesteacnul ar putea avea valori n cretere ale IgE dup expunerea la acest preparat.
Ipoteza 2. - Nivelul Ig.E scade semnificativ n urma tratamentului gemoterapic aplicat.
Indicatorii statistici descriptivi
-
pre-tratament: media = 93,01; abaterea standard = 178,71; mediana = 34,60; valoarea

minim = 12,30; valoarea maxim = 747,70. Se nregistreaz o eroare standard de
msurare ridicat (SE = 44,67), datorat a dou valori extreme n seria de date.
post-tratament: media = 131,41; abaterea standard = 223,33; mediana = 49,60;

valoarea minim = 25,00; valoarea maxim = 875,10. Se nregistreaz o eroare
standard de msur ridicat (SE = 55,83), datorat a dou valori extreme n seria de
date.
Analiza normalitii distribuiilor (metoda Kolmogorov - Smirnov pentru un eantion)
indic:
pre-tratament: Z = 1,47 la p = 0,027, rezultnd o diferen statistic semnificativ fa

de distribuia normal.
24
post-tratament: Z = 1,54 la p = 0,017, rezultnd o diferen statistic semnificativ fa

de distribuia normal.
Datorit faptului c distribuiile nu pot fi considerate normale, vom
utiliza testul
neparametric Wilcoxon. Rezultatele obinute sunt: Z = -3,408 la p = 0,001. Mrimea efectului

r = 0,602 indic un efect ridicat, adic o diferen important.
Diferenele la nivelul IgE sunt semnificative statistic, dar n sensul opus celui anticipat.
Valorile IgE cresc semnificativ post-tratament.
n ceea ce privete eozinofilia sub tratament cu gemoterapic de mce i mesteacn
pufos:
Dintre cei 16 pacienti 10 au avut creteri dup tratament i 6 au avut scderi, deci pare a
fi o tendin la a crete eozinofilele, iar valorile cu care cresc sunt predominante.
Exist totui un pacient cu valori mari ale eozinofiliei (10,70) nainte de tratament, la care
valorile scad uor dup (9,4), dar i unul la care valorile erau mici i normale nainte de
tratament (3,80) i cresc foarte mult dup (10, 60).
Aceste fapte impun din nou discuia cu eventuale intercurene sau alergii - pentru c
datele sunt neunitare (de exemplu: eozinofilele tind s scad uor dup faza iniial a unei
parazitoze sau la sfritul unui sezon de alergii i cresc n timpul sezonului - deci nu se pot
trage concluzii certe numai pe baza unor date de laborator - depinde i de statusul imun i de
sntate sau boal al acelui pacient).
Ipoteza 3.- Nivelul eozinofilelor scade semnificativ n urma admninistrrii
tratamentului alternativ.
Media valorilor eozinofilelor pre-tratament se ridic la 4,07, cu o abatere standard de
2,70. Mediana ia valoarea 3,75, iar eroarea standard de msurare este egal cu 0,674. Valorile
extreme sunt: minim = 1,20; maxim = 10,70.
Media valorilor eozinofilelor post-tratament este de 4,75, cu o abatere standard de 3,01
i mediana egal cu 4. Eroarea standard de msurare ia valoarea 0,752. Valorile extreme sunt:
minim = 1,30; maxim = 10,60.
Media n cazul seriei de date post-tratament este superioar mediei valorilor
eozinofilelor pre-tratament.
Analiza normalitii distribuiilor (test Kolmogorov-Smirnov pentru un eantion) indic
urmtoarele:
-
pre-tratament: Z = 1,044 la p = 0,226 (p>0,05), aadar putem considera distribuia ca

fiind normal, de tip gaussian.
25
post-tratament: Z = 0,618 la p = 0,84 (p>0,05), aadar putem considera distribuia ca

fiind Testul ,,t`` pentru msurtori repetate indic urmtoarele: t(15) = -1,407 la p = 0,09
(test unilateral). Diferenele observate nu sunt semnificative statistic la un prag de eroare
inferior lui 0,05.
Diferenele nregistrate nu sunt nesemnificative statistic. Mai mult, valorile eozinofilelor tind
s creasc post-tratament, nu s scad. Exist un risc de eroare mult prea ridicat de a susine
c efectul observat nu este unul aleator i c ar putea fi explicat de tratamentul aplicat.
Tabel VIII.Lot M2 - Eozinofilia n urma tratamentului cu RC i BP
Iniiale,vrst
M.A.- 3
M.Al 4
M.B.-14
C.B.-15
C.A.- 17
D.V.-53
D.I.-12
F.M.-36
K.E 5
C.L.- 8
M.P. 4
M.V. -35
N.B.-14
B.L. 45
G.E. -14
N.F. 25
Valori Eozinofile
Valori nainte de
Valori dup
tratament
tratament
1,40
1,30
4,00
3,60
3,80
2,90
3,70
4,40
2,60
4,90
3,80
10,60
2,42
3,30
10,70
9,40
9,40
9,80
5,50
5,00
2,90
3,40
1,20
1,30
2,20
1,80
6,00
6,10
3,86
6,40
1,70
1,80
Diferene eozinofile
0,10
0,40
0,90
-0,70
-2,30
-6,80
-0,88
1,30
-0,40
0,50
-0,50
-0,10
0,40
-0,10
-2,54
-0,10
Diferen e Eozinofile
2,00
1,30
0,90
1,00
0,10
0,50
0,40
0,40
0,00
-1,00
-0,10
-0,50
-0,40
-0,70
-0,10
-0,10
-0,88
-2,00
-2,30
-3,00
-2,54
-4,00
-5,00
-6,00
-7,00
-8,00
-6,80
1
10
11
12
13
14
15
16
Diferente Eozinofile 0,10 0,40 0,90 -0,7 -2,3 -6,8 -0,8 1,30 -0,4 0,50 -0,5 -0,1 0,40 -0,1 -2,5 -0,1
26
17
Fig. 4. Diferenele eozinofiliei n urma tratamentului cu RC i BP
4.2. Evaluri comparative ale tratamentelor efectuate pe cele dou loturi martor
Repartizarea subiecilor pe cele dou loturi a fost un proces secvenial. La
repartizarea ntr-un lot sau altul, s-au urmrit strict 3 markeri specifici alergiciei (cortizol
seric, IgE, eozinofilie). Resursele financiare fiind proprii i limitate, nu am reuit s
realizm loturi mai mari de pacieni care s permit analize statistice mai detailiate. Totui,
acestea pot reprezenta un punct de plecare pentru o evaluare cantitativ mai clar a valorilor
markerilor.
Numrul subiecilor fiind mic, nu s-au putut obine date statistice mai clare.
Asocierea RC i BP nu a permis o interpretare corect a datelor, datorit aciunilor
diferite dovedite a celor 2 gemoterapice (RC- antialergic, BP- antiinflamator).
Comparnd rezultatele obinute pe loturile de subieci supui tratamentului, pentru
evaluarea cortizolului, IgE, eozinofiliei, nu se pot trage concluzii certe cu privire la aciunea
antiinflamatorie sau antialergic, menionate. O explicaie ar fi numrul mic de pacieni
luai n studiu, propunerea fiind pentru o cercetare mai ampl pe loturi mai mari de subieci
crora s li se administreze strict cte un remediu pentru a elimina eventualele interferene
datorate asocierii lor ( RC- antialergic, BP- antiinflamator, dar nu antialergic).
Dei a aprut n unele situaii o cretere a IgE, subiecii nu au prezentat simptome
specifice de tip alergic i nici nu au avut n antecedentele personale episoade semnificative
din punct de vedere clinic.
Dei exist numeroase studii de specialitate fitofarmacologice care dovedesc
aciunile antiinflamator, antioxidant, antialergic, al preparatelor, nu am gsit nici un studiu
gemoterapic via experiment clinic, abordarea cercetrii personale, fiind oarecum ngreunat
de lipsa de date.
Concluzii:
ntruct dintre toate gemoterapicele studiate RC are cel mai mare potenial
antioxidant, considerm c n bun parte aciunea antialergic se datoreaz reducerii
radicalilor liberi de oxigen rezultai din oxidarea lipidelor membranare.
Diluia decimal Hahnemanian DH1 poate influena constantele biochimice.
Subiecii luai n studiu nu au prezentat nici o reacie secundar/advers prin
administrarea acestei terapii, aspect important innd cont de reaciile secundare ale
medicaiei alopate care prezint diverse reacii adverse conforme cu prospectele lor.
27
4.3. Analiza unui simptom clinic tusea la administrarea unor gemoterapice

(gemoderivate) - RN, RC.
Deoarece analiza constantelor biochimice a fost limitat ca valoare, am
ales un
marker clinic tusea (30, 66, 80, 100).

S-a ales un eantion lot M3 - 54 de subieci din cei 131 luai n studiu cu diverse
afeciuni respiratorii (viroze repetate- 20, bronite - 22, astm bronic - 5), pentru validarea
unei ipoteze clinice.
Ipoteza 4. Tusea ca simptom se amelioreaz semnificativ post-gemoterapie.
Rezultatele calculului statistic 2 sunt: 2 = 3,051 la p = 0,041 (test unilateral); p <
0,05. Observm c tusea, ca simptom, este mai puin prezent n urma gemoterapiei, dup 2
luni. Diferena este una semnificativ statistic.
Concluzii
n urma gemoterapiei, tusea ca simptom, este semnificativ ameliorat dup 2 luni.
Efectul crete atunci cnd tratamentul este prelungit nc 2 luni.
Ipoteza se valideaz.
ntruct tusea este declanat de leucotriene, compui rezultai din metabolismul
lipidelor sub influena lipooxigenazei, iar compuii reductori de tip flavonoide o
blocheaz, presupunem c RC, RN i P acioneaz prin acest mecanism (27).
Tabel IX. Lot M3 - Tusea ca simptom la 2 luni dup gemoterapie (RN, RC)
la 2 luni
pre-tratament
post-tratament
Total
simptom
fara tuse
19
23,5
-4,5
28
23,5
4,5
47
47,0
Total
tuse
35
30,5
4,5
26
30,5
-4,5
61
61,0
54
54,0
54
54,0
108
108,0
4.4. Rezultate analitice

A fost supus studiului un numr de 131 de pacieni cu diferite patologii respiratorii
(viroze repetate - VR, bronite - B, astm bronic - AB, rinite alergice - RA, alergodermii A). Majoritatea pacienilor (aprox 80%) s-au prezentat pentru o consultaie dup scheme
diferite de tratament alopat. n general, au predominat forme diferite de viroze respiratoriiacute sau cronice care au folosit antibioterapie pe perioade lungi de timp. O caracteristic
28
esenial a tuturor cazurilor a fost neconcordana ntre simptomatologia clinic a pacientului

i diagnosticul prezentat,situaie des ntlnit n diagnosticul fals de astm bronic.
Toi pacienii au fost ndrumai s-i efectueze analizele pentru a elimina
existena unei infecii sau a unei alte patologii colaterale. n acest sens ei au efectuat:VSH,
hemoleucograma cu formula leucocitar, fibrinogenul, proteina C reactiv, examenul de
urin, ASLO, exudat nazal, exudatul faringian, cortizolul seric, IgE, probele ventilatorii,
radiografia pulmonar, testele alergice.
Loturile nu sunt n general echilibrate din punct de vedere numeric, deoarece
repartizarea a fost efectuat n mod secvenial conform cu prezentarea pacienilor la
cabinet. Acest aspect a limitat oarecum studiul, neexistnd o colaborare cu alte centre care s
permit furnizarea unor informaii multiple pentru o prelucrare de date ulterioar.
4.4.1. Repartizarea pe grup de vrst a eantioanelor de subieci
n tabelul X sunt reprezentate vrstele din loturile de tratament. Se observ clar o
predominan a lotului tnr sub 20 de ani, ponderea fiind dat de predominana acestor
afeciuni la vrsta copilriei i adolescenei. De remarcat o distribuie aproape egal a
loturilor de vrst de pn la 60 de ani, urmat de grupa de peste 60 (34, 224, 225
Tabel X. Repartiia pe grupe de vrst a eantioanelor de subieci
Grup vrst sub
20 ani
61
Grup vrst
20-29 ani
19
Grup vrst
30-59 ani
28
Grup vrst peste

60 ani
23
4.4.2. Repartiia pe sexe a eantionului de subieci

Referitor la sexul subiecilor 55 au fost brbai i 76 femei, n total 131 pacieni.
Analiznd eantioanele de tratament, se observ o uoar dominan a sexului
feminin n ceea ce privete adresabilitatea. Procentul nu este ns semnificativ, dar exist
studii care consemneaz o sensibilitate mai crescut a femeii la apariia unor probleme de tip
respirator, mai ales a rinitei alergice. Femeia are o structur psiho-emoional special,
posibil legat de ciclurile mestruale, sarcin, menopauz, dar i de fumat care pot determina
anumite reacii specifice, inclusiv cele legate de o hiperreactivitate (34, 224, 162).
4.4.3. Repartiia pe boli i grupe de de vrst a eantionului de subieci
Tabel XI. Repartiia pe boli i grupe de vrst
Nr.crt.
1
2
3
Boal
Rinit alergic
Viroze repetate
Bronite repetate
Sub 20 ani 20 - 29 ani 30 - 59 ani

26
11
19
21
5
4
18
4
6
29
Peste 60 ani
5
1
1
4
5
Alergodermie
Astm bronic
1
0
1
0
1
5
0
2
La nivelul ntregului numr de 131 pacieni, repartiia acestora pe grupe de vrst

este prezentat n tabelul XI. Se remarc numrul mare de subieci la categoria sub 20 de ani,
o categorie de pacieni aflat la vrst la care sistemul imunitar este n curs de maturizare,
sau se resimt unele probleme ale copilriei mici. Este cunoscut faptul c la vrsta copilriei,
exist o frecven mai mare a problemelor de tip respirator date de contactul cu colectivitatea
nou n care copilul i desfoar activitatea.
Pe segmentul de pn la 29 de ani, se observ o inciden mai mic a afeciunilor
respiratorii, posibil datorate strict unei hipersensibiliti, sau unor motive izolate: umezeal,
frig, aer condiionat.
La eantionul 30-59 de ani, se observ creterea incidenei afeciunilor
respiratorii, mai ales a rinitei alergice posibil legat de afeciunile cronice care ncep s se
instaleze odat cu vrsta.
Curios este c la grupa de peste 60 de ani, numrul acestora a devenit mai mic.
Explicaia provine posibil de la faptul c afeciunile respiratorii cronice (BPOC, astm
bronic) sunt mai frecvente, iar pacienii au optat pentru medicaia alopat (34, 35, 224).
Pornind de la aceste date minime, am ncercat o rencadrare diagnostic ct mai
aproape de datele obinute clinic prin anamnez i examinarea clinic a pacientului. n urma
acestor delimitri, am obinut urmtoarele eantioane de pacieni cu viroze repetate,
bronite repetate, rinite alergice, alergodermii, astm bronic (tabelele XII XVI).
Tabel XII. Viroze repetate
Viroze repetate
Tratament alopat
Tratament naturist
Durata tratament
31
Ketof,Aerius,Singulair,
RN, RC, BP, CB, P,
2 4 luni
antibiotice,
AP, HR, VL, PS,

Argint coloidal
Pacienii care s-au prezentat la cabinet acuzau repetarea unor episoade de tip viral la
intervale variabile de timp (1- 4 luni), care necesitau administrarea de antibiotice.
Administrarea gemoterapicelor s-a efectuat pe o durata de minim 2 luni.
ntr-o prim etap simptomul clinic - tusea, a cedat n proporie foarte mare aspect
evideniat anterior. Celelalte gemoterapice s-au anexat n tratament datorit unor situaii
particulare care au vizat statusul pacientului i nu neaprat cercetarea n sine.
30
Tabel XIII Bronite repetate status postbronite

Bronite
Tratament alopat
Tratament naturist
Durata tratament
Ketof,Aerius,Singulair,antibiotice
RN, RC, BP, P,
2 - 4 luni
repetate
29
HR, VL, AP,

Giardinophyt
Examinarea clinic a acestor pacieni alturi de analizele de laborator, nu au

evideniat modificri.
Specificitatea acestui grup const n administrarea pe o perioad lung de timp
(6-12 luni) a medicaiei antihistaminice, fr a avea date certe clinice i paraclinice care s
explice administrarea acestora. Singura explicaie posibil este legat de interpretarea
apariiei bronitelor ca un sindrom hiperreactiv (221). Persistena unei tuse cu sau fr
expectoraie n ciuda terapiei, dovedete inutilitatea sau ncadrarea greit a
simpomatologiei clinice. Acetia prezentau ca simptomatologie clinic: tuse persistent
iritativ sau expectorant, fr febr, repetarea acestor episoade la intervale scurte de timp
chiar n cadrul aceleiai luni.
Cu aceast ocazie in s subliniez necesitatea ncadrrii clinice i paraclinice corect
a pacienilor, mai ales a copiilor care pot repeta diferite procese infecioase pe fondul unor
parazitoze neinvestigate sau/i a unor carene vitaminice i minerale legate de procesul de
cretere. Administrarea HR, VL, AP, Giardinophyt, a fost necesar tocmai pentru a rezolva
infeciile parazitare prezente, care pot mri pragul de reactivitate.
Prezentarea pacienilor cu rinite alergice a fost legat de administrarea ndelungat (
6 96 luni !) Parazitozele intestinale au fost prezente la 15 subieci din categoria de vrst
sub 20 de ani, la 3 la categoria 20 29 ani, respectiv 3 la categoria de vrst 30 59 ani. a
preparatelor antihistaminice, care la un moment dat nu mai aveau efectele pozitive ateptate
Tabel XIV Rinite alergice
Rinite alergice
Tratament alopat
Tratament naturist
Durata tratament
61
Ketof,Aerius,Singulair
RN, RC, BP, AP, HR,
2 - 4 luni
antibiotice, Bixtonim,
VL, BP, Poligema

31
Prednison, Berotec,
Sinus, Betarax,
Claritine, Xyzal, Telfast,
Respiral forte, Argint
Ventolin, Olynth
coloidal, Meridian 3
focare, Giardinophyt
Tratamentul antiparazitar a modificat tabloul rinitei pn la dispariie. Testele

alergologice au dovedit prezena diverselor alergii ( cel mai frecvent praf, mucegai, polen,
aditivi alimentari, acetia din urm fiind evideniai mai ales de pacienii care consumau
alimente semipreparate fast food, cartofi congelai prjii). Aparintorii copiilor relatau
dispariia sau scderea episoadelor alergice odat cu tratamentul parazitozelor.
La aduli schimbarea modelului alimentar i de via
(factor stress) a permis reducerea sau renunarea complet la tratamentul alopat. Cu ct
terapia alternativ a fost mai corect i mai ndelungat cu att simptomele s-au remis mai
mult. Cura salin s-a dovedit a fi de un real ajutor n terapia pacientului(34, 38, 90, 109, 141).
Tabel XVI Astm bronic
Astm bronic
Tratament alopat
Tratament naturist
Durata tratament
7 pacieni
Prednison, Borenar,
RN, RC, BP, Brahmi,
2 - 6 luni
Berotec, Ventolin
Acupunctur,
Ashwagandha, Betarax
, Propolis,
Acest eantion de pacieni a acuzat din punct de vedere clinic, urmtoarele

simptome: tuse cu sau fr expectoraie, dispnee. Examinarea clinic pe aparate a evideniat
la nivel pulmonar, un murmur vezicular diminuat cu prezena unor raluri bronice, specifice
formelor cronice de astm. Categoria de vrst a fost 30 59 ani, respectiv peste 60 de ani.
mbuntirea statusului pacienilor, a aprut la primele 2 luni de administrare, prin
reducerea tusei, aspect relevat n studiul menionat anterior (66, 80, 161).
4.5. Discuii integrative
Scopul studiului a constat n cercetarea i/sau verificarea eficacitii unor
gemoterapice i a metodelor complementare de tratament n scopul validrii lor.
Cel mai mare numr de subieci aparine vrstei de pn la 20 de ani i este urmat
de cel ntre 30 59 de ani, pentru care patologia este specific. Grupa de vrst tnr a optat
pentru aceast terapie datorit informrii i deschiderii acestor persoane fa de o terapie
complementar. De remarcat interesul crescut al prinilor i al populaiei tinere pentru
acest tip de terapie.
32
Nu exist informaii cu privire la interesul mai sczut al celorlalte categorii de vrst.

Ponderea persoanelor de sex feminin, a fost n toate situaiile uor crescut fa de
cea masculin, cunoscut fiind preponderena unor afeciuni la aceast categorie.
Este important de menionat creterea ponderii acestor afeciuni, legat de
dezvoltarea economic, industrial a tuturor rilor, dar i de folosirea excesiv a
antibioterapiei, mai ales n Romnia, care poate modifica pragul de reactivitate al subiecilor
(186).
4.6. Limitele studiului
Acest studiu prezint cteva limite care trebuie menionate:
a. Studiul nu este de tip randomizat, ci secvenial pe msura prezentrii acestora la cabinet.
b. Subiecii au fost repartizai n funcie de simptomatologia acestora, observndu-se la
prezentarea lor o ncadrare incorect din punct de vedere al diagnosticului.
c. Polimedicaia acestor pacieni nu a permis o evaluare corect a tuturor constantelor
biochimice, aceti subieci,deoarece s-au prezentat la un interval de 2-12 luni de la
momentul primului simptom (boal).
d. Numrul mic al subiecilor i resursele financiare personale limitate, nu a permis
urmrirea mai multor aspecte, inclusiv biochimice, ale acestora.
e. Studiile celor 2 loturi de pacieni (17/16), nu au dovedit aciunile farmacologice
evideniate anterior (antiinflamator, antialergic).
f. n prezentul studiu a fost implicat un singur medic, ceea ce a fcut ca posibilele modificri
ale tratamentelor s fie evitate, ns procedeul limiteaz validitatea datelor obinute.
g. Utilizarea RC i BP n acelai studiu nu a fost suficient pentru a dovedi o activitate
farmacologic.
h. Studiile nu au permis o evaluare clar a unui singur gemoterapic deoarece pacienii doreau
soluii rapide pentru rezolvarea problemelor cu care se confruntau, astfel nct a fost dificil
s evalum care ar fi fost evoluia dac se folosea o monoterapie. Din acest motiv s-ar
impune o continuare a studiului clinic pe pacieni cu patologie unic cu administrarea unei
monoterapii.
5. CONCLUZII GENERALE I PERSPECTIVE

Cercetrile privind eficacitatea gemoterapiei n tratamentul afeciunilor respiratorii,
s-au desfurat pe o perioad limitat (2 luni 6 luni) i a cuprins un numr de 131 de
subieci care prezentau diverse probleme de tip respirator. Pacienii au fost repartizai pe
grupe de vrst, sex, afeciuni, pentru a ncerca s demostrm eficiena acestui tip de
tratament la toate categoriile de subieci. Pentru a dovedi legtura dintre compoziia
chimic i aciunile acestor gemoterapice antiinflamator, antioxidant, antibacterian, am
33
parcurs 2 etape cu rezultate surprinztoare : negsind documentaie, dect pe planta matur,

a fost necesar cercetarea compoziiei chimice ale acestor produse prin analize tip HPLC,
LC, MS, DPPH, respectiv activitatea antimicrobian pe germeni (Staphylococcus aureus,
Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa i Escherichia coli).
Rezultatele analizei sterolilor au evideniat c toate gemoterapicele cercetate conin
doar beta-sitosterol, de asemenea semnalm absena
tuturor sterolilor cercetai n
gemoterapicul de carpen (Carpinus betulus) i prezena n mici cantiti doar a betasitosterolului n gemoterapicul de clin (Viburnum lantana L.) (2,033g/mL). Tinctura de
propolis cercetat conine 1,516 g/mL betasitosterol. Cea mai mare cantitate de
betasitosterol se gsete n gemoterapicul obinut din coacz negru (21,598g/mL). n
celelalte gemoterapice cercetate cantitile de betasitosterol sunt destul de apropiate n
mesteacn pufos-17,251 g/mL, n mce - 15,859 g/mL .
Rezultatele analizei HPLC, exprimat n g/mL, arat c n RC, BP, RN predomin
heterozidele quercetolului (147,875 quercitrin, 28,392 hiperozid, 22,542 isoquercitrin n
RC; 16,111 isoquercitrin, 1,714 rutozid i 10,826 quercitrin n BP) i agliconii (quercetol
5,294, kaempferol 1,146, n RN).
Ca acizi fenol-carboxilici, exprimai n g/mL, predomin acidul p-cumaric (1,464 n
RC; 56,132 n BP; 13,742 n RN). Cantitatea de acid cafeic/acid clorogenic, dup separare, a
fost de: 1,48/41,00 n RC; 1,38/13,90 n BP; 18,43/16,09 n RN; 282,7/3,12 n P; 0,17/1,67 n
VL i neidentificabil /5,44 n CB.Metodele de determinare cantitativ prin HPLC/MS sunt
reproductibile i ca atare propunem introducerea lor n metodologia de determinare a
calitii gemoterapicelor respective. Limitele urmeaz a fi precizate n urma mai multor
determinri.
Tinctura de propolis prezint cea mai puternic aciune antioxidant (IC50= 2,79
g/mL). Lund n considerare rezultatele, se poate evidenia efectul antioxidant n
urmtoarea ordine cresctoare: VL <CB <RN <BP <BHT <RC < quercetin<P.
n ceea ce privete activitatea antibacterian Staphylococcus aureus este tulpina
bacterian cea mai sensibil la aciunea P, BP, RC. P i RN au prezentat i un efect
inhibitor fa de Listeria monocytogenes. P prezint cea mai bun activitate mpotriva
tulpinilor bacteriene Pseudomonas aeruginosa i Escherichia coli.
n ceea ce privete cercetarea clinic, s-a demonstrat c diluia decimal
hahnemanian DH1 poate modifica constantele biochimice fr a putea concretiza
evidenierea efectului antialergic i antiinflamator propus.
Experimentul clinic care s-a efectuat a dat posibilitatea pacienilor s-i reduc sau
chiar s renune definitiv la medicaie ndeosebi cea antialergic.
34
Tusea ca simptom clinic, respectiv testele alergice, au rspuns pozitiv la administrarea

gemoterapiei, aspect esenial pentru un punct de plecare n alte studii, mai ales clinice.
Originalitatea tezei
1. Studiile farmacologice s-au adresat n premier pe gemoterapicele PlantExtract
Cluj-Napoca RN, RC, BP, VL, CB, pentru un studiu comparativ chimic (antioxidant,
antibacterian, antiinflamator) i clinic. Introducerea propolisului a fost necesar datorit
utilizrii sale n mod frecvent n diferite afeciuni respiratorii.
2. Utilizarea unei combinaii originale (RN, RC, BP) n toate afeciunile respiratorii
pentru a dovedi aciunile menionate anterior, n scopul utilizrii lor ulterioare, n
experiment clinic.
3. Demonstrarea aciunii pe constante biochimice a diluiei decimale, aspect
important pentru dezvoltarea nanoterapiilor.
4. Efectuarea unor cercetri farmacologice via experiment clinic, pentru a demonstra
modul de aciune al acestora.
Perspectivele pe care le deschide teza
Rezultatele obinute n urma cercetrii farmacologice, deschid noi perspective pentru
continuarea altor cercetri. Este necesar ca acestea s in cont de limitele pe care le-am
artat n prezenta tez, dar i de completarea investigaiilor pentru a obine rezultate
obiective care s fie corelate cu datele fitochimice obinute. Cercetarea limitat doar la
obinerea datelor fitochimice i farmacologice, fr continuarea cercetrii clinice, nu va
mbunti managementul terapiilor bolilor respiratorii.
35
6. BIBLIOGRAFIE SELECTIV
1. Aigner T, Fundel K, Saas J, et al. Large-scale gene expression profiling reveals major
pathogenetic
pathways
of
cartilage
degeneration
in
osteoarthritis. Arthritis
and
Rheumatism. 2006;54(11):35333544.
2.
Akram
Khan
M1, Afzal
M2-
Chemical
composition
of
Nigella
sativa Linn:
Inflammopharmacology. 2016 Apr 11).

3. Altun M.L., Saltan itolu G., Sever Ylmaz B., zbek H. Antinociceptive and antiinflammatory activities of Viburnum opulus. Pharmaceutical Biology, 2009, 47(7):653-8. ).
5. Andriamadio J.H., Rasoanaivo L.H., Benedec D., Vlase L., Gheldiu A-M., Duma M., et al.,
HPLC/MS analysis of polyphenols, antioxidant and antimicrobial activities of Artabotrys
hildebrandtii O. Hffm. Extracts.Nat Prod Res, 2015, 29(23): 2188-2196.
7.Anttonen MJ1, Karjalainen RO., J Agric Food Chem. 2006 Oct 4;54(20):7530-8.Highperformance liquid chromatography analysis of black currant (Ribes Nigrum L.), fruit
phenolics grown either conventionally or organically:J Agric Frood Chem.2006 oct 4;54(20)
Institute of Applied Biotechnology)
9. Bakhvalov S.A., Martem'ianov V.V., Kukushkina T.A., Vyoschina G.I. - The dynamics of
phenolic compounds and soluble sugars in the leaves of the silver birch (Betula pendula
Roth.) after defoliation and their significance in Enthomological Plant Resistance, Biology
Bulletin, 2009, 36(5): 449-454.
10. Bloiu Maria-Luiza, Daniela Clina, Laurian Vlase, Maria Viorica Bubulic, Qualitative
and quantitative determination of polyphenol content of Scilla bifolia, Journal of Medicinal
Plants Research 6(20):3664-3671, 2012
11. Balasoiu, ML ; Calina, D ; Vlase, L ; Bubulica, MV ; Chirigiu, L , Quantitative
Determination of Caffeic Acid, Chlorogenic Acid and Luteolin-7-glucoside from Scilla bifolia
by HPLC-MS, Revista de chimie 65(3): 290-294, 2014
16. Benedec D., L. Vlase, D. Hanganu, I. Oniga, Antioxidant Potential and Polyphenolic
Content of Romanian Ocimum Basilicum, Digest Journal of Nanomaterials and Biostructures,
7(3):1263 - 1270, 2012.
24. Bonarska-Kujawa D., Cyboran S., yka R., Oszmiaski J., Kleszczyska H. Biological
activity of blackcurrant extracts (Ribes nigrum L.) in relation to erythrocyte membranes.
BioMed Research International, 2014, Article ID 783059.
25. Borza Al. i colab.Dictionar etnobotanic,Ed.Academiei R.S. Romania,1968,pag.30.31,147,149
26. Bota C., Deliu C. Effect of plant growth regulators on the production of flavonoids by cell
suspension cultures of Digitalis lanata. Farmacia, 2015, 63(5):716-719.
27.Bruneton P.-Pharmacognosie,Phytochimie.Plants medicinalis,ed.II.TEC-DOC Londra
.Paris,New York,1993,pag.277-278,
30. Bush A. Paediatric problems of cough. Pulm Pharmacol Ther 2002; 15309-15
31. Butnariu M. Detection of the polyphenolic components in Ribes nigrum L. Annals of
Agricultural and Environmental Medicine, 2014, 21(1): 11-14.
34.Cazzoletti L., Marcello Ferrari, Mario Olivieri, Giuseppe Verlato, Leonardo Antonicelli,
Roberto Bono, Lucio Casali, Isa Cerveri, Pierpaolo Marchetti, Pietro Pirina, Andrea Rossi,
Simona Villani, Roberto de MarcoThe gender, age and risk factor distribution differs in selfreported allergic and non-allergic rhinitis: a cross-sectional population-based studyAllergy
Asthma Clin Immunol. 2015; 11: 36.
35. Cesaroni G, Badaloni C, Porta D, Forastiere F, Perucci CA. Comparison between various
indices of exposure to traffic-related air pollution and their impact on respiratory health in
adults. Occup Environ Med.2008;65:683690.
36. Chang C. Yang M., Wen H., Cem J. - Estimation of total flavonoid content in propolis by
two complementary colorimetric methods, J. Food. Drug Anal., 2002, 10:178-182.
38.Chaulet P. After health sector reform, whither lung health. International Journal of
Tuberculosis Lung Disease, 1998, 2 (S): 349359.
39. Chikanza IC, Fernandes L. Novel strategies for the treatment of osteoarthritis. Expert
Opinion on Investigational Drugs. 2000;9(7):14991510.
41.Christensen R, Bartels EM, Altman RD, et al. Does the hip powder ofRosa
canina (rosehip) reduce pain in osteoarthritis patients? a meta-analysis of randomized
controlled trials. Osteoarthritis Cartilage 2008; Apr 11
43. Chrubasik C., Roufogalis B.D., MllerLadner U., Chrubasik S. A systematic review on
the Rosa canina effect and efficacy profiles. Phytotherapy Research, 2008,1,22(6):725-33.
44. Cieckiewicz E , Angenot L , Gras T , Kiss R , Frdrich M, Potential anticancer activity of
young Carpinus betulus leaves.University of Lige, CIRM, Laboratory of Pharmacognosy,
Lige,
Belgium.Phytomedicine
International
Journal
of
Phytotherapy
and
Phytopharmacology [2012, 19(3-4):278-283]

48.
Constantino
L.Albasini
A.,Rastelli
G.,Benvenuti
S.Dipartamento
di
Scienze
Farmaceutiche,Univ.di Modena,Itlay-Activity of polyophenolic crude extracts as scavengers

of superoxide radicals and inhibitors of xanthine oxidase,=Planta med.1992
II
50.Costea T. Istudor V., Gostin I., Olah N. - Researches upon indigenous herbal Products for
therapeutic valorification in 7 metabolic diseases. Note II. Polyphenols analysis of Betulac
Medicine in evolution, 2012, XVII (4):717-723.
51. Costea T. Istudor V., Gostin I., Olah N. - Researches upon indigenous herbal Products for
therapeutic valorification in 7 metabolic diseases. Note II. Polyphenols analysis of Betulac
Medicine in evolution, 2012, XVII (4):717-723.
53. Costea T., L. Vlase, V. Istudor, M.l. Popescu, C.-e Grd, Researches Upon Indigenous
Herbal Products for Therapeutic Valorification in Metabolic Diseases. Note Ii. Polyphenols
Content, Antioxidant Activity And Cytoprotective Effect of Betulae Folium Dry Extract,
Farmacia, 2014, 62(5):961-970Aug.58(4):342-4
56.DaelsRakotoarison D.A., Gressier B.,Trotin F., Brunet C., Luyckx M., Dine T.Bailleul F.,
Cazin,M., Cazin J.C.-Effects of Rosa canina fruit extract on neurtrophil respiratory
burst..Phytotherapy research,2002.16(2):157-61
57. Dallenbach-Tolke K., Nyiredy S., Gross G.A., Sticker 0. - Flavonoid glycosides from
Betula pubescens and Betula pendula, J.Nat. Prod., 1986, 49:1155-1156.
58. Dehelean C. A., Pnzaru S. C., Peev C. I., Soica C. Andal D. S., Characterisation of birch
tree leaves, buds and bark dry extracts with antitumor activity, journal of Optoelectrons and
Advanced Material, 2007, 9(3) : 783 787.
59. Demirci B., Paper H.D., Demirci F., Baser K. C.H., Franz G. Essential oil of Betula
pendula Roth. buds. Evidance Based Complementary and Alternative Medicine, 2004, 1(3) :
301 -303
62. EMEA Betula pendula Roth, Betula pubescens Ehrh., folium, Assesment report for the
development of community monographs and for inclusion of herbal substance (s), preparation
(s) or combinations there of in the list, Doc Ref EMEA/HMPC/260018/2006, London 2008
65. Eom HJ, Kang HR, Kim HK, Jung EB, Park HB, Kang KS, Kim KH.Bioactivity-guided
isolation of antioxidant triterpenoids from Betula platyphylla var. japonica bark.Bioorg Chem.
2016 Apr 1;66:97-101.
66. Everett CF, Kastelik IL et al.Chronic persistent cough n the community: a questionnaire
survey. Cough, 2007: 23, 3-5.
72. Freysdottir J., Sigurpalsson M.B., Omarsdottir S., Olafsdottir E.S., Vikingsson A.,
Hardardottir I.Ethanol extract from birch bark (Betula pubescens) suppresses human dendritic
cell mediated Th1 responses and directs it towards a Th17 regulatory response in vitro.
Immunology letters, 2011, 136(1):90-6.
75.Ganguly A. Das B. Ray A. Sen N., Dasgupta S.B. Mukhopadhayay S., Majumder K.H. Betulinic acid,
a catalytic inhibitor of topoisomerase, inhibits reactive oxygen speciesIII
mediated apoptotic topoisomerase I-ADN cleveable complex formation in prostate cancer

cells, but does not affect the process of cell death, Cancer Res, 2007, 67(24): 11848-11858.
76. Garcia - Vigueira C, Greenaway W, Whatley F. Composition of propolis from two
different Spanish regions. Zeitschrift fr Naturforschung C. 1992;47:634637
80. Gibson GJ. Obesity, respiratory function and breathlessness. Thorax. 2000;55:S41
S44. Pub. Med
87.Grayna Czaja-Bulsa, Micha BulsaThe natural history of IgE mediated wheat allergy in
children with dominant gastrointestinal symptomsAllergy Asthma Clin Immunol. 2014; 10(1)
88. . Grigorescu E. i colab.-Index fitoterapeutic-Ed.Cantes-Iasi-2001,pag 419, 420, 520, 80
90.Guerra S, Sherrill DL, Martinez FD, Barbee RA. Rhinitis as an independent risk factor for
adult-onset asthma. J Allergy Clin Immunol. 2002;109:419425.
100. Hwang SW,Oh U: Hot channels n airways: Pharmacology af the vanilloid receptor. Curr
Opin Pharmacol 2:235-242, 2002.
101. HCS 13/2007 referitoare la aprobarea Ghidului privind procedura care trebuie urmat de
deintorii autorizaiei de punere pe pia n desfurarea activitilor de
farmacovigilen
102. HCS 14/2007 privind aprobarea Ghidului privind cerinele pentru sistemele de
farmacovigilen, monitorizarea conformitii i inspeciile de farmacovigilen
104. Volumul 9A din Rules Governing Medicinal Products in the European Union:
Guidelines on Pharmacovigilance for Medicinal Products for Human Use, September 2008.
105. Directiva 2001/83/EC, cu modificrile i completrile ulterioare
109. International Study of Asthma and Allergies in Childhood (ISAAC) Steering Committee.
Worldwide variation in prevalence of symptoms of asthma, allergic rhinoconjunctivitis, and
optic eczema: ISSAC. Lancet 1998; 351: 1225-32.
116. Jine Y., Lis M., Szczypka M., Obminska-Mrukowicz B. Influence of betulinic acid on
lymphocytes subsets and humoral immune response in mice, Polish Jurnal of Veterinary
Sciences, 2012, 15(2) : 303-313.
119. Khknen M.P., Hopia A.I., Vuorela H.J. et al. Antioxidant activity of plant extracts
containing phenolic compounds. J Agric Food Chem, 1999,47: 39543962.
122. Katirciolu H, Mercan N. Antimicrobial activity and chemical compositions of Turkish
propolis from different regions. African Journal of Biotechnology. 2006;5(11):11511153
125. Kilicgun H., Altiner D. Correlation between antioxidant effect mechanisms and
polyphenol content of Rosa canina. Pharmacognosy Magazine, 2010, 6(23):238.
126. Kilicgun H., Dehen A. In vitro antioxidant effect of Rosa canina in different antioxidant
test systems. Pharmacognosy Research, 2009, 1(6):417.
IV
136. Kratchanova M., Denev P., Ciz M., Lojek A., Mihailov A. Evaluation of antioxidant
activity of medicinal plants containing polyphenol compounds. Comparison of 2 extraction
systems, Acta Biochimica Polonica, 2010, 57 (2) : 229-234
141. Lanata CF, Rudan I, BoschiPinto C, Tomaskovic L, Cherian T, Weber M, et al.
Methodological and quality issues in epidemiological studies of acute lower respiratory
infections in children in developing countries. Int J Epidemiol. 2004;33:136272
143. Lemanske R.F. Jr. , J Allergy Clin Immunol 2002.
146. Liu P, Kallio H, Yang B. Flavonol glycosides and other phenolic compounds in buds and
leaves of different varieties of black currant (Ribes nigrum L.) and changes during growing
season. Food Chem.2014;160:180189. doi: 10.1016/j.foodchem.2014.03.056.
148. Manach C., Scalbert A., Morand C., Rmsy C., Jimnez L. Polyphenols: food sources
and bioavailability. Am J Clin Nutr, 2004, 79: 727-47.
150. Marcucci MC. Propolis: chemical composition, biological properties and therapeutic
activity. Apidologie.1995;26(2):8399..28. Kumazawa S,
Antioxidant
activity
of
propolis
of
various
Hamasaka
T, Nakayama
geographic
T.
origins.Food
Chemistry. 2004;84(3):329339.
161. Mello CG,Irwin RS,Curley FJ: Predictive value of the character, timing and
complications of chronic cough n diagnosing its cause. Arch Intern Med 156.997-1003,1996.
162. MeiLan K. Han, Dirkje Postma, David M. Mannino, Nicholas D. Giardino, Sonia
Buist, Jeffrey L. Curtis, and Fernando J. Martinez "Gender and Chronic Obstructive
Pulmonary Disease", American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, Vol. 176,
No. 12 (2007), pp. 1179-1184.
175. Msges R, Klimek L. Todays allergic rhinitis patients are different: new factors that
may play a role.Allergy. 2007;62:969975.
179. Murray and Nadels, Textbook of respiratory medicine, fourth edition,Chung KF,
Widdicombe JG, Cough, 29, 2005, 831-47.
180. Neacu C.- Compendiu de apiterapie- ed. Tehnic, Bucureti 2002, pg.102-134
184. Nowak R., Gawlik-Dziki U. Polyphenols of Rosa L. leaves extracts and their radical
scavenging activity. Zeitschrift fr Naturforschung C, 2007, 62(1-2):32-8.
188. Orodan M., Laurian V.,
Istudor V.- Analysis of sterolic compounds from vegetal
extracts of Ribes nigrum, Rosa canina, Betula pubescens, Carpinus betulus, Viburnum lantana
and Propolis tincture Fiziologia-2015.252(86)
186.Olteanu I., Totul despre hiperreactivitatea bronic
189. Orodan M., Vodnar D.C., Toiu A.M., Pop C.E., Vlase L., Istudor V. Arsene A.L.Phytochemical analysis, antimicrobial and antioxidant effect of some gemmotherapic
remedies used in respiratory diseases- Revista Farmacia, 2016 Vol.64, 2
192. Papay V., Toth L., Soltesz M., Nagy E. and Litkei G. (1985), Flavonoids and
Bioflavonoids Symposium Proc. 7thHungarian Bioflavonoids Symposium, Szeged,Hungary.
Studies in organic chemistry 23 (L. Farkas et al., ed. ), 233-240, Elsevier, Amsterdam 1986.
193. Pandey K.B., Rizvi S.I. Plant polyphenols as dietary antioxidants in human health and
disease. Oxidative medicine and cellular longevity, 2009, 2(5): 270-278.
197. Peev C. I., Vlase L., Antal D. S., et al. Determination of some polyphenolic compounds
in buds of Alnus and Corylus species by HPLC.Chemistry of Natural Compounds, 2007,
43(3): 259-262.
198. Pitera F. - Compendiu de gemoterapie clinic - Ed.Fundaia cretin de homeopatie
Simile Constana, 2000.-pg-36 -38, 42, 52, 53, 74, 76, 86, 87, 148-150, 161, 231-233, 235,
274
204. Pop G.; Galuscan A; Peev C; Militaru A; Vlase L; Ardelean L; Rusu LC, HPLC-MS
Identification of Sterol Fractios from Vegetable Oil, REVISTA DE CHIMIE 63(10):10461050, 2012
205. Popravco S A. 1976. Plant sources of propolis. Pchelovodstvo 97:21-23. In e. CRANE,
Bees and beekeeping-science, Practice and World Resources 1990.
216. Salvat A., Antonacci L., Fortunato R.H., Suarez E.Y., Godo H. M. Antimicrobial activity
in methanolic extracts of several plants species from Northern Argentina. Phytomedicine,
2004, 11:230-234.
219. Schikov A.N., Djachuk G.I., Seergev D.V., Pozharitskaya O.N., Esaulenko V., Kosman
V.M., Makarov V.G. Birch bark extract as therapy for chronic hepatitis C. a pilot study,
Phytomedicine, 2011, 18(10) : 807-810.
220. Serafim
L.(1994)
- Propolis and Pollen as associate
treatment in atherosclerosis,
in Apitherapy in Romania, Apimondia Publishing House, Bucharest, 144-164

221. Schneider F.,Bunu C.,Tnasie G.,Mederle C.,Punescu V.,: Human bronchial
responsiveness. Local mecanisms of modulation; Fiziologia. Physiology; 3 ; 1996; 26:7-12.
230. Shakibaei M, De Souza P. Differentiation of mesenchymal limb bud cells to
chondrocytes in alginate beads. Cell Biology International. 1997;21(2):7586.
232.SharmaV. K., GG Sethuraman, Adverse cutaneous reactions to drugs: an overview
Department of Dermatology, Venereology and Leprology, Postgraduate Institute of Medical
Education and Research, Chandigarh, India., India, Year : 1996 | Volume : 42 | Issue : 1
| Page : 15-22
VI
238. Suzutani T., Ogasawara M, Yoshida I, Azuma M, Knox YM - Phytoter Res.,- Antiherpes activity of an extract of Ribes nigrum L. 2003 Jun;17(6):609-13
240. Tabart J, Franck T, Kevers C, Pincemail J, Serteyn D, Defraigne JO, Dommes J.
Antioxidant
and
anti-inflammatory
activities
of Ribes
nigrum extracts. Food
Chem. 2012;131:11161122. doi: 10.1016/j.foodchem.2011.09.076.

249. Tetau M.-Gemmotherapy,a clinical guide edition du details inc
250. Trease and Evans-Pharmacognosy-Ed.Saunders 1996-Viburnum opulus-pag.478
272.Wilkinson D., Hollander S.A comparison of drug literature coverage by Index Medicus
and Drug Literature Index.,Bull Med Libr Assoc. 1973 Oct;61(4):431-2.
273. Willich SN, Rossnagel K, Roll S, et al. Rose hip herbal remedy in patients with
rheumatoid arthritisa randomised controlled trial. Phytomedicine. 2010;17(2):8793.
279. XXX - Farmacopeea Romn, Ed. a X-a, Ed. Medical, Bucureti, 1993.
280. xxx - PDR for Herbal Medicine third Edition. Editura Thompson, 2005, p.81-82,94,97,
260 675-676, 765-766.:
288. Zhao G, Yan W., Cao D.- Simultaneous determination of betulin and betulinic acid in
white birch bark using RP-HPLC, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2007,
43(3): 959-962.
VII

Rezumat Teza 10.08.2016 PDF

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Rezumat Teza 10.08.2016 PDF

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

CONTRIBUII LA CERCETAREA

UNOR GEMODERIVATE UTILIZATE

2.4. Alte preparate utilizate n studiul clinic............................................................................. 9

D. Carpinus betulus L.- remediu biologic important, antihemoragic, indispensabil n

- completarea normei de calitate a gemoterapicelor supuse cercetrii cu precizarea

2. OBINEREA GEMOTERAPICELOR CERCETATE

Ca orice productor i Plantextract Cluj-Napoca dispune de un laborator de control al

activeaz i stimuleaz 11-oxi-steroizii i determin creterea nivelului corticosteroizilor, care

sistematic: Regn: Plantae;

Magnoliophyta, Angiospermatophyta, Clas: Magnoliatae, ordin: Rosales, familie: Rosaceae;

2.2.3.4 Organotropism i posologie

(Chrysanthemum vulgare), semine de mrar (Anethum graveolens), cuioare (Eugenia

tuturor sterolilor cercetai n

3.2. Analiza compuilor polifenolici prin LC i MS

folosit cromatografia de lichide de nalt performana cuplat cu spectrometria de masa

3.2.1. Material i metod

Analiza compuilor polifenolici prin detecie UV

Fig. 1. Cromatograma unui amestec de 18 polifenoli, detecie UV la =330 i =370 nm

Hidroliza se face dup urmatorul protocol: o parte extract se dilueaz cu o parte

Tabel II Determinare cantitativ a acidului cafeic i clorogenic

Acid clorogenic (g/mL)

Ioni specifici de identificare

Acid cafeic: m/z 179 > m/z 135

Acid clorogenic:m/z 353 > m/z 191

Tabel III Coninutul n polifenoli al gemoterapicelor i tincturii de propolis (g/mL)

Not: NF-not found, sub limita de detecie

Tabel IV Potenialul antioxidant al produselor cercetate

Proantocianidinele, flavonoidele i acidul ascorbic coninute n fructele de Rosa canina L. i

bacterii gram pozitive - Staphylococcus aureus (ATCC 49444) i

Listeria monocytogenes (ATCC 19114) i bacterii gram negative - Pseudomonas aeruginosa

Muller-Hinton Agar. Acestea au fost depozitate la 4C i subcultivate o dat pe lun. Pentru

mpotriva tulpinilor bacteriene Pseudomonas aeruginosa i

Escherichia coli (189).

4.1. Studiu privind eficacitatea gemoterapicelor menionate n

S-au mai efectuat nc 5 loturi de pacieni care au cuprins : rinita alergic : 61

4.1.3. Rezultate i discuii

Valori Cortizol seric

Ipoteza 1. RN scade valorile cortizolului

pre-tratament: Z = 0,607 la p = 0,855

post-tratament: Z = 0,446 la p=0,989.

Diferente Cortizol seric

Fig. 2. Lot M1 - Diferenele cortizolului seric

Distribuiile fiind normale vom utiliza testul t pentru msurtori repetate.

Fig. 3. Diferene IgE n urma tratamentului cu RC i BP

Determinrile de IgE s-au efectuat n perioada august-septembrie, aceste fapte putnd

pre-tratament: media = 93,01; abaterea standard = 178,71; mediana = 34,60; valoarea

post-tratament: media = 131,41; abaterea standard = 223,33; mediana = 49,60;

pre-tratament: Z = 1,47 la p = 0,027, rezultnd o diferen statistic semnificativ fa

post-tratament: Z = 1,54 la p = 0,017, rezultnd o diferen statistic semnificativ fa

Datorit faptului c distribuiile nu pot fi considerate normale, vom

neparametric Wilcoxon. Rezultatele obinute sunt: Z = -3,408 la p = 0,001. Mrimea efectului

pre-tratament: Z = 1,044 la p = 0,226 (p>0,05), aadar putem considera distribuia ca

post-tratament: Z = 0,618 la p = 0,84 (p>0,05), aadar putem considera distribuia ca

Tabel VIII.Lot M2 - Eozinofilia n urma tratamentului cu RC i BP

Fig. 4. Diferenele eozinofiliei n urma tratamentului cu RC i BP

4.3. Analiza unui simptom clinic tusea la administrarea unor gemoterapice

marker clinic tusea (30, 66, 80, 100).

4.4. Rezultate analitice

esenial a tuturor cazurilor a fost neconcordana ntre simptomatologia clinic a pacientului

Grup vrst peste

4.4.2. Repartiia pe sexe a eantionului de subieci

Sub 20 ani 20 - 29 ani 30 - 59 ani

La nivelul ntregului numr de 131 pacieni, repartiia acestora pe grupe de vrst