Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
INTRODUCERE ................................................................................................... 3
1.ORGANIZAREA MATERIEI .......................................................................... 7
1.1Niveledeorganizareamateriei..........................................................................................7
1.1.1Cinciniveledeorganizarealemateriei..............................................................................8
1.1.2Organizareaunuipolimer................................................................................................11
1.1.3.Organizareastructurilorbiologice..................................................................................11
1.2.Relaiaproprietatestructurtipuridesinteze................................................................12
1.3.Metodedecaracterizare..................................................................................................15
1.4.Polimeri,caracteristicigenerale.......................................................................................15
1.4.1Proprietilepolimerilor..................................................................................................16
1.4.2Polimericristalini............................................................................................................19
1.4.3Polimeriamorfocristalini...............................................................................................20
1.4.4Cristalinitateaistructurapolimerului............................................................................21
1.4.5Cristalinitateaiforeleintermoleculare.........................................................................21
1.4.6Reticularea......................................................................................................................22
1.5Biopolimeri,polimeribiocompatibili.................................................................................23
1.6Polimeri:relaiastructurproprietateprocesare.............................................................26
1.7Referine..........................................................................................................................29
3.4Bazelespectrometrieidemas.........................................................................................52
3.5Metodedeionizare,separareidetecie..........................................................................54
3.5.1.Ionizareamoleculelor.....................................................................................................54
3.5.2Selectareaiaccelerareaionilor......................................................................................60
3.5.3Selectareadeteciaionilorduptimpdezbor(TOF)......................................................61
3.5.4Separareaionilorncmpurimagnetice...........................................................................62
3.5.5Separareaionilorncmpuricuadrupolare,trapePenning..............................................63
3.5.4Detecia..........................................................................................................................64
3.6Spectruldemasalsubstanelor......................................................................................65
3.6.1Spectruldemasalelementelor.....................................................................................65
3.6.2Spectruldemasalcompuilororganici.........................................................................67
3.7Polimerispectredemas.................................................................................................73
3.7.1Poliolefine.......................................................................................................................73
3.7.2Polimeriacrilici................................................................................................................75
3.8Problemeiexemple........................................................................................................76
3.9Referine..........................................................................................................................80
Introducere
Metodele de analiz fizico-structural a materialelor constituie elementele
de baz n determinarea relaiei dintre structur-proprietate-procesare pentru orice
domeniu al tiinei materialelor. Ele furnizeaz date despre comportarea i
proprietile acestora legate de structur, natura forelor de interaciune,
organizare structural. Cum fiecare domeniu din tiina materialelor are metode de
investigare specifice ele se pot subclasifica n metode structurale, fizice i
analitice comune pentru orice tip de material respectiv specifice pentru a msura o
proprietate particular.
Diversitatea i necesitatea de a proiecta noi tipuri de materiale avansate a
condus la combinaii altadat nebnuite (de exemplu puncte cuantice sau
nanopulberi pe suporturi de biopolimeri pentru imagistic medical sau transport
dirijat de medicamente, materiale mezocelulare, nanocompozite, nanotuburi etc.)
Toate pot fi investigate din punct de vedere al masei i distribuiei
moleculare (spectrometrie de mas, difuzia luminii, potenial zeta, cromatografie), al structurii (XRD, Raman, FT-IR, RMN), al compoziiei ( fluorescen X,
XPS, ESCA, Auger, spectroscopie de emisie) numai a aminti cteva din ele.
Diversitatea materialelor prezentat succint n capitolul 1 a impus diversificarea metodelor de investigare prin creterea rezoluiei, sensibilitii i a limitelor de detecie pn la ordine de femtomoli sau rezoluii de ordinul 1-2 angstromi pentru microscoapele electronice sau de fore atomice. Dei principiile
fizice au rmas aceleai tehnologia avansat i implementarea nanotehnologiilor a
impulsionat dezvoltarea de noi instrumente de investigare mai performante.
Multe din exemple i aplicaii sunt din domeniul tiinei polimerilor avnd n
vedere dezvoltarea lor exploziv i varietatea, altdat inimaginabil, a aplicaiilor.
Analiza i caracterizarea materialelor, a stucturilor macromoleculare i supramoleculare n particular a sistemelor polimere este o subtopic de larg interes
n domeniul analizelor chimice i fizice de investigare a organizrii complexe a
materiei. Tehnicile spectroscopice dezvoltate de fizica secolului XIX i XX au
devenit metode uzuale de investigare structural n chimia analitic, organic sau
macromolecular: spectroscopia IR, Raman, UV-Viz, Rezonana Magnetic
Nuclear (RMN). Tehnici de caracterizare tradiionale din fizica strii solide,
difracia de raze X, microscopie electronic, analiza termic diferenial s-au extins spre fizico-chimia sistemelor macromoleculare contribuind la elucidarea multor aspecte structurale inclusiv decelarea structuii proteinelor sau a acizilor nucleici respectiv a ADN-ului. La tehnicile specifice de investigare a proprietilor polimerilor ce erau focalizate pe caracteristici specifice (vsco-elasticitate, mecanice,
vscozimetrice) le-au fost adugate unele din fizico-chimia coloizilor pentru investigarea structurii lanurilor i a distribuiei maselor moleculare: cromatografia pe
gel permeabil sau de excluziune steric, mprtierea la unghiuri mici a radiaiei X
(SAXS) sau a neutronilor (SANS). De menionat dezvoltarea actual a metodelor
3
de mprtiere a luminii ( difuzia Rayleigh) a permis o dat cu introducerea surselor laser la facilitarea caracterizrii distribuiilor maselor moleculare, volumului
hidrodinamic, vscozitatea intrinsec, potenial zeta prin noile tehnici de
mprtierea dinamic a luminii (DLS), autocorelaia fasciculelor.
Poate c cel mai sugestiv exemplu de utilizare a metodelor de investigare a
morfologiei i a interaciilor la nivel molecular este microscopia de fore atomice
(AFM) care a permis topografierea interaciilor inter i intramoleculare dintre
lanurile polimerice. AFM i microscopia de baleiaj prin efect tunel (STM) au deschis noi orizonturi att pentru tiina materialelor ct i pentru fizico-chimie: investigarea mecanismelor de reacie ( single molecular chemistry), autoasamblare,
organizarea materiei de jos n sus ( metodele bottom-up), funcionalizare etc.
O enumerare a noilor tehnici de investigare a materialelor polimere este pe
departe a fi exhaustiv. Pe msur ce noi tehnici se perfecioneaz ele au un impact important n caracterizarea acestora. Un exemplu este spectroscopia de mas
care a fost considerat ca un instrument auxiliar n caracterizarea polimerilor n
special a distribuiei maselor moleculare. O dat cu trecerea de la metodele de ionizare electronic, ce induceau largi fragmentri ale lanurilor macromoleculelor,
la ionizarea prin pulverizare (ESI) sau prin desorpia dintr-o matrice prin ionizare
sub aciunea unui fascicul laser (MALDI) caracterizarea macromoleculelor respectiv a polimerilor s-a dezvoltat exploziv. Este pentru prima dat cnd se pot investiga pe lng determinarea maselor moleculare absolute, distribuii i aspecte
asupra conformaiilor sau organizrii locale a sistemelor macromoleculare. Combinarea cromatografiei pe gaze, lichide sau de excluziune steric cu spectroscopia
de mas cu timp de zbor sau cu analizoare cuadrupolare, trape ionice, sectoare
multipolare au devenit aresenalul comun al metodelor moderne de caracterizare.
Din acest motiv necesitatea reevalurii metodelor moderne de investigare se
impune mai ales c la nivelul literaturii de specialitate se simte o lips a unei cri
care s pun la dispoziie un material pentru specialiti n tehnicile de caracterizare cu diferite nivele de pregtire. Cartea are ca scop s furnizeze att materiale
de referin ca o introducere n metodele moderne de caracterizare dar i ca un instrument util de formare de cercettori sau de utilizare n descifrarea structurilor i
proprietilor noilor materiale avansate.
Metodele moderne de caracterizare au o evoluie dinamic nemaifiind specifice unui domeniu sau a unei specializri ele devin rapid comune tiinei materialelor chiar dac s-au dezvoltat iniial pentru o caracterizare punctual. n acest
context cartea abordeaz problematica metodelor de investigare i caracterizare de
la simplu pn la limita de specializare pentru un domeniu specific. Aceasta va
permite unui specialist ntr-o metod de caracterizare s poat corela rezultatele cu
alte metode. n aceeai msur cartea furnizeaz materialul de baz pentru formarea de cercettori care doresec s se iniieze i perfecioneze ntr-o metod
specific de analiz fizico-structural.
Necesitatea unei cri care s introduc pe cititor n metodele moderne de
investigare a materialelor se impune ntruct literatura de specialitate le cuprinde
sporadic n capitole disparate. Mai mult unele monografii trateaz metodele la o
4
nalta inut tiinific devenind greu accesibil pentru tinerii cercettori sau
studenii de la Master. Aceast carte vine n sprijinul acestora dar i a
cercettorilor care doresc s combine mai multe metode n vederea investigrii
materialelor complexe.
Metodele descrise fac parte din categoria determinrilor maselor moleculare, compoziiei, fragmentrii imagistic a distribuiei de mase moleculare:
spectrometria de mas, cromatografia de excluziune steric (SEC), spectrometria
de mas cu timp de zbor (TOF-SM), desorpii i ionizri din matrici sub aciunea
radiaiei laser (TOF- MALDI)
ntruct multe metode sunt noi iar abrevierile literaturii de specialitate sunt
diverse uneori dificil de echivalat cu termeni din literatura tiinific romn s-a
preferat meninerea abrevierilor originale acolo unde se impune. Aceasta va
conduce i la o familiarizare cu terminologia internaional.
Capitolul 1
1.Organizarea materiei
1.1 Nivele de organizare a materiei
SP
AT
IU
LE
UC
L
ID
IA
N
Atomii sunt capabili s formeze combinaii, sisteme organizate, structuri i arhitecturi: molecule, clusteri, cristale, cristale
moleculare, polimeri, materia vie. Toate formele de materie,
umple spaiul Euclidian, formnd universul material cu geometria sa ntr-o perfect armonie cu forele de interaciune ce menin
echilibrul dinamic.
Natura n miliarde de ani utilizand energii primare a asamblat atomii n
structuri ordonate, a creat primele structuri organizate-cristalele, primii compui
moleculari- moleculele, a asamblat moleculele n macromolecule i cristalele moleculare, a creat primele ansamble supramoleculare cu diferite nivele de organizare - proteine, ADN, ARN, enzime, etc. n decursul evoluiei au aprut forme de
organizare primare autoreproductibile cu capacitate de difereniere i reproducere.
n final a generat lumea vie i pe cea mai perfect organizare nzestrat cu
inteligen, omul.
Omul: un mimetic al naturii a observat, copiat, a creat noi materiale i
substane,metode de investigare asociind modele calitative i cantitative pentru
descrierea acestora. Cu toate acestea nu s-a ajuns nc s se genereze forme androide dei s-au produs mari realizri n nelegerea structurilor neuronale,
inteligenei artificiale, materiale biocompatibile, ingineria esuturilor ( domenii
astzi cunoscute ca polimeri electroactivi, mecatronic, biomimetic).
Progrese excepionale s-au realizat n sinteza materialelor avansate, ingineria genetic, proteomic, manipularea atomilor, componente i biocomponente cu
capaciti de autoasamblare i auto-organizare. Toate acestea sunt rodul unei
diversiti de instrumente, tehnici de analiz i investigare de nalt rezoluie a
materiei.
Toate acestea au loc n spaiul fizic 3D-euclidian dominat de atomi i de
forele de interaciune fundamentale ce impun simetria i organizarea pe diferite
nivele:
Atomii - simetrie sferic impus de natura forelor electromagnetice;
Moleculele- formele simple, au simetria figurilor geometrice euclidiene impus de natura forelor intermoleculare;
Cristalele- sunt cele mai perfecte forme ale geometrie euclidieneinteraciunea este guvernat de fore electrostatice (legatura ionica)
sau/i cuantice ( cristalele covalente);
Macromoleculele- nivele de organizare induse de natura legaturii chimice i de forele intermoleculare;
7
2. Structu
ura atomic//molecular: Atomii, mooleculele, moonomerii, coonstituie
nitile de coonstrucie( unitile strructurale reppetabile- USR
R) a oricru
ui tip de
un
matterial sau subbstan.
Exemple: Silicea ( SiiO2) sau m
monomerul de silice- eeste alctuit dintr-un
m de Si ce este
e legat tetrraedric de patru atomi de
d oxigen afllai n vrfuriile acesatom
tuiaa ( atomii de oxigen ei insi sunt legai la dooi atomi de Si). La fel se
s poate
spuune i despree carbura de siliciu, SiC deosebirea fiind
f
c SiC are o serie larg de
politipi, forme ale aceluii polimorf identic n orgaanizare 2D dar
d diferit n
n aranjantul planelorr pe a treia direcie.
d
men
3. Structuura cristalin (ordonat):: Aranjamen
nte periodicee n spaiu (ssau dup
umite reguli)) de atomi / molecule/
m
m
monomeri.
anu
Exemple: Silica sau silicea estee polimorficc avnd cteeva reprezen
ntri de
njamente peeriodice; triddimitul o sttructura hexagonal; criistobalitul, structura
s
aran
cub
bic; sticla de
d silice are o structur aamorf; cuarrul, structurra hexagonal. Indifereent de aranjjamentul spaial toi poolimorfii au aceeai strructur monomeric
SiO
O2 sau mai prrecis compooziie chimicc. Carbonul are polimorrfi: diamantu
ul, grafitul, fullerene, nanotuburi.
n
S este un rreprezentantt tipic cu pollimorfi i politipi
SiC:
4. Microstructura: Distribuia
D
i dimensiuneea USR ntrr-un materiaal cu un
umit aranjam
ment spaial (Granulaia,
(
fazele, textu
ura, defectelee, etc)
anu
Exemple:Microstructu
ura unei arggile const din
d granule fine de cuar ntr-o
c
mattrice de carbbonat de calcciu ( forma calcit).
5. Macrostructura: Fo
orma, dimennsiunile, aspectul unei sttructuri la niivel macroscopic.
a
cu
u form,
Exemple: un cuar doopat devine o piatra semiipreioasa ( ametistul)
gura 1.2, este reprezentaat sugesasppect i culoarre bine preciizate macrosscopic. n fig
tiv evoluia silicei pe cele cinci
c
nivele de
d organizare.
Fig
gura 1.2- a) Exxemplificare dee organizare a silicei
n natur
n
b) Abundena
A
polimorfilor de silice n
naatur
oxigen combinaate n diferitte forme. Sillicea este un major ingreedient n oricce tip de
mic amorf ce a fost folosit ncc de acum 5000 ani de
d ctre
sticcl, o ceram
civiilizaie. Obssidianul ( stiicla vulcanicc) a fost unn element m
major de com
mer nc
din
n cultura Neo
olitic ( Culttura Anatoliaan de la aatal Hyk). Silicea amoorf este
un exemplu dee polimer annorganic, un oxid care prin
p procese de dimerizaare conneric de
ducce la formareea unei reelle bidimensionale cunoscute sub dennumirea gen
sticcle. Analiza mecanismellor formrii sticlelor estee un bun exemplu de a nelege
tran
nziiile amorrfo-cristalinee, definiia iintuitiv a teemperaturiloor de tranziiie Tg. n
aceest sens se vaa considera un
u caz ipoteetic de organnizare a unuii oxid punndu-se n
evid
den aspecttele de organnizare pe differite nivele (figura
(
1.3)
a
b
Figura 1.3- Etaape de formaree a unui oxid ippoF
teetic, transform
marea ntr-o struuctur organizat
(ooxid ipotetic) respectiv ntrr-o stare amorrf,
stticloas. Se obbserv c analiiza pe acest oxxid
ippotetic s-a limiitat pn la niv
velul 3 de orgaaniz
zare
interesnduu-ne numai orrgani-zarea maateriiei la nivel miccroscopic
structuraa electronic
dimerizaare, formare US
SR,
solidificare organizare structural (b,c)
10
11
Secundar: substane anorganice, stri de agregare, organice mic moleculare, cristale moleculare;
Materia biologic poate fi intuitiv clasificat astfel:
Primul nivel biologic:lichidele biologice, aminoacizi, monozaharide
cu greutate moleculara de 250 Daltoni.
Al doilea nivel biologic: lipide, esterii acizilor grai, etc: 500-1000 D
Altreilea nivel biologic (structura primara a lanurilor-scheletul molecular- arhitectura molecular): proteine, acizi nucleici, polizaharide, soluii coloidale de biopolimeri etc: >104 D, grade de polimerizare mai mari de 105 . Structura primara poate asimila pe suportul
su fizic o mare cantitate de informaie prin numrul de microstari
(conformaiile ansamblului molecular)
Al patrulea nivel biologic (structura secundar): definete de regul
relaiile conformaionale dintre unitile monomere vecine, efectele
cooperative. Se disting structuri secundare cristaline( elicea dubl
la acizii nucleici) i amorfe( ghem statistic).
Al cincilea nivel biologic ( structura teriara): se refer la
conformaia spaiala global a ntregii structuri ( in cazul polimerului
la intregul lan)
Al aselea nivel biologic (structura cuaternar): Structurile active
(ex proteine, enzime, anticorpii) sunt asociate cu un numar mic de
polipeptide iar centrele active din structuri ce conin ioni sau micromolecule cu sisteme conjugate n calitate de cofactori cu un rol
esenial n recunoasterea stimulului i deschiderea sau nchiderea
cilor de acces spre structura mam pentru procesarea informaiei
i realizarea unui eveniment
SUPERSTRUCTURILE: agregatele mari de biomolecule cu structuri i funciuni precise: cromozomi ( lanuri de ADN), ribizomi, etc
Celula: unitatea de baz a ntregului- organ, organism, ansamblu de
organe, etc
1.2.Relaia proprietate-structur - tipuri de sinteze
Orice ansamblu de atomi configurat n diferite forme de la molecule, cristale
la macromolecule, polimeri, stri de agregare au proprieti fizice legate direct de
structura i modul de aranjare n spaiul euclidian. Un ansamblu organizat dup
regulile proprii, formeaz un compus, corp sau un sistem. Un sistem este delimitat
de o frontier: suprafaa de separare deasemeni cu proprieti fizice perfect delimitate, prin care se realizeaz interaciunea cu celelalte corpuri (sisteme);
Un sistem este caracterizat prin proprieti:
globale (macroscopice): geometrice, mecanice, termice, electrice, optice, etc
structurale: organizarea i dispunerea motivelor atomice sau moleculare n aranjamente cristaline locale sau globale
12
Sinteze
Procese
ii
Ma
ter
g
olo
hn
te
Imbuntatire
Perfectionare
o
cr
Mi
Informatica
Limbaje
Inteligenta
artificiala
iale
Idei- Concepte
Sinteze
fizico-chimice
Fabricatie
dispozitive
Mecanice
Electrice
Magnetice
Optice
TESTARE DISPOZITIVE
VERIFICARI FUNCTIONALE
Generale
densitati
mase moleculare
compzitie
Structurale
Realizare
Nanotehnologii
Tehnici de analiza
fizico- structurala
Morfologice
Biologie
Inginerie
genetica
*Spin- coating
*Fotolitografie
*PLD, PVD, CVD
*UV-fotoaliniere
*Dielectroforeza
*AFM-nanomani
pulatoare atomice
*Langmuir-Blodgett
*Polimerizari
controlate
*Grefari chimice
*Autoansamblari
*sol-gel
*Laser nanopiroliza
*Implantari ionice
*MBE-epitaxie
Functionale
Figura 1.6- Interdependena dintre sinteze materiale, realizare dispozitive, metode de investigare i caracterizare
14
Picnometrie
Sedimentare
Difuzia lumini
Vscozimetrie
Fluorescena X, Auger, ESCA
Emisie Spectrala Uv-Viz
Cromatografie
Spectrometrie de mas
2. Morfologice, topografice
Microscopie Optica
Microscopie electronic de baleiaj (SEM)
Topografie-AFM (microscopie de fore atomice)
Imagistica: n X, Uv, Viz, Ir, Microunde
3.Structurale
4. Termo-Mecanice
5. Electrice, Magnetice,
Optice
Polimerii solizi constituie clasa reprezentativ i se pot asocia prin comparaie modelului sticlelor, structuri amorfo-cristaline. Atunci cnd n structura
lanului polimeric este prezent o anumit ordonare, indus de anumii factori
termo-mecanici sau fizici, acetia pot cristaliza ca n cazul fibrelor ( poliketone,
poliamide, poliesteri) sau a polistirenulu sindiotactic. Asamblarea i configuraia
macromoleculeor n polimeri solizi sunt cu totul diferite fa de soluiile
macromoleculare i n particular fa de soluiile diluate. n soluii i sisteme
vscoase macromoleculele au diferite grade de libertate n consecin i comportare diferit. Forma i mrimea respectiv distribuia macromoleculelor dup masa
lor molecular definesc proprietile fiecrui polimer.
Soluiile polimerice uneori i diluate sunt nalt vscoase, dar odat cu
creterea concentraiei, ele devin att de vscoase nct la un moment dat forele
intermoleculare se intensific iar caracterul de lichid dispare. n acest caz comportarea este de gel adic o reea de macromolecule interpenetrate ce conin moleculele de solvent.
Diferenele dintre comportarea fizico-chimic diferit a polimerilor fa de
sistemele mic-moleculare pot fi rezumate astfel:
1. Gradul de organizare i mpachetare, conformaiile lanurilor macromoleculare: Marea majoritate a polimerilor sunt liniari; sunt molecule
ale cror atomi se unesc pe direcii prefereniale, impuse de natura
legturilor covalente, formnd un lan de dimensiuni foarte mari. Nu
ntotdeauna acest lan este rigid i cuasiliniar. O simpl estimare a
energiei interne a lanului arat c exist o serie de minime locale mai
mult sau mai puin echidistante. ntre punctele de minim segmentele
de lan sunt rigide formnd aa numitele segmente (adesea
confundate cu USR dar n cazuri excepionale). n punctele de minim
ale energiei poteniale segmentele capt diferite grade de libertate de
la rotaii frnate pn la rotaii libere n jurul axelor locale proprii (
segmente Kuhn). Aceasta le d un caracter de mobilitate ce conduce la
flexibilitatea polimerului prin luarea unor configuraii extrem de
diferite. Aceste configuraii corespund unei energii globale minime a
strii de echilibru a unei macromolecule determinnd conformaia sa.
Cu ct gradul de libertate a segmentelor este mai mare cu att lanul
macromolecular se rsuceste (contorsioneaz) i se ndoaie formnd un
ghem complicat cu caracter de distribuie statistic a segmentelor
(modelul ghemului statistic). Lanurile au tendina de a se rsuci unele
n jurul celorlalte astfel nct macromoleculele dintr-un polimer vor
forma global un ghem gigant cu un nalt grad de dezordine. Pe msur
ce polimerul este nclzit energia cinetic a lanurilor crete, depind
forele de interaciune de tip Van der Waals, conducnd la o cretere a
mobilitii acestora. Aproape toi polimerii prezint o temperatur de
tranziie vitroas (glass transition) interpretat ca temperatura pentru
care componenta cinetic este egal cu energia potenial. Peste
aceast temperatur macromoleculele au o mobilitate specific ce
17
Figura
F
1.7 a)) Model de plieere a lanurilorr polimere pe seegmente cu lunngimi caracteriistice; b)
Plierea
P
unui poolimer cu formaarea de stive 3D
D, lamele
Foarte puini
p
sunt polimerii care prezzint astfell de caraccteristici
reprezentani fiiind polietillena liniar ccu mase moeeculare foartte mari i arramidele
(Keevlar, Nomeex). Cei maai muli pollimeri se poot ntinde pe distanee scurte
naiinte de a se plia
p sau s i alinieze reeciproc lanuurile.
Pentru poolietilen, lu
ungimea lannului ntinss nainte dee a se plia este de
aprroximativ 10
00 angstrom
mi. Polimerii pot forma stive de astfel de lanurri pliate
(lam
mele), figuraa 1.7b. De reegul lanurille nu aparinn integral unuui singur criistalit. O
parrte a lanuluii este inclus ntr-o regiunne organizatt n lamele iar restul nttr-un alt
dom
meniu de laamele sau rmne
r
liberr. Cnd se ntampl
d
Fig
gura 1.8 a). Laanuri cu pri participante
p
n lamele iar alteele in domeniile amorfe, b). laanuri
caree particip alterrnant cu pri n
lamele i dom
meniile amorfee intorcndu-see la lamela urm
mtoare c).
lanuuri cu participaare aleatorie laa lamele i dom
menii amorfe (switchboard moodel) d) Modell de
sferuulit
sunt prezentai polimeri care sunt n cazuri extreme. Aceste dou extreme se
datoreaz structurii polimerului i a forelor intermoleculare.
1.4.4 Cristalinitatea i structura polimerului
Structura polimerului influeneaz cristalinitatea acestuia. Dac este regulat
i ordonat, acesta se va mpacheta n cristale mai uor. Un exemplu este
polistirenul.sintetizat n dou tipuri: sindiotactic (cristalin) i atactic (amorf),
figura 1.9.
1.4.6 Reticularea
Reticularea polimerilor i are originea n vulcanizarea cauciucului natural,
latexul sau astzi cunoscut ca poliizoprenul. De reticulare este legat numele
inventatorulului Charles Goodyear care a nclzit accidental latexul natural cu sulf
i oxid de plumb. Rezultatul fiind o mas casant cu proprieti diferite de latex.
Diferite concentraii de sulf a condus la variaii largi n proprieti de la elastic la
rigid. Goodyear a denumit acest proces, vulcanizare. Ca fenomen sulful, de altfel
un polimer anorganic, a format puni de legtur ntre lanurile macromoleculelor
de poliizopren conducnd la reticularea acestora. n figura 1.12 a, este descris
mecanismul de reticulare a poliizoprenului utiliznd ca agent sulful. Se observ c
sulful romboedral se descompune n 2-3 meri (rareori 4 molecule pe lan) care
reacioneaz cu atomii de carbon din legturile duble ale poliizoprenului. Reeaua
format din reticularea macromoleculelor are proprieti cu totul diferite fa de
polimerul iniial. Similar cu poliizoprenul ali elastomeri (polibutadiena,
poliizobutilena, policloroprenul) pot fi reticulai formnd o clas aparte aceea a
cauciucurilor sintetice .
Cauciucul nu este singurul care poate fi reticulat. Plasticele sunt de
asemenea fcute mai puternice, rigide i procesabile prin reticulare. Polimerii sunt
de regul topii sau presai la cald cu adaosuri de ageni de reticulare nainte de a
fi reticulai. Un polimer odat ce a fost reticulat la temperaturi nalte nu mai poate
22
fi modelat. Materialele pentru care reticularea are loc la temperaturi relativ medii
(100-3000C) se numesc plastice de termoformare (thermosets). Acestea sunt
complet diferite fa de termoplastice care nu sunt reticulate fiind modelate prin
topire, injecie sau presare la cald. Primul thermoset sau plastic termoformat prin
reticulare a fost ebonita (poliizopren reticulat cu sulf la concentraii mari). Alte
exemple sunt rinile epoxidice, policarbonaii etc. Materialele reticulate sunt n
general insolubile n solveni deoarece toate lanurile polimerului sunt legate
covalent. Dar ei pot adsorbi solveni. n situaia n care un material reticulat
absoarbe o cantitate apreciabil de solvent obinem un gel. Un astfel de gel este
gelatina iar cel sintetic este poliacrilamida. Poliacrilamida este solubil n ap n
timp ce poliacrilamida reticulat poate adsoarbi apa.
Structura monomerului combinat cu aranjamentul topologic al monomerilor n lanul polimeric conduce la forme de ghem statistic printr-o mpachetare
aleatorie [9]. Acest aranjament topologic este datorat forelor slabe de interaciune
reciproc a USR-urilor dintre lanuri. Anumite proprieti vibraionale i mecanice
pot fi observate spectroscopic dar nu distinctiv. Aspectele topologice de aranjament a monomerilor n lan, forma de ghem statistic ce se evideniaz la scal
coloidal, persistena lanului (liniaritatea local) sau tacticitatea sunt decelate de
tehnici RMN.
tate pentru nelegerea fenomenelor i structurii polimerilor se pot consulta monografiile [10, 11-18].
1.7 Referine
1. K.Eric Drexler, Nanosystems:Molecular Machinery, Manufacturing,and Computation,
1992, ed J. Willey&Sons, 1992, versiunea 2006 (www.e-drexler.com)
2. R.P.Feynman, Plenty of Room at the Bottom, Dec 1959, www.its.caltech.edu /~feynman/
3. S. R. Sandler, W. Karo, J.-A. Bonesteel, E. M. Pearce, Polymer Synthesis and Characterization Academic Press, San Diego, 1998
4. George Odian, Principles of Polymerization, 3rd ed., John Wiley & Sons, New York,
1991
5. R. Langer, D.A. Tirrel, Designing Materials for Biology and Medicine, Nature 428,
487-492, (2004).
6. A. Steinbuchel: Biopolymers (John Wiley-VCH, Weinheim 2003).
7. M. Yu, T.J. Deming, Synthetic Polypeptide Mimics of Marine Adhesives, Macromolecules 1998, 31, 4739-4745
8. en.wikipedia.org/aminoacids
9. J. D. Ferry, Viscoelastic Properties of Polymers, Wiley ,p. 3, 1980
10. Mc Paul C. Painter and Michael M. Coleman Fundamentals of Polymer Science. An
Introductory text, Techriumic Publishing Company, Inc., Lancaster, PA, 1994.
11. F.A. Bovey and F.H. Winslow (Eds.), Macromolecules. An Introduction to Polymer
Science, Acad. Press, New York, 1979
12. I Alexander Yu. Grosberg and Alexei R. Khokhlov Giant Molecules: Here, There and
Everywhere, Acad. Press, San Diego, 1997
13. John W. Nicholson, The Chemistry of Polymers, Royal Society of Chemistry, Cambridge, UK, 1991
14. Stephen L Rosen, Fundamental Principles of Polymeric Materials , Series: SPE
Monographs, John Wiley & Sons, New York, 1982
15. Paul J. Flory, Principles of Polymer Chemistry, Cornell University Press, Ithaca,
1953
16. Malcolm P. Stevens, Polymer Chemistry: An Introduction , 2nd Ed., Oxford University Press, New York, 1990
17. Herbert Morawetz, Macromolecules in Solution, 2nd Ed., Wiley-Interscience, New
York, 1975
18. Hiromi Yamakawa, Modem Theory of Polymer Solutions, Harper & Row,New York,
1971
29
30
Capitolul 2
2. Mase moleculare
2. 1 Cromatografia de excluziune steric
Cromatografia de excludere steric (SEC) are ca principiu de baz transportul particulelor i separarea acestora dup dimensiunea lor mai exact dup
volumul lor hidrodinamic. Se utilizeaz de regul la determinarea distribuiei maselor moleculare a macromoleculelor sau a complexelor moleculare cum sunt proteinele. Cnd o soluie apoas este folosit de a transporta o proba printr-o coloan
de separare tehnica este cunoscut sub denumirea de filtrare cromatografic pe gel
(GPF). Termenul de cromatografie pe gel permeabil (GPC) este utilizat atunci
cnd faza mobil este un solvent organic. Aplicaia principal a GPF este n
fracionarea proteinelor i a polimerilor solubili n ap n timp ce GPC este
utilizat n analiza distribuiei maselor moleculare a polimerilor solubili n
solveni organici. Fiecare tehnic nu trebuie confundat cu electroforeza pe gel
unde moleculele sunt transportate de un cmp electric prin faza staionar funcie
de sarcina electric.
SEC este pe larg folosit pentru purificarea i analiza polimerilor sintetici i
biologici ca de exemplu proteine, poliyaharide, acizi nucleici. De regul ca faz
staionar se utilizeaz geluri de poliacrilamid, dextran sau agaroz pentru
separarea biopolimerilor, transportul realizndu-se la presiuni mici. Pentru
polimeri sintetici tipici sunt silica sau polistirenul reticulat iar transportul se
realizeaz la presiuni medii sau mari.
Avantajele metodei SEC sunt c pot fi utilizate diverse soluii fr a
interfera cu procesele de filtrare sau separare pstrndu-se astfel activitatea
biologic sau proprietile intrinseci ale polimerilor sintetici i biologici. SEC se
combin cu alte metode sau tehnici ce urmresc alte caracteristici cum ar fi SM,
determinarea potenialului zeta, afinitate etc.
Tehnica a fost inventat de Grant Henry Lathe i Colin Ruthven [1]. Ulterior
Porath i Flodin au introdus gelurile de dextran reticulat care gonflat n ap este
capabil s separe proteine [2]. Acest gel este astzi comercializat sub denumirea
de Sephadex i utilizat extensiv n separarea biopolimerilor. Ulterior s-au elaborat
alte geluri pentru fracionarea dimensional- agaroza, poliacrilamida, polistirenul
reticulat, silicea activat. O trecere comprehensiv a dezvoltrii metodelor
cromatografice este prezentat n lucrarea [3]. SEC s-a dezvoltat rapid n ultimele
decade datorit realizrii de faze staionare din polistiren reticulat a cror
dimensiune este sub 10 microni conducnd la reducerea drastic a nlimii
coloanelor cromatografice i a numrului de platouri de secveniere per unitate de
lungime. SEC este un capitol particular al cromatografiei pe gel introdus de
31
Moore [4] pentru a descrie separarea polimerilor din solveni organici n coloane
mpachetate cu perle de polistiren reticulat liofilizat.
2.1.1 Metoda experimental
n SEC particulele de diferite dimensiuni sunt eluate (filtrate) prin faza
staionar la diferite rate. Aceasta conduce la separarea particulelor din soluie
dup dimensiunea lor. Ideal se presupune c toate particulele de aceeai
dimensiune vor fi eluate simultan. Aparatul const dintr-un tub umplut cu perle de
polimer sau material poros proiectat astfel nct s aib pori de diferite dimensiuni.
Porii pot fi superficiali sau sunt canale submicronice n particulele fazei
staionare. Soluia ce conine macromoleculele traverseaz perlele fazei solide, ea
ptrunde prin pori simultan cu macromolecule care au dimensiuni mai mici sau
comparabile cu acetia. Macromoleculele cu dimensiuni mai mari nu pot intra prin
pori sau staiona pe suprafaa perlelor prin urmare vor curge n jurul perlelor i se
vor elua mai repede. Soluia se elueaz pe msur ce este colectat la ieirea din
coloana cromatografic. Soluia filtrat, colectat la captul terminal al coloanei
se numete eluat. Volumul liber include solventul cu toate particulele mari ce nu
intr n porii perlelor fazei staionare iar volumul solventului este cunoscut sub
denumirea de volumul coloanei. n figura 2.1-1 este prezentat modelul fizic de
separare a moleculelor dup dimensiune. Se observ c drumul parcurs de
moleculele ce au dimensiuni comparabile cu al porilor au drmul de parcurgere mai
lung iar n timp se vor elua mai lent. Distribuiile de mase vor fi mai largi sau mai
nguste funcie de dispersia dimensional a porilor. n figura 2.1-2.a-c este
prezenta schema de principu a fracionrii polimerilor utiliznd metoda excluziunii sterice.
1
Figura 2.1-1. Principiul separrii moleculelor dup
dimensiune prin excluderea sau traversarea porilor
unor structuri de perle reticulate. 2. Principiul
fracionrii prin excluziune steric a polimerilor prin
coloane cu eluare secvenial.n prima etap se umple
coloana cu soluia de polimer iar in etapele secundare
se elueaz cu acelai volum de solvent pentru eluarea
fraciilor cu dimensiunea mai mic
32
de perlele gelului. Volumul de permeaie Vp= Vi+V0. Moleculele mici inclusiv ale
solventului traverseaz un volum de eluie Ve=Vi+V0=Vp. Moleculele mari traverseaz volumul Ve= V0 iar cele intermediare Ve=xVi+ V0 unde x este coeficientul de partiie. Acesta este cel mai simplu model geometric al excluziunii sterice
fr a se lua n consideraie interaciile i natura porilor respectiv a spaiilor
interstiiale. De notat c modelul descrie curgerea liber a eluentului. Experimental eluentul se injecteaz sub presiune de 1-50 atm.
2.1.2 Etalonarea
n cazul perlelor poroase de sticl dimensiunea porilor poate fi msurat
prin metoda intruziunii mercurului n coloan. Pori cu diametrul de 10-250nm
sunt suficieni pentru a separa fracii cu masa molecular de ordinul 103-107. n
cazul perlelor de polimer reticulat (cel mai uzual fiind polistirenul) se estimeaz
volumul de retenie, Vr: volumul de solvent elutriat din momentul introducerii n
coloan i momentul de timp cnd apare n efluent. Msurtorile se realizeaz la
temperatur i rate de injecie constante.
Procedura de calibrare const n injecia de mixturi de polistiren cu mase
moleculare standard dizolvate n THF ntr-o serie de coloane mpachetate cu perle
de polistiren reticulat (perle de 10 microni diametru). Coloanele au diametrul interior standard de 7,5 mm i lungime de 300 mm. Presiunea de injecie este de 20
atm la o rat de 1ml/min (figura 2.3). Detectorul UV determin variaia n timp a
transportului de molecule spre efluent.
Masa molecular i distribuia obinut este dependent de reproductibilitatea ratei de pompare a solventului pentru a o precizie bun de eluiei n timp.
O dat curbele de etalonare stabilite se pot determina distribuia maselor
moleculare ale altor polimeri. Dac se completeaz cromatograful cu un vscozimetru se se pot evalua parametrii intrinseci cum ar fi vscozitatea sau masa medie
numeric a moleculeor.
34
35
37
2.2
Prin urmare masa medie numeric este definit astfel:
2.3
2.4
n experimentele de laborator de regul se evalueaz sau msoar greutatea
molecular, wi i nu direct Mi. Dac notm concentraia unei specii de polimer i
(n mas per volum) atunci:
2.5
atunci masa medie numeric poate fi exprimat n termeni de concentraii prin:
2.6
2.7
Diametrul Di
(u.a)
1
5
25
lungime
Ni Di
900
250
1250
arie ( x1/)
volum (x 6/)
900
1250
31250
900
6250
781250
2400
33400
1
:
3
788400
2.4
13.9
23.6
39
2.8
Astfel pentru
. Alte forme de
apar n experimente specifice de difuzia luminii respectiv de separare prin centrifugare
2.9
2.17
2.18
1
1
calculat din distribuia cea mai
Masa molecular medie gravimetric,
probabil se obine din mediere pe fraciile gravimetrice:
1
Aplicnd acelai procedeu de derivare de dou ori asupra seriei din 2.18. se
obine:
2.20
Combinnd relaiile 2.19 i 2.20 ale maselor medii numerice i gravimetrice
se obine indicele de polidispersie:
1
2.21
Figura 2.6- Funcia de distribuie cea mai probabil reprezent prin fracii numerice(a) respectiv
masice(b). Fraciile numerice respectiv masice sunt reprezentate n funcie de gradul de
polimerizare. Cele trei curbe sunt pentru trei valori ale parametrului p.
42
2.22
43
2.23
Mw
500.000
250.000
125.000
PDI
2,50
2,00
2,50
Rezolvare:
500.000
250.000
250.000
0,333
125.000 1
0,333
1
1
200
125
50
1
68,5
b) Care este
a mixturii?
c) Care este efectul stearatului de Ca asupra maselor moleculare deduse
din difuza luminii respectiv din presiunea osmotic? ( difuzia luminii
msoar
iar presiunea osmotic
)
, pentru un polimer
d) Care este cea mai mare valoare posibil pentru
coninnd 3% n greutate stearat de Ca.
1. Se consider distribuia cea mai probabil a maselor moleculare:
a) S se deduc o expresie pentru probabilitatea P(M) ca un polimer
aleator selectat s fie de mas M. S se exprime rezultatul n termeni
de M i nu de gradul de polimerizare i.
b) Care mas molecular corespunde probabilitii maxime
c) S se deduc o expresie pentru w(M), fracia unui polimer care are
masa M.
2. S se calculeze procentul conversiei grupelor funcionale necesar de a
obine un poliester cu masa medie numeric de 24.000 g/mol din
monomerul HO(CH2)14COOH
3. O poliamid s-a preparat din hexametilen diamin (9.22 g, masa
molecular 116) i acid adipic ( 13.2 g, masa molecular 166) la 2800C.
Analiza produsului de reacie a artat c el conine 2.6x10-3 moli de
i
presupunnd c distribuia
grupri carboxilice. S se determine
este cea mai probabil.
45
2.3 Referine
1 G.H Lathe, C.R Ruthven, The separation of substances and estimation of their relative
molecular sizes by the use of columns of starch in water. Biochem. J. 62(4): 665-674,
1956
2 J. Porath, P Flodin, Gel filtration: A method for desalting and group separation. Nature
183(4676): 1657-1659, 1959; P. Flodin, Dextran Gels and Their Applications in Gel
Filtration. Uppsala, Sweden: Pharmacia, 1962
3 M. Eisenstein, A look back, adventures in the matrix. Nature Methods 3(5): 410, 2006
4 J. C. Moore. J. Polymer Sci. A2 ,835, 1964
5. S. S. Cutie, and S. J. Martin. Size-Exclusion Chromatography of Cross-Linked Superabsorbent Polymers, Journal of Applied Polymer Science, Vol. 55, 605-609 ,1995
6. S. S. Cutie, P. B. Smith, R E. Reim, A. T. Graham. Analysis and Characterization of
Superabsorbent Polymers, In Modern Superabsorbent Polymer Technology. Edited by
F. L. Buchholz and A. T. Graham. John Wiley & Sons, Inc. (1998)
7. D. M. Meunier. "Molecular Weight Determinations" in Handbook of Instrumental
Techniques for Analytical Chemistry. Edited by F. Settle, Prentice Hall PTR. 1997
8. Jack Cazes. "Gel Permeation/Size Exclusion Chromatography". In a Century of Separation Science. Edited by H. I. Issaq. Marcel Dekker, Inc. 2002
9. C.F. Poole , The Essence of Chromatography, Elsevier, 925pp, 2003
10. Chi-san Wu, Column Handbook for Size Exclusion Chromatography, Elsevier, 637pp,
1999
11.L. M Constantinescu, C. Berlic, V. Barna, Fizico-chimia polimerilor, aplicaii, Ed
U.B, 2006
12.L.M. Constantinescu, C. Berlic, Structura polimerilor, metode de studiu, Ed UB,
pp194, 2003.
13.P. J. Flory, Principles of Polymer Chemistry, Cornell University, New York, 1953.
14. F. Rodriguez, C.Cohen, C.K Ober, L.A Archer, Principles of Polymer Systems, 5th Ed, 760pp,
Taylor &Francis Pub, 2003
46
Capitolul 3
3. Spectrometria de mas (SM)
Pentru a pune n eviden importana acestei metode de analiz vom incepe
cu un eveniment important al anului 2002: Academia de tiinte din Suedia a acordat Premiul Nobel pentru urmtoarea tematic: for the development of methods
for identification and structure analyses of biological macromolecules, pentru
John B. Fenn, Virginia Commonwealth University, Richmond, USA, i Koichi
Tanaka Shimadzu Corp., Kyoto, Japan , for their development of soft desorption
ionisation methods for mass spectrometric analyses of biological macromolecules repectiv lui Kurt Wthrich Swiss Federal Institute of Technology (ETH),
Zrich, Switzerland and The Scripps Research Institute, La Jolla, USAfor his
development of nuclear magnetic resonance spectroscopy for determining the
three-dimensional structure of biological macromolecules in solution.
Premiile Nobel au fost acordate pentru Metodele Analitice revoluionare de
investigarea biomoleculelor, n particular pentru proteine i polimeri. Posibilitatea
analizei n detaliu a proteinelor a condus la o adnc nelegere a proceselor vieii.
Cercettorii pot acum simplu i rapid
s releve ntr-o prob diferite categorii de
proteine. Ei pot deasemenea s releve reprezentarea tridimensional de cum arat
moleculele ntr-o soluie i pot s determine funcionalitatea lor att n celule ct i
singulare.
Macromoleculele biologice sunt actorii principali n alctuirea vieii fie c
exprim prosperitatea diversitii sau n John B. Fenn (1917) ; Koichi Tanaka(1959)
ameninarea unei boli. Pentru nelegerea
biologiei i medicinei la nivel molecular, prin prisma instrumentelor fizico- chimiei, unde identitaea, caracteristicile funcionale, arhitecturile structurale i
interaciile dintre biomolecule sunt bazele vieii, avem nevoie de a vizualiza activitatea i influena reciproc a moleculelor mari cum ar fi de exemplu proteinele.
A studia sau a analiza macro i biomoleculele trebuiau dezvoltate principiile
separrii i determinrii caracteristicile lor individuale. Iat de ce RMN i SM
au devenit subiectul premiiilor Nobel.
Metodele au revoluionat dezvoltarea de noi medicamente promind noi
aplicaii pentru alte domenii ale fizico-chimiei. Cele mai importante domenii care
ateapt mult de la aceste tehnici revoluionare se refer la controlul alimentelor,
diagnoza timpurie n cancerele de plmni i de prostat, biocompatibilitatea materialelor.
47
Nobel:"in recognition of the great merits of his theoretical and experimental investigations on the conduction of electricity by gasses."
In 1946, William E. Stephens, introduce conceptul analizorului de timp de
zbor ( time of flight, TOF), concept ce permite analiza ionilor prin msurarea vitezei acestora pe traiectoria spre colector ( detector).
Perioada 1930 1970 a fost acea a unor mari realizri pentru spectrometria
de mas. La sfritul primului razboi mondial prin lucrrile lui Francis W. Aston i
Arthur J. Dempster s-au adus contribuii importante n imbuntirea rezoluiei
spectrometrelor de mas o dat cu dezvoltarea tehnicii vidului i a electronicii. Alfreid Neir ncorporeaz aceste realizri n construcia i designul noii generaii de
spectrometre reducndu-le considerabil masa.
O intens activitatea n dezvoltarea SM a fost depus pentru o perfecionare
continu a instrumentelor n scopul analizrii moleculelor cu mase moleculare din
ce n ce mai mari. Acest deziderat avea s fie atins abia n anii 70 cnd s-a neles
c n procesul de analiz trebuie o preprocesare a substanelor: preparearea de molecule ncrcate electric ntr-o faz gazoas urmat de separarea fizic a ionilor/
macroionilor n vid
Pentru biomolecule provocarea era de a gsi o procedur viabil pentru prepararea de probe. Procesul prin care se dovedea abilitatea de a face biomoleculele
s prseasc faza lichid sau solid i de a se deplasa printr-o faz gazoas a
condus la ingenioase combinaii de alegere a materialelor, energiei, dimensiunii,
structurii i nu n ultimul rnd a mediului chimic.
Introducerea principiilor i a SM spre echiparea biotiinelor n studierea
identitii, structurii, caracteristicilor funcionale a moleculelor gigant a dat o
puternic dezvoltare acestui domeniu al fizicii experimentale.
Istoria a jucat i aici un rol ca n cele mai multe tiine interdisciplinare.
Cercettorii i ingineria tehnologic s-au concentrat pe ideia c este strict necesar
s se volatilizeze mai nti molecula i apoi s o ionizeze. n plus energia necesar
volatilzrii moleculei era de regul dat de o surs termic ns aceasta conducea
la modificri chimice, efecte secundare n decursul procesului de nclzire- volatilizare. Dezvoltrile experimentale erau marginale n raport cu pasul necesar de a fi
capabili de a analiza molecule gigant intacte.
O noutate major descris de M.S.B. Munson i F.H. Field in 1966 [10] era
de a folosi ionizarea chimic (chemical ionisation, CI). Pentru prima dat a fost
posibil de a ioniza macro i biomolecule termolabile. Un gaz reactant, abundent n
ioni formai printr-o descrcare electric, ionizeaz moleculele volatilizate.
Desorpia cu plasma (PD- plasma desorption), introdus in 1976 [11],
folosete ioni de energie mare pentru a desorbi i ioniza molecule. Tehnica a cunoscut un oarecare succes dar niciodat nu a prezentat o credibilitate n determinarea maselor moleculare mai mari de 10 kDa.
Dac lum pentru comparare masele moleculare a substanelor comune se
evideniaz imediat limitele PD-SM: mii de Dalton (Da) pentru hormonul insulin
(5734 Da), sute de mii de Da pentru proteinele comune i de 5 milioane Da pentru
complexe enzimatice gigant.
50
FAB- (fast atom bombardement), bombardamentul cu atomi rapizi. A cunoscut o limitare n dezvoltare ntruct distruge moleculele mici. M. Barber et al.
[12] au descris realizarea de experimente de FAB care permitea o acoperire cu
medii nevolatile realizandu-se astfel o protecie chimic i termic. Moleculele
polare, termic labile, i pstrau integritatea n procesul de ionizare. Aceast lucrare a artat c atomii (respectiv ionii) de Ar, Cs, Xe accelerai ar putea fi folosii
la determinarea masei de mici biomolecule ( adic mase moleculare < 10 kDa)
combinat cu determinarea structurii prin fragmentare. Aceast tehnic, apropiat
ca principiu cu spectroscopia de mas cu ioni secundari ce utilizeaz matrici lichide ( LSIMS- liquid matrix secondary ion mass spectroscopy) nu rezolv problema atingerii maselor moleculare mari dar a avut un impact major asupra succeselor ulterioare.
Un alt tip de analizor, n dotarea actual a spectrometrelor, a fost dezvoltat
n anul 1950 de Wolfgang Paul: analizorul cuadrupolar. Analizorul cuadrupolar
este capabil s separe ionii ntr-un cmp electric alternativ crescnd astfel utilitatea
spectrometrelor. O alta inovaie adus de Paul este aceea de trap ionic
cuadrupolar; dispozitiv specific proiectat cu funciunea de a trapa ionii i respectiv de ai msura. Prima trap ionic a devenit comercial disponibl n 1983 iar
n prezent trapele cuadrupolare sunt cel mai larg folosite n analizoarele de mas.
Pentru contribuiile sale Paul a primit Premiul Nobel in 1989 n fizic.
Provocarea lansat n anii 1980 era de a gsi o cale de a analiza compui cu
mas molecular gigant prin SM i de a face din ea un puternic instrument detector n tehnicile de separare din faz lichid sau solid
Introducerea metodelor ESI i desorbia cu fascicul laser (SLD- soft laser
desorption) a ntrunit cerinele mai sus enunate. Explozia aplicaiilor rezultat din
folosirea ESI i SLD poate fi exemplidficat prin aceea c este aa de moderat
nct i viruii pot fi conservai, rmn viabili, dup procesarea ESI [13]. Metoda
SLD a permis de a ncrca electric, ioniza, locaii singulare de pe structura unei
molecule gigant. Aceste dou metode practic au revoluionat multe domenii ale
analizelor fizico-structural n combinaie cu SM.
3.3 Rolul spectrometriei de mas n tehnicile de analiz fizico-chimice
Analiza spectral de mas implic transformarea unui analit M ntr-un set de
ioni n faz gazoas i msurarea acestora n funcie de raportul mas/sarcin
(m/z) [14]. Metoda de ionizare impune tipurile de ioni moleculari sau cuasimoleculari i fragmentele acestora. Ionii moleculari sunt n general radicali cationici
(M+*) formai prin eliminarea unui electron sau anionici (M-*) formai prin adiia
de electroni, utilizai ocazional pentru probe electronegative. Ionii cuasimoleculari
pot fi pozitivi sau negativi i se formeaz prin adugarea sau substracia de ioni ca
exemple comune fiind [ M+H]+, [M-H]-, [M+Na]+, [M+Cl]-. Metodele de ionizare
slabe genereaz predominant ioni moleculari sau cuasimoleculari n timp ce metodele de ionizare tari genereaz numai ioni i fragmente ionizate.
Spectrometrele de mas separ ionii generai i msoar abundena lor vs
m/z. Mixturile sau alte sisteme complexe lichide sunt separate prin cromatografie
51
de gaz (GC) sau pe lichide (LC) iar spectrometrul de mas reprezint sistemul de
detecie i msur a produilor, compoziiei pentru fiecare component individual facilitndu-se astfel caracterizarea probei. n prezent GC-MS i LC-MS au
o larg rspndire n laboratoarele analitice i de caracterizare. Valoarea exact
m/z a ionilor moleculari sau cuasimoleculari relev compoziia elementar a probei. Dac ionii moleculari sunt instabili i se descompun complet rezultatul
fragmentrii d o distribuie specific i poate fi utilizat ca o amprent n programele de identificare a compoziiei i structurii substanelor. Fragmentele ionice
furnizeaz informaii importante despre structura primar (conectivitatea sau
secvena iar n cazul polimerilor , unitatea structural repetitiv). Spectrometria de
mas a catigat constant o larg utilizare n analiza polimerilor datorit
sensibilitii ( <10-15 mol sunt suficieni pentru analiz), selectivitate (componente
minore pot fi analizate n cadrul unei mixturi), specificitate ( masa exact i fragmentarea specific este caracteristic pentru fiecare substan), i vitez
( achiziie rapid de date i prelucrare n secunde) [15]
3.4 Bazele spectrometriei de mas
Spectrometria de mas este n prezent tehnica experimental care lucreaz
cu cele mai mici uniti de masur ale masei- atomi, molecule, radicali, fragmente
moleculare. Instrumentul de baz este alctuit din urmtoarele componente principale: 1.sursa de ionizare respectiv dispozitiv de injectie a substanei de analiz
2.analizorul de mas, sistemul de vid 3. detectorul ionic (figura 3.1)
Ionii sunt generai ntr-o surs de ionizare prin inducerea sau pierderea unei
sacini electrice. O dat ionii formai n faza gazoas ei sunt electrostatic directionai ntr-un analizor de mas, separai dupa masa lor i n final detectai. Rezultatul ionizrii, separarii ionilor i a deteciei dup masa lor specific va conduce la un spectru de mas ce furnizeaz date extrem de precise asupra maselor
moleculare respectiv informaii structurale atunci cnd este cuplat cu un RMN.
Spectrometrele de mas au devenit pivotul unei largi game de aplicaii n
analiza substanelor organice, anorganice, nanomateriale, impuriti; datri geologice, testarea medicamentelor, identificarea drogurilor; monitorizarea proceselor
din industria petrolier, analiza suprafeelor, identificarea compoziiilor unor
compui exotici, etc.
Recent spectrometria de mas, perfecionndu-se continuu datorit noilor
tehnici din micro si nanotehnologie, a condus la dezvoltri i aplicaii de neimaginat acum un deceniu: aplicaii n biologia molecular, virusologie, analiza proteinelor, gene, cromozomi, ADN; identificarea compoziiei i structurii unei largi
clase de polimeri.
n figura. 3.2 este prezentata schema de principiu a unui spectrometru de
mas de ultima generaie.
54
55
Rata de formare a ionilor este dependent de energia incident a electronilor.O mare parte din energie se consum n procese secundare de
fragmentare respectiv de ionizri secundare.
Lund n considerare toate aceste procese secundare pentru a observa
produii de descompunere un fascicul de electroni trebuie sa aib cel puin 20eV.
Optimum a fost stabilit la 70 eV pentru a se obine un randament rezonabil
de ionizare -descompunere-fragmentare.
3.5.1.2 Ionizarea chimic (CI)
Ionizarea chimic are loc prin reacii ion-molecul cu reactivi ionici formai
din gaze reactive [21]. Sursele de ioni pentru CI sunt similare ca n EI dar
opereaz la presiuni relativ mari (0.1-2 torr). Cel mai comun proces n CI este
reacia de transfer de proton. Proba mpreun cu un exces de gaz reactant (aproximativ 1000/1), alctuit dincompui de tipul R-H, sunt introduse simultan n sursa
de ionizare. Moleculele reactante sunt ionizate prin ciocniri electronice care ulterior reacioneaz cu alte molecule formnd ioni reactivi RH2+, protonnd proba:
RH + e RH + + 2e ionizare
RH + + RH RH 2+ + R* , formare ion reactiv
RH 2+ + M RH + MH + , transfer de proton
RH 2+ + M [ M + RH 2 ]+ , aditie electrofila
Agenii reactivi tipici pentru protonare sunt: CH5+, (CH3)3C+, NH4+.
Transferul de protoni are loc cu o eficien de aproape 100% iar efectul este
exoterm adic afinitatea protonilor la M este mai mare dect la RH. Exotermicitatea se reflect n energia intern a ionului MH+ care poate fi controlat prin alegerea tipului de gaz ce conin molecule RH. Cnd diferena de afinitate este mic,
cazul reactanilor cu afinitate protonic mare ( de exemplu NH3) energia intern a
ionului MH+ este mic iar fragmentrile au probabilitate mic de a avea loc. n
contrast cnd diferenele de afinitate sunt mari o fracie apreciabil de MH+
suport fragmentare. Reacii endoterme de transfer de protoni de regul nu se
observ, n astfel de cazuri are loc adiie electrofil [22]. n cazul n care presiunea
este mai mare de 2 torr ionii RH2+ sunt termalizai ( se diminueaz efectul
reaciilor endoterme) asigurndu-se astfel c M sunt ionizai prin reacii chimice i
nu prin ionizare electronic. Exemple tipice de ionizare cu diferite specii generate
de gazul reactiv prin ciocniri electronice:
Ar + + M Ar + M + , transfer de sarcina
H 3+ + M 2 H 2 + [ M H ]+ , substitutie anionica
CH 3O + M CH 3OH + [ M H ] , substitutie cationica
Cl - + M [ M + Cl ] , aditie nucleofila
Funcie de natura analitului pot fi utilizate alte reacii dect transferul de protoni sau adiia electrofil pentru a produce ioni moleculari sau cuasimoleculari.
56
3.5.1.7 MALDI (Desorpia laser prin ionizare dintr- o matrice suport a analitului)
Desorpia laser prin ionizare dintr- o matrice suport a analitului ( Matrix
assited laser desorption ionization) este una dintre cele mai promitoare metode
de desorpie a macromoleculelor sintetice i biologice [26, 27]. Polimerul este
dizolvat ntr-un solvent convenabil ales i mixat cu o soluie a unei matrici ntr-un
raport de 1:100-1:50.000. Ageni auxiliari de ionizare (sruri de ioni metalici) pot
fi adugai. O pictur de ordinul 1-2 l de mixtur este depus pe suprafaa intei
(figura 3.4) care se solidific fie prin evaporare fie prin ngheare. inta este
iradiat de un fasciul laser pulsat UV ( N2, 237nm) sau IR ( CO2, 10,6m). Prin
iradiere matricea ce conine analitul se ionizeaz conducnd la reacii de
protonare, deprotonare sau ionul metalic se ataeaz moleculei. Macroionii
formai se desorb pentru fi transferai n analizorul de mas [28, 29]. MALDI este
cea mai senzitiv metod de desorpie-ionizare a probelor ce pot avea concentraii
de ordinul picomoli atingnd limita de femtomoli. Ionii moleculari rezultai pot
atinge mase de ordinul 50000 Da iar ioni cu sarcini multiple sunt coprodui n
abunden mare. O diluie mare conduce la formarea de clusteri de analit ceea ce
complic atribuirea maselor moleculare. Matricile utilizate n MALDI sunt de
regul compui organici. n MALDI-UV matricile cele mai utilizate sunt: acid
2,5-dihidroxibenzoic (DHB), acid HABA, 2-4-hidroxifenilazobenzoic, acizi
cianocinamici.
Mecanismul desorpie-ionizare.
Macromoleculele nu sunt direct energizate prin iradiere; radiaia laser este
adsorbit de matrice ce distruge local structura evapornd-o. Formarea local de
vapori ntr-o structur solid creeaz un gaz supracomprimat n care au loc reacii
de transfer de sarcin cu moleculele de analit ( n principal transfer de H+ sau ioni
de metal) [28].
Expansiunea gazului transport ionii de analit spre suprafa n faz
gazoas cu posibile alte reacii de ionizare. Ciocnirile cu alte molecule ale matricii
din interiorul gazului ( plasma matricii) disip cea mai mare parte din energia
intern a ionilor de analit (figura 3.6)
MALDI este n prezent metoda de ionizare utilizat frecvent pentru analiza
compoziiei, gruprilor terminale i a distribuiei maselor moleculare pentru polimerii sintetici, biopolimeri. Din metoda MALDI a derivat o nou metod de procesare a polimerilor/ biopolimerilor de transport i acoperire a diferitelor substraturi sau de medicamente respectiv funcionalizare: MAPLE- evaporare laser
pulsat din matrici solide sau lichide [30].
Metoda MAPLE este pe larg utilizat n laboratoarele din Institutul Naional
de Fizica Laserilor Plasma i Radiaii la studiul transferurilor de biopolimeri i a
administrrii dirijate a medicamentelor ( Contract CEEX- Administrarea dirijat a
medicamentelor prin metoda MAPLE) n cooperare cu Institutul P.Poni Iai i Universitatea din Bucureti C.C 3Nano-SAE [31].
58
Figura 3.7-ESI, formarea picturilor ncrcate prin electropulverizare n prezena unui gaz pulverizator (a). ntre capilar i
contraelectrod es aplic un potenial de ordinul 3-4kV. Evaporarea crete densitatea de sarcin pe pictur ceea ce conduce la
fragmentarea acestei (forele de repulsie electrostatice devin mai
mari det tensiunea superficial), (b).
n prezent aceast metod se folosete numai n spectrometrele de mas pentru separri izotopice sau pentru determinri de molecule cu mase moleculare de
ordinul 10-100 Da.
Figura 3.8- Selectarea i colimarea fasciculelor de ioni n cmpuri electrostatice (a); principiul detectorului cu timp de zbor
t=
1.5m
2i(15000V )
t
mi
= 2eEl S i
Zi
ld
3.1b
ral cei mai muli ioni au sarcin +1 prin urmare ei vor fi deviai proporional cu
masa lor.
Deviaia unui ion de sarcin q i mas M cu viteza V n cmp magnetic, B,
pentru un sector circular de raz R i lungime l este dat de relaia:
lB
2
M
qV
3. 2
R=
M
M
3.3
unde M este masa ionului detectat i M este cea mai mic diferen care poate fi
pus n eviden atunci cnd se msoar masa M . Rezoluia spectrometrelor de
mas variaza n limite largi, de la cteva uniti pentru aparatele cu joas rezoluie,
la 10 6 pentru cele de nalt i foarte nalt rezoluie. Aparatele uzuale, produse in
serie, se nscriu de obicei in clasa aparatelor de rezoluie medie R=100 500 i a
celor de rezoluie nalte R=1000 20000.
Pentru sectorul circular din figura 3.9 rezoluia este dependent de deviaia
n cmp mai precis este din rezoluia deviaiei.
Luminozitatea aparatului reprezint fracia din ionii produi de surs, cu
un m/q dat, care ajung pe detector. Cu ct un spectrometru de mas este mai luminos, cu att sensibilitatea lui in domeniu pentru determinarea abundeneelor izotopice va fi mai mare. Pentru unele spectrometre de masa aceste sensibiliti pot fi
foarte ridicate pn la 10-8 pri dintr-un amestec de ioni.
Detecia ionilor A i C care au fost deflectai spre perei se realizeaz printro variaie continu a cmpului magnetic de la valori mici la cmpuri intense. n acest mod se pot produce analize pentru un spectru larg de ioni.
Spectrometrele se calibreaz dup masa ctorva atomi cunoscui dar n special dup masa 12C.
63
n trapele ionice de tip Penning (figura 3.10b) ionii sunt separai prin deplasarea lor n camp electric simultan cu meninerea ntr-un spaiu definit sub
aciunea unui cmp magentic [41]
Figura 3.10- Trape Paul cuadrupolare (a) Trape Penning axiale(b), Trape Paul geometrie
hiperbolic uniaxial (c)
3.5.4 Detecia
Cuca Faraday
Cel mai simplu detector de sarcini este cuca Faraday[42]. Cnd ionii ciocnesc pereii metalici sarcina lor este neutralizat de ctre electroni (figura 3.11 ).
Un curent de electroni este detectat n firul metalic care poate fi amplificat i
nregistrat. Cuca Faraday este o incint din metal proiectat s captureze sarcinile
electrice n vid.
Numar ioni, N I
=
t
e
3.4
unde N este numrul de ioni observai la timpul t (sec), I curentul n amperi iar e ,
sarcina elementar (1.60 10-19 C). Astfel un curent de 1nA corespunde la aproximativ 6x109 ioni ce lovesc cuca Faraday. Similar, cuca Faraday poate lucra ca
un detector de electroni. Ea nu este sensibil la cureni de ordinul pA sau echivalent la fascicule de ioni slabe ducnd la sensibiliti sczute pentru izotopi. Din acest motiv ele s-au nlocuit cu multiplicatori electronici construii pe principiul
emisiei secundare i multiplicat pe dinode.
Multiplicatoare de electroni.
MCP- multiplicatoare planare multicanal (figura 3.12).
Plcile colectoare cu microcanale
sunt acoperite cu straturi de fosfor
( emisie de fotoni) sau de PbO
pentru emisie secundar de electroni. La diferene de potenial de
ordinul 500V electronii secundari
emii se multiplic n avalan pe
fiecare plac succesiv. Unghiul
de deschidere al anodului i numarul de plci conduc la sensibiliti
de ordinul 106 electroni per ion inFigura 3.12- MCP, electronii generai de ioni se
cident [43, 44]
multiplic prin emisii secundare pe catozii din microcanalele plcilor aflate la poteniale diferite
66
Figura 3.116-a)
fragmentriii Cl2.
Spectroograma
Cl2,
b)
Detaliu
al
d mas al compuilor
c
oorganici
3.6..2 Spectrul de
n aceast seciune ne
n vom ocuppa de modul de fragmentare a moleculelor
f
mune n
orgganice, mecaanismele de fragmentare
pentru ctevva substane organice com
ved
derea neleggerii metodellor de interprretare.
3.6.2.1 Origineea fragmentrii, formareaa ionilor molleculari
Cnd o substan
s
orgganic vapoorizat trece n camera de ionizare datorit
e
se formeaz iooni moleculari pozitivi nootai cu M+ sau M+*
cioccnirilor cu electronii
pen
ntru a pune n
n eviden existena unuui electron neemperecheaat (radical ion
nic).
Fragmenttarea are locc datorit fapptului c ionnii moleculaari nu sunt stabili
s
i
r n fragm
mente molecu
ulare mai m
mici. Cel maii simplu cazz este cnd frragmense rup
telee rezultate su
unt un ion i
un radicall liber (un atom
a
sau un grup de atoomi care
con
nin un electrron nempereecheat) :
Radicalull liber nu vaa produce o linie
l
pe specctrul de mas acesta fiin
nd elimiI
X+ va fi deflectat de
d analizor pproducnd o linie pe
nat de sistemull de vidare. Ionul
gram. Toatte tipurile ii modurile de
d fragmentaare vor fi suurprinse ca un
u fenodiag
men
n global pee diagrama spectrului
s
dee mas. Penttru exemplifficare este prezentat
p
pen
ntanul ca un studiu de caaz [45].
ograma este diferit fa de cea a ellementelor unde
u
fieSe observv ca spectro
nui izotop. n cazul com
mpuilor orrganici fiecaare linie
caree linie coreespundea un
reprezint un frragment difeerit produs cnd ionul moolecular s-a ffragmentat.
m
i linia
l
de baz.
Linnia ionului molecular
Pen
ntanul-Cel mai
m greu ion
n ce a trecut prin analizoorul de mas i corespunnde linia
de m/z=72
m
sau linia ionului molecular.. Cea mai nnalt linie la m/z=43 estee numit
67
m
s-a eliminat
e
prin sistemul de vidare a speectrometrulu
ui.
undde radicalul metilic
Linia m/zz=43 poate fi
f analizat nn acelai mo
od: Ionul ideentificat este alcatuit
n 3 atomi de carbon i 7 hidrogeni
h
iarr reacia de fragmentare
f
din
a ionului molecular
estee:
rad
dicalul etileniic fiind la rin
ndul su elim
minat din sisstem.
Linia m/zz=29 corespu
unde tipic unnui ion etilicc, [CH3CH2]]+:
Celelalte linii asociatte celor prinncipale sunt mai
m greu dee analizat i rezolvat
oarece maselle molecularre sunt cu pieerderi de 1 sau 2 atomi de
d hidrogen.
deo
Pen
ntanona
Un alt cazz interesant este cel al peentanonei (ppentan-3-onaa).
Figura
a 3.18-Spectrull de mas al pentanonei
De notat c fragmenttarea are locc pe legturiile cele mai slabe din sttructur.
s produs pe
p gruparea metil din poozitia 2 i nu
u pe cea
Prinn urmare fraagmentarea s-a
din
n lanul princcipal.
O]+
Ionnii acil [RCO
Ionii cu sarcini
s
pozitiive pe grupaarea carbonil C=O sunt reelativ stabilii. Pentru
a
vom
m considera ccazul spectrrului de mass a unor keetone, 3a exxemplifica aceasta
pen
ntanona din figura 3.18. Se observv c la m/zz=57, coresppunde liniei ionului
[CH
H3CH2CO]+. Exist o gaam variat de
d alte exem
mple ce demoonstreaz exttrastabilitaatea ionilor pozitivi.
p
69
arat clar diferenele dintre cei doi compui liniile 43, 57 i 71 vor da pe deplin
diferena dintre ele: liniile 43 i 71 lipsesc n 3-pentanon iar 57 lipsete n 2
pentanona. De notat c exist o linie la m/z=58 de inlime mic n 2-pentanon
ns aceasta este datorat rearanjamentelor moleculare.
Determinarea masei moleculare din linia ionului molecular (M+)
Masa moleculara a unui compus poate fi determinat din analiza liniei ionului molecular rezultat din ionizarea acestuia sub aciunea ciocnirilor electronice
din camera de ionizare. Ionul molecular este fie de tipul M+ sau M+* adic un ion
molecular cu un electron nemperecheat ( o jumtate din electronii iniiali au fost
eliminai n procesul de ionizare). Masa ionului molecular reprezint masa
molecular a moleculei. De exemplu masa pentanului este 72 ca i cea a ionului
su molecular (figura 3.17), presupunnd c sarcina este unitar iar prezena izotopilor (13C) genereaz o linie adiacent ) linia M+1 adiacent cu nlime mult mai
mic.
Pentru a obine valoarea masei moleculare cu precizie este necesar a se
cunoate cu acuratee valorile maselor atomice ale izotopilor identificate cu spectrometre de mas de nalt rezoluie:
Izotop
Masa
Masa
numeric real
Cu noile date despre masa exact cu 4
1
H
1
1.0078
zecimale ale atomilor se pot calcula cu preci12
C
12
12.0000
zie masele moleculare a oricrei substane 14
N
14
14.0031
chimice repectiv ale polimerilor.
16
O
70
16
15.9949
Exemple:
Compus
etilena
propena
etanal
formula
chimica
C2H2
C3H8
CH3CHO
Masa moleculara
26
44
44
Prin urmare probabilitatea este 2/100 de gsi crbonul 13 n compus iar raportul nlimilot liniilor ar fi de 98/2. Pentru ali compui cu 2 izotopi se poate
considera i linia M+2. n cazul carbonului ponderea lui 13C este de 1 la 10000 iar
14
C are o pondere nesemnificativ
3.6.2.5 Utilizarea nlimilor liniilor la predicia numrului de atomi de carbon
Numr mic de atomi de carbon: dac se msoar nlimea liniei M+1ca
procent din nalimea liniei M aceasta da numrul de atomi de carbon n compus.
De exemplu pentru un compus cu doi atomi de carbon nlimea liniei M+1 este
de 2% din nlimea liniei M a ionului molecular. Similar pentru un compus cu 3
atomi de carbon vom avea 3% din M pentru linia M+1. n cazul moleculelor cu
numr mare de atomi proporia de 13C nu mai poate fi considerat de 1% , iar raportul de 2/98 trebuie considerat la 1.11% valoarea real a procentului de izotopi
existent n natur. Astfel pentru un compus cu 5 carboni n compoziie va avea
5.55 (5x1.11) molecule ce vor conine 1 izotop 13C la fiecare 94.45 ce conin numai atomi de 12C. Raportul nlimilor celor 2 linii 5.55/94.45 conduce la un procent de 5.9% ceea ce ar arta c n compus sunt 6 atomi de carbon ceea ce pentru
molecule mari este un rezultat eronat.
71
72
73
Figura 3.26- Spectre de mas cu metoda MALDI-TOF: 1. Polietilen glicol, punerea n eviden a
posibilitilor de determinare a momentelor distribuiei maselor 2. Modificarea chimic a
gruprilor terminale a PP atactice i sindiotactice, rezolvarea distribuiei de mase respectiv a
structurii ( prof. W.Wallace, Polymer Div, Mat Science and Eng. Materials, National Institute
Science and Technology, NIST,. SUA)
74
75
Ma
asa moleculaar
Masa mo
olecular (M
M) a unei suubstane estee masa unei molecule din
d acea
subbstan raporrtat la unitatea atomic de mas, u.a.m, egal cu 1/12 din masa
atom
mului de carrbon C12. Aceasta este ddistinct fa de masa m
molecular reelativ a
uneei molecule care
c
este rap
portul dintree masa molecculei la 1/122 din masa carbonuc
lui 12 i este unn numr adim
mensional nootat cu Mr.
Un Daltoon (Da)- estee 1/12 din masa nuclidullui de 12C saau n uniti de
d mas
-27
e
1,66056655 x 10 . Utilizat cuu precdere n fizica nuclear a
inteernaionale este
fostt pe larg inttrodus n liteeratura biochhimic faciliitnd exprim
marea maselo
or moleculaare ale biopo
olimerilor [448]
Molul se refer la maasa echivalennt a unei suubstane egall cu masa nuumeric
m
Pentru substaane atomicee termenul este
e
de mas atomic ( 1 atom
a moleculei.
12
graam de C=122 grame sau de Oxigen aatomic este de 16 gramee). Un mol de
d hidrogen
n este 2 gram
me sau de oxigen 32 gram
me, un mol de
d glucoz este 180 g.
Detalii assupra termin
nologiei utilizzrii acestorr termeni se gsesc
g
n normele i
omandrile IUPAC
I
(Maanual of Sym
mbols and Teerminology ffor Physicocchemical
reco
Quaantities and Units, 1979, Pergamon,, Oxford) [49
9]
3.8 Probleme i
exemple
1. Un
U gaz coniine numai elementele dinn urmtoareaa list:
1
H 1.0078
12
C 12.0000
14
N 14.0031
16
O 15.9949
Linnia ionului molecular
m
a gazului estee m/z = 28.00312 determ
minat cu unn SM de
nallt rezoluie. Identificaii tipul de gazz
Dinn combinaiaa dintre atom
mi se observv c pot fi 3 tipuri de gaze cu massa aproxim
mativ 28: N2, CO i C2H4. Calculnd cu acurateee:
28.0062
N2
27.9949
CO
C2H4 28.0312
iar rspunsul esste: C2H4.
S
ul Thomson
2. Spectrometru
J.J Tomooson a fost primul care a inventat sppectrograful i metoda dee de deminare a a maselor
m
unoor izotopi. D
Dispozitivul utilizat
u
de J.J.
J Thomson
n pentru
term
deteerminarea maselor
m
atom
mice este schhiat n fig. 3.28a. Un ballon, prevzu
ut cu doi
elecctrozi, are loc
l o descaarcare electriic. Sarcinille rezultate din descrccarea n
spaaiul anod (A
A), catod (C
C, un canal ngust) trec prin dou plci plan--paralele
con
nductoare PP
P pe care see aplic un cmp
c
electricc uniform, iaar cu un elecctromagnet NS se obtinne un cmp de
d inducie B constant. Vectorul B este paralel pe vec76
torul cmp electric. Fasciculul de ioni, colimat prin catodul C traverseaz cele
dou cmpuri, suprapuse ajung pe un ecran fluorescent (D) sau placa detectoare.
Cele doua cmpuri fiind paralele, forele care acioneaz asupra ionilor
(Fe=qE si FL=q(v x B)) sunt orientate dup dou axe perpendiculare ntre ele.
Ca urmare, ionii de sarcin specific q/m, cu viteze iniiale v diferite, vor
ajunge pe ecranul D distribuindu-se pe un arc de parabol cu vrful n originea
axelor de coordonate, punct de pe ecran n care ajunge fasciculul n lipsa cmpurilor. Dac fasciculul de ioni conine mai muli izotopi, ionii respectivi avnd
aceeai sarcin, pe placa detectoare apare cte o parabol pentru fiecare izotop.
Ansamblul de parabole constituie un spectru de mas. S se demonstreze c
ntr-un set de cmpuri perpendiculare E-B traiectoria este o parabol i s se estimeze rezoluia funcie de parametrii experimentali (distana ecran condensator de
accelerare)
Not: Aceasta metod permite obtinerea unor parabole foarte fine, separate printrun interval destul de mare. Sensibilitatea metodei este ns mic, deoarece se
lucreaz cu fascicule paralele, ceea ce reduce mult intensitatea urmelor. Cu toate
acestea, metoda parabolelor a dat rezultate foarte importante. Cu metoda parabolelor Thomson identific pentru prima dat izotopii de He.
3.Spectrometrul de mas Aston
Primul spectrograf de masa perfecionat mult n comparaie cu metoda parabolelor a lui Thomson, a fost construit de F.W. Aston (1919) i utilizat sistematic
la studiul izotopilor diferitelor elemente. Acest dispozitiv focalizeaz ioni care au
practic aceeai direcie dar viteze diferite. Pentru deviaia fasciculului de ioni se
folosesc un cimp electric i unul magnetic, reciproc perpendiculare.
Deviaiile sunt n acelai plan, dar de sens opus. n anumite condiii, deviaiile se compenseaz astfel nct ionii de aceeai sarcin specific i de viteze diferite, dei sunt deviai diferit, sunt focalizai n acelai punct, pe detector. Schema
de principiu a spectrografului Aston este prezentata in fig. 3.28b. Ionii pozitivi
sunt trecui printr-un sistem de fante (D1, D2 etc.) obtinndu-se astfel un fascicul
paralel colimat cuasiparalel. Direcia vitezei ionilor fiind definit, este suficient o
focalizare a vitezelor.
Dac notm cu U diferena de potenial de accelerare a ionilor de mas M i
cu viteza v n sistemul deflector, avem o deviaie = lE/2U.
Pentru a limita abaterea unghiului se interpune o fant D cu o deschidere
foarte mic. Fasciculul de ioni de mas M i vitez v1 ce iese prin fanta D sunt
deviai n sectorul magnetic cu unghiul dat de expresia 2.2.
Ionii cu aceeasi sarcina specifica q/M dar cu v2>v1 vor fi deviati cu un unghi
mai mare, +d, iar in cimpul magnetic vor descrie un arc de cerc cu o raz mai
mic R2=Mv2/qB. Pentru a se ntlni n acelai punct A la o distan r este necesar
ca deviaia de unghi pe lungimea L+r s fie egal cu deviaia de unghi la
distana r:
( L + r ) d = rd
77
apar urmtoarele linii la m/z : 23u, 35u (75%) i 37u (25%). ntr-un alt tip de
spectrometru EI-SM apar numai linile 35u (75%) i 37u (25%).
Artai c:
Primul tip de spectrometru permite separarea ambelor tipuri de sarcini, sectorul de separare fiind liniar.
Sodiul este monoizotopic
Abundena izotopilor de Cl este n raport de 1/3.
6. ntrebri i probleme
1. Care este principiul de baz a spectrometriei de mas?
2. Care sunt componentele de baz ale unui spectrometru de mas
3. Ce semnificaie are raportul m/z sau m/q?
4. Cum este definit un spectru de mas?
5. Atribuii urmtorii termeni la un spectru de mas obinut prin ionizare
electronic (EI): linia( picul de baz), ionul molecular, fragmentele ionului molecular. Identificai compusul
molecular.
6. Care este unitatea pentru masa atomic?. Calculai masa molecular a unei molecule simple n uniti de kilograme
7. Care este domeniul de presiuni la care funcioneaz un spectrometru de
mas
8. Definii termenul de izotop. Definii numrul de mas. Cum se noteaz
numrul de mas a unui izotop?
9. Definii abundena izotopic.
7. Studiu de caz.
Recent n [50], este prezentat un studiu extensiv asupra distribuiei maselor moleculare ale polietilenei de nalt densitate prin metoda ESIMALDI TOF. Explicai necesitatea introducerii fullerenelor (C60) ca
agent de excitaie pentru radiaia laser UV. De ce energia laser de ionizare
/desorpie depinde de raportul cp/cv al polietilenei?
79
3.9 Referine
1. William Prout, On the relation between the specific gravities of bodies in their gaseous
state and the weights of their atoms. Annals of Philosophy, 6: 321330, 1815; William
Prout Correction of a mistake in the essay on the relation between the specific gravities of bodies in their gaseous state and the weights of their atoms. Annals of Philosophy, 7: 11113, 1816
2. Siegfried Robert , The Chemical Basis for Prout's Hypothesis. Journal of Chemical
Education 33: 263 266,1956
3. Dempster, A. J. A New Method of Positive Ray Analysis, Phys. Rev. 11 (4): 316 325,
1918
4. Francis William Aston, The Distribution of Electric Force in the Crookes Dark Space,
Proceedings of the Royal Society of London. Series A 84 (573): 526-535, 1911
5. Fenn, J. B.; Mann, M.; Meng, C. K.; Wong, S. F.; Whitehouse, C. M.,Electrospray ionization for mass spectrometry of large biomolecules, Science 246: 64-71, 1989
6 .Kebarle P , A brief overview of the present status of the mechanisms involved in electrospray mass spectrometry,.Journal of mass spectrometry : JMS 35 (7): 804-17, 2000
7 .Tanaka, Koichi;,Hiroaki Waki, Yutaka Ido, Satoshi Akita, Yoshikazu Yoshida, Tamio
Yoshida, T. Matsuo ,Protein and polymer analyses up to m/z 100 000 by laser ionization time-of-flight mass spectrometry. Rapid Communications in Mass Spectrometry 2
(8): 151-153, 1988
8. Karas, M.; Bachmann, D.; Hillenkamp, F. Influence of the Wavelength in HighIrradiance Ultraviolet Laser Desorption Mass Spectrometry of Organic Molecules,.
Anal. Chem. 57: 2935-9., 1985
9. Beavis RC, Chait BT. "Matrix-assisted laser-desorption mass spectrometry using 355
nm radiation". Rapid Commun. Mass Spectrom. 3 (12): 436-9,1989.
Beavis RC, Chait BT , "Cinnamic acid derivatives as matrices for ultraviolet laser desorption mass spectrometry of proteins". Rapid Commun. Mass Spectrom. 3 (12): 4325, 1989
Strupat K, Karas M, Hillenkamp F (1991). "2,5-Dihidroxybenzoic acid: a new matrix
for laser desorption-ionization mass spectrometry.". Int. J. Mass Spectrom. Ion
Processes 72 (111): 89-102, 1991
Poon TC, Opportunities and limitations of SELDI-TOF-MS in biomedical research:
practical advices". Expert review of proteomics 4 (1): 51-65, 2007
10. Munson, M.S.B. and Field, F.H. Chemical ionisation mass spectrometry. I. General
introduction. J. Am. Chem. Soc., vol 88, 2621,1966
11. MacFarlane, R.D. and Torgerson, D.F. Californium-252 plasma desorption mass
spectroscopy. Science 191, 920-925, 1976
12. Barber, M., Bordoli, R.S., Sedgwick, R.D. and Tyler, A.N Fast atom bombardment of
solids (FAB): a new ion source for mass spectrometry. J. Chem. Soc. Chem. Commun325-327,1981
13. Bothner, B., Dong, X.F., Bibbs, L., Johnson, J.E. and Siuzdak, G. Evidence of viral
capsid dynamics using limited proteolysis and mass spectrometry. J. Biol. Chem. 273
673-676, 1998
14. Johnstone, R. A. W. and Malcolm, E. R., Muss Spectrometry for Chemists and Biochemists, 2nd ed., Cambridge University Press, Cambridge, 1996.
80
15 Hoffmann, E. de, Charette, J., and Stroobant, V, Mass Spectromehy: Principles and
Applications, Willey, Chichester, 1996
16 H Creel , Prospects for the Analysis of High Molar Mass Polymers Using MALDI Mass Spectrometry, Tends in Polym. Sci, Elsevier vol 1(11), 336-342, 1993
17. A. P. Bruins , Mass spectrometry with ion sources operating at atmospheric pressure.
81
82
Capitolul 4
4.Spectroscopia de masa cu ioni secundari (SIMS)
Bombardamentul suprafeei unei probe cu un fascicul de ioni primar urmat
de spectroscopia de mas a ionilor secundari emii constituie SIMS. Astzi, SIMS
este larg utilizat pentru analiza urmelor elementelor n materiale solide, n special
a semiconductorilor i filmelor subiri.
SIMS este printre puinele metode de a produce ioni n probele solide fr o
vaporizare prealabil. Fascicolul SIMS primar poate fi focalizat la mai puin de 1
m n diametru. Pentru microanaliza i msurarea distribuiei elementelor este necesar controlul locului de inciden de pe suprafaa probei a fascicolului primar.
n experimentele SIMS suprafaa fiind bombardat cu fascicule de ioni sau
atomi accelerai transferul de energie spre atomii de pe suprafaa intei acetia
sufer o serie de procese: emisie de fragmente, rearanjarea atomilor de pe
suprafa. Raportul m/z al cationilor sau anionilor poate fi msurat, iar spectrul
este dat de intensitatea semnalului proporional cu cantitatea fiecrei specii.
Spectrul n principal descrie structura suprafeei n aceeai msur ca i la
spectrometrele de mas convenionale cu deosebirea c era necesar injecia speciilor, ionizarea i analiza lor ulterioar.
Analiza spectrului de mas a ionilor secundari emii este funcie de adncimea de ptrundere a atomilor din fascicolul primar.
Atunci cnd rata de pulverizare este extrem de mic, analiza poate fi efectuat n timpul consumrii a mai puin de o zecime din stratul atomic. Acest mod
de mprtiere lent este numit SIMS static. Modul static implic energii mici ale
fluxurilor de ioni incideni (aprox 1KeV) respectiv densiti mici (<1 nA/cm2).
Corodarea este foarte lent ( necesit 1 or pentru a ndeprta un prim strat).
Suprafaa rmne n general intact iar datele sunt relativ uor corelabile i interpretabile n rezolvarea unor probleme implicnd ceramici, sticle, polimeri, materiale biopolimere.
Modul dinamic presupune un bombardament rapid al suprafeei cu ioni din
ce n ce mai energici (1-30KeV) pentru o investigare de adncime a suprafeei. Se
poate particulariza pe una sau mai multe specii prezente n prob i atunci se
ridic profilul concentraiei. Modul dinamic presupune fluxuri incidente mari ce
implic o rapid deteriorare a suprafeei din aceast cauz tehnica este folosit la
ridicarea profilului de adncime a suprafeei.
Modul de scanare- fasciculul baleiaz proba pentru a ridica harta distribuiei speciilor atomice. Rezoluia de scanare tipic a acestor instrumente este
de 1 micron
83
Figura 4.1-a) Principiul de emisie a ioniloe secundari sub incidena unui fascicul de
ioni,b) Modelul ciocnirilor n cascad,biparticul
Fasciculul primar ioni poate fi de Cs+, O2, O, Ar+, Ga+ cu energii 1-30KeV,
adncimea de penetrare fiind de 1-10nm. Rata de pulverizare variaz ntre 0.55nm/s depinznd de intensitatea fasciculului primar, tipul de material, orientarea
cristalului. Randamentul, definit ca numrul de atomi extrai din prob la numrul
de ioni incideni este 5-15.
Modelul ciocnirilor n cascad este cel mai potrivit pentru a descrie
procesele ce au loc la ciocnirea dintre ionii incideni i atomii de pe suprafaa
probei (figura 4.1b). Ionii incideni cedeaz energie prin multiple ciocniri biparticul spre atomii int. Atomii de pe suprafa sunt pulverizai spre exterior
sau continu prin alte ciocniri s induc n adncimea intei noi procese de ionizare
dislocnd noi atomi din reea. Adncimea de penetrare nu depete 10nm.
n suprafaa probei se produce astfel o mixtur de ioni, atomi, fotoni,
electroni ce se desorb sub vid nalt constituind astfel materialul pulverizat.
Deasemeni n suprafaa probei se induc cratere, imperfeciuni ale reelei
(dislocaii, defecte multiple), reorganizri locale de atomi. Dup bombardamentul
84
cu ioni suprafaa probei are o rugozitate tipic alctuit din motive specifice:
adncituri, creste, conuri, aglomerri de conuri.Procesul de pulverizare produce
ioni secundari cu un spectru larg de energii cinetice de translaie distincte pentru
ionii atomici respectiv moleculari. Ionii moleculari au o distribuie de energie
cinetic mai mic i relativ ngust deoarece o mare parte din energie se distribuie
pe gradele interne (vibraie, rotaie), figura 4.2
Eficiena SIM, adic fracia de atomi pulverizai care devin ionizai, este
dependent de tipul elementelor i variaz cu ordine de mrime. Eficiena de
ionizare este dependent de potenialul de ionizare pentru ioni pozitivi i de
afinitate pentru ionii negativi. n figura 4.3 sunt prezentate dou grafice pentru
eficiena de ionizare relativ funcie de potenalul de ionizare respectiv afinitatea
electronic a elementelor. Eficiena de ionizare este raportat la siliciu n matrice
de siliciu la pulverizare cu ioni de oxigen
Figura 4.3- Eficiena de ionizare funcie de potenialul de ionizare respectiv afinitatea elementelor
anomalie avnd un randament mare n toate probele. Neonul i heliul sunt n afara
tendinei de corelaie.
Aceeai comportare o prezint i corelaia dintre eficiena de ionizare
relativ funcie de afinitate ( ca referin s-a luat siliciul pulverizat cu ioni de
cesiu). n acest caz halidele I, Br, F, Cl se abat de la corelaie.
Exist o serie de factori care influeneaz eficiena ionizrii dar cele mai
importante sunt legate de oxigen care crete rata de formare de ioni pozitivi iar
cesiul pentru ionii negativi. Efectul bombardamentului cu ioni de oxigen se
datoreaz formrii de oxizi care prin ruperea legturilor se formeaz ioni pozitivi
iar oxigen datorit afinitii electronice mari favorizeaz captura de electroni.
Analiza cantitativ n SIMS utilizeaz factorii de sensibilitate relativ
definii astfel:
4.1
unde RSFE este factorul de sensivitate relativ a elementului, IE, intensitatea
ionilor secundari a elementului, IR, intensitatea ionilor secundari a elementului de
referin ( matricea sau substratul de analizat); CE, CR sunt concentraiile
elementului E respectiv a matricii sau elementului de referin R. Dac R este
majoritar reprezentnd maticea, M atunci concentraia elementului E va fi:
4.2
n analiza de urme se poate presupune c CM este constant iar factorul de
sensivitate relativ poate fi redefinit ca RSF=RSFECM, factor de sensivitate a
elementului raportat la o matrice dat. n acest caz concentraia elementului
analizat n urmele din matrice se exprim mult mai convenabil:
4.3
unde RSF i CE au aceleai uniti de msur.
Este simplu de observat c msurtorile n SIMS necesit o etalonare cu
materiale i doze cunoscute pentru evaluarea factorului RSF. Deoarece
randamentul ionic este dependent de elementul analit speciile pulverizate trebuie
analizate separat pentru a fi msurat RSF.
Implantarea ionic reprezint standarde optime pentru calibrrile din SIMS.
n principiu este posibil orice tip de implantare ionic ntr-o matrice dat.
Implantarea ionic se realizeaz la energii de 50-300KeV pe adncimi de 0.2
microni. Integrarea curentului de implantare pe perioada dat se obine doza de
material implantat ( excluderea curentului de electroni secundari din curentul total
este principala corecie de fond).
Un exemplu tipic este implantarea fosforului n siliciu (figura 4.4)
La o doz de 1015 ioni de fosfor implantat ionii secundari de fosfor emii pe
intervalul de timp 150 sec pn la formarea craterelor este de 3,68x106 . Din
msurtori de profilometrie adncimea craterului i din doza de implantare rezult
concentraia de implantare
1.35
86
10
89
Figura 4.6-Analiza compoziiei hrtiei igienice, erveele: scopul analizei este de a identifica tratamentul suprafeei a tipurilor de hrtie i tratamentul lor cu diferii aditivi, cuantificarea nivelului de C, O, N, Ca, Si, Cl. Se disting clar compui cu amoniu cuaternar i diferite tipuri de gliceride a cror compoziie arat un coninut de atomi n numr impar.O
interpretare detaliat a spectrului utiliznd librrii de date, reguli de fragmentare i analiza
de detali conduce la identificarea de aditivi ca mixturi de esteri mono i dibazici cu structuri :
CxHyC(=O)O-CH2-CH(OH)-CH2-N+(CH3)3
i
CxHyC(=O)O-CH2-CH(O(O=)CCxHy)-CH2-N+(CH3)3
unde x este o combinaie de C15(palmitat) i C17 (stearat), compui folosii ca ageni de lubrefiere
respectiv de nmuiere. Cel mai interesant caz este studiul capacitii de adsorbie, preluare
de urme, indus de aditivul poliaminoamide (PAAE). TOF- SIMS identific prin analiz
de imagine rolul gruprilor CN- din PAAE prin monitorizarea C2H- din cian la adeziune
pe fibra celulozic.
90
acest mod au putut fi caracterizai polimeri sintetici, prmind n acelai timp evaluarea distribuiei masei moleculare a unui lan oligomer intact.
n plus fragmente moleculare mari i mici au fost generate prin tehnica TOF
SIMS. Aceste fragmente ionice sunt importante pentru analiza structural a materialului. De exemplu, fragmentele indicatoare corespunznd aminoacizilor pot fi
identificate din analiza moleculelor de protein.
93
anaaliz a dispo
ozitivului SIIMS astfel nct
Figgura 4.11-Speectrometru TO
OF-SIMS
Carracteristici
adnncimea de eantionare este de 10-200 .
se obine
o
spectrrul de mas a zonei de laa suprafaa pprobei.
ceraarea de imaggini cu o rezoluie spaiaal de ordinuul micronilorr.
rezooluie nalt n mas (
of 10,0000)
deteectarea ionillor pozitivi i
negativi cuu mase mai m
mari de circaa
10,0
000 D
sen
nsibilitate anaalitic extrem
m de nalt.
95
4.4 Referine
1 R.G. Wilson, Int. J. Mass Spectrometry. Ion Proc., 143, 43, 1995
2 A. Benninghoven, F. G. Rdenauer, and H. W. Werner Secondary Ion Mass Spectrometry: Basic Concepts, Instrumental Aspects, Applications, and Trends, Ed, Wiley, New York, pp1227 .
1987
3. S. Fletcher, N. P. Lockyer and J. C. Vickerman C 60, Buckminsterfullerene - Its Impact on Biological ToF-SIMS Analysis, Surface and Interface Analysis (Special Issue on Biological Analysis) 38, 1393-1400, 2006
Referine generale TOF-SIMS:tehnici i aplicaii, pentru studii aprofundate
1. A Benninghoven,. Chemical Analysis of Inorganic and Organic Surfaces and Thin Films by
Static Time-of-Flight Secondary Ion Mass Spectrometry (ToF-SIMS), Angewandte Chemie International (in English), vol 33 #10, 1023-1043. 1994,
2.L VanVaeck, A Adriaens.and , R.Gijbels, Static Secondary Ion Mass Spectrometry: (S-SIMS)
Part 1. Methodology and Structural Interpretation, Mass Spectrometry Reviews, v. 18, p. 1-47.
1999
3. A.,Adriaens, L., VanVaeck, and F., Adams, Static Secondary Ion Mass Spectrometry (S-SIMS)
Part 2: Material Science Applications, Mass Spectrometry Reviews, v. 18, p. 48-81. 1999
4. ToF-SIMS:Surface Analysis by Mass Spectrometry, Eds John C. Vickerman and David Briggs,
IMPublications, ISBN 1-901019-03-9, UK, pp 623,2001
5. The Static SIMS Library version 4, Eds by John C. Vickerman, David Briggs and Alex Henderson, IMPublications, ISBN 0-9537848-6-X, 2007
Referine pe specificul materialelor
1. Mathez, E. A., and Mogk, D. W., Characterization of carbon compounds on a pyroxene surface from a gabbro xenolith in basalt by time-of-flight secondary ion mass
spectrometry, Amer. Min., v. 83, p. 918-924. 1998
2. Mogk, D. W., and Mathez, E. A., Carbonaceous films in midcrustal rocks from the
KTB borehole, Germany, as characterized by Time-of-Flight, Geochemistry, Geophysics, Geosystems (G3), Amer. Geophys. Union, November 13, 2000 (epublication).
3. Toporski, J., and Steele, A., Characterization of purified biomarker compounds using
time of flight secondary ion mass spectrometry (ToF-SIMS), Organic Chemistry,
v.35,7. 2004
4. V. S Smentkowski,. and S. G Ostrowski,. "Time of flight secondary ion mass spectrometry:A powerful high throughput screening tool." Rev Sci Instrum 78 (7):072215,
2007.
5. R. N. Sodhi, "Time-of-flight secondary ion mass spectrometry (TOF-SIMS):versatility
in chemical and imaging surface analysis." Analyst 129 (6): 483-7. 2004.
6. Sjovall, P., Lausmaa, J. and Johansson, B. (2004). "Mass spectrometric imaging of lipids in brain tissue." Anal Chem 76 (15): 4271-8., 2004
96
Spectroscopia EXAFS (Extended X-ray Absorption Fine Structure) consta din analiza oscilatiilor sistematice ale spectrului de absorbtie a radiatiei X, la energii superioare limitei
de absorbtie. Informatia extrasa descrie aranjamentul atomic local n jurul speciei absorbante: numarul atomilor nvecinati si natura lor chimica, distantele interatomice, gradul de
dezordine structurala.
Metoda EXAFS s-a extins puternic ndeosebi dupa anii 80, odata cu dezvoltarea facilitatilor de utilizare a radiatiei de sincrotron. n prezent, metoda este aplicata n domenii din
cele mai diverse, ca: studiul semiconductorilor si al materialelor complexe (sisteme multicomponente), cataliza, biochimie, studiul materialelor la presiuni nalte (cu posibilitatea
descrierii n timpi reali a tranzitiilor de faza), geologie etc. n conditii de incidenta razanta
a radiatiei, metoda este utilizata n studiul suprafetelor (mecanisme de adsorbtie si chemosorbtie, procese de corodare/oxidare etc.).
n raport cu tehnicile traditionale de difractie de raze X, avantajele metodei EXAFS sunt:
(i) specifici-tatea atomica, constnd din descrierea separata a structurii locale n jurul fiecarei specii atomice; (ii) sensi-bilitatea ridicata, permitnd abordarea sistemelor de dilutie
nalta (ex. metale fin dispersate n matrici usoare); (iii) aplicabilitatea metodei, cu acelasi
formalism matematic, la studiul materialelor cristaline si amorfe, indiferent de gradul de
ordonare structurala la distanta.
Facilitati
n INCDFM exista o experienta ndelungata n utilizarea spectroscopiilor EXAFS/XANES.
Cele doua metode au fost aplicate n studiul unei varietati largi de materiale: metalofullerene, aliaje cvasi-cristaline (icosaedrale) Al-Cu-Fe si Al-Mn-RE (RE = pamnturi rare),
aliaje si compusi intermetalici, catalizatori metalici etc. Datele primare de absorbtie au
fost achizitionate la surse de radiatie sincrotron, prin aplicatii de timpi de utilizare sau n
cadrul unor Conventii de cooperare (Beijing Synchrotron Radiation Facility). Analiza datelor a fost efectuata n INCDFM, cu programe de calcul de conceptie proprie.
Descrierea metodei
Atenuarea prin absorbtie fotoelectrica a radiatiei X este descrisa de legea It =
I0exp(-(E)t), unde I0 si It sunt intensitatile fasciculului incident si respectiv transmis, t
este grosimea stratului absorbant, iar (E) este coeficientul liniar de absorbtie, depinznd
de energia E a fotonilor X si de natura materialului absorbant. n general, coeficientul de
absorbtie variaza monoton cu energia radiatiei incidente. Aceasta comportare este ntrerupta n vecinatatea energiilor de legatura Eb ale electronilor de pe paturi atomice adnci
(K, L, M,), unde coeficientul (E) manifesta un salt, corespunznd cresterii absorbtiei
prin efect fotoelectric. Discontinuitatile respective reprezinta limitele de absorbtie, denumite K, L1, L2, L3, , n functie de patura atomica pe care a avut loc fotoabsorbtia (1s1/2,
2s1/2, 2p1/2, 2p3/2, ).
La energii superioare limitei, spectrul de absorbtie manifesta doua regiuni distincte:
structura fina a limitei sau XANES (X-ray Absorption Near-Edge Structure), pe un interval
de 10-15 eV deasupra limitei, si structura extinsa a limitei sau EXAFS (Extended X-ray
Absorption Fine Structure), dincolo de 30-50 eV deasupra limitei, pna la 800-1000 eV.
97
Intervalul de energii XA
ANES coresp
punde tranzittiilor fotoelecttronilor, de pe patura
atom
mica pe care a avut loc fo
otoabsorbtia, pe starile neo
ocupate, deassupra nivelulu
ui Fermi,
si avnd
a
simetria
a permisa de regulile de tranzitie
t
dipolara (?l = 1; ?j = 0,1). Intervalul
resp
pectiv reflecta
a astfel densitatea de stari electronice, putnd fi core
elat cu starea
a chimica
a attomilor absorbanti.
n domeniul EXAFS, fo
otoelectronii e
extrasi au en
nergii suficien
nt de mari (E
E-E0 > 50
eV)), pentru a fi tratati
t
n apro
oximatia electronilor liberi. Fotoelectron
nii calatoresc
c n jurul
atom
mului absorba
ant/emitator si
s se mprastiie elastic pe atomii
a
nvecin
nati (Fig.1). Cu
C o anumita
a probabilitate
e, ei sunt mp
prastiati napo
oi, spre atom
mul absorbant central. Starrea finala
a fo
otoelectronulu
ui este descrrisa de supra
apunerea dinttre unda prim
mara, calatoa
are spre
atom
mii vecini, si undele secu
undare, mpra
astiate pe acestia din urm
ma. Interferen
nta undei
prim
mare cu unde
ele retrompra
astiate module
eaza starea finala,
f
avnd cca efect un sistem de
maxxime si minim
me n spectrul de absorbtie
e (Fig.1a), ca
are defineste structura extinsa a limite
ei (EXAFS). Oscilatiile
O
EXA
AFS reflecta aranjamentul structural n
n jurul atomulu
ui absorban
nt: amplitudinea oscilatiilor este corela
ata cu numarrul atomilor vecini,
v
iar fre
ecventele
EXA
AFS cu disttantele interattomice (atom absorbant vecin mprasttietor).
n intervalu
ul EXAFS, sp
pectrul de ab
bsorbtie (E) este dat de suma
s
a doua
a componen
nte: una mono
otona (0(E)),, corespunzn
nd absorbtiei pe
p atomul izo
olat (fara nici o nvecinare
e structurala)), si o compon
nenta oscilato
orie 0(E)?(E)), descriind effectul EXAFS. Functia
de modelare (functia EXAFS
S), definita priin raportul ce
elor doua com
mponente, co
ontine inform
matia structurrala.
Dependen
nta functiei EX
XAFS de vecttorul de unda
a al fotoelectro
onilor (k = [(2
2m/h)(EE0)]], unde E=h? este energia fotonilor, E0 = energia limitei, iar E-E
E0 = energia cinetica
c
a
foto
oelectronilor) este
e
descrisa
a prin suma:
, (1)
luata pe
este paturile de
d coordinatie ale atomullui absorbantt. Nj este num
marul de
atom
mi pe suprafa
ata paturii j de
e coordinatie (vecinii de ordin j), situati la distanta Rj de atomull absorbant, iar
i s j este fluctuatia patrratica medie a distantelor Rj n jurul un
nei valori
med
dii (prin efec
cte de dezo
ordine topolog
gica/termica). Fj(k) este amplitudinea
a de retromprastiere a electronilor pe
p vecinii de o
ordin j, iar j j(kk) este defaza
ajul functiei de
e unda a
foto
oelectronilor n
n procesul de
e retromprasttiere. l (k) este drumul liber mediu al ele
ectronilor
ntre
e ciocnirile in
nelastice, ca o masura a p
parcursului fo
otoelectronilorr n jurul atom
mului absorb
bant. Factoru
ul exp(-2Rj/l (kk)) descrie piierderile de amplitudine
a
EX
XAFS prin ciocniri inelasstice si atenua
area contribu
utiilor la EXAF
FS din partea paturilor supe
erioare de coordinatie
(la distante
d
Rj re
elativ mari). Acest
A
factor de
etermina n mare
m
parte ca
aracterul locall al informattiei EXAFS, re
estrnse la nvecinarea imediata a atom
mului absorba
ant (primele 3-4
3 paturi
de coordinatie). Factorul exp
p(-2s jk), de tip Debye-W
Waller, este de
easemenea un
u factor
de diminuare
EXAFS si ma
d
a amplitudinilor
a
asoara gradul de dezordine a structurii locale.
Principiu
ul metodei EX
XAFS consta d
din extragere
ea parametrilo
or structurali Nj, Rj, s j,
prin
n fitarea neliniiara a sumei (1), n conditii de cunoaste
ere prealabila
a a functiilor Fj(k), j j(k)
si l (k).
98
An
naliza datelor
d
Etapele principale ale analize
ei EXAFS sunt exemplificatte n Fig.1, pe
entru spectrul de absorb
btie al unei fo
olii Ni, masura
at la limita Ni K (E0 = 8333 eV). Ele consstau din:
Extragerea fondului
f
de ab
bsorbtie coresspunznd absorbtiei pe electronii mai sla
ab legati
decct Ni 1s. Fon
ndul respectivv (Fig.1a, linia
a rosie) a fostt determinat prin
p fitarea polinomiala a spectrului la energii E<E0 si extrapolarrea fitului rezu
ultat n domen
niul E>E0. Spectrul
obtiinut dupa extrragerea fondu
ului (Fig.1b) d
descrie fotoab
bsorbtia doar pe electronii Ni 1s.
Calculul func
ctiei EXAFS din
d raportul ce
elor doua com
mponente ale spectrului n domeniul EXAFS: com
mponenta osccilatorie, (E)
0(E), si com
mponenta mon
notona (absorbtia pe
mul izolat) 0(E). Absorbtia
a atomica 0(E
(E) a fost apro
oximata prin fitarea spectru
ului exatom
periimental (E), n intervalul EXAFS,
E
cu fu
unctii spline (F
Fig.1b, linia ro
osie). Functia ?(E),
calcculata din rap
portul [(E)0(E)]/0(E), a fost reprezen
ntata n Fig.1cc, n raport cu
u vectorul de
d unda k al fotoelectronu
f
lui.
Transformarrea Fourier a functiei
f
EXAF
FS. Functia k?(k) a fost tra
ansformata Fo
ourier n
rapo
ort cu distanta
a R masurata
a de la atomul absorbant Ni,
N n intervalu
ul k=1,8-13,0 -1,
und
de semnalul EXAFS
E
domin
na peste zgom
motul statistic al spectrului. Modulul tran
nsformatei Fourier
F
(Fig.1d) este o cva
asi-distributie radiala atomica, cu maxim
mele corespun
nznd paturillor de coordin
natie ale atom
milor Ni. Distan
ntele interatomice Rj din sttructura cfc a metalului au
a fost indicatte prin linii ve
erticale, mpre
euna cu nume
erele corespunzatoare de coordic
natiie (numarul atomilor vecinii la distanta Rj). Abaterea sistematica
s
a maximelor ra
adiale n
rapo
ort cu pozitiile
e Rj este un efect
e
al defaza
ajelor j (k) n expresia
e
funcctiei EXAFS (1
1).
n principiu,
p
suma (1) poate fi fitata cu un n
numar arbitrarr de mare de termeni, reprrezen
ntnd contributtiile diferitelorr paturi de coo
ordinatie la EX
XAFS. ntruct, nsa, fiecarre patura contribuie
c
cu trei
t parametri variabili (Nj, Rj, s j) n proccesul de fitare
e, fitul functiei EXAFS
cu mai
m multe patturi de coordin
natie ridica ne
erezonabil nu
umarul parametrilor de fitarre,
putnd conduce la
l instabilitati de calcul sau
u ambiguitati n
interpretare
ea rezultatelo
or. n
con
nsecinta, se prefera izolare
ea succesiva a cte unui terrmen n suma
a (1), si fitarea
a sa separa
ata cu patura
a corespunzattoare de coord
dinatie. Proce
edeul a fost e
exemplificat n
n Fig.2d,
pen
ntru prima pattura de coordinatie (vecinii cei mai apropiati) a atomilor Ni. Primul maxim
radiial a fost izola
at printr-o func
ctiefereastra
a de tip Hanning si retransfformat Fourie
er n
spa
atiul k (filtrare Fourier). Rezzultatul obtinu
ut (Fig.2c, linia
a rosie) repre
ezinta contribu
utia primeii paturi de coo
ordinatie la EXAFS (?1(k)), filtrata din sp
pectrul experiimental ?(k).
Fitul neliniar al spectrului ?1(k), avnd ca
c rezultat parametrii struccturali ai prime
ei paturi
de coordinatie:
c
n
numarul
celor mai apropiatti vecini (N1), distanta
d
pna la acestia (R
R1) si
grad
dul de dezord
dine structura
ala (s 1). Functiile F1(k), j 1(k)
(k si l (k) (asa
a-numitele sta
andarde
EXA
AFS) au fost calculate
c
n prealabil,
p
folossind subrutine
e specializate
e (codul FEFF
F, Univ.
Washington).
99
100
Figura 1a
Spectroscopia EXAFS
Extended X-ray Absorption Fine Structure)
Spectroscopia EXAFS (Extended X-ray Absorption Fine Structure)
consta din analiza oscilatiilor sistematice ale spectrului de absorbtie a
radiatiei X, la energii superioare limitei de absorbtie.
Informatia extrasa descrie aranjamentul atomic local n jurul speciei
absorbante: numarul atomilor nvecinati si natura lor chimica, distantele
interatomice, gradul de dezordine structurala
Descrierea metodei
101
102
Dep
pendenta fu
unctiei EXA
AFS de vectorul de unda
u
al fottoelectroniloor (k =
[(2m
m/h)(E-E0))], unde E este energgia fotonilor, E0 = eneergia limiteii, iar EE0 = energia cinetica
c
a fottoelectronillor) este desscrisa prin ssuma:
Analiza datelo
or
Exttragerea fon
ndului de ab
bsorbtie coreespunznd abbsorbtiei pe electronii mai
m slab
legaati dect Ni 1s. Fonduul respectiv (Fig.1a, lin
nia rosie) a ffost determinat prin
fitaarea polinom
miala a specttrului la enerrgii E<E0 si extrapolareea fitului rezzultat n
dom
meniul E>E
E0. Spectrull obtinut duupa extrageerea fonduluui (Fig.1b) descrie
foto
oabsorbtia doar
d
pe electrronii Ni 1s
103
104
b Procedeu
ul a fost exemplifica
e
at n Fig.1dd, pentru prima pattura de
coordin
natie (vecinii cei mai aapropiati) a atomilor Ni.
N Primul maxim
radial a fost izolat printr-oo functieffereastra d
de tip Hanning si
(
Foourier). Rezzultatul
retranssformat Foourier n sspatiul k (filtrare
obtinutt (Fig.1c, linia rosie) rreprezinta contributiaa primei pa
aturi de
coordin
natie la EXA
AFS (1(k)), ffiltrata din spectrul exp
perimental (k).
b Fitul neliiniar al specctrului 1(k), avnd ca rezultat
r
parrametrii stru
ucturali
ai prim
mei paturi de
d coordinaatie: numarrul celor maai apropiatti vecini
(N1), diistanta pnaa la acestia (R1)
(
si grad
dul de dezorrdine structu
urala (s
1). Fun
nctiile F1(k)), j 1(k) si l (k) (asa-nu
umitele stan
ndarde EXA
AFS) au
fost calculate n prrealabil, foloosind subru
utine speciallizate (codull FEFF,
W
).
Univ. Washington)
105