BIOCHIMIE ŞI BIOLOGIE MOLECULARĂ

An de studii : II, semestrul 3

Nr.ore curs : 14
Nr.ore lucrări practice : 28
Nr.credite : 3
Forma de examinare: examen
Cod: 0401020106

Obiective
- La curs: cursul urmăreşte însuşirea de către studenţi a noţiunilor şi proceselor
fundamentale legate de metabolismul proteic şi de cel al acizilor nucleici şi legătura acestora
cu noţiuni generale de biologie moleculară.. Este prezentat modul de organizare structurală a
acizilor nucleici şi tehnici utilizate în biologia moleculară pentru determinarea acestei
structuri; biosinteza acizilor nucleici şi dereglări în biosinteză, amplificarea fragmentelor de
ADN, hibridizarea acizilor nucleici; biosinteza şi catabolismul aminoacizilor şi proteinelor;
biosinteza şi catabolismul hemului; prezentarea proteinelor specifice laptelui.
- La lucrările practice: aprofundarea metodelor analiticede separare a
biomoleculelor (cromatografice,electroforetice) sau de dozare (spectrofotometrice,
volumetrice etc.) tipice pentru un laborator biochimic care îi permit sa facă determinări
calitative şi cantitative ale proteinelor, aminoacizilor, acizilor nucleici şi a unor metaboliţi ai
acestora.

CURS
Determinarea structurii primare a ADN-ului: fragmentarea ADN-ului, stabilirea hărţii
fizice a ADN-ului; clonarea şi amplificarea fragmentelor de ADN; determinarea
secvenţei bazelor din fragmentele clonate (secvenţializarea ADN-lui recombinat)
Biosinteza acizilor nucleici: biosinteza nucleotidelor ; biosinteza ADN; mecanismul
semiconservativ de replicare; mutageneza; transgeneza, animale transgenice. Sinteza
enzimatică şi amplificarea fragmentelor de ADN (tehnica PCR). Biosinteza ARN
Catabolismul acizilor nucleici ADN, ARN. Catabolismul nucleotidelor
Hibridizarea acizilor nucleici
Biosinteza proteinelor: Biosinteza aminoacizilor în organismele animale. Codul
genetic Mecanismul de biosinteză a proteinelor. Reglarea expresiei genelor
(biosintezei proteice) la eucariote
Catabolismul proteinelor. Digestia, absorbţia şi vehicularea protidelor. Catabolizarea
aminoacizilor: căi generale si specificice de catabolizare a aminoacizilor; dereglări în
metabolismul aminoacizilor. Ciclul ureogenetic
Metabolismul hemului
Proteinele laptelui: prezentarea generală a proteinelor specifice laptelui - cazeine,
proteinele din lactoser şi sinteza acestora. Influenţa polimorfismului genetic asupra
compoziţiei în proteine a laptelui la diverse specii

LUCRĂRI PRACTICE
1. Norme de protecţia muncii.Organizarea laboratorului. Prezentarea lucrărilor practice
ce se vor efectua în laborator.
2. Hidroliza nucleoproteinelor şi identificarea componentelor acizilor nucleici.
3. Dozarea acizilor nucleici prin metoda Spirin.
4. Obţinerea curbelor etalon necesare dozarii proteinelor prin două metode diferite -
metoda biuretului şi metoda Bradford
5. Tehnici de extracţie a proteinelor. Extracţia şi dozarea proteinelor din ţesut hepatic
prin metoda biuretului.
6. Dozarea proteinelor totale din lapte prin metoda Bradford.
7. Prezentarea tehnicilor de laborator utilizate în analiza proteinelor din diverse medii
biologice (tehnici utilizate în proteomică - cromatografie, electoforeză)
8. Hidroliza proteinelor si analiza aminoacizilor prin cromatografie pe strat subtire.
9. Analiza aminoacizilor prin cromatografie in faza lichida de inalta performanta
(HPLC).
10. Identificarea proteinelor din urina. Identificarea pigmentilor biliari.
11. Dozarea ureei din sânge şi a azotului aminoamoniacal din urină.
12. Dozarea cazeinelor din lapte.
13. Dozarea acidului uric din sânge. Dozarea creatininei din urină.
14. Recuperari. Colocviu.

Titularul cursului
Conf. dr. Sanda ANDREI