Polarimetria este tehnica de dozare a soluţiilor de substante optic active.
Aceste substanţe (solide sau lichide) au proprietatea de a roti planul de polarizare
al luminii cu un anumit unghi a datorita prezentei unuia sau mai multor atomi de carbon asimetrici. Substanţele care rotesc planul de polarizare spre dreapta (în sens invers trigonometric) se numesc dextrogire (glucoza, lactoza, progesteron), iar cele care rotesc planul de polarizare spre stânga (în sens trigonometric) se numesc levogire (fructoza, colesterolul). Pentru soluţii lichide, unghiul de rotaţie al planului de polarizare a depinde de natura substanţei optic active, de grosimea stratului străbătut l (dm) şi de concentraţia lor c (%), după relaţia lui Biot: Polarimetrele sunt folosite pentru determinarea glucozei si albuminei din urina, precum si pentru dozarea glucozei din lichidul cefalorahidian, ser sanguin, etc.
1. Unda luminoasă
În conformitate cu teoria ondulatorie luminii, raza luminoasă este o undă
electromagnetică. Iniţiată de o perturbaţie electrică într-un punct, raza luminoasă, reprezentată oscilaţia transversală, se propagă cu viteza luminii prin variaţii în fază ale câmpului electric şi magnetic a căror vectori intensitate sunt perpendiculari între ei şi pe direcţia de propagare
Fenomenul luminos, datorat oscilaţiilor acestor două câmpuri, este
provocat de variaţiile periodice a stării electrice a atomilor, a căror arhitectură electronică este astfel perturbată.
2. Lumină naturală şi lumina polarizată
Numim lumină naturală, lumina ce provine de la o sursă când oscilaţiile
elementare ale vectorului electric au loc complet haotic, în toate direcţiile. Aceste direcţii sunt conţinute într-un plan perpendicular pe direcţia de propagare
3. Procedee de obţinere a luminii polarizate
Lumina polarizată se poate obţine prin fenomenele de reflexie, refracţie şi
dublă refracţie. Din punctul de vedere al aplicaţiilor practice, cel mai frecvent se utilizează lumina polarizată prin fenomenele de reflexie şi dublă refracţie.
1. Polarizarea prin reflexie
Fenomenul se polarizare apare într-una din cele mai simple şi obişnuite
situaţii- reflexia luminii pe o suprafaţă plană. Atunci când o rază de lumină ajunge la suprafaţa de separaţie a două medii transparente, cea mai mare parte a luminii se refractă şi doar 10-15% se reflectă. Această rază reflectată este parţial polarizată.
Principiul metodei polarimetrice constă în măsurarea unghiului de rotaţie a
luminii plan polarizate de către o substanţă optic activă introdusă între polarizor şi analizor.
Metoda folosită este o metodă cantitativă cu ajutorul căreia se măsoară
concentraţia unei soluţii etalon.
Polarimetrul este un dispozitiv alcătuit în principal din două prisme nicol
dispuse coaxial, între cei doi nicoli fiind aşezat tubul polarimetric ce conţine soluţia optic activă (fig.10). Sursa de lumină monocromatică- o lampă de sodiu- produce un fascicul divergent, transformat în fascicul paralel de lentilă colimator LC. Lumina străbate nicolul polarizator obţinându-se un fascicul de lumină liniar polarizată. Nicolul analizator, montat într-un tub, se află la o distanţă de circa 30 şi se poate roti în jurul axei cu . Analizorul este solidar
cu un tambur gradat (0- ), iar un sistem vernier permite citirea diviziunilor
de grad.
Fig.10. schema polarimetrului: S-sursa de lumină monocromatică; L.C.- lentilă