ASIMILAREA AZOTULUI MOLECULAR DE CTRE PLANTE Rezervele de azot din sol, n diferitele sale combinaii, sunt destul de reduse.

Ele se completeaz cu azot n urma putrezirii organismelor animale i vegetale. Azotul din diferitele sale combinaii, este folosit: o parte n nutriia lor mineral; alt parte este transformat n form molecular, n procesul de denitrificare. Acest proces este produs de organisme care descompun srurile azotate din sol, cu eliberarea azotului molecular. Din categoria organismelor capabile de a folosi N2 din atmosferi, pentru a sintetiza substanelor organice azotate necesare nutriiei lor, fac parte: - bacteriile anaerobe (ex.: Clostridium pasteurianum, specii din genul Azotobacter etc.); - bacterii chemotrofe (ex.: Chromatium, Chlorobacterim, Rhodospirillum Azotobacter, Nitrobacter etc.); - bacterii simbiotice (bacteriile fixatoare de N2 de pe rdcinile unor plante (Rhisobium leguminosarum, Frankia, etc); - alge albastre (cianobacterii) (ex.: Nostoc, Anabaena); - ciuperci (Phoma betae). n practica agricol este bine cunoscut faptul c, dup recoltarea leguminoaselor, ntotdeauna solul rmne mbogit n azot, datorit bacteriilor fixatoare de azot, care se gsesc n nodoziti pe rdcinile acestor plante.

Cortex Peri absorbani

Convieuirea dintre gazd = simbioz

bacterii

planta

1
Pr absorbant Rhizobium

Formarea nodozitilor, pe rdcinile leguminoaselor, este rezultatul infestrii celulelor parenchimatice ale scoarei rdcinii de ctre bacterii, proces care are se desfoar astfel: 1. ptrunderea bacteriilor n rdcinile plantelor prin periorii absorbani; 2. bacteriile diger pereii celulozici ai celulelor scoarei; 3. bacteriile ajung n apropierea endodermei; 4. aceste celule fiind incitate i ncep s se divid mult, proces care se termin cu apariia unei nodoziti;

Celule ale scoarei

Infecie cu bacrterii

2 3
Bacterii

Modul de formare a unei nodoziti

Nodozitate

Nodozitate

Dup formarea nodozitilor, plantele i revin, consumnd azotul fixat de bacterie n nodoziti.

Nodozitate

Fixarea azorului n nodoziti de ctre Rhisonium leguminosarum la rdcinile de fasole

n realitate este vorba de un parazitism de tip special pentru c de la ptrunderea bacteriilor i pn la formarea nodozitii, planta este stnjenit n cretere. Din nodozitile leguminoaselor s-a izolat bacteria Rhizobium leguminosarum, care prezint numeroase rase foarte importante pentru agricultur (tiut fiind faptul c o ras poate convieui numai cu anumite leguminoase). Cunoscute sunt i speciile de Azospirillum care produc creterea poaceelor precum i cianobacteria Anabaena azollae care fixeaz N2 n frunzele ferigii natante Azolla filiculoides.

Diazovezicul

Azolla filiculoides

Frankia alini

Sfecla (Beta vulgaris)

Filamente de Anabaena azollae n canalele aerifere din frunza ferigii natante

Arin negru (Alnus glutinosa) Miceliu si spori de Phoma betae

Pe lng ferigi, leguminoase sau poaceae sunt i alte familii de plante vasculare care pot intra n simbioz cu bacteriile fixatoare de N2: ex.: bacteria Frankia alini care fixea N2 n rdcinile de arin negru (Alnus glutinosa). In afar de bacterii sunt cunoscute i ciuperci care pot fixa N2 molecular: ex. Phoma beae care paraziteaz rdcinile de sfecl (Beta vulgaris).

ASIMILAREA CARBONULUI DE CTRE PLANTE Analizele chimice au artat c, dintre toate elementele chimice care intr n corpul plantelor C4 reprezint elementul de baz. El intr n compoziia celor mai diferite combinaii organice, indispensabile vieii plantelor. Dintre combinaiile organice ale carbonului amintim n primul rnd glucidele, care stau la baza sintezei altor substane organice: proteine, lipide, vitamine etc. Sinteza glucidelor de ctre plante se realizeaz n cursul asimilrii carbonului. Majoritatea plantelor iau C4 din aerul nconjurtor (atmosfer) sau din aerul din sol (unde se gsete sub form de CO2). Exist i organisme care nu sunt capabile s asimileze C4 din CO2. Ele iau acest element din substanele organice sintetizate de plantele verzi (ca i animalele). Dup sursa de C pe care o folosesc n nutriia lor, organismele se mpart n 3 categorii: autotrofe; heterotrofe; mixotrofe

I. NUTRIIA ORGANISMELOR AUTOTROFE Organismele autotrofe au posibilitatea de a-i sintetiza substanele organice, necesare nutriiei lor, din H2O, sruri minerale i CO2. Pentru aceste sinteze ele au nevoie de o surs de energie. Dup natura sursei de energie folosit, organismele autotrofe se mpart n 2 grupe: organisme chemoautotrofe; organisme fotoautotrofe.

1. Nutriia organismelor chemoautotrofe (chemosinteza)

Chemosinteza = procesul prin care unele organisme autotrofe folosesc, pentru sinteza substanelor organice proprii, energia chimic eliberat prin oxidarea unor substane minerale. Acest tip de nutriie este caracteristic bacteriilor chemosintetizante (chemotrofice). Dup natura substanelor pe care le oxideaz aceste bacterii sunt de mai multe tipuri: nitrificatoare; sulfuroase; feruginoase; hidrogenobacterii

a. Bacteriile nitrificatoare triesc n sol i oxideaz amoniacul (NH3) format prin putrezirea resturilor vegetale i animale, transformndu-l n acid azotic (HNO3). Aceast transformare se numete nitrificare i are loc n 2 faze: I. n prima faz se formeaz acidul azotos (HNO2) i se elibereaz energie, dup reacia:

2 NH 3 + 3O2 2 HNO2 + 2 H 2 O + 158cal.(660,44 jouli)

Bacteriile care produc aceast transformare se numesc nitritbacterii (ex. Nitrosomonas); II. n faza a doua se oxideaz acidul azotos i se formeaz acid azotic (HNO3), conform reaciei:

2 NNO2 + O2 2 HNO3 + 48cal.(200,64 jouli)

Aceast faz este produs de nitratbacterii, dintre care amintim pe Nitrobacter. Energia eliberat din aceste reacii este folosit pentru sinteza substanelor organice (din sruri minerale, ap i CO2). Cei 2 acizi formai (HNO2 i HNO3) se combin cu diferite metale, formnd nitrii (HN4NO2, KNO2) i nitrai (NH4-NO3, KNO3), care reprezint cea mai important surs de azot pentru plantele evoluate. In consecin, bacteriile nitritbacteriile au o mare importan pentru fertilitatea solului.

b. Bacteriile sulfuroase (sulfatbacteriile) triesc n apele care conin hidrogen sulfurat (H2S), pe care l transform n acid sulfuric (H2SO4), dup reaciile:

2 H 2 S + 3O2 S2 + 2 H 2O + 63cal.(263,34 jouli ) S 2 + 3O2 + 2 H 2O 2 H 2 SO4 + 263,6cal.(1101,85 jouli )

Energia astfel eliberat este folosit la sinteza substanelor organice, ca i n cazul anterior. Aceste oxidri sunt realizate de bacteriile sulfuroase: Beggiatoa, Thiotrix, Spirillum granulatum. n Marea Neagr triesc bacterii sulfuroase care oxideaz H2S care se gsete la adncimi mari (cca. 200 m). Exist i bacterii sulfuroase care conin pigmeni asimilatori ce la ajut s realizeze i fotosintez, acestea se numesc bacterii verzi i sulfuroase purpurii. c. Bacteriile feruginoase (ferobacterii) triesc n mlul din fundul apelor, unde oxideaz sruri feroase pe care le transform n sruri ferice, conform reaciei chimice:

2 FeCO3 + 3H 2 O + 1/2O 2 2Fe(OH)3 + 2CO 2 + 20 cal.(83,60jouli )

(hidroxid feric)

(carbonat feros)

Energia eliberat este folosit la sinteza substanelor organice. Dintre bacteriile feruginoase amintim Gallionella feruginea (asemntoare cu un fir spiralat). Prin activitatea bacteriilor feruginoase se formeaz uneori zcminte de sruri ferice.

d. Hidrogebobacteriile Triesc n sol i n apele dulci, oxidnd H care este pus n libertate prin descompunerea celulelor i a altor substane organice pentru a-i procura energia necesar sintezelor organice.

2 H 2 + O 2 2 H 2 O + 136 ,6 cal .

2. Nutriia organismelor fotoautotrofe (fotosinteza) Este forma cea mai important de nutriie autotrof la plante.
Pentru sinteza substanelor organice din cele anorganice (sruri minerale, ap, CO2) n fotosintez se folosete energia solar, absorbit de ctre pigmenii asimilatori (cu precdere clorofila). Totodat, n urma procesului de fotosintez se elibereaz n atmosfer oxigen. Dintre organele plantelor verzi, frunzele sunt cele care ndeplinesc procesul de fotosintez, celelalte organe intervenind ntr-o mai mic msur. Organitele celulare implicate direct n acest proces sunt cloroplastele, prezente n mezofil. n tilacoidele granale ale cloroplastelor sunt localizai pigmenii asimilatori (clorofilieni, carotenoizi i ficobilini).

Organele plantei i organitele celulare implicate n fotosintez

n mod schematic procesul de fotosintez poate fi reprezentat prin urmtoarea ecuaie general:

Mecanismul fotosintezei
Conform concepiei actuale, mecanismul fotosintezei este extrem de comlicat i const ntr-un ansamblu de reacii chimice i fiziologice care duc n final la formarea substanelor organice proprii nutriiei plantei. Reaciile fotosintezei au fost grupate n 2 faze: faza de lumin; faza de ntuneric. I. Faza de lumin (faza Hill dup biochimistul englez Robin Hill) Aceast faz se desfoar n grana cloroplastelor, care reprezint i sediul captrii energiei solare care ulterior va fi transformat n energie chimic potenial i nmagazinat n substanele organice sintetizate.

Faza de lumin se desfoar n mai multe etape: captarea CO2 din mediul nconjurtor n cloroplastele celulelelor mezofilului; absorbia energiei luminoase de ctre pigmenii asimilatori; transformarea energiei luminoase n energie chimic potenial; fixarea energiei chimice poteniale n produii stabili cu legturi fosforice macroergice. 1. Captarea CO2 din mediul nconjurtor n cloroplastele din celulele mezofilului. Aerul, ncrcat cu CO2, ptrunde, prin ostiolele stomatelor, n camera substomatic. De aici, CO2 difuzeaz n pereii celulozici ai celulelor asimilatoare ale mezofilului (esutul palisadic i lacunar). n pereii celulelor se gsete ap ceea ce face ca CO2 s formeze H2CO3, care ulterior va disocia, n trepte, n ioni CO3- i ioni bicarbonat (HCO3-). Sub aceast form aceti ioni s ptrund n citoplasma celulelor asimilatoare. Din citoplasm ioniii ajung n cloroplaste.

2. Absorbia energiei luminoase de ctre pigmenii asimilatori (etapa fotofizic). Din totalul luminii incidente care cade pe suprafaa frunzelor: 20% se reflect, risipindu-se n spaiu; 10% strbate frunza fr a fi absorbit; 70% este absorbit de frunze.

Lumin reflectat

Frunzele folosesc pentru fotosintez, numai 1% din procentul de 70%; 49% din acest energie caloric este eliminat din Lumin absorbit frunze prin transpiraie; 20% este folosit de plant pentru a-i ridica to Cloroplast frunzelor cu cca. 1-2oC Lumin emis peste to mediului ambiant. Radiaia solar absorbit, reflectat i care trece prin
frunzele unor specii lemnoase (dup N. N. Kalitin)

Energia luminoas absorbit, reflectat sau care strbate frunzele este diferit n raport cu specia.

Frunze de:

Radiaie absorbit (%) 39 24 27

Radiaie reflectat (%) 29 42 33

Radiaie care trece prin frunze (%) 32 34 40

Arar (Acer sp.) Plop (Populus sp.) Tei (Tilia sp.)

Compoziia energiei luminoase

Spectrul vizibil

Totalitatea radiaiilor din spectrul solar absorbite de pigmenii asimilatori din cloroplaste, formeaz radiaia fiziologic (activ) n procesul de fotosintez i reprezint cam 35,5% din energia luminoas solar (dup L. A. Ivanov), ocupnd zona din spectrul solar cuprins ntre = 380-750 nm.

Energia luminoas folosit de plante, nu const dintr-un curent continuu, ci dintr-o Lungimea de und (nm) succesiune de doze mici (ocuri) de lumin, numite cuante, care n pigmenii asimilatori trebuie s lucreze numai n locuri foarte precise ale legturilor C-O i H-O (nu i asupra tuturor legturilor dintre Compoziia spectral a luminii atomii care i alctuiesc). Radiaiile luminoase ajung la pigmenii asimilatori sub form discontinu de fotoni (un foton = o cantitate fix de energie, innd cont de faptul c, o cuant este caracterietica fotonului de emite energie). n 1900, fizicianul Max Planck elaboreaz teoria cuantic i arat c energia fotonului este dat de relaia:

unde:

= h .

= energia unei cuante; h = constanta lui Planck (6,624 10-34 jouli s); = frecvena vibraiilor razelor de lumin (numrul de unde transmise de razele solare n unitate de timp) n consecin, lumina are un caracter dual: are nsuire att de und electromagnetic, ct i de particul cu energie fotoni. Pe de alt parte, conform teoriei echivalenei a lui Einstein: nr. de molecule transformate pe cale fotochimic = nr. fotonilor absorbii. Astfel, pentru fiecare raz de lumin, cuanta are o valoare constant ns valoarea n calorii a fiecrei radiaii este diferit pentru c depinde de frecvena radiaiilor absorbite. In acest sens: valoarea n calorii a unei cuante de radiaie roie = 38 Kcal.; valoarea n calorii a unei cuante de radiaie violet = 71 Kcal.; Plantele absorb cuantele cu energie a radiaiilor din spectrul vizibil cu ajutorul pigmenilor asimilatori i le trec apoi moleculelor de CO2 i H2O. Prin absorbia unei cuante se produce un oc care are ca rezultat sinteza unei molecule sau descompunerea ei.

 S-a constatat faptul c, o cuant absobit din lumina roie (cu val. 38 Kcal.) nu este capabil s determine singur o reacie ntre moleculele de CO2 i H2O la nivelul lanului glucidic (HC-OH), pentru aceasta fiind necesare 112 Kcal. Pentru reducerea unei molecule de CO2 sunt necesari 4 atomi de H, ceea ce corespunde cu 4 cuante de lumin (4 ). n consecin, fotosinteza este o reacie sensibilizat (principalul sensibilizator optic, fiind Cla680 680), determinat de frecvena ciocnirilor ntre cuantele de lumin i sensibilizator (pigmenii asimilatori). n grana cloroplastelor sunt coninui diferii pigmeni asimilatori: Cla, Clb, pigmenii carotenoizi (xantofila i carotinele). Cla absoarbe, din spectrul vizibil, cu intensitate mare, radiaiile roii ( = 680 nm) i cu intensitate mai redus pe cele albastru-violet. Cla reflect radiaiile verzi (datorit culorii verzi proprii). Clb absoarbe energia luminoas din spectrul albastru i portocaliu, reflectndu-le pe cele galben-verzi. Pigmenii carotenoizi (galben-portocaliu) absorb din spectrul vizibil radiaiile albastre-verzi i le reflect pe cele galben-portocaliu.

 Pigmenii asimilatori formeaz la nivelul membranei tilacoidelor granale complexe (200 molecule de clorofil grupate n fascicule), care absorb energia luminoas, numite sisteme fotochimice (SF). Un sistem fotochimic ipotetic este format din: centrul de absorbie (CA); centrul de reacie (CR). I. Centru de absorbie (CA) funcioneaz ca o anten, captnd energia luminoas. El este compus din Cla700, Clb i pigmeni carotenoizi, reprezennd 99% din totalul de pigmeni asimilatori. II. Centrul de reacie (CR) este fotosensibil i conine numai Cla680 680, capabil ea nsi de a absorbi energie.

 Pigmenii asimilatori din CA transfer energia radiaiilor luminoase (fotonilor), absorbite de ei, Cla680 680 din CR, fie prin inducie molecular fie prin mecanismul rezonanei. Ca urmare Cla680 680 trece, din stare fundamental n stare excitat. Campbell i colaboratorii (2004) arat c c nu toi pigmenii carotenoizi transmit energia absorbit de ei Cla, unii dintre acetia avnd funcie de protecie mpotriva excesului de energie luminoas care ar distruge moleculele de clorofil, coninui n grana cloroplastelor. Ex.: la foioase, odat cu instalarea sezonului rece, se reduce n frunze sinteza de clorofil iar ca mijloc de protecie se sintetizeaz mai muli pigmeni carotenoizi (roii, galben, portocalii). 3. Transformarea energiei luminoase n energie chimic potenial (etapa fotochimic). Spre deosebire de reaciile fotochimice obinuite, n faza de lumin a fotosintezei, energia cuantelor nu este consumat, ci coninut n produi de reacie, procesul desfurndu-se cu ridicarea potenialului termodinamic. Procesul ntreg decurge n salturi succesive, fiecare salt reprezentnd o anumit reacie fotochimic numit fotoact. Prin cercetrile efectuate pn n prezent s-a dedus c n aceast etap au loc ntre 8-10 reacii fotochimice succesive.

Mult vreme s-a crezut c exist un singur SF. ntre anii 1948-1952, Robert Emerson a efectuat mai multe experimente asupra unor culturi de Chlorella. El a observat (1952) faptul c, prin iluminarea simultan a culturii de Chlorella cu 2 radiaii roii de lungimi de und diferite = 670 i = 700 nm, se produce o intensificare a procesuui de fotosintez la aceste alge verzi, fa de valoarea intensitii procesului, prin aplicarea acestor lungimi de und separat. Acest fapt la determinat pe Emerson s constate c de fapt n cadrul fazei de lumin, absorbia energiei luminoase i transformarea sa n energie chimic, nu se realizeaz cu 2 SF: SF I i SF II (aa numita schem Z) = efectul Emerson. SF II (water splitting photosystem). Este SF-ul care folosete energia luminoas, absorbit de pigmenii asimilatori, pentru a extrage din H2O (donatorul de e), electronii coninui n protonii de H+, determinnd fotoliza apei. Un foton ciocnind o molecul de Cla din CA al SF II, creaz o energie rezonant care este transferat i celorlalte molecule vecine din CA.
Cnd acest energie ptrunde n CR al lui SF II, Cla680 680 cedeaz un e . Un foton trebuie s excite fiecare electron din molecula de Cla, acesta trecnd din starea sa fundamental n stare excitat (un nivel energetic superior).

 Odat excitat Cla680, cedeaz 2 e, cu potenial energetic ridicat (oxidndu-se), unei substane acceptor de e - plastochinona (Pq) o protein cu Cu, care se reduce (Pq + 2H+). Cei doi e, mpreun cu 2 protoni de H+, colectai din strom, trec n lumenul tilacoidului. Golul energetic creat este continuu completat, cu electroni provenii de acest dat din fortoliza H2O (donator de electroni). De asemenea, protonii de H trec n lumen. Fotoliza apei 4 H2O 4 OH4 H+ + 4 OH4 H2O2
Fotoliza apei

Este un proces produs tot de pigmenii asimilatori sub aciunea luminii. In cadrul acestui proces are loc scindarea a 4 molecule de H2O n:

2 H2O 1/2 O2

- 4 cationi de H+, ce conin e-, cu potenil energetic normal, care vor fi implicai n reaciile fotochimice - 4 anioni HO-. Ulterior, anionii HO- trec n 2 molecule de ap oxigenat (H2O2). Acestea disociaz n 2 molecule de ap i O2, care se degaj n atmosfer. n consecin, O2 degajat provine din fotoliza apei i nu din CO2 cum s-a crezut mult vreme.

-8 -9 s, adic a n stare excitat Cla680 680 poate sta un timp foarte scurt [10 , 10 miliarda parte dintr-o secund = 1 nanosecund (ns)]. n acest interval scurt de timp, energia absorbit de Cla680 680 trebuie cedat reaciilor fotosintezei.

Prin pierderea cuantei de energie Cla680 poate reveni la starea fundamental sau poate sta n stare excitat un timp mai lung (10-3, 10-2 ns). n acest timp Cla680 i pstreaz un nalt nivel energetic, avnd o mare capacitate de reacie.