UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN

VETERINAR DIN BUCURETI

FACULTATEA DE MANAGEMENT, INGINERIE ECONOMIC
N AGRICULTUR I DEZVOLTARE RURAL
INGINERIE I MANAGEMENT N ALIMENTAIA PUBLIC I
AGROTURISM

Tem de cas Microbiologie

17-Amonificarea i asimilarea amoniacului de ctre
microorganisme

Profesor Coordonator:

Student: Chiric Cosmin

Lector Doctor Ciocoiu Emilia

Grupa: 8116

Bucureti 2016
1

Cuprins
1.Introducere...................................................................3
2.Capitolul 1...................................................................3
3.Capitolul 2...................................................................5
3.1 Amonificarea acidului uric i hipuric.....................5
3.2 Hidroliza ureei........................................................6
3.3 Nitrificarea.............................................................7
4. Capitolul 3..................................................................9
4.1 Asimilarea Amoniacului.........................................9
5.Bibliografie................................................................10

1.Introducere
Amonificarea reprezint procesul de descompunere a proteinelor din materia
organic a solului sub aciunea microorganismelor, avnd ca rezultat formarea
amoniacului. n aceast etap de transformare a azotului, proteinele sunt
descompuse n aminoacizi, care la rndul lor sunt supui unui proces de deaminare pentru a putea elibera moleculele de amoniac n momentul mor ii
organismelor vii.
Azotul organic se ntlnete n sol i asociat u humusul. n sol se gsesc
aminoacizi legai de particulele de sol, aminoacizii liberi, glucide
aminate(glucozamine, glactozamine), baze nucleice purinice i pirimidice.
Amonificarea decurge n dou faze succesive:
Faza nespecific;
Faza specific.

2.Capitolul 1
Faza nespecific cosnt n hidroliza compuilor organici ce structur
complex pn la nivelul moleculelor, care pot ptrunde n celulele
microorganismelor sau care apoi pot fi biodegradate. Proteinele complexe i
polipeptidele sunt biodegradate de microorganisme cu ajutorul enzimelor
proteolitice (exoproteolitice sau endoproteolitice). Proteazele acioneaz, att
asupra proteinelor, ct i asupra oligopeptidelor. Exist dou categorii de enzime
care acioneaz protenileor:
-Proteinazele (peptidil peptid hidrolazele sau enzime proteolitice) sunt
endoproteinaze acionnd din interiorul structurii proteinelor clivndu-le n
peptide.
-Peptidazele sunt exopeptidaze ce acioneaz secvenial asupra lanului
polipeptidic. Unele acioneaz asupra captului terminal al lanului cu N i se
numesc amino peptidaze sau aminoacil peptid hidrolaze, iar altele acioneaz
asupra gruprii COOH i se numesc carboxipeptidaze (acil aminoacid
hidrolaze).
Peptidazele (ambele tipuri) elibereaz tripeptide sau dipeptide din care
rezult aminoacizi sub aciunea tripeptidazelor sau dipeptidazelor.
3

i putrefacia este o biodegradare sub aciunea unor proteinaze exocelulare

produse de microorganismele de putrecaie : (Bacillius, Clostridium, Proteus,
Sarcina, Welchia).
Faza nespecific se desfoar sub aciunea proteolitic a unor
microorganisme heterotrofe: Arthrobacter sp., Pseudomonas sp., Proteus sp.,
Serratia macerans, Bacillus subtilis, B. megaterium, B. cereus, B. mycoides, B.
thermopoproteolyticus, Clostridium sp., Flavobacterium sp. sau a unor fungi ca:
Alternaria, Aspergillus, Mucor, Penicillium, Rhizopus. La acestea se adaug
numeroasele exoproteinaze de origine vegetal sau animal.
Faza specific de amonificare const n eliberarea NH 3 din compuii
rezultai n faza nespecific, sub aciunea enzimelor microorganismelor
specifice. Exist mai multe ci metabolice de dezaminare i anume:
1. Dezaminarea oxidativ produs de Aspergillus niger, Escherichia coli,
Proteus sp., Pseudomonas aeruginosa, B. subtilis. Se realizeaz fie cu
aminoacid (L i D) oxidaze, fie cu aminoacid (L) dehidrogenaze.
2. Dezaminarea reductiv este caracteristic bacteriilor anaerobe
(Clostridium sp.).
3. Dezaminarea desaturant se realizeaz cu enzime de tipul aspartazei,
metilaspartazei, histidazei de ctre: E. coli, Proteus sp., Clostridium sp.,
Pseudomonas sp., Neurospora sp.
4. Dezaminarea prin deshidratare este caracteristic hidroxiaminoacizilor i
este produs de E. coli i Neurospora crassa.
Amoniacul astfel format, fiind volatil se degaj n atmosfer, unde se poate
combina cu oxizi de sulf i se rentoarc n sol sub form de sulfat de amoniu i
poate s diminueze riscul ploilor acide sau se poate pierde. O parte din
amoniacul format n sol poate fi absorbit temporar de complexele argilo-humice
sau in aerobioz este convertit n

+
NH 4 , apoi oxidat n nitrii, iar n final n

nitrai (forme accesibile ca nutrieni pentru plante i microorganisme).

Amonificarea se desfoar normal n limitele pH-ului neutru, la temperaturi
cuprinse ntre 2- 40 C (cu un optim n jur de 30 C), n straturile
superficiale, bine structurate, aerate i cu umiditate potrivit.

n solurile acide NH 3 este absorbit de complexele argilo-humice, dei

amonificarea se desfoar lent, dar cu randament maxim.

n solurile alcaline, randamentul este sczut, iar

NH 3

se degaj uor.

Asupra amonificrii din sol are influen i raportul dintre C i N, fiind optim la
valori ale acestuia cuprinse ntre 15-20, iar excesul de carbon (resturi vegetale
abundente) are influene negative (asupra amonificrii). n amonificarea
proteinelor importante sunt: Bacillus subtilis, B. mesentericus, B. megaterium,
B. mycoides, B. putrificus, B. sporogenes, Proteus vulgaris, Pseudomonas
fluorescens, Escherichia coli, Aspergillus sp., Botrytis sp., Sarcina Iutea,
Trichodermo sp.
Amonificarea acizilor nucleici se desfoay asemntor cu cea a proteinelor.
n faza nespecific acioneaz: Achromobacter, Bacillus, Clostridium,
Streptomyces, Aspergillus, Penicillium, etc. Sub aciunea ribonucleazelor,
dezoxiribonucleazelor, nucleazelor, acizii nucleici (din celulele vegetale,
animale sau ale microorganismelor) sunt biodegradai n mononucleotide
individuale. n faza specific are loc biodegradarea purinelor i purimidinelor de
ctre microorganismele: Clostridium, Copynebacterium, Micrococcus,
Pseudomonas pn la forma de uree care n final este amonificat de
microorganismele specifice.
Descompunerea chitinei are loc dup procesul complex al circuitului azotului
prin amonificare sub aciunea bacteriei Bacillus chitinovorus.
Chitina chitinozan glucozamin + acid acetic glucoz + NH 3

3.Capitolul 2
3.1 Amonificarea acidului uric i hipuric

Se realizeaz de bacteriile Bacillus flurescens, Clostridium acidi urici,

Micoccus ureae i Proteus vulgaris.
Acidul hipuric acidul benzoic + glicocol acid glicocolic + NH 3
Acid uric acid tartronic + uree.

3.2 Hidroliza ureei

Ureea din sol provine din degradarea bazelor purinice i pirimidinice, din
excreii i din metabolismul microorganismelor.
Amonificarea ureei este mai rapid la temperatura de + 37oc i mai lent la
temperaturi mai sczute. Uneori, la temperaturi mai ridicate, o parte din
amoniacul produs se pierde prin volatilizare sau se fixeaz prin adsor ie pe
particulele argilohumice. Hidroliza ureei este realizat de microorganismele
care au ca enzim ureaza din genurile: Achromobacter, Bacillus, Clostridium,
Copynebacterium, Pseudomonas, dar mai ales de urobacterii: Bacillus
probatus, Bacillus freudenreichii, Micrococcus ureae, Planosarcina ureae,
Sarcina ureae, Urobacillus miquellii, Urobacillus pasteurii.
n sol activitatea urobacteriilor este foarte important, att pentru
amonificarea fertilizanilor (urea ce conine 47%N), ct i a produilor de
excreie ai organismelor (populaia uman elimin n 24 de ore cca. 19 mii
tone acid ureic, iar toate celelalte animale de pe glob cca, 1,5 milioane tone
acid ureic n 24 de ore).
Cianamida de calciu este unul dintre fertilizanii cu azot aplicai n
tehnologiile de cultur ale plantelor. n urma hidrolizei cianamidei de calciu
rezult cianamida, care apoi prin hidroliz se transform n uree. Ureea
format este hidrolizat i metabolizat de urobacterii i rezult amoniac.
Pn la formarea ureei toi ceilali compui sunt toxici pentru sistemele
biologice active (microorganisme, plante etc.). Aceti produi toxici influeneaz
negativ activitatea vital a sistemelor biologice din sol.
n tehnologiile de cultur ale plantelor cianamida de calciu se aplic fetilizat
cu cel puin dou ureei, sptmni acioneaz nainte urobacteriile de nfiin area
n amonificarea culturilor prin semnat sau plantat. Dup apari ia ureei,
acioneaz urobacteriile n amonificarea acesteia. Datorit toxicitii produselor
de hidroliz ai cianamidei de calciu, aceasta nu se aplic ca fertilizant n
perioada de vegetaie a plantelor.

Amonificarea este un proces indispensabil n circuitul biogeochimic al

azotului de ecosfer. Amoniacul rezultat poate fi utilizat de sistemele biologice
n form amoniacal sau el este oxidat prin procesul de nitrificare pn la nitra i
form accesibil ca nutrieni tuturor sistemelor biologice.
3.3 Nitrificarea

Nitrificarea este un proces biologic realizat de bacteriile autochimiolitotrofe

prin care amoniacul sau alte forme reduse de azot anorganic (produse n
amonificare) sunt oxidate la nivel de nitrai.
Nitraii sunt forme anorganice de azot, uor asimilabile de ctre toate
sistemele biologice (plante, animale, microorganisme). Nitraii sunt foarte
importani ca nutrieni i pentru plantele de cultur. Nitrificarea se realizeaz n
ecosfer de dou categorii speciale de bacterii autochimiolitotrofe obligate. Ca
urmare a activitii unor bacterii, n prima etap rezult nitrii (azoti i, deriva i
ai acidului azotos), iar n cea de a doua etap din nitrii, rezult nitrai.
Ca urmare a acestui fapt nitrificarea prezint dou etape distincte i anume:
1 .Nitritarea;
2.Nitratarea.
n nitritare acioneaz nitritbacteriile (nitrosobacteriile), care oxidez
amoniacul pn la nitrii. n aceast etap intervin nitritbacteriile care apar in
genurilor: Nitrosomonas, Nitrosocystis, Nitrosolobus, Nitrosospira, Sorangium.
Nitriii, care rezult, sunt n general toxici fa de sistemele biologice cu
excepia nitritbateriilor i nitratbacteriilor. Aceste dou categorii de bacterii
acioneaz permanent i cooperant n ecosfer i n final se produc nitrai (n cea
dea doua etap nitratare), ca forme de azot anorganic accesibile pentru toate
sistemele biologice.
n nitratare acioneaz nitratbacteriile, care oxideaz nitriii n nitrai.
Nitratbacteriile sunt reprezentate de genurile: Nitrobacter, Nitrococcus,
Nitrospira, Bactoderma i Microderma.
Prin activitatea asociat i dependent a celor dou categorii de bacterii
(nitritbacteriile i nitratbacteriile) n pedosfer (sol), nu se acumuleaz nitri i,
care ar fi toxici pentru sistemele biologice (inclusiv i pentru plante).
Bacteriile nitrificatoare se ntlnesc pe sau n toate substraturile unde are
acces oxigenul (aeraea este condiia obligatorie pentru activitatea nitrit i

nitratbacteriilor). n condiii de sol, activitatea bacteriilor nitrificatoare este

prezent n partea superioar (10 15cm), unde ptrunde oxigenul. n procesul
de nitrificare iau natere nitraii cu importan deosebit ca nitrien i pentru
plante.
Nitrificarea se desfoar normal n solurile bine aerate, cu o umiditate de
4070% din capacitatea de cmp ale acestora, la un pH cuprins ntre 6,2-9,2
(pH.ul optim
= 7,5-8,0) i la o temperatur de dezvoltare cuprins ntre 5- 40 0 C (cu un optim
ntre 25 - 35 0C). Prin intensificarea nitrificrii se mrete i solubilizarea
fosfailor insolubili din sol i se mbuntete nutriia cu fosfor a sistemelor
biologice (att plante ct i microorganisme). Nitrificarea se intensific o dat
cu creterea aerrii i nclzirea solului i cu prezena bazelor n substratul de
cultur.
n solurile cu reacie acid se recomand aplicarea amendamentelor
pentru a aduce pH-ul la nivelul optim. Pentru desfurarea normal a nitrificrii
se recomand ca aplicarea fertilizanilor (ngrmintelor chimice) s se fac n
doze mai mici i repetate, pe msura consumului nitrailor de ctre plante. Prin
oxidarea amoniacului n nitrai are loc i o schimbarre a sarcinii electrice de la
pozitiv la cea negativ. Particulele de sol, i n special argila, au o ncrctur
negativ, fapt care determin reinerea numai a formelor amoniacale. Formele
nitrice (avnd o sarcin electric negativ ca i particulele de argil) nu sunt
reinute de acestea i se pierd prin splare (levigare) sau prin denitrificare.
S-a constatat c n solurile fertile, nitrificarea se desfoar n condiii
optime, mai ales cnd se amelioreaz starea de aerare a solului (prin diverse
lucrri de mobilizare superficial a solului, de distrugere a crustei, de evitare a
stagnrii apei i de meninere a unei structuri permeabile pentru aer), cnd se
nclzete solul i cnd activitatea bacteriilor nitrificatoare este normal.
n solurile normale i fertile numrul de bacterii nitrificatoare poate
ajunge pn la un milion la un gram de sol. n cazul levigrii (splrii) nitra ii
pot ajunge n pnza de ap freatic i s sc manifeste printr-o serie de
inconveniente cum sunt:
Pierderea de nutrieni de azot din sol cu consecine negative pentru creterea i
dezvoltarea plantelor;
Combinarea nitrailor cu unii compui aminai din apa freatic cu Iormarea de
nitrozamne cancerigene;
Reducerea nitrailor n nitrii cu efecte toxice directe pentru sistemele biologice
sau combinarea nitriilor cu hemoglobina n organismele animale cu efecte
toxice foarte grave.
8

Aceste fenomene sunt foarte frecvente n habitatele unde se administreaz

ngreminte chimice cu azot n exces.
Nitrificarea este o etap foarte important n circuitul azotului n ecosfer i
asigur, n pedosfer, nutrienii acccsibili pcntru toatc sistcmclc biologicc sub
form de nitrai(plante, animale i microorganisme).

4. Capitolul 3
4.1 Asimilarea Amoniacului

Se realizeaz de ctre microorganisme att din cel rezultat prin fixarea

N2

, ct i din amonificare.

ncorporarea NH 3 n compuii organici de ctre microorganisme st la

baza biosintezei aminoacizilor, a glucidelor aminate, a bazelor purinice i
pirimidanice.
n incorporarea NH 3 n compuii organici sunt 4 ci i anume:
1. Aminarea reductiv a - cetoglutaratului la glutamat, sub aciunea
gutamat dehidrogenazei.
- Cetoglutarat + NH 3 + NADAPH + L glutamat + H 2 O +
+
NADP

2. Combinarea NH 3 cu fumaratul cu ajutorul aspartazei (aspartatamonium

liaza) i producerea de L- asparat.
3. ncorporarea NH 3 n aminoacizi cu ajutorul alanim dehidrogenazei
Piruvat

NH 3

+
H

alanine.

Este caracteristic actinomicetelor i genului Bacillus.

4. Producerea de glutamine de acid L glutamic cu ajutorul glutamin
sintetazei
i
a
glutamat
sintetazei.
Acid L glutamic + ATP + NH 3 glutamamin + ADP + Pi + H 2 O
Glutamin

- oxoglutarate +

NH 3
NH 3

cetoglutamat

oxoglutamat)

glutamate

Glutamina este important pentru sinteza de: purine, triptofan, histidin,

glucozamino -6- fosfat i carbamilfosfat (precursori ai pirimidinelor).
9

Prin transaminri pot rezulta o serie de aminoacizi importani:

L glutamat + piruvat cetoglutamat + alanin
L glutamat + oxalilacetat cetoglutarat + L asparat
L glutamat + glioxilat cetoglutarat + glicocol

5.Bibliografie
Emilia Ciocoiu, Mali Manole, Ioan Geamn
Microbiologie
Editura PRINTECH - 2012

10