II.

CALEA FOTOSINTETIC C4
Calea fotosintetic C4 se mai numete i calea Hatach i Slack, dup fiziologii australieni Marshal Davidson Hatach i Roger C. Slack care n 1966 au elucidat acest tip de fixare a CO2. Calea fotosintetic C4 reprezint un complex biochimic i fiziologic accesoriu cii C3. Acceptorul iniial de fixare a CO2 este o substan organic fosfoenol priruvatul (PER) iar primul produs fotosintetizat, n funcie de specie, este o substan organic (acizi dicarboxilici), cu 4 atomi de C n molecul: fie acidul malic (MAL) (srurile i esterii si = malat); fie acidul aspartic (ASP) (srurile i esteri si= aspartat) n aceast categorie intr: sorgul, tirul, porumbul, meiul, trastia de zahr etc. Cei 2 acizi dicarboxilici sunt att produi primari ct i intermediari, servind la transferul carbonului ctre ciclul Calvin. Calea fotosintetic C4 se realizeaz n 4 etape: 1. Fosforilarea acidului piruvic (PIR) Noaptea, acidul piruvic (PIR) (compus cu 3C) este fosforilat n forma sa de enol fosfoenol piruvatul (PEP) ca acceptor de CO2, reacie catalizat de enzima fosfoenol sintetaza sub aciunea energiei furnizate de ATP care trece n ADP + Pa sau chiar pn la AMP. Acidul piruvic (PIR) + Pa (3C)
fosforilare
fosfoenol sintetaza

fosfoenol piruvat (PEP) (3C)

2. Carboxilarea primar a fosfoenolpiruvatului (PEP) PEP

PEPPEP- carboxilaza

acid oaxaloacetic (AOA)

instabil
ATP malat dehidrogenaza (din cloroplaste)

aminare reductiv aspartatamino transferaza (din citoplasm)

- predominant, acid aspartic (C4H7N04) - predominant, acid malic (C4H6O5) (ASP) (MAL) - reducerea 2 NAD+ la NADPH2 (ex. porumb, trestia de zahr etc.) MAL (ASP) se formeaz noaptea, cnd stomatele sunt nchise, n celulele mezofilului. Prezena lor determin scderea pH-ului sucului vacuolar de la 6 la 4. 3. Decarboxilarea (degradare enzimatic) acizilor dicarboxilici (MAL i ASP) Astfel, ziua, la lumin, cnd stomatele sunt deschise, MAL (ASP) trece (prin punctuaiuni), din cloroplastele celulelor mezofilului n cloroplastele celulelor tecii perifasciculare (parenchimatice), din jurul sistemului vascular al nervurilor. Aici ei sunt supui decarboxilrii (degradrii enzimatice) sub aciunea enzimei transcarboxilaza proces ce duce din nou la formarea PIR i apoi PEP i totodat eliberarea de CO2 intern. Ca urmare pH-ul sucului vacuolar crete de la 4 la 6

Fixarea CO2 intern pe RUDP. CO2 intern, eliberat prin decarboxilarea MAL (ASP), este fixat pe RuDP, acceptor iniial de CO2, sub aciunea RuDPcarboxilaza, care intr i urmeaz calea ciclului Calvin (a plantelor C3), unde se formeaz substanele organice complexe i se regenereaz RuDP, ca acceptor de aceast dat a CO2 intern !!!!. 4. Acidul piruvic (PIR), nou format, trece din cloroplastele celulelor tecii perifasciculare n cloroplastele celulellor mezofilului unde este transformat n PIR i apoi fosforilat la fosfoenol piruvat (PEP), regenerndu-se astfel acceptorul de CO2 atmosferic i ciclul C4 se reia. In concluzie: Calea fotosintetic C4 este format din 2 cicluri: 1. ciclul C4 (Hatach i Slack) de la fixarea CO2 atmosferic pe PEP pn la decarboxilarea MAL (ASP), cu regenerarea PEP (acceptor de CO2 atmosf.) 2. ciclul C3 (Calvin) fixarea CO2 intern pe RuDP, formarea de substane organice complexe i regenerarea RuDP (acceptorul iniial a CO2 intern). Calea fotosintetic C4 se caracterizeaz prin 2 carboxilri separate spaial: 1. o carboxilare primar ( carboxilare), care are loc n celulele mezofilului, utiliznd CO2 atmosferic, catalizat de enzima PEP carboxilaza; 2. o carboxilare secundar ( carboxilare) care se desfoar n celulele tecii perifasciculare, utiliznd CO2 intern, catalizat de enzima RuDPcarboxilaza.

Calea fotosintetic C4

Bilanul energetic al cii C4 Nevoile energetice ale acestei ci sunt ridicate. Ex.: pentru o molecul de CO2 redus sunt utilizate: - 4 molecule de ATP; - 2 molecule de NADPH2. ceea ce denot o activitate metabolic intens.

Plantele C4 au caracteristic o structur anatomic foliar diferit de cea a plantelor C3 aa numita structur Kranz, alctuit, n principal din: - mezofil omogen, clorofilian; - teci perifasciculare parenchimatice, reprezentnd aa numita coroan (Laetsch, 1974).

D.p.d.v. citologic celulele teacii perifasciculare sunt bogate n citoplasm, au multe mitocondrii alturi de celelalte organite, o vacuol mare central, cloroplaste i conin cantiti variabile de amiloplaste n funcie de specie (dup Huber i colab., 1990). Studii recente, asupra mezofilului plantelor C4, confirm diferena spaial a reaciilor care au loc n cadrul cii fotosintetice C4 dar i faptul c aceste plante folosesc ambele mecanisme de fixare a CO2. Argumente: 1. prezena PEP carboxilazei n celulele mezofilului; 2. prezena RuDP ca i a celor mai multe enzime specifice ciclului Calvin, n celulele tecii perifasciculare. Plantele tip C4 au o eficien fotosintetic mai mare, comparativ cu plantele C3, deoarece PEP- carboxilaza are o afinitate mai mare pentru CO2 atmosferic dect RuDP- carboxilaza. Acest fapt face ca plantele C4 s aibe o vitez de carboxilare de 15 ori mai mare dect cea a plantelor C3. Ex.: trestia de zahr (Saccharum officinarum) (plant C4) produce 32-35 g s.u.org. / m2 / zi, n timp ce napul (Brassica rapa var. rapa) (plant C3) produce 6-8 g s.u.org. / m2 / zi. Se admite c migrarea asimilatelor n frunzele plantelor C4 este de 3 ori mai rapid dect n frunzele plantelor tip C3.

Acest fapt a fost demonstrat prin cercetrile efectuate la sfecla de zahr de ctre Habershow n 1973. Autorul afirm c n celulele mezofilului plantelor C3, transportul lent al asimilatelor contribuie la acumularea glucidelor n cloroplaste i de aici ncetinirea vitezei de desfurare a fotosintezei la aceste plante.

III. CALEA FOTOSINTETIC C.A.M. (Crassulacean acid metabolism)

Se numete astfel deoarece a fost obsevat i descris la reprezentani ai familiei Crassulaceae (Bryophyllum, Kalanchoe, Sedium calycinum etc). iar ulterior la plante suculente (Opuntia) i Ananas sativa, orhidee, Tillantia etc.), palnte ce triesc n zone secetoase, aride (xerofite). La acest tip de plante, fixarea i reducerea CO2 este asemntoare cu cea a plantelor tip C4. Fixarea CO2 pe PEP i formarea diacizilor (n special MAL) (4C) (prin carboxilarea PEP) are loc n vacuole, noaptea cnd stomatele sunt deschise, pstrnd aproape constant coninutul apei n celule. Formarea acizilor determin acidifierea sucului vacuolar de la pH 6 la 4. n timpul zilei, cnd stomatele sunt nchise, diacizii (MAL) ies din vacuole n cloroplaste (mitocondrii) unde sunt decarboxilai primar. Ca urmare pH-ul sucului vacuolar crete de la 4 la 6.

Dup Osmund (1978), decarboxilarea MAL este dependent de specie dar i de factorii de mediu, procesul avnd loc: - fie prin intervenia enzimelor malice; - fie prin oxidarea prealabil a MAL de ctre NADPH2 n AOA. care este decarboxilat, cu formarea PIR etc.

Fixarea la ntuneric a CO2 atmosferic de ctre plantele CAM, reprezint o adaptare a acestore plante pentru supravieuirea lor n medii aride, deertice, unde plantele i asigur prin aceste mecanisme: o bun aprovizionare cu CO2: economisesc apa (pentru c stomatele ziua sunt deschise la minim sau nchise i deschise noaptea). In concluzie: Chiar dac fixarea i reducerea CO2 la plantele CAM este asemntoare cu cea a plantelor C4, exist o diferen esenial ntre cele 2 ci fotosintetizante. Astfel: la plantele tip C4, reaciile biochimice ale fazei obscure a fotosintezei, sunt separate spaial, avnd loc n celulele mezofilului i a tecii perifasciculare. la plantele tip CAM, reaciile biochimice sunt separate n timp (ziua i noaptea), desfurndu-se n acelai tip de celule (celulele mezofilului).

MECANISMUL FOTOSINTEZEI LA BACTERIILE FOTOSINTETIZANTE Bacteriile fotosintetizante sunt reprezentate prin bacteriile verzi i cele sulfuroase purpurii, care triesc de obicei n apele sulfuroase (n special cele care conin H2S). Aceste bacterii conin pigmeni verzi asemntori clorofilei, fie bacterioclorofila (a i b), fie bacterioviridina. Ex.: Cloroxidobacterium, Rhodopseudomonas, Cromatium etc.). Spre deosebire de plantele verzi, bacteriile fotosintetizante transform energia luminoas, absorbit de pigmenii asimilatori, n energie chimic prin intermediul unui singur SF. Sub aciunea luminii, bacterioclorofila trece din stare fundamental n stare excitat, expulznd e cu potenial energetic ridicat (oxidndu-se) unui aceptor primar de e - feredoxina (Fd) - care se reduce. Donatorul de e este H2S, de fapt cationii de H+ ce conin e cu potenial energetic normal. O parte din energie chimic este stocat n ATP (format din ADP+ + Pa). Golul energetic creat este prin expulzarea e- este completat continuu cu electroni provenii din scindarea H2S i apoi cedai bacterioclorofilei. Deci e cu potenial normal nu provin din fotoliza apei ca la plantele verzi. n acest proces intervin i citocromi.

REACIILE FAZEI DE LUMIN ALE FOTOSINTEZEI LA BACTERIILE FOTOSINTETIZANTE

Acceptor primar de eFD

eFP

NADP+ + 2H+

Lumina

e-

NADPH2

H2S

e-

citocrom

CENTRUL DE REACTIE A BACTERIOCLOROFILEI a

ADP+ + Pa ATP

 Electronii cu potenial energetic ridicat, preluai de FD, sunt transferai, cu ajutorul unei flavoproteine (FP) la NADP+ care se reduce la NADPH2, n care se nmagazineaz o alt parte de energie chimic, n concluzie: La bacteriile fotosintetizante, faza de lumin a fotosintezei prezint particulariti importante: e cu potenial normal nu provin din fotoliza apei ca la plantele verzi, donatorul de electroni fiind H2S. substanele cu grupri fosforice macroergice (ATP i NADPH2) la bacteriile fotosintetizante, nmagazineaz cantiti mai mari ca cele ale plantelor verzi, fapt pentru care aceste organisme au numai un singur SF si anume SF I, fapt pentru care nu mai au nevoie i de cel de al doilea SF (SF II). n cursul desfurrii proceselor fotochimice, la bacteriile fotosintetizante, nu se elinereaz O2. II. Faza obscur a fotosintezei la bacteriile fotosintetizante Reaciile biochimice, la aceste organisme verzi, par a fi identice cu cele stabilite de Calvin pentru plantele C3.

IMPORTANA FOTOSINTEZEI n afar de amploarea pe care o are, procesul de fotosintez are o importan deosebit n natur, pentru faptul c: 1. Folosind ca surs, pentru sinteza substanelor organice proprii, CO2 atmosferic sau solvit n H2O, plantele verzi contribuie la meninerea la o valoare constant a acestui gaz n natur (n mediu); 2. Prin degajarea n atmosfer a O2 de ctre plantele verzi (n urma forosintezei), acest gaz este pus la dispoziia tuturor vieuitoarelor aerobe, fiind folosit de ctre acestea n procesul de respiraie. n acelai timp el asigur i desfurarea diferitelor procese de combustie din industrie i din activiti menajere (gospodriile oamenilor). 3. Fotosinteza este, practic, singurul proces din natur prin care se sintetizeaz cantiti uriae de substane organice. Ex: 30.000 de plante de porumb acumuleaz n 8 ore de fotosintez 300 kg de substan organic. Prin acest proces plantele asigur practic sursa de hran pentru toate organismele heterotrofe i mixotrofe, de pe planeta noastr. 4. Plantele verzi sunt singurele vieuitoare de pe Terra care ndeplinesc un rol cosmic, concretizat prin fixarea unei pri de energie solar, pe care o transform nenergie chimic, i o nglobeaz, sub form de energie chimic, n substanele organice fotosintetizate.

Compoziia chimic a sevei elaborate

Analiza biochimic a sevei elaborate a stabilit c aceasta este alctuit din: ap; glucide solubile (zaharoza fiind singura dintre glucidele translocate); ATP; compui cu azot - reprezentai prin amino acizi i amide; acizi organici, reprezentai prin cantiti mici de acid citric, tartric i oxalic; vitamine; fitohormoni (hormoni de cretere); substane minerale (K+, Na+, Cl-, Mg2+, PO43-).

Direcia transportului substanelor organice prin vasele liberiene

Transportul sevei elaborate se face prin vasele liberiene bazipetal dar i acropetal. Transportul bazipetal este cea mai des ntlnit cale de transport. Este calea prin care se asigur asimilatele necesare desfurrii activitii vitale ale plantelor. De la vasele liberiene substanele organice i minerale strbat celulele pe cale simplasmic pentru a fi utilizate n procesele metabolice sau pentru a fi depozitate n organele de rezerv (bulbi, tuberculi, etc.).

Acest transport se face pe distane mici i cu vitez redus, fiind un transport activ, ce utilizeaz energia eliberat n timpul procesului de respiraie Transportul sevei elaborate se face: ascendent i descendent. I. Circulaia descendent a sevei brute s-a pus n eviden prin metoda decorticrii inelare. Astfel, s-a observat c n zona inciziei se formeaz un inel dublu de calus iar n partea inferioar a inciziei se constat ncetarea creterii ceea ce duce la moartea esuturilor i n cele din urma a ntregii plante. Circulaa descendent a sevei brute dup modelul presiunii de deplasare a sevei elaborate (cea mai cunoscut), se realizeaz astfel: 1. prin transpiraie, apa este mpins, n vasele de xilem, ctre celulele mezofilului; 2. glucoza, sintetizat n celulele mezofilului - celule surs (de substane organice), este transportat n vasele liberiene, reducnd astfel potenilaul energetic al apei i ncetinind presiunea de deplasare a sevei elaborate n vasele liberiene; 3. apa, din vasele de xilem, ptrunde n vasele liberiene, prin osmoz, crend o cretere a presiunii poteniale de deplasare a soluiei (sevei elaborate) n aceste vase; 4. acest diferen de presiune intern face ca glucoza, din soluie, s fie dirijat spre celulele care trebuie nutrite celule colectoare (celule ale tulpinii, florilor, fructelor, rdcinii etc.).

Modelul presiunii de deplasare descendent a sevei elaborate

Transpiraie mpinge apa n vasul de lemn Glucoz

Celulele surs trimit glucoza n vasul liberian, reducnd potenialul energetic al apei -curgere lent a soluiei

Apa trece, din vasul de lemn, n cel liberian, prin osmoz, crend o cretere a presiunii de curgere a sevei n vas. Diferena de presiune creat dirijeaz glucoza spre celula colectoare.

Glucoz

Apa se deplaseaz napoi n vasul de lemn

Glucoza este reinut n celula colectoare

5. glucoza, din soluia sevei elaborate, este reinut n celule colectoare a organelor corpului; 6. apa se deplaseaz napoi n vasele de lemn, fiind urcat, din nou, de curentul continuu ascendent a sevei brute.

Schem reprezentnd sumar transportul sevei elaborate n corpul plantelor

Mugurele terminal de cre cretere al tulpinii

Glucoza este tramsportat spre mugurele terminal Apa cu sruri minerale din sol

Frunza

Tulpina

Glucoza sintetizat n urma fotosintezei

Glucoza transportat ctre rdcin

Seva brut absorbit din sol de ctre rdcin

II. Circulaia ascendent a fost observat n cazul frunzelor i a seminelor situate n vrful coroanei arborilor. S-a constatat o intensificare a circulaiei sevei elaborate cnd se nltur frunzele din jurul fructelor. Ex.: calatidiul de floarea soarelui n care s-a observat o intensificare a circulaiei sevei elaborate datorit faptului ca aceasta se afl la un nivel superior fa de frunzele asimilatoare.

Viteza de deplasare a sevei elaborate

S-a putut observa folosind izotopi radioactivi (14C, 32P), cu ajutorul crora s-a constatat c: viteza de deplasare a zaharozei n vasele liberiene ale plantelor de cartof este 50-88 cm/h; la frunzele de soia - 87-107 cm/h, la pin 6-48 cm/h; la floarea soarelui - 30-240 cm/h; la porumb 85-660 cm/h. Aceast vitez este de cteva mii de ori mai mare ca viteza de difuziune ceea ce confirm natura metaboliilor (substanelor organice), care circul n vasele liberiene.

FACTORII CARE INFLUENEAZ FOTOSINTEZA Fotosinteza este influenat de factori interni i externi.

I. Factorii interni
1. Structura frunzelor influeneaz fotosinteza prin: grosimea limbului, a cuticulei; numrul de stomate, cloroplaste; gradul de deschidere al stomatelor. 2. Vrsta frunzelor. La frunzele tinere (n prima faz de formare a lor) intensitatea fotosintezei (I.F.) este sczut (datorit suprafeei lor reduse). Pe msura maturizrii lor I.F. crete. 3. Specia La plantele ierboase mezofite I.F. este cuprins ntre 5-10 mg CO2/dm2/h, la leguminoase este de 10 mg CO2/dm2/h. 4. Gradul de hidratare al esuturilor asimilatoare. La frunzele cormofitelor, terestre, fotosinteza scade destul de repede n intensitate, odat cu creterea deficitului de H2O al esuturilor asimiltoare. I.F. este maxim la un deficit al frunzelor de 13% iar procesul ncetinete la un deficit de ap n frunze cuprins ntre 40-45%.