Coloran!i "i colora!

ii
Clasificare: num!r de coloran"i: doi coloran"i (acid/ bazic) bicrome; trei coloran"i (de obicei unul bazic/doi acizi) - tricrome tipul colora"iei: colorare propriu-zis! (hematoxilin!-eozin!), reac"ie chimic! (histochimic!), reac"ie imunologic! (imunohistochimic!)

Tipuri de colora!ii
morfologice histochimice histoenzimologice imunohistochimice citologice

Tipuri de reac!ii
bazofilia: caracterizeaz! substraturile care se coloreaz! cu reactivi bazici (e.g. hematoxilina); exemple de structuri bazofile: nucleii (cromatina) #i corpii Nissl (reticul endoplasmic rugos) acidofilia: caracterizeaz! substraturile care se coloreaz! cu reactivi acizi (e.g. eozina, verdele lumin!); structuri acidofile: citoplasma, fibrele de colagen metacromazia: caracterizeaz! substraturi care modific! culoarea colorantului; exemplu: albastru de toluidin! coloreaz! mucusul n violet

Colora!ii morfologice
hematoxilin!eozin!: nucleul colorat n violetalbastru, citoplasma n roz tricrom! Masson: nucleul violet intens, citoplasma nuan"e de gri sau albastru palid, fibrele musculare n ro#u, fibrele colagene n albastru tricrom! Gmri: nucleul violet, citoplasma colorat! diferit, dependent de momentul func"ional al celulei, fibrele musculare n ro#u, fibrele colagene n verde

Colora!ii histochimice
reac"ia PAS: identific! gup!ri aldehidice libere (glicogen, glicoproteine) albastru de toluidin!: mucine nesulfatate #i sialomucine, metacromatic; nucleii, ortocromatic albastru alcian: glicozaminoglicani sulfata"i (heparin!, condroitin sulfat) mucicarmin: mucus impregn!ri argentice: fibre de reticulin!, neurofibrile orcein!: fibre elastice

Reac!ii histoenzimologice
eviden"iaz! prezen"a enzimelor prin reac"ie de culoare cele mai utile n practic!:
fosfataza alcalin! fosfataza acid! adenozintrifosfataza acetilcolinesteraza

Reac!ii imunohistochimice
se bazeaz! pe afinitatea dintre antigen #i anticorp; produsul final de reac"ie se vizualizeaz! cu diaminobenzidin! (DAB) #i este colorat n brun citokeratina: exprimat! de celulele epiteliale actina: exprimat! de celulele musculare #i mioepiteliale cromogranina A: exprimat! de celulele sistemului neuroendocrin difuz colagenul IV: membranele bazale antigenul specific prostatic: exprimat de celulele glandulare prostatice

Colora!ii citologice
colora"iile citologice se efectueaz! pe frotiuri Papanicolaou: nucleii colora"i n albastru-violet, citoplasmele n nuan"e de orange - verde - ro#u albastru policrom tanin-Dr!gan: nucleii sunt colora"i n albastru-violet, citoplasmele n albastru (ortocromatic) sau violet (metacromatic) May Grnwald Giemsa: nucleii colora"i n nuan"e de violet intens, citoplasmele n violet deschis, identific! granula"iile din citoplasma elementelor figurate sanguine #i a precursorilor medulari

!ESUTURILE EPITELIALE
Defini!ie "esuturile epiteliale sunt formate din celule dispuse ordonat, strns apozi!ionate, solidarizate prin jonc!iuni Celulele individuale prezint# n citoplasm# filamente de citokeratin# (markerul imunohistochimic al epiteliilor)

Caractere generale
acoper" suprafe#ele $i delimiteaz" cavit"#ile, formeaz" glandele celulele sunt solidarizate prin jonc#iuni $i prezint" microdomenii distincte de membran" prin microdomeniul bazal celulele sunt solidarizate la membrana bazal"

Clasificare general#
de acoperire: acoper" suprafe#e $i delimiteaz" cavit"#i $i organe cavitare glandulare: glandele exocrine $i endocrine senzoriale: celule specializate n recep#ia stimulilor mioepitelii: specilizate n contrac#ie

Epiteliile de acoperire
Criterii de clasificare: num"rul de straturi celulare $i forma celulelor din stratul superficial Num"r de straturi celulare: simple (un singur rnd), stratificate (mai multe rnduri) Variant": pseudostratificate Forma celulelor din stratul superficial: scuamoase, cubice, columnare

Epitelii pseudostratificate
un singur rnd de celule, nuclei la diferite n"l#imi epiteliu respirator uroteliu c"i genitale masculine

Epitelii stratificate
zone: bazal" , intermediar", superficial" stratificate scuamoase: cu $i f"r" keratinizare stratificate scuamoase keratinizate: epiderm stratificate scuamoase nekeratinizate: cavitate bucal", faringe, esofag, col uterin, vagin

Membrana bazal#
structur" acelular" , omogen" acidofil" PAS +, argirofil" imunohistochimic: colagen IV, laminin"

Epiteliile glandulare
Defini!ie "esuturile epiteliale glandulare sunt
formate din celule nalt specializate n sinteza unor produ#i specifici

Epiteliile exocrine
unicelulare: celula caliciform# multicelulare: epiteliul gastric de acoperire, secretor de mucine "i glandele tubulare glande tubulare: simple, ramificate "i tubulo-acinare

Acinii
seros: cel mai mic, rotund, format numai din mucos: ovalar, format numai din celule
mucoase, lumen larg "i neregulat, celule mioepiteliale n jur; sublingual#, esofag celule seroase, lumen ngust; parotid#, pancreas

mixt: ovalar, cel mai mare, celulele mucoase

dispuse central delimiteaz# lumen larg, celulele seroase dispuse la periferie sub form# de semilun#, celule mioepiteliale n jur; submandibular#

Miofibroblastul
caractere intermediare ntre fibroblast #i celula muscular" neted" nucleu cu contur sinuos citoplasm" acidofil", con!ine filamente contractile de actin" produce colagen #i se contract" identificare: anti-actin", anti-vimentin" localizare: vilozit"!i intestinale, pl"gi n curs de vindecare

Mastocitul
nu se eviden!iaz" la colora!ia HE identificare: albastru de toluidin", albastru alcian-safranin" morfologie: celul" cu form" rotund", ovalar" sau poligonal", care con!ine n citoplasm" granula!ii alcianofile, metacromatice localizare: n toate !esuturile conjunctive, concentrate perivascular #i perinervos

Pericitul
localizare: n jurul vaselor sanguine mici (capilare #i venule postcapilare) form" stelat", prelungiri citoplasmatice ramificate care nconjur" vasul sanguin nucleu ovalar, eucromatic citoplasma palid acidofil" la HE, colorat" intens cu anti-actin"

Macrofagul
deriv" din monocitul circulant form" poligonal" sau neregulat" nucleu rotund, hipercrom, f"r" nucleol citoplasm" acidofil" omogen sau con!ine particule endocitate (resturi celulare, pigmen!i, particule inerte) totalitatea macrofagelor din organism: sistemul mononuclear-macrofagic

Fibrele de colagen
ATEN%IE! fibrele sunt un produs de secre!ie al celulelor. Nu au nuclei acidofile, grosimi diferite, organizate n fascicule, neramificate se coloreaz" n roz cu eozin", n verde sau albastru cu metodele tricrome localizare: n toate !esuturile conjunctive

Fibrele de reticulin"
nu se eviden!iaz" cu metoda HE, ci numai prin impregnare argentic" sub!iri, relativ egale ca grosime, ramificate #i anastomozate, formnd re!ele localizare: pl"mn, rinichi, glande exocrine #i endocrine, ficat (schimburi rapide de substan!e)

"esutul mezenchimal
celule: mezenchimale substan"# fundamental# bogat# fibre: absente localizare: embrion, f#t; la adult, insule mici n jurul capilarelor formeaz#: toate "esuturile conjunctive, musculare !i unele epitelii

"esutul reticular
celule: reticulare fibre: de reticulin# substan"# fundamental#: bogat# localizare: stroma organelor hematolimfopoetice (excep"ie timusul)

"esutul conjunctiv lax

celularitate: polimorf# (fixe !i mobile) fibre: sub"iri de colagen, dispuse dezordonat, rare elastice substan"# fundamental#: bogat# localizare: dermul superficial, lamina propria a organelor tubulare (ntotdeauna n vecin#tatea epiteliilor)

"esuturile conjunctive dense dezordonate #i ordonate

celule reduse numeric (fibrocite, fibroblaste) numeroase fibre de colagen, n fascicule; dispuse dezordonat sau ordonat pu"in# substan"# fundamental#

"esutul conjunctiv dens dezordonat

fibre groase de colagen organizate n fascicule dispuse dezordonat rare fibrocite !i fibroblaste pu"in# substan"# fundamental# localizare: dermul profund, submucoasa organelor tubulare

"esutul conjunctiv ordonat

celule relativ numeroase fibre de colagen groase, dispuse paralel, n fascicule substan"# fundamental# redus# tendon, ligament, aponevroz#, "esut lamelar

Tendonul
celulele: tenocite sec"iune longitudinal#: fibre colagene paralele, nuclei bigemina"i sau cvadrigemina"i ai tenocitelor sec"iune transversal#: arii acidofile, nucleii tenocitelor sunt ntre fibre; tenocitele au form# stelat# (prelungiri citoplasmatice printre fibre) nveli!uri: endo-. peri- !i epitenonium

"esutul conjunctiv lamelar

fibre de colagen groase, dispuse concentric rare celule de tip fibroblastic fibrocitar substan"# fundamental# redus# localizare: cornee, capsula corpusculilor senzitivi, perinerv

Matricea cartilaginoas"
ntre celulele cartilaginoase omogen#, moderat acidofil# (colagen) teritorial# "i interteritorial# metacromatic# PAS pozitiv# (glicoproteine) alcianofil# (glicozaminoglicani) forme particulare: la elastic "i fibros

!esutul osos "i osul ca organ

!esut conjunctiv dur, format din celule "i matrice extracelular# mineralizat#

Celulele #esutului osos

osteoprogenitoare: celule dormante care se pot transforma n osteoblaste; localizare: n imediata vecin#tate a $esutului osos osteoblaste: situate la periferia $esutului osos; sintetizeaz# matricea extracelular# osteocite: celule mature localizate n lacunele $esutului osos, interconectate prin prelungiri citoplasmatice fine, incluse n canaliculi oso"i osteoclaste: celule multinucleate, macrofage ale tesutului osos; celula cu origine medular#, rol n resorb$ie "i remodelare

Tipuri de tesut osos

unitatea structural# de baz#: lamela osoas#, format# din osteocite dispuse n acela"i plan "i matricea mineralizat# dintre ele n func$ie de aranjamentul lamelelor se disting:
$esut osos compact tesut osos spongios

Tesutul osos compact

format din lamele osoase dispuse sub form# de:
sisteme haversiene (osteoane) centrate de canal Havers sisteme intersti$iale (solidarizeaz# osteoanele vecine) sisteme circumferen$iale extern "i intern

prezent n diafiza oaselor mari "i late corticala oaselor scurte "i late

!esutul osos spongios

lamelele osoase nu sunt organizate de obicei sub form# de osteoane prezent n epifiza oaselor mari "i zona central# a oaselor scurte "i late format din trabeculi oso"i de forme "i m#rimi diferite; nu prezint# canale Havers prezint# spa$ii ovalare (lacune) n care se g#sesc celule osoase (osteocite)

Osul ca organ
periostul: $esut conjuctiv dens situat la periferia osului, format din dou# zone: intern# cu celule osteoprogenitoare, "i extern# format# din $esut conjuctiv dens $esutul osos endostul: $esut conjunctiv care delimiteaz# cavit#$ile osului,asem#n#tor zonei interne a periostului; con$ine celule osteoprogenitoare m#duv# hematogen# extremit#$ile articulare ale oaselor lungi: acoperite de cartilaj hialin

Osificarea
intramembranoas#: se desf#"oar# pe model de $esut conjunctiv cu transformarea celulelor mezenchimale n osteoblaste, prin intermediul $esutului condroid; prezent# la oasele cutiei craniene "i viscerocraniului endocondral#: pe model de $esut cartilaginos (hialin); prezent# la majoritatea oaselor organismului mixt#: mandibul#, omoplat

Etapele osific$rii endocondrale

modelul de cartilaj hialin osul periostal degenerarea cartilajului mugurii conjunctivo-vasculari diferen$ierea osteoblastelor cu secre$ia de matrice centrii de osificare resorb$ie "i remodelare - osteoclaste

Cre"terea oaselor n lungime

cartilajul de cre"tere de la limita epifiz# diafiz# zonele cartilajului de cre"tere:
cartilajul de rezerv# zona hiperplazic# zona hipertrofic# zona cartilajului degenerat frontul de proliferare conjunctivo-vascular# zona osului imatur, cu osteoclaste zona de $esut osos matur

!esuturile musculare striate

prezint" stria!ii longitudinale #i transversale (miofibrile) scheletal visceral cardiac celularitate specific": celule musculare striate scheletale #i viscerale (fibre musculare) #i celule musculare striate cardiace

Fibra muscular" striat"

sec!iune longitudinal": coloan" acidofil", cu stria!ii transversale #i nuclei multipli, palid colora!i, situa!i sub plasmalem" (sarcolem"); stria!iile transversale prezen!a sarcomerelor sec!iune transversal": arie poligonal" sau rotund", cu aspect punctat acidofil, $-2 nuclei la periferie

nveli#urile mu#chiului striat scheletal

endomisium: !esut conjunctiv lax sub!ire, cu fibre de reticulin", nvele#te fiecare fibr", rare vase capilare perimisium: !esutul conjunctiv care solidarizeaz" mai multe fibre, formnd fascicule, numeroase vase capilare epimisium: nvele#te mu#chiul n totalitate, con!ine vase sanguine de dimensiuni mai mari

!esutul muscular striat visceral

structural asem"n"tor celui scheletal fibre mai groase #i mai scurte localizare: limb", faringe, treimea superioar" a esofagului, sfincter uretral extern, sfincter anal

Placa motorie
form" particular" de sinaps" componenta presinaptic": termina!ia axonal" ramificat" a neuronului motor componenta postsinaptic": por!iune delimitat" a fibrei musculare, f"r" stria!ii, cu numeroase organite #i concentrare de nuclei

!esutul muscular cardiac

celule musculare striate cardiace: nucleu unic (rar dublu) situat central, ramifica!ii prin care se solidarizeaz" la celulele vecine (discurile intercalate) ntre fasciculele de celule musculare cardiace: !esut conjunctiv cu numeroase capilare !esutul nodal: celule grupate, dispuse n spa!iul subendocardic, poligonale, nucleu central, citoplasm" palid colorat", pot avea stria!ii n zona periferic", filamentele contractile nu sunt organizate n sarcomere

!esutul muscular neted

celule musculare netede: fuziforme, nucleu unic, central, citoplasm" acidofil", cu stria!ii longitudinale; organizate n fascicule; ntre celulele individuale cantitate minim" de !esut conjunctiv cu fibre de reticulin" localizare: tubul digestiv, arbore bron#ic. organe cavitare (stomac, vezicul" biliar", vezic" urinar", uter) marker: desmin" #i actin" de tip mu#chi neted

!esutul nervos
Celulele !esutului nervos: neuroni celule de sus!inere (glii n sistemul nervos central "i celule Schwann "i satelite n periferie)

Neuronul
corp celular "i prelungiri corpul celular format din nucleu "i citoplasm# cu organite, filamente de citoschelet "i incluziuni prelungirile neuronale:
dendritele: unice sau multiple, mai groase la baz#, intens ramificate axonul: unic, con de emergen!#, segment ini!ial, segment de conducere, ramifica!ie terminal#

Tipuri de neuroni
multipolari: un axon, mai multe dendrite (neuroni motori, interneuroni) bipolari: un axon "i o dendrit# (olfactivi, retin#) unipolari: o singur# prelungire (neuronii din ganglionii nervo"i spinali "i ata"a!i nervilor cranieni)

Celulele de sus"inere
Sistemul nervos central (celule gliale marker: proteina glial# fibrilar# acid#): astrocitele (protoplasmatice, fibroase, periventriculare "i Bergmann) oligodendrocitele (formeaz# mielina) microglia Sistemul nervos periferic: celula Schwann (formeaz# mielina) celulele satelite

Organele sistemului nervos central

Creier
Cerebel M!duva spin!rii Bariera hemato-encefalic! Plexurile coroide nveli"urile sistemului nervos central

Componentele straturilor cortexului cerebelos

molecular: fibrele aferente (ag!#!toare "i mu"chioase). dendritele neuronilor Purkinje, axonii neuronilor granulari, rari interneuroni mici, celule gliale "i vase sanguine mijlociu: corpul celulelor Purkinje, interneuroni (celule Lugaro) "i celule gliale (Bergmann) granular: corpul "i dendritele neuronilor granulari, segmentul ini#ial al axonilor neuronilor Purkinje

Bariera hemato-encefalic!
cea mai selectiv! din organism componente:
celulele endoteliale, cu pu#ine vacuole de transport "i margini suprapuse membrana bazal! a endoteliului prelungirile dilatate terminal ale astrocitelor

Plexurile coroide "i celula ependimar!

Plexurile coroide: la nivelul ventriculilor, formate din celule epiteliale "i piamater: filtreaz! plasma lichidul cerebro-spinal Celula ependimar!: formeaz! epiteliul care delimiteaz! cavit!#ile SNC; n canalul spinal prezint! microvili la polul apical (resorb#ia l.c.s.)

nveli"urile sistemului nervos central

duramater: #esut conjunctiv fibros arahnoida; #esut conjunctiv lax acoperit de epiteliu de tip scuamos piamater: #esut conjunctiv lax sub#ire, n contact cu substan#a nervoas! suport pentru vase sanguine

Sistemul nervos periferic

Ganglionii nervo!i spinali !i asocia"i
nervilor cranieni Fibrele nervoase Nervul periferic nveli!urile nervului periferic Sistemul nervos autonom Receptorii senzitivi

Ganglionii nervo!i spinali !i asocia"i nervilor cranieni

organe ncapsulate capsula: "esut conjunctiv dens neuroni unipolari care au corpul celular globulos n zona periferic# a ganglionului, nconjurat de celule satelite prelungirile neuronilor unipolari: concentrate n zona central#, p#r#sesc ganglionul prin hil

Fibrele nervoase
fibra nervoas#: axonul, nconjurat de teaca de mielin#, metode de identificare morfologice !i acid osmic (vizualizeaz# mielina) n imediata vecin#tate a fibrei nervoase: stratul celulelor Schwann !i "esut conjunctiv fin ntre celulele Schwann consecutive: strangula"iile Ranvier (conducerea saltatorie) mai multe fibre nervoase formeaz# nervul periferic

Nervul periferic
fascicule de fibre nervoase care transmit acela!i tip de impuls nervos, grupate prin "esut conjunctiv sec"iune longitudinal#: aspect fibrilar, palid colorat cu metoda HE datorit# dizolv#rii mielinei; ntre tecile de mielin# ale fibrelor nervoase vecine celule Schwann sec"iune transversal#: fibra nervoas# cu axonul punctiform, central, nconjurat de un halou necolorat (teaca de mielin#; n jur se dispune circular celula Schwann nveli!urile nervului periferic

nveli!urile nervului periferic

endonerv: "esutul conjunctiv foarte fin care nvele!te fiecare fibr# nervoas#; componentele sale sunt sintetizate de celulele Schwann !i nu este vascularizat perinerv: "esut conjunctiv lax, grupeaz# mai multe fibre nervoase, vascularizat, cu fibroblaste !i mastocite epinerv: nvele!te nervul periferic n totalitate, format din "esut conjunctiv lamelar

Sistemul nervos autonom

ganglioni asocia"i sistemului nervos autonom: nu au capsul# proprie, neuroni
multipolari, pu"ine celule satelite; localizare: n straturile submucos !i muscular ale organelor tubulare !i cavitare ale organismului

fibre nervoase simpatic parasimpatic enteric

Corpusculii senzoriali
structuri specializate n preluarea informa"iilor din mediul extern !i intern, pe care le transform# n influx nervos termina"ii nervoase libere corpusculi senzoriali: fibr# nervoas# dispus# central, adesea contorsionat#, nconjurat# de "esur conjunctiv lamelar exemple: corpusculii Vater-Paccini, corpusculii Meissner

Eritrocitele
anucleate, rotunde, 7 microni diametru disc biconcav: centru palid, periferie intens colorat# colora$ia May Grunwald Giemsa: nuan$e de portocaliu

Trombocitele
anucleate, fragmente din citoplasma megacariocitului cele mai mici elemente figurate sanguine poligonale centru intens colorat: granulomer periferie: palid colorat#, hialomer

Granulocitul neutrofil
rotund, diamtru %0-%2 microni nucleu lobulat (2-5 lobi), pun$i fine de cromatin#, cromozom sexual citoplasm# acidofil# granula$ii specifice mici, punctifome, care se coloreaz# cu reactivi neutri (granula$ii neutrofile)

Granulocitul eozinofil
rotund, %0-%2 microni diametru nucleu lobulat (de obicei doi lobi) citoplasm# acidofil# n citoplasm#, granula$ii acidofile specifice, rotunde, egale, colorate n portocaliu

Granulocitul bazofil
rotund, 9-%0 microni diametru nucleu nelobulat, de form# neregulat#, intens colorat citoplasm# acidofil# granula$ii inegale, cu form# variat#, care pot masca nucleul "i se coloreaz# cu reactivi bazici

Limfocitul
rotund, diametru variabil (mic, mijlociu, mare) nucleu rotund, ovalar, rar reniform, heterocromatic, intens colorat citoplasm# intens bazofil#, redus# cantitativ limfocitele mijlocii "i mari pot con$ine cteva granula$ii nespecifice, azurofile

Monocitul
cel mai mare element figurat sanguin rotund sau ovalar, %2-20 microni diametru nucleu reniform sau poligonal, cu nucleol, aspect striat al cromatinei citoplasm# palid bazofil# (cenu"iualb#struie), cteva granula$ii azurofile n concavitatea nucleului

Formula leucocitar!
Raportarea procentual# a leucocitelor granulocite neutrofile segmentate: 50-65% granulocite neutrofile nesegmentate: %-3% granulocite eozinofile: 2-4% granulocite bazofile: 0 0.5% limfocite: 25-35% monocite: 3-8%

Hematopoeza
Defini!ie: procesul de formare al
elementelor figurate sanguine La adult, toate elementele figurate sanguine se formeaz" numai n m"duva hematogen" Metodologie de studiu: frotiul efectuat prin punc!ie medular" Raportarea procentual" a precursorilor elementelor figurate sanguine; medulogram"

Celula stem
0.2% din popula!ia celular" a m"duvei hematogene dimensiuni mici (8-#0 microni), adesea fuziform" nucleu rotund sau ovalar, eucromatic, cu nucleoli multipli citoplasm" bazofil", omogen" f"r" granula!ii sau incluziuni

Hematopoeza la adult
eritropoez" granulocitopoez" trombocitopoez" limfocitopoez" plasmocitopoez" monocitopoez"

Limfocitopoeza !i plasmocitopoeza
Limfocitopoeza: toate celulele au nucleu rotund $i citoplasm" bazofil" f"r" granula!ii specifice Filia!ie: limfoblast prolimfocit limfocit Plasmocitopoeza: nucleu heterocromatic, excentric, citoplasm" bazofil"; are loc n m"duva hematogen", organe limfoide $i !esutul conjunctiv Filia!ie: limfocit B activat de limfocit T helper (proplasmocit) - plasmocit

M#duva hematogen#
localizare: cavit"$ile oaselor forme: ro#ie, galben", cenu#ie, fibroas" capsul": endost, dublat extern de $esut osos trabeculi oso#i acoperi$i de endost organ nelobulat strom": $esut reticular parenchim: $esut mieloid

Tipuri de $esut limfoid

Folicul limfoid Cordon limfoid Infiltrat limfoid difuz

Cordonul limfoid
aglomerare de limfocite dispuse n #iraguri con$ine predominant limfocite T localizare: zona medular" a ganglionului limfatic #i tecile periarteriolare ale splinei

Infiltratul limfoid difuz

aglomerare masiv" de limfocite, f"r" aranjament particular con$ine limfocite B #i T n propor$ii aproximativ egale localizare: $esutul limfoid asociat mucoaselor, jonc$iunea corticomedular" a ganglionului limfatic, amigdal"

Organele limfopoetice
Timus Ganglion limfatic Splin! Amigdale "esut limfoid asociat mucoaselor