Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
curs 1
Toxicologia este o tiin relativ nou, care a debutat ca o tiin analitic.
Actualmente se disting:
Toxicologia industrial (ocupaional)
Toxicologia mediului
Toxicologia legal
Toxicologia medical (clinic)
Toxicologia medical, care include aspectele clinice, sistematizeaz informaiile
cu privire la patologia specific produs de toxice sub aspectul etiologiei, al
mecanismelor moleculare ale efectelor toxice, al toxocineticii, al conduitei medicale n
intoxicaiile acute, al diagnosticului clinic i paraclinic i al tratamentului intoxicaiilor
respective. Acest domeniu abordeaz finalmente toate aspectele ce vizeaz
interaciunile complexe dintre toxic i organismul uman.
Epidemiologia intoxicaiilor acute
Intoxicaiile acute ocup un loc semnificativ ntre cauzele de morbiditate i
mortalitate, n toate rile lumii, inclusiv n cele cu un standard ridicat de civilizaie,
care beneficiaz de o reea de centre antitoxice i clinici de toxicologie bine
organizate i performante ca experien i competen. Cteva date pe care le
prezentm n continuare pot fi ilustrative i ca referin pentru definirea locului
toxicologiei printre disciplinele medicale.
In SUA se apreciaz de ctre FDA c cele 430 centre de control i informaii
toxicologice primesc 1,5 milioane solicitri anual, din care rezult c peste 91% sunt
expuneri la diferite substane toxice la domiciliu.
Un numr foarte mare de intoxicaii acute accidentale se produc la copii n
special sub vrsta de 5 ani. Se apreciaz c expunerea la toxice a copiilor ntre 5 i 9
ani reflect stressul intrafamilial sau intenia de suicid. Mortalitatea prin intoxicaii
este totui sczut ntre 5 i 14 ani.
Expunerea la toxice pentru persoane de peste 60 de ani este uzual accidental
(83%), cu intenie de suicid (14,8%) sau prin abuz de droguri (1,7%).
Tabel 1 Cele mai frecvente cauze de intoxicaii acute
Substane medicamentoase
Analgezice
Paracetamol
Aspirin
Multivitamine asociate cu fier
Sedativ-hipnotice
Benzodiazepine
Barbiturice
Neuroleptice
Antimicrobiene
Droguri de abuz
Hormoni i antihormonale
Substane nemedicamentoase
Detergeni i alte
substane de curire
Plante
Cosmetice
Chimicale
Hidrocarburi
Alcooli
Insecticide
Toxic-toxicitate
1. Caracteristici cantitative ale toxicitii acute
Parametrii cantitativi ai toxicitii acute permit caracterizarea univoc a
reactivitii (agresivitii) chimice a diferiilor compui fa de materia vie,
la diferite niveluri de organizare ale acesteia.
Toxicitatea acut poate fi evaluat pe sisteme simple, cum ar fi organisme
unicelulare, bacterii, virusuri, culturi de celule sau populaii celulare diverse, precum
i pe organisme aparinnd diferitelor specii, inclusiv mamifere superioare. Se
constat n acest context diverse grade de variabilitate ale rspunsului materiei vii, n
raport de gradul de organizare, factorii comuni uzual interceptai fiind mecanismele
toxice, corelaia concentraie-efect, o anumit secvenialitate a evenimentelor toxice
generatoare de leziuni sau de moarte celular etc.
Unul dintre cei mai cunoscui i uzuali parametri cantitativi, dar i cel mai
controversat, pentru caracterizarea toxicitii acute a substanelor active biologic este
doza medie letal (DL 50) determinat experimental pe animale de laborator. Acest
parametru statistic reprezint doza de substan care produce moartea a 50% dintrun lot experimental de animale, consecutiv administrrii pe o anumit cale.
Uzual, DL50 este exprimat n uniti ponderale pe kilogram greutate corporal
(mg/kg corp). Pentru a elimina influena greutii moleculare a compusului i pentru o
comparaie adecvat a toxicitii diferiilor compui, DL50 se poate exprima n moli/kg.
Toxicitatea acut a compuilor chimici mai poate fi exprimat i n mg/m2
suprafa corporal. De remarcat c exist o mai bun corelaie ntre toxicitatea la
om i animale dac se convertesc valorile exprimate n mg/kg n mg/m2 suprafa
corporal. Doza medie letal se utilizeaz pentru clasificarea substanelor toxice n 5
categorii, n raport de toxicitatea lor acut exprimat ca DL50 (Tabel ).
Pentru substanele volatile sau gazoase se utilizeaz concentraia medie letal
pe litru de aer inhalat (CL50 sau CLt50)
CL50 (concentraia letal 50%)
CLt50 (concentraia letal 50% n timp definit)
Concentraia atmosferic n cazul unor expuneri profesionale se exprim n: ppm
sau mg/m3 (pri per milion sau mg/m3)
DML (doz minim letal la om), pentru anumite toxice
Paraldehida - 100mi
Metanol
-70ml
Dintre criticile aduse DL50
1. un anumit grad de nespecificitate a efectului final estimat=letalitatea,
2. absenta informatiilor privind mecanismul de actiune
3. absenta pantei corelatie doza efect,
4. absenta UNOR FACTORI DE VARIABILITATE generate de conditiile de
determinare de la laborator la laborator, =animale, greutate, sex, varsta,
alimentatie, temperatura mediului, conditii de cazare,
Exista parametrii aditionali, DL50, respectiv DL01, - care aproximeaza doza maxima
subletala, ca si DL99= doza minima care provoaca efectul letal la 99 din componenta
lotului experimental.
CATEGORIA
SUPERTOXICE
DL50
<5
5-50
mg/kg
mg/kg
FOARTE TOXICE
50-500
mg/kg
MODERAT TOXICE
0,5-5
g/kg
CU TOXICITATE REDUS
5-15
g/kg
PRACTIC NETOXICE
> 15
g/kg
EXTREM DE TOXICE
DML=doza minima letala, doza care in administrare unica sau fractionat, indiferent
de perioada de timp, produce efect letal la animale sau om. Aceasta nu exprima o
relatie doza raspuns, ci adesea este rezultatul unor observatii izolate, nu vizeaza
exclusiv expuneri acute, poate rezulta att din observaii pe animale ct i la om.
Se utilizeaz acest parametru pentru predicia riscului uman consecutiv expunerii la
anumite toxice i poate furniza informaii adecvate, care elimin necesitatea unor
extrapolri de la animale la om.
Suplimentar, pentru CL50 (CL=concentraia letal) se poate determina CLt 50, care
exprim concentraia de toxic n aerul inspirat care produce efect letal ntr-un interval
de timp precizat.
Doza administrat pe cale inhalatorie poate fi calculat din formula:
VCto
D = ------------Gc(kg)
n care: V = volum respirator/minut ,
C = concentraia compusului mg/l
t = timp de expunere
= procentul de compus reinut
Gc = greutatea corporal (kg)
In studiile de toxicitate cronic se definete doza maxim tolerat (DMT) drept
cantitatea cea mai mare de substan despre care se poate anticipa c administrat
nu va altera durata de via a animalelor prin alte efecte dect, eventual, cele
carcinogene.
Nivelul fara efecte (toxice) definete cantitatea sau mrimea dozei de
substan care poate fi inclus, fr efecte toxice, n dieta unui lot de animale
(OMS). Exist reguli i procedee acceptate de extrapolare a acestui nivel
netoxic de la animale la om.
Nivelurile acceptabile de expunere la om se exprim prin valoarea limit
prag viznd concentraia atmosferic a substanelor toxice la locul de
munc la care personalul poate fi expus fr efecte toxice.
Aceast valoare se exprim n ppm (pri per milion) sau mg/m3.
Evident, caracteristica acestei expuneri este corelaia cu durata acesteia, zilnic i
sptmnal.
Din experiena clinic uman privind expunerea la toxice a rezultat o serie de
date cantitative care, corelate cu datele experimentale, au furnizat o serie de
3
informaii cu valoare cel puin orientativ, asupra dozelor toxice i letale la om pentru
diferii compui. In tabelul 2 au fost prezentate cteva doze minime letale la om
pentru cteva substane cunoscute.
Determinarea sau estimarea se poate efectua respectiv i prin extrapolarea din
cercetrile pe animale. Se cunosc astfel, spre exemplu, aceste valori limit pentru
asbest, bis(clormetil) eter, compui de crom, sulfura de nichel, clorur de vinil.
Iar pentru ali compui (4-aminodi- fenil, benzidin, P-naftilamin, 4-nitrodifenil)
expunerea pe orice cale, la orice nivel este inacceptabil.
Clasificarea substanelor toxice conform toxicitii relative
Dei, DL 50 constituie un parametru global al toxicitii, fr s furnizeze detalii
asupra mecanismului genezei efectului letal, i pstreaz o valoare satisfctoare i
este un criteriu relativ comod pentru a preveni i controla, n anumite limite, riscurile
expunerii la compui toxici, n condiiile desfurrii activitii societii umane. n
Tabelul 2 se observ clasificarea dup criteriul toxIcitii acute a compuilor chimici,
i spre o mai bun orientare n domeniu, precizm c cea mai mare parte a
substanelor medicamentoase au DL 50 ntre 50 i 500 mg/kg.
1.4. Date de toxocinetic general
1.4.1. Metabolismul toxicelor
Dup absorbie i distribuie, compuii toxici se elimin din organism pe cile
uzuale, n special pe cale urinar. Eliminarea pe aceast ultim cale este corelat
direct cu hidrosolubilitatea compusului respectiv. Substanele hidrosolubile se
elimin uzual pe cale urinar, fr prealabil biotransformare.
Compuii cu nalt liposolubilitate se elimin foarte greu pe cale urinar
datorit retroresorbiei lor la nivel tubular renal.
Biotransformrile metabolice sunt cu att mai extinse cu ct compusul are un
grad mai nalt de liposolubilitate. Prin aceste transformri compusul devine din
liposolubil (apolar) din ce n ce mai hidrosolubil, respectiv mai polar.
Activitatea toxodinamic, poate varia consecutiv biotransformrilor, fie n sensul
inactivrii (detoxifierii), fie n sensul bioactivrii, respectiv de cretere a
toxicitii.
Reaciile de biotransformare metabolic se mpart n dou tipuri importante:
Reacii din faza I: oxidarea, reducerea, hidroliza
Reacii din faza a Il-a: conjugarea, respectiv geneza unui compus rezultat din
toxic (sau metabolit) cuplat cu un compus endogen
Uzual, diferenele de toxicitate alo unor compui de la o specie la alta sau chiar
de la un organism la altul, n cadrul aceleiai specii, au ca baz diferene n privina
tipului i cilor de metabolizare, precum i n viteza de desfurare a acestor procese
REACII DIN FAZA I
OXIDAREA
Este modalitatea cea mai frecvent de biotransformare pentru cea mai mare
parte a compuilor cunoscui.
Oxidarea este catalizat de sistemul enzimatic microsomal localizat la nivelul
reticulului endoplasmatic hepatic. Acest sistem are o mare plasticitate adaptativ,
rspunznd la creterea substratului natural sau exogen prin creterea masiv a
cantitii componentelor, prin proliferarea reticulului endoplasmatic cu consecine
4
naftalen
3.
Epoxidarea
Aldrin
4.
dieldrin
Dezaminarea oxidativ
amfetamina 5.
fenilaceton
N-dealkilarea
N,N-dimetil-p-nitrofenil carbamat
N-metil-p-nitrofenil carbamat
O-dealkilarea
p-nitroanisol - p-nitrofenol
6.
S-dealkilarea
6-metiltiopurin
7.
N-oxidarea
trimetilamin 8.
6-mercaptotiopurin
trimetilamin oxid
N-hidroxilarea
anilin
fenilhidroxilamin
9.
10. P-oxidarea
Difenilmetilfosfin
difenilmetilfosfin oxid
11. Sulfoxidarea
metiocarb
metiocarb sulfon
12. DesuIfurarea (nlocuirea S cu O)
paration > paraoxon
Oxidarea nemicrosomal se ntlnete n cazul aminelor, procesul fiind localizat la
nivelul mitocondriilor i catalizat de monoaminoxidaza:
5-HT, putrescein > aldehide
De asemenea, dehidrogenarea alcoolilor i aldehidelor este catalizat de
5
alcooldehidrogenaz i aldehiddehidrogenaz:
Etanol
acetaldehid
acid acetic
REDUCEREA
Procesul este catalizat de reductaze, mai frecvent la nivelul bacteriilor intestinale i
mai puin prezent la nivelul esuturilor.
Reducerea microsomal
-Nitroreducerea:
Nitrobenzen
nitrosobenzen
fenilhidroxilamina
anilin
-Azoreducerea:
azobenzen -> anilin
Reducerea
nonmicrosomal
alcooldehidrogenazei.
se
produce
prin
reacia
invers
HIDROLIZA
Se exercit asupra compuilor care conin legturi de tip ester, respectiv: esteri,
amide, compui fosfat. Att la nivelul esuturilor animale, ct i al plasmei se gsesc
esteraze i amidaze care catalizeaz hidroliza compuilor corespunztori.
Dintre esterazele cunoscute, menionm:
FIG 1.Entitati toxice consecutive metabolizarii unor compusi sau unor agresiuni
N-hidroxilarea este catalizat de enzimele microsomale din diferite esuturi i
rezult metabolii N-hidroxilai, cum sunt cei rezultai din acetaminofen, 2AAF (2acetilaminofluoren), uretan, unii colorani aminoazoici, care pot produce necroz sau
cancer prin legturi covalente; unele amine aromatice pot produce hemoliza sau
methemoglobinemie.
Metaboliii N-hidroxilai sunt de asemenea supui unor reacii de conjugare: cu
acidul glucuronic i se excret rapid, cu acidul sulfuric sau acetic mai instabili, cu
proprieti mutagene, carcinogene i foarte toxici.
Anumii compui halogenai pot genera radicali liberi, entiti deosebit de
reactive. Astfel, principala lor caracteristic, o mare reactivitate chimic, este i cauza
8
agresivitii lor biologice. Pot fi atomi, ioni sau molecule care conin un electron impar.
Radicalii liberi lezeaz grav funciile celulare, putnd duce la moarte celular, ca
urmare a interaciunii cu acizii nucleici pe care i pot fragmenta, a inactivrii unor
enzime diverse, a peroxidrii lipidelor etc.
Radicalii liberi pot apare n context fiziologic i patologic: n procesul de
metabolizare a constituenilor alimentari, a medicamentelor, a toxicelor, consecutiv
expunerii la radiaii ionizante, n contextul fagocitozei i inflamaiei, n numeroase
procese patogenice. Astfel, tetraclorura de carbon formeaz radicalul triclormetil,
care produce peroxidarea lipidelor polinesaturate sau se leag covalent de proteine
sau de lipide nesaturate.
De asemenea, pot produce radicali liberi: halotanul, bromtriclormetanul, precum
i ierbicidul paraquat. Lezarea hepatic este strns corelata cu peroxidarea lipidelor
de ctre tetraclorura de carbon. Antioxidanii i vitamina E diminueaz semnificativ
hepatotoxicitatea acestor compui.
Activarea unor compui n tubul digestiv se poate exercita asupra nitriilor sau a
unor amine, n mediul acid gastric, cu formarea de nitrosamine, multe cu proprieti
carcinogene, sau nitraii convertii n nitrii pot induce methemoglobinemia.
Date de toxodinamie general
Mecanisme ale toxicitii chimice
Receptorul n toxicologie
Substanele active biologic, din care fac parte substanele farmacodinamic active ca
i substanele toxodinamie active, acioneaz asupra unor structuri receptoare sau
receptori definii n conceptul devenit deja clasic.
In fapt, conceptul de receptor n farmacologie n general (inclusiv n toxicologie)
implic, n sens operaional, dou caracteristici eseniale (funcii) ale receptorului,
respectiv recunoaterea i transducia.
Ca urmare, receptorul trebuie sa recunoasc o entitate chimic anumit i s
translateze (transduc) informaia consecutiv interaciunii respective (spre exemplu
dintre agonist i receptor) ntr-o form identificabil de celula respectiv i cu
consecine asupra funcionalitii acesteia (depolarizare, creterea permeabilitii
membranare, activarea adenilatciclazei sau guanilatciclazei, alterarea transcripiei
ADN etc.).
Categoria de toxic include, pe de o parte, compuii pentru care parametrii unei
nalte toxiciti fa de diferite organisme constituie o caracteristic definitorie i, pe
de alt parte, substane cu o toxicitate relativ redus, utilizate inclusiv ca
medicamente, dar care n condiii de supradozare (accidental, suicid) pot deveni
periculoase pentru organism.
Receptorul toxodinamic este o structur uzual macromolecular, implicat esenial n
funcionalitatea celular. Astfel de receptori pot fi diverse enzime, centrii activi,
grupri chimice eseniale ale acestor biocatalizatori sau acizi nucleici, componeni
membranari, citoplasmici etc. (Tabel 4)
Rezult c un numr mare de compui, fie c interacioneaz cu receptori mai mult
sau mai puin specifici, fie genereaz perturbri fr s fie implicate astfel de structuri
n amorsarea efectelor toxice.
TOXIC
MECANISM
Compui organofosforici,
Carbamai
Cianuri
Blocarea
centrului
esterazic
Blocarea transportului de
electroni
n
lanul
respirator
Inactivarea
gruprilor
tiolice
Formarea:
carboxihemoglobinei,
methemoglobinei
Blocarea sintezei acizilor
nucleici
Radicali liberi, peroxidare
Stimulare direct, blocare,
paralizie
Stimulare intens,
Sindrom muscarinic
Metale grele
Monoxidul de carbon,
nitrii, nitrai
Alchilante radiomimetice
Tetraclorura de carbon,
Receptor nicotinic
Bromtriclormetan
Nicotin, curarizante
Receptor muscarinic
Muscarin
(Amanita muscaria)
12