1.

Bună ziua numele meu este Andreea Vădureanu și astăzi vă voi prezenta tema Substituenți
tisulare pe bază de polizaharide vegetare.
2. Prezentarea va cuprinde următoarele secțiuni.
3. Biopolimeri reprezintă o directie modernă de cercetare la nivel mondial, iar materialele ,în
special cele de naturale au fost exploatate pentru a permite proiectarea de matrici cu
structură definită pentru diferite aplicații în domeniul medical. Polimerii naturali sunt
resurse regenerabile, biocompatibil și prezintă toxicitate redusă.
4. Polizaharidele sunt polimeri naturale care au la bază monozaharide de unite prin legături
glicozidice, avand o structură distinctă și proprietăți precum recunoașterea biologică,
reglare a răspunsului celular active, declanșarea de către celule a mecanismului remodelare.
Datorită acestor proprietăți polizaharidele extrase din surse vegetale precum nanoceluloza,
alginatul si pectina și au găsit o serie de aplicații în domeniul medical. Studiul de față
urmărește obținerea unor suporturi polimerice pentru obținerea de substituenti tisulari
elibereze substanță activă.
5. Partea experimentală este prezentata în secțiunea de materiale și metode. Materiile prime
folosite pentru obținerea membranelor polimerice au fost celuloza sub formă de pulpa,
alginatul de sodiu si pectina cu grad scazut de metoxilare. Asemanarile dintre pectina si
alginat sunt urmatoarele: prezența de grupări carboxil, capacitatea de reticulare cu clorura
de calciu, natura anionica, acestea avand surse de provenienta total diferite alge respectiv
coaja de citrice sau alte fructi. Substanță active utilizata a fost 5FU care este un antitumoral
inhibă diviziunea celulelor neoplazice prin interferarea sintezei de ADN reticularea cu
clorura de calciu 3%.
6. Pentru obținerea membranelor polizaharidice au fost necesare 5 etape, prima dintre ele
fiind oxidarea celulozei și obtinerea de gel de nanoceluloza. Oxidarea a fost mediata de
reactivul TEMPO, folosind sistemul bromura de sodiu si hiperclort de sodiu, reactia
mentinandu-se la pH 10,5. S-au obținut nanofibrile de celuloza, cu grupari carboxil, sub
forma de gel transparent cu o concentratie de 1,19% și viscozitate ridicata.
7. In suspensia de nanoceluloza a fost adaugat alginatul sau pectina in raport 1la 1 sau 1 la 3.
Medicamentul a fost de asemenea adaugat într-o concentratie mai mica si una mai mare,
de asemenea fiind pastrate si probe martor. (Tabel). Reticularea a fost efectuata in solutie
 de clorura de calciu 30 de minute. Pentru uscare si obtinerea de matrici 3d poroase s-a
folosit liofilizarea. Se poate observa aspectul probelor inainte si dupa liofilizare.
8. Rezultatele obtinute in urma utilizarii metodelor de caracterizare. A fost efectuata analiza
spectroscopica ATR FT-IR pentru materiile prime polizaharidice. Se observa in spectrul
nanocelulozei ,fata de spectrul celulozei,ca oxidarea a fost efectuata cu success prin aparitia
unei benzi suplimentare la 1621 cm la – 1 reprezentand gruparea carboxil, aceata banda
fiind de aasemenea, prezenta si in spectrul alginatului si pectinei. Se observa in toate
spectrele semnale specifice vibratiei legaturilor -O-H la 3300, și a inelului piranozic la
aproximativ 1000.
9. A fost efectuata analiza FT IR si pentru 5FU si membranele polizaharidice obtinute. Putem
observa aparitia de semnale specifice medicamentului, mai slabe pentru concentratia mica
si mai pronuntate pentru concentratia mare la 3000 pentru legatura N-H si aproximativ
1200 pentru C-F.
10. Determinarea gradului maxim de gonflare a fost prin metoda gravimetrica. Putem observa
o crestere a gradului de gonflare o data cu crestera de alginate/ pectina. Pentru probele cu
o concentratie egala de polizaharide se inregistreaza o scadere a gradului de gonflare o data
cu cresterea cantitatii de medicament, in timp cele cu concentratie mai mare de alginat/
pect o crestere. Probele cu pectina gonfleaza mai mult decat cele cu alginat.
11. Analiza morfologica micro CT a pus in evidenta o suprafata usor rugoasa a probelor,
Membranele prezinta o arhitectura interna sub forma de straturi suprapuse, observandu-se
micropore, iar adaugarea de medicament s-a observant ca duce la o mai buna omogenitate
structurala a materialului.
12. Eficienta de incapsulare a SA a fost diferita in functie de compozitia polimerica si cantitatea
de medicament, in cazul probelor cu alginate se observa o crestere o data cu cresterea
concentratiei de la 62 la 68 in timp ce pentru pectina se observa o scadere. Eliberarea a fost
rapida in primele 30 de minute, echilibrul fiind atins la 2h pentru probele cu alginate si cea
cu pectina si cantitate mica de medicament si la respective 5 h pentru cele cu c mare de
medicament. Cu toate ca a incapsulat doar 50 % proba cu pectina si c mare de medicament
a eliberat in procent de 91% in 24 de ore fata de restul probelor care au eliberat in jur de
60-70%.
13. Evaluarea proprietatilor biologice a foste efectuata in cadrul facultatii de biologie. Initial a
fost evaluate biocompatibilitatea probelor martor fiind utilizate cellule stem extrase din
tesut adipos. S-a utilizat metoda Live-Dead ce presupune marcarea cu calceina respective
bromura de etidiu. Toate cele 4 compozitii mentin viabilitatea celulara. O data cu adaugarea
supimentara de alginate/ pectina se observa o biocompatibile mai buna. Dupa 6 zile se
observa proliferarea celulara. Probele cu pectina in raport mai mare prezinta cea mai buna
biocompatibilitate si o grupare a celulelor.
14. A fost studiat si efectul antitumoral pe celule tumorale extrase din carcinom mamar atat
calitativ cat si cantitativ. Evaluarea calitativa a fost efectuata prin aceiasi metoda ca si
anterior. Se observa un numar mare de celule moarte marcate cu rosu pentru probele cu o
concentratie mare de medicament.
15. Prin testele cantitative au fost puse in evidenta aceleasi rezultate. Viabilitate a fost studiata
prin testul MTT si este scazuta pentrul probele cu concentratie mare de medicament, iar
testul LDH a pus in evidenta o citotoxicitate mare pentru aceleasi probe.
16. In concluzie au fost obtinute membrane 3D poroase, cu grad de gonflare diferit in fnctie de
compozitie ce prezinta o incapsulare si o eliberare eficienta de medicament, cu o
biocompatibilitate mare mai ales pentru probele imbogatite cu alginat/ pectina și un efect
antitumoral pronuntat. Ca o perspectiva viitoare compozitiile polimerice vor fi studiate
pentru obtinerea de geluri polimerice adecvate pentru bioprintarea 3D.