Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T.

Popa Iai Facultatea de Medicin

Fluiditatea (microvscozitatea) membranei celulare

-caracteristici biofizice i msurare-

Hrimiuc Lavinia Mihaela Anul I, Seria C, Gru a !"

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

Introducere
Conform modelului mozaicului fluid, o biomembran este un fluid n care proteinele i lipidele sunt orientate pe dou dimensiuni. Bistratul lipidic este structura de baz a tuturor celulelor i membranelor organitelor celulare. Membranele celulare sunt structuri fluide dinamice i majoritatea moleculelor din constituia lor sunt capabile s se mite n planul membranei. Fluiditatea reprezint calitatea acestei micri.[ !

Definiie "na dintre caracteristicile de baz ale biomembranelor o reprezint fluiditatea #micro$%scozitatea&. Fluiditatea se definete ca in$ersul $alorii coeficientului de $%scozitate membranar. ['!
fluiditate = vscozitate =

Descriere (rezena interaciunilor slabe de tip )idrofil*)idrofob ntre diferii constitueni permite o micare permanent a moleculelor.['! +e fapt, termenul de ,fluiditate, reprezint o combinaie a diferitelor tipuri de micri a componentelor membranei-

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

+ifuzia lateral a moleculelor n planul membranei +ifuzia trans$ersal a moleculelor de pe un strat pe altul- flip*flop Fle.ibilitatea lanurilor de acil /otaia[ !

Membrana cristal lichid Membranele celulare sunt meninute mpreun prin interaciuni )idrofobe, de unde rezult organizarea strict a structurilor 0 ordinea. (e de alt parte, membranele se afl n micare #rapid pentru lipide i lent pentru proteine& 0 fluiditatea. Cele dou caliti, ordinea i fluiditatea, caracterizeaz starea de ec)ilibru dinamic a membranei, sau starea de cristal lic)id.['!

Tipuri de micri
Difuzia lateral a moleculelor n planul membranei +ifuzia lateral este posibil datorit libertii lipidelor i proteinelor din membran de a se mica, n cazul n care acestea nu sunt restricionate de anumite interaciuni. +ifuzia lateral este un proces spontan i destul de rapid.

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

1cest tip de micare poate fi e$ideniat printr*un proces numit F/1( #fluorescence reco$er2 after p)otobleac)ing&, care presupune marcarea cu soluii fluorescente pentru a urmri micarea moleculelor.[3! Difuzia transversal a moleculelor: flip-flop Micarea de ,flip*flop, implic translaia moleculei pe cel de*al doilea strat al membranei. 1cest proces este nefa$orabil din punct de $edere termodinamic din cauza micrii capetelor fosfolipidelor, ncrcate cu sarcini electrice, de*a lungul dublului strat lipidic )idrofob. +ifuzia trans$ersal necesit o cantitate semnificati$ de energie, rezultat din sinteza de 14(.[5!

6tudiul acestui tip de micare a moleculelor este esenial pentru nelegerea funciilor i reglrilor celulare. +ifuziunea trans$ersal este implicat n apoptoza celulelor, iar e.ternalizarea anumitor fosfolipide prin migrare transmembranar este un mecanism cunoscut de semnalizare intercelular. Mai mult, micarea ,flip*flop, trebuie s aib loc pentru a susine creterea uniform a membranei i este esenial pentru meninerea asimetriei fosfolipidelor n membranele celulare.[7!

Modulatori ai fluiditii membranare

(roprietile fluidelor din membranele biologice sunt eseniale pentru numeroasele funcii celulare, printre care dez$oltarea celular, transportul de substane, transmiterea semnalelor i acti$itatea enzimatic. C)iar i cele mai mici sc)imbri ale fluiditii membranei ar putea cauza funciuni incorecte i procese patologice.[ !

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

Modulatorii fluiditii se mpart n dou categorii Biofizici- temperatura, presiunea, p8*ul, potenialul membranar de repaus Bioc)imici- proteine membranare, concentraia de ioni, raportul acizi grai saturai9acizi grai nesaturai, coninutul de colesterol['!

Temperatura :radul de fluiditate al membranei ar putea fi stabilit prin determinarea temperaturii de topire. ;dat cu creterea temperaturii, membrana trece rapid dintr*o stare rigid ntr*o stare mai fluid. ; temperatur sczut de topire indic prezena acizilor grai, care susin fluiditatea, n timp ce o temperatur de topire ridicat indic prezena acizilor grai i a colesterolului, care restricioneaz fluiditatea.

4emperatura de topire mai poate fi afectat de abilitatea moleculei de a se auto*mpac)eta, gradul de saturare, lungimea lanului acidului gras sau dublele legturi. Compar%nd acizii grai saturai cu cei nesaturai, cei saturai au o temperatur de topire mai ridicat, deoarece reziduurile reacioneaz ntre ele, cauz%nd o stare rigid a acidului gras. +e asemenea, legturile duble cis au un punct de topire mai ridicat fa de cele trans, deoarece nu se pot mpac)eta singure ntr*un cristal, pe c%nd cele trans pot. <anurile lungi de acizi grai au un punct de topire ridicat, deoarece, comparati$ cu lanurile scurte, e.ist mai multe legturi care se pot rupe. Cu c%t se rup mai multe legturi, cu at%t este mai ridicat temperatura de topire.
[3!

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

olesterolul Cantitatea de colesterol dintr*o biomembran ofer informaii asupra fluiditii acesteia. 6e atribuie colesterolului funcia de modulator al segregrii laterale a lipidelor i al densitii mpac)etrii, form%ndu*se domenii mai bogate sau mai srace n colesterol. +atorit structurii sale rigide i plate, cu un capt polar scurt, colesterolul este potri$it pentru contactul direct cu fosfolipidele care au lanuri saturate de acili i este astfel capabil s influeneze mpac)etarea lipidelor nconjurtoare.

Cu c%t este mai ridicat cantitatea de colesterol din membran, cu at%t fluiditatea acesteia scade, din cauza rigidizrii bistratului.[=!

oncentraia de ioni Fier +ei fierul, cel mai abundent metal de tranziie din organismul uman, este necesar pentru numeroase procese fiziologie #transportul de o.igen&, un amestec de pero.id de )idrogen i sruri feroase ar putea o.ida moleculele organice. 1stfel, fierul este frec$ent utilizat pentru a induce pero.idarea lipidelor i, n consecin, rigiditatea membranei. Cupru >ncubarea ,fantomelor, eritrocitare cu ioni de Cu'? a sczut fluiditatea membranei, posibil din cauza interaciunii acestor cationi cu gruprile de fosfatidilcolina din stratul e.tern.

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

@inc 6uplimentele orale de zinc au crescut micro$%scozitatea membranelor trombocitelor la pacienii cu boala 1lz)eimer. 6eleniu 6uplimentele cu seleniu au stabilizat membranele mpotri$a rigidizrii cauzate de mbtr%nire, aciune datorat coninutului de glutation pero.idaza a seleniului. Cadmiu, Mercur i (lumb A.punerea in $itro a membranelor la metale grele to.ice a a$ut efecte asupra fluiditii. 1stfel, cu ajutorul metodelor de analiz, s*a demonstrat scderea fluiditii la ,fantomele, eritrocitare i a membranelor placentare care au fost tratate cu cloruri de cadmiu, mercur i plumb. >nteraciunea metalelor grele cu membranele celulare e.plic, cel puin parial, to.icitatea asociat acestor metale.[ !

ontrolul fluiditii
Fluiditatea membranelor determin gradul la care pot fi transportate moleculele i gradul la care semnalele pot fi conduse prin membran. Fluiditatea este o funcie a membranei ce depinde de coninutul de acizi grai i colesterol. <anurile de acizi grai pot fi ordonate i rigide sau dezordonate i fluide. <anurile lungi de acizi grai sunt capabile s formeze interaciuni intermoleculare puternice, care restricioneaz fluiditatea. Bndoirile lanurilor de acizi grai, formate ca rezultat al dublelor legturi nesaturate cis i trans, inter$in n interaciunile intermoleculare care susin fluiditatea. 1stfel, aceasta poate fi controlat prin $ariaia numrului de duble legturi i a lungimii lanurilor de acizi grai. (rezena moleculelor $oluminoase de colesterol restricioneaz fluiditatea. 1cesta este modulatorul c)eie al fluiditii membranei. [3!

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

Msurarea fluiditii membranei

A.ist $ariate metode analitice pentru a msura micarea indi$idual a lipidelor. (olarizarea fluorescenei deri$ailor +(8, dar i rezonana electronic paramagnetic #/A6&, folosind ageni de spin ai acizilor grai au fost frec$ent utilizate n analiza fluiditii biomembranelor.[ ! C6ondele +(8 folosesc dip)en2l)e.atriene, care este o )idrocarbur ce prezint o fluorescen puternic doar intercalat lipidelor din membran, n ap nefiind fluorescent. +(8 se aliniaz printre bistratul lipidic paralel cu lanurile acil, dar se poate de asemenea orienta i n centrul bistratului i c)iar paralel cu suprafaa la introducerea +(8 i a deri$ailor si n prob se produce o fluorescen puternic datorit absorbiei i emisiei de fluorescen, dipolii de +(8 sunt aliniai apro.imati$ de*a lungul a.ei lor moleculare, unde polarizarea fluorescenei este ridicat[D!

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

!!!!!!!!!!!!!!!! Bibliografie . EoseF EoaGuHFn :arcHFa , A. MartHFnez*BallarHFn, 6. MillaF n*(lano, E.<. 1llueF , C. 1lbendea, <. Fuentes, E.F. Ascanero- IAffects of trace elements on membrane fluidit2I. Eournal of 4race Alements in Medicine and Biolog2 J #'KK7& J0'' '. (rof. dr. Cipriana Ltefnescu-ICurs de biofizicI #'K &

3. 1lberts, Eo)nson, <eMis, /aff, /oberts, Nalter <efers, MarO-IMolecular Biolog2 of 48A CA<<.I Fift) edition* . Freeze*Fracture 4ec)niGue. Port)Mester Biolog2 :lossar2. D Po$ 'KKJ #)ttp-99en.MiOibooOs.org9MiOi96tructuralQBioc)emistr29<ipids9MembraneQFluidit2& 5. 1rc)ita /ajaseO)aran and 6at)2anara2ana P. :ummadi-IFlip*Flop of ()osp)olipids in (roteoliposomes /econstituted from +etergent A.tract of C)loroplast MembranesRinetics and ()osp)olipid 6pecificit2I.(<o6 ;ne. 'K S =# '&- e'T5K . 7. 4imot)2 C. 1nglin and Eo)n C. Conbo2-I<ateral (ressure +ependence of t)e ()osp)olipid 4ransmembrane +iffusion /ate in (lanar*6upported <ipid Bila2ersI.Biop)2s E. 'KKT Eul2 S J7# &- T=0 J3. =. Ratrin R. 8alling, Bodil /amstedt, Eoel 8. P2strUm, E. (eter 6lotte, and 4)omas R. M. P2)olm-IC)olesterol >nteractions Mit) Fluid*()ase ()osp)olipids- Affect on t)e <ateral ;rganization of t)e Bila2erI.Biop)2s E. 'KKT ;ctober 7S J7#T&- 3T= 03TD . D. #)ttp-99MMM.marOergene.com9NebPeMsletter'.D.)tm&

Universitatea de Medicin i Farmacie Grigore T. Popa Iai Facultatea de Medicin

Cuprins
IntroducereVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVV.. ' Definiie Descriere

Tipuri de micriVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVV 3 Difuzia lateral Difuzia transversal

Modulatori ai fluiditii membranareVVVVVVVVVVVVVVVVVVV.. 5 ontrolul fluiditiiVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVV D Msurarea fluiditii membraneiVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVV. T "iblio#rafieVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVV. J

10