Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
03 Structura Celulei PDF
03 Structura Celulei PDF
Celula Perete celular Rigid: mucocomplex Rigid: chitină (fungi), celuloză (alge
verzi, plante superioare), absent (celule
animale)
prima formă de viaţă de pe Pământ Nucleu Primitiv, netipic (nucleoid) Tipic, cu nucleol
Celula microorganisme
în medicină
importantă cunoaşterea structurii şi înţelegerea
diferenţelor de structură şi metabolism a celulare acelulare
1
EUCARIOTE
PROCARIOTE
STRUCTURA ŞI MORFOLOGIA FUNGILOR
ŞI PROTOZOARELOR
EUCARIOTE - nucleul
EUCARIOTE - nucleul cromozomi
suspendaţi în nucleoplasmă
“comanda centrală a celulei”
molecule liniare de ADN şi proteine
unifică, controlează şi integrează funcţiile celulei
genele localizate de-a lungul moleculei de ADN
are 3 componente: (genom=genotip)
codifică proteine
membrană nucleară – străbătută de pori prin care pot trece rARN – sintetizat în nucleol – intră în compoziţia
molecule relativ mari ribozomilor
tARN
nucleoplasmă – matrice gelatinoasă, tip de protoplasmă caracteristice pt fiecare specie:
numărul şi compoziţia cromozomilor
2
EUCARIOTE – citoplasma (citosol) EUCARIOTE – reticul endoplasmic
semifluidă, gelatinoasă sistem de membrane interconectate şi aranjate să
conţine: formeze un sistem de transport alcătuit din:
granule de stocare tubuli
reticul endoplasmic saci plaţi
ribozomi ME:
complex Golgi reticul endoplasmic rugos – ribozomi ataşaţi de partea
mitocondrii externă a membranelor
lizozomi, etc. reticul endoplasmic neted – nu are ribozomi ataşaţi
3
EUCARIOTE - mitocondria EUCARIOTE - plastid
“fabrica de energie” la celulele plantelor
∅ 0,5 – 1 µm; lungime 7 µm organit în care se produce energie
aici are loc respiraţia celulară → sinteza moleculelor de ATP structuri inconjurate de membrană
nr. mitocondrii / celulă – variază conţin pigmenţi fotosintetici
sediul fotosintezei – conversia energiei luminoase în
! Mitocondria şi cloroplastul – provin din bacterii care au energie chimică
energie luminoasă
convieţuit cu celule eucariote CO2 şi H2O carbohidraţi şi oxigen
4
EUCARIOTE – cili
organite de locomoţie
în raport cu flagelii sunt mai:
mulţi
scurţi Structura şi morfologia celulei bacteriene
subţiri
celula eucariotă mobilă prin cili
celule ale organismului uman: celula ciliată tract respirator
protozoare ciliate
imprimă mişcare coordonată, ritmică
PROCARIOTE PROCARIOTE
de 10 ori mai mică faţă de celula eucariotă
structură simplă elemente obligatorii
citoplasma membrana citoplasmatică
1 cromozom citoplasma
ribozomi material nuclear
alte particule
perete
nu are sistem de mebrane interne
elemente facultative
membrana citoplasmatică
perete celular
± capsulă, flageli, pili, spor
5
STRUCTURA PEPTIDOGLICANULUI PROCARIOTE – perete bacterian
- stratul structurilor speciale:
bacterii Gram-pozitive
(20%) – polizaharide, acizi teichoici, MPZ
bacterii Gram-negative
(80%) – lipopolizaharide = endotoxine + lipoproteine
(complex glucido-lipido-polipeptidic)
bacterii acido-alcoolo-rezistente
acid micolic, ceruri, proteine GM mică
6
COLORAŢIA GRAM
7
PROCARIOTE –
material nuclear extracromosomal atenţie!!
plastid
plasmide organit citoplasmatic prezent în unele celule eucariote
molecule mici de ADN dc, circular alge, plante
libere în citoplasmă / integrate în cromozom sediul fotosintezei
conţin 10 – sute de gene
prezente în plasmid
celula fungică
mică moleculă de ADN extracromozomal
celula bacteriană
prezente în majoritatea bacteriilor
1 plasmid
multiple copii ale aceluiaşi plasmid
mai multe tipuri de plasmide
8
Coloraţia MANEVAL pentru capsulă – corpul bacterian în
roşu, materialul capsular clar (necolorat) Capsula bacteriană – coloraţie negativă
peritrich amphitrich
monotrich
lophotrich
9
PROCARIOTE – flageli PROCARIOTE – pili (fimbrii)
formaţiuni filamentoase, rigide, pericelular
prezente la unele bacterii Gram-negative
excepţional la bacterii Gram-pozitive (Streptococcus
mutans)
mai scurte şi mai subţiri decât flagelii
nu au rol în mobilitate
originea în membrana citoplasmatică
alcătuite din subunităţi proteice - pilină
Proteus vulgaris cell, possessing numerous short, straight pili and several longer, curved flagella; the cell is
undergoing binary fission. (Volk WA, et al.: Essentials of Medical Microbiology, 5th ed. Philadelphia,
Lippincott-Raven, 1996.)
10
PROCARIOTE – spor (endospor)
Viroizi
Prioni
Virusuri
Viroizi Viroizi
Caractere morfostructurale Localizare
ME: formaţiuni liniare sau bastonaşe nucleoli / nucleoplasmă
lungime < 50 nm; diametru 2,5 nm cloroplaste
sunt molecule unice de acid nucleic:
ARN, m.c., închis covalent, circular Replicare
240 – 375 nucleotide probabil în nucleu
nu au capsidă dependentă de enzimele celulei gazdă
în absenţa unui virus helper (dif. de v. defective)
ARN-ul viroizilor nu are capacităţi codificante (absenţa
aparentă a sintezelor)
ARN-ul viroizilor funcţionează şi ca enzimă - ribozima
11
Prioni - generalităţi
Viroizi
agenţi infecţioşi de natură proteică (PrPsc)
boli ale plantelor superioare proteine anormale, infecţioase
boala tuberculilor fuziformi ai cartofului
“proteinaceous infectious particle
boli ale citricelor
Henry Prusiner (1982) - 1997 premiul Nobel
nanismul şi marmorarea crizantemelor
structuri proteice, transmisibile şi infecţioase ⇒ se
boli ale palmierului de cocos, ale roşiilor etc.
multiplică!! → anulează dogma centrală
a biologiei moleculare
vizualizare
hibridizare in situ
induc boli ale SNC la om şi animale
scanare cu laser
encefalopatii spongiforme transmisibile (EST)
ME de baleiaj
proteine capabile de autoreplicare, în absenţa Prion-proteina (PrPsc din scrapie sau PrPcj din BCJ)
acidului nucleic este produsul de clivaj al proteinei precursor (PrPc)
fac parte din grupul “autofoldaze” sau “chaperone”
12
Prioni - Compoziţie chimică, structură Prioni - Compoziţie chimică, structură
proteina precursor (PrPc) – normală proteina precursor (PrPc) – normală
13
Prioni - Compoziţie chimică, structură
Prioni - Compoziţie chimică, structură
Prion-proteina (PrPsc) - anormală
Prion-proteina (PrPsc) - anormală
modificări chimice (8 modificări)
modificări chimice (8 modificări)
1. clivarea peptidului semnal N-terminal (cu 22 aa)
5. .
(identică) Formarea unui inel cu o legătură disulfidică
6. . prin care se unesc două reziduuri de cisteină
2. modificarea reziduului de arginină la nivelul
de la nivelul codonilor 179 şi 214 - în
codonului 25 (identică)
interiorul inelului , la nivelul codonului 189
3. . Glicozilarea oligozaharidelor linkate de asparagină
la nivelul codonilor 181 şi 198 – rezultă 400 forme
se evidenţiază o substituire de aminoacid
4. . ? rol în modificarea timpului de incubaţie în scrapie??
diferite de proteine prionice
? diferă ologozaharidele linkate în cele 2 proteine??
mutaţii punctiforme şi inserţii în codonii PRNP → susceptibilitate izoformă proteică cu structură şi funcţionalitate anormală
la encefalopatii spongiforme:
codonii 200, 210, 232 → BCJ
codonii 117, 198, 217 → BGSS
codonii 129, 178 → IFF
14
Prioni - acţiunea agenţilor fizici şi chimici
Prioni - Compoziţie chimică, structură
PrPsc rezistentă faţă de:
PrPsc = prion proteina anormală din scrapie proteaze
PrPc = prion proteina normală celulară nucleaze
DN-aze
alcătuite din ≈ 250 aa
RN-aze
cele 2 proteine sunt izoforme
agenţi inactivatori ai acizilor nucleici
structura primară asemănătoare radiaţii ionizante
hidroxilamina etc.
Prioni - acţiunea agenţilor fizici şi chimici Prioni - acţiunea agenţilor fizici şi chimici
rezistenţa PrPsc:
PrPsc parţial inactivată de:
expresia alterărilor sale conformaţionale → deficienţe de
căldură – 1000C
fenol transport la suprafaţa celulei şi de catabolizare →
clor acumulare anormală în substanţa cerebrală, formare de
hidroxid de Na agregate fibrilare, dezorganizarea substanţei cerebrale
LA OM:
kuru
boala Creutzfeld-Jacob (BCJ)
boala Gerstmann-Sträussler-Scheincker (BGSS)
varianta Creutzfeld-Jacob (v. BCJ)
insomnia fatală familială (IFF)
(Anca-Michaela Israil-Biologie moleculară,prezent şi perspective)
15
Prioni – boli prionice
LA ANIMALE: Prioni – Caracterele bolilor prionice
Clinic
scrapie
encefalita transmisibilă a curcilor perioada de incubaţie lungă: 2 luni-30 ani
(Anca-Michaela Israil-
Biologie moleculară,prezent şi perspective)
16
Prioni Prioni – cultivare - boala experimentală
animale inoculare
cimpanzei i.cerebrală
izolare de PrPsc din creierul pacienţilor şi
maimuţe i.peritoneală
animalelor bolnave şoareci subcutană
hamsteri digestivă
nurci necesară
transmitere intraspecie sau interspecii, cu pisici specificitate de specie a
material infecţios cerebral oi proteinelor prionice
bividee etc. adaptarea agentului prin pasaje
repetate
parenterală
lichidele de cultură inoculate la cimpanzei - boală
injecţii cu preparate contaminate
transfuzii
intervenţii chirurgicale
transplant de organe etc.
17
Prioni – patogeneza – aspecte clinice
Prioni – patogeneza – aspecte clinice Boala Creuzfeld – Jacob
caracteristicile comune ale encefalopatiei supravieţuire
debut
spongiforme: la 65 ani 6 -12 luni
Anglia – 17 cazuri
fermieri:
SUA - 15 cazuri
3 cazuri de fermieri proprietari de animale cu ESB transfuzie de sânge – Australia – femei cu tratament cu hormoni
personal medical: gonadotropi în antecedente – ulterior donatoare de sânge
vaccinare cu vaccin antirabic – preparat din ţesut cerebral de animal infectat
oftalmologi, ORL-işti, neurochirurgi, ortopezi, anatomo-patologi
18
Prioni – patogeneza – aspecte clinice Prioni – patogeneza – aspecte clinice
simptome: evoluţie
tulburări de ritm circadian; 13 luni
pierderea totală a somnului;
tulburări vegetative:
diagnostic
HTA, tahicardie, hipertermie etc. histopatologic
alterarea progresivă a atenţiei; atrofia selectivă a talamusului, în lipsa plăcilor amiloide
disfagie; nucleu anterior talamic
tulburări de echilibru; nucleu talamic medio-dorsal
mioclonii;
confuzie;
halucinaţii;
crize epileptiforme.
19
Prioni – patogeneza – aspecte clinice Prioni – patogeneza – aspecte clinice
evoluţie - 1 an clinic
ataxie cerebeloasă (kuru = tremurături)
predomină simptome psihiatrice, demenţă finală
rigiditate
fără modificări EEG caracteristice
caşexie progresivă
cauze posibile:
evoluţie letală
transmitere de la bovine – consum de carne de vită
infectată cu prioni (140 cazuri confirmate în Anglia)
infectate prin consum de pulbere de concentrate
de carne din oi cu scrapie
20
Prioni – epidemiologie Prioni – epidemiologie
rezervor de infecţie pt cazurile umane: transmitere pt. BCJ
omul caracter profesional
animale??? (insuficient cunoscut) contact cu ţesut sau sânge contaminat
transmitere pt. BCJ măcelari
iatrogen
personal medical
cu hormon pituitar de creştere (hipofiza – cadavru infectat)
transplant de cornee sau dura mater neurochirurgi
implantare de electrozi insuficient sterilizaţi oftalmologi
transfuzii de sânge de la femei tratate anterior cu hormon
gonadotrop anatomopatologi
vaccinare cu vaccin antirabic din ţesut cerebral infectat
Prioni – epidemiologie
Prioni – profilaxie
transmitere pt. BCJ reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
oral transmisibile:
boala kuru exclus de la donare
canibalism persoana cu antecedente familiale de boli prionice
produse alimentare de la animale infectate??? persoana cu antecedente de tratament cu hormon hipofizar
manipulare atentă a ţesuturilor şi organelor
creier
sânge
lcr
Prioni – profilaxie
reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
Prioni – profilaxie
transmisibile:
sterilizarea instrumentarului reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
căldură: autoclavare de 2 ori la transmisibile:
134°C – câte 1h; 138°C – câte 18 min;
agenţi chimici
interzis consum carne animal bolnav
hipoclorit de Na 5 - 25% - 1h;
NaOH (1N – 2N) – 1h urmată de autoclavare la 121°C – 30 min. interzis – făina de oase – carne în hrana animalelor
incinerare ţesuturi, organe contaminate arderea animalelor bolnave
piese histopatologice
tratare cu formol apoi cu acid formic 96% - 1h (nu inactivează
complet agentul prionic!!)
21
Prioni Virusuri - definiţie
pentru viitor
Virion = virus = corpuscul elementar = corpuscul viral
elucidarea naturii prionilor
aprofundarea
aspectelor genetice
unitatea virală, morfofuncţională, completă, intactă,
infecţioasă, cu diametrul cuprins între 18-400 nm, capabil
patogenezei
să infecteze bacterii, plante, animale, omul
inter-relaţiilor cu encefalopatia spongiformă a animalelor
identificarea aspectelor epidemiologice care contribuie
la apariţia encefalopatiei spongiforme şi întreruperea Se găsesc extracelular:
acestora înainte de a infecta celula gazdă
după ce s-au asamblat şi au fost eliberaţi din celula în care
s-au multiplicat
Virusuri - dimensiune
Extrem de mici Caractere generale ale virusurilor
18 – 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae)
Dimensiuni extrem de mici
V. hepatitei A, v. poliomielitei Nu pot fi văzute la microscopul optic
40 – 80 nm Se evidenţiază la microscopul electronic
rotavirus, v. rubeolos, v. hepatitei B, v. hepatitei C Sunt filtrabile prin filtre bacteriologice
Caractere generale ale virusurilor VIRUS VEGETATIV – particula virală aflată în celulă,
Parazitism avansat deficitară în unele aspecte ale replicării
Nu au enzime proprii
Dependenţă cvasitotală de enzimele şi maşinăria PROVIRUS – genom viral integrat în cromozomul celulei
replicativă a gazdei
gazdă, multiplicându-se sincron cu acesta
Se multiplică doar în interiorul unei celule vii
22
Morfologia virusurilor
sferic
v.gripal, v.herpetic, adenovirus, v. polio
cilindric, bastonaş
v. mozaicului tutunului, fagi
paralelipiped
v. variolic, v. vaccinia
cartuş
v. rabic
filamentos
v. Ebola
sferic cu coadă
bacteriofag
23
STRUCTURA GENOMULUI VIRAL
virusuri ARN
MĂRIMEA GENOMULUI VIRAL 1. m.c. liniar:
piesă unică
VHA
CAPSIDA CAPSIDA
complex de structuri proteice care îmbracă acidul
aspecte caracteristice ale morfogenezei capsidei
nucleic viral virale:
nr. mic de gene din genomul viral → nu permite
are arhitectură şi compoziţie specifice fiecărui tip sinteză de polipeptide cu diversitate mare
viral !! unităţi structurale similare, grupate repetitiv, după
modele geometrice similare, avantajoase ⇒ capside cu
structuri foarte complexe
24
CAPSIDA TIPURI DE SIMETRIE ALE ARHITECTURII CAPSIDALE
binară, helicoidal-icosaedrică
25
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ
adenovirus
herpesvirus
26
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDALĂ
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDALĂ
Virusuri cu anvelopă:
întreaga structură rigidă
Virusuri fără anvelopă
formă sferică – structura tubulară încolăcită în interiorul
formă flexibilă
virionului
aspect de bastonaş
spiră regulată – v.gripal
v.mozaicului tutunului
ghem neregulat – v.paragripal
de cartuş – structura tubulară orientată în spire strânse,
paralele – v.rabic
Paramyxoviridae Rhabdoviridae
Orthomyxoviridae
simetrie icosaedrică
Coada
parainfluenzavirus simetrie helicoidală
v. rabic
Simetrie complexă
înveliş viral
Funcţiile capsidei virale
protejează genomul de acţiunea factorilor externi, de
nucleazele celulare;
nucleoid viral asigură forma virionului;
fixează virionii nuzi de receptorii celulari specifici;
subunităţile structurale ale capsidei sunt antigene care
ADN viral cu proteine
asociate induc formarea şi reacţionează cu anticorpii
neutralizanţi.
-corpi laterali
27
Învelişul viral
peplos, anvelopă
derivă din membranele celulei gazdă:
din membrana plasmatică
v. gripal,
v. paragripal,
retrovirusuri
28
Spiculii
Spiculii
Hemaglutininele
de natură glicoproteică se află pe suprafaţa învelişului viral
prezente la v. învelite:
În structura lor au fost identificate 3 zone: Orthomyxovirus
Zona de ancorare, situată pe faţa internă a învelişului viral, Paramyxovirus
de natură peptidică; Rhabdovirus etc.
bastonaşe prismatice cu baza triunghiulară
Zona medie care străbate stratul bilipidic al învelişului nr. spiculilor de HA variază în funcţie de virus
extern, formată din lanţuri polipeptidice;
funcţii:
recunoaştere receptori celulari, ataşare şi penetrare virus în
Zona externă, situată deasupra învelişului extern, alcătuită celulă;
din glicolipide. induc răspuns imun (antc. hemaglutinoinhibanţi)
rol în hemaglutinarea hematiilor şi în hemadsorbţie.
Spiculii
Spiculii Profactorul de fuziune
poate fi situat pe învelişul viral sau pe alte structuri ale
Neuraminidazele învelişului
prezente la orthomyxovirus, paramyxovirus prezent la herpes virus, VRS, paramyxovirus
Glicoproteine ancorate în dublul strat lipidic formă inactivă
Funcţii: Glicoproteină
facilitează pătrunderea virusului în celula gazdă prin Funcţii:
fuziunea învelişului viral cu membrana celulară favorizând
scindarea acidului sialic din glicoproteinele suprafeţei
penetrarea virusului în celula gazdă;
celulare
fuziunea membranelor celulare determinând apariţia de
intervin în procesul de ieşire a noilor particule din celulă sinciţii;
diseminarea infecţiei;
producerea hemolizei.
29
Cele mai importante enzime virale Cele mai importante enzime virale
Reverstranscriptaze Endonucleaze
prezente la retrovirusuri, hepadnavirusuri clivează catenele acizilor nucleici
prezente la: v. ARN: v. gripal; v. ADN: poxvirus
ADN-polimerază ARN dependentă integrează genomul viral în ADN celular
transcrie genomul ARN în ADN la v. cu potenţial oncogen
SV40, adenovirusuri
ADN-polimerază ADN dependentă Enzime
necesare transcrierii şi modificărilor ARNm
integrază poliadenilat-polimeraze; metiltransferaze etc.
integrează ADN proviral în ADN celular prezente la: poxvirus; reovirus
numai la retrovirusuri
Cele mai importante enzime virale Cele mai importante enzime virale
Proteinaze
Proteinkinaze, Timidinkinaze, Dezoxicitindezaminaze clivează precursorii polipeptidici în proteine funcţionale
accelerează transcrierea şi replicarea genomului viral şi structurale
prezente la: herpesvirus prezente la: picornavirus, togavirus, coronavirus,
Tirozinkinaze flavivirus, calicivirus
codificate de oncogene ale v. sarcomului aviar (v. Rous) 4 clase:
serinproteinaze
au ca ţintă proteinele celulare implicate în reglarea ciclului
cisteinproteinaze
celular
aspartatproteinaze
metaloproteinaze
30