Sunteți pe pagina 1din 30

Celula

 unitatea vie fundamentală a oricărui organism


 ca întregul organism celula exprimă caracteristicile de
bază ale vieţii
 foloseşte nutrienţii din mediu pt a obţine energie
 poate creşte; se poate reproduce
 răspunde la stimulii din mediu
 lumină
 căldură/frig
 substanţe chimice
 poate suferi mutaţii genetice
 supravieţuire
 apariţie de noi specii etc.

Celula procariotă Celula eucariotă

Organisme Bacterii., Alge albastre Fungi, alge verzi, protozoare, plante,


animale superioare

Celula Perete celular Rigid: mucocomplex Rigid: chitină (fungi), celuloză (alge
verzi, plante superioare), absent (celule
animale)

 prima formă de viaţă de pe Pământ Nucleu Primitiv, netipic (nucleoid) Tipic, cu nucleol

Membrana nucleară Absentă Prezentă


 celula primitivă asemănătoare cu cele mai simple bacterii de
Cromozom Unic, moleculă circulară > 1, nr. constant pentru specie
azi ADN, haploid
 celula fără sistemul complex de membrane → procariotă Diviziune Directă (amitoză) Indirectă (mitoză sau cariokineză)
 celula cu membrană nucleară şi reticul endoplasmic → Înmulţire sexuată Rară şi de tip particular Frecventă
eucariotă Curenţi citoplasmatici Absenţi Prezenţi
 virusurile – evoluţie regresivă Reticul endoplasmic Absent; mezozomi Prezent, organizare caracteristică

 câteva gene protejate de un înveliş proteic Mitocondrii Absente Prezente


 fără/puţine enzime proprii Organe de locomoţie Facultative (cili) Facultative (cili sau flageli)
 depind de metabolismul energetic al celulei gazdă Mişcare amoeboidă Absentă Perete rigid – absentă;
Fără perete rigid – prezentă

Celula microorganisme

 în medicină
 importantă cunoaşterea structurii şi înţelegerea
diferenţelor de structură şi metabolism a celulare acelulare

 diferitelor tipuri de celule


 diferitelor categorii de microorganisme
viroizi
PROCARIOTE EUCARIOTE prioni
virusuri

explicarea fenomenelor patologice


explicarea efectelor terapiei medicamentoase
archaea algae
chemoterapia distruge microorganismele
bacteria protozoa
chemoterapia nu distruge celula umană sănătoasă
cyanobacteria fungi

1
EUCARIOTE
PROCARIOTE
STRUCTURA ŞI MORFOLOGIA FUNGILOR
ŞI PROTOZOARELOR

Cross-section through a yeast


 EUCARIOTE cell, showing the nucleus (N)
with nuclear pores (P),
 EU – adevărat mitochondrion (M), and
vacuole (V). The cytoplasm is
surrounded by the cell
 CARYO – nucleu
EUCARIOTE – membrana celulara
membrane. The thick outer
portion is the cell wall.
 ADN-ul celular este (Lechavalier HA, Pramer D:
The Microbes. Philadelphia,
înconjurat de membrană JB Lippincott, 1970.)
nucleară  membrana celulară=membrana plasmatică=membrană citoplasmică
 Dimensiuni
 10-30 µm ∅  mozaic format din proteine şi fosfolipide
 de 10 ori mai
 structură şi funcţie similară tuturor membranelor prezente
mari decât în celulele eucariote
celula procariotă
 Rol
 separă componentele celulei de mediul extern
 reglează schimburile dintre celulă şi mediul extern
(permeabilitate selectivă)

A typical eucaryotic animal cell. ( BJ,


Wood DL: Memmler’s The Human Body in
Health and Disease, 9th ed. Philadelphia,
Lippincott Williams & Wilkins, 2000.)

EUCARIOTE - nucleul
EUCARIOTE - nucleul  cromozomi
 suspendaţi în nucleoplasmă
 “comanda centrală a celulei”
 molecule liniare de ADN şi proteine
 unifică, controlează şi integrează funcţiile celulei
 genele localizate de-a lungul moleculei de ADN
 are 3 componente: (genom=genotip)
 codifică proteine
 membrană nucleară – străbătută de pori prin care pot trece  rARN – sintetizat în nucleol – intră în compoziţia
molecule relativ mari ribozomilor
 tARN
 nucleoplasmă – matrice gelatinoasă, tip de protoplasmă  caracteristice pt fiecare specie:
 numărul şi compoziţia cromozomilor

 numărul genelor de pe fiecare cromozom

2
EUCARIOTE – citoplasma (citosol) EUCARIOTE – reticul endoplasmic
 semifluidă, gelatinoasă  sistem de membrane interconectate şi aranjate să
 conţine: formeze un sistem de transport alcătuit din:
 granule de stocare  tubuli
 reticul endoplasmic  saci plaţi
 ribozomi  ME:
 complex Golgi  reticul endoplasmic rugos – ribozomi ataşaţi de partea
 mitocondrii externă a membranelor
 lizozomi, etc.  reticul endoplasmic neted – nu are ribozomi ataşaţi

 aici au loc majoritatea reacţiilor metabolice

EUCARIOTE - ribozomi EUCARIOTE - ribozomi


 18-22 nm ∅  majoritatea proteinelor eliberate de reticolul
 alcătuiţi din ARN ribozomal şi proteine endoplasmatic – nu sunt mature – trec în complexul
 rol în sinteza proteinelor esenţiale Golgi – maturare – exercitarea funcţiei caracteristice.
 aglomerări de ribozomi – poliribozomi (polisomi) –
 S – unitate Svedberg
legaţi printr-o moleculă de mARN.
 40S, 60S, 80S
 fiecare ribozom alcătuit din:  – coeficienţi de sedimentare
 subunitate mare – 60S
uniţi → ribozomi de 80S
 subunitate mică – 40S
 produşi în nucleol – transportaţi în citoplasmă – legaţi
prin mARN – iniţiază sinteza de proteine
Dr. Usanee Anukool, CMB-AMS, CMU

EUCARIOTE – lizozomi si peroxizomi


EUCARIOTE – complex Golgi  lizozomi:
 comunică cu reticolul endoplasmic  vezicule mici derivate din complexul Golgi
 completează transformarea proteinelor nou formate în  ∅ 1 µm
proteine mature, funcţionale şi împachetarea lor în  conţin lizozim şi enzime digestive
vezicule:  descompun materialul străin pătruns în celulă – fagocitoză
 depozitate în celulă  intervin şi în distrugerea celulelor deteriorate – autoliză
 excretate din celulă – exocitoză/secreţie  peroxizomi
 vezicule încojurate de mebrană unde se produce şi se
descompune H2O2 în H2O şi O2.
 conţin catalază
 prezenţi în aproape toate celulele eucariote
 predomină în hepatocitul mamiferelor

3
EUCARIOTE - mitocondria EUCARIOTE - plastid
 “fabrica de energie”  la celulele plantelor
 ∅ 0,5 – 1 µm; lungime 7 µm  organit în care se produce energie
 aici are loc respiraţia celulară → sinteza moleculelor de ATP  structuri inconjurate de membrană
 nr. mitocondrii / celulă – variază  conţin pigmenţi fotosintetici
 sediul fotosintezei – conversia energiei luminoase în
! Mitocondria şi cloroplastul – provin din bacterii care au energie chimică
energie luminoasă
convieţuit cu celule eucariote  CO2 şi H2O carbohidraţi şi oxigen

energie stocată în leg.chimice

EUCARIOTE - plastid EUCARIOTE - citoschelet


 sistem de fibre alcătuit din:
 cloroplast  microtubuli
 un tip de plastid  concavi, subţiri, formţi din subunităţi proteice = tubulină

 conţine pigment fotosintetic verde → clorofil  microfilamente de actină

 prezent în:  filamente intermediare


 celulele plantelor  rol:
 algelor  structural: rigiditate, formă
 diviziune celulară
 contractilitate
 motilitate etc.

EUCARIOTE – perete celular EUCARIOTE – flageli


 structură simplă  organite de locomoţie
 celuloză – în alge, plante  celula eucariotă
 pectină  imobilă
 lignină  mobilă
 chitină – fungi, exoschelet crabi, exoschelet cărăbuş  spermatozoid
 săruri minerale – în alge  protozoare flagelate
 rol:  1 sau mai mulţi / celulă
 rigiditate  imprimă mişcare de răsucire
 formă
 protecţie

4
EUCARIOTE – cili
 organite de locomoţie
 în raport cu flagelii sunt mai:
 mulţi
 scurţi Structura şi morfologia celulei bacteriene
 subţiri
 celula eucariotă mobilă prin cili
 celule ale organismului uman: celula ciliată tract respirator
 protozoare ciliate
 imprimă mişcare coordonată, ritmică

PROCARIOTE PROCARIOTE
 de 10 ori mai mică faţă de celula eucariotă
 structură simplă  elemente obligatorii
 citoplasma  membrana citoplasmatică
 1 cromozom  citoplasma
 ribozomi  material nuclear
 alte particule
 perete
 nu are sistem de mebrane interne
 elemente facultative
 membrana citoplasmatică
 perete celular
 ± capsulă, flageli, pili, spor

PROCARIOTE – perete bacterian


PROCARIOTE
Grosime 15 – 35 nm; alcătuit din proteine, lipide, hidraţi de carbon
Format din:

 elemente facultative - strat bazal


 elemente obligatorii = mucopeptid = mucocomplex = peptidoglican = mureină
 perete  capsulă
* reţea
 membrana citoplasmatică  flageli
- macromolecule lungi, polizaharidice paralele
 citoplasma  pili
Acid N-acetilmuramic
 material nuclear  spor N-acetilglucozamina (! Lizozim)
- legate prin punţi transversale polipeptidice
Tetrapeptid – D şi L-aminoacizi – ataşat la acidul N-acetilmuramic
Pentapeptid – punţi între tetrapeptide (!penicilina)

5
STRUCTURA PEPTIDOGLICANULUI PROCARIOTE – perete bacterian
- stratul structurilor speciale:
bacterii Gram-pozitive
(20%) – polizaharide, acizi teichoici, MPZ

bacterii Gram-negative
(80%) – lipopolizaharide = endotoxine + lipoproteine
(complex glucido-lipido-polipeptidic)

bacterii acido-alcoolo-rezistente
acid micolic, ceruri, proteine GM mică

PROCARIOTE – perete bacterian


 rolul peretelui bacterian
 susţine mecanic celula bacteriană
 menţine forma bacteriei
 asigură protecţia celulei bacteriene
 intervine în procesele de osmoză şi difuziune
 este sediul
 unor antigene somatice
 receptorilor specifici pentru bacteriofagi
 participă la diviziunea bacteriei
Bacterial cell walls. (A) A portion of the Gram-positive bacterium, Bacillus fastidious;
note the cell wall’s thick peptidoglycan layer, beneath which can be seen the cell membrane.
 imprimă caracterele de tinctorialitate ale
(B) The Gram-negative bacterium, Enterobacter aerogenes; both the cell membrane and celulei bacteriene
the outer membrane are visible along some sections of the cell wall. (A: Volk WA, et al.:
Essentials of Medical Microbiology, 5th ed. Philadelphia, Lippincott-Raven, 1996.)

6
COLORAŢIA GRAM

PROCARIOTE – membrana citoplasmatica

structură similară cu cea a eucariotelor


flexibilă, foarte subţire, vizibilă la ME
alcătuită după modelul mozaicului fluid:
două straturi de molecule fosfolipidice cu extremităţile
hidrofobe spre interior şi cu cele hidrofile spre exterior
între moleculele de fosfolipide se găsesc proteine
Invaginare - mezozomi: sistem membranos intracelular cu rol în
respiraţie, diviziune etc.

PROCARIOTE – membrana citoplasmatica PROCARIOTE – citoplasma


 sistem coloidal complex: proteine, glucide, lipide, apă,
 Rolul membranei citoplasmatice: minerale
 reglează presiunea osmotică  structură granulară:
 controlează procesele de difuzie pasivă  ribozomi – 15 nm; izolaţi sau ca reticul endoplasmatic; rol
esenţial în biosinteza proteinelor celulare
 controlează procesele de difuzie catalizate
 granulaţii de volutină (corpusculi Babeş-Ernst, granulaţii
enzimatic metacromatice) – polimetafosfaţi
 conţine enzime ale metabolismului respirator  granulaţii (incluzii) de glicogen, amidon, lipide etc.
 intervine în creşterea şi diviziunea bacteriei  vacuole – conţin diferite substanţe în soluţii învelite de
membrană lipoproteică = tonoplast
 este locul de sinteză al endotoxinelor
 conţine mari cantităţi de ARN – citoplasma intens bazofilă

PROCARIOTE – material nuclear PROCARIOTE – material nuclear


 nu este delimitat de o membrană diferenţiată  cromozomul bacterian are 850 – 6500 gene codificante pt:
 nu are nucleosol  enzime
 alcătuit dintr-un unic cromozom haploid  proteine
 format dintr-o unică moleculă de ADN dublu helicată,  rARN
închisă circular  tARN
 coordonează toată activitatea celulei
 capabil de autoreplicare
 diviziunea nucleului precede diviziunea citoplasmei şi a
peretelui - bacterii cu 2-4 nuclei ce apar ca gheme (sculuri)
de forme diferite ocupând cam 1/10 din volumul bacteriei =
bacterii pe cale de diviziune

7
PROCARIOTE –
material nuclear extracromosomal atenţie!!
 plastid
 plasmide  organit citoplasmatic prezent în unele celule eucariote
 molecule mici de ADN dc, circular  alge, plante
 libere în citoplasmă / integrate în cromozom  sediul fotosintezei
 conţin 10 – sute de gene
 prezente în  plasmid
 celula fungică
 mică moleculă de ADN extracromozomal
 celula bacteriană
 prezente în majoritatea bacteriilor
 1 plasmid
 multiple copii ale aceluiaşi plasmid
 mai multe tipuri de plasmide

PROCARIOTE – capsula PROCARIOTE – capsula


 capsulă  se formează
 substanţă gelatinoasă, mucoidă la exteriorul celulei  în organismul gazdă
bacteriene, bine delimitată, vizibilă la microscop  pe medii în condiţii optime
 colonii “M” – lucioase, mucoase, confluente

 microcapsulă (slime layer; glycocalix)  compoziţie în funcţie de specie


 substanţă gelatinoasă, mucoidă la exteriorul celulei  în general polizaharide
bacteriene, în strat subţire, evidenţiabilă doar prin metode  polipeptide – Bacillus anthracis
chimice  substanţe capsulare diferite chimic la aceeaşi
specie → tulpini diferite→ diferenţiere
serologică

PROCARIOTE – capsula PROCARIOTE – capsula


 ROL:  EVIDENŢIERE:
 asociată cu patogenitatea tulpinii - factor al virulenţei  coloraţie negativă cu tuş de China, colargol
 protector faţă de factori nocivi (fagocitoza, desicaţia)
 coloraţii speciale (Hiss)
 de adezină (permite aderarea unor bacterii)
 barieră protectoare faţă de bacteriofagi  reacţia de umflare a capsulei (Neufeld) cu seruri
 conţine substanţe cu specificitate antigenică de specie polivalente şi monovalente anti-capsulare
sau de tip (ag. K)

8
Coloraţia MANEVAL pentru capsulă – corpul bacterian în
roşu, materialul capsular clar (necolorat) Capsula bacteriană – coloraţie negativă

Capsule stain. The capsule stain is an example


of a negative staining technique.
The bacterial cells and the background stain,
but the capsules do not. The capsules are seen
as unstained “halos” around the bacterial cells.
Klebsiella pneumoniae (x 1000)

Streptococcus pneumoniae (x 1000)


Streptococcus pneumoniae

PROCARIOTE – flageli PROCARIOTE – flageli


1. Corpuscul bazal
 organe de locomoţie
 situat în citoplasmă
 subţiri, fine, alungite, neramificate, flexibile, sinuoase imediat sub membrana
 alcătuiţi din flagelină – proteină complexă similară cu citoplasmatică
miozina musculară  alcătuit din
 reprezintă antigenul flagelar “H”  2 discuri M şi P la bacterii
Gram-pozitive
 pornesc din citoplasma bacteriei, din corpusculul bazal  4 discuri M, S, P, L la
bacterii Gram-negative
2. Cârlig
3. Filament flagelar

PROCARIOTE – flageli PROCARIOTE – flageli

peritrich amphitrich

monotrich
lophotrich

9
PROCARIOTE – flageli PROCARIOTE – pili (fimbrii)
 formaţiuni filamentoase, rigide, pericelular
 prezente la unele bacterii Gram-negative
 excepţional la bacterii Gram-pozitive (Streptococcus
mutans)
 mai scurte şi mai subţiri decât flagelii
 nu au rol în mobilitate
 originea în membrana citoplasmatică
 alcătuite din subunităţi proteice - pilină

PROCARIOTE – pili (fimbrii) PROCARIOTE – pili (fimbrii)


 pili de sex (de conjugare)
 0-4 bucăţi / celulă;
 codificaţi de plasmide
 fimbrii de adeziune
 10-30 bucăţi / celulă;
 codificate de gene de pe cromozom
 fimbrii comune
 50-400 bucăţi / celulă

Proteus vulgaris cell, possessing numerous short, straight pili and several longer, curved flagella; the cell is
undergoing binary fission. (Volk WA, et al.: Essentials of Medical Microbiology, 5th ed. Philadelphia,
Lippincott-Raven, 1996.)

PROCARIOTE – spor (endospor) PROCARIOTE – spor (endospor)


 format în unele bacterii  rezistenţi la
 formă de rezistenţă / supravieţuire  căldură
 frig
sporulare
celulă vegetativă endospor  uscăciune
 substanţe chimice
germinare

 sporulare  supravieţuiesc ani de zile în praf, pe sol


 copia cromozomului + cantitate mică de citoplasmă –  rezistă la fierbere, la acţiunea dezinfectantelor
înconjurate de un înveliş proteic gros  se evidenţiază cu coloraţii speciale sau la ME

10
PROCARIOTE – spor (endospor)

Spor central, sferic, mai mic


decât corpul bacterian

Spor central, ovalar, mai mare


decât corpul bacterian

Spor subterminal, ovalar, mai


mare decât corpul bacterian

Spor terminal, sferic, mai mare


decât corpul bacterian

Bacillus anthracis – coloraţie pentru


spori (x 1000)

Viroizi
Prioni
Virusuri

Viroizi Viroizi
 Caractere morfostructurale  Localizare
 ME: formaţiuni liniare sau bastonaşe  nucleoli / nucleoplasmă
 lungime < 50 nm; diametru 2,5 nm  cloroplaste
 sunt molecule unice de acid nucleic:
 ARN, m.c., închis covalent, circular  Replicare
 240 – 375 nucleotide  probabil în nucleu
 nu au capsidă  dependentă de enzimele celulei gazdă
 în absenţa unui virus helper (dif. de v. defective)
 ARN-ul viroizilor nu are capacităţi codificante (absenţa
aparentă a sintezelor)
 ARN-ul viroizilor funcţionează şi ca enzimă - ribozima

11
Prioni - generalităţi
Viroizi
 agenţi infecţioşi de natură proteică (PrPsc)
 boli ale plantelor superioare  proteine anormale, infecţioase
 boala tuberculilor fuziformi ai cartofului
 “proteinaceous infectious particle
 boli ale citricelor
 Henry Prusiner (1982) - 1997 premiul Nobel
 nanismul şi marmorarea crizantemelor
 structuri proteice, transmisibile şi infecţioase ⇒ se
 boli ale palmierului de cocos, ale roşiilor etc.
multiplică!! → anulează dogma centrală
a biologiei moleculare
 vizualizare
 hibridizare in situ
 induc boli ale SNC la om şi animale
 scanare cu laser
 encefalopatii spongiforme transmisibile (EST)
 ME de baleiaj

Prioni - multiplicare Prioni - Compoziţie chimică, structură

 proteine capabile de autoreplicare, în absenţa  Prion-proteina (PrPsc din scrapie sau PrPcj din BCJ)
acidului nucleic  este produsul de clivaj al proteinei precursor (PrPc)
 fac parte din grupul “autofoldaze” sau “chaperone”

 proteină normală de 33 – 35 kDa


 glicoproteină secretată la suprafaţa membranei plasmatice a tuturor
celulelor din organism
 cantitate mare pe suprafaţa neuronilor

Prioni - Compoziţie chimică, structură Prioni - Compoziţie chimică, structură

 rolul proteinei precursor (PrPc) proteina precursor (PrPc) – normală


 interacţionează cu receptorii de acetilcolină  compusă din 254 aa
 în memorie
 devine funcţională după
 codifică şi conservă informaţia
 modificări chimice
 în reglarea somnului
 modificări conformaţionale
 protecţie în stress-ul oxidativ
 trofic pentru celulele Purkinje

12
Prioni - Compoziţie chimică, structură Prioni - Compoziţie chimică, structură
proteina precursor (PrPc) – normală proteina precursor (PrPc) – normală

 modificări chimice (7 modificări)  modificări chimice (7 modificări)


1. clivarea peptidului semnal N-terminal (cu 22 aa) 5. . Formarea unui inel cu o legătură disulfidică
2. modificarea reziduului de arginină la nivelul 6. . prin care se unesc două reziduuri de cisteină
codonului 25 de la nivelul codonilor 179 şi 214
3. . 7. Îndepărtarea peptidului hidrofob C-terminal (cu
Glicozilarea oligozaharidelor linkate de
4. . asparagină la nivelul codonilor 181 şi 198 20 aa) şi fixarea, în schimb, a unui
glicozilfosfatidilinozitol

Prioni - Compoziţie chimică, structură


Prioni - Compoziţie chimică, structură
proteina precursor (PrPc) – normală

proteina precursor (PrPc) – normală


 modificări conformaţionale
 replierea proteinei – configuraţie secundară α-helix
 sursă de energie (rol de enzimă) – chiar PrPc care catalizează
propria împăturire: rol de autofoldază=proteină chaperone

(Anca-Michaela Israil-Biologie moleculară,prezent şi perspective)

Prioni - Compoziţie chimică, structură


Prioni - Compoziţie chimică, structură
 Prion-proteina (PrPsc) - anormală
 proteină anormală  Prion-proteina (PrPsc) - anormală
 compusă tot din 254 aa
 greutate moleculară 21 – 30 kDa
 codificată de acelaşi ORF (open reading frame)
 izolată din plăcile amiloide cerebrale
 are acelaşi semnal peptidic format din 22 aa
 morfologic – structuri filamentoase
 diferite modificările posttranslaţionale chimice şi
 scrapie associated filaments “SAF” conformaţionale

13
Prioni - Compoziţie chimică, structură
Prioni - Compoziţie chimică, structură
 Prion-proteina (PrPsc) - anormală
 Prion-proteina (PrPsc) - anormală
 modificări chimice (8 modificări)
 modificări chimice (8 modificări)
1. clivarea peptidului semnal N-terminal (cu 22 aa)
5. .
(identică) Formarea unui inel cu o legătură disulfidică
6. . prin care se unesc două reziduuri de cisteină
2. modificarea reziduului de arginină la nivelul
de la nivelul codonilor 179 şi 214 - în
codonului 25 (identică)
interiorul inelului , la nivelul codonului 189
3. . Glicozilarea oligozaharidelor linkate de asparagină
la nivelul codonilor 181 şi 198 – rezultă 400 forme
se evidenţiază o substituire de aminoacid
4. . ? rol în modificarea timpului de incubaţie în scrapie??
diferite de proteine prionice
? diferă ologozaharidele linkate în cele 2 proteine??

Prioni - Compoziţie chimică, structură Prioni - Compoziţie chimică, structură


 Prion-proteina (PrPsc) - anormală  Prion-proteina (PrPsc) – anormală

 modificări chimice (8 modificări)


7. Îndepărtarea peptidului hidrofob C-terminal (cu  modificări chimice (8 modificări)
20 aa) şi fixarea, în schimb, a unui
glicozilfosfatidilinozitol Determină alte diferenţe posttranslaţionale şi de

8. Modificări la nivelul reziduului de arginină metabolism diferite fenotipuri de boli prionice


corespunzător codonului 37

Prioni - aspecte genetice


 sinteza proteinei prionice – codificată genetic Prioni - Compoziţie chimică, structură
 expresia PrPc umane
 codificată de gena PRNP  Prion-proteina (PrPsc) - anormală
 situată pe braţul scurt al cromozomului 20  modificări conformaţionale
 cadru deschis de citire (ORF) – 253 codoni (759 nucleotide)
replierea proteinei – configuraţie secundară β-plisat (β-sheets)

 mutaţii punctiforme şi inserţii în codonii PRNP → susceptibilitate izoformă proteică cu structură şi funcţionalitate anormală
la encefalopatii spongiforme:
 codonii 200, 210, 232 → BCJ
 codonii 117, 198, 217 → BGSS
 codonii 129, 178 → IFF

14
Prioni - acţiunea agenţilor fizici şi chimici
Prioni - Compoziţie chimică, structură
 PrPsc rezistentă faţă de:
 PrPsc = prion proteina anormală din scrapie  proteaze
 PrPc = prion proteina normală celulară  nucleaze
 DN-aze
 alcătuite din ≈ 250 aa
 RN-aze
 cele 2 proteine sunt izoforme
 agenţi inactivatori ai acizilor nucleici
 structura primară asemănătoare  radiaţii ionizante

 structura secundară diferă:  UV cu lungimi de undă 254-280 nm

 PrPc – tip α-helix  agenţi chimici


 PrPsc – tip β-plisat  aldehide

 hidroxilamina etc.

Prioni - acţiunea agenţilor fizici şi chimici Prioni - acţiunea agenţilor fizici şi chimici

 rezistenţa PrPsc:
 PrPsc parţial inactivată de:
 expresia alterărilor sale conformaţionale → deficienţe de
 căldură – 1000C
 fenol transport la suprafaţa celulei şi de catabolizare →
 clor acumulare anormală în substanţa cerebrală, formare de
 hidroxid de Na agregate fibrilare, dezorganizarea substanţei cerebrale

Prioni - acţiunea agenţilor fizici şi chimici Prioni – boli prionice

LA OM:

kuru
boala Creutzfeld-Jacob (BCJ)
boala Gerstmann-Sträussler-Scheincker (BGSS)
varianta Creutzfeld-Jacob (v. BCJ)
insomnia fatală familială (IFF)
(Anca-Michaela Israil-Biologie moleculară,prezent şi perspective)

15
Prioni – boli prionice
LA ANIMALE: Prioni – Caracterele bolilor prionice
 Clinic
scrapie
encefalita transmisibilă a curcilor  perioada de incubaţie lungă: 2 luni-30 ani

encefalita spongiformă bovină (boala vacilor nebune)  simptomatologie neurologică

encefalita degenerativă a felinelor (pisici domestice)  evoluţie lentă, progresivă: luni-ani

boala cronică caşectizantă a cervideelor  fatală

encefalopatia ugulatelor exotice: nyala, antilopa


africană în captivitate

Prioni – Caracterele bolilor prionice Prioni – Caracterele bolilor prionice


Există sub forme interconvertibile de bastoane, complexe
 Histopatologic proteice cu lipid-detergent şi lipozomi
 leziuni cerebrale degenerative
 vacuolizare progresivă a
 corpilor neuronali
 dendritelor
 axonilor
 proliferare astrocitară excesivă
 “status spongious” al materiei cenuşii
 detectare de structuri tubo-veziculare în prelungirile
sinaptice

(Anca-Michaela Israil-
Biologie moleculară,prezent şi perspective)

Prioni – Caracterele bolilor prionice Prioni – Caracterele bolilor prionice


 Răspuns imun  Răspuns imun – în boala naturală
 ABSENT!!
 gazda este imunocompetentă faţă de alte antigene!!
 absenţa sintezei anticorpilor specifici

 sistemul imun nu se mobilizează faţă  absenţa răspunsului celular specific

de prioni!!  absenţa oricăror modificări calitative, cantitative

 tratamentul cu imunomodulatoare sau funcţionale ale limfocitelor T şi B


sau imunosupresoare nu modifică  absenţa oricăror modificări ale interleukinelor
evoluţia bolii!!

16
Prioni Prioni – cultivare - boala experimentală
 animale  inoculare
 cimpanzei  i.cerebrală
 izolare de PrPsc din creierul pacienţilor şi
 maimuţe  i.peritoneală
animalelor bolnave  şoareci  subcutană

 hamsteri  digestivă

 nurci  necesară
 transmitere intraspecie sau interspecii, cu  pisici  specificitate de specie a
material infecţios cerebral  oi proteinelor prionice
 bividee etc.  adaptarea agentului prin pasaje
repetate

suspensii de creier de la bolnavii de kuru


reprodusă boala după
filtrate acelulare de la bolnavi cu BCJ latenţă de 1 an

Prioni – cultivare – substraturi celulare Prioni – patogeneza – aspecte clinice


 poarta de intrare
 orală
 culturi de explanturi de creier – inoculare cu agenţi  canibalism ritual
kuru şi BCJ – infective 70 – 25 zile  hrana bovinelor
 făină de carne de oi, capre insuficient prelucrată termic

 parenterală
 lichidele de cultură inoculate la cimpanzei - boală
 injecţii cu preparate contaminate
 transfuzii
 intervenţii chirurgicale
 transplant de organe etc.

Prioni – patogeneza – aspecte clinice Prioni – patogeneza – aspecte clinice

 cale de diseminare – nu este certă


 cale de eliminare – nu este certă
 replicare în ggl regionali → căi limfatice → căi
 prioni – la om
sanguine (trombocite infectate?) → ţesut reticulo-
endotelial  în sânge şi urină
 în creier şi cornee

 centripet pe cale nervoasă – la rozătoare

17
Prioni – patogeneza – aspecte clinice
Prioni – patogeneza – aspecte clinice Boala Creuzfeld – Jacob
 caracteristicile comune ale encefalopatiei  supravieţuire
 debut
spongiforme:  la 65 ani  6 -12 luni

 oboseală, anxietate,  evoluţie


confuzie  fatală
 caracter heredo-familial
 perioada de stare  diagnostic
 transmitere verticală
 mioclonii, ataxie  EEG – caracteristic
 predispoziţie genetică
cerebeloasă  Western-blot – PrPsc
 simptome piramidale  ex. histopatologic creier
 tablou clinic neurologic cu demenţă:  simptome  degenerări neuronale
dezorientare, scăderea memoriei, tulburări ale extrapiramidale  vacuolizări
intelectului şi judecăţii  demenţă progresivă  acumulare de amiloid

Prioni – patogeneza – aspecte clinice


Prioni – patogeneza – aspecte clinice
Boala Creuzfeld – Jacob
 cunoscută din sec. 18; frecvenţă 1/1.000.000/an în lume
Boala Creuzfeld – Jacob
 debut la 60 ani
 3 mecanisme de producere aBCJ
 Simptome:
 pierderea treptată a stării de echilibru
 pierderea treptată a capacităţii de deplasare  infecţie lentă

 pierderea memoriei  infecţie sporadică


 stare de confuzie
 alterare genetică
 dezorientare
 demenţă
 sfârşit letal

Prioni – patogeneza – aspecte clinice Prioni – patogeneza – aspecte clinice


Boala Creuzfeld – Jacob
Boala Creuzfeld – Jacob
 3 mecanisme de producere a BCJ
 3 mecanisme de producere a BCJ
 infecţie lentă
 infecţie lentă  contaminare iatrogenă
1. infecţii conjugale – transmitere orizontală??  80 cazuri până în prezent
 transplant de cornee, de timpan
2. infecţii în raport cu profesiunea:
 implantare de electrozi intracerebrali insuficient sterilizaţi
 măcelari:  instrumentar chirurgical sterilizat prin metode clasice
 administrare de hormon pituitar de creştere – preparat din ţesut hipofizar
 familie cu 9 membrii – 3 măcelari toţi cu BCJ – transmitere prin soluţie de
recoltat de la cadavru
continuitate?? (sângele este infecţios înainte de apar.simpt)  1973-1985, Franţa- 100.000 hipofize prelevate – 41 cazuri

 Anglia – 17 cazuri
 fermieri:
 SUA - 15 cazuri
 3 cazuri de fermieri proprietari de animale cu ESB  transfuzie de sânge – Australia – femei cu tratament cu hormoni
 personal medical: gonadotropi în antecedente – ulterior donatoare de sânge
 vaccinare cu vaccin antirabic – preparat din ţesut cerebral de animal infectat
 oftalmologi, ORL-işti, neurochirurgi, ortopezi, anatomo-patologi

18
Prioni – patogeneza – aspecte clinice Prioni – patogeneza – aspecte clinice

Boala Creuzfeld – Jacob Boala Creuzfeld – Jacob

 3 mecanisme de producere aBCJ  3 mecanisme de producere aBCJ


 infecţie sporadică  alterare genetică

 mecanism necunoscut  10-15% din cazuri


 1994 – Anglia – 53 cazuri – vârste peste 75 ani  până în 1996 – 100 familii cu asemenea cazuri
 1994 – Germania – 115 cazuri – vârsta medie 66 ani  legătură între unele mutaţii de pe cromozomul 20 şi boală
1996 – Anglia – 10 cazuri noi – variantă BCJ – 19-41 ani

Prioni – patogeneza – aspecte clinice Prioni – patogeneza – aspecte clinice

Boala Gerstmann-Sträussler-Scheincker Insomnia fatală familială

 debut  descrisă în 1992 (Medori R.)


 1994: 14 cazuri în Italia, Franţa, Anglia, SUA
 la 45 – 50 ani
 debut
 mai frecventă în Japonia
 la 35-60 ani;
 are caracter ereditar familial (formă genetică a bolii)  evoluţie
 variantă a BCJ  7-12 luni

 simptomatologie similară cu BCJ  caracter familial-ereditar:


 29 cazuri într-o familie pe 5 generaţii
 domină
 ataxia spino-cerebeloasă
 demenţa

Prioni – patogeneza – aspecte clinice Prioni – patogeneza – aspecte clinice

Insomnia fatală familială Insomnia fatală familială

 simptome:  evoluţie
 tulburări de ritm circadian;  13 luni
 pierderea totală a somnului;
 tulburări vegetative:
 diagnostic
 HTA, tahicardie, hipertermie etc.  histopatologic
 alterarea progresivă a atenţiei;  atrofia selectivă a talamusului, în lipsa plăcilor amiloide
 disfagie;  nucleu anterior talamic
 tulburări de echilibru;  nucleu talamic medio-dorsal
 mioclonii;
 confuzie;
 halucinaţii;
 crize epileptiforme.

19
Prioni – patogeneza – aspecte clinice Prioni – patogeneza – aspecte clinice

Varianta nouă a BCJ Boala kuru

 descrisă în 1996  1957 – Gajdusek - la triburile din Papua-Noua Guinee


 diferenţe:  canibalism ritual
 debut – la 29 ani  femeile şi copiii - consum de creier de la rudele decedate

 evoluţie - 1 an  clinic
 ataxie cerebeloasă (kuru = tremurături)
 predomină simptome psihiatrice, demenţă finală
 rigiditate
 fără modificări EEG caracteristice
 caşexie progresivă
 cauze posibile:
 evoluţie letală
 transmitere de la bovine – consum de carne de vită
infectată cu prioni (140 cazuri confirmate în Anglia)
infectate prin consum de pulbere de concentrate
de carne din oi cu scrapie

Prioni – dg. laborator


Prioni – dg. laborator evidenţierea plăcilor amiloide
 pp:  biopsie cerebrală + ex. histopatologic
 biopsii de ţesut cerebral (!! risc mare)  ! risc de rezultat fals negativ (zonă neafectată)

 ganglioni spinali  ex. imuno-histo-chimic cu Ac. monoclonali


 nervi periferici  ggl. spinali, ggl. mezenterici, nervi periferici
 sânge  Western-blot
 l.c.r.  LCR, sânge, derivate din plasmă, material bioptic

 evidenţierea PrPsc – doar la conc. de 106 particule /gr.  PET-blot


ţesut cerebral  preparate fixate cu formol
 !! deja infecţia a depăşit faza asimptomatică  detectează conc. mici de PrPsc, în faze incipiente

 PCR, hibridizări, ELISA

Prioni – dg. laborator


 Dg. de certitudine Prioni – epidemiologie
 postmortem – evidenţierea leziunilor histopatologice  incidenţa bolii subevaluată
cerebrale  nu are raportare obligatorie
 dg. de certitudine nu se practică întotdeauna
 incidenţa anuală
 1 -2 cazuri la 1 milion
 rata medie a mortalităţii
 0,09 – 31 cazuri la 1 milion
 raport bărbaţi / femei 1,05 / 1

20
Prioni – epidemiologie Prioni – epidemiologie
 rezervor de infecţie pt cazurile umane:  transmitere pt. BCJ
 omul  caracter profesional
 animale??? (insuficient cunoscut)  contact cu ţesut sau sânge contaminat
 transmitere pt. BCJ  măcelari
 iatrogen
 personal medical
 cu hormon pituitar de creştere (hipofiza – cadavru infectat)
 transplant de cornee sau dura mater  neurochirurgi
 implantare de electrozi insuficient sterilizaţi  oftalmologi
 transfuzii de sânge de la femei tratate anterior cu hormon
gonadotrop  anatomopatologi
 vaccinare cu vaccin antirabic din ţesut cerebral infectat

Prioni – epidemiologie
Prioni – profilaxie
 transmitere pt. BCJ  reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
 oral transmisibile:
 boala kuru  exclus de la donare
 canibalism  persoana cu antecedente familiale de boli prionice
 produse alimentare de la animale infectate???  persoana cu antecedente de tratament cu hormon hipofizar
 manipulare atentă a ţesuturilor şi organelor
 creier
 sânge
 lcr

Prioni – profilaxie
 reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
Prioni – profilaxie
transmisibile:
 sterilizarea instrumentarului  reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
 căldură: autoclavare de 2 ori la transmisibile:
 134°C – câte 1h; 138°C – câte 18 min;
 agenţi chimici
 interzis consum carne animal bolnav
 hipoclorit de Na 5 - 25% - 1h;
 NaOH (1N – 2N) – 1h urmată de autoclavare la 121°C – 30 min.  interzis – făina de oase – carne în hrana animalelor
 incinerare ţesuturi, organe contaminate  arderea animalelor bolnave
 piese histopatologice
 tratare cu formol apoi cu acid formic 96% - 1h (nu inactivează
complet agentul prionic!!)

21
Prioni Virusuri - definiţie
 pentru viitor
 Virion = virus = corpuscul elementar = corpuscul viral
 elucidarea naturii prionilor

 aprofundarea
 aspectelor genetice
unitatea virală, morfofuncţională, completă, intactă,
infecţioasă, cu diametrul cuprins între 18-400 nm, capabil
 patogenezei
să infecteze bacterii, plante, animale, omul
 inter-relaţiilor cu encefalopatia spongiformă a animalelor
 identificarea aspectelor epidemiologice care contribuie
la apariţia encefalopatiei spongiforme şi întreruperea  Se găsesc extracelular:
acestora  înainte de a infecta celula gazdă
 după ce s-au asamblat şi au fost eliberaţi din celula în care
s-au multiplicat

Virusuri - dimensiune
 Extrem de mici Caractere generale ale virusurilor
 18 – 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae)
 Dimensiuni extrem de mici
 V. hepatitei A, v. poliomielitei  Nu pot fi văzute la microscopul optic
 40 – 80 nm  Se evidenţiază la microscopul electronic
 rotavirus, v. rubeolos, v. hepatitei B, v. hepatitei C  Sunt filtrabile prin filtre bacteriologice

 90 – 200 nm  Au un singur tip de acid nucleic


 V. herpetic, v. rujeolos, v. respirator sinciţial, v. rabic  ARN (ribovirusuri) sau
 ADN (dezoxiribovirusuri)
 300 - 450 nm (Poxviridae)
 Au structură extrem de simplă
 V. variolic

 peste 900 nm lungime, diametru 80 nm (Filoviridae)

Caractere generale ale virusurilor  VIRUS VEGETATIV – particula virală aflată în celulă,
 Parazitism avansat deficitară în unele aspecte ale replicării
 Nu au enzime proprii
 Dependenţă cvasitotală de enzimele şi maşinăria  PROVIRUS – genom viral integrat în cromozomul celulei
replicativă a gazdei
gazdă, multiplicându-se sincron cu acesta
 Se multiplică doar în interiorul unei celule vii

22
Morfologia virusurilor
 sferic
 v.gripal, v.herpetic, adenovirus, v. polio
 cilindric, bastonaş
 v. mozaicului tutunului, fagi
 paralelipiped
 v. variolic, v. vaccinia
 cartuş
 v. rabic
 filamentos
 v. Ebola
 sferic cu coadă
 bacteriofag

Structura virusurilor GENOMUL VIRAL


 I. genom viral
 II. capsida  este alcătuit dintr-o moleculă de acid nucleic viral

 III. înveliş viral  FIE ARN  RIBOVIRUSURI

 FIE ADN  DEZOXIRIBOVIRUSURI

 poartă informaţia genetică necesară replicării


 determină capacitatea infectivă a virusului.

MĂRIMEA GENOMULUI VIRAL MĂRIMEA GENOMULUI VIRAL


 apreciată în funcţie de:
 unitatea de masă moleculară – DALTON  diferită de la o familie la alta referitor la:
 nr. de nucleotide sau perechi de nucleotide din structurile  greutatea moleculară
mono- sau bicatenare – KILOBAZA  1,5 x 106 Da – Parvovirus
 15 x 106 Da – Poxvirus
Dalton – unitate de măsură egală cu 10.000 pe scara greutăţilor
atomice??  numărul de nucleotide

Kilobaza – unitate egală cu:  5-7 kb - Papovavirus


1.000 nucleotide pt str. monocatenare (kb)  231 kbp - Herpesvirus
1.000 perechi de nucleotide pt. str. bicatenare (kbp)  compoziţia în baze

23
STRUCTURA GENOMULUI VIRAL
 virusuri ARN
MĂRIMEA GENOMULUI VIRAL 1. m.c. liniar:
 piesă unică
VHA

 nr. de gene cuprins în genom  picornavirus, VHA


2. m.c. divizat
 9 structuri genice - HIV
 8 molec liniare inegale ARN
 12 structuri genice - v. gripal  v.gripal v.gripal
 240 structuri genice - v. vaccinia 3. m.c. cu 3 str. circulare
 bunyavirus
 nr. de proteine codificate dependent de mărimea 4. d.c. cu 10-12 segm. separate
genomului  reovirus
5. m.c. cu 2 segmente inegale
 250 proteine - v. vaccinia
 arenavirus
 200 proteine - v. herpetic
6. m.c. diploid:
 2 – 6 proteine - Parvoviridae  2 molec. identice ARN legate reovirus
 4 proteine - Picornavirus necovalent
 retrovirusuri

STRUCTURA GENOMULUI VIRAL


 virusuri ADN
1. m.c. liniar:
 parvovirus
FUNCŢIILE GENOMULUI
2. m.c. circular  conţine întreaga informaţie genetică virală
 fag X 174
3. d.c. cu secvenţe terminale  asigură infectivitatea virală
repetitive
 adenovirus, herpesvirus  este capabil de autoreplicare în absenţa celorlalţi
4. d.c. cu extremităţi închise covalent
constituenţi virali
 v. vaccinia
5. d.c. circular, închise necovalent, cu  excepţie: ARN viral izolat, m.c., sens negativ (virusuri cu
extremităţi m.c.
genom divizat – othomyxovirus)
 hepadnavirus
6. d.c. circular, închise covalent şi
suprarăsucite
 SV40, polyomavirus

CAPSIDA CAPSIDA
 complex de structuri proteice care îmbracă acidul
 aspecte caracteristice ale morfogenezei capsidei
nucleic viral virale:
 nr. mic de gene din genomul viral → nu permite
 are arhitectură şi compoziţie specifice fiecărui tip sinteză de polipeptide cu diversitate mare
viral  !! unităţi structurale similare, grupate repetitiv, după
modele geometrice similare, avantajoase ⇒ capside cu
structuri foarte complexe

24
CAPSIDA TIPURI DE SIMETRIE ALE ARHITECTURII CAPSIDALE

 aspecte caracteristice ale morfogenezei capsidei


virale:  cubică – icosaedrică
 resurse limitate: cópii multiple sintetizate de o singură
genă
 între subunităţile proteice capsidale – interacţiuni
puternice – realizează ansambluri stabile care  helicoidală
- îmbracă genomul viral
- asigură integritatea genomului viral

 binară, helicoidal-icosaedrică

CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ


CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ
 capsomerele – organizate în jurul unor axe perpendiculare
caracteristice simetriei cubice – icosaedru
 particula virală are formă sferică sau contur hexagonal  poliedru cu:
 virusuri ARN sau ADN
 virusuri cu sau fără anvelopă 20 feţe triunghiuri echilaterale

 cea mai eficientă aranjare - maxim de volum cu minim 30 muchii


de material
12 vârfuri (vertex), orientate după axe de simetrie rotaţională de tip 2/3/5
 capsomerele nu sunt echivalente cu subunităţile
chimice de construcţie
 capsomere alcătuite din 5, 6 subunităţi chimice

CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ


 vertex * numărul capsomerelor – specific pt. fiecare virus
 reuneşte 5 feţe – PENTON * pentone întotdeauna 12; variază nr. de hexone
 fiecare faţă – 5 subunităţi
proteice – PENTAMERI virusuri ADN – parvovirus 32 capsomere; herpesvirus 162
 muchii şi feţe
virusuri ARN – picornavirus 32 capsomere; reovirus 92
 HEXONI
 alcătuiţi din 6 subunităţi
proteice - HEXAMERI

* numărul capsomerelor – specific pt. fiecare virus


* pentone întotdeauna 12; variază nr. de hexone
virusuri ADN – parvovirus 32 capsomere; herpesvirus 162
virusuri ARN – picornavirus 32 capsomere; reovirus 92

25
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ

CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ CAPSIDE CU SIMETRIE CUBICĂ ICOSAEDRICĂ

adenovirus
herpesvirus

Herpes nucleocapsid showing pentons at the vertices of the icosahedron


poliovirus
Zhou et al. Baylor College of Medicine Reference: Z. H. Zhou, B.V.V Prasad, J. enterovirus
Jakana, F.R. Rixon, W. Chiu Baylor College of Medicine, Journal of Molecular Biology

CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDALĂ CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDALĂ


Nucleocapsida tubulară cu gol axial

 particula virală are formă tubulară, flexibilă sau


rigidă, de lungimi şi diametre variabile
 virusuri ARN
Disc de subunităţi alăturate
 virusuri cu sau fără anvelopă
 capsomerele
 subunităţi chimice identice

 aşezate repetat pe spira acidului nucleic printr-o mişcare


de rotaţie în jurul unui ax + translaţie paralelă cu acelaşi
ax
Creştere în spirală
Structură virală cilindrică

26
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDALĂ
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDALĂ
 Virusuri cu anvelopă:
 întreaga structură rigidă
 Virusuri fără anvelopă
 formă sferică – structura tubulară încolăcită în interiorul
 formă flexibilă
virionului
 aspect de bastonaş
 spiră regulată – v.gripal
 v.mozaicului tutunului
 ghem neregulat – v.paragripal
 de cartuş – structura tubulară orientată în spire strânse,
paralele – v.rabic

Paramyxoviridae Rhabdoviridae
Orthomyxoviridae

Capside cu simetrie binară, icosaedrică-


helicoidală
influenzavirus
 Bacteriofagi
 Cap

 simetrie icosaedrică

 Coada
parainfluenzavirus  simetrie helicoidală

v. rabic

Simetrie complexă
înveliş viral
Funcţiile capsidei virale
 protejează genomul de acţiunea factorilor externi, de
nucleazele celulare;
nucleoid viral  asigură forma virionului;
 fixează virionii nuzi de receptorii celulari specifici;
 subunităţile structurale ale capsidei sunt antigene care
ADN viral cu proteine
asociate induc formarea şi reacţionează cu anticorpii
neutralizanţi.

-corpi laterali

-membrană externă acoperită de tubuli

27
Învelişul viral
 peplos, anvelopă
 derivă din membranele celulei gazdă:
 din membrana plasmatică
 v. gripal,

 v. paragripal,

 retrovirusuri

 din membrana nucleară


 herpesvirus

Rolul învelişului viral Structura învelişului extern


 protejează nucleocapsida;
 structuri derivate din celula gazdă:
 intervine în iniţierea ciclului infectant prin
recunoaşterea şi ataşarea v. de receptorii celulari;
 intervine în procesul de asamblare a noilor particule dublu strat lipidic constituit, în proporţii diferite,
virale; de fosfolipide, colesterol, glicolipide
 intervine în activităţi specific virale (hemaglutinare,
hemadsorbţie, hemoliză, fuziunea membranelor
celulare);

Structura învelişului extern  Proteina M (matrix)

 structuri proprii virale (codificate de v.:


 prezentă la toate v. învelite (excepţie bunyavirus)

 Proteina M  situată pe faţa internă a învelişului viral


 Spiculi  Funcţii:
 Hemaglutinine
 menţine integritatea învelişului viral;
 Neuraminidaze
 Profactori de fuziune  rol în asamblarea virionilor şi eliberarea lor prin înmugurire;
 implicată în transportul ionilor de H

28
 Spiculii
 Spiculii
 Hemaglutininele
 de natură glicoproteică se află pe suprafaţa învelişului viral
 prezente la v. învelite:
 În structura lor au fost identificate 3 zone:  Orthomyxovirus
 Zona de ancorare, situată pe faţa internă a învelişului viral,  Paramyxovirus
de natură peptidică;  Rhabdovirus etc.
 bastonaşe prismatice cu baza triunghiulară
 Zona medie care străbate stratul bilipidic al învelişului  nr. spiculilor de HA variază în funcţie de virus
extern, formată din lanţuri polipeptidice;
 funcţii:
 recunoaştere receptori celulari, ataşare şi penetrare virus în
 Zona externă, situată deasupra învelişului extern, alcătuită celulă;
din glicolipide.  induc răspuns imun (antc. hemaglutinoinhibanţi)
 rol în hemaglutinarea hematiilor şi în hemadsorbţie.

 Spiculii
 Spiculii  Profactorul de fuziune
 poate fi situat pe învelişul viral sau pe alte structuri ale
 Neuraminidazele învelişului
 prezente la orthomyxovirus, paramyxovirus  prezent la herpes virus, VRS, paramyxovirus
 Glicoproteine ancorate în dublul strat lipidic  formă inactivă
 Funcţii:  Glicoproteină
 facilitează pătrunderea virusului în celula gazdă prin  Funcţii:
 fuziunea învelişului viral cu membrana celulară favorizând
scindarea acidului sialic din glicoproteinele suprafeţei
penetrarea virusului în celula gazdă;
celulare
 fuziunea membranelor celulare determinând apariţia de
 intervin în procesul de ieşire a noilor particule din celulă sinciţii;
 diseminarea infecţiei;
 producerea hemolizei.

Alte componente asociate virionului Cele mai importante enzime virale


 Transcriptaze virale/replicaze
 Enzimele virale
 Sinteza de proteine-enzime codificate de virus este restrânsă
(nr. mic de gene din genomul v.)
ARN-polimeraze ARN dependente
 la v. ARN m.c. de sens negativ
 Sunt proteine
 paramyxovirus, rhabdovirus, orthomyxovirus
 Structurale - în învelişul viral
 rol – interrelaţie cu celula gazdă
 Nestructurale - asociate nucleocapsidei
ARN-polimeraze virale ADN dependente
 transcrierea ADN în ARNm
 rol
 poxvirus
 replicarea genomului viral

 sinteza de proteine virale


ADN-polimeraze virale ADN dependente
herpesvirus

29
Cele mai importante enzime virale Cele mai importante enzime virale
 Reverstranscriptaze  Endonucleaze
 prezente la retrovirusuri, hepadnavirusuri  clivează catenele acizilor nucleici
 prezente la: v. ARN: v. gripal; v. ADN: poxvirus
ADN-polimerază ARN dependentă  integrează genomul viral în ADN celular
 transcrie genomul ARN în ADN  la v. cu potenţial oncogen
 SV40, adenovirusuri
ADN-polimerază ADN dependentă  Enzime
 necesare transcrierii şi modificărilor ARNm
integrază  poliadenilat-polimeraze; metiltransferaze etc.
integrează ADN proviral în ADN celular  prezente la: poxvirus; reovirus
numai la retrovirusuri

Cele mai importante enzime virale Cele mai importante enzime virale
 Proteinaze
 Proteinkinaze, Timidinkinaze, Dezoxicitindezaminaze  clivează precursorii polipeptidici în proteine funcţionale
 accelerează transcrierea şi replicarea genomului viral şi structurale
 prezente la: herpesvirus  prezente la: picornavirus, togavirus, coronavirus,
 Tirozinkinaze flavivirus, calicivirus
 codificate de oncogene ale v. sarcomului aviar (v. Rous)  4 clase:
 serinproteinaze
 au ca ţintă proteinele celulare implicate în reglarea ciclului
 cisteinproteinaze
celular
 aspartatproteinaze
 metaloproteinaze

30

S-ar putea să vă placă și