DEMONSTRAREA UBICUITĂŢII

DEMONSTRAREA UBICUITĂŢII
VICROORGANISMELOR
MICROORGANISMELOR

LUCRAREA 1
LUCRAREA
 Relaţiile
Relaţiile microorganism-
microorganism- gazdă
gazdă
 Saprofitism -microorganismul saprofit
Saprofitism -microorganismul saprofit şi şi omul
omul sunt
sunt complet
complet independenţi
independenţi
unul
unul faţă
faţă de
de celălalt
celălalt
Comensalism -- nu
 Comensalism nu pot
pot trăi
trăi decât
decât înîn contact
contact sau sau înîn imediata
imediata apropiere
apropiere a a
celulelor umane
celulelor umane sau sau animale.
animale.
• se
se dezvoltă
dezvoltă pe pe seama
seama produselor
produselor de de metabolism
metabolism celular celular fără
fără a a produce
produce
manifestări
manifestări patologice.
patologice.
• ex.
ex. -- bacteriile
bacteriile care
care se se găsesc
găsesc în în mod
mod normal
normal se se multiplică
multiplică şişi se
se dezvoltă
dezvoltă pepe
tegumente,
tegumente, mucoasele:
mucoasele: orală, orală, nazo-faringiană,
nazo-faringiană, intestinală,
intestinală, sausau vaginală
vaginală
constituind flora
constituind flora comensală
comensală normalănormală locală.
locală.
• Daca
Daca exista
exista unun beneficiu
beneficiu din din această
această asociaţie
asociaţie →simbioză
>simbioză (ex. (ex. unele
unele bacterii
bacterii
(lactobacilii, E.
(lactobacilii, coli) ale
E. coli) ale tubului
tubului digestiv
digestiv sintetizează
sintetizează vitamina
vitamina K, K, vitamina
vitamina B,B,
indispensabile
indispensabile omului omului şi şi pe
pe care,
care, elel nu
nu lele poate
poate produce.
produce.
• Prezenţa
Prezenţa florei
florei intestinale normale şi
intestinale normale şi implicit
implicit a a unor
unor antigene
antigene microbiene
microbiene
după
după naştere,
naştere, solicită
solicită sistemul
sistemul imunitar
imunitar şi şi formarea
formarea de de imunoglobuline.
imunoglobuline.
 Patogenitate
Patogenitate (parazitism)-capacitatea
(parazitism)-capacitatea unui unui microorganism
microorganism de de a a provoca
provoca
gazdei
gazdei parazitate
parazitate un un proces
proces infecţios.
infecțios.
• capacitatea
capacitatea de de invazie
invazie şi şi multiplicare
multiplicare (virulenţă)
(virulență) în în interiorul
interiorul organismului
organismului şi şi
producere a
de producere
de a unor
unor substanţe
substanţe toxicetoxice (toxigeneza)
(toxigeneza)
 Relaţiile
Relaţiile microorganism-
microorganism- gazdă
gazdă
 Microorganismele de
> Microorganismele de colonizare
colonizare formează,
formează, în în
ansamblul
ansamblul lor,lor, oo entitate
entitate etiologică
etiologică numită
numită „microbiota
„microbiota
indigenă”.
indigenă”.
 In organism
» In organism se se delimitează
delimitează mai mai multe
multe zone,
zone, din
din punct
punct
de
de vederea
vederea a a prezenţei
prezenţei germenilor.
germenilor.
•* Zone
Zone normal sterile: mediul
normal sterile: mediul intern,
intern, ţesuturile,
țesuturile, cavităţi
cavităţi
seroase.
seroase.
•* Zone
Zone normal necolonizate (deşi
normal necolonizate (deşi contaminate
contaminate ocazional
ocazional
sau periodic):
sau periodic): sinusurile
sinusurile paranazale,
paranazale, urechea
urechea medie,
medie,
infraglotic al
etajul infraglotic
etajul al căilor
căilor respiratorii, caile biliare,
respiratorii, caile biliare, căile
căile
genitale
genitale interne,
interne, vezica
vezica urinară,
urinară, stomacul,
stomacul, duodenul.
duodenul.
•* Zone
Zone normal colonizate: colonul
normal colonizate: colonul şi şi ileonul
ileonul terminal,
terminal,
căile
căile aero-digestive
aero-digestive superioare, uretra distală,
superioare, uretra distală, vaginul,
vaginul,
tegumentul.
 Cand apare
Cand apare colonizarea
colonizarea tranzitorie
tranzitorie sau
sau permanentă?
permanentă?
• discontinuitate
discontinuitate accidentală
accidentală aleale barierelor
barierelor antiinfecţioase
antiinfecţioase
(plăgi,
(plăgi, arsuri);
arsuri);
• eliminarea
eliminarea microbiană
microbiană deficitară
deficitară (bronşite
(bronşite cronice,
cronice, viroze
viroze
respiratorii, aclorhidrie gastrică,
respiratorii, aclorhidrie gastrică, uropatii
uropatii obstructive).
obstructive).
• Perturbări
Perturbări înîn echilibrul
echilibrul ecologic
ecologic al al microbiotei
microbiotei indigene,
indigene,
disbioze, pot
disbioze, pot fi
fi induse
induse de:
de:
• modificări
modificări ale
ale substratului
substratului nutritiv
nutritiv (ten
(ten seboreic,
seboreic, absenţa
absenţa
unor enzime
unor enzime digestive);
digestive);
• condiţii
condiţii fizico-chimice
fizico-chimice de de găzduire
găzduire deosebite
deosebite (transpiraţie
(transpiraţie
excesivă);
excesivă);
• modificarea
modificarea receptorilor
receptorilor pentru
pentru liganzii
liganzii bacterieni
bacterieni
(pierderea fibronectinei
(pierderea fibronectinei din din glicocalixul
glicocalixul epiteliului
epiteliului oro-
oro-
faringian);
faringian);
• administrarea
administrarea de de antibiotice.
 CLASIFICARE
CLASIFICARE
• Microorganism
Microorganism nepatogen nepatogen
-- face
face parte
parte din flora normală
din flora normală
-- nu
nu produce îmbolnăvire
produce îmbolnăvire
• Microorganism
Microorganism patogen patogen
. microorganism care
- microorganism întotdeauna cauzează
care întotdeauna cauzează
boală.
oala.
• Microorganism
Microorganism potential
potential patogen (oportunist)
patogen (oportunist)
__ -- microorganism
microorganism capabilcapabil să să cauzeze
cauzeze
îmbolnăvire
imbolnavire doar doar atunci
atunci când
când este
este afectat
afectat
sistemul de
sistemul de apărare
apărare al al macroorganismului
macroorganismului
• Microorganism
Microorganism saprofitsaprofit
-- bacterii care trăiesc
bacterii care trâiesc înîn natură
natură
-- se
se stabilesc
stabilesc rarrar în organism
în organism
au importantă
-- au importantă redusă
redusă ca ca factori
factori patogeni
 în laboratorul
Condiţii în
Condiţii laboratorul de
de microbiologie
microbiologie
• Se
Se ordonează
ordonează pe pe masa
masa de de lucru
lucru echipamentul
echipamentul strict strict necesar.
necesar.
• Persoana
Persoana care care lucrează
lucrează trebuie
trebuie să să sese aşeze
aşeze comod
comod pe pe scaun,
scaun, cu cu antebraţele
antebraţele
complet
complet pe pe hiatul
hiatul meseimesei şi şi toate
toate mişcările
mişcările trebuie
trebuie făcutefăcute subsub controlul
controlul vederii.
vederii.
• Se
Se ţine
ţine ansa
ansa în în mâna
mâna dreaptă,
dreaptă, ca ca pepe unun creion,
creion, de de extremitatea
extremitatea opusă opusă firului.
firului.
• înîn mâna
mâna stângă
stângă recipientul
recipientul din din care
care se se prelevă
prelevă sau sau în în care
care urmează
urmează să să sese
introducă
introducă materialul
materialul manipulat,
manipulat, cât cât mai
mai aproape
aproape de de extremitatea
extremitatea inferioară,
inferioară,
încât conţinutul
încât conţinutul şi şi traiectul
traiectul ansei
ansei să să rămână
rămână sub sub controlul
controlul vederii.
vederii.
• Se
Se scoate
scoate dopul
dopul recipientului
recipientului cuprinzându-l
cuprinzându-l între între auricular,
auricular, inelar
inelar şişi palma
palma
mâinii
mâinii drepte.
drepte. Dacă Dacă nu nu sese lucrează
lucrează în în boxe
boxe de de securitate
securitate microbiologică
microbiologică de de
clasă
clasă 2 2 sau
sau 3,3, se
se vava menţine înclinat recipientul
menţine înclinat recipientul fără fără dop
dop pentru
pentru a a preveni
preveni
depunerea de
depunerea de pulberi
pulberi în interior.
în interior.
• Se
Se sterilizează
sterilizează prin prin flambare
flambare gura gura recipientelor închise cu
recipientelor închise cu vată, înainte şi
vată, înainte şi după
după
ce s-a
ce s-a prelevat
prelevat proba.
proba.
• Se
Se introduce
introduce ansa ansa în recipient pentru
în recipient pentru prelevarea
prelevarea sau sau depunerea
depunerea materialului
materialului
microbian.
microbian. Se Se va va evita
evita cucu atenţie
atenţie atingerea
atingerea cu cu ansa
ansa a a gurii
gurii şişi pereţilor
pereţilor în în zona
zona
superioară
superioară a a recipientului.
recipientului.
• Imediat
Imediat după după retragerea
retragerea ansei, ansei, se se vava flamba
flamba guragura recipientului
recipientului şi şi se
se vava
introduce
introduce dopul dopul sau sau se se va înşuruba capacul.
va înşuruba capacul.
• Se
Se vava resteriliza
resteriliza ansaansa prinprin ardere
ardere ”la “la roşu”
roşu” şişi se
se vava flamba
flamba portansa.
portansa.
DECONIAMINAREA
DECONTAMINAREA

Lucrarea 2
 Definiţii
Definiţii
• Contaminare-
Contaminare- prezenta prezenta microorganismelor
microorganismelor pe pe o o suprafata.
suprafata.
• Decontaminarea
Decontaminarea microbiană microbiană -- reducerea
reducerea numarului
numarului de de agenti
agenti
patogeni de
patogeni de pepe unun obiect
obiect sausau dintr-o substanţă pâna
dintr-o substanţă pâna la la 0.
0.
• Colonizarea
Colonizarea —– prezenta
prezenta si si multiplicarea
multiplicarea unui unui microorganism
microorganism pe pe
suprafata gazdei,
suprafata gazdei, fara
fara o o reactie
reactie deosebita
deosebita din din partea
partea acesteia.
acesteia.
• Aseptic
Aseptic —– lipsit
lipsit dede microbi
microbi patogeni.
patogeni.
• Antisepsie
Antisepsie —– distrugerea
distrugerea sau sau indepartarea
indepartarea formelor
formelor vegetative
vegetative ale ale
microorganismelor, dar
microorganismelor, dar nunu obligatoriu
obligatoriu a a sporilor
sporilor bacterieni,
bacterieni, de de pe
pe
suprafetele vii.
suprafetele vii.
• Antiseptic-
Antiseptic- substanta
substanta antimicrobiana
antimicrobiana pentru pentru aplicari
aplicari pepe suprafete
suprafete viivii
(tegumente, mucosae,
(tegumente, mucosae, plagi).
plagi).
• Dezinfecţia
Dezinfecţia -- distrugerea
distrugerea formelor
formelor vegetative
vegetative ale ale
microorganismelor, mai
microorganismelor, mai putin
putin a a sporilor,
sporilor, dede pepe suprafetele
suprafetele inerte.
inerte.
• Dezinfectant-
Dezinfectant- substanta
substanta antimicrobiana
antimicrobiana pentru pentru aplicari
aplicari pepe materiale
materiale
inerte.
inerte.
• Sterilizarea
Sterilizarea -- distrugerea
distrugerea sau îndepărtarea tuturor
sau îndepărtarea tuturor microbilor,
microbilor,
inclusiv aa sporilor.
inclusiv sporilor.
• Steril
Steril —– lipsit
lipsit total
total dede microorganisme
microorganisme viabile.
 Definiţii
Definiţii
• Contaminare-
Contaminare- prezenta prezenta microorganismelor
microorganismelor pe pe o o suprafata.
suprafata.
• Decontaminarea
Decontaminarea microbiană microbiană -- reducerea
reducerea numarului
numarului de de agenti
agenti
patogeni de
patogeni de pepe unun obiect
obiect sausau dintr-o substanţă pâna
dintr-o substanţă pâna la la 0.
0.
• Colonizarea
Colonizarea —– prezenta
prezenta si si multiplicarea
multiplicarea unui unui microorganism
microorganism pe pe
suprafata gazdei,
suprafata gazdei, fara
fara o o reactie
reactie deosebita
deosebita din din partea
partea acesteia.
acesteia.
• Aseptic
Aseptic —– lipsit
lipsit dede microbi
microbi patogeni.
patogeni.
• Antisepsie
Antisepsie —– distrugerea
distrugerea sau sau indepartarea
indepartarea formelor
formelor vegetative
vegetative ale ale
microorganismelor, dar
microorganismelor, dar nunu obligatoriu
obligatoriu a a sporilor
sporilor bacterieni,
bacterieni, de de pe
pe
suprafetele vii.
suprafetele vii.
• Antiseptic-
Antiseptic- substanta
substanta antimicrobiana
antimicrobiana pentru pentru aplicari
aplicari pepe suprafete
suprafete viivii
(tegumente, mucosae,
(tegumente, mucosae, plagi).
plagi).
• Dezinfecţia
Dezinfecţia -- distrugerea
distrugerea formelor
formelor vegetative
vegetative ale ale
microorganismelor, mai
microorganismelor, mai putin
putin a a sporilor,
sporilor, dede pepe suprafetele
suprafetele inerte.
inerte.
• Dezinfectant-
Dezinfectant- substanta
substanta antimicrobiana
antimicrobiana pentru pentru aplicari
aplicari pepe materiale
materiale
inerte.
inerte.
• Sterilizarea
Sterilizarea -- distrugerea
distrugerea sau îndepărtarea tuturor
sau îndepărtarea tuturor microbilor,
microbilor,
inclusiv aa sporilor.
inclusiv sporilor.
• Steril
Steril —– lipsit
lipsit total
total dede microorganisme
microorganisme viabile.
 Sterilizare
Sterilizare
 >» căldură
căldură uscată
uscată
•* încălzire
încălzire la
la roşu,
roşu,
•* flambarea,
flambarea,
•* incinerarea,
incinerarea,
•* prin
prinaercald;
aer cald;
> căldură
căldură umedă
umedă
•* Autoclavare
Autoclavare -- peste
peste I00°C
I00*C
•* sub
sub 100°C
100“C (pasteurizare,
(pasteurizare, tindalizarea);
tindalizarea);
 >» filtrare
filtrare
> radiaţii
radiaţii (ultraviolete, gamma şi
(ultraviolete, gamma şi X)
X)
> microunde
microunde
» sterilizarea
sterilizarea chimică
chimică cucu oxid
oxid de etilen (în
de etilen (în chirurgie
chirurgie şi
şi
stomatologie) si
stomatologie) si aldehide
aldehide (glutaraldehide
(glutaraldehide si si
formaldehide).
 prin caldură
Sterilizare prin
Sterilizare caldură uscată
uscată
-- încălzirea
încălzirea la rosu —– ansa
la rosu ansa de de platina
platina
flambarea —– completarea
-- flambarea completarea sterilizării
sterilizării
incinerarea —– arderea
-- incinerarea arderea cu cu reducere
reducere la la cenusa
cenusa
-- sterilizarea
sterilizarea prin prin aer
aer cald
cald (pupinel)
(pupinel)
» Mecanism
Mecanism de de actiune
actiune :: oxidarea
oxidarea
» 160*C22 h,
160°C h, 180°C
180*C 1h.
1h.
» Indicatii:
Indicatii:
•. sticlarie de
sticlarie de laborator,
laborator,
•. instrumentar chirurgical,
instrumentar chirurgical,
•. substanţe grase,
substanţe grase, pulberi.
pulberi.
>» Contraindicaţii:
 Contraindicaţii:
•+ soluţii
soluţii apoase,
apoase,
•* obiecte din
obiecte din cauciuc
cauciuc sausau garnituri
garnituri din
din cauciuc,
cauciuc,
•+ seringi
seringi din
din sticlă
sticlă cu
cu metal,
metal,
•* ţesături
ţesături şişi vată
vată din
din bumbac
bumbac sau sau fibră
fibră sintetică,
sintetică,
•+ materiale contaminate
materiale contaminate din din laborator.
Pupinel
Pupinel
 Pupinel
Pupinel
• Carcasă=
Carcasă= cutie
cutie de
de formă
formă paralelipipedică
paralelipipedică cu
cu pereţi
pereţi dubli, între
dubli, între
care
care circulă
circulă aerul
aerul cald. În interiorul
cald. În interiorul cutiei
cutiei există
există rafturi
rafturi unde
unde se
se

aşează
aşează obiectele.
obiectele.

• Sistemul
Sistemul de
de ventilaţie=
ventilaţie= ventilator
ventilator care
care uniformizează
uniformizează
temperatura
temperatura aerului
aerului favorizând
favorizând circulaţia
circulaţia continuă
continuă

• Sistemul
Sistemul de
de măsurare
masurare al
al temperaturii=
temperaturii= un
un termometru
termometru cu
cu
mercur
mercur al
al cărui
cărui rezervor
rezervor este
este plasat în interior
plasat în interior iar
iar scala
scala gradată
gradată
în exterior
în exterior
• Sursa
Sursa de
de căldură= rezistenţă electrică
căldură= rezistenţă electrică

• Sistem
Sistem de
de reglare
reglare şi
şi control
control
 prin caldură
Sterilizare prin
Sterilizare caldură umedă
umedă
Fierberea —– mecanism
 Fierberea mecanism de de acţiune:
acţiune: denaturarea
denaturarea (100°C,
(100*C, 30´)
30")
S

Indicatii -- are
Indicatii are o o utilizare
utilizare limitată,
limitată, instrumentar
instrumentar de de mica
mica chirurgie
chirurgie (in
(in absenta
absenta celui
celui steril),
steril),
alimente, apade
alimente, apade baut,
baut, lenjerie,
lenjerie, biberoane.
biberoane.
 Sterilizare
Sterilizare la la peste
peste 100°
100” C C (prin
(prin vapori
vapori sub
sub presiune-
presiune- autoclavarea)
autoclavarea)
OVYV$S

 Mecanism
Mecanism de de actiune
actiune :: denaturarea
denaturarea (coagularea
(coagularea proteinelor)
proteinelor)
 Temperatura
Temperatura vaporilor
vaporilor de de apa
apa creste
creste proportional
proportional cu cu presiunea
presiunea (0,5atm.-115°C,
(0,5atm.-115*C, 1atm.-1atm.-
121*C=15-30'-microbiologie, 2
121°C=15-30´-microbiologie, 2 atm.-134°C=30´-blocuri
atm.-134*C=30'-blocuri operatorii)
operatorii)
Indicaţii: material
 Indicaţii: material infecţios
infecțios dindin laborator
laborator ,, medii
medii dede cultura,
cultura, câmpuri
câmpuri operatorii,
operatorii, tuburile
tuburile
V

de dren, mănuşi
de dren, mănuşi de de cauciuc,
cauciuc, sonde
sonde de de diverse
diverse tipuri,
tipuri, instrumentar
instrumentar pentru
pentru chirurgia
chirurgia
clasică
clasică şişi laparoscopică.
laparoscopică.

 Pasteurizarea (sterilizare
Pasteurizarea (sterilizare partiala)
partiala)
VYVYV

 denaturarea proteinelor-
denaturarea proteinelor- expunere
expunere la la temperaturi
temperaturi de
de sub 100*C şi
sub 100°C şi de
de scurtă
scurtă durată
durată
 Indicatii: produse
Indicatii: produse alimentare
alimentare termolabile
termolabile
 nu se
nu se distrug
distrug :: micobacteriile,
micobacteriile, enterovirusurile.
enterovirusurile.

 Tindalizarea
Tindalizarea (sterilizare
(sterilizare fractionata)
fractionata) -- expunere
expunere la la temperaturi
temperaturi de de sub
sub 100°C
100*C
VS

încălzirile repetate
 încălzirile repetate omoară
omoară atâtatât formele
formele vegetative
vegetative existente
existente iniţial
iniţial cât
cât şi
şi pe
pe cele
cele
germinate
germinate din din spori în intervalele
spori în intervalele dintre încălziri( 30-60
dintre încălziri( 30-60 min.,
min., 3-8
3-8 zile
zile consecutiv,
consecutiv, la
la 56-
56-
100̊ ̊
100'C.C.̊
 Indicaţii:
Indicaţii: sterilizarea
sterilizarea unor
unor medii
medii dede cultură,
cultură, alimente.
alimente.
 Autoclav
Autoclav
Mulllab Condhuctă de sracuate a ahunualuu
& but din mantaîn cameră

7 =
i amera interioară Uşă

Mediu de & but în cameră

cultură

| il anta

Esracuare "A dnusie abnat

 Autoclav
Autoclav
AUTOCLAVUL= utilizat
AUTOCLAVUL= utilizat pentru
pentru sterilizarea
sterilizarea cu
cu vapori
vapori de
de apă
apă sub
sub presiune.
presiune.
Este
Este metoda
metoda cea
cea mai
mai utilizată
utilizată astăzi
astăzi pentru
pentru sterilizarea
sterilizarea unor
unor materiale
materiale
şi
şi a
a instrumentelor
instrumentelor chirurgicale.
chirurgicale. Practic
Practic peste
peste 120°C
1209C sunt
sunt distruşi
distruşi toţi
toţi
germenii,
germenii, inclusiv
inclusiv bacteriile
bacteriile sporulate
sporulate şişi virusurile.
virusurile.

Autoclavul este
Autoclavul este alcătuit
alcătuit din:
din:
-- un
un cazan
cazan cucu peraţi
peraţi dubli,
dubli, cazanul
cazanul interior
interior fiind
fiind în comunicare cu
în comunicare cu
spaţiul
spaţiul dintre
dintre cei
cei 22 pereţi
pereţi
-- Capacul
Capacul
-- Manometru
Manometru
-- Robinet
Robinet pentru
pentru reglarea
reglarea presiunii
presiunii
-- Supapă
Supapă de de siguranţă
siguranţă
-- Sursa
Sursa de
de căldură
căldură (( arzător
arzător cu
cu gaze
gaze sau
sau rezistenţă
rezistenţă electrică
electrică ))
 Filtrarea
Filtrarea

» Reţinerea
 Reţinerea microorganismelor
microorganismelor din din medii
medii lichide
lichide sau
sau aer
aer
» Trecerea
 Trecerea prinprin membrane
membrane cu cu porozitaţi
porozitaţi diferite
diferite
» Sterilizarea
 Sterilizarea lichidelor
lichidelor termolabile
termolabile si si sterilizarea
sterilizarea aerului
aerului pentru
pentru
crearea unui
crearea unui mediu
mediu aseptic
aseptic (boxe(boxe cu cu flux
flux laminar
laminar cu cu filtre
filtre HEPA
HEPA ::
High-Efficiency Particulate
High-Efficiency Particulate Air Air Filtres).
Filtres).
>» Boxele
Boxele de de siguranţă
siguranţă antiepidemică
antiepidemică sunt sunt de de trei
trei clase:
clase:
• Boxele
Boxele de de clasă
clasă I,|, aerul
aerul curat
curat pătrunde
pătrunde frontal,
frontal, este
este pus
pus înîn mişcare
mişcare de de
un
un ventilator
ventilator ce ce antrenează,
antrenează, aerosolii aerosolii printr-un
printr-un filtru
filtru HEPA,
HEPA, carecare îiîi
reţine
reţine total
total sau în cea
sau în cea maimai mare
mare parte
parte şi şi care
care trebuie
trebuie schimbat
schimbat
periodic.
periodic.
• Boxele
Boxele de de clasă
clasă II,
II, sunt
sunt asemănătoare
asemănătoare cu cu precedentele,
precedentele, dar dar aerul
aerul
curat
curat pătrunde
pătrunde filtrat
filtrat şi şi este
este recirculat
recirculat prin prin filtre în proporţie
filtre în proporţie de de 70%,
70%,
încât suprafaţa
încât suprafaţa de de lucru
lucru este
este scăldată
scăldată cu cu aeraer steril.
steril.
• Boxele
Boxele de de clasă
clasă III,
III, auau incinta
incinta complet închisă, operatorul
complet închisă, operatorul îşi îşi
introduce
introduce mâinile
mâinile în în aria
aria dede lucru
lucru prin
prin mănuşi,
mănuşi, fixate
fixate etanş
etanş la la aparat,
aparat,
Aerul
Aerul este
este admis
admis şi şi evacuat
evacuat prin prin filtre.
filtre.
Hota cu
Hota cu flux
flux laminar
laminar
 Sterilizarea
Sterilizarea prin
prin radiaţii
radiaţii
» Radiaţii
Radiaţii ultraviolete
ultraviolete (UV) (UV)
•* lămpile germicide sunt
lămpile germicide sunt tuburi
tuburi dindin sticlă
sticlă specială
specială înîn care
care
descărcările
descărcările electrice într-o atmosferă
electrice într-o atmosferă cu cu vapori
vapori de de mercur,
mercur, lala
joasă presiune,
joasă presiune, generează
generează radiaţiiradiaţii UV.
UV.
•* Viaţa
Viaţa de
de funcţionare
funcţionare a a lămpilor
lămpilor germicide
germicide uzuale,
uzuale, este
este de
de 100
100
ore,
ore, dar
dar scade
scade dupădupă aprinderi
aprinderi frecvente.
frecvente.
•* Pentru
Pentruaa menţine
menţine efectul
efectul germicid
germicid maximal,
maximal, lămpile
lămpile trebuie
trebuie
periodic
periodic curăţate
curățate prin prin ştergere
ştergere cu cu o o cârpă
cârpă moale
moale umezită
umezită înîn
alcool,
alcool, amoniac
amoniac şi şi apă.
apă.
•* Indicatii:
Indicatii:
•* reducerea încărcăturii microbiene
reducerea încărcăturii microbiene a a spaţiilor
spaţiilor dede lucru;
lucru;
•* bariere
bariere protectoare
protectoare între aria cu
între aria cu animale
animale inoculate,
inoculate, boxele
boxele de
de
necropsie
necropsie şi şi persoanele
persoanele din din laborator
laborator sau sau animalele
animalele sănătoase;
sănătoase;
•* laboratoarele
laboratoarele care care nu nu auau hote
hote le le pot
pot folosi
folosi pentru
pentru repartizarea
repartizarea
mediilor
mediilor de de cultură,
cultură, manipulării
manipulării aseptice;
aseptice;
•* suprafeţe
suprafeţe de de lucru
lucru netede.
netede.
 Sterilizarea
Sterilizarea prin
prin radiaţii
radiaţii
> Radiaţiile gamma şi
Radiațiile gamma şi XX
•* Sunt
Sunt radiaţii
radiaţii ionizante
ionizante foarte
foarte eficiente
eficiente pentru
pentru
sterilizare,
sterilizare, utilizarea
utilizarea lorlor trebuie
trebuie săsă fiefie folosita
folosita cucu
prudenţă
prudenţă pentru
pentru căcă pot
pot distruge
distruge şişi celulele
celulele umane.
umane.
•* Aceste
Aceste radiaţii
radiaţii generează
generează radicali
radicali liberi,
liberi, care
care
reacţionează
reacţionează chimicchimic cu cu proteinele
proteinele şi şi acizii
acizii nucleici
nucleici
provocând moartea
provocând moartea bacteriei.
bacteriei.
> Microunde
Microunde
•* Se utilizează pentru
Seutilizează pentru resterilizarea
resterilizarea mediilor
mediilor de de cultură
cultură
care au
care au fost
fost depozitate
depozitate timp timp îndelungat, sterilizarea
îndelungat, sterilizarea
rezultă
rezultă din
din căldura
căldura produsă
produsă de de microunde.
microunde.
> Ultrasunete
Ultrasunete
•* Sunt bactericide prin
Sunt bactericide prin fenomenul
fenomenul de de cavitaţie
cavitaţie pe pe care
care î]îl
produc la
produc la trecerea
trecerea prin
prin apa extra şi
apa extra şi intracelulară,
intracelulară,
determinând dezagregarea
determinând dezagregarea structurii
structurii bacteriene.
 Controlul
Controlul eficientei
eficientei sterilizării
sterilizării

•* Indicatori fizici —– termometre

Indicatori fizici termometre şi şi manometre
manometre
care sunt
care sunt fixate
fixate pepe aparatura
aparatura de de sterilizare
sterilizare sau
sau
dacă
dacă aparatul
aparatul este
este automat,
automat, parametrii
parametrii fizici
fizici vor
vor
fi
fi afişaţi
afişaţi continuu
continuu pe pe un
un display.
display.

•* Indicatori chimici: se
Indicatori chimici: se folosesc
folosesc substanţe
substanţe cu
cu
punct de
punct de fuziune
fuziune apropiat
apropiat dede temperatura
temperatura lala
care se
care se face
face sterilizarea(acidul
sterilizarea(acidul benzoic-
benzoic- 121°C)
121*C)
Indicatori chimici
Indicatori chimici
 Controlul
Controlul eficientei
eficientei sterilizării
sterilizării
•* Indicatori
Indicatori biologici
biologici
-- pt.
pt. autoclav:
autoclav: fiole Stearotest —– suspensie
fiole Stearotest suspensie de de spori
spori dede
Bacillus stearotermophillus
Bacillus stearotermophillus ,, atingerea
atingerea temperaturii
temperaturii de de
121*C duce
121°C duce la
la distrugerea
distrugerea sporilor,
sporilor, indicatorul
indicatorul din
din fiole
fiole
virează. Controlul
virează. Controlul sterilizării
sterilizării se
se realizează
realizează prin
prin incubarea
incubarea
la 56°C
la 56*C == 24
24 hh (sterilizare
(sterilizare corecta
corecta -- cul.
cul. limpede
limpede violet).
violet).

"OP

|
—

m %
ț
home
=

1 ae Ei
E
E
|
 Pt. pupinel
Pt. pupinel : : stripuri
stripuri -- o
o cantitate
cantitate de de spori
spori Bacillus
Baci/lus
atrophaeus impregnati
atrophaeus impregnati pe pe hirtie
hirtie de
de filtru
filtru si
si ambalati
ambalati
individual in
individual in pliculete.
pliculete.
Dupa finalizarea
Dupa finalizarea ciclului
ciclului de
de sterilizare,
sterilizare, pentru
pentru testarea
testarea
corectitudinii, sunt
corectitudinii, sunt necesare
necesare tehnici
tehnici dede laborator
laborator
(cultivare in
(cultivare in bulion)
bulion) si
si perioada
perioada de
de incubare
incubare 7 zile..
7 zile

pa rea e Pa ma
 Testul Bowie
Testul Bowie si
si Dick
Dick
•* Verificarea
Verificarea calitatii
calitatii penetrarii
penetrarii aburului;
aburului;
•+ Se
Se plaseaza
plaseaza hartia
hartia test
test in
in mijlocul
mijlocul unor
unor prosoape
prosoape
de bumbac;
de bumbac;
•+ Se
Se realizeaza
realizeaza un un ciclu
ciclu de
de sterilizare
sterilizare complet
complet la la
134"C, 5
134°C, 5 min.
min.
•e Sterilizare eficienta —– dacă
Sterilizare eficienta dacă schimbarea
schimbarea culorii
culorii
modelului geometric
modelului geometric imprimat
imprimat esteeste uniformă.
uniformă.
•* Indicatii:
Indicatii:
-zilnic, daca
-zilnic, daca la la autoclav
autoclav se se sterilizeaza
sterilizeaza textile;
textile;
-cel putin
-cel dată pe
putin 11 dată saptamana daca
pe saptamana daca sterilizăm
sterilizam
instrumentar;
instrumentar;
-- după
după fiecare
fiecare reparatie.
Testul Bowie
Testul Bowie si
si Dick
Dick

=
 Dezinfecţia
Dezinfecţia

•* Dezinfectante
Dezinfectante -- se
se aplica
aplica pepe suprafete
suprafete inerte
inerte
(efecte iritante
(efecte iritante sau
sau toxice)
toxice)

•* Antiseptice
Antiseptice -- se
se aplică
aplică pe
pe tegumente,
tegumente,
mucoase sau
mucoase sau plăgi(toxicitate
plagi(toxicitate mai
mai redusa)
 Dezinfecţia
Dezinfecţia

•* Dezinfectante
Dezinfectante -- se
se aplica
aplica pepe suprafete
suprafete inerte
inerte
(efecte iritante
(efecte iritante sau
sau toxice)
toxice)

•* Antiseptice
Antiseptice -- se
se aplică
aplică pe
pe tegumente,
tegumente,
mucoase sau
mucoase sau plăgi(toxicitate
plagi(toxicitate mai
mai redusa)
 Substante antiseptice
Substante antiseptice si
si /sau
/sau dezinfectante
dezinfectante
• Formolul
Formolul
• Alcoolul etilic
Alcoolul etilic
• Alcoolul metilic
Alcoolul metilic
• Glicerina
Glicerina
• Fenolul
Fenolul
• Crezolii
Crezolii
• Creolina
Creolina
• Varul cloros
Varul cloros
• Cloramina
Cloramina
• Permanganatul de
Permanganatul de potasiu
potasiu
• Apa oxigenata
Apa oxigenata
• lodul -- tinctura
Iodul tinctura de
de iod
iod
• Acidul boric
Acidul boric
• Hidroxidul de
Hidroxidul de sodiu
sodiu
• Sapunurile
Sapunurile
• Detergenti
Detergentii
 Studiul microbiologic
Studiul microbiologic al
al
aeromicroflorei, suporturilor
aeromicroflorei, suporturilor si
si
tegumentelor
 TESTE DE
TESTE DE STERILITATE
STERILITATE

• Se
Se insaminteaza
insaminteaza in in bulion
bulion simplu
simplu obiectul
obiectul steril
steril ca ca
atare (ace,ata
atare (ace,ata chirurgicala,
chirurgicala, comprese
comprese mici,mici, apa
apa
sterila)in coditii
sterila)in coditii dede asepsie.
asepsie.
• Obiectele
Obiectele sterile
sterile mari
mari sese sterg
sterg dede 2-3
2-3 ori
ori cu
cu un
un
tampon steril
tampon steril umezit
umezit cu cu SF,
SF, cece va
va fi
fi insamintat
insamintat in in
bulion simplu.
bulion simplu.
• Tuburile
Tuburile cu cu bulion
bulion nutritiv
nutritiv se se incubeaza
incubeaza 3-5 3-5 zile
zile lala
37*C.
37°C.
• Se
Se raporteaza
raporteaza microorganismele
microorganismele identificate.
identificate.
• Interpretare:se
Interpretare:se considera
considera probaproba conforma
conforma probaproba
sterila, fara
sterila, fara prezenta
prezenta germenilor
 TESTE DE
TESTE DE AEROMICROFLORA
AEROMICROFLORA
• Se determina
Se determina flora flora microbiana
microbiana atmosferica
atmosferica in in sali
sali de
de pansamente,
pansamente, saloanesaloane de de terapie
terapie
acuta, internari.
acuta, internari.
• Metoda sedimentarii:
Metoda sedimentarii: pentru pentru fiecare
fiecare incapere
incapere se se folosesc
folosesc celcel putin
putin 2 2 grupe
grupe de de
placi(una cu
placi(una cu geloza
geloza singesinge si si una
una cu
cu geloza
geloza simpla-ambele
simpla-ambele fara fara lichid
lichid dede condensare)
condensare)
care se
care se vor
vor aseza
aseza in in centrul
centrul incaperii
incaperii si si unul
unul intr-un
intr-un colt
colt al
al camerei,
camerei, ambele
ambele grupuri
grupuri la la
inaltimea unei
inaltimea unei mese(60-100cm)
mese(60-100cm)
• Se ridica
Se ridica capacul
capacul placilor
placilor si si se
se aseaza
aseaza cu cu deschiderea
deschiderea capacului
capacului in in jos, alaturi de
jos, alaturi de placa.
placa.
• Timpul de
Timpul de expunere
expunere =10min. =10min.
• Placile vor
Placile vor fifi incubate
incubate 24-48ore
24-48ore la la 37*C
37*C
• Se numara
Se numara coloniile
coloniile crescute
crescute pe pe geloza
geloza simpla
simpla la la 48ore
48ore
• Calcul(formula lui
Calcul(formula lui Omelianski)
Omelianski) Nr.UFC/mc aer
Nr.UFC/mc aer =Nx10000/SxK
=Nx10000/SxK
• N=nr.colonii de
N=nr.colonii de pe pe placa
placa
• S=suprafata placii
S=suprafata placii Petri
Petri inin cmp(63,5
cmp(63,5 cm2) cm2)
• K=coeficientul timpului
K=coeficientul timpului de de expunere(1
expunere(1 pt.5min,2
pt.5min,2 pt.10 pt.10 min,3
min,3 pt.15
pt.15 min)
min)
• Se raporteaza
Se raporteaza :-Nr.total
:-Nr.total de de germeni/m3
germeni/m3 de de aer
aer
• De pe
De pe geloza
geloza sangesange ne ne intereseaza
intereseaza coloniile
coloniile hemolitice
hemolitice la la 24
24 ore.
ore.
• Interpretare:-nr.total de
Interpretare:-nr.total de germeni
germeni sa sa nu
nu depaseasca500-1500/m3
depaseasca500-1500/m3 aer,in aer,in functie
functie de de
gradul de
gradul de activitate,inceputul
activitate,inceputul sau sau sfirsitul
sfirsitul zilei
zilei dede lucru
lucru
• -- max.300UFC/m3
max.300UFC/m3 aer aer inin sali
sali de
de operatii,nou-nascuti,
operatii,nou-nascuti, cu cu absenta
absenta florei
florei
hemolitice
 TESTE DE
TESTE DE SANITATIE:
SANITATIE:
I. CONTROLUL
I. CONTROLUL SUPRAFETELOR
SUPRAFETELOR SI
SI AA INVENTARULUI
INVENTARULUI MOALE
MOALE

Se vor
Se vor lua
lua probe
probe dede pepe suprafetele
suprafetele care care sunt
sunt considerate
considerate curate
curate si si dezinfectate.
dezinfectate.
1. Se
1. Se foloseste
foloseste un un tampon
tampon umezit umezit cu cu SF SF steril
steril cucu care
care se
se sterge
sterge o o suprafata
suprafata dede 25
25 cm2
cm2
prin trecerea
prin trecerea tamponului
tamponului de de 2-3
2-3 ori
ori inin sensuri
sensuri diferite
diferite pepe toata
toata suprafata.
suprafata.
2. Se
2. Se imerseaza
imerseaza tamponul
tamponul in in 1ml
1ml SF,
SF, agitindu-se
agitindu-se puternic.
puternic.
3. Se
3. Se adauga
adauga 9 9 ml
ml SF
SF si
si se
se agita
agita energic
energic =dilutie
=dilutie 1/101/10
4. Se
4. Se mai
mai face
face inca
inca oo dilutie
dilutie zecimala
zecimala :1ml :1ml dindin dilutia
dilutia 1/10
1/10 +9ml+9ml SF=dilutie
SF=dilutie 1/100
1/100
5. Se
5. Se disperseaza
disperseaza 0.1ml
0.1ml din din fiecare
fiecare dilutie
dilutie pepe cate
cate o o placa
placa de de geloza
geloza sange
sange si
si mediu
mediu
lactozat si
lactozat si se
se incubeaza
incubeaza 24-48 24-48 ore ore lala 37°C
37*C
6. Se
6. Se numara
numara coloniile
coloniile de de pepe fiecare
fiecare placa
placa si si se
se aplica
aplica formula:
formula:
Nr. germeni
Nr. germeni /cmp
/cmp = = N1xD1x0.1/25cmp+N2xD2x0.1/25cmp
N1xD1x0.1/25cmp+N2xD2x0.1/25cmp
N1,N2 =nr.germeni
N1,N2 =nr.germeni de de pepe fiecare
fiecare placa
placa de de geloza
geloza sange
sange
D1,D2 =dilutiile
D1,D2 =dilutiile folosite
folosite

Se raporteaza:-Nr.
Se raporteaza:-Nr. germeni/cmp
germeni/cmp
-Prezenta oricaror
-Prezenta oricaror germeni
germeni patogeni
patogeni identificati
identificati

Interpretare: Se
Interpretare: Se considera
considera curata
curata oo suprafata
suprafata /material
/material moale
moale pe
pe care
care se
se dezvolta
dezvolta sub
sub
55 colonii/cmp
colonii/cmp si
si nu
nu sunt
sunt prezenti
prezenti germeni
germeni patogeni.
II.Controlul tegumentelor
II.Controlul tegumentelor

1. Se
1. Se sterg
sterg tegumentele
tegumentele cu cu unun tampon
tampon steril steril umezit
umezit cu cu SF
SF
2. Se
2. Se adauga
adauga 9 9 ml
ml SFsi
SFsi se
se agita
agita bine
bine
3. Se
3. Se depune
depune 0.1 0.1 mlml din
din dilutia
dilutia 1/10
1/10 in in centrul
centrul uneiunei placi
placi de
de geloza
geloza sange
sange sisi mediu
mediu lactozat
lactozat si
si se
se
disperseaza uniform
disperseaza uniform cu cu ansa
ansa sterile
sterile
4.Se pot
4.Se pot face
face din
din dil.1/10
dil.1/10 dilutii
dilutii seriate(1/100,1/1000,etc)si
seriate(1/100,1/1000,etc)si se se procedeaza
procedeaza ca ca la
la dil.1/10
dil.1/10
5. Se
5. Se incubeaza
incubeaza placile
placile 24-48
24-48 ore ore lala 37*C
37*C
6. Se
6. Se identifica
identifica germenii
germenii conform
conform procedurilor
procedurilor specifice
specifice
7. Se
7. Se numara
numara coloniile
coloniile de de pe pe placa
placa si si se
se aplica
aplica formula:
formula:
Nr. colonii(UFC)/ml
Nr. colonii(UFC)/ml =NxD/0.1(volumul
=NxD/0.1(volumul insamantat) insamantat)
N=nr colonii
N=nr colonii /placa
/placa
D=inversul dilutiei
D=inversul dilutiei
8. Placile
8. Placile cu
cu nr.
nr. mai
mai mare
mare de de 300
300 coloni
coloni pe pe placa
placa vor
vor fi
fi raportate
raportate caca atare.
atare.

Se raporteaza:-Nr.UFC/ml
Se raporteaza:-Nr.UFC/ml
-Prezenta:Escherichia, Proteus,
-Prezenta:Escherichia, Proteus, S.aureus,
S.aureus, Pseudomonas
Pseudomonas spp,
spp, Klebsiella
Klebsiella spp,
spp,
Acinetobacter, Enterococcus
Acinetobacter, Enterococcus rezistent
rezistent la
la vancomicina
vancomicina

Interpretare:Se considera
Interpretare:Se considera o
o mana
mana curate
curate aceea
aceea la
la care:
care:
Nr.UFC/ml nu
Nr.UFC/ml nu depaseste
depaseste 100
100 UFC/ml
UFC/ml pt.pt. personalul
personalul ingrijitor
ingrijitor si
si infirmiere
infirmiere
40UFC/ml pt.personalul
40UFC/ml pt.personalul mediu
mediu sisi medical
medical
10UFC/ml pt.personalul
10UFC/ml pt.personalul care
care efectueaza
efectueaza interventii
interventii aseptice.
aseptice.
NU contine
NU contine germeni
germeni patogeni
 EXAMENUL MICROSCOPIC
EXAMENUL MICROSCOPIC IN IN
DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC.
DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC.
COLORAŢII
COLORAII UTILIZATE
UTILIZATE IN
IN
BACTERIOLOGIE
BACTERIOLOGIE

LP33
LP
 MORFOLOGIA BACTERIILOR
MORFOLOGIA BACTERIILOR
Organisme unicelulare,
Organisme unicelulare, procariote
procariote

Citoplasmă

Elemente Obligatorii: A a a NE Nucleoid

- y a eA
- perete celular,
- membrana citoplasmatică, Caps ul 7
- citoplasma bacteriană,
- material nucl ear; Perete celular
- riobozomi. Membrană
citoplasrnatică
Hiermenie facultativa: za
- capsula bacteriană Ribozonna
- cilii (flagelii)
- fimbriile (pilii)
- sporul Pih
 MORFOLOGIA BACTERIILOR
MORFOLOGIA BACTERIILOR
• Forma
Forma bacteriilor:
bacteriilor:

• Forma
Forma sferică
sferică (coci):
(coci):

• -- stafilococi
stafilococi -- (Staphylococcus).
(Staphylococcus).

• -- diplococi
diplococi (Diplococcus)-
(Diplococcus)- perechi
perechi (neisserii
(neisserii -- bob
bob de
de cafea,
cafea,
pneumococi -- lanceolaţi);
pneumococi lanceolaţi);
• -- streptococi (Streptococcus) -- lanţuri;
streptococi (Streptococcus) lanţuri;

• -- tetracoci
tetracoci (Tetracoccus)
(Tetracoccus) -- câte
câte 4
4 celule:
celule:

• -- sarcine
sarcine (Sarcina)
(Sarcina) -- pachete
pachete din
din 8-16-32
8-16-32 coci;
coci;

• -- micrococi
micrococi (Micrococcus)
(Micrococcus) -- celule
celule izolate;
izolate;
 MORFOLOGIA BACTERIILOR
MORFOLOGIA BACTERIILOR
Forma
Forma cilindrică
cilindrică (bacili):
(bacili): |
a
| PP
|
Bacterium -- bastonaşe
-- Bacterium bastonaşe cu
cu capetele
capetele rotunjite,
rotunjite, nu
nu |
formează
formează spori
spori (Mycobacterium,
(Mycobacterium, |
Corynebacterium, enterobacterii);
Corynebacterium, enterobacterii); | Cp

-Bacillus -- bastonaşe
-Bacillus bastonaşe mari
mari cu
cu capetele
capetele retezate,
retezate, |
celulei
diametrul celulei
depăşesc diametrul | „”
formează
formează spori
spori ce
ce nu
nu depăşesc
anthracis). Posibilă
(Bacillus anthracis).
(Bacillus Posibilă aranjarea în lanţuri
aranjarea în lanţuri --
streptobacili;
streptobacili; caii ae

Clostridium -- bastonaşe
-- Clostridium bastonaşe cu
cu capetele
capetele rotunjite,
rotunjite,
formează
formează spori
spori cece depăşesc
depăşesc diametrul
diametrul celulei
celulei
(Clostridium tetani,
(Clostridium tetani, Clostridium
Clostridium botulinum,
botulinum, C.C.
perfringens).
perfringens).
za | |
 MORFOLOGIA BACTERIILOR
MORFOLOGIA BACTERIILOR
Forma spiralată
Forma spiralată (încurbată):
(încurbată):
> |
|
-Vibrio -- bastonaşe
-Vibrio bastonaşe încurbate (1/2 spiră,
încurbate (1/2 spiră, % |
aspect de
aspect de virgulă)
virgulă) (Vibrio
(Vibrio cholerae);
cholerae); |
|
|
-Campylobacter, Helicobacter
-Campylobacter, Helicobacter -- 2
2 spire,
spire, ||
|
aspect
aspect de
de “pasăre
“pasăre în zbor”
în zbor” i
|
(Campylobacter jejuni);
(Campylobacter jejuni); |

-Spirillum -- celule
-Spirillum celule spiralate
spiralate rigide;
rigide; NERA a

-Spirochaeta -- celule
-Spirochaeta celule spiralate,
spiralate, cu
cu 5-25
5-25 pp
spire, flexibile
spire, flexibile (Treponema,
(Treponema, Leptospira,
Leptospira,
Borrelia).
Borrelia). EN oz

Bacterii polimorfe:
Bacterii polimorfe: Actinomyces,
Actinomyces,
Rickettsia, Chlamydia,
Rickettsia, Chlamydia, Mycoplasma.
WMycoplasma.
 Morfologia
Morfologia virală
virală

-- este
este un un agent
agent patogen
patogen inframicrobian;
inframicrobian;
-- invizibil
invizibil cucu microscopul
microscopul optic;optic;
-- se
se evidenţiază
evidenţiază la la microscopul
microscopul electronic;
electronic;
-- are
are dimensiuni
dimensiuni mici mici cuprinse
cuprinse între 18-500 nm,
între 18-500 nm, pot
pot traversa
traversa
membranele filtrante;
membranele filtrante;
-- se
se reproduce
reproduce numai
numai în interiorul celulelor
în interiorul celulelor viivii (bacterii,
(bacterii,
plante, animale,
plante, animale, om);
om);
-- au
au rezistenţă
rezistenţă lala glicerină
glicerină şişi solvenţii
solvenţii lipoizi;
lipoizi;
-- provoacă
provoacă diverse
diverse boliboli infecţioase
infecțioase numite
numite viroze;
viroze;
-- înîn general,
general, virusurile
virusurile dau dau imunitate;
imunitate;
-- exemple:
exemple: virusul
virusul variolei,
variolei, turbării,
turbării, encefalitei,
encefalitei, HIVHIV şi
şi virusul
virusul
gripei.
 Morfologia virusurilor
Morfologia virusurilor
• sferică
sferică ((virusurile
virusurile gripale,
gripale, paragripale,
paragripale,
adenovirusurile)
adenovirusurile)
• Cilindrică,
Cilindrică, de
de bastonaş
bastonaş (virusul
(virusul mozaicului
mozaicului
tutunului)
tutunului)
• Paralelipipedică(poxvirusurile)
Paralelipipedică(poxvirusurile)
• De
De cartuş
cartuş (virusul
(virusul rabic)
rabic)
• Filamentoasă
Filamentoasă (bacteriofagi)
(bacteriofagi)
• Sferică
Sferică cucu coadă
coadă
 Morfologia
Morfologia virală
virală
Structura virusurilor
Structura virusurilor
-- genom viral -- partea
genom viral partea centrală
centrală formată
formată dindin
material genetic
material genetic care
care poate
poate fi
fi ARN
ARN sau
sau ADN;
ADN;
-- capsidă
capsidă -- un înveliş protector
un înveliş protector dede natură
natură
proteică,
proteică, format
format dindin capsomere
capsomere (160);
(160);
-- capsida împreună cu
capsida împreună cu genomul
genomul viral
viral alcătuiesc
alcătuiesc
nucleocapsida;
- peplos - înveliş exterior de natură proteică care
apare la virusurile mai complexe.
Imagini ale
Imagini ale virusului
virusului HIV
HIV

Matricea proteică (p17)

Proteina capsidei (p24)

Proteaze/
transcnptaze reverse/
proteine integraze
Bistratul lpidic
al membranei

Diet de ARN
 CLASIFICARE
CLASIFICARE

• Microscopu ui optic
Microscopului optic
• cu fond
Microscopu cu
Microscopul fond întunecat
întunecat
• cu contrast
Microscopu cu
Microscopul contrast dede fază
fază
• cu fluorescenţa
Microscopu cu
Microscopul fluorescenţa
• Microscopu electronic
Microscopul electronic cu
cu transmisie
transmisie
• electronic cu
Microscopu electronic
Microscopul cu baleaj
baleaj (scanning)
 VICROSCOP OPTIC
MICROSCOP OPTIC
Partile componente ocular ASE EI RR RT - so =
PE
Ci lentila observatorul N RA N A f 3] 97 e.
Seg i —
m art
-,
27 2:
2 Aa DC i
capul —. ac 7 oa
—- „ =. E —, a.

Dan focus fin Pa 4 pt

fo 4€ * =
Ea 8 =
— -- i i

| * St 2 —.
şi E: brat cu inclinare 5 7 4 p> î 4, [e - 9

N € ” => 22 < — ? zf
obiectiv x A i Pa u
adaptor rotativ: : pl ee ,
P = Sp
= =.
=:
lentile 23 Sp PR 1 a d:
scalala Verni Vernier. iem cede poat poziti onarea
Rp a => d 5=
v-— = 7 SA

platforma
condensatorul ————j . ——— bratul
diafragma fr
aperturii O
diafragma disc tila deplasare
axa X-Y
iluminator
sau oglinda

baza
VICROSCOP ELECTRONIC
MICROSCOP ELECTRONIC

MN
o |
IE: fu
MU
Ap
A
Imagini —– microscop
Imagini microscop fond
fond intunecat
intunecat
 Metode microscopice
Metode microscopiceî înîn bacteriologie
bacteriologie
|.
I. Preparatul nativ
Preparatul nativ >
(umed,
(umed, întreîntre lamă
lamă şi şi lamelă)
lamelă) = a
Utilizat :: sediment
Utilizat sediment urinar,
urinar, “Ca
materii fecale-diaree,
materii fecale-diaree,
preparate umede
preparate umede recoltate
recoltate din din
micoze superficiale
micoze superficiale
Permite studierea:
Permite studierea:
•* mobilităţii
mobilităţii germenilor;
germenilor;
•* morfologiei
morfologiei bacteriene.
bacteriene.
Tehnica de
Tehnica lucru —– se
de lucru se realizeaza
realizeaza g'.—4 ) îi,
Treponema aumicrosope
A e es
â fond noir
oo suspensie
suspensie de de microorganisme
microorganisme
vii cu
vii cu SF
SF intre
intre lama
lama si si lamela(
lamela| sau
sau KOH
KOH pt.
pt. fungi).
fungi).
Examinarea se
Examinarea se face
face cu: cu:
•* microscopul
microscopul optic, optic, cu cu obiective
obiective uscate.
uscate.
•* microscopul
microscopul cu cu fond
fond întunecat;
întunecat;
•* microscop
microscop cu cu contrast
contrast de de fază:
fază:
Metode microscopice
Metode microscopice în bacteriologie
în bacteriologie

•* II.
II. Coloraţia
Coloraţia negativă
negativă (metoda
(metoda Burri)
Burri)
Permite studierea:
Permite studierea:
•* germenilor
germenilor greu
greu colorabili
colorabili (Leptospira,
(Leptospira, Treponema);
Treponema);
•* germenilor
germenilor cucu capsulă
capsulă (Klebsiella,
(Klebsiella, S.
S. pneumoniae)
pneumoniae)
Coloranţi:
Coloranţi: suspensii
suspensii coloidale
coloidale (tuş
(tuş de
de China,
China, tuş
tuş de
de
India- Cryptococcus).
India- Cryptococcus).

Tehnica de
Tehnica de lucru:
lucru:
•* microorganismele
microorganismele se se suspensioneaza
suspensioneaza intr-o picatură de
intr-o picatură de
colorant
colorant
•* se
se examineaza
examineaza cu cu microscopul
microscopul optic,
optic, cucu imersie.
imersie.
•* SeSe colorează
colorează fondul
fondul preparatului,
preparatului, iar
iar bacteriile
bacteriile rămân
rămân
necolorate
Metode microscopice
Metode microscopice în bacteriologie
în bacteriologie
•* III.
III. Preparate
Preparate colorate
colorate
Permit studierea:
Permit studierea:
•* morfologiei
morfologiei germenilor;
germenilor;
•* dispoziţiei
dispoziţiei germenilor;
germenilor;
•* afinităţii
afinităţii tinctoriale
tinctoriale (colorabilitatea):
(colorabilitatea):
Etapele
Etapele realizării frotiurilor:
realizării frotiurilor:
•* etalarea întinderea cu
etalarea -- întinderea cu grijă
grijă a
a preparatului
preparatului
patologic
patologic (pp)
(pp) pepe lamă
lamă (să
(să nu
nu atingă
atingă marginile);
marginile);
•* uscarea
uscarea la la temperatura
temperatura camerei;
camerei;
•* fixarea
fixarea (la
(la flacără
flacără sau
sau chimică)
chimică)
 Coloraţii
Coloraţii simple
simple

Coloraţia
Coloraţia cu cu albastru
albastru de de metilen:
metilen:
• -- se
se acoperă
acoperă frotiul
frotiul cu cu soluţie
soluţie A.M.,
A.M.,,
• -- se
se lasă în repaus
lasă în repaus 1-2 1-2 minute;
minute;
• -- se
se spălă
spălă cucu apă
apă distilată;
distilată;
• -- se
se aşează
aşează frotiul
frotiul înîn stativ
stativ pentru
pentru uscare;
uscare;
• -- se
se examinează
examinează la la microscop;
microscop;
• -- se
se notează
notează observaţiile
observaţiile şi şi se
se interpretează
interpretează rezultatele.
rezultatele.
• bacterii
bacterii colorate
colorate în albastru închis,
în albastru cu un
închis, cu un halou
halou
necolorat
necolorat (dacă
(dacă sunt
sunt capsulate),
capsulate),
• diferite
diferite celule
celule şişi celulele
celulele inflamatorii
inflamatorii (nucleul
(nucleul are
are o
o
culoare
culoare albastru
albastru mai închis, citoplasmă
mai închis, citoplasmă are are nuanţe
nuanţe dede
albastru);
albastru);
• se
se pot
pot observa
observa destul
destul de de bine
bine detaliile
detaliile de
de structură.
structură.
 Coloraţia
Coloraţia cu
cu albastru
albastru de
de metilen
metilen
•* secretie
secretie genitala
genitala 100X
100X Elemente tip
Elemente tip Candida
Candida 100X
100X
 Coloratii compuse-Coloraţia Gram:
Coloratii compuse-Coloraţia Gram:
• se
se acoperă
acoperă frotiul
frotiul cu cu violet
violet de
de gentiana,
gentiana, 1-2minute;
1-2minute;
• se îndepărtează colorantul;
se îndepărtează colorantul;
• se
se acoperă
acoperă frotiul
frotiul cu cu lugol
lugol (fixator),
(fixator), 1-2
1-2 minute;
minute;
• se îndepărtează lugolul;
se îndepărtează lugolul;
• se
se acoperă
acoperă frotiul
frotiul cu cu un
un amestec
amestec de de alcool-acetonă
alcool-acetonă (1 (1 parte
parte acetonă/3
acetonă/3 părţi
părţi alcool
alcool
de 96°),
de 96*), rapid,
rapid, 25-30
25-30 secunde;
secunde;
• se
se spălă
spălă insistent
insistent cu cu apă
apă
• se
se acoperă
acoperă frotiul
frotiul cu cu fucsină
fucsină diluată
diluată 1/10
1/10 pentru
pentru 1 1 minut;
minut;
• se
se spălă
spălă cu
cu apă;
apă;
• se
se aşeză
aşeză frotiul
frotiul înîn stativ
stativ pentru
pentru uscare;
uscare;
• se
se examinează
examinează la la microscop;
microscop;
• se
se notează
notează observaţiile
observaţiile şi şi se
se interpretează
interpretează rezultatele:
rezultatele:

• dacă
dacă frotiul
frotiul aa fost
fost realizat
realizat din
din colonia
colonia izolată
izolată sese pot
pot vedea:
vedea: microorganisme
microorganisme cu cu
aceeaşi
aceeaşi formă
formă şi şi dimensiune
dimensiune ,, cu cu o
o anumită
anumită dispoziţie,
dispoziţie, cu
cu sau
sau fără
fără capsulă,
capsulă, Gram
Gram
pozitive
pozitive (violet)
(violet) sau
sau Gram
Gram negative
negative (roşii);
(roşii); levuri
levuri colorate
colorate în violet;
în violet;
• dacă
dacă frotiul
frotiul aa fost
fost realizat
realizat din
din p.p.
p.p. se
se pot
pot vedea
vedea diferite
diferite celule,
celule, PMN
PMN (nucleul
(nucleul şişi
citoplasmă
citoplasmă aparapar înîn nuanţe
nuanţe dede roşu),
roşu), bacterii
bacterii Gram
Gram pozitive
pozitive şi/sau
şi/sau Gram
Gram negative,
negative,
levuri etc;
levuri
 Coloraţia
Coloraţia Gram
Gram

Ex. microscopic:
Ex. microscopic: afinitati
afinitati tinctoriale
tinctoriale (coloratia
(coloratia Gram,
Gram, cu
cu mare
mare
valoare pentru
valoare pentru diagnosticul
diagnosticul prezumtiv)
prezumtiv)

Frotiuri din
Frotiuri din sputa,
sputa, colorate
colorate Gram:
Gram: stanga
stanga -- coci
coci Gram
Gram pozitivi
pozitivi in
in diplo
diplo si
si lanturi
lanturi scurte
scurte (Str.
(Str.
pneumoniae); centru- cocobacili
pneumoniae); centru- cocobacili Gram
Gram negativi
negativi intra
intra si
si pericelular
pericelular (Haemophilus
(Haemophilus influenzae
influenzae ););
dreapta- levuri
dreapta- levuri /pseudofilamente(x100)
 Coloraţia
Coloraţia Gram
Gram

$ ASM Metobebrary.01g > Smith

Coloratia Gram:
Coloratia Gram: Stanga-
Stanga- bacili
bacili Gram
Gram negativi;
negativi; coci
coci Gram
Gram pozitivi
pozitivi in
in gramezi –Centru si
gramezi —Centru si in
in
lanturi -- dreapta;
lanturi dreapta; (X100)
 Bacillus
Bacillus
Antrax
Antrax
anthracis
anthracis Koch
Koch 1876
1876

Neisseria
Neisseria
Gonoree
Gonoree
onorrhoeae
gonorrhoeae Neisser
Neisser 1879

Febra tifoida
Febra tifoida Salmonella
Salmonella
Eberth
Eberth 1880
Typhi
Typhi

Mycobacterium
Mycobacterium
Koch
Tuberculoza
Tuberculoza Koch 1882
tuberculosis
tuberculosis

Holera
Holera Vibriocholerae
Vibriocholerae Koch
Koch 1883
 •. Difteria
Difteria Corynebacterium diphteriae
Corynebacterium diphteriae Klebs/Loeffler 1883
Klebs/Loeffler 1883
•. Tetanos
Tetanos Clostridium tetani
Clostridium tetani Nicolaier
Nicolaier 1885
1885
7
- 2
n - / N « i ra 0 %
E > A
! «4 b Pat = A %
—— g. E . e st TAR
$ 9 me

a -g
A ins % )
| *. SP ză Lt A

* Ji 270
-_ -_ „ % . a

•. Diaree
Diaree Escherichia coli
Escherichia coli Escherich
Escherich 1885
1885
•. Pneumonie Streptococcus
Pneumonie Streptococcus pneumoniae
pneumoniae Fraenkel
Fraenkel 1886
1886
Ps i E i
Ș
•+ Meningita
Meningita Neisseria meningitidis
Neisseria meningitidis Weischselbaum
Weischselbaum 1887
1887
•«+ Febra
Febra ondulanta
ondulanta Brucella
Brucella sp.Bruce1887
sp.Bruce1887

•+ Gangrena gazoasa
Gangrena gazoasa Clostridium
Clostridium perfringens Welch et
perfringens Welch et Nuttal
Nuttal 1892
1892
•+ Pesta
Pesta (ciuma)
(ciuma) Yersinia
Yersinia pestis Yersin/Kitasato1894
pestis Yersin/Kitasato1894
E MD S PR EROAI

Coloratia Wayson-aspect
Coloratia Wayson-aspect in
in ac
ac de
de siguranta
• C
Botulism Clostridium
Clostridium botulinum Van
botulinum Van Ermengem
Ermengem 1896
1896
> RR
aa * a „ iI „ să =

Z •+ Dizenteria Shigella
Dizenteria dysenteriae Shiga1898
Shigella dysenteriae Shiga1898
EI DRE N ZE a A
b | [7 P

•+ SifilisTreponema pallidum
SifilisTreponema Schaudin/Hoffmann1905
pallidum Schaudin/Hoffmann1905

• Tusea convulsiva Bordetella pertussis Bordet et Gengou 1906

Imunohistochimie
Imunohistochimie

•+ Meningita Rickettsia
Meningita Rickettsia rickettsii
rickettsii Ricketts1909
Ricketts1909
 Coloratia Gram
Coloratia Gram

CEP 10-25/C20X,
CEP 10-25/C20X, PSEUDOMICELII
PSEUDOMICELII SI
SI
CELULE LEVURICE -– frotiu
CELULE LEVURICE frotiu Gram
Gram
100x
100x
 Coloratia Gram
Coloratia Gram
BACILI GRAM
BACILI GRAM POZITIVI
POZITIVI RAMIFICATI,
RAMIFICATI,
PMN DEZAGRAGATE,
PMN DEZAGRAGATE, DETRITUS
DETRITUS IN GRAMEZI,
IN GRAMEZI, RUPTI,
RUPTI, TIP
TIP
CELULAR, MUCUS
CELULAR, MUCUS,, NUMEROSI
NUMEROSI BACILI
BACILI ACTYNOMICETE
ACTYNOMICETE
GRAM NEGATIVI
GRAM NEGATIVI MICI,
MICI, IN
IN GRAMEZI
GRAMEZI SISI IN
IN
“BANCURI
“BANCURI DEDE PESTE
PESTE

db
 Coloratia Gram
Coloratia Gram
PUROI RENAL-
PUROI RENAL- PMN
PMN INTREGI,
INTREGI,
DEZAGREGATE, RELATIV
DEZAGREGATE, RELATIV FRECVENTI
FRECVENTI BGN
BGN LICHID
LICHID PERITONEAL-
PERITONEAL-
DETRITUS FIBRINA, EPITELII,
FIBRINA, EPITELII,
CELULAR, MACROCONIDII
DETRITUS CELULAR, MACROCONIDII
 Coloratia Gram
Coloratia Gram
ABCES HEPATIC
ABCES HEPATIC -- MASA
MASA DE
DE LEUCOCITE
LEUCOCITE SI
SI u Pi
PSEUDOHIFE SEPTATE
PSEUDOHIFE SEPTATE CU
CU CELULE
CELULE LEVURICE
LEVURICE “Clue
Clue cells”
cells
 Coloratia Gram
Coloratia Gram

CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS
CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS -LCR-
-LCR- secretie genitala
secretie genitala
FROTIU GRAM
FROTIU GRAM
Coloratie Gram
Coloratie Gram 100X
100X
 Coloratia Gram
Coloratia Gram

LCR- Diplococi
LCR- Diplococi Gram
Gram +,
+, capsulati
capsulati URINA- BGN
URINA- BGN tip
tip Pseudomonas
Pseudomonas
Coloraţia
Coloraţia May-Grunwald Giemsa
May-Grunwald Giemsa

•+ se
se fixeaza
fixeaza frotiul
frotiul cucu May-Grunwald
May-Grunwald -2min. -2min.
•* se
se înclină
înclină lama
lama şişi se
se scurge
scurge soluţia
soluția colorantă
colorantă (care
(care are
are şi
şi rol
rol
fixator);
fixator);
•* se
se acoperă
acoperă frotiul
frotiul cucu soluţie
soluție Giemsa
Giemsa preparata
preparata
extemporaneu, (2pic./1ml
extemporaneu, (2pic./Iml apa)apa) pentru
pentru 2020 min.;
min.;
•* se spălă cu apa;
sespălăcu apa;
•+ se
se aşeză
aşeză frotiul
frotiul în
în stativ pentru uscare;
stativ pentru uscare;
•* se
se examină
examină la la microscop;
microscop;
•* se
se notează
notează observaţiile
observaţiile şi şi se
se interpretează
interpretează rezultatele
rezultatele
Coloraţia
Coloraţia May-Grunwald Giemsa
May-Grunwald Giemsa

Coloratie May-Grunwald-Giemsa
Coloratie May-Grunwald-Giemsa (( 100 X —– Bacili
100 X Bacili spiralati
spiralati
 compuse- Coloraţia
Coloratii compuse-
Coloratii Ziehl-Neelsen
Coloraţia Ziehl-Neelsen
Este
Este o coloraţie utilă
o coloraţie utilă înîn identificarea prezenţei de
identificarea prezenţei bacili acid-alcool
de bacili acid-alcool rezistenţi
rezistenți
(BAAR):
(BAAR):
•+ se
se aşează
aşează frotiul
frotiul uscat
uscat şi şi fixat pe un
fixat pe un suport
suport situat
situat deasupra
deasupra tăviţei
tăviţei de
de colorare;
colorare;
•+ se
se acoperă complet lama
acoperă complet lama cu cu fucsină
fucsină bazică nediluată (filtrată
bazică nediluată proaspăt) 10
(filtrată proaspăt) 10 min;
min;
•+ sesetrece becul de
trece becul de gaz
gaz aprins
aprins de de 2-3
2-3 ori, pe sub
ori, pe sub lama
lama acoperită
acoperită dede fucsină,
fucsină, până
până
la emiterea
la emiterea de de vapori;
vapori;
•+ se
se spălă
spălă insistent
insistent cu cu apă
apă distilata
distilata
•+ seseadăugă
adăugă amestec
amestec decolorant
decolorant acid-alcool
acid-alcool (3(3 ml
ml acid
acid clorhidric
clorhidric concentrat
concentrat// 97 97
ml alcool
ml alcool etilic
etilic 90-95°),
90-95*), 1min;
lmin;
•+ sesespălăcuapă
spălă cu apă distilată;
distilată;
•e se
se recolorează
recolorează cu cu albastru
albastru de de metilen,
metilen, 1| minut;
minut;
•+ sesespălăcuapă
spălă cu apă distilată;
distilată;
•+ se
se examinează
examinează la la microscop:
microscop:
•+ bacili
bacili dede culoare
culoare roşieroşie (dacă
(dacă există
există BAAR);
BAAR);
•+ diferite
diferite celule
celule şi şi PMN
PMN (toate(toate structurile
structurile ne-BAAR
ne-BAAR apar apar colorate
colorate albastru)
albastru) etc;
etc;
•+ dacă
dacă frotiul
frotiul este
este din
din colonie,
colonie, se se evidenţiază
evidenţiază numai bacili de
numai bacili de culoare
culoare roşie.
roşie.
 Coloraţia Ziehl-Neelsen
Coloraţia Ziehl-Neelsen

•* Coloratia Ziehl-Neelsen
Coloratia Ziehl-Neelsen
—– Evidentierea
Evidentierea micobacteriilor
micobacteriilor (BK,
(BK, lepra)
lepra)
 FACULTATEA DE MEDICINĂ ŞI FARMACIE
UNIVERSITATEA “DUNĂREA DE JOS”, GALAŢI

RECOLTAREA SI TRANSPORTUL
PRODUSELOR PATOLOGICE
Obţinerea
Obţinerea unui
unui rezultat
rezultat corect
corect lala examenul
examenul microbiologic
microb iologi
impune respectarea
impune respectarea unor
unor reguli
reguli referitoare
referitoare la:
la:
-- modul
modul dede recoltare
recoltare al
al produsului
produsului patologic
patologic (PP);
(PP); -
-- metodele
metodele de de conservare;
conservare; ti
-- modalităţile
modalităţile dede transport.
transpori.

La
La recoltarea
recoltarea produselor
produselor patologice
patologice trebuie
trebuie răspuns
răspuns lala
următorul
următorul chestionar:
chestionar:
Ce
Ce se recoltează? În
se recoltează? În care
care produse
produse patologice
patologice se
se pot
pot găsi
găsi
bacteriile suspectate?
bacteriile suspectate?
Bacteriile
Bacteriile patogene
patogene poate
poate fi
fi căutat:
căutat:
-- la
la porţi
porţi de
de intrare;
intrare;
în organe
-- în organe ţintă;
ţintă;
-- în focare metastatice
în focare metastatice nespecifice;
nespecifice;
în căile
-- în căile de
de răspândire
răspândire (sânge
(sânge şi şi ganglioni);
ganglioni);
în căile
-- în căile de
de eliminare
eliminare (intestin,
(intestin, căi
căi urinare)
urinare)
Bacteriile
Bacteriile pot
pot fi
fi depistate
depistate prin prin căutarea
căutarea antigenelor
antigenelor bacteriene
bacteriene în:în:
-- umori;
umori;
-- sânge;
sânge;
-- urină;
urină;
-- exudate:
exudate: LCR,
LCR, spută.
spută.
Cine poate
Cine poate recolta?
recolta?
Recoltarea
Recoltarea produsului
produsului patologic
patologic esteeste efectuată
efectuată de de medicul
medicul clinician
clinician şi/sau
şi/sau asistent.
asistent.
Cât
Cât sese recoltează?
recoltează?
Cantitatea
Cantitatea produsului
produsului prelevat
prelevat trebuie
trebuie să să fie
fie suficientă.
suficientă.
Când
Când se se recoltează?
recoltează?
La
La prelevarea
prelevarea probelor
probelor se se ţine
ţine seama
seama de de anumite
anumite reguli-
reguli- recoltarea
recoltarea se se face:
face:
-- după
după pregătirea
pregătirea prealabilă
prealabilă a a pacientului;
pacientului;
-- după
după informarea
informarea pacientului
pacientului în în legătură
legătură cucu analiza
analiza ce ce urmează
urmează a a fi
fi
efectuată
efectuată şi şi cu
cu modul
modul corect
corect de de efectuare;
efectuare;
în recipiente
-- în recipiente pentru
pentru recoltare
recoltare curate,
curate, sterile,
sterile, de de unică
unică folosinţă
folosinţă şi
şi
adaptate
adaptate investigaţiei.
investigaţiei. Recipientele
Recipientele de de transport
transport se se închid
închid ermetic
ermetic pentru
pentru a a preveni
preveni
contaminarea
contaminarea mediului
mediului şi şi aa personalului
personalului care care manipulează
manipulează produsele
produsele patologice;
patologice;
-- cât
cât maimai aproape
aproape de de debut;
debut;
înaintea administrării
-- înaintea administrării antibioticului;
antibioticului;
-- cât
cât maimai rapid
rapid posibil,
posibil, corect,
corect, aseptic;
aseptic;
-- pe
pe recipient
recipient se se notează
notează numele
numele pacientului
pacientului şi şi provenienţa
proveniența sa, sa, tipul
tipul
produsului patologic
produsului patologic
În ce
În ce scop
scop se se face
face recoltarea?
recoltarea? _
Trebuie
Trebuie să să sese precizeze
precizeze ce ce examene
examene de de laborator
laborator se se solicită.
solicit |
Transportul produsului
Transportul produsului patologic
patologic la la laborator
laborator se se face:
face: 2 — ci A
-- cât
cât mai
mai repede
repede pentru
pentru a a preveni
preveni - În -«
degradarea produsului
degradarea produsului patologic;
patologic;
„=- folosind
folosind mediimedii dede transport
transport care care asigură
asigură o o bună
bună
supravieţuire
supravieţuire a a bacteriilor.
bacteriilor.
transport, produsul
La transport,
La produsul patologic
patologic trebuie
trebuie să să fie însoţit de
fie însoţit de un
un bilet
bilet dede
trimitere completat
trimitere completat corect.corect.
În cazul
În cazul examenului
examenului virusologic:
virusologic:
-- produsele
produsele patologice
patologice se se transportă
transportă în în recipiente închise
recipiente închise
ermetic,
ermetic, pe pe gheaţă,
gheaţă, însoţite
însoţite de de formular
formular de de cerere
cerere de de analiză
analiză
completat
completat corespunzător,
corespunzător, imediat imediat dup dup recoltare;
recoltare;
-- dacă
dacă produsele
produsele nu nu pot
pot fi fi prelucrate
prelucrate imediat
imediat trebuie
trebuie
congelate rapid
congelate rapid lala -70°C,
-70*C, pentru
pentru ca ca unele
unele virusuri
virusuri sunt
sunt deosebit
deosebit de de
labile
labile şi îşi pierd
şi îşi pierd viabilitatea/infectivitatea
viabilitatea/infectivitatea rapid rapid (citomegalovirus,
(citomegalovirus,
varicela -- zoster
varicela zoster virus,
virus, virusul
virusul respirator
respirator sinciţial);
sinciţial);
-- trebuie
trebuie să să se evite congelarea
se evite congelarea produselor
produselor patologice
patologice la la - -
20*C, deoarece
20°C, deoarece virusurile
virusurile îşi îşi pierd
pierd viabilitatea.
viabilitatea.
 Ce produse
Ce produse patologice
patologice pot pot fi
fi recoltate?
recoltate?
Produsele patologice
Produsele patologice sunt
sunt reprezentate
reprezentate de:
de:
-- exsudat
exsudat faringian;
faringian;
-- secreţie
secreție nazală;
nazală;
-- secreţie
secreție nazo-faringiană;
nazo-faringiană;
-- spută;
spută;
-- sânge;
sânge;
-- LCR;
LCR;
urină;
-- urină;
-- secreţie
secreție vaginală;
vaginală;
-- secreţie
secreție uretrală
uretrală şi
şi prostatică;
prostatică;
-- materii
materii fecale;
fecale;
-- bilă;
bilă;
-- puroi;
puroi;
-- secreţie
secreție conjunctivală;
conjunctivală;
-- exsudate
exsudate din
din cavităţi închise.
cavităţi închise.
 = _—
cc

Modul de
Modul de recoltare
recoltare
a celor
a celor mai
mai frecvente
frecvente produse
produse
patologice,
patologice, inîn funcţie
funcţie de
de
situsul anatomic
situsul
Exsudat faringian
Exsudat faringian
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Când
Când se se recoltează:
recoltează: înainte
înainte de
de tratament
tratament antibacterian,
antibacterian, înainte
înainte dede ingestia
ingestia alimentelor
alimentelor sau
sau
toaleta
toaleta cavităţii
cavităţii bucale.
bucale.
Cantitate
Cantitate recoltată:
recoltată: un un tampon
tampon sausau 2 2 tampoane
tampoane în în cazurile
cazurile speciale;
speciale;
Transport: <
Transport: < 22 ore
ore
Mod de
Mod recoltare —– se
de recoltare se deprimă
deprimă baza
baza limbii
limbii cucu un
un apăsător
apăsător steril;
steril; se
se şterge
şterge ferm
ferm cu
cu un
un
tampon,
tampon, dar dar nunu brutal,
brutal, amigdalele
amigdalele şi şi peretele
peretele posterior
posterior alal faringelui,
faringelui, zone
zone inflamate,
inflamate,
ulcerate sau
ulcerate sau depozitele
depozitele purulente.
purulente.
Tamponul
Tamponul este este introdus
introdus înîn tubul
tubul protector
protector şi şi apoi
apoi sunt
sunt notate
notate datele
datele pacientului.
pacientului.
Examinare
Examinare trebuietrebuie făcută
făcută înîn maxim
maxim 2 2 ore
ore de
de lala recoltare.
recoltare.
În biletul
În biletul de
de trimitere
trimitere sese precizează
precizează suspiciunea
suspiciunea clinic clinic de
de angină
angină şi şi stomatită
stomatită Vincent
Vincent
(depozit pseudomembranos);
(depozit pseudomembranos);
-- identificarea
identificarea lui lui Staphylococcus aureus este
Staphylococcus aureus este înîn scop
scop epidemiologic
epidemiologic (purtător).
(purtător).
Virusolodic:
Virusologic:
-- Se
Se şterge
şterge ferm
ferm mucoasa
mucoasa faringiană
faringiană cu
cu un
un tampon
tampon uscat;
uscat;
-- se
se aşează
aşează tampoanele
tampoanele încărcate
încărcate înîn mediu
mediu dede transport;
transport;
-- se
se păstrează
păstrează produsul
produsul patologic
patologic pe
pe gheaţă;
gheaţă;
-- izolarea
izolarea virusurilor
virusurilor de
de pe
pe tampoane
tampoane este
este mai
mai puţin
puţin eficientă
eficientă decât
decât izolarea
izolarea din
din aspirate
aspirate
sau
sau lavaje,
lavaje, dar
dar recoltarea
recoltarea cucu tamponul
tamponul este
este mult
mult mai
mai uşor
uşor de
de efectuat;
efectuat;
-- se
se transportă
transportă la la laborator
laborator pepe gheaţă.
gheaţă.
Exsudat nazal
Exsudat nazal
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Pacientul
Pacientul suflă
suflă nasul.
nasul.
Mod de
Mod de recoltare:
recoltare:
-- medicul
medicul umectează
umectează tamponul
tamponul faringian
faringian în
în ser
ser fiziologic;
fiziologic;
-- şterge,
şterge, pe
pe rând
rând vestibulul
vestibulul foselor
foselor nazale.
nazale.
Cantitate
Cantitate recoltată:
recoltată: un un tampon
tampon pentru
pentru fiecare
fiecare nara.
nara.
Transport: <
Transport: < 22 ore.
ore.
Examinarea: la
Examinarea: la 2-3
2-3 ore
ore de
de la
la recoltare.
recoltare.
Observaţie:
Observatie: exsudatul
exsudatul nazal
nazal este
este recomandat
recomandat în principal pentru
în principal pentru
depistarea
depistarea purtătorilor
purtătorilor de
de Staphylococcus
Staphylococcus aureus.
aureus.

Virusolodgic:
Virusologic:
-- Se
Se roteşte
roteşte tamponul
tamponul umectat
umectat cucu mediu
mediu dede transport
transport în cavitatea
în cavitatea
nazală;
nazală;
-- tampoanele încărcate se
tampoanele încărcate se aşează
aşează înîn mediu
mediu de
de transport,
transport, acestea
acestea se
se
păstrează/se
păstrează/se transportă
transportă la
la laborator
laborator pe
pe gheaţă
gheaţă
Secreţia
Secreţia nazo-faringiană
nazo-faringiană
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Pacientul
Pacientul este
este aşezat
aşezat cu cu capul
capul înclinat
înclinat pe
pe spate.
spate.
Mod de
Mod de recoltare:
recoltare:
-- medicul
medicul introduce
introduce tamponul
tamponul nazo nazo -- faringian printr-o nară,
faringian printr-o nară, până
până lala
peretele posterior
peretele posterior al al
faringelui, se
nazo -- faringelui,
nazo se lasă
lasă câteva
câteva secunde,
secunde, după
după care
care sese roteşte
roteşte uşor,
uşor,
apoi
apoi se
se retrage
retrage puţin,
puţin, se se reinseră,
reinseră, roteşte
roteşte şi
şi se
se retrage
retrage definitiv.
definitiv.
Examinarea :: la
Examinarea la 2-3
2-3 ore
ore dede la
la recoltare.
recoltare.

Virusolodic:
Virusologic:
Tamponul
Tamponul inserat
inserat pepe tijă
tijă flexibilă
flexibilă sese introduce
introduce printr-o
printr-o nară
nară până
până ce
ce
se atinge
se atinge peretele
peretele posterior
posterior al al nazo
nazo -- faringelui, se aşteaptă
faringelui, se aşteaptă câteva
câteva
secunde
secunde şi şi se
se retrage;
retrage;
-- se
se recoltează
recoltează în în primele
primele 5 5 zile
zile de
de la
la apariţia
apariţia simptomelor;
simptomelor;
-- se
se transportă
transportă la la laborator
laborator pe pe gheaţă.
gheaţă.
Spută
Spută
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Se
Se recoltează
recoltează la la internare.
internare.
Mod de
Mod recoltare: se
de recoltare: se efectuă
efectuă periajul
periajul dinţilor,
dinţilor, clătirea
clătirea energică
energică a a gurii
gurii şi
şi
gargară
gargară cu cu apă
apă sterilă.
sterilă. Pacientul
Pacientul tuşeşte
tuşeşte şişi expectorează
expectorează într-un într-un recipient
recipient
steril
steril (cu
(cu gâtul
gâtul larg
larg şişi cu
cu unun capac
capac care
care se închide ermetic).
se închide ermetic).
Tuse spontană, intensă,
Tuse spontană, intensă, supravegheată.
supravegheată.
Cantitatea
Cantitatea recoltată:
recoltată: 1-2 1-2 mlml probă
probă purulentă.
purulentă.
Tuşitori
Tuşitori cronici, TBC: toată
cronici, TBC: toată sputa
sputa de de la
la expectoraţia
expectoraţia matinală
matinală sau sau
expectorată
expectorată în în interval
interval de de 11 -- 2
2 ore
ore
Tuse
Tuse slab productivă: stimularea
slab productivă: stimularea expectoraţiei
expectoraţiei
Transport: <
Transport: < 22 ore.
ore.
Observaţii:
Observaţii: se se recoltează
recoltează sputa sputa subsub directa
directa îndrumare
îndrumare a a asistentei.
asistentei. Se Se
explică
explică pacientului
pacientului diferenţa
diferenţa dintre
dintre a a expectora
expectora şi şi aa scuipa.
scuipa. Sputa
Sputa se se
recoltează
recoltează dimineaţa
dimineaţa când când pacientul
pacientul face
face ‘‘toaleta
“toaleta bronhiilor”.
bronnhiilor”.
Nu
Nu sese examinează
examinează probele probele de de spută
spută adunate
adunate în în 24
24 dede ore!
ore!

Virusologic:
Virusologic:
Se
Se transportă
transportă la
la laborator
laborator pe
pe gheaţă
gheaţă
Secreţie
Secreţie traheală
traheală
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Mod
Mod de de recoltare:
recoltare: secreţie
secreție aspirată în recipient
aspirată în recipient steril.
steril.
Cantitatea
Cantitatea recoltată:
recoltată: > > 33 mL.
ML.
Transport: <
Transport: < 22 ore.
ore.
Observații: se
Observaţii: se aspiră
aspiră cu cu ajutorul
ajutorul unei
unei sonde
sonde dede unică
unică folosinţă,
folosinţă, atraumatic,
atraumatic,
aseptic.
aseptic. Se
Se va
va efectua
efectua preoxigenarea
preoxigenarea bolnavului
bolnavului cucu fracţie
fracţie inspiratorie
inspiratorie Fi
Fi O2
02
= 1,
= 1, timp
timp de
de trei
trei minute.
minute.

Virusologic:
Virusologic:
-
Secreţie
Secreţie otică
otică internă
internă
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Mod de
Mod recoltare -- timpan
de recoltare timpan perforat:
perforat: sese colectează
colectează fluidul
fluidul cucu un
un tampon
tampon flexibil
flexibil cu
cu
ajutorul unui
ajutorul unui speculum
speculum auditiv.
auditiv.
Cantitatea
Cantitatea recoltată:
recoltată: tampon
tampon cu cu mediu
mediu dede transport
transport sau
sau sistem
sistem anaerob.
anaerob.
Obligatoriu
Obligatoriu sese recoltează
recoltează doua
doua tampoane
tampoane din din acelaşi
acelaşi loc.
loc.
Transport: <
Transport: < 22 ore.
ore.
Observații: în
Observaţii: în cazul
cazul secreţiei
secreției aspirate
aspirate sausau biopsiei
biopsiei se
se foloseşte
foloseşte sistemul
sistemul dede
transport anaerob.
transport anaerob. Culturile
Culturile de
de la
la nivel
nivel nazofaringian
nazofaringian sausau exsudat
exsudat faringian
faringian nu nu sunt
sunt
predictive
predictive pentru
pentru agenţii
agenţii etiologici
etiologici în
în otita
otita medie.
medie.

Virusologic:
Virusologic:
-
Secreţie
Secreţie otică
otică externă
externă
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Mod de
Mod recoltare: cu
de recoltare: cu un
un tampon
tampon umezit
umezit sese curăţă
curăţă conductul
conductul auditiv
auditiv extern.
extern.
Cu un
Cu un al Il-lea tampon
al II-lea tampon se se recoltează
recoltează prin
prin rotire
rotire fermă.
fermă.
Cantitatea recoltată: obligatoriu
Cantitatea recoltată: obligatoriu sese recoltează
recoltează 2 2 tampoane.
tampoane.
Transport: <
Transport: < 22 ore.
ore.
Observaţii. pentru
Observaţii: pentru secreţia
secreția otică
otică externa
externa sese va
va efectua
efectua rotirea
rotirea riguroasă
riguroasă aa
tamponului.
tamponului.

Virusologic:
Virusologic:
-
Secreţii
Secreţii oculare
oculare
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Conjunctivă
Conjunctivă
Mod de
Mod de recoltare:
recoltare:
se
se recoltează
recoltează câtecâte unun tampon
tampon separat
separat pentru
pentru fiecare
fiecare ochi;
ochi;
tamponul este
tamponul este umezit
umezit în ser fiziologic
în ser fiziologic steril;
steril;
se
se roteşte
roteşte tamponul
tamponul şi şi se însămânţează direct
se însămânţează direct pe pe mediile
mediile de de cultură,
cultură, majoritatea
majoritatea
germenilor
germenilor având având viabilitate
viabilitate redusă
redusă sau sau sese aduc
aduc imediat
imediat in in laborator.
laborator.
însămânţare directă
Transport: însămânţare
Transport: directă pe pe mediile
mediile de de cultura
cultura (chocolate,
(chocolate, geloză-sânge),
geloză-sânge),
frotiuri
frotiuri pentru
pentru examenul
examenul microscopic
microscopic direct. direct. Plăcile însămânţate se
Plăcile însămânţate se trimit
trimit la
la laborator
laborator
< 15
< 15 min.
min.
Observaţii: se
Observaţii: se recoltează înainte de:
recoltează înainte de: toaleta
toaleta feţei,
feţei, terapie
terapie antimicrobiană
antimicrobiană topicătopică sausau
sistemic;
sistemic; se se recoltează
recoltează de de lala nivelul
nivelul ambelor
ambelor conjunctive.
conjunctive. OchiulOchiul neinfectat
neinfectat serveşte
serveşte
drept control.
drept control.
Cornee
Cornee
Mod de
Mod recoltare: se
de recoltare: se raclează
raclează din din mai
mai multe
multe ariiarii ale
ale ulcerului
ulcerului cornean.
cornean. Se Se foloseşte
foloseşte
soluţie
soluţie anestezică
anestezică locală.
locală.
însămânţare directă
Transport: însămânţare
Transport: directă pe pe mediile
mediile de de cultura
cultura (BHI,
(BHI, chocolate),
chocolate), frotiuri
frotiuri pentru
pentru
examenul
examenul microscopic
microscopic direct.
direct. Plăcile însămânţate se
Plăcile însămânţate se trimit
trimit lala laborator
laborator < < 15
15 min.
min.

Virusologic:
Virusologic:
-
 Sânge -- hemocultură
Sânge hemocultură
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Recoltare în
Recoltare recipiente speciale
în recipiente speciale pentrupentru
Hemocultură:
Hemocultură:[11 1 set set = = 11 flacon
flacon aerobaerob + + 11 flacon
flacon anaerob.
anaerob.
Se
Se recomandă
recomandă recoltarea
recoltarea sângelui
sângelui din din 22 locuri
locuri diferite
diferite
Volum recoltat:
Volum recoltat: 10 10 mlml (1-3
(1-3 ml ml lala copii)
copii)
Recoltarea
Recoltarea pentrupentru hemocultură,
hemocultură, presupune presupune lipsa lipsa tratamentului
tratamentului cu cu antibiotice,
antibiotice, altfel
altfel există
există riscul
riscul caca germenii
germenii să
să
nu
nu crească.
crească.
Tehnica de
Tehnica recoltare: se
de recoltare: se procedează
procedează la la antiseptizarea
antiseptizarea tegumentului
tegumentului cu cu iod
iod (betadine),
(betadine), apoiapoi cucu alcool
alcool 70%;
70%;
se
se aşteaptă
aşteaptă uscarea
uscarea zonei zonei antiseptizate.
antiseptizate. Recoltarea
Recoltarea sângelui
sângelui se se face
face direct
direct în în flacoane.
flacoane.
Transport: Transportul
Transport: Transportul trebuietrebuie făcutfăcut imediat.
imediat. Nu Nu sese refrigerează.
refrigerează.
Observaţii:
Observaţii: Sepsis acut: 3
Sepsis acut: 3 seturi,
seturi, 3 3 venopuncţii
venopunciii separate,
separate, la la interval
interval de de 1010 minute, înainte de
minute, înainte de a a începe
începe
antibioticoterapia.
antibioticoterapia.
Endocardita
Endocardita acută: acută: 3 3 seturi,
seturi, 3 3 venopuncţii
venopuncţii separate
separate în în primele
primele 1-2 1-2 ore
ore dede evoluţie;
evoluţie; sese recomandă începerea
recomandă începerea
terapiei.
terapiei.
Endocardita subacută: 3
Endocardita subacută: 3 seturi,
seturi, 3 3 venopuncţii
venopuncţii separate
separate la la interval
interval de de 1515 minute
minute în în prima
prima zi.
zi. Dacă
Dacă rezultatul
rezultatul la
la
24
24 ore
ore este
este negativ,
negativ, recoltaţi
recoltaţi încăîncă trei
trei seturi.
seturi. Endocardita
Endocardita în în timpul
timpul tratamentului
tratamentului cu cu antibiotice:
antibiotice: 3 3 seturi,
seturi, 3 3
venopuncţii
venopuncţii separate,
separate, zilnic,
zilnic, 3 3 zile
zile succesiv.
succesiv. Se Se recoltează
recoltează imediat înaintea începerii
imediat înaintea începerii următoarei
următoarei doze doze de de
antibiotic.
antibiotic. Nu Nu sese recoltează
recoltează când când concentraţia
concentraţia sericăserică a a antibioticului
antibioticului este este maximă.
maximă.
Febra
Febra de de origine
origine necunoscută:
necunoscută: 2-3 2-3 seturi,
seturi, venopuncţii
venopuncţii separate
separate la la interval
interval de de cel
cel puţin
puţin oo ora.
ora.
Virusologic:
Virusologic:
În cursul
În cursul diagnosticului serologic: se
diagnosticului serologic: se recoltează
recoltează sânge
sânge înîn vacutainere
vacutainere
fără anticoagulanţi (dop
fără anticoagulanţi (dop roşu). roşu).
Sângele
Sângele recoltat
recoltat sese transportă
transportă fără
fără
refrigerare, la
refrigerare, la temperatura
temperatura camerei.
camerei.
Serul este
Serul este separat
separat în laborator.
în laborator.
În
În cazul
cazul determinării
determinării statusului imun: se
statusului imun: se recoltează
recoltează oo singură
singură probă;
probă; pentru
pentru detectarea
detectarea infecţiilor
infecțiilor acute
acute se
se
recoltează
recoltează probe
probe perechi,
perechi, o o probă
probă de de sânge
sânge în
în perioada
perioada dede stare
stare a
a bolii
bolii şi
şi o
o probă
probă în
în starea
starea dede convalescenţă,
convalescenţă,
la interval
la interval dede 10-14
10-14 zile
zile între
între probe.
probe.
 dj

Lichid cefalorahidian
Lichid cefalorahidian (LCR)
(LCR) 3.
Bacteriologic:
Bacteriologic:
LCR
LCR se
se recoltează
recoltează prin
prin puncţie
puncţie lombară în condiţii
lombară în condiţii stricte
stricte de
de asepsie.
asepsie.
Produsul
Produsul patologic
patologic nu
nu se
se refrigerează
refrigerează (Neisseria
(Neisseria meningitidis).
meningitidis).

Virusologic:
Virusologic:
Recoltarea se
Recoltarea se face
face în primele 7
în primele 7 zile
zile de
de la
la debut;
debut;
-- se
se transportă
transportă la
la laborator
laborator pe
pe gheaţă.
gheaţă.
 Urină
Urină

Bacteriologic:
Bacteriologic:
Pacientul
Pacientul trebuie
trebuie educat
educat (explicat
(explicat pe înţelesul fiecărui
pe înţelesul fiecărui bolnav)
bolnav) pentru
pentru prevenirea
prevenirea contaminării
contaminării
probei
probei
Momentul prelevării: prima
Momentul prelevării: prima urină
urină dede dimineaţă.
dimineaţă.
Recoltarea urinei
Recoltarea urinei sese face:
face:
-- după
după celcel puţin
puţin 3-4
3-4 ore
ore dede lala micţiunea
micţiunea anterioară;
anterioară;
-- după
după toaleta
toaleta riguroasă
riguroasă a a organelor
organelor genitale
genitale externe
externe cu cu apă
apă călduţă
călduţă şişi săpun;
săpun;
-- din jetul mijlociu
din jetul mijlociu fără întrerupere fluxului;
fără întrerupere fluxului;
-- în
în recipiente
recipiente sterile
sterile speciale
speciale pentrupentru recoltarea
recoltarea urinei.
urinei.
Cantitatea
Cantitatea necesară:
necesară: 10-20 10-20 ml. ml.
nou-născuţi se
Pentru nou-născuţi
Pentru se folosesc
folosesc pungipungi sterile
sterile din
din material
material plastic.
plastic.
Se
Se mai
mai poate
poate preleva
preleva urină
urină prin
prin puncţie
puncţie suprapubiană
suprapubiană sau sau prin
prin cateter:
cateter:
Examenul microbiologic
Examenul microbiologic al al urinei
urinei trebuie
trebuie efectuat
efectuat în cel mult
în cel mult 2 2 ore
ore de
de la
la prelevare
prelevare indiferent
indiferent de
de
modul de
modul de recoltare.
recoltare.

Virusologic:
Virusologic:
Se
Se recoltează jetul mijlociu
recoltează jetul în recipient
mijlociu în recipient steril
steril cu
cu capac
capac filetat;
filetat;
-- se
se transportă
transportă imediat
imediat lala laborator
laborator pe
pe gheaţă;
gheaţă;
-- recoltarea
recoltarea se
se face în primele
face în primele 2 2 săptămâni
săptămâni de de boală;
boală;
-- se
se transportă
transportă la
la laborator
laborator pepe gheaţă.
gheaţă.
Secreţiile genitale —– la
Secreţiile genitale la femei
femei
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Vaginite: se
Vaginite: se recoltează
recoltează din din fundul
fundul de de sac
sac vaginal,
vaginal, cucu tampon
tampon steril
steril care
care
apoi se
apoi se introduce
introduce în mediu de
în mediu de transport;
transport;
-- se
se efectuează
efectuează două două frotiuri.
frotiuri.
Transport: <
Transport: < 2 2 ore.
ore.
Observaţii:
Observaţii: în în cazul
cazul suspiciunii
suspiciunii infecţiei
infecţiei cucu Trichomonas vaginalis, un
Trichomonas vaginalis, un tampon
tampon se se imersează
imersează în în tub
tub steril
steril
cu
cu 11 mLmL soluţie
soluţie salină
salină izotonă
izotonă (37ºC),
(37*C), pentru
pentru examen
examen microscopic
microscopic (preparat
(preparat proaspăt
proaspăt între
între lamă-lamelă.
lamă-lamelă.
Cervicite: se
Cervicite: se recoltează
recoltează cu cu unun tampon
tampon steril;
steril; se
se îndepărtează
îndepărtează mucusulmucusul de de la
la nivelul
nivelul cervixului;
cervixului; cucu un
un alt
alt
tampon
tampon se se recoltează
recoltează produsul
produsul patologic
patologic prinprin introducerea
introducerea şi şi rotirea
rotirea înîn canalul
canalul cervical;
cervical; sese asigură
asigură
evitarea
evitarea contaminării
contaminării probei probei cu cu flora
flora vaginală;
vaginală;
se
se efectuează
efectuează două două frotiuri.
frotiuri.
Bartolinite: se
Bartolinite: se prelevează
prelevează secreţia
secreția purulentă
purulentă de de la
la nivelul
nivelul orificiului
orificiului conductului
conductului glandular.
glandular.
Cantitatea
Cantitatea recoltată
recoltată > > 11 mL.
mL.
Transport: sistem
Transport: sistem anaerob.
anaerob.
Endometrite: se
Endometrite: se badijonează
badijonează cu cu alcool
alcool iodat
iodat exocolul
exocolul şi şi canalul
canalul cervical;
cervical; sese introduce
introduce un un cateter;
cateter; sese
aspiră
aspiră lichid
lichid endometrial.
endometrial.
Observaţii:
Observaţii: puroiul
puroiul aspirat
aspirat prin prin puncţie
puncţie (abces)
(abces) se însămânţează pe
se însămânţează pe medii
medii aerobe
aerobe şi şi anaerobe.
anaerobe.
La fetițe: se
La fetiţe: se efectuează
efectuează tamponarea
tamponarea secreţiei
secreției de de la
la nivelul
nivelul vulvei.
vulvei. Cu Cu ajutorul
ajutorul unui
unui cateter
cateter se
se introduc
introduc în în
vagin 2
vagin 2 mlml ser
ser fiziologic
fiziologic steril,
steril, apoi
apoi se se colectează
colectează lichidul
lichidul de
de spălătură;
spălătură;
-- se
se efectuează
efectuează două două frotiuri.
frotiuri.
Produsul
Produsul patologic
patologic nu nu sese refrigerează
refrigerează (Neisseria
(Neisseria gonnorhoeae).
gonnorhoeae).

Virusolodic:
Virusologic:
Se
Se transportă
transportă la
la laborator
laborator pe
pe gheaţă.
gheaţă.
Secreţiile genitale —– la
Secreţiile genitale la bărbaţi
bărbaţi
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Uretrite:
Uretrite:
-- se
se recoltează
recoltează secreţie
secreție uretrală
uretrală spontană
spontană (picatura
(picatura matinala)sau
matinala)sau provocată
provocată cu cu tampon
tampon steril,
steril, care
care
se introduce
se introduce în în mediu
mediu de de transport:
transport:
Cantitatea recoltată: tampon
Cantitatea recoltată: tampon cu cu mediu
mediu de de transport;
transport; se se efectuează
efectuează două două frotiuri;
frotiuri;
pentru examenul
pentru examenul microscopic.
microscopic.
-- se
se poate
poate recolta
recolta şi şi urină
urină -- primul
primul jet.
jet.
Transport: 2
Transport: 2 ore.
ore.
Observaţii
Observaţii -- examinarea
examinarea uretreiuretrei şişi prelevarea
prelevarea probelor
probelor sese fac
fac la
la cel
cel puţin
puţin două
două ore ore după
după micţiune.
micţiune.
Pacienţii
Pacienţii cucu scurgere
scurgere discretă
discretă vor
vor reduce
reduce lichidele
lichidele până
până înîn ziua
ziua următoare
următoare şi şi prelevarea
prelevarea se se face
face
înainte de
înainte de micţiunea
micţiunea matinală.
matinală. In In cazul
cazul suspiciunii
suspiciunii infecţiei
infecţiei cucu Trichomonas
Trichomonas vaginalis,
vaginalis, prelevarea
prelevarea
se
se va
va face înaintea micţiunii
face înaintea micţiunii matinale;
matinale; tamponul
tamponul se se imersează
imersează în în tub
tub steril
steril cu
cu 11 mL mL soluţie
soluţie salină
salină
izotonă
izotonă (37ºC),
(37*C), pentru
pentru examen
examen microscopic
microscopic fără întârziere. Probele
fără întârziere. Probele destinate
destinate cultivării
cultivării gonococilor
gonococilor
se însămânţează imediat
se însămânţează imediat pe pe medii
medii speciale,
speciale, lala 37ºC.
37*C.
Prostatite:
Prostatite:
-- se
se recoltează
recoltează secreţia
secreția prostatică
prostatică dupădupă masaj
masaj prostatic
prostatic ejaculare
ejaculare şi şi colectare
colectare în în recipient
recipient steril.
steril.
Cantitatea
Cantitatea recoltată:
recoltată: tampon
tampon cu cu mediu
mediu de de transport;
transport; doua
doua lame
lame pentru
pentru examenul
examenul microscopic.
microscopic.
Transport: <
Transport: < 22 ore.
ore.
Virusologic:
Virusologic:
Se
Se transportă
transportă la
la laborator
laborator pe
pe gheaţă.
gheaţă.
 Materii
Materii fecale:
fecale: Coprocultură
Coprocultură
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Scaun emis
Scaun emis spontan.
spontan.
Defecarea
Defecarea se se face
face în în containere
containere de de unică
unică utilizare
utilizare de
de carton
carton sau
sau material
material plastic.
plastic. Se
Se recoltează:
recoltează:
-- cu
cu tampon/linguriţa
tampon/linguriţa coprorecoltorului;
coprorecoltorului;
-- porţiuni
porţiuni lichide,
lichide, mucoase,
mucoase, sanguinolente,
sanguinolente, volumulvolumul prelevat
prelevat fiind
fiind de
de 33 -- 55 cm
cms;3;
-- prelevare
prelevare rectală;
rectală;
-- cu
cu sonda
sonda Nelaton:
Nelaton:
-- umectarea
umectarea sondei
sondei în ser fiziologic
în ser fiziologic
-- penetrarea
penetrarea sfincterului
sfincterului anal prin rotare
anal prin rotare lentă;
lentă;
introducere
introducere intrarectală
intrarectală ≈ = 15
15 cm;
cm;
adaptarea unei
adaptarea unei siringi
siringi sterile
sterile de de 10 10 mL;
mL;
-- se
se efectuează
efectuează 1 1 -- 22 aspiraţii;
aspirații;
-- introducerea
introducerea aspiratului
aspiratului în tub steril
în tub steril cu
cu dop,
dop, cucu mediu
mediu dede conservare
conservare lichid.
lichid.
Pentru depistare
Pentru depistare Clostridium
Clostridium difficile
difficile se
se face
face recoltarea
recoltarea de
de scaun
scaun diareic
diareic (lichid
(lichid sau
sau moale)
moale) în
în
recipient
recipient curat,
curat, fără
fără mediu
mediu de de transport.
transport.
Virusologic:
Virusologic:
Scaun emis
Scaun emis spontan.
spontan.
Se
Se recoltează
recoltează probe
probe înîn primele
primele 2 2 -- 3
3 zile
zile de
de boală;
boală; nu nu se
se folosesc
folosesc conservanţi,
conservanţi, medii
medii de
de transport,
transport,
nu
nu se
se recoltează
recoltează cu cu tamponul
tamponul deoarece
deoarece o o mare
mare parte
parte din
din virusuri
virusuri se
se absoarbe
absoarbe pe
pe tampon
tampon
Metode de
Metode de conservare:
conservare:
-- refrigerare
refrigerare lala 4
4*C;
oC;

-- congelare
congelare la la -70
-70*C. Se folosesc
oC. Se folosesc containere
containere sterile.
sterile.
Cantitatea de
Cantitatea de probă:
probă: 5 5 -- 10
10 cm
cm>. .
3
Lichide
Lichide
Bacteriologic:
Bacteriologic:
Ascită, bilă,
Ascită, bilă, lichid
lichid sinovial, pericardic, peritoneal,
sinovial, pericardic, peritoneal, pleural
pleural
Mod de
Mod recoltare: se
de recoltare: se dezinfectează
dezinfectează tegumentul
tegumentul cu cu betadine,
betadine, 3 3 badijonări
badijonări
succesive
succesive cu cu respectarea
respectarea timpul
timpul dede acţiune
acţiune al al antisepticului;
antisepticului; se se aspiră
aspiră cu cu ac
ac
steril/
steril/ chirurgic,
chirurgic, se îndepărtează iodul
se îndepărtează iodul cucu alcool
alcool 70%.
70%.
Cantitatea
Cantitatea recoltată:
recoltată: întotdeauna
întotdeauna trebuie
trebuie trimis
trimis fluid
fluid cât
cât de
de mult
mult posibil.
posibil.
Niciodată
Niciodată nu nu sese recoltează
recoltează tampon îmbibat în
tampon îmbibat în lichid.
lichid.
Transport: <
Transport: < 15
15 minute.
minute.
Observaţii:
Observații: recoltarea
recoltarea se se face
face în flacoane pentru
în flacoane pentru sistemul
sistemul automat:
automat: se se
îndepărtează capacul
îndepărtează capacul flacoanelor;
flacoanelor; se se dezinfectează
dezinfectează capacelecapacele dede cauciuc
cauciuc cu cu
alcool
alcool 70%;
70%; se se inoculează
inoculează fiecare
fiecare flacon,
flacon, fără
fără a a depăşi
depăşi semnul
semnul de de pepe
etichetă.
etichetă. Pentru
Pentru culturi
culturi se
se recomandă
recomandă recoltarea
recoltarea şi şi transportul
transportul direct
direct înîn
flacoane
flacoane de de hemocultură.
hemocultură.
Virusologic:
Virusologic:
-
 Eno

CULTIVAREA BACTERIILOR,
CULTIVAREA BACTERIILOR,
VIRUSURILOR,
VIRUSURILOR,
RICKETISIILOR
RICKETTSIILOR
SI
SI
CHLAMYDIILOR,
CHLAMYDIILOR,

B7 4
LP
 UNU ee
CULIIVAREA BACTERIILOR.
CULTIVAREA BACI ERIILOR

-- Mediul
Mediul de de cultura
cultura -- un
un complex
complex dede substante
substante
care permite
care permite cresterea
cresterea si
si multiplicarea
multiplicarea
bacteriilor sau
bacteriilor sau mediu
mediu care
care asigura
asigura nutrientii
nutrientii si si
conditiile fizico-
conditiile fizico- chimice
chimice necesare
necesare cresterii
cresterii si
si
multuiplicarii bacteriene.
multiplicarii bacteriene.
 Eno

Siele]»
Scop
 Identițicare agentului
Identificare agentului etiologic
etiologic al
al unei
unei
infectii;
infectii;

 Determinarea farmacorezistentei
Determinarea farmacorezistentei
mMIcroorganismelor izolate
microorganismelor izolate

 Prepare seruri
Prepare seruri si
si vaccinuri
vaccinuri
Mediile de
Mediile de cultură
cultură

Să
»Să asigure
asigure cantităţi
cantităţi optime
optime de hidratare şi
de hidratare şi substanţe
substanţe nutritive
nutritive necesare
necesare creşterii
creşterii
şi
şi multiplicării
multiplicării microorganismelor;
microorganismelor;
Să asigure sursa
Să asigure sursa dede carbon
carbon şi
şi energie
energie (compuşi
(compuşi organici
organici —– polizaharide,
polizaharide, proteine,
proteine,
lipide anorganice);
lipide anorganice);
Să
Să conțină săruri
conţină săruri minerale,
minerale, cu cu rol
rol în
în menţinerea
menţinerea echilibrului
echilibrului ionic
ionic al
al celulei
celulei (Na
(Na?,+,
KK+,+, Ca?+,
Ca Mg?*,
2+, Mg Mn, Fe
2+, Mn, Fe?+, Co”);
2+, Co 2+);

Să
»Săasigure factori
asigure factori de
de creştere
creştere necesari
necesari pentru
pentru dezvoltarea
dezvoltarea unor
unor microorganisme
microorganisme
cu
cu exigenţe
exigenţe de
de creştere
creştere (purine, pirimidine, aminoacizi,
(purine, pirimidine, aminoacizi, vitamine
vitamine etc.)
etc.)
Să
»Să asigure
asigure sursa
sursa de azot necesară
de azot necesară biosintezei
biosintezei acizilor
acizilor nucleici
nucleici şişi proteinelor
proteinelor
(compuşi
(compuşi organici: proteine, peptone,
organici: proteine, peptone, aminoacizi
aminoacizi sau sau anorganici
anorganici -- azotaţi,
azotaţi, azotiţi
azotiţi
Să ofere
»)Să ofere un
un pHpH optim
optim pentru
pentru dezvoltarea
dezvoltarea microorganismelor:
microorganismelor: în general
în general
microorganismele
microorganismele se se dezvoltă
dezvoltă optim
optim la pH neutru
la pH neutru== 7.2-7.4,
7.2-7.4, cu unele excepții:
cu unele excepţii:
Vibrio cholerae
Vibrio cholerae se se dezvolta
dezvolta la
la un
un pH
pH optim
optim alcalin
alcalin (pH=9.0-9.2),
(pH= 9.0- 9.2), în în timp
timp ce
ce
levurile
levurile şi
şi mucegaiurile preferă un
mucegaiurile preferă un pH
pH acid
acid (pH=5-6);
(pH=5-6);
» Să
Să satisfacă
satisfacă necesităţile
necesităţile de
de aerobioză
acrobioză sausau anaerobioză
anaerobioză ale bacteriei, satisfacă
ale bacteriei,
naerobioză ale bacteriei,
Să fie
»Să steril şi
fie steril şi repartizat
repartizat în
în recipiente
recipiente sterile
sterile
Clasificarea
Clasificarea mediilor
mediilor de
de cultură
cultură sese realizează
realizează în în
funcţie
funcţie de
de mai
mai multe
multe criterii,
criterii, care
care se
se suprapun
suprapun
parţial,
parţial, datorită
datorită complexităţii
complexităţii şi şi diversităţii
diversităţii lor
lor
chimice:
chimice:

- după
- după consistenţă:
consistenţă:
» medii lichide(bulion,
medii lichide(bulion, apa
apa peptonata);
peptonata);
> medii semisolide
medii semisolide
» solide (geloză
medii solide
medii (geloză dreaptă, înclinată, în
dreaptă, înclinată, în
plăci).
plăci). Consistenţa
Consistenţa mediului
mediului de
de cultură
cultură este
este dată
dată
de
de includerea
includerea în în compoziţie
compoziţie a a unor
unor substanţe
substanţe
inerte:
inerte: agar
agar (geloză)
(geloză)
-
- după
după provenienţă:
provenienţă:

» medii naturale
medii naturale
lichide: : mediu
lichide mediu cu cu lapte;
lapte; ou;
ou;
solidificate:. : cartof
solidificate cartof glicerinat
glicerinat
» artificiale care
medii artificiale
medii care auau oo compoziţie
compoziţie chimică
chimică
bine
bine definită
definită şişi nu
nu conţin
conţin nici
nici un
un produs
produs
natural
natural ca
ca sursa
sursa de de factori
factori de de creştere
creştere (in
(in
compozitia lor
compozitia intra soluţii
lor intra soluţii minerale,
minerale, soluţii
soluţii de
de
zaharuri, aminoacizi
zaharuri, aminoacizi). ).
 Vedii artificiale
Medii artificiale
a.Medii de
a.Medii de bază
bază
—– pentru germeni nepretenţioşi
pentru germeni nepretenţioşi
•* bulion simplu —– macerat
bulion simplu macerat de carne, peptonă,
de carne, peptonă, NaClNaCl
0,5%.
0,5%.
•geloza
*geloza simplă
simplă —– bulion
bulion + + agar-agar
agar-agar (un(un extract
extract de
de alge
alge
care asigură
care asigură consistenţa
consistenţa solidă,solidă, nu are proprietăţi
nu are proprietăţi
nutritive)
nutritive)
b. Medii
b. Medii compuse
compuse
1) Medii
1) Medii complexe:
complexe: mediu mediu de de bază
bază + + substanţe
substanţe
organice (sânge,
organice ser, glucoză),
(sânge, ser, glucoză), suntsunt folosite
folosite pentru
pentru
cultivarea germenilor pretenţioşi
cultivarea germenilor pretenţioşi
•* geloza
geloza sânge,
sânge, geloza
geloza serser
•* bulion
bulion sânge,
sânge, bulion
bulion ser,
ser, bulion
bulion glucozat
glucozat
„Ste a
 Ene

GELOZA SANGE
GELOZA SANGE

 Stafilococ
Stafilococ
auriu hemolitic
auriu hemolitic
 Ene

GELOZA SANGE
GELOZA SANGE

 Stafilococ auriu
Stafilococ auriu
nehemolitic
nehemolitic
 Eno

Vedii artificiale
Medii artificiale
 2) Medii
2) Medii. de
de îmbogăţire
Irmbogatire; : destinate
destinate cultivării
cultivarii unor
unor
bacterii
bacterii cu
cu necesităţi
necesităţi nutritive
nutritive particulare
particulare şi şi care
care
sunt
sunt stimulate
stimulate săsa crească
crească inîn modmod special,
special,
deoarece
deoarece numărul
numarul lor lor este
este redus
redus inîn produsul
produsul
patologic
patologic inîn momentul
momentul recoltării
recoltarii
•e mediul
mediul Pike
Pike pentru îmbogăţirea streptococilor:
pentru Imbogaţirea streptococilor:
bulion
bulion glucozat
glucozat cu cu cristal
cristal violet
violet (inhibă
(inhiba
dezvoltarea
dezvoltarea stafilococilor),
stafilococilor), azidazid dede NaNa (inhibă
(inhiba
Gram negativii),
Gram negativii), +/-+/= sânge
sange
•e mediul
mediul hiperclorurat
hiperclorurat pentru îmbogăţirea
pentru imbogaţirea
stafilococilor; bulion
stafilococilor: bulion + + NaCl
NaCl 7,5%
7,5%
•* bulionul
pulionul selenit
selenit acid
acid de de sodiu-
sodiu- pt.
pt. salmonele
salmonele
„Ste a
 Eno

Vedii artificiale
Medii artificiale
 3) Medii
3) Meali selective
selective; :
 care
care conţin
conţin elemente
elemente ce ce permit
permit creşterea
creşterea numai
numai anumitor
anumitor
dintr-un produs
bacterii dintr-un
bacterii produs şi şi alte
alte substanţe
substanţe carecare inhibă
inhiba
dezvoltarea altora
dezvoltarea altora -- permit
permit cultivarea
cultivarea unor unor bacterii
bacterii
pretenţioase
pretenţioase
 mediul Lowenstein-Jensen —– pt.
mediul Löwenstein-Jensen pt. cultivarea micobacteriilor –
cultivarea micobacteriilor =
ou,
OU, cartofi,
cartofi, verde
verde malachit,
malachit, asparagină,
asparagina, glicerină
glicerina
 Sabouraud =– pt.
mediul Sabouraud
mediul pt. cultivarea
cultivarea levurilor:
levurilor: geloză
geloza + +
maltoză/glucoză
maltoza/glucoza + + antibiotice
antibiotice
 Schaedler =– pt.
mediul Schaedler
mediul anaerobi =– geloză
pt. anaerobi geloza sânge
sange + + glucoză
glucoză
 chocolat —– neisserii,
mediul chocolat
mediul neisserii, hemofili:
hemofili: geloză
geloza sânge,
sange, sângele
sangele
se
se adaugă
adauga la la geloza
geloza topită
topita şi şi răcită
racita lala 60-70°C
60-70*C
 Mediu Chapman —– pt.
Vediu Chapman pt. stafilococi
stafilococi

„Ste a
 Eno

GELOZA CHOCOLAT
GELOZA CHOCOLAT
 Eno

MEDII DE CULTIVARE A
MICROORGANISMELOR IN LABORATOR

-= mediul Lowenstein-Jensen –
mediul Löwenstein-Jensen — pt.
pt. cultivarea micobacteriilor –
cultivarea micobacteriilor = ou,
ou, cartofi,
cartofi,
malachit, asparagină,
verde malachit,
verde asparagina, glicerină
glicerina
-- mediul Sabouraud =– pt.
mediul Sabouraud pt. cultivarea levurilor: geloză
cultivarea levurilor: geloza ++ maltoză/glucoză
maltoza/glucoza + +
antibiotice
antibiotice
 Ene

MEDIU SABOURAUD
MEDIU SABOURAUD

 ZYGOMICETE LA
ZYGOMICETE LA 24
24
0 să
ORE
 Ene

MEDIU SABOURAUD
MEDIU SABOURAUD

 ZYGOMICETE LA
ZYGOMICETE LA
48 DE
48 DE ORE
ORE
 Ene

MEDIUL SABOURAUD
MEDIUL SABOURAUD

E ul Îi ZYgomicete' si
Zygomicete si
levuri tip
levuri tip
Candida la
Candida la 4 4
Zile
zile

| i

0 III
 Ene

MEDIUL SABOURAUD
MEDIUL SABOURAUD

 CaNa/aa. krusei
Candida KT-USEI
(( conform
conform API)
API)
 Ene

MEDIU SABOURAUD-
MEDIU SABOURAUD-

 LEVURI —– CANDIDA
LEVURI CANDIDA
ALBICANS -DISPERSIE
ALBICANS -DISPERSIE
 Eno

MEDIUL SABOURAUD
MEDIUL SABOURAUD

j ve,  FUNgI din

Fungi din familia
familia
+ FUSARIUN (conform
FUSARIUM (contor
frotiu”amprenta”)
frotiu-amprenta')
 Ene

MEDIUL SABOURAUD
MEDIUL SABOURAUD

 20) 7e/| | flavus

Aspergillus e 0
 fetele artificiale
Medii aie aaa
 4) Medii
4) Mea!i diferenţiale
aiferențiale:; : permit
permit identificarea
identificarea bacteriilor
bacteriilor pepe baza
baza unor
unor
procese biochimice
procese biochimice
•e mediul TSI (triple
mediul ISI (triple sugar
sugar iron)
iron) conţine
conţine glucoză,
glucoza, lactoză,
lactoza, zaharoză
zaharoza
pentru
pentru studiul
studiul fermentării
fermentarii acestora,
acestora, sulfat
sulfat de
de Fe
Fe pentru
pentru detectarea
detectarea
producerii de
producerii de H2S
H2S
•e mediul
mediul Simmons
Simmons =– mediumediu cu cu citrat
citat pentru
pentru studiul
studiul folosirii
folosirii citratului
citratului ca
ca
unica
Unica sursă
sursa de de carbon
carbon
•e mediul
Mediul cu
cu uree
uree —– uree
uree + + roşu
roşu fenol
fenol pentru
pentru detectarea
detectarea ureazei
ureazei
•e mediul
mediul MIU,
MIU, MILF
MILE
•e mediu AABIL-
mediu AABTL- punepune inin evidenta
evidenta fermentarea
fermentarea lactozei
lactozei

 5) Medii
5) Mea!/ de
ae transport (Stuart –= pt.
transport (Stuart pt; Neisserii, Cary –= Blair-
Nelsserii, Cary Bial/= pt
pi:
2)pjr[e) eee reia] e)din
enterobacterii [p) materii
14)e ea] fecale;
ez)/2

 6) Medii
6) Weă!/ de
ae conservare
conservare

„Ste a
 Erno

MEDII POLITROPE
MEDII POLITROPE SI
SI AABTL
AABTIL
A - ESES
WI a O
i . Serratia
AA PE marcescens
[Acre 0IA
E STSI,
pe OMIU,MILF,
E
citrat Simmon
citrat SiImmon
 Eno

MEDIUL TSI
MEDIUL TSI

 IIS)!
TSI
neinsamantat si
neinsamantat si
TSI
TSI cucu bacili
bacili
Gram negativi
Gram negativi
nonfermentativi
nonfermentativi
 Eno

0310!
MEDIU TSI

 TSI neinsamantat
TSI neinsamantat
SIP
si biet) luciu
TSI cu jeleu
metalic
metalic
 Eno

MEDIUL TSI
MEDIUL TSI

 1SI neinsamantat
TSI neinsamantat
Si ISI
si cu hidrogen
TSI cu hidrogen
sulfurat
sulfurat
 Eno

CITRAT SIMMONS
CITRAT SIMMONS

 Citrat Simmons
Citrat Simmons
negativ! si
negativ si pozitiv
pozitiv
 Eno

MEDIUL UREE
MEDIUL UREE

 Ureaza negativ
Ureaza negativ
(stanga) si
(stanga) si ureaza
ureaza
pozitiv (dreapta).
pozitiv (dreapta).
 Eno

MEDIUL ABE
MEDIUL ABE

 Vediul ABE
Mediul ABE
i negativ si
negativ si ABE
ABE
pozitiv (reactie
pozitiv (reactie
de culoare
de culoare
neagra) pentru
neagra) pentru
ENterococi
Enterococi
 Ene

MEDII POLITROPE
MEDII POLITROPE

 PSEUDOMONAS
PSEUDOMONAS
FLUORESCENS (cf
FLUORESCENS (cf;
Phoenix) pe
Phoenix) pe ISI, MIU,
TSI, MIU,
citrat Simmons
citrat Simmons si si
fenilalanina ..
fenilalanina
 Erno

MEDII POLITROPE
MEDII POLITROPE

 TE mirabillis
Proteus PI
 Erno

MEDII POILTRPOPE
MEDII POILTRPOPE

F Morganella
41]
TN0r garii,
morganii
 VEDII POLITROPE
MEDII POLITROPE

i ră a Providencia
 Providencia rustigiani
rustigiani
"97, |
E E | . +
 Ene

MEDII POLITROPE
MEDII POLITROPE

 KLEBSIELLA spp.
KLEBSIELLA Spp.
la 24
la 24 ore.
ore.
 Ene

MEDII POLITROPE
MEDII POLITROPE

 E ZA Zi spp.
KLEBSIELLA Ile)la
48 ore.
48 Ore.
 Ene

MEDII POLITROPE
MEDII POLITROPE

 | Op ZII)
PROTEUS spp.
 Condiţia
Condiţia esenţială
esenţială reuşitei unei însămânţări
reuşitei unei insămânţări constă
constă înîn
respectarea
respectarea regulilor
regulilor de
de manipulare
manipulare sterilă
sterilă (aseptică),
(aseptică),

 Lucrul
Lucrul înin condiţii
condiţii aseptice presupune desfăşurarea
aseptice presupune desfăşurarea tuturor
tuturor
operaţiilor
operaţiilor lala flacăra
flacăra becului
becului de de gaz,
gaz, care
care asigură
asigură o0 zona
zona
sterila cu
sterila cu diametrul
diametrul de de 20
20 cm,
cm, sau
sau în hote cu
în hote cu flux
flux laminar,
laminar, înîn
încăperi
încăperi fără
lără curenţi
curenți dede aer
aer sau
sau în
în boxe
boxe special
special amenajate,
amenajate,
evitând
evitând vorbitul
vorbitul înîn timpul
timpul lucrului
lucrului şi purtând echipament
și purtând echipament de de
protecţie adecvat
protecție adecvat (halat,
(halat, mască,
mască, bonetă,
bonetă, mănuşi).
mănuși).
 Tehnicile de
Tehnicile însămânţare (şi
de insămânţare (şi materialele
materialele necesare)
necesare)
variază in funcţie
variază în iuncţie de scopul însămânţării,
de scopul insămânţaării, de consistenţa
de consistenţa
inoculului şi
inoculului și a
a mediilor
mediilor utilizate pentru însămânţare.
utilizate pentru insămânțare.

Inoculul utilizat
Inoculul utilizat pentru
pentru însămânţarea
însămânţarea unui unui mediu
mediu de de cultură
cultură
DORI fi:
poate EI
-lichid —– reprezentat
“lichid reprezentat de de culturi
culturi microbiene
microbiene obţinute
obținute înîn
mediu lichid,
mediu lichid, produse
produse normale
normale sau patologice, lichide
sau patologice, lehide (apă,
fi
lapte,
lapte, sânge,
sânge, LCR, urină, lichid
LCR, urină, lichid de de ascită,
ascită, lichid pleural,
lichid pleural,
spermă,
spermă, lichid
lichid de
de spălătură
spălătură bronho-alveolară);
bronho-alveolară);
“solid -- reprezentat
-solid reprezentat de de culturi
culturi microbiene
microbiene dezvoltate
dezvoltate pe pe
mediu solid,
mediu solid, produse normale şi
produse normale patologice solide
şi patologice solide ((materii
materii
ecale, fragmente
fecale, lraemente de de tesuturi
tesuturi recoltate
recoltate prinprin biopsie).
biopsie).

„Ste a
 Eno

Vetode de
Metode insamantare
de insamantare
Pe medii
Pe medii solide:
solide:
însămânţare prin
 -= insamanţare prin epuizare
epuizare (se
(se obţin
obţin colonii
colonii
izolate);
izolate);
însămânţare inîn sector
 -- insamanţare sector (se
(se obţin
obţin colonii
colonii
confluente);
confluente);
însămânţare prin
 -- insamanţare înţepare.
prin inţepare.
însămânţare prin
 insamanţare încorporare
prin incorporare
“Pe medii lichide
Pe medii lichide
 -- omogenizarea
omogenizarea unei unei colonii
colonii inîn mediu
mediu lichid.
lichid.

„Ste a
 Insămânţarea
Însămânţarea
ir prin epuizare
prin epuizare>
Obţinerea
Obținerea culturii primare:
GU/turii primare;
see incarca
 -= s încarcă ansa
ansa dede platină
platina sterilizată
sterilizata cu
cu produs
produs
patologic;
patologic;
 -= se
se descarcă
descarca ansaansa pe pe mediu
mediu de de cultură:
cultura:
 -= se însămânţează un
se insamanţeaza un prim
prim sector;
sector;
 -= se sterilizează
esieini| As e ansa;ela
 -= din
din primul
primul sector însămânţat se
sector insamanţat se trasează
traseaza câteva
câteva, striuri
striuri
paralele inîn sensul
paralele sensul acelor
acelor de
de ceasornic;
ceasornic;
 -= se
se continuă însămânţarea prin
continua insamanţarea prin striuri
striuri paralele,
paralele,
terminandu-se printr-un
terminându-se printr-un striu
striu inîn zig-zag.
zig-zag. În
In ultimul
ultimul sector
sector
bacteriile
bacteriile sunt
sunt dispersate,
dispersate, astfel încât după
astfel incat dupa incubare
incubare sese
VOI forma
vor forma colonii
60/07! izolate.
izolate,
Obţinerea
ODținerea culturii
culturii pure
pure: :
 -- se
se repică
repica oo singură
singura colonie
colonie din
din cultura
cultura primară
primara pe
pe un
un mediu
mediu de
de
cultură
cultura proaspăt,
proaspat,
 Ene

- Tehnica insamânţarii cu ansa prin epuizare

Scop:
Scop: obţinerea
obţinerea coloniilor
coloniilor izolate
izolate
 23 w A DEPP
e
Însămânţarea
| KI 0 0 2 a în
Eeesector:
 -- se încarcă ansa
se incarca ansa dede platină
platina sterilizată
sterilizata cucu
produs patologic;
produs patologic;
 -- se
se descarcă
descarca ansa
ansa pe pe mediu
mediu de de cultură
cultura
sub forma
sub forma unui
unui sector
sector dede cerc.
cerc.
 Pe
Pe o0 placă
placa pot
pot fi însămânţate mai
fi insamanţate mai multe
multe
specii
specii bacteriene.
bacteriene. Prin însămânţare inîn
Prin insamanţare
sector
sector nunu se
se obţin
obţin colonii
colonii izolate.
izolate.
 Însămânţarea
Insămaânţarea pe
pe medii
rnedlii în
in coloană
coloană înclinată
închinate :
 se încarcă ansa
se incarca ansa de
de platină
platina sterilizată
sterilizata cu
cu produs;
produs;
 se
se descarcă
descarca ansa
ansa pepe partea înclinată aa
partea inclinata
mediului
mediului de de cultură
cultura sub
sub forma
forma unui
unui striu.
striu. Nu
Nu
se
se obţin
Opţin colonii
colonii izolate,
izolate, bacteriile
bacteriile cresc
cresc sub
sub
diferite modele
diferite modele
Insămânțarea prin
Însămânţarea prin înţepare
înţepare: : -= se se practică
practică
pentru însămânţarea mediilor
pentru insamanţarea mediilor solide
solide turnate
turnate inîn
coloană
coloana dreaptă;
dreapta;
 -- se încarcă acul
se incarca acul de
de inoculare
inoculare cu cu produs;
produs;
 -- se înţeapă mediul
se inţeapa mediul inîn direcţie
direcţie verticală
verticala pe pe o
distanţă
distanţa dede ¾*4 din înălţimea coloanei;
din inalţimea coloanei;
Ste a
 Ene

INSAMANTARE INOCUL
INSAMANTARE INOCUL SOLID
SOLID PE
PE MEDII
MEDII SOLIDE
SOLIDE SI
SI LICHIDE
LICHIDE

Numerotare
Numerotare
eprubeta
eprubeta
ST
 Flambare
eprubeta
eprubeta
 Insamantare TSI
Insamantare TSI
(panta dreapta)
(panta dreapta)
 Insamantare asi
TSI
IN zig-zag
in zig-zag (panta
(panta
inclinata)
inclinata)
 Insamantre prin
Insamantre prin
inteparea coloanei
inteparea coloanei
(( mediu
mediu SIM)
SIM)
 jante Ale in
Insamantare IN zig-
ZIg-
Zag (panta
zag (panta inclinata)
inclinata)
mediu Simmons
mediu Simmons
 Eno

Tehnica
Te însămânţării
hnica in samânţarii prin încorporare
prin in corporare

Se
Se lichefiază
lichefiaza mediul
mediul prin încălzire la
prin incalzire la 8O°C,
80*C,
se
se răceşte
raceşte la la 50°
502 CC
 se
se introduce
introduce produsul
produsul de însămânţat cu
de insamanţat cu o
O
pipetă
pipeta sterilă.
sterilă.
 Se
Se omogenizează
omogenizeaza prin prin uşoara
uşoara rotire
rotire aa
recipientului,
recipientului.
 Mediul
Vediul astfel însămânţat, se
astfel insamanţat, se toarnă
toarna după
dupa
caz,
caz, inîn plăci
placi Petri
Petri sterile,
sterile, sausau se se lasă
lasa ca
ca
atare inîn recipientul
atare recipientul inîn care
care s-as-a făcut
facut
îmmmiiasamaniarea.
însămânţarea.
 Eno

Însămânţarea
XII) 00 în medii
le [10 lichide
/Le («2

 -- Se încarcă ansa
Se incarca ansa de
de platină
platina sterilizată
sterilizata cucu
produs
produs
 -- Se
Se omogenizează
omogenizeaza produsul
produsul recoltat
recoltat inîn
mediul
mediul de
de cultură
cultură lichid
lichid
 Prelevare colonie
Prelevare colonie
izolata (inocul
izolata (Inocul
Solid)
solid)
 Flambarea eprubetei
Flambarea eprubetei
 Omogenizarea culturii
Omogenizarea culturii
in mediu
in mediu lichid
lichid pentru
pentru
antibiograma
antibiograma
 Ene
MICRO-TEST
SISTEME MICRO-TEST
SISTEME

Metodologia
Metodologia de de bază
bază este
este aceeaşi
aceeaşi şiȘi consta)
constă inîn insamanţarea
însămânţarea
simultană
simultana, aa microvolumelor
microvolumelor de de probă
proba (inocul
(inocul bacterian
bacterian
standardizat) inîn mediile
standardizat) mediile liofilizate
liofilizate sau
sau hidratate
hidratate conţinute
conţinute
intr-o galerie dede identificare.
într-o galerie identificare.

Sistemele API
Sistemele API cu
cu diferite
diferite variante
variante pentru
pentru identificarea
identificarea enterobacteriilor
enterobacteriilor (API
(API 20E),
20E), a
a
pacililor Gram-negativi
bacililor Gram-negativi non-enterobacterii
non-enterobacterii (API-NE,
(API-NE, API-Listeria,
API-Listeria, API-
API-686///4/5,
Bacillus,
API-Campy,
API-Campy, API-Staph etc. );
API-Staph etc.);

]
i martie)
Aa Ș
Muia
aa pers: a
 Ene

GALERIE API
GALERIE API

 CANDIDA KRUSEI
CANDIDA KRUSEI

Cod 1000
Cod 1000
 Erno

GALERIE API
GALERIE PENTRU LEVURI
API PENTRU LEVURI

 AND
API ID si Ava
API
FUNGIGRAMA pentru
FUNGIGRAMA pentru
TRICHOSPORON
TRICHOSPORON 22
 Eno

TEHNICI DE INSAMANTARE
TEHNICI DE INSAVANTARE ALE
ALE
PRODUSELOR PATOLOGICE
PRODUSELOR PATOLOGICE
 Ene

LICHIDUL DE
LICHIDUL DE ASCITA
ASCITA
INSAMANTAREA UNUI
INSAMANTAREA UNUI INOCUL
INOCUL LICHID
LICHID PE
PE MEDII
MEDII
SOLIDE
SOLIDE

 Flambarea
Flambarea
eprubete cu
eprubetei cu produs
produs
patologic (lichid
patologic (lichid de
de
ascita)
ascita)
 Ene

LICHID DE
LICHID DE ASCITA
ASCITA

 Prelevare produs
Prelevare produs
patologic cu
patologic cu ansa
ansa de
de
Unica folosinta
unica folosinta
 Erno

LICHID DE
LICHID DE ASCITA
ASCITA

 Depunere produs
Depunere produs
patologic pe
patologic pe medii
medii de
de
cultura (geloza
cultura (geloza
lactozata)
lactozata)
 Ene

LICHID DE
LICHID DE ASCITA
ASCIIA

 B)jseispse)
Dispersareaaste)
produsului patologic
produsului patologic
 Erno

LICHID DE
LICHID DE ASCITA
ASCITA

E
 (geloza sange)
(geloza sange)
 Ene

LICHID DE
LICHID DE ASCITA
ASCIIA

A A 3
 Dispersarea
Dispersarea
produsului
produsului
patologic pe
patologic pe geloza
geloza
sange
sange
RE
 Ene

LICHID DE
LICHID DE ASCITA
ASCIIA

 Flambarea lamei
Flambarea lamei
pentru frotiu
pentru frotiu
LICHID DE
LICHID DE ASCITA
ASCIIA

a „e  Depunere
Depunere
Produsului
produsului
patologic pe
patologic pe lama
lama
 Erno

INSAMANTAREA SPUTEI
INSAMANTAREA SPUTEI

 S.F pentru
S.F pentru spalarea
spalarea
Sejtji=)
sputei.
 Ene

INSAMANTREA SPUTEI
INSAMANTREA SPUTEI

 Adaugare
Adaugare 22 ml ml
S.F.peste sputa
S.F.peste sputa (placa
(placa
Petri sterila)
Petri sterila)
 Ene

INSAMANTAREA SPUTEI-SPALARE
INSAMANTAREA SPUTEI-SPALARE IN
IN S.F.
S.F.

 Sputa se
Sputa se spala
spala in
in 2-
2=
3Ciek-] less
bai de S.F.,
SUCCESIV;
succesiv;

 se aleg pentru
insamantare
portiunile
reprezentative .
 Ene

SPALAREA SPUTEI
SPALAREA SPUTEI

A -
AR
pe |
Dida
| A
 Spalarea in
Spalarea in a
a
doua baie.
Dale.
. i all PP

doua
3
î .
-,/ ar
 Ene

INSAMANTAREA SPUTEI
INSAMANTAREA SPUTEI

 Vediu lactozat
Mediu lactozat
 Ene

INSAMANTAREA SPUTEI
INSAMANTAREA SPUTEI

 Vediu geloza
Mediu geloza
sange
sange
INSAMANTAREA SPUTEI
INSAMANTAREA SPUTEI

 Vlediu Sabouraud
Mediu Sabouraud
(levuri)
(levuri)
 Ene

INSAMANTARE EX.
INSAMANTARE EX. FARINGIAN
FARINGIAN

 Descarcarea
Descarcarea
tamponului
tamponului
 Ene

INSAMANTARE EX.
INSAMANTARE EX. FARINGIAN
FARINGIAN

 Epuizarea culturii
Epuizarea culturii
descarcate (ansa)
descarcate (ansa)
 Ene

INSAMANTARE EX.
INSAMANTARE EX. FARINGIAN
FARINGIAN

 Insamantare ex.
Insamantare ex.
faringian pe
faringian pe mediul
mediul
Sabpouraud (( levuri)
Sabouraud levuri)
 Ene

INSAMANTAREA COPROCULTURII
INSAMANTAREA COPROCULTURII

pa,  Coprocultoare
Coprocultoare
 Ene

INSAMANTAREA COPROCULTURII
INSAMANTAREA COPROCULTURII

 Dispersarea
Dispersarea
Produsului
produsului
 Ene

INSAMANTAREA COPROCULTURII
INSAMANTAREA COPROCULTURII

 Insamantarea
Insamantarea
INoculului solid
inoculului solid in
in
mediu lichid
mediu lichid

 Insamantarea in
Insamantarea in
pulion selenit
bulion selenit (mediu
(mediu
de imbogatire)
de imbogatire)
 Erno

INSAMANTAREA COPROCULTURII
INSAMANTAREA COPROCULTURII

 Efectuarea frotiului
Efectuarea frotiului
 Erno

COPROCULIURA
COPROCULTURA

 ela
Insamantari pe mediu
pe mediu
SS
SS
 Ene

COPROCULTURA 22
COPROCULTURA

 Insamantari pe
Insamantari pe
mediul ADCIL
mediul ADCL
 POEDII
P
Caractere de
Caractere de cultură
cultura
a, colonii
a. COJ/ON| de
de tip
tip S
Si(smooth
(smooth -- netede):
netede); ((5. aureus, S.
S. aureus, 5.
Dyogeres; E.
pyogenes, E. coli
Co))),),
9. colonii
b. CO/ONI/ deGe tip
tip R R(rough
(rough -= rugos,
rugos, aspru,
aspru, grunjos):
grunjos); Bacillus
Bac!///us
2)0)14)[2l6 Mycobacterium
anthracis, 134| (ee)e)zi era 0/pp) tuberculosis,
cleste) Corynebacterium
eg 4202 cil,
(/Dhht/02//ae;
diphtheriae;
65/6441)
c. 0) rapel [apa S-R,
forme intermediare: Sp R-Si; ;
dGl.. colonii
COlon!/ dede tip
tip M: capsulă ((K/ebs'e//a);
Micapsula Klebsiella);
E, CO/ONI pufoase
e.Colonii pulOase -= mucegaiuri
Tmucegalilii,
f.
f; fenomen
|e/10/neri de de căţărare
cațarare (invazie,
(invazie, migrare,
migrare, roire):
roire);
 Eno

Caractere biochimice
Caractere biochimice si
si de
de metabolism
metabolism
 a, Metabolismul
a. IVEtabo!/STMuU! glucidic
QIUCIGIE
 -= se
se studiază
studiaza pe pe medii
medii dede cultură
cultura diferenţiale
diferenţiale
sau selectiv-diferenţiale;
sau selectiv-diterenţiale;
 -- urmăreşte
urmareşte descompunerea
descompunerea diferitelor
diferitelor zaharuri
zaharuri
de
de către
catre bacterii
bacterii (glucoză,
(glucoză, lactoză,
lactoza, zaharoză,
zaharoză,
manitol);
manitol);
 -= prin
prin descompunerea
descompunerea zahărului
zaharului de de către
catre
bacterii
pacterii mediul
mediul sese acidifică,
acidifica, iar
iar indicatorul
indicatorul
 schimbă
schimba culoarea
culoarea mediului
mediului de de cultură.
cultura.

„Ste a
 Eno

biochimice si
Caractere biochimice
Caractere metabolism
de metabolism
si de

 D, Metabolismul
b. Metabolismul proteic
proteic :
 -= se
se studiază
studiaza pe
pe medii
medii de
de cultură
cultura diferenţiale;
diferenţiale;
 -= prin
prin descompunerea
descompunerea proteinelorproteinelor dede către
catre
bacterii
bacterii sese eliberează
elibereaza metaboliţi
metaboliți precum
precum
 Îalele)jăzpissezitheiasleip)
indol, H2S sau amoniac; rele
 -= indolul
indolul şi şi HH-S2S se
se evidenţiază
evidenţiaza cu cu ajutorul
ajutorul unor
unor
hartii de
hârtii de filtru
filtru imbibate
îmbibate inîn reactiv
reactiv
 specific
specific (reactiv
(reactiv Kovacs
Kovacs pentru
pentru indol
indo! şi
şi săruri
saruri de
de
Pb pentru
Pb pentru H H-S);
2S);
= prezenţa
 prezenţa amoniacului
amoniacului se se evidenţiază
evidenţiază cu cu
ajutorul unui
ajutorul unui indicator
indicator de de culoare.
culoare.
SS ta a
 Eno

Caractere biochimice
Caractere biochimice si
si de
de metabolism
metabolism
 C, Enzimele
c. EfizZirele bacteriene
bacteriene
P1e/nolizitele; :
hemolizinele
 -= enzime
enzime carecare lizează
lizeaza hematiile
hematiile (alterează
(alterează hemoglobina);
hemoglobina);
 -- prezenţa
prezenţa acestei
acestei enzime
enzime se se evidenţiază
evidenţiaza pe pe mediu
mediu geloză
geloza -= sânge;
sânge;
 -= principalele
principalele tipuri
tipuri dede hemoliză:
hemoliza;
 -- alfa
alfa (α)
(Q) -- apare
apare ca ca o0 zonă
zona verzuie în jurul
verzuie în jurul coloniei;
coloniei;
 -- beta
peta (β)
(B) -- sângele
sangele esteeste descompus
descompus total, în jurul
total, in jurul coloniei
coloniei este
este oo zonă
zona clară,
clară,
transparentă.
transparenta.
 α -Hemolizina sintetizată
a-Hemolizina sintetizată de de Streptococcus
SireptocoGcus viridans,
V/ridarns, Streptococcus
St eplOCOCGus
DPNeu/noriae) produce
pneumoniae) produce lizaliza incompletă
incompleta aa hematiilor,
hematiilor, culoare
culoare verzuie;
verzuie;
 -hemolizina sintetizată
ß-hemolizina sintetizata de de Streptococcus
S//eptOcocculs pyogenes,
pyogernes, Bacillus
Bacil/tl5 cereus,
cereus; Listeria
Listeria
/10N0cyt0genes produce
monocytogenes produce liza liza completă
completa a a hematiilor,
hematiilor, zona
zona dede hemoliza
hemoliza este
este
clară;
e f=]g=)
 y-hemolizina produsă
y-hemolizina produsa de de Staphylococcus
Staphy/ococeus spp. 5pp, lizează
lizeaza hematiile,
hematiile, dar
dar nu
nu
produce zone
produce zone dede hemoliza
hemoliza pe pe agar-sânge
agar-sange (la (la streptococi,
streptococi, "y-hemoliza"
"y-hemoliza”
indică
indica absenţa
absenţa hemolizei).
hemolizei).

„Ste a
 Eno

biochimice si
Caractere biochimice
Caractere metabolism
de metabolism
si de

Cala/aZa ((512D9/1y/0cOCGUs
catalaza sDD);):
Staphylococcus spp
 -= descompune
descompune apa apa oxigenată
oxigenata in în apă
apa şi Şi oxigen;
oxigen;
 -= oxigenul
oxigenul eliberat
eliberat se evidenţiază prin
se'evidenţiaza prin formarea
formarea bulelor
bulelor de
de gaz;
gaz;
COagUIaza; :
coagulaza
 -= determină
determina coagularea
coagularea plasmei
plasmei recoltate
recoltate pe pe anticoagulant;
anticoagulant;
e) dee 7420 (CU
oxidaza N.Sza)a)aje/ [fel N.
meningitidis, SN gonorrhoeae,
e Ori Ole)zi Pseudomonas
pi 0 ele) alea)
p zi aeruginosa,
zic Îplez) V.
A
C/10/erae);):
cholerae
 -= enzime
enzime oxidative;
oxidative;
 -= acţionează
acţionează asupra
asupra unorunor substanţe
substanţe producând
producând compuşi compuşi coloraţi.
colorați.
gelatinaza ((C/ost/G/u/
gelatinaza Clostridium perit11gers);
perfringens):
 -= lichefiază
lichefiaza gelatina;
gelatina;
lecitinaza ((Bac///us
lecitinaza anthracis; Clostridium
Bacillus anthracis, CIostriai/urm spp.
59p.););
nitrat-reductaza ((//ycopacter1U/m
nitrat-reductaza Mycobacterium spp.) 59p. );;

„Ste a
 ENRERENaraa
Caractere biochimice
Caractere biochimice si
si de
de metabolism
metabolism

 C, Alte
d. teste
Alte teste
VoDilitatea: :
Mobilitatea
 -- bacteriile
pacteriile flagelate
flagelate sunt
sunt mobile
mobile şişi migrează într-un
migrează intr-un
mediu
mediu de de cultură
cultura semisolid,
semisolid, deviază
deviaza de de la
la locul
locul de
de
inoculare
inoculare (traiectul
(traiectul de înţepătură).
de intepatura).
MIrOSU]; :
Mirosul
 -= la
la multe
multe specii,
specii, coloniile
coloniile auau miros
miros caracteristic:
caracteristic;
PrOGilcelrea de
Producerea de pigment
D/g/mert; :
 -= pigmenţi
pigmenţi nedifuzibili
nedifuzibili -= nunu difuzează
difuzeaza inîn mediu,
mediu, vor vor colora
colora
doar colonia
doar colonia ((S5tapPy/ococaus
Staphylococcus aureus aureus -= pigment
pigment auriu);
auriu);
 -- pigmenţi
pigmenţi difuzibili
difuzibili -= difuzează
difuzeaza inîn mediu,
mediu, colorează
colorează şi și
mediul ((Pseudomonas
mediul Pseudomonas =- pigmentpigment verde).
verde).

„SS
at a
 Cultivarea Rickettsiilor
Cultivarea Rickettsiilor
 microorganisme
microorganisme care care sese află
afla la
la graniţa
graniţa
dintre
dintre bacterii
bacterii şi ŞI virusuri.
virusuri.
 Se
Se aseamănă
aseamana cu cu bacteriile
bacteriile prin:
prin: dimensiuni,
dimensiuni,
morfologie,
morfologie, compoziţie
compoziţie chimică,
chimica, organizare
organizare
celulară
celulara internă
interna şi şi multiplicare
multiplicare directă.
directă.
 nu
NU cresc
cresc pepe medii
medii de de cultură,
cultura,
 se
se multiplică
multiplica numai
numai inîn ţesuturile
țesuturile vii,vii, ca
ca şişi
V/Iptistig]
ls)
virusurile.
 Unele rickettsii
Unele rickettsii sunt
sunt patogene
patogene pentru
pentru om, om,
provocand bolile
provocând bolile febrile,
febrile, rickettsioze,
rickettsioze, cu cu
erupţii
erupții peteşiale
peteşiale pe pe tegumentele
tegumentele bolnavilor.
bolnavilor.
Ste a
Metode de
Metode de cultivare
cultivare a
a rickettsiilor
rickettsiilor
 au un
au un echipament
echipament enzimatic
enzimatic destul
destul de de bogat
bogat
care
care Iiîi permite
permite să-şi întreţină un
sa-și intreţina un metabolism
metabolism
complet, dar
complet, dar insuficient
insuticient pentru
pentru a a se
se dezvolta
dezvolta
independent intr-un
independent într-un mediu
mediu dede cultură
cultura artificial,
artificial,
zje=0]l2]p.
acelular.
 fragmente
fragmente de de ţesuturi,
ţesuturi,
 culturi celulare,
culturi celulare,
 ou
OU dede găină
gaina embrionat
embrionat (sacul
(sacul vitelin).
vitelin).
 pe animale
pe animale de de laborator
laborator -cobai,
-cobai, soarece
soarece. (temperatura
(temperatura
cobaiului
cobaiului infectat
infectat creşte,
creşte, urmează
urmeaza o 0 evoluţie
evoluţie caracteristică,
caracteristica, după
dupa care
care animalele
animalele se se vindecă.
vindeca.
Concomitent
Concomitent aparapar şi
şi alte
alte semne
semne de de boală:
boală; zbârlirea
zbârlirea părului,
părului, scăderea
scaderea inîn greutate,
greutate, tumefierea
tumefierea
scrotului.
scrotului. Şoarecii
Şoarecii sunt
sunt inoculaţi intraperitoneal. Rickettsiile
inoculaţi intraperitoneal. Rickettsiile pot
pot fi
fi puse
puse înîn evidenţă
evidenţă pin:
pin:
amprente
amprente făcute
facute din
din splină,
splina, ficat, în ser
ficat, in ser unde
unde sese pun în evidenţă
pun in evidenţa anticorpii
anticorpii specifici.)
specifici.)

„Ste a
 —————N

Cultivarea Chlamydiilor
Cultivarea Chlamydiilor
 inîn sacul
sacul vitelin
vitelin alal embrionului
embrionului de de găină
gaina şişi inîn
culturi celulare,
culturi celulare, pretratate
pretratate cu cu ciclohexamidă.
ciclohexamida.
 pacterii minuscule,
bacterii minuscule, cocoide,
cocoide, parazite
parazite obligatoriu
obligatoriu
intracelular
intracelular
 Au structură
Au structura procariotă,
procariota, cu cu perete
perete de de tip
tip Gram(-)
Gram(-)
 Se reproduc
Se reproduc prinprin diviziune,
diviziune, intr-un Ciclu
într-un ciclu
complex,
complex, care care le le individualizează
individualizează de de celelalte
celelalte
pacterii.
bacterii.
 Forma
Forma extracelulară
extracelulara infecţioasă
infecţioasa aa chlamidiilor
chlamidiilor
este de
este de corpi
corpi elementari
elementari (CE),(CE), care
care au
au aspect
aspect
COCOId, cu
cocoid, cu diametru
diametru de de 300
300) nmnm şişi perete
perete rigid,
rigid,
multilaminat, metabolic
multilaminat, metabolic inactivi.
inactivi.

„Ste a
 Ciclul reproductiv
Ciclul reproductiv al
al chlamydiilor
chlamydiilor"*
 După
După fixarea
fixarea dede receptorii
receptorii specifici
specifici ai ai celulei
celulei
gazdă,
gazda, CE CE este
este fagocitat,
fagocitat, dar dar inîn cca.
cca. 8 8 ore
ore sese
transformă
transforma Inîn corpuscul
corpuscul reticulat(CR)-
reticulat(CR)- forma forma
vegetativă,
vegetativa, neinfecţioasă;
neinfecțioasa;
 După
După cca.
cca. 20
20 ore,
ore, dede lala infectare,
infectare, CR CR sese
transforma inîn CE,
transformă CE, după
după 40 40) ore
ore vacuola
vacuola este este
plină
plina cu
cu CE
CE nou
nou formaţi.
formaţi.
 Prin
Prin ruperea
ruperea celulei
celulei CE CE sunt
sunt puşipuşi inîn libertate
libertate şi şi
pot începe un
pot incepe un nou
nou ciclu
ciclu dede infecţie.
infecţie.
 La
La capătul
capatul unui
unui ciclu
ciclu care
care durează
durează 24-4824-48 ore,
ore,
celula
celula gazdă
gazda este
este lizată
lizata cu cu eliberarea
eliberarea aa
Se pier ere Melo e NE E ale pe la) eee
numeroşi corpi elementari infecţioşi.
 Cultivarea virusurilor
Cultivarea virusurilor
 sunt parazite
sunt parazite intracelulare
intracelulare absolute,
absolute,
 se cultivă
se cultiva numai
numai inîn culturi
culturi celulare,
celulare, embrioni
embrioni de de
găină,
gaina, animale
animale de de laborator
laborator sensibile.
sensibile.
 celulare= celule
Culturi celulare-
Culturi celule provenite
provenite din din ţesuturi
ţesuturi animale
animale
Sau umane,
sau umane, adulte
adulte sausau embrionare,
embrionare, normalenormale sau sau
Neoplazice, plasate
neoplazice, plasate intr-un
intr-un mediu
mediu adecvat
adecvat (nutrienţi,
(nutrienți,
pH, temperatură)
pH, temperatura) rămân raman viabile
viabile şi
şi sese multiplică
multiplica
 Aceste culturi
Aceste culturi dede celule
celule sese clasifică
clasifica in;în:
 CUlturi primare
culturi primare de de celule,
celule,
 tulpini de
tulpini de celule
celule diploide
diploide ((obtinute din tes.
obtinute din tes. embrionare)
embrionare)
 linii permanente
linii permanente de de celule
celule (provin
(provin din
din tumori
tumori canceroase
canceroase
sau mutante).
sau mutante).
„Ste a
 Vedii pentru
Medii pentru culturi
culturi celulare
celulare S%
 Sunt
Sunt medii medii de de creştere
creştere (Hanks, (Hanks, Eagle). Eagle).
 Toate
Toate sunt sunt soluţii
soluţii apoase
apoase care care conţin:
conţin:
 nutrienţi
nutrienți (aminoacizi,
(aminoacizi, vitamine, vitamine, glucoza, glucoza, sărurisaruri
minerale);
minerale);
 au un
au un sistem
sistem tampontampon la la pH-
pH- 7,4;7,4;
 un
Un indicator,
indicator, roşu roşu fenol,
fenol, pentrupentru monitorizarea
monitorizarea
pDH- lui,
pH- lui, sese incubează
incubează la la 37°
3/79 C, C, 24-48
24-48 ore. ore.
[[anii inocularea! culturii
Pentru inocularea culturii de
de celule
celule cucu virus,
virus, mediul
mediul de
de creştere
creştere este
este
îndepărtat, iar
indepartat, iar pe
pe filmul
filmul celular
celular spălat,
spalat, sese depune
depune produsul
produsul patologic
patologic
prelucrat
prelucrat (omogenizare, îndepărtarea debriurilor
(omogenizare, indepartarea debriurilor celulare
celulare şi
şi bacteriilor
bacteriilor prin
prin
centrifugare
centrifugare şi şi apoi
apoi tratat
tratat cu
cu antibiotice).
antibiotice). După
Dupa absorbţia
absorbţia virusului
virusului pepe
receptorii celulari,
receptorii celulari, surplusul
surplusul din inocul este
din inocul îndepărtat, iar
este indepartat, iar filmul
filmul celular
celular va
va
fi
fi acoperit
acoperit cu
cu unun mediu
mediu de întreţinere.]|]
de intreţinere.
„Ste a
 Eno

Culturi de
Culturi de organe
organe
 Sunt mici
Sunt mici fragmente
fragmente de de trahee
trahee sau
sau
bronhii,
pronhii, intestin
intestin subţire
subţire proximal,
proximal, trompe
trompe
etc., menţinute
uterine, etc.,
uterine, menținute inîn mediu
mediu dede
cultură
cultura adecvat
adecvat ,, păstrându-şi
pastrandu-şi structura
structura şi
şi
funcţiile
funcţiile mai
mai multe
multe zile.
zile.
 ca SINOD SRI Rar ar ea
Urmărirea
Urmarirea replicării
replicarii virale
virale în
in culturi
culturi celulare
celulare
 citopatic este
Efectul citopatic
Efectul este urmărit
urmarit microscopic
microscopic (rotunjire,
(rotunjire, sinciţii)
sinciţii)
 Apariţia inîn supernatant
Apariţia supernatant a a unei
unei hemaglutinine
hemaglutinine (virusurile(virusurile gripale,
gripale,
arbovirusurile) care
paragripale, arbovirusurile)
paragripale, care aglutinează
aglutineaza hematiile
hematiile anumitor
anumitor specii
specii dede
animale
animale sausau păsări
pasari inîn condiţii
condiţii de pH, temperatură
de pH, temperatura sau sau aa unui
unui antigen
antigen fixator
fixator
de complement
de complement (virusurile
(virusurile rujeolic,
rujeolic, poliomielitic).
poliomielitic).
 Hemadsorbţia- adsorbţia
Hemadsorbţia- adsorbţia eritrocitelor
eritrocitelor pe pe membrana
membrana modificată
modificata a a celulelor
celulelor
care au
care au replicat
replicat un un virus,
virus, poate
poate fi fi mai
mai precoce
precoce decât
decat efectul
efectul citopatic,
citopatic, iar
iar
Uneori este
uneori este singura
singura modalitate
modalitate de de depistare
depistare a a virusului
virusului in culturi celulare.
în culturi celulare.
 Incluziile virale -- sunt
Incluziile virale sunt urmărite
urmarite prin prin coloraţia
coloraţia hemaulan-eozină,
hemaulan-eozina, Giemsa. Giemsa.
 Coloraţia imunoflorescenta depistează
Coloraţia imunoflorescentă depisteaza antigenele
antigenele virale
virale inîn celulele
celulele
infectate.
infectate.
 Interferenţa
Interferenţa virală-virala- Unele
Unele virusuri
virusuri ca:ca; virusul
virusul rubeolic,
rubeolic, adenovirusuri,
adenovirusuri, nu nu
determină
determina efectefect citopatic.
citopatic. Depistarea
Depistarea lor lor se
se face
face indirect
indirect prin
prin incapacitatea
incapacitatea
celulelor infectate
celulelor infectate de de a a replica
replica unun virus
virus sigur
sigur citopatogen
citopatogen (virusul
(virusul! ECHO)
ECHO)
 Transformarea
Transformarea celulelor celulelor normale
normale inîn celule
celule canceroase
canceroase (transformare
(transformare
malignă)
maligna) printr-un
printr-un virus
virus oncogen
oncogen (v. (v. SV
SV 40,
40, v.
v. sarcomului
sarcomului Rous),Rous), se se traduce
traduce
prin
prin pierderea
pierderea inhibiţiei
inhibiţiei de de contact
contact cu cu focare
focare de de aglomerări
aglomerari celulare.
celulare.

„Ste a
 Embrionii
Embrionii de
de găină
gaina SS
 Ţesutul embrionar
Țesutul embrionar de de găină
gaina inîn vârstă
varsta dede 6-14
6-14 zile,
zile, ca
ca şi
şi
membranele embrionare
membranele embrionare permit permit cultivarea
cultivarea virusurilor,
virusurilor,
chlamidiilor, după
rickettsiilor, chlamidiilor,
rickettsiilor, dupa inoculare,
inoculare, pe pe membrana
membrana
chorioalantoidă
chorioalantoida (poxvirusuri,
(poxvirusuri, v. v. herpetice),
herpetice), inîn cavitatea
cavitatea
alantoidiană
alantoidiana sau sau inîn cavitatea
cavitatea amniotică
amniotica (v. (v. gripale,
gripale, paragripale,
paragripale,
urlian, rujeolic),
urlian, rujeolic), sausau inîn sacul
sacul vitelin
vitelin (rickettsii,
(rickettsii, chlamidii).
chlamidii).
Viabilitatea embrionului
Viabilitatea embrionului este este verificată
verificata cu cu ovoscopul
ovoscopul inîn cameră
camera
obscură.
obscura,
 Embrionii
Embrionii viiVii se
se inoculează,
inoculeaza, se se incubează
incubeaza la la 35
35 CC timp
timp dede 3-3- 55
zile
Zile şi
şi se
se refrigerează
refrigereaza peste peste noapte
noapte la la 4°
49 CC (pentru
(pentru a a se
se evita
evita
hemoragia
hemoragia inîn cursul
cursul recoltării
recoltarii ))
Creşterea
Creşterea virusului
virusului inîn embrion
embrion poatepoate determina:
determina:
moartea acestuia,
 moartea acestuia,
 apariţia
apariţia dede peteşii
peteşii pepe membrana
membrana chorioalantoidă,
chorioalantoida,
acumularea de
 acumularea de hemaglutinmă
hemaglutinmaă in in lichidul
lichidul amniotic
amniotic sau sau alantoidic
alantoidic
(v. gripale).
 lat: Le de
Animale (0 Eee pe Le eo pa
laborator
 Se folosesc
Se folosesc numai
numai când cand receptivitatea
receptivitatea celorlalte
celorlalte gazde
gazde
de
de laborator
laborator este
este nesatisfăcătoare
nesatisfacatoare (v. (v. rabic,
rabic,
arDOVirusurile).
arbovirusurile).
Replicarea
Replicarea virală
virala este
este demonstrată
demonstrata prin: prin:
 boala
boala manifestă
manifesta aa animalului,
animalului, eventual
eventual decesul;
decesul;
 urmărirea
urmarirea virusului
virusului inîn organele
organele ţintă
ţinta (bogate
(bogate inîn celule
celule
receptive pentru
receptive pentru virusul
virusul inoculat);
inoculat);
prin hemaglutinare
 prin hnemaglutinare (arbovirusurile);
(arbovirusurile);
 infecţiozitatea
infecţiozitatea omogenatelor
omogenatelor (v. (v. Coxsackie);
Coxsackie);
examene histopatologice
 examene histopatologice care care pot
pot depista
depista leziuni
leziuni
inflamatorii, degenerative,
inflamatorii, degenerative, dar dar mai
mai ales
ales incluzii
incluzii virale;
virale,
Uneori caracteristice
uneori (corpusculii Babeş-Negri,
caracteristice (corpusculii Babeş-Negri, inîn
neuronii
Neuronii infectaţi
infectați cu cu virus
virus rabic).
rabic).
 FACULTATEA DE MEDICINĂ ŞI FARMACIE
UNIVERSITATEA “DUNĂREA DE JOS”, GALAŢI

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
AL INFECTIILOR
 —_..

METODE DIRECTE
METODE DIRECTE
e

1.Examenul direct
direct al
al produsului
produsului patologic
pato
Y m

1.Examenul
Bacteriologic:
Bacteriologic:
1. examen
1. examen macroscopic
macroscopic Parazitologic:
Parazitologic:
2. examen
2. microscopic —– microscopie
examen microscopic microscopie optică
optică
o preparat
o preparat nativ
nativ 1. examen
1. examen macroscopic
macroscopic
o
o coloraţie
coloraţie negativă
negativă 2. examen
2. examen microscopic
microscopic
o
o coloraţie
coloraţie simplă
simplă o metode
o metode directe
directe
o
o coloraţii
coloraţii compuse
compuse
î. -preparat nativ,
-preparat nativ, în ser
în ser
3.
3. evidenţierea
evidenţierea antigenelor
antigenelor bacteriene
bacteriene prin
prin metode
metode serologice
serologice fiziologic
fiziologic
4. detectarea
4. ADN-ului microbian
detectarea ADN-ului microbian (reacţii
(reacţii de
de hibridizare,
hibridizare, amplificare
amplificare
-preparat nativ
-preparat în soluţie
nativ în soluţie
genică
genică —– PCR)
PCR) lugol
lugol
-frotiu colorat
-frotiu colorat

Virusologic:
Virusologic: o metode
o metode de
gros
gros
de examinare
examinare în
în strat
strat

1. examen
1. examen macroscopic-nu
macroscopic-nu
o metode
o metode de
de concentrare
concentrare
2. examen
2. examen microscopic
microscopic
o
o evidenţierea
evidenţierea incluziilor
incluziilor o metode
o metode larvoscopice
larvoscopice
virale —– microscopie
virale microscopie optică
optică o
o amprenta
amprenta anală
anală
o
o microscopie
microscopie electronică
electronică 3. detectarea
3. ADN-ului -- reacţii
detectarea ADN-ului reacţii de
de
3. reacţii
3. reacţii antigen-anticorp
antigen-anticorp
(evidenţierea antigenului)
(evidenţierea antigenului) hibridizare,
hibridizare, amplificare
amplificare genică(PCR)
genică(PCR)
4. detectarea
4. ADN-ului -- reacţii
detectarea ADN-ului reacţii de
de hibridizare,
hibridizare, amplificare
amplificare genică
genică
(PCR)
(PCR)
2. Cultivarea
2. Cultivarea

Bacteriologie:
Bacteriologie:
Izolarea
Izolarea germenului
germenului în în cultură
cultură pură
pură
însămânţarea si
însămânţarea si cultivarea
cultivarea pepe medii
medii de
de cultură
cultură
inoculare la
inoculare la animale
animale de de laborator
laborator

Virusologie:
Virusologie:
-culturi celulare,
-culturi celulare, linii
linii celulare
celulare
-animale de
-animale de laborator
laborator
-oul de
-oul de găină
gâină embrionat
embrionat

Parazitologie:
Parazitologie:
-însămânţarea se
-însămânţarea se face
face pentru
pentru paraziţii
paraziţii unicelulari
unicelulari pe
pe medii
medii
încălzite la
încălzite la 37°C,
37*C, 1sau
1sau mai
mai multe
multe zile
zile
-animale de
-animale de laborator
laborator
3. Identificarea
3. Identificarea 4. Antibiograma
Bacteriologie:
Bacteriologie:
Identificarea germenului
Identificarea germenului izolat
izolat din
din cultură
cultură pură
pură
1.
1. cercetarea
cercetarea caracterelor
caracterelor de
de cultură
cultură si
si morfotinctoriale
morfotinctoriale
2.cercetarea caracterelor
2.cercetarea caracterelor biochimice
biochimice si si de
de metabolism
metabolism
3.determinarea structurii
3.determinarea structurii antigenice
antigenice prin:
prin: DA
DA
-reacţii de
-reacţii de aglutinare
aglutinare
-reacţii de
-reacţii de precipitare
precipitare
-reacţii de
-reacţii de umflare
umflare a a capsulei
capsulei
4. tehnici
4. tehnici de de detectare
detectare a a AND
AND microbian
microbian
5. Determinarea patogenităţii
5. Determinarea patogenităţii germenului
germenului izolat
izolat prin:
prin:
-teste in
-teste in vitro
vitro
-teste in
-teste in vivo
vivo (boala
(boala experimentală)
experimentală)
Virusologie:
Virusologie: NU
NU
T. Examen
1. Examen microscopic
microscopic
2. Modificarile
2. Modificarile caracteristice
caracteristice aparute
aparute pe:
pe:
-culturi celulare
-culturi celulare
-OGE
-OGE
-animale de
-animale de experienta
experienta
3. Reactii
3. Reactii Antigen-Anticorp
Antigen-Anticorp
4. Detectare
4. Detectare ANDAND prin
prin reactii
reactii de
de hibridizare,
hibridizare, amplificare
amplificare genica
genica (PCR)
(PCR)
Parazitologie:
Parazitologie: NU
NU
T.Reactii Antigen-Anticorp
1.Reactii Antigen-Anticorp
2. Tehnici de
2.Tehnici de detectare
detectare a
a AND microbian
AND microbian
 METODE INDIRECTE
METODE INDIRECTE

Bacteriologie:
Bacteriologie:
detectarea anticorpilor
detectarea anticorpilor din
din serul bolnavilor (anticorpii
serul bolnavilor (anticorpii se
se urmăresc în
urmăresc în
dinamică)
dinamică)

Virusologie:
Virusologie:
detectarea anticorpilor
detectarea anticorpilor din
din serul
serul bolnavilor
bolnavilor
-- Seroconversia:
Seroconversia: cresterea
cresterea titrului
titrului de
de anticorpi
anticorpi în probele de
în probele de ser
ser recoltate
recoltate la
la
interval de
interval de 10-14
10-14 zile (demonstrarea unei
zile (demonstrarea unei infecţii
infecţii recente,
recente, actuale)
actuale)

Parazitologie:
Parazitologie:
detectarea anticorpilor
detectarea anticorpilor din
din serul
serul bolnavilor
bolnavilor
-Anticorpii se
-Anticorpii se urmaresc
urmaresc in dinamica –reactii
in dinamica —reactii biologice
biologice cutanate
cutanate de
de diagnostic
diagnostic
(IDR)- rar
(IDR)- rar
Alt model- schema
Alt model- schema simplificata:
simplificata:
Caractere generale:
Caractere generale:
Diagnosticul de
Diagnosticul de laborator
laborator consta
consta in:in:
I.|. Diagnosticul
Diagnosticul bacteriologic
bacteriologic
1.1. Recoltarea
Recoltarea produselor
produselor patologice;
patologice;
2. Examnarea
2. Examnarea macroscopic
macroscopic si si microscopic
microscopic (prin
(prin
examen direct)
examen direct) al
al produsului
produsului patologic;
patologic;
3. Insamintarea
3. Insamintarea si si izolarea;
izolarea;
4. Citirea
4. Citirea si
si interpretarea
interpretarea rezultatelor;
rezultatelor;
5. Cercetarea
5. Cercetarea caracterelor
caracterelor de de patogenitate:
patogenitate:
-- teste
teste de
de patogenitate
patogenitate ”” in in vitro”;
vitro”;
-- teste
teste de
de patogenitate
patogenitate “in “in vivo”.
vivo'.
6. Cercetarea
6. Cercetarea sensibilitatii
sensibilitatii la la actiunea
actiunea bacteriofagilor;
bacteriofagilor;
7. Cercetarea
7. Cercetarea sensibilitatii
sensibilitatii la la antibiotic
antibiotic si
si chimioterapice.
chimioterapice.
II. Diagnostic
II. Diagnostic imunologic
imunologic
 Genul Staphylococcus
Genul Staphylococcus
Stafilococi coagulazo-pozitivi:
Stafilococi coagulazo-pozitivi: S.
S. aureus
aureus
Stafilococi coagulazo-negativi (SCN)
Stafilococi coagulazo-negativi (SCN) cucu importanţă
importanţă clinică:
clinică: S.
$. lugdunensis,
lugdunensis, S.
$. epidermidis,
epidermidis, S.
S.
haemolyticus, S. saprophyticus
haemolyticus, S. saprophyticus

Produs patologic
Produs patologic
-- portaj:
portaj: secreţie
secreție din
din cavitatea
cavitatea nazală
nazală anterioară,
anterioară, secreţie
secreție faringiană,
faringiană, probe de pe
probe de pe tegumente
tegumente (zona
(zona axilară,
axilară,
perianală)
perianală)
-- plăgi,
plăgi, otite,
otite, infecţii
infecţii tegumentare
tegumentare  = puroiul
puroiul (S.
(S. aureus)
aureus)
-- infecţii
infecţii urinare = urină
urinare  urină (S.
(S. saprophyticus,
saprophyticus, S.
S. aureus)
aureus)
-- infecţii
infecţii gastro-intestinale,
gastro-intestinale, toxiinfecţii
toxiinfecţii alimentare
alimentare 
=> materii
materii fecale,
fecale, vomismente,
vomismente, alimente.
alimente.
meningite 
-- meningite => LCR
LCR
-- septicemie,
septicemie, febră puerperală 
febră puerperală = sânge
sânge (S.
(S. aureus,
aureus, SCN)
SCN)
-- pneumonie = spută.
pneumonie  spută.
-- infecţii
infecţii nosocomiale
nosocomiale -- S.
S$. aureus
aureus meticilino-rezistent
meticilino-rezistent (MRSA,
(MRSA, SARM),
SARM), SCN
SCN meticilino-
meticilino- rezistent

-1-
 UrCIiOr
urcior

impetigo stafilococic
impetigo stafilococic

carbuncul
carbuncul
furuncul
furuncul •- afectaţi
afectaţi mai
mai mulţi
mulţi foliculi
foliculi piloşi
piloşi
adiacenţi
adiacenţi
•* centrul
centrul necrotic se elimină
necrotic se elimină —–
ulceraţie
ulceraţie –— cicatrice
cicatrice
 carbuncul
carbuncul
hidrosadenită

Formă
Formă Formă
Formă
uşoară
uşoară severă
severă

al feţei
panariţiu
impetigo bulos
impetigo bulos al feţei

•* S.aureus
S.aureus
–infecţie superficială
-infecţie superficială a
a pielii
pielii
–erupţie iniţial
-erupţie iniţial în
în jurul gurii —–
nasului, gurii
jurul nasului,
diseminare rapidă
diseminare rapidă la
la alte
alte zone
zone
–vezicule cu
—vezicule puroi —– se
cu puroi sparg –
se sparg — cruste
cruste
–copii, tineri
-copii, tineri
–invazie sistemică
-—invazie sistemică -deces
-deces

impetigo -- pustule
impetigo pustule
impetigo -- cruste
impetigo cruste

vezicule —– sparte
•* vezicule sparte -- cruste
cruste •* adult
adult
•* pustule
pustule
diseminare sistemică
•* diseminare sistemică
-– rară
rară
 mastita
mastita
Plagă chirurgicală infectată

sindromul pielii opărite

sindromul pielii opărite

•* cauză: S.aureus producător

cauză: S.aureus producător de
de sindromul pielii
sindromul pielii opărite
opărite —–
exfoliatină
exfoliatină
–
— exotoxină
exotoxină epidermolitică
epidermolitică Boala Ritter
Boala Ritter
PP 3

•*La nou-născut
La nou-născut
 Genul Staphylococcus
Genul Staphylococcus

1.Examenul direct
1.Examenul direct al
al pp:
pp:
-- macroscopic:
macroscopic: puroi
puroi cremos, filamentos, gălbui.
cremos, filamentos, gălbui.
microscopic: coloraţia
-- microscopic: colorația Gram:
Gram: coci
coci gram (+), dispuşi
gram (+), dispuşi în
în grămezi
grămezi asemănătoare
asemănătoare
ciorchinilor de
ciorchinilor de strugure
strugure
A 0 AP E e RC Recl: aice0 ol
ca FEL 7 7 ci

= Se. dia

pe 20 TI, =
E 3. a
— sii DS
oa PECol.
iGram, S.Vaaureus
aa Tipe –
Ta agata E =

Gram, S.
Col. Gram,
Col. aureus
S. aureus coci fi văzuţi
pot fi
G+, pot
coci G+, văzuţi de obicei în
de obicei în
–- preparat
preparat de de pe
pe dar cîţiva
perechi, dar
perechi, sunt dispuşi
cîţiva sunt dispuşi
geloză-sânge
geloză-sânge –- se se în ciorchine (x1000)
în ciorchine (x1000)
observă
observă dispoziţia
dispoziţia
tipică
tipică înîn ciorchine
ciorchine
(x1000)
(x1000)
2. Izolare:
2. Izolare:
-- mediul
mediul de
de îmbogăţire:
îmbogăţire: mediul
mediul hiperclorurat
hiperclorurat lichid
lichid
-- Chapman
Chapman (Ch)
(Ch)
-- nepretenţios, poate fi
nepretenţios, poate fi cultivat pe geloză
cultivat pe geloză simplă
simplă sau
sau geloză
geloză
sânge, Incubare
sânge, Incubare aerobă
aerobă lala 37C,
37*C, 1818 —– 24
24 ore.
ore.

- descompune
- descompune S.epidermidis
S.epidermidis
manitolul
manitolul -- nu
nu descompune
descompune
manitolul
manitolul

S. aureus
S. aureus pe G-sg-– coloniile
pe G-sg coloniile sunt
sunt de
de 1-2
1-2
mm, netede
mm, netede
S. epidermidis
S. epidermidis pe G-sg: această
pe G-sg: această specie
specie are
are
de obicei
de obicei colonii
colonii albe
albe
 Genul Staphylococcus
Genul Staphylococcus
3. Identificarea
3. Identificarea bacteriei:
bacteriei:
-- Caractere morfotinctoriale: frotiu
Caractere morfotinctoriale: frotiu dindin cultură
cultură pură
pură = coci
coci Gram
Gram (+),(+), înîn
grămezi.
grămezi. aureus, S.
aureus, $.

-- Caractere
Caractere dede cultură:
cultură: colcol “S”
“S” cucu pigment
pigment galben-auriu
galben-auriu până
până la
la citrin
citrin

-- Caractere
Caractere biochimice:
biochimice:

-- S.
5. aureus:catalază
aureus:catalază
\
+;oxidază -;coagulaza liberă
+;oxidază -;coagulaza liberă +,
+, producerea
producerea de de DN-ază,
DN-ază,
descompunerea manitolului
descompunerea ,„coagulaza legată
manitolului ,coagulaza legată + + (clumping
(clumping factor
factor —– CF),
CF),
producerea de
producerea de hemolizine; ;
-- producere pigment: de
de pigment:
producere de auriu la
la auriu
de la la portocaliu, citrin (5.
galben citrin
portocaliu, galben aureus, S.
(S. aureus, S.
lugdunensis, S.
lugdunensis, chromogenes, ş.a.);
$. chromogenes, ş.a.); Di
SCN: coagulaza
-- SCN: coagulaza liberă
liberă ; ;
4.Determinarea patogenităţii:
4.Determinarea patogenităţii:
-- in
in vitro:
vitro: producerea
producerea dede coagulază,
coagulază, hemolizine,
hemolizine, descompunerea
descompunerea
manitolului
manitolului
-- in
in vivo:
vivo: inoculare
inoculare la
la animale
animale de
de laborator
laborator (cobai,
(cobai, iepure)
iepure)

5. Lipizarea bacteriilor:
5.Tipizarea bacteriilor:

-pentru identificarea
-pentru identificarea sursei de infecţie
sursei de infecţie
lizotipie (determinarea
-prin lizotipie (determinarea sensibilităţii
sensibilităţii stafilococului
stafilococului faţă de
faţă de
. e E) . e.

-prin
acteriofagi; este
bacteriofagi; este o
o sensibilitate
sensibilitate stabilă
stabilă aa stafilococului)
stafilococului)
-prin metode
-prin metode de biologie moleculară
de biologie moleculară

6. Antibiograma
6.
 Genul Streptococcus
Genul Streptococcus

5. pyogenes
S. pyogenes
5. agalactiae
S. agalactiae
S. grup
S. viridans
grup viridans
S. pneumoniae
S. (Pneumococ)
pneumoniae (Pneumococ)

Podus patologic:
Podus patologic:

pyogenes: secreţie
S. pyogenes:
S. secreție faringiană,
faringiană, secreţie
secreție din
din leziuni
leziuni tegumentare,
tegumentare, sânge
sânge pentru
pentru serologie
serologie
agalactiae: secreţie
5. agalactiae:
S. secreție vaginală,
vaginală, secreţia
secreția canalului
canalului cervical –la mamă
cervical —la mamă LCR,
LCR,
sânge, aspirat bronşic
sânge, aspirat bronşic —– la
la nou-născut
nou-născut

S. grup
S. viridans: se
grup viridans: se găsesc
găsesc în
în mod
mod normal
normal în
în secreţia
secreția faringiană;
faringiană; prin
prin leziuni
leziuni ale
ale mucoasei
mucoasei
bucale
bucale pot
pot pătrunde
pătrunde în
în sânge,
sânge, cauzând
cauzând endocardită
endocardită subacută
subacută la pacienţii cu
la pacienţii cu leziuni
leziuni ale
ale
endocardului valvular
endocardului valvular

Pneumococ: spută,
Pneumococ: spută, LCR,
LCR, sânge
 I. Grupul
I. Grupul piogenic
piogenic --S.S. pyogenes
pyogenes
I.
|. Grupul
Grupul piogenic
piogenic --S.S. pyogenes
pyogenes
•* Boli
Boli invazive
invazive datorate
datoratestreptococilor piogeni
streptococilor piogeni
• singura specie
singura specie a a grupului
grupului Lancefield
Lancefield AA –Erizipelul
—Erizipelul
• sunt beta-hemolitici
sunt beta-hemolitici –Celulite
-Celulite
• starea de
starea de portaj
portaj naso-faringian este prezentă
naso-faringian este prezentă la
la 10-30%
10-30% din
din –Fasceite necrozante
-Fasceite necrozante
oameni
oameni –Febra puerperală
-Febra puerperală
• principalul
principalul patogen
patogen uman
uman asociat cuinvazia locală
asociat cuinvazia locală sau
sau –Sepsisul streptococic.
—Sepsisul streptococic.
sistemică
sistemică streptOcOccus prOaeres

–şi
—şi cu
cu dezordini
dezordini imunologice
imunologice post-streptococice
post-streptococice

Boli invazive
Boli invazive
Erizipel al
Erizipel al gambei
gambei

faza acută ERIZIPEL

ERIZIPEL convalescenţă
convalescenţă

Boli invazive
Boli invazive
Erizipel al
Erizipel al feţei
feţei

pi
faza acută
faza acută ERIZIPEL
ERIZIPEL convalescență
convalescenţă
 Boli
Boli invazive
invazive
Boli
Boli invazive
invazive
Celulită
Celulită
Fasceită
Fasceită necrozantă
necrozantă

I.I. Grupul
Grupul piogenic
piogenic --S.S. pyogenes
pyogenes

•* Boli
Boli localizate:
localizate:
–Faringita
— Faringita streptococică
streptococică
–Scarlatina
—Scarlatina
–
-— Impetigo
Impetigo streptococic
streptococic

•* Endocardita
Endocardita infecţioasă
infecțioasă
–Foarte
—Foarte rară
rară
–Severitate înaltă
—Severitate înaltă angina streptococică, limfadenită

Boli localizate
Boli localizate
Faringită
Faringită // amigdalită
amigadalită

Amigdalită
Amigdalită ulcero-necrotică
ulcero-necrotică
Amigdalită
Amigdalită purulentă
purulentă tonsilita streptococică
tonsilita streptococică cu
cu exsudat
exsudat
tonsilita streptococică
tonsilita streptococică fără
fără exsudat
exsudat tonsilita streptococică
tonsilita streptococică foliculară
foliculară

Boli localizate
Boli localizate
Boli localizate
Boli localizate
Scarlatină
Scarlatină
Scarlatină

Limbă albă —la

Limbă albă debut
– la debut Limbă
Limbă zmeurie
zmeurie –
— după
după câteva zile
câteva zile

Boli localizate
Boli localizate
Impetigo streptococic
Impetigo streptococic

FAŢĂ PICIOR
PICIOR
1. Examen
1. Examen direct
direct
a. Exam. macroscopic:
a.Exam. macroscopic:
-- S.
S. pyogenes,
pyogenes, S.S. de
de grup
grup viridans,
viridans, enterococii
enterococii -- nu
nu este
este necesar
necesar exam.
exam. macroscopic
macroscopic aa
produsului patologic
produsului patologic
b. Exam.
b. Exam. microscopic:
microscopic:
-- col
col GRAM:
GRAM: cocicoci Gram
Gram (+)
(+)
O S.
o pyogenes: coci
S$. pyogenes: coci rotunzi,
rotunzi, dispuşi
dispuşi în
în lanţuri
lanţuri
o S.
o $. de grup viridans:
de grup viridans: coci
coci rotunzi
rotunzi sau
sau ovalari
ovalari dispuşi
dispuşi în
în lanţuri
lanţuri
2. Izolarea
2. Izolarea bacteriei:
bacteriei:
-- mediul
mediul de
de îmbogăţire:
îmbogățire: PIKE
PIKE
-- Geloză-sânge
Geloză-sânge
Bulion-sânge; Bulion
-- Bulion-sânge; Bulion ser;
ser; Bulion
Bulion glucozat;
glucozat; Geloză
Geloză ser
ser
 3. Identificare:
3. Identificare:
-- Caractere
Caractere morfotinctoriale
morfotinctoriale
-- Caractere de cultură:
Caractere de cultură:
col “S”
o col
o “S” cu
cu hemoliză f (clară,
hemoliză  (clară, transparentă)
transparentă)  Streptococi -hemolitici
= Streptococi f-hemolitici

ASM Microbelibrary.neg C Hama

sensibilitate
sensibilitate faţă
faţă de
de Determinarea hidrocarbonatului
Determinarea hidrocarbonatului C
C din
din
BACITRACINĂ
BACITRACINĂ -- peretele bacterian
peretele prin reacţii
bacterian prin reacţii de
de
identificare grup
identificare grup AA precipitare şi
precipitare şi aglutinare
aglutinare —– stabilirea
stabilirea
Testul CAMP
Testul CAMP pentru
pentru identificarea
identificarea S.
S. de
de grup
grup BB arupelor Lancefield
grupelor Lancefield

col “S”
o col
o “S” cu
cu hemoliză o (incompletă,
hemoliză  (incompletă, de
de culoare verde datorită
culoare verde datorită reducerii
reducerii Hb
Hb la
la MetHb)
MetHb)
Bilă
Bilă Optochină
Optochină Inuliină
Inuliină Esculină
Esculină Rafiinoză
Rafiinoză
S. de
S. de grup
grup viridans
viridans Rezistent
Rezistent Rezistent
Rezistent -- -- +
+
Pneumococi
Pneumococi Sensibil
Sensibil Sensibil
Sensibil +
+ -- --

Descompunerea Inulinei,
Descompunerea Inulinei, Esculinei,
Esculinei, Rafinozei
Rafinozei se
se realizează
realizează pe
pe mediul
mediul cu
cu indicator
indicator Andrade.
Andrade.

4. Antibiograma
4. Antibiograma
-- Streptococul
Streptococul de
de grup
grup A:A: şi-a păstrat sensibilitatea
şi-a păstrat sensibilitatea faţă
faţă de penicilină —– nu
de penicilină se efectuează
nu se efectuează
ABG (numai
ABG în situaţii
(numai în situații speciale,
speciale, de
de ex.
ex. alergie
alergie la penicilină sau
la penicilină monitorizarea rezistenţei
sau monitorizarea la penicilină
rezistenţei la penicilină şi
şi alte
alte
antibiotice, fără
antibiotice, fără comunicarea
comunicarea rezultatului)
rezultatului)

Pentru ceilalţi
-- Pentru ceilalţi streptococi se efectuează
streptococi se efectuează ABG
 Caractere antigenice
Caractere antigenice
Antigenele somatice:
Antigenele somatice:
Antigenul capsular, Ia
Antigenul capsular, la cei
cei cu
cu capsulă
capsulă şişi care
care poate
poate fifi distrus
distrus de de oo enzima
enzima
proprie, hialuronidaza.
proprie, hialuronidaza.
Antigenul
Antigenul M, M, se
se găseşte
găseşte pe pe suprafaţa
suprafaţa peretelui,
peretelui, pe pe baza
baza acestui
acestui antigen
antigen se se
împart
împart înîn cca.
cca. 80
80 dede serotipuri,
serotipuri, iar iar organismul
organismul produce
produce anticorpi
anticorpi anti-M.
anti-M.
Carbohidratul C
Carbohidratul C (se
(se găseşte
găseşte în în profunzimea
profunzimea peretelui
peretelui bacterian).
bacterian). Pe Pe baza
baza
acestui antigen,
acestui antigen, streptococii
streptococii se se împart
împart înîn 19 19 serogrupuri
serogrupuri (notate
(notate dede la
la A,
A, B,
B, C,
C,
etc.), este
etc.), este clasificarea
clasificarea lui lui Lancefield.
Lancefield.
Antigene solubile
Antigene solubile
Exotoxina
Exotoxina se se numeşte
numeşte eritrotoxina,
eritrotoxina, are are afinitate
afinitate pentru
pentru piele,
piele, determina
determina
exantem (la
exantem (la nivelul
nivelul pielii)
pielii) şişi enantem
enantem (la (la nivelul
nivelul mucoaselor).
mucoaselor).
Exotoxina apare
Exotoxina apare doar
doar cândcând streptococii
streptococii sunt lizogeni, deci
sunt lizogeni, deci purtători
purtători de
de
bacteriofag.
bacteriofag.
Exotoxina
Exotoxina determină scarlatina, este
determină scarlatina, este aceeaşi
aceeaşi pentru
pentru toţii
toţii streptococii,
streptococii, de de aceea
aceea
anti-exotoxina, oferă
anticorpii anti-exotoxina,
anticorpii oferă protecţie
protecţie pentrupentru toţii
toţii streptococii.
streptococii.
Alte antigene
Alte antigene solubile:hialuronidaza,
solubile:hialuronidaza, fibrinolizinele,
fibrinolizinele,
(streptolizina O
(streptolizina O şi
şi S),
S$), proteinaze,
proteinaze, DN- DN- şi şi RN-aze.
RN-aze. carbohidraze.
Caractere de
Caractere de patogenitate
patogenitate

Multiplicare
Multiplicare şi şi invazivitate
invazivitate
Multiplicare —– proteina
Multiplicare proteina M M care
care determină
determină afecţiuni
afecţiuni la la poarta
poarta de
de intrare.
intrare.
Invazivitatea -- enzimele
Invazivitatea litice, care
enzimele litice, care determină
determină apariţia
apariţia de de focare
focare secundare
secundare propagate
propagate dindin
aproape în
aproape aproape.
în aproape.
Infecţiile
Infecţiile datorate
datorate multiplicării
multiplicării şi şi invazivităţii
invazivităţii sunt:
sunt: infecţii
infecţii cutanate
cutanate (erizipel,
(erizipel, abcese,
abcese,
colecţii
colecţii purulente),
purulente), angine,
angine, infecţii
infecţii respiratorii
respiratorii (rinite,
(rinite, sinuzite,
sinuzite, pleurezii),
pleurezii), meningite,
meningite,
abcese
abcese în în diferite
diferite organe,
organe, endocardita
endocardita lentălentă malignă,
malignă, celecele mai
mai multe
multe afecţiuni
afecţiuni sunt
sunt date
date de
de
streptococul
streptococul grupul
grupul A. A. Streptococul
Streptococul grupulgrupul B B dă
dă cele
cele mai
mai grave
grave afecţiuni
afecţiuni ale
ale nou-născutului
nou-născutului
şi
şi ale
ale gravidei.
gravidei.

Toxigeneza
Toxigeneza
Doar
Doar streptococii
streptococii de
de grup
grup A A au
au această
această proprietate,
proprietate, pentru
pentru că
că ei
ei au
au receptori
receptori pentru
pentru
bacteriofagi, devenind
bacteriofagi, devenind lizogeni.
lizogeni. Ei
Ei dau
dau Scarlatina.
Scarlatina.

Boli prin
Boli prin hipersensibilizare
hipersensibilizare
Apar înîn urma
Apar urma mecanismului
mecanismului dede hipersensibilizare
hipersensibilizare de
de tip
tip IIII sau
sau 111
111 (citotoxic
(citotoxic respectiv
respectiv al
al
complexelor
complexelor imune),
imune), pot
pot să
să apară
apară boli
boli autoimune
autoimune post-streptococice:
post-streptococice: reumatism
reumatism articular
articular
acut,
acut, cardită
cardită reumatismală,
reumatismală, eritem
eritem nodos,
nodos, glomerulonefrita
 Evidenţierea
Evidenţierea Ac
Ac
Streptolizina “O”
-- Streptolizina “O” =
= SLO=
SLO= Ag = determină
Ag  determină formarea
formarea de
de Ac
Ac anti-SLO
anti-SLO =
=
ASLO
ASLO
ASLO creşte
-- ASLO creşte în primele 7
în primele 7 zile până în
zile până în săptămânile
săptămânile 3-4
3-4 când se menţine
când se menţine în
în
platou şi
platou şi apoi
apoi scade titrul până
scade titrul până la
la valori
valori normale până la
normale până la 6 luni, dacă
6 luni, dacă s-a
s-a
intervenit cu
intervenit cu un tratament corespunzător
un tratament corespunzător (vindecare);
(vindecare);
-- sau poate să
sau poate să crească
crească titrul Ac dacă
titrul Ac dacă nu
nu aa fost
fost tratat
tratat bolnavul
bolnavul sau
sau s-a
s-a produs
produs
oo complicaţie
complicaţie (RAA, afectare cardiacă,
(RAA, afectare cardiacă, glomerulonefrită
glomerulonefrită renală
renală acută,
acută,

coreea minor
coreea minor etc.).
etc.).
Val 
-- Val < 1/200 Ul/ml 
1/200 UI/ml nu există
= nu există infecţie
infecţie streptococică
streptococică
Val 
-- Val > 1/200 Ul/ml 
1/200 UI/ml este infecţie
=> este infecţie streptococică în evoluţie.
streptococică în evoluţie.

-Ac anti-streptokinază
-Ac anti-streptokinază =
= ASK
ASK
-Ac anti-streptodornază
-Ac anti-streptodornază == ASD
 Genul Enterococcus
Genul Enterococcus
enterococii au
- enterococii au fost inclusi iniţial
fost inclusi inițial în grupa D
în grupa D Lancefield
Lancefield aa genului
genului Streptococcus
Streptococcus
- în 1984 pe
în 1984 baza diferenţelor
pe baza diferenţelor genetice
genetice s-a
s-a separat
separat din
din genul
genul Streptococcus
Streptococcus
Enterococcus
Enterococcus faecalis,
faecalis, Enterococcus
Enterococcus faecium
faecium
Podus patologic:
Podus patologic: d

- urină
urină > 43 /
- secreţie
secreție uretrală,
uretrală, secreţie prostatică, secreţia
secreție prostatică, secreția canalului
canalului cervical
cervical

a.
4
puroi din
- puroi plăgi
din plăgi se,
bilă
- bilă că
materii fecale
- materii fecale > t &
sânge
- sânge . ca
1.+. Examen
Examen direct
direct /
Exam. microscopic:
Exam. microscopic:
 se
se face
face doar
doar pentru
pentru produsele
produsele patologice
patologice în mod normal
în mod normal sterile
sterile
= coci
coci Gram
Gram +,
+, ovalari,
ovalari, mari,
mari, dispuşi
dispuşi în
în lanţuri
lanţuri scurte
scurte sau
sau în
în diplo,
diplo, imobili,
imobili, necapsulaţi,
necapsulaţi, nesporulaţi
nesporulaţi
2. Izolarea
2. Izolarea bacteriei:
bacteriei:
= geloză
geloză sânge
sânge
. ABE
ABE (agar-bilă-esculină)
(agar-bilă-esculină)
= incubare
incubare la
la 37ºC,
37*C, 18 – 24 ore
18 —24
3. Identificare:
3. Identificare:
Caractere morfofotinctoriale
- Caractere morfofotinctoriale
- Caractere de cultură:
Caractere de cultură:
o colonii
o S, α
colonii S, a hemolitice
hemolitice sau
sau nehemolitice
nehemolitice

C. biochimice:
- C. biochimice:
o catalază
o catalază —–
O oxidază
o oxidază —–
o rezistent
o rezistent la bilă
la bilă
o hidrolizează
o hidrolizează esculina
esculina în
în prezenţa
prezenţa aa 40%
40% bilă sau săruri
bilă sau săruri biliare
biliare
= pe
pe mediul ABE —– coloraţie
mediul ABE coloraţie neagră
neagră
pe baza
pe baza fermentării
fermentării zaharurilor
zaharurilor se
se pot
pot împărţi
împărţi în
în 5
5 grupe,
grupe, în
în cadrul
cadrul cărora
cărora se pot diferenţia
se pot diferenţia speciile
speciile tot pe baza
tot pe baza
fermentării
fermentării zaharurilor
zaharurilor

Esculină
Esculină Xiloză
Xiloză Arabinoză
Arabinoză

Enterococcus spp.
Enterococcus Spp. +
+ +
+ +

E. faecium
E. faecium +
+ - +

E. faecalis
E. faecalis +
+ - -

44.. Identificare antigenică

Identificare antigenică
-- latexaglutinare
latexaglutinare

5. Antibiograma
5. Antibiograma
-- sunt
sunt germeni cu rezistenţă
germeni cu rezistenţă crescută
crescută la
la antibiotice
antibiotice
-- antibiograma se efectuează
antibiograma se efectuează obligatoriu
FACULTATEA DE MEDICINĂ ŞI FARMACIE
UNIVERSITATEA “DUNĂREA DE JOS”, GALAȚI

STREPTOCOCCUS
PNEUMONIAE
 Habitat
Habitat

Pneumococii sunt
Pneumococii sunt -gazduiti
-gazduiti pe
pe mucoasa
mucoasa tractusului
tractusului
respirator superior
respirator superior
(purtatori nasofaringieni
(purtatori nasofaringieni 50-70%)
50-70%)
-pot coloniza
-pot coloniza mucoasa
mucoasa
genito-urinara sau
genito-urinara sau intestinala
intestinala

Rezistenta in
Rezistenta in mediul
mediul extern:
extern: mor
mor repede
repede in
in conditii
conditii dede
uscaciune, temperatura
uscaciune, temperatura camerei,
camerei, dupa
dupa expunere
expunere la la
lumina
lumina
 Riscul infectiei
Riscul infectiei apare
apare lala purtatorii
purtatorii
nasofaringieni de
nasofaringieni de tulpini
tulpini capsulate!
capsulate!

Pacientul prezinta
Pacientul prezinta -frison,
-frison, febra,
febra, junghi toracic
junghi toracic
-tuse cu
-tuse cu expectoratie
expectoratie ruginie
ruginie
-cel mai
-cel mai frecvent
frecvent este
este interesat
interesat un
un singur
singur lob,
lob, dar
dar pot
pot
fifi afectati
afectati 2
2 si
si chiar
chiar 33 lobi
Caractere microscopice
Caractere microscopice

-coci Gram
-coci Gram pozitivi,
pozitivi, ovali,
ovali, lanceolate
lanceolate sau
sau in
in
flacara de
flacara de lumanare
lumanare
-asezati in
-asezati in perechi
perechi
-capsulati
-capsulati
Cultivare
Cultivare ,
Insamantare prelevate
Insamantare prelevate cat
cat mai
mai de a MR:
precoce posibil,
precoce posibil, fara
fara refrigerare
refrigerare a
La 37°C
La 3/7 C 18-24h (atm
18-24h (atm 5-10%
5-10% CO2)
CO2)
Geloza-sange:
Geloza-sange:
-- colonii
colonii de
de tip
tip S-
S- inconjurate
inconjurate de zona α-hemoliza
de zona a-hemoliza
-- colonii
colonii de
de tip
tip R-
R- tulpinile
tulpinile necapsulate
necapsulatej i
-- colonii
colonii de
de tip
tip M(mucoide)-
M(mucoide)- tulpinile
tulpinile
cu capsula,
cu capsula, dupadupa 18-24h
18-24h sufera
sufera o o
deprimare in
deprimare in centru
centru capatand
capatand
aspect crateriform
aspect crateriform
 Identificarea
Identificarea
-caractere de
-caractere de cultivare
cultivare si si microscopie
microscopie
-sensibilitate la
-sensibilitate la Optochin
Optochin
-solubilitate in
-solubilitate in bila
bila (autolizeaza
(autolizeaza bila,
bila, cu
cu
clarificarea suspensiei)
clarificarea suspensiei)
-patogenitate pentru
-patogenitate pentru soareci
soareci
-polizaharidul capsular-
-polizaharidul capsular- determinarea
determinarea
pneumococilor in
pneumococilor in serul
serul sanguin
sanguin si
si urina
urina
-- latexaglutinare
latexaglutinare
-- coaglutinare
coaglutinare
 Structura antigenica
Structura antigenica b
P = a

Polizaharidul C
- Polizaharidul C
Antigenul polizaharidic
- Antigenul polizaharidic capsular
capsular (identificat
(identificat prin
prin
reactia de
reactia de umflare
umflare a a capsulei
capsulei in in scop
scop epidemiologic
epidemiologic
la prepararea
la prepararea de de vaccinuri).
vaccinuri). Capsula
Capsula esteeste factorul
factorul
major de
major de virulenta
virulenta (efect
(efect antifagocitar)
antifagocitar)
Proteina M
- Proteina M (proteina
(proteina dede suprafata)
suprafata)
Pneumolizina- factor
- Pneumolizina- factor de
de virulenta
virulenta (eliberata
(eliberata prin
prin
autoliza- efect
autoliza- efect hemolitic,
hemolitic, leucolitic
leucolitic si
si dermonecrotic)
dermonecrotic)
 Tratament
Tratament

Conduita terapeutica
Conduita terapeutica oo stabilim
stabilim prin
prin antibiograma
antibiograma
-sensibilitatea la
-sensibilitatea la Penicilina
Penicilina (testate
(testate prin
prin discuri
discuri de
de
oxacilina)
oxacilina)
S —
S Penicilina
Penicilina
R—
R CMI
CMI
Epidemiologie
Epidemiologie
Vaccinarea
Vaccinarea
-- in
in special
special lala pacientii
pacientii cu
cu risc
risc crescut
crescut
(varstnici, diabet,
(varstnici, diabet, bronsita
bronsita cronica
cronica etc)
etc)
-- copii
copii sub
sub 22 ani
ani
 DEFINIŢIE, ÎNCADRARE

N Numele genului Neisseria

E m:=dicul german Neisser.
Ma descris pentru prima dată germenulrauzator al
gonoreei
 DEFINIŢIE, ÎNCADRARE
N Genul Neisseria - speciile importante
IN. meningitidis |meningococul)
N N. gonorrhoeae |gonococul)

N /Jeisserii saprofite:
N W./lactamica; N.mucosa; N.flava; N.sicca; N.subflava;
N.cinerea; N.elongata;

N Flora normală tegumentară şi faringeană

 Habitat

N. gonorrhoeae
Na nivelul mucoaselor genitale la gazdele
infectate

N. meningitidis
N portajul nazal, faringian, rinofaringian
Bursa epidemică majoră
Bpunctul de plecare al meningitei
 Caractere morfotinctoriale

N coci Gram-negativi
N reniformi
Mi=tele adiacente aplatizate
M=:pect de boabă de cafea
N clispuşi în diplo, ocazional formează tetrade.
Bimobili
E meningococ - structură capsulară
Caractere morfotinctoriale
 Caractere de cultură

N Creşterea este influenţată negativ de

Buscăciune
Mprezenţa acizilor graşi
N |emperatura optimă de incubare 35-37/"C
N Atmostera
Numedă
B<suplimentată cu 3-10% CO,
N Coloniile apar în 24-48 de ore, mai rapid în
cazul meningococului.
 Caractere de cultură

Gonococul
Bcolonii
de tip $
E dimensiuni
de 0,5-1 mm
Bnepiementate
Mopace
sau transparente
 Caractere de cultură

Veningococul
Mcolonii de tip S
E cimensiuni de circal mm
Mtransparente
N nepigmentate
Htulpinile incapsulate (A, C)
Ecolonii de tip M (mucoide)
structură antigenică- factori de virulență
Neisseria gonorrhoeae
PROTEINE PREZENTE ÎN MEMBRANA EXTERNĂ:
N porinele
Mformează canale in membrana externă
Mproteinall
Mintervine
în procesul de aderare a gonococului de celula
ţintă
Mproteina care leagă fierul
Ne exprimă atunci când aportul de Fe este insuficient
 Structură antigenică
Neisseria meningitidis

N ANTIGENELE CAPSULARE
N ce natură polizaharidică
N permit identificarea a 13 grupe serologice

N PILII
 Răspuns imun
N |n infecțiile cu gonococ
Bz pare un răspuns imun ineficient
= ceeaşi persoană poate face infecţii repetate
Baccinurile elaboratesunt ineficiente.
Mnu există practic imunitate postinfecţioasă
Mciatorită fenomenelor de variaţie antigenică a pililor
 Răspuns imun
H |n infecţiilecu meningococ
N imunitatea este mediată
Mcelular
Bumoral
Binticorpii apar
Mupă infecţii subclinice
Matorită stării de portaj asimptomatic
Bicțiunea anticorpilor necesită prezenţa
complementului
E persoanele cu deficit al sistemuluicomplement
prezintă risc foarte mare pentru infecția
meningococică
 PATOGENIE. BOALA LA OM
Neisseria gonorrhoeae

N bzrbaţi
E retrita gonococică
M-ecreţie galben-verzuie, cremoasă
Biureri la micţiune
Min lipsa tratamentului, aceasta poate afecta prin
invazie epididimul şi printr-o eventuală fibroză poate
determina apariţia de stricturi uretrale.
 PATOGENIE. BOALA LA OM
Neisseria gonorrhoeae

N femei
Hocalizare endocervical
Me poate extinde la niveluluretrei, vaginului,
glandelor Bartholin, trompelor uterine
E posibilitatea apariţiei unor fibroze şi obstrucţii care
conducla sterilitate.
 PATOGENIE. BOALA LA OM
Neisseria gonorrhoeae

N Simptomele caracteristice la femei sunt:

Mcurgerevaginală,
Bciisurie
BE ciureri abdominale
 PATOGENIE. BOALA LA OM
Neisseria gonorrhoeae

N |nfecţia netratată la femei se poate complica

N pe cale ascendentă
Bsalpingită
Mabces tubo-ovarian
Mboală inflamatorie pelvină

Mica urmare

Msarcina extrauterină

Esterilitate
 PATOGENIE. BOALA LA OIM
Neisseria gonorrhoeae

N oftalmia gonococică [ophtalmia neonatorum)

Bnama cu gonoree
Bnou-născutul se naşte pe cale naturală
E prevenire- instilaţii
de soluţie de nitrat
de Ag 1% în
sacul conjunctivalal nou-născutului

N conoreea ano-rectală

N faringita gonococică
 PATOGENIE. BOALA LA OM
Neisseria meningitidis

N contagiozitatea este mare

E meningita meningococică apare la 1/1000 din
persoanele contaminate
 PATOGENIE. BOALA LA OM
Neisseria meningitidis

N Succesiuneafenomenelor:
N colonizarea mucoasei respiratorii
Minvazia locală
N bacteriemia, favorizată de prezenţa capsulei
Malterarea barierei hemato-encefalice
Hinflamaţia in spaţiul subarahnoidian
Mcreşterea presiunii intracraniene
 PATOGENIE. BOALA LA OM
Neisseria meningitidis

N Activarea mai multor cascade inflamatorii

E latorită eliberării unor cantităţi importante de
endotoxină
N pot conduce la
Minstalarea unui sindrom de coagulare intravasculară
diseminată
Ho evoluţie nefastă spre deces
 TRATAMENT

N penicilina- antibioticul de elecţie în tratamentul

infecţiei gonococice
tulpini rezistente prin
N producere de f-lactamaze codificate plasmidic
rezistenţă mediată cromozomal
Me extinde şi la tetracicline, eritromicină, aminoglicozide

N necesitatea efectuării antibiogramei

N necesitatea tratamentului partenerilor sexuali
 TRATAMENT

N |n meningita cu meningococ

E penicilinaG

N ceftriaxona

N cefotaximul

E Cloramfenicolul

N Rezistenţa la peniciliă este rară

 EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE.
CONTROL
GONOCOC
N Omul este singura gazdă naturală
N transmitere
Mp: cale sexuală
Me la mamă la nou-născut [in timpulnaşterii)
Mrar
Eprin intermediul unor obiecte

N receptivitatea- generală
 EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE.
CONTROL
MENINGOCOC
N Omuleste singura gazdă naturală
N stare de portaj nazo-faringiană
N transmitere
N cale aeriană (picături Pflugge)
în condiţiile unui contact
apropiat
N Contagiozitatea - mare
N FReceptivitatea - mai mare la
N copii sub5 ani
N pacienţi cu deficienţe ale factorilor complementului
N persoane instituţionalizate
 EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE.
CONTROL
MENINGOCOC
N |ratamentulpreventiv al purtătorilor
Bu rifampicină
N pentru contacţii din
Hfamilie
Mcolectivităţi inchise în cazul apariţiei unor cazuri de
meningită

N Vaccinarea este posibilă doar pentru unele

serogrupe
COCOBACILI
COCOBACILI GRAM
GRAM NEGATIVI
NEGATIVI

GENUL HAEMOPHILUS
GENUL
 Caractere
Caractere morfotinctoriale
morfotinctoriale

reuneste un
reuneste un grup
grup larg
larg de
de
cocobacili polimorfi,
cocobacili polimorii,
imobili,
imobili,
nesporulati,
nesporulati,
Gram negativi,
Gram negativi,
aerobi si
aerobi si facultativ
facultativ anaerobi
anaerobi si
si carboxifili
carboxutili
 Caractere
Caractere de
de cultura
cultura

cresc pe
cresc pe medii
medii cu
cu sânge
sânge
multe specii
multe specii de
de Haemophilus au strictă
Haemophilus au strictă nevoie
nevoie de
de doi
doi factori
factori de
de crestere
crestere
factorul X
factorul X
factorul V
factorul V

Specia care necesită

Specia care necesită pentru
pentru crestere
crestere numai
numai factorul
factorul V
V primeste
primeste la
la denumire
denumire
prefixul „para”
prefixul „para” (H.parainfluenzae).
(H.parainfluenzae).
Mediile
Mediile
geloza chocolat;
geloza chocolat;
geloza Fildes;
geloza Fildes;
geloza Levinthal;
geloza Levinthal;
Haemophilus Test
Haemophilus Test Medium
Medium (HTM)
(HIM) etc.
 Caractere
Caractere de
de cultura
cultura

Unele bacterii
Unele bacterii cum
cum este
este Staphylococcus
Staphylococcus aureus
aureus produc
produc o o
cantitate mare
cantitate mare dede NAD
NAD
Se poate
Se poate obtine
obtine o o cultură
cultură dede Haemophilus
Haemophilus pe pe geloza
geloza
sânge (care furnizează
sânge (care furnizează factorul
factorul X)
X) de-a
de-a lungul
lungul unui
unui striu
striu de
de
cultură
cultură de
de S.aureus care furnizează
S.aureus care furnizează factor
factor V.V.
Acest fenomen
Acest fenomen se se numeste
numeste satelitism
satelitism..
Satelitism cu
Satelitism cu Staphylococcus
Staphylococcus sp. sp. pe
pe G-sg.
G-sg.
H. influenzae
H. influenzae a a fost trasat lângă
fost trasat lângă o o dungă
dungă trasată
trasată cucu stafilococi
stafilococi
Coloniile de
Coloniile de H.
H. influenzae
influenzae sunt
sunt mai
mai mari
mari în apropierea
în apropierea
stafilococilor, datorită
stafilococilor, datorită difuziei
difuziei factorului
factorului V V de
de lla
a acestia.
a i
acestia.
nam E ip- Pa pai
nara e Pe ta
me » i E

- = .
e ui i
da
= E. PE E îl cae Et E
=FP> S-a 2 În pe a poza miri Li
E m LE Pr: E

i E Ia Ie
III EP
E [me _
= = Pg e e
-—
Da it —-.—_ E he - rai

=
re pi uigr Lil
E Rin
Da se
ii 2 n re RER DR
i e
5 IE pila 2
Sia i 8 a
: = pă
ape PE TIP il
E me
BE a P, caz
i mi iai SĂRI mini ei ilie i al gal! Pi ei me e irniagliga
pai
ar: - cita a =, -.—
- Pi F. i sita
Do a ital 9 „mul lim? ue cold pi e oana E — a E: mi
- Dc ia RE a 3
Din punct
Din punct de
de vedere medical —– importante
vedere medical importante speciile
speciile pe
pe care
care omul
omul
le adăposteste
le adăposteste în patru ecosisteme:
în patru ecosisteme:

-faringe,
-faringe,
-cavitatea bucală,
-cavitatea bucală,
placa dentară
-- placa dentară
-- Sporadic
SporadIc
-- Intestinul
Intestinul
-- aparatul
aparatul uro-genital
uro-genital
 Haemophilus
Haemophilus influenzae
influenzae

specia cel
specia cel mai frecvent implicată
mai frecvent implicată în infectii umane
în infectii umane
în special la
în special la copii
copii
Celelalte specii
Celelalte specii izolate
izolate dede la
la om
om sunt
sunt comensale
comensale
oportuniste
oportuniste
pot fi
pot fi implicate
implicate ocazional
ocazional
în infectii din
în infectii din sfera
sfera oto-rino-laringiană
oto-rino-laringiană
la pacienti
la pacienti imunodeprimati
imunodeprimati
meningita
meningita
în septicemie
în septicemie
în endocardită
în endocardită
 DEFINITIE, ÎNCADRARE
DEFINITIE, ÎNCADRARE

Haemobphilus ducreyi
Haemophilus ducreyi sisi Haemophilus
Haemophilus aegyptius
aegyptius
patogeni ai
patogeni ai mucoaselor
mucoaselor
genito-urinară
genito-urinară
conjunctivală
conjunctivală
nu au
nu au fost
fost izolati
izolati de
de la persoane sănătoase
la persoane sănatoase
Haemophilus nu
Haemophilus se găseste
nu se găseste liber în natură
liber în natură
Pneumonia (non-typable)
 Izolarea si
Izolarea si identificarea
identificarea enterobacteriilor
enterobacteriilor

Escherichia coli
Escherichia coli

Produs patologic
Produs patologic
-- materii fecale, bilă
materii fecale, bilă
alimente, vărsături
-- alimente, vărsături
-- urină
urină
-- puroi,
puroi, LCR,
LCR, sânge
sânge
1.Examen direct
1.Examen direct
-- din
din materii
materii fecale
fecale nunu se
se efectuează
efectuează examen
examen
MICrOSCOpIC
microscopic
2. Izolare
2. Izolare
pe medii
-- pe medii selective
selective şi şi diferenţiale pentru
diferenţiale pentru
enterobacterii: MacConkey,
enterobacterii: MacConkey, Leifson,
Leifson, Levine
Levine
-- geloză
geloză lactozată
lactozată
-- pe
pe geloză
geloză sânge
sânge
-- bulion
 Escherichia coli
Escherichia coli
3.Identificare
3.Identificare
-- caractere
caractere morfotinctoriale
morfotinctoriale
obacili gram
obacili gram negativi,
negativi, cucu capete
capete rotunjite,
rotunjite, cucu cili
cili peritrichi
peritrichi
onecapsulaţi, nesporulaţi
onecapsulaţi, nesporulaţi
-- caractere
caractere de de cultură
cultură
oîn bulion: îlîl tulbură
oîn bulion: tulbură uniform,
uniform, formează depozit şi
formează depozit şi un
un inel
inel
aderent la
aderent la suprafaţă
suprafaţă
ope medii
ope medii solide:
solide: colonii
colonii de
de tip
tip S,
S, mici
mici
= geloză sânge —– colonii
oeloză sânge colonii S,
S, mici, alb-cenuşii, hemoliză
mici, alb-cenuşii, hemoliză
(urină)
(urină)
= geloză
oeloză lactozată–
lactozată-— colonii
colonii S, S, mici,
mici, lactozo-pozitive
lactozo-pozitive
(galbene)
(galbene)
= Leifson,
Leifson, MacConkey
MacConkey -- colonii
colonii S, S, mici,
mici, lactozo-pozitive
lactozo-pozitive
(roşii)
(roşii)
Levine —– colonii
= Levine colonii caracteristice,
caracteristice, lactozo-pozitive
lactozo-pozitive (mov(mov
închis),
închis), cucu luciu
luciu metalic
Escherichia coli –
Escherichia coli — imagine
imagine microscop
microscop electronic
electronic
 Escherichia coli —– frotiu
Escherichia coli frotiu colorat
colorat Gram
Gram

a: E.coli
a: E.coli cultura
cultura sediment
sediment urinar
urinar b: E.coli
b: E.coli cultura
cultura pura
Escherichia coli
Escherichia coli -- pe
pe geloza-sange
geloza-sange
 Caractere biochimice
Caractere biochimice

ope mediul
ope mediul MILF
MILF
Lizina
=] izina pozitiv
pozitiv
mobilitate
= mobilitate pozitiv
pozitiv
indol
=indol pozitiv
pozitiv
ope mediul
ope mediul TSI
ISI
glucoză
= olucoză pozitiv,
pozitiv, fara
fara producere
producere de
de gaz
gaz
H
= H>S2S negativ
negativ
= Jactoză, zaharoză
lactoză, zaharoză pozitiv
pozitiv
ope mediul
ope mediul Simmons
Simmons
Simmons
= Simmons negativ
negativ
ope mediul
ope mediul cu cu uree
uree
uree
= uree negativ

-6-
 Structura
Structura antigenică
antigenică
 antigenul „O”
» antigenul „O” sau
sau antigenul
antigenul somatic
somatic
--antigenul cu specificitate
antigenul cu specificitate de grup-prin reacţii
de grup-prin reacții de
de aglutinare
aglutinare au
au fost
fost
identificate 180
identificate 180 de
de serogrupe antigenice „O”
serogrupe antigenice „O”
 antigenul „H”
> antigenul „„H” sau
sau antigenul
antigenul flagelar
flagelar -- prezent
prezent doar
doar la
la tulpinile
tulpinile
ciliate
ciliate
prin reacţii
prin reacţii de
de aglutinare
aglutinare au fost evidenţiate,
au fost evidenţiate, greu,
greu, 56
56 de
de serotipuri
serotipuri
„H”
„H”

 antigenul „K”
P antigenul „K” sau
sau antigenul
antigenul capsular
capsular
-specificitate
 de tip
specificitate de tip
-aa fost
 fost identificat
identificat la
la tulpini
tulpini uropatogene
uropatogene de
de E.
E. coli,
coli, la
la tulpini
tulpini implicate
implicate în
în
cazuri de meningită
cazuri de meningită neo-natală
neo-natală (antigen
(antigen K-1)
K-1)
-se
 cunosc 103
se cunosc 103 antigene
antigene KK
pe baza
- pe baza antigenelor
antigenelor O, H şi
O, H şi K
K au
au fost
fost identificate
identificate peste
peste 700
700 de
de
serotipuri de
serotipuri de E.coli
E.coli


» antigenul B —– la
antigenul B la nou
nou nascut
nascut determina
determina sindromul
sindromul toxico-septic;
toxico-septic;


P antigenul solubil
Endotoxina -- antigenul
Endotoxina solubil care
care se
se eliberează
eliberează după
după moartea
moartea
bacteriei.
 Caractere de
Caractere de patogenitate
patogenitate
-- Virulenţa
Virulenţa şi
şi toxicitatea
toxicitatea bacteriilor
bacteriilor patogene
patogene sunt
sunt legate
legate de
de
prezenţa
prezenţa Ag
Ag KkK şi
şi aa unor
unor toxine
toxine (enterotoxina,
(enterotoxina, neurotoxina
neurotoxina
e(c.).
etc.).
-- Adezine
Adezine
-- Invazine
Invazine
-- Mobilitate/chemotaxie
Mobilitate/chemotaxie

-- Toxine
Toxine
•toxina
“toxina LT,
LI, toxina
toxina ST,
SI, toxina
toxina Shiga-like
Shiga-like
•e citotoxine
citotoxine endotoxina
endotoxina (LPS)
(LPS)
-- Factori
Factori cu rol antifagocitar
cu rol antifagocitar şi
şi protectori la reacţia
protectori la reacţia
bactericidă
bactericidă a a serului
serului
•“Capsula, antigenul K,
Capsula, antigenul K, LPS
LPS
-- Factori
Factori genetici
genetici aiai patogenităţii
patogenităţii

•* schimb
schimb de de material
material genetic prin transducţie
genetic prin transducţie şi
şi conjugare
conjugare
plasmide transmisibile
plasmide transmisibile
plasmide de
-plasmide de rezistenţă
rezistenţă lala antibiotice
antibiotice
plasmide pentru factorii
plasmide pentru de virulenţă
factorii de virulență
-plasmide pentru producerea
plasmide pentru producerea toxinelor
toxinelor
 Boala la
Boala la om
om
• E.coli
E.coli -- afecţiuni
afecţiuni locale
locale sau
sau generale:
generale:
• afecţiuni genitourinare (80%
afecţiuni genitourinare (80% datorită
datorită unor
unor patotipuri
patotipuri
uropatogene care
uropatogene care pot
pot prezenta:
prezenta: adezine,
adezine, hemolizine,
hemolizine,
aerobactinei, ce
aerobactinei, ce au
au receptori
receptori pe pe tractul
tractul urinar),
urinar),
• infecţii
infecţii intestinale
intestinale care care dau
dau BDA,
BDA, endocardite,
endocardite, meningite,
meningite,
septicemii.
septicemii.
• Sunt
Sunt 6 6 patotipuri
patotipuri diareigene:
diareigene:
• ETEC
ETEC (enterotoxigen),
(enterotoxigen),
• EHEC
EHEC (enterohemoragic),
(enterohemoragic),
• EIEC
EIEC (enteroinvaziv),
(enteroinvaziv),
• EAggEC
EAggEC (enteroagregativ),
(enteroagregativ),
• EPEC
EPEC (enteropatogen),
(enteropatogen),
• DAEC
DAEC (enteroaderentdifuz).
(enteroaderentdifuz).
• Răspunsul
Răspunsul imun imun este
este slab.
slab.
• Tratament:
Tratament: se se face
face conform
conform antibiogramei.
antibiogramei.
• Se
Se mai
mai poate
poate administra
administra ser anticolibacilar sau
ser anticolibacilar sau se
se prepară
prepară
un
un autovaccin
autovaccin din din tulpina
tulpina izolată
izolată de
de la
la pacient.
pacient.
• Tratamentul
Tratamentul cu cu bacteriofagi
bacteriofagi poatepoate dada rezultate
rezultate bune
bune mai
mai
ales când
ales când el el este
este aplicat
aplicat local.
 Klebsiella
Klebsiella
-- Izolare
Izolare
pe geloză,
-- pe geloză, geloză
geloză sânge,
sânge, geloză
geloză lactozată
lactozată
-- creşte
creşte pepe medii
medii selective
selective şi şi diferenţiale
diferenţiale pentru
pentru enterobacterii,
enterobacterii, acestea
acestea
fiind folosite
fiind folosite pentru
pentru dg.
de.
-- Identificare
Identificare
-- caractere
caractere morfotinctoriale
morfotinctoriale
-- caractere
caractere de de cultură
cultură
ocolonii mucoase
ocolonii mucoase de de tip
tip M,
M, lactozo
lactozo pozitive
pozitive
-- la,
la toate i
toate tulpinile 1zolate
izolate

-10-
-10-
 Caractere biochimice
Caractere biochimice
ope mediul
ope mediul SIMSIM
= H
H>S2S negativ
negativ
= mobilitate
mobilitate negativ
negativ
= indol
indol variabil
variabil
ope mediul
ope mediul TSITSI
= fermentează
fermentează glucoza
glucoza cucu producere
producere de
de gaz
gaz
= H
H>S2S negativ
negativ
= descompune
descompune lactoza
lactoza şi
şi zaharoza
zaharoza
ope mediul
ope mediul Simmons
Simmons
= Simmons
Simmons pozitiv
pozitiv
ope mediul
ope mediul cu cu uree
uree
= urează
urează pozitiv
pozitiv
ope geloza lactozată
ope geloza lactozată
= descompune
descompune lactoza
Rezistenţa
Rezistenţa la
la agenţi
agenţi fizici,
fizici, chimici
chimici
şi
şi biologici
biologici

•* sunt
sunt omorâte prin încălzire
omorâte prin încălzire la
la 55-60°
55-60* C,C,
timp de
timp de 30
30 min,
min, dar
dar pot
pot rezista
rezista mai
mai multe
multe
săptămâni
săptămâni înîn natură
natură dacă
dacă au
au condiţii
condiţii
favorabile.
favorabile.

•* Sunt
Sunt sensibile
sensibile la
la antibiotice
antibiotice cu
cu spectru
spectru
larg,
larg, rezistente
rezistente la penicilină.
la penicilină.

• Unele
Unele tulpini
tulpini pot
pot prezenta
prezenta oo creştere
creştere aa
rezistenţei
rezistenţei la antiseptice şi
la antiseptice şi dezinfectante
 Caractere antigenice
Caractere antigenice
•* Se
Se cunosc
cunosc antigene somatice: „O”
antigene somatice: „O şişi “K”.
“K
7)

Antigenul
Antigenul „O”
„O'” se întâlneşte la
se întâlneşte la formele
formele
„S”,
„S”, antigenul
antigenul „K”
„K” la
la formele
formele capsulate.
capsulate.
•* pe
pe baza
baza antigenului
antigenului „K"
„K' sunt
sunt 77
77 de
de
serotipuri (serovaruri).
serotipuri (serovaruri).
•* Antigenul
Antigenul solubil
solubil este
este endotoxina.
endotoxina.
•* prin
prin reacţia
reacția de umflare aa capsulei
de umflare capsulei se
se determină prezenţa
determină prezenţa
antigenului K
antigenului
 Caractere de
Caractere de patogenitate
patogenitate
•* nu
nu se
se efectuează de rutină
efectuează de rutină

•* K. pneumoniae inoculată
K. pneumoniae inoculată la la şoareci
şoareci intraperitoneal
intraperitoneal
sau
sau subcutan
subcutan determină
determină septicemie
septicemie mortală
mortală
• Pe
Pe lângă
lângă tipurile
tipurile de
de Klebsiella
Klebsiella saprofite,
saprofite, se se pot
pot
întâlni şi
întâlni şi specii
specii patogene
patogene pentru
pentru om om care
care produc:
produc:
pneumonii,
pneumonii, bronşite,
bronşite, pleurezii,
pleurezii, infecţii
infecţii urinare,
urinare,
otite, meningite,
otite, meningite, colecistite.
colecistite.
• Uneori
Uneori potpot da
da infecţii
infecţii intraspitaliceşti.
intraspitaliceşti.
• Speciile cele
Speciile cele mai
mai întâlnite sunt:
întâlnite sunt:
• Klebsiella pneumoniae
Klebsiella pneumoniae care care este
este specia
specia cea
cea mai
mai
întâlnită înîn afecţiunile
întâlnită afecțiunile pulmonare,
pulmonare, urinare,
urinare,
nosocomiale,
nosocomiale,
• Klebsiella rhinoscleromatis
Klebsiella rhinoscleromatis
• ozenae pot
Klebsiella ozenae
Klebsiella pot să
să dea
dea afecţiuni
afecţiuni înîn sfera
sfera ORL.
ORL.
 GENUL PROTEUS
GENUL PROIEUS
P.P. vulgaris
vulgaris
P.P. mirabilis
mirabilis
P.P. penneri
penneri
P.P. myxofaciens
myxofaciens
Produs patologic
Produs patologic
-- fac
fac parte
parte din
din microflora
microflora tubului
tubului digestiv,
digestiv, produc
produc diferite
diferite
infecţii în condiţiile
infecţii în condiţiile scăderii
scăderii rezistenţei
rezistenţei organismului.
organismului.

oinfecţii urinare
oinfecţii urinare —– urină
urină
oinfecţii nosocomiale
oinfecţii nosocomiale (plăgi postoperatorii şi
(plăgi postoperatorii şi arsuri
arsuri
suprainfectate) —– secreţie
suprainfectate) secreție din plagă
din plagă
oinfecţii ORL
oinfecţii ORL (sinuzite, otite) —– puroi
(sinuzite, otite) puroi
osepticemie —– sânge
osepticemie sânge
omeningite —– LCR
omeningite LCR
oinfecţii digestive
oinfecţii digestive (mai rare) —– materii
(mai rare) materii fecale
 GENUL PROTEUS
GENUL PROIEUS
•e 1. ]. Examen
Examen direct
direct
-- se practică doar
se practică doar din
din produse
produse biologice
biologice în mod normal
în mod normal sterile
sterile

-- bacili
bacili Gram
Gram negativi,
negativi, polimorfi,
polimorii, cu
cu cili
cili
peritrichi, necapsulaţi,
peritrichi, necapsulaţi, nesporulaţi
nesporulați

•e 2. 2. Izolare
Izolare
pe geloză
-- pe geloză simplă,
simplă, pe
pe geloză
geloză sânge
sânge

pe medii
-- pe medii selective
selective şi
şi diferenţiale pentru enterobacterii:
diferenţiale pentru enterobacterii: MacConkey,
MacConkey,
Leifson
Leifson
-- geloză
geloză lactozată
lactozată
 GENUL PROTEUS
GENUL PROIEUS
• 3, Identificare
3. Identificare d S- ' E i
- caractere morfotinctoriale
caractere morfotinctoriale . cet Pa
- caractere de
caractere de cultură
cultură SS, ) î
€ | + 4
ope medii
ope medii fără
fără bilă
bilă su mt
= Pa = săi
• fenomenul
fenomenul de căţărare:
de cățărare: colonii cu caracter invadant, margini
colonii cu caracter invadant, margini
dantelate ce
dantelate ce pot acoperi toată
pot acoperi toată suprafaţa
suprafaţa mediului.
mediului.
• fenomenul Dienes: dacă
fenomenul Dienes: dacă tulpinile
tulpinile provin
provin de la aceeaşi
de la aceeaşi specie
specie şi şi
sunt
sunt însămânţate
însămânţate pe pe aceeaşi placă, prin
aceeaşi placă, prin creştere
creştere sese suprapun,
suprapun, dacă dacă
tulpinile sunt
tulpinile sunt diferite
diferite rămâne
rămâne între ele o
între ele o zonă
zonă de
de demarcaţie
demarcaţie
ope medii
ope medii cucu bilă
bilă
= colonii
colonii de
de tip
tip S,
S, lactozo
lactozo negative
negative |
F,

= ochi
ochi de pisică (produc
de pisică (produc H
H>S)
2S)
 GENUL PROTEUS
GENUL PROTEUS

-- caractere
caractere biochimice
biochimice

ogeloză lactozată
ogeloză lactozată —– nu
nu fermentează
fermentează lactoza
lactoza
ope mediul
ope mediul SIMSIM
= H
H»S2S pozitiv
pozitiv
= mobilitate
mobilitate pozitiv
pozitiv
= indol
indol variabil
variabil
e P.
P. mirabilis:
mirabilis: indol
indol negativ
negativ
e P.
P. vulgaris:
vulgaris: indol
indol pozitiv
pozitiv
ope mediul
ope mediul TSITSI
= fermentează
fermentează glucoza
glucoza
= H
H»S2S pozitiv
pozitiv
= nu
nu descompune lactoza şi
descompune lactoza şi zaharoza
zaharoza
ope mediul
ope mediul Simmons
Simmons
= Simmons
Simmons pozitiv
pozitiv
ope mediul
ope mediul cu cu uree
uree
= urează
urează pozitiv
 GENUL PROTEUS
GENUL PROIEUS
-- Caractere
Caractere antigenice
antigenice
oprin reacţii
oprin reacţii de
de aglutinare
aglutinare cu
cu seruri
seruri anti
anti O,
O, anti
anti H
H

-- determinarea
determinarea patogenităţii
patogenităţii —– nu nu are
are importanţă
importanţă
practică
practică
•* Ei Ei se întâlnesc la
se întâlnesc la om
om caca germeni
germeni saprofiţi,
saprofiţi, dar
dar pot
pot
să
să provoace:
provoace: toxiinfecţii
toxiinfecţii alimentare,
alimentare, infecţii
infecţii
urinare,
urinare, otite,
otite, meningite,
meningite, septicemii
septicemii cucu evoluţie
evoluţie
gravă.
grava. Inoculaţi
lnoculaţi la la animale
animale de de laborator
laborator (iepure,
(iepure,
şoarece,
şoarece, cobai)
cobai) produc
produc în în câteva
câteva zile
zile oo septicemie
septicemie
mortală.
mortală.
•* Imunitatea
|lmunitatea este
este slabă.
slabă.
Tratamentul se
-- Tratamentul se face
face după
după antibiogramă,
antibiogramă, dar dar pentru
pentru
că
că apar
apar tulpini
tulpini rezistente
rezistente se se completează
completează cu cu
autovaccin
autovaccin şi şi bacteriofagi
bacteriofagi specifici.
specifici.
 Genul Shigella
Genul Shigella
Shigella dysenteriae
Shigella dysenteriae
Shigella flexneri
Shigella flexneri
Shigella boydi
Shigella boydi
Shigella sonnei
Shigella sonnei
Produs patologic
Produs (dizenteria bacilară):
patologic (dizenteria bacilară):
-- materii
materii fecale
fecale
oemise spontan
oemise spontan
orecoltate pe
orecoltate pe sondă,
sondă, de la purtători
de la purtători
-- vărsături
vărsături
-- alimente
alimente
-- de la purtători:
de la purtători: materii
materii fecale
fecale cu
cu sonda
sonda Nelaton
Nelaton
1. Examen
1. Examen direct
direct nu se practică
nu se practică
2. Izolarea
2. Izolarea
pe medii
-- pe medii selective
selective şi
şi diferenţiale pentru enterobacterii:
diferenţiale pentru enterobacterii:
Leifson, MacConkey,
Leifson, MacConkey, SS SS
-20-
-20-
 Genul Shigella
Genul Shigella
Ident ifiicare
•- 3.3. Identificare
entif p” E 4.
-- caractere
caractere morfotinctoriale
morfotinctoriale 9 "A
negativi, neciliaţi,
. 1. . + 1. . . | E
obacili Gram
obacili Gram negativi, neciliați, (pr
A ,
necapsulaţi,
necapsulaţi, nesporulaţi
nesporulați $
la
|
|

-- caractere
caractere de de cultură
cultură N] 7 C
ocolonii de
ocolonii de tip
tip S,
S, mici,
mici, transparente,
transparente... . e
ÎN ! VE (e
lactozo negative
lactozo negative 4"
+
$
 Genul Shigella
Genul Shigella
-- caractere
caractere biochimice
biochimice
ope mediul
ope mediul MILF
MILF
= mobilitate
mobilitate negativ
negativ
= indol
indol variabil
variabil
ope mediul
ope mediul TSI
TSI
= fermentează
fermentează glucoza
glucoza (gaz-)
(gaz-)
= HH»S negativ
2S negativ

= nu
nu descompune lactoza şi
descompune lactoza şi zaharoza
zaharoza
ope mediul
ope mediul Simmons
Simmons
= Simmons
Simmons negativ
negativ
ope mediul
ope mediul cucu uree
uree
urează negativ
= urează negativ

identificare antigenică
-- identificare antigenică (Ag
(Ag somatic
somatic OO sisi Ag. Solubile —–
Ag. Solubile
endotoxina)
endotoxina)
oreacţii de
oreacţii aglutinare pe
de aglutinare pe lamă
lamă cu
cu seruri
seruri specifice
specifice de
de grup
 Caractere de
Caractere de patogenitate
patogenitate
•* testul
testul keratoconjunctivitei
keratoconţunctivitei la cobai —– testul
la cobai testul Sereny
Sereny
• Au
Au caracter
caracter de de multiplicare
multiplicare şi şi toxigeneză,
toxigeneză, acţionează
acţionează
la
la nivelul
nivelul sigmoidului
sismoidului provocând
provocând ulceraţii
ulceraţii superficiale.
superficiale.
• în dizenteria
în dizenteria dată
dată dede Shigella
Shigella apar
apar trei
trei simptome
simptome ce ce
constituie sindromul
constituie sindromul dizenteric
dizenteric (scaune
(scaune sanghinolente
sanghinolente
şi
şi mucoase,
mucoase, colici
colici abdominale,
abdominale, tenesme).
tenesme).
• In
In general
general boala
boala evoluează
evoluează cronic,
cronic, uneori
uneori pe pe fondul
fondul
unei
unei rezistenţe
rezistenţe scăzute
scăzute daudau recidive.
recidive.
• La
La copii
copii este
este cea
cea mai
mai gravă
gravă dizenterie.
dizenterie. Răspunsul
Răspunsul
imun este
imun este foarte
foarte slab.
slab.
• Tratamentul se
Tratamentul se face
face conform
conform antibiogramei.
antibiogramei.
• în ţara
în ţara noastră
noastră sese face
face unun tratament
tratament specific
specific cucu un
un
vaccin viu
vaccin viu nepatogen,
nepatogen, VADIZEN
VADIZEN produs
produs de de Institutul
Institutul I.|.
Cantacuzino,
Cantacuzino, cu cu rezultate
rezultate promiţătoare,
promițătoare, imunitatea
imunitatea
durand 6-12
durand 6-12 luni.
 GENUL SALMONELLA
GENUL SALMONELLA
5. enterica,
S. enterica, subspecia
subspecia enterica
enterica
serogrupuri: S.
serogrupuri: S$. fyphi, S. paratyphi
typhi, S. paratyphi A,
A, B, S$. enteritidis
B, S. enteritidis

Produs patologic
Produs patologic
-- în febra tifoidă
în febra tifoidă
ode la
ode la bolnavi:
bolnavi:
în prima
= în prima săpt.
săpt. —– sânge
sânge
= în Il-a săpt.
în aa II-a săpt. —– materii
materii fecale,
fecale, bilă,
bilă, suc
suc duodenal
duodenal
= în III-a săpt.
înaa III-a săpt. —– materii
materii fecale,
fecale, sânge
sânge pentru
pentru serodiagnostic
serodiagnostic
= în IV-a săpt.
înaa IV-a săpt. -- sânge
sânge pentru
pentru serodiagnostic
serodiagnostic
ode la
ode la purtător:
purtător: materii
materii fecale
fecale după
după administrarea
administrarea unui purgativ, bilă
unui purgativ, bilă
-- în gastroenterite —– materii
în gastroenterite materii fecale,
fecale, vărsături,
vărsături, alimente
alimente
-- în septicemii —– sânge
în septicemii sânge
1.Examen
1. Examen direct: direct: nu se efectuează
nu se efectuează
2.Izolare
2.Izolare
-- pe
pe medii
medii de de îmbogăţire
îmbogăţire
pe medii
-- pe medii selective
selective şi şi diferenţiale
diferențiale pentru
pentru enterobacterii
enterobacterii (MacConkey,
(MacConkey,
Leifson, SS)
Leifson, $$)
-- pe
pe geloză
geloză sânge,
sânge, geloză
geloză lactozată
lactozată
 GENUL SALMONELLA
GENUL SALMONELLA
•* 3.
3. Identificare
Identificare
-- caractere
caractere morfotinctoriale
morfotinctoriale
•* o0 bacili
bacili Gram negativi, ciliaţi
Gram negativi, peritrichi, nesporulaţi,
ciliaţi peritrichi, nesporulaţi,
necapsulaţi
necapsulaţi
-- caractere
caractere de de cultură
cultură
ope geloză
ope sânge —– colonii
geloză sânge colonii dede tip
tip S,
S, mici,
mici, transparente
transparente
ope MacConkey,
ope Leiison —– colonii
MacConkey, Leifson colonii S,
S$, lactozo-negative
lactozo-negative
ope SS
ope SS -- colonii
colonii S,
$, lactozo-negative,
lactozo-negative, în ochi de
în ochi pisică
de pisică
 Caractere biochimice
Caractere biochimice
ope mediul
ope mediul SIM
SIM
= H
H»S2S pozitiv
pozitiv
= mobilitate
mobilitate pozitiv
pozitiv
= indol
indol negativ
negativ
ope mediul
ope mediul TSI
TSI
= fermentează
fermentează glucoza
glucoza
= H
H»S pozitiv
2S pozitiv
= nu
nu descompune lactoza şi
descompune lactoza şi zaharoza
zaharoza
ope mediul
ope mediul Simmons
Simmons
= Simmons
Simmons pozitiv
pozitiv
= pe
pe mediul
mediul cu uree -- urează
cu uree urează negativ
 Caractere antigenice
Caractere antigenice

Diagnostic serologic
Diagnostic serologic
-- în febra tifoidă-
în febra tifoidă- detectarea
detectarea şi şi titrarea
titrarea anticorpilor
anticorpilor faţă
faţă de
de
ag O,
ag O, ag
ag HH ale S. typhi
ale S. typhi şi
şi paratyphi
paratyphi A, A, BB (reacţia
(reacţia Widal)
Widal)
-- Antigenul
Antigenul solubil
solubil este
este endotoxina
endotoxina -un -un rol
rol patogen
patogen mult
mult maimai
important la
important la salmonelele
salmonelele cu cu caracter
caracter invaziv,
invaziv, deoarece
deoarece suntsunt
puse
puse în în circulaţie,
circulaţie, ducând
ducând la la generalizare
generalizare (febra
(febra tifoidă).
tifoidă).

Seruri aglutinante
Seruri aglutinante polivalente
polivalente OO Grup
Grup I| (A,
(A,
B,D,E,L)
B, D, E, L)
Grup IIIl (C,
Grup (C, F,
F, G,
G,H)
H)
o
pozitiv negativ

Seruri monovalente
Seruri monovalente Ser anti
Ser anti Vi
Vi
BO, DO,
AO, BO,
AO, etc!
DO, etc
serogrup
stabilire serogrup
stabilire

Seruri monovalente
Seruri monovalente H
H
stabilire serotip
stabilire serotip

27-
-27-
 Caractere de
Caractere de patogenitate
patogenitate
• multiplicare
multiplicare
• endotoxinogeneză,
endotoxinogeneză,
• pseudocapsulă (Ag
pseudocapsulă (Ag „Vi”)
„Vi') au
au şi şi caracter
caracter de de invazivitate
invazivitate (unele
(unele
tulp.)
tulp.)
• La
La omom salmonelozele
salmonelozele sunt sunt subsub douădouă forme
forme principale:
principale:
• 1.
1. boli
boli septicemice,
septicemice, cu cu evoluţie
evoluţie gravă gravă şi şi mortalitate
mortalitate ridicată,
ridicată,
cum
cum sunt:
sunt: febra
febra tifoidă
tifoidă (produsă
(produsă de de bacilul tific) şi
bacilul tific) şi febrele
febrele
paratifoide
paratifoide A, A, BB şi
şi CC (produse
(produse de de bacili
bacili paratifici
paratifici A, A, BB şi
şi C); în
C); în
acest
acest caz,caz, diagnosticul
diagnosticul este este bacteriologic
bacteriologic şi şi imunologic;
imunologic;
• 2.
2. boli
boli localizate,
localizate, maimai ales
ales lala nivelul
nivelul tubului
tubului digestiv
digestiv
(toxiinfecţiile alimentare
(toxiinfecţiile alimentare şi enteritele), cu
şi enteritele), cu o o durată
durată mai mai scurtă
scurtă
şi
şi de
de o o gravitate
gravitate maimai redusă,
redusă, iar iar diagnosticul
diagnosticul este este
bacteriologic.
bacteriologic.
imunitatea
Imunitatea
• Foşti
Foşti bolnavi
bolnavi de de febră
febră tifoidă
tifoidă şi şi paratifoidă
paratifoidă dobândescdobândesc o o
imunitate
imunitate destuldestul de de solidă,
solidă, care
care poate
poate dura dura toatătoată viaţa.
viaţa.
Imunitatea
Imunitatea în în toxiinfecţiile
toxiinfecţiile alimentare
alimentare şi şi aa enteritelor
enteritelor este este
slabă.
slabă.
• Imunitatea
Imunitatea antitifoparatifoidică
antitifoparatifoidică se se poate
poate dobândi
dobândi şi în mod
şi în mod
artificial, prin
artificial, prin vaccinare.
 Rezistenţa
Rezistenţa
•germeni
*oermeni rezistenţi;
rezistenți;
–în solul
—în solul păşunilor
păşunilor pot pot supravieţui
supravieţui pânăpână la
la 200
200 de
de
zile,
zile,
–în apă
—în apă câteva
câteva luni
luni
–în alimente
—în alimente între
între 1010 şi
şi 180
180 dede zile,
zile,
–în pulberile
—în pulberile de de ouă
ouă 4 4 ani.
ani.
•sensibile
“sensibile la la căldură
căldură
–distruse înîn 55 minute
—distruse minute la la 100°C;
100*C:;
•dezinfectantele
*dezinfectantele le le distrug
distrug în 30-120 de
în 30-120 de minute
 Yersinia enterocolitica
Yersinia enterocolitica

Produs patologic
Produs patologic
-- în gastroenterite -- materii
în gastroenterite materii fecale
fecale
-- în apendicite, limfadenopatii
în apendicite, mezenterice -- conţinut
limfadenopatii mezenterice conţinut apendicular,
apendicular,
ganglioni mezenterici
ganglioni mezenterici
-- în artrite septice
în artrite septice -- lichid
lichid sinovial
sinovial
-- sânge
sânge
1.Examen
1. Examen directdirect -- examen
examen microscopic
microscopic nu se practică
nu se practică
2.Izolarea
2.Izolarea
-- pe
pe geloză
geloză sânge
sânge
pe medii
-- pe medii selective
selective şi şi diferenţiale
diferenţiale pentru
pentru enterobacterii:
enterobacterii: Leifson,
Leifson,
MacConkey
MacConkey
3. Identificare
3. Identificare
-- caractere
caractere morfotinctoriale
morfotinctoriale
obacili Gram
obacili negativi, mici,
Gram negativi, mici, coloraţi bipolar, necapsulaţi,
colorați bipolar, necapsulaţi,
nesporulaţi,
nesporulaţi, ciliaţi
ciliați
-- caractere
caractere de de cultură
cultură
ope, mediul
ope mediul Leifson,
Leifson, geloza
geloza lactozata
lactozata- - colonii
colonii de
de tip
tip S,
S, mai
mai
mici ca
mici ca aa altor
altor enterobacterii,
enterobacterii, transparente,
transparente, lactozonegative
lactozonegative
ope geloză
ope sânge —– colonii
geloză sânge colonii de
de tip
tip S,
S, mici,
mici, mate,
mate, alb-cenuşii,
alb-cenuşii,
nehemolitice
 Caractere biochimice
Caractere biochimice
o pe
o pe mediul
mediul MILF
MILF
= mobilitate
mobilitate
e negativ
negativ la
la 37
37/* C
C
e pozitiv
pozitiv lala 30
30* CC
= indol
indol negativ
negativ
o pe
o pe mediul
mediul TSI TSI
= fermentează
fermentează glucoza
glucoza fără
fără producere
producere dede gaz
gaz
= HH2S2S negativ
negauv
= nu
nu descompune
descompune lactozalactoza
= descompune
descompune zaharozazaharoza
o pe
o pe mediul
mediul Simmons
Simmons
= Simmons
Simmons negativ
negativ
o pe
o pe mediul
mediul cu cu uree
uree
= urează
urează pozitiv
pozitiv
o pe
o pe geloză
geloză lactozată,
lactozată, Leifson,
Leifson, MacConkey
MacConkey
= nu
nu descompune
descompune lactozalactoza
-- identificare antigenică
identificare antigenică
o reacţii
o reacţii de de aglutinare
aglutinare pe pe lamă
lamă cucu seruri
seruri specifice
specifice de
de grup O3 3 şi
grup O şi O
Ov.9.
-- determinarea
determinarea patogenităţii
patogenităţii
nu are
o nu
o are importanţă practică
importanţă practică
-- antibiograma se
antibiograma se efectuează
efectuează
 Yersinia pestis
Yersinia pestis
• patogenă
patogenă pentru
pentru şobolan,
şobolan, se se dezvoltă
dezvoltă
în focare naturale,
în focare naturale, se se transmite
transmite de de lala un
un
animal la
animal la altul
altul prin
prin purici
purici (vectori),
(vectori), sau sau
prim
prim muşcătură
muşcâtură de de şobolan
şobolan (direct).
(direct).
• La
La om
om sese transmite
transmite prin prin muşcătura
muşcătura
şobolanului
şobolanului sau înţepătura puricelui.
sau înţepâtura puricelui.
• PESTA
PESTA sau
sau CIUMA,
CIUMA, mortalitate
mortalitate de de 95%
95%
şi
şi contagiozitate
contagiozitate foartefoarte mare.
mare.
• Diagnosticul
Diagnosticul de de laborator
laborator esteeste
bacteriologic,
bacteriologic, de de urgenţă.
urgenţă.
 Yersinia pestis
Yersinia pestis
Caractere morfologice
Caractere morfologice şi şi tinctoriale
tinctoriale
•* Sunt cocobacili Gram
Sunt cocobacili Gram negativi,
negativi, cu cu tendinţă
tendinţă
la
la coloraţie
coloraţie bipolară,
bipolară, cu cu lungimea
lungimea de de 1-2
1-2
pm şi
pm şi lăţimea
lăţimea de de 0,3-0,5
0,3-0,5 pm. pm.
•* sunt
sunt dispuşi
dispuşi în în lanţuri
lanţuri scurte,
scurte, prezintă
prezintă o o
capsulă,
capsulă, suntsunt nesporulaţi,
nesporulaţi, sunt sunt imobili.
imobili.
Caractere
Caractere de de cultură
cultură
•* Y.pestis
Y.pestis creşte
creşte uşor
uşor pepe mediile
mediile de de cultură,
cultură,
dar
dar temperatura
temperatura optimă optimă este este 28-33°
28-33" C, C,
•* pe
pe geloză
geloză simplă
simplă timptimp de de 4848 h,
h, colonii
colonii de de 1-1-
22 mm
mm (la(la 24
24 hh de
de 0,1-0,2
0,1-0,2 mm),mm), rotunde,
rotunde, cu cu
margini
margini uşoruşor franjurate,
franjurate, la început gri
la început gri cucu
centrul
centrul gălbui
gălbui şi şi bombat
bombat (pălărie
(pălărie
chinezească),
chinezească), iar iar pepe AABTL
AABIL sunt sunt lactozo
lactozo
negative, colonii
negative, colonii albastru-verzui.
 Yersinia pestis
Yersinia pestis
Caractere de
Caractere de rezistenţă
rezistenţă
•* puţin
puţin rezistentă
rezistentă în în mediul
mediul exterior,
exterior, rezistă
rezistă 2-3
2-3 săptămâni
saptamâni în în
produsele patologice,
produsele patologice, dar dar un
un anan pepe cadavre.
cadavre.
•* distrusă
distrusă de
de dezinfectante.
dezinfectante.
•+ sensibilă
sensibilă la:
la: tetraciclină,
tetraciclină, cloramfenicol,
cloramfenicol, streptomicină.
streptomicină.
Caractere antigenice
Caractere antigenice
•* Prezintă
Prezintă antigene
antigene somatice:
somatice: de de perete
perete „O”, capsular şi
„O, capsular şi
antigene solubile,
antigene solubile, endotoxina.
endotoxina.
•* se
se eliberează
eliberează dupădupă moartea
moartea bacteriei.
bacteriei.
Caractere de
Caractere de patogenitate
patogenitate
•+ Se
Se manifestă
manifestă prin prin multiplicare
multiplicare şi şi invazivitate
invazivitate date
date de
de
antigenul capsular.
antigenul capsular.
•* se
se manifestă
manifestă mai întâi prin
mai întâi prin apariţia
apariţia unei unei vezicule,
vezicule, lala locul
locul
înţepăturii, apoi
înţepăturii, apoi ajunge
ajunge în în ganglionii
ganglionii vegetativi,
vegetativi, apare
apare o o
adenopatie (bubon),
adenopatie (bubon), germenii
germenii se se vor
vor multiplica
multiplica în sânge, pot
în sânge, pot
da
da oo septicemie
septicemie (pesta)
(pesta) cucu evoluţie
evoluţie foarte
foarte rapidă,
rapidă,
•* mortalitatea
mortalitatea în în pesta
pesta bubonică
bubonică este este dede peste
peste 75%.
75%. Infecţia
Infecția
poate
poate ajunge
ajunge în în pulmon,
pulmon, apare
apare pesta
pesta pulmonară,
pulmonară, în în acest
acest
caz
caz bolnavul
bolnavul esteeste contagios
contagios prin
prin picăturile
picăturile Pflugge.
Pflugge.
Germene
Germene Boala
Boala Produs patologic
Produs patologic Examen direct
Examen direct Izolare
Izolare
-
- infecţii
infecții digestive
digestive materii fecale,
- materii bilă
fecale, bilă din materii
din materii -- pe
pe medii
medii selective
selective
E.
E. coli
coli alimente, vărsături
-- alimente, vărsături fecale nu
fecale nu se
se şi
şi diferenţiale
diferenţiale
efectuează
efectuează pentru
pentru
a
-- Infecţii -_ urină
ină examen
cCxXaIMcen .
Infecţiu urinare
urinare urina enterobacterii:
enterobacterii:
| _ -i puroi MICITOSCOPIC
microscopic
-- infecţii
infecţii puroi p MacConkey,
MacConkey,
tegumentare,
tegumentare, Leifson, Levine
Leifson, Levine
suprainfecţii
suprainfecţii -- geloză
geloză lactozată
lactozată
de plăgi
de plăgi -- pe geloză
pe geloză sânge
sânge
-- meningite
meningite -- LCR
LCR -- bulion
bulion
-- Septicemii
Septicemii -- sânge
sânge

Genul
Genul -_j infecţii
infecțiiii digestive
diset
digestive -- spută,
spută,ă secreţii
secrețiiLI -_ se efectuează—_
se efectuează pepe geloză,
-|- pe 8 geloză, „8geloză
geloză
nazale sânge, geloză
Klebsiella
Klebsiella nazale doar
doar oz
lactozată
lactozată
-- materii
materii fecale,
fecale,
din produse
din produse
patologice
patologice -- pe
pe medii
medii selective
selective
bilă,
bilă, vărsături,
vărsături, norma
normal şi
şi diferenţiale
diferenţiale
alimente
alimente Sterile
Sterile pentru
pentru
-- infecţii
infecţii urinare
urinare -- urină
urină —– în
în infecţii
infecţii
enterobacterii:
enterobacterii:
urinare
urinare
MacConkey,
MacConkey,
-- infecţii
infecţii -- puroi
puroi
tegumentare,
tegumentare, Leifson
Leifson
suprainfecţii
suprainfecții
plăgi
de plăgi
de
-- meningite
meningite -- LCR
LCR
-- în septicemii
în septicemii -- sânge
sânge
 - infecţii
infecţii urinare
urinare (P.
(P. - urină
urină „U Sa _
Genul
Genul Di | practică doar
se practică
-- se pe geloză
doar|- - pe geloză simplă,
simplă,
vulgaris)
mirabilis, vulgaris)
mirabilis, | LA
Proteus
Proteus din produse
din produse pe geloză sânge
pe geloză sânge
- infecţii
infecţii nosocomiale
nosocomiale ia
- secreţie di plagă> A
4 secreție din
din plagă biologice în
biologice în -- pe
pe medii
medii
(plăgi
lăgi postoperatorii
postoperatorii
(plăgi postop mod normal
mod normal selective
selective şi
şi
şi1 arsuri
arsuri
Ş sterile
sterile diferenţiale
diferențiale
suprainfectate)
suprainfectate)
| bacili Gram
-- bacili Gram pentru
pentru
Ş puroi
- puroi .
- infecţii
infecţii ORL
ORL negativi, enterobacterii:
enterobacterii:
negativi,
otite
sinuzite, otite)
(sinuzite, | MacConkey,
( cu
polimorfi, cu
polimorfi, MacConkey,
- sânge
sânge EEE Leifson
septicemie
- septicemie LCR cili peritrichi,
cili peritrichi, Leifson
- LCR
.: necapsulaţi,
necapsulați, _ _
meningite
- meningite
- fecale
materii fecale
materii psulaţ -- geloză
geloză lactozată
lactozată
nesporulaţi
nesporulaţi
- infecţii
infecții digestive
digestive (mai
(mai
rare)
rare)

fecale
materii fecale
- materii tică
: SI | - nu se practică
- nu se practică Ș
Shigella
Shigella dizenteria bacilară
-- dizenteria bacilară o spontan
emise spontan
o emise p -pe medii
-pe medii
dysenteriae
dysenteriae o recoltate pe
o recoltate pe sondă,
sondă, selective şi
selective şi
la purtători
de la
de purtători diferenţiale
diferențiale
- vărsături,
vărsături, alimente
alimente pentru
pentru
la purtători:
de la
- de purtători: enterobacterii:
enterobacterii:
Leifson,
Leifson,
materii fecale
materii fecale cu
cu
MacConkey, SS
MacConkey, SS
sonda Nelaton
sonda Nelaton
 febra tifoidă
-- febra tifoidă -- de
de la
la bolnavi:
bolnavi: n se
nu se _|-- pe
pe medii
mediide de
_ | J _ efectuează
electuează | , Lu
o în
o prima săpt.
în prima săpt. —– sânge
sânge îmbogăţire
îmbogăţire
Genul
Genul o în
o II-a săpt.
în aa II-a săpt. —– materii
materii pe medii
- pe medii
Salmonella fecale, bilă, suc
fecale, bilă, suc duodenal
duodenal selective
selective
Salmonella
o în
o III-a săpt.
în aa III-a săpt. —– materii
materii
şi
fecale, sânge
fecale, sânge
pentru serodiagnostic
pentru serodiagnostic diferenţiale
diferențiale
o în
o IV-a săpt.
în aa IV-a săpt. -- pentru
pentru
pentru
sânge pentru
sânge enterobacte
enterobacte
serodiagnostic
serodiagnostic rii
rii
de la
- de purtător:
la purtător: (MacConke
(MacConke
o materii
o fecale după
materii fecale după Leifson
y, Leifson,
administrarea unui
administrarea unui Y i
purgativ, bilă
purgativ, bilă SS)
SS)
-- în
în gastroenterite materii fecale,
gastroenterite - materii fecale, vărsături,
vărsături, - pe geloză sânge
pe geloză sânge
alimente
-- în septicemii
în septicemii a mente - geloză
geloză lactozată
lactozată
sânge
- sânge

Yersinia -- gastroenterite
gastroenterite materii fecale
- materii fecale -- examen
examen pe geloză
- pe geloză sânge
sânge
Yersinia
„__|-- apendicite,
apendicite, - conţinut
conținut apendicular,
apendicular, ganglioni
ganglioni | micros
micros pe medii
- pe medii
enterocoli
enterocoli Ş mezenterici
mezenterici
limfadenopati
limfadenopatii COpIC
copic selective
selective şi
şi
tica
tica
mezenterice
mezenterice nu se
nu se diferenţiale
diferenţiale
-- artrite
artrite septice
septice - lichid
lichid sinovial
sinovial practică|
practică pentru
pentru
-- Meningite - LCR
Meningite c enterobacter
enterobacter
ii: Leifson,
ii: Leifson,

MacConkey
MacConkey
Germene
Germene
Identificare
Identificare

Caractere
Caractere biochimice
Caractere biochimice
Caractere Reacţii
Reacţii Ag-Ac,
Ag-Ac,
Caractere de
de de
caractere de
caractere
morfotincto-
morfotincto- Caractere
:
riale Cultură
Cultură GL SIM TSI Sim! Meu patogenitate, :
riale
GL SIM TSI Simm M. cu patogenitate,
(gel ons | uree
ons uree | lizotipie,
Lizotipie,
(gel
H2S I Mo G L,Z H2S antibiogramă,
antibiogramă,
H25| 1 (Mo| G |LZ|H2S
oză_
oza
etc.
etc.
lacto
lacto
zată)
zată)
+
+ -- H+ ++ +
+ + |- -
+ - --
-- bacili
bacili -- g. sg. —– colonii
g sg. colonii identificare
identificare
gram
gram S,, „a
coli
E. coli
E. N antigenică
antigenică
negativi,
negativi, mici, alb-
MICI, alb- _
-- reacţii
reacţii de
de
cu
cu cenuşii,
CENUȘII, pe
aglutinare pe
aglutinare
capete
capete hemoliză
hemoliză lamă,
lamă, cu
cu
rotunjite,
rotunjite, (urină)
(urină) seruri
seruri

cili
cu cili
cu g.1.—
-- g. colonii
l.– colonii polivalente,
polivalente,

peritrichi, |
peritrichi, mici
S, mici
S, apoi
apoi

-- necapsula
necapsula |.
- Leifson
Leifson, monovalente
monovalente
(i,ţi, EPEC,
EPEC,
nesporula |
nesporula MacConkey
MacConkey
ţţii _ EIEC,
EIEC,
S,
colonii S,
-- colonii EHEC,
EHEC,
mici
mici serotipul
serotipul
0157
O157
Levine —– colonii
-- Levine colonii -- se
se
caracteristice,
caracteristice, efectuează
efectuează
antibiogra
antibiogra
mov inchis,
mov inchis, cu
cu ma
ma
luciu
luciu metalic
metalic
 Identificare
Identificare
Germene
Germene
Caractere
Caractere Caractere
Caractere Caractere biochimice
Caractere biochimice
. de
de
morfotincto-
morfotincto- Reacţii
Reacţii Ag-Ac,
Ag-Ac,
riale cultură
cultură
riale caractere de
caractere de
, patogenitate,
patogenitate,
GL
GL SIM
SIM TSI
TSI Simm M.cu|
Simm| M. cu
lizotipie,
lizotipie,
(geloză
(geloză ons
onNs uree
uree N U

II |Mo|GG
Mo |L/Z|H:S
L,Z H2S antibiogramă,
antibiogramă,
lactozată | H
lactozată H»S
2S
etc.
etc.
))
L I | identificare
identiiicare
+
+ -- +
+ -- +
+ +
+ -- +
+ +
+ |
Genul Col. Gram:
Col. Gram: Colonii de
Colonii up
de tip antigenică prin
antigenică -- prin
Genul M -
cocobacili,
cocobacili, M ” r. de
r. de umflare
umflare aa
Klebsiella | Gram
Klebsiella negativi, |
Gram negativi, (mucoase)
(mucoase) lei
în diplo capsulei se
capsulei se
în diplo,
încapsulaţi,
încapsulaţi, determină
determină
prezenţa
prezenţa

antigenului K
antigenului K

imobili determinarea
determinarea
imobili,
| t itătii-
nesporulaţi patogenităţii-nu
pa ogenităţii-nu
nesporulaţi se
efectuează
efectuează de de
Col. negativă
Col. negativă rutină
rutină
K. pneumoniae
K. pneumoniae
inoculată
noculată
la şoareci
la şoareci
intraperitoneal
intraperitoneal
sau subcutan
sau subcutan
determină
determină
septicemie
septicemie
mortală
mortală
antibiograma se
antibiograma se
Germene
Germene Identificare
Identificare

Caractere
Caractere Reactii As-A
morfotinct | Caractere de
Caractere de Caractere biochimice
Caractere biochimice Reacţii
eacții Ag-Ac,
Ag-Ac,
morfotinct
0- riale cultură
cultură caractere de
caractere de
o- riale
«| patogenitate,
patogenitate,
GL SIM TSI Simm M.
GL SIM ISI Sim A
cu lizotipie
lizotipie,
(gel
(gel | E2S|
H 2 S T
I I | Mo
Mo G
G ȚLZ|H:S!
L,Z H 2 S ons
ons pie
ure€! antibiogramă
uree antibiogramă
oză
oză
,„etc.
etc.

TIR IL NE
lact
ozat
ozat
ă)
ă)
-- ++ +
+ +
+ +
+ -|- +
+ [+
+ +
+
Genul
Genul --_ bacili
bacili |pe medii
pe medii fără
fără bilă
bilă identificare
identificare
Gram -E antigenică-r.
Proteus
Proteus Gram _ fenomenul antigenică-r.
- fenomenul
negativi,
negativi, de aglutinare
de aglutinare
polimorf
polimorf de
de cu seruri
cu seruri
1. cu
i, cu cili
cili căţărare
căţărare anti
anti O,O, anti
anu HH
i | lizotipia-în
lizotipia-în
-fenomenul
peritrichi,| “POMeNU
peritrichi, scop
scop
necapsul Dienes
necapsul Dienes pe
pe epidemiolog
epidemiolog
ci IC
ic
aţi,
aţi, medii
medii fără
fără bilă
bilă determinare
determinare
nesporul -|- colonii
nesporul colonii de
de aa
| | patogenităţii
patogenităţii
aţi
aţi up S,
tip $, –— nu
nu
lactozo
lactozo are importanţă
are importanţă
negative,
negative, practică
practică
de
ochi de
ochi antibiogra
antibiogra
pisică
pisică ma-
ma-
(produc
(produc obligatorie
obligatorie
H»5)
H 2S)
Germene
Germene Identificare
Identificare

Caractere]
Caractere Caractere
Caractere Caractere biochimice
Caractere biochimice Reacţii Ag-
Reacţii Ag-
de Ac, 9
morfotin
morfotin de i
Cto- Cultură
Cultură caractere
caractere
cto-
riale
riale GL|
GL SIM
SIM ISI
_ TSI Sim
Sim
m M.
M.
cu [e
de
H> 2 | II|Mo
H Hp]2
GIL,L, H
Mo G m Cu
(ge S Z S Ons ure
(ge | S 4 |S |Ons| ure patogenitat
patogenitat
loz ee
lo [| [| [| e, lizotipie,
e, lizotipie,
ă
a antibiogra
antibiogra
lact mă,
lact etc.
mă, etc.
oza
oza
tă)
tă)
bacili
bacili -- - +
E - r
+ - - - --
Shigella | Gram
Shigella Gram colonii de
colonii de tip
tip identificare
identificare
S, -” antigenică-
antigenică-
negativ | - .
dysenteria | negativ
dysenteria
ee MICI,
mici, r. de
r. de
I,i, _ aglutinare
aglutinare
transparent
transparent pe lamă
pe lamă
neciliaţ
neciliaţ e cu seruri
cu seruri
e,
i,i specifice
specifice
lactozonega
lactozonega de grup
de grup
necaps
necaps determinar
determinar
| uve
tive ea
ea
ulaţi,
ulaţi, patogenităţ
patogenităţ
nespor
nespor ii-testul
ii-testul
p keratoconju
keratoconju
ulaţi
ulați nctivitei la
nctivitei la
cobai —–
cobai
testul
testul
Sereny
Sereny
 Identificare
Identificare
Germene
Germene
Caractere
Caractere Caractere de
Caractere de Caractere biochimice
Caractere biochimice Reactii Ag-A
Reacţii
eacţii Ag-Ac,
Ag-Ac
morfotincto
morfotincto cultură
cultură fi Ag-Ac,
riale caractere de
caractere de
- riale
patogenitate,
patogenitate,
lizotipie,
lizotipie,
GL
GL SIM
SIM TSI
TSI Simm| M.
Simm cu
M. cu
(gel uree antibiogramă,
ons | uree
ons antibiogramă,
(gel
| oză„ 1ES|
H 2S Mo
I1 | Mo g
G L,Z Es
L,Z H2S etc.
etc.
oză
lacto
lacto
zată
zată
))

bacili Gram
bacili Gram -|- g. SE —– colonii
E. sg colonii -|” +
Pt- + + - + +
+ -- Identificare
Identificare
de antigenică-r.
Genul
Genul negativi,
negativi, N antigenică-r.
tip
Up S,5, mici,
Mic, :
de aglutinare
de aglutinare
Salmonella
Salmonella ciliaţi
ciliaţi
transparen
transparen cu
Cu seruri
serurl
peritrichi,
peritrichi, |
, te
te mono si
mono SI
nesporulaţi,
nesporulaţi, MacConk polivalente
polivalente
MacConkey,
-- MacConkey, , |
necapsulaţi
necapsulaţi Lit Diagnostic
Diagnostic
eifson —–
Leifson
serologic-în
serologic-în
colonii S,
colonii $,
febra
febra tifoidă-
tifoidă-
lactozo-
lactozo-
detectarea
detectarea şi
şi
negative
negative
S titrarea
titrarea
SS --colonii
-- SS $,
colonii S, | |
anticorpilor
anticorpilor
lactozo-
lactozo-
ve. faţă
faţă de ag O,
de ag ag
O, ag
negative, în
negative, în
S H ale
H typhi
S. typhi
ale S.
ochi de
ochi pisică
de pisică
şi
ŞI paratyphi
paratyphi A,
A,
B (reacţia
B (reacţia
Widal)
Widal)
 Identificare
Identificare
Germene
Germene
Caractere
Caractere Caractere de
Caractere de Caractere biochimice
Caractere biochimice
morfotinct
morfotinct cultură
cultură Reacţii
Reacţii Ag-Ac,
Ag-Ac,
o0 caractere de
caractere de
-riale
-riale _ patogenitate,
patogenitate,
GL
GL SIM
SIM TSI
TSI Simm M.
Simm| M.
cu
cu |lizotipie,
lizotipie,
(gel
(gel ons
ons o
H>S|
H 2S I1 Mo|
Mo G
G |ILZIH»S
L,Z H2S uree
ure€| antibiogramă
antibiogramă
oză
ză
Ii | | [ ,, etc.
etc.
lact
lact
ozat
ozat
ă)
ă)
E bacili Gram
bacili Gram| -- mediul
mediul -- -II -Ii +
[a e+
a -Mă -ni A- +
+
Yersinia
Yersinia L Leifson,
Leifson, identificare
identificare
negauvi,
negativi, -- +
+ : .
enterocolitica
enterocolitica N MacConkey-
MacConkey- antigenicăreac
antigenicăreac
MICI,
mici, ţiiii de
d
col. de
col. de tip
tip ţi e
coloraţi
colorați aglutinare pe
aglutinare pe
| S, mai
S, mai mici
MICI lamă
lamă
bipolar,
bipolar, |
altor
ca aa altor
ca cu seruri
cu seruri
necapsulaţ
necapsulaţ e
specifice de
| enterobacteri
enterobacteri specifice | de
i,i, | grup O
grup O3 3 şi şi O
Ov.9.
i,i, .
nesporulaţ
nesporulaţ determinarea
determinarea
i transparente,
transparente, patogenităţii-
patogenităţii-
i,1, ciliaţi
ciliaţi nu are
nu are
lactozonegat
lactozonegat
importanţă
importanță
ive
ive .
practică
practică
pe g.
- pe sg. —–
e. sg. antibiogra
antibiogra
colonii de
colonii de ma
ma sese
efectuează
efectuează
up S,
tip S, mici,
mici,

mate, alb-
mate, alb-

cenuşii,
cenușii,
nehemolitic
nehemolitic
ee
FACULTATEA DE MEDICINĂ ŞI FARMACIE
UNIVERSITATEA “DUNĂREA DE JOS”, GALAŢI

Pseudomonas
aeruginosa
 Habitat
Habitat
Microorganism ubicuitar
Microorganism ubicuitar
-prezent in
-prezent in sol,
sol, pe
pe plante
plante
Afinitate pentru
Afinitate pentru apa
apa
-izolat din
-izolat din apa
apa de
de rau,
rau, canal,
canal, piscine,
piscine,
apa potabila,
apa potabila, minerala,
minerala, termala
termala
Contamineaza produsele
Contamineaza produsele alimentare
alimentare si
si farmaceutice
farmaceutice
-chiar daca
-chiar daca sunt
sunt stocate
stocate la
la frigider
frigider
Frecvent izolat
Frecvent izolat si
si din
din mediul
mediul spitalicesc
spitalicesc
-suprafete, instrumente,
-suprafete, instrumente, dispositive
dispositive medicale,
medicale,
solutii antiseptice,
solutii antiseptice, injectabile,
injectabile,
produse medicamentoase,
produse medicamentoase, cosmetice
cosmetice
Caractere morfotinctoriale
Caractere morfotinctoriale

Bacili Gram
Bacili Gram negativi
negativi
Dispus: izolat/
Dispus: izolat/ in
in perechi/
perechi/ lanturi
lanturi scurte
scurte
|
e
iq
Nesporulat
Nesporulat pr:

Prezinta un
Prezinta un cil
cil polar
polar
(ii confera
(ii confera mobilitate)
mobilitate)
 Caractere de
Caractere de cultura
cultura

Pe medii
Pe medii solide
solide
-colonii S
-colonii S (pigmentate
(pigmentate in in verde-albastrui)
verde-albastrui)
-coloniile au
-coloniile au reflexe
reflexe metalice,
metalice, L(-)
L(-)
-miros aromat
-miros aromat (tei,
(tei, salcam,
salcam, iasomie)
iasomie)
-B hemoliza
-β hemoliza
 7
i—. T
—— ra du Ie ma
Maryngol. 2017;83:201-6

A
shutterstock.com : 524153776
Colonii f hemolitice (geloză sânge)

i
e

|.
Mediul TSI — G-, L-, Z-

Colonii lactozo-negative (MacConkey agar)

Pe medii
Pe medii lichide
lichide
-pelicula fina
-pelicula fina la
la suprafata
suprafata
-sub pelicula
-sub pelicula se
se acumuleaza
acumuleaza un
un strat
strat de
de pigment
pigment
 Caractere biochimice
Caractere biochimice = h
-- Germene
Germene nefermentativ
nefermentativ
-- Oxidaza
Oxidaza pozitiv
pozitiv
-- Produce
Produce pigment
pigment
-piocianina (verde-albastruie)
-piocianina (verde-albastruie)
-pioverdina (galben-verzuie,
-pioverdina (galben-verzuie, fluorescenta,
fluorescenta,
solubila in
solubila in apa)
apa)
-10% din
-10% din tulpini
tulpini nu
nu produc
produc pigment
pigment
 Structura antigenelor
Structura antigenelor
Antigen somatic O
Antigen somatic O
-20 de
-20 de serotipuri
serotipuri
-06, O11
-O6, 011 celcel mai
mai frecvent
frecvent isolate
isolate in
in laborator
laborator
-O012 foarte
-O12 foarte rezistent
rezistent lala antibiotic
antibiotic
-Antigen flagelar
-Antigen flagelar HH
-Slime
-Slime
-substanta mucoida
-substanta mucoida extrasa
extrasa din din coloniile
coloniile mucoide
mucoide
ale tulpinilor
ale tulpinilor implicate
implicate in in infectiile
infectiile ale
ale tractului
tractului
respirator de
respirator de la
la pacientii
pacientii cu
cu fibroza
fibroza chistica
chistica
-factor de
-factor de adeziune
adeziune
 Raspuns imun
Raspuns imun
•+ Persoanele
Persoanele cu
cu sistem
sistem imun
imun integru
integru se
se apara
aaa fata
fata
de colonizarea
de colonizarea cu
cu P.
P. aeruginosa
aeruginosa prin
prin mecanisme
mecanisme
nespecifice -Fagocitoza
nespecifice -Fagocitoza
-Complement seric
-Complement seric

•* Apararea
Apararea nespecifica
nespecifica poate
poate fifi depasita
depasita
-ingestia sau
-ingestia sau inocularea
inocularea uneiunei cantitati
cantitati mari
mari de
de
germeni si
germeni si tulpini
tulpini foarte
foarte virulente
virulente
-infectia se
-infectia se instaleaza
instaleaza sisi se
se generalizeaza
generalizeaza inainte
inainte
ca organismal
ca organismal sa sa dezvolte
dezvolte un un raspuns
raspuns imun
imun
Caractere de
Caractere de patogenitate
patogenitate P = > >
Virulenta
Virulenta —————
-putin virulent
-putin virulent pt
pt organismal
organismal sanatos
sanatos
-devine virulent
-devine virulent ptpt cei
cei cu
cu imunitate
imunitate deprimata
deprimata
-asigurata de:
-asigurata de: capsula,
capsula, pili,
pili, lipopolizaharid
lipopolizaharid cu
cu
rol de
rol de endotoxina
endotoxina

Toxigeneza
Toxigeneza
-sintetizeaza substante
-sintetizeaza substante difuzibile
difuzibile cu
cu effect
effect toxic
toxic
(exotoxine, cititoxina,
(exotoxine, cititoxina, hemolizine,
hemolizine, elastase,
elastase,
colagenaze etc)
colagenaze etc)
 Patogenie. Boala la om

* În funcţie de poarta de intrare cauzează:

— infecţii cutanate
* Consecinţă a băilor în ape poluate
— Foliculită
— Piodermită
— Intertigo
— Otită ex

* În mediul spitalices
— infecţii ale plăgilor
» Chirurgicale, traumatice, ale escarelor sau a arsurilor
 Patogenie. Boala
Patogenie. Boala la
la om
om

• Infectii
Infectii iatrogene
iatrogene datorate
datorate ingrijirilor
ingrijirilor medicale
medicale sausau
manevrelor instrumentare
manevrelor instrumentare (otite,
(otite, meningite,
meningite,
endocardite, osteoartrite,
endocardite, osteoartrite, infectii
infectii urinare)
urinare)
• Bronhopneumonii-
Bronhopneumonii- frecventefrecvente la la pacientii
pacientii cu
cu alta
alta boala
boala la
la
baza
baza
• Infectii
Infectii digestive-
digestive- enterite
enterite (consum
(consum de de apa
apa contaminata)
contaminata)
• Infectii
Infectii oculare-
oculare- secundare
secundare interventiilor
interventiilor chirurgicale
chirurgicale
-- utilizarea
utilizarea de
de solutii
solutii de
de curatare
curatare a a
lentilelor de
lentilelor de contact
contact contaminate
 ——_".

Tratament
Tratament >
„0
DI
*
e
-- Pune
Pune serioase
serioase problem
problem terapeutice
terapeutice “mi
-- Favorizeaza
Favorizeaza raspandirea
raspandirea bacteriei
bacteriei in
in mediul
mediul de
de
spital
spital
Obligatoriu sub
Obligatoriu sub controlul
controlul antibiogramei!
antibiogramei!

Vaccinoterapia
Vaccinoterapia
-vaccin monovalent
-vaccin monovalent (pacientii
(pacientii cu
cu afectiuni
afectiuni
respiratorii cauzate
respiratorii cauzate dede P.P. aeruginosa)
aeruginosa)
-vaccine antipiocianic
-vaccine antipiocianic polivalent
polivalent (adm
(adm de
de ser
ser imun
imun
antipiocianic, la
antipiocianic, la pacientii
pacientii cucu arsuri
arsuri extinse)
 Genul
Acinetobacter
 Habitat
Habitat
•+ Specii
Specii ubicuitare
ubicuitare inin sol
sol si
si apele
apele de
de suprafata
suprafata
•+ Frecvent
Frecvent isolate
isolate in
in industria
industria alimentara
alimentara a a carnii
carnii
•* Ocazional
Ocazional inin microbiota
microbiota flotanta
flotanta aa tegumentului
tegumentului

Specii
Specii
•* A. baumanii
A. baumanii
•* A. lwoffii
A. Iwoffii
•* A. haemolyticus
A. haemolyticus
• A. calcoaceticus
A. calcoaceticus
Diagnostic bacteriologic
Diagnostic bacteriologic

-expectoratie, aspirat
-expectoratie, aspirat bronsic
bronsic
-Puroi
-puroi
-urina
-urina
-hemoculturi
-hemoculturi
-drenuri
-drenuri
-catetere
 dj

Caractere microscopice
Caractere microscopice 3 Se
n
Bacili Gram
Bacili Gram negativi
negativi -scurti,
-scurti, grosi,
grosi, pana
pana la
la cocoizi
cocoizi
-imobili
-imobili
-necapsulati
-necapsulati
- . r i
p" i / . î za * pa t -N +
Ei
3 i > % y » i

ie: e -
.. .
A. “ a
4
E o Lot - “ A *
= 3
a - * + d * / & % -* T
În a * a . ) dC x,
. că . d, p* . i "n"
Na “ 23: A 4
4 , $' =
* d + i - F be”
+
- *. 5 T i Ş & / N

g e . ab d > 7
s 4 Po y . *
Ş

Pop 2» LA a $ o
7 Si ț sa. î
să * .. pe. + pe af 9 bau
Fa - “A * SI alfa
N" 4 d» E &. DN - OPi OFierre-Edouar
Ed /
d FOURNIER/CNRS Ph otot hei
Po ile pi 23
E V * Pa! 8, DE 8 Je y
A 7 E a03 SP = î.
 Caractere de
Caractere de cultura
cultura

-colonii de
-colonii de tip
tip SS
-L(-) galben
-L(-) galben palid
palid sau
sau alb-gri
alb-ori
-nepigmentogeni
-nepigmentogeni
-unele specii
-unele specii produc
produc hemoliza tip β
hemoliza tip 3 pe
pe geloza-sange
geloza-sange
-oxidazo-negativi
-oxidazo-negativi
 i

Patogenitate
Patogenitate "i
Acinetobacter determina o o diversitate
Acinetobacter determina diversitate de
de___ E
infectii, mai
infectii, mai ales
ales inin sectiile
sectiile de de terapie
terapie intensive:
inte
-infectii respiratorii
-infectii respiratorii
-Factori de
-Factori de risc:
risc: varsta
varsta crescuta,
crescuta, boala
boala
pulmonara cronica,
pulmonara cronica, proceduri
proceduri chirurgicale,
chirurgicale,
canula endotraheala
canula endotraheala sau sau tub
tub gastric
gastric
-infectii ale
-infectii ale plagilor
plagilor si si arsurilor
arsurilor
-bacteriemii; infectii
-bacteriemii; infectii dede cateter
cateter
-meningite, infectii
-meningite, infectii oculare
oculare
-infectii tract
-infectii tract urinar
urinar
-endocardite (protezatii
-endocardite (protezatii valvulari)
valvulari)
Tratament
Tratament

Putine antibiotice
Putine antibiotice sunt
sunt active
active asupra
asupra
tulpinilor de
tulpinilor de Acinetobacter
Acinetobacter

Antibiobrama este intotdeauna

Antibiobrama este intotdeauna necesara!
Familia Bacillaceae,
Familia Bacillaceae, g.
gs. Bacillus
Bacillus

—– B.
B. anthracis
anthracis -antraxul
-antraxul la ierbivore și
la ierbivore și accidental
accidental la
la
om, agent
om, agent important
important alal bioterorismului;
bioterorismului;
—– B.
B. cereus -intoxicaţie alimentară
cereus -intoxicație alimentară și
și infecții
infecţii oculare
oculare
sau
sau cu alte localizări;
cu alte localizări;
 1. Bacillus
1. Bacillus anthracis
anthracis

Produse patologice:
Produse patologice:
-- înîn cărbunele
cărbunele cutanat
cutanat -- exsudat
exsudat dindin pustula
pustula
malignă;
malignă;
-- înîn cărbunele
cârbunele intestinal
intestinal -- materii
materii fecale;
fecale;
-- înîn cărbunele
cărbunele pulmonar
pulmonar -- spută;
spută;
-- înîn formele
formele septicemice
septicemice -- sânge;
sânge;
-- pentru
pentru diagnostic
diagnostic retrospectiv
retrospectiv -- fragmente
fragmente de
de
organe.
Carbune cutanat —– forma
Carbune cutanat forma buloasa
 Bacillus anthracis
Bacillus anthracis
Examen direct:
Examen direct:
-- frotiu
frotiu Gram:
Gram: bacili
bacili Gram
Gram pozitivi,
pozitivi, cu
cu capetele
capetele
drept) sau
retezate(taiate drept)
retezate(taiate sau uşor
uşor concave,
concave, asezaţi în
asezaţi în
lanţuri,
lanţuri, cu
cu aspect
aspect ce ce imită
imită trestia
trestia de
de bambus
bambus
-- prezintă
prezintă un un spor
spor central(in
central(in conditii
conditii nefavorabile,
nefavorabile,
mai mic
mai mic decat
decat dimensiunile
dimensiunile b.-nu
b.-nu deformeaza)
deformeaza)
-- înîn produsul
produsul patologic
patologic prezintă
prezintă capsulă
capsulă (comuna
(comuna
pentru tot
pentru tot lantul).
lantul).
•* Izolare:
izolare: germene
germene nepretenţios,
nepretenţios, poate
poate fi
fi cultivat
cultivat
pe:
pe: bulion;
bulion; geloză
geloză simplă;
simplă; geloză
geloză sânge
sânge
 •Frotiu
*Frotiu din
din amprenta
amprenta de de
splină
splină aa şoarecelui
şoarecelui
decedat după
decedat după 4848 ore
ore de
de la
la
inocularea suspensiei
inocularea suspensiei
bacteriene. Coloraţie
bacteriene. Coloraţie cucu
albastru de
albastru de metilen
metilen policrom
policrom
(1000x). Bacillus
(1000x). anthracis şi
Bacillus anthracis şi
celulele splenice
celulele apar coloraţi
splenice apar colorați
în albastru, iar
în albastru, iar capsula
capsula
colorată
colorată metacromatic
metacromatic în în roz.
roz.

Frotiu din
Frotiu din cultura
cultura de de 48
48 ore
ore pepe
agar nutritiv.
agar nutritiv. Bacili
Bacili gram-pozitivi
gram-pozitivi
mari (0,9
mari (0,9 micrometri/3-
micrometri/3-
8micrometri) aşezaţi
8micrometri) aşezaţi înîn lanţuri
lanţuri
arcuite, sporulaţi,
arcuite, sporulaţi, cu cu spor
spor oval
oval
situat central şi
situat central şi care
care nunu
deformează
deformează corpul
corpul bacteriei.
 Bacillus anthracis
Bacillus anthracis
Identificarea se
Identificarea se face
face pepe baza
baza caracterelor:
caracterelor:
•* morfotinctoriale:
morfotinctoriale: sunt sunt bacili
bacili Gram
Gram pozitivi,
pozitivi, mari (3-5 μm
mari (3-5 um lungime/1-1,2
lungime/1-1,2
μm
um grosime),
grosime), cu cu capetele
capetele tăiate
tăiate drept
drept sau
sau uşor
uşor concave,
concave, imobili.
imobili. Sporul
Sporul se
se
formeaza în
formeaza în prezenţa
prezenţa oxigenului,
oxigenului, are are diametrul
diametrul egalegal sau
sau mai
mai mic
mic decât
decât
grosimea
grosimea bacilului,
bacilului, este
este oval
oval şişi este
este dispus
dispus central;
central;
•* de cultură: este
decultură: este o o bacterie
bacterie aerobă
aerobă facultativ
facultativ anaerobă,
anaerobă, nepretenţioasă
nepretenţioasă
nutritiv,
nutritiv, se
se dezvoltă
dezvoltă pe pe medii
medii simple,
simple, lala 35-37°C.
35-37*C.
În lichid formează
mediu lichid
În mediu formează un un depozit
depozit floconos,
floconos, mediul
mediul rămâne
rămâne clar;
clar;
pe medii
pe solide se
medii solide se formează
formează coloniicolonii de
de tip
tip „R”
„R” cu
cu suprafaţa
suprafaţa rugoasă,
rugoasă, centrul
centrul
ombilicat,
ombilicat, margini
margini dantelate
dantelate cu cu prelungiri
prelungiri laterale
laterale (cap
(cap de
de Medusă);
Medusă); în în
geloză
geloză dreaptă
dreaptă apar apar creste
creste subsub forma
forma unuiunui brad
brad inversat.
inversat.
Pe geloza
Pe sânge nu
geloza sânge nu produce
produce hemoliză;
hemoliză;
•* biochimice:
biochimice: este este o o bacterie
bacterie catalază
catalază pozitivă,
pozitivă, nunu produce
produce urează.
urează.
Fermentează
Fermentează unele unele zaharuri
zaharuri (glucoza,
(glucoza, maltoza,
maltoza, zaharoza),
zaharoza), indolindol negativă.
negativă.
 •Bacillus
*Bacillus anthracis,
anthracis, detaliu
detaliu al
al
•Bacillus anthracis. Cultură
*Bacillus anthracis. Cultură dede 24
24 ore
ore pepe unei culturi
unei culturi de
de 24
24 ore
ore pepe agar
agar
agar nutritiv
agar nutritiv (1/1):
(1/1); nutritiv (x3).
nutritiv (x3). Aspectul
Aspectul de de "cap
"cap
colonii mari
colonii mari de
de 3 3 mm,
mm, aplatizate,
aplatizate, de
de tip
tip de meduză":
de meduză": periferia
periferia coloniei
coloniei
R.
R. examinată
examinată cu cu lupa
lupa apare
apare
înconjurată de
înconjurată de prelungiri
prelungiri
laterale ondulate
laterale ondulate precum
precum
şuviţele
şuviţele de de păr.
păr.
•Cultură
*Cultură de
de 24
24 ore
ore pe
pe agar
agar cucu 5%
5% sânge
sânge dede •Bacillus anthracis cultură
*Bacillus anthracis cultură dede 24
24 ore
ore pe
pe agar
agar cu
cu 5%
5%
berbec(1/1). Coloniile
berbec(1/1). Coloniile mari,
mari, sânge de
sânge de
berbec (x3).
berbec În această
(x3). În această imagine
imagine de detaliu observăm
de detaliu observăm
rugoase, alb-cenuşii,
rugoase, alb-cenuşii, turtite,
turtite, nehemolitice
nehemolitice
coloniile mari
coloniile mari cu
cu diametrul
diametrul dede 5
5 mm,
mm, alb-cenuşii,
alb-cenuşii,
aparţin
aparţin Bacillus
Bacillus anthracis
anthracis ((jos ); coloniile
jos ); coloniile cu
cu rugoase, cu
rugoase, cu aspect
aspect de "sticlă pisată".
de "sticlă pisată”.
morfologie asemănătoare,
morfologie asemănătoare, dar dar înconjurate
înconjurate de de
o zonă
o zonă largă
largă de beta-hemoliză aparţin
de beta-hemoliză aparţin
Bacillus cereus
Bacillus cereus (sus)
(sus)
 Structură
Structură antigenică
antigenică
-- componente
componente ale
ale complexului
complexului exotoxinic
exotoxinic (componenta
(componenta B):
B):
Exotoxina
Exotoxina esteeste determinată
determinată plasmidic
plasmidic constă
constă dintr-un
dintr-un
amestec de
amestec de trei
trei proteine
proteine imunogene:
imunogene: factorul
factorul edematos,
edematos,
factorul letal,
factorul letal, antigenul
antigenul protectiv
protectiv (componenta
(componenta B), B), capabil
capabil
să
să inducă
inducă producerea
producerea de de anticorpi.
anticorpi.
-- antigenul
antigenul capsular
capsular polipeptidic
polipeptidic (antigenul
(antigenul K): K): Toate
Toate
tulpinile
tulpinile virulente
virulente formează
formează un un singur
singur tip
tip de
de antigen
antigen
polipeptidic capsular
polipeptidic capsular (poli-D-glutamat)..
(poli-D-glutamat)..
-- antigenul
antigenul somatic
somatic polizaharidic
polizaharidic din din peretele
peretele celular,
celular,
responsabil de
responsabil de reacţia
reacţia de
de precipitare
precipitare în inel care
în inel care are
are loc
loc în
în
prezenţa
prezenţa anticorpilor
anticorpilor specifici
specifici (reacţia
(reacţia Ascoli).
 TRATAMENT
TRATAMENT
• Bacillus
Bacillus anthracis
anthracis esteeste sensibil
sensibil la la o
o gamă
gamă
largă
largă de
de antibiotice:
antibiotice: penicilină,
penicilină,
eritromicină,
eritromicină, tetraciclină.
tetraciclină.
• trebuie
trebuie să
să nene asigurăm
asigurâm că că tulpina
tulpina izolată
izolată
nu
nu este
este producătoare
producătoare de de β-lactamază.
f-lactamază.
• Cloramfenicolul
Cloramfenicolul poate poate fi fi de
de asemenea
asemenea util util
în terapia
în terapia acestei
acestei afecţiuni.
afecţiuni.
• Antibioticoterapia
Antibioticoterapia trebuie
trebuie să să fie
fie precoce
precoce şi şi
asociată
asociată în în formele
formele severe
severe cu cu serul
serul
anticărbunos.
anticârbunos.
 2.
2. Bacilul
Bacilul Cereus
Cereus
• Mobil
Mobil
• Neincapsulat
Neincapsulat
• Produce
Produce toxiinfectii
toxiinfectii alimentare
alimentare datorate
datorate
enterotoxinelor:
enterotoxinelor:
Termostabila (forma
Termostabila (forma emetica-
emetica- consum
consum dede
orez contaminat)
orez contaminat)
Termolabila (forma
Termolabila (forma diareica-
diareica- consum
consum dede
carne sau
carne sau vegetale
vegetale contaminate)
contaminate)
• Produce
Produce panoftalmia
panoftalmia oculara
oculara cu
cu pierderea
pierderea rapida
rapida
aa vederii
 Bacillus anthracis
Bacillus anthracis
•* Diagnostic
Diagnostic diferenţial
diferenţial faţă
faţă de
de alţi
alţi germeni
germeni din
din
genul Bacillus
genul Bacillus (B.
(B. cereus):
cereus):
-- sensibilitatea
sensibilitatea lala penicilină:
penicilină:
anthracis este
B. anthracis
B. este sensibil,
sensibil,
cereus este
B. cereus
B. este rezistent;
rezistent;

-- hemoliza:
hemoliza: B. anthracis nu
B. anthracis nu produce
produce hemoliză,
hemoliză,
cereus produce
B. cereus
B. produce hemoliză;
hemoliză;
 Rezistenţa
Rezistenţa faţă
faţă de
de factori
factori fizici
fizici şi
şi chimici
chimici

• Rezistenţa
Rezistenţa formelorformelor vegetative
vegetative este este similară
similară cu cu a a
celorlalte bacterii,
celorlalte bacterii, fiind
fiind distruse
distruse de de exemplu
exemplu în 30 de
în 30 de
minute la
minute 60“C căldură
la 60°C căldură umedă.
umedă.
• Sporii
Sporii suntsunt deosebit
deosebit de de rezistenţi
rezistenți la la acţiunea
acţiunea acizilor,
acizilor,
dezinfectantelor,
dezinfectantelor, radiaţiilor,
radiaţiilor, temperaturilor
temperaturilor înalte înalte (rămân
(rămân
viabili
viabili şi şi după
după fierbere
fierbere timp
timp de de câteva
câteva ore)ore)
• Supravieţuiesc
Supravieţuiesc câteva câteva săptămâni
săptămâni în în dezinfectantele
dezinfectantele pe pe
bază
bază de de fenol.
fenol. LaLa temperaturi
temperaturi de -5“C pot
de -5°C pot rezista
rezista până
până la la
10 ani.
10 ani.
• Sunt
Sunt distruşi
distruşi lala temperatura
temperatura de de fierbere
fierbere în în circa
circa 10
10 minute
minute şi şi
prin autoclavare.
prin autoclavare.
• ÎnÎn frotiuri fixate şi
frotiuri fixate şi colorate
colorate nu îşi pierd
nu îşi pierd viabilitatea
 Habitat
Habitat

•* intestinul
intestinul animalelor
animalelor şi
şi al
al omului,
omului,
•* eliminaţi
eliminaţi cu
cu materiile
materiile fecale
fecale ajung
ajung pe
pe sol
sol
GENUL
GENUL CLOSTRIDIUM
CLOSTRIDIUM
•* Endospori
Endospori
—– supravieţuiesc
supraviețuiesc timp îndelungat
timp îndelungat
—– unele
unele specii
specii chiar
chiar multiplicându-se în sol.
multiplicându-se în sol.

Caractere
Caractere morfo-tinctoriale
morfo-tinctoriale
•* bacili
bacili Gram
Gram pozitivi
pozitivi sau
sau Gram
Gram variabili,
variabili,
•* capetele
capetele rotunjite
rotunjite
•* corpul
corpul bacterian
bacterian deformat
deformat de de endosporul
endosporul mai
mai
mare
mare decât
decât corpul
corpul bacteriei
bacteriei
•* unele
unele specii
specii prezintă
prezintă capsulă
capsulă

RR ae
Caractere
Caractere de
de cultură
cultură
pas
ww
ei Clostridium
Clostridium difficile,
difficile, geloză
sânge,incubare18ore,37€
sânge,
geloză
incubare 18 ore, 37 C 0

• medii
medii uzuale,
uzuale,
•* incubate
incubate la
la 37°C, în anaerobioză
37*C, în anaerobioză
•* cresc
cresc lent
lent
•* colonii
colonii SS (unele
(unele specii
specii au
au caracter
caracter invaziv)
invaziv)
•* geloza
geloza sânge
sânge -- majoritatea
majoritatea speciilor
speciilor produc
produc
hemoliză beta.
hemoliză beta. Clostridium
Clostridium perfringens,
perfringens, geloză
geloză
sânge, incubare
incubare 18
18 ore,
ore, 37
37 C
€
0
sânge,

1
 Rezistenţa
Rezistenţa faţă
faţă de
de factori
factori fizici,
fizici, chimici,
chimici, biologici
biologici (sporii)
(sporii) Specii
Specii de
de interes
interes medical
medical
•* Clostridiumtetani
Clostridiumtetani -- tetanos;
tetanos;
Agentul fizic/chimic
Agentul fizic/chimic Timp de
Timp de
supravieţuire
supravieţuire •* Clostridiumbotulinum
Clostridiumbotulinum -- botulism;
botulism;
fierbere
fierbere 5 minute
5 minute •* Clostridiile
Clostridiile gangrenei gazoase ::
gangrenei gazoase
—– C.perfringens,
C.perfringens,
105*C, căldură
105°C, căldură umedă
umedă 30 minute
30 minute
-– C.histolyticum,
C.histolyticum,
glutaraldehi
glutaraldehi da,
da, dezinfectanţi
dezinfectanţi pepe bază
bază 2-3 ore
2-3 ore —– C.septicum,
C.septicum,
de halogeni
de halogeni —– C.oedematiens
C.oedematiens
formaldehidă, derivaţi
derivați fenolici
formaldehidă, fenolici 4-5 zile
4-5 zile •* Clostridium
Clostridium difficile
difficile
mediul
mediul extern,
extern, feriţi
feriţi de
de raze
raze solare,de
solare,de zeci de
de ani
ani
—– sindroame
sindroame diareice
diareice post-antibioterapie
post-antibioterapie
zeci
umezeală
umezeală —– enterocolita
enterocolita pseudomembranoasă
pseudomembranoasă

Clostridium
Clostridium tetani
tetani
habitat
habitat

•* ÎnÎn stare
stare vegetativă
vegetativă -- înîn intestinul
intestinul omului
omului şi
şi al
al
animalelor
animalelor -- cu
cu materiile
materiile fecale,
fecale, ajung în mediul
ajung în mediul
extern
extern (pe
(pe sol)
sol) unde
unde sporulează;
sporulează;

•* ÎnÎn mediul
mediul spitalicesc
spitalicesc poate
poate contamina
contamina bandaje,
bandaje,
CLOSTRIDIUM TETANI
CLOSTRIDIUM TETANI aţa
aţa chirurgicală, pudra de talc, lenjeria etc.
chirurgicală, pudra de talc, lenjeria etc.

Clostridium
Clostridium tetani
tetani C.tetani, coloraţie pt.spori

•* bacil
bacil mare
mare
•* cu
cu capetele
capetele rotunjite
rotunjite
•* Gram
Gram pozitiv
pozitiv
•* cu cili peritrichi
cu cili peritrichi
•* ÎnÎn prezenţa
prezenţa oxigenului
oxigenului formează
formează un
un spor
spor ra)
—– sferic
sferic terminal
terminal
—– mai
mai mare
mare decât
decât diametrul
diametrul celulei
celulei bacteriene
bacteriene
—– conferă
conferă germenului
germenului aspectul
aspectul de
de băţ
băț de
de chibrit,
chibrit, băţ
băţ de
de
tobă,
tobă, ac
ac de
de gămălie.
gămălie.

2
 Clostridium
Clostridium tetani
tetani
cultivare
cultivare

• medii
medii simple
simple
• condiţii
condiţii de
de strictă
strictă anaerobioză
anaerobioză
• temperatura
temperatura de de 37°C
37*C
• Coloniile
Coloniile pepe geloză
geloză sânge:
sânge:
apar
apar după
după 48
48 de
de ore,
ore,
rotunde,
rotunde, 4-6 mm diametru,
4-6 mm diametru, mate
mate
de
de tip
tip S
S
Înconjurate:
Înconjurate:
de
de oo zonă
zonă pufoasă
pufoasă
C.tetani – coloraţie negativă
şi
şi de
de o
o zonă îngustă de
zonă îngustă de β-hemoliză.
B-hemoliză.

Clostridium
Clostridium tetani
tetani Clostridium tetani
Clostridium tetani
rezistenţa
rezistenţa faţă
faţă de factori fizici,
de factori fizici, chimici,
chimici, biologici
biologici
structura
structura antigenică
antigenică // răspuns
răspuns imun
imun
ANTIGENE
ANTIGENE
• Formele
Formele vegetative
vegetative •* antigene
antigene flagelare
flagelare de
de tip
tip HH
– distruse
distruse de
de expunerea
expunerea timp
timp de
de 15-20
15-20 de
de minute
minute la
la •* antigenul
antigenul somatic
somatic O O din
din peretele
peretele bacterian
bacterian
temperaturi
temperaturi dede 55-60°C
55-60*C
•* oo exotoxină
exotoxină cu
cu structură
structură proteică.
proteică.
– de
de substanţe
substanţe dezinfectante
dezinfectante —– toţi
toţi bacilii
bacilii tetanici
tetanici elaborează
elaborează un
un singur
singur tip
tip de
de toxină,
toxină,
• Sporii
Sporii codificată
codificată plasmidic.
plasmidic.
– rezistă
rezistă la
la temperatura
temperatura de
de 100°C
100*C
– distruşi
distruşi prin
prin RĂSPUNS
RĂSPUNS IMUN
IMUN
• autoclavare
autoclavare la 120*C şi
la 120°C şi 11 atm,
atm, timp
timp de
de 30
30 de
de minute
minute •* producerea
producerea anticorpilor
anticorpilor antitoxină
antitoxină
• Poupinel
Poupinel timptimp de
de 11 oră
oră la
la 180°C.
180*C.
—– nu
nu sunt
sunt utili
utili din
din punct
punct de
de vedere
vedere al
al protecţiei
protecţiei şi
şi nici
nici înîn scop
scop
• ÎnÎn mediul
mediul extern, în condiţii
extern, în condiţii de
de uscăciune
uscăciune sporii
sporii rămân
rămân viabili
viabili zeci
zeci şi
şi diagnostic.
chiar
diagnostic.
chiar sute
sute de
de ani.
ani.

Clostridium
Clostridium tetani
tetani Clostridium
Clostridium tetani
tetani
caractere
caractere de
de patogenitate
patogenitate caractere
caractere de
de patogenitate
patogenitate

•* Tetanospasmina
Tetanospasmina
•* Patogen
Patogen prin:
prin:
—– inhibă
inhibă eliberarea
eliberarea acetilcolinei,
acetilcolinei, interferând
interferând astfel
astfel cu
cu
—– multiplicare
multiplicare la
la poarta
poarta de
de intrare
intrare unde
unde rămâne
rămâne
activitatea
activitatea sinapsei
sinapsei neuromusculare;
neuromusculare;
cantonat
cantonat neavând
neavând capacitate
capacitate de
de invazivitate;
invazivitate;

—– determină
determină spasme
spasme musculare
musculare generalizate,
generalizate,
—– toxinogeneză
toxinogeneză -- produce
produce o
o exotoxină
exotoxină neurotropă
neurotropă
hiperreflexie
hiperreflexie şi
şi convulsii;
convulsii;
numită
numită tetanospasmină;
tetanospasmină;

—– producerea
producerea unei
unei hemolizine
hemolizine numite
numite tetanolizină.
tetanolizină.

3
 Clostridium
Clostridium tetani
tetani
Clostridium
Clostridium tetani
tetani boala
boala la
la om
om
boala
boala la
la om
om
• Incubare:
Incubare: 4-5
4-5 zile
zile de
de la
la contaminare
contaminare
• Poarta
Poarta de
de intrare
intrare a
a sporilor:
sporilor: • spasme ale musculaturii
spasme ale musculaturii
– plăgi
plăgi „tetanigene”:
„tetanigene”: – din
din zona
zona contaminată,
contaminată,
• plăgi
plăgi adânci
adânci care
care asigură
asigură anaerobioză,
anaerobioză, cu
cu ţesut
ţesut zdrobit.
zdrobit.
– apoi
apoi ale
ale muşchilor
muşchilor masticatori,
masticatori,
• Suport
Suport material
material alal transmiterii:
transmiterii: pământ,
pământ, obiecte
obiecte
• trismus
trismus
(inclusiv
(inclusiv instrumente
instrumente medicale,
medicale, materiale
materiale sanitare)
sanitare)
contaminate • facies
facies de
de tip
tip „risus
„risus sardonicus”
sardonicus”
contaminate cu cu spori.
spori.
• Sporii • Moartea
Moartea sese poate
poate produce
produce prin
prin asfixie
asfixie
Sporii germinează,
germinează, formaforma vegetativă
vegetativă care
care ia
ia naştere
naştere
elaborează
elaborează cei
cei 22 factori
factori de
de virulenţă:
virulență: • !!
!! Pacientul
Pacientul este
este conştient
conştient
– tetanolizina
tetanolizina
– tetanospasmina
tetanospasmina

Risus sardonicus

Prezentă
Prezentă contracţia
contracția
maseterului
maseterului şi
şi aa muşchilor
muşchilor
gâtului
gâtului

CDC/Dr. Thomas
CDC/Dr. Thomas F.F.
Sellers/Emory University
Sellers/Emory University

Portretul unui soldat care moare cu tetanos – Sir Charles Bell

Originalul la Colegiul Regal de Chirurgie, Edinburgh, Scoţia

- rigiditatea corpului: opistotonus, risus sardonicus

Tetanos Tetanos neonatal

Tetanos neonatal
pacient de 46 ani corpul este
corpul este complet
complet rigid
rigid
Manila, Filipine mortalitate aproape
mortalitate aproape 100%
100%
CDC cauzat de
cauzat de contaminare
contaminare a a
bontului ombilical
bontului ombilical
CDC

Contractura
Contractura spastică
spastică amam
muşchilor feţei împiedică
muşchilor feţei împiedică
deschiderea gurii
deschiderea gurii
copilul
copilul nu
nu se
se poate
poate hrăni
hrăni

4
 Clostridium
Clostridium tetani
tetani

M
Opistotonus diagnostic
diagnostic de
de laborator
laborator

•* nu
nu este
este un
un diagnostic
diagnostic de
de rutină
rutină

•* Diagnosticul
Diagnosticul este
este
—– Clinic
Clinic -- !!
!! Să
Să fie
fie precoce
precoce

Contracţia
Contracţia musculară
musculară puternică
puternică
—– Epidemiologic
Epidemiologic
aa muşchilor
muşchilor spatelui
spatelui şişi a
a membrelor
membrelo| —– Bacteriologic
Bacteriologic —– cel
cel mai
mai des
des post-mortem
post-mortem
poate duce
poate duce la
la fractura oaselor
fractura oaselor

Clostridium
Clostridium tetani
tetani Clostridium
Clostridium tetani
tetani
tratament
tratament epidemiologie,
epidemiologie, prevenire,
prevenire, control
control

•* administrarea în paralel
administrarea în paralel aa • Sursa
Sursa de
de infecţie:
infecţie:
– om
om
—– serului
serului antitoxic
antitoxic -- anticorpii
anticorpii specifici
specifici vor
vor neutraliza
neutraliza toxina
toxina – animale
animale
–
— antibioticoterapiei - distruge bacteriile cantonate la
antibioticoterapiei - distruge bacteriile cantonate la poarta
poarta de
de • ca
ca re
re el
el ii mină
mină prin
prin dej
dej ecte
ecte formele
formele vegeta
vegetatiti ve
ve de
de C.teta
C.teta ni
ni
intrare;
intrare; eficientă
eficientă penicilina
penicilina • Transmiterea:
Transmiterea: prin
prin intermediul
intermediul pământului
pământului contaminat
contaminat cu
cu spori
spori
—– anatoxinei
anatoxinei tetanice
tetanice purificate
purificate şi
şi adsorbite
adsorbite pe
pe fosfat
fosfat de
de • Poarta
Poarta de
de intrare:
intrare:
aluminiu
aluminiu -- ATPA
ATPA – plagă
plagă adâncă,
adâncă, contaminată
contaminată cu
cu pământ
pământ ce
ce conţine
conţine spori
spori de
de bacili tetanici.
bacili tetanici.

•* Tratamentul
Tratamentul trebuie
trebuie realizat
realizat de
de urgenţă
urgenţă administrându-
administrându-
• Profilaxia
Profilaxia specifică
specifică
– vaccinarea
vaccinarea obligatorie înîn copilărie
obligatorie copilărie cu
cu trivaccin
trivaccin anti-diftero-tetano-
anti-diftero-tetano-
se
se ser
ser antitetanic înainte de
antitetanic înainte de fixarea
fixarea toxinei în ţesut.
toxinei în ţesut. pertusis.
pertusis.
– rapeluri
rapeluri necesare
necesare obţinerii
obţinerii unei
unei imunităţi
imunităţi solide.
•* Se
Se impune
impune toaleta
toaleta chirurgicală
chirurgicală a
a plăgii
plăgii tetanigene.
tetanigene. solide.

Clostridium
Clostridium botulinum
botulinum
habitat
habitat

în stare
în stare vegetativă în intestinul
vegetativă -- în intestinul omului
omului şi
şi al
al animalelor
animalelor
cu
cu materiile
materiile fecale,
fecale, ajung în mediul
ajung în mediul extern
extern (pe
(pe sol)
sol)
sporulează;
sporulează;
unele
unele specii
specii se
se pot
pot chiar
chiar multiplica.
multiplica.

Sporii
Sporii sunt
sunt foarte
foarte rezistenţi
rezistenți
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
CLOSTRIDIUM BOTULINUM la
la adăpost
adăpost dede radiaţiile
radiaţiile solare
solare şi
şi de
de umezeală
umezeală supravieţuiesc
supraviețuiesc
zeci
zeci de
de ani.
ani.

5
 Clostridium
Clostridium botulinum
botulinum
cmt
cmt

•* bacil
bacil mare: 3,0-20,2 μm
mare: 3,0-20,2 um // 0,6-1,4
0,6-1,4 μm
um
•* cu
cu capetele
capetele rotunjite
rotunjite
•* Gram
Gram pozitiv
pozitiv
•* cu
cu cili
cili peritrichi
peritrichi
•* necapsulat
necapsulat
•* ÎnÎn prezenţa
prezenţa oxigenului
oxigenului formează
formează unun spor
spor
—– ovalar
ovalar central
central sau
sau subterminal
subterminal
—– mai
mai mare
mare decât
decât diametrul
diametrul celulei
celulei bacteriene
bacteriene
—– Bacteria
Bacteria este
este deformată
deformată de
de spor,
spor, luând
luând aspect
aspect de
de
bărcuţă.
bărcuţă.

Clostridium
Clostridium botulinum
botulinum Clostridium botulinum
cultivare
cultivare rezistenţa
rezistenţa faţă
faţă de
de factori
factori fizici,
fizici, chimici,
chimici, biologici
biologici

•* medii
medii simple
simple
•* condiţii
condiţii de
de strictă
strictă anaerobioză
anaerobioză •* Similară
Similară cu
cu cea
cea a a C.
C. tetani
tetani
•* temperatura
temperatura de de 37°C
37*C
•* Coloniile
Coloniile pe
pe geloză
geloză sânge:
sânge:
4-6
4-6 mm
mm diametru,
diametru, transparente
transparente
de
de tip
tip S
S
Înconjurate:
Înconjurate:
de
de oo zonă
zonă pufoasă
pufoasă
şi
şi de
de o
o zonă îngustă de
zonă îngustă de β-hemoliză.
B-hemoliză.

Clostridium
Clostridium botulinum
botulinum Clostridium
Clostridium botulinum
botulinum
Caractere
Caractere de
de patogenitate
patogenitate Boala
Boala la
la om
om

•* Nu
Nu se
se multiplică
multiplică în
în organism
organism cici în
în alimente
alimente unde
unde •* Toxiinfecţia
Toxiinfecţia alimentară
alimentară botulinică:
botulinică:
produce
produce o o exotoxină
exotoxină care
care este
este distrusă
distrusă prin
prin —– Apare
Apare în în urma
urma ingerării
ingerării conservelor
conservelor de de legume,
legume, zarzavaturi,
zarzavaturi,
fructe, carne,
fructe, carne, alimente
alimente păstrate
păstrate prin
prin sărare
sărare sau
sau afumare,
afumare, mezeluri,
mezeluri,
fierbere la 100°C,
fierbere la 100*C, timp
timp de
de 20
20 minute.
minute. care sunt consumate fără o nouă prelucrare termică,
cârnaţi care sunt consumate fără o nouă prelucrare termică, care
cârnaţi care
conţin toxina preformată
conţin toxina preformată

•* Este
Este patogen
patogen prinprin toxinogeneză.
toxinogeneză. Elaborează
Elaborează —– La
La nivelul
nivelul plăcilor
plăcilor neuromotorii, toxina împiedică
neuromotorii, toxina împiedică eliberarea
eliberarea de
de
exotoxine
exotoxine cu cu neurotropism faţă de
neurotropism faţă de sistemul
sistemul acetilcolină,
acetilcolină, determinând
determinând o o paralizie
paralizie flască.
flască.

nervos periferic.
nervos periferic. •- apare
apare lala 18-24
18-24 ore
ore de
de la
la ingestie
ingestie
•* începe
începe la la extremitatea
extremitatea cefalică:
cefalică: diplopie
diplopie sau
sau paralizie
paralizie bulbară
bulbară
(imposibilitate de înghiţire şi
(imposibilitate de înghiţire şi de
de vorbire).
vorbire).
•* Toxina
Toxina botulinică
botulinică este
este cea
cea mai
mai puternică
puternică otravă
otravă •* are evoluţie descendentă,
are evoluţie descendentă, ajungând
ajungând până
până la la paralizia
paralizia
cunoscută;
cunoscută; doza
doza letală
letală pentru
pentru om
om este
este de1-2
de1-2 mg.
mg. musculaturii respiratorii
musculaturii respiratorii ceea
ceea ce
ce duce
duce la
la moarte
moarte
•* Bolnavul
Bolnavul rămâne
rămâne conştient
conştient până
până aproape
aproape dede exitus.
exitus.

6
 Cons
Cons erve,
erve, cârnaţi,
cârnaţi, ss uc
uc de
de
morcovi,
morcovi, etc.
etc.
Clostridium
Clostridium botulinum
botulinum
Boala
Boala la
la om
om

•* Botulismul
Botulismul infantil
infantil
—– Este
Este urmarea
urmarea formării
formării toxinei
toxinei botulinice
botulinice prin
prin
germinarea
germinarea la
la nivel
nivel intestinal
intestinal aa sporilor
sporilor ingeraţi.
ingeraţi.

-– Manifestările
Manifestările clinice
clinice sunt
sunt similare
similare cu
cu cele
cele ale
ale
toxiinfecţiei
toxiinfecţiei alimentare
alimentare cu
cu toxina
toxina preformată.
preformată.

—– Botulismul
Botulismul neo-natal
neo-natal apare
apare lala sugarii
sugarii (sub
(sub 66 luni)
luni)
care
care consumă
consumă miere
miere de
de albină
albină contaminată
contaminată cu
cu spori
spori
de C.
de C. botulinum
botulinum

Clostridium
Clostridium botulinum
botulinum Clostridium
Clostridium botulinum
botulinum
Diagnostic
Diagnostic Tratament
Tratament

În toxiinfecţia
• În toxiinfecţia botulinică
botulinică primează
primează diagnosticul
diagnosticul clinic
clinic •* Se
Se administrează
administrează ser
ser antibotulinic
antibotulinic
-– iniţial
iniţial polivalent
polivalent
• Diagnosticul
Diagnosticul de de laborator
laborator urmăreşte în principal
urmăreşte în principal -– după
după identificarea
identificarea tipului
tipului de
de exotoxină
exotoxină produs
produs se
se
stabilirea tipului de
stabilirea tipului de exotoxină
exotoxină produs
produs de
de C.botulinum
C.botulinum administrează
administrează ser
ser specific
specific monovalent.
monovalent.
(toxinotipie).
(toxinotipie).
—– Se
Se poate
poate administra
administra serser trivalent
trivalent (A,B,E)
(A,B,E) prompt
prompt
i.v.,
i.v., cu
cu precauţiile
precauţiile seroterapiei,
seroterapiei, în în condiţii
condiţii
• Produsele
Produsele patologice
patologice recoltate
recoltate sunt
sunt susţinere
susţinere a a funcţiilor
funcţiilor vitale.
vitale.
—– serul de
serul de lala pacient
pacient
—– probe de
probe de materii
materii fecale
fecale
—– probe de
probe de alimente.
alimente.

• Evidenţierea
Evidenţierea exotoxinei în prelevate
exotoxinei în prelevate se
se face
face prin testul de
prin testul de
.

neutralizare
neutralizare inin vivo
vivo sau
sau prin
prin metode
metode ELISA
ELISA

7
 CLOSTRIDIUM DIFFICILE
CLOSTRIDIUM DIFFICILE
-- Bacil
Bacil Gram
Gram pozitiv
pozitiv sporulat
sporulat anaerob,
anaerob, recunoscut
recunoscut în 1978 ca
în 1978 ca
agent etiologic
agent etiologic al al colitei
colitei pseudomembranoase
pseudomembranoase care care apareapare în în
marea
marea majoritate
majoritate a a cazurilor
cazurilor după după antibioterapie
antibioterapie prelungită.
prelungită.
-- Factorul
Factorul principal
principal de de virulenţă
virulență esteeste reprezentat
reprezentat de de 2 2 toxine:
toxine:
toxina
toxina AA sau
sau enterotoxina
enterotoxina şi şi toxina
toxina B B sau
sau citotoxina
citotoxina care care induc
induc
leziuni.
leziuni.
-- Este
Este afectată
afectată mucoasa
mucoasa colonului
colonului şi şi a
a rectului
rectului caracteristică
caracteristică
fiind
fiind apariţia
apariţia la la nivelul
nivelul mucoasei
mucoasei intestinale
intestinale a a unui
unui infiltrat
infiltrat
inflamator
inflamator şi şi aa unor
unor false
false membrane
membrane fibrinoase,
fibrinoase, aderente.
aderente.
-- Simptomul
Simptomul principal
principal este este diareea
diareea apoasăapoasă sau sau mucoasă,
mucoasă, rareori rareori
sanguinolentă.
sanguinolentă.
-Cele mai
-Cele mai frecvente
frecvente cazuri cazuri apar
apar în în mediul
mediul spitalicesc
spitalicesc în în unităţile
unităţile
cu
cu spitalizări
spitalizări prelungite,
prelungite, cu cu pacienţi
pacienţi vârstnici
vârstnici şi şi cu
cu tratamente
tratamente
antibiotice
antibiotice susţinute.
susţinute.
-- Sporii
Sporii colonizează
colonizează foarte foarte repede
repede mediul
mediul de de spital
spital şi şi sunt
sunt greu
greu
de
de eradicat
eradicat fiind
fiind rezistenţi
rezistenți la la dezinfectantele
dezinfectantele obişnuitobişnuit utilizate
utilizate în în
spital.
spital.
-Portajul intestinal
-Portajul intestinal de de C.difficile
C.difficile esteeste mic:
mic: 0-3%.
0-3%.
-- La nou-născut portajul
La nou-născut portajul de de C.difficile
C.difficile este
este frecvent:
frecvent: 20-70% 20-70% în în
primele
primele săptămâni
săptămâni de de viaţă
viaţă diminuând
diminuând progresiv
progresiv până până la la valori
valori
asemănătoare
asemănătoare cu cu ale
ale adultului
adultului la la vârsta
vârsta de de 3-4
3-4 ani.
ani.

Diagnosticul de
Diagnosticul de laborator
laborator
în evidenţierea
-constă în
-constă evidenţierea bacteriei
bacteriei şi
şi a
a prezenţei
prezenţei toxinelor în
toxinelor în
materiile fecale.
materiile fecale.

Tratament
Tratament
-- oprirea
oprirea antibioterapiei.
antibioterapiei.
-- administrare
administrare de
de metronidazol
metronidazol sau
sau vancomicină.
vancomicină.

Prevenire
Prevenire
-- izolarea
izolarea pacientului
pacientului şi
şi obligatoriu
obligatoriu decontaminarea
decontaminarea mediului
mediului de
de
spital la
spital la externare.
 DEFINIȚIE, ÎNCADRARE

bacili mici,
bacili gram-pozitivi, usor
mici, gram-pozitivi, usor încurbaţi
încurbaţi
formă de
formă de măciucă
măciucă
coryne
coryne == măci
măci ucă
ucă
bakteri
bakteri on
on =
= baston
baston mi
mi c
c
aşezaţi
aşezaţi sub formă de
sub formă de
lLi i tere
tere
pal
pal ii sade
sade

nesporulati
nesporulati
necapsulaţi,
necapsulaţi,
imobili
imobili
aerobi
aerobi şi
şi facultativ
facultativ anaerobi.
anaerobi.
În genul Corynebacterium
În genul Corynebacterium se se distinge
distinge grupul
grupul Corynebacterium
Corynebacterium diphtheriae
diphtheriae
speci
speci a
a cea
cea mai
mai iimportantă
mportantă Corynebacteri
Corynebacteri um
um di
di phtheriae
phtheriae (bacilul
(bacilul difteric)
difteric)
C.
C. ul
ul cerans,
cerans, C. pseudotuberculosis.
C. pseudotuberculosis.

Habitat Caractere morfotinctoriale

bacil gram
bacil gram pozitiv
pozitiv
Habitatul este
Habitatul este strict
strict uman
uman nesporulat
nesporulat
necapsulat
necapsulat
, , , imobil
imobil
Corynebacterium diphtheriae
Corynebacterium diphtheriae -- prezent
prezent formădispuşă
de măciucă
formă de măciucă
sub formă de grămezi asemănătoare :
A ▪ cu palisada, formă de grămezi
dispuşăisua, asemănătoare :
în:
IN : ▪ cu
cu pachete
▪ cu
pachete de
de ace
ace cu
cu gămălie,
gămălie,
. . , cu literele alf abetului
literele alf latin (V,
abetului latin (V, L)
L)
tractul respirator
tractul respirator superior
superior uman
uman la
la 3-5%
3-5% din
din cu literele chinezesti.
▪ cu literele chinezesti.
Coloraţia
Coloraţia Neisser
Neisser evidenţiază
persoanele sănătoase
3nă
persoanele sănătoase Granulaţii
evidenţiază
Granulaţii metacromatice în interiorul
metacromatice în interiorul corpului
corpului bacterian
bacterian (granulaţii
(granulaţii
Babeş-Ernst).
la nivel
la nivel tegumentar.
tegumentar. Babeş-Ernst).
Aspectele
Aspectele morfologice
morfologice
caracteristice
caracteristice
permit
permit diferenţierea
diferenţierea de
de corynebacteriile
corynebacteriile comensale
comensale (bacili
(bacili difteroizi)
difteroizi)
▪ mai
mai scurţi
scurţi şi
şi mai
mai groşi.
groşi.

Caractere de cultură

Mediul Loeffler
Mediul Loeffler cu
cu ser
ser coagulat
coagulat este
este
Gram
mediul clasic
mediul clasic utilizat
utilizat pentru
pentru izolarea
izolarea C.
C.
am stain
stain of
of Corynebacterium.
Corynebacterium. . 1
Copyright ©
Copyright O 2007
2007 Aerotech
Aerotech P&K
P&K diphtheriae.
diphtheriae.

Coloniile
Coloniile
se
se dezvoltă
dezvoltă în
în 8-12-18
8-12-18 ore
ore
sunt colonii
sunt colonii RR
alb-gălbui, lucioase,
alb-gălbui, lucioase, bombate
bombate
C.diphtheriae —–
C.diphtheriae
Coloraţia
Coloraţia Neisser
Neisser

1
Caractere de cultură Caractere de cultură

După
După aspectul
aspectul coloniilor
Mediu
Mediu de
de îmbogăţire
îmbogăţire coloniilor
3 tipuri
3 tipuri de
de C.
C. diphtheriae,
diphtheriae, cu
cu grade
grade diferite
diferite de
de patogenitate:
patogenitate:
OCST (ou-cisteină-ser-telurit)
OCST (ou-cisteină-ser-telurit)
tipul gravis
tipul gravis
colonii
colonii nehemolitice,
nehemolitice, mari,
mari, cu
cu suprafaţă
suprafaţă granulară,
granulară, gri-negre
gri-negre
în
în "margaretă“
"margaretă“
Medii selective
Medii selective ▪* cu
cu margini
margini crenelate
crenelate (colonii
(colonii R)
R)
Gundel-Tietz (geloză,
Mediul Gundel-Tietz
Mediul (geloză, sânge,
sânge, cistină
cistină si
si
tipul mitis
tipul mitis
telurit)
telurit) colonii hemolitice,
colonii hemolitice, convexe,
convexe, cu
cu margini
margini circulare,
circulare, negre
negre
▪ creşte
creşte sub
sub formă
formă de
de colonii
colonii negre
negre de tip
de tip S
S
▪ datorită
datorită reducerii
reducerii teluritului
teluritului la
la telur
telur metalic
metalic
tipul intermedius
tipul intermedius
Mediul
Mediul Tinsdale
Tinsdale (agar,
(agar, ser,
ser, cistină,
cistină, telurit,
telurit, tiosulfat)
tiosulfat) colonii
colonii nehemolitice,
nehemolitice, mici,
mici, cu
cu margini
margini circulare,
circulare, negre,
negre, cu
cu suprafaţa
suprafaţa
▪ producerea granulară
producerea de de H2S
H2S imprimă
imprimă oo culoare
culoare brună
brună mediului
mediului granulară
S-R
din jurul
din coloniei negre
jurul coloniei negre de
de C.
C. diphtheriae
diphtheriae

Cor gynebacterium diphtherise, miti»

Corynebacterium diphtheriae, miti» Cor ynebacterium diphiherise, mitis Tinsdale apar
Chocolate tellurite ager Chocolate agar
Corynebacterium colonies
Corynebacterium colonies on
on blood
blood agar.
agar.
Copyright ©
Copyright O 2007
2007 Aerotech
Aerotech P&K
P&K

Caractere biochimice şi de metabolism Rezistenţa faţă de agenţii fizici, chimici şi biologici

Rezistenţa în mediul
Rezistenţa în mediul extern
extern este
este medie
medie
catalază
catalază pozitiv
pozitiv
Persistă
Persistă timp îndelungat (5
(5 săptămâni):
urează
urează negativ.
negativ. ferit
timp îndelungat
ferit de
de uscăciune
uscăciune şi
săptămâni):
şi lumină
lumină
descompune glucoza,
descompune glucoza, dextrina
dextrina mai
mai ales
ales pe
pe lenjerie, în fragmente
lenjerie, în fragmente din
din falsele
falsele membrane,
membrane,
praf.
praf.
nu descompune
nu descompune zaharozazaharoza Pe
Pe mediile
mediile de
de cultură,
cultură, la
la temperatura
temperatura camerei:
camerei:
reduce
reduce nitraţii,
nitrații, este
este viabil
viabil timp
timp de
de 2
2 săptămâni.
săptămâni.
descompune cistina
descompune cistina cu
cu eliberare
eliberare de
de H2S
H2S Este distrus
Este distrus de:
de:
produce bacteriocine.
produce bacteriocine. căldura
căldura umedă
umedă (10(10 minute
minute la
la 58°C;
58*C; 11 minut
minut la
la 100ºC)
100*C)
alcool
alcool
antiseptice uzuale
antiseptice uzuale
de
de antibiotice
antibiotice (eritromicină,
(eritromicină, penicilină,
penicilină, clindamicină
clindamicină etc.)
etc.)

2
Structura antigenică Răspuns imun

posedă
posedă antigene
antigene „O”
„O” polizaharidice
polizaharidice Umoral
Umoral
comune tuturor
comune tuturor tulpinilor
tulpinilor anticorpii antimicrobieni,
anticorpii antimicrobieni, specifici
specifici de
de tip
tip
▪ nu
nu oferă
oferă protecţie
protecţie
antigene
antigene proteice
proteice de
de suprafaţă
suprafaţă „K”
„K” anticorpii
anticorpii antitoxină
antitoxină
cu specificitate
cu specificitate de
de tip.
tip. ▪ neutralizează
neutralizează toxina
toxina
▪ au
au caracter
caracter protectiv
protectiv dacă
dacă titrul
titrul lor
lor atinge
atinge valoarea
valoarea de
de
C. diphtheriae
C. diphtheriae produce
produce bacteriocine
bacteriocine 0,03 UA/ml.
0,03 UA/ml.
permit tiparea
permit tiparea tulpinilor
tulpinilor
Cea Statusul imun
Statusul post-boală sau
imun post-boală sau post-vaccinare
post-vaccinare
Cea mai
mai importantă
importantă structură
structură antigenică
antigenică se
toxina se apreciază
apreciază prin
prin dozarea
dozarea titrului
titrului de
de anticorpi
anticorpi
toxina difterică
difterică
identică antitoxici
antitoxici
identică la
la toţi
toţi bacilii
bacilii difterici
difterici toxigeni
toxigeni ▪ prin
prin reacţii
reacţii ELISA
ELISA

Caractere de patogenitate Caractere de patogenitate

Bacilul difteric
Bacilul difteric poate
poate fi
fi patogen
patogen prin:
prin: Exotoxina
Exotoxina difterică
difterică
multiplicare la
multiplicare la poarta
poarta de
de intrare
intrare produsă
produsă doar
doar de
de tulpinile
tulpinile care
care posedă
posedă gena
gena
Toxinogeneză
Toxinogeneză „tox+”
„tox+”
▪ purtată
purtată de
de bacteriofagul
bacteriofagul temperat
temperat β
B

Toxina
Toxina difterică
difterică este
este aceeasi
aceeasi pentru
pentru toate
toate Exotoxina
Exotoxina difterică
difterică
tulpinile
tulpinile producătoare
producătoare poate afecta
poate afecta toate
toate celulele
celulele organismului
organismului
exotoxină
exotoxină de
de natură
natură proteică
proteică ▪ în
în primul
primul rând
rând
▪ ale
ale inimii
inimii (miocardită)
(miocardită)
blochează
blochează sinteza proteinelor
sinteza proteinelor celulare
celulare ▪ nervilor
nervilor (demielinizare)
(demielinizare)
▪ rinichilor
rinichilor (necroză
(necroză tubulară).
tubulară).

PATOGENIE. BOALA LA OM PATOGENIE. BOALA LA OM

Boala
Boala este
este specifică
specifică omului
omului —– difterie
difterie Corynebacterium diphtheriae
Corynebacterium diphtheriae nu
nu are
are
se
se manifestă
manifestă prin
prin capacitate
capacitate invazivă
invazivă
▪ leziuni
leziuni locale
locale
▪ datorate
datorate colonizării
colonizării ţesuturilor
ţesuturilor
▪ prin
prin leziuni
leziuni generale,
generale, la
la distanţă
distanţă se
se multiplică
multiplică la
la poarta
poarta de
de intrare
intrare
▪ datorate
datorate acţiunii
acţiunii exotoxinei
exotoxinei
▪ cauzează
cauzează o
o inflamaţie
inflamație locală
locală

Poarta de
Poarta de intrare
intrare a
a bacilului
bacilului difteric
difteric
tractul respirator
tractul respirator (faringe,
(faringe, nas)
nas) în acelasi timp
în acelasi timp
leziuni tegumentare
leziuni tegumentare ▪ în
în cazul
cazul tulpinilor
tulpinilor infectate
infectate cu
cu bacteriofagi
bacteriofagi „tox+”
„tox+”
mai ▪ începe
mai rar,
rar, de
de mucoasa
mucoasa genitală
genitală începe sinteza
sinteza toxinei
toxinei

3
PATOGENIE. BOALA LA OM

Toxina
Toxina elaborată
elaborată local
local induce
induce apariţia
apariţia unei
unei structuri
structuri -- „falsa
„falsa
membrană”
membrană”
compuse
compuse din din fibrină,
fibrină, leucocite,
leucocite, eritrocite,
eritrocite, celule
celule epiteliale
epiteliale
respiratorii
respiratorii moarte
moarte şi şi bacterii
bacterii
de culoare gri-maronie
de culoare gri-maronie
foarte
foarte aderentă
aderentă de de ţesutul
țesutul subiacent
subiacent
▪ încercarea
încercarea de
de aa îndepărta fals a
îndepărta fals a m
m em
em brană
brană duce
duce la
la ss ângerări
ângerări la
la nivelul
nivelul
ss ubm
ubm ucoasei
ucoasei
Falsa
Falsa membrană
membrană
poate
poate să
să apară
apară
▪ la
la nivel
nivel am
am igdalian
igdalian
▪ faringian
faringian
▪ nazal
nazal
▪ genital
genital
se poate
se poate extinde
extinde
▪ acoperind
acoperind faringele,
faringele, obs trucţionând arborele
obs trucţionând arborele traheobronsic.
traheobronsic.

PATOGENIE. BOALA LA OM

La
La adăpostul
adăpostul falsei
falsei membrane
membrane
baciIul
bacilul continuă
continuă multiplicarea
multiplicarea şi
şi sinteza
sinteza de
de
toxină
toxină
toxina
toxina difuzează
difuzează pe
pe cale
cale sanguină
sanguină
▪ conduce
conduce la
la apariţia
apariţia unor
unor tulburări
tulburări la
la distanţă:
distanţă:
▪ tulburări
tulburări dede ritm
ritm cardiac
cardiac
miocardită
miocardită
▪ dificultăţi
dificultăţi vizuale,
vizuale, de
de vorbire,
vorbire, deînghiţire,
deînghiţire, etc.
etc.

IL EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL

Difteria
Difteria este
este oo boală
boală strict
strict umană
Decizia
Decizia administrării
administrării de
de ser
ser antidifteric
antidifteric singurul
singurul izvor
izvor de
de infecţie
umană
infecţie este
este omul
omul
trebuie
trebuie luată
luată urgent
urgent ▪ purtător
purtător cronic
▪ bolnav
bolnav
cronic

pentru
pentru că
că antitoxina
antitoxina neutralizează
neutralizează numai
numai ▪ inf
inf ectat
singura
ectat inaparent
inaparent
singura modalitate
modalitate de
de transmiterea
transmiterea infecţiei
infecţiei
toxina
toxina difterică
difterică circulantă
circulantă ▪ interumană.
interumană.

seroterapia este
seroterapia este cu
cu atât
atât mai
mai eficace
eficace cu
cu cât
cât Transmiterea
Transmiterea
prin
prin picături-nucleosoli
este
este utilizată
utilizată mai
mai precoce
precoce prin
picături-nucleosoli
prin secreţii
secreţii şi
şi exsudate
exsudate
obiecte sau
obiecte sau alimente
alimente contaminate
contaminate

Antibioticele sunt indicate

Antibioticele sunt indicate Receptivitatea
Receptivitatea (în
(în lipsa
lipsa vaccinării)
vaccinării) este
este mai
mai mare
mare până
până la
la vârsta
vârsta de
de
poate
poate apărea
apărea oo ameliorare
ameliorare locală
locală
6-8 ani.
6-8 ani.
Imunitatea
Imunitatea transplacentară
transplacentară oferă
oferă protecţie
protecţie 3-6
3-6 luni.
luni.
contagiozitatea scade
contagiozitatea scade

4
EPIDEMIOLOGIE. PREVENIRE. CONTROL

Prevenirea
Prevenirea nespecifică
nespecifică
izolarea
izolarea
tratarea cu
tratarea cu antibiotice
antibiotice a
a surselor
surselor
Profilaxia
Profilaxia specifică
specifică
vaccinarea
vaccinarea antidifterică
antidifterică
▪ anatoxina
anatoxina purif
purif icatăexotoxina
icatăexotoxina dif
dif terică
terică supusă
supusă acţiunii
acţiunii concomitente
concomitente aa
ff ormolului
ormolului şişi căldurii
căldurii

Copiii
Copiii sunt
sunt imunizaţi
imunizaţi activ
activ
trivaccinul DTP
trivaccinul DTP
apoi cu
apoi cu bivaccinul
bivaccinul DT
DT
▪ vaccinarea
vaccinarea permitede
permitede regulă
regulă obţinerea
obţinerea unor
unor nivele
nivele protective
protective de
de anticorpi
anticorpi antitoxici
antitoxici
suf
suf iciente
iciente timp
timp de
de aproximativ
aproximativ 1515 ani
ani
▪ cu toate acestea
cu toate acestea colonizarea
colonizarea bacteriană
bacteriană respiratorie
respiratorie sau
sau cutanată
cutanată rămâne
rămâne posibilă.
posibilă.

5
 IZOLAREA SI
IZOLAREA SI IDENTIFICAREA
IDENTIFICAREA MICOBACTERIILOR
MICOBACTERIILOR
Mycobacterium
Mycobacterium tuberculosis
tuberculosis
Mycobacterium leprae
Mycobacterium leprae

Produsul patologic
Produsul patologic
-- în tuberculoza pulmonară–spută,
în tuberculoza pulmonară-spută, aspirat
aspirat bronşic,
bronşic, lichid pleural, spălătură
lichid pleural, spălătură gastrică
gastrică
-- în
în tuberculoza
tuberculoza renală
renală —– urina
urina (toată
(toată cantitatea
cantitatea dede urină
urină emisă
emisă dimineaţa)
dimineaţa)
-- în
în tuberculoza
tuberculoza genitală
genitală —– secreţie
secreție vaginală,
vaginală, cervicală,
cervicală, spermă,
spermă, secreţie prostatică
secreție prostatică
-- în
în tuberculoza
tuberculoza articulară,
articulară, osoasă
osoasă —– lichid
lichid sinovial,
sinovial, puroi
puroi
-- în
în tuberculoza
tuberculoza ganglionară
ganglionară —– material
material din
din puncţie
puncție ganglionară,
ganglionară, puroi
puroi
-- în meningita tuberculoasă
în meningita tuberculoasă —– LCR LCR
1. Examen
1. Examen direct
direct
-au un
-au un continut
continut crescut
crescut dede lipide
lipide (acid
(acid micolic)- acest caracter
micolic)- acest caracter confera
confera acido-alcoolo-rezistenta
acido-alcoolo-rezistenta acestor
acestor
bacterii
bacterii
-- frotiu
frotiu colorat Ziehl-Neelsen —– bacili
colorat Ziehl-Neelsen bacili lungi
lungi şi
şi subţiri, uşor încurbaţi,
subțiri, uşor încurbaţi, nesporulati,
nesporulati, necapsulati, imobili, roşii
necapsulati, imobili, roşii
(acido- alcoolo-rezistenţi),
(acido- alcoolo-rezistenţi), fondul
fondul preparatului
preparatului fiind
fiind albastru
albastru

-1-
22. . Izolare
Izolare
-- pe pe mediul Lowenstein-Jensen ,, care
mediul Lowenstein-Jensen care conţine
conţine săruri
săruri
minerale, asparagină
minerale, asparagină sau
sau acid
acid glutamic,
glutamic, amidon,
amidon,
gălbenuş
gălbenuş de de ou,
ou, glicerină
glicerină şi
şi verde
verde malachit
malachit
-- incubare
incubare la
la 37C,
37/*C, (4-
(4- 6 saptamani) până
6 saptamani) până la
la 90
90 de
de zile
zile

3. Identificare
3. Identificare
-- caractere
caractere morfotinctoriale
morfotinctoriale
-- caractere
caractere de de cultură
cultură
oo tipul uman are
tipul uman are o o creştere lenta, favorizată
creştere lenta, favorizată de prezenţa glicerinei
de prezenţa glicerinei
= creşte
creşte înîn 2-3
2-3 săptămâni
săptămâni
= colonii
colonii de de tip
tip R,
R, neregulate,
neregulate, uscate,
uscate, conopidiforme,
conopidiforme, ca ca firmiturile
firmiturile de de
pâine
pâine
= coloniile
coloniile se se detaşează
detaşează uşor
uşor de de pe mediu şi
pe mediu şi se
se emulsionează
emulsionează greu greu înîn SFSF
= în
în mediu
mediu lichid
lichid formează
formează la la suprafaţă un văl
suprafaţă un văl gros
gros ce
ce se
se întinde
întinde mai
mai
repede
repede
oo tipul bovin are
tipul bovin are o o creştere
creştere rapid
rapid
= colonii
colonii de de tip
tip S,
S, mici,
mici, netede
netede îi
= coloniile
coloniile se se detaşează
detaşează greu
greu de de pe
pe mediu
mediu şişi se
se emulsionează
emulsionează uşor uşor înîn ser
ser
fiziologic
fiziologic
= în
în mediu lichid formează
mediu lichid formează la la suprafaţă
suprafaţă unun văl
văl subţire,
subțire, friabil,
friabil, cu
cu
dezvoltare lentă
dezvoltare lentă
-- inoculare
inoculare la la animale
animale de de experienţă
experienţă —– cobaiul
cobaiul
4. Caractere
4. Caractere biochimice
biochimice
Sunt
Sunt germeni
germeni aerobi,
aerobi, au
au enzima
enzima catalază,
catalază, se
se dezvoltă
dezvoltă lala un pH uşor
un pH uşor acid,
acid,
tipul hominis
tipul hominis este
este singurul
singurul care
care produce
produce acid
acid nicotinic.
nicotinic.
Antibiograma
Antibiograma
se efectuează
-- se efectuează pepe mediul
mediul Lowenstein
Lowenstein în care au
în care au fost
fost incluse
incluse tuberculostatice
tuberculostatice

5. Caract
5. Caractereere ant i geni ce - constituenţii
antigenice- constituenţii peretelui
peretelui celular induc apariţia
celular induc apariția
unui răspuns imun de tip celular si a unei hipersensibilităţi de tip IV:
Tuberculo-lipidele
Tuberculo-lipidele
Tuberculo-proteinele
Tuberculo-proteinele
▪induc
induc sensibilizare
sensibilizare de
de tip
tip anafilactic
anafilactic
▪în
în asociere
asociere cu
cu tuberculolipide induc răspuns
tuberculolhpide induc răspuns imun
imun predominant
predominant celular
celular
polizaharidele
polizaharidele
▪induc
induc formarea
formarea de anticorpi circulanţi
de anticorpi circulanţi
 Diagnostic indirect
Diagnostic indirect
-- Intradermoreacţia
Intradermoreacţia Mantoux Mantoux
se inoculează
-- se inoculează intradermic
intradermic tuberculină purificată (PPD,
tuberculină purificată (PPD, 2 2 unităţi)
unit
-- este
este o IDR alergică
o IDR alergică
-- dacă
dacă persoana
persoana nu nu aa venit
venit în contact cu
în contact cu germenele
germenele
(nu aa fost
(nu fost bolnav,
bolnav, nu nu a a fost
fost vaccinat),
vaccinat), atunci
atunci lala locul
locul inoculării
inoculării
nu apare
nu apare nici nici o o reacţie,
reacţie, IDR
IDR negativ
negativ -- pacientii
pacientii respectivi
respectivi vor
vor avea
avea indicatie
indicatie de
de
vaccinare,
vaccinare,
-- daca
daca pacientul
pacientul a a fost
fost vaccinat
vaccinat si/sau
si/sau a a trecut
trecut prin
prin primoinfectie
primoinfectie apare
apare oo
reactie locala
reactie locala (eritem
(eritem si si edem)
edem) cu cu un
un diametru
diametru transversal
transversal al al edemului
edemului < < 10
10 mm,
mm,
-- daca
daca diametrul
diametrul induratiei
induratiei esteeste >> 10
10 mm,
mm, pacientul
pacientul va va fi
fi monitorizat:
monitorizat:
MRF si/
MRF si/ sausau efectuarea
efectuarea unui unui frotiu
frotiu colorat
colorat Ziehl-Neelsen
Ziehl-Neelsen din din sputa.
sputa.

Caractere de
▪ Caractere de patogenitate
patogenitate
Mycobacterium tuberculosis
▪ Mycobacterium tuberculosis nu
nu produce
produce toxine
toxine
este patogen
▪ este patogen prin
prin capacitatea
capacitatea sa
sa de
de aase multiplica în
se multiplica organismul gazdă
în organismul gazdă
distrugerea bacteriei
▪ distrugerea se soldează
bacteriei se soldează cu
cu eliberarea de constituenţi
eliberarea de constituenți antigenici
antigenici care
care
o reacţie
induc o
induc reacţie imunitară
imunitară de
de hipersensibilitate ce stă
hipersensibilitate ce stă la
la baza
baza transformării
transformării
cazeoase
Tehnica de
Tehnica de prelevare
prelevare a
a sputei:
sputei:
-în recipiente
-în recipiente sterilesterile dede unică
unică folosinţă,
folosinţă,
-- înainte
înainte de de începerea tratamentului medicamentos.
începerea tratamentului medicamentos.
-- Se
Se recoltează
recoltează dimineaţa
dimineaţa la la sculare
sculare o o cantitate
cantitate de de 5-10
5-10 ml,
ml, se se va
va repeta
repeta
la 3-4 zile,
la 3-4 zile, se se poate
poate păstra
pastra la la 4°
4* CC cucu adaos
adaos de de carbonat
carbonat de de sodiu
sodiu pulvis,
pulvis,
50
50 mgmg lala 5 5 ml
ml spută;
spută; sausau fosfat
fosfat trisodic
trisodic (2-4 (2-4 mlml din
din sol
sol 15%).
15%).
-- Se
Se vor
vor respecta
respecta regulile
regulile de de asepsie
asepsie aa personalului
personalului care care asistă
asistă sau sau
transportă
transportă probele.probele.
-Aspectul sputei:
-Aspectul sputei: esteeste purulentă,
purulentă, nu nu se
se vava lucra sputa mucoasă,
lucra sputa mucoasă, care care dede
cele
cele mai
mai multe
multe ori ori este
este salivă.
salivă.
-Sputa astfel
-Sputa astfel recoltată,
recoltată, se se va
va transporta
transporta în în laborator,
laborator, se se va
va spăla
spăla în în SFSF în
în
trei
trei băi
băi separate,
separate, şi şi apoi
apoi se se vava recolta
recolta fragmentul
fragmentul purulent,
purulent, se se va
va
însămânţa pe
însămânţa pe medii
medii selective
selective tip tip Lowenstein-Jensen
Lowenstein-Jensen (L-J) (L-]) şişi se
se vor
vor face
face
mai multe
mai multe frotiuri.
frotiuri.
-- se
se vor
vor colora
colora albastru
albastru de de metilen
metilen unde unde se se vor
vor pune
pune înîn evidenţă
evidenţă PMN PMN, ,
care
care trebuie
trebuie să să fie
fie de
de cel
cel puţin
puţin 5 5 ori
ori mai
mai multe
multe decât
decât celulele epiteliale şi
celulele epiteliale şi
coloraţii
coloraţii Ziehl Neelsen pentru
Ziehl Neelsen pentru a a fi fi puşi
puşi înîn evidenţă
evidenţă bacilii
bacilii tuberculoşi.
tuberculoşi.
-- Când
Când numărul
numărul de
de germeni în produsul
germeni în produsul patologic
patologic este
este redus
redus (paucibacilar),
(paucibacilar), frotiul
frotiul se
se face
face
după
după omogenizarea
omogenizarea şi şi concentrarea
concentrarea produsului produsului patologic.
patologic.
-Omogenizarea se
-Omogenizarea se face într-un balon
face într-un balon de de 250250 ml,ml, cucu fund
fund plat,
plat, peste
peste spută
spută se se adaugă
adaugă o o
cantitate
cantitate egală
egală sau sau de de 2-3
2-3 oriori mai
mai maremare de de NaOH
NaOH 0,5%, 0,5%, la la 60°C,
60*C, 30 30 min.
min.
Concentrarea prin
-- Concentrarea prin flotare,
flotare, se se obţine
obţine prin prin adăugare
adăugare de de apă
apă distilată
distilată (AD)
(AD) până
până la jumătatea
la jumătatea
balonului
balonului şi şi 22 ml
ml de xilol sau
de xilol sau neofalină.
neofalină. Se Se agită
agită energic
energic 10 10 min,
min, sese adaugă
adaugă AD AD până
până la la
jumătatea gâtului
jumătatea gâtului balonului,
balonului, se se lasă
lasă înîn repaus
repaus 30 30 min,
min, timp
timp în în care
care sese formează
formează un un inel
inel
cremos
cremos în în care
care au au fost
fost concentraţi
concentrați bacilii bacilii tuberculoşi
tuberculoşi din din produs.
produs.
Stratul cremos
Stratul cremos este este aspirat într-o pipetă
aspirat într-o Pasteur prevăzută
pipetă Pasteur prevăzută cu cu o o pară
pară dede cauciuc,
cauciuc, sau sau un un
pipetor automat.
pipetor automat. Pe Pe 2-32-3 lame
lame degresate,
degresate, care care sunt
sunt aşezate
aşezate pe pe oo platină încălzită sau
platină încălzită sau pe pe un
un
geam
geam deasupra
deasupra băii, băii, se se depun
depun succesiv,
succesiv, picături
picături din din materialul
materialul cremos,
cremos, pânăpână când
când acesta
acesta se se
epuizează,
epuizează, apoi apoi frotiul
frotiul va va fi
fi uscat,
uscat, fixat
fixat la la flacără
flacără şi şi colorat
colorat Ziehl-Neelsen.
Ziehl-Neelsen.
Se va
Se va examina
examina la la microscop
microscop cu imersie şi
cu imersie şi se
se va
va face
face o o apreciere
apreciere cantitativă:
cantitativă:
-- 0O baciJi/
baci]Ji/ 300
300 câmpuri
câmpuri microscopice
microscopice =absentă =absentă b.a.a.r;b.a.a.r;
-- 1-3
1-3 bacili/
bacili/ 300300 câmpuri
câmpuri = = prezenţa
prezenţa b.a.a.rb.a.a.r se se solicită
solicită repetare;
repetare;
-- 4-9
4-9 bacili/100
bacili/100 U U = = prezenţa
prezenţa b.a.a.rb.a.a.r (+);(+);
10-100 bacili/100
-- 10-100 bacili/100 == prezenţa prezenţa b.a.a.r
b.a.a.r (++);
(++);
-- peste
peste 100
100 bacili/100
bacili/100 câmpuricâmpuri mic. mic. = = prezenţa
prezenţa b.a.a.r b.a.a.r (+++).
(+++).
Concentraţia micobacteriilor tuberculozei
Concentrația micobacteriilor tuberculozei în în spută
spută esteeste totdeauna
totdeauna în în raport
raport direct
direct cucu
dimensiunea
dimensiunea şi şi intensitatea
intensitatea leziunii.leziunii. AlteAlte bacterii
bacterii AR AR posibil
posibil de de întâlnit
întâlnit înîn frotiuri
frotiuri sese
deosebesc morfologic:
deosebesc nocardiile şi
morfologic: nocardiile şi actinomicetele
actinomicetele sunt sunt filamentoase,
filamentoase, cu cu ramificaţii
ramificații şi şi
extremităţi îngroşate. Apoi
extremităţi îngroşate. Apoi produsul
produsul patologic
patologic se se va însămânţa pe
va însămânţa pe mediile
mediile de de cultură
cultură
amintite.
amintite. Controlul
Controlul creşterii
creşterii pe pe mediile
mediile de de cultură
cultură se se face
face prin
prin frotiuri
frotiuri colorate
colorate Ziehl-
Ziehl-
Neelsen.
Identificarea
Identificarea rapidă
rapidă a
a micobacteriilor
micobacteriilor
Se
» Se face
face prin
prin colorare
colorare cucu fluorocromi
fluorocromi
(auramin-rhodamină) aa sputei
(auramin-rhodamină) sputei şi şi se
se
examinează
examinează cu cu microscopul
microscopul cu cu fluorescenţă,
fluorescenţă,
micobacteriile se
micobacteriile se colorează
colorează înîn galben
galben
portocaliu, pe
portocaliu, pe fond
fond negru.
negru.
» Reacţia de
Reacţia de amplificare
amplificare genică
genică (PCR)
(PCR)
» Sonde ADN
Sonde ADN identifică
identifică prin
prin hibridare
hibridare
secvenţe
secvenţe nucleotidice
nucleotidice specifice
specifice unorunor
micobacterii..
micobacterii
 Genul Mycobacterium
Genul Mycobacterium
•* Din
Din punct
punct de
de vedere
vedere clinic,
clinic, tuberculoza
tuberculoza se se
caracterizeaza prin:
caracterizeaza prin:
•* oboseala,
oboseala, astenie,
astenie, subfebrilitati
subfebrilitati vesperale,
vesperale, tuse
tuse
cu expectoratie
cu expectoratie (hemoptizie),
(hemoptizie), antecedente
antecedente
personale patologice
personale incarcate (fumator,
patologice incarcate (fumator,
afectiuni respiratorii
afectiuni respiratorii frecvente,
frecvente, purtator cronic,
purtator cronic,
nivel socio-economic
nivel socio-economic scazut).
 Genul Mycobacterium
Genul Mycobacterium

•* Evolutia
Evolutia poate
poate fi:fi:
·- favorabila [autolimitare, autosterilizare)
favorabila (autolimitare, autosterilizare) sau
sau
·- nefavorabila
nefavorabila (ramolisment
(ramolisment cazeos,
cazeos, fistulizare in
fistulizare in
bronsii si
bronsii si in
in final dezvoltarea cavernelor,
final dezvoltarea cavernelor
reprezentand surse
reprezentand surse majore
majore de
de diseminare
diseminare
sanguina si
sanguina si limfatica).
 Genul Mycobacterium
Genul Mycobacterium

•* Transmiterea
Transmiterea tuberculozei
tuberculozei sese face
face mai
mai ales
ales pe
pe
cale aerogena,
cale aerogena, favorizata
favorizata dede conditii
conditii insalubre,
insalubre,
supraaglomerarea, intuneric,
supraaglomerarea, intuneric, umezeala
 PROFILAXIE
PROFILAXIE
• Profilaxia
Profilaxia nespecifică
nespecifică
• depistarea precoce
depistarea precoce aa surselor
surselor de
de infecie
infecie
• izolarea lor
izolarea lor
• tratarea
tratarea
• educatia sanitară
educatia sanitară a a populaiei
populaiei
• Profilaxia
Profilaxia specifică
specifică
• vaccinarea BCG
vaccinarea BCG
• obligatorie la
obligatorie la noi în tară
noi în tară
• contine o
vaccinul contine
vaccinul o tulpină
tulpină de
de Mycobacterium
Mycobacterium bovis
bovis
• a
a pierdut
pierdut capacitatea
capacitatea patogenă patogenă rămânând
rămânând imunogenă
imunogenă
• vaccinul BCG
vaccinul BCG (bacille Calmette-Guerin) se
(bacille Calmette-Guerin) se utilizează
utilizează în
în
profilaxia tuberculozei
profilaxia tuberculozei din din 1921
IVIycobacterium leprae
Mycobacterium leprae
-Sunt bacili
-Sunt bacili acid-alcoolo-rezistenţi,
acid-alcoolo-rezistenţi, în în coloraţia
coloraţia Ziehl-Neelsen
Ziehl-Neelsen apar apar
roşii.
rOŞII.
-Sunt lungi
-Sunt lungi de de 4-5 pm şi
4-5 pm şi groşi
groşi de de 0,4-0,5
0,4-0,5 pm,pm, se se găsesc
găsesc exclusiv
exclusiv
numai
numai la la oameni,
oameni, sunt sunt dispuşi
dispuşi intraceluar
intraceluar înîn grămezi
grămezi compacte.
compacte.
-- Nu
Nu cultivă
cultivă pe pe medii
medii artificiale
artificiale şi şi nici
nici pe
pe medii
medii viivii (culturi
(culturi celulare
celulare
sau animale
sau animale de de laborator).
laborator).
-Poate cultiva
-Poate cultiva pe pe şoarecele
şoarecele alb alb
-Aceşti bacili
-Aceşti bacili auau multiplicare
multiplicare strict
strict intracelulară,
intracelulară, unde unde formează
formează
grămezi
grămezi care care se se numesc
numesc globiglobi leproşi
leproşi (ca (ca ţigările într-un pachet)
ţigările într-un pachet)
-Este rezistent
-Este rezistent în mediul extern,
în mediul extern, sensibil
sensibil la sulfone şi
la sulfone şi rifampicină,
rifampicină,
iar
iar tratamentul
tratamentul durează durează 5 5 ani.
ani.
 Identificarea micobacteriilor
Identificarea micobacteriilor
• impune
impune competenţă,
competenţă, norme norme de de securitate
securitate microbiologică,
microbiologică, dotăridotări şi
şi facilităţi
facilităţi
particulare.
particulare.
• laboratoarele
laboratoarele implicate
implicate în în Programul
Programul Naţional
Naţional de de Control
Control al al Tuberculozei
Tuberculozei
sunt ierarhizate
sunt ierarhizate pe pe 33 niveluri:
niveluri:
• Nivelul
Nivelul I,|, laboratoarele
laboratoarele dispensarelor
dispensarelor teritoriale
teritoriale de de pneumoftiziologie,
pneumoftiziologie,
efectuează
efectuează microscopia
microscopia pentru
pentru depistarea b.a.a.r, şi
depistarea b.a.a.r, şi trimit
trimit prelevatele
prelevatele
patologice laboratoarelor
patologice laboratoarelor de de nivel
nivel II,
II, pentru
pentru efectuarea
efectuarea culturilor,
culturilor, asimilate
asimilate
acestor laboratoare
acestor laboratoare suntsunt unele
unele din din laboratoarele
laboratoarele clinice.
clinice.
• Nivelul
Nivelul II, laboratoarele dispensarelor/staţionarelor
II, laboratoarele dispensarelor/staţionarelor judeţene judeţene de de
pneumoftiziologie şi
pneumoftiziologie şi ale
ale marilor
marilor spitale
spitale cu cu paturi
paturi pentru
pentru pacienţi
pacienţi cucu
tuberculoză,
tuberculoză, trebuie
trebuie săsă asigure
asigure izolarea
izolarea micobacteriilor,
micobacteriilor, identificarea
identificarea M. M.
tuberculosis, identificarea
tuberculosis, identificarea primară
primară aa micobacteriilor
micobacteriilor non-tuberculoase
non-tuberculoase cu cu
sau
sau fără
fără testare
testare aa sensibilităţii
sensibilităţii la la antibiotice.
antibiotice.
• Nivelul Il, sunt
Nivelul III, sunt laboratoarele
laboratoarele de de referinţă,
referinţă, asigură
asigură identificări
identificări definitive,
definitive,
monitorizarea laboratoarelor
monitorizarea laboratoarelor de nivel I| şi
de nivel II, supraveghează
şi II, supraveghează dinamicadinamica
chimiorezistenţei primare
chimiorezistenţei primare şi şi deţin
deţin colecţia
colecţia naţională
naţională de de tulpini
tulpini de
de referinţă
referinţă
micobacteriene.
BACTERII SPIRALATE
BACTERII SPIRALATE
Familia Spirochetaceae.
Familia Spirochetaceae.
 Familia Spirochetaceae.
Familia Spirochetaceae.
Cuprinde bacterii
Cuprinde bacterii de
de forma
forma spiralata
spiralata (spirochete),incadrate
(spirochete),incadrate
in 3
in 3 genuri,
genuri, toate
toate implicate
implicate inin patologia
patologia umana:
umana:
o Genul
o Genul Treponema,
Treponema, care care cuprinde:
cuprinde:
o specii
o saprofite, comensale
specii saprofite, comensale ale ale mucoaselor
mucoaselor genitala
genitala
si bucala,
si bucala,
o specii
o specii patogene,
patogene, majoritatea
majoritatea implicate
implicate inin boli
boli cu
cu
transmitere veneriana;
transmitere veneriana;
—– Treponema
Treponema pallidum (ME)
pallidum (ME)
o Genul
o Genul Leptospira,
Leptospira, cuprinde
cuprinde bacterii
bacterii implicate
implicate in in
producerea leptospirozelor
producerea leptospirozelor;;
—– Leptospira
Leptospira interrogans(ME)
interrogans(ME)
o Genul
o Genul Borrelia
Borrelia cuprinde
cuprinde bacterii
bacterii implicate
implicate in in aparitia
aparitia
boreliozei, febrelor
boreliozei, febrelor recurente
recurente si si a
a bolii
bolii de
de Lyme.
Lyme.
Legionella pneumophila

•Gram negative rod

•Stains poorly

5
Genul Treponema
Genul Treponema
 Genul Treponema
Genul Treponema
Exista mai
Exista mai multe
multe specii
specii patogene:
patogene:
·- Treponema
Treponema pallidum
pallidum (principalul
(principalul reprezentant
reprezentant al al
acestui gen),
acestui gen), agentul
agentul etiologic
etiologic al al sifilisului
sifilisului care
care este
este o o
boala veneriana,
boala veneriana, specific
specific umana,
umana,
·- Treponema
Treponema pertenue,
pertenue, in in zonele
zonele calde
calde tropicale
tropicale
determina aparitia
determina aparitia pianului,
pianului, boala
boala veneriana,
veneriana, carecare sese
manifesta tardiv
manifesta tardiv prin
prin leziuni
leziuni osoase,
osoase,
·- Treponema
Treponema carateum,
carateum, determina
determina pinta,
pinta, mai
mai ales
ales inin
America Centrala si
America Centrala si de
de Sud;
Sud; se se caracterizeaza
caracterizeaza initial
initial prin
prin
leziuni cutanate
leziuni cutanate si si tardiv
tardiv prin
prin leziuni
leziuni cardio-vasculare
cardio-vasculare si si
ale sistemului
ale sistemului nervos
nervos central.
central.
Caractere morfotinctoriale
Caractere morfotinctoriale
•bacterie
“bacterie spiralată,
spiralată, cu
cu spire
spire regulate
regulate şi
şi cu
cu capetele
capetele drepte.
drepte.

•Este
*Este foarte
foarte subţire
subţire şi
şi relativ
relativ scurtă
scurtă 2
2 –
— 20
20 µm/0,1
um/0,1 -- 0,3
0,3 µm.
um.

•Este
“Este foarte
foarte mobilă
mobilă

–
- Mişcarea
Mişcarea caracteristică
caracteristică sese observă
observă prin
prin examinarea
examinarea treponemelor
treponemelor lala microscopul
microscopul
cu fond
cu fond întunecat unde apar
întunecat unde apar ca
ca spirochete
spirochete fine,
fine, cu
cu 6
6 -- 14
14 spire
spire regulate,
regulate, animate
animate de
de
mişcări
mişcări de înşurubare, flexie
de înşurubare, flexie şi
şi translaţie
translație

Caractere
Caractere de
de cultură
cultură ţi,
•T. pallidum nu
* |. pallidum nu se
se poate
poate cultiva
cultiva pe
pe medii
medii de
de cultură
cultură artificiale.
artificiale

•Poate
*Poate fi
fi menţinută în viaţă
menţinută în viaţă prin
prin inoculări
inoculări intratesticulare
intratesticulare la
la iepure,
iepure,
care
care dezvoltă
dezvoltă o
o orhită
orhită sifilitică
sifilitică
 Patogenie. Boala
Patogenie. Boala la
la om
om
•T.
* [. pallidum este agentul
pallidum este agentul etiologic
etiologic al
al
–sifilisului
—sifilisului venerian
venerian
•se
*se transmite
transmite prin
prin contact
contact sexual,
sexual, direct
direct cu
cu leziunile
leziunile
ulcerative ale
ulcerative ale persoanei
persoanei infectate
infectate
•Boala
*Boala evoluează
evoluează în în mai
mai multe
multe etape:
etape:
–sifilisul
—sifilisul primar
primar
–sifilisul
—sifilisul secundar,
secundar, latent
latent
–sifilisul
sifilisul terţiar
terțiar

–sifilisului congenital
—sifilisului congenital
•se
*se transmite
transmite la
la făt,
făt, transplacentar
transplacentar de
de la
la gravidele
gravidele
infectate, în
infectate, perioadele de
în perioadele de bacteriemie
bacteriemie
sifilisul primar
sifilisul primar
–După o
-După o incubaţie
incubație de
de 33 săptămâni
săptămâni se
se dezvoltă
dezvoltă leziunea
leziunea primară,
primară, denumită
denumită şancru
şancru de
de
inoculare
inoculare (şancru
(şancru dur)
dur)
•Ulceraţie
*Ulceraţie nedureroasă,
nedureroasă, cucu marginile
marginile ridicate,
ridicate, indurate
indurate şişi baza
baza netedă
netedă
–după 11 săptămână
-după săptămână apare
apare adenopatia
adenopatia regională
regională dură,
dură, discretă,
discretă, nedureroasă
nedureroasă
–se “vindecă”
—se “vindecă” spontan în 3-6
spontan în 3-6 săptămâni
săptămâni —– bacteriile
bacteriile sunt
sunt prezente în ţesutul
prezente în țesutul limfatic
limfatic

N "Oa a i A
•* sifilisul
sifilisul secundar
secundar
–apare la
-apare 4 -- 10
la 4 10 săptămâni
săptămâni după
după apariţia
apariţia şancrului
şancrului dacă
dacă pacientul
pacientul nu
nu urmează
urmează
tratament
tratament
–leziuni muco-tegumentare
—leziuni muco-tegumentare diseminate
diseminate şi
şi de
de aspect
aspect variat
variat dar
dar care
care sunt
sunt infectante
infectante
–După manifestările
-După manifestările clinice
clinice urmează
urmează o o perioadă
perioadă de
de latenţă,
latenţă, sifilisul
sifilisul latent
latent
•bolnavul
“bolnavul este
este asimptomatic
asimptomatic şi
şi necontagios,
necontagios, cu
cu excepţia
excepţia transmiterii
transmiterii transplacentare
transplacentare
sau prin
sau prin sânge
sânge
 sifilisul terţiar
•* sifilisul terțiar
–apare la
-apare la 55 —– 30%
30% dindin pacienţii
pacienţii netrataţi,
netrataţi, după
după 1- 1- 40
40 de
de ani
ani (în
(în medie
medie
15
15 ani)
ani) de
de lala infecţia
infecția primară
primară
–Afectează sistemul
-Afectează sistemul cardiovascular
cardiovascular (în (în special
special aorta)
aorta) şi
şi sistemul
sistemul
nervos central
nervos central
–Leziunea histologică
-Leziunea histologică caracteristică
caracteristică este
este goma
goma
•ulceraţie
*ulceraţie necrotică
necrotică
•apare
“apare pe pe tot
tot corpul
corpul dardar şi în ficat,
şi în ficat, oase
oase sau
sau testicule
testicule

•sifilisul
“sifilisul congenital
congenital
–se manifestă
—se manifestă asemănător
asemănător cu cu sifilisul
sifilisul secundar
secundar al al
adultului.
adultului.
–în sifilisul
—în sifilisul congenital
congenital tardiv
tardiv predomină
predomină manifestările
manifestările
neurologice
neurologice acompaniate
acompaniate de de modificări
modificări caracteristice
caracteristice ale
ale
sistemului
sistemului osos,
osos, ale
ale dinţilor
dinţilor sau
sau oculare
oculare
 Diagnostic
Diagnostic
evidenţierea
evidenţierea treponemelor
treponemelor
–examen microscopic
—examen MICroscopic din din
•secreţie din şancru
“secreție din şancru în sifilisul primar
în sifilisul primar
•exsudat
*exsudat dindin leziuni,
leziuni, biopsii
biopsii în sifilisul secundar
în sifilisul secundar
•LCR
“LCR în sifilisul terţiar
în sifilisul terțiar
•prelevate
“prelevate dindin cordonul
cordonul ombilical, placentă,
ombilical, placentă,
aspirat nazal,
aspirat nazal, din
din leziunile
leziunile cutanate
cutanate în sifilisul
în sifilisul
congenital
congenital
NU se
NU se colorează
colorează Gram,
Gram, se se foloseşte
foloseşte
microscopul cu
microscopul cu fond
fond întunecat
întunecat sau sau coloraţii
coloraţii
speciale (Giemsa, imunofluorescenţă)
speciale (Giemsa, imunofluorescenţă)
 Diagnostic
Diagnostic
◆diagnostic
O diagnostic serologic
serologice
◆cea
cea mai utilizată metodă
mai utilizată metodă de
de diagnostic
diagnostic
◆Testele
O Lestele serologice
serologice nespecifice
nespecifice

◆evidenţiază
evidenţiază anticorpii
anticorpii antilipoidici
antilipoidici care
care apar
apar în boala acută
în boala acută la 4 —– 66 săptămâni
la 4 săptămâni de la infecţie
de la infecție
◆teste
teste obligatorii
obligatorii în
în caz de căsătorie,
caz de căsătorie, angajare,
angajare, examene
examene de
de admitere,
admitere, la la gravide, pentru obţinerea
gravide, pentru obținerea
permisului de
permisului de conducere
conducere
◆metode
metode folosite
folosite

◆VDRL
O VDRL (Veneral
(Veneral Diseases
Diseases Research Laboratory), reacţie
Research Laboratory), reacție de
de precipitare
precipitare
◆RPR
RPR (Rapid
(Rapid Plasma Reagine), reacţie
Plasma Reagine), reacţie de
de aglutinare
aglutinare
◆pot
pot apărea
apărea rezultate
rezultate fals
fals pozitive
pozitive =>
=> obligatorie
obligatone CONFIRMAREA
CONFIRMAREA prin prin teste
teste specifice
specifice

o VDRL
o VDRL (Veneral
(Veneral Disease
Disease Research
Research Laboratory)
Laboratory) este
este un
un test
test de
de triaj
triaj pentru
pentru
depistarea sifilisului
depistarea sifilisului (primar);
(primar); caca principiu
principiu este
este o
o reactie
reactie de
de floculare;
floculare; areare o
o
sensibilitate crescuta,
sensibilitate crescuta, dar
dar o
o specificitate
specificitate scazuta
scazuta (pot
(pot apare
apare reactii
reactii fals
fals pozitive:
pozitive:
la gravide,
la gravide, sau
sau dupa
dupa ingestie
ingestie de
de alcool,
alcool, postprandial,
postprandial, administrare
administrare de de vaccinuri,
vaccinuri,
precum si in
precum si in alte
alte situatii
situatii patologice:
patologice: lepra,
lepra, infectii
infectii virale,
virale, stari
stari canceroase,
canceroase, boli
boli
autoimune: poliartrita
autoimune: poliartrita reumatoida,
reumatoida, lupus
lupus eritematos
eritematos diseminat);
diseminat); dede aceea
aceea orice
orice
rezultat pozitiv trebuie
rezultat pozitiv trebuie confirmat
confirmat printr-un
printr-un test
test cu
cu specificitate
specificitate mai
mai mare,
mare, de de
exemplu TPHA
exemplu TPHA; ;
oo RPR
RPR carbon
carbon (Rapid
(Rapid Plasma
Plasma Reagin),
Reagin), in
in care
care cardiolipidul
cardiolipidul este
este fixat
fixat pe
pe suport
suport
solid reprezentat
solid reprezentat dede particule de carbon,
particule de carbon, astfel
astfel incat
incat anticorpii
anticorpii specifici
specifici vor
vor putea
putea
fi detectati
fi detectati prin
prin reactii
reactii de
de aglutinare;
aglutinare; specificitatea
specificitatea este
este redusa,
redusa, de
de aceea
aceea sese
recomanda confirmarea prin
recomanda confirmarea prin TPHA
TPHA sausau ELISA.
ELISA.
Tratament
Tratament
•Penicilina G administrată
*Penicilina G administrată parenteral.
parenteral.

•La
*La nevoie
nevoie penicilina
penicilina se
se poate
poate înlocui cu alte
înlocui cu alte antibiotice.
antibiotice.

•Pacienţii
“Pacienţii trebuie
trebuie urmăriţi
urmăriţi serologic
serologic şi
şi clinic
clinic pentru
pentru a
a aprecia
aprecia
eficienţa
eficienţa tratamentului
tratamentului. .

Epidemiologie
Epidemiologie
◆Sursa
9 Sursa de
de infecţie
infecţie este
este omul
omul bolnav în stadiu
bolnav în stadiu de
de sifilis
sifilis primar
primar sau
sau secundar
secundar

◆Boala
O Boala sese transmite
transmite prin
prin contact
contact sexual,
sexual, transplacentar
transplacentar şi
şi prin
prin sânge
sânge infectat
infectat
(transfuzii)
(transfuzii)

◆Receptivitatea
QRecepitivitatea este
este generală,
generală, infecţia
infecția existând
existând la
la orice
orice vârstă
vârstă

◆profilaxie
eprofilaxie nespecifică
nespecifică pentru
pentru bolile
bolile cu
cu transmitere
transmitere sexuală:
sexuală:
◆evitarea
Qevitarea contactelor
contactelor sexuale
sexuale neprotejate
neprotejate
◆evitarea
evitarea partenerilor
partenerilor multipli,
multipli, anonimi,
anonimi,
◆în
Qin cazul îmbolnăvirii, tratarea
cazul îmbolnăvirii, tratarea tuturor
tuturor partenerilor
partenerilor sexuali
sexuali

◆Depistarea
9 Depistarea gravidelor
gravidelor şi
şi tratarea
tratarea lor
lor scade
scade incidenţa
incidenţa sifilisului
sifilisului congenital
congenital
 TESTAREA SENSIBILITĂŢII
BACTERIILOR
LA ANTIBIOTICE ŞI TEHNICI DE
LABORATOR PENTRU CONTROLUL
ANTIBIOTICOTERAPIEI

LP 7
LP 7
Criterii în iniţierea
Criterii în iniţierea şi
şi conducerea
conducerea
antibioterapiei
antibioterapiei

1. Oportunitatea
1. Oportunitatea tratamentului
tratamentului antibacterian
antibacterian
 criterii
criterii clinice: pneumonii lobare,
clinice: pneumonii lobare, infecţii
infecții genito-
genito-
urinare, meningite
urinare, meningite purulente,
purulente, endocardite
endocardite acute
acute sausau
subacute,
subacute, celulite
celulite necrozante,
necrozante, febră prelungită la
febră prelungită la cei
cei cucu
valvulopatii cardiace,
valvulopatii cardiace, stări
stări febrile
febrile lala neutropenici,
neutropenici, cu cu
proteze cardiace,
proteze cardiace, articulare,
articulare, şunturi,
şunturi, catetere
catetere venoase;
venoase;
 criterii de
criterii de laborator:
laborator:
- leucocitoză
leucocitoză cu polinucleoză, valori
cu polinucleoză, valori crescute
crescute ale
ale
procalcitoninei, CRP,
procalcitoninei, CRP, fibrinogen,
fibrinogen, V.S.H.
V.S.H.
- izolarea şi
izolarea şi identificarea
identificarea agentului
agentului etiologic.
etiologic.
2. Criterii
2. Criterii în alegerea antibioticului
în alegerea antibioticului adecvat
adecvat
 etiologie
etiologie probabilă
probabilă (anterior
(anterior identificării):
identificării): explică
explică
necesitatea
necesitatea cunoaşterii principalilor agenţi
cunoaşterii principalilor agenţi etiologici
etiologici
sensibilitatea
sensibilitatea lala antibiotice
antibiotice a a agentului
agentului etiologic
etiologic
(spectrul natural
(spectrul natural versus
versus spectru
spectru actual);
actual);
 sediul
sediul infecţiei
infecţiei (concentraţii
(concentraţii eficiente
eficiente în: bilă, urină,
în: bilă, urină,
cavităţi
cavități seroase)
seroase)
 particularităţi
particularităţi individuale:
individuale: vârstă,
vârstă, stări
stări fiziologice,
fiziologice, tare
tare
organice/boli
organice/boli asociate,
asociate, stări
stări alergice,
alergice, stări
stări dede
imunodepresie;
imunodepresie;
3.
3. Aprecierea
Aprecierea eficienţei
eficienţei terapiei
terapiei cucu antibiotice
antibiotice
 criterii clinice: scăderea
criterii clinice: scăderea febrei,
febrei, ameliorarea
amelorarea stării
stării
generale;
generale;
 criterii
criterii de
de laborator:
laborator:
- nespecifice:
nespecifice: scăderea
scăderea CRP, procalcitonină, fibrinogen;
CRP, procalcitonină, fibrinogen;
- specifice:
specifice: negativarea
negativarea examenelor
examenelor bacteriologice.
bacteriologice.
Explicaţii
Explicații posibile
posibile ale
ale eşecului
eşecului tratamentului
tratamentului
cu antibiotice
cu antibiotice
testarea sensibilităţi faţă de o bacterie fără
. . 9 .

semnificaţie
semnificaţie clinică;
clinică;
- streptococi
streptococi viridans
viridans in in infecţii
infecţii respiratorii;
respiratorii;
- stafilococi
stafilococi coagulază-negativi
coagulază-negativi (contaminanţi
(contaminanţi ai
ai
hemoculturia)
hemoculturii)
lipsa
lipsa realizării
realizării înîn focarul
focarul dede infecţie
infecţie aa unor
unor
concentraţii
concentraţii active;
active;
selectarea
selectarea unor
unor mutanţi
mutanţi rezistenţi;
rezistenți;
pacient
pacient imunodeprimat;
imunodeprimat;
>» Antibioticele sunt
Antibioticele sunt substanţe
substanţe antimicrobiene
antimicrobiene
obţinute
obţinute prin
prin biosinteză
biosinteză bacteriană
bacteriană
Bac!///us) ) sau
(streptomycete, Bacillus
(streptomycete, sau fungică
fungică
(Penicillinurmn),
(Penicillinum),
Chimioterapicele sunt
>» Chimioterapicele sunt substanţe
substanţe
antimicrobiene
antimicrobiene obţinute
obţinute prin prin sinteză, în
sinteză, în
laborator
laborator sausau produşi
produşi de semi-sinteză, când
de semi-sinteză, când
pe un
pe un nucleu
nucleu elaborat
elaborat de de un un microorganism
microorganism
viu
viu se
se grefează
grefează o o grupare
grupare chimică
chimică exemplu:
exemplu:
(meticilina, ampicilina,
(meticilina, ampicilina, oxacilina,
oxacilina, rifampicina).
rifampicina).
> Spectru de
Spectru de acţiune
acţiune -- profilul
profilul activităţii
activităţii unui
unui agent
agent
antimicrobian asupra
antimicrobian asupra unor
unor variate
variate specii
specii bacteriene
bacteriene
sau grupuri
sau grupuri dede specii
specii (bacterii
(bacterii Gram
Gram pozitive,
pozitive, Gram
Gram
negative, bacterii
negative, bacterii aerobe,
aerobe, anaerobe,
anaerobe, etc.).
etc.).

> Mecanisme majore

Mecanisme majore de de acţiune
acţiune antibacteriană
antibacteriană
-- Inhibarea
Inhibarea sintezei
sintezei peretelui
peretelui bacterian.
bacterian.
Alterarea permeabilităţii
-- Alterarea permeabilităţii membranei
membranei citoplasmatice.
citoplasmatice.
-- Inhibarea
Inhibarea sintezei
sintezei proteice.
proteice.
-- Inhibarea
Inhibarea sintezei
sintezei acizilor
acizilor nucleici.
nucleici.
Testarea sensibilitatii bacteriilor la antibiotice

» Respectarea procedurilor
Respectarea procedurilor de
de testare:
testare:
- mediul
- mediul dede cultura
cultura
-inoculul
-inoculul
- standardizarea
- standardizarea inoculului
inoculului
- alegerea
- alegerea antibioticelor
antibioticelor
- respectarea
- respectarea conditiilor
conditiilor de
de incubare,
incubare, temperatura,
temperatura,
atmosfera.
atmosfera.
- citirea
- citirea si
si interpretarea
interpretarea corectă
corectă aa breakpoint-urilor
breakpoint-urilor

>
 Respectarea procedurilor
Respectarea procedurilor de
de biosiguranţă
biosiguranţă în
în
laborator
laborator

DD
 Metode convenţionale de
Metode convenţionale de testare
testare in
/2
VItro
vitro

>
 cantitative
cantitative _— macrometodă
macrometodă
mediu lichid
mediu lichid
- metoda
- metoda diluţiilor
diluţiilor micrometodă
micrometodă
mediu solid
mediu solid
- E-Test
- E-Test

>
 calitative
calitative
- antibiograma
- antibiograma difuzimetrică
difuzimetrică (Kirby-Bauer)
(Kirby-Bauer)

DD
Antibiograma difuzimetrică
sensibilitatea
sensibiliţatea bacteriei
bacțeriei la
la un
un anumit
anumit antibiotic este
antibiotic este
apreciată
apreciată după
după mărimea
mărimea diametrului
diametrului zonei
zonei dede |
inhibare
inhibarea a creşterii
creşterii (CMI)
(CMI) în jurul microcomprimatului
în jurul microcomprimatului
de antibiotic
de antibiotic respectiv.
respectiv.
reprezintă
reprezintă metoda uzuală de
metoda uzuală de testare în laboratorul
testare în laboratorul
clinic
clinic a
a sensibilităţii
sensibilităţii la
la antibiotice
antibiotice aa bacteriilor
bacteriilor cu
cu
creştere
creştere rapidă,
rapidă, aerobe
aerobe şişi facultativ
facultativ anaerobe;
anaerobe;
avantaje
avantaje
- metodă
metodă uşoruşor dede executat
executat şişi ieftină;
ieftină;
- standardizată,
standardizată, cu cu rezultate exacte şi
rezultate exacte şi reproductibile;
reproductibile;
- flexibilă în alegerea
flexibilă în alegerea antibioticelor
antibioticelor pentru
pentru testare;
testare;
dezavantaje:
dezavantaje:
- metodă
metodă calitativă;
calitativă,
- standardizată
standardizață numainumai pentru
pentru unele
unele dindin speciile
speciile bacteriene
bacteriene de
de
interes medical:
interes medical: specii
specii din
din familia
familia Enterobacteriaceae
Enterobacteriaceae, ,
Acinetobacter spp,
Acinetobacter spp, P.aeruginosa
P.aeruginosa, , S.maltophilia
S.maltophilia, , B.cepacia
B.cepacia, , .
S.aureusşişi stafilococi
S.aureus stafilococi coagulazo-negativi, S.pneumoniae şi
coagulazo-negativi, S.pneumoniae şi
alte specii
alte specii Streptococcus
Streptococcus, , Enterococcus
Enterococtus spp,
șpp, Haemophillus
Haemophillus
spp,„_/V. gonorrhoeae, N.meningitidis,V.cholerae.
N.gonorrhoeae, N.meningitidis, V.cholerae.
Testarea sensibilitatii la antibiotice a bacteriilor

 Breakpoint-urile divid bacteriile in trei categorii

de sensibilitate:

» Sensibil (S—
Sensibil (S— defineste
defineste activitatea
activitatea antimicrobiana
antimicrobiana
asociata cu
asociata cu succesul
succesul terapeutic)
terapeutic)
» Intermediar
Intermediar (I—defineste
(I—defineste activitatea
activitatea antimicrobiana
antimicrobiana
asociata cu
asociata cu un
un efect
efect terapeutic
terapeutic incert,
incert, cu
cu exceptia
exceptia
situatiilor cand
situatiilor cand sese pot
pot administra
administra doze
doze foarte
foarte mari)
mari)
» Resistent
Resistent (R—defineste
(R—defineste activitatea
activitatea antimicrobiana
antimicrobiana
asociata esecului
asociata esecului terapeutic).
terapeutic).
Antibiograma difuzimetrică
Antibiograma difuzimetrică
/
 Care sunt
Care sunt bacteriile
bacteriile ce
ce pot
poi fi
fi testate?
testate?

/
 Ce antibiotice
Ce antibiotice folosim
folosim pentru
pentru testare?
testare?

'
 Cum
Cum realizăm
realizăm testarea?
testarea?

'
 Cum
Cum asigurăm
asigurăm controlul
controlul de
de calitate?
calitate?

”
 Cum
Cum citim
citim şi
şi interpretăm
interpretăm rezultatele?
rezultatele?
Condiţii
Condiţii impuse
impuse pentru
pentru tulpina
tulpina de
de testat
testat

- Să
Să reprezinte
reprezinte agentul
agentul etiologic
etiologic real
real al
al infecţiei;
infecţiei;

= Să
Să fie
fie înîn cultură
cultură pură;
pură;

= Să
Să se
se realizeze în paralel
realizeze în paralel identificarea
identificarea la
la nivel
nivel de
de
specie.
specie.
Criterii în alegerea antibioticelor pentru testare
 Sensibilitatea
Sensibilitatea naturală
naturală a
a speciei;
speciei;

 Sediul
Sediul infecţiei;
infecţiei;

 Extrapolarea
Extrapolarea rezistenţei
rezistenţei pentru
pentru antibiotice
antibiotice din
din
aceeaşi
aceeaşi familie;
familie;

 Antibiotice care
Antibiotice care exprimă
exprimă cel
cel mai
mai bine
bine un
un
anumit fenotip
anumit fenotip de
de rezistenţă;
rezistenţă;

 Disponibilitatea antibioticelor
Disponibilitatea antibioticelor în farmacii.
în farmacii.
Metoda de testare Kirby-Bauer
Mediul de testare
 Agar
Agar Mueller-Hinton
Mueller-Hinton
- nu
nu interferează
interferează cu cu acţiunea
acţiunea antibioticelor;
antibioticelor;
- permite
permite o o difuziune
difuziune uniformă
uniformă a a antibioticelor
antibioticelor din
din microcomprimate
microcomprimate ;;
- asigură
asigură o o creştere
creştere satisfăcătoare
satisfăcătoare pentru
pentru bacterii
bacterii nepretenţioase
nepretenţioase
nutritiv;
nutritiv;
- pentru
pentru bacterii
bacterii fastidioase
fastidioase se
se adaugă
adaugă suplimente
suplimente de de creştere
creştere (sânge
(sânge de
de
erbec pentru
berbec S.pneumoniae şi
pentru S.pneumoniae şi alţi
alţi streptococi
streptococi iariar pentru
pentru H.influenzae
//./nfluenzae
şi
Ş i N.gonorrhoeae
W.gonorrhoeae se se folosesc
folosesc numai
numai mediile
mediile indicate
indicate dede standardul
standardul
CLSI);
CLSI);
- pH 7,2
pH 7,2 -
- 7,4
7,4 la
la temperatura
temperatura camerei
camerei (verificare
(verificare pentru
pentru fiecare
fiecare lot
lot de
de
mediu);
mediu);
- concentraţie
concentraţie optimă
optimă de
de ioni
ioni divalenţi
divalenţi –- Ca,
Ca, Mg;
Mg;
- concentraţii
concentraţii reduse
reduse de
de timidină
timidină sausau timină.
timină.
 Repartizarea
Repartizarea mediului
mediului
0C, pe
- lala 45-50
45-5009C, pe suprafaţă
suprafaţă perfect
perfect orizontală, în cutii
orizontală, în cutii Petri, în grosime
Petri, în grosime
de
de d4 mm
mm (25
(25 mL
mL pentru
pentru o
o placă
placă cu
cu ø
8 de
de 9
9 mm),
mm), cu
cu uscare
uscare înainte de
înainte de
utilizare.
utilizare.
 Conservarea
Conservarea plăcilor
plăcilor
- plăcile
plăcile neutilizate
neutilizate vor
vor fi
fi menţinute
menținute la
la frigider
frigider (+4
(+4 -
- +8
+8%C)
0C) în pungi din
în pungi din
plastic, cel
plastic, cel mult
mult 7
7 zile.
zile.
Microcomprimate cu antibiotice
Depunerea
Depunerea microcomprimatelor
microcomprimatelor
- se
se scot
scot la
la temperatura
temperatura camerei
camerei cu
cu 1-2
1-2 ore
ore înainte de utilizare,
înainte de utilizare,
pentru echilibrarea
pentru echilibrarea temperaturii;
temperaturii;
- depunere
depunere manuală
manuală sausau cu
cu dispenser
dispenser pepe suprafaţa
suprafaţa mediului, într-
mediului, într-
un
un interval
interval de
de 15
15 min
min de
de la însămânţare (cel
la însămânţare (cel mult
mult 6
6
microomprimate
microomprimate pe pe plăci
plăci cu
cu ø
3 de
de 9
9 mm).
mm).

Incubarea plăcilor
- înîn termostat
termostat cu
cu atmosferă
atmosferă obişnuită,
obişnuită, la
la temperatura
temperatura de
de 35
350%C,
0C,

după
după cel
cel mult
mult 1515 min
min de
de la
la depunerea
depunerea microcomprimatelor;
microcomprimatelor;
- atmosferă
atmosferă cucu CO
CO, 2 pentru
pentru incubarea
incubarea tulpinilor
tulpinilor Streptococcus
Streptococcus, ,
Haemophilus, , N.gonorrhoeae
Haemophilus N.gonorrhoeae sau sau N.meningitidis
N.meningiticlis; ;
- durata
durata incubării
incubării 16-18
16-18 ore.
ore.
Inoculum
Prepararea
Prepararea suspensiei
suspensiei bacteriene
bacteriene
- suspensie
suspensie în Mueller –- Hinton
bulion Mueller
în bulion (soluţie salină
Hinton (soluţie salină izotonă)
izotonă) din
din
cultura de
cultura de 18-24
18-24 ore
ore pe
pe medii
medii neselective;
neselective;
- densitate
densitate conformă
conformă standardului
standardului de
de turbiditate
turbiditate 0,5
0,5 McFarland;
McFarland;
Însămânţarea
Însămânţarea suspensiei
suspensiei
- înîn interval
interval de
de 15
15 min
min de
de la
la realizare,
realizare, cu
cu tampon
tampon din
din vată
vată ,, prin
prin
descrierea
descrierea dede striuri
striuri paralele
paralele pepe suprafaţa
suprafaţa mediului în 3
mediului în 3 sensuri,
sensuri,
rotind placa
rotind placa cu 6000 după
cu 60 după fiecare
fiecare etalare,
etalare, pentru
pentru aa obţine
obţine oo cultură
cultură
uniformă
uniformă “în
“în pânză”.
pânză.
Microcomprimate cu antibiotice
Conservarea
Conservarea microcomprimatelor
microcomprimatelor
- conţin
conţin concentraţii
concentraţii standard
standard (CLSI);
(CLSI);
- sunt
sunt folosite
folosite numai
numai cele
cele în termen de
în termen de valabilitate;
valabilitate;
- cele
cele de
de utilizare
utilizare curentă
curentă sunt
sunt menţinute
menținute la la frigider
frigider cel
cel mult
mult o
o
săptămână;
săptămână;
- cele
cele din
din stoc
stoc şi
şi cele
cele termolabile
termolabile (betalactamine,
(betalactamine, combinaţii
combinaţii cu
cu
ac.clavulanic)
Tha ulanic) sunt
sunt menţinute
menținute lala congelator
congelator (-20
(-20%0);
0C);
Aprecierea dimensiunii zonelor de inhibiţie
- se
se măsoară
măsoară ø
8 zonelor
zonelor din
din jurul microcomprimatelor pe
jurul microcomprimatelor pe dosul
dosul
plăcilor
plăcilor
- pe mediul
pe Mueller-Hinton suplimentat
mediul Mueller-Hinton suplimentat cu
cu sânge
sânge măsurarea
măsurarea se
se face
face
cu capacul
cu capacul deschis;
deschis;
 Precizări suplimentare
- înîn cazul
cazul antibiogramei
antibiogramei tulpinilor Proteus se
tulpinilor Proteus se ignoră
ignoră cultura în văl;
cultura în văl;
- vor
vor fi fi ignorate
ignorate microcoloniile
microcoloniile din
din vecinătatea
vecinătatea discului
discului cu
cu
Sulfametoxazol -Trimetoprim
Sulfametoxazol -Trimetoprim (cu (cu dimensiuni
dimensiuni < < 20%);
20%);
- în testarea
în testarea streptococilor,
streptococilor, se se măsoară
măsoară diametrul
diametrul zonei
zonei dede inhibiţie
inhibiţie
a
a culturii
culturii şi
şi nu
nu aa hemolizei;
hemolizei;
- Coloniile
Coloniile care
care sese dezvoltă
dezvoltă înîn interiorul
interiorul zonei
zonei de
de inhibiţie
inhibiţie pot
pot fifi
variante
variante rezistente
rezistente sau sau se
se datorează
datorează unuiunui inocul
inocul impur
impur (amestec).
(amestec).
- atunci când
atunci când inoculul
inoculul a a fost
fost pur,
pur, coloniile
coloniile prezente
prezente în zona de
în zona de
inhibiţie
inhibiţie aa unor
unor microcomprimate
microcomprimate vor vor fi
fi subcultivate,
subcultivate, identificate
identificate şi şi
retestate.
retestate.
Interpretarea
Interpretarea şi
şi raportarea
raportarea rezultatelor
rezultatelor
-- Ø3 înîn mm
mm a
a zonelor
zonelor de
de inhibiţie
inhibiţie sunt
sunt interpretate
interpretate după
după
standardele CLSI
standardele CLSI sau
sau EUCAST,
EUCAST, în final microorganismul
în final microorganismul
testat fiind
testat fiind încadrat pentru fiecare
încadrat pentru fiecare antibiotic
antibiotic în una din
în una din
cele
cele 33 categorii,
categorii, S,
S, I| sau
sau R,
R, şi
şi raportat
raportat terapeutului.
terapeutului.
Selectează 4-5 colonii bine izolate şi
realizează suspensia bacteriana
 |
LE RI A |
a | Ș |

Wc Faria
O 5
E) ) 4

na N î EI d i

— azere Dei Mee dice iei ari. ;

Însămânţează placa cu mediul Mueller-Hinton
Maăsoară 8 zonelor de inhibiţie şi interpretează
APAN EI
Testarea sensibilitatii bacteriene prin
metoda Disc-Difuzimetrica

CLSI (( Clinical
CLSI Clinical and
and Laboratory
Laboratory Standards
Standards
Institute)
Institute)
emetoda
metoda Kirby Bauer
Kirby Bauer (Disc-Difuzimetrica)
(Disc-Difuzimetrica)
Usi ez pleda o ei) ir]
Usi ez pleda o ei) ir]
 “ bacterial
bacterial growth
growth

inhibition zone in mm
 Metoda
Metoda diluţiitor în mediul
diluţiitor în mediul lichid
lichid

» PRINCIPIUL DETERMINARII
PRINCIPIUL DETERMINARII CMI
CMI
•- Un
Un inocul
inocul standardizat
standardizat al
al tulpinii
tulpinii testate
testate este
este insamantat
insamantat
intr-un gradient
intr-un gradient discontinuu
discontinuu de de concentratii
concentratii dede antibiotic,
antibiotic, se
se
urmăreşte
urmăreşte concentraţia
concentraţia de de medicament
medicament care care aa inhibat
inhibat creşterea
creşterea
germenului testat
germenului testat
•- Macrodilutii
Macrodilutii ((tuburi
tuburi cu
cu volum
volum de de minim
minim 2ml)
2ml)
•- Microdilutii(placute
Microdilutii(placute de de microtitrare
microtitrare cucu oo capacitate<500/μL
capacitate<500/uL godeu)
godeu)
•- CMI=
CMI= concentratia
concentratia ceacea mai
mai mica
mica care
care inhiba
inhiba complet
complet
cresterea in
cresterea in vitro,
vitro, in
in 18-24
18-24 ore
ore de
de incubare
incubare

8 «1 2 1 0.85 0.25 0.125 0.006

Nr”
$
9
e
*
Aaaa
Ei

E
n Pas
arati sei rapi
aa

ă RRSR-:
EL

îi Bana
a

% Danae
au
 Testarea sensibilitatii bacteriene prin
metoda E-test
-îmbină acurateţea
îmbină acurateţea testării
testării cantitative
cantitative şi
şi simplitatea
simplitatea
testării
testării difuzimetrice
difuzimetrice cu
cu mare
mare economie
economie de de timp.
timp.
e
 testarea sensibilitatii
testarea sensibilitatii la
la Va
Va pentru
pentru Stafilococ
Stafilococ si
si a
a
Pe pentru
Pe pentru Pneumococ,
Pneumococ,
Penicilina___
Penicilina

Vancomicina
Vancomicina
Indicatorii de bază prin care se exprimă activitatea
unui antibiotic “/n vitro” prin intermediul
antibiogramei

>
 concentraţia
concentraţia minimă
minimă inhibitorie
inhibitorie (C.M.I),
(C.M.I), care
care
este
este cea
cea mai
mai mică
mică cantitate
cantitate dede antibiotic
antibiotic care
care
poate
poate inhiba
inhiba tulpina
tulpina testată.
testată.
» concentraţia
concentraţia minimă
minimă bactericidă
bactericidă (C.M.B),
(C.M.B), este
este
cea
cea mai
mai mică
mică cantitate
cantitate dede antibiotic
antibiotic care
care
poate
poate omorî
omori tulpina
tulpina testată
testată
Controlul de laborator al eficienţei
tratamentului cu antibiotice
» Se
Se practică
practică fie
fie pentru
pentru a a evidenţia
evidenția eficienţa
eficienţa
antibioterapiei, fie
antibioterapiei, fie pentru
pentru evidenţierea
evidenţierea
nocivităţii
nocivităţii tratamentului.
tratamentului.
» N.E.I
N.E.I (nivelul
(nivelul dede eficienţă
eficienţă inhibitorie)=
inhibitorie)= nivelul
nivelul
de antibiotic/C.M.I)
de antibiotic/C.M.I)
» N.E.B
N.E.B (nivelul
(nivelul dede eficienţă
eficienţă bactericidă)
bactericidă) = =
nivelul de
nivelul de antibiotic/C.M.B
antibiotic/C.M.B. .
» un
un N.E.I
N.E.I sau
sau unun N.E.B
N.E.B care
care are
are cel
cel puţin
puţin
valoarea de
valoarea 4-8 indică
de 4-8 indică oo antibioterapie
antibioterapie
eficientă.
eficientă.

 Metode rapide
» Dozarea
Dozarea în în dinamică
dinamică a a concentraţiei
concentraţiei de de proteina
proteina
C
C reactivă
reactivă
» Antibioticoterapie eficenta
Antibioticoterapie eficenta
-Scăderea concentraţiei
-Scăderea concentraţiei de
de CRP
CRP
-Normalizarea concentraţiei
-Normalizarea concentraţiei CRP
CRP semnifică
semnifică
vindecarea
vindecarea
>» Antibioticoterapie ineficenta
Antibioticoterapie ineficenta
» Cresterea
Cresterea persistenta CRP sfârşitul
persistenta aa CRP sfârşitul curei
curei de
de
antibiotice prevesteşte
antibiotice prevesteşte recăderea
recăderea sausau recurenţa
recurenţa
infecţiei.
infecţiei.
 FENOTIPURI DE REZISTENTA
BLSE (afinitate > tinta- extindere spectru)
PENICILINAZE MUTANTE (CLASA A)-
K. pneumoniae, E. coli, P. Mirabilis, Salmonella spp. - teste de sinergism

ALTE BLSE TRANSFERABILE (K. pneumoniae, £. co!/i, P. mirabilis, Salmonella spp., Pseudomonas
aeuginosa, Acinetobacter baumannii : cefotaximaza (CTX-M), ceftazidimaza, BES-1, GES-1, SFO-I,

PER-!1 (clasa A) sau Oxa -11 (clasa D).

Caz, ceftazidima; TIM, Timentin; CRO, ceftriaxona

Veb-1 A.
Veb-1 A. boumannii
 screening=sinergism intre C3G si ATM si clavulanat pe
placa
Confirmare =sinergism cu
clavulanat
» diminuarea valorii
diminuarea valorii CMI
CMI cu
cu 3
3 dilutii
dilutii (microdilutii/E-Test
(microdilutii/E-Test ESBL)
ESBL)

» cresterea diametrului
cresterea diametrului de
de inhibitie
inhibitie cu
cu 5
5 mm,
mm, in
in cazul
cazul utilizarii
utilizarii
discurilor duble
discurilor duble
Detectia carbapenemazelor

DETECTIA

+ EDTA
20 µl| solutie
solutie de
de EDTA
EDTA adaugata
adaugata pe
pe discul
discul de
de cefalosporina
cefalosporina
 -_
- - —

)
Pila PN mi —
Pa" $ =— PE”) IA €
OI SU SAI MS sia SOIA

Rezistenta inductibila
Rezistenta inductibila lala clindamicina
clindamicina Absenta antagonismului
Absenta antagonismului
(erm +)
(erm +) (msrA+)
(msrA+)
Raportare clinda-R
Raportare clinda-R Raportare clinda-S
Raportare clinda-S

15 - 26 mm

“D”
+ -

Cli-2mcg/Ery-15mcg
Cli-2mcg/Ery-15mcg E 15 CC 2

Se raporteaza:
Se raporteaza:
clindamycin
clindamycin R
R
erythromycin
erythromycin RR
oxacillin
oxacillin RR
nicillin
penicillin RR
vancomycin =)
S