VIRUSOLOGIE

Microbiologia = ramura biologiei care studiaz caracterele generale ale

microbilor, forma, structura, activitatea fiziologic i biologia acestora.
Microbii = organisme foarte mici, dimensiunea lor fiind exprimat n
microni.
1 micron = 1000 mm
1 milimicron = 1 000 000 000 mm (nm)
Microbii sunt:
patogeni - produc mbolnviri
nepatogeni (saprofii) nu produc boala dect ocazional
Rol pozitiv al microbilor:
floarea microbian normal din intestin sintetizeaz vitamine din
grupul B.
Ramurile microbiologiei:
Virusologia studiaz virusurile
Bacteriologia studiaz bacteriile
Micologia studiaz ciupercile microscopice parazite
Parazitologia studiaz paraziii microscopici
tiin relativ tnr a aprut n strns legtur cu dezvoltarea
tiinelelor naturii, a fizicii, chimiei.
Microbiologia a contribuit la dezvoltarea biologiei n general i n special
a geneticii.
Contribuia microbiologiei la fabricarea de vaccinuri i antibiotice care
au dus la diminuarea unor epidemii: cium, holer, febr tifoid, etc.
nceputurile microbiologiei inventarea microscopului - olandezul
Antonie Van Leeuwenhock ntre 1632-1732.
Microscopul mrea de 300 de ori i a observat organisme vii denumite
animalicule.

 ntemeietorul microbiologiei trebuie considerat chimistul francez Louis

Pasteur 1822-1895, care a demonstrat rolul microorganismelor n
fermentaia alcoolic i lactic.
A introdus n practic vaccinul antirabic, anticrbunos i tehnica de
sterilizare prin pasteutizare.
Robert Koch 1843-1910, medic german, a descoperit agenii etiologici ai
tuberculozei, antraxului i holerei.
A utilizat pentru prima data medii de cultur solide.

Ilia Mecinikov 1845-1916 printele imunologi-ei a deminstrat existena

fagocitelor.
Victor Babe 1854-1926 a scris primul tratat de microbiologie din lume.
A contribuit la studiul turbrii, al leprei, TBC-ului, holerei, difteriei.
A descoperit peste 50 de microbi. A anticipat prin cercetrile sale
descoperirea antibioticelor
Ioan Cantacuzino 1863-1934, creatorul colii romneti de microbiologie
i de medicin experimental.
A fondat n 1921 Institutul Cantacuzino.

Definiie: Virusologia (inframicrobiologia) tiina care studiaz virusurile

(inframicrobii) i afeciunile provocate de acetia.

Primul virus 1982 Ivanovski virusul mozaicului tutunului

Urmtoarele decenii: variola, rabia, poliomielita, hepatita viral, gripa,
HIV

Virusurile germeni extrem de mici, foarte puini evoluai cu organizare

rudimentar
Lipsite de enzime proprii
Multiplicarea lor este legat de parazitarea obligatorie a
celulelor vii.
Particulariti:
Particule de dimensiuni foarte mici (18-400nm), vizibile doar cu
microscopul electronic.

Posed un singur tip de acid nucleic: ADN, ARN

Sunt parazii intracelulari obligatorii
nmulirea virusurilor replicare
Sunt specifice, fiecare virus provoac o anumit boal
Fiecare virus prezint o structur anitigenic specific (omul i
animalele infectate cu un virus produc anticopri specifici iar
imunitatea dobndit este solid i de lung durat)
Virusurile sunt insensibile la antibioticile uzuale

Virion = virus = corpuscul elementar = corpuscul viral

unitatea viral, morfofuncional, complet, intact, infecioas, cu
diametrul cuprins ntre 18-400 nm, capabil s infecteze bacterii, plante,
animale, omul
Se gsesc extracelular:
nainte de a infecta celula gazd
dup ce s-au asamblat i au fost eliberai din celula n care s-au
multiplicat

Dimensiune
Extrem de mici:
18 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae)
18 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae)
40 80 nm
rotavirus, v. rubeolos, v. hepatitei B, v. hepatitei C
90 200 nm
V. herpetic, v. rujeolos, v. respirator sinciial, v. rabic
300 - 450 nm (Poxviridae)
v. Variolic
peste 900 nm lungime, diametru 80 nm (Filoviridae)
VIRUS VEGETATIV particula viral aflat n celul, deficitar n
unele aspecte ale replicrii,lipsit de capsid.

 PROVIRUS genom viral integrat n cromozomul celulei gazd,

multiplicndu-se sincron cu acesta.
sferic
v.gripal, v.herpetic, adenovirus, v. polio
cilindric, bastona
v. mozaicului tutunului, fagi
paralelipiped
v. variolic, v. vaccinia
Cartu
v. rabic
filamentos
v. Ebola
sferic cu coad
bacteriofag
Genomul viral
este alctuit dintr-o molecul de acid nucleic viral
Fie ARN RIBOVIRUSURI
Fie ADN DEZOXIRIBOVIRUSURI
poart informaia genetic necesar replicrii
determin capacitatea infectiv a virusului.
Functiile genomului
Conine ntreaga informaie genetic necesar replicrii
Asigur infectivitatea viral
Este capabil de autoreplicare n absena celorlali constitueni virali
Excepie ARN viral izolat, m.c., sens negativ
(virusuri cu genom divizat orthomyxovirus)

Capsida
complex de structuri proteice care mbrac acidul nucleic viral
are arhitectur i compoziie specifice fiecrui tip viral

Functiile capsidei virale

protejeaz genomul de aciunea factorilor externi, de nucleazele
celulare;
asigur forma virionului;
fixeaz virionii nuzi de receptorii celulari specifici;
subunitile structurale ale capsidei sunt antigene care induc formarea i
reacioneaz cu anticorpii neutralizani.

Invelisul viral
peplos, anvelop
deriv din membranele celulei gazd:
din membrana plasmatic
v. gripal,
v. paragripal,
retrovirusuri
din membrana nuclear
herpesvirus

Rolul invelisului viral

protejeaz nucleocapsida;
intervine n iniierea ciclului infectant prin recunoaterea i ataarea v.
de receptorii celulari;
intervine n procesul de asamblare a noilor particule virale;
intervine n activiti specific virale (hemaglutinare, hemadsorbie,
hemoliz, fuziunea membranelor celulare);

Structura invelisului extern

Structuri proprii virale:
Proteina M (matrix)

 Spiculi:
Hemaglutinine
Neuraminidaze
Profactori de fuziune

Spiculii:
Hemaglutininele
Prezente la virusurile invelite
Form de bastonae prismatice cu baza triunighiular
Funcii:
Recunoate receptori celulari, ataarea i penetrarea
virusului n celul
Induc rspuns imun
Rol n hemaglutinarea hematiilor
Neuraminidazele
Prezente la orthomyxovirus i paramyxovirus
Sunt glicoproteine ancoarte n dublu strat lipidic
Funcii:
Faciliteaz ptrunderea virusului n celula gazd prin
scindarea acidului sialic din glicoproteinele suprafeei
celulare
Intervin n procesul de ieire a noilor particule din celul
Profactorul de fuziune
Poate fi situat pe nveliul viral
Prezent la herpes virus, paramyxovirus
Este glicoprotein
Funcii:
Fuzionarea nveliului viral cu membrana celular
favoriznd penetrarea virusului n celula gazd
Diseminarea infeciei
Producerea hemolizei

Alte componente asociate virionului

Enzimele virale
Sinteza de proteine-enzime codificate de virus este restrns (nr.
mic de gene din genomul v.)

 Sunt proteine
Structurale - n nveliul viral
rol interrelae cu celula gazd
Nestructurale - asociate nucleocapsidei
Rol -replicarea genomului viral
sinteza de proteine virale

Bacteriofagii
Structur:
Cap
Coad
Capul form sferic, alungit, prism hexagonal are o poriune
central dens, format din ADN i capsida.
Coada - cilindru axial rigid nvelit ntr-un manon contractil
- plac terminal cu 6 fibre cu rol de fixare pe celula gazd (bacteria)
Compozitia chimica a virusurilor
Elementele de baz
Proteine
Glucide
Lipide
Ac. Nucleici
Virusuri simple: protein + ac. nucleic (v. polio, Pr+ ARN);
bacteriofagi- Pr. + ADN
Virusuri complexe: - genom viral, ptura pr. intern, ptura externa
lipoproteic. (v. gripal)
Proteinele virale
parte comp. a capsidei
proteine cu rol enzimatic
Cultivarea si modul de multiplicare al virusurilor

 Pt. stabilirea dg. unei viroze sunt necesare izolarea i identificarea ag.
patogen n prod. patologice recoltate de la bolnav, cadavru. Cultivarea
lor e posibil prin inoculare n o gazd receptiv:
Animale de laborator
Ou embrionate
Culturi de celule
Multiplicarea virusurilor se autoreproduc folosind mecanismele
celulare din interiorul celulelor vii, de unde iau: hrana,enzimele,energia
necesar multiplicrii.

Multiplicarea virusurilor-Replicare
Etape:
Adsorbia - faza de adeziune i fixare la celula- gazd
Ptrunderea v. n celula-gazd
Faza de eclips - v. ptruns n cel. se dezintegreaz n ac. nucleic
i proteine i nu mai poate fi pus n eviden.
Faza de multiplicare activ ac. nucleic separat i capsida
separat se multiplic pt. ca n final s se asambleze - formnd
particule virale complete.
Faza de eliberare .v. formate prsesc celula treptat pe msura
formrii sau se acumuleaz - explozia celulei -gazd, eliberndu-se
- infectnd alte celule.

Actiunea agentilor fizici chimici si biologici asupra virusurilor

Agenti fizici
Temperatura
Cldura
factori: tip de virus, prezena substane protectoare
18-25C
sensibile: v.rujeolos, v.gripal etc.
moderat sensibile: v.Ebola, v.Marburg, v.Epstein-Barr etc.
rezistente: v.coxsackie, v.variolic etc
56-100C

 30 minute inactivarea majoritii virusurilor

Cldura
cldura umed:
fierberea (100C)
cteva minute VHA, v.rabic
30 minute VHB
autoclavarea:
121C, 1 atm, 30 minute toate virusurile
Frigul
conserv virusurile
4C (refrigerare)
cteva sptmni enterovirusuri
doi ani v.rabic n fragmente de nevrax
-20C (congelare)
insuficient pt pstrarea v.gripale, v.respirator siciial
-70C (congelare) / pstrare n azot lichid la -190C
prezervarea infectivitii pt ani de zile

Ph-ul:
pH
sub 5
peste 9

deterioreaz infectivitatea

stabile la pH extrem
acid 3 enterovirusuri
alcalin 9 v.gripal B

Radiatiile
IONIZANTE
aciune
direct: pe acizi nucleici i proteine virale

 indirect: ionizarea mediului nconjurtor producere de

compui toxici
radiaii electromagnetice (X, gamma)
radiaii corpusculare ( i )
inactiveaz virusurile

Ultrasunetele:
vibraii peste 20 kHz/sec
folosite pt:
eliberarea virusurilor din celule
obinerea unor substructuri virale
omogenizarea suspensiilor virale etc.

Agenti chimiciAgenti virulicizi

ageni oxidani
1%, oxidri n proteinele virale
peroxid de hidrogen (H2O2(
3-6%, inactivare virus, agent antiseptizant
ozon
dezinfecia apei, f.scump, puin utilizat
permanganat de potasiu
1%

aldehide
formaldehida (formol)
1-8%, atac acizii nucleici i proteinele virale
agent decontaminant

 aerosoli pt decontaminarea aerului

glutaraldehida
2% tamponat cu bicarbonat de Na, la pH 7,5-8,5
sterilizarea la rece: instrumentar medical delicat
HIV, HBV
halogeni/compui halogenai
clorul
tratarea apei potabile
hipoclorit de calciu / hipoclorit de sodiu
10%, deterioreaz acizii nucleici virali, dezinfectani
antivirali universali
cloramina
2-5%, 20%

detergeni
sintetici
afecteaz virusuri cu peplos
dezoxicolat de Na
dodecilsulfat de Na
Tween 80
cationici
aciune virulicid + aciune spumant
sruri de amoniu cuaternar 20%
clorura de benzolcarmin pt. tegumente mucturi
de
animale 1% inactivare v.rabic

Agenti conservanti /stabilizanti

glicerol

 soluie tamponat 50%

conserv infectivitatea
v.polio 6 ani
v.herpetic 5 ani
v.rabic 9 luni
v.urlian 7 spt.
sruri de Mg, Na
soluii molare de MgCl,NaCl

Agenti biologici
lizozim
n secreiile nazale, lacrimale, salivare
efect virulicid v.gripal
suc gastric
aciune virulicid prin
pH-ul acid
enzime proteolitice: tripsin, pepsin
bil
inactiveaz virusurile cu pelos

PATOGENEZA INFECIEI VIRALE RELAII VIRUS-CELUL GAZD

Definitii:
Aderen (ataare, adeziune)
procesul prin care microorganismul se leag de suprafaa
celulei int
principalul pas n iniierea procesului infecios.
Diseminare (invazie)
procesul prin care microorganismul se rspndete de la
poarta de intrare n tot organismul
Infecie

 multiplicarea unui agent infecios patogen n interiorul

organismului, chiar dac este nensoit de manifestri
clinice de boal.

Microorganism nepatogen
face parte din flora normal; nu produce mbolnvire
Microorganism patogen
microorganism care ntotdeauna cauzeaz boal.
Microorganism potenial patogen (oportunist)
microorganism capabil s cauzeze mbolnvire doar atunci cnd
este afectat sistemul de aprare al macroorganismului
Microorganism saprofit
care triete n natur
se stabilesc rar n organism
au importan redus ca factori patogeni
Patogenitate
capacitatea unui microorganism de a cauza boal prin virulen
sau toxigenitate
Purttor asimptomatic
persoan care adpostete microorganismul fr a prezenta
semne clinice de boal care poate transmite microorganismul celor
din jur
Patogeneza infectiei
include
iniierea procesului infecios
mecanismele care duc la instalarea semnelor i simptomelor bolii
infecioase
interaciunea microorganism - gazd depinde de:
capacitatea microorganismului de a se stabili n macroorganism i
de a cauza leziuni
mecanismele de aprare ale macroorganismului