Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
”Nicolae Testemițanu”
Catedra de biochimie și biochimie clinică
BIOCHIMIE
Student ________________________________________________
Grupa _________________________________________________
Profesor ________________________________________________
Chișinău, 2023
Aprobat la ședințele:
Catedrei de biochimie și biochimie clinică (proces verbal nr. _ din _________ 2023)
Comisia Metodică pe profil Științe fundamentale (proces verbal nr. _ din _________ 2023)
Consiliul de Management al Calită ții, USMF „Nicolae Testemițanu” (proces verbal nr. _ din
_________ 2023)
Autori:
Recenzenți:
Victor Vovc, profesor universitar, doctor habilitat în ştiinţe medicale;
Anatol Vișnevschi, profesor universitar, doctor habilitat în ştiinţe medicale;
Biochimie: Ghid pentru lucră ri practice pentru studenții Facultă ții Stomatologie /
……………………… ș. a.; Universitatea de Stat de Medicină și Farmacie „Nicolae Testemițanu”,
Catedra de biochimie și biochimie clinică – Chișină u:
Tema nr. 7. Cinetica reacţiilor enzimatice. Reglarea activită ţii enzimelor. Utilizarea
enzimelor în practica medicală ....................................................................................................................... 44
Tema nr. 12. Glucidele: rolul biologic, clasificarea și structura. Digestia şi absorbţia
glucidelor. Metabolismul glicogenului..................................................................................................... 67
A. Obligatorie:
1. Lîsîi L., Pavlovschi E. Biochimie medicală (ediţia a treia). Chişină u, 2019.
2. Lîsîi L. Biochimie medicală (ediţia a doua). Chişină u, 2007.
3. Champe P.C., Harvey R.A., Ferrier D.R. Biochimie ilustrată . Ed. 4-a. București. Editura
medicală Calisto, 2010.
4. Dinu V., Truţia E., Popa-Cristea E., Popescu A. Biochimie medicală . Mic tratat. Bucureşti,
1996.
5. Lîsîi L. Biochimie. Teste. Test-minim. Chişină u, 2008.
6. www.biochimie.usmf.md. (Indicaţii metodice, suport teoretic).
B. Suplimentară:
6. Nelson D.L., Cox M.M., Lehninger A. Principles of Biochemistry. Sixth Edition. 2012.
7. Bhagavan N.V., Ha Chung-Eun. Essentials of Medical Biochemistry: With Clinical Cases.
Academic Press; 1st edition, 2011.
8. Campbell P.N., Smith A.D. Biochemistry illustrated. Internatinal edition, 2000
9. Lehninger A.L. Principles of Biochemistry. The Johns Hopkins University School of
Medicine, Worth Publishers Inc., 2007.
10. Metzler D.E. Biochemistry. The chemical reactions of living cells. Second edition, vol.1-
2. Academic Press, 2003
11. Stryer L. Biochemistry. Freeman and Company, San-Francisco, USA, 2000.
12. Северин Е.С. Биохимия. Учебник для вузов. 2-е издание. Москва, 2004.
www.biochemistry.ru.
13. Ferrier D. R. Biochemistry. Lippincott’s Illustrated Reviews. 7th edition, 2017.
14. Rodwell V. W., Bender D. A., Botham K. M., Kennelly P. J., Weil P. A. Harper's Illustrated
Biochemistry, 31st Edition, 2018.
15. www.themedicalbiochemistrypage.org
CERINŢE FAŢĂ DE STUDENŢI
la Catedra de biochimie și biochimie clinică
În conformitate cu Carta Universită ţii şi Codul Moral toţi studenţii sunt obligaţi să
respecte urmă toarele reguli:
1. Să îndeplinească toate sarcinile care le revin potrivit planului de învă ţă mâ nt și
curriculumului la disciplina Biochimie.
2. Să acceseze regulat pagina catedrei – https://biochimia.usmf.md/ro pentru a se
informa cu avizele plasate.
3. Frecvenţa la cursuri şi lucră rile de laborator este obligatorie.
4. Studenţii se prezintă la orele de curs şi lucră rile de laborator fă ră întâ rziere, în halate
(nu se admit costume chirurgicale), cu toate rechizitele necesare şi temele pregă tite.
5. La lucră rile de laborator studenţii sunt acceptaţi cu Ghidul pentru lucră ri practice
îndeplinit.
6. Semnarea procesului verbal al lucră rii de laborator este obligatorie şi atestă
îndeplinirea pă rţii practice. În cazul nesemnă rii procesului verbal, partea practică a
orei se recuperează conform orarului recuperă rii restanţelor practice (absenţelor).
7. Absenţele la lucră rile de laborator se recuperează numai cu permisiunea vice-
decanului. La recuperare studentul se prezintă ca şi la orele de lucră ri practice: cu
procesul verbal, testele și itemii pentru lucrul individual rezolvați, tema învă ţată .
8. Studenţii sunt obligaţi:
‒ să foloseascã cu precauţie bunurile materiale existente în spaţiul catedrei, să
pă streze utilajul şi mobilierul, să le întreţină în stare bună . Prejudiciul cauzat prin
deteriorarea sau distrugerea bunurilor se va recupera, conform procedurii legale,
de la cei care le-au produs;
‒ să urmeze strict regulile tehnicii securită ţii în laboratorul de biochimie;
‒ să pă streze ordinea, cură ţenia şi liniştea în incinta catedrei;
‒ în anotimpul rece al anului hainele (paltoanele, scurtele) se lasă la vestiar.
9. În timpul cursului sau lucră rii de laborator este interzisă folosirea telefoanelor mobile
şi utilizarea diverselor mijloace tehnice (laptop-urilor, iPad-urilor, etc.).
10. Responsabil de disciplină în timpul lucră rilor practice este studentul de serviciu.
11. Să respecte drepturile de autor ale altor persoane şi să recunoască paternitatea
informaţiilor prezentate în lucră rile elaborate.
INSTRUCȚIUNE PRIVIND MĂSURILE PENTRU PROTECȚIA MUNCII ȘI
ASIGURAREA SECURITĂȚII ÎN LABORATOARELE DE BIOCHIMIE
1. Întregul personal și studenții, trebuie să cunoască și să respecte regulile de protecție a
muncii și de asigurare a securită ții pentru prevenirea accidentelor de muncă .
2. Tot personalul care lucrează în laboratoarele de biochimie este obligat să poarte halate
albe curate.
3. Aparatele electrice (centrifugă , termostate, frigidere, spectrofotometru, etc.) trebuie să
aibă prizele cu împă mâ ntare și izolare electrică perfectă . Fixarea lor în priză se face
numai cu mâ na uscată .
4. Toate reacțiile chimice se execută în conformitate cu condițiile prescrise (cantitatea,
concentrația, vesela, succesiunea etc.).
5. Masa de lucru se pă strează într-o ordine și cură țenie exemplară . Nu se aglomerează
masa cu vase și aparate inutile, pe masă se pun numai reactivii și vesela necesară
pentru lucrarea respectivă .
6. Nu se execută nici o operație în vase murdare. După utilizare, toate vasele de laborator
se spală cu apă de la robinet și cu apă distilată .
7. Nu se lasă substanțe în vase neetichetate.
8. Sticlele cu reactivi trebuie să fie întotdeauna închise cu dop. Dacă se folosesc diferiți
reactivi, trebuie de avut grijă să nu se schimbe dopurile. Excesul luat dintr-un reactiv
nu trebuie turnat înapoi în sticlă .
9. Trebuie să se lucreze cu mare precauție cu metalele alcaline, fosfor, brom, clor, acid
azotic, substanțe toxice și inflamabile.
10. Pipetarea materialelor biologice se face cu pipete prevă zute cu filtru de vată .
11. Pipetarea acizilor concentrați și a bazelor se face cu pipetă cu volum mai mare decâ t
volumul de pipetat și prevă zute cu filtru de vată .
12. În timpul încă lzirii unei eprubete care conține un lichid capă tul deschis al eprubetei nu
se ține spre cel care efectuează operația și nici spre vecini.
13. Este strict interzisă gustarea reactivilor, deoarece majoritatea substanțelor chimice
folosite sunt toxice sau caustice.
14. Mirosirea substanțelor chimice nu se face prin apropierea nasului direct la gâ tul sticlei
cu reactivi, dar prin aducerea unui curent de aer care conține vapori ai substanțelor de
la gâ tul sticlei cu ajutorul palmei în apropierea nasului.
15. Câ nd se lucrează cu substanțe care în cursul operației se pot împră știa sau pot produce
mici explozii, se folosesc ochelari de protecție.
16. După finalizarea lucră rii practice, se pun toate vasele la loc, se cură ță masa și se
controlează dacă aparatura electrică a fost scoasă din prize și robinetele de apă și gaz
închise.
17. Fiecare laborator trebuie să fie dotat cu o trusă de prim ajutor care să conțină
medicamente și material medical strict necesar (antinevralgice, cardiotonice,
antibiotice, antiseptice, calmante, tifon, etc.).
18. Este interzisă utilizarea alimentelor în laborator.
19. Este necesar ca mă surile de protecție a muncii, de asigurare a securită ții și de
prevenire a toxicită ții să fie discutate cu fiecare grupă de studenți la începutul
activită ții anului universitar și reamintite periodic, studenții înregistrâ ndu-se și
semnâ ndu-se în registrul ce atestă instruirea efectuată .
20. În cazul unor accidente se va apela la conducă torul lucră rii.
INFORMAȚII DESPRE EVALUARE
1. Cu scopul de a verifica cunoştinţele studenţilor, la sfâ rşitul fiecă rui capitol vor fi
susținute 6 totaliză ri, câ te 3 în fiecare semestru:
‒ Totalizarea I: “Structura proteinelor și acizilor nucleici”;
‒ Totalizarea II: „Enzimele și Bioenergetica”;
‒ Totalizarea III: „Metabolismul glucidelor”;
‒ Totalizarea IV: „Metabolismul lipidelor”;
‒ Totalizarea V: „Metabolismul proteinelor simple şi complexe”;
‒ Totalizarea VI: „Reglarea genetică și hormonală ” și „Biochimia umorilor (sâ ngelui
și salivei)”;
2. Totalizarea se susţine:
‒ o dată la lecție, conform planului de studiu (la computer);
‒ a doua dată conform unui orar stabilit de catedră ;
‒ una dintre cele trei totaliză ri pe semestru poate fi susținută suplimentar în ultima
să ptă mâ nă a semestrului.
3. Studentul care a plagiat (copiat) în timpul totaliză rii, va primi o notă negativă și nu i
se va mai permite să o susțină din nou.
4. A 4-a notă în ambele semestre va fi acordată pentru lucrul individual și implicarea în
activită ți pe parcursul orelor practice.
5. Notele finale de la totaliză ri și pentru lucrul individual (în numă r de 4) vor fi utilizate
pentru a calcula media pentru admiterea la evaluarea semestrială (examen). La
examen vor fi admiși doar acei studenți care au nota medie „5” sau mai mare, nu au
absențe nerecuperate la orele practice și au fost prezenți la cel puțin 70% din orele
teoretice.
Tema nr. 1. Importanța biochimiei pentru disciplinele medicale. Grupele
funcționale și tipurile de legături chimice specifice biomoleculelor.
Aminoacizii – rolul biomedical, structura, clasificarea și proprietățile.
Mod de lucru:
№ Reactivi Eprubeta
1 Ovalbumină 1% 5 pică turi
2 Reactiv Fol 5 pică turi
Conţinutul eprubetei se fierbe 1-2 minute.
Rezultat::_____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
Concluzie:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Mod de lucru:
№ Reactivi Eprubeta
1 Ovalbumină 1% 5 pică turi
2 HNO3 concentrat 5 pică turi
Conţinutul eprubetei se fierbe 1-2 minute.
Eprubeta se ră ceşte sub un jet de apă rece, apoi:
3 NaOH 20% 10 pică turi
Rezultat::_____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Concluzie: ___________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Experienţa 3. Reacţia cu ninhidrină
Principiul metodei: Ninhidrina interacţionează cu grupă rile alfa-amino ale proteinelor şi
aminoacizilor cu formarea unui compus colorat în albastru-violet.
Mod de lucru:
№ Reactivi Eprubeta
1 Ovalbumină 1% 5 pică turi
2 Soluţie de ninhidrină 0,5% 5 pică turi
Conţinutul eprubetei se fierbe 1-2 minute.
Rezultat::_____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Concluzie:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Mod de lucru:
№ Reactivi Eprubeta
1 Ovalbumină 1% 5 pică turi
2 Soluţie de NaOH 10% 5 pică turi
3 Soluţie de CuSO4 1% 2 pică turi
Eprubeta se agită
Rezultat::_____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Concluzie:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Nivelul inițial de cunoștințe
1. Elementele chimice. Tabelul periodic al elementelor.
1. Plasați moleculele: CO2, H2O, HCl, NH4, O2, N2, Cl2, CH4, NaCl, NaH2PO4, Na2CO3, proteina,
DNA în colonițele din tabel conform legă turilor chimice prezente în ele.
Covalentă
Covalentă polară Ionică de hidrogen
nepolară
2. Divizaţi urmă torii aminoacizi în grupe conform clasifică rii biologice: Thr, Cys, Phe,
Gln, His, Met, Gly, Arg. Scrieţi peptida formată din aminoacizii indispensabili. Daţi
definiţia noţiunii de aminoacid indispensabil, indicaţi care aminoacizi se referă la
acest grup şi care sunt sursele aminoacizilor indispensabili?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
3. Divizați aminoacizii proteinogeni conform proprietă ților fizico-chimice (completați
tabelul):
Aminoacizii Aminoacizii Aminoacizii Aminoacizii
hidrofobi hidrofili neutri hidrofili acizi hidrofili bazici
4. Ce sarcină (+/-) vor avea și spre care electrod (anod/catod) vor migra urmă torii
aminoacizi în mediul acid, neutru şi bazic?
pH<7.0 pH=7.0 pH>7.0
Aminoacidul
sarcina electrodul sarcina electrodul sarcina electrodul
Alanina
Serina
Lizina
Acidul aspartic
Glutamina
5. Scrieți urmă toarea tripeptida Glu-Pro-Arg. Evidențiați legă turile peptidice clasice și
atipice. Indicați deosebirile lor.
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
6. Forțele Van der Waals sau interacțiunile Van der Waals reprezintă:
a) forțele de atracție de putere relativ mică dintre moleculele neutre
b) forțele de respingere de putere relativ mică dintre moleculele neutre
c) forțele de atracție de putere mare dintre moleculele neutre
d) forțele care stabilizează legă turile covalente polare
e) forțele care stabilizează legă turile covalente nepolare
7. Care dintre perechile de atomi și grupe funcționale vor forma legături ionice?
a) C și N
b) NH2 și H+
c) COO- și NH3+
d) Cl- și Na+
e) COO- și NH2
8. Legătura de hidrogen se formează între:
a) un atom de hidrogen parțial încă rcat pozitiv și un atom de O, N sau S parțial încă rcat
negativ
b) un atom de hidrogen parțial încă rcat negativ și un atom de O, N sau S parțial încă rcat
pozitiv
c) un ion de hidrogen cu sarcină pozitivă și un atom de O, N sau S parțial încă rcat
negativ
d) un atom de hidrogen parțial încă rcat pozitiv și un atom de O, N sau P parțial încă rcat
negativ
e) un ion de hidrogen cu sarcină pozitivă și un atom de O sau N cu sarcină negativă
2. Colagenul, calmodulina, factorii plasmatici ai coagulă rii II, VII, IX şi X sunt proteine
fixatoare de calciu. Ce particularitate structurală comună posedă aceste proteine? Care
vitamină este necesară pentru realizarea funcției de fixare a calciului de că tre aceste
proteine?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Scrieţi reacţia la care participă vitamina respectivă .
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
3. Completaţi tabelul de mai jos, reflectâ nd proprietă țile structurale ale proteinelor:
Soluţia Proteină
din (ovalbumină ),
să culeţ (NH4)2SO4
Soluţia
H2O
din vas
Concluzii:____________________________________________________________________________________________
_
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Întrebări pentru studiu
1. Masa moleculară a proteinelor. Principiile de bază utilizate pentru determinarea masei
moleculare (ultracentrifugarea, cromatografia, spectrometria de masă ).
2. Proprietă ţile amfotere ale proteinelor. Sarcina electrică a proteinelor. Factorii ce
determină sarcina proteinei. Punctul şi starea izoelectrică .
3. Solubilitatea proteinelor. Proprietă ţile hidrofile ale proteinelor în funcție de
componența aminoacizilor, particularită ţile structurale, pH-ul și temperatura
solventului. Proprietă țile soluțiilor proteice ca soluții coloidale. Stă rile de agregare ale
soluțiilor proteice (sol, gel, xerogel). Utilizarea biomedicală a xerogelurilor.
4. Denaturarea proteinelor, agenţii ce provoacă denaturarea. Modifică rile structurale ale
proteinei la denaturare. Importanța biomedicală a denatură rii.
5. Metodele de separare, purificare și analiză ale proteinelor (principiul metodelor,
importanța biomedicală ): a) dializa; b) electroforeza; c) cromatografia; d)
spectrofotometria.
2. Divizaţi în grupe conform solubilită ţii urmă toarele proteine: albumina, hemoglobina,
keratina, transferina, IgM, fibrina, protrombina, colagenul. Ce factori influenţează
solubilitatea proteinelor? Pe ce proprietate a proteinelor v-ați bazat pentru a diviza
proteinele enumerate în solubile și insolubile?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
3. Într-o soluţie sunt dizolvate histone şi albumine umane. Alegeţi soluţia tampon care
trebuie utilizată pentru precipitarea fiecă rui tip de proteină : sol. 1 cu pH=6,0; sol. 2 cu
pH=7,4; sol. 3 cu pH=11,0. Explicați de ce ați ales soluția tampon respectivă și care este
mecanismul acestei metode de separare a proteinelor individuale din amestecuri?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
4. Spre care electrod vor migra albuminele şi histonele la pH=7,0, dacă linia de start este la
mijlocul distanţei dintre anod şi catod? Explicaţi.
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
5. Ce metodă din cele enumerate mai jos poate fi utilizată pentru purificarea lichidelor
biologice (ser, plasmă , limfă ) de substanţe nocive micromoleculare: denaturarea,
hidroliza, electroforeza, dializa, cromatografia de afinitate? Descrieţi principiul metodei
şi utilitatea ei clinică .
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Teste pentru autoevaluare
1. pH-ul izoelectric al tetrapeptidei Arg - Lys - His - Ala se află în zona pH-lui:
a) 1.5 – 3.0
b) 3.0 – 4.5
c) 4.5 – 6.0
d) 5,0 – 7,0
e) 7.5 – 9.0
2. O proteină conține în % următorii AA: Arg - 10, Lys - 26, Val - 13, Pro - 35, Ala -
8, Gly - 8. La pH fiziologic această proteină:
a) migrează spre catod
b) migrează spre anod
c) are sarcină netă pozitivă
d) are sarcină netă negativă
e) nu posedă sarcină electrică
Rezultat:_____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_
Concluzie:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Rezultat:_____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_
Concluzie:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
11. Care afirmații sunt corecte atât referitor la structura DNA, cât și la cea a RNA?
a) structura primară reprezintă o catenă polinucleotidică
b) structura secundară este un helix dublu
c) formează complexe nucleoproteice cu histonele
d) conține în cantită ți semnificative baze azotate minore
e) structura primară este stabilizată de legă tura 5′,3′-fosfodiesterică
Rezultat:_____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_
Concluzie:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Rezultat:_____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_
Concluzie:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
B6
PP(B3)
Acidul
ascorbic
Rezultat:______________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Concluzii:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_
Nr
Reactivi Eprubeta de experienţă Eprubeta martor
.
1. Soluţie de amidon 1 ml 1 ml
(conţine 0,0004 g amidon) (conţine 0,0004 g amidon)
2. Incubare 5 minute în baia de apă la
-
temperatura de 370C
3. Urină 0,02 ml -
4. Amestecul se agită şi se introduce din nou în baia de apă la 37 C exact 7,5 minute
0
Valorile normale ale activită ţii amilazei din urină – 20-160 g/oră ·L.
Valoarea diagnostică. În pancreatitele acute şi parotiditele epidemice se observă creşteri
importante ale α-amilazei în sâ nge şi urină . Creşteri moderate se depistează în
pancreatitele cronice, litiaza pancreatică , tumori ale pancreasului, litiaza biliară , ulcerul
gastric, insuficienţa renală cronică şi, uneori, după administrarea de opiacee (morfină
codeină , papaverină etc.).
Rezultat:______________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Concluzii:____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_
2. Unele enzime posedă structură şi proprietă ţi fizico-chimice diferite, dar catalizează una
şi aceeaşi reacţie. Frecvent ele sunt proteine oligomere formate din monomeri diferiţi.
Acestea sunt: enzimele alosterice, izoenzimele sau proenzimele? Daţi exemple de
asemenea enzime şi explicaţi care este valoarea lor clinico-diagnostică .
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
4. Care este valoarea clinico-diagnostică a determină rii activită ţii amilazei în serul sangvin
şi în urină ? Ce reacţie catalizează amilaza? Care este sediul de sinteză şi de acţiune a
amilazei?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
5. Numiţi toate enzimele ciclului Krebs şi determinaţi la ce clasă de enzime se referă ele
(completaţi tabelul):
Enzimele ciclului Krebs La ce clasă se referă enzimele respective?
6. Care enzime ale ciclului Krebs sunt enzime reglatoare? Care sunt activatorii şi inhibitorii
acestor enzime? Completaţi tabelul.
Enzimele reglatoare ale
Activatorii Inhibitorii
ciclului Krebs
15. Câte molecule de ATP pot fi maxim sintetizate în lanțul respirator din energia
perechilor de electroni și protoni furnizate de ciclul Krebs?
a) 3 b) 6 c) 9 d) 11 e) 12
2. Adă ugarea rotenonei la mitocondriile care respiră pe glutamat conduce atâ t la încetarea
sintezei ATP-ului, câ t şi a transportului de electroni. Cum se pot restabili aceste procese?
(Amintim că rotenona blochează transportul de electroni în lanţul respirator pe sectorul
NAD - ubichinonă ).
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Rezultat: _____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Concluzii: ____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Nivel inițial de cunoaștere
1. Clasificarea enzimelor. Hidrolazele – caracteristica generală .
2. Reglarea activită ții enzimelor – alosterică , prin modificare covalentă .
2. Rumegă toarele utilizează celuloza ca hrană , iar majoritatea mamiferelor nu o pot utiliza.
Explicaţi.
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
3. Numiţi enzimele tractului gastro-intestinal care participă la digestia glucidelor.
Completaţi tabelul:
Substratul
Legătura pe
asupra Produsele
Enzima Sediul sintezei care
căruia reacţiei
o scindează
acţionează
4. Vmax a glicogen fosforilazei din mușchii scheletici este cu mult mai mare decâ t a
glicogen fosforilazei hepatice. Explicați care este rolul fiziologic al enzimei în mușchi și
în ficat? De ce este necesar ca glicogen fosforilaza musculară să fie mai activă ,
comparativ cu enzima hepatică ?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
peroxidaza
2H2O2 + fenol + 4-amino-antipirina chinonimina +4H 2O
Intensitatea culorii chinoniminei este proporţională cu concentraţia de glucoză din proba
de analizat şi se mă soară la spectrofotometric densitatea oprică (DO).
Reactivi:
1. Reactiv enzimatic de lucru:
a. Sol. 70 mmol/L tampon fosfat pH-7,4
b. 5 mmol/L Fenol
c. Glucozoxidaza - > 10 U/ml
d. Peroxidaza - > 1 U/ml
e. 0,4 mmol/L 4-amino-antipirina
2. Proba: ser nehemolizat
Tehnica de lucru: se pipetează în două eprubete, după schema urmă toare:
Eprubeta experimentală Eprubeta martor
Reactiv enzimatic de lucru 1,5 ml 1,5 ml
Ser 0,02 ml -
se agită ;
se incubează 10 min la temperatura camerei;
se citeşte densitatea optică a soluției experimentale (DO) faţă de martor la 500 nm, în
cuva de 0,3 cm. Coloraţia este stabilă 2 ore.
4. Scrieţi reacţiile glicolizei anaerobe în care se formează ATP prin fosforilare la nivel de
substrat.
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Enzimele
Enzimele
reglatoare
reglatoare Activatorii Inhibitorii Activatorii Inhibitorii
ale gluconeo-
ale glicolizei
genezei
1 4
2 3
3 2
1
Teste pentru autoevaluare
Rezultat: _____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Concluzii:____________________________________________________________________________________________
_
_________________________________________________________________________________________________________
2. Care acizi grași sunt indispensabili organismului uman? Scrieți structura lor. Care sunt
principalele surse alimentare de acizi grași indispensabili?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
3. La ingerarea unei raţii bogate în lipide are loc depozitarea lor în ţesutul adipos.
Indicați schematic cum are loc digestia trigliceridelor alimentare, absorbţia
produselor de hidroliză a lor, resinteza în enterocite, transportul trigliceridelor spre
ficat şi ţesutul adipos şi sinteza lor în adipocite.
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
4. În stare de stres și inaniţie apare o mobilizare intensă a trigliceridelor din țesutul
adipos. Ce hormoni stimulează lipoliza în aceste cazuri? Indicați schematic modul în
care se utilizează produsele de hidroliză a trigliceridelor?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Rezultat: _____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Concluzii:____________________________________________________________________________________________
_
_________________________________________________________________________________________________________
1. În stă rile de stres şi de inaniţie are loc o mobilizare intensă a triacilglicerolilor din
ţesutul adipos. Indicați schematic că ile de utilizare a produselor de hidroliză a
trigliceridelor?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
2. Care vor fi consecinţele unei diete bogate în lipide şi lipsite de glucide asupra oxidă rii
acizilor graşi? Explicaţi expresia ”Lipidele ard în flacă ra glucidelor”. Utilizarea că ror acizi
graşi, cu numă r par sau cu numă r impar de atomi de carbon, este mai convenabilă în
lipsa glucidelor din alimentaţie? Argumentaţi ră spunsul.
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
3. Scrieți structura unui triacilglicerol alcă tuit dintr-un acid gras saturat, un acid gras
nesaturat și unul cu numă r impar de atomi de carbon. Calculați care este randamentul
energetic al oxidă rii complete a trigliceridei?
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
3. Explicaţi dacă este posibilă sinteza glucozei din lipide. Dacă este posibil, indicaţi
schematic calea de sinteză şi scrieţi reacţiile.
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Teste de autoevaluare
1. Selectați reacţia reglatoare a sintezei endogene de colesterol:
a) formarea de β-hidroxi-β-metil-glutaril-CoA (HMG-CoA)
b) ciclizarea scualenului
c) formarea 5-pirofosfomevalonatului
d) sinteza acidului mevalonic din HMG-CoA
e) condensarea a 2 molecule de acetil-CoA
II. pentru exprimarea conţinutului HCl în grame trebuie de ţinut cont că 1 ml de NaOH
0,1N este echivalent cu 1 ml de HCl 0,1N, iar într-un 1 ml de HCl 0,1N se conţine
0,00365 g de HCl.
X (g HCl/L) (V1 0,00365 1000)/5 V1 0,73
unde:
V1 – cantitatea de NaOH 0,1 N consumat (ml);
0,00365 – conţinutul HCl 0,1 N la 1 ml (g)
5 – cantitatea de suc gastric luat pentru titrare (ml);
1000 – recalcul la 1 litru de suc gastric.
Toate tipurile de aciditate se calculează după acelaşi principiu:
Notă: HCl liber V1 20 (sau 0,73);
HCl total V2 + V3/2 20 (sau 0,73);
HCl fixat HCl total – HCl liber;
Aciditatea totală V3 20 (sau 0,73);
Substanţe acidoreagente Aciditatea totală – HCl total.
Sucul
pancreatic
Sucul
intestinal
1. Completaţi tabelul:
Aminoacizii glucogeni Aminoacizii cetogeni Aminoacizii micşti
Amino acid
Amino acid
Amino acid
α -ceto acidul ce α -ceto acidul ce α -ceto acidul ce
Nr
Nr se formează la se formează la Nr se formează la
dezaminarea lui dezaminarea lui dezaminarea lui
1 Ala Piruvat 1 1
2 2 2
3 3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
2. Este posibilă sau nu sinteza aminoacizilor din glucide? Dacă da, indicaţi că ile posibile și
scrieți reacțiile.
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
3. Enumerați aminoacizii ce se sintetizează din alți aminoacizi. Scrieți reacțiile sintezei
unui aminoacid din altul.
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
Tehnica executării:
Nr. Reactivi Eprubeta
1. Urină 1,5 ml
2. 20% NaOH 1 ml
3. Reactiv fosfowolframic 1 ml
4. Conţinutul probei se agită şi se titrează cu soluţie de ferocianură de potasiu pâ nă la
dispariţia coloraţiei albastre
Rezultat: _____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
Concluzii: ____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Valoarea diagnostica: În serul sangvin, cantitatea de proteine totale variază între 6,5 şi
8,5 gr/100 ml sau 65-85 g/l. Proteinele din serul sangvin scad pâ nă la 40-50 g/l
(hipoproteinemie) în nefroze, inaniţie, ciroze, la pierderea proteinei în urma hemoragiilor
şi formă rii exsudatelor. Hiperproteinemia se poate întâ lni la pacienţi cu mielom, diabet
insipid, vomită ri frecvente, diaree și alte cazuri de dehidratare a organismului.
Rezultat: DO = _____________ C = ____________
Concluzii: ____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Substraturile
Enzimele
Primeri
Direcţia
sintezei
Etapele
Fidelitatea
Erori
Rol biologic
3. În secția de terapie intensivă a fost internat un pacient cu grețuri, vomă (10-12 ori
timp de 24 ore), diaree (6-8 episoade în 24 ore), crampe și dureri abdominale.
Investigațiile biochimice au stabilit creșterea activită ții enzimelor hepatice (ALT și
AST). Din anamneză s-a stabilit că bolnavul a consumat ciuperci culese din pă dure.
Investigația a stabilit că printre ele au fost și amanitele (mai numite și pă lă ria șarpelui
sau muscă rița). Care este mecanismul toxicită ții acestor ciuperci?
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
Enzimele
Factorii
proteici
Ionii
Energie
(sursă şi
cantitate)
Teste pentru autoevaluare
b) Reacţia cu ninhidrină
Principiul metodei: Ninhidrina reacționează cu grupă rile α-amino ale proteinelor şi
aminoacizilor cu formarea unui compus colorat în albastru-violet.
Tehnica executării:
Nr. Reactivi Eprubetă
1. Soluție de insulină 5 pică turi
2. Soluţie de ninhidrină 0,5% 5 pică turi
3. Conţinutul eprubetei se fierbe 1-2 min
4. Culoarea soluției
Rezultat: _____________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
Concluzii: ____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
b) Reacţia cu diazoreactiv
Principul metodei: La interacţiunea adrenalinei cu diazoreactivul soluţia se colorează în
roşu ca urmare a formă rii unei combinaţii de tipul azocoloranţilor.
Tehnica executării:
Nr Reactivi Eprubetă
1 Diazoreactiv 6 pică turi
2 Soluţie de adrenalină 0.1% 5 pică turi
3 Soluţie de 10% NaOH 2 pică turi
5 Lichidul se colorează în roşu.
Rezultat: _____________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
Concluzii: ____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Calcitriolul
Calcitonina
7. Corticosteroizii se utilizează:
a) în tratamentul colagenozelor (reumatism, poliartrită nespecifică )
b) ca agenţi desensibilizanţi (în astmul bronhic, bolile alergice)
c) ca imunosupresori în transplant de organe şi ţesuturi
d) ca agenţi fibrinolitici
e) în calitate de hemostatice
8. Ce efecte exercită glucocorticoizii asupra metabolismului ţesutului osos:
a) stimulează biosinteza mRNA
b) inhibă sinteza proteinelor fibrilare
c) sporesc eliminarea Ca2+ şi a fosfaţilor din oase în sâ nge
d) sporesc densitatea minerală osoasă
e) produc osteoporoză steroid-indusă
9. Ce efecte exercită aldosteronul asupra eliminării cu urina a substanţelor
minerale şi a apei?
a) creşte eliminarea sodiului
b) creşte eliminarea potasiului
c) crește eliminarea apei
d) scade eliminarea apei
e) nu se modifică eliminarea sodiului şi a apei
10. Selectați afirmațiile corecte referitor la reglarea sintezei şi secreţiei
aldosteronului:
a) depinde de concentraţia plasmatică a sodiului
b) depinde de cantitatea de magneziu plasmatic
c) este reglată de hormonii hipotalamo-hipofizari
d) este influențată de sistemul renin-angiotensină
e) se bazează pe mecanismul feed-back
Rezultat: _____________________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________
Concluzii: ____________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
3. Se va deregla coagularea sâ ngelui şi din ce cauză în urmă toarele stă ri patologice: icter
hepatic microsomal, ciroză hepatică , hipovitaminoza K? Argumentați ră spunsul.
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
13. Ce factor de coagulare este eliberat din țesutul rănit și inițiază cascada de
coagulare?
a) protrombină
b) trombină
c) fibrină
d) tromboplastina tisulară
e) proaccelerina
15. Selectaţi factorii coagulării sângelui care participă doar în calea intrinsecă:
a) factorul VIII - globulina antihemofilică A
b) factorul X - Prower-Stuart
c) factorul XI – Rozenthal
d) factorul V - proaccelerina
e) factorul IX - globulina antihemofilică B.
16. Selectaţi factorii coagulării sângelui care participă doar în calea extrinsecă:
a) factorul VII - proconvertina
b) factorul I - fibrinogenul
c) factorul III - tromboplastina tisulară
d) ionii de Ca++
e) factorul X - Prower-Stuart
17. Selectaţi factorii coagulării sângelui care participă atât în calea intrinsecă, cât şi
în calea extrinsecă:
a) factorul VIII - globulina antihemofilică A
b) factorul XI - Rozenthal
c) factorul V - proaccelerina
d) factorul I - fibrinogenul
e) factorul III - tromboplastina tisulară
f) ionii de Ca++
1. Cantitatea că ror substanțe salivare corelează cu nivelul lor sangvin? Care este valoarea
clinico-diagnostică ă a doză rii lor în salivă ? Dați exemple.
________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________
Teste de autoevaluare:
4. Selectați compusul care este prezent în salivă în cea mai mare cantitate:
a) apa
b) sodiul
c) calciul
d) ureea
e) amilaza
5. Selectați compuși minerali prezenți în salivă în cea mai mare concentrație:
a) sodiul
b) potasiul
c) clorul
d) tiocianatul
e) zincul
10. Care compuși prezenți în salivă sunt implicați în regenerarea țesuturilor moi ale
cavității orale?
a) factor de creștere epidermică (EGF)
b) factorul de creștere endotelial vascular (VEGF)
c) factor de creștere transformator alfa (TFG-α)
d) factorul de creștere a nervilor (NGF)
e) factorul necrozei tumorale alfa (TNF-α)
11. Selectați afirmațiile care caracterizează mecanismul de secreție salivară
a) celulele acinare produc saliva inițială compusă din apă și ioni
b) celulele acinare produc saliva inițială compusă din apă și mucine
c) celulele acinare produc saliva inițială compusă din apă , ioni, enzime și mucine
d) saliva inițială este izotonă și are aproximativ aceeași osmolaritate ca și plasma
e) saliva inițială este hipertonă