Determinarea nitrazepamului din urină

Izolarea din urină

10 mL urină şi 5mL soluţie carbonat de sodiu 0.2M se aduc într-o pâlnie de separaţie. Se efectuează două
extracţii succesive cu câte 10mL clorbutan. Fazele de solvent separate şi reunite se filtrează (printr-o hârtie
de filtru uscată, spălând filtrul cu puţin solvent) într-o capsulă şi se evaporă la sec pe baie de apă. Reziduul
obţinut serveşte la analiza toxicologică a nitrazepamului.

Mod de lucru – Determinarea cantitativă

Reziduul obţinut prin extracţie cu solvenţi organici se dizolvă în 2 mL metanol conţinând KOH (0,5g
KOH/100mL metanol) şi se aduce cantitativ cu acelaşi solvent într-un balon cotat de 10mL. În paralel cu
proba, se prelucrează în aceleaşi condiţii, 6-7 standarde cu concentraţia cuprinsă între 1,5-15μg
nitrazepam/mL soluţie metanolică cu KOH. Se măsoară absorbanţele probei şi etaloanelor la
spectrofotometru la 365nm, în cuva de 1 cm, faţă de martorul de reactivi. Raportarea absorbanţei probei se
face pe curba etalon, obţinându-se concentraţia C în μg/mL soluţie metanolică.

Principiul metodei

Nitrazepam
A A
1.2500
2.0000

1.0000
1.5000

0.7500
1.0000

0.5000
0.5000

0.2500
0.0000

225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0 nm 225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0 nm

Absorbance Absorbance

Spectrul UV al nitrazepamului în metanol Spectrul UV al nitrazepamului în metanol cu KOH