Clonare

Clonarea este procesul de creare a unei copii identice. n biologie clonarea se refer la procesul folosit pentru crearea de copii ale fragmentelor de ADN (clonare molecular), celulelor (clonare celular) sau a organismelor. Termenul include i modul de reproducere asexuat. Clonarea ("klon", n greac, nseamn "germen", "vlastar", "rmuric", "crengu") este definit ca o metod prin care se produc clone, adic organisme, celule sau molecule identice. Exist o clonare natural, cnd, pornind de la acelai zigot, apar gemenii. n antichitate, a fost cunoscut clonarea la plante (via-de-vie, pomii fructiferi), care se pot nmulti astfel, cu pstrarea caracteristicilor genetice. Cultivate n vitro, celulele vegetale, ct i cele animale, pot evolua n clone. Dup diviziune, rezult doi embrioni identici din punct de vedere genetic. Cele dou organisme au acelai patrimoniu genetic, dar au organisme proprii. Pornind de la modelul natural, a fost perfectata o tehnic, ce const n separaia blastomerilor, cnd embrionii au 60-80 de celule, dup 6-7 zile de la concepere. Metoda a fost pus n practic n Frana, n 1982.Prin aceast tehnic, care se desfaoar, n principiu, ca i reproducerea sexuat din natur, se obin cupluri de gemeni identici genetic. Cea mai frecvent metod const n obinerea unei clone, prin transplant de nuclei n ovule. nca din 1955, cand s-au fcut primele experiene pe broasc, s-a observat c transferul de nucleu trebuie realizat n faza cand celulele au totipoten, adic au capacitatea de a regenera. Celula este denucleat i, n citoplasma ei, se introduce nucleul unei celule adulte. Zigotul va moteni ntreg patrimoniul genetic al donatorului. Organismul rezultat nu mai pstreaz nimic de la cele de la care au provenit gameii. Primul mamifer clonat cu succes, din celulele unui animal adult, s-a nascut la 5 iulie 1996. Profesorul Ian Wilmut, de la Institutul Roslin din Edinburgh, a transferat nuclee, provenite din glanda mamar a unei oi mature, n ovulele unei oi din alt ras. Din 277 de transferuri s-au obinut 29 de embrioni, care au ajuns n faza de blastocist. Dup 148 de zile, din singurul embrion, care a supravieuit dup implantare, s-a nscut oaia Dolly. Aceasta realizare a fost capital pentru evoluia acestor experimente, pentru c nu s-au mai folosit nuclee de embrioni, ci celule de la un organism adult. Dup naterea oitei Dolly, cercetarea n domeniul clonrii a evoluat mult. n 1998, s-a anunat naterea a dou vaci i obinerea a 20 de copii de oareci.

n Romnia, au fost fcute cu succes experiente de clonare a animalelor domestice, pe baza nucleelor din celule embrionare de la taurine, la Universitatea de Stiine agricole din Timioara, iar de la ovine, la Staiunea de Cretere si Ameliorare a Ovinelor de la Pallas-Constanta.

Controverse
Clonarea este considerat de unii o provocare biotehnologic fr etic pentru c lezeaz identitatea individului i a speciei, i atac direct demnitatea persoanei. Comitetul National de Bioetic ( din Italia ) este mereu atent s examineze cazuri i situaii , care s cointereseze lumea tiinific , legislatorii i publicul , la o mas rotund care s duc toate forele n direcia tutelrii sntii omului i ambientului. Decizia European Patent Office ( EPO ) de a concede Universitii din Edimburg, brevetul care prevede izolarea i cultura celulelor staminale de embrioni i de esuturi adulte i modificarea lor genetic, a readus n atenie chestiunea etic a producerii i utilizrii de embrioni n scop comercial. CNB i-a exprimat n ocazii anterioare, n mod expres , propriile rezerve privind brevetarea fiinelor vii i experimentarea pe embrionul uman i opoziia fa de clonarea uman , n particular - Raportul despre brevetarea organismelor vii din 19 noiembrie 1993, Identitatea i statutul embrionului uman din 22 iunie 1996, Clonarea din 17 octombrie 1997.

Clonarea molecular

Clonarea molecular se refer la procedura de izolare a unei anumite secvene ADN i obinerea mai multor copii ale acesteia in vitro. Clonarea este frecvent folosit pentru amplificarea secvenelor ADN ce conin gene, dar poate fi folosit i pentru amplificarea oricrei secvene ADN cum ar fi promotorii, secvene necodate i secvene aleatoare ale ADN. Este folosit ntr-o larg varietate de experimente n biologie precum i o serie de aplicaii practice cum ar fi producerea pe scar larg a proteinelor. Uneori termenul este greit utilizat ca referindu-se la identificarea locaiei cromozomilor unei gene cu un anume fenotip,

precum "positional cloning". n practic localizarea unei gene la un anumit cromozom sau regiune genomic nu permite neaprat izolarea sau amplificarea secvenei genomice relevante. n esen, pentru a amplifica o secven ADN ntr-un organism viu acea secven trebuie s fie legat de originea replicrii, un element al secvenei capabil s direcioneze propagarea ei nsi i a tuturor celor conectate de ea. n practic totui, un numr de alte elemente sunt dorite i exist o varietate de vectori care permit expresii proteice, marcarea, producerea de ARN i ADN de sine stttori. Clonarea oricrui fragment ADN presupune n esen patru pai: fragmentare, ligaturare, transformare (transfection) i selecie.

Clonarea uman

Tehnica transferului nuclear a fost aplicat, pn la urm, i fiinelor umane. Primele informaii despre rezultate ale cercetarii n acest domeniu au aprut n 1993, cnd doi cercettori americani, J.Hall i R. Stilmann, au anunat inteniile lor de a face asemenea experimente pe celule umane. Mai trziu, n 1998, ntr-un centru de sterilitate al unui spital din Seul, a fost obinut, prin tehnica Honolulu, un embrion uman. Nucleul folosit aparinea aceleiai persoane de la care fusese prelevat ovulul. Procesul a fost ntrerupt n momentul n care divizarea ajunsese la patru celule, datorita restriciilor impuse de guvernul coreean. Oameni de tiint din Statele Unite au declarat, n 2001, c au clonat cu succes embrioni de maimu. Peste cteva luni, la 24 noiembrie 2001, cercetatorii de la Advanced Cell Technology au anunat obinerea mai multor embrioni umani clonai n scop de cercetare a celulei stem. Acetia au murit nsa n stadiul de 2, 4 si 6 celule. La 25 decembrie 2002, Brigitte Boisselier, biochimista, reprezentant a companiei Clonaid, a anunat naterea primului copil clonat. Ea este membr a gruprii Rael, o sect infiinata de ziaristul francez, stabilit n Canada, Claude Vorilhon. Mentorul acestei micri, denumite "Raelian Movement", care numr de mii de membri, provenii din 84 de ari, pretinde c a fost contactat de Elohim, n 1973. Potrivit acestui mesaj, viaa pe pmnt ar fi fost creat n mod artificial de reprezentani ai altui sistem solar, iar omul a aprut acum 25 de mii de ani, prin clonare. Un studiu recent, publicat n revista britanic British Medical Journal, contrazice declaraiile companiei Clonaid,

susinand c, pn n acest moment, clonarea umana ar fi imposibil de realizat. Clonarea reproductiv nu este admis deocamdat nicaieri n lume. Rezoluia Comisiei pentru probleme de bioetica a Parlamentului Europei, din 7 septembrie 2000, interzice "utilizarea embrionilor umani pentru producerea de celule tulpinare". Printr-o decizie a UNESCO, din 1997, se interzice in spaiul european clonarea reproductiv umana. Parlamentul Romaniei a ratificat, la 22 februarie 2001, conform Constituiei Romniei, art.74, alin.2, Convenia European pentru protecia drepturilor omului i a demnitaii fiinei umane, fa de aplicaiile biologiei i medicinei, Convenia privind drepturile omului i biomedicina, semnate la Oviedo, la 4 aprilie 1997, i Protocolul adiional la Convenia European pentru protecia drepturilor omului i a demnitaii fiinei umane fa de aplicaiile biologiei i medicinii, referitor la interzicerea clonrii fiinelor umane, semnat la Paris la 12 ianuarie 1998. Exista, totui, unele ari (Suedia, Marea Britanie, Franta) unde cercetrile terapeutice pe embrionii umani clonai continua, iar cercetrile n domeniul clonrii terapeutice implica i perfecionarea tehnicilor clonrii reproductive. Marea Britanie a fost prima ar care a autorizat asemenea tip de cercetare, n 1990, instituind cel mai liberal cadru juridic n acest sens. Embrionii umani folosii n cercetri distructive se obin prin aceleai tehnici utilizate n cazul oii Dolly. Dup care se extrag celulele stem din embrionii clonai i acetia sunt distrui. Potrivit cercettorilor, celulele stem, obinute prin aa-zisa clonare terapeutic, au multe avantaje fa de cele obinute n mod convenional, din embrioni neclonai. esuturile sau organele create prin aceast tehnic nu ar mai fi respinse pentru c acestea ar conine aceeai structur genetic, ca i adultul cruia i se face operaia de transplant. Clonarea terapeutic, care are aceleai etape, ca oriice clonare, implic crearea i distrugerea de embrioni umani. Toate problemele de etica, create de cercetarea pe embrioni, se pstreaz n acest caz, pentru c embrionii umani clonai au acelai statut ca i cei creati prin alte tehnici. Dac ar fi s ajung la maturitate, fiinele umane clonate ar putea fi fizic identice cu cele de la care au fost prelevate nucleele transferate. Evident, ar avea o personalitate i o identitate separat.