UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE V.Babe TIMIOARA DISCIPLINA BIOLOGIE CELULAR I MOLECULAR Prof.Dr.

DOINA VERDE

CITOPLASMA
SEDIUL PROCESELOR METABOLICE CELULARE

I. HIALOPLASMA
(CITOSOL)
Definiie Structur Ultrastructur Proprieti fizice Compoziie chimic Roluri i activiti fiziologice

II. INCLUZIUNILE CITOPLASMATICE

Incluziuni glucidice Incluziuni lipidice - fiziologice - temporare - permanente - patologice - boli genetice - boli ctigate Incluziuni proteice Incluziuni pigmentare Incluziuni de cristale i cristaloizi Incluziuni patologice

III. ORGANITE INTRACITOPLASMATICE

Motilitate: elementele citoscheletului celular Generarea energiei metabolice: condriomul (mitocondrii) Sintez i secreie celular: ribozomi, reticul endoplasmic, aparat Golgi Digestie intracelular: lizozomi Detoxifiere: peroxizomi

CITOSCHELETUL CELULAR
1. 2. 3. 4. Microfilamentele de actin Microfilamentele de miozin Filamentele intermediare Microtubulii

Componentele se asambleaz i dezasambleaz permanent, funcie de starea metabolic i necesitile celulei

 MO - celul n cultur, fixat i colorat cu albastru Coomassie, coloraie specific proteinelor

1. Microfilamentele de actin
forma monomeric actina G

forma polimerizat actina F

(A) monomer, (B) microfilament, (C) imagine TEM

polimerizarea actinei
- faza de lag (nucleere)
- elongarea - faza staionar

Proteine asociate care influeneaz formarea microfilamentelor de actin

Profilina, timozina - mpiedic polimerizarea Filamina - favorizeaz organizarea n reea tridimensional a filamentelor (leag nodurile reelei) Gelsonina - determin fragmentarea filamentelor Fimbrina , -actinina, vilina - leag filamentele n mnunchiuri

 rolul profilinei i timozinei

 rolul filaminei

 rolul gelsoninei

 rolul -actininei i fimbrinei

A.

Organizarea molecular, localizarea i rolurile filamentelor de actin n celulele nemusculare:

2. Inel contractil (n citodierez)

1. Inel necontractil (zonulla adherens)

3. Organizarea molecular a microvililor

4. Organizarea molecular a fibrelor de stress i filopodiilor

 generarea forelor cortexului de actin n scopul deplasrii

 rolul filamentelor de actin n deplasarea keratocitelor

migratoare

 lamelipode i vluri de membran la extremitatea de migrare a unui fibroblast uman n cultur

B. Organizarea molecular a filamentelor de actin n celulele musculare

2. Microfilamentele de miozin
Forma monomeric

- Mecanismul polimerizrii n celulele nemusculare

polimerizarea n celulele musculare

- Microscopie de fluorescen - fibre musculare striate scheletale

- TEM seciune longitudinal prin muchiul scheletal

- TEM seciune transversal prin muchiul scheletal

 Organizarea proteinelor accesorii la nivelul sarcomerului

 Glisarea actinelor n timpul contraciei musculare

3. Filamentele intermediare
Diametru intermediar ntre actine i microtubuli Molecule fibrilare alctuite din mai multe polipeptide diferite (se exprim diferit n mai multe tipuri celulare) Polimerizarea nu necesit consum energetic i este definitiv Nu prezint polaritate, sunt insolubile n soluii fiziologice, dar se dizolv la variaii mari de pH Rol general: susinere, rezisten Importana medical: evidenierea lor permite diagnosticul tumorilor maligne Sunt cunoscute 4 tipuri: epitelial, axonal, vimentin, nuclear

modelul de polimerizare al filamentelor intermediare

1. Tipul epitelial - filamente de keratin (citokeratine)

Keratine de tip I (acide) i tip II (alcaline) 20 de tipuri n celulele epiteliale i 10 tipuri n pr i unghii Sunt ancorate n desmozomi i hemidesmozomi Rol structural i de rezisten mecanic Formeaz stratul cornos al epidermului i unghiilor

Implicaii medicale: - epidermoliza buloas simpl - maladii buloase bucale, esofagiene, corneene - diagnosticul epitelioamelor

Localizarea filamentelor de keratin n enterocite i participarea lor la formarea desmozomilor

 m. fluorescen: filamente de keratin n celulele epiteliale

2. Tipul axonal neurofilamente n neuroni

Formate din trei polipeptide : NF-L, NF-M, NF-H Implicaii medicale: - scleroza lateral amiotrofic:
sinteza NF n excesacumulare anormal mpiedicarea propagrii influxului nervos n lungul axonuluidegenerescen axonalatrofie axonal Efect letal

 tipuri de filamente intermediare n celulele SN

3. Tipul vimentin
Filamentele de vimentin n celulele mezenchimale Filamentele de desmin n celulele musculare Filamentele de sinemin (asociat cu celelalte) Filamentele gliale n astrocite

4. Tipul nuclear laminele nucleare

4. Microtubulii
1. 2. 3. 4. organizare moleculara - tubulina polimerizare depolimerizare clasificare: instabili i stabili a) microtubulii liberi b) asterii c) fusul de diviziune d) axonema cililor i flagelului e) centrul celular 5. rolurile microtubulilor

1. organizare molecular

2. polimerizarea Imunofluorescen: - verde:distribuia proteinelor tau - orange: distribuia proteinelor MAP

3. factori inhibitori ai polimerizrii

4.clasificare: instabili i stabili

a) microtubulii liberi b) asterii c) fusul de diviziune d) axonema cililor i flagelului e) centrul celular

microtubulii liberi
- variabilitatea de lungime i poziie a microtubulilor liberi n celulele epiteliale pulmonare dup tratarea cu rhodamin

 Centriol n seciune transversal (TEM) i longitudinal (schem)

 Centrozomul (TEM)

Asterul

Fusul mitotic (fusul de diviziune)

n metafaz, fusul de diviziune este format din: - microtubuli polari - microtubuli cinetocorieni - microtubuli liberi + - microtubuli asterieni

ROXI

 rolul fibrelor cinetocoriene n ataarea cromozomului metafazic

 fluorescen multipl:
- verde-microubuli fusoriali i asterieni - roz-centromeri - albastru-cromozomi

- TEM: fus de diviziune n anafaz

5. Rolurile microtubulilor

diviziune micare meninerea formei celulare susinerea organitelor

 meninerea formei celulare

 meninerea localizrii mitocondriilor

 meninerea localizrii ap. Golgi