UNIVERSITATEA DE VEST VASILE GOLDI ARAD, FACULTATEA DE MEDICIN, FARMACIE I MEDICIN DENTAR, SPECIALIZAREA NUTRIIE I DIETETIC, ANUL I

REPLICAIA ADN
BIOLOGIE CELULAR
1/15/2014

STUDENT: ANCUA CRISTINA-FLAVIA

Acidul deoxiribonucleic (ADN pe scurt) este materialul genetic al organismelor celulare i al celor mai muli virui. ADN-ul poart informaiile necesare sintetizrii directe a proteinelor i pentru replicare. Sinteza proteinelor este producerea de proteine necesare celulei sau viruilor pentru activitile acestora sau pentru dezvoltare. Replicarea este procesul prin care ADN-ul se copiaz pe sine insui pentru fiecare celul descendent sau virus, pasnd informaii despre sinteza proteinelor. n cele mai multe organisme celulare ADN-ul este organizat ca i cromozomi localizai in nucleul celulei. O molecul de ADN const in dou lanuri ,compuse dintr-un numr mare de compui chimici, numii nucleotide, prinse mpreun pentru a forma un lan. Aceste lanuri sunt aranjate ca i cum ar fi fost intoarse unul peste altul. Fiecare nucleotid consta n trei unitai: o molecul de zahr, un grup de fosfai i unul sau patru compui diferii conin baze. Nucleotidele dintr-un bra al lanului sunt ntr-o asociere specific cu nucleotidele corespunztoare din cellalt bra al lanului ADN. Replicaia ADN nainte ca o celul s se divid, ea trebuie s-i produc o nou copie a fiecrui cromozom.astfel, diviziunea celular este precedat de o faz special a ciclului vieii celulare, numit faza S, n care fiecare celul trebuie s i sintetizeze o copie de ADN. ntr-o celul eucariot tipic, faza S dureaza aproximativ opt ore. La sfritul ei, din fiecare cromozom rezult doi cromozomi perfect identici cu cel de origine i care vor rmne legai ntre ei prin intermediul centromerului pn n metafaza mitozei. Duplicarea cromozomilor implic att replicarea moleculei lungi de ADN a fiecruia, ct i asamblarea la ADN-ul nou format a noi proteine cromozomiale, ceea ce duce la formarea cromatinei. Procesul de copiere fidel a succesiunii de nucleotide din moleculele de ADN, deci a informaiei genetice, n scopul transmiterii acesteia de-a lungul generaiilor celulare, se numete replicaia ADN. Procesul, de fapt o reacie de polimerizare, are loc cu o rat de 500 nucleotide/secund la bacterii i de 50 nucleotide/secund la celulele de mamifere. Enzimele de replicaie trebuie s fie foarte exacte i rapide. Viteza i acurateea sunt asigurate de o main replicativ complex, reprezentat de un complex multienzimatic.

Fidelitatea replicaiei ADN Copierea ADN (DNA templating; templet=ablon) este un proces prin care secvena de nucleotide a ADN-ului (sau a unei secvene de ADN) este duplicat prin mperecherea complementar de baze (A cu T sau U, si G cu C), ntr-o secven nucleotidic complementar (de ADN sau de ARN). Procesul presupune recunoaterea ficrui nucleotid i implic n mod obligatoriu separarea tranzitorie a celor dou lanuri complementare ale dublului helix de ADN, astfel c gruprile acceptoare i donoare ale ficrei legturi de hidrogen ale bazelor azotate s apar expuse pentru mperechere. Procesul este catalizat de o enzim de polimerizare a nucleotidelor, descoperit n 1957, care a fost denumit ADN-polimeraza. Substratul acestei enzime l constituie dezoxiribonucleotid-trifosfaii, ei fiind polimerizai ntr-un singur lan polinucleotidic pe baza modelului unei catene care are rol de matri. ADN-polimeraza catalizeaz adiia treapt cu treapt a dezoxiribonucleotidelor, la captul 3OH al unui lan polinucleotidic preexistent (lanul primer) care se afl mperecheat la lanul matri. Astfel lanul nou sintetizat crete in direcia 53. Deoarece fiecare nucleotid care vine s se adauge la catena n sintez, trebuie s se mperecheze cu nucleotidul de pe lanul matri, acesta din urm determin care din cei 4 nucleotidtrifosfai s intre n recie. n timpul replicaiei, fiecare caten veche de ADN servete ca matri pentru sinteza unei catene noi. Astfel, secvena ADN de o lungime enorm este replicat semiconservativ de ctre ADNpolimeraz. Fiecare din cele dou celule fiice rezultate din diviziune motenete astfel, un dublu helix de ADN care conine o caten veche si una nou. Furca replicativ Cercetrile din anii '60 au evideniat c regiunile aflate n replicare se mic de-a lungul helixului de ADN parental. Deoarece o asemenea regiune are o form de Y, ea a fost denumit furca replicativ. La nivelul furcii replicative, helixul ambelor molecule noi de ADN este sintetizat de un complex enzimatic complex care conine i ADN-polimeraza. Iniial s-a crezut c mecanismul replicrii ADN decurge simplu, prin creterea ambelor lanuri la nivelul furcii replicative, prin adugarea nucleotid cu nucleotid, pe msura ce furca replicativ se desface de la un capt la cellalt. Dar din cauza orientrii antiparalele a celor dou lanuri de
3

ADN, acest mecanism ar presupune ca un lan nou s creasc n direcia 5'3', iar cellalt n direcia 3'5'. n acest caz, furca replicativ ar avea nevoie de dou ADN-polimeraze diferite, una care s poat polimeriza in direcia 5'3' i una care s polimerizeze lanul n formare, n direcia 3'5'. Nu s-a evideniat ns existena vreunei ADN-polimeraze care s poat determina creterea unui lan polinucleotidic n direcia 3'5' i care s adauge astfel fiecare nou nucleotid la captul 5'-ppp al unui lan n cretere. Cum se face deci sinteza ADN n direcia 3'5'? Rspunsul a fost prima dat sugerat la sfritul anilor '60 de rezultatele unor experimente n care s-a adugat pentru cteva secunde, n mediul de cretere al unor bacterii in diviziune, 3H-timidina puternic redioactiv. Astfel, a devenit redioactiv doar ADN-ul recent sintetizat, strict de la nivelul furcii replicative. Aceast metod selectiv de marcare a evideniat apariia temporar la nivelul furcii replicative a unor fragmente scurte de ADN, de 1000-2000 de nucleotide, cunoscute astzi cu numele de fragmente Okazaki. Ulterior asemenea fragmente au fost evideniate i la eucariote, ele fiind ns mult mai scurte, de 100-200 nucleotide. Fragmentele Okazaki sunt sintetizate doar n direcia 5'3' i, dup ce sinteza lor se incheie, ele sunt legate de ctre o enzim numit ADN-ligaza, pentru a forma lanul lung de ADN. Furca replicativ are deci o structur asimetric. Lanul nou de ADN care este sintetizat continuu, fr ntreruperi, se numete lanul prioritar (leading strand), deoarece sinteza sa precede sinteza discontinu a celuilalt lan, numit lan tardiv (intarziat) (lagging strand). Sinteza lanului tardiv rmne n urma sintezei lanului prioritar deoarece fragmentele Okazaki se pot polimeriza doar dup ce furca replicativ s-a desfcut cu un numr de nucleotide egal cu lungimea acestor fragmente. De notat este c sinteza fragmentelor Okazaki se face n sens invers sintezei lanului prioritar, ns tot n direcia 5'3', de aceea pentru replicarea ADN nu este necesar dect intervenia unui singur tip de ADN-polimeraz. Replicarea ADN, este un proces fundamental care are loc n celulele organismelor vii, este baza ereditii biologice. El realizeaz copierea, mai precis duplicarea, moleculelor de ADN, purttorul informaiei genetice. Este un proces semiconservativ, n care molecula ADN iniial este despicat n lung, ca un fermoar, n cele dou iraguri complementare care o compun.
4

Fiecare din acestea devine un model pentru sinteza unui nou irag complementar, integrnd, dup regula complementaritii bazelor, nucleotidele dispersate n nucleul celulei. Rezult dou molecule ADN identice.

BIBLIOGRAFIE: 1. Francisc Mixich, Biologie celular i molecular, editura Sitech 1997; 2. Nicolae Frinel, Doina Verde, Biologie celular i molecular, Universitatea Vasile Goldi Arad, editura Mirton Timioara 1994; 3. Ardelean Aurel, Pribac George Ciprian, Biologie celular i molecular, Vasile Goldi University Press Arad 2010; 4. Mihai Cruce, Biologie celular i molecular, Colecia Hipocrate, Editura Aius Craiova, 1999 5. Francisc Mixich, Aurel Ardelean, Principii fundamentale de Biologie molecular, Editura medical universitar Craiova, 2002