ADN ARN POLIPEPTIDE

Genetica Moleculara

ARN-ul este transcris, conform legilor complementaritatii bazelor azotate, de pe o matrita monocatenara de ADN Majoritatea genelor codifica pentru proteine; o mica parte dintre ele codifica molecule de ARN functionale, care nu sunt insa supuse translatiei Secveta nucleotidica a genelor determina ordinea aminoacizilor in proteine, cu alte cuvinte forma, marimea si functia respectivelor proteine ARNm este translat in grupe de cate 3 nucleotide (codoni) la nivelul ribozomilor, pe baza imperecherii anticodonului ARNt cu codonul de la nivelul ARNm

Genetica Moleculara

ADN ARN polipeptide (dogma centrala a geneticii)

Initial s-a crezut ca fluxul de informatie are exclusiv directia prezentata mai sus ARN-ul poate sa revina la ADN prin procesul de reverstranscriptie; nu sunt cunoscute procese prin care informatia sa fie transferata de la proteine la ARN sau ADN

Complementaritatea bazelor azotate sta la baza transferului de informatie In timpul transcriptiei, pentru formarea ARN In timpul translatiei pentru formarea proteinelor Legaturile de H, usor de inlaturat, joaca un rol important in transferul informatiei

Genetica Moleculara

Primul pas in procesul de transfer al informatiei este transcriptia Transcriptia: copierea secventei nucleotidice ADN in ARN Genereaza transcripte ARN ADN-ul poate fi transcris de foarte multe ori ARN Polinucleotida monocatenara Contine riboza in locul dezoxiribozei Contine baza azotata pirimidinica Uracil (U) U formeaza legaturi de H cu A (inlocuieste T) Capetele 5 si 3 ale moleculei au importanta majora

Genetica Moleculara

ARN-ul nu este intotdeauna o molecula monocatenara.

Catenele de ARN sunt deosebit de flexibile si pot adopta conformatii secundare.

Genetica Moleculara

deoxiribonucleosid 5-monofosfat

Ribonucleosid 5monofosfat

Genetica Moleculara

Genetica Moleculara

ARN informational: codifica proteinele, se numeste mesager ARNm Este utilizat ca transcript primar la procariote Este modificat post-transcriptional la eucariote Modificari ale capetelor 5 si 3 Indepartarea intronilor Este translat in secventa de aminoacizi ARN functional (structural) ARNt (ARN transportor): transporta aminoacizii la ribozomi; se nunmeste si adaptorul Crick ARNr (ARN ribozomal): component structural si catalitic al ribozomilor ARNsn(ARN apartinand spliceosomului): component structural si catalitic al spliceosomului (echipamentul de eliminare a intronilor) ARNsno (ARN mic, nucleolar): ARN de dimensiuni mici, nucleolar, implicat in maturarea ARNr ARNsc: controleaza traficul proteinelor in citoplasma
Genetica Moleculara

Sinteza ARN-ului este catalizata de catre ARN polimeraza Ca matrita este utilizata o monocatena de ADN Intotdeauna este folosita aceeasi catena, pentru o gena data Are loc o despiralizare locala a ADN-ului Adaugarea de nucleotide libere se realizeaza la capatul 3 liber al catenei in crestere Sinteza ARN se desfasoara in directie 5 spre 3 la fel ca in cazul ADN-ului Matrita este citita din directie 3 spre 5 Pentru sinteza catenei ARN complementare se aplica aceleasi reguli ale complementaritatii bazelor Polimeraza initiaza sinteza ARN de novo Transcriptul este identic din punct de vedere al secventei cu catena nematrita (catena sens), cu exceptia inlocuirii T cu U

Genetica Moleculara

Transcriptia este asimetrica doar o catena a ADN-ului este transcrisa in ARN catena matrita (catena non-sens, catena -) Transcriptul ARN are secventa identica secventei catenei nematrita (catena sens, catena +)

ARN-ul este sintetizat numai in directie 5 spre 3 Catena matrita este citita in directie 3 spre 5

Genetica Moleculara

Genetica Moleculara

Oricare dintre cele doua catene ale ADN-ului poate fi folosita ca matrita La nivelul unei anumite gene insa, aceeasi catena va fi folosita intotdeauna ca matrita

DNA

Genetica Moleculara

Numeroase molecule de ARN polimeraza pot efectua simultan transcriptia unei gene, in cazul in care de pe aceeasi secventa genica sunt necesare mai multe transcripte

Genetica Moleculara

Procariote: o unica ARN polimeraza Efectueaza transcriptia ARNm, ARNr si ARNt Transcriptia si translatia sunt procese cuplate Eucariote: exista trei ARN polimeraze ARN polimeraza I transcrie genele ARNr ARN polimeraza II transcrie genele structurale (care codifica proteine); cu alte cuvinte produce ARNm Transcriptele primare sunt supuse unor modificari posttranscriptionale ARN polimeraza III transcrie genele pentru ARNt si genele pentru ARNr 5S La eucariote, transcriptia si translatia au loc in compartimente celulare separate La nivelul organitelor, cele doua procese au loc in acelasi compartiment, la fel ca in cazul procariotelor

Genetica Moleculara

Initierea Are loc la capatul 5 al unei gene ARN polimerazase cupleaza la un promotor Se produce o despiralizare locala a ADN-ului Elongarea Prin aditia de nucleotide la capatul 3 a unei catene in crestere Este guvernata de principiul complimentaritatii bazelor azotate Se folosesc nucleotide in forma trifosfat, a caror trecere la forma monofosfat genereaza energia necesara procesului Terminarea La capatul 3 al genei Necesita formarea unei bucle terminator (la procariote) sau interventia unei enzime (la eucariote)
5UTR
Genetica Moleculara

Regiune codificatoare

3UTR

Promoter 5 3 RNA polymerase

Nontemplate strand 3 5 Template strand

Transcription bubble 5 3 3 5

Genetica Moleculara

Stabileste locul unde incepe transcriptia la ce punct de pe catena si care catena a ADN-ului va functiona ca matrita

Genetica Moleculara

Elongarea aditia de ribonucleotide cu formarea unei catene de ARN, are loc din directie 5 spre 3

Terminarea este dependenta de o secventa specifica de nucleotide

Genetica Moleculara

capatul 5: capping Aditia la capatul 5 a 7-metilguanozinei capatul 3: atasarea unei cozi poli(A) Aditia a 150-200 nucleotide cu adenina la capatul 3 Reprezinta un semnal de poliadenilare Indepartarea intronilor (splicing) de catre spliceozom Toti intronuu au secvente de recunoastere 5GU si 3AG (regula GU AG) ARNsn de la nivelul spliceozomului realizeaza cataliza exciziei intronului Intronul este indepartat in forma lariat si distrus ulterior Unele gene care nu codifica proteine structurale poseda introni care se auto-indeparteaza

Genetica Moleculara

5metil guanozina este atasata la capatul 5 imediat dupa debutul transcriptiei Aceasta nucleotida protejeaza capatul 5al ARNm, avand si rol in translatie
Genetica Moleculara

O endonucleaza cliveaza ARNm imediat dupa secventa semnal AAUAAA Coada poliA este atasata de o poliA polimeraza Nu toate moleculele de ARNm prezinta o coada 3 poliA

Genetica Moleculara

Poarta denumirea de splicing Are loc la nivelul ARNm, dar si in ARNr si ARNt Intronii sunt indepartati inainte ca ARNm sa paraseasca nucleul

Siturile de splicing au o secventa specifica, fiind supuse regulii 5 GU 3 AG Moleculele de ARNsn formeaza o unitate functionala care a primit denumirea de spliceozom
Genetica Moleculara

Transcript primar

Spliceozom asamblat

Produsul reactiei de splicing

Genetica Moleculara

Splicing-ul este rezultatul a doua reactii de transesterificare

Primul splicing are loc la capatul 5 al intronului care va ramane atasat de restul secventei sale la pozitia 2 a adeninei de la nivelul punctului de ramificare

Al doilea splicing elibereaza lariatul si ARNm cu intronul eliminat

Genetica Moleculara

Genetica Moleculara

Proteinele sunt polimeri de aminoacizi (polipeptide) Fiecare aminoacid are o grupare R care ii confera proprietati chimice unice Aminoacizii sunt conectati prin legaturi peptidice Fiecare polipeptida are un capat amino si unul carboxil Structura Primara: secventa de aminoacizi Secundara: pe baza formarii legaturilor de H, -helix si -foaie plisata Tertiara: impachetarea structurii secundare Cuaternara: doua sau mai multe structuri tertiare Forma si functia proteinei este determinata de structura sa primara, la randul sau codificata de gena

Genetica Moleculara

Genetica Moleculara

Genetica Moleculara