Sunteți pe pagina 1din 18

Capitolul 10

163

Capitolul 10

10
TRANSLAIA
Dup transcripia i transmiterea mesajului genetic din
ADN nuclear n citoplasm, secvena nucleotidelor din ARNm
este convertit ntr-o secven specific de aminoacizi n
protein. Procesul se numete translaie, ntruct limbajul
nucleotidelor este tradus n limbajul celor 20 de aminoacizi ce
alctuiesc proteinele. Catenele polipeptidice sunt sintetizate prin
aranjarea riguroas a aminoacizilor ntr-o anumit ordine,
asigurat de ctre codul genetic un sistem de corespondene
dintr-o anumit secven de trei nucleotide (codon) din ARNm
i fiecare din cei 20 de aminoacizi.
n procesul transcrierii ARNm a preluat mesajul genetic
din molecula de ADN despre succesiunea aminoacizilor din
lanul polipeptidic. Sistemul prin care succesiunea nucleotidelor
din molecula de ADN (sau ARN) determin
ordinea
aminoacizilor n protein poart denumirea de cod genetic.
Proprietile codului genetic
Este alctuit din triplete, fiecare triplet formeaz un codon.
Exist 64 de codoni, dintre care 61 codific pentru anumii
aminoacizi, iar trei - sunt codoni de STOP informaional.
Este universal - la toate organismele exist acelai cod
genetic, cu unele excepii la procariote, protozoare i n
mitocondrii.
164

Capitolul 10

U
(Phe)
(Phe)
(Leu)
(Leu)
(Leu)
(Leu)
(Leu)
(Leu)
(Ile)
(Ile)
(Ile)
(Met)
(Val)
(Val)
(Val)
(Val)

C
(Ser)
(Ser)
(Ser)
(Ser)
(Pro)
(Pro)
(Pro)
(Pro)
(Thr)
(Thr)
(Thr)
(Thr)
(Ala)
(Ala)
(Ala)
(Ala)

A
(Tyr)
(Tyr)
STOP
STOP
(His)
(His)
(Gln)
(Gln)
(Asn)
(Asn)
(Lys)
(Lys)
(Asp)
(Asp)
(Glu)
(Glu)

G
(Cys)
(Cys)
STOP
(Trp)
(Arg)
(Arg)
(Arg)
(Arg)
(Ser)
(Ser)
(Arg)
(Arg)
(Gly)
(Gly)
(Gly)
(Gly)

U
C
A
G
U
C
A
G
U
C
A
G
U
C
A
G

Fiecare codon codific un singur aminoacid. Prezint


ambiguitate doar codonii AUG, care specific metionina i
formil-metionin, ct i GUG pentru valin i formilmetionin.
Este degenerat. Acelai aminoacid poate fi codificat de mai
multe triplete (triplete sinonime) - astfel serinei i corespund
6 codoni, prolinei - 4 etc.
Este colinear - ordinea tripletelor n molecula de ARN
corespunde ordinii aminoacizilor n lanul polipeptidic.
Nu este suprapus - tripletele vecine nu conin nucleotide
comune (fig. 10.1).
Este fr virgule - codonii urmeaz unul dup altul, fr
spaii.
Exist un triplet universal de iniiere - AUG. La procariote i
la unele plante n calitate de codon de iniiere poate fi GUG.
Exist trei codoni STOP - UAA, UAG, UGA.
165

Capitolul 10

Ordinea codonilor n molecula de ARNm se numete faz de


lectur. n fiecare molecul de ARNm exist trei faze de
lectur. Faza de lectur care ncepe cu AUG se numete faz de
lectur deschis (fig. 10.1).

Fig. 10.1. Proprietile codului genetic

Procesul de decodificare a informaiei cifrate n molecula


de ARNm se realizeaz pe ribozomi cu ajutorul ARNt. Aparatul
de translaie include numeroi factori proteici ce catalizeaz
traducerea corect a codului genetic, polimerizarea
aminoacizilor, asamblarea ribozomilor, controlul duratei de
via a ARNm, controlul numrului de polipeptide sintetizate de
pe aceeai matri.
Procesul de translaie este similar la procariote i
eucariote. Sunt diferii factorii proteici de translaie, tipurile de
ribozomi implicai i modul de iniiere a translaiei. De
asemenea, difer i structura moleculelor de ARNm. La
procariote ARNm, de obicei, este policistronic - conine
informaia despre sinteza mai multor proteine, iar la eucariote
conine informaia despre sinteza unui singur polipeptid. La
procariote procesele de transcripie i translaie pot decurge
166

Capitolul 10

concomitent. Aceasta este posibil deoarece ambele procese


decurg direct n citoplasm, iar viteza de sintez a proteinelor
(10 aa/sec) este comparabil cu viteza de sintez a ARN (30
b/sec). La eucariote aceste procese decurg separat: transcrierea n nucleu, iar translaia - n citoplasm. Realizarea mesajului
genetic n mitocondrii i plastide are loc integral n organitele
respective.

Aparatul de translaie
Aparatul de sintez a proteinelor este constituit din urmtoarele
componente:
ARNm matri pentru sinteza proteinei;
ribozomi sediu pentru asamblarea polipeptidului;
ARNt translator al codului genetic de pe ARNm;
aminoacilARNt sintetaze adaproti penru
aminoacizi la ARNt corespunztor;
aminoacizi monomerii proteinei;
ATP i GTP surse de energie;
Mg2+, Ca2+ - cofactori ai enzimelor;
factori proteici, catalizatori ai translaiei reglatori
specifici ai procesului de decodificare a codului
genetic i sintezei proteinei.
ARNm la eucariote conine mesajul genetic pentru
sinteza unei molecule proteice, este monocistronic. Se
sintetizeaz i proceseaz n nucleu, apoi se transport n
citoplasm (ARNm este asociat cu proteine specifice,
recunoscute de complexul porului nuclear). Captul 5 este
protejat de CAP, care servete ca semnal de recunoatere pentru
ribozom n iniierea translaiei. CAP-ul este urmat de cteva
zeci de nucleotide netranslate secvena lider care reprezint
situs de legare a ARNm de ribozom (fig. 10.2).
167

Capitolul 10

Fig. 10.2. Organizarea ARNm la eucariote

Regiunea translabil conine secvena de baze ce controleaz


ordinea asamblrii aminoacizilor n polipeptid. La captul 5 al
secvenei translate se conine codonul de iniiere AUG, iar
terminaia este determinat de unul din cei trei codoni STOP. La
captul 3 al mesagerului se gsete o regiune de 100-200
nucleotide netranslate coada poli(A).
ARNm procariotic este policistronic, produs al
transcripiei unui operon. Spre deosebire de ARNm de la
eucariote, la procariote mesagerul nu este procesat. Capetele
moleculei nu conin CAP i poli(A). Secvena lider este format
din circa 10 nucleotide netranslate i conine un hexamer
conservat (5'AGGAGG3') numit secvena Shine-Dalgarno.
Ea este complementar unei secvene conservate de la captul 3'
al moleculei ARNr 16S. ntr-o molecul de ARNm se pot
conine mai muli codoni de iniiere AUG (mai rar GUG sau
UUG).
ARNt. n procesul de sintez a proteinei sunt implicai
20 de aminoacizi. Ei sunt transportai la locul de sintez cu
ajutorul moleculelor de ARNt. Astfel, ARNt servete ca
translator (traductor) al codului genetic de pe ARNm i adaptor
pentru aminoacizii corespunztori.
Fiecare molecul este
format din ~70-80 nucleotide care formeaz o structur
secundar specific - frunz de trifoi (fig. 10.3). Molecula
ARNt conine n afar de cele patru baze majore A, U, G, C i
168

Capitolul 10

cteva baze minore: pseudouracil (), dihidrouridina (D), timina


(T) etc.
Regiunile funcionale ale ARNt:
braul acceptor de care se unete aminoacidul (aa);
bucla care asigur recunoaterea ribozomului;
bucla D care este centrul de recunoatere de ctre
aminoacil-ARNt-sintetaz;
bucla anticodon care conine un triplet ce determin
tipul aminoacidului, transportat ulterior de ARNt i
are proprietatea de a se mperechea cu cele trei
nucleotide ale codonului din ARNm.
n total exist 61 tipuri de ARNt, n corespundere cu
numrul de triplete codificatoare.

Fig. 10.3. Structura moleculelor de ARNt

169

Capitolul 10

Aminoacil-ARNt-sintetaza. Selecia corect i legarea


aminoacidului la molecula respectiv de ARNt se realizeaz cu
ajutorul enzimei aminoacil-ARNt-sintetaza. Aceast enzim are
specificitate pentru fiecare dintre aminoacizi, de aceea n total
exist 20 tipuri (fig. 10.4). Aminoacidul se unete la grupa OH
din poziia C2' sau C3' de la captul 3' al moleculei de ARNt.
Adiionarea se realizeaz n 2 etape:
g 2
1) Enzima + aminoacid + ATP M
Enzima-aminoacilAMP + P~P
2) Enzima-aminoacil-AMP + ARNt
Aminoacil-ARNt +
AMP + enzima.

Fig. 10.4. Mecanismul interaciunii aminoacidului, ARNt i


ARNt-sintetatzei

Ribozomii. Ribozomii reprezint sediul de traducere a


ARNm i polimerizare a aminoacizilor. Ei constituie complexe
ribonucleoproteice i sunt formai din dou subuniti de mrime
inegal. n citoplasm, dac ribozomii nu sunt implicai n
procesul de translaie, subunitile ribozomale sunt disociate.
Formarea ribozomului are loc doar la unirea cu ARNm.
Structura ribozomilor, la fel ca i structura ARNr este similar,
ns nu identic, la toate speciile (fig. 10.5).
170

Capitolul 10

Ribozomii eucariotici. Subunitatea 40S conine o


molecul de ARNr 18S i ~33 proteine. Subunitatea 60S conine
la rndul su, trei molecule de ARNr (5S, 5,8S, 28S) i circa 49
proteine. ARNr i subunitile ribozomale 40S i 60S se
formeaz n nucleol.
Ribozomii procariotici. Subunitatea 30S conine o
molecul de ARNr 16S i 21 proteine. Subunitatea 50S este
format din ARNr 5S, 23S i 31 proteine. Sinteza ARNr i
formarea subunitilor ribozomale are loc direct n citoplasm.

Fig. 10.5. Organizarea molecular a ribozomilor

171

Capitolul 10

Ribozomii au cteva centre catalitice:


Situsul A - aminoacil - este responsabil de unirea
complexului aminoacil-ARNt;
Situsul P - peptidil - este responsabil de unirea peptidilARNt;
Situsul E este responsabil de eliminarea ARNt.
Legtura dintre ribozom, molecula de ARNt i molecula
de ARNm se realizeaz prin intermediul ARNr. Molecula ARNr
din subunitatea mic este responsabil de recunoaterea i unirea
la ARNm. Moleculele de ARNr din subunitatea mare sunt
responsabile de unirea celor dou subuniti ribozomale,
interaciunea ARNt cu subunitatea mare i cu molecula de
ARNm. Reaciile ce se desfoar pe ribozom sunt catalizate de
proteinele ribozomale.
Factori proteici de translaie. Fiecare etap a translaiei
este controlat de un complex de factori proteici specifici: IF
factori de iniiere; EF factori de elongare; RF factori de
terminare.
Mecanismul translaiei
Sinteza proteinelor se face prin aezarea secvenial a
aminoacizilor n ordinea impus de mesajul genetic preluat de
ARNm, n procesul sintezei sale pe matri de ADN. Descifrarea
mesajului se face n sensul 5'3' al moleculei de ARNm, deci n
aceeai ordine n care a fost copiat de ARNm n procesul de
transcripie.
Procesul de biosintez a proteinelor decurge n trei etape:
iniierea, elongarea i terminarea. Fiecare etap este controlat
de factori proteici specifici, care difer la procariote i eucariote.
Iniierea include reaciile care preced formarea legturii
peptidice ntre primii doi aminoacizi din protein. Ea necesit
legarea ribozomului la ARNm i formarea complexului de
172

Capitolul 10

iniiere care include primul aminoacil-ARNt. Aceasta este o


etap relativ lent a translaiei i determin rata cu care ARNm
este tradus (fig. 10.6).
Iniierea decurge n cteva etape:
(1) formarea complexului metionil-ARNt met (la procariote
formilmetionil-ARNt fmet);
(2) activarea complexului metionil-ARNtmet prin adugarea
unei molecule de GTP;
(3) formarea complexului [metionil-ARNtmet] [GTP]
[subunitatea
ribozomal mic]. Metionil-ARNt se
situeaz n situsul P (proprietate unic doar pentru ARNt
de iniiere);
(4) asocierea complexului format la ARNm i recunoaterea
codonului de iniiere AUG, cu consumul unei molecule
de ATP;
(5) asocierea subunitii ribozomale mari i disocierea GTP
n GDP i Pi.

Fig. 10.6. Mecanismul iniierii translaiei

173

Capitolul 10

La eucariote mai nti se recunoate CAP-ul, apoi


subunitatea ribozomal mic migreaz pn cnd ajunge la
primul codon AUG. Primul aminoacid incorporat este
metionina (Fig 10.7).
La procariote se recunoate fiecare AUG care servete
drept semnal pentru iniierea translaiei. Primul aminoacid
incorporat este formilmetionina.

Fig. 10.7. Particularitile iniierii translaiei la


procariote i eucariote

Elongarea include toate reaciile de la formarea primei


legturi peptidice, pn la adugarea ultimului aminoacid.
Aminoacizii se ataeaz unul cte unul n conformitate cu
succesiunea codonilor n molecula de ARNm. Este cea mai
rapid etap a translaiei (fig. 10.8).
Elongarea
se
caracterizeaz
prin
succesiunea
urmtoarelor evenimente:
(1) formarea complexelor aminoacil-ARNt;
(2) activarea complexelor aminoacil-ARNt prin adugarea a
cte o molecul de GTP;
174

Capitolul 10

Fig. 10.8. Mecanismul elongaiei lanului polipeptidic

(3) transportarea complexului [aminoacil-ARNt] [GTP] la


situsul A al ribozomului i eliberarea GDP + Pi;
(4) transferul aminoacidului iniiator din situsul P n situsul
A i formarea legturii peptidice ntre aminoacizi.
Procesul este catalizat de enzima peptidil-transferaza. n
etapele urmtoare ale elongaiei din situsul P se va
transfera n situsul A ntregul lan polipeptidic;
(5) eliberarea moleculei de ARNt din situsul P i asocierea
unei molecule de GTP la ribozom;
(6) translocarea ribozomului cu un triplet. Micarea
ribozomului se efectueaz n direcia
5' 3' al
moleculei de ARNm:
- tripletul decodificat nimerete n afara sectorului P;
- n situsul P se va deplasa ARNt cu polipeptidul
format
(peptidil-ARNt);
175

Capitolul 10

n sectorul A se situeaz urmtorul codon, iar n


situsul A urmtorul aminoacil-ARNt. n calitate de
energie servete GTP care se hidrolizeaz pn la
GDP + Pi.
Procesul decurge pn cnd n sectorul A nimerete unul
din cei trei codoni STOP.
Terminarea cuprinde evenimentele necesare pentru
eliberarea lanului polipeptidic sintetizat i disocierea
ribozomilor de la ARNm.
Cnd n sectorul A se situeaz unul dintre cei trei codoni
STOP (UAG, UGA, UAA), la ribozom se unete factorul de
eliberare RF. RF condiioneaz disocierea complexului de
translaie. Subunitile ribozomale, ARNt, ARNm, RE, factorii
proteici de translaie pot fi reutilizai (fig. 10.9.).
-

Fig. 10.9. Terminarea translaiei i eliberarea componenilor


aparatului de translaie

176

Capitolul 10

Lanul polipeptidic sintetizat, de obicei, sufer unele


modificri posttranslaionale: nlturarea metioninei iniiale,
fosforilarea, glocozidarea, hidroliza specific etc.
Reglarea translaiei
Biosinteza proteinelor poate fi activat/inactivat de
diveri factori de natur proteic sau neproteic care
interacioneaz cu componeni aparatului de translaie.
n tab. 10.1 sunt enumerai principalii factori de
translaie la procariote i eucariote, mecanismul lor de aciune la
diferite etape ale iniierii, elongrii i terminrii biosintezei
proteinei.
La procariote este bine studiat mecanismul de aciune i
al altor factori ce pot modula translaia. Spre exemplu sunt
prezentate unele antibiotice i modul lor de blocare a sintezei
proteice la bacterii.

Cazagamicina blocheaz iniierea translaiei prin legarea ei la captul


3' al moleculei 16S, responsabil de interaciunea cu ARNm.
Puromicina blocheaz sinteza proteinei prin unirea ei la ARNt n loc
de aminoacid.
Tetraciclina blocheaz legarea aminoacil-ARNt la situsul A al
ribozomului.
Streptomicina mpiedic trecerea de la iniierea la elongarea lanului
polipeptidic.
Cloramfenicolul blocheaz activitatea peptidil-transferazei.
Eritromicina - blocheaz translocaia ribozomului.

Unele modificri (mutaiile) din structura ARNm pot


cauza dereglri n procesul de translaie. Mutaiile pot fi cauzate
de modificrile din structura ADN transcris sau pot aprea n
ARNm sintetizat.
Modificarea
secvenei-lider
poate
mpiedica
recunoaterea
i
legarea
ribozomilor
la
ARNm.
177

Capitolul 10
Tabelul 10.1. Factorii de translaie i mecanismul lor de aciune

IF-1
IF-2

Initierea

IF-3
eIF-2
eIF-3
eIF-4A
eIF-4B
eIF-5

Elongarea

eIF-6
EF-Tu
EF-Ts
EF-G
eEF-1

Terminarea

eEF-1
eEF-2
RF-1
RF-2
RF-3
???

Procariote
Se unete la subunitatea 30S i stabilizeaz complexul de
iniiere pn la interaciunea cu ali factori proteici
Se unete la ARNt de iniiere i controleaz ptrunderea lui
pe ribozom
Controleaz unirea corect a subunitii 30S la ARNm
Eucariote
Activeaz complexul Met-ARNtmet
Asigur unirea subunitii 40S la CAP-ul ARNm
Recunoate CAP-ul i asigur denaturarea palindroamelor
din secvena lider a ARNm
Asigur stabilitatea moleculei ARNm i previne formarea
buclelor
Este o GTP-az ce asigur unirea subunitii 60S la
complexul de iniiere
Previne legarea prematur a subunitii 60S la subunitatea
40S
Procariote
Mediaz ptrunderea aminoacil-ARNt n situsul A
Asigur hidroliza GTP; regenereaz EF-Tu
Asigur translocarea ribozomului
Eucariote
Asigur unirea aminoacil-ARNt la ribozom; este omologul
EF-Tu
Asigur hidroliza GTP; este omologul EF-Ts
Asigur translocarea ribozomului; este omologul EF-G
Procariote
Recunoate codonii STOP UAA i UAG
Recunoate codonii STOP UGA i UAA
Asigur specificitatea RF-1 i RF-2.
Eucariote
Mecanism asemntor ca la procariote; factorii de terminare
sunt nc puin studiai

178

Capitolul 10

Pierderea/adiionarea unui sau mai multor nucleotide


provoac decalarea fazei de lectur i modificarea secvenei de
aminoacizi n ntregul lan, dup locul de modificare. Substituia
nucleotidelor poate provoca apariia codonilor missens sau
nonsens. Mutaiile missens determin
nlocuirea unui
aminoacid cu altul. n cazul formrii unor codoni STOP
prematuri (mutaie nonsens), are loc sinteza unor lanuri
polipeptidice mai scurte. nlocuirea unui codon STOP cu un
codon sens duce la alungirea lanului polipeptidic.
Numrul de polipeptide sintetizate de pe aceeai matri
ARNm este determinat de durata de via a mesagerului. La
procariote ARNm sintetizat este supus imediat translaiei i are o
durat de via de 2-5 min. La eucariote exist mai multe
mecanisme ce asigur stabilitatea ARNm, care au o durat de
via de la 20 min pn la 48 ore. Unul dintre ele este asociat
cu lungimea secvenei poli(A). n plus la eucariote exist
particule RNP ce pstreaz ARNm. Asocierea ARN cu
proteinele previne degradarea enzimatic a mesagerului. Date
recente pun n eviden existena unor molecule de ARNantisens, care se pot lega complementar cu moleculele de
ARNm, blocnd astfel degradarea i prevenind translaia
mesagerilor respectivi.
Particularitile translaiei n mitocondrii
Mitocondriile posed un aparat propriu de translaie care
include ribozomi proprii (n mediu 70S), ARNt propriu i
utilizeaz ca matri ARNm transcris de pe ADN mitocondrial.
Procesul de translaie se aseamn, n linii generale, cu cel
descris la procariote, avnd unele particulariti. ARNm este
policistronic i nu este supus CAP-rii sau poliadenilrii. n
mitocondrii exist doar 22 tipuri de ARNt, deoarece al treilea
nucleotid din bucla anticodogen respect principiul: G
179

Capitolul 10

recunoate orice pirimidin din tripletul codogen, iar U - orice


purin.
n mitocondrii sunt sintetizate doar o parte din enzimele
implicate n metabolismul energetic. Celelalte proteine
mitocondriale, inclusiv proteinele reglatoare ale replicrii,
transripiei, translaiei sunt codificate de genomul nuclear,
sintetizate n citoplasm i importate n mitocondrii. De aceea,
biosinteza proteinelor mitocondriale este reglat n mare parte
de activitatea genelor nucleare.
Verificarea cunotinelor:
1. Definii noiunile: translaie, cod genetic, codon, anticodon,
faz de lectur, situs A, situs P, aminoacil-ARNt-sintetaza.
2. Care sunt proprietile codului genetic?
3. Care sunt componentele aparatului translaional?
4. Prin ce se deosebete procesul de translaie la pro- i
eucariote?
5. Care sunt etapele procesului de biosintez a proteinelor?
6. Care sunt mecanismele de reglare ale sintezei proteice la
eucariote?

180