Disciplina de Microbiologie UMF Tg.

Mure
LP8

Diagnosticul de laborator al infeciilor cauzate de enterobacterii

Escherichia coli
Produs patologic
-

materii fecale, bil

alimente, vrsturi

urin

puroi, LCR, snge

1. Examen direct
-

din materii fecale nu se efectueaz examen microscopic

2. Izolare
-

pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson, Levine

geloz lactozat

pe geloz snge

bulion

3. Identificare
-

caractere morfotinctoriale
o bacili gram negativi, cu capete rotunjite, cu cili peritrichi
o necapsulai, nesporulai

caractere de cultur
o n bulion: l tulbur uniform, formeaz depozit i un inel aderent la suprafa
o pe medii solide: colonii de tip S, mici

geloz snge colonii S, mici, alb-cenuii, hemoliz (urin)

geloz lactozat colonii S, mici, lactozo-pozitive (galbene)

Leifson, MacConkey - colonii S, mici, lactozo-pozitive (roii)

Levine colonii caracteristice, lactozo-pozitive (mov nchis), cu luciu metalic

caractere biochimice
o pe mediul SIM

H2S negativ

mobilitate pozitiv

indol pozitiv
-1-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

o pe mediul TSI

glucoz pozitiv, cu producere de gaz

H2S negativ

lactoz, zaharoz pozitiv

o pe mediul Simmons

Simmons negativ

o pe mediul cu uree

uree negativ

identificare antigenic

prin reacii de aglutinare pe lam, cu seruri polivalente, apoi monovalente

pentru:

E. coli enteropatogen EPEC

E. coli enteroinvaziv EIEC

E. coli enterohemoragic EHEC, serotipul O157

se efectueaz antibiograma

GENUL KLEBSIELLA
K. pneumoniae
K. oxytoca
K. rhinoscleromatis
K. ozaenae

Produs patologic
-

sput, secreii nazale n infecii respiratorii

materii fecale, bil, vrsturi, alimente n infecii digestive

urin n infecii urinare

puroi

LCR n meningite

snge n septicemii
-

Examen direct

se efectueaz doar din produse patologice normal sterile

o coloraia Gram: cocobacili, Gram negativi, dispui n diplo, ncapsulai, imobili,
nesporulai
-2-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

o coloraia negativ

- Izolare
-

pe geloz, geloz snge, geloz lactozat

crete pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii, acestea fiind folosite pentru dg.

- Identificare
-

caractere morfotinctoriale (vezi examenul microscopic)

caractere de cultur
o colonii mucoase de tip M, lactozo pozitive

caractere biochimice
o pe mediul SIM

H2S negativ

mobilitate negativ

indol variabil

o pe mediul TSI

fermenteaz glucoza fr producere de gaz

H2S negativ

descompune lactoza i zaharoza

o pe mediul Simmons

Simmons pozitiv

o pe mediul cu uree

ureaz pozitiv

o pe geloza lactozat

descompune lactoza

identificare antigenic
o prin reacia de umflare a capsulei se determin prezena antigenului K

determinarea patogenitii
o nu se efectueaz de rutin
o K. pneumoniae inoculat la oareci intraperitoneal sau subcutan determin septicemie
mortal

antibiograma se efectueaz la toate tulpinile izolate

-3-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

GENUL PROTEUS
P. vulgaris
P. mirabilis
P. penneri
P. myxofaciens

Produs patologic
-

fac parte din microflora tubului digestiv, produc diferite infecii n condiiile scderii
rezistenei organismului.
o infecii urinare urin
o infecii nosocomiale (plgi postoperatorii i arsuri suprainfectate) secreie din plag
o infecii ORL (sinuzite, otite) puroi
o septicemie snge
o meningite LCR
o infecii digestive (mai rare) materii fecale

1. Examen direct
-

se practic doar din produse biologice n mod normal sterile

bacili Gram negativi, polimorfi, cu cili peritrichi, necapsulai, nesporulai

2. Izolare
-

pe geloz simpl, pe geloz snge

pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson

geloz lactozat

3. Identificare
-

caractere morfotinctoriale (vezi examenul direct)

caractere de cultur
o pe medii fr bil

fenomenul de crare: colonii cu caracter invadant, margini dantelate ce pot

acoperi toat suprafaa mediului.
-4-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

fenomenul Dienes: dac tulpinile provin de la aceeai specie i sunt

nsmnate pe aceeai plac, prin cretere se suprapun, dac tulpinile sunt
diferite rmnentre ele o zon de demarcaie

o pe medii cu bil

colonii de tip S, lactozo negative

ochi de pisic (produc H2S)

caractere biochimice
o geloz lactozat nu fermenteaz lactoza
o pe mediul SIM

H2S pozitiv

mobilitate pozitiv

indol variabil

P. mirabilis: indol negativ

P. vulgaris: indol pozitiv

o pe mediul TSI

fermenteaz glucoza

H2S pozitiv

nu descompune lactoza i zaharoza

o pe mediul Simmons

Simmons pozitiv

o pe mediul cu uree

ureaz pozitiv

identificare antigenic
o prin reacii de aglutinare cu seruri anti O, anti H

lizotipia
o este util n scop epidemiologic pentru stabilirea sursei unei infecii nozocomiale
o n practic se poate nlocui prin nsmnarea tulpinilor izolate pe o plac de geloz i
urmrirea apariiei fenomenului de crare sau a liniei Diene

determinarea patogenitii nu are importan practic

antibiograma
-5-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

este obligatorie pentru fiecare tulpin izolat, deoarece pot prezenta multirezisten, mai ales
cele izolate din infecii nozocomiale.

Diagnosticul de laborator al dizenteriei bacilare

Shigella dysenteriae
Shigella flexneri
Shigella boydi
Shigella sonnei

Produs patologic (dizenteria bacilar):

-

materii fecale
o emise spontan
o recoltate pe sond, de la purttori

vrsturi

alimente

de la purttori: materii fecale cu sonda Nelaton

1. Examen direct nu se practic

2. Izolarea
-

pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey, SS

3. Identificare
-

caractere morfotinctoriale
o bacili Gram negativi, neciliai, necapsulai, nesporulai

caractere de cultur
o colonii de tip S, mici, transparente, lactozonegative

caractere biochimice
o pe mediul SIM

H2S negativ

mobilitate negativ

indol variabil

o pe mediul TSI

fermenteaz glucoza fr producere de gaz

H2S negativ
-6-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

nu descompune lactoza i zaharoza

o pe mediul Simmons

Simmons negativ

o pe mediul cu uree

ureaz negativ

identificare antigenic
o reacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup

determinarea patogenitii
o testul keratoconjunctivitei la cobai testul Sereny

GENUL SALMONELLA
S. enterica, subspecia enterica
serogrupuri: S. typhi, S. paratyphi A, B, S. enteritidis

Produs patologic
-

n febra tifoid
o de la bolnavi:

n prima spt. snge

n a II-a spt. materii fecale, bil, suc duodenal

n a III-a spt. materii fecale, snge pentru serodiagnostic

n a IV-a spt. - snge pentru serodiagnostic

o de la purttor: materii fecale dup administrarea unui purgativ, bil

-

n gastroenterite materii fecale, vrsturi, alimente

n septicemii snge

1. Examen direct: nu se efectueaz

2. Izolare
-

pe medii de mbogire

pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii (MacConkey, Leifson, SS)

pe geloz snge, geloz lactozat

3. Identificare
-

caractere morfotinctoriale
o bacili Gram negativi, ciliai peritrichi, nesporulai, necapsulai
-7-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

caractere de cultur
o pe geloz snge colonii de tip S, mici, transparente
o pe MacConkey, Leifson colonii S, lactozo-negative
o pe SS - colonii S, lactozo-negative, n ochi de pisic

caractere biochimice
o pe mediul SIM

H2S pozitiv

mobilitate pozitiv

indol negativ

o pe mediul TSI

fermenteaz glucoza

H2S pozitiv

nu descompune lactoza i zaharoza

o pe mediul Simmons

Simmons pozitiv

Seruri aglutinante polivalente O

GrupI (A, B, D, E, L)
Grup II (C, F, G, H)
pozitiv

negativ

Seruri monovalente
AO, BO, DO, etc
stabilire serogrup

Ser anti Vi

Seruri monovalente H
stabilire serotip

pe mediul cu ureeureaz negativ

identificare antigenic

4. Diagnostic serologic
-

n febra tifoid
o detectarea i titrarea anticorpilor fa de ag O, ag H ale S. typhi i paratyphi A, B
(reacia Widal)
-8-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Diagnosticul de laborator al infeciilor cauzate de Yersinia

enterocolitica
Produs patologic
-

n gastroenterite - materii fecale

n apendicite, limfadenopatii mezenterice - coninut apendicular, ganglioni mezenterici

n artrite septice - lichid sinovial

snge

1. Examen direct - examen microscopic nu se practic

2. Izolarea
-

pe geloz snge

pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey

3. Identificare
-

caractere morfotinctoriale
o bacili Gram negativi, mici, colorai bipolar, necapsulai, nesporulai, ciliai

caractere de cultur
o pe mediul Leifson, geloza lactozata - colonii de tip S, mai mici ca a altor
enterobacterii, transparente, lactozonegative
o pe geloz snge colonii de tip S, mici, mate, alb-cenuii, nehemolitice

caractere biochimice
o pe mediul SIM

H2S negativ

mobilitate

negativ la 37 C

pozitiv la 30 C

indol negativ

o pe mediul TSI

fermenteaz glucoza fr producere de gaz

H2S negativ

nu descompune lactoza

descompune zaharoza

o pe mediul Simmons
-9-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Simmons negativ

o pe mediul cu uree

ureaz pozitiv

o pe geloz lactozat, Leifson, MacConkey

nu descompune lactoza

identificare antigenic
o reacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup O3 i O9.

determinarea patogenitii
o nu are importan practic

antibiograma se efectueaz

-10-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Germene
Escherichia
coli

Boala

Produs patologic

Examen direct

Izolare

materii fecale, bil

alimente, vrsturi

nu se efectueaz

i difereniale

infecii digestive

din materii fecale

pe medii selective

infecii urinare

urin

examen

pentru

infecii tegumentare,

puroi

microscopic

enterobacterii:

suprainfecii de plgi

MacConkey,

meningite

LCR

septicemii

snge

Leifson, Levine

Genul

infecii digestive

sput, secreii nazale

Klebsiella

infecii digestive

materii fecale, bil, vrsturi, alimente

infecii urinare

infecii tegumentare,

se efectueaz doar

geloz lactozat

pe geloz snge

bulion

pe geloz, geloz

din produse

snge, geloz

urin n infecii urinare

patologice normal

lactozat

puroi

sterile

suprainfecii de plgi

pe medii selective
i difereniale

meningite

LCR

pentru

n septicemii

snge

enterobacterii:
MacConkey,
Leifson

-11-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

infecii urinare (P.

urin

mirabilis, vulgaris)

Genul Proteus
-

infecii nosocomiale (plgi

secreie din plag

biologice n mod
normal sterile

suprainfectate)
infecii ORL (sinuzite,
otite)

Shigella

din produse

postoperatorii i arsuri

se practic doar

puroi

septicemie

snge

meningite

LCR

infecii digestive (mai rare)

materii fecale

dizenteria bacilar

materii fecale

dysenteriae

pe geloz snge
-

pe medii selective
i difereniale

bacili Gram

pentru

negativi,

enterobacterii:

polimorfi, cu cili

MacConkey,

peritrichi,

Leifson

necapsulai,
nesporulai

pe geloz simpl,

nu se practic

geloz lactozat

pe medii selective

o emise spontan

i difereniale

o recoltate pe sond, de la purttori

pentru

vrsturi, alimente

enterobacterii:

de la purttori: materii fecale cu sonda

Leifson,

Nelaton

MacConkey, SS

-12-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Genul

febra tifoid

de la bolnavi:

nu se efectueaz

o n prima spt. snge

Salmonella

mbogire

o n a II-a spt. materii fecale, bil, suc

duodenal

pe medii selective
i difereniale

o n a III-a spt. materii fecale, snge

pentru

pentru serodiagnostic

enterobacterii

o n a IV-a spt. - snge pentru

(MacConkey,

serodiagnostic
-

pe medii de

Leifson, SS)

de la purttor:

pe geloz snge

geloz lactozat

examen

pe geloz snge

microscopic nu se

pe medii selective

o materii fecale dup administrarea

unui purgativ, bil

Yersinia
enterocolitica

n gastroenterite

materii fecale, vrsturi, alimente

n septicemii

snge

gastroenterite

materii fecale

apendicite, limfadenopatii

coninut apendicular, ganglioni mezenterici

mezenterice

practic

i difereniale

artrite septice

lichid sinovial

pentru

meningite

LCR

enterobacterii:
Leifson,
MacConkey
-13-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Germene

Identificare
Caractere

Caractere de

morfotincto-

cultur

riale

Caractere biochimice

caractere de
patogenitate,

GL

coli

bacili gram

negativi, cu

mici, alb-cenuii,

capete

hemoliz (urin)

rotunjite,

H2 S

TSI
Mo

Simm

M. cu

lizotipie,

ons

uree

antibiogram, etc.

L,Z H2S

identificare
antigenic
-

reacii de

g. l. colonii S,

aglutinare pe

mici

lam, cu seruri

Leifson,

polivalente, apoi

necapsulai,

MacConkey -

monovalente

nesporulai

colonii S, mici

EPEC, EIEC,

Levine colonii

EHEC, serotipul

caracteristice,

O157

cu cili
peritrichi,
-

g. sg. colonii S,

SIM

lactozat)

(geloz

Escherichia

Reacii Ag-Ac,

(mov nchis), cu

se efectueaz

luciu metalic

antibiograma
-14-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Germene

Identificare
Caractere

Caractere de

morfotincto-

cultur

riale

Caractere biochimice

caractere de
patogenitate,

GL

Klebsiella

Col. Gram:

Colonii de tip M

cocobacili,

(mucoase)

Gram negativi,
n diplo,

SIM

lactozat)

H2 S

(geloz

Genul

Reacii Ag-Ac,

+
-

TSI
Mo

L,Z H2S

Simm

M. cu

lizotipie,

ons

uree

antibiogram, etc.

identificare
antigenic - prin r.
de umflare a capsulei
se determin prezena
antigenului K

ncapsulai,

determinarea

imobili,

patogenitii-nu se

nesporulai

efectueaz de rutin

Col. negativ

K. pneumoniae inoculat
la oareci intraperitoneal
sau subcutan determin
septicemie mortal

antibiograma se
efectueaz la toate
tulpinile izolate
-15-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Germene

Identificare
Caractere

Caractere de

morfotincto-

cultur

riale

Caractere biochimice

caractere de
patogenitate,

GL

Proteus

bacili Gram pe medii fr bil

negativi,
polimorfi,

fenomenul de
crare

cu

cili - fenomenul Dienes

peritrichi,
pe medii fr bil
necapsulai,
nesporulai

SIM

lactozat)

H2 S

(geloz

Genul

Reacii Ag-Ac,

+
-

TSI
Mo

L,Z H2S

Simm

M. cu

lizotipie,

ons

uree

antibiogram, etc.

identificare
antigenic-r. de
aglutinare cu seruri
anti O, anti H
lizotipia-n scop
epidemiologic

colonii de tip S,

determinarea

lactozo negative,

patogenitii nu

ochi de pisic

are importan

(produc H2S)

practic
antibiogramaobligatorie

-16-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Germene

Identificare
Caractere

Caractere de

morfotincto-

cultur

riale

Caractere biochimice

caractere de
patogenitate,

GL

dysenteriae

bacili Gram -

colonii de tip S,

negativi,

mici, transparente,

neciliai,

lactozonegative

necapsulai,

SIM

lactozat)

H2 S

(geloz

Shigella

Reacii Ag-Ac,

+
-

nesporulai

TSI
Mo

L,Z H2S

Simm

M. cu

lizotipie,

ons

uree

antibiogram, etc.

identificare
antigenic-r. de
aglutinare pe lam
cu seruri specifice
de grup
determinarea
patogenitii-testul
keratoconjunctivitei
la cobai testul
Sereny

-17-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Germene

Identificare
Caractere

Caractere de

morfotincto-

cultur

riale

Caractere biochimice

caractere de
patogenitate,

GL

Salmonella

bacili Gram

g. sg colonii de

SIM

lactozat)

H2 S

(geloz

Genul

Reacii Ag-Ac,

TSI
Mo

L,Z H2S

Simm

M. cu

lizotipie,

ons

uree

antibiogram, etc.

identificare
antigenic-r. de

negativi, ciliai

tip S, mici,

peritrichi,

transparente

aglutinare cu seruri

MacConkey,

mono si polivalente

Leifson colonii

Diagnostic

S, lactozo-

serologic-n febra

negative

tifoid-detectarea i

SS - colonii S,

titrarea anticorpilor

lactozo-negative,

fa de ag O, ag H

n ochi de pisic

ale S. typhi i

nesporulai,

necapsulai

paratyphi A, B
(reacia Widal)

-18-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure

LP8

Germene

Identificare
Caractere

Caractere de

morfotincto

cultur

-riale

Caractere biochimice

caractere de
patogenitate,

GL

Yersinia
enterocolitica

mediul Leifson,

SIM

lactozat)

H2 S

(geloz

bacili Gram

Reacii Ag-Ac,

TSI
Mo

L,Z H2S

Simm

M. cu

lizotipie,

ons

uree

antibiogram, etc.

identificare
antigenicreacii de

negativi, mici,

MacConkey- col.

colorai

de tip S, mai

bipolar,

mici ca a altor

necapsulai,

enterobacterii,

de grup O3 i O9.

nesporulai,

transparente,

determinarea

ciliai

lactozonegative

patogenitii-nu are

pe g. sg.

importan practic

colonii de tip S,

antibiograma se

mici, mate, alb-

efectueaz

cenuii,
nehemolitice

-19-

aglutinare pe lam
cu seruri specifice