GENUL STAPHYLOCOCCUS

DIAGNOSTIC DE LABORATOR
Bacteriologie si Imunologie , Curs universitar, Anda Baicus , Ed. Universitara „ Carol Davila”

Specia Diagnostic de laborator

Produs patologic: puroi, lichid pleural, spută, urină, etc.
Frotiu: colorat albastru de metilen, coci dispuși în ciorchine, PMN-uri, detritusuri celulare, floră de
asociație
Examenul macroscopic: puroiul are consistența groasă cu nuanță aurie și este fetid
Cultură:
- produs patologic provenit din leziuni închise (abcese, flegmoane), însamanțarea se face pe medii
de cultură simple: bulion, geloză înclinată;
- produs patologic provenit din leziuni deschise, se folosesc mediile de îmbogațire lichide sau
solide: mediul Chapman cu un conținut de 7,5% NaCl și manitol, geloza-sânge este utilizată
pentru a diferenția tulpinile hemolitice de cele nehemolitice
Identificare:
- caracterelor de cultură
- pe mediile de cultură lichide creșterea de tip S este cu tulburarea uniformă a mediului și depozit la
fundul eprubetei
- pe geloză, coloniile au ϕ=1-3mm, sunt bombate, opace, margini rotunde, suprafața netedă,
consistență moale, se detașează ușor de pe mediu, culoarea coloniilor este galbenă sau aurie pentru
tulpinile de S. aureus și pală pentru tulpinile de S. epidermidis și S. saprophyticus
- creșterea de tip M este caracteristică tulpinilor încapsulate, pe geloză sânge coloniile de S. aureus
sunt înconjurate de o zonă mica de hemoliză completă în jur
S. aureus - caracterelor biochimice
S. aureus fermentează manitolul din mediul Chapman, coloniile apar galbene.
- teste enzimatice
coagulaza+, (clumping factor- coagulaza legata, coagulaza libera) catalaza+, hialuronidaza+,
fibrinolizina+, leucocidina+, nuclează+
Identificarea coagulazei legate (o proteina prezenta in peretele bacterian care este un receptor pentru
fibrinogen) prin reactia de aglutinare – Staphy slidex test ( colonii de stafilococ puse in contact cu
eritrocite sensibilizate cu fibrinogen)
- caractere de patogenitate
Studierea caracterelor de patogenitate pentru S. aureus pe teste in vitro:
• pigmentogeneza, nu mai este considerat astăzi criteriu de patogenitate
• enterotoxine termostabile - teste in vivo: inoculare id. la iepure (cultură pură) este urmată de
septicemie mortală; inocularea subcutanată/intramusculară la iepure produce abcese
localizate
S. aureus meticilino rezistent (MRSA)*
Pentru identificarea speciilor au fost introduse diverse tehnici moleculare secvențiere, ribotyping
(analiza genelor care codifică ARNr), analiza polimorfismului fragmentelor de restricție enzimatică
(RFLP) aparute in urma tratării fragmentului de ADN cu endonucleaze de restricție, electroforeza în
camp pulsatil. În urma analizelor efectuate, s-a ajuns la concluzia că detecția genei SCCmec și
electroforeza în camp pulsatil au fost cele mai discriminatorii.
Tratament
Tratamentul depinde de tipul infecției, de sensibilitatea bacteriei la antibiotice și durează 7 zile în
infecția tegumentară și pană la 4 săptămani în endocardita bacteriană. Flucloxacilina administrată
oral sau intravenos este folosită pentru tratament în cazul izolatelor de S. aureus meticilino sensibile.
Aminoglicozidele sunt utilizate în tratamentul endocarditelor. Glicopeptidele (Vancomicina,
Teicoplanin) sunt utilizate în infecții în care exista suspiciune de tulpină meticilino rezistentă. Infecția
produsă de stafilococi cu sensibilitate intermediară (VISA) sau rezistență (VRSA) la vancomicină
poate fi tratată cu cloramfenicol, rifampicină sau trimetoprim sulfametoxazol.
Lizotipia, testarea sensibilității tulpinilor de S. aureus la bacteriofagi dă informații asupra originii
tulpinii izolate în cazul unor situații epidemice speciale. Tipizarea tulpinilor de S. aureus se face
utilizînd metode ca: PFGE, toxinotipie, detectarea SCCmec și spA. Pentru tulpinile rezistente la
meticilina detectarea genei mec A.
S.epidermidis coagulazo negativ, sensibil la novobiocin, nu produce exotoxine, nu fermentează manitolul
S.saprophytic coagulazo negativ, nehemolitic, rezistent la novobiocin, nu produce exotoxine.
us
Fig.9.1.1. Staphylococcus aureus- coci Gram pozitivi dispusi in gramezi a) Frotiu din
cultură pură colorat Gram, b) frotiu din secretie vaginală c), d) frotiu din hemocultură, e)
colonii de tip S, culoare aurie pe geloză simplă, f) g) colonii hemolitice si nehemolitice pe
geloza sange, h) , i)hemoliză completă pe geloză sânge, j) colonii de tip S nehemolitice pe
geloză sânge,Staphylococccus lugdunensis
a) b)

c) d)

e) f)

g) h)
i) j)

Fig.9.1.2.. Staphylococcus aureus k) colonii de S. aureus pe mediul Chapman, l) colonii de

S. epidermidis pe mediul Chapman, m) colonii MRSA pe mediul cromogen pentru izolare
MRSA, n) staphy slidex test; 1: test pozitiv, 2: test negativ, o) testul catalazei pozitiv, p) D test
(E: eritomicina, DA2: clindamicina, FOX: cefoxitin)
k) l)

m) n)

o) p)