Disciplina de Microbiologie UMF Tg.

Mure LP8

Diagnosticul de laborator al infeciilor cauzate de enterobacterii Escherichia coli

Produs patologic
materii fecale, bil alimente, vrsturi urin puroi, LCR, snge

1. Examen direct
din materii fecale nu se efectueaz examen microscopic

2. Izolare
pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson, Levine geloz lactozat pe geloz snge bulion caractere morfotinctoriale o bacili gram negativi, cu capete rotunjite, cu cili peritrichi o necapsulai, nesporulai caractere de cultur o n bulion: l tulbur uniform, formeaz depozit i un inel aderent la suprafa o pe medii solide: colonii de tip S, mici geloz snge colonii S, mici, alb-cenuii, hemoliz (urin) geloz lactozat colonii S, mici, lactozo-pozitive (galbene) Leifson, MacConkey - colonii S, mici, lactozo-pozitive (roii) Levine colonii caracteristice, lactozo-pozitive (mov nchis), cu luciu metalic

3. Identificare

caractere biochimice o pe mediul SIM H2S negativ mobilitate pozitiv indol pozitiv -1-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

o pe mediul TSI glucoz pozitiv, cu producere de gaz H2S negativ lactoz, zaharoz pozitiv Simmons negativ uree negativ

o pe mediul Simmons o pe mediul cu uree identificare antigenic prin reacii de aglutinare pe lam, cu seruri polivalente, apoi monovalente pentru: E. coli enteropatogen EPEC E. coli enteroinvaziv EIEC E. coli enterohemoragic EHEC, serotipul O157

se efectueaz antibiograma

GENUL KLEBSIELLA
K. pneumoniae K. oxytoca K. rhinoscleromatis K. ozaenae

Produs patologic
sput, secreii nazale n infecii respiratorii materii fecale, bil, vrsturi, alimente n infecii digestive urin n infecii urinare puroi LCR n meningite snge n septicemii -

Examen direct
o coloraia Gram: cocobacili, Gram negativi, dispui n diplo, ncapsulai, imobili, nesporulai -2-

se efectueaz doar din produse patologice normal sterile

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

o coloraia negativ

- Izolare
pe geloz, geloz snge, geloz lactozat crete pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii, acestea fiind folosite pentru dg.

- Identificare
caractere morfotinctoriale (vezi examenul microscopic) caractere de cultur o colonii mucoase de tip M, lactozo pozitive caractere biochimice o pe mediul SIM H2S negativ mobilitate negativ indol variabil fermenteaz glucoza fr producere de gaz H2S negativ descompune lactoza i zaharoza Simmons pozitiv ureaz pozitiv descompune lactoza

o pe mediul TSI

o pe mediul Simmons o pe mediul cu uree o pe geloza lactozat identificare antigenic o prin reacia de umflare a capsulei se determin prezena antigenului K determinarea patogenitii o nu se efectueaz de rutin o K. pneumoniae inoculat la oareci intraperitoneal sau subcutan determin septicemie mortal antibiograma se efectueaz la toate tulpinile izolate

-3-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

GENUL PROTEUS
P. vulgaris P. mirabilis P. penneri P. myxofaciens

Produs patologic
fac parte din microflora tubului digestiv, produc diferite infecii n condiiile scderii rezistenei organismului. o infecii urinare urin o infecii nosocomiale (plgi postoperatorii i arsuri suprainfectate) secreie din plag o infecii ORL (sinuzite, otite) puroi o septicemie snge o meningite LCR o infecii digestive (mai rare) materii fecale

1. Examen direct
se practic doar din produse biologice n mod normal sterile bacili Gram negativi, polimorfi, cu cili peritrichi, necapsulai, nesporulai

2. Izolare
pe geloz simpl, pe geloz snge pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson geloz lactozat

3. Identificare
caractere morfotinctoriale (vezi examenul direct) caractere de cultur o pe medii fr bil fenomenul de crare: colonii cu caracter invadant, margini dantelate ce pot acoperi toat suprafaa mediului. -4-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

fenomenul Dienes: dac tulpinile provin de la aceeai specie i sunt nsmnate pe aceeai plac, prin cretere se suprapun, dac tulpinile sunt diferite rmnentre ele o zon de demarcaie

o pe medii cu bil colonii de tip S, lactozo negative ochi de pisic (produc H2S)

caractere biochimice o geloz lactozat nu fermenteaz lactoza o pe mediul SIM H2S pozitiv mobilitate pozitiv indol variabil o pe mediul TSI fermenteaz glucoza H2S pozitiv nu descompune lactoza i zaharoza Simmons pozitiv ureaz pozitiv P. mirabilis: indol negativ P. vulgaris: indol pozitiv

o pe mediul Simmons o pe mediul cu uree identificare antigenic o prin reacii de aglutinare cu seruri anti O, anti H lizotipia o este util n scop epidemiologic pentru stabilirea sursei unei infecii nozocomiale o n practic se poate nlocui prin nsmnarea tulpinilor izolate pe o plac de geloz i urmrirea apariiei fenomenului de crare sau a liniei Diene determinarea patogenitii nu are importan practic antibiograma -5-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

este obligatorie pentru fiecare tulpin izolat, deoarece pot prezenta multirezisten, mai ales cele izolate din infecii nozocomiale.

Diagnosticul de laborator al dizenteriei bacilare

Shigella dysenteriae Shigella flexneri Shigella boydi Shigella sonnei

Produs patologic (dizenteria bacilar):

materii fecale o emise spontan o recoltate pe sond, de la purttori vrsturi alimente de la purttori: materii fecale cu sonda Nelaton

1. Examen direct nu se practic

2. Izolarea
pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey, SS caractere morfotinctoriale o bacili Gram negativi, neciliai, necapsulai, nesporulai caractere de cultur o colonii de tip S, mici, transparente, lactozonegative caractere biochimice o pe mediul SIM H2S negativ mobilitate negativ indol variabil fermenteaz glucoza fr producere de gaz H2S negativ -6-

3. Identificare

o pe mediul TSI

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

nu descompune lactoza i zaharoza Simmons negativ ureaz negativ

o pe mediul Simmons o pe mediul cu uree identificare antigenic o reacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup determinarea patogenitii o testul keratoconjunctivitei la cobai testul Sereny

GENUL SALMONELLA
S. enterica, subspecia enterica serogrupuri: S. typhi, S. paratyphi A, B, S. enteritidis

Produs patologic
n febra tifoid o de la bolnavi: n prima spt. snge n a II-a spt. materii fecale, bil, suc duodenal n a III-a spt. materii fecale, snge pentru serodiagnostic n a IV-a spt. - snge pentru serodiagnostic

o de la purttor: materii fecale dup administrarea unui purgativ, bil n gastroenterite materii fecale, vrsturi, alimente n septicemii snge

1. Examen direct: nu se efectueaz

2. Izolare
pe medii de mbogire pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii (MacConkey, Leifson, SS) pe geloz snge, geloz lactozat caractere morfotinctoriale o bacili Gram negativi, ciliai peritrichi, nesporulai, necapsulai -7-

3. Identificare

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

caractere de cultur o pe geloz snge colonii de tip S, mici, transparente o pe MacConkey, Leifson colonii S, lactozo-negative o pe SS - colonii S, lactozo-negative, n ochi de pisic

caractere biochimice o pe mediul SIM H2S pozitiv mobilitate pozitiv indol negativ fermenteaz glucoza H2S pozitiv nu descompune lactoza i zaharoza Simmons pozitiv

o pe mediul TSI

o pe mediul Simmons

Seruri aglutinante polivalente O GrupI (A, B, D, E, L) Grup II (C, F, G, H) pozitiv Seruri monovalente AO, BO, DO, etc stabilire serogrup Seruri monovalente H stabilire serotip negativ Ser anti Vi

pe mediul cu ureeureaz negativ

identificare antigenic n febra tifoid o detectarea i titrarea anticorpilor fa de ag O, ag H ale S. typhi i paratyphi A, B (reacia Widal) -8-

4. Diagnostic serologic

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Diagnosticul de laborator al infeciilor cauzate de Yersinia enterocolitica

Produs patologic
n gastroenterite - materii fecale n apendicite, limfadenopatii mezenterice - coninut apendicular, ganglioni mezenterici n artrite septice - lichid sinovial snge

1. Examen direct - examen microscopic nu se practic

2. Izolarea
pe geloz snge pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey caractere morfotinctoriale o bacili Gram negativi, mici, colorai bipolar, necapsulai, nesporulai, ciliai caractere de cultur o pe mediul Leifson, geloza lactozata - colonii de tip S, mai mici ca a altor enterobacterii, transparente, lactozonegative o pe geloz snge colonii de tip S, mici, mate, alb-cenuii, nehemolitice caractere biochimice o pe mediul SIM H2S negativ mobilitate o pe mediul TSI fermenteaz glucoza fr producere de gaz H2S negativ nu descompune lactoza descompune zaharoza -9negativ la 37 C pozitiv la 30 C

3. Identificare

indol negativ

o pe mediul Simmons

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Simmons negativ ureaz pozitiv nu descompune lactoza

o pe mediul cu uree o pe geloz lactozat, Leifson, MacConkey identificare antigenic o reacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup O3 i O9. determinarea patogenitii o nu are importan practic antibiograma se efectueaz

-10-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Germene Escherichia coli

Boala
infecii digestive infecii urinare infecii tegumentare, suprainfecii de plgi meningite septicemii

Produs patologic
materii fecale, bil alimente, vrsturi urin puroi LCR snge

Examen direct
din materii fecale nu se efectueaz examen microscopic

Izolare
pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson, Levine geloz lactozat pe geloz snge bulion pe geloz, geloz snge, geloz lactozat pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson

Genul Klebsiella

infecii digestive infecii digestive infecii urinare infecii tegumentare, suprainfecii de plgi meningite n septicemii

sput, secreii nazale materii fecale, bil, vrsturi, alimente urin n infecii urinare puroi LCR snge

se efectueaz doar din produse patologice normal sterile

-11-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

infecii urinare (P. mirabilis, vulgaris)

urin secreie din plag

se practic doar din produse biologice n mod normal sterile

pe geloz simpl, pe geloz snge

Genul Proteus
-

infecii nosocomiale (plgi postoperatorii i arsuri suprainfectate)

pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: MacConkey, Leifson

puroi snge LCR materii fecale materii fecale o emise spontan o recoltate pe sond, de la purttori vrsturi, alimente de la purttori: materii fecale cu sonda Nelaton -

bacili Gram negativi, polimorfi, cu cili peritrichi, necapsulai, nesporulai -

infecii ORL (sinuzite, otite)

septicemie meningite infecii digestive (mai rare) dizenteria bacilar

geloz lactozat

Shigella dysenteriae

nu se practic

pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey, SS

-12-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Genul Salmonella

febra tifoid

de la bolnavi: o n prima spt. snge o n a II-a spt. materii fecale, bil, suc duodenal o n a III-a spt. materii fecale, snge pentru serodiagnostic o n a IV-a spt. - snge pentru serodiagnostic

nu se efectueaz

pe medii de mbogire pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii (MacConkey, Leifson, SS)

de la purttor: o materii fecale dup administrarea unui purgativ, bil

pe geloz snge geloz lactozat

n gastroenterite n septicemii gastroenterite apendicite, limfadenopatii mezenterice artrite septice meningite

materii fecale, vrsturi, alimente snge materii fecale coninut apendicular, ganglioni mezenterici lichid sinovial LCR examen microscopic nu se practic pe geloz snge pe medii selective i difereniale pentru enterobacterii: Leifson, MacConkey -13-

Yersinia enterocolitica

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Germene
Caractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL
(geloz lactozat)

Identificare Caractere biochimice

Reacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,

SIM H2 S I Mo G

TSI L,Z H2S

Simm ons

M. cu uree

lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic reacii de aglutinare pe lam, cu seruri polivalente, apoi monovalente EPEC, EIEC, EHEC, serotipul O157 se efectueaz antibiograma

Escherichia coli

bacili gram negativi, cu capete rotunjite, cu cili peritrichi,

g. sg. colonii S, mici, alb-cenuii, hemoliz (urin)

g. l. colonii S, mici Leifson, MacConkey colonii S, mici

necapsulai, nesporulai -

Levine colonii caracteristice, (mov nchis), cu luciu metalic -14-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Germene
Caractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL
(geloz lactozat)

Identificare Caractere biochimice

Reacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,

SIM H2 S I Mo G

TSI L,Z H2S

Simm ons

M. cu uree

lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic - prin r.

de umflare a capsulei se determin prezena antigenului K

Genul Klebsiella

Col. Gram: cocobacili, Gram negativi, n diplo, ncapsulai, imobili, nesporulai Col. negativ

Colonii de tip M (mucoase)

+ -

determinarea patogenitii-nu se
efectueaz de rutin
K. pneumoniae inoculat la oareci intraperitoneal sau subcutan determin septicemie mortal

antibiograma se efectueaz la toate tulpinile izolate -15-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Germene
Caractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL
(geloz lactozat)

Identificare Caractere biochimice

Reacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,

SIM H2 S I Mo G

TSI L,Z H2S

Simm ons

M. cu uree

lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic-r. de aglutinare cu seruri anti O, anti H lizotipia-n scop epidemiologic determinarea patogenitii nu are importan practic antibiogramaobligatorie

Genul Proteus

bacili Gram pe medii fr bil negativi, polimorfi, cu fenomenul de crare

+ -

cili - fenomenul Dienes peritrichi, pe medii fr bil necapsulai, nesporulai colonii de tip S, lactozo negative, ochi de pisic (produc H2S)

-16-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Germene
Caractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL
(geloz lactozat)

Identificare Caractere biochimice

Reacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,

SIM H2 S I Mo G

TSI L,Z H2S

Simm ons

M. cu uree

lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic-r. de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup determinarea patogenitii-testul keratoconjunctivitei la cobai testul Sereny

Shigella dysenteriae

bacili Gram negativi, neciliai, necapsulai, nesporulai

colonii de tip S, mici, transparente, lactozonegative

+ -

-17-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Germene
Caractere morfotinctoriale Caractere de cultur GL
(geloz lactozat)

Identificare Caractere biochimice

Reacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,

SIM H2 S I Mo G

TSI L,Z H2S

Simm ons

M. cu uree

lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenic-r. de aglutinare cu seruri mono si polivalente Diagnostic serologic-n febra tifoid-detectarea i titrarea anticorpilor fa de ag O, ag H ale S. typhi i paratyphi A, B (reacia Widal)

Genul Salmonella

bacili Gram negativi, ciliai peritrichi, nesporulai, necapsulai

g. sg colonii de tip S, mici, transparente

MacConkey, Leifson colonii S, lactozonegative

SS - colonii S, lactozo-negative, n ochi de pisic

-18-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP8

Germene
Caractere morfotincto -riale Caractere de cultur GL
(geloz lactozat)

Identificare Caractere biochimice

Reacii Ag-Ac, caractere de patogenitate,

SIM H2 S I Mo G

TSI L,Z H2S

Simm ons

M. cu uree

lizotipie, antibiogram, etc. identificare antigenicreacii de aglutinare pe lam cu seruri specifice de grup O3 i O9. determinarea patogenitii-nu are importan practic antibiograma se efectueaz

bacili Gram

mediul Leifson, MacConkey- col. de tip S, mai mici ca a altor enterobacterii, transparente, lactozonegative

Yersinia enterocolitica

negativi, mici, colorai bipolar, necapsulai, nesporulai, ciliai -

+ -

pe g. sg. colonii de tip S, mici, mate, albcenuii, nehemolitice

-19-