Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
MICROBIOLOGE GENERALA
1. Obiectul de studiul al microbiologiei
2. Caractere generale i poziia microorganismelor n lumea vie
2.1. Prionii
2.2. Virusurile
2.3. Bacteriile
2.4. Cyanobacteriile (algele albastre-verzi)
2.5. Protozoarele
2.6. Ciupercile
MICROBIOLOGIA SOLULUI
1. Solul ca mediu de via pentru microorganisme
2. Circuitul azotului
3. Circuitul carbonului
4. Influena factorilor ecologici asupra microorganismelor
5. Interrelaiile dintre microorganismele din sol
6. Interrelaiile dintre plantele superioare
i microorganismele din sol
MICROBIOLOGIA FERMENTAIILOR
1. Fermentaia alcoolic
2. Utilizarea microorganismelor n vinificaie
Bibliografie
2
6
7
8
12
23
23
24
26
27
33
41
53
56
58
61
62
62
68
MICROBIOLOGIEGENERAL
GENERAL
MICROBIOLOGIE
Procariote
Bacterii
Cyanobacterii
Nucleul
fr membran
Compoziia chimic a membranei fr steroli (cu excepia
citoplasmatice
micoplasmelor)
Sistemul respirator
n
membrana
citoplasmatic
Ribozomii
70 S
Curenii citoplasmatici
abseni
6
Eucariote
Alge, Fungi, Protozoare,
Plante, Animale
cu membran
conine steroli
mitocondrii
80 S
prezeni
Reticulul endoplasmatic
Tipul de diviziune
absent
direct (sciziparitatea)
prezent
Mitoz
Capsida viral (gr. "Kapsa" = cutie), acoper genomul fiind alctuit din subuniti
proteice denumite capsomere. Capsomerele sunt constituite din molecule proteice aezate n
mod regulat, formnd n ansamblu structura specific a virusului. Capsida protejeaz
materialul genetic.
Capsida i genomul viral formeaz nucleocapsida.
La unele virusuri nucleocapsida este acoperit de o alt structur numit nveliul
extern sau peplosul (gr. peplos = manta).
Virusurile plantelor
Virusurile plantelor au o mare importan ca ageni patogeni datorit marii lor
rspndiri i faptului c acelai virus poate infecta plante care aparin la diferite familii
botanice.
Bolile produse de virusuri la plante sunt denumite viroze. Pn n prezent sunt
cunoscute cteva sute de boli virale, produse de virusuri care aparin la 25 genuri distincte.
Din punct de vedere morfologic virusurile plantelor aparin la dou grupuri: grupul
virusurilor izometrice (izodiametrice) sau sferice i grupul virusurilor alungite.
n general virusurile plantelor au o structur chimic mai simpl dect virusurile
animale i bacteriofagii.
Mecanismul de transmitere:
Virusurile se pot transmite de la planta bolnav la planta sntoas pe mai multe ci:
A - transmitere mecanic: prin contact ntre frunze; anastomoze radiculare; unelte de
lucru; altoire.
B - transmiterea prin vectori se realizeaz prin intermediul insectelor (cca.400 specii):
afide i cicade. Relaia dintre virus - insect vectoare este variabil i corespunde la 3 situaii:
Virusuri nepersistente, pot fi transmise pn la circa 4 ore de la achiziie.
Virusuri semipersistente au capacitatea de infectare variabil de la 10-100 ore de la
achiziie.
Virusuri persistente cu o capacitate de infectare de peste 100 ore (uneori chiar toat
durata de via a vectorului).
n funcie de rspndirea i comportarea virusurilor n corpul vectorului, acestea se
mpart n 3 categorii:
Virusuri localizate pe stilet (virusuri nepersistente).
Virusuri circulante (virusuri persistente) pot fi transmise timp ndelungat ajungnd
n hemolimfa insectei.
Virusuri propagative (virusuri persistente) se multiplic n corpul vectorului fiind
transmise toat viaa insectei.
C - transmiterea prin intermediul ciupercilor fitopatogene din sol, (ex.Polymyxa betae
transmite virusul rizomaniei la sfecla pentru zahr).
D - transmiterea prin intermediul nematozilor.
E - transmiterea prin semine (cca. 1/3 din virusuri).
Circulaia virusurilor n interiorul plantelor se realizeaz prin parenchim
(plasmodesme), prin floem i prin xilem.
Bacteriofagii
Bacteriofagii sunt virusuri adaptate la viaa parazitar n celulele bacteriene i care
prin multiplicare produc liza acestora.
n anul 1915 Twort, descoper fenomenul de liz transmisibil, dar nu poate explica cu
exactitate cauza acesteia.
D'Herelle (1917) demonstreaz natura particular a fagului i l consider, ca virus,
determinndu-l bacteriofag (mnctor de bacterii).
9
Structura este aceea a unui cilindru proteic gol deschis la capete (capsid) n interior
aflndu-se genomul fagic format din ADN m.c., o molecul circular.
Fagii filamentoi infecteaz numai bacteriile cu caracter mascul, ca i fagii cu ARN,
adsorbia fcndu-se pe receptori speciali situai la extremitatea liber a pililor de sex.
Fagii maturi sunt eliminai prin intermediul unor pori care se formeaz n membrana
citoplasmatic, bacteria nefiind lizat, aceasta continu s se divid un timp, ulterior
coninutul celular trece la exterior prin porii deschii de virioni.
Cianofagii
Au form asemntoare cu bacteriofagii T-impar. Genomul este reprezentat de ADN
d.c. de 13,2 m.
Micovirusurile
Sunt virusuri care atac fungii, fiind cunoscute i sub denumirea de micofagi.
Structura micovirusurilor.
Cel mai bine studiat este virusul care infecteaz specia Penicillium chrysogenum, care
se prezint sub forma unor mici particule poliedrice cu de 33-41 nm. Genomul este
reprezentat de o molecul de ARN d.c.
La fungi virusurile sunt n general latente, celulele se dezvolt mai lent, dar nu lizeaz
constant. Micovirusurile au fost evideniate i n sporii fungilor.
Transmiterea micovirusurilor n general se face n urma plasmogamiei (heterocarioza).
Rolul bacteriofagilor n sol
Coloniile de bacterii cultivate pe medii artificiale n zonele unde sunt atacate de
bacteriofagi apar ca nite zone clare "plaje" de liz, iar n suspensii bacteriene atacul fagilor
produce limpezirea mediului datorit lizei bacteriilor parazitate care dispar.
Din astfel de suspensii de bacterii lizate se pot obine prin ultra filtrare suspensii de
bacteriofagi. O proprietate deosebit a unor tulpini de fagi, este capacitatea de a tri n unele
celule bacteriene fr a provoca moartea acestora, dar elibernd n afar noi particule virale.
Astfel de fagi sunt denumii "bacteriofagi temperai", iar celulele bacteriene ce-l gzduiesc se
numesc "celule lizogene".
Importana bacteriofagilor din sol const n faptul c influeneaz ecologia bacteriilor
gazd, distrugnd speciile de bacterii "lizosensibile", modificnd uneori echilibrul microbian.
Rspndirea virusurilor din sol este influenat de capacitatea humusului i argilelor de
a absorbi i imobiliza particulele de virus. Se tie n acest sens c solurile argiloase i bogate
n humus adsorb mai mult particulele de virus de ct cele nisipoase. De aici rezult i
posibilitatea rspndirii difereniate a unor boli virotice ale plantelor i ai bacteriofagilor n
natur.
Importana agricol a bacteriofagilor este puin cunoscut nc. Existena
bacteriofagilor a fost demonstrat nc din anul 1927 de ctre A. Grigne, fiind dovedit n
solele cultivate cu plante leguminoase. Densitatea lor maxim este n zona rizosferic i n
nodozitile mature sau la nceputul mbtrnirii.
Rspndirea bacteriofagilor nu este influenat prea mult de condiiile din sol. Astfel
au fost identificai n soluri cu pH ntre 5,2-9,3, ct i n soluri care au suferit ngheul iernii.
2.3. BACTERIILE
Sunt organisme unicelulare cu o structur complex care au un metobolism propriu
datorit unui aparat enzimatic complex ce le asigur desfurarea proceselor vitale. n linii
generale bacteriile au o serie de caractere generale ce pot fi sistematizate astfel:
12
Nucleul celulei bacteriene este de tip procariot, adic lipsit de membran, iar
afinitile tinctoriale nu sunt deosebite fa de citoplasm.
Bacteriile au un polimorfism accentuat, putnd mbrca mai multe aspecte
morfologice ca forme sferice, cilindrice, spiralate sau helicoidale, filamentoase i ptrate.
Micarea la speciile mobile este asigurat de organite speciale, numite cili sau
flageli.
Bacteriile sunt lipsite de clorofil, dar unele grupe au pigmeni sintetizani i ca
atare pot folosi energia luminoas.
Altele i procur energia necesar sintezelor celulare i altor manifestri vitale,
dezintegrnd diverse substane chimice prin intermediul proceselor fermentative, fiind din
acest punct de vedere, organisme chimiosintetizante (Chemotrofe).
Se nmulesc prin aciziparitate, dar se cunosc la unele grupe i forme de conjugare
de tip parasexuat, cu formare de celule sexuate de sens diferit; forma de sciziparitate rmne
ns forma esenial de reproducere.
Bacteriile pot forma spori, ce constituie un mijloc de conservare a speciei, la unele
grupe.
Morfologia bacteriilor
Din punct de vedere al formei exterioare se disting cinci tipuri de baz, dup cum
urmeaz:
- bacterii sferice denumite coci, cu genul principal Coccus;
- bacterii cilindrice sub form de bastona drept sau uor curbat din care face parte
genul Bacillus;
- bacterii spiralate sau elicoidale, n care se cuprind trei categorii de germeni i anume:
vibrionii, spirilii i spirocheta;
- bacterii filamentoase, cu celule alungite n care se cuprind actinomicetele;
- bacterii ptrate, sunt foarte rare, ntlnite n apele saline.
Dup forma celulelor i modul de grupare n urma procesului de diviziune, bacteriile
se mpart n urmtoarele tipuri i subtipuri morfologice:
Bacteriile sferice sau cocii, au form sferic, ovoidal, sau elipsoidal, cu cele dou
diametre aproximativ egale. n funcie de poziia celulelor fiice dup diviziune, cocii prezint
urmtoarele moduri de grupare:
Cocul simplu, izolat, la care celulele rmn independente dup diviziune (ex.
Micrococcus ureae).
Diplococul, la care diviziunea se face dup planuri succesive paralele, celulele
rezultate rmnnd grupate cte dou (ex. Diplococcus pneumoniae).
Streptococul, la care diviziunea se face dup planuri succesive paralele, iar celulele
rezultate formeaz lanuri de lungimi variabile (ex. Streptococcus lactis).
Tetracocul, la care planurile de diviziune sunt perpendiculare unele fa de altele, iar
celulele rezultate sunt dispuse cte 4 la un loc (ex. genul Gafkia).
Sarcina, la care planurile de diviziune sunt orientate dup cele trei direcii ale spaiului
i reciproc perpendiculare unul pe altul, rezultnd o grupare de celule sub form de cub (ex.
Sporosarcina ureae).
Stafilococul, la care planurile succesive de diviziune sunt dispuse n mai multe
direcii, iar celulele rezultate se grupeaz ca un ciorchine (ex. Staphyllococcus aureus.
Bacteriile cilindrice, cunoscute sub denumirea de bacili au form de bastonae, cu
raportul ntre cele dou axe foarte diferit, de la forme cu aspect filamentoase, pn la unele cu
aspect aproape sferic. Unele dintre bacteriile cilindrice au proprietatea de a forma spori.
Bacteriile spiralate, sunt elicoidale cuprind trei subtipuri morfologice:
Vibrionul, n form curbat, cu un singur tur de spir.
Spirilul, n form de spiral cu mai multe ture de spir, rigide ca un baston.
13
Spirocheta, sub form de spiral cu mai multe ture de spir dar flexibile, care se poate
strnge i relaxa.
Bacteriile filamentoase, au ca prototip actinomicetele, microorganisme cu asemnri
morfologice cu fungii, cu particularitatea de a forma hife, cu tendin de ramificare, de unde i
aspectul lor de miceliu.
n unele cazuri, spre exemplu la Sphaerotilus nutans aspectul filamentos este
determinat de aezarea celulelor individuale n lanuri de celule reunite printr-o teac delicat,
cu perete neted.
Bacteriile ptrate, evideniate n apa hipersalin din peninsula Sinai, au forma unor
ptrate cu latura de 1,5-11 m i o grosime de 0,1 m. Formeaz placarde de 8-16 celule
ptrate rezultate n urma diviziunii.
permeazele care asigur transportul activ n interiorul celulei a unor substane organice polare
din mediu.
Membrana citoplasmatic are rol n creterea i diviziunea celular; la nivelul su ia
natere semnalul care declaneaz iniierea replicrii cromozomului bacterian.
n sfrit, membrana citoplasmatic este suportul enzimelor care particip la sinteza
ATP (la eucariote aceste enzime se afl n mitocondrii).
Mezozomii sunt formaiuni care deriv din membrana citoplasmatic sub forma unor
invaginri, legate de ADN celular. Aceste organite celulare joac un rol important n
diviziunea nucleului i n formarea septului care separ cele dou celule fiice.
La bacteriile purpurii mezozomii conin pigmeni clorofilieni.
La bacteriile fixatoare de N2, nitrogenaza care este inhibat de O2, este protejat de
mezozomi.
La bacteriile nitrificatoare numeroasele invaginri ale membranei citoplasmatice
mresc suprafaa de schimb enzimatic.
Citoplasma, este un sistem coloidal constituit din sruri minerale, compui solubili de
natur lipoproteic, nucleoproteine, lipide i ap. Are un pH cuprins ntre 7-7,2.
Citoplasma poate fi caracterizat ca un complex de stri fizice ntr-o continu
transformare, n funcie de starea fiziologic i vrsta celulei.
Ribozomii sunt formaiuni citoplasmatice, sferice. O celul bacterian conine n
medie 18.000 ribozomi de tip 70 S, cu un diametru de 10-30 nm. Fiecare ribozom se disociaz
n dou subuniti, 30 S i 50 S. Fiecare subunitate 50 S este legat de o subunitate 30 S prin
intermediul legturilor ARN - protein i protein-protein.
Ribozomii 70 S joac un rol precis n cursul traducerii lanurilor de ARN n proteine.
Materialul nuclear ("nucleul") este constituit dintr-un cromozom format de o bucl de
ADN aflat n suspensie, n citoplasm. Lungimea acestuia este mare, ajungnd la Escherichia
coli la 1 mm, ceea ce implic o rsucire foarte accentuat.
Plasmidele sunt considerate material genetic extracromozomial, fiind independente de
nucleu.
Plasmidele nu sunt indispensabile pentru viaa celular dar pot aduce un avantaj
selectiv. Ele poart informaia pentru degradarea unor substraturi i pentru rezistena la
antibiotice.
Replicarea plasmidelor se produce n dou momente diferite: atunci cnd celula se
divide i atunci cnd se produce procesul de conjugare.
Bacteriile pot conine mai multe plasmide. Escherichia coli, de exemplu, posed pe
cromozom 1 sau 2 plasmide conjugate i 10-15 plasmide neconjugate.
Vacuolele sunt formaiuni sferice care apar n citoplasm n faza de cretere activ a
celulelor bacteriene. n interiorul lor se gsete ap sau gaz.
Cele cu ap au rol n meninerea presiunii osmotice n raport cu mediul extern, iar cele
cu gaz au rol de flotaie.
Incluziunile sunt formaiuni inerte care apar n citoplasm la sfritul periodei
exponeniale de cretere a celulei. Ele pot fi formate din glicogen, amidon, carbonat de calciu
i fosfat anorganic.
Sporul bacterian este o formaiune care deriv din celula vegetativ a bacteriilor, n
anumite condiii de via. Sporul este o form de conservare a speciei la condiiile
nefavorabile de mediu i concentreaz ntr-un volum redus toate componentele eseniale ale
celulei din care provine.
Form sporului poate fi sferic sau oval.
Dispunere sporului n celula vegetativ poate fi central, subterminal, terminal sau
lateral.
Dup modul de formare, structur i rezisten la factorii de mediu, sporul bacterian
poate fi de mai multe tipuri:
16
Numr de
diviziuni
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
22
2.4. CYANOBACTERIILE
(ALGELE ALBASTRE-VERZI)
Sunt organisme procariote care folosesc apa ca donator de electroni i n prezena
luminii produc oxigen. Mecanismul lor fotosintetic este identic cu cel al algelor eucariote.
Celulele prezint un perete rigid, multistratificat, asemntor cu cel de la bacteriile
Gram-negative. Peretele celular poate fi acoperit la exterior cu o teac gelatinoas sau
fibroas. Cele mai multe Cyanobacterii sunt mobile ntr-un anumit stadiu de dezvoltare, avnd
o mobilitate de tip glisant, asemnndu-se cu bacteriile filamentoase glisante de tip Beggiatoa.
Pigmenii fotosintetizani sunt reprezentai numai de clorofila "a" i deficobiliproteine
(alloficocyanina, ficocyanina i uneori ficoeritrina). n citoplasm se observ vacuole cu gaze
ce au rol de flotaie.
Unele cyanobacterii sunt unicelulare, iar altele filamentoase, formnd lanuri mai
lungi.
Cyanobacteriile sunt strict fotoautotrofe i nu se pot dezvolta numai n prezena
substanelor organice, nu au nevoie de vitamine ca factori de cretere, iar ca surs de azot
folosesc azotaii, srurile de amoniu, iar unele specii folosesc azotul molecular, fiind fixatoare
de azot (Nostoc i Anabaena).
Sunt mult rspndite n sol, n apele dulci i ape srate din mri i oceane. Sunt mai
tolerante fa de condiiile extreme nefavorabile dect algele eucariote.
Ele constituie primele organisme ce populeaz rocile dezagregate, participnd la
procesul de solificare i favorizeaz dezvoltarea n masa lor mucilaginoas a unor bacterii
fixatoare de azot ntre care Azotobacter i Clostridium.
Dintre cyanobacterii mai rspndite n natur sunt genurile Gloeocapsa i
Chroococcus care sunt organisme unicelulare. Alte grupe sunt filamentoase ca, Oscillatoria i
Lyngbia. Genurile Nostoc i Anabaena ce au capacitate de a fixa azotul molecular triesc n
solurile umede din orezrii, unde asigur N2 necesar plantelor.
2.5. PROTOZOARELE
Sunt organisme unicelulare la care se cunoate un anumit ciclu evolutiv i care
reprezint vieuitoare complete i independente, fiind cuprinse n ncrengtura Protozoa, regn.
Protista..
Celula unui protozor se compune din protoplasm, n care se gsesc incluziunile
granulare, condriozomii, precum i diferite substane de rezerv. De asemenea, se gsesc unul
sau mai muli nuclei cu forme i structuri diferite.
Ca substane de rezerv n celulele de protozoare s-au descoperit; amidonul,
glicogenul, leucozina, grsimi i substane proteice de rezerv cum este volutina.
nmulirea protozoarelor se face pe cale asexuat prin mprirea celulei n dou pri
aproape egale, n urma crui proces apar dou celule fiice. nmulirea sexuat are loc dup
mai multe diviziuni simple, prin conjugare ntre gamei. n urma contopirii gameilor iau
natere zigoii care n condiii neprielnice se transform n zigochiti sau chiti de repaus care
au o mare rezisten la temperaturi nefavorabile, concentraii mari de sruri solubile,
uscciune sau acumulare n mediul ambiant a unor factori nocivi. La revenirea condiiilor
favorabile, din zigochiti apar indivizi obinuii.
n sol sunt rspndite protozoare din urmtoarele clase: Rhizopoda, Sarcodina,
Mastigophora (Flagelata) i Infusoria (Cilliata).
Din clasa Sarcodina cele mai rspndite genuri sunt: Negleria, Amoeba.
23
2.6. CIUPERCILE
Ciupercile reprezint un grup numeros la care se cunosc cca. 100.000 de specii, fiind
cuprinse n regnul Fungi.
De asemeni, ele constituie o component important a microflorei solului la care s-au
identificat peste 170 de genuri i peste 800 de specii. Frecvena lor n sol variaz ntre 8.000 i
1.000.000 de indivizi pe gramul de sol.
Ciupercile au un rol important n natur participnd n descompunerea substanelor
organice; formeaz asociaii sub form de micoriz cu rdcinile plantelor; produc substane
antibiotice participnd n acest fel la antagonismul microbian i la reglarea echilibrului
biologic n sol.
Morfologia ciupercilor
Aparatul vegetativ este un tal cu o constituie variat iar, complexitatea acestuia crete
pe msura evoluiei filogenetice. Astfel, la ciupercile din subncrengtura Mastigomycotina
aparatul vegetativ este o celul nud - gimnoplast sau o asociere de gimnoplati ce formeaz
un plasmodiu.
La ciupercile din Zigomycotina aparatul vegetativ cu aspect filiform este un
sifonoplast, neseptat, format din hife simple sau ramificate.
La ciupercile din subncrengtura
Ascomycotina, Basidiomycotina i
Deuteromycotina, aparatul vegetativ poate fi unicelular, sub form de dermatoplast ca la
Saccharomycetaceae, iar la majoritatea este un tal filamentos pluricelular, format din hife
septate.
Talul ciupercilor poate fi filamentos la ciupercile microscopice, sau masiv la unele
ciuperci din subncrengtura Basidiomycotina, formnd corpuri de fructificare de dimensiuni
vizibile cu ochiul liber (carpofori).
Reproducerea ciupercilor
24
25
MICROBIOLOGIASOLULUI
SOLULUI
MICROBIOLOGIA
Litosfer
46,29
27,61
7,81
5,40
3,77
2,68
2,36
2,40
0,21
Podzol
Cernoziom
Cantitatea n %
69,7
76,1
13,4
15,2
4,3
5,6
0,7
2,6
1,1
2,2
1,2
1,3
3,0
3,3
-
29
Carbon
Fosfor
Magneziu
Sulf
Clor
0,22
0,10
0,08
0,03
0,01
2,2
0,39
1,1
-
4,6
1,10
2,2
-
furnizeaz solului cea mai important surs de materie organic. Rdcinile au n plus un rol
important i n modificarea concentraiei soluiei solului (ca urmare a procesului de adsorbie)
i n eliminarea a numeroase substane (n special enzime) care intervin direct n activitatea
microorganismelor. Datorit acestor condiii specifice, numrul de microorganisme aflate n
jurul rdcinilor (rizosfer) depete cu mult pe cel aflat n restul solului.
Macrofauna, cuprinde o diversitate mare de organisme, dintre care amintim:
nematozii (circa 10 mii/mp), viermii inelai, rmele (90-500 kg/ha), furnicile, coleopterele i
diverse vertebrate care, prin activitatea lor, mbogesc solul n materie organic, ce va fi
utilizat de microorganisme.
Micropopulaia din sol este reprezentat de microflor i microfaun.
Microflora constituie populaia cea mai important pentru viaa solului. Ea este
format din bacterii, cyanobacterii, ciuperci microscopice i alge.
Cea mai important indicaie asupra activitii microorganismelor din sol este dat de
numrul lor n unitatea de volum, de greutate sau de suprafa. Valoarea absolut a unor
microorganisme raportat la un gram de sol, variaz ntre 1 milion-1 miliard de bacterii, ntre
5.000-50.000 la ciuperci, ntre 3.000-30.000 la actinomicete i 500-5.000 la alge (la
adncimea de 2-5 cm).
Microfauna solului este constituit din protozoare monocelulare (ntre 100-1.000
buc./g sol), dintre care cele mai numeroase aparin ncrengturii Flagellate. Dei aciunea lor
este cunoscut, rolul protozoarelor n sol nu este pe deplin clarificat.
Numrul microorganismelor din sol i componena lor constituie un important criteriu
practic n aprecierea activitii biologice a acestora. Pentru edificarea complet a acestei
activiti, este necesar i cunoaterea activitii biochimice a microorganismelor.
32
2. CIRCUITUL AZOTULUI
Azotul este un element esenial pentru existena vieii n biosfer, deoarece este inclus
n structura tuturor proteinelor i a acizilor nucleici. Dei este prezent n natur n cantiti
foarte mari, se gsete aproape invariabil n forme inaccesibile direct, plantelor i animalelor.
Circuitul azotului n natur se desfoar pe parcursul a mai multor etape care implic
desfurarea unor multiple activiti biochimice, unele au loc n anaerobioz iar altele n
prezena oxigenului.
Aceste etape sunt:
fixarea N2;
amonificarea;
nitrificarea;
denitrificarea.
I. Fixarea azotului molecular se poate realiza pe cale abiotic i biotic.
Pe cale abiotic fixarea se realizeaz prin iradieri, descrcri electrice i prin
intermediul precipitaiilor.
Pe cale biotic fixarea azotului molecular este un proces lent i continuu prin care, sub
aciunea a peste 100 genuri de bacterii diferite, azotul gazos atmosferic este convertit la forme
fixe (NH4-, NO3-, NO2-), care sunt folosite de plante i introduse n forme organice utiliznd
energia obinut prin fotosintez.
Bacteriile care particip la aceast fixare au fost grupate astfel:
- bacterii fixatoare de N2 libere aerobe;
- bacterii fixatoare de N2 libere anaerobe;
- bacterii fixatoare de N2 care triesc n asociaie cu plantele.
n cazul celui de-al treilea grup n funcie de relaia care se stabilete ntre cei doi
parteneri, ntlnim trei tipuri de simbioz:
simbioza Rhizobium - leguminoase;
simbioza Actinomicete - neleguminoase;
simbioza asociativ.
II. Amonificarea, const n mineralizarea azotului proteic pn la NH3.
III. Nitrificarea cu cele dou trepte intermediare: nitritarea i nitratarea n care are loc
oxidarea NH3 pn la nitrii respectiv nitrai.
IV. Denitrificarea este procesul prin care are loc reducerea azotului nitric pn la azot
molecular, ncheindu-se n acest mod circuitul azotului.
Toate procesele desfurate pe parcursul celor patru etape sunt mediate numai de
bacterii, cu excepia unei etape premergtoare amonificrii, proteoliza n care pot aciona i
microfungii.
n timp ce n ecosistemele naturale, circuitul azotului este un proces echilibrat, n
sensul c pierderile de azot din sol sunt compensate de procesele de fixare, n sistemele
supuse procesului de agricultur, pierderile depesc ritmul de nlocuire.
Dac rezervele de azot din sol sunt limitate, fapt ce duce la apariia unor frecvente
dezechilibre ntre nevoia de azot i posibilitatea de a o satisface, din contr, rezerva de azot
atmosferic, este practic inepuizabil, calculele artnd c aceasta ar putea asigura necesarul
pentru cel puin 800.000 ani. Din pcate aceast imens cantitate este inaccesibil, direct,
organismelor vii i mai cu seam plantelor superioare.
33
n 3 zile 100 % din concentraia final, n timp ce altele realizeaz fixarea ntregii cantiti
numai dup 12 zile.
36
II. Amonificarea
Substanele organice azotate, reprezentnd 99 % din rezervele totale de N 2 din sol,
constau din rezerve humice i din ali compui acumulai n mod natural n sol prin procesul
de fixare biologic a N2 i prin cel de degradare a resturilor organice vegetale i animale, a
ngrmintelor verzi i a blegarului.
nsi celulele bacteriene reprezint o mas de substan organic, predominant
proteic, de aproximativ 6 t/ha, la care se adaug circa 20 de tone reprezentate de restul
microflorei i microfaunei. Dac acest N2 organic ar rmne ca atare, rezervele de N2
accesibile plantelor s-ar micora n fiecare an i nu ar mai permite creterea plantelor.
n mod normal ns, aceste substane sufer un proces de mineralizare, la sfritul
cruia sunt aduse n stare de NH3.
Procesul de amonificare propriu-zis este precedat de descompunerea moleculelor
proteice prin hidroliz, cu ajutorul proteazelor extracelulare eliberate de numeroasele specii
de microorganisme aerobe i anaerobe dup formula general:
H2O
H2O
H2O
protein
peptone
peptide
aminoacizi
proteinaze
peptonaze
peptidaze
Aminoacizii rezultai din aceast degradare ptrund n interiorul celulelor bacteriene,
unde sufer un proces de dezaminare, din care rezult NH3 i acidul organic corespunztor. Se
ntlnesc mai multe tipuri de dezaminare i anume:
1. Dezaminarea hidrolitic
2. Dezaminarea hidrolitic i decarboxilare
3. Dezaminarea reductoare
4. Dezaminarea reductoare cu decarboxilare (anaerob)
5. Dezaminarea oxidativ cu decarboxilare
6. Dezaminarea cu desaturare.
Din asemenea reacii, n afar de NH3, pot rezulta acizii: acetic, formic, propionic,
butiric, valerianic.
n funcie de condiiile de mediu i natura microflorei, aceti acizi pot fi oxidai
complet la CO2 i H2O (n mediul aerob), acumulai ca atare, transformai n alcooli.
Amonificarea n sens strict poate fi definit deci ca un proces biologic n care se
elibereaz n sol NH3, ca rezultat al aciunii microflorei solului asupra aminoacizilor rezultai
din descompunerea substanelor proteice. n acest sens nu este inclus n amonificare,
eliberarea de NH3 sub aciunea micoflorei temporare de putrefacie.
n acest proces NH3 poate fi refolosit ca atare, de o serie ntreag de microorganisme.
Cea mai mare parte din el sufer n continuare o transformare absolut necesar pentru viaa
din sol, n forme accesibile plantelor, iar restul poate fi fixat n sol, mai ales n soluri acide sau
se evapor n atmosfer.
Microflora capabil s produc amonificarea substanelor proteice este numeroas i
diferit i acioneaz n timp dup cum urmeaz:
La nceputul procesului intervin bacterii obligat aerobe cum sunt: Bacillus cereus var.
micoides, B. subtilis, B. thermoproteolyticus, specii nesporulate ca: Serratia marcescens,
Arthrobacter etc. i specii facultativ anaerobe cum sunt: Proteus vulgaris, Pseudomonas
fluorescens, Escherichia coli, Sarcina lutea etc.
Dup 2-3 zile intr n aciune specii obligat anaerobe cum sunt: Clostridium
putrefaciens, C. perfringens i unele actinomicete ca: Streptomyces violaceus i
Micromonospora chaleea, care ncep s predomine i fac ca degajarea de NH3 s fie maxim.
ncepnd cu ziua a 4-a mediul este invadat de mucegaiuri i degajarea de NH 3
descrete datorit faptului c acestea folosesc NH3 pentru sinteza proteinelor proprii i produc
mult acid care neutralizeaz amoniacul.
39
sintez a protoplasmei acestora (asimilarea nitriilor), fie c sunt redui, pentru oxidarea unei
substane organice sau minerale.
Denitrificarea reprezint un proces care nchide circuitul prin ntoarcerea N 2 molecular
n natur.
Reducerea nitrailor n procesul de denitrificare se face fie pn la N 2 sau NH3, fie
pn la stadii intermediare ca nitrii, acidul hiponitros etc.
Condiiile optime de producere sunt realizate n solurile saturate cu ap i n structurile
profunde n care pot reaciona urmtoarele grupuri de microorganisme.
Bacteriile denitrificatoare propriu zise ce reduc NO3- la N2 sunt: Pseudomonas stutzeri
i Pseudomonas denitrificans.
Dintre microorganismele din flora general a solului capabile s reduc NO 3- la NO2sunt: Bacillus megaterium, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa etc., precum i unele
bacterii sulfuroase ca: Thiobacillus denitrificans.
Semnificaia procesului de denitrificare este nc controversat, acesta fiind considerat
de unii autori ca un fenomen patologic, inconstant i relativ rar n condiii naturale ale
solurilor de cultur. Este sigur c reducerea nitrailor pn la N 2 gazos reprezint pentru solul
respectiv o pierdere real care poate ajunge pn la 120 kg N2/ha/an, cu toate c o parte din N2
degajat poate fi preluat de fixatorii de N2 anaerobi cum sunt: Clostridium pasteurianum.
n acelai timp, reducerea incomplet, pn la stadiile intermediare, de nitrii i NH 3,
este mai puin duntoare pentru fertilitatea solului respectiv, deoarece NH 3 poate fi folosit de
unele microorganisme heterotrofe, n timp ce nitriii sunt preluai de nitratbacterii i reoxidri
n nitrai.
3. CIRCUITUL CARBONULUI
Dac a fost relativ uor s se dea o descriere, destul de schematic e drept, a ciclului
azotului n sol, nu este la fel de simplu pentru circuitul carbonului; acesta din urm nu are
verigile bine individualizate care ale primului.
Mai nti trebuie s artm c sursele de carbon introduse n sol sunt numeroase:
carbonul mineral al CO2 atmosferic i carbonaii telurici, urmeaz apoi carbonul organic al
vegetalelor i animalelor sub forme multiple, de la glucide simple pn la substane
polimerizate ca celuloze sau cu structuri complexe ca lignina.
Metabolismul acestor forme diverse este mult diferit n sol din mai multe cauze i
anume:
- datorit nsi structurii substanelor carbonate;
- datorit florei multiple zimogene care acioneaz asupra acestor substane.
Aceste diferene se traduc prin viteza de atac diferit i prin produii de metabolism
intermediari obinui. Dac n adevr produii finali ai oxidrii i mineralizrii carbonului
organic sunt n mod constant CO2 i H2O ( i CH4 n condiii de anaerobioz), produsele
intermediare sunt foarte variate, sub form de acizi organici i zaharuri, mai mult sau mai
puin complexe.
De fapt, mineralizarea carbonului organic este n mod excepional realizat ntr-o
singur etap i ca regul general, numeroase grupuri de bacterii i ciuperci intervin n mod
succesiv pentru a ajunge la produse simple terminale.
Acest ciclu al carbonului este complicat nc prin faptul c substanele hidrocarbonate
sunt totdeauna asociate n proporie variabil cu substane azotate (proteice), lipide, precum i
cu lignina, cerurile, rinile, taninurile, etc. Proporia relativ a acestor diverse substane
modific n mod profund metabolismul produilor hidrocarbonai.
Metabolismul mai variaz i n funcie de structura fizic i chimic a solului, de clim
(temperatur, umiditate), de sistemul de cultur, etc.
41
Ultimul factor ce complic situaia este acela c n acelai timp cnd substanele
hidrocarbonate sunt degradate, mineralizate, microorganismele realizeaz sinteza, pentru
propriul lor corp, a unor produi ca hemiceluloza.
Este ca atare dificil de tiut care sunt produii intermediari de degradare i care sunt
cei de sintez. n orice caz, att unii ct i alii se pot combina pe cale chimic sau fizic ntre
ei, precum i cu ali compui din sol pentru a forma substanele de rezerv humic.
Pentru o mai clar prezentare a problemei, se va lua n considerare mai nti
metabolismul carbonului mineral i apoi a celui organic.
Metabolismul carbonului mineral
Se tie c majoritatea bacteriilor au nevoie pentru metabolismul propriu de gazul
carbonic (CO2) dar acesta intr n ciclul biologic n cantiti relativ mici
Exist grupri fiziologice de bacterii care nu pot metaboliza dect carbonul mineral,
cum sunt autotrofele sau litotrofele, care joac un anumit rol n sol.
ntre acestea n primul rnd sunt bacteriile ce posed pigment asemntor cu clorofile
(bacterioclorofil) i algele ce posed clorofil, care sunt organisme fototrofe. Metabolismul
acestora este asemntor cu cel al plantelor superioare, energia fiind furnizat de ctre
radiaiile luminoase.
Snt apoi bacteriile lipsite de pigment de tip clorofilian, care i iau energia din oxidri
ale substanelor minerale reduse (n mod esenial NH3 i SH2); aceast energie le permite s
reduc CO2 i s metabolizeze carbonul, fiind organisme chimiolitotrofe. Printre ele se afl
bacteriile nitrificatoare i unele care intervin n ciclul sulfului i fierului.
Cu ajutorul carbonului mineral astfel metabolizat cu apa i cu substanele minerale
luate din sol, aceste autotrofe din primul i al doilea grup realizeaz sinteza protoplasmatic,
triesc, respir i ca urmare elimin CO2; n felul acesta ciclul mineral al carbonului se
ncheie.
Dac importana teoretic a metabolizrii carbonului mineral este foarte mare, din
punct de vedere cantitativ nu are dect un rol restrns comparativ cu acela al ciclului organic
ce provine de la vegetale i animale.
Metabolismul carbonului organic
Carbonul organic este n mod esenial de origine vegetal fiind introdus n sol prin
procese multiple i sub forme variate.
Prin procese naturale ca esuturi vegetale moarte, sub form de rdcini, frunze care
ajung n sol odat cu moartea plantelor.
Prin procese artificiale cum este ncorporarea unor vegetale parial metabolizate, sub
form de gunoi natural i artificial.
Carbonul organic de origine animal este din punct de vedere cantitativ mai puin
important, fiind format din vieuitoarele faunei telurice dup moartea acestora sub form de
cadavre. n acest caz descompunerea se realizeaz prin fenomene de putrefacie, unde rolul
carbonului este foarte slab, datorit raportului C/N foarte sczut.
Ca atare se va lua n considerare n mod esenial compoziia esuturilor vegetale, care
reprezint o mas foarte nsemnat de materie organic n natur.
Plecnd de la carbonul mineral atmosferic, de la ap i srurile din sol, vegetalele au
fcut sinteza constituenilor celulari. n ceea ce privete substanele carbonate, esuturile
vegetale sunt constituite din:
- glucide ca monoze (hexoze-pentoze); dioze trioze, polioze, amidon, inulin, dextrin,
hemiceluloz.
- glucozizi ca acizi organici fici i volatili; grsimi, ceruri i rini; lignin. n tabelul
8 sunt redai principalii constitueni din diferite produse vegetale.
42
Celuloza
%
28,5
25,43
37,27
Pentozani
(hemiceluloze)
13,52
21,33
21,67
Lignina
%
28,25
20,40
21,21
Grsimi i
cear
2
2,02
0,67
37,67
31,50
14,70
1,37
30,56
23,54
15,13
0,77
Proteine
%
9,31
4,30
3
2,11
3,50
Celuloz
%
18,06
26,9
30,59
36,26
Pentoze
%
16
21,18
22,71
22,90
Lignin
%
9,9
11,8
18
17,1
Grsimi i
ceruri
2,4
2,6
1,7
1,26
N total
%
2,5
1,76
1,01
0,24
48
Dezvoltarea lui Th. Ferrooxidans duce la acidifierea mediilor, datorit acidului sulfuric
produs. La rndul lui acidul sulfuric poate solubiliza cuprul i alte metale grele din mineralele
cele conin. De aceea dezvoltarea lui Th. Ferrooxidans duce la acumularea de concentraii
fitotoxice pentru plantele de cultur, a acidului sulfuric i a metalelor grele n haldele de steril
luate n cultur.
4. Reducerea fierului trivalent. Acest produs se datoreaz unor bacterii facultativ sau
obligat anaerobe ca B. circulans, B. polymyxa, Enterobacter aerogenas, Clostridium
butyricum, etc.
Aceasta n prezena substanelor organice ca glucoza, reduc fierul trivalent la Fe 2+, Fe
trivalent servind ca acceptor de electroni.
Mai sunt capabile de reducerea Fe trivalent i unele ciuperci din sol. Toate aceste
microorganisme fier-reductoare sunt chimioorganoheterotrofe.
Trebuie s menionm c oxidarea Fe2+ i reducerea Fe trivalent n sol se poate
produce i fr participarea direct a microorganismelor (fig.32).
13. Microorganismele din sol i circuitul fosforului
Fosforul este un element absolut necesar vieuitoarelor i intr n compoziia acizilor
nucleici, a unor proteine, a unor compui macroergici (ATP), a fosfolipidelor, a
fosfozaharidelor, a fitinei, etc.
Ciclul fosforului redat n fig.33 se desfoar n mai multe faze, dup cum urmeaz:
1. Mineralizarea fosforului organic se desfoar n paralel cu mineralizarea
compuilor organici cu N (amonificarea) sub aciunea acelorai microorganisme. Unul dintre
microorganismele foarte active n mineralizarea P organic este Bacillus megaterium var.
phosphaticus.
n urma mineralizrii P se elibereaz sub form de ortofosfat solubil, asimilabil de
ctre plante i microorganisme; n acelai timp ns ortofosfatul solubil poate trece n
ortofosfai de Ca, Fe, Al, Mg, Cu i Ni care sunt insolubili.
Compuii organici cu P reprezint 15-85% din cantitatea total de P din diferite soluri.
ntre compuii organici cu P ai solului predomin fitina i acizii nucleici. Fitina este de
origine vegetal, iar acizii organici provin de la microorganisme, plante i animale. Fitina
constituie ntre 10-80% din cantitatea total de P organic din soluri. Ea este sarea de Mg i Ca
a acidului fitic, iar descompunerea ei hidrolitic este catalizat de fitoz.
2. Mobilizarea ortofosfailor insolubili este procesul de solubilizare a fosfatului
tricalcic, a ortofosfailor de Fe, Al, Mg, Mn, Cu, Ni, ce are loc sub aciunea acizilor produi de
microorganisme i de cei excretai de rdcinile plantelor. Aici intr acizii azotos i azotic
produi de microorganismele nitrificatoare, acidul sulfuric produs de microorganismele
sulfoficatoare, acidul carbonic i acizii organici produi de microorganisme, precum i de
rdcinile plantelor.
Dintre acizii organici acidul 2-ceto-D-gluconic joac un rol deosebit n solubilizarea
ortofosfailor insolubili. Mai contribuie la solubilizare i acizii citric, succinic, malic, oxalic,
tartric, lactic, precum i acizii humici.
3. Transformarea meta-, piro- i polifosfailor este realizat sub aciunea unor bacterii
ca Pseudomonas fluorescens, Sporocytophaga cauliformis i a unor ciuperci ca Aspergillus i
Penocillium. Aceste reacii sunt catalizate de enzime, dar ele pot avea loc i sub aciunea
aciditii, iar transformarea meta- i pirofosfailor poate fi catalizat i de MnO2
4. Oxidarea fosfailor i hipofosfailor are loc sub aciunea unor microorganisme
aerobe i este de asemenea catalizat de enzime.
5. Reducerea ortofosfailor este produs de microorganisme aerobe, reacia respectiv
fiind de natur enzimatic,.
n prezena nitrailor i sulfailor , reducerea ortofosfailor este inhibat, deoarece
nitraii i sulfaii sunt utilizai mai uor ca acceptori de electroni.
51
vegetale se mineralizeaz sub aciunea microorganismelor din sol. Seleniul apare sub form
de selenii (SeO32-) i selenai (SeO42-).
Microorganismele din sol sunt capabile i de oxidarea seleniului metalic i al
seleniurilor (Se2-) la selenai.
O alt transformare microbian a seleniului n sol este reducerea seleniilor i
selenailor la Se metalic. Aceast capacitate a fost demonstrat la unele bacterii cum sunt
Clostridium, Corynebacterium i ciuperci ca Rhizobium, precum i la unele levuri i
mucegaiuri.
Compuii cu Se (selenii, selenai, Se-aminoacizi), pot fi metilai sub form de produs
gazos numit dimetilselein (CH3-Se-CH3).
Acest proces poate fi realizat de unele ciuperci ca Aspergillus, Cephalosporium,
Fusarium, Penicillium, ca i de unele bacterii.
15.3. Zincul. Microorganismele n urma descompunerii resturilor vegetale elibereaz
zincul sub form solubil (Zn2+). Microflora solului realizeaz aceast solubilizare prin acizii
minerali i organici produi. n sens invers, prin diminuarea aciditii, microorgaismele
micoreaz solubilitatea Zn. Tiobacilii oxideaz S din ZnS la acid sulfuric i elibereaz ZN
SUB FORM DE Zn2+ care rmne n soluie datorit acidului sulfuric. H 2S produs de
microorganisme ndeprteaz Zn prin formarea de ZnS care precipit.
Insolubilizarea microbian a Zn provoac la pomii fructiferi o caren manifestat prin
micorarea limbului frunzelor, boal ce poate fi prevenit prin tratarea solului cu sulfat de
zinc (ZnSO4).
15.4. Cuprul. Descompunerea microbian a resturilor vegetale poate duce la
micorarea concentraiei cuprului solubil, datorit unei reacii chimice n care sunt implicai
produii microbieni formai n cursul descompunerii.
Tiobacilii pot solubiliza Cu din minereuri sulfuroase cum este calcopirita (CuFeS 2), iar
Thiobacillus ferrooxidans poate oxida att S ct i Cu monovalent din Cu 2S. Hidrogenul
sulfurat (H2S) format pe cale microbian poate precipita Cu 2+ sub form de CuS.
Microorganismele din sol au capacitatea de transformare i a altor microelemente ca Mo, V,
Co, Ni, Pb, Cd, Si.
4. INFLUENTA FACTORILOR ECOLOGICI ASUPRA MICROORGANISMELOR
Influena pH-ului
Pentru marea majoritate a micropopulaiei solului, pH-ul optim este cel apropiat de
neutralitate. Aa se explic de ce n solurile cu reacie neutr se gsete cea mai bogat i
variat microflor.
Dup preferinele fa de pH-ul solului, microorganismele pot fi grupate n:
- Neutrofile, care prefer un pH n jur de 7. Din aceast categorie fac parte cele mai
multe i mai importante microorganisme din sol (Azotobacter, bacteriile nitrificatoare
autotrofe, microorganismele celulolitice cele mai active, actinomicetele).
- Acidofile, a cror dezvoltare maxim este la un pH n jur de 3 (genul Thiobacillus).
- Bazofile, cu o dezvoltare maxim la un pH mai mare de 8 (Bacillus ureolitici).
- Indiferente sunt majoritatea ciupercilor.
pH-ul solului poate fi considerat ca un factor de reglaj al competiiei pentru hran. De
exemplu, ciupercile, care suport uor (chiar preferabil) reacia acid a solului, concureaz
toate celelalte microorganisme din solurile acide.
Calcarizarea solurilor acide stimuleaz evident activitatea lor biologic. Cu ct pH-ul
solului neamendat este mai sczut, cu att este stimulat mai puternic activitatea
microorganismelor.
Exist o corelaie ntre coninutul de substane nutritive i reacia solului, dovedit prin
schimbul de ioni. Schimbul este ntr-un raport echivalent ntre ionii de hidrogen produi de
53
care explic faptul c bacteriile anaerobe se pot dezvolta i n straturile superioare, bine
aerisite, ale solului. Un exemplu elocvent este cauza metabiozei dintre bacteriile aerobe i cele
anaerobe n cadrul agregatelor particulelor din sol: cele aerobe se dezvolt pe suprafaa
agregatelor i consum O2, mpiedicnd, astfel, difuzarea oxigenului n interiorul agregatelor,
prin aceasta favorizeaz dezvoltarea bacteriilor anaerobe din interiorul agregatelor.
Raporturi antagoniste
Antagonismul const n relaii n care un microorganism sau un fag exercit o aciune
defavorabil asupra unui alt microorganism. Fenomenul apare cnd un organism secret n
mediu produse ale activitii vitale care inhib dezvoltarea altui organism sau l omoar.
n sol apar urmtoarele aspecte de antagonisme ntre microorganismele care l
populeaz:
- Antagonismul microbian propriu-zis, care se realizeaz prin:
Concuren pentru sursa de hran, ce apare cnd dou specii au necesiti nutritive
asemntoare. Specia cu o cretere rapid mpiedic dezvoltarea speciei cu cretere lent. De
exemplu, la nceputul descompunerii resturilor vegetale i animale, bacteriile se dezvolt
abundent, n timp ce actinomicetele nu se dezvolt. Dup epuizarea substanelor uor
asimilabile, bacteriile mor. n locul lor apar actinomicetele care se multiplic rapid,
consumnd resturile organice care nu au fost descompuse de bacterii.
Modificarea mediului prin produi metabolici. De exemplu, acidul lactic i acidul
butiric, produi ai bacteriilor de fermentaie, acioneaz asupra tuturor microorganismelor
asociate i, astfel mpiedic multiplicarea bacteriilor de putrefacie. Tot aici, trebuie menionat
i fenomenul de antibioz, cnd antibioticul produs de un microorganism poate elimina
dezvoltarea altor organisme din sol. De exemplu, Streptomyces grisseus produce
streptomicin, care inhib activitatea bacteriei Bacillus subtilis.
Parazitismul este fenomenul prin care un fag sau un microorganism se dezvolt pe
seama i n dauna altui microorganism. Dup cum s-a mai menionat, fagii paraziteaz
bacterii, actinomicete, cianobacterii i ciuperci, al crui mecanism a fost, de asemenea, descris
anterior.
Sunt i bacterii i actinomicete care lizeaz alte bacterii, respectiv ciuperci sau alge.
Bacteriile micolitice sunt mixobacterii sau tulpini de Bacillus i Pseudomonas, iar
actinomicetele micolitice sunt streptomicete i nocardii.
Liza la cianobacterii i la algele verzi este efectuat de mixobacterii i alte bacterii,
precum i de unele tulpini de streptomicete.
Sunt i cazuri cnd att parazitul ct i gazda sunt ciuperci. De exemplu, Penicillium
vermiculatum este parazit pe Rhizoctonia solani. Aceasta din urm poate fi parazit la rndul ei
pe alte ciuperci, de exemplu pe Mucor recuvus.
Prdtorismul (predaia) este un act de agresiune cnd un microorganism (agresor)
atac pe un altul (prada) pe care l captureaz, ingereaz i diger.
De exemplu, bacteriile sunt o hran a protozoarelor (protozoarul Rhizopoda consum
n timpul existenei sale circa 40.000 de bacterii). Prin aceasta, ns, nu se reduce numrul
bacteriilor, ci se poate, uneori, mri intensitatea proceselor fiziologice ale bacteriilor. Astfel de
relaii pot fi considerate ca relaii de simbioz. Sunt i ciuperci prdtoare care consum
animale mici, bacterii prdtoare, protozoare, metazoare i chiar bacteriofagi.
Studiul raporturilor antagoniste dintre diferii reprezentani ai micropopulaiei solului
prezint interes n sensul dirijrii lor pentru protecia plantelor cultivate, excluznd astfel
mijloacele chimice de combatere, care prezint multe neajunsuri.
Simbioza (mutualismul)
Simbioza este o form de convieuire ntre dou sau mai multe specii i const ntr-o
nutriie ncruciat: fiecare simbiont produce un metabolit pe care nu-l poate produce cellalt.
57
Rizosfera
Rizosfera este zona de sol care nconjoar rdcinile i este influenat de acestea din
punct de vedere fizic, chimic i biologic, datorit aciunilor specifice dintre microorganismele
solului i plantele superioare. n cadrul rizosferei sunt trei subzone (dup Berezova, 1950)
care se deosebesc ntre ele att n privina densitii microbiene, ct i prin structura speciilor
de microorganisme.
Prima zon, numit "rizosfera intern" (rizosfera propriu-zis), are o raz de 0-0,5
cm. Ea cuprinde microorganismele de la suprafaa rdcinilor.
A doua zon, numit ''zona periradicular", cuprinde microorganismele care se
gsesc la o distan de 0,5 cm de rdcin.
A treia zon sau "rizosfera extern" ("edatosfera") cuprinde microorganismele care
se gsesc la o distan mai mare de 0,5 cm de rdcin.
Prezena mai multor microorganisme (n special bacterii) n rizosfer dect n solul
nerizosferic (fr rdcini), se numete efect rizosferic. Intensitatea efectului rizosferic la
bacterii se exprim prin raportul R/S (rizosfer/sol nerizosferic) care, n general este de 5:10
(la actinomicete, ciuperci, alge i protozoare R/S este ntre 2 i 3).
Numrul bacteriilor n rizosfer este influenat de urmtorii factori:
- Distana dintre suprafaa rdcinii i particulele de sol. Pe suprafaa rdcinii se
gsesc cele mai multe bacterii.
- Zonele rdcinii. Solul din jurul perilor radiculari conine mai multe bacterii dect
cel din jurul celorlalte zone ale rdcinii.
- Distana dintre zonele rdcinii i suprafaa solului. Zonele rdcinilor mai apropiate
de suprafaa solului au o rizosfer mai bogat n bacterii dect zonele rdcinilor, de pe
aceeai plant, care se gsete la adncime.
- Specia plantei. n rizosfera gramineelor perene se gsesc mai multe bacterii dect la
cele anuale, iar la lucern i trifoi mai multe dect la leguminoase.
- Faza de vegetaie. Flora bacterian din rizosfer crete n cursul dezvoltrii plantei,
ajungnd la o valoare maxim n perioada nfloritului, dup care scade evident.
- Coninutul solului n substane nutritive. n solurile fertile, raportul R/S este mai mic
dect la solurile srace.
Efectul rizosferic se manifest nu numai sub aspect cantitativ (numr de
microorganisme), ci i calitativ, fapt ce const n modificarea echilibrului dintre diferite grupe
de microorganisme din sol.
n rizosfera plantelor predomin bacteriile nesporogene, bastonaele Gram-negative
din genurile Pseudomonas, Flavobacterium, Achromobacter i Agrobacterium (n rizosfera
unor plante se dezvolt i Rhizobium, Azotobacter, Azospirillum .a.).
Relaiile dintre rdcinile plantelor i microorganismele din rizosfer
Aportul plantelor. Rdcinile influeneaz, din punct de vedere mecanic, structura
solului, elibereaz CO2, secret metabolii cu aciune energetic, enzimatic, care activeaz
sau inhib creterea lor, lsnd resturi de esuturi care sunt utilizate ca hran de
microorganismele din sol.
Bacteriile din rizosfer sunt acelea care utilizeaz excreiile radiculare i substanele
provenite din exfolierea esuturilor radiculare. Excreiile radiculare conin: aminoacizi,
vitamine, acizi organici simpli, zaharuri, baze azotate, enzime, glucozide .a.
Bacteriile cu un potenial ridicat de sintez a substanelor biologic active din rizosfer,
cu o mare capacitate de nmulire i capabile s se hrneasc cu produsele de eliminare ale
rdcinilor, ca i acelea care prin metabolismul lor produc substane ce inhib nmulirea
altora, ajung dominante n structura microbiologic a rizosferei.
Cantitatea i calitatea produilor eliminai de rdcinile plantelolr sunt determinate, pe
lng baza ereditar, i de unii factori externi, dintre care menionm: condiiile de nutriie,
umiditatea, lumina, pH-ul, temperatura, aeraia i altele care condiioneaz buna cretere i
dezvoltare a plantelor i, n special, a sistemului radicular.
59
60
n solurile de pdure, ciupercile care formeaz micorize au viaa nelimitat, iar n cele
supuse unei inundaii de durat sunt distruse complet. Solurile pajitilor sunt, n general,
lipsite de ciuperci care formeaz micoriza.
Majoritatea ciupercilor de micoriz prefer solurile cu o reacie puin acid. Exist i
forme care prefer solurile acide sau puternic alcaline.
Se pare c humusul are o influen direct i pozitiv asupra micorizei.
Coninutul solului n vitamine i aminoacizi influeneaz rspndirea i activitatea
ciupercilor care formeaz micorize. Sunt i cazuri cnd solul conine substane care inhib
creterea ciupercilor i, prin aceasta, dezvoltarea micorizei.
Folosirea micorizei n agricultur este o problem n cercetare, cu perspective
promitoare, privind inocularea solului i a puieilor cu ciuperci de micoriz.
MICROBIOLOGIA
MICROBIOLOGIA
FERMENTAIILOR
FERMENTAIILOR
Vinul este o butur alcoolic nedistilat, cunoscut din cele mai vechi timpuri, care se
obine prin fermentaia alcoolic a mustului de struguri. Fermentaia mustului, obinut prin
zdrobirea strugurilor recoltai la maturitate, se face n vase speciale deschise, sub aciunea
drojdiilor din flora natural sau a unor tulpini selecionate.
Pe struguri, n must i respectiv n vin, exist un numr nsemnat de microorganisme,
bacterii i ciuperci care iau parte la procesul de fermentaie, avnd fie un rol pozitiv n cazul
fermentaiilor normale, fie un rol negativ, de "mbolnvire" a vinului, cnd declaneaz unele
procese fermentative care duc la efecte nedorite.
Levurile
Levurile sunt ciuperci microscopice care au capacitatea de a produce fermentaia
caracteristic a mediilor ce conin zaharuri (levere = a ridica). Ele sunt grupate din punct de
vedere sistematic n subncr. Ascomycotina, fam. Saccharomycetaceae i n subncr.
Deuteromycotina (Fungi imperfeci), fam. Cryptococcaceae.
Rspndirea levurilor
Levurile sunt larg rspndite n natur, ele se ntlnesc n sol, ape, pe plante, flori,
fructe etc.
Solul este considerat rezervorul principal al levurilor, unde numrul lor este n medie
de 250.000 celule pe gramul de sol.
n general, se ntlnesc n stratul superficial cuprins ntre 2-10 cm iar n solurile
podgoriilor pn la 30-40 cm, att ca forme vegetative ct i forme de rezisten.
Levurile apar pe boabe n timpul maturrii acestora i sunt rspndite de insecte (n
special Drosophylla sp.) prin intermediul particulelor de praf i nu n ultimul rnd odat cu
stropii provocai de ploi.
Levurile ce se gsesc pe struguri aparin la mai multe specii, proporia dintre ele fiind
diferit n funcie de mai muli factori: condiiile climatice, starea de sntate a recoltei,
coninutul n zahr al mustului etc.
Principalele levuri ntlnite n vin
Levuri sporogene
Saccharomyces ellipsoideus (Sacch. cerevisiae), prezint importana cea mai mare
pentru fermentaia mustului. Levurile acestei specii au form elipsoidal sau globuloas.
La fermentarea mustului prezint un randament ridicat realiznd n medie 1 ml alcool
pur din 1,7 g zahr i rezist pn la concentraii de 16 % vol. alcool, uneori chiar mai mult.
Temperatura optim este de 20-25oC i suport concentraii de pn la 250-300 mg/l
SO2 total.
Dup declanarea fermentaiei ele pun stpnire rapid pe mediu pentru ca la sfritul
procesului numrul lor s scad foarte mult.
Saccharomyces oviformis. Se prezint sub form oval, uneori rotund. Aceast levur
este specific regiunilor calde unde strugurii realizeaz concentraii ridicate n zahr. Prezint
acelai randament n alcool dar are o putere alcooligen mai mare dect Sacch. ellipsoideus
depind uneori 18 % vol. alcool.
Specia devine dominant spre sfritul fermentaiei i suport concentraii de pn la
300 mg/l SO2 total i 100 mg/l SO2 liber.
Este considerat o bun levur de finisaj la prepararea vinurilor seci, obinute din
musturi bogate n zahr. n schimb trebuie inactivat sau nlturat din vinurile demiseci,
demidulci i dulci, ntruct majoritatea accidentelor de refermentare se datorete acestei
specii.
Saccharomyces acidifaciens (Sacch. bailii).
Specie rezistent la concentraii mari de SO2, putndu-se dezvolta pn la concentraii
de 12 % vol. alcool. Provoac mbolnvirea vinurilor demiseci i dulci sulfitate.
63
64
n practic sunt cunoscute sub denumirea de levuri apiculate. Acestea apar pe bace la
faza de prg, iar la maturitatea deplin a strugurilor reprezint 99 % din totalul levurilor
existente n acest moment.
Ele declaneaz fermentaia mustului, avnd o capacitate foarte mare de nmulire,.
randamentul n alcool este mai sczut dect al levurilor eliptice. Ele consum pentru l ml
alcool pur 2,1 g zahr.
Puterea alcooligen este redus realiznd 4-5 % vol. alcool, concentraie maxim pn
la care aceast specie poate rezista.
Prezint o sensibilitate mai mare dect levurile eliptice la SO2.
Rhodotorula mucilaginosa, Rh. Glutinis, Rh. rubra sunt levuri denumite i
mucilaginoase deoarece produc mucilagii n musturi i vinurile tinere srace n aciditate i
formeaz pigmeni carotenoizi galbeni pn la roii.
Se ntlnesc n pivniele de vinuri n care formeaz mpreun cu unele bacterii i alte
ciuperci depuneri mucilaginoase pe pereii umezi. Dei, sensibile la alcool prezint o
rezisten mare la temperaturi ridicate (50-60oC) i la aciunea substanelor alcaline (fosfat
trisodic 1 %). Rezist la aciunea acidului boric pn la concentraia de 3 %.
Mucegaiurile
Ciupercile care formeaz colonii pufoase vizibile cu ochiul liber, n practic sunt
denumite mucegaiuri.
Mucegaiurile, obinuit aerobe, sunt foarte rspndite n natur, ntlnindu-se aproape
n toate mediile, datorit capacitii mari de nmulire i de rspndire precum i a rezistenei
mari la condiiile mai puin prielnice de mediu.
Sunt frecvent ntlnite n plantaiile viticole, pe frunze, boabe, n sol, pe utilajele i
pereii pivnielor, precum i la suprafaa mustului n primele etape de vinificaie.
Mucor racemosus, produce n plantaii infecia strugurilor pe vreme ploioas. n cazul
n care se afl complet scufundat n must ciuperca se prezint sub form de fragmente de
sifonoplast; are capacitatea de a produce fermentarea mustului pn la 5-7 % vol. alcool
Mucor circinelloides, este o alt specie care este folosit la fabricarea berei.
Mucor piriformis, oxideaz parial glucidele cu formarea acizilor citric, oxalic,
gluconic etc.
Rhizopus nigricans este frecvent pe strugurii vtmai, n pivnie sau pe utilajele
folosite n vinificaie, formnd pe suprafaa substratului degradat un mucegai de culoare
negricioas. Prezint capacitate mic de fermentaie.
Aspergillus niger, se dezvolt n crame i pivnie, pe vase vinicole, dopuri, formnd un
mucegai negru.
Aspergillus glaucus, se ntlnete mai frecvent pe suporturi lemnoase din pivnie.
Penicillium glaucum, produce putrezirea boabelor incomplet coapte sau strugurii
vtmai de insecte sau grindin.
Dac contaminarea se extinde devreme se pot produce pierderi de recolt importante,
boabele atacate fiind complet distruse. Cnd atac strugurii copi, mustul obinut are gust
amar.
n crame i pivnie se dezvolt pe dopuri, vase vinicole etc., ptrunznd n lemnul
doagelor.
n timpul fructificrii secret esteri cu gust i miros caracteristic de mucegai ce se
transmit vinului.
Genul Merulius cuprinde specii extrem de pgubitoare care se dezvolt n pivnie, pe
butoaie, czi, pe rafturi, stelaje i orice obiect din lemn pe care se formeaz un miceliu alb, cu
aspect buretos.
Speciile genului Merulius formeaz substane cu miros specific neplcut, unele atac
numai celuloza, altele numai lignina, transformnd lemnul ntr-o mas moale, de culoare
brun sau alb.
65
- Acetobacter pasteurianus;
- Acetobacter peroxydans.
Genul Gluconobacter
Cuprinde bacterii asemntoare din punct de vedere morfologic cu speciile genului
Acetobacter.
Singurul criteriu de difereniere l reprezint flagelaia cnd aceasta exist. Astfel,
speciile genului Gluconobacter sunt lofotriche (3-8 cili la fiecare pol) fa de ciliaia
peritriche la Acetobacter.
Produc oxidarea moderat a etanolului pn la acidul acetic la un pH=4,5.
Temperatura optim de dezvoltare este 25-30oC dar variaia acesteia poate fi cuprins
ntre 7-41oC.
Fiziologic se deosebete de genul Acetobacter prin urmtoarele proprieti:
- ciclul Krebs nu este complet.
- nu oxideaz acidul acetic i lactaii pn la CO2.
Bacterii lactice
Reprezentanii acestui grup sunt facultativi-anaerobi i particip la o serie de
transformri n vin i anume:
- transformarea glucidelor n acid lactic i ali produi secundari (glicerol, alcool etilic,
acid acetic etc);
- fermentaia malolactic;
- degradarea acidului tartric, citric;
- degradarea glicerolului i a altor componeni.
Genul Pediococcus
Cuprinde bacterii Gram (+) cu aspect sferic grupate sub form de diplococi sau
tetracoci.
Sunt nesporulate, imobile, homofermentative. Fermenteaz glucidele, iar acidul malic
numai la pH ridicat. Nu degradeaz acidul citric i tartric, din acest motiv nu sunt considerate
duntoare.
Prezint dou specii importante:
- Pediococcus cerevisiae;
- Pediococcus pentosacens.
Genul Leuconostoc
Cuprinde bacterii Gram (+), cu celule de form sferic, ovoid sau alungit, dispuse
sub forma unor iraguri de mrgele ca i streptococii.
Produc fermentaia malolactic numai n vinuri foarte acide, nesulfitate sau cu un
coninut redus de SO2.
Principalele specii:
- Leuconostoc gracile, este specia cea mai frecvent n vinuri. Descompune energic
acidul malic i n msur mai mic acidul citric.
- Leuconostoc oinos A, X, P.
Genul Lactobacillus
Grupeaz bacterii Gram (+) i cuprinde att specii homofermentative ct i specii
heterofermentative.
Specii homofermentative:
Lactobacillus plantarum se prezint sub form de bastonae scurte, izolate sau
grupate.
Lactobacillus casei, se prezint sub forma unor bacili lungi i subiri izolai sau
grupai.
Specii heterofermentative:
- Lactobacillus fructivorans;
- Lactobacillus hilgardii;
67
- Lactobacillus brevis.
BIBLIOGRAFIE
1.Anghel I., Toma M., Voica C., Cojocaru I. - Biologia i tehnologia drojdiilor, Vol. I 1989, Vol. II - 1991, Vol. III - 1993. Ed. Tehnic, Bucureti.
2. Buchanan R.E., Gibbons N.E. - Bergeys manual of determinative Bacteriology , Ed.
Wiliams.
3. Eliade Gh., Ghinea L., tefanic Gh. - Microbiologia solului, Ed. CERES, Bucureti,
1975.
4. Eliade Gh., Ghinea L., tefanic Gh. - Bazele biologice ale fertilitii solului. Ed. CERES,
Bucureti, 1983.
5. Hatman M. - Microbiologie - Lucrri practice, Universitatea Agronomic Iai - Centrul de
multiplicare, Iai, 1990.
6. Hatman M., Ulea E. - Microbiologie - Curs, Universitatea Agronomic Iai - Centrulde
multiplicare, Iai, 1993.
7. Kiss t., tefanic GH., Pasca Daniela, Drgan-Bularde Zborovschi, Crian R. Enzimologia mediului nconjurtor, Ed. CERES, Vol. I - 1991, Vol. II, 1993.
8. Mihescu Gh., Gavril L. - Biologia microorganismelor fixatoare de azot, Ed. CERES,
Bucureti, 1989.
9. Papacostea P. - Biologia solului. Ed. tiinific i Enciclopedic, Bucureti, 1976.
10. Zarnea Gh. - Tratat de microbiologie general, Ed. Academiei Romne, Bucureti, Vol. I
- 1983, Vol. II - 1984, Vol. III - 1986, Vol. IV - 1990,Vol.V - 1994.
68