Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
AMELIORARE A ARBORILOR
STRATEGIA DE AMELIORARE
Stabilete direciile i obiectivele principale de ameliorare a caracterelor i
nsuirilor cantitative i calitative ale unei specii, precum i performanele
generale dorite
Prin strategia de ameliorare antamat se are n vedere eficientizarea i optimizarea
procesului de ameliorare. Cercettorii stabilesc i utilizeaz n acest sens mijloace i inte de
ameliorare eficiente n cadrul programelor de ameliorare stabilite. A optimiza n acest caz nseamn
a adapta strategia i programul de ameliorare n funcie de:
- caracteristicile speciei, uneori a unui grup de populaii ale acesteia;
- structura i tipul variaiei genetice;
- modul de motenire a caracterelor importante,
pentru a obine cel mai mare beneficiu per unitatea de timp.
-
Obiectivele de ameliorare pot fi aceleai pentru toate subpopulaiile sau pot fi diferite pentru
unele dintre ele.
Motivaia unei astfel de strategii de ameliorare:
La arbori, pe parcursul ciclului lung de derulare a programelor de ameliorare pot surveni
modificri:
- mediogene, care influeneaz ctigul genetic preconizat iniial;
- privitoare la tehnologiile silvice;
- privitoare la obiectivele i prioritile de ameliorare a speciei respective
In felul acesta, MPBS permite:
- s se obin valori specifice fiecrei subpopulaii pentru ctigul genetic de ameliorare,
n funcie de condiiile staionale implicate n locul de derulare a experimentului;
- s se poat reorienta n timp programul de ameliorare pentru unele subpopulaii, ceea
ce presupune, totodat, cheltuieli mai mici, deoarece subpopulaiile de ameliorare sunt
alctuite dintr-un numr mai mic de exemplare dect n cazul unei populaii unice de
ameliorare;
- practicarea seleciei disruptive
Exemplu de aplicare a acestui concept:
Exemplu de strategie de ameliorare via MPBS pentru Pinus radiata, n Noua Zeeland:
= bazat pe constituirea a 7 subpopulaii de ameliorare;
Obiective de ameliorare urmrite:
1. Obinerea de creteri active i trunchiuri cu form bun (ameliorat)
2. Lemn cu rezisten mecanic mare, cherestea cu noduri mici i ramuri dispuse n unghi
mic fa de axul trunchiului
3. Internoduri moderate la lungi, creteri active
4. Creteri active, vtmri reduse provocate de Dothistroma, lemn dens
Obiectivele unei strategii i ale programului de ameliorare sunt de o mare diversitate, dar
acestea trebuie s asigure, n general:
un ctig genetic pe termen lung pentru cteva trsturi (caractere) de interes silvicultural,
comercial, tehnologic, adaptativ etc.;
meninerea unui nivel optim de diversitate genetic n populaia de ameliorare;
conservarea diversitii genetice a speciei respective;
suficient flexibilitate n schema programului de ameliorare pentru a face posibile
eventualele reorientri determinate de necesitatea incorporrii de noi tehnologii (de
exemplu, s permit folosirea la un moment dat a unor noi biotehnologii);
desfurarea cu eficien economic a tuturor activitilor din strategia de ameliorare astfel
nct s fie posibil recuperarea cheltuielilor n timp (prin comercializarea materialului de
reproducere ori prin asigurarea unui beneficiu echivalent n plan social).
Spre deosebire de ameliorarea multor plante de interes agricol, n cazul speciilor lemnoase
forestiere, ca urmare a derulrii adeseori a unui ciclu de ameliorare pe parcursul a ctorva
ani sau chiar decade, programele de ameliorare sunt mai greu de derulat iar costurile
acestora sunt mult mai mari.
(a) Inexistena posibil a unor studii anterioare care s cuantifice parametri implicai n
luarea deciziei, cum este eritabilitatea;
(b) Dificulti determinate de arealul i structura populaiilor de baz de plecare n primul
ciclu de ameliorare (a cror nivel de variabilitate este de multe ori necunoscut sau doar
aproximat);
(b) valori mici ale efectivelor populaiilor de ameliorare n cazurile alelelor comune
(frecvente) sau chiar pentru cele cu frecven intermediar
De exemplu:
dac q = 0.5 Ne = 6 la 18);
dac q = 0.25 la 0.5 Ne = 10 la 40;
dac q = 0.01 (alel rar) Ne = 300 la 1000
Propuneri pentru valor ale lui N (efectivul iniial de arbori recenzai n populaia de
ameliorare (pentru populaia de baz a unui program cu generaii avansate de
ameliorare) dup White et al., 2007
Sursa bibliografic
Specia
Programul
de
N
ameliorare
Eucalyptus globulus
CELBI Portugalia
300 Cotterill et al., 1989
Eucalyptus globulus
APM Australia
300 Cameron et al., 1989
Eucalyptus nitens
Eucalyptus regnans
Euclyptus grandis
ARACRUZ Brazilia
400 Camphinos i Ikemori, 1989
Eucalyptus urophylla
Picea abies
Suedia
1000 Rosvall et al., 1998
Picea glauca
Canda
450 Fowler, 1986
Picea mariana
Canada
400 Fowler, 1987
Pinus banksiana
SUA
400 Kang,1979
Canada
200 Klein, 1987
Pinis caribea
Australia
250 Kanowski i Nikles, 1989
Pinus elliottii
CFGRP SUA
900 White et al., 1993
CFGRP SUA
360 White et al., 2003
WGFTIP- SUA
800 Lowe i van Buijtenen, 1986
Pinus radiata
STBA- Australia
300 White et al., 1999
FRI- Noua Zeeland
350 Shelbourne et al., 1986
Pinus taeda
NCSU- SUA
160 McKeand i Bridgwater,
WGFTIP- SUA
800 1998
Lowe i van Buijtenen, 1986
Populus tremuloides
Canada
150 Li, 1995
Pseudotsuga menziesii
BC- Canada
350 Heanan, 1986
Salix spp.
SLU- Suedia
200 Gullberg, 1993
Tsuga heterophylla
SUA i Canada
150 King i Cartwright, 1995
Concluzie: Dei n unele situaii Ne pare a fi suficient la valori de 20 40, nu se
recomand astfel de valori ca urmare a faptului c n generaii succesive de ameliorare se
ajunge la consangvinizare ridicat. De aceea, n general, mrimea populaiei pare a fi
asiguratoare la valori de 300 400. Pentru alele rare sunt necesare efective mai mari ale
populaiei de ameliorare, de circa 1000 exemplare
b. Program de ameliorare cu populaii multiple (de exemplu, trei subpopulaii MP1, MP2 i MP3 - de mrimi diferite)
PROGRAME DE AMELIORARE
Programul de ameliorare stabilete modul concret de obinerere a materialului genetic
ameliorat, presupunnd:
-
Prima decizie care trebuie luat este de a alege specia sau speciile de utilizat n crearea
plantaiilor, n funcie de condiiile de mediu din arealul respectiv. Abia apoi se trece la
elaborarea programului de ameliorare.
Activitile centrale ale unui ciclu de inmulire sunt: selecia i imperecherea. Ciclul este
recurent, n sensul c urmtorul ciclu ncepe dup ce cel anterior a fost finalizat.
Numrul de ani ntre etapele de selcie din dou cicluri succesive poart denumirea de ciclu
sau intervalul dintre generaiile de ameliorare.
Selecia asupra descendenilor din prima generaie de ameliorare este denumit selecia
generaiei secunde.
Populaia de baz
Populaia de baz a unui anumit ciclu de ameliorare conine toi arborii utili care ar putea fi
selectai. Populaiile de baz mari pot conine chiar cteva mii de arbori cu genotip distinct. La
iniierea unui program de ameliorare, populaia de baz conine arbori selectai din arborete
naturale sau, posibil, din plantaii din zona de mperechere.
Zona de mperechere include setul de ecosisteme din arealul pentru care se va produce
varietatea ameliorat genetic.
Populaia de baz a primului ciclu de ameliorare pentru specii exotice presupune adeseori
selecie n:
1. Arealul natural al speciei;
2. Rasele locale constituite n plantaii existente n ara n care se deruleaz programul de
ameliorare;
3. Culturile comparative din ara n care se deruleaz programul sau din alte ri
Populaia selectat
Fiecare ciclu al ciclului de mperechere ncepe cu selecia exemplarelor din populaia de
baz. n cele mai multe cazuri, din populaia de baz vor fi selectai, rezultnd populaia selectat,
ntre 100 i 1000 de arbori din zona de mperechere.
n primul ciclu de ameliorare, arborii sunt selectai din populaia de baz numai dup
caracterele lor fenotipice superioare aparente = selecie n mas.
Generaiile avansate de populaii de baz se constituie pe baz de pedigree, prin selecia
progeniturilor - candidat cu nsuiri superioare.
n fiecare ciclu, populaia selectat conine adesea cteva sute de exemplare, ceea ce
conduce la modificarea frecvenei alelelor fa de populaia de baz.
Populaia de nmulire
De regul, nu sunt inclui n imperecheai toi arborii din populaia selectat. Cei care sunt
utilizai efectiv pentru a fi mperecheai formeaz populaia de nmulire. Aceast regul poate fi
neleas din urmtoarea perspectiv: din mperecherea ntre doi genitori rezult i descendeni mai
puin valoroi, care nu justific a fi folosii n continuare la mperecheri n vederea obinerii
varietilor ameliorate.
Dac toi arborii populaiei selectate s-ar folosi ca genitori pentru a crea descendenii pentru
urmtoarea populaie de baz (ciclul urmtor), atunci populaia de nmulire viitoare ar fi identic cu
precedenta, ceea ce nu ar asigura progresul genetic.
Populaia de propagare
Este populaia care asigur multiplicarea varietii genetice ameliorate create n cadrul
ciclului de ameliorare. Mai este denumit populaie de difuzare.
Un exemplu de populaie de propagare este o livad semincer
Testarea genetic
Testele se fac adeseori n locaii n diferite condiii staionale n pdure, dar se pot
efectua testri i n pepiniere, sere, camere de cretere etc.
Testrile urmresc:
a. Evaluarea calitii genetice a materialului obinut dup un ciclu de ameliorare;
(1)
-
n care:
GC = H2 S = i H2 P ,
GA = h2 S = i h2 P ,
n care:
1.
2.
3.
4.
Ciclul presupune:
Selecie n populaia generaiei k i mperecheri controlate rezultnd familii full-sib;
Aceste familii sunt plantate n culturi comparative care vor forma populaia de baz a
generaiei k+1;
Selecia arborilor superiori din familiile valoroase, rezultnd populaia de mperechere a
generaiei k+1;
Din aceste mperecheri va rezulta populaia de baz a generaiei k+2
Familiile full-sib sunt mai valoroase dect polenizarea liber deoarece:
a. Se poate realiza un control total de pedigree;
b. Se obine ctig genetic mai mare per ciclu de ameliorare;
c. Se pot identifica familiile care au capacitate specific de combinare (CSC) pozitiv;
d. Se pot capta, de asemenea, efectele genetice aditive asociate cu CGC
culturi comparative create la intervale de cte trei ani). n aceste culturi comparative s-au
efectuat msurtori la vrsta de 4, 8 i 12 ani, vrste care reprezint 17%, 33% i
respectiv 50% din rotaia stabilit = 24 ani).
6. Generaia avansat de ameliorare este acum la al treilea ciclu.
7. Infuzia de noi materiale: s-au introdus peste 3000 de noi arbori selectai n populaii
neameliorate
B.
Figura 149 - Program de ameliorare a arborilor n SUA (Carolina de Nord) bazat pe producerea de
varieti sintetice, cu practicarea seleciei recurente i constituirea de generaii
avansate de livezi semincere
C.
Fig.143 - Strategia i etapele programului de ameliorare n vederea crerii de varieti sintetice: S semine pentru mpduriri i rempaduriri; B - butai, - var.mul. - varietti multiclonale; A- arbori plus;
Liv.sem.s.prov. - livad semincer din semine de proveniene; A surse sem. - arborete surse de semine
(dup
D.
SELECIA
fenotipic
genotipic
individual
n mas
de proveniene, de familii full-sib sau half-sib, de clone etc.
Selecia fenotipic:
selecia arborilor superiori la aplicarea operaiunilor culturale i a tratamentelor
arbori i arborete surse identificate pentru recoltarea seminelor
rezervaii de semine netestate
livezi semincere netestate
selecia varietilor hibride i clonale netestate
i = h2i (yi - ),
n care:
i este valoarea genetic prezumat pentru arborele i;
h2i reprezint eritabilitatea adecvat arborelui i (se poate modifica pentru arborii msurai n
staiuni diferite);
yi este valoarea msurat pentru caracterul analizat la arborele i;
este media valorii respective la arborii msurai n diferite condiii staionale
Toate aceste calcule sunt efectuate cu un pachet informatic specific.
(4) Calcularea indicelui de selecie (criteriului de selecie) pentru fiecare arbore.
Dac sunt 1000 de arbori candidai pentru selecie i la fiecare arbore se msoar dou
caractere fenotipice 2000 de valori genetice de prezumat.
Pentru cele dou caractere trebuie indicat importana fiecruia, prin atribuirea unei
valori relative w (de exemplu = w2 = 0.5 pentru fiecare, dac se consider c sunt la
fel de importante cele dou caractere). Rezult:
Ii = w1 i1 + w2 i2 n care:
Ii este indexul de selecie pentru arborele i;
w1 i w2 sunt ponderile atribuite caracterelor msurate la fiecare arbore;
i1 i i2 sunt valorile genetice prezumate pentru cele dou caractere
n care:
n care:
Intensitaea seleciei
a.
b.
2.
Cu ct este mai mare, cu att ctigul genetic are valoare mai mare.
Cu ct crete numrul de caractere dup care se face selecia simultan, intensitatea
seleciei pentru fiecare caracter scade. De aceea, nu este eficient ameliorarea simultan
pentru mai mult de 3 la 5 caractere.
Eritabilitatea.
a.
Amelioratorii pot exercita influene mai mari asupra intensitii de selecie dect a
eritabilitii.
b. Ctigul genetic este direct proporional cu mrimea eritabilitii
3.
Deviaia (abaterea) standard.
Influeneaz, de asemenea, direct mrimea ctigului genetic. Selecia n populaii cu
variabilitate mare este mai profitabil dect n populaii care tind spre uniformitate.
n care:
w1, w2, ...wm reprezint ponderea economic (ori social) dat fiecrui caracter (ponderile
nsumate = 1);
A1i, A2i... A2i reprezint valoarea genetic pentru fiecare caracter
SELECIA GENOTIPIC:
= selecia pe baza informaiilor din populaii de evaluare (testare)
Parametri genetici statistici care se determin n populaiile de evaluare:
- valorile medii ale caracterelor i nsuirilor; variana caracterelor i nsuirilor cantitative i
calitative;componentele varianei; abaterile standard;coeficienii de variaie;
- eritabilitatea caracterelor;
- corelaii ntre diverse caractere;
- interaciunea genotip x mediu;
- corelaii juvenil adult;
- clasamentul unitilor testate (populaii, clone, varieti hibride etc.)
*Selecia concomitent:
= posibil pentru caractere corelate (determinate de gene
linkate sau pleiotrope)
De exemplu, selecia n tandem practicabil la rinoase n
vederea obinerii de biotipuri cu numr redus de ramuri n
verticil i cretere activ
necesitatea stabilirii de indici de selecie separai, pentru
fiecare caracter urmrit
Selecia recurent:
Tipuri:
a. Simpl = selecia fenotipurilor valoroase i ncruciarea ori multiplicarea vegetativ a
acestora fr restricii
Modalitatea de desfurare a seleciei recurente : I obinerea de informaii; E evaluarea i selecia celor mai
bune genotipuri; P incruciarea celor mai bune genotipuri pentru generarea unui nou ciclu de selecie; Xn
media caracterului n populaia de evaluare n; Xn+1 media populaiei de evaluare n generaia n+1; diferena
ntre Xn i Xn+1 red ctigul genetic pentru ciclul respeciv de selecie ( dup
2.
* Selecia clonal
numai pentru zona de sud-est a SUA; aceste livezi produc semine care asigur instalarea anual a
700 ha plantaii = 90 % din suprafaa anual de rempdurire din zona respectiv).
Avantajele LSC fa de LSDS constau n:
1.
Materialul vegetal din arborii selecionai este uor de obinut i de propagat prin
altoire, butire sau culturi de esuturi;
2.
Se grbete procesul de nflorire i fructificaie;
3.
Livada se folosete numai pentru producerea de semine genetic ameliorate, fr a
funciona i ca test, ca in cazul celor obinute pe cale sexuat
Arborii selectai n teren poart denumirea de ortei; descendenii vegetativi ai acestora se
numesc ramei. mpreun formeaz o clon. In mod obinuit, o livad semincer cuprinde
ntre 20 i 60 de clone.
Valoarea fenotipic a arborilor n livada semincer nu prezint importan, deoarece
evaluarea acestora se face n culturi comparative.
Design-ul genetic al livezilor semincere clonale:
Trebuie s asigure ctig genetic maxim, dar i meninerea unui nivel ridicat de
diversitate genetic.
Prima generaie de livad semincer trebuie s porneasc de la un numr mare de clone
(s zicem 60), ca urmare a lipsei de date din teste de evaluare. Prin selecia celor mai bune
clone (realizat n culturile cu rol de testare), n generaiile avansate de LSC numrul
clonelor scade.
Livezile semincere rezultate din clone evaluate n prima generaie de culturi
comparative sunt denumite livezi testate sau livezi generaia 1,5 ( generaia 1,5 este prima
generaie de ameliorare, respectiv generaia 2,5 este cea rezultat dac livada rezult prin
testarea generaiei secunde de selecie anterior instalrii livezii).
n generaiile avansate de livezi semincere se pot utiliza clone din diferite generaii
(prini din generaia anterioar mpreun cu descendeni ai acestora).
-
EXEMPLE:
Modul de stabilire a legturii dintre o gen marker cu dou alele (M1 i M2) i un locus
genic responsabil pentru o caracteristic cantitativ, momentul formrii mugurilor, cu
cele dou alele QTL1 i QTL2. Primul genitor parental prezint nmugurire timpurie i este homozigot
pentru alelele M1 i respectiv QTL1, iar al doilea genitor parental manifest nmugurire trzie i este homozigot
pentru alelele M2 i respectiv QTL2. Descendena dintre acetia este dublu heterozigot (QTL1/QTL2,
respectiv M1/M2). n acest exemplu se presupune c momentul formrii mugurilor este o caracteristic
cantitativ (dup E r i k s s o n et E k b e r g, 2001)
Selecia asistat de markeri genetici pe baza QTL este o form de selcie indirect, deoarece
caracterul cantitativ urmrit spre a fi ameliorat (denumit carcter int) se identific la arbori
valoroi prin intermediul analizelor genetice moleculare.
n figura urmtoare se poate observa modalitatea de aplicare a seleciei indirecte cu
markeri n linkage cu QTL, prin utilizare de SNP-uri (SNP = single nucleotide polymorphisms).
n exemplul dat se observ c alelele marker A1 i B1 la arborele 2 nu conduc la un fenotip cu
dimensiuni mari.
Gy = gray = 1 J/Kg
Programele de ameliorare a arborilor prin
mutagenez = bazate preponderent pe provocarea
Poliploidia poate fi indus prin folosirea unor ageni mutageni chimici, cum sunt colchicina
(alcaloid extras din Colchicum autumnale) i pedofilina (obinut din Podophyllum peltatum)
La arbori, primii poliploizi artificiali (triploizi) au fost obinui la pinul silvestru, n anul 1939,
prin metoda colchicinizrii
rata cea mai mare de cretere n diametru pentru tetraploidul Salix alba, recomandat
petru crearea de culturi cu ciclu scurt de producie( 5-6 ani)
In zona rivier a Donului au fost identificate exemplare mixoploide de Populus x canescens =
P. alba var. nivea x P. tremula, cu celulele n marea lor majoritate triploide, cu toleran mare
fa de solurile srace
- structura florilor;
Metodele de hibridare:
A. Dup gradul de nrudire al genitorilor:
- hibridare apropiat, care include hibridrile intraspecifice ntre rase, forme, varieti
sau biotipuri;
- hibridare ndeprtat, care se realizeaz la nivel interspecific (mai nti trebuie
determinat compatibilitatea de interfecundare ntre speciile implicate; se poate face: i. prin
testarea efectiv a compatbilitii de mperechere; ii. prin antecedente de hibridare realizate
n alte programe de ameliorare; iii. prin observaii privind existena/absena hibridrilor
spontane )
Hibridare simpl( A x B)
Hibridare dubl: (A x B) x (C x D)
A x B; A x C; A x D; A x E
* Hibridarea dilael
Genitori
P1 P7 P66 P67 N39 N40 N41 N42
P1
- x x x x x x x
P7
x - x x x x x x
P66
x x - x x x x x
P67
x x x - x x x x
N39
x x x x x x x
N40
x x x x x x x
N41
x x x x x x x
N42
x x x x x x x x - ncrucisari efectuate
Numarul combinatiilor posibile n cazul unui test dialel complet fara autofecundare este dat de
relatia n(n-1), n care n este numarul genitorilor. Pentru exemplu de mai sus rezulta 8 x 7 = 56
combinatii.
Pollen was harvested from this American chestnut graft in Joe Schibig's orchard in Sumner
County, TN and was used to pollinate a TACF mother tree at Meadowview VA
Hybrid between Pinus elliottii and Pinus palustris in a test plantation at Olustee, Florida.
The tree was photographed at the beginning of the ninth growing season, its height being 7
meters, and the d.b.h. 13.5 centimeters. - Courtesy, U.S. Forest Service
Fr ndoial ns, c cele mai multe hibridri s-au realizat pn n prezent ntre speciile genului Pinus.
Astfel, conform estimrilor fcute de Critchfield (1975), n ultimii 75 de ani au fost obinui 95 hibrizi
interspecifici, totaliznd circa 4 500 combinaii realizate ntre 95-100 de specii din totalul de 105 existente n
flora actual (M a n, 1996).
Obiectivele generale urmrite prin programele de hibridare, la pini, au constat n obinerea efectului de
heterozis sau captarea unor gene valoroase.
Lucrrile de hibridare la pini au debutat n ara noastr n anul 1954. Pn n anul 1956 au fost obinute
26 combinaii hibridogene ntre P. sylvestris (component matern) i P. nigra, P. contorta, P. murrayana,
P. banksiana, P. ponderosa i P. jeffreyi (componente paterne). n general, rezultatele hibridrilor din
aceast perioad nu au fost suficient de concludene.
Ulterior, s-au ntreprins noi experimentri, demne de consemnat fiind cele din programul instituit n anul
1978 i condus de I. Blada, n cadrul Institutului de Cercetri i Amenajri Silvice I.C.A.S., avnd ca
obiectiv ameliorarea rezistenei la Cronartium ribicola. Pe lng faptul c prin acest program s-au obinut
rezultate bune n privina ameliorrii rezistenei pinilor cu 5 ace fa de duntorul amintit, s-au realizat i
combinaii hibridogene cu heterozis somatic i, totodat, s-au produs, n premier, hibridri ntre P. cembra
i P. griffithii, respectiv P. cembra i P. monticola.
Polenizrile controlate efectuate la pini n ultimele 5 decenii, n ara noastr, s-au soldat cu obinerea a 27
hibrizi interspecifici i a 6 hibrizi intraspecifici, cu un total de 58 combinaii (tabelul 80).
La genul Picea, capacitatea de hibridare interspecific a fost testat n experimente realizate n SUA,
Suedia, Germania, n rile din fosta URSS i fosta Iugoslavie .a. Din aceste experimente s-a tras concluzia
c posibilitile de hibridare depind de gradul de nrudire morfologic i proximitatea ariilor naturale. Din
cele circa 70 de ncruciri interspecifice ncercate, numai 16 au prezentat o reuit net, 42 au euat, iar 12
au dat rezultate nesigure.
27
28
29
30
31
32
33
P. ponderosa var.
scopulorum x P. rigida
Hibrizi intraspecifici
P. griffithii x P. griffithii
P. sylvestris x P. sylvestris
P. nigra var. austriaca x P.
nigra var. austriaca
P. densiflora x P. densiflora
P. contorta x P. contorta
var. latifolia
P. jeffreyi x P. jeffreyi
2
1
2
4
1
1
1
Ameliorarea plopilor:
P. x canadensis cv. Serotina (P. nigra x P. deltoides) - hibrid de sex mascul, P. x c. cv. Robusta
(P. nigra var. plantierensis x P. angulata) - de sex mascul, P. x c. cv. Regenerata (P. Serotina x
P. nigra) - de sex femel, P. x c. cv. Eugenei (P. n. cv. Italica x P. Regenerata) - de sex mascul.
Principalele cultivare admise n prezent n cultur, n ara noastr, sunt: cv. Serotina (clonele
R1, R3, R4), cv. Robusta (clonele R13, R18, R20, Oltenia, i, ndeosebi, clona R16), cv. Sacrau
(clonele 59 i 79), cv. Italia (clonele I214, I45/51, I45/55, I69/55), cv. Deltoides 227, cv.
Regenerata, cv. Cetate, cv. Arge, cv. Marilandica, cv. Jacometti (clonele 107, 307), cv.
Toropogriki, .a.
Ameliorarea slciilor:
Hibrizi de Salix fragilis x S. matsudana .a.
Ameliorarea molizilor:
Hibridri interspecifice, la molid, n ara noastr, au fost fcute ncepnd din anul 1966 (B e n e
a et al, 1975), obinndu-se 9 combinaii cu 6 specii, ns, hibrizii rezultai nu au dovedit n testul
de pepinier superioritate fa de prini, n privina creterilor. n cadrul acestui experiment, spre
exemplu, s-au obinut hibrizi ntre: P. abies x P. obovata, P. abies x P. sitchensis, P. abies x P.
koyamai, P. abies x P. omorika, P. abies x P. orientalis .a.
La molid s-au ntreprins i hibridri intraspecifice, ntre rase, proveniene sau varieti. Astfel,
fenomenul de heterozis a fost dovedit la hibrizii rezultai din ncruciarea ntre rasa nordic i cea
sudic.
n ara noastr, n ultimul timp s-au fcut polenizri controlate de ctre Gh. Prnu, ntre
ideotipul de molid cu coroan ngust (Picea abies var. columnaris) i tipul comun (Picea abies var.
pyramidalis), experiment din care ar putea s fie deduse n viitor unele concluzii utile n domeniile
cunoaterii i gospodririi arboretelor de molid.
**Poate
1.
Selecia arborilor cu genotip superior. In acest sens este indicat s fie clonai
arbori elit sau superelit obinui prin selecie recurent, testai n culturi
comparative, precum i hibrizi intra sau interspecifici care se dovedesc
purttori de heterozis somatic, adaptiv i/sau reproductiv
2.
Vrsta plantei donatoare are un rol foarte important n reuita multiplicrii in vitro.
EXEMPLU: LA DUGLAS = proces facil de multiplicare in vitro a explantelor recoltate de la
puiei de pn la 5 ani, respectiv din ce n ce mai dificil dup 10 ani
3.
Sterilizarea explantelor i a mediului de cultur.
Explantele i mediul de cultur prezint o compoziie chimic ce devine favorabil instalrii
florei bacteriene i fungice, motiv pentru care operaia de izolare i sterilizare este obligatorie,
pentru reuita culturii in vitro.
4. Izolarea i inocularea explantelor Explantele trebuie s fie de dimensiuni adecvate
procedeului de multiplicare in vitro utilizat. Totodat, s-a constatat c celulele "traumatizate"
prin secionare reacioneaz ulterior pozitiv, declannd diviziunile cu rol de cretere a
explantului
5.
6.
7.
L u c u D n i l et
Mediile de cultur in vitro trebuie, n primul rnd, s asigure supravieuirea explantului (deci
s nu fie toxice) i, n al doilea rnd, s fac posibil inducerea diviziunilor, proliferarea i
citodiferenierea celular.
In compoziia mediilor de cultur intr trei categorii de componente: -nutritive;
- reglatoare de cretere;
- stabilizatoare.
Componentele nutritive sunt reprezentate de:
- ELEMENTE MINERALE (macroelemente i microelemente) - ELEMENTE ORGANICE
(surse organice de carbon i de azot, vitamine, aminoacizi etc.).
Componentele reglatoare de cretere sunt reprezentate de: - fitohormoni (auxine,
ciotochinine, gibereline);
- diverse substane reglatoare (etilen .a.).
Componentele stabilizatoare. Mediul de dispersie pentru componentele necesare
mediului de cultur in vitro este apa. Stabilizatorii necesari sunt reprezentai de:
- substane antioxidante;
- substane absorbante (obinuit se folosete crbune activ);
- stabilizatori osmotici i de pH etc.
Mediile de cultur pot fi solide (pe suport de agar) sau lichide. Acestea din urm sunt utilizate
pe scar larg n prezent
n funcie de concentraia molar total se difereniaz medii de cultur:
- concentrate (36-50 mM);
- mediu concentrate (26-35 mM);
- diluate (7-25 mM).
Literatura de specialitate recent recomand utilizarea mediilor de cultur mai diluate,
dei la arbori au dat rezultate mulumitoare i mediile concentrate.
** IMPLICAII ALE
SOMATIC IN VITRO:
METODEI
DE
AMELIORARE
PRIN
MULTIPLICARE
Costurile determinate de tehnologia implicat i cheltuielile materiale sunt mari, fiind de 310 ori mai ridicate dect cele presupuse de obinerea variatilor sintetice n livezi
semincere;
A se observa vitroplante
plagiotrope
Ingustarea diversitii genetice a culturilor astfel create, care sunt mult mai vulnerabile fa
de aciunile diverilor factori restrictivi de natur biotic sau abiotic.
Cultura de antere este cel mai frecvent procedeu de androgenez (figura 152). Recoltarea anterelor
se face, de obicei, n momentul n care microsporii sunt uninucleai sau n timpul primei mitoze
polinice
celulelor
- Surse posibile de celule "competente" pentru obinerea de protoplati i plante in vitro (dup B r e z
e a n u et al., 1988- din L u c u D n i l et L u c u D n i l , 1998)
REALIZRI LA ARBORI:
Primii protoplati fuzionai ntre celule somatice prelevate de
la specii diferite de arbori au fost obinui ntre Paulownia
taiwaniana i Populus sp. De asemenea, s-a reuit regenerarea
de plante ntregi la specii din genul Citrus (V a r d i et al. 1982),
la Populus tremula, Populus alba x P. grandidentata i Populus
nigra Betulifolia x P. Trichocarpa
- la Pinus pinaster i Pseudotsuga menzienii s-au izolat
protoplati cu rezultate foarte bune utiliznd cotiledoane;
- s-au obinut culturi celulare i clone libere de viroze, dar
nu imune, la specii din genurile Juniperus, Populus,
Pinus, Malus .a.;
- regenerarea de calus din protoplati de Alnus incana
izolai din culturi de celule n suspensie;
- formarea de calus din protoplati izolai din celule de
mezofil, la Populus sp.;
- regenerarea de calus din protoplati de Sorbus aucuparia;
- la noi n ar, n cadrul ICAS s-au realizat experimentri
pentru obinerea i fuzionarea protoplatilor la ulmul de
Turkestan, ulmul de munte, salcm, stejar pedunculat etc
Modaliti de obinere a plantelor transgenice prin ncorporare de material genetic exogen (dup
R o u, 1988 din L u c u- D n i l et L u c u- D n i l , 1998)
ETAPE DE LUCRU:
a) Izolarea vectorului. Gena inclus n ADN-ul vectorului
va fi protejat de aciunea DN-azelor celulare digestive.
Figura 158
L u c u D n i l et L u c u D n i l , 1998)