Universitarea de Medicin i Farmacie Carol Davila Bucureti

Facultatea de Farmacie
MEDICAMENTE RADIOFARMACEUTICE

Referat
Utilizarea medical a

99m

Tc . Mecanisme

moleculare de captare sau fixare a

radiotrasorilor la nivelul structurilor int.

Student :
Badea Alexandru Marian
Anul 3, grupa 2;

Mai 2014

Page 1

Introducere
Dintre toate domeniile imagisticii medicale, Medicina Nuclear a avut evoluia cea mai
surprinztoare. n medicin, radionuclizii sunt folosii n diagnostic, tratament i cercetare.
Trasorii radioactivi care emit radiaii gama pot oferi informaii diagnostice despre anatomia i
funcionarea diverselor organe. Acetia sunt folosii n tomografii (single photon emission,
computer tomography, PET scanning). Radioizotopii, att cei gama ct i cei beta emitori, au
devenit de asemenea o metod promitoare n tratamentul unor forme tumorale.
Ramura medicinei care folosete substane radioactive n scop diagnostic i terapeutic se
numete Medicin Nuclear. Substanele utilizate sunt n general, substane farmaceutice marcate
cu radioizotopi, purtnd numele de radiofarmaceutice. n diagnostic, substanele radioactive se
administreaz pacientului i msoar radiaia emis. Majoritatea testelor diagnostice utilizeaz
pentru obinerea imaginilor o camer pentru detecia radiaiilor gama. n acest caz, imagistica
mai este cunoscut i sub numele de scintigrafie nuclear. n terapie, radioizotopii sunt
administrai pentru tratamentul anumitor boli.
Radiofarmaceuticele au dou mari componente:

radionuclidul

compusul farmaceutic ( molecula vectoare) .

Radionuclidul este important pentru detecie sau pentru a elibera o anumit doz de radiaie, iar
preparatul farmaceutic dicteaz biodistribuia i localizarea in vivo.
Pentru explorri radioizotopice este posibil s se observe distribuia unei funcii
regionale, care sa ofere imaginea n structur a unui organ sau leziune. Radionuclizii furnizeaz
doctorului abilitatea de a privi n corpul uman, i de a observa esuturi i organe. Unii compui
chimici se concentreaz n mod natural n organe/ esuturi specifice din corp, astfel, aceti
radionuclizi pot fi folosii ca trasori.
Un trasor radioactiv este chimic ataat unui compus care se va concentra n mod natural
ntr-un organ sau esut. Procesul de ataare a unui radioizotop la un compus chimic se numete

Mai 2014

Page 2

marcare. Astfel, pentru a detecta problemele din interiorul unui organ, medicii folosesc aceste
radiofarmaceutice sau medicamente radioactive.

Date de chimie-fizic asupra unor radionuclizi i molecule vectoare:

Tecnhneiul 99m i trasorii techneiai
Perrier i Sagre descoper n anul 1937 elementul cu numrul atomic 43, rezultat din
bombardamentul cu deutroni al molibdenului. Numele de Techneiu a fost atribuit de ctre
Paneth, din greac, din grecescul tekhnetos=artificial, de la techne=art manual, meserie,
consemnnd faptul c era primul element artificial produs de ctre om.
Izotopii techneiului sunt numeroi , de la 90Tc la 110Tc, nu mai puini de 21. Izotopii 90,
91, 93, 94, 95, 96, 97, 99 i 102 prezint i forme metastabile, notate cu m[75].
1. Techneiul, date de chimie-fizic
Se prezint sub mai multe stri de oxidare, dintre care cele mai stabile sunt 7, 4 i 3 n
prezena apei,celelalte grade de oxidare fiind stabile doar n prezena liganzilor, alii dect apa .
n faz apoas i la potenial nalt, forma stabil a techneiului este reprezentat de ionul
-

pertechnetat, TcO4 . La valoarea de 7,4 a pH-ului ( fiziologic) Tc liber n prezena oxigenului

-

va forma ionul pertechnetat, TcO4 .

Formele reduse ale Tc trebuie cuplate cu liganzi pentru administrare in vivo, absena
ligandului conduce n cursul reducerii ionului pertechnetat n faz apoas la specii cationice care
se transform rapid n TcO2 sau n forme hidroxilate.
n practic exist 2 metode dee sintez a compuilor techneiai [75] :

Metoda direct : pertechnetatul este redus n prezena ligandului .

Metoda indirect , cea mai frecvent, sinteza complexului se realizeaz ntr-o

prim etap ca i metoda direct, iar apoi de efectueaz un schimb de ligand.

Mai 2014

Page 3

2. Techneiul n oncologie:
Techneiul este radiofarmaceuticul ideal ( emisie de 140 keV, T1/2=6 ore), cel mai
utilizat n laboratoarele de medicin nuclear.
Principalele indicaii ale compuilor techneieni :

Scintigrafia glandelor salivare, scintigrafia tiroidei

Evaluarea viabilitii miocardului

Scintimamografia

Scintigrafia renal

Scintigrafia pulmonar (perfuzie pulmonar)

Explorrile cerebrale

Scintigrafia hepato-splenic

Limfoscintigrafia
n imagistica nuclear oncologic dou radiofarmaceutice (compui techneiai ) sunt mai

utilizate:

99m

Tc-acid dimercaptosuccinic( DMSA) pentru cancerul medular tiroidian- i, da

dat mai recent, 99mTc-citrat. Pentru evidenierea metastazelor de la un cancer medular tiroidian
se mai utilizeaz, n practic, i 99mTc-MIBI.
Rolul 99mTc-sestamibi i 99mTc-tetrofosmin este deja stabilit n obinerea imagonilor
neoplasmelor mamare, la pacientele cu rezultate mamografice neconcludente. Pentru
neoplasmele cerebrale se 99mTc-HMPAO.
A fost descris deja faptul c diferii cationi lipofilici (ca 99mTc-sestamibi i 99mTctetrofosmin) pot bloca aciunea glicoproteinei-P, protein care se pare c este responsabil de
transportul diferitelor substane citotoxice afar din celule .

3. Progrese recente privind derivaii techneiai:

Cercetrile recente se refer la procesele realizate n sinteza de noi molecule vectoare
marcate cu 99mTc. Acestea pot fi grupate n:
Anticorpi sau fragmente de anticorpi; este vorba ndeosebi de 99mTc-anti-CEA MoAb
pentru neoplasmul de colon, 99mTc-anti-CD15 pentru diagnosticul apendicitelor
Mai 2014

Page 4

echivoce, 99mTc-anti-PSA n neoplasmul de prostat i 99mTc-antigranulocit Mab n

imagistica infecioas.
Peptide : este cunoscut faptul c tumorile exprim n cantitate crescut la suprafaa
celulelor receptori pentru peptide, marcarea cu 99mTc a diferitelor peptide se afl n
stadiu de cercetare.
Steroizi; pentru vizualizarea tumorilor care exprim receptori pentru estrogeni, dar i
pentru progesteron.
Alte molecule mici, se refer mai ales la intirea neuroreceptorilor cu ajutorul
compuilor techneiai. Radiofarmaceuticele trebuie s ndeplineasc o serie de
criterii, printre care : greutate molecular favorabil traversrii barierei hematoencefalice, lipofilie adecvat, nalt specificitate pentru receptorii studiai. Drept
exemplu: 99mTc-TRODAT-1, pentru studiul transportorilor dopaminergici.

Mecanisme moleculare de captare sau fixare a radiotrasorilor la nivelul

structurilor int

Studile experimentale efectuate de ctre diverse grupuri de cercettori au drept scop

descoperirea ct mai n detaliu a mecanismelor de captare a radiofarmaceuticelor, pentru
gasirea de noi radiofarmaceutice ct mai specifice. Uneori captarea n diferite organe a fost
observat ntmpltor, cum este cazul taliului 201 utilizat iniial n cardiologia nuclear; la unii
pacieni radioizotopul se fixa i n alte esuturi dect n miocard, esuturi diagnosticate ulterior ca
fiind de natur neoplazic.
Radiofarmaceuticul poate fi un atom:
Singur ( 201Tl,

123

I)

Legat de o molecul ( 99mTc-difosfonat )

Legat de un hormon ( 111In-somatostatin)
Legat de un anticorp ( 99mTc-antiCEA)
Mai 2014

Page 5

Legat de o particul ( 99mTc-macroagregate)

Este evident faptul c mecanismele de captare i fixare ale radiofarmaceuticelor depind
pe de o parte de proprietile fizico-chimice ale radioizotopilor (atunci cnd este vorba de
molecule singure ) sau dimpotriv, sunt n funcie de particularitile moleculei vectoare pe care
o marcheaz.
Exist o clasificare a mecanismelor de captare a radiofarmaceuticelor n celulele
transformate malign :
n funcie de lipofilie i de potenialul redox ( 99mTc-HMPAO )
Legare specific i difuziune simpl ( 99mTc-sestamibi i 99mTc-tetrofosmin )
Transport activ (131I n tiroid i

201

Tl n tumori)

Difuziune facilitat (123I-metiltirozina)

TECNEIU 99m- MIBI

1. Distribuie n organism:
99m

Tc-hexa-2-metoxiizobutilizonitril ( 99mTc-sestamibi sau 99mTc-MIBI ) este un

radiofarmaceutic lipofil, un complex cationic, sintetizat iniial ca o alternativ pentru 201Tl pentru
realizarea scintigrafiilor miocardice.
Comparativ cu 201Tl ,

99m

Tc-MIBI prezint o captare cardiac mai redus ( 2 %),

rmnnd ulterior fixat la nivelul miocardului. MIBI se elimin rapid din snge localizndu-se la
nivelul muchilor scheletici, ficat i rinichi ; radiotrasorul se va elimina apoi prin sistemul biliar
i intestine ( 36,9 % din activitatea injectat se gsete n scaun dup primele 48 de ore), precum
i pe cale renal: n primele 24 de ore se elimin 29,5% din activitatea injectat n repaus i
24,1% din cea injectat la efort.
Dup injectare intravenoas in bolus, radioactivitatea descrete de manier exponenial,
att n repaus ct i la efort. Raportul de fixare inim/ficat este mai mare la efort dect la repaus,
raportul de fixare inim/plmni este n general mai mare de 2.

Mai 2014

Page 6

n repaus, contrastul la cteva minute de la injectare este suficient pentru vizualizarea

cordului, ameliorndu-se n timp pentru a atinge maximum la 3 ore (timpul optim de realizare a
imaginii este de o or, din cauza descreterii radioactive a Tc. ). La efort, contrastul
inim/plmni este mai bine exprimat dect la repaus, imaginea putnd fi realizat ncepnd din
prima jumtate de or.
n cazul mamografiilor neconcludente ( cazurile ndeosebi de sni deni mamografic)
scintimamografia cu 99mTc-MIBI poate fi extrem de util; unii autori au experimentat ca
radiotrasor i 99mTc-tetrofosmin.

2. Studiul mecanismelor de captare n celul

Mai multe grupuri de cercettori au ncercat s explice mecanismele prin care sestamibi
ptrunde n celulele canceroase. Iniial, s-au referit la legarea specific a 99mTc-sestamibi de
proteine membranare, ipotez infirmat ulterior , demonstrndu-se c de fapt proteinele erau
resturi mitocondriale intramembranare rezultate din cauza limitelor tehnicilor utilizate.

Fig. 1. Principalele tipuri de mecanisme

de captare intracelular a
medicamentelor radiofarmaceutice n
celulele neoplazice.

Studii ulterioare au dus la concluzia c radiofarmaceuticul se leag specific de

fosfolipidele membranare, ceea ce este n contradicie cu faptul c radioizotopul se acumuleaz
intracitoplasmatic i de imposibilitatea marcrii membranei plasmatice.

Mai 2014

Page 7

Cel mai plauzibil mecanism de ptrundere intracelular a 99mTc-sestamibi este reprezentat

de transportul pasic (difuziunea simpl). Studiile pe modele animale au evideniat faptul c dup
ptrunderea intracelular a radiofarmaceuticului, acesta este captat de mitocondrii. Studiile au
fost continuate pe culturi de miocite confirmndu-se informaiile anterioare. Captarea depinde
att de intensitatea metabolismului mitocondrial, ct i de potenialul de repaus negativ ( de circa
-30mV) al membranei mitocondriale. O cretere a potenialului de repaus negativ al membranei
celulare se ntlnete la nivelul celulelor miocardice i celulelor tumorale.

3. Comparaie ntre 99mTc-MIBI i

201

201

Taliu

Tl este radioizotopul cel mai utilizat n cardiologia nuclear( perfuzia i viabilitatea

miocardic) . Este un cation monovalent care ptrunde n miocite prin acelai mecanism ca i
ionuil de potasiu. Captarea 201Tl att n miocite ct i n celulele tumorale a sugerat o
imilitudine a mecanismului de ptrundere i anume transport acti pn ATP-aza Na+/K+ , cu toate
c mecanismul exact nu este nc cunoscut.
Fig. 2. Prezentarea schematic a
pompei de Na+/K+ .

Se pare c intrarea radioizotopului n celulele canceroase se realizeaz n funcie de

urmtorii factori: fluxul sangvin, gradul de malignitate, viabilitatea celulelor tumorale i necroza
tumoral. Cercetrile au artat c exist diferene ntre K+ i 201Tl, n timp ce ionul are afinitate
pentru un singur situl al pompei, radioizotopul se fixeaz pe dou situsuri ale ATP-azei Na+/K+ ,
ceea ce ar explica timpul mai lung de clearance al 201Tl din miocite , comparativ cu potasiul.

Mai 2014

Page 8

Experimentele efectuate pe celule ascitice tumorale Ehrlich au artat c ouabaina i

furosemidul inhib ptrunderea Tl. Este tiut faptul c ouabaina inhib pompa Na+/K+, n timp ce
furosemidul inhib mecanismul de transport al clorului ( cotransport). Astfel, se pare c cel puin
2 mecanisme de transport sunt implicate n ptrunderea intracelular a 201Tl .
Taliul este util n localizarea i diagnosticul urmtoarelor tipuri de neoplasme: cerebrale,
pulmonare, osoase, tiroidiene.
Comparativ, clearance-ul sangvin al 99mTc-MIBI este mai rapid dect al taliului 201.
Captarea ambilor trasori la nivel miocardic este n strns corelaie cu debitul sangvin,dar
concentraia taliului n celule este de 3 ori mai mare dect a MIBI. Cel puin 2 autori au raportat
faptul c studiile cu MIBI nu sunt relevante pentru punerea n eviden a zonelor de ischemie
miocardic n comparaie cu cel obinut cu taliu 201.

4. Utilizarea 99mTc-MIBI n oncologie

MIBI este un cation lipofil fiind reinut de ctre mitocondriile celulelor tumorale datorit
gradientului electrochimic. Se pare c prin utilizarea 99mTc-MIBI rezultate identice se obin n
ceea ce privete captarea de ctre celulele canceroase ca i n cazul celorlali ageni lipofili
studiai., dovedindu-i utilitatea n diagnosticul pozitiv al unor neoplasme, cum ar fi:
osteosarcoamele, tumorile mamare, cerebrale i tiroidiene.
Factori implicai n modularea captrii MIBI : proteinele membranare PgP, hipoxia,
fluxul sangvin, proteina antiapoptic.
Chimiorezistena este un fenomen prin care celulele in vivo sau cele din cultur devin
rezistente la un numr diferit de compui citotoxici. Acest fenomen este determinat de
supraexpresia glicoproteinelor P, codate de o familie de gene notate MDR.
Glicoproteina P (sau Pgp- P glycoprotein) cu o greutate molecular de 170 kDa, este
rspunztoare de ieirea 99mTc-sestamibi din celulele transformate malign. Ea este prezent i n
membrana celulelor normale, avnd rolul de a elimina produii citotoxici din celule. Studiile
efectuate au artat c exist o relaie de dependen direct ntre mecanismul de eliminare a
Mai 2014

Page 9

radiofarmaceuticului i rezistena la medicamente, cum ar fi ndeosebi antraciclinele i

actinomicina D. Altfel spus, tumorile care nu concentreaz MIBI vor fi i cele care nu vor
rspunde la chimioterapice.
Se pare c gena care codific Pgp este localizat pe cromozomul 7 i este numit gena
MDR-1. Mutaii ale oncogenelor supresoare p53 i p21 determin o cretere a expresiei genei
MDR-1, deci o cretere a numrului de proteine Pgp n celulele tumorale. Ciclosporina A,
Verapamilul ( blocant al canalelor de calciu) i derivaii chininici sunt cunoscui ca fiind blocani
ai Pgp.
n concluzie, 99mTc-sestamibi este util i n evidenierea prin scintigrafie a neoplasmelor,
care sunt rezistente a agenii chimioterapeutici, existnd o relaie de invers proporionalitate
ntre cantitatea de Pgp din membrana celular i cantitatea de 99mTc-MIBI intracelular.

99m

Tc-fosfonaii

Progresele privind imagistica nuclear osoas pot fi mprite n 2 perioade diferite: pre- i posttechneiu. 99mTc este practic radioizotopul ideal , fiind disponibil sub firm de pertechnetat de
-

sodiu ( 99m TcO4 ) n soluii izotone saline i poate fi redus la grade de oxidare inferioare pentru
legare cu diferii vectori.

Teoria ncorporrii 99mTc-difosfonatului

Pentru majoritatea radiotrasorilor, principalul factor de localizare este reprezentat de
fluxul sangvin. 99mTc-difosfonatul trebuie s ajung la os pentru a fi extras. O cretere a fluxului
sangvin va determina o cretere a extraciei . Procesul de extracie necesit mai multe etape:
trecerea radiofarmaceuticului din snge n celulele endoteliale, apoi n spaiul extracelular,
osteocite, lichidul intraosos i n final n esutul osos propriu zis. Trecerea 99mTc-difosfonatului
se realizeaz ns prin transport activ n veziculele matricei, sub form de complex intact.

Mai 2014

Page 10

Se pare c difosfonaii se leag de ionii de calciu din sruri prin intermediul oxigenului
din gruprile fosfat. Complexul va fi ncorporat apoi n matricea necristalin. Odat cu formarea
matricei necristaline amorfe, 99mTc-difosfonatul poate interaciona pasiv cu materialul cristalin.
Aceti compui se leag n principal de esutul osos mineral i nu de cel osteoid. 99mTcdifosfonatul se fixeaz preferenial pe fosfatul de calciu amorf, comparativ cu hidroxiapatita.
Acest lucru sugereaz faptul c ambel ci sunt posibile, dar transportul activ determin o
acumulare mai mare a radiotrasorului.
n concluzie, mecanismul prin care radiofarmaceuticele techneiene se fixeaz la nivel
osos poate fi explicat prin absorbia compuilor de ctre hidroxiapatit, substan care prezint o
suprafa mare de schimb, care permite absorbia i schimbul unui numr variat de ioni.
Sr2+ , Pb2+, Ra2+ i Mg2+ cu Ca2+ ;F- cu OH- ; CO32- , difosfonat, pirofosfat cu fosfaii.
Studiile autoradiografice arat c fosfonaii techneiai se fixeaz n principal n faza
minelal, ndeosebi la nivelul situsurilor reactive de esut osos.
Structura difosfonailor joac, de asemenea, un rol important n legare. Cercetrile pe
animale de expoerien au demonstrat c legarea de hidroxiapatit este n strns relaie cu
structura MDP-lui.

Mai 2014

Page 11

Bibliografie:
1. Studiul experimental i clinic al unor radiofarmaceutice utilizate n oncologia nuclear,
IAI 2005, doctorand Irena Cristina Rileanu. (TEZ DE DOCTORAT)
2. Maublant JC & al. In vitro uptake of technetium-99m-teboroxine in carcinoma cell lines
and normal cells: comparison with technetium-99m-sestamibi and thalium-201. J Nucl
Med. 1993, 34 (11): 1949-1952.
3. Pauwels EKJ & al. The mechanism of accumulation of tumour-localising
radiopharmaceuticals. Eur J Nucl Med. 2004, 45: 220-225.
4. Moretti JL. & al., To use MIBI or not to use MIBI? That is the question when assessing
tumour cells. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 2005; 32(7): 836-840.

Mai 2014

Page 12