Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Descriere
Hemocultura constituie una din metodele cele mai importante si delicate pentru laboratorul de
microbiologie. Sangele, fiind in mod normal steril, izolarea si identificarea unei bacterii sau a unui fung
in hemocultura are o semnificatie diagnostica considerabila.
Bacteriemia este prezenta in sange a bacteriilor provenite dintr-un focar septic sau de pe o mucoasa
lezata. Frecvent starea bacteriemica este lipsita de expresie clinica sau se insoteste numai de frison si
febra la care se pot adauga simptome si semne proprii conditiei care a determinat descarcarea
bacteriemica.
Septicemia este termenul clinic prin care se defineste o bacteriemie importanta cu evolutie clinica
neregulata, imprevizibila si grava, acompaniata de frisoane, febra neregulata, toxemie, hipotensiune,
prostratie, eruptii cutanate polimorfe si variate, metastaze septice tisulare sau viscerale. Gravitatea
sindromului septicemic lasa pe al doilea plan simptomatologia focarului infectios primar, care trebuie
insa intotdeauna cautat.
Principiul hemoculturii
Hemocultura este un test calitativ pentru detectarea microorganismelor prezente in sange. Sangele,
prelevat in conditii de stricta asepsie, este insamantat in flaconul de hemocultura a carui compozitie
favorizeaza dezvoltarea germenilor aerobi, anaerobi si microaerofili.
Principalii factori de imbogatire incorporati in mediu care favorizeaza dezvoltarea germenilor sunt:
- asociere de peptone, cazeina si gelatina pentru aportul de aminoacizi;
- extract de levuri pentru aportul de vitamine;
- hemine si NAD care permit dezvoltarea Haemophilus-ului si favorizeaza cresterea unor germeni
pretentiosi nutritiv cum sunt Actinobacilus, Cardiobacterium, Eikenella si alti anaerobi;
- vitamina B6, element indispensabil in dezvoltarea Streptococului deficient intalnit in endocardite si a
Stafilococului;
- CO2 element important pentru cresterea germenilor din speciile: Neisseria, Brucella, Haemophilus,
Streptococcus, Campylobacter.
Interpretarea rezultatelor
Absenta cresterii - mediul din recipientul Signal ramane limpede si nu trece de mansonul verde al
camerei de expansiune. In primele 6-12 ore de incubare se pot face subculturi oarbe (inocularea pe geloza
chocolat in atmosfera de CO2 la 35ºC pentru alte 48h sau in bulion thyoglicolat cu resazurina) si frotiuri
care se vor colora Gram (examinare microscopica).
Recipientele cu crestere absenta vor fi reincubate si urmarite in continuare.
Hemocultura pozitiva - daca in sangele de cercetat au existat germeni care s-au multiplicat in mediul de
cultura (hemocultura pozitiva), mediul va trece in camera de expansiune si se va ridica deasupra
mansonului verde al acesteia.
Se preleveaza din zona inferioara a camerei de expansiune o cantitate mica de mediu. Accesul in camera
de expansiune se face prin partea ei superioara prin manevra sterila. Aceasta manevra nu poate contamina
continutul recipientului Signal.
Eliberarea rezultatelor
a) rezultat partial prin frotiu colorat Gram;
b) rezultat definitiv dupa izolarea, identificarea bacteriei si efectuarea antibiogramei sau antifungigramei.
Interpretarea rezultatului final se face in functie de contextul clinic si de numarul flacoanelor pozitive in
raport cu cele recoltate.
Hemoculturi pozitive
Se iau in considerare:
- mai multe hemoculturi pozitive cu un germen patogen;
- mai multe hemoculturi pozitive cu un germen obisnuit comensal intr-un anumit context clinic;
- 1 hemocultura pozitiva cu germeni patogeni cunoscuti (Salmonella);
- 1 hemocultura pozitiva cu germeni potential patogeni in context clinic evocator cum ar fi: Streptococcus
pneumoniae in pneumopatii, enterobacterii in infectii urinare, Stafilococ coagulazo-negativ in infectii de
cateter.
Se exclud:
- 1 hemocultura pozitiva cu un germen comensal fara context clinic: suprainfectie cu Stafilococ
coagulazo-negativ, Corynebacterii, Streptococ non-grupabil;
- pe un teren imunologic deprimat se iau in considerare si aceste bacterii;
- pe un teren imunologic normal se repeta hemocultura.
Hemoculturi negative
- recoltarea probei s-a realizat dupa antibioticoterapie;
- recoltarea s-a realizat tardiv in cursul bolii (apar anticorpii);
- cantitate insuficienta de sange recoltat;
- timp de observatie prea scurt;
- mediu de cultura gresit ales.
Recomandari
Recomandari pentru efectuarea hemoculturii:
Se face la indicatia medicului in anumite situatii clinice cum sunt:
- toate cazurile cu febra de origine neprecizata, mai ales daca se acompaniaza de semne clinice
evocatoare de infectie;
- sepsis, soc septic;
- pacienti cu endocardita acuta;
- sindrom sugestiv pentru infectie sistemica cu germeni specifici (febra enterica, bruceloza, leptospiroza);
- infectii localizate severe (meningite, pneumonii, supuratii intraabdominale).
Metoda
Pentru hemocultura se utilizeaza kit-ul Signal-Oxoid, compus din: a) recipient cu mediu Signal;
compozitia acestui mediu permite cresterea germenilor aerobi, anaerobi si microaerofili, ceea ce
provoaca o crestere a presiunii detectata prin indicatorul de crestere adaptat flaconului (camera de
expansiune); b) camera de expansiune pentru mediu, in care in cazul multiplicarii bacteriene si cresterii
presiunii, o parte din amestecul sange/bulion trece in ea si indica activitate bacteriana (hemocultura
pozitiva).
Cauze de respingere a probei -probe neetichetate; probe incorect recoltate (nu s-au respectat regulile de
antisepsie); transport necorespunzator.
Prelucrare necesara dupa recoltare - se ataseaza camera de expansiune livrata in acelasi kit. Se
incubeaza la 37ºC. Durata incubarii la termostat si urmarirea probei este in medie de 7 zile. Se impune
incubare mai prelungita la pacientii cu endocardita subacuta, la probele prelevate sub antibioticoterapie
(pana la 14 zile) sau cand urmarim microorganisme exigente.
Limite si interferente
- tratament antimicrobian aplicat inaintea prelevarii;
- contaminarea sangelui cu flora exogena;
- cantitate insuficienta de sange prelevat;
- frecventa si momentul recoltarilor gresit stabilite;
- mediu de incubare si repicare gresit alese;
- timp de incubare necorespunzator.