Introducere în microscopia optică

În lucrarea practică de azi

• Vom afla ce este histologia şi cum o vom
studia în cursul acestui an
• Vom recapitula pe scurt elemente de
microscopie optică utile în studiul
histologic al celulelor şi ţesuturilor
• Vom învăţa să studiem imagini 2D prin
prisma unei structuri 3D
• Vom învăţa coloraţii noi
 Introducere în histologie
• Histologia – știinţa care studiază organizarea
microscopică a ţesuturilor şi organelor

• Ramuri:
• Histologia generală
• Histologia specială
Ţesuturi
• Țesut = grup de celule asemănătoare,
specializate pentru a îndeplini una sau
mai multe funcții caracteristice

• Componente:
• Celule
• Matricea extracelulară
 Recapitulare – preparatul microscopic
permanent
• Etapele obținerii:
• Recoltare
• Fixare
• Includere
• Secționare
• Colorare
• Montare și etichetare
Microscopul optic
Oculare

Obiective

Vize

Sursa
de
lumină
 Introducere în histologie

4x – orientarea 10x – detalii tisulare 40x – detalii celulare

http://histologyolm.stevegallik.org/node/31
Tipuri de secţiuni
Secţiune prin Secţiune prin tub
tub drept curbat

http://www.ansci.wisc.edu
Introducere în histologie

www.studyblue.com
 Cum folosim nucleii pentru a ne orienta pe
preparat – exemplu

Diferite tipuri de
nuclei = diferite
tipuri de celule

Limitele celulei nu
se pot observa
distinct.

http://www.lab.anhb.uwa.edu.au
Cum folosim nucleii pentru a ne orienta pe
preparat – exemplu

Nuclei aliniaţi într-un singur strat

Nuclei grupaţi concentric

secure.health.utas.edu.au
Cum folosim nucleii pentru a ne orienta pe
preparat – exemplu

Nuclei răspândiţi
în ţesut

Nuclei dispuși în strat

https://histology.medicine.umich.edu/
Exemplu de secţiune la nivelul unui
ţesut bogat celular

Secţiune perpendiculară

Secţiune oblică
 Exemplu de secţiune la nivelul unui
ţesut bogat celular

Secţiune oblică

Secţiune perpendiculară
https://histology.medicine.umich.edu/
Colorații pentru fibre conjunctive, col.HE

Fibre de colagen roz-roșii

http://www.histologyguide.com/
Colorații pentru fibre conjunctive, col.HE

Nucleu bazofil

Fibre de colagen roz-roșii

http://www.histologyguide.com/
 Colorații pentru fibre
conjunctive, col. HEAM

Fibre de colagen albastre

Colorații pentru fibre conjunctive, col. Azan

https://memim.com/heidenhain%27s-azan-trichrome-stain.html Fibre de colagen albastre

Colorații pentru fibre conjunctive, col. van
Gieson Fibre de colagen roșii

https://www.shutterstock.com/image-photo/submucosa-layer-esophagus-showing-abundant-bundles-743928874
 Colorații pentru fibre conjunctive

Lamele elastice
din peretele unui vas
colorate cu orceină

Fibre reticulare
dintr-un ganglion
limfatic evidențiate
prin impregnare
argentică

http://www.uff.br/atlashistovet/FibraElastica.jpg http://www.histologyguide.com/slidebox/03-connective-tissue.html
 Impregnare argentică - alte aplicații

Membrana bazală Prelungiri ale celulelor nervoase

http://cases.renalpathsoc.org/wp-content/uploads/2015/07/com201508_2.jpg http://www.doctorc.net/Labs/Lab2/Examples/exgolstn.htm
 Alte colorații Glicoproteine din
celule ale mucoasei
intestinale
Lipide din
celule adipoase

Colorație Sudan III Colorație PAS

http://slideplayer.pl/slide/10370173/ https://www.fishersci.ca/shop/products/pas-staining-kit/m1016460001
Incluziuni de melanină
Exerciţii
1. Desenaţi o secţiune longitudinală, apoi una transversală printr-un
ou (fiert tare ☺).
Anexă – colorații
Colorație Rezultate
Hemalaun-eozină Nuclei – albastru închis
cu albastru de Citoplasma – albastru-cenușiu
metilen (HEAM) Fibre de colagen – albastru intens
Azan (azocarmin- Nuclei – roșu intens
anilină) Citoplasma – roșu
Fibre de colagen – albastru
van Gieson Nuclei – negru
Citoplasmă – galben
Fibre de colagen – roșu intens
Orceină Fibre elastice – brun-roșcat
Impregnare Membrana bazală; fibre reticulare; prelungiri nervoase – brun-
argentică negru
Sudan III Lipide – roșu-portocaliu
PAS (periodic acid Polizaharide, glicoproteine – roșu purpuriu
Schiff)
Artefacte
• Imagini false care apar în preparatele
microscopice permanente în urma
pregătirii acestora
• Exemple
Artefacte apărute în timpul etapei de fixare

J Oral Maxillofac Pathol. 2018 May-Aug; 22(2): 279.

Artefacte induse de secționare

J Oral Maxillofac Pathol. 2018 May-Aug; 22(2): 279.

Artefacte induse de colorare

Precipitat de
colorant

https://www.tamucet.org/product/evaluating-blood-smears-and-analyzing-erythrocyte-morphology/
Artefacte induse de folosirea solvenților
organici
 Ce artefacte puteţi identifica pe aceste
imagini?

https://www.semanticscholar.org/paper/A-review-of-artifacts-in-histopathology-Taqi-Sami/cec6d7742a9e5a9c0772749c2a5d112090e847cf
Ce artefacte puteţi identifica pe
această imagine?

J Oral Maxillofac Pathol. 2018 May-Aug; 22(2): 279.

Colorația HE
Nucleu bazofil Celulă Citoplasmă bazofilă Nucleu bazofil

Citoplasmă acidofilă Matrice extracelulară bazofilă

Pancreas exocrin Cartilaj traheal

http://www.histologyguide.com/slidebox/slidebox.html