Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Curs 4 Bacteriologie - Partea Generală
Curs 4 Bacteriologie - Partea Generală
Bacteriile sferice. Sunt bacteriile cunoscute sub numele generic de coci. Cocii pot fi perfect
sferici (Staphylococcus aureus), elipsoidali (Streptococcus viridans), lanceolai (Streptococcus
pneumoniae) sau reniformi (Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae). La majoritatea bacteriilor
sferice, celulele fiice rezultate n urma procesului de diviziune nu se despart la sfritul diviziunii, ci
formeaz grupri caracteristice cu valoare taxonomic.
n funcie de poziia celulelor fiice dup diviziune, cocii prezint urmtoarele ase subtipuri morfologice:
micrococii - celulele fiice rmn izolate (Micrococcus roseus);
diplococii - celulele rmn ataate n perechi (Streptococcus pneumoniae, Neisseria gonorrhoeae);
streptococii celule dispuse ca un sirag de margele (Streptococcus pyogenes);
tetracocii sau tetrada celule dispuse cate 4 (Gafkya tetragena);
sarcina pachete cubice (Sarcina flava, Sarcina aurantiaca);
stafilococii - coci aranjai n form de ciorchine (Staphylococcus aureus).
Bacteriile cilindrice. Sunt cunoscute sub denumirea de bacili sau bastonae.
Bacilii pot fi drepi, uor ncurbai la mijloc sau la unul din capete. Extremitile bacililor pot fi tiate drept, ca
la Bacillus anthracis sau rotunjite, ca la majoritatea bacililor: Mycobacterium tuberculosis.
Marginile laterale ale bacililor sunt de regul paralele, sau pot fi i apropiate la extremiti, dnd bacilului
aspectul de fus (Fusobacterium fusifformis) sau ndeprtate i rotunjite la una sau la ambele capete.
n urma procesului de diviziune bacilii pot fi grupai cte doi (diplobacili), n lanuri cu lungimi variabile
(streptobacili) sau n palisad (ca scndurile unui gard). Unii bacili formeaz grupri sub form de rozet
sau stea.
Raportul dintre cele dou diametre - longitudinal i transversal variaz mult, unele bacterii putnd lua un
aspect filamentos sau sferic - oval, fiind denumite cocobacili. Acestea din urm sunt uneori greu de
difereniat de coci.
Bacteriile spiralate (helicoidale). Aceste bacterii au form cilindric, alungit, dar prezint
curburi ale axului longitudinal. Se cunosc trei subtipuri morfologice:
vibrionul: n form de virgul (Vibrio cholerae)
spirilul: n form de spiral, cu mai multe ture de spir rigide (Spirillum mutans)
spirochete, n form de spiral, cu mai multe ture flexibile, care se pot comprima sau relaxa (Treponema
pallidum).
Bacteriile filamentoase. Acest tip morfologic se ntlnete la actinomicete (bacterii miceliene).
Dimensiunile bacteriilor
Bacteriile au dimensiuni foarte mici, de ordinul micrometrilor (micronilor) (1 m - 10-6 m), din care
cauz nu pot fi observate dect la microscop.
n medie, dimensiunile bacteriilor sunt cuprinse ntre 0,5-1 m x 3-6 m. Cele mai mici ca
dimensiune sunt nanobacteriile descoperite recent, cu dimensiuni de 0,02-0,03 m; cele mai mari
pot ajunge intre 10-20 m - lungime, iar n cazul formelor filamentoase, n mod excepional, chiar
la 500 m.
Dimensiunile mici ale bacteriilor apar ca o condiie esenial pentru creterea i multiplicarea lor
rapid, n comparaie cu celulele eucariote, ce le confer un mare avantaj biologic n natur,
asigurnd supravieuirea lor.
spaiul periplasmic
Semnificaia biologic a peretelui celular:
Peretele celular reprezint sistemul de susinere mecanic al ntregii celule. Datorit rigiditii
sale determin forma caracteristic a celulelor bacteriene i o protecie mpotriva factorilor
nefavorabili din mediu.
Asigur protecia celulei fa de ocul osmotic; fr suportul rigid al peretelui celular, membrana
plasmatica nu ar putea rezista presiunii interne.
n cazul bacteriilor mobile, constituie suportul rigid pe care se sprijin flagelii in contracie.
Conine substanele care dau specificitatea antigenic a celulelor i receptorii specifici pentru
fixarea bacteriofagilor (virusuri care paraziteaz bacteriile).
Protoplatii i sferoplatii
Unele bacterii sunt n mod normai lipsite de perete celular. Aa sunt, de
exemplu, micoplasmele, un grup de bacterii parazite intracelular. Izotonismul
celulei parazitate asigur micoplasmelor supravieuirea n lipsa peretelui
celular.
Dac se trateaz cu lizozim (enzima care hidrolizeaz peptidoglicanul din
peretele celular) celulele bacteriene Gram-pozitive, peretele celular este
distrus integral. Rmne doar membrana citoplasmatic ce menine forma
aproximativ sferic. Aceste forme poart numele de protoplati. Protoplatii
nu-i mai pot reface prin sintez peretele celular daca acesta a fost complet
distrus.
La bacteriile Gram-negative peretele celular bacterian nu poate fi
degradat complet sub aciunea lizozimului ci, doar i slbete structura. La
aceste bacterii lizozimul nu distruge dect ptura de murein, membrana
extern a peretelui celular rmnnd aproape intact. n medii hipotonice
celulele astfel tratate lizeaz, iar n medii hipertonice se transform n
sferoplati. Acetia se deosebesc de protoplati prin aceea c peretele lor
celular este numai parial distrus.
Membrana citoplasmatic
Membrana citoplasmatic acoper citoplasma celulei bacteriene, separnd-o de suprafaa intern a
peretelui celular de care este, de obicei, strns lipit. Poate fi pus n eviden i la microscopul fotonic,
dup colorare selectiv cu albastru Victoria sau fr colorare, la bacteriile vii examinate in cmp
ntunecat, caz in care apare ca o linie net, luminoas, strlucitoare.
La bacterii, membrana citoplasmatic prezint o structur bilaminar, fiind format dintr-un dublu strat
fosfolipidic, n grosimea cruia exist diferite proteine i polizaharide.
Membrana citoplasmatic este prevzut cu numeroase invaginri care ptrund n citoplasm. Aceste
invaginri sunt denumite mezozomi i mpreun cu membrana citoplasmatic din care deriv formeaz
sistemul membranar unic sau "unit membrana". Datorit sistemelor enzimatice pe care le conine, ea are
importante funcii n metabolismul energetic. La celulele eucariote aceste funcii sunt ndeplinite de
organite specializate (mitocondriile).
Mezozomii sunt structuri multifuncionale cu rol important n controlul replicrii cromozomului bacterian si
n sinteza membranei plasmatice, a peretelui celular i a septului transversal care separ celulele dup
diviziune.
Semnificaia biologic a membranei citoplasmatice
Membrana citoplasmatic reprezint o component permanent a celulei bacteriene, avnd rolul de a
delimita spaiul intracelular.
Pentru celula bacterian membrana citoplasmatic reprezint o barier osmotic semipermeabil, ce
asigur o rapid echilibrare a ionilor de sodiu ntre interiorul i exteriorul celulei, o concentrare
intracelular a ionilor de potasiu i de magneziu, precum i ptrunderea sau evacuarea unor molecule de
dimensiuni mici
Membrana citoplasmatic este sediul a numeroase enzime respiratorii, reprezentnd o important
structur cu rol energetic
Membrana citoplasmatic coordoneaz creterea i diviziunea celular, iniiind replicarea cromozomului
bacterian i asigurnd separarea cromozomilor fii, prin formarea septului transversal de diviziune.
Citoplasma
Citoplasma este un sistem coloidal complex format din proteine, lipide i glucide, ap (80%), sruri
minerale i o serie de substane rezultate n urma metabolismului. Citoplasma bacterian nu are o
organizare definit, similar celei din celulele eucariote, care conine organite difereniate i delimitate de
membrane. Aspectul ei este variabil n funcie de varsta culturii i de condiiile de mediu. n interiorul
citoplasmei se gsete materialul nuclear, incluziunile, vacuolele i ali constitueni.
O caracteristica a citoplasmei bacteriene este prezena unei mari cantiti de ARN, care i confer
caracterul de bazofilie, mai intens la celulele tinere.
Materialul nuclear
Spre deosebire de celulele eucariote, care au un nucleu cu structur bine definit, mrginit de o
membran, coninnd un numr definit de cromozomi capabili de diviziune mitotic, materialul nuclear
bacterian are o form primitiv de organizare, lipsit de membran, situat in partea central a celulei i care
nu sufer modificri de tip mitotic in cursul ciclului de diviziune.
Datorit caracteristicilor sale particulare, aceast structur a fost desemnat cu numeroi termeni:
nucleoid, nucleozom, material nuclear, nucleoplasm. cromozom bacterian etc.
Din punct de vedere chimic materialul nuclear conine 60% ADN, 30% ARN i 10% proteine. Se
pare c ARN-ul i proteinele contribuie la conservarea unitii structurale a nucleoplasmei, n lipsa unei
membrane proprii. Pe seciuni ultrafine s-a observat c regiunea nuclear este plin cu filamente foarte
fine formate din ADN i corespund cromozomului bacterian.
Prin metode speciale cromozomul bacterian a fost extras din celul, constatndu-se c este alctuit dintr-o
singur, molecul, gigant (aproximativ 1 mm lungime la Escherichia coli) de ADN de form circular, cu
extremitile reunite, pliat foarte strns n dou rnduri de bucle succesive, stabilizate de ctre proteine.
Semnificaia biologic a materialului genetic
Determin arhitectura celulei bacteriene, ereditatea i capacitatea ei de evoluie.
Datorit lipsei membranei proprii, un contact direct ntre ADN i ribozomii din citoplasm face ca transferul
informaiei genetice s se realizeze foarte rapid.
Ribozomii
Ribozomii sunt particule nucleoproteice intracitoplasmatice, de form aproximativ sferic. La procariote, n faza de
cretere activ, se gsesc n citoplasm 1500 - 100.000 particule ribozomale.
Ribozomii sunt componeni eseniali ai sistemului de traducere a informaiei genetice i au rol n sinteza proteinelor.
Vacuolele
Vacuolele sunt formaiuni sferice, cu diametrul de 0,3-0,5 m, care apar n celula bacterian n perioada de
cretere activ. Numrul lor este variabil n raport cu mediul de cultur (6- 20/celul). Conin diferite substane
metabolice i sunt nconjurate la periferie de un nveli lipoproteic unistratificat numit tonoplast.
Incluziunile citoplasmatice
Incluziunile citoplasmatice sunt formaiuni structurale ce conin o serie de substane inerte, depuse n citoplasma
celulei, cu rol de substane de rezerv. Dup structura lor, evideniat la microscopul electronic, ele sunt de dou tipuri:
Glicocalixul
Glicocalixul este alctuit dintr-o mas de filamente polizaharidice ataate de lipopolizaharidele de pe suprafaa bacteriilor, formnd n
ansamblu o structur ca o psl pe suprafaa celulei, asigurnd fixarea acesteia de alte celule sau suporturi.
Spre exemplu, vibrionul holeric se leag de "marginea n perie" a celulelor intestinale umane, iar gonococul de celulele vaginale,
bacteriile care produc infectii urinare se fixeaza i se menin ei n cile urinare sterile, fr a fi ndeprtate; glicocalixul asigura i o
rezisten mrit fa de bacteriofagi sau protozoare.
n mediile naturale competitive, populate de mai multe specii de bacterii, selecia favorizeaz celulele protejate de glicocalix.
Flagelii
Flagelii sunt apendici filamentoi, dispui la suprafaa bacteriilor, reprezentnd organite de locomoie.
Posibilitatea de deplasare se ntlnete numai la anumite bacterii ca: bacili, vibrioni i spirili.
Numrul flagelilor pe suprafaa unei celule variaz ntre 1-100, fiind caracteristic pentru o anumit specie.
n funcie de dispunerea flagelilor pe suprafaa celulei bacteriene, acestea pot fi (fig. 7.10):
atriche (bacterii imobile, fr flageli - majoritatea bacteriilor)
monotriche (cu un singur flagel polar, exemplu Vibrio cholerae);
lofotriche (cu un smoc de flageli situat la un pol al celulei, exemplu Spirillum marinus)
amfitriche (cu un flagel la ambii poli ai celulei)
peritriche (cu flageli pe toat suprafaa celulei, exemplu Proteus vulgaris).
Existena flagelilor este controlat genetic i reprezint un caracter care poate fi pierdut i redobndit prin mutaie.
Micarea este determinat de reacia celulei la diferii stimuli din mediu. Cnd celula se deplaseaz n direcia stimulului se vorbete
de un tactism pozitiv, iar cnd se ndeprteaz de stimul de un tactism negativ.
n funcie de natura stimulului deosebim urmtoarele tipuri de tactisme: chemotactism, fototactism, aerotactism, termotactism etc.
Chemotaxia - este o modalitate de deplasare preferenial a bacteriilor sub efectul unor concentraii inegale de substane
chimice din mediu. Se manifest fie prin atragerea, fie prin respingerea bacteriilor din zonele n care concentraia substanei este mai
ridicat.
Din punct de vedere al atragerii i respingerii bacteriilor, exist dou grupe mari de substane chimice:
substane chemotactic pozitive (atractante): zaharuri, aminoacizi, O2, Ca ;
substane chemotactic negative: acizi grai, alcooli
Aerotaxia - reprezint deplasarea celulelor bacteriene ntr-un anumit mod n funcie de gradientul de O2. Prin aceast
micare fiecare bacterie caut zona de concentraie n oxigen adecvat tipului su respirator, aerob, anaerob, microaerofil.
Pilii i fimbriile
Sunt apendici filamentoi, pericelulari, prezeni la bacteriile Gram negative (Escherichia coli, Proteus,
Klebsiella, Shigella, Salmonella) i mai rar la bacteriile Gram pozitive. Pot fi evideniai numai prin
microscopie electronic. Sunt mai numeroi dect flagelii, mai subiri i mai casani.
Dup structur, funcie i determinism genetic, aceti apendici au fost grupai n dou categorii:
pilii de sex - apendici filamentoi care reprezin receptori specifici pentru bacteriofagi i calea de
transfer a ADN-ului bacterian i plasmidial n procesul de conjugare. Pierderea pililor prin mutaie
determin rezistena fa de infecia cu bacteriofagi.
fimbriile - care nu sunt implicate n transferul ADN cromozomial, viral sau plasmidial.
Sunt alctuite dintr-un numr variabil de molecule de fimbrin. Fimbriile rmn legate de protoplati
i sferoplati, ceea ce arat originea lor intracelular.
Semnificaia biologic a fimbriilor
Creterea suprafeei de absorbie a substanelor nutritive.
Creterea activitii respiratorii a bacteriilor.
Facilitarea aderrii bacteriilor de diferite substraturi sau alte organisme.
Formarea unor pelicule de bacterii reunite prin fimbrii la suprafaa mediilor lichide.
Servesc ca organite de transport a unor metabolii
Contribuie la stabilizarea cuplurilor de conjugare
Influeneaz virulena bacteriilor patogene prin: fixarea bacteriilor patogene de celule i esuturi,
determinarea unei specificiti de esut; inducerea formrii de anticorpi datorit antigenelor din fimbrii;
conferirea unei rezistene deosebite a bacteriilor la fagocitoz.
Sporul bacterian
La unele bacterii, forma vegetativ se poate transforma ntr-un spor. Aceste bacterii se numesc sporogene. La bacterii
se ntlnesc mai multe tipuri de spori:
Endosporul (sporul propriu-zis) - este o formaiune intracelular, refringent i rezistent la factorii nefavorabili de
mediu. Este caracteristic pentru genurile Clostridium i Bacillus.
Artrosporul - constituie o formaiune intracelular, cu o rezisten mai sczut comparativ cu a endosporului, dar
superioar formei vegetative. Se formeaz prin fragmentarea celulei vegetative.
Adevratul spor bacterian sau endosporul este ntlnit la speciile genului Bacillus i Clostridium. Datorit caliti lor
sale deosebite de rezisten, endosporul conserv n stare dormant, timp ndelungat, toate proprietile genotipice ale
celulei vegetative din care provine.
Indiferent de morfologia celulei n care se constituie, forma sporului (endosporului) este rotund sau oval, cu
diametrul variabil.
Sporul este unic i numai excepional s-au descris mai muli spori n aceeai celul.
Ultrastructura.
tunicile (nveliurile sporale) - reprezint trei straturi suprapuse: unul extern (exina), unul intern (intina), ntre care se
gsete stratul mijlociu;
sporoplasma (inima sporului) - reprezint 60-70% din greutatea sporului i conine elementele biologic active (ADN,
ARN, mai puin ARN mesager, ribozomi).
Sporogeneza
Reprezint un proces de morfogenez n urma cruia n interiorul unei celule bacteriene se difereniaz o alt celul
diferit din punct de vedere chimic, enzimatic i fiziologic. n cursul sporogenezei la unele bacterii aerobe sau anaerobe se
elibereaz n mediu substane biologic active: enzime, antibiotice, toxine. Fenomenul este deosebit de important pentru
industria microbiologic, bacteriile respective fiind utilizate n producerea industrial a enzimelor (Bacillus subtills),
antibioticelor (specii de Bacillus i Streptomyces), toxine (specii de Clostridium) etc.
Germinarea sporului
Reprezint fenomenul de transformare a sporului n celula vegetativ, respectiv trecerea sporului din stare dormant,
metabolic inactiv, la starea metabolic activ. Se realizeaz in trei faze succesive: activarea, iniierea germinrii i creterea
postgerminal.
Activarea germinrii - este produs n condiii favorabile de umiditate, temperatur, pH i de unele substane chimice.
Iniierea germinrii - este marcat de creterea sporului n volum, ca urmare a absorbiei de ap,
Creterea postgerminal - dezintegrarea structurilor sporale nceput n faza de iniiere paralel cu dobndirea activitii
respiratorii i a altor activiti metabolice. Cortexul i tunicile sporale dispar, iar noua celul vegetativ se constituie n
centrul sporului. Creterea postgerminal se sfrete n momentul n care celula vegetativ intr n prima diviziune.
Semnificaia biologic a sporului
Sporul reprezint o etap normal a ciclului de dezvoltare a bacteriilor sporogene, deoarece sporogeneza necesit condiii
de mediu similare celor reclamate de celula vegetativ, se deosebete de celula vegetativ prin mai multe caractere i se
comport ca o form de rezisten ce pstreaz toate caracterele fenotipice i genotipice ale speciei
Sporul bacterian nu reprezint o form de multiplicare ca la fungi. Rezistena sporului bacterian la factorii nefavorabili de
mediu este deosebit de mare; pot rezista cteva ore la 120 C cldur umed sau 200C cldur uscat. S-au evideniat
spori viabili i dup mai bine de 100 ani (Bacillus anthracis pe campiile unde au murit in secolele trecute oi bolnave de
antrax, numite popular campiile blestemate)
Cromatoforii
Cromatoforii sau aparatul fotosintetic reprezint un complex de structuri membranoase implicate n procesul de conversie a
energiei luminoase n energie chimic.
Plasmidul
Plasmidele sunt molecule de ADN independente de cromozomul bacterian localizate n citoplasm. Plasmidele de
dimensiuni mari sunt prezente, de obicei, n una sau dou copii, n timp ce plasmidele de dimensiuni mici pot fi prezente n
10 -100 copii. Plasmidele nu sunt eseniale pentru supravieuirea celulei. Multe dintre ele poart gene codificatoare ale
anumitor caractere ale celulei gazd. Urmtoarele tipuri de plasmide sunt relevante din punct de vedere medical:
Plasmide ale virulenei. Poart determinani ai virulenei bacteriei, ex. genele enterotoxinei sau hemolizinei.
Plasmide ale rezistenei. Poart informaie genetic ce confer rezisten la ageni antiinfecioi.
Fiziologia bacteriilor
Necesiti nutritive ale bacteriilor
Pentru creterea i multiplicarea lor, microorganismele necesit prezena n mediu a unor
substane nutritive care s conin att elemente chimice necesare pentru sinteza constituenilor
celulari i activitii enzimatice, ct i substane necesare producerii de energie.
Aceste elemente se clasific n:
Tipuri trofice
Microorganismele se caracterizeaz printr-o mare diversitate metabolic, multe dintre ele, avnd capacitatea de a se
dizolva pe substraturi anorganice, utiliznd ci metabolice inaccesibile pentru plante i animale.
Exist 2 criterii de baz, n funcie de care microorganismele pot fi clasificate n mai multe tipuri nutriionale: sursa
de energie i sursa de carbon.
n funcie de sursa de energie:
fototrofe: bacteriile care utilizeaz ca i surs de energie, lumina
chemotrofe: bacteriile care utilizeaz ca i surs de energie substanele chimice.
Acestea la rndul lor se mpart n:
-chemoorganotrofe, care utilizeaz ca surs de energie substanele organice
-chemolitotrofe (gr. litos-piatr, cu sensul de mineral), care utilizeaz ca surs de energie substanele
anorganice
n funcie de sursa de carbon:
autotrofe: bacteriile care utilizeaz ca surs de carbon CO2 i srurile sale minerale (compuii anorganici).
heterotrofe: bacteriile care utilizeaz ca surs de carbon substanele organice.
Dac se iau n considerare ambele criterii, bacteriile se clasific n:
fotoautotrofe: bacteriile care utilizeaz ca i surs de energie, lumina i ca surs de carbon CO 2 i srurile sale
minerale (compuii anorganici).
fotoheterotrofe: bacteriile care utilizeaz ca i surs de energie, lumina i ca surs de carbon substanele organice
chemoautotrofe: bacteriile care utilizeaz ca i surs de energie substanele chimice i ca surs de carbon CO 2 i
srurile sale minerale
chemoheterotrofe: bacteriile care utilizeaz ca i surs de energie substanele chimice i ca surs de carbon
substanele organice.
Creterea bacteriilor
Creterea este definit n sens biologic, ca procesul de mrire coordonat a tuturor
constituenilor unui organism, ca rezultat al producerii sau adugrii de substan nou.
La toate speciile unicelulare creterea are ca rezultat multiplicarea acestora, respectiv
creterea numrului de indivizi. La organismele pluricelulare creterea are ca efect sporirea
volumului, respectiv a taliei individuale.
Celulele bacteriene care cresc ca mas i volum nu i mrec proporional toate
dimensiunile. De exemplu, la bacteriile cilindrice, n timpul creterii echilibrate, diametrul
cilindrului rmne fix, n aa fel nct are loc doar creterea n lungime a celulei.
Creterea nu continu la nesfrit, deoarece la un moment critic este ntrerupt, fiind
urmat de diviziunea celular.
Creterea unei populaii de microorganisme este rezultatul creterii i diviziunii
organismelor individuale care formeaz populaia respectiv, ntr-un mediu de cultur
corespunztor, bacteriile perfect adaptate au o cretere echilibrat. Culturile aflate n stare de
cretere echilibrat i menin o compoziia chimic constant deoarece creterea biomasei este
nsoit de o cretere comparabil a celorlalte componente ale populaiei (proteine, ARN, ADN,
ap intracelular).
Multiplicarea bacteriilor
Multiplicarea reprezint creterea numrului de celule bacteriene, ce se poate realiza prin mai multe mecanisme:
nmugurire
Fragmentare
Conjugarea
Diviziunea direct
Reprezint forma cea mai rspndit de multiplicare a bacteriilor, constnd n scindarea celulei mam n dou celule fiice, cel mai adesea
identice, egale ca mrime (diviziune izomorf) sau uneori inegale (diviziune heteromorf).
Procesul de diviziune implic 3 etape succesive:
a. Apariia unui sept transversal format din membrana citoplasmatic, ce mparte spaiul citoplasmatic n 2 compartimente;
b. Invaginarea peretelui celular la nivelul septului transversal i ptrunderea lui centripet, cu separarea lui n dou foie; n aceast etap
celulele fiice astfel formate vor avea toi constituenii proprii, dar peretele celular rmne comun;
c. Separarea celulelor fiice prin scindarea peretului celular comun; n unele cazuri, celulele fiice rmn legate ntre ele prin septul
transversal, deoarece peretele celular nu se divide.
Conjugarea
Conjugarea reprezint transferul de ADN de la o celul donatoare la o celul receptoare, proces ce implic contactul dintre celule.
Conjugarea este posibil dac exist 2 componente: plasmidele pentru conjugare i traspozonii. n procesul conjugrii aceste componente sunt ele
nsele transferate. Conjugarea este ntlnit mai ales la bacteriile Gram-negative (E. coli)