Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Analiza Instrumentala
Analiza Instrumentala
Editura AcademicPres
Colegiu editorial:
Director editur: Prof. Dr. Doru PAMFIL
Consilier editorial: Prof. Dr. Radu SESTRA
Editura AcademicDirect
Director editur: Prof. Dr. Ing. Gheorghe LAZEA
Redactor: . L. Dr., Ing. Lorentz JNTSCHI
Refereni tiinifici:
Prof. Dr. Teodor HODIAN
Prof. Dr. Elena Maria PIC
Tehnoredactare, tiprire, coperta: autorii.
Editura AcademicPres
Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar Cluj-Napoca
Calea Mntur, Nr. 3-5, 400372, Cluj-Napoca, Romania
Tel. +40-264-596384, Fax +40-264-593792
E-mail: eapcluj@yahoo.com
Editura AcademicDirect
Universitatea Tehnic din Cluj-Napoca
Muncii 103-105, 400641, Cluj-Napoca, Romania
Tel. +40-264-401775, Fax +40-264-592051
E-mail: root@ph.academicdirect.org
Lorentz JNTSCHI
Cuprins
0. Prefa............................................................................................................................. 1
1. Informaia Analitic ........................................................................................................ 3
2. Proba ............................................................................................................................. 25
3. Metode chimice de analiz - interferene cu analizele instrumentale ........................... 39
4. Metode electrochimice .................................................................................................. 55
5. Metode termice de analiz............................................................................................. 83
6. Metode optice de analiz............................................................................................... 91
7. Spectrometria de absorbie n UV-VIS ......................................................................... 97
8. Spectrometria de absorbie n IR................................................................................. 113
9. Analiza prin absorbie atomic (AA) .......................................................................... 129
10. Spectrometria de emisie ............................................................................................ 141
11. Fluorimetria i spectrometria de chemiluminescen................................................ 155
12. Nefelometria i turbidimetria .................................................................................... 167
13. Refractometria i polarimetria................................................................................... 175
14. Spectrometria de fluorescen X (XRF).................................................................... 181
15. Metode cromatografice - privire de ansamblu .......................................................... 197
16. Cromatografia de gaze (GC) ..................................................................................... 212
17. Cromatografia de lichide de nalt performan (HPLC).......................................... 231
18. Cromatografia ionic (IC) ......................................................................................... 249
19. Cromatografia planar (TLC) ................................................................................... 257
20. Analiz spectral nuclear......................................................................................... 267
21. Prelucrarea datelor rezultate din msurtori.............................................................. 281
22. Anexe ........................................................................................................................ 303
23. Bibliografie ............................................................................................................... 315
24. Index.......................................................................................................................... 317
Prefa
Prefa
Lucrarea intitulat Chimie Analitic i Instrumental abordeaz majoritatea metodelor
i tehnicilor uzuale de analiz chimic instrumental. Se adreseaz studenilor Facultii de
tiina i Ingineria Materialelor, ndeosebi studenilor seciilor de Ingineria Mediului n
Industrie, Deformri Plastice i Tratamente Termice i tiina Materialelor, a cror pregtire
presupune cunoaterea metodelor de analiz chimic i instrumental. Lucrarea conine
capitole de pregtirea probelor pentru analiz, prelevarea i dizolvarea probelor, metode
chimice i electrochimice de analiz, metode instrumentale de rezonan magnetic, lsnd ca
metodele n faz solid [1] ca microscopia i difractometria s fie detaliate la alte discipline pe
care acetia le frecventeaz pe parcursul studiilor. Materialul este prezentat ntr-o manier
modern, punndu-se accent pe tratarea sistemic a conceptelor i legilor specifice chimiei i
fizicii.
Lucrarea i completeaz coninutul cu numeroase trimiteri la literatura de specialitate.
Cluj-Napoca,
August 2006
Horea Iustin NACU & Lorentz JNTSCHI
[1] Solak H. H. et al., Measurement of strain in AlCu interconnect lines with x-ray microdiffraction, Journal of
Applied Physics, 86, 884, 15 July 1999.
Chimie Analitic i Instrumental
Informaia Analitic
Nici un efect a crui exactitate are o valoare mai slab de 10 % nu merit a fi cercetat
- Walther Nernst (1864-1941), Chimist fizician german -
Informaia Analitic
Generaliti
Se vorbete de o analiz chimic atunci cnd activitatea depus, de o persoan, grup
sau organizaie, are drept rezultat cel puin o caracteristic chimic calitativ (adic o
proprietate ce indic prezena sau absena unei specii chimice) sau cel puin o cifr care indic
un coninut dintr-o specie sau material dat. Ansamblul de operaii i msurtori, plus
condiiile experimentale, menite s dea, mcar n parte, compoziia fizico-chimic a unei
"probe" din material, produs sau esut biologic, convenim s-l numim sistem analitic.
Supunnd un material (numit prob) operaiilor unui sistem analitic, consumnd reactivi i
materiale auxiliare (de exemplu detergeni), energie i manoper (lucrul efectiv), se obine
rspuns la una din ntrebrile:
Este prezent specia (caracteristica) X n prob?
n ce cantitate este prezent specia X?
A rspunde doar la ntrebarea (a) nseamn a face o analiz chimic calitativ iar a
rspunde la ntrebarea (b) nseamn a executa o analiz chimic cantitativ. A rspunde la
ambele ntrebri pentru toate speciile cunoscute constituie analiza complet.
Dac se urmrete evoluia unei anumite mrimi analitice, n timp, spunem c se
realizeaz monitorizare a acesteia. Deci, numim monitorizarea factorilor poluani, msurarea
periodic, la intervale predeterminate de timp, a concentraiei unuia dintre factorii poluani ai
mediului. Aadar,
O analiz fizico - chimic sau un procedeu de monitorizare se poate defini azi ca un proces
de obinere a informaiei analitice la un pre de cost minim.
Material
Proces de
analiz
Informaie
X1 X2 Xn
Parametri
fizico-chimici
Fig. 1. Schema bloc a unui flux analitic
Informaia Analitic
[2] Joyce Michael A., Fraser Marie E., James Michael N. G., Bridger William A., and Wolodko William T.,
ADP-Binding Site of Escherichia coli Succinyl-CoA Synthetase Revealed by X-ray Crystallography, p. 1725, Biochemistry, Volume 39, Issue 1, January 11, 2000.
[3] Clausen Tim, Schlegel Anja, Peist Ralf, Schneider Eva, Steegborn Clemens, Chang Yuh-Shin, Haase
Andrea, Bourenkov Gleb P., Bartunik Hans D., and Winfried B., X-ray structure of MalY from
Escherichia coli: a pyridoxal 5'-phosphate-dependent enzyme acting as a modulator in mal gene
expression; EMBO J., 19, p. 831-842, 2000.
[4] Ishikawa Kohki, Mihara Yasuhiro, Gondoh Keiko, Suzuki Ei-ichiro, and Asano Yasuhisa, X-ray structures of
a novel acid phosphatase from Escherichia blattae and its complex with the transition-state analog
molybdate; EMBO J., 19, p. 2412-2423, 2000.
[5] Shewchuk Lisa, Hassell Anne, Wisely Bruce, Rocque Warren, Holmes William, Veal James, and Kuyper Lee
F., Binding Mode of the 4-Anilinoquinazoline Class of Protein Kinase Inhibitor: X-ray Crystallographic
Studies of 4-Anilinoquinazolines Bound to Cyclin-Dependent Kinase 2 and p38 Kinase, Journal of
Medicinal Chemistry, p. 133-138, Volume 43, Issue 1, January 13, 2000.
[6] Chakraborty Debashis, Chandrasekhar Vadapalli, Bhattacharjee Manish, Krtzner Ralph, Roesky Herbert W.,
Noltemeyer Mathias, and Schmidt Hans-Georg, Metal Alkoxides as Versatile Precursors for Group 4
Phosphonates: Synthesis and X-ray Structure of a Novel Organosoluble Zirconium Phosphonate,
Inorganic Chemistry, p. 23-26, Volume 39, Issue 1, January 10, 2000.
[7] Gabelnick Aaron M., Capitano Adam T., Kane Sean M., Gland John L., and Fischer Daniel A., Propylene
Oxidation Mechanisms and Intermediates Using in Situ Soft X-ray Fluorescence Methods on the Pt(III)
Surface, Journal of the American Chemical Society, p. 143-149, Volume 122, Issue 1, January 12, 2000.
[8] Solak H. H. et al., Measurement of strain in AlCu interconnect lines with x-ray microdiffraction, Journal of
Applied Physics, 86, 884, 15 July 1999.
[9] Steger-Hartmann T., Lnge R., Schweinfurth H., Environmental Risk Assessment for the Widely Used
Iodinated X-Ray Contrast Agent Iopromide (Ultravist), American Society, EESA, p. 274-281, Volume
42, Issue 3.
[10] Chapman Wendy Webber, Fizman Marcelo, Chapman Brian E., Haug Peter J., A Comparison of
Classification Algorithms to Automatically Identify Chest X-Ray Reports That Support Pneumonia,
American Society, JBIN, p. 4-14, Volume 34, Issue 1.
Chimie Analitic i Instrumental
[11] Venezia A. M., Liotta L. F., Deganello G., Schay Z., Guczi L., Characterization of Pumice-Supported AgPd and Cu-Pd Bimetallic Catalysts by X-Ray Photoelectron Spectroscopy and X-Ray Diffraction;
American Society, JCAT, p. 449-455, Volume 182, Issue 2.
[12] Ohno Youichi, The Scanning-Tunneling Microscopy, the X-Ray Photoelectron Spectroscopy, the InnerShell-Electron Energy-Loss Spectroscopy Studies of M Te2and M3SiTe6(M=Nb and Ta), American
Society, JSSC, p. 63-73, Volume 142, Issue 1.
[13] Johnson Daniel J. D., Nugent Philip G., Tuddenham Edward G. D., Harlos Karl, Kemball-Cook Geoffrey,
Crystallization and Preliminary X-Ray Analysis of Active Site-Inhibited Human Coagulation Factor VIIa
(des-Gla), American Society, JSBI, p. 90-93, Volume 125, Issue 1.
[14] Jackson Togwell A., West M. Marcia, and Leppard Gary G., Accumulation of Heavy Metals by Individually
Analyzed Bacterial Cells and Associated Nonliving Material in Polluted Lake Sediments, Environmental
Science & Technology, p. 3795-3801, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999.
[15] Bishop Gary A., Stedman Donald H., Hektner Mary, Ray John D., An In-Use Snowmobile Emission Survey
in Yellowstone National Park, Environmental Science & Technology, p. 3924-3926, Volume 33, Issue 21,
November 1, 1999.
[16] Fernndez Pilar, Vilanova Rosa M., and Grimalt Joan O., Sediment Fluxes of Polycyclic Aromatic
Hydrocarbons in European High Altitude Mountain Lakes, Environmental Science & Technology, p.
3716-3722, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999.
[17] Taran Y. A., Fischer T. P., Cienfuegos E. and Morales P., Geochemistry of hydrothermal fluids from an
intraplate ocean island: Everman volcano, Socorro Island, Mexico, Chemical Geology, p. 51-63, Volume
188, Issues 1-2, 30 August 2002.
[18] Aleinikoff John N., Wintsch Robert P., Fanning Mark C. and Dorais Michael J., U-Pb geochronology of
zircon and polygenetic titanite from the Glastonbury Complex, Connecticut, USA: an integrated SEM,
EMPA, TIMS, and SHRIMP study, p. 125-147, Volume 188, Issues 1-2, 30 August 2002.
[19] Shi Ji Ping and Harrison Roy M., Investigation of Ultrafine Particle Formation during Diesel Exhaust
Dilution, Environmental Science & Technology, p. 3730-3736, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999.
[20] Haefliger Olivier P., Bucheli Thomas D., and Zenobi Renato, Comment on "Real-Time Characterization of
the Organic Composition and Size of Individual Diesel Engine Smoke Particles", Environmental Science
& Technology, p. 3932-3932, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999.
[21] Reilly Peter T. A., Gieray Rainer A., Whitten William B., and Ramsey J. Michael, Response to Comment on
"Real-Time Characterization of the Organic Composition and Size of Individual Diesel Engine Smoke
Particles", Environmental Science & Technology, p. 3933-3934, Volume 33, Issue 21, November 1,
1999.
6
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
ciment, cocs i hidrocarburi policiclice aromatice provenite din cocsificare [22], oxizi de fier
de la topirea minereurilor i fluoruri de la procesele metalurgice [23-25]. n tabelul 1 sunt
prezentai civa dintre poluanii organici tipici din apele reziduale industriale:
Tabelul 1 Componeni organici n apele reziduale industriale
Domeniul
Componente reziduale n apele uzate
minerit,
uzine
de humus, praf de crbune, ageni de flotaie
prepararea minereurilor
turntorii
cianuri, fenoli, gudroane, praf de crbune
prelucrarea fontei i a ageni de umectare i lubrifiani, cianuri, inhibitori, hidrocarburi,
oelurilor
reziduuri de solveni
prepararea
crbunilor, humus, praf de crbune, cianuri, rodanine, fenoli, hidrocarburi,
cocserii
piridine bazice
producia de crbune acizi grai, alcooli (n special metanol), fenoli
lemn
industria petrolier
emulsii de uleiuri, acizi naftenici, fenoli, sulfonai
past de lemn pentru metanol, cimol, furfurol, hidrai de carbon solubili, acizi
fabricarea hrtiei
lignosulfonici
Viscoz i celuloz
xantogenai, semiceluloze alcaline
industria hrtiei
acizi rezinici, polizaharide, fibre celulozice
industria textil
ageni de degresare i umectare, ageni de nivelare, apreturi,
ageni de ncleiere, acizi grai, acid nitrolotriacetic (trilon),
colorani
spltorii
detergeni, celuloz carboximetilic, enzime, ageni de nlbire,
colorani, murdrii, proteine, snge, cacao, cafea, etc.
industria pielriei i produi de degradare a proteinelor, spunuri, ageni de tanare,
tanailor
spun de calciu emulsionat, pr
rafinrii de zahr
zahr, acizi vegetali, betain, pectin
fabrici de amidon
compui solubili n ap pe baz de proteine, pectine, hidrai de
carbon
fabrici de produse lactate proteine, lactoz, acid lactic, emulsii de grsimi, ageni de
splare i cltire
fabrici de spun i glicerin, acizi grai, emulsii de grsimi
grsimi
fabrici de conserve
componeni vegetali solubili
fabrici de bere
componeni vegetali solubili, reziduuri de bere, ageni de cltire
fabrici
de
produse acizi grai i aminoacizi, alcooli, hidrai de carbon
fermentate
abatoare
snge, componeni din carne solubili n ap i componeni
emulsionai
[22] Swackhamer Deborah L., Schottler Shawn, and Pearson Roger F., Air-Water Exchange and Mass Balance
of Toxaphene in the Great Lakes, Environmental Science & Technology, p. 3864-3872, Volume 33, Issue
21, November 1, 1999.
[23] Wehner B., Bond T. C., Birmili W., Heintzenberg J., Wiedensohler A., and Charlson R. J., ClimateRelevant Particulate Emission Characteristics of a Coal Fired Heating Plant, Environmental Science &
Technology, p. 3881-3886, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999.
[24] Emmrich Monika; Kinetics of the Alkaline Hydrolysis of 2,4,6-Trinitrotoluene in Aqueous Solution and
Highly Contaminated Soils, Environmental Science & Technology, p. 3802-3805, Volume 33, Issue 21,
November 1, 1999.
[25] Paulson Anthony J., Balistrieri Laurie, Modeling Removal of Cd, Cu, Pb, and Zn in Acidic Groundwater
during Neutralization by Ambient Surface Waters and Groundwaters, Environmental Science &
Technology, p. 3850-3856, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999.
Chimie Analitic i Instrumental
Au mai fost puse n eviden asfalturi, solveni, monomeri sintetici, cauciucuri butilice
i negru de fum. Ali poluani sunt: pulberea de cenu de la termocentralele electrice care
utilizeaz crbune sau particule de zgur rezultate din diferite procese industriale [26,27].
Acestei liste complexe de poluani i se pot aduga poluani gazoi ai aerului i
particulele datorate unei poluri locale sau accidentale.
Apa este un sistem la fel de complex ca i aerul atunci cnd este analizat pentru
determinarea componenilor poluani. Ca i n studiul aerului, chimia analitic a jucat un rol
important n studiul polurii apei.
Operaia de msurare este fundamental n analiz. O msurtoare simpl poate
implica proprieti ca: mas, intensitate de curent, tensiune, volum sau timp [28-32]. Alte
proprieti msurate n vederea unor analize chimice sunt: absorbia sau emisia de energie
[33-35] rotaia optic [36], indicele de refracie [37], constanta de echilibru [38] constanta
[26] Bond T. C., Bussemer M., Wehner B., Keller S., Charlson R. J., and Heintzenberg J., Light Absorption by
Primary Particle Emissions from a Lignite Burning Plant, Environmental Science & Technology, p.
3887-3891, Volume 33, Issue 21, November 1, 1999.
[27] Gallego-Jurez Juan A., Riera-Franco De Sarabia Enrique, Rodrguez-Corral German, Hoffmann Thomas
L., Glvez-Moraleda Juan C., Rodrguez-Maroto Jesus J., Gmez-Moreno Francisco J., Bahillo-Ruiz
Alberto, Martn-Espigares Manuel, Acha Miguel, Application of Acoustic Agglomeration to Reduce Fine
Particle Emissions from Coal Combustion Plants, Environmental Science & Technology, p. 3843-3849,
Volume 33, Issue 21, November 1, 1999.
[28] Martin Todd M., Gupta Ram B., and Roberts Christopher B., Measurements and Modeling of Cloud Point
Behavior for Poly(propylene glycol) in Ethane and in Ethane + Cosolvent Mixtures at High Pressure,
Industrial & Engineering Chemistry Research, p. 185-194, Volume 39, Issue 1, January 4, 2000.
[29] Mussari Lelia, Postigo Miguel, Lafuente Carlos, Royo Flix M., and Urieta Jos S., Viscosity Measurements
for the Binary Mixtures of 1,2-Dichloroethane or 1,2-Dibromoethane with Isomeric Butanols, Journal of
Chemical & Engineering Data, p. 86-91, Volume 45, Issue 1, January 13, 2000.
[30] Dunstan Dave E., Stokes Jason, Diffusing Probe Measurements of Polystyrene Latex Particles in
Polyelectrolyte Solutions: Deviations from Stokes-Einstein Behavior, Macromolecules, p. 193-198,
Volume 33, Issue 1, January 11, 2000.
[31] Devireddy Ramachandra V., Barratt Paul R., Storey Kenneth B., Bischof John C., Liver Freezing Response
of the Freeze-Tolerant Wood Frog, Rana sylvatica, in the Presence and Absence of Glucose. I.
Experimental Measurements, American Society, CRYO, p. 310-326, Volume 38, Issue 4.
[32] Lau Ka-Sing, Ngai Sze-Man, Multifractal Measures and a Weak Separation Condition, American Society,
AIMA, p. 45-96, Volume 141, Issue 1.
[33] Roncin Jean-Yves, Launay Franoise, Bredohl Harald, Dubois Iwan, The Vacuum Ultraviolet Absorption
Bands of the Pink Afterglow Spectrum of Molecular Nitrogen Revisited at High Resolution, American
Society, JMSP, p. 243-249, Volume 194, Issue 2.
[34] Meng Q., Daniels-Race T., Luo Z., McNeil L. E., The polarization sensitivity of optical absorption in
tensile strained GaAs/InAlAs double quantum wells, American Society, SPMI, p. 583-590, Volume 25,
Issue 4.
[35] Baldo M.A. et al., Very high-efficiency green organic light-emitting devices based on
electrophosphorescence, Applied Physics Letters, 75, 4, July 5, 1999.
[36] Peddle Derek R., Hall Forrest G. and LeDrew Ellsworth F., Spectral Mixture Analysis and GeometricOptical Reflectance Modeling of Boreal Forest Biophysical Structure, Remote Sensing of Environment, p.
288-297, Volume 67, Issue 3, March, 1999.
[37] Kendrick Brent S., Kerwin Bruce A., Chang Byeong S. and Philo John S., Online Size-Exclusion HighPerformance Liquid Chromatography Light Scattering and Differential Refractometry Methods to
Determine Degree of Polymer Conjugation to Proteins and ProteinProtein or ProteinLigand
Association States, p. 136-146, Analytical Biochemistry, Volume 299, Issue 2, 15 December, 2001.
[38] Ortiz T. M., Meyer B. A., and Razani A., Empirical Correlation of Equilibrium Separation Factors in the
Pd-H2/D2 System with Temperature and Composition, Journal of Chemical & Engineering Data, p. 120123, Volume 45, Issue 1, January 13, 2000.
8
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
vitezei de reacie [39,40] energia de activare [41] sau cldura de reacie [42,43]. Orict de
simple sau complexe ar fi aceste msurtori, sigurana, utilitatea, precizia, interpretarea i
realizarea lor depind de analist, care trebuie s fie preocupat nu numai de efectuarea analizei,
ci i de cum, de ce i unde se utilizeaz n final rezultatele obinute. Analistul are obligaia de
a efectua determinri bazate pe procedee sigure, reproductibile i verificate.
[39] Dillingham Mark S., Wigley Dale B., and Webb Martin R., Demonstration of Unidirectional SingleStranded DNA Translocation by PcrA Helicase, Measurement of Step Size and Translocation Speed,
Biochemistry, p. 205-212, Volume 39, Issue 1, January 11, 2000.
[40] Laarhoven Lucas J. J. and Mulder Peter, -C-H Bond Strengths in Tetralin and THF: Application of
Competition Experiments in Photoacoustic Calorimetry, The Journal of Physical Chemistry B, p. 73-77,
Volume 101, Issue 1, January 2, 1997.
[41] Mitchell T. E., Hirth J. P. and Misra A., Apparent activation energy and stress exponent in materials with a
high Peierls stress, p. 1087-1093, Acta Materialia, Volume 50, Issue 5, 14 March, 2002.
[42] Cedeo Fidel Oscar, Prieto Mara M., and Xiberta Jorge, Measurements and Estimate of Heat Capacity for
Some Pure Fatty Acids and Their Binary and Ternary Mixtures, Journal of Chemical & Engineering Data,
p. 64-69, Volume 45, Issue 1, January 13, 2000.
[43] Dai Wenbin, Kojima Kazuo, and Ochi Kenji, Measurement and Correlation of Excess Molar Enthalpies of
Carbon Dioxide + 2-Butanol and 2-Propanol Systems at the Temperatures 303.15 K and 308.15 K and at
Pressures from 7.0 to 8.5 MPa, Journal of Chemical & Engineering Data, p. 6-10, Volume 45, Issue 1,
January 13, 2000.
Chimie Analitic i Instrumental
[44] Srbu Costel, Jntschi Lorentz, Validarea i Evaluarea Statistic a Metodelor Analitice prin Studii
Comparative. I. Validarea Metodelor Analitice folosind Analiza de Regresie, Revista de Chimie,
Bucureti, p. 19-24, 49(1), 1998.
[45] Nacu Horea, Jntschi Lorentz, Hodian Teodor, Cimpoiu Claudia, Cmpan Gabriela, Some Applications of
Statistics in Analytical Chemistry, Reviews in Analytical Chemistry (Freud Publishing House), p. 409456, XVIII(6), 1999.
[46] Baker G. L., Gollub J. P., Blackburn J. A., Inverting chaos: Extracting system parameters from
experimental data, Chaos, p. 528, Vol. 6, No. 4, 1999.
[47] Hatton Angela D. and Gibb Stuart W., A Technique for the Determination of Trimethylamine-N-oxide in
Natural Waters and Biological Media, Analytical Chemistry, p. 4886-4891, Volume 71, Issue 21,
November 1, 1999.
10
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
Noiuni fundamentale
Procedeele de monitorizare, pentru a putea fi comparate cu alte metode de analiz, n
vederea nlocuirii sau perfecionrii acestora, sunt individualizate prin caracteristici proprii,
dintre care amintim pe cele mai frecvent utilizate: exactitatea, precizia, selectivitatea,
sensibilitatea, limita de detecie, durata, costul.
n afar de acestea mai exist i alte caracteristici, necesare doar specialitilor, care
creeaz noi metode de analiz: analitii, o profesie care se dobndete doar prin pasiunea
executrii de analize performante, zi de zi, o perioad de timp de ordinul anilor, indiferent de
meseria de baz a celui ce o practic: chimist, fizician, medic, inginer, biolog sau geolog.
Exactitatea
Este msura ncrederii acordat msurtorii efectuate cu un mijloc de msur. Aceasta
se refer la sistemul analitic, n ansamblu, indiferent de locul i timpul msurtorii. Exactitate
a se msoar folosind un material (substan) zis etalon - n care ncrederea este deplin.
Diferena dintre valoarea adevrat, adic aceea recunoscut unanim, i cea msurat o
denumim eroare. Este esenial ca etalonul s fie recunoscut de toate laboratoarele interesate.
Exactitatea este msurat i de corelaia ce exist ntre un standard i o prob, la msurtori
repetate. n acelai timp, exactitatea estimeaz posibilitatea de apariie a erorilor sistematice.
O comparaie intuitiv dintre exactitatea unei analize i trasul la int cu o puc scoate n
eviden sensul exactitii (vezi fig. 2).
11
Precizia
Gruparea analizelor individuale n jurul valorii medii se evalueaz prin precizie. Schia
de mai jos ne permite s caracterizm dou trageri la int, una precis i alta imprecis (fig.
3). Noiunea de precizie este sinonim cu aceea de reproductibilitate i se exprim tot n
procente utiliznd abaterea standard a mediei de selecie sx (sau RSD [48]):
Precizia (%) = sx100/ x
Prin definiie:
sx =
(x i -x)
n(n-1)
unde xi reprezint valoarea numeric a unei analize, x - valoarea mediei tuturor analizelor, n
fiind numrul de determinri i reprezint abaterea standard a mediei de selecie, o msur
matematic a mprtierii rezultatelor n jurul mediei.
Fig. 3. Ilustrarea preciziei: A-tir precis analog cu o analiz chimic precis, B-tir imprecis
analog cu o analiz chimic imprecis
Selectivitatea
Selectivitatea sau specificitatea este msura n care rezultatul unei analize este
influenat de prezena unui alt component. De exemplu, pentru identificarea ionului Ni2+ avem
la dispoziie un reactiv numit dimetilglioxim, ce nu reacioneaz cu nici un alt ion. Spunem
c aceasta este o reacie specific (i deci metoda este selectiv). Cu alte cuvinte analiza nu
este influenat de concentraiile altor ioni aflai n aceeai soluie. Selectivitatea indic, prin
valoarea sa, interferena altor ioni (sau, mai general, a altor specii chimice). S notm cu y un
semnal dependent de concentraie i fie n numrul de componeni de analizat, fiecare
contribuind la cele n semnale diferite: y1, y2, ... , yn, printr-un sistem de ecuaii liniare de
forma:
y1 = 11C1 + 12C2 + ... + 1nCn
y2 = 21C1 + 22C2 + ... + 2nCn
[48] RSD este prescurtarea din l. engl. a termenului relative standard deviation folosit n literatura de specialitate
internaional.
12
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
...
yn = n1C1 + n2C2 + ... + nnCn
Spunem despre un proces de determinare analitic, care determin n componeni de
concentraii C1, C2, ..., Cn, prin msurarea valorilor semnalelor y1, y2, ..., yn, c este total
selectiv dac i numai dac elementele diagonalei principale a matricei coeficienilor supus
transformrilor elementare, ii (i = 1..n), sunt diferite de zero.
Sensibilitatea
Dac nu exist interferene i singurul component de analizat are analiza bazat pe
funcia y = f(c), numit i funcie de rspuns, exemplificat n fig. 4 pentru o specie oarecare,
atunci panta acestei curbe indic chiar sensibilitatea, S:
S=
y
c
La funciile liniare, de forma y = a + bx, cea mai frecvent folosit mrime, n calitate
de sensibilitate a analizei, este chiar coeficientul b - panta curbei - adic: S = b.
n cazul existenei mai multor funcii liniare msurarea sensibilitii, Hn este chiar
determinantul corespunztor coeficienilor funciilor de rspuns (vezi sistemul de ecuaii
liniare precedent):
Hn = det(), unde matricea coeficienilor ij
Pentru analiza chimic instrumental trebuie gsite astfel de condiii experimentale
sau de prelucrare a datelor, ca elementele de pe diagonala principal s fie maxime iar restul
Chimie Analitic i Instrumental
13
egale cu zero sau ct mai mici. Sistemul are n acest caz o sensibilitate i selectivitate mare.
Se msoar n uniti de timp per analiz iar costul la preul unei analize incluznd:
materialele, manopera, chiria laboratorului, amortizarea aparatelor (uzura mijloacelor fixe),
costurile reactivilor folosii, energia i apa.
14
Informaia Analitic
Evidena analizelor
15
Standarde analitice
n vederea obinerii unor rezultate ale analizelor care s poat fi valabile pentru mai
multe uniti (firme, instituii sau uniti economice) pe teritoriul unei ri sau al unui grup de
ri, de regul analizele se fac prin metode verificate i adaptate la probe de o anumit
categorie. De exemplu, cuprul din oel sau cuprul din prul uman se aseamn n principiu dar
reetele difer din mai multe puncte de vedere. n prezent n rile avansate exist organizaii
care studiaz i verific metodele de analiz pentru cele mai diverse grupuri materiale.
Echivalentul acestora la noi este Institutul Romn de Standardizare. Cele mai potrivite metode
sunt recomandate a fi utilizate n toate laboratoarele de acelai tip din ara respectiv. Aceste
metode se denumesc metode standardizate i sunt publicate, existnd chiar n unele biblioteci.
Acestea prevd toate operaiunile, modul de determinare a fiecrui component - inclusiv
formula de calcul (fr a se da explicaii privind principiile) sau instrumentul necesar. Exist
ns i standarde care se ocup cu aspecte comune mai multor metode de analiz cum ar fi
luarea probei medii pentru diferite materiale, de exemplu probe de sol, de aer de ap, nisip,
gru sau minereu.
n cazul n care nu s-au elaborat nc reete standard, fiind vorba de un produs nou,
analizele se fac pe baza unei norme interne stabilite de comun acord ntre productorul i
beneficiarul respectivei analize. Colecia de metode unanim acceptate formeaz un sistem de
standarde de analiz chimic i acestea sunt denumite diferit n funcie de ar. De exemplu,
ASTM n SUA, DIN n Germania iar n ultimul timp, pentru Comunitatea European,
standardele ISO.
16
Informaia Analitic
Metodele analitice de pot clasifica pe tipul i starea fizic a probei, scopul analizei,
mrimea probei (tabelul 2) sau dup tipul metodei analitice. Dup acest din urm criteriu,
metodele analitice se mpart n metode chimice i metode instrumentale. Metodele chimice se
bazeaz pe diferite operaii chimice folosind sticlria uzual de laborator format din aparate
simple. n general n aceste metode se msoar masa sau volumul. Metodele instrumentale
implic utilizarea unui echipament complex, bazat pe principii electronice, optice sau termice.
n aceste cazuri, se msoar diferite proprieti corelate cu compoziia probei. Cele mai bune
rezultate se obin prin cuplarea tehnicilor chimice cu cele instrumentale [49]. Fiecare
categorie de metode prezint avantaje i dezavantaje, i alegerea metodei sau complexului de
metode trebuie s se fac minimiznd interferena dezavantajelor i maximiznd influena
avantajelor asupra cerinelor concrete ale analizei de efectuat.
Avantajele metodelor instrumentale: determinarea este foarte rapid; pot fi utilizate
probe mici; pot fi cercetare probe complexe; prezint o sensibilitate ridicat; dau un grad mare
de siguran rezultatelor msurtorilor.
Avantajele metodelor chimice: procedeele sunt simple i precise; metodele se bazeaz
ia de obicei un timp destul de lung; precizia scade odat cu micorarea cantitilor de prob
(msurtori absolute); sunt lipsite de flexibilitate; sunt poluante pentru mediul nconjurtor.
Dezavantajele metodelor instrumentale: este necesar o etalonare iniial sau continu
[49] Bailey Nigel J. C., Cooper Paul, Hadfield Stephen T., Lenz Eva M., Lindon John C., Nicholson Jeremy K.,
Stanley Paul D., Wilson Ian D., Wright Brian, and Taylor Stephen D., Application of Directly Coupled
HPLC-NMR-MS/MS to the Identification of Metabolites of 5-Trifluoromethylpyridone (2-Hydroxy-5trifluoromethylpyridine) in Hydroponically Grown Plants, Journal of Agricultural and Food Chemistry, p.
42-46, Volume 48, Issue 1, January 17, 2000.
Chimie Analitic i Instrumental
17
Analiza cantitativ
Analiza cantitativ este bazat pe msurarea unei proprieti care este corelat direct
sau indirect, cu cantitatea de constituent ce trebuie determinat dintr-o prob. n mod ideal,
nici un constituent, n afar de cel cutat, nu ar trebui s contribuie la msurtoarea efectuat.
Din nefericire, o astfel se selectivitate este rareori ntlnit.
Pentru a proceda la o analiz cantitativ, trebuie urmate o serie de etape:
1. Obinerea unei probe semnificative prin metode statistice;
2. Prepararea probei;
3. Stabilirea procedeului analitic n funcie de:
Metode: (chimice; fizice cu sau fr schimbri n substan);
Condiii: (determinate de metoda de analiz aleas; determinate de substana cercetat);
Cerine: (rapiditate, exactitate, costuri; posibilitatea de amortizare);
4. Evaluarea i interpretarea rezultatelor.
Practic, dup natura analizei, exist 7 tipuri de metode de analiz: (1) gravimetrice; (2)
volumetrice; (3) optice; (4) electrice; (5) de separare; (6) termice; (7) de rezonan. n general,
(1) i (2) sunt metode chimice, iar (3-7) sunt instrumentale (bazate pe relaii ntre o proprietate
caracteristic i compoziia probei). Adeseori, n analiz se cupleaz dou sau mai multe
dintre aceste procedee de baz. O alt clasificare a metodelor de analiz se poate face dup
implicarea componenilor n reacii chimice, n metode stoechiometrice i metode
nestoechiometrice. Tabelul 3 conine unele metode tipice de msurare i categoria tip
stoechiometric:
Tabelul 3. Metode analitice stoechiometrice (S) i nestoechiometrice (N)
1. GRAVIMETRICE - izolarea unui precipitat care poate fi cntrit
1.1 Ageni de precipitare anorganici (S)
1.2 Ageni de precipitare organici (S)
1.3 Electrodepunere (S)
2. VOLUMETRICE - reacia substanei de analizat cu o soluie standard
2.1 Titrri acid-baz (S)
2.2 Titrri de precipitare (S)
2.3 Titrri complexonometrice (S)
2.4 Titrri de oxidare - reducere (S)
3. OPTICE
3.1 ABSORBIE DE ENERGIE - atenuarea radiaiei de ctre o prob absorbant
3.1.1 Colorimetrie (N)
3.1.2 Spectrofotometrie n ultraviolet (N)
3.1.3 Spectrofotometrie n infrarou (N)
3.1.4 Msurarea reflectanei luminii reflectate de prob (N)
3.2 EMISIE DE ENERGIE - aplicarea unei energii suplimentare (cldur, lumin) i
observarea emisiei fotonice
3.2.1 Emisia n arc - excitarea n arc electric (N)
18
Informaia Analitic
19
Metode de separare
Adesea este necesar s se ndeprteze impuritile din prob nainte ca aceasta s fie
supus analizei. Procedeele folosite pentru acest lucru sunt cuprinse sub titlul general de
metode de separare. Metodele de separare se bazeaz pe fenomene fizice sau chimice i nu
totdeauna sunt asociate doar cu separarea impuritilor [50].
Separarea componenilor dintr-un amestec poate avea o importan att calitativ ct i
cantitativ, separarea poate fi util pentru purificare, pentru concentrarea unuia dintre
componeni sau a tuturor. O clasificare a metodelor de separare este dat n tabelul 4.
Sub aspect analitic, procedeele de separare sunt deosebit de importante, deoarece
metodele de analiz sunt selective i conduc la rezultate corecte numai dac n prealabil s-au
izolat constituenii probei [51]. Metodele de separare aplicate sistemelor chimice au ca scop
separarea sau mprirea unui amestec eterogen sau omogen n unitile sale individuale, n
grupuri, componente sau chiar n elemente [52].
Tabelul 4. Metode de separare
Metoda
Bazele metodei
Precipitare
solubiliti diferite
Distilare
volatiliti diferite
Sublimare
presiuni de vapori diferite
Extracie
solubilitatea diferit ntre dou faze
Cristalizare
proprieti de solubilitate funcie de temperatur
Rafinare zonal
cristalizare la temperatur ridicat
Flotaie
diferene de densitate ntre substane i lichid
Ultrafiltrare
mrimea substanei vs dispozitivul de filtrare
Dializ
osmoza - trecerea selectiv a unui sistem printr-o membran
Electrodepunere
electroliza folosind electrozi ineri
Cromatografie
de absorbie pe coloan distribuia solutului ntre o faz solid i una lichid pe coloan
de repartiie pe coloan distribuia solutului ntre dou lichide pe coloan
adsorbia sau repartiia pe un strat subire poros plan
pe strat subire
repartiia pe o suprafa de hrtie plan
pe hrtie
lichide, nalt presiune cromatografia de lichide pe o coloan sub o presiune ridicat
schimbul de ioni
prin schimb ionic
mrimea solutului
cu site moleculare
mrimea solutului
penetraia prin gel
distribuia solutului ntre un gaz i o faz lichid sau solid
de gaze
separarea pe o suprafa plan n prezena unui cmp electric
electroforeza zonal
[50] Utille J.-P., Boutron P., Separation of Racemic from meso-2,3-Butanediol, Cryo, p. 398-402, 38(4), 1999.
[51] Oleinikova M., Muraviev D., Valiente M., Aqua-Impregnated Resins. 2. Separation of Polyvalent Metal
Ions on Iminodiacetic and Polyacrylic Resins Using Bis(2-ethylhexyl) Phosphoric and Bis(2-ethylhexyl)
Dithiophosphoric Acids as Organic Eluents, Anal. Chem., p. 4866-4873, Volume 71, Issue 21, 1999.
[52] Ishii Y., Ryan A.J., Processing of Poly(2,6-dimethyl-1,4-phenylene ether) with Epoxy Resin. 1. ReactionInduced Phase Separation, Macromolecules, p. 158-166, 33(1), 2000.
20
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
Este foarte important stabilirea de standarde sau de referine pentru orice fel de
msurtoare. Astfel, standardul de baz n cazul msurrii unor proprieti fizice este o unitate
de msur foarte precis definit. n chimie, standardul de baz poate fi o substan a crei
puritate a fost verificat. Deoarece standardele de baz nu sunt ntotdeauna accesibile, se
21
dup
ce
fost
[53] A transvaza - a trece prin turnare (manual sau instrumental) un lichid dintr-un vas n altul.
22
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Informaia Analitic
ntrebri de verificare
23
Proba
nceputul este partea cea mai important a unui lucru
Platon (cca. 428-347 B.C.), n Republica, Cartea II
Proba
De cele mai multe ori, luarea unei probe, la o analiz fcut n laboratoarele didactice,
const ntr-o cntrire sau o msurare a unui volum de prob cu care se ncepe lucrul n
laborator. Trebuie s avem n vedere c practica din realitate este diferit. i anume, aceasta
poate constitui etapa cu care ncepe analiza n laborator dar originea eantionului adus la
laborator este alta - provenind din materialul de analizat. Unul din subcapitole va aborda i
acest aspect. Pe de alt parte, etapa cu care se ncepe analiza chimic din laboratorul de
analiz instrumental rmne cntrirea. Deci, ncepem acest capitol cu atenionarea c:
de calitatea i modul de ntreinere a balanei analitice - principalul instrument de
cntrire - depinde exactitatea tuturor analizelor din acel laborator
Prelevarea probelor
25
Dar, aplicnd aceste precauii se obin de regul cantiti prea mari de material de analizat
format din buci cteodat neomogene i diferite, n ceea ce privete compoziia, de la un
punct la altul. Aceast prob reprezentativ, este sfrmat i mrunit nite scule specifice
de exemplu concasoare sau mori i redus treptat pn la cantitatea trimis la laborator, care
poate fi ntre 25 g i 1 kg. Aceasta, nainte de cntrire, se macin fin (50). n prepararea
probelor se folosesc materiale dure i totodat pure ca agat, cuar, porelan, platin, Teflon
sau polietilen. Acestea se spal n mod special. De exemplu, sticla se spal cu detergent apoi
se umecteaz cu amestec cromic, se cltete cu ap apoi cu ap distilat i n final, se usuc
fr tergere.
Exist 3 metode de baz pentru colectarea probelor gazoase. Acestea sunt: prin
expansiune ntr-un container din care proba poate fi ulterior evacuat; prin absorbie pe un
suport i prin nlocuire cu un lichid. n toate cazurile, trebuie s se cunoasc volumele vaselor
de colectare, temperatura i presiunea. n mod obinuit, vasele de colectare sunt confecionate
din sticl i trebuie prevzute cu un orificiu de intrare i unul de ieire ce pot fi nchise i
deschise, n mod convenabil.
Pentru a elimina contaminarea probelor, se recomand iniial splarea containerului cu
gazul din care se preleveaz proba. Concepia dispozitivului de prelevare a probei trebuie s
permit ca acest procedeu s se execute cu uurin. Aerul este un amestec complex de
diferite gaze. Studiul compoziiei aerului este o problem frecvent n studiul mediului [5659]. Compoziia sa real este dependent de mediul nconjurtor i de locul de unde se ia
proba. n prezent, datorit polurii, multe eforturi sunt ndreptate pentru studiul i
supravegherea calitii aerului. Exist mai multe modaliti pentru prelevarea probelor de aer.
O metod preferat n cazul analizelor de mediu este metoda absorbiei prezentat n fig. 1.
Pentru determinarea unor compui aflai n concentraii foarte coborte n probe
gazoase, de exemplu compui moleculari n stare de vapori dintr-o atmosfer poluat, se
obinuiete captarea acestora pe un suport solid, prin trecerea unui volum cunoscut din
eantion peste o coloan (tubuor) care conine suportul respectiv. Un astfel de exemplu este
prezentat n fig. 2 unde tubul (4x100mm), iniial nchis la cele dou capete (la flacr),
[56] Mendes Adlio M. M., Costa Carlos A. V., and Rodrigues Alrio E., Analysis of Nonisobaric Steps in
Nonlinear Bicomponent Pressure Swing Adsorption Systems. Application to Air Separation, Industrial &
Engineering Chemistry Research, p. 138-145, Volume 39, Issue 1, January 4, 2000.
[57] Slawig T., Domain optimization of a multi-element airfoil using automatic differentiation, p. 225-237,
Advances in Engineering Software, Volume 32, Issue 3, 15 December, 2000.
[58] Davidson Gregg R., Use of SF6 to label drilling air in unsaturated, fractured rock studies: risk of overpurging, p. 1361-1370, Applied Geochemistry, Volume 17, Issue 10, October, 2002.
[59] Liao Chung-Min, Chen Jein-Wen, Chen Jui-Sheng and Liang Huang-Min, A transfer function model to
describe odor causing VOCs transport in a ventilated airspace with mixing/adsorption heterogeneity, p.
1071-1087, Applied Mathematical Modelling, Volume 25, Issue 12, December, 2001.
26
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Proba
conine mai muli adsorbeni, fiecare destinat unui anumit compus. Varietatea suporturilor
folosite este limitat doar de imaginaia analistului.
apa manson de cauciuc
aer
apa
De exemplu acestea pot fi diferite sortimente de crbune poros (activ), grafit, polimeri
organici poroi avnd fixate prin legturi chimice diferite funciuni precum i adsorbeni
mbibai cu soluii de reactivi sau chiar coninnd reactivi solizi. O pomp cu debit controlat
asigur aspirarea unui anumit volum. Dup nchiderea cu capace etane tubuorul din sticl
sau material plastic este transportat n laborator. Aici, compuii adsorbii sunt recuperai, fie
prin extracie ntr-un solvent (de preferat CS2) fie prin desorbie termic, simultan cu
splarea, realizat cu un gaz inert. Marele avantaj al ultimei metode este acela c proba nu se
proporie de 60%. Acest tip de prelevare a probelor este specific igienei industriale i
controlului polurii mediului.
Ca exemplu reuit de prelevare a probelor pe suporturi solide putem da cazul
determinrii aldehidei formice din aer. Aceasta provine din degradarea rinilor
Chimie Analitic i Instrumental
27
amestecul lichid este instabil (de exemplu o emulsie), dac conine componeni volatili, sau
dac conine gaze dizolvate, intervin dificulti suplimentare [60]. n general, prile alicote
[61] sunt prelevate la ntmplare de la diferite adncimi i din toate locurile din proba de
lichid. Acestea pot fi analizate n mod separat sau pot fi combinate pentru a da o prob cu
compoziie, n mod static, reprezentativ pentru proba original. Amestecurile de lichide
nemiscibile sunt destul de frecvente n tehnic [62]. Cele mai cunoscute sunt amestecurile de
ulei + ap i benzine + ap. Deversrile de produse petroliere accidentale sunt evenimente
foarte neplcute pentru ecosisteme. Pentru aceste amestecuri separarea fazelor, msurarea
raportului de amestecare i apoi analiza cantitativ a fraciilor separate sunt metode uzuale n
analiza instrumental a lichidelor.
Extracia lichid - lichid prin coloane cu suport solid este una dintre cele mai moderne
metode de prelevare a probelor lichide, de exemplu n cazul analizei unor poluani ai apelor.
Aceast metod, aprut relativ recent (uneori denumit extracia lichid-solid), a revoluionat
o procedur de laborator mai veche, nc utilizat i azi - extracia cu solveni pentru
separarea analiilor din probele lichide. Este o metod de separare dar totodat de concentrare
a analitului. Este o tehnic folosit n cazul concentraiilor mici (cum este i cazul poluanilor)
i const n trecerea unui volum cunoscut de prob, lichid sau n soluie, peste un cartu de
extracie umplut cu adsorbent solid cu o compoziie care s favorizeze reinerea unor
anumite clase de compui. Situaia ntlnit cel mai frecvent este prezentat n fig. 3 i
parcurge 4 etape.
[60] Wassenaar L.I. and Koehler G., An On-Line Technique for the Determination of the 18O and 17O of
Gaseous and Dissolved Oxygen, Anal.Chem., p. 4965-4968, 71(21), 1999.
[61] alicot adjectiv feminin, termen matematic, din francezul aliquote; parte alicot = parte a unui tot,
coninut n el de un anumit numr ntreg de ori; alicuante adjectiv, feminin, termen matematic, din
francezul aliquante; parte alicuant = parte care nu intr de un numr exact de ori ntr-un tot;
[62] Lu H., Matsumoto T., Gratzl M., Fine Chemical Manipulations of Microscopic Liquid Samples. 2.
Consuming and Nonconsuming Schemes, Anal.Chem., p. 4896-4902, 71(21), 1999.
28
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Proba
II
Splare
impuriti
III
Splare
analit
IV
Fig. 3. Principiul reteniei selective a analitului pe coloane prin extracie; se observ fixarea
selectiv a analitului, n timp ce impuritile nu sunt reinute
29
substan solid, deoarece compoziia particulelor de diferite mrimi poate varia. n general,
transformarea unei probe mari ntr-o prob de mrime convenabil pentru analiz cere mai
nti, reducerea probei la o mrime de particule uniform i n al doilea rnd, reducerea
masei probei. O mrime de particule uniform se obine trecnd proba prin concasoare,
pulverizatoare, mori sau mojare. Poate fi utilizat de asemenea i sitarea pentru granule, sau
pilirea pentru metale. Oricare ar fi procedeul ales, este necesar s se asigure ca prin aceste
operaiuni s nu se contamineze proba.
n cazul solidelor granulare (inclusiv n cazul monitorizrii poluanilor solului),
probele se extrag din mai multe puncte, cu aa-numitele sonde (fig. 4), de la adncimi diferite
sau, n lipsa lor, cu lopei conform schielor din fig. 5.
11/0,3
1/0,2
12/0,4
6/0,5
4/0,2
14/0,4
3/0,1
2/0,2
8/0,1
9/0,1
13/0,5
15/0,5
5/0,4
10/0,2
7/0,1
L/6
L/6
L/6
L/6
L/6
L/6
urmtoarele etape: (1) Se macin proba la o granulaie prevzut, (2). Se amestec materialul
obinut n grmad, (3). Se turtete cu ajutorul lopeii pn formeaz un strat n form de disc,
de grosime egal (fig. 6). (4). Acesta se mparte n patru sferturi egale i se rein numai dou
din sferturile opuse (v. fig. 7) de exemplu se rein sferturile I i III, restul - II i IV - se arunc.
Dac proba este mai mare se repet operaiile 1 ... 4 att ct este necesar. Aceste operaii se
pot realiza i mecanizat cu utilaje specializate.
Cnd standardul prevede, se mai execut o mrunire final a probei i n laborator,
pstrndu-se totui o proba martor i n unitatea care trimite eantionul, un timp suficient: 3
sau 6 luni.
30
Proba
31
[63] Jntschi Lorentz, Chira Ioan Ovidiu, Caiet de Lucrri practice de Chimia i Biochimia Poluanilor, U.T.
Press, Cluj-Napoca, 113 p., 2000, ISBN 973-9471-46-3.
32
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Proba
motive. Primul, datorat temperaturii mai ridicate, necesare topirii (de la 300C pn la
1000C) face ca procesele de reacie s se desfoare cu o vitez mai mare. Al doilea avantaj
este c n cazul fondanilor, n contact cu proba exist o cantitate mai mare de reactiv, ceea ce
face ca reacia s fie nu numai rapid ci i mai deplasat spre formarea de produi.
Tabelul 1. Fondani uzuali
Fondant Aplicaii (neoxidani)
Fondant
Aplicaii (oxidani)
Na2CO3 Silicai, fosfai, sulfai
Na2CO3+KNO3 probe uor oxidabile: Sb, S, Cr, Fe
NaOH, Silicai, carburi de siliciu Na2O2
sulfuri, aliaje, metale insolubile n acizi:
KOH
ferocrom, Ni, Mo, (fero)W
B2O3
Silicai, oxizi
33
fierbinte. Soluia rezultat, dei puternic alcalin, este corespunztoare pentru o ulterioar
separare sau chiar analiz chimic.
Extracia cu solveni aflai n stare supracritic este o metod de extracie mai puin
obinuit dar care permite uneori realizarea unor performane inaccesibile celorlalte tehnici de
extracie. Se aplic att probelor lichide ct i solide. Se tie c peste temperatura critic orice
lichid atinge o stare n care nu exist deosebiri ntre fazele lichide i gazoase. Fiecare
substan are pe digrama fazelor n coordonate presiune-temperatur, un punct critic. Valorile
pc i Tc corespunztoare acestui punct conconstituie limita inferioar de la care exist starea
supracritic. Cteva substane pot exista n stare supracritic chiar n condiii apropiate de
temperatura mediului ambiant: CO2, N2O, CHClF2. Aceste substane nu pun probleme nici n
ceea ce privete toxicitatea, nici coroziunea. Folosind aceste substane n stare supracritic se
pot realiza extracii imposibil de realizat prin alte metode. n principiu, se lucreaz cu un
recipient n form de tub, rezistent la presiune, n care se pune proba (solid sau o soluie) i
apoi se introduce lichidul supracritic.
Se poate lucra n dou variante. O prim variant este maniera off-line care const n
depresurizarea fluidului - condiii n care acesta devine gaz i las analitul, mpreun cu alte
impuriti, n forma unor picturi pe pereii vasului. Apoi urmeaz un procedeu de dizolvare extracie selectiv cu solveni clasici sau folosind un cartu de extracie cu suport solid unde
se combin selectivitatea extraciei cu adsorbia.
O a doua variant este maniera on-line, n care produsul extraciei este direct introdus
ntr-o instalaie cromatografic n funciune - fie una cu fluide supracritice, fie de tip HPLC.
Ultima variant se poate aplica doar cnd matricea probei nu interfer cu analitul.
Caracteristicile de solubilitate ale solventului supracritic CO2 se pot modifica mai ales
cu presiunea i temperatura. Dar ajustrile fine ale solventului supracritic (fluidului
supracritic) se mai pot modifica i prin introducerea n amestec a aa-numitor modificatori
organici (metanol, aceton), ntruct polaritatea CO2 supracritic are o valoare cobort,
comparabil cu cea a hexanului (evident la 100atm i 35C).
n rezumat, exist 4 posibiliti de a se modifica selectivitatea fluidului supracritic:
Presiunea,
Temperatura,
Durata,
Alegerea unor modificatori.
Extracia cu fluide supracritice este o metod relativ costisitoare dar care se preteaz la
automatizare i, n condiiile unui numr mare de probe, devine totui rentabil. n cazul
34
Proba
moleculelor mari - polimeri, componente biochimice ale organismelor naturale - metoda este
extrem de eficace.
Luarea probei n cazul monitorizrii instrumentale
35
suprafaa apei, pe vertical, depinde de tipul pompei folosite. Este preferat o adncime de 60
cm pn la 1m (evident de la nivelul suprafeei apei, dac este posibil) deoarece sub acest
Multe din principiile analizelor de aer se suprapun peste cele ale analizelor de ap.
Locul de poziionare a punctului de prelevare trebuie de asemenea s in cont de
36
Proba
37
ntrebri de verificare
38
Procesul de precipitare este cunoscut de foarte mult timp ca un procedeu folosit pentru
separare. Separarea prin precipitare se bazeaz pe diferenele ntre stabilitile
precipitatelor, n anumite condiii experimentale [64].
[64] Kekedy L., Chimie Analitic Calitativ, Ed. Scrisul Romnesc, Craiova, 1970.
Chimie Analitic i Instrumental
39
n alte cazuri, scopul principal al precipitrii este purificarea. n orice caz, procedeele
de analiz gravimetric i cele de separare prin precipitare sunt similare.
Gravimetria este o metod de analiz cantitativ bazat pe msurarea masei unui
precipitat. Toate msurtorile pentru determinarea masei sunt efectuate n acest caz cu balana
electroliz care conine soluia probei, prin reglarea curentului i potenialului. Se depune
specia de analizat pe catod, care se cntrete nainte i dup depunere.
Degajarea de gaze este de asemenea folosit gravimetric. Se nregistreaz pierderea
40
Gravimetria
soluia rmas (denumit soluie mum) s nu mai rmn dect o cantitate infim din
aceasta. Cantitatea rmas n soluie trebuie s fie sub limita de sensibilitate a balanei
analitice, deci o cantitate att de mic nct s nu mai poat fi sesizat de ctre balan i care,
n consecin, nu modific rezultatul. Apoi, precipitatul se separ prin filtrare, urmat
obligatoriu de o splare. Se obine, n final, compusul precipitat pur care, dup uscare sau
uscare i calcinare, se cntrete.
Cteva exemple de reacii cu formare de precipitate sunt:
Ba2+ + SO42- BaSO4 (pentru determinarea sulfatului),
Ag+ + Cl- AgCl (pentru analiza argintului sau clorurii),
Ca2+ + C2O42- CaC2O4 (pentru determinarea calciului).
Gama reaciilor folosite este foarte diferit i de aici denumirea de metod chimic
care se d gravimetriei. De exemplu, se pot folosi reactivi care reduc specia chimic solubil
la un element pur - insolubil. Astfel, clorhidratul de hidroxilamin (NH2OHHCl) se poate
folosi pentru reducerea Au, Se, Te la precipitate metalice din combinaii solubile ale acestora.
Dintre metodele care au la baz ndeprtarea unei combinaii la nclzire, amintim
reacia de volatilizare a silicei cu acid fluorhidric (reacia se execut ntr-un creuzet de platin
sub ni):
SiO2(s) + 4HF(l) SiF4(g) + 2H2O(l) (pentru analiza siliciului)
Reaciile folosite n gravimetrie trebuie s ndeplineasc cteva condiii:
S fie, n anumite condiii, cantitative,
S rezulte combinaii bine definite,
S aib loc cu vitez suficient de mare,
Produsele reaciilor trebuie s fie uor filtrabile i s nu se redizolve n urma splrii.
41
Dup filtrare i splare, se ndeprteaz apa prin uscare la etuv i, de regul, urmeaz
o calcinare n cuptor - proces prin care compoziia chimic se poate modifica.
Un exemplu simplu de analiz gravimetric l constituie determinarea ferului. Etape:
1. Se aduc prin calcinare creuzetele la pondere constant (2-3 probe paralele).
2. Se oxideaz soluia coninnd fer, provenit din solubilizarea unei mase de prob
cunoscute, utiliznd oxidani potrivii: (Fe2+ Fe3+)
3. Se precipit hidroxidul de fer, Fe(OH)3 care se filtreaz i se spal.
4. Se calcineaz precipitatul ntr-un creuzet (rezult Fe2O3).
5. Se cntrete suma creuzet + Fe2O3.
6. Se calculeaz coninutul de Fe din prob din masa probei i masa de precipitat pur obinut.
Referitor la ultimul punct se obinuiete, pentru lucrul n laborator, simplificarea
calculului stoechiometric prin utilizarea unui factor gravimetric, deosebit de la o substan la
alta. Acest factor se calculeaz nainte de analiz astfel nct imediat dup cntrirea final
produsul dintre masa precipitatului i factorul gravimetric d direct masa analitului. Pe baza
acestei mase se exprim rezultatul final al analizei.
S considerm c avem de stabilit compoziia unei probe din specia A i masa acesteia
se va determina pe baza cntririi unei mase de precipitat, mppt. Se poate scrie, pe baza celor
afirmate anterior:
mA = fmppt
(1)
unde f este factorul gravimetric. Cu ajutorul masei mA se poate exprima concentraia de analit
A din cele m grame de prob, cu care s-a pornit n analiz:
%A =
mA
100
m
(2)
sau
%A =
f m ppt
m
100
(3)
H+
Prob
Fe2+
(soluie)
O2-
Fe2+
(soluie)
Fe(OH)3
tC
Fe2O3
Dac notm cu M Fe2O3 masa unui mol de oxid de fer (III) i cu MFe masa atomic a ferului
M Fe2O3 . . . . . . . . 2MFe
Mppt . . . . . . . . . . x
_________________
x = mppt2MFe/ M Fe2O3
2M Fe
M Fe2O3
(4)
Metodele gravimetrice sunt dificile i consumatoare de timp. ns, dac sunt executate
de personal calificat, sunt cele mai exacte metode de analiz chimic cunoscute. Etaloanele
materialelor folosite n analizele instrumentale sunt analizate prin astfel de procedee.
n rezumat, succesiunea de operaii din cadrul analizelor gravimetrice este urmtoarea:
1. Cntrirea probei i dezagregarea;
2. Precipitarea;
3. Filtrarea;
4. Splarea precipitatului;
5. Uscarea;
6. Calcinarea;
7. Cntrirea;
8. Calculul.
Balana analitic
Instrumentul de msur utilizat pe larg n gravimetrie este balana analitic (fig. 2).
Aceasta are o sensibilitate ridicat, care permite determinarea masei cu un numr mare de
cifre semnificative (3-5 cifre). Puine instrumente fizice permit o astfel de performan. De
asemenea permite msurarea precis a maselor cu o eroare 210-4g. De aceea, balana
analitic se considera, pn la apariia etaloanelor comerciale, inima laboratorului de analize
chimice. Fiind un instrument exact i precis, balana necesit n cadrul laboratorului analitic
instrumental un plasament privilegiat, ntr-o ncpere fr circulaie, fr variaii mari de
temperatur i pe un suport ferit de vibraii. Balanele moderne au ncorporate greutile care
le menin exactitatea pe perioade mari de timp. Periodic toate balanele au nevoie de verificare
i atestare metrologic. Acestea se fac prin comparaie cu setul de greuti etalon existente n
cadrul reelei naionale a serviciilor de metrologie.
Chimie Analitic i Instrumental
43
Substanele pulverulente se vor cntri pe hrtie cerat, folii de plastic sau n fiole de
cntrire. Obiectele cntrite nu se ating cu mna ci se folosesc mnui, pensete sau cleti
pentru a se preveni modificarea maselor datorit umezelii minii.
parcursul cntririi.
Cnd se fac mai multe cntriri paralele se vor folosi aceleai procedee de cntrire.
Balana analitic este mult utilizat n analiza instrumental. n afar de cntrirea probelor n
vederea analizelor aceasta mai este folosit pentru realizarea soluiilor etalon sau a probelor
etalon sintetice, solide, folosite pentru comparaie n diversele instrumente analitice care vor
face obiectul urmtoarelor capitole.
44
Volumetria
45
obiectul prezentei lucrri dar, n realitate, se apeleaz doar la metodele puin costisitoare,
pentru c avantajul principal al volumetriei este tocmai preul de cost cobort.
Tabelul 2. Indicatori de culoare bazai pe pH
max
Nr Denumire
pH
[66]
[65]
1 2,4,6-trinitrofenol, acid picric
0.6-1.3
2 timolsulfonftalein, albastru de timol
1.2-2.8 544.4
3 2,4-dinitrofenol, -dinitrofenol
2.4-4.0
4 tetrabromofenolsulfonftalein, albastru de bromfenol 3.0-4.6 436.6
5 rou de congo
3.0-5.0 520.2
6 p-sulfonat de dimetilaminobenzen, metiloranj
3.1-4.4 522.5
7 tetrabromo-m-crezolsulfonftalein, verde de bromcrezol 3.8-5.4 444.6
8 acid dimetilaminobenzen-o-carboxilic, rou de metil
4.2-6.3 530.4
9 dibrom-o-crezolsulfonftalein, purpuriu de bromcrezol 5.2-6.8 433.6
10 dibromotimolsulfonftalein, albastru de bromtimol
6.2-7.6 433.6
11 fenolsulfonftalein, rou de fenol
6.8-8.4 433.6
12 o-crezolsulfonftalein, rou de crezol
7.2-8.8 434.6
13 timolsulfonftalein, albastru de timol
8.0-9.6 430.6
14 di-p-dioxidifenilftalid, fenolftalein
8.3-10 553
15 ditimolftalid, timolftalein
9.3-10.5 598
16 acid m-nitrobenzenazosalicilic, galben de alizarin
10-12 550
17 nitramin, 2,4,6-trinitrofenolmetilnitramin
10.8-13 550
culoare soluie
[67] [68]
i/g
r/g
0.04% aq
i/g
0.1% alc
g/b
0.4% aq
b/r
0.04% aq
r/o
0.1% aq
g/b
0.1% aq
r/g
0.1% alq
g/p
0.04% aq
g/b
0.5% aq
g/r
0.05% aq
g/r
0.05% aq
g/b
0.04% aq
i/p
0.05% alq
i/b
0.04% alq
i/g
0.1% alc
i/o
0.01% aq
Reaciile chimice
Reaciile chimice pe care se bazeaz titrimetria trebuie s fie echilibre chimice, practic
total deplasate spre dreapta. Aceste echilibre trebuie s se stabileasc rapid, deci vitezele de
reacie trebuie s fie mari. Reaciile consacrate n volumetrie, care ndeplinesc condiiile
amintite, sunt cele din categoria echilibrelor ionice (unde cu Ox i Red s-au notat formele
oxidate i reduse ale partenerilor redox iar cu M i L s-au notat ionul metalic, respectiv
ligandul):
Reacii acid-baz (ambele tari) : H+ + OH Reacii redox: Ox1 + Red2
Reacii de complexare: M + nL
H2O;
Red1 + Ox2;
MLn.
n general constantele de echilibru ale acestor reacii trebuie s fie mai mari de 106.
Reaciile de precipitare se utilizeaz, dar destul de rar. Cele care se aplic sunt cele care duc la
precipitate cu produse de solubilitate mai mici de 10-10.
adugat n vasul conic din biuret nu poate fi mai mic de o pictur - anume ultima pictur
nainte de schimbarea culorii. Aadar, eroarea de picurare este o eroare inevitabil n orice
titrare. Valoarea acestei erori se exprim prin ecuaia:
Eroare de picurare = p% =
v
100
V
(5)
unde v este volumul unei picturi (0.03 ml), iar V - volumul de reactiv utilizat pn la punctul
de echivalen. Se poate observa c cu ct valoarea V este mai mare cu att eroarea de
picurare, p%, scade. De aceea titrrile trebuie reglate astfel nct s se utilizeze aproape
ntreaga scal a biuretei. De asemenea, prin folosirea unor orificii ct mai nguste ale
Chimie Analitic i Instrumental
47
msurare a volumelor. n general, aceast eroare crete o dat cu murdrirea pereilor, dar i
cu creterea raportului suprafa/volum.
Prima cauz se ndeprtez prin tehnicile de curire a vaselor de laborator, astfel ca
lichidul, practic, s nu adere la perei.
Pentru a nelege factorii de care depinde a doua cauz, s considerm aria lateral, S,
a lichidului dintr-o biuret, de raz r, pentru nlimea h. Aceasta este:
S = 2rh
(6)
(7)
2V 4V
=
r
D
(8)
39
40
2
Fig. 3. Eroarea de paralax crete citind incorect diviziunea: 1-corect; 2-incorect
biuretei sau a citirii incorecte, adic dintr-un unghi diferit de 90 fa de aceasta (fig. 3).
Eroarea de temperatur apare n laboratoarele n care nu se respect temperatura
pentru care sunt etalonate aparatele din sticl (20C). Acest lucru provoac o dilatare sau
contracie a sticlei i o dat cu aceasta se modific volumul msurat, V, fa de cel citit, V0,
fiind coeficientul de dilatare volumic al sticlei (aceas eroare poate fi ndeprtat prin calcul):
48
V = V0[1 + (t-20)]
(9)
de dimensiunile sticlei ca funcii de temperatur. Astfel, sticla o dat nclzit se dilat dar la
rcire, nu mai revine la dimensiunile iniiale, pstrnd o dilatare remanent. Similar, la rcire
sticla se contract dar, revenind la temperatura camerei, nu i recapt dimensiunile iniiale ci
vasul are un volum mai mic. Acest lucru face ca citirile la baloane cotate uscate la cald, prin
neglijarea acestui fenomen, s duc la erori nebnuit de mari. n consecin, aparatura de
msurare a volumelor din sticl se va pstra, dup verificarea volumului, la o temperatur
constant, nu se va usca n etuv i nu se va nclzi sau lsa n magazii nenclzite. De aceea
i aparatura de msurarea volumelor trebuie periodic verificat metrologic pentru a se obine
rezultate de ncredere.
Etapele analizei volumetrice
49
aproximativ normal (cu factorul 1.15). Trecerea volumului, V, msurat ntr-o titrare
executat cu o soluie aproximativ normal, ntr-un volum teoretic, Vt, de soluie exact
normal (0.1 N n exemplul de mai sus) se realizeaz cu ajutorul factorului F. Astfel, dac
inem cont c ambele volume conin aceeai mas de reactiv de titrare, mr, putem scrie:
mr = VTr = VtTt
(10)
unde Tr este titrul soluiei n realitate (real) iar Tt - titrul teoretic al soluiei exact normale. De
aici putem exprima volumul Vt:
Vt = V
Tr
Tt
(11)
sau:
Vt = VF
(12)
Deci,
factorul nmulit cu volumul de titrare transform acest volum ntr-un volum de normalitate exact
(13)
unde cu nE,1 i nE,2 am notat numrul de echivaleni din reactivii 1, respectiv 2. Dac
considerm c reactivul 1 este titrantul fie volumul acestuia V, cu factorul F i normalitatea
exact N. Ca urmare putem scrie:
nE,2 = VFN
(14)
(15)
Calculul concentraiei procentuale de analit, %A, din proba de analizat se face inndu-se
cont de masa de prob, m, cntrit iniial. Astfel, exprimnd procentul din ntreg:
%A =
mA
100
m
(16)
inndu-se cont de cele amintite anterior, aceeai concentraie se poate exprima n funcie
de datele titrrii:
%A =
V F N EA
100
m
(17)
S-a obinut astfel una din formulele de calcul frecvent prezent n instruciunile de lucru
standardizate.
50
Uneori aceeeai relaie se scrie n funcie de titrul teoretic, T. Astfel se poate observa c
VFNEA = VFT iar ecuaia precedent devine:
%A =
V FT
100
m
(18)
volumetrice. n cazul unei ape alcalinitatea se poate evalua prin capacitatea acesteia de a
neutraliza acizii. Sursa alcalinitii n cazul apelor naturale o constituie urmtorii ioni:
Bicarbonat (HCO3-);
Carbonat (CO32-);
Hidroxid (OH-).
Srurile altor acizi slabi cum ar fi: borai, silicai sau fosfai mai pot contribui doar
accidental la alcalinitate. De asemenea cteva sruri ale unor acizi organici pot contribui de
asemenea la aceasta, dar numai n apele poluate sau lipsite de aeraie i ntr-o msur foarte
mic. Contribuia major la alcalinitate o are bicarbonatul. Alcalinitatea adus de ionii
carbonat, CO32-, i hidroxid, OH-, poate deveni important doar atunci cnd activitatea algelor
din ape este ridicat sau n apele industriale.
De alcalinitate trebuie s se in cont n toate procesele de tratare a apelor potabile sau
reziduale. Aceasta acioneaz ca tampon de pH n coagulare sau n procesele de dedurizare cu
var i sod.
Dup modul de evaluare a alcalinitii distingem: alcalinitatea fa de fenolftalein i
alcalinitatea total. Ambele se determin prin titrare cu un acid tare pn la virajul
la pH-ul de viraj al indicatorului fenolftalein (8.3) marcnd tot hidroxidul i jumtate din
carbonatul prezent, ceea ce se poate simboliza: OH- + 1/2CO32Alcalinitatea total se poate msura pn la pH-uri diferite (5.1; 4.8; 4.5 sau 3.7) n
funcie de coninutul de dioxid de carbon prezent. Aceasta reflect ntreaga alcalinitate dat de
hidroxid, carbonat plus bicarbonat: OH- + CO32- + HCO3-.
Valoarea de pH pn la care se face determinarea este urmtoarea:
30 mgL-1 CO2 - pH = 5.1
150 mgL-1 CO2 - pH = 4.8
150 mgL-1 CO2 - pH = 4.5
n cazul prezenei silicailor i fosfailor - pH = 4.5
Chimie Analitic i Instrumental
51
52
ntrebri de verificare
53
Metode electrochimice
Teoria ghideaz, experimentul decide
Izaak M. Kolthoff (1894-1993), Electrochimist american
Metode electrochimice
Generaliti
O reacie redox provocat prin efectele curentului electric, ce are loc de regul prin
intermediul unui electrod, ntr-o incint numit celul electrochimic, poart numele de
reacie electrochimic. Electrochimia, n general, implic folosirea unor reacii redox ce pot fi
electrochimic msoar masa depus la unul din electrozi: electrogravimetria, iar altele
timpul: cronoamperometria i cronopoteniometria. Unele dintre metode, care msoar tot
curentul ns n condiii de tensiune variabil liniar, se denumesc voltamperometrice. Un caz
particular al acesteia, care msoar curentul datorat polarizrii suprafeei unui electrod, poart
numele de polarografie. O alt tehnic, care msoar curentul simultan cu modificarea ciclic
a potenialului n timp, poart numele de voltametrie ciclic. Aceasta este cea mai utilizat
metod n ultimul timp, pentru studiul reaciilor chimice redox n soluie, fie a proceselor ce
au loc pe un anumit electrod.
Toate metodele utilizeaz n procesul de msurare doi sau trei electrozi scufundai n
electrolitul celulei, care funcioneaz cu sau fr diafragm. Doi electrozi pot fi identici, de
exemplu n conductometrie sau n metodele difereniale sau diferii, n marea majoritate a
metodelor. n acest caz, unul dintre electrozi, cel pe care se produce reacia, este considerat
Chimie Analitic i Instrumental
55
electrodul de msur (sau de lucru), iar cellalt electrodul de referin. Se mai utilizeaz i
56
Metode electrochimice
Metode poteniometrice
cost sczut, preciziei i a exactitii lor, sunt metode preferate n analize chimice, datorit
durabilitii electrozilor, a varietii reaciilor pentru care se pot aplica precum i datorit
posibilitilor de automatizare. Acestea sunt, n esen msurtori de volume, momentul citirii
volumului de titrant fiind indicat de electrodul de msur. Celula const, n ambele cazuri, din
paharul (vasul) de titrare plus ansamblul format de cei doi electrozi i soluie, electrozii fiind
legai la un milivoltmetru aa cum se observ n fig. 1.
57
Uneori unul dintre electrozi este separat de soluie printr-o diafragm. n acest caz
interfaa este simbolizat prin dou bare verticale: ||. Este cazul electrozilor de referin unde
prin aceasta se asigur compoziia constant a soluiei n contact cu electrodul, al crui
potenial este meninut la aceeai valoare pe toat durata msurtorilor. Considernd, de
exemplu, celula:
M | Mz+ || KCl (sat) | AgCl | Ag
n care electrodul indicator, cel din stnga, este un metal care are potenialul sensibil la ionii
proprii, Mz+, electrodul de referin fiind, n acest caz, aa-numitul electrod de argint-clorur
de argint, aflat n contact cu o soluie saturat de ioni Cl- (n conformitate cu denumirea).
Acesta, dup cum se va arta n continuare, ar fi, n absena unei soluii saturate de KCl,
sensibil la concentraia ionilor clorur, lucru evitat prin realizarea diafragmei i a contactului
cu soluia saturat, a crei concentraie n Cl- este meninut automat constant.
Titrri poteniometrice
Aceste metode msoar o specie chimic pe baza unei reprezentri a potenialului unui
electrod, n funcie de volumul, V, folosit pentru titrare, pe baza dependenei funcionale =
f(V) - denumit i curb de titrare (fig. 2).
Metode electrochimice
= 0 +
RT [ Ox ]
ln
zF [ Red ]
Red.
electrodul de argint. Toi vor avea potenialul dependent de concentraia ionilor din soluia cu
care este n contact direct, Mz+ - lucru uor de neles prin nlocuirea concentraiilor speciilor
participante n ecuaia lui Nernst. n general:
= 0 +
RT
ln M z +
zF
Electrozii de gaz fac parte, n principiu tot din electrozii de spea I-a. ntre acetia un
loc cu totul aparte l ocup electrodul de hidrogen: (Pt)H2 | H+, (redat n fig. 3), cu echilibrul
pe electrod:
Chimie Analitic i Instrumental
59
H+(aq) + e-
n acest caz hidrogenul molecular este dizolvat fizic ntr-un metal nobil Pt (sau Pd). Rolul
platinei este dublu, de conductor inert i de catalizator. Electrodul propriu-zis este o plac din
Pt (sau Pd) de 0.4-0.5mm, cu suprafaa de 1cm2 legat printr-un fir tot din Pt (Pd) fixat ntr-un
tub de sticl. Pe plac se depune electrolitic Pt (platin poroas - neagr) din soluia de acid
hexacloroplatinic, H2[PtCl6], timp de 1-2 minute, la o densitate de curent de 50-100mAcm-2.
RT H
= +
ln 1/2
F
pH
+
poate fi utilizat i ca electrod de pH. De altfel, n caz de litigiu ntre laboratoare, acesta este
electrodul cu care se efectueaz expertiza. Ali electrozi de gaz de mai mic importan sunt
electrozii de oxigen, de clor etc. n care gazul respectiv se barboteaz peste o plac similar de
platin.
Electrozii de spea a 2-a sunt formai prin asocierea a dou straturi: metal/sare greu
solubil a metalului respectiv, iar ultimul este n contact cu o soluie a unui anion al srii greu
solubile. Cei mai utilizai sunt electrozii:
[69] condiii standard - T = 298K, activitatea ionilor activi 1 echiv./L, respectiv presiunea parial a speciilor
gazoase 1 atm.
60
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Metode electrochimice
AgCl(s) + e-
i potenialul de electrod:
= 0 +
RT
ln{1/[Cl-]}
zF
Este tot mai puin folosit datorit problemelor de legate de poluarea mediului. Evident c
ambii electrozi sunt sensibili la ionii Cl-. n soluie la o concentraie constant a ionului
clorur, potenialul acestora este, la temperatura camerei, practic o constant.
Electrozii de spea a 3-a sunt formai dintr-un metal, pe care se afl depuse dou
combinaii greu solubile, dispuse n straturi subiri succesive, n contact una cu alta (dintre
care n contact cu metalul este o combinaie a ionului metalului-suport). Astfel de electrozi
sunt sensibili i funcioneaz reversibil la cationul unui alt metal. De exemplu, un astfel de
electrod este redat de lanul:
Pb | PbC2O4(s) | CaC2O4(s) | Ca2+(aq)
Pb(s) + CaC2O4(s)
Fazele solide (cele notate
(s))
RT
ln [Ca2+]
zF
specii chimice, aflate ntr-un echilibru reversibil una cu cealalt, o form fiind oxidat (Ox)
iar cealalt redus (Red). Trebuie accentuat c ambele specii (Ox i Red) sunt solubile spre
deosebire de cazurile precedente. O schem general de reprezentare a acestor electrozi este:
Pt | Ox; Red
sau mai concret, dac considerm un electrod ntlnit curent n practica de laborator, anume
electrodul redox Fe(II)/ Fe(III) acesta se reprezint:
Chimie Analitic i Instrumental
61
Pt | Fe2+; Fe3+
RT
RT
ln{[Ox]/[Red]} = 0 +
ln{[Fe3+]/[Fe2+]}
zF
zF
tehnica zilelor noastre, din aceast categorie, este electrodul de sticl. Azi, n laboratoarele de
analize, electrodul de hidrogen este practic complet nlocuit de acesta n msurtorile de pH
(vezi fig. 4). Utilizarea sa se bazeaz pe faptul c potenialul existent la interfaa membran soluie este:
H(1)+
H(2)+
RT
ln a (H2)+
F
unde primul termen - st0 - include toate constantele ce mai intervin n practic. O ecuaie
similar se obine chiar dac electrozii interni i externi sunt diferii, caz mai rar ntlnit n
practic. Acest electrod de sticl prezint unele neajunsuri i anume n medii puternic acide,
sau puternic bazice, apar abateri mari de la ecuaia amintit. n aceste cazuri se recurge la alte
tipuri de electrozi, sensibili tot la ionul H+, cum ar fi electrodul de antimoniu (stibiu) 62
Metode electrochimice
Sb|Sb2O3|H+ (un electrod de spea a 2-a) sau electrodul de wolfram (analog ca principiu de
funcionare cu primul, doar oxidul care ia natere pe W fiind WO3).
Ali electrozi membran ion selectivi. Alturi de sticl (membrana din electrodul cu
acelai nume) exist numeroase alte membrane. Orice faz neapoas, prezentnd conducie
ionic, interpus ntre 2 soluii apoase constituie o membran. Feele membranei trebuie sa
aib un rol de schimbtor de ioni. Schematic, un electrod membran se reprezint conform
schemei din fig. 5.
Membran
Soluie apoas a
Electrod de
(conductor
ionului
referin extern
ionic)
(msurat)
Fig. 5. Structura unui electrod membran ion - selectiv n celula de msur
Electrod de
Soluie apoas a
referin intern ionului (const.)
RT a 2
ln 1
F
a
63
Dac ntre electrozii de lucru i de referin exist un curent impus, nu foarte mare
(de civa microamperi), are loc o modificare a concentraiei speciei active, din cauza
electrolizei. Titrarea se numete cu electrod polarizat. n fig. 7-stnga, se prezint curbele de
titrare pentru un curent +i , i = 0 i -i, toate obinute cu acelai electrod. Cele trei curbe nu
difer n mod esenial. Se observ c saltul se produce nainte de echivalen, pentru curba
trasat n condiiile -i i dup acesta la cea cu curentul opus: +i.
Folosindu-se doi electrozi indicatori identici dar polarizai n sens contrar (unul
parcurs de un curent +i i altul de unul -i) prin reprezentarea diferenei de potenial (fig. 7dreapta) aprute aceti electrozi, n funcie de volumul de titrant V, se obine o curb de titrare
al crui vrf indic punctul de echivalen. Metoda se numete titrare cu doi electrozi
polarizai, dar aceasta are un singur dezavantaj, anume necesit nregistrarea semnalului n
Una din consecinele datelor prezentate n tabelul 8.1 este posibilitatea ordonrii
elementelor n funcie de potenialul lor de reducere standard. Dac aplicm o astfel de
ordonare pentru metale, de la starea de oxidare uzual a acestora la starea neutr electric se
obine seria activitii electrochimice a metalelor. O astfel de serie este redat n fig. 8.8.
Au Pt Ag Hg Cu (H) Pb Sn Ni Fe Zn Cr Al Mg Na Ca K
+
Fig. 8. Seria activitii electrochimice pentru cteva metale uzuale
De exemplu, E0(Zn2+,Zn) = 0.76V < +0.34 = E0(Cu2+,Cu) deci Zn are o tendin
termodinamic de a reduce Cu2+ i este de ateptat ca reacia de mai jos s aib loc:
Zn(s) + CuSO4(aq) ZnSO4(aq) + Cu(s)
Msura cantitativ a desfurrii reaciei este dat de constanta de echilibru K. Cnd
reacia a atins echilibrul, K = Q, unde Q reprezint raportul de echilibru adic raportul obinut
prin nlocuirea n expresia K a datelor concrete (determinate practic) considernd pila
64
Metode electrochimice
galvanic care funcioneaz pe baza reaciei. Aceasta la echilibru are diferena de potenial E
= 0 ntre electrozi.
nlocuind n ecuaia lui Nernst K = Q, E = 0, se obine:
ln(K) =
n F E0
R T
65
Conductometrie
Conducia curentului prin soluii
metru). Se mai folosesc adesea i uniti derivate din aceasta ca Scm-1 sau dSm-1. Se pune
problema: care ion sau care substan conduce cel mai bine curentul? Kohlrausch (1876) a
gsit potrivit pentru exprimarea calitii de a conduce curentul electric n soluii mrimea
conductivitate echivalent, simbolizat (lambda mare - n l. greac veche). Astfel, conform
definiiei:
= 1000 /Cn
unde cu Cn s-a notat concentraia normal a soluiei. S-a constatat c aceast mrime depinde
de natura, dar i de concentraia soluiei, crescnd cu diluia. S-a adoptat de aceea
conductivitatea echivalent la diluie infinit, simbolizat , care nu mai depinde de
concentraie i permite evaluarea sau compararea contribuiei independente, la conducia
total, a fiecrui ion.
n tabelul 1 se prezint comparativ valorile conductivitilor echivalente ale ctorva
cationi, notate + , respectiv a ctorva anioni, -, la diluie infinit. Se pot remarca
conductivitile ridicate ale ionilor HO- respectiv H+, comparativ cu ale celorlali ioni
monovaleni.
66
Metode electrochimice
Tabelul 1. Conductiviti echivalente la diluie infinit pentru civa ioni frecvent ntlnii
Cationul + (Scm-1) Anionul - (Scm-1)
H+
348.8
OH198.6
K+
73.5
Br78.1
+
NH4
73.6
I
76.8
Ag+
61.8
Cl76.4
+
Na
50.1
NO3
71.5
Ba2+
127.3
HCO344.5
2+
2Mg
106.1
SO4
160.0
Msurarea conductivitii
67
K 45.65
=
= 0.009989 -1cm -1
R 4570
Metode electrochimice
industriale sau diverse tipuri de galvanizare, decapare sau splare, verificndu-se fie
modificrile majore de concentraii, fie perfeciunea splrii. O aplicaie aparte, asupra creia
se va reveni, este aceea de detector conductometric n analiza prin cromatografie ionic. n
fine, cea mai cunoscut aplicaie este titrarea conductometric.
Titrarea conductometric
Dac ntr-o soluie de acid tare se adaug treptat o baz tare (de ex. NaOH)
conductana soluiei se modific, la nceput scznd, din cauza antrenrii ionilor H+ provenii
din acid ntr-o combinaie puin disociat - apa. Reacia:
H3O+ + HO-
2H2O
Se poate observa c titrarea continu prin determinarea ctorva puncte i dup punctul
de echivalen iar ulterior se traseaz dreptele i, n final, din intersecia acestora se obine
punctul de echivalen.
variaia de volum s fie neglijabil i curbele s fie de la nceput nite drepte. Dac nu se
poate realiza acest lucru este necesar o corecie a conductanei inndu-se cont de creterea
de volum. Cnd se titreaz acizi de trie moderat ca acizii acetic sau oxalic, variaia
conductanei urmeaz curba (2) din figura anterioar. La nceput conductana este joas. Apoi
Chimie Analitic i Instrumental
69
are loc o scdere uoar dup care aceasta crete paralel cu (1). Dac acidul este foarte slab,
cum este cazul acidului boric sau a fenolului, nu se mai poate observa poriunea iniial de
scdere a conductanei, curba de titrare fiind asemntoare cu (3) din fig. 11. Dac ns
titrarea se execut cu o baz slab, uneori intersecia este mai net din cauz c dup
echivalen baza nu mai contribuie practic la conductan, obinndu-se o dreapt orizontal.
Metoda se poate aplica i pentru sruri ca acetatul de sodiu cu un acid tare din motive
lesne de neles - ionul acetat este de fapt o baz. Prin conductometrie se mai pot indica i
titrri bazate pe reacii de precipitare (de ex. NaCl cu AgNO3). n acest caz, la nceput se
obine o dreapt orizontal deoarece conductana precipitatului AgCl este practic nul, iar
ionul clorur din soluie se nlocuiete, pe parcursul titrrii, cu ionul azotat care practic
conduce la fel. La sfrit conductana va crete pentru c ambii ioni din excesul de AgNO3
contribuie la conducie.
Printre avantajele titrrii conductometrice trebuie amintit faptul c se pot utiliza soluii
diluate, amestecuri de acizi i baze i c se pot chiar analiza soluii colorate. Nu este necesar
msurarea conductivitii (i nici etalonarea celulei) ci se msoar rezistena care se reprezint
grafic n funcie de volumul de titrare. Totui pentru c reaciile sunt exoterme i
msurtorile sunt sensibile la variaiile de temperatur se recomand termostatarea vasului
de titrare.
70
Metode electrochimice
Coulometria
un circuit cu trei electrozi, redat schematic n fig. 12, adic cu un electrod de lucru (EL), un
electrod auxiliar (EA) i un electrod de referin (ER) - de regul un electrod de argint/clorur
de argint.
71
O celul bine aleas maximizeaz valoarea p prin utilizarea unui electrod cu o arie
mare, a unei celule cu volum mic i cu un coeficient de transfer masic ridicat obinut printr-o
agitare eficient a soluiei. Cu valori p maxime se obin durate de analiz minime, la aceeai
arie de sub curbe (fig. 15). Calculul propriu-zis const n aplicarea legii lui Faraday i anume:
Nr.moli = Q/(zF)
unde Q = It reprezint numrul de Coulombi trecui iar z numrul de electroni schimbai n
procesul de electrod. Q este aria de sub curba I = f(t) care este proporional cu concentraia
speciei de analizat. De regul coulometrele moderne execut i integrarea ariei de sub curb.
Msurtoarea se oprete cnd I < 0,1I0 unde I0 este curentul rezidual, adic curentul msurat
n absena analitului. Analiza sistemelor multicomponente se poate realiza cnd E1/2 >
200mV, unde E1/2 este potenialul de semiund. Se schimb pur i simplu potenialul
electrodului la noua valoare i se ncepe o nou msurtoare. n principiu:
metoda nu are nevoie de etalon primar fiind o metod absolut, una dintre puinele metode
cunoscute pn n prezent n afara metodelor chimice - gravimetria i volumetria;
n condiii optime, limita de detecie poate fi i mai cobort - pn la 10-8 mol/l
Metode electrochimice
obinerea unor curbe de variaie a curentului (continuu) n funcie de tensiunea aplicat pe doi
electrozi, unul polarizabil iar cellalt nepolarizabil. Trebuie menionat c electrodul de lucru
este n mod obinuit din mercur, avnd o suprafa extrem de mic, denumit electrod
picurtor (pictor) de mercur. Cellalt electrod (nepolarizabil) este alctuit fie din mercurul
aflat pe fundul celulei (avnd o suprafa mult mai mare), fie este un electrod de referin (din
calomel). Pentru asigurarea conduciei necesare, se adaug i o aa-numit soluie de baz
care este necesar s dea o concentraie ionic de cel puin 50 de ori mai mare dect a soluiei
de analizat. n aceast tehnic, rspunsul care se msoar pe electrodul de lucru este rezultat
dintr-o combinaie a transportului de mas, att prin difuzie, ct i prin convecie. Prin variaia
continu i cu vitez constant a potenialului dintre cei doi electrozi, de la un potenial de
start pn la unul final (adic asigurnd o variaie liniar), ionii din soluie vor migra spre
electrodul avnd semnul contrar, iar pe suprafaa electrodului de mercur speciile cu
potenialul de descrcare mai mic dect cel aplicat ntre cei doi electrozi se vor descrca
(adic apar aanumitele specii electroactive). De aceea, la un moment dat, pe curbele I = f(U)
se va observa un salt de intensitate, n form de S, care va fi direct proporional cu
concentraia substanei de analizat. Curbele se mai numesc curbe polarografice iar acest salt
se denumete und polarografic avnd aspectul din fig. 16.
Curba se obine cu un aparat denumit polarograf (fig. 17) ce const din urmtoarele
pri principale:
73
Mercur, Hg
Electrod de
referin
Azot, N2
I (A)
h2
A
h1
U
1/ 2
1
1/ 2
2
E (V)
Soluia cu
ionii de
analizat
Mercur, Hg
Pe schema din fig. 18 se observ sursa de potenial variabil redat prin cursorul C, ce
se deplaseaz pe firul AB, ampermetrul A i rezistenele n serie, RS, respectiv n paralel, RP,
74
Metode electrochimice
ce servesc aducerii n scar a curentului precum i cei doi electrozi, cel pictor, de pe care se
desprind periodic picturi, i cel nepolarizabil, format din mercurul de pe fundul paharului,
legate prin contacte n circuit.
Factorii ce determin nlimea undelor
Saltul de intensitate a curentului este modelat matematic prin ecuaia lui Ilcovi i
anume:
i d = 0.627zFD1/2 m 2/3 t1/6C
unde z este numrul de electroni schimbai n procesul de electrod, F - numrul lui Faraday,
96496 C, D - coeficientul de difuziune n cm2s-1, m - viteza de picurare n mgs-1, t - perioada
de picurare n s, C - concentraia substanei n molL-1, 0.627 o constant de proporionalitate.
n condiii fixate se poate remarca c:
id = constC
deci exist o relaie liniar ntre nlimea undei i concentraia substanei de analizat.
Exist cteva neajunsuri ale aplicaiilor cantitative pentru aceast metod. Astfel, prin
msurarea continu a curentului n timpul creterii picturii, apare o contribuie substanial a
curentului capacitiv care nu mai depinde de specia de analizat, ci de matricea soluiei. Cnd
mercurul se desprinde de la captul capilarei, n perioada iniial de formare a unei noi
picturi, are loc o cretere rapid a ariei laterale a acesteia. Spre finalul vieii picturii, exist o
cretere mult mai mic a suprafeei acesteia, ceea ce diminueaz contribuia modificrilor
capacitive la curentul total msurat. Curentul care prezint interes al speciei active provenit
din substana de analizat - curentul faradaic - scade cu rdcina ptrat a timpului (o dat cu
creterea dimensiunilor stratului de difuziune Nernst). Scderea exponenial a curentului
capacitiv este cu mult mai rapid dect a celui faradaic astfel c la finalul vieii picturii
contribuia curentului faradaic este decisiv. Din cauz c peste acest fenomen se suprapune
modificarea continu a potenialului, chiar i pe momentul desprinderii picturii (de exemplu,
la o vitez de baleiaj de 2 mVs-1 i la o vitez de picurare de 4 sec, pe parcursul desprinderii
picturii, apare o diferen de 0.8 mV ntre momentul desprinderii i momentul nceperii
formrii unei noi picturi), exist o oarecare contribuie capacitiv a curentului la valoarea
total a semnalului. De aceea, raportul semnal-zgomot caracteristic acestei metode nu permite
msurarea unor concentraii mai coborte de ordinul 10-5-10-6M. Pentru o mai bun observare
a curentului faradaic separat de cel capacitiv s-au introdus tehnicile puls-polarografice.
75
Metode electrochimice
funcie de tensiunea amintit este mai puin afectat de zgomotul de fond, avnd forma unui
pic - reprezentnd de fapt difereniala undei n form de S. nlimea picurilor obinute este
parametrul cantitativ al semnalului iar poziia maximului cel calitativ, adic echivalentul
potenialului de semiund. Limitele de detecie n aceast tehnic sunt de 10-8-10-9M din
cauza discriminrii i mai bune a curenilor capacitivi de cei faradaici.
Voltametria ciclic
Const n aplicarea unui potenial care variaz periodic, ntre dou valori prefixate, cu
o vitez cunoscut. n coordonate potenial catodic - timp, apar nite unde triunghiulare, aa
cum se poate observa pe fig. 21. Curbele curent - potenial, redate n fig. 22 - numite
voltagrame ciclice - arat ca nite polarograme, fiind urmate apoi de curentul rezidual i apoi
de curentul rezultat din reacia care se petrece n sens opus, pe msur ce potenialul revine la
valoarea iniial - urmrind curbele n ordinea t0, t1 i t2.
Pentru o reacie reversibil curentul vrfului (picului) corespunde concentraiei
analitului conform ecuaiei Randles-Sevcik:
ip = (2.6910-6)z3/2 ACD1/21/2
unde ip reprezint curentul corespunztor picului (A), z - numrul electronilor implicai n
semireacie, A - suprafaa electrodului (m2), D - coeficientul de difuziune (m2s-1), - viteza
de baleiaj (Vs-1), C - concentraia n molL-1.
Se poate observa i aici proporionalitatea dintre ip i concentraia analitului, exact ca
n polarografia simpl.
77
Tehnica este utilizat frecvent, n ultimul timp [70], deoarece furnizeaz informaii
privind viteza de transfer dintre electrod i analit, privind stabilitatea analitului n sistemul dat
i de asemenea, permite estimarea potenialului normal redox (de reducere), r0. Pe fig. 22 se
mai pot observa potenialele catodice i anodice de vrf (pic), notate Epc i Epa, precum i
valorile curenilor, Ipc, Ipa - egali. Valorile Ipa, respectiv Ipc, reprezentate n funcie de C trebuie
s dea o dreapt care trece prin zero, altfel indicnd suprapunerea peste fenomenul reversibil
al unei adsorbii (fizice). Potenialul de reducere, r0 se poate calcula prin media dintre Epa i
Epc: r0 = (Epa + Epc)/2.
Voltametria de redizolvare anodic
Metode electrochimice
n analiza chimic, se lucreaz printr-una din cele dou metode cunoscute metoda
curbei de etalonare sau metoda adaosului standard. n prima se utilizeaz o curb de
79
mai mic, dintr-o soluie etalon, cunoscut, de concentraie CCUN, a speciei de analizat. Aceast
variant presupune o liniaritate pe un domeniu mai larg de concentraii.
n metoda adaosului standard (simplu), iniial se msoar semnalul h0 n soluia de
analizat i dup adaosul volumului v, noul semnal h1 corespunztor noii concentraii, de
exemplu C1 - necunoscut. Deoarece avem o proporionalitate ntre semnal i concentraie
(fig. 26) rezult:
h 0 Cx
=
h1
C1
Aceasta provine att din soluia de analizat, necunoscut ct i din soluia etalon,
cunoscut. Expresia pentru noua concentraie C1 se poate scrie:
C1 =
C x V + CCUN V
V+v
Cn =
nvCCUN
V + nv
80
Metode electrochimice
ntrebri de verificare
1. Care este ecuaia care red factorii de care depinde potenialul de electrod?
2. Ce electrozi de referin cunoatei?
3. Ce tip de electrod, dintre cele 4 tipuri cunoscute, este electrodul de argint - clorur de
argint?
4. Din ce categorie de electrozi face parte electrodul de sticl?
5. Care electrod se folosete, n caz de litigiu, pentru evaluarea pH-ului?
6. De ce tip este un electrod de platin scufundat ntr-un amestec de ioni Ti4+, Ti3+?
7. Ce form are curba de titrare poteniometric?
8. Ce unitate se utilizeaz pentru exprimarea conductanei?
9. n ce tehnic se utilizeaz electrodul picurtor de mercur?
10. Cum se numete semnalul analitic n polarografie i ce caracteristici are?
11. Prin ce se deosebete voltametria ciclic de polarografie?
12. Ce mrimi fizice se nregistreaz n coulometrie?
13. Ce reprezint ecuaia lui Ilcovi?
14. Ce variante se pot utiliza pentru analiza cantitativ n polarografie?
15. Cnd se poate aplica metoda adaosului standard?
81
anumit etalon, n ceea ce privete o anumit proprietate, o dat cu creterea temperaturii sau a
diferenei de temperatur dintre prob i etalon, simultan cu nclzirea probei.
n afar de faptul c orice fenomen chimic este nsoit de un efect termic, uneori mai
mare alteori mai mic, substanele chimice nu sunt stabile termic n orice condiii. Mai precis,
de la o anumit temperatur, n sus (sau, dup caz, n jos), substanele chimice sufer
transformri fizico-chimice detectabile prin msurtori de temperatur (termometrie), iar prin
determinarea altor parametri fizici msurai simultan cu schimbarea de temperatur, acestea
pot fi analizate. Astfel, termic, se pot urmri unele fenomene fizice ca: topirea, cristalizarea,
fierberea, sublimarea i vitrifierea (la polimeri, de exemplu) sau fenomene chimice cum ar fi
diverse reacii de oxidare (ardere), descompuneri, deshidratri sau interaciuni fizice
(chemosorbii).
Termometrie
mpreun o singur faz transparent (omogen). Practic, cantiti mici de prob sunt
introduse ntr-un tub capilar i observate, n timpul nclzirii cu vitez mic, la microscop.
[71] http://www-2.cs.cmu.edu/~sef/
Chimie Analitic i Instrumental
83
este un procedeu aplicabil oricrei reacii cantitative. Se aplic atunci cnd nu exist un
indicator optic al sfritului titrrii (fie de culoare fie de fluorescen) sau unul electrochimic.
Metoda se poate utiliza chiar n lichide tulburi, colorate intens sau neomogene. n cursul
titrrii trebuie s existe o coresponden unic T H. Astfel, n situaia cnd cldura
degajat este H pentru un mol atunci pentru n moli efectul termic va fi nH. Dac se
noteaz cu K constanta calorimetric a incintei termostatate avem:
-T =
n H
K
(1)
Metoda poate fi aplicat chiar i n solveni organici, n soluii colorate sau n topituri,
fiind realmente o metod util atunci cnd alte alternative cad. n loc de flacon de titrare se
poate utiliza un vas izolat termic: fie un vas Dewar (vas cu pereii dubli, vidat i argintat), fie
un vas din polietilen plasat n mijlocul unui cub din spum polistirenic sau poliuretanic de
dimensiuni 20x20cm. Acesta echivaleaz cu un termostat de calitate bun. Dispozitivele
utilizate pentru msurarea temperaturii pot s fie un termocuplu legat la un poteniometru
nregistrator sensibil, un termistor legat la un microampermetru sensibil, iar mai recent o
rezisten electric, sensibil la temperatur, legat printr-o interfa adecvat la un calculator.
85
funcie de temperatur, de timp i ntr-o atmosfer dat. TG este o tehnic prin care se
msoar masa probei o dat cu creterea temperaturii. Metoda este util n determinarea
puritii probei precum i a concentraiilor de ap, de carbonai sau de substane organice din
materiale, dar n general pentru studierea oricrei reacii de descompunere termic.
1
2
m
3
Astfel, prin nclzirea (sau rcirea) cu vitez constant a unei combinaii sau a unui
material, acesta poate suferi o serie de transformri att fizice ct i chimice care pot fi puse n
eviden prin msurarea simultan a masei probei i a temperaturii acesteia. Modificrile
masice nregistrate duc la nite reprezentri grafice numite termograme sau curbe
termogravimetrice (prescurtate TG) precum i la difereniale ale acestora (DTG) vizibile n
fig. 3. Aparatura utilizat este descris principial n aceeai figur. Se observ c proba se
nclzete ntr-un cuptor, a crui temperatur se msoar, viteza de nclzire fiind controlat n
aa fel ca temperatura s creasc continuu i, pe ct posibil, liniar. Simultan proba se
cntrete.
Termogramele (curbele TG) constituie adevrate amprente pentru probe formate din
86
Analiza termodiferenial
endotermice, rezultnd o curb caracteristic pentru un anumit material (de ex. pmnturi,
minerale, metale). Pentru cazul simplu cnd conductibilitatea termic a probei, k, coincide cu
cea a probei etalon, inerte din punct de vedere al modificrilor de structur, sub aciunea
temperaturii, ntre masa probei m i T se poate scrie ecuaia:
T =
m dH
k dt
(2)
unde dH/dt reprezint cantitatea de cldur degajat (respectiv consumat) de 1 mol substan
n unitatea de timp, la un moment dat, t. n intervalul de timp t2 - t1, ct dureaz transformarea
endotermic (vezi fig. 6) se poate scrie:
m
dH
= k TdT
dt
(3)
87
Pentru transformarea de mai sus, rezultatul primei integrale - H - fiind o constant iar
numrul de moli N = m/M, ecuaia se poate rescrie:
N=
k
TdT
H
(4)
unde integrala reprezint chiar aria de sub curb (vezi poriunea nnegrit fig. 6). Deci,
cunoscnd efectul termic al reaciei (H) i determinnd aria de sub curb, se pot realiza cu
aceast tehnic analize cantitative, evalundu-se numrul de moli n dintr-o substan pe baza
unei etalonri prealabile.
Aparatele ce nregistreaz simultan curbele T, TG, DTG i ATD pe aceeai prob au
primit denumirea de derivatografe.
Calorimetria diferenial
Este cunoscut sub prescurtarea DSC (de la differential scanning calorimetry); ofer
aceleai informaii dar prezint cteva avantaje i anume factorii cum ar fi granulaia precum
i pregtirea probei afecteaz mai puin curbele, iar exactitatea i precizia sunt mult
mbuntite. Metoda mai aduce n plus i calitatea de a se putea determina capacitile
calorice ale materialelor.
Calorimetria diferenial (DSC) msoar independent debitele de flux termic spre o
prob i spre un etalon, care se afl ambele la aceeai temperatur. Se determin apoi
diferena dintre cele dou fluxuri termice i se reprezint grafic diferena dintre fluxurile
termice, n funcie de temperatur.
Tehnica a fost introdus n 1964 de Watson i ONeill. Se utilizeaz dou incinte
calorimetrice, una coninnd proba i alta, materialul de referin, separate una de alta, dar
meninute de dou dispozitive de nclzire separate (rezistene de platin), la aceeai
temperatur. nclzirea, realizat electric, se nregistreaz. n acest fel proba care absoarbe
cldur va necesita o nclzire suplimentar pentru a se realiza temperatura dorit - cea fixat
printr-un program de temperatur prevzut dinainte. Fineea mai mare face posibile i alte
aplicaii ca:
89
ntrebri de verificare
90
(1)
(2)
91
parte, lumina ultraviolet (UV), anume cea cu lungimi de und sub 200nm, are o energie
potrivit pentru a excita electronii din atomii componeni ai moleculelor (covalente) din
substanele aflate n stare gazoas n aer. Molecula excitat are un timp de via scurt, ~10-8s.
Dup acest interval, aceasta revine la starea fundamental, n care a existat iniial, emind la
rndul ei (cednd) energie, dar de ast dat n toate direciile. Aceasta este radiaia difuzat
(mprtiat). Anumite molecule, ca dioxidul de sulf de exemplu, nu revin direct n starea
fundamental deorece au nivele intermediare. Acestea, cnd revin din starea intermediar la
starea fundamental, moleculele emit o alt lungime de und fa de lumina primit, n
general mai srac n energie (deci de lungime de und mai mare). Spunem n acest caz c s-a
emis o radiaie de fluorescen. Aadar n domeniul UV moleculele din aer absorb lumin din
cauza salturilor electronilor din atomi pe nivele energetice mai nalte. Fa de alte domenii ale
energiilor luminoase, substanele pot fi transparente.
S presupunem c mergem pe biciclet pe o osea neted. Drumul are asperiti dar
noi nu le simim pentru c, denivelrile fiind mult mai mici fa de diamentrul roilor, nu
interacioneaz cu acestea. Dac coborm o vale i apoi urcm o pant uoar, o neregularitate
cu raza de curbur mult mai mare dect diametrul roilor, de asemenea nu ne face s simim
mare lucru. Dac ajungem cu bicicleta pe un drum cu denivelri de ordin de mrime apropiat
de raza roilor, bicicleta ncepe s vibreze, i s piard din viteza de naintare (deci din
energie). Cnd ajungem pe o poriune cu gropi mari, de 10-20cm nu mai putem nainta practic
ntreaga energie imprimat bicicletei fiind pierdut. Similar se petrec lucrurile i n cazul
energiei radiaiei electromagnetice transmise substanelor. Deci, faptul c o oscilaie de o
anumit dimensiune este absorbit de atomii, respectiv electronii legturilor chimice din
molecule, indic faptul c n interiorul acestora exist acelai ordin de mrime a tranziiilor
energetice. Cnd energia radiaiei trece practic nereinut, nseamn c energiile puse in joc n
molecula respectiv au cu totul alte ordine de mrime.
Lumina (sau radiaia electromagnetic) mai nseamn i energie ce se transmite doar
n buci, numite cuante de energie, i care pot fi calculate din lungimea de und:
E = h = hc/
(3)
Domeniul de lungimi de und fiind foarte larg, radiaia electromagnetic este foarte
[72] metode optice se consider cele care lucreaz n domeniul UV, vizibil i IR iar tehnicile care aplic tot
principii optice dar n alte domenii (X, etc.) se consider metode spectrale.
92
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
metode de absorbie (pe domenii diverse: raze X, vizibil, UV, IR, RMN etc),
metode de emisie a radiaiei electromagnetice (tot pe diverse domenii),
metode de fluorescen (UV, VIS, X etc), fosforescen sau luminescen,
metode de difracie (cu raze X, cu electroni, cu neutroni),
refractometria i interferometria,
polarimetria,
metode bazate pe difuzia luminii,
metode combinate.
Domeniile spectrale la care ne-am referit anterior sunt prezentate n tabelul 1.
Tabelul 1. Domenii spectrale folosite n analizele instrumentale
Denumirea
Lungimi de und,
domeniului Tipul
Tipuri de tranziii
spectrometriei
n cm
n mrimi uzuale spectral
2
3
10 -10 1m-10m
Radio
RMN
Reorientri de spin nuclear
10-1
1mm
Microunde RES
Reorientri de spin electronic
10-2
100m
IR ndeprtat IR
Rotaii moleculare
-3
-4
10 -10 1m-10m
IR apropiat IR
Vibraii moleculare
400 -750nm
Vizibil
VIS
Energii ale electronilor de valen
-5
10
100-400nm
UV apropiat UV
Energii ale electronilor de valen
-6
10
10 nm
UV
UV
Energii ale electronilor interiori
ndeprtat
10-7-10-8 1 nm (1)
Raze X
Rntgen
Energii ale electronilor interiori
(de raze X)
10-9-10-10 0.1-0.01nm
Raze
Gama
Energii ale ale nucleonilor
93
Kirchhoff - 1859 - enun legea privind legtura ntre capacitatea de emisie i de absorbie
a luminii de ctre corpuri, lege ce-i poart numele;
Bunsen i Kirchhoff - 1860 - primul chimist, al doilea fizician, pun bazele spectroscopiei,
devenit astzi spectrometrie datorit msurtorilor electrice asociate;
94
ntrebri de verificare
95
reprezint varianta n care intensitatea culorii probei [73] se compar vizual sau instrumental,
n lumin alb, cu un set de soluii etalon - preparate n condiii absolut identice cu proba.
Aceasta este o metod subiectiv i mai puin selectiv, pentru c rezultatele depind mult de
persoana care execut analiza. Se remarc faptul c sensibilitatea maxim a ochiului omenesc
atinge maximul pentru domeniul 550-560nm (domeniul culorii verzi), lucru important cnd
compararea probei cu etalonul se face vizual. n aceast tehnic se pot realiza msurtori, prin
comparaie vizual, chiar n eprubet la lumina zilei, rezultnd analize chimice cu exactiti
mai slabe dect 1%. Cu ct exist mai multe soluii etalon, pentru comparaie, cu att metoda
este mai exact. Exist, dup cum am amintit i metode colorimetrice instrumentale,
obiective, dar acestea sunt tot mai puin folosite. n schimb se folosesc aparate ieftine care
utilizeaz metode colorimetrice bazate pe reacii executate pe hrtie de filtru, pe substane
aflate n stare adsorbit pe suporturi granulare - n cazul gazelor - i chiar pe reacii de culoare
n soluii.
Fotometria i spectrofotometria msoar instrumental lumina transmis de o soluie
colorat [74] lucrnd cu o surs de lumin monocromatic. Cnd lumina incident este
filtrat, prin filtre optice, avnd un spectru mai larg, avem de a face cu o fotometrie iar cnd
97
care n locul probei de analizat se pune o aa-numit prob martor (sau prob oarb) - o
prob de referin de concentraie zero. Apoi fascicolul cade pe detectorul D, unde semnalul
optic este transformat n semnal electric. Semnalul rezultat, dup o amplificare, poate fi n
final msurat i nregistrat. nregistrat nu mai nseamn astzi ntotdeauna preluarea
semnalului cu un nregistrator ci mai degrab introducerea acestuia n memoria unui
calculator urmnd de regul prelucrarea automat a datelor.
Materialele
din
care
se
confecioneaz
diferitele
pri
componente
ale
Se poate remarca faptul c detectorii sunt identici iar cuva de cuar permite lucrul n ambele
domenii. Doar sursele difer. Prin nglobarea ambelor surse - lampa cu deuteriu i cea cu
wolfram
acelai
instrument,
funcionnd
consecutiv,
s-a
reuit
realizarea
spectrofotometrelor UV-VIS.
98
l
solvent + solut
Fig. 2. Absorbia luminii n cazul legii Lambert-Beer
Dac lungimea l provoac o reducere cu un anumit procent a intensitii iniiale, Io, de
exemplu cu 50%, un nou strat de lungime l, egal cu primul, va aciona, conform legii Lamber
- Beer, n acelai mod, adic va diminua tot la jumtate noua radiaie incident. Se observ pe
diagrama din fig. 3 c graficul punctelor corespunztoare dimensiunilor celulei 1l, 2l, 3l, se
distribuie pe o curb exponenial. Aceast curb poate fi scris algebric ca o funcie:
I = I0e-kl
(1)
unde k este o constant. Ecuaia precedent reprezint una din formele legii lui Lambert Beer. Prin convenie, se numete transmitan fracia transmis, I a intensitii, raportat la I0,
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
unde A este absorbana, k - coeficientul de absorbie iar l - lungimea parcurs de lumin prin
mediul colorat sau lungimea celulei.
[75] Unele lucrri mai vechi utilizeaz i termenul de densitate optic, n locul absorbanei i aceasta se noteaz
cu D (din l. francez: densit optique).
Chimie Analitic i Instrumental
99
(7)
100
Spectre de absorbie
Spectrele de absorbie reprezint dependena semnalului de lungimea de und, .
Exist mai multe variante de prezentare dar cea mai utilizat este varianta reprezentrii
absorbanei n funcie de lungimea de und: A = f(). Celelalte variante, mai puin utilizate -
numite toate spectre de absorbie - sunt T = f(), log A = f(), = f() sau log = f().
Ultimele dou servesc n special pentru caracterizarea speciilor moleculare ntruct nu mai
depind de condiiile experimentale n care se fac determinrile acestor spectre.
Fiecare substan are un spectru de absorbie caracteristic, ca form general, ca
domeniu spectral, ca numr de maxime (denumite picuri) precum i ca raporturi ntre
intensitile diverselor picuri. Caracteristicile unui spectru sunt redate pe fig. 4. Poziia picului
este caracterizat de valoarea sa maxim, max . Se numete maxim de absorbie att vrful ca
atare ct i lungimea de und care corespunde maximului. Pot exista unul sau mai multe
maxime de absorbie. Numrul de maxime precum i forma general a curbei, reprezint
caracteristica calitativ dup care se pot identifica substanele. De exemplu, n fig. 5 se afl
101
situeaz toate, n mod riguros, pe o dreapt deoarece intervin erori experimentale i din
acelai motiv, n practic, dreapta nu trece exact prin origine.
spectrale), notat X pe fig. 4, deoarece cu ct picurile sunt mai nguste se pot mai bine deosebi
dou substane cu spectre avnd aspecte apropiate. Tot pentru a se evita suprapunerile, n
cazul existenei mai multor maxime de absorbie, se prefer lucrul la maximele de absorbie
cu lungimile de und cele mai mari.
102
n afar de condiiile de mai sus mai trebuie inut cont de urmtoarele reguli practice,
foarte importante pentru respectarea legii lui Lambert-Beer i totodat pentru obinerea de
rezultate analitice corecte:
103
(8)
electronice i celelalte tranziii fiind mult mai mari dect cele reprezentate pe figur.
n substanele formate din molecule covalente se cunosc aa-numitele grupri
cromofore sau auxocrome, care sunt grupri de atomi care dau ntregii molecule calitatea de a
absorbi lumina - n cazul de fa, n domeniul UV-VIS. Legat de cele amintite anterior, o
grupare cromofor reprezint locul din molecul unde-i au originea tranziiile electronice. Sa mai introdus i termenul de cromogen care constituie ansamblul dintr-un schelet molecular
pe care se gsesc grefai mai muli cromofori. Pentru o serie de molecule, toate avnd legate
acelai cromofor, poziia i intensitatea benzilor de absorbie rmn n mare aceleai (tabelul
2). Mai mult, dac o molecul conine mai multe grupe cromofore izolate, mai exact separate
104
ntre ele prin cel puin dou legturi simple, se poate observa suprapunerea efectelor
individuale.
Frecven
P
...
Transmisie
...
...
...
6
5
4
3
2
1
0
...
6
5
4
3
2
1
0
+1
Legend: 0, 1, 2, ... - reprezint nivele de rotaie; , +1 - reprezint nivele de vibraie; Ramura P conine
toate tranziiile cu J = -1: P(J) = S(+1,J-1)-S(,J) = - 2BJ; Ramura R conine toate tranziiile cu J =
+1: R(J) = S(+1,J+1)-S(,J) = + 2BJ; Ramura Q conine toate tranziiile cu J = 0: Q(J) = S(+1,J)S(,J) = ; Ramura Q este permis doar pentru tranziii electronice n unele molecule diatomice (ex. NO)
i molecule poliatomice neliniare.
Cnd nu este posibil analiza unor specii chimice, direct, din cauza lipsei culorii
acestora, se pot provoca reacii care dau compui colorai, prin apariia unor grupri
cromofore, pe baza crora se pot analiza anumite substane n prezena altora, realizndu-se
105
familii de curbe de absorbie ale aceleiai substane, n condiii fizice sau de mediu diferite (de
exemplu la mai multe valori ale pH-uri diferite) i semnaleaz existena a dou specii chimice
diferite, aflate n echilibru chimic una cu cealalt - indiferent de tipul reaciei chimice ce are
loc. Numrul de puncte izobestice reprezint numrul de specii chimice, aflate n echilibru
ntre ele, fiecare absorbind lumina la lungimi de und diferite. Lungimea de und izobestic
este valoarea pentru care coeficientul molar de extincie, , este egal pentru ambele
componente i fie M, respectiv N, aceste componente. Algebric, acest lucru se reflecta n
expresia absorbanei la lungimea de und respectiv ():
A = ([M] + [N])l,
unde l este lungimea celulei; cum concentraia lor global este aceeai, fiind dat de suma:
C = [M] + [N] = const.,
absorbana la punctul izobestic (), va fi:
A = lC,
adic tot o constant.
106
Instrumentaia
electrice obinuite prin aceea c zona de ieire a radiaiei este confecionat din sticl de cuar
- i lampa cu deuteriu prevzut cu arc de descrcare n deuteriu, aflat la o presiune medie
(ceea ce asigur un spectru continuu). O astfel de lamp, a crui punct de descrcare este zona
cenuie din interiorul cutiei mari (fig. 10) permite obinerea unui spectru continuu pe
domeniul 160-400nm, care se completeaz foarte bine cu spectrul becului cu incandescen
(fig. 11). Un spectrometru prevzut cu ambele surse, poate acoperi tot domeniul UV-VIS (fig.
11). Razele de lumin trec prin aer, dar mai nou dirijarea acestora se face i prin fibre optice.
Sistemul dispersiv sau monocromatorul poate fi, n vizibil, un filtru colorat din sticl
sau material plastic transparent dar i un filtru cu interferen, iar n UV-VIS o prism
confecionat din cuar sau, n ultimul timp, sisteme bazate pe reele plane sau concave cu
circa 1200 trsturi per mm. Aceste reele sunt integrate n monocromatoare care permit
extragerea unei zone nguste din spectrul UV-VIS, printr-o simpl deplasare a oglinzii (fig.
12).
107
Limea domeniului spectral care trece prin monocromator depinde mult de limea
fantelor de intrare i ieire. Cele mai bune rezoluii se obin prin utilizarea unor oglinzi
prevzute cu distane focale mari (0.2-0.5m).
Detectorul transform semnalul luminos n semnal electric. Acest dispozitiv d aadar
un semnal proporional cu intensitatea care iese din celula de msur. Intensitatea semnalului
recepionat va depinde de lungimea de und - deci de lungimea de und selecionat prin
poziia oglinzii - dar i prin deschiderea fantelor de intrare, respectiv de ieire, din
monocromator. Acestea din urm, limiteaz domeniul spectral dar i intensitatea luminii, n
ansamblu. De aceea fiecare modificare de deschidere a fantelor sau de lungime de und
modific i intensitatea msurat de spectrofotometru.
De-a lungul timpului s-au impus dou tipuri de detectori: tuburile fotomultiplicatoare
i dispozitivele semiconductoare (care pot fi, la rndul lor, detectori cu transfer de sarcin CCD , n l. engl.- sau fotodiode cu siliciu - CID). Fotomultiplicatoarele - nite dispozitive
ultrasensibile al crui domeniu liniar se ntinde pe 7 decade - au fost pn nu demult cele mai
utilizate dintre acestea. Pentru spectrofotometrele de rutin, fotodiodele sunt cele mai
utilizate. n ultimul timp au aprut detectoarele cu reelele de diode care constituie de fapt
nite diode de dimensiuni mici nirate pe aceeai plac. n acest caz nu mai este nevoie de
fanta de ieire, ceea ce a simplificat ntructva instrumentaia (fig. 13).
mai utilizate n aplicaiile de rutin. De regul n calea razei incidente se plaseaz succesiv
proba martor sau de referin (care conine solventul plus eventual reactivii necesari pentru
analiz) i proba de analizat. Pentru a se compensa i variaiile sursei luminoase se utilizeaz,
108
Fig. 15. Prezentarea schematic a unui spectofotometru UV-VIS, monocanal, cu sistem splitbeam; componentele principale sunt: 1- surs, 2 - monocromator, 3 - prob, 4 - detector
Din aceast categorie face parte i spectrometrul cu reea de diode (fig. 13) care are
avantajul c permite recepia simultan a ntregii game spectrale ntr-un interval de timp de
cteva milisecunde. Deosebirea const doar n ordinea prob-monocromator care-i schimb
locul ntre ele. Rezoluia acestor spectrometre este limitat de dimensiunile microdiodelor
care in locul fantelor de ieire.
n sistemele cu dispozitive split-beam, raza care iese din monocromator este desprit
n dou i una dintre aceste raze cade pe un detector care preia fondul (de exemplu, o
fotodiod 1 pe fig. 15), iar cealalt, dup ce trece prin prob (respectiv prin proba martor),
cade pe un al doilea detector, notat 2 (fig. 15). Semnalul final rezult prin diferena dintre
semnalele date de cele dou detectoare i prelucrat pentru a se msura (sau nregistra) direct
absorbana. Pe figura alturat se poate observa funcionarea alternativ a lmpii pentru
domeniul vizibil (VIS) cu cea pentru domeniul UV.
Spectrometrele bazate pe comparaie (cu dublu canal) sunt cele mai performante
109
const n faptul c rspunsul detectorului este meninut constant, n funcie de , prin reglarea
automat a intensitii de intrare n monocromator (printr-un mecanism de feed-back).
O alt variant (fig. 17) folosete pentru desprirea razei incidente, monocromatice,
un disc rotitor prevzut cu o oglind n form de sector de cerc (dispozitiv denumit curent n
literatura de specialitate chopper [76]). O jumtate de perioad oglinda reflect raza incident
iar n cealalt jumtate, o transmite. Aadar, una dintre raze trece prin celula de msur iar
cealalt prin cea de referin, fiind ulterior aduse prin montajul optic pe acelai detector - de
ast dat un fotomultiplicator. Faptul c are loc amplificarea unui singur semnal compenseaz
micile variaii parazite ale intensitii sursei. Circuitul de msur funcioneaz sincron cu
rotaia chopper-ului; o perioad semnalul corespunde celulei de msur iar o alt o perioad,
celei de referin.
[76] din l. engl., to chop - a tia n buci sau a toca, respectiv chopper - main de tocat
110
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Spectrometria fotoacustic
Rezultat
(laser)
termic
presiune
acustic
Fig. 18. Schema-bloc a transmiterii informaiei n spectrometria fotoacustic
Cu ajutorul acestei tehnici, soluiile de colorani pot fi analizate pe domenii liniare de
circa 10 ori mai largi dect msurnd absorbana optic la aceeai lungime de und (de ex.
la 523nm [77]) i s-au pus la punct metode pentru analiza fumului rezultat din motoarele
Diesel (lucrndu-se la 800nm). De asemenea, s-a mai constatat c semnalul crete liniar cu
energia pulsului de energie a radiaiei laser.
[77]Haisch C., Niessner R., Light and sound photoacoustic spectroscopy, Spectroscopy Europe, 14(5), p. 1015, 2002.
Chimie Analitic i Instrumental
111
ntrebri de verificare
112
Spectrometria de absorbie n IR
Toate modelele sunt greite; unele sunt folositoare
George E. P. Box, statistician american [78]
Spectrometria de absorbie n IR
Introducere
Domeniul mediu se mai numete i IR fundamental. Acesta este cel mai bogat n informaii i
cel mai accesibil experimental. n vorbirea obinuit este domeniul IR care servete n mod
curent att pentru analiza chimic ct i pentru recunoaterea calitativ a combinaiilor
anorganice, organice sau naturale dar i n determinri de structur chimic. Domeniul IR
apropiat, destul de srac n benzi de absorbie specifice anumitor legturi, are o importan
mare tocmai n aplicaii cantitative ale lichidelor. Domeniul IR ndeprtat este nc n studiu.
Ca i n alte domenii ale spectrometriei, n IR se determin transmitana dat de
raportul intensitilor transmise, I, respectiv incidente, I0, adic:
T=
I0
(T<1).
I
(1)
1
A = log
T
(2)
(3)
Pe acest grafic de disting mai multe maxime mai nguste - linii - sau mai largi - benzi.
Pe axa ordonatelor, n loc de T poate aprea T% sau A - absorbana - dar n mod obinuit se
utilizeaz numrul de und n cm-1 (sau Kaysers) din necesitatea de a nu se apela la numere
att de mari ca frecvenele - exprimate n Hz - sau lungimile de und - exprimat n nm.
[78] http://www.engr.wisc.edu/ie/faculty/box_george.html
[79] numrul de und (notat uneori i ) se exprim prin relaia
luminii; se observ c este proporional cu frecvena.
Chimie Analitic i Instrumental
Exist la ora actual o diversitate de metode de analiz bazate pe spectrele IR. Astfel
exist spectrometre bazate pe dispersie dup lungimea de und, sau bazate pe transformata
Fourier, diverse analizoare industriale simple, nedispersive - ultimele specializate doar pe
anumite combinaii chimice - precum i spectrometre de proces care fac analize, n mod
continuu, pe anumite linii tehnologice de gaze sau lichide. n fine, exist spectrometre IR
portabile care permit analiza unor poluani ai mediului.
Absorbia n IR se datorete interaciunilor dintre radiaia electromagnetic incident
i anume componenta electric a acesteia, cu dipolii electrici ai unei molecule. Se admite
componeni execut micri de vibraie de-a lungul legturii n timp ce molecula se rotete. O
intensificare a micrii de vibraie duce la o alungire i simultan, la o slbire a legturii dar i
la o intensificare a micrii de rotaie. n acest fel se explic de ce, n absena oricrui dipol
permanent, nu apare nici un cuplaj cu unda electromagnetic i nu are loc nici o diminuare a
intensitii radiaiei IR incidente. Sau, altfel spus, gazele monoatomice (gazele rare) i
substanele cu moleculele simetrice (ca de exemplu O2, N2, Cl2), avnd legturi nepolare, sunt
perfect transparente la radiaiile din domeniu IR. n moleculele poliatomice posibilitile de
apariie ale spectrelor IR sunt mai mari deoarece aici vibraiile asimetrice pot duce, chiar n
moleculele nepolare, la apariia unor dipoli electrici, iar posibilitile de apariie ale unor
vibraii de deformare (de modificare a unghiurilor dintre legturi n afara celor de alungire) se
mresc.
Pe de alt parte, intensitatea unei benzi de absorbie n IR este proporional cu
ptratul variaiei momentului dipolar al moleculei, datorit absorbiei. Se tie c n general
grupele polare (C-O, C=O, C-Br etc.) genereaz benzi de absorbie mai intense dect cele slab
polare (C-N, C=N, C-H etc.).
Se mai tie din studiul fizic al spectrelor c energia mecanic total, a unei molecule
izolate, poate fi aproximat [80] printr-o reuniune de trei termeni (toi cuantificai) corespunznd energiilor de rotaie, de vibraie i a electronilor de legtur - care se poate reda
prin ecuaia:
ETOT = EVIB + EROT + EELEC
Despre micarea de vibraie am amintit cte ceva n aliniatele precedente. Energia de
rotaie se refer la rotaia moleculei n jurul centrului de greutate i valorile cu care variaz
[80] n afar de cei trei termeni amintii, mai exist energia micrii de translaie (necuantificat) i energia
nucleelor. Doar termenii amintii sunt ns importani pentru producerea spectrelor optice.
114
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Spectrometria de absorbie n IR
aceast energie sunt cu mult mai mici dect n cazul vibraiei, care la rndul ei este mai mic
dect cea a electronilor de legtur. Acetia din urm interacioneaz n special cu radiaia din
domeniul UV-VIS. Cei trei termeni, care apar adesea simultan n spectre, sunt foarte diferii
ca valoare energetic i se poate considera c cei trei variaz independent unii de alii.
Aceast aproximaie este posibil pe baza teoremei Born - Oppenheimer, care permite o
abordare simplificat a problemei [81].
Micarea de vibraie a unei legturi dintr-o molecul poate s fie asimilat unei
deplasri asemnntoare cu un arc spiral - situat n direcia legturii. Micarea ritmic a
acestuia, de-a lungul legturii, duce la creterea, respectiv scurtarea distanei interatomice.
Totodat, poate s ia i aspectul unei deformri (sau ndoiri) a legturii, care implic
deplasarea atomilor n afara axei dintre acetia. Numrul mare de legturi duce implcit la un
numr mare de benzi.
Amintim de asemenea, c experimental nu s-au observat spectre de linii pentru
compui n fazele condensate (lichid sau solid), n schimb sunt frecvente astfel de linii n
faz gazoas. Motivele sunt tocmai interaciunile dipol-dipol, dintre molecule aflate n faz
condensat, precum i solvatarea reciproc ntre acestea, lucru care implic, foarte probabil,
perturbaii ale nivelelor energetice ale legturilor chimice individuale. Pe de alt parte,
lrgirea unei linii este invers proporional cu durata strii excitate. Aceast durat fiind mai
scurt n strile condensate, liniile spectrale IR ale lichidelor i solidelor se lrgesc
suplimentar, predominnd benzile de absorbie.
ntindere ()
Deformare ()
Fig. 1. Cele dou tipuri de vibraii a unei legturi covalente polare implicate n absorbie IR
[81] Conform acestei teoreme deplasarea electronilor are loc independent de deplasrile nucleelor.
Chimie Analitic i Instrumental
115
1
k
(4)
m1 m 2
m1 + m 2
(5)
EVIB = h V +
2
(6)
unde cu V s-a notat numrul cuantic de vibraie (care ia valori ntregi: V = 0, 1, 2, 3, , n).
Ca rezultat, energiile asociate micrii oscilatoare de vibraie pot lua doar acele valori pentru
care este satisfcut ecuaia de mai sus. Pentru V = 0 exist o energie a punctului zero, EVIB =
h/2. Fa de acest punct, se obin o serie de nivele numite excitate trecndu-se de la V = 0 la
V = 1, care poart numele de vibraie fundamental iar apoi la V = 2, 3, ... cnd apar
armonicile superioare.
[82] Legea lui Hooke se refer la oscilaia unui resort elastic i se exprim: F=kx unde k este o constant de
for iar x distana sau elongaia deplasrii.
[83] n mecanica cuantic soluiile matematice apar prin rezolvarea ecuaiei lui Schrdinger iar soluiile
prezentate n diferite lucrri reprezint aproximaii plauzibile.
116
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Spectrometria de absorbie n IR
Cele mai frecvente tranziii de vibraie permise de regulile de selecie ale numrului
cuantic de vibraie (V = 1) sunt aadar cele de la V = 0 (notat V0) la V1 [84]. Dac dorim o
explicaie, cauza ar fi aceea c singurul nivel populat fiind cel fundamental, tranziiile pleac
de la acest nivel oprindu-se, cu maxim probabilitate, la nivelul urmtor (V = 1). Astfel se
constat experimental c benzile corespunztoare armonicelor superioare, dei teoretic
posibile, au intensiti foarte mici.
Dar din pcate vibraiile moleculelor nu sunt perfect armonice. De aceea forma curbei
energiilor, la o observare mai riguroas, nu este o parabol, ca n cazul ideal (fig. 2) iar
distanele dintre nivelele energetice de vibraie nu sunt egale. De aceea a fost necesar
introducerea unui nou model, mai apropiat de perfeciune - modelul oscilatorului anarmonic.
Acest model are ca rezultat o expresie matematic, denumit ecuaia lui Morse:
1 h2 2
1
EVIB = h V +
V+
2 4D
2
(7)
unde V este tot numrul cuantic de vibraie iar D reprezint energia de disociere a moleculei,
E(fig. 8.3).
[84] Regulile de selecie au fost la nceput impuse de constatrile experimentale. n ultimul timp, aceste reguli au
o fundamentare teoretic (mecanic-cuantic) i nu mai sunt absolute. Adic chiar tranziiile interzise din
vechile reguli, devin tranziii cu o probabilitate mic i corespund unor linii de intensitate sczut.
Chimie Analitic i Instrumental
117
S-a constat experimental c nivelele energiei de rotaie nu pot lua orice valori ci doar
anumite valori, potrivit unui numr cuantic rotaional, j. Ecuaia admis pentru energia de
rotaie este:
EROT =
j
h2
2
j(j + 1) 8 I
(8)
unde j este numrul cuantic de rotaie, I - momentul de inerie al moleculei iar h - constanta
lui Planck. Aceste micri se pot observa bine la gaze. La lichide i solide amorfe micrile de
rotaie nu pot fi tratate ca mrimi cuantificate, dat fiind frecvena ciocnirilor moleculare. La
solidele cristaline rotaia nu este, de regul, posibil.
Variaiile energiei de rotaie sunt cu mult mai mici dect ale celei de vibraie i n
consecin nivelele energetice de rotaie, pentru aceeai stare a energiei vibraionale, au valori
extrem de apropiate. Dar pentru fiecare nivel de vibraie exist mai multe nivele de rotaie. Un
tablou complet al tranziiilor energetice posibile trebuie s combine cele dou tipuri de nivele
(fig. 4). Se poate remarca pe diagrama 4-c c variaia energiei de vibraie este hotrtoare n
ceea ce privete poziia benzii n spectrul IR.
Regulile de selecie pentru tranziiile de rotaie, observate n spectrele IR, sunt j = 0 i j =
V=0
j=4
j=2
j=1
j=0
j=4
j=3
j=3
j=2
j=1
j=0
j=2
j=1
j=0
V=1
V=0
a
b
c
Fig. 4. Reprezentarea schematic a nivelelor: de vibraie (a) a poziiei relative pentru cele de
rotaie (b) i a dispunerii nivelelor de vibraie-rotaie suprapuse, formate din a + b (c)
Analiznd mai atent structura fin a spectrelor de vibraie-rotaie, se poate observa c
acestea sunt compuse din trei tipuri de benzi care formeaz aa-numitele ramuri P, Q i R ale
unui maxim din spectrul de absorbie n IR. Astfel s-a constatat c exist tranziii n care se
118
Spectrometria de absorbie n IR
j=3
j=2
j=1
j=0
V=1
j=4
j=3
R3
R1
R0
P1
P3
j=2
j=1
j=0
P4
V=0
seria R
seria P
De aceea aceast band este cea mai intens i apare doar la moleculele poliatomice
dar nu exist de loc la cele biatomice, fiind interzis. n cazul tranziiilor n care variaz
numrul cuantic de rotaie (de exemplu, de la j(V=0)=1 la j(V=1)=2, deci j = +1) apar o serie de
linii de absorbie cu frecvene mai mari dect frecvena Q - notate n ordinea cresctoare a E
cu R0, R1, R2, (chiar dac nivelele nu sunt echidistante). Totalitatea acestora formeaz
seria R a benzii. n fine, exist tranziii n care starea de rotaie scade cu o unitate (de
exemplu, de la j(Vo)=1 la j(V1)= 0, deci j = -1) care alctuiesc seria P a benzii spectrale - toate
avnd frecvene mai joase - care se noteaz n ordine descresctoare a E cu P1, P2, P3, . Pe
fig. 5 se prezint schematic corespondena dintre tranziiile de absorbie i liniile structurii
fine a spectrelor de vibraie-rotaie n coordonate absorban - numr de und.
Prezentm mai jos, pentru exemplificare, spectrul IR al metanului gazos (fig. 6) care
ilustreaz convingtor existena celor trei ramuri P, Q i R ale unei benzi, care corespund doar
vibraiilor C-H asimetrice.
119
120
Spectrometria de absorbie n IR
Aparatura
difracie i interferen) i care pot fi prevzute cu dou canale sau monocanal (cu sau fr
chopper).
Spectrometre bazate pe transformata Fourier, care permit intrarea n celul a ntregului
Chiar dac nu permit obinerea unor spectre de absorbie, deci sunt inutile n ceea ce
privete analiza calitativ, aceste aparate servesc doar pentru analize de amestecuri dinainte
cunoscute (de exemplu CO, CO2 sau H2O, D2O) n procese industriale sau controlul mediului.
Aceste analizoare sunt robuste, uor de utilizat i ieftine. Se pot analiza astfel sute de soluii
formate din mai multe gaze sau lichide n controlul tehnologic sau al mediului ambiant.
Un exemplu de aplicaie de acest tip este analizorul de CO i CO2 din gazele de
eapament ale automobilelor - prezent practic n orice service auto. Acestea msoar
absorbana la 2170cm-1 n cazul CO i la 2350cm-1 n cazul CO2. Una dintre numeroasele
variante ale acestui analizor este cel prezentat n fig. 7.
R D
S
L
Chopp.
N
121
umplut cu azot (N2 - care nu absoarbe n IR). Prin rotirea chopper-ului (Chopp.), de ctre
motorul M, cu o frecven sincron cu alternana circuitului de msur, la detector vor ajunge,
pe rnd, semnalul cu, i fr, absorbia substanei de referin. Evident, pe discul chopper-ului
se pot monta mai multe celule de referin i filtre (pn la 6). Prin prelucrarea semnalului
detectorului, n conformitate cu metoda adaosului standard, se poate evalua concentraia
necunoscut.
Spectrometre bazate pe dispersie
Nernst, lmpile Globar i filamentele Nicrom toate trei pentru IR fundamental i lmpile cu
mercur la presiune ridicat pentru IR ndeprtat.
Tuburile Nernst constau din rezistene formate din tubuoare cu diametru de 2mm i
30cm lungime confecionate din amestecuri de oxizi ai pmnturilor rare (n special Y i Er)
plus ZrO2. Domeniul spectral n care lucreaz este 0.4-20m.
Lmpile Globar (denumire comercial - GLOBAR care s-a ncetenit) sunt
rezistene care constau din nite baghete de 4mm diametru avnd 50cm lungime,
confecionate din SiC. Sunt mai fragile dect tuburile Nernst.
Spiralele din srm Nicrom sunt sursele cele mai puin pretenioase. Stabile n timp,
rezistente n aer acestea dau o temperatur mai sczut i, n consecin, au o putere de emisie
mai slab. Stratul de oxizi format pe suprafa asigur emisia radiaiei. Servesc drept surse n
aparatele mai puin pretenioase.
Monocromatoarele pentru IR sunt construite pe aceleai principii cu cele din domeniul
UV-VIS i pot fi cu prism sau reea. Un dezavantaj al acestora este acela c nu pot fi
confecionate din acelai material pentru tot domeniul IR. Exist materiale preferate doar pe
anumite subdomenii ale IR-ului ca de exemplu: LiF (0.115-7m), CaF2 (0.125-10m) BaF2
(0.2-13.5m), NaCl (0.2-17m), KBr (0.2-26m) sau CsI (1-40m). De aceea se prefer
selectarea cu prisme a unei poriuni i cu un monocromator se submparte domeniu pe
subdomenii foarte nguste.
122
Spectrometria de absorbie n IR
detectorilor folosii n UV-VIS. Acetia pot fi clasificai pe baza principiului care st la baza
funcionrii n dou grupuri:
Detectori cuantici bazai pe efectul fotonilor asupra materialelor;
Detectori termici care se bazeaz pe modificarea proprietilor fizice ale materialelor cu
temperatura.
Tc
A
O
O
F2
O
S
Ob
R2
F1
R1
O
A
O
Fig. 8. Schema de principiu a unui spectrometru cu reea. S - surs, O - oglinzi, C - cuve, A atenuatoare, F1, F2 - fante, R1,R2 - reele, Tc - termocuplu
Din prima categorie amintim detectorii fotovoltaici care constau dintr-un film
fotoconductor (de exemplu un compus HgCdTe) depus pe un suport inert. Pentru a avea o
sensibilitate bun detectorul este meninut la temperatura azotului lichid.
Tot din aceast categorie amintim detectorii piroelectrici care constau din cristale
plasate sub form de sandwich ntre dou armturi plane din care una este transparent. Sub
efectul unei diferene de potenial, cristalul se polarizeaz comportndu-se ca un dielectric.
Gradul de polarizare difer n funcie de intensitatea radiaiei termice primite. Semnalul dat de
detector este liniar pe tot domeniul iar ineria termic este redus. Substanele folosite cu
succes n acest tip de detectori sunt sulfatul de triglicin deuterat (DTGS) sau tantalatul de
litiu (LiTaO3).
Dintre detectorii termici, cei mai folosii n ultimul timp, amintim: termocuplurile,
termorezistenele i detectorii pneumatici.
Termocuplurile, sunt dispozitive care se bazeaz pe generarea unei tensiuni electrice
ntr-un circuit coninnd dou jonciuni identice, formate din metale diferite (prin topire
local). Cele dou jonciuni trebuie s se afle la temperaturi diferite (efect Peltier), condiii n
care apare tensiunea amintit.
123
const dintr-o capsul metalic (cilindric) avnd un capt nchis cu o plcu metalic
nnegrit iar la cellalt cu o plcu metalic flexibil. Radiaia IR cznd pe partea nnegrit,
nclzind gazul din celul, provoac dilatarea acestuia. Ca urmare, gazul provoac o deplasare
a membranei flexibile datorit mririi volumului incintei. Micarea poate fi sesizat prin
includerea acestei membrane flexibile ntr-un condensator care, la rndul lui, este inclus ntrun circuit de msurare a capacitii.
124
Spectrometria de absorbie n IR
Analiza prin spectrometrie de absobie n IR se poate aplica pentru gaze, lichide sau
solide. Gazele se introduc n nite celule speciale unde proba se introduce cu precauiile
necesare (cltire, evacuarea gazului precedent, vidare) sau prin diluare n aer. Lungimea
acestor celule de gaz este mrit prin reflexii repetate (cu oglinzi) ajungndu-se la 5-20m n
spaii de 0.5m.
Lichidele pot fi studiate ca atare sau sub form de soluii. Dac sunt prea volatile,
lichidele se pot analiza punnd o pictur ntre dou discuri, perfect lefuite, confecionate din
cristale de NaCl, care ulterior se preseaz una de alta i se prind ntr-o ram nainte de
introducerea n spectrometru. Soluiile cu concentraii ntre 0.05-10% se introduc n celule de
grosimi 0.1-1mm care se introduc ca atare n spectrofotomerul IR. Evident solvenii trebuie s
fie anhidrii, puri i transpareni n IR pentru domeniul de interes. Solvenii preferai pentru
diluii sunt CCl4, CHCl3 i CS2.
Solidele se analizeaz fie n soluii fie ca emulsii n ulei de parafin (denumit n
literatura de specialitate dup produsul comercial NUJOL). Acesta absoarbe doar n trei
benzi cunoscute. Se mai pot utiliza emulsii n KBr cristalin la o diluie de 1% (1mg substan
la 99mg KBr). Pastila transparent obinut dup mcinare i presare se fixeaz ntr-o ram
potrivit i se introduce n aparat n faa fascicolului IR.
125
Dac se pune problema analizei prin specrofotometrie IR a unui amestec de mai muli
componeni, cunoscndu-se dinainte spectrul de absorbie individual al acestora, se poate
realiza aceast determinare utiliznd legea Lambert- Beer. n conformitate cu legea amintit,
dac componentele nu interacioneaz unele cu altele, se poate admite aditivitatea
absorbanelor adic: absorbana unei substane aflate n amestec cu alta este aceeai cu cea
care ar avea-o substana dac ar fi singur n celul. Datorit numrului mare de linii metoda
este aplicabil i n domeniul IR, n special pentru amestecuri de gaze.
Pentru exemplificare s considerm un amestec de trei compui, fiecare avnd o
concentraie finit simbolizat CA, CB, CC. Pentru determinarea prin analiz a substanelor A,
B i C se alege o cte o band caracteristic, diferit, pentru fiecare, cu maximele 1, 2 i 3.
Chiar dac maximele sunt diferite la fiecare din cele trei lungimi de und, se constat c toate
cele trei substane absorb lumina dar ntr-o msur foarte diferit. S notm cu A1, A2 i A3
absorbanele msurate pentru cele trei lungimi de und 1, 2 i 3. Evident, n virtutea celor
amintite anterior, fiecare din cele trei absorbane msurate reprezint contribuia tuturor celor
trei substane. Cunoscndu-se coeficienii molari de extincie pentru fiecare din cele trei
substane, la fiecare din cele trei lungimi de und (9 valori: 1A , 2A , 3A , , C2 , 3C ), se poate
scrie, n cazul unei celule cu lungimea l constant, pe baza existenei aditivitii absorbanelor
urmtoarele ecuaii:
Pentru 1: 1A CA + 1B CB + 1C CC = A1/l
Pentru 2: 2A CA + 2B CB + C2 CC = A2/l
Pentru 3: 3A CA + 3B CB + 3C CC = A3/l
Se observ c a aprut un sistem de trei ecuaii liniare cu trei necunoscute anume CA,
CB, CC (adic chiar concentraiile). Soluia se afl analitic:
1A
2
A
3 A
1B
2B
3 B
1C A1 CA
2 C A 2 = CB
3C A 3 CC
(9)
Practic pot interveni mai mult de trei lungimi de und. Sistemul dei are n acest caz
mai multe ecuaii dect necunoscute se poate rezolva i conduce la rezultate mai precise. n
cazul anterior notnd matricea coeficienilor [], matricea absorbanelor [A] i matricea
concentraiilor (necunoscutelor) [C], se poate scrie soluia sistemului precedent mai simplu
astfel:
[C] = []-1[A]
126
(10)
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Spectrometria de absorbie n IR
ntrebri de verificare
127
folosit a fost o improvizaie pentru a se obine absorbia atomic n cadrul unui fotometru cu
flacr (un spectrometru de emisie n care excitarea atomilor se realizeaz ntr-o flacr).
Acesta, ca i celelalte instrumente care au urmat, msoar concentraia unui element dintr-o
prob, prin determinarea absorbiei realizate de ctre atomii probei, adui ntr-o flacr sau,
mai general, n faz gazoas (la o temperatur suficient de ridicat) asupra unei radiaii
monocromatice furnizate de o surs extern. Evident c radiaia respectiv este astfel aleas
nct s fie caracteristic unui anumit atom.
Spectrometrul de absorbie atomic msoar radiaia absorbit de atomii care rmn
n stare fundamental (neexcitai) n stare gazoas. Numrul acestora fiind de obicei mult mai
mare dect a celor excitai, spectrometria de absorbie atomic (AAS [86]) este o metod
caracterizat de o sensibilitate mult mai bun, cel puin pn la temperaturi de 5000K.
Remarcm faptul c aparatura pentru absorbie atomic poate fi utilizat, la nevoie, i pentru
lucrul n emisie.
Principiul metodei
Ionii din soluia de analizat, prin pulverizare (sau nebulizare) ptrund o dat cu gazul
purttor ntr-o zon cu temperatura ridicat (de ex. o flacr) i devin atomi. Acetia trebuie
adui ntr-o stare energetic potrivit n vederea favorizrii absorbiei i reducerii la minim a
emisiei. Acest lucru se realizeaz n flcri cu temperaturi din domeniul 2000-3000K
(obinute de exemplu folosind arztoare cu aer-acetilen).
Modul n care se produc atomii metalici n stare gazoas este descris mai amnunit n
continuare (fig. 1). La aspirarea soluiei ntr-o flacr se petrec, ntr-o succesiune rapid,
urmtoarele etape:
[85] http://www.science.org.au/academy/memoirs/walsh2.htm
[86] AAS = prescurtarea denumirii n l. engl., Atomic Absorption Spectrometry.
Chimie Analitic i Instrumental
129
flacr i devenind atomi excitai, care constituie ei nii surse de radiaii. Spectrul de
emisie rezultant const din linii caracteristice mai ales ale atomilor dar i ale ionilor
excitai care pot aprea (procesul 4 din fig. 1). O parte dintre atomi se pot transforma i n
alte specii MO, MOH (procesul 5 pe fig. 1) cnd nu mai iau parte la procesul de absorbie
atomic.
(1)
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
unde N1 este numrul de atomi n stare excitat pe nivelul 1, N0 - numrul de atomi aflai n
stare fundamental,
rezonan tipice.
Tabelul 1. Raportul dintre numrul de atomi din strile excitat, N1, respectiv fundamental,
N0, la dou temperaturi, 2000, respectiv 4000 K
Element E Lungime de und
N1/N0
(eV)
(nm)
2000K 4000K
Na
2.1 589.0
9.86.10-6 4.44.10-3
K
2.93 422.7
1.91.10-6 6.03.10-3
Zn
5.79 213.9
7.31.10-6 1.48.10-7
Walsh a fost cel care a propus primul, pentru aceast metod, n calitate de surse de
lumin, nite lmpi de construcie special denumite lmpi cu catod cavitar [87] (fig. 3) care
emit un spectru atomic, format din linii, caracteristice materialului (metalului) din care este
confecionat catodul. Cu ajutorul monocromatorului se selecteaz doar linia dorit, de obicei
linia de rezonan a elementului respectiv.
n afara sursei, deosebit de toate sursele utilizate n celelalte metode optice, schema
bloc a acestei metode (fig. 4) este cu totul analog spectrofotometriei de absorbie n general.
Deosebirea este aceea c, n cazul absorbiei atomice, n loc de soluii lichide, probele se afla
n stare gazoas ntr-o flacr i nu sunt constituite din molecule ci din atomi n stare
fundamental.
Lamp cu catod cavitar (surs) Flacr sau cuptor (celul) Monocromator Detector
Fig. 4. Schema bloc a spectrometrului de absorbie atomic
131
I = I0e-KlN
(2)
(3)
(4)
Deci A, pentru un atom dat, pentru parametrii fizici ai sistemului optic constani i o
flacr fix, este proporional cu N. Cum numrul de atomi din unitatea de volum N depinde
de mai muli factori constani (debit, vscozitate etc.) dar mai ales de concentraia C a soluiei
pulverizate n flacr, introducnd concentraia n locul numrului de atomi, N, ecuaia
devine:
A = kC
(5)
unde k este un coeficient constant, propriu fiecrui element la lungimea de und aleas i n
condiiile unui instrument dat i ale unei flcri stabile. Relaia, liniar n coordonatele A-C,
este util pentru analiza cantitativ propriu-zis i exploatat cu totul analog ca n
spectrofotometria de absorbie UV-VIS.
132
Aparatura
luminos de intensitate constant. Soluia coninnd proba etalon, sau cea de analizat, este
transformat ntr-un aerosol fin, n interiorul unei incinte numite sistem de pulverizare, sau
pulverizator (nebulizor). Aerosolul, amestecat intim cu amestecul de gaze, oxidant plus
carburant, este condus apoi n flacr (fig. 5).
Atomii unui anumit element absorb doar lumina cu lungimea de und specific
elementului respectiv. Tocmai aceste lungimi de und caracteristice sunt emise de surs i
trecute prin flacr iar diminuarea, exprimat n unitai de absorban, este proporional cu
numrul de atomi ai elementului de analizat, prezeni n flacra. Atomii celorlalte elemente
Chimie Analitic i Instrumental
133
nsoitoare nu absorb lumina la aceeai lungime de und ci fiecare la alte valori ale acesteia.
Acest lucru se asigur prin selectarea lungimii de und i cunoaterea elementelor nsoitoare.
Detectorul, de regul un foto-multiplicator, msoar intensitatea luminii monocromatice -
sau prin metoda adaosului standard. Analiza chimic prin absorbie atomic este extrem de
specific, lrgimea benzii de absorbie, fiind foarte ngust - de ordinul a 10-3nm - face
aproape imposibile orice confuzii privind analitul. De aceea cu aceast metod se pot analiza
66 elemente metalice sau semimetalice, fiind puin recomandat pentru nemetale. Metoda
analizei prin AA este principala metod de analiz a elementelor metalice minore din
materiale sau din mediu, inclusiv poluarea organismelor cu acestea. Liniile specifice cad n
domeniul 190-850nm permind analize de ordinul microgramelor (g) iar n anumite cazuri
134
Probleme speciale
n practic apar totui interferene cu alte elemente din prob, de exemplu are loc
formarea unor combinaii greu disociabile (Mg2P2O7, ZrO2 sau Ca3PO4 etc.) sau efecte legate
de temperatura flcrii cu care se lucreaz - prea mare sau prea mic - ceea ce afecteaz
numrul atomilor n stare fundamental. Acestea, indiferent de natura lor fizic, au cptat
denumirea de efect de matrice. De aceea trebuie luate contramsuri. Toate aceste probleme se
studiaz individual, folosind publicaiile de specialitate. Pentru a se asigura o limit de
detecie ct mai joas, este necesar neutralizarea fluctuaiilor fondului. Pentru acest scop s-au
pus la punct instrumente cu dublu fascicul, ale cror detectoare primesc alternativ semnale de
la raza incident care, odat traverseaz proba (flacra sau cuptorul) i, alternativ, trece
nemodificat sub form de radiaie de referin. n cazul atomizoarelor cu flacr efectul de
matrice este mai redus. n cazul utilizrii cuptoarelor tubulare efectul devine foarte important
datorit concentraiei mai ridicate a acesteia. Cele mai importante mijloace de corecie a
fondului sunt cele bazate pe lmpi cu deuteriu i cele care utilizeaz efectul Zeeman.
Fig. 6. Instrument la care corecia fondului se face cu ajutorul unei lmpi cu arc de deuteriu
135
Metode evoluate
Fig. 7. Cuptorul tubular din grafit, nclzit electric, permite volatilizarea probelor
mercur, arsen, staniu, stibiu, bismut, seleniu - au dou proprieti importante pentru analiza
lor chimic. Se reduc cu dificultate la elemente n flacr n schimb dau uor hidruri volatile.
De aceea, nainte de introducerea n flacr a probelor coninnd aceste elemente, proba se
supune unui proces chimic necesar transformrii elementelor chimice amintite n hidrurile
136
NaBH 4
800 C
As3+
AsH 3
As + 3 / 2H 2
Hidrura volatil este antrenat de gazul purttor ntr-un cuptora din cuar, plasat n
flacr unde de fapt are loc i reacia de descompunere n atomi. n acest fel s-au obinut
sensibiliti de 100 de ori mai bune, n cazul acestor elemente. n cazul particular al
mercurului, care nu d o hidrur stabil, se utilizeaz nite celule speciale din care Hg nu mai
are nevoie s fie transferat n flacr. Metoda, denumit metoda vaporilor reci, se aplic n
dispozitive specifice n care reducerea are loc cu SnCl2.
137
(6)
138
ntrebri de verificare
139
Spectrometria de emisie
Opera noastr nu se adreseaz dect acelora care emit pe aceeai lungime de und cu noi
Jean Cocteau (1889-1963), Journal dun inconu
Spectrometria de emisie
Introducere
Atomii sau ionii unui element, adui n diferite stri excitate, revin la nivele staionare
mai coborte ca energie sau chiar n stare fundamental, emind radiaii electromagnetice, cu
frecvene din domeniul UV, VIS i IR. Ansamblul acestor frecvene constituie spectrul de
emisie al speciei respective.
Avnd nivelele bine definite i distincte de la un atom la altul (cu foarte rare excepii),
spectrul de emisie va fi diferit - aadar va caracteriza calitativ fiecare atom - permind
141
10
Pentru a emite toate radiaiile posibile din spectru, atomul trebuie sa absoarb o
energie cel puin egal cu potenialul de ionizare al su. Majoritatea elementelor au acest
potenial sub 10eV. Valorile cele mai mici, din acest punct de vedere, le au elementele
alcaline. Halogenii ns au poteniale de ionizare peste 10eV. De aceea, pentru aceeai
energie de excitare, sensibilitatea analizei spectrale va fi mai mare pentru elementele cu
energia de ionizare joas i evident mai mic pentru cele cu energia de ionizare ridicat
(adic pentru cele situate n partea dreapt i sus a sistemului periodic - halogenii i celelalte
nemetalele tipice). Elementele alcaline i alcalino-pmntoase se pot analiza i cu o aparatur
spectral mai simpl i anume prin spectrofotometrie de flacr respectiv cu cea pentru
absorbie atomic unde flacra este utilizat ca surs optic.
Privind retrospectiv, spectroscopia optic de emisie atomic (OES), a permis
descoperirea unor elemente noi, la vremea respectiv: Rb i Cs (ambele n 1860), Tl (1862)
precum i a elementelor Ga i He. Ultimul dintre acestea, decelat mai nti n lumina venit de
la Soare (1868), a fost identificat cu mult nainte de a fi fost izolat pe Pmnt (1895). Acestea
sunt doar cteva dintre numeroasele contribuii ale spectrometriei la cunoaterea uman.
Avantajele OES cantitative constau n sensibilitatea considerabil, rapiditatea
excepional, reproductibilitatea bun, necesarul de cantiti mici de proba iar dintre
dezavantaje amintim: eroarea de 2.5%, n cel mai fericit caz, exactitate relativ constant pe tot
domeniul de concentraii i posibilitatea de a analiza corect doar elementele minore. De
asemenea instrumentele pentru acest gen de analize sunt scumpe - constituind investiii
serioase, pe termen lung, ale laboratoarelor de analize chimice instrumentale.
142
Spectrometria de emisie
Instrumentaia
prin instrument.
Cel mai simplu spectrometru, cel cu prism, este prezentat schematic n fig. 1.
Sursa spectral cea mai veche n OES, utilizat n variante perfecionate i astzi, o
constituie arcul electric - creat ntre doi electrozi de grafit (spectral pur) sau un electrod de
grafit i unul de cupru (sau un alt metal pur, absent din prob) - a crui intensitate a curentului
este de cteva zeci de amperi. Temperatura realizat se situeaz ntre 3000-6000K. Electrodul
inferior este fasonat n form de crater, astfel nct s suporte proba (fig. 2), aflat fie sub
form de fragmente metalice, fie sub form de pulbere, n amestec cu grafit i n ambele
cazuri, presate n cavitatea micro-creuzetului. La apariia arcului electric, elementul de
analizat din prob se volatilizeaz, transformndu-se n atomi sau ioni. Arcul n curent
continuu este recomandat n analiza spectrelor atomice, iar cel n scnteie - provocat de un
curent alternativ (avnd o energie de 20-50keV), care duce la temperaturi mai ridicate - pentru
analiza spectrelor ionilor.
Spectrometrele moderne sunt prevzute cu monocromatoare cu o reea curbat care
localizeaz liniile spectrale pe acelai cerc cu cel cruia i aparine reeaua: aa-numitul cerc
Rowland, reprezentat n fig. 3. Lumina ptrunde spre reeaua curbat intrnd printr-o fant
situat pe acest cerc i ies printr-o alt fant situat tot pe cerc. Receptorii, astzi formai din
minusculi fotoreceptori sau fotomultiplicatori, sunt plasai chiar n dreptul fantei de ieire.
143
10
analizat cte o fant i un fotodetector. n aceast variant radiaia venit de la surs intr
printr-o singur fant, fiind apoi dispersat prin reeaua concav bazat pe reflexie. Radiaia
compus, incident, ajunge la o serie de fante de ieire care izoleaz, fiecare, linia selecionat
de ctre utilizator pentru un anumit element. Fantele de intrare i cele de ieire se gsesc
ambele pe acelai cerc Rowland - avnd raza de curbur egal cu aceea a oglinzii. Raza, dup
ce trece prin cele dou fante, cade pe fotomultiplicatorul elementului respectiv care d un
semnal de ieire - un curent - care este integrat pe o capacitate, rezultnd astfel o tensiune
convertibil cu uurin n concentraie. Astfel de spectrometre moderne sunt denumite adesea
cuantometre. Instrumentele multicanal recente pot analiza simultan pn la 60 de elemente
chimice. Pentru a se rezolva interferenele aprute se msoar mai multe lungimi de und
pentru acelai element i se realizeaz corecii de fond. O analiz de 25 de elemente dureaz,
de la expunerea n analizor, graie mijloacelor de calcul moderne, circa 1-2 minute.
Spectrometrele secveniale funcioneaz similar, ns au numai dou canale de
msurare a intensiti pentru toate radiaiile emise de surs. Un canal este fix i msoar
intensitatea radiailor emise de etalon sau de martorul din prob, iar altul, mobil, nregistreaz
succesiv liniile pentru elementele de analizat. Acesta este un analizor mai lent dar totodat
mai ieftin, avnd posibilitatea de a analiza un numr mai mare de elemente dect cel simultan.
Acest analizor este avantajos n cercetarea tiinific, unde numrul de elemente chimice
analizate poate fi foarte diferit.
144
Spectrometria de emisie
care mai conine urme de argon, o descrcare n arc -asemntoare celei din lampa cu catod
cavitar (menionat la spectrometria de absorbie atomic). Denumirea provine de la aspectul
de aureol pe care-l capt proba de analizat n calitate de catod n aceast surs (v. fig. 4). n
timpul funcionrii, proba se corodeaz cu vitez constant, datorit arcului electric, pe
msur ce analiza se efectueaz, permind n acest fel un numr mare de analize calitative a
unor straturi subiri succesive din interiorul probei (piesei) paralele cu suprafaa. Cunoscnduse viteza de avansare a corodrii probei (n m/sec), aceast tehnic permite caracterizarea
privind compoziia chimic n funcie de distan (n adncime) a materialelor compozite straturi obinute prin tratamente termice, galvanizri sau alte prelucrri ale suprafeele
exterioare de pe piesele solicitate n condiii extreme, cele din maini. n mod surprinztor,
proba poate consta i din pulberi sau chiar din materiale izolatoare.
din cadrul variantelor n arc sau scnteie. Se pot realiza microspectre locale, pe incluziuni sau
zone care, observate la microscop, prezint aspecte diferite de restul probei. Se realizeaz
cratere de diametre 20-200m, din care se evapor circa 10-8-210-6g din prob. Zona
145
10
(1)
Spectrometria de emisie
(2)
(3)
(4)
147
10
etalon intern chiar elementul major. Motivul este unul practic: la analizele de serie mare
elementul major are o concentraie practic constant.
Elementul din etalonul intern respect i el o ecuaie log I = f(log C) analog cu cel de
analizat. Presupunnd c exist un efect de matrice, avem pentru un etalon intern de
concentraie fixat, Ce:
log(Ie) = log(ae) + belog(Ce)
(5)
(6)
(7)
148
Spectrometria de emisie
O contribuie major la succesul OES a adus-o introducerea spectrometrelor cu aanumitele tore pe baz de plasm de argon unde temperaturile ridicate permit practic excitarea
oricrui element (T = 6000K). Tehnica, denumit complet : spectrometrie optic de emisie
atomic cu plasm cuplat inductiv (ICP-OES [90]) este mult utilizat n ultimul timp. Este
ns obligatorie dezagregarea prealabil a probei (aducerea acesteia n soluie) i apoi
pulverizarea acesteia (ca aerosol) direct n argonul ce va intra n zona cald (plasm). Erorile
sunt i aici de 3-5%.
Sursa pentru acest tip de plasm const dintr-un dispozitiv, prezentat schematic n fig.
7 compus din trei tuburi concentrice, confecionate din cuar, fiecare deschis n partea dinspre
zona cald (de regul orientat n sus).
Curentul de argon, ce poart cu sine proba, sub form de particule fine (un aerosol),
trece prin tubul central. Obinerea plasmei este realizat de cele dou sau trei nfurri ale
unui tub de inducie prin care circul un curent de radiofrecven (27MHz) de mare putere (12KW). Un al doilea flux gazos tot de argon ionizat curge, cu un debit cuprins ntre 10 i 15
L.min-1, prin tubul intermediar i servete la meninerea plasmei. Gazul de protecie, care va
deveni n partea superioar tot plasm, curge sub forma unui curent elicoidal, izolnd termic
tubul de cuar exterior i dnd stabilitate plasmei. Iniial, plasma este pornit de o scnteie,
realizat cu un dispozitiv auxiliar, apoi se autontreine. Plasma propriu-zis are o form
inelar (toroidal), n care proba este introdus n partea central, rece, nclzindu-se pe
msur ce se apropie i intr n contact cu zona cald (vezi fig. 7).
[90] ICP-OES reprezint, n literatura internaional, prescurtarea denumirii din l. engl.: Inductively Coupled
Plama - Optical Emission Spectrometry
Chimie Analitic i Instrumental
149
10
150
Spectrometria de emisie
Fotometria de flacr
Din punct de vedere practic, metoda este important prin aceea c permite obinerea
semnalelor analitice pentru elemente ca Na, K, Ca, Li - elemente dificil de analizat prin
numeroase alte tehnici - utiliznd o aparatur relativ simpl i ieftin. Metoda prezint
interes n analiza apelor unde coninutul Na+ i Ca2+ este esenial, concentraia acestora fiind
cobort.
Q Qp
mc
(8)
151
10
Temperatura depinde de natura, dar i de raportul componenilor (carburantcomburant) care trebuie pstrat n limite optime i constante.
Proba, dup dizolvare, este adus n flacr prin pulverizare, utilizndu-se un
pulverizator (sau nebulizor), iar picturile fine evaporndu-se brusc, provoac apariia ionilor,
respectiv a atomilor, care sufer excitri i dezexcitri repetate. Simultan cu acestea mai au
loc fenomene de ionizare, asocieri de ioni, autoabsorbia i difuzia (mprtierea luminii). S
explicm pe scurt fiecare din acestea. Ionii au alte nivele dect atomii. Apariia ionizrii
micoreaz numrul atomilor, deci sensibilitatea metodei. Autoabsorbia const n utilizarea
luminii emise pentru excitarea propriilor atomi, ceea ce micoreaz lumina emis i
sensibilitatea i stabilitatea semnalului la concentraii mari. Acest lucru se petrece n zonele
reci, deci strbtute obligatoriu de lumin. Difuzia este fenomenul de mprtiere a luminii ce
d un semnal distorsionat n cazul prezenei acesteia n proba pentru analiz n timp ce
lipsete din proba etalon.
Numrul atomilor excitai crete cu temperatura datorit ecuaiei amintite la
spectrometria de absorbie atomic, lucru ce se poate observa i din tabelul 2, pentru cteva
Carburanii cei mai ntlnii n cadrul metodei sunt oxidul de carbon, hidrogenul,
metanul, propan - butanul i acetilena iar comburanii pot fi aerul sau oxigenul. Se poate
observa c sunt aceiai cu cei utilizai n AA pentru temperaturi joase (tabelul 2).
Aparatura const, ca pri principale, din urmtoarele (fig. 9): un pulverizator
pneumatic (2), cu ajutorul cruia soluia etalon sau, dup caz, de analizat coninut n paharul
(1) este adus n arztorul (3) alimentat cu aer sau oxigen de la o surs (de exemplu un
cilindru sub presiune) unde arde cu o flacr - (4) - gazul combustibil. Radiaia emis, mai
exact spectrul emis, este monocromat cu ajutorul filtrului sau monocromatorului, care
selecteaz lungimea de und dorit. Curentul fotoelectric ce ia natere n fotomultiplicator (5),
este amplificat de un amplificator (6) i nregistrat (7).
152
Spectrometria de emisie
Utilizarea spectrometrului cu dou canale (vezi fig. 11) permite ca erorile datorate
fondului flcrii (ca variaii brute ale temperaturii, ale debitelor soluiei de prob etc.) s fie
nlturate prin metoda etalonului intern, utiliznd dou canale simultan.
153
10
ntrebri de verificare
1. Care sunt domeniile de lungimi de und n care se pot obine linii spectrale n
spectrometria de emisie?
2. Care sunt elementele pentru care nu este recomandat spectrometria de emisie?
3. Ce este un etalon intern i care este rolul su?
4. Care este cea mai veche surs spectral cunoscut n spectrometria optic de emisie optic?
5. Sub ce form se poate plasa proba n arcul electric?
6. Cum se introduce proba n spectrometria cu plasm cuplat inductiv?
7. Ce este spectrometria cu descrcare aureolar?
8. Care este fenomenul care genereaz plasma, cel mai frecvent?
9. De ce se utilizeaz sursa de excitare cu laser?
10. Ce avantaj prezint flacra n calitate de surs de excitare?
11. Ce este un tampon spectral?
12. Care este forma ecuaiei utilizate n analiza cantitativ?
13. Care sunt elementele pentru care metoda spectrometriei n flacr este recomandabil?
14. Cum se aduce proba lichid n flacr n aceast metod?
15. Ce fenomene secundare diminueaz semnalul n fotometria de flacr?
16. Ce factor mrete, pentru aceeai prob, numrul atomilor excitai?
154
Anumite combinaii chimice, aflate mai ales n soluie sau n stare solid, n urma
excitrii moleculelor cu radiaii din domeniile vizibil i UV apropiat, reemit o parte din
energia primit sub form de radiaie luminoas - adesea vizibil. Aceast reemisie se
numete fluorescen. Maximul radiaiei de fluorescen este situat de obicei la o valoare a
lungimii de und mai mare dect maximul picului radiaiei care a provocat excitarea, diferena
de energie corespunztoare transformndu-se n cldur, fiind disipat n mediu.
Simplificat, acest fenomen poate fi reprezentat conform schemei din fig. 1.
Excitare
Fluorescen
Dezexcitare
Fig. 1. Schema procesului de apariie a fluorescenei. Radiaia incident are lungimea de
und mai mic dect cea emis
Dup excitare, intensitatea luminii emise de ctre atomi, F, scade exponenial n timp
respectnd o ecuaie de forma:
F = I0 e kf t
unde F este radiaia de fluorescen produs de ctre o substan, I0 - intensitatea radiaiei
incidente, kf - o constant caracteristic substanei (analog constantei de vitez) iar t - timpul.
Trebuie fcut o distincie ntre fluorescen, care corespunde unei scderi rapide a
intensitii luminoase emise i fosforescen - la care scderea n timp este cu mult mai lent.
De aceea o specie molecular poate fi, deodat, att fluorescent ct i fosforescent. Pe de
alt parte, luminescena este tot o reemisie de lumin dar aceasta are la origine energia unei
reacii. Aceast energie nu se degaj sub form de cldur (ca n majoritatea cazurilor) ci sub
form de energie radiant. De fapt o putem considera ca pe o excitare a electronilor cu
ajutorul cldurii de reacie.
Timpul de via a unei specii moleculare excitate, 0, se definete chiar cu ajutorul
155
11
Dup acest timp intensitatea rezidual nu reprezint dect 36.7% din cea iniial adic
peste 60% dintre moleculele excitate au revenit la starea neemisiv. De aceea fluorimetria
lucreaz n regim staionar - excitarea avnd loc pe tot parcursul msurtorii - pe cnd
fosforescena, la care diminuarea intensitii n timp este mult mai lent, se studiaz doar dup
ce a ncetat faza de excitare.
Fluorescena, riguros vorbind, implic emisia de radiaie prin tranziia ntre dou
niveluri care au aceeai multiplicitate (de exemplu singlet la singlet sau triplet la triplet). Dac
tranziia are loc ntre dou niveluri de multiplicitate diferit, aceasta poart numele de
luminescen.
Metodele de analiz bazat pe fluorescen nu sunt general aplicabile oricror
substane. Dar, toate metodele analitice bazate pe att pe fluorescen ct i pe i luminescen
pe lng c sunt foarte specifice sunt i foarte sensibile. De exemplu, putem aminti c limita
de determinare a unei metode fluorimetrice, pentru o anumit combinaie chimic, este de
circa 1000 de ori mai cobort dect cea a unei metode prin absorbie n vizibil sau n
ultraviolet. De aceea, din aceast categorie de metode exist cteva extrem de utile n analiza
i monitorizarea unor poluani ai mediului.
Dei am amintit la nceput c fluorescena apare n strile lichid i solid, anumite
gaze, de exemplu aflate n atmosfera terestr, pot fi determinate cantitativ prin fluorescena
indus de excitarea cu un puls de durat foarte mic (1sec) cu ajutorul unui laser de mare
putere (dispozitiv cunoscut sub denumirea de lidar).
ntruct nivelul radiaiei de luminescen nu este ntotdeauna foarte ridicat, exist dou
tipuri de instrumente diferite: fluorimetre i spectrometre de chemiluminescen. Ultimele iau gsit aplicaii n domeniul analizelor N sau S din materiale precum i n monitorizarea
NOx, H2S din aer precum i n studiile, respectiv analizele fenomenelor de mbtrnire a
materialelor plastice.
156
S1
S0
V4
V3
V2
V1
V0
T1
Fosforescen
V4
V3
V2
V1
V0
S0
Se poate observa (fig. 2) c moleculele pot pstra o parte din energia lor sub form de
energie de vibraie. Acest exces de energie urmeaz a fi disipat n mediul nconjurtor prin
coliziuni mecanice sau alte procese neradiative cunoscute sub denumirea de relaxare
vibraional. Se mai poate uneori totui produce i o emisie de fotoni, evident mai sraci n
[91] S0, S1, T1 ... reprezint stri electronice (nivele energetice), iar V0, V1, ...nivele energetice de vibraie
caracterizate fiecare de un numr cuantic de vibraie uneori notat tot V0, V1,... . S i T sunt prescurtri
amintind sensurile de singlet, respectiv de triplet.
Chimie Analitic i Instrumental
157
11
firesc absorbia este situat la lungimi de und mai mici, respectiv n conformitate cu
ecuaiile: E = h = hc/, la valori ale energiei, E, mai ridicate (fig. 3).
Fig. 3. Poziiile relative ale absorbiei i fluorescenei n cazul eozinei. Se remarc o zon de
lungimi de und comun
Moleculele care au banda de absorbie corespunztoare tranziiei: S0S1 (v. fig. 1),
localizat la = 250nm i pentru care absorbia luminii se datorete unei tranziii (') sunt
fluorescente.
Substituenii - donori de electroni - grefai pe un sistem -delocalizat mresc ntotdeauna
158
n consecin, moleculele organice care au cel puin dou legturi conjugate i care
conin i o band de absorbie la > 200nm, cu un coeficient de absorbie 103Lmol-1cm-1,
prezint fluorescen i pot fi analizate fluorimetric. De exemplu, compuii moleculari ciclici
cu sisteme conjugate (fig. 4), care mai posed grupri funcionale donoare de electroni, se
preteaz foarte bine la acest tip de determinri.
Bifenil
Fluoren
Naftalina
OH
NH2
N
Acetofenona
Benzen
Anilina
Oxina
Fig. 4. Diveri compui fluoresceni aromatici. Oxina (8-hidroxichinoleina) formeaz
combinaii complexe fluorescente cu numeroi ioni metalici
Intensitatea fluorescenei
159
11
(1)
(2)
unde cu I0 s-a notat intensitatea radiaiei incidente, A - absorbana soluiei (A = lC) iar b lungimea parcursului radiaiei de fluorescen prin celula de msur. nlocuind A avem:
F = fI0lbC
(3)
unde C este concentraia molar a soluiei. nglobnd toate constantele care depind de celul,
respectiv de soluie, ntr-o singur constant, K, obinem o ecuaie mai simpl:
F = KI0C
(4)
log(F)
C
log(C)
-5
10
510
-5 -4 -3 -2
Fig. 5. Relaia liniar dintre intensitatea fluorescenei, F, i concentraia C. Domeniul liniar
este relativ ngust iar la concentraii ridicate liniaritatea dispare
-5
160
Aparatura
Monocromator (1)
- de excitare
Celul
Unghiul:
90-180
Se mai utilizeaz i lmpile cu vapori de mercur care produc linii spectrale intense (la
254, 313 i 365nm). Acestea, pot fi izolate individual folosindu-se nite simple filtre optice.
De asemenea au mai aprut surse cu laser heliu-cadmiu (325nm, 5-10mW) care de asemenea
necesit un filtru optic i impun folosirea unor fotomultiplicatori.
Constructiv se pot distinge dou tipuri de fluorimetre: (1) bazate pe determinarea
raportului fluorescenelor i (2) spectrofluorimetre.
Fluorimetrele bazate pe determinarea raportului fluorescenelor (fig. 7) dup ce
selecteaz radiaia excitant optim, gsit prin ncercri preliminare, radiaia incident este
desprit, de o oglind semitransparent, n dou raze: una care cade pe prob (aflat n
celula de msur) iar cealt pe o fotodiod. Din celula de msur iese radiaia de fluorescen,
care se observ la un unghi de 90 fa de cea incident. Un al doilea monocromator, denumit
de emisie, selecteaz radiaia dorit, de regul cea mai intens. Proba poate fi nlocuit cu un
etalon metrologic pentru reglaje. Folosirea celor dou fotodiode n opoziie elimin
fluctuaiile de intensitate inerente oricrei surse bazate pe arc electric. Calculul concentraiei
Chimie Analitic i Instrumental
161
11
necunoscute se face pe baza ecuaiei F = KI0C n care KI0 este o constant pentru orice
pereche de valori C, F. Rezult:
Cnec = Cet
Fnec
Fet
unde Cnec este concentraia probei necunoscute, Inec - intensitatea fluorescenei probei
necunoscute, Cet - concentraia probei etalon, cunoscute i Iet - intensitatea fluorescenei
pentru proba etalon - cunoscut.
Surs de xenon
Oglind
semitransparent
Referin
Prob
Monocromator
-1
Fotodiod1
Fotodiod2
Monocromator
-2
Calcul
raport
Rezultat, F
Fig. 7. Schema unui spectrofluorimetru cu doi detetectori care elimin deriva sursei
Spectrofluorimetrele permit, pe lng cele amintite anterior la fluorimetre, obinerea
unor spectre de fluorescen. Fiecare din cele dou monocromatoare baleiaz ntreg domeniul
spectral. Pentru fiecare valoare a radiaiei excitante exist un spectru de fluorescen separat.
Pentru tot domeniul se obine o familie de spectre care caracterizeaz n mod unic o
combinaie chimic sau un material fluorescent. Cu ajutorul acestora se pot seleciona
condiiile optime de lucru pentru o determinare de rutin.
162
Aplicaii
Exist un numr mic de molecule care posed o fluorescen natural. Acestea pot fi
analizate cantitativ prin fluorimetrie dac se dispune de substana pur (etalon). Numrul
acestora este foarte mic (5-8% din total). Pe de alt parte, aa cum exist reactivii de culoare,
exist i o serie de reactivi de fluorescen care duc, n urma unei reacii chimice, la produi
fluoresceni. Din primul grup de metode amintim analiza hidrocarburilor policiclice aromatice
din ape, n urma separrii acestora prin cromatografie. Tot n categoria acestui prim grup intr
i determinarea aflatoxinelor - nite ageni cancerigeni prezeni n alimente dar i o serie de
alte substane importante cum ar fi steroizi i vitamine. Din a doua grup de metode amintim
determinrile unor cationi metalici cum ar fi Be2+ cu reactivul morin sau unii compleci ai
metalelor trivalente cu oxina (8-oxichinoleina).
Determinarea dioxidului de sulf (SO2) prin fluorimetrie n UV
Evacuare
Lamp
UV
SO2
Fotodetector de
control
Filtru secundar
(214 nm)
Filtru
primar
Semnal
Fotomultiplicator
163
11
Chemiluminescena
Exist reacii chimice care sunt nsoite de emisie luminoas. O astfel de substan este
luminol-ul care poate reaciona cu ferul (II) i permite punerea n eviden a unor concentraii
mici din acest element.
O astfel de reacie este i cea utilizat pentru determinarea monoxidului de azot, NO n
amestec cu dioxidul de azot, NO2. Aceti oxizi rezult prin arderea combustibililor la
temperaturi ridicate n prezena azotului din aer i constituie poluani ai aerului. Metoda are la
baz reacia de oxidare a NO cu ozon rezultnd, ntr-o prim faz, NO2* (adic o form
excitat a dioxidului de azot) - o specie chimic luminescent. Pentru determinarea
compoziiei amestecului NO plus NO2 se procedeaz astfel. Pe o fraciune cunoscut din
proba de aer (1 pe fig. 8) tot dioxidul de azot este redus la monoxid i n urma reaciei cu
ozonul se determin NO + NO2. Pe o alt fraciune, (2), se determin prin aceeai metod
doar NO (NO2 prezent, nefiind n stare excitat, nu prezint luminescen). Apoi, prin
diferen se determin NO.
Evacuare
Aer pur
Generator
Ozon (O3)
Etalon
NOx
NOx
(2)
(1)
Microprocesor
Prob
Mo Convertiz
or
Filtru
NO
NOx
NOx
Un astfel de monitor NOx este prezentat schematic n fig. 8. Proba de aer este n
prealabil filtrat pe un filtru i se desparte prin dou conducte. Pe drumul (1) exist o etuvconvertizor care conine o coloan umplut cu pulbere de molibden. La nclzire, Mo din
coloan provoac reducerea doar pentru dioxidul de azot:
NO2 + Mo NO + MoO3
Deci, pe drumul (2) gazul rmne nemodificat iar pe drumul (1) amestecul este
convertit integral la NO. Apoi, fraciunile (1) i (2) intr n cele dou celule de luminescen,
164
F = KCNO
165
11
ntrebri de verificare
1. Ce este fluorescena?
2. Prin ce se deosebete fluorescena de fosforescen?
3. Ce este un reactiv de fluorescen?
4. Ce fenomen fizic st la baza luminescenei?
5. Ce avantaje i ce dezavantaje prezint metodele fluorimetrice?
6. Care fenomen este situat la lungimi de und mai mici, pentru aceeai substan, absorbia
sau fluorescena?
7. Care sunt principalele reguli care guverneaz apariia fluorescenei?
8. Ce este intensitatea fluorescenei i care sunt factorii care o determin?
9. n ce coordonate se construiete o curb de etalonare n fluorimetrie?
10. Ce surse optice se folosesc n fluorimetrie? Dar n metodele prin luminescen?
11. Ce tipuri de instrumente analitice cunoatei n fluorimetrie?
12. Ce gaze, avnd mari implicaii n protecia mediului, se pot monitoriza prin metodele
fluorescenei i luminescenei?
13. Ce metode generale de analiz prin fluorescen cunoatei?
166
Nefelometria i turbidimetria
ntregul este mai mult dect suma prilor
Aristotel (384-322 .e.n.)
Nefelometria i turbidimetria
Principii generale
Difuzia
luminii
reprezint
fenomenul
de
mprtiere
luminii
datorat
neomogenitilor mediului - indiferent dac este vorba de un mediu gazos, lichid sau solid.
Att nefelometria ct i turbidimetria reprezint aplicaii analitice ale fenomenelor
asociate difuziei luminii (fig. 1). Astfel, la trecerea luminii printr-un mediu dispers, heterogen
(sistem coloidal), dac neglijm lumina reflectat, putem scrie innd cont de difuzia i
absorbia luminii:
I0 = Ia + Id + I
(1)
unde s-a notat cu I0 - intensitatea luminii incidente, Ia - intensitatea luminii absorbite, Id intensitatea luminii difuzate i I - intensitatea luminii transmise.
I0
I
Turbidimetrie
Nefelometrie
Id
Fig. 1. Reprezentare schematic a fenomenului de difuzie a luminii i a tehnicilor bazate pe
acest fenomen
Nv 2
4R 2
(2)
167
12
9 n 2 -n12
(1 + cos 2)
2
2
2 n +2n1
(3)
unde cu n i n1 s-au notat indicii de refracie ai particulei respectiv ai mediului n care este
suspendat particula. Se poate observa c relaia permite calculul valorii N cnd s-ar cunoate
toi ceilali parametri. Cum N este proporional cu concentraia se poate trage concluzia c
intensitatea luminii difuzate, Id, este proporional cu concentraia particulelor, respectiv cu
cea a soluiei din care provin acestea.
n afar de cele dou tehnici amintite exist i alte aplicaii importante ale difuziei
luminii n evaluarea cantitativ a maselor moleculare ale substanelor macromoleculare
(polimerilor) din soluie sau n analiza granulometric a pulberilor suspendate n lichide sau
chiar n gaze.
168
Nefelometria i turbidimetria
Nefelometria
Nefelometria este o tehnic de analiz instrumental bazat pe msurarea intensitii
luminii difuzate, Id datorate unei anumite specii chimice, greu solubil n mediul lichid i
avnd o granulaie fin (sistem coloidal). Lucrnd la un unghi cunoscut, pe un amestec
cunoscut de substane i ntr-un mediu cu indice de refracie constant, la o finee ridicat a
particulelor (la o dimensiune apropiat de lungimea de und a luminii incidente) ecuaia lui
Rayleigh devine:
Id = I0Kcv2
(4)
(5)
unde KMA este produsul de solubilitate - o constant cunoscut pentru un compus greu solubil
(la o temperatur dat). Evident, metoda se poate aplica pentru oricare din ionii care pot lua
parte la o reacie de precipitare, de exemplu perechile de anion i cation: (SO42-; Ba2+), (Cl-;
Ag+) sau (C2O42-; Ca2+) etc.
Orice proces de precipitare depinde de mai muli factori ca: natura reactivilor,
concentraia acestora, temperatura, pH-ul, viteza de adugare a reactivilor, agitarea i mediul
de reacie. Este deosebit de dificil de reprodus ntocmai toate aceste condiii. Peste toate
acestea, nu trebuie uitat c sistemul coloidal (microeterogen) aprut nu este stabil. Pentru a se
stabiliza sistemul, se recurge la ncetinirea proceselor de difuzie - adic a deplasrii
particulelor (ceea ce micoreaz probabilitatea ciocnirilor) prin mrirea viscozitii mediului.
Pe de alt parte, alturi de electroliii din reactivii participani la reacia de precipitare, se mai
introduce un electrolit tare care, prin sarcina superficial creat, va micora viteza de
coagulare.
169
12
Turbidimetria
Tubidimetria este tehnica nefelometric n care unghiul de observaie este zero - adic
msurarea se face n lumina transmis. Pentru aceste determinri pot fi folosite tot
spectrofotometrele din domeniul vizibil dar sunt preferate instrumente specializate denumite
turbidimetre. Pn nu demult, se utilizau ca surse luminoase lmpi cu filament din W, dar
I0
= klc
I
(6)
Nefelometria i turbidimetria
171
12
dx
= k [c]0 [R]0
dt
(7)
(8)
Ve
Ve
Nefelometria i turbidimetria
4000 FTU (formazine turbidity units - uniti de turbiditate - formazin), uniti cunoscute i
sub denumirea de NTU - uniti de turbiditate nefelometrice [95]. Reeta de preparare este
urmtoarea:
Se dizolv 10.0g hexametilentetramin (C6H12N4) n ap i se dilueaz la 100ml
[95] Unitile FNU sau, mai recent NTU, reprezint uniti standardizate, introduse de USEPA i recunoscute de
standardele europene ISO, mai concret ISO-70227
Chimie Analitic i Instrumental
173
12
ntrebri de verificare
174
Refractometria i polarimetria
Toat fizica este fie imposibil fie trivial; este imposibil pn o nelegi, apoi, devine trivial
Ernest Rutherford (1871- 1937)
Refractometria i polarimetria
Refractometria
Indicele de refracie notat n la o temperatur dat i lucrnd cu lumin de lungime de
und, , fixat este o constant fizic important care caracterizeaz cu precizie o substan
chimic deoarece mici cantiti de impuriti modific valoarea acestui indice. Msurtorile
de indici de refracie se pot realiza rapid i cu cantiti mici de substan, aparatura fiind
relativ ieftin. Se tie din fizic ce este refracia i indicele de refracie. Pe figura alaturat
(vezi fig. 1) am reprezentat trecerea energiei radiante dintr-un mediu 1 ntr-un mediu 2.
Fenomenul de schimbare a direciei de propagare caracterizat prin unghiul i, respectiv r, se
numete refracie.
n1sin(i) = n2sin(r)
i
1(n1)
2(n2)
r
Fig. 1. Fenomenul refraciei i legea dup care se petrece
Conform legilor refraciei empirice sin i/sin r = n reprezint indicele de refracie al
mediului 2 n raport cu primul i este egal cu raportul vitezelor de propagare n cele dou
medii (n mediul mai dens cu vitez mai mic). Dac r = 90 raza se propag n mediul 2
perpendicular pe interfaa celor dou medii i se poate scrie: n2,1 = sin i. Aceast valoare i este
denumit unghi limit sau unghi critic. Dac r > 90 asistm la o reflexie total adic raza nu
trece n mediul 2.
Dac mediul 1 este chiar vidul, n reprezint indicele de refracie absolut i:
n = n1/n2
(1)
(2)
175
13
O relaie mai adecvat pentru aceeai constant de material a fost dedus din teoria
electromagnetic a luminii (Maxwell) avnd expresia:
r=
(n 2 1)
(n 2 + 2) d
(3)
numit tot refracie specific. Produsul dintre aceasta i masa molar a primit denumirea de
refracia molar - tot o constant de material - fiind utilizat astzi n caracterizarea fizico-
(4)
[96] Amestecuri formate doar din dou substane diferite, fiecare avnd un indice de refracie n specific.
176
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Refractometria i polarimetria
(5)
177
13
Polarimetria
Activitatea optic a substanelor cristaline este strns legat de structura lor cristalin.
Alteori la baza rotaiei stau asimetriile moleculare. Astfel, prin topire sau dizolvare disprnd
structura dispare i activitatea optic a substanelor cristaline. La alte substane activitatea
optic este legat de structura lor molecular (chiral) i la acestea activitatea se pstreaz i
n soluie (de exemplu la zaharoz). Dac rotaia are loc n sensul acelor de ceasornic
substana o numim dextrogir iar unghiul de rotaie se consider pozitiv. La rotaia n sens
opus denumirea substanei este de substan levogir iar unghiul se consider negativ. n
afar de natura substanei unghiul de rotaie depinde i de lungimea de und a radiaiei,
lungimea parcursului optic, de concentraie i temperatur. n cazuri excepionale variaz i
cu timpul, caz n care vorbim de mutarotaie. Pentru face comparabile msurtorile de rotaie
pentru diferite substane se fac raporturi ale unghiului msurat la lungimea drumului optic, la
densitatea soluiei i se fac referiri la o concentraie convenional de 1g per ml solvent.
Rotaia se numete n acest caz specific, se noteaz cu []t i are relaia de definiie:
[]t = /(ld)
(6)
unde este unghiul de rotaie msurat, - lungimea de und, l - lungimea celulei, d densitatea soluiei.
De exemplu, la o concentraie de Cg/100ml solvent expresia rotaiei specifice devine:
[]t = 100/(lCd)
178
(7)
Refractometria i polarimetria
Aceasta este o constant caracteristic a lichidelor i solidelor pure aflate n soluie. Valoarea
, pentru o soluie (material) optic activ, este legat de concentraie printr-o ecuaie de forma:
= a + bC + cC2
(8)
unde a, b, c sunt constante empirice. Aceasta face posibil analiza cantitativ a unui
component sau amestec de componente optic active.
Determinarea unghiului de rotaie se face cu ajutorul polarimetrelor (de exemplu de tip
Mitscherlich) a cror reprezentare schematic este prezentat n fig. 4.
179
13
ntrebri de verificare
180
n fluorescena de raze X (XRF [98]) lucrurile se petrec altfel. Anume, au loc succesiv
urmtoarele procese:
1. Electronii interiori ai atomilor probei sunt expulzai datorit ciocnirilor cu fotonii X ai
sursei de raze X primare (fig. 1 i 4).
2. Electronii din straturile exterioare ocup locurile rmase vacante de pe straturile inferioare
(K, L, M).
3. n urma tranziiilor care au loc, se elibereaz cuante de energie din domeniul razelor X
care prsesc proba n toate direciile.
Energia sursei de raze X este cuprins ntre 5 i 100keV. Razele X primare, cum se
numesc radiaiile care provin de la surs (adesea un tub de raze X), sunt dirijate spre proba
supus analizei. Radiaiile X caracteristice - specifice elementelor probei i reemise de ctre
[97] Denumirea de radiaie Rntgen se folosete mult n literatura internaional n onoarea fizicianului german
K. Rntgen - descoperitorul acestor raze.
[98] XRF este prescurtarea din l. engl. a denumirii internaionale: X-Ray Fluorimetry.
Chimie Analitic i Instrumental
181
14
aceasta - prsesc eantionul, coninnd informaii care permit stabilirea compoziiei chimice
a materialului [99] (solid sau soluie).
totodat n vid) a electronilor emii de ctre catod. Acetia izbind anticatodul (de multe ori
anodul tubului), genereaz raze X specifice anticatodului, n interiorul acestuia. n funcie de
natura probei, se lucreaz cu un anticatod potrivit - confecionat dintr-un metal care s nu fie
coninut n prob (Cu, Fe, Co, Ni, Cr, Mo, Ag, Rh etc.). Dup cum am amintit, razele X
primare sunt emanate n toate direciile ns prsesc tubul doar acelea care vin spre direcia
ferestrei, confecionate din beriliu - un element cu caracter metalic, suficient de rigid, avnd
un numr de ordine mic i de aceea la o grosime redus este practic transparent la raze X.
Schia de principiu a unui astfel de tub este reprezentat schematic n fig. 2.
Radiaiile X care prsesc tubul sunt de dou tipuri. O radiaie de fond - cu spectru
larg, continuu - peste care se gsete suprapus un spectru caracteristic metalului anticatodului.
Cznd asupra probei de analizat, fotonii X provoac la rndul lor apariia altor radiaii
caracteristice, de ast dat ale probei supuse analizei. Din acest motiv, reamintim c nu se
folosesc tuburi cu anticatodul compus dintr-un metal care se gsete i n proba de analizat.
De exemplu radiaia care prsete un tub cu anticatod din Mo este prezentat n fig. 3 la
diferite valori ale energiei acesteia. Se remarc lrgimea considerabil a domeniului de
lungimi de und emise, comparativ cu domeniul celor caracteristice.
Mecanismul apariiei radiaiei caracteristice este prezentat ceva mai n detaliu n fig. 4.
Astfel, n urma coliziunii mecanice dintre fotonii X ai sursei primare cu electronii de pe
[99] Nu este neaprat necesar s fie fotoni X. Se pot obine spectre de fluorescen X i cu surse de electroni
(tunuri electronice), surse de radiaii sau chiar de radiaii . Toate au un principiu similar.
182
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
straturile inferioare, mai sraci n energie, acetia sunt expulzai. Locurile vacante rmase
dup plecarea electronilor (redate cu alb pe fig. 4), sunt ocupate de electroni aflai pe straturile
superioare - mai bogai n energie. Diferena de energie este emis sub forma unei cuante care,
pentru majoritatea atomilor din sistemul periodic, se gsete n domeniul razelor X. Doar
elementele uoare Z = 1..5 nu au aceste tranziii n domeniul razelor X. n plus, spectrul de
fluorescen X, cum se mai numete ansamblul liniilor produse n maniera amintit, nu
depinde dect n foarte mic msur de natura combinaiei chimice n care se gsete atomul
n proba de analizat.
Fig. 4. Tranziiile care provoac principalele linii utilizate n analiza prin FRX
Razele X primare care prsesc tubul de raze X, sunt dirijate apoi asupra probei de
analizat. Aceasta, va emite aa-numita radiaie de fluorescen - caracteristic elementelor
probei, fiind nsoit i de o radiaie continu care are un spectru larg datorit interaciunii
electronilor cu cmpul electric al nucleului.
Dac din punct de vedere calitativ, spectrul de raze X al probei este simplu (are 2 sau
3 linii principale) i n acesta foarte rar se suprapun dou linii de la doi atomi diferii, analiza
cantitativ, care utilizeaz valoarea intensitii radiaiilor X caracteristice, ntmpin cteva
dificulti majore. n primul rnd, excitarea atomilor din prob are loc doar ntr-un strat
subire de la suprafaa probei, a crui grosime depinde de energia sursei (variind ntre cteva
sute de microni la 1cm). De aceea orice neuniformiti ale suprafeei pot influena rezultatul.
Apoi, unii atomi absorb doar anumite radiaii i acest lucru determin o influen a
compoziiei chimice a probei asupra rezultatelor valorii intensitii msurate. Efectele de
matrice - denumire dat totalitii efectelor provocate de ctre elementele nsoitoare asupra
rezultatului analitic, pentru un element dat - fac necesare, n cazul analizelor cantitative,
Chimie Analitic i Instrumental
183
14
184
Principiul acestei variante tehnice este ilustrat n fig. 5. Se observ prile principale
ale instrumentaiei: sursa de excitare (1) - de fapt tubul de raze X primare - proba (2),
pregtit cu o suprafa plana i de compoziie ct mai uniform, sistemul de analiz a
lungimii de und i a intensitaii acesteia (3) care include i detectorul (4).
Gaz P-90
Anod
Izolator Fereastr Catod
Fig. 6 Schia de principiu a contorului
proporional
Sistemul de analiz a lungimii de und se compune din cristalul analizor (3) care se
deplaseaz sincron cu detectorul (4), mpreun cu colimatoarele i fanta, situat mpreun cu
cristalul (mai recent curbat - seciunea sa fcnd parte dintr-un cerc Rowland). Acest
ansamblu are rolul de a separa linia analitic - caracteristic elementului de analizat.
Dispozitivul poart denumirea de goniometru.
Detectorul msoar fotonii X plecai din prob n urma tranziiilor amintite i care
sunt numrai de un numrtor de impulsuri, iar acest numr este afiat digital sau introdus
ntr-un sistem de procesare a datelor sub denumirea de intensitate, I. Fotonii razelor X
(precum i ai altor particule radiante bogate n energie) pot fi numrai folosind urmtoarele
tipuri de detectori:
Detectori cu gaze sau contoarele proporionale care nregistreaz un puls de curent rezultat
avnd doi electrozi-conductori: un fir central i un tub din tabl, metalic. Fotonul X provoac
ionizarea gazului iar electronul este accelerat de cmpul intens (500-700V) ce exist ntre
anod (+) i catod (-). n deplasarea sa ctre polul opus, primul electron format provoac
Chimie Analitic i Instrumental
185
14
ionizarea altor particule gazoase rezultnd electroni secundari i ioni. Acest fenomen, numit
descrcare n avalan mrete mult semnalul electric al pulsului de curent, care este
(1)
unde n este un numr ntreg din domeniu 1..n, - lungimea de und a radiaiei X incidente, d constanta reelei (fig. 7) iar unghiul de inciden al radiaiei X care vine de la prob (pe fig.
7, = 1 = 2). Prin modificarea orientrii cristalului, al crui unghi se cunoate cu ajutorul
goniometrului (v. tabelul 1) se poate sesiza prezena unui anumit element deoarece la anumite
unghiuri (fixe) caracteristice doar pentru un anumit element, intensitatea radiaiei X, notat
I, msurat de ctre detector, va prezenta picuri accentuate (vezi anexa 1).
parcurgnd mpreun toate unghiurile posibile. Astfel, semnalul va fi o curb cu mai multe
picuri n coordonate: 2 - I. Aceste analizoare sunt preferate n cercetare pentru c pot
analiza numeroase elemente. Prezint uneori dezavantajul c durata analizelor de acest fel
este uneori prea mare.
Analizoarele multicanal sunt prevzute prin construcie cu mai muli detectori i msoar
[100] Este vorba de o difracie, n toate direciile i o interferen care poate fi constructiv, la unghiul care
respect ecuaia lui Bragg, sau distructiv la celelalte
186
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
simultan radiaia de fluorescen a probei, fiecare dintre perechile cristal analizor - detector
fiind situate la un anumit unghi, , dinainte reglat, caracteristic doar pentru un anumit
element. Ultima variant este preferat n analizoarele industriale unde probele au
compoziii apropiate, iar analizele trebuie s fie rapide. Dezavantajul const n faptul c n
cazul unor probe cu compoziie neateptat, mai ales dac conin alte elemente dect
probele curente, se obin rezultate complet eronate.
Tabelul 1. Cteva cristale analizoare utilizate curent n XRF. Cu ct lungimea de und a
elementului de analizat este mai mare cu att cristalul ales trebuie s aib o distan
reticular mai mare
Cristal
Planul expus razelor Domeniu de
d
X (indicii Miller*) utilizare (nm) (nm)
Topaz
303
0.015 - 0.15 0.1356
Fluorur de litiu 200
0.025 - 0.272 0.201
Siliciu
111
0.055 - 0.598 0.314
Acid oxalic
001
0.05 - 0.75 0.589
Mic
002
N/A
0.996
Sterat de plumb 001
6 -15
0.996
* Indicii Miller constituie cifre care definesc orientarea diferitelor fee plane ale unui cristal,
n spaiu ( http://geology.csupomona.edu/drjessey/class/gsc215/minnotes5.htm
sau http://www.gly.uga.edu/schroeder/geol6550/millerindices.html).
187
14
Detectorii folosii cel mai frecvent sunt detectorii pe baz de semiconductori Si(Li
adic formai din siliciu dopat cu litiu. Acetia nregistreaz un semnal avnd nlimea
proporional cu energia fotonului incident, n urma unei descrcri n avalan la care
Fig. 10. Spectrul de fluorescen X a unei probe etalon (NBS nr. 1571) folosind un analizor
cu geometria din fig. 7 i int secundar de Mo
Pentru scopuri speciale se mai utilizeaz i ali detectori cum ar fi cei pe baz de
semiconductori cu Ge(Li), CdZnTe sau HgI2. Dac pentru analizele cantitative se pot utiliza
probele, practic fr nici o prelucrare, n cazul analizelor cantitative problemele sunt aceleai
ca la metoda dispersiei dup lungimea de und, fiind necesare probe perfect plane, omogene
i etaloane din aceleai materiale ca i cele supuse analizei.
Avantajele metodei sunt: simplitatea instrumentaiei (de exemplu nu exist pri n
micare), iar analiza cantitativ dureaz circa 30 secunde. n locul tubului de raze X de
energie nalt, de dimensiuni mari, scump i mare consumator de energie se folosesc tuburi de
raze X de putere mic, radioizotopi sau raze ionice. Analiza calitativ este foarte sensibil
putnd merge, att pentru lichide ct i pentru solide, pn la ppm pentru toate elementele de
la B la Al.
XRF cu reflexie total are la baz exact acelai principiu ca i analiza XRF cu
dispersie dup energie convenional, dar utilizeaz un aranjament geometric specific pentru a
maximiza raportul semnal/zgomot. Astfel, cnd radiaia trece dintr-un mediu cu o densitate
mai mic ntr-unul cu densitate mai ridicat, radiaia sufer o reflexie total dac unghiul de
inciden este situat sub un anumit unghi critic (civa miliradiani n cazul razelor X). Razele
Chimie Analitic i Instrumental
189
14
incidente, ptrund n suprafaa reflectant extrem de puin. Iluminnd proba cu o raz care
este reflectat total, absorbia acesteia de ctre suport este mult redus. Acest lucru reduce
zgomotul de fond. De asemenea, realiznd stratul de prob foarte subire se reduce i mai mult
zgomotul de fond. Astfel, o prob format dintr-o micro-pictur de soluie (ntre 10 i 100l)
este plasat pe un suport din silicagel. Prin evaporarea solventului, rezult un strat extrem de
subire de substan - de civa nanometri. Apoi se face msurtoarea n maniera obinuit a
dispersiei dup energie.
Avantajele sunt urmtoarele: nu exist practic efect de matrice, limita de detecie
coboar foarte mult pentru elemente cu numr de ordine, Z, mai mare de 13 (Al), se pot
analiza simultan mai multe elemente, se obine un raport semnal/zgomot bun, analizele
cantitative se pot realiza cu un singur standard intern, domeniul dinamic liniar este excelent,
iar coninutul minim detectabil atinge ordinul ppb [101].
Microsonda cu raze X, denumit prescurtat i -XRF, este echivalentul microscopic al
radiaii - cele electronice sau ionice - dnd informaii pertinente privind compoziia probei;
Imaginile se pot obine lucrnd n aer, cu o preparare minim a probei;
Se pot analiza probe care nu sunt conductori;
Construcia aparaturii este mult mai simpl dect n cazul microsondei electronice (unde
[101] 1 ppb = o parte per miliard (109 pri). Din l. engl. part per billion.
190
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
191
14
(2)
unde: Ci este concentraia elementului i cunoscut n procente, Ii - intensitatea msurat, bi fondul spectral, mi - coeficient al termenului liniar, mii - coeficientul termenului ptratic care
este egal cu zero n aproximaia liniar.
Odat stabilite valorile lui bi, mi i mii ale curbei optime, pe baza etaloanelor, acestea
se stocheaz n memoria calculatorului. Apoi, calculatorul poate fi comandat s determine
concentraia elementului x din proba necunoscut pe baza valorii Ix - msurate dup
introducerea eantionului n analizor. Dac n probele supuse analizelor exist fluctuaii mari
ale concentraiilor elementelor nsoitoare, trebuie s se in cont de efectul de matrice. Acesta
nseamn s se ia n considerare efectul tuturor elementelor j (diferite de elementul i) care
trebuie i ele analizate. Efectul de matrice const n :
absorbia radiaiei caracteristice a elementului i de ctre elementul j;
excitaia secundar a radiaiei caracteristice a elementului i de ctre radiaiile caracteristice
ale elementului j;
creterea fondului radiaiei caracteristice, pentru un element i, datorit prezenei radiaiilor
altor elemente j, care sunt reflectate aproximativ sub acelai unghi. Primele dou efecte 192
numite uzual, interaciuni - sunt luate n considerare prin valoarea coeficientului mi. Cel de
al treilea efect, numit efect de suprapunere, este luat n considerare prin valoarea
coeficientul de suprapunere, bij.
Efectul de matrice poate fi modelat matematic cu ajutorul ecuaiei lui Lucas-Tooth i
Paine (preferat pn la apariia calculatoarelor moderne):
Ci = a i + bi Ii 1 + k ijI j
j
(3)
unde: Ci este concentraia cunoscut a elementului; i, bij sunt coeficieni explicai mai sus; iar
Ii i Ij sunt intensitile msurate pentru elementele i, respectiv j. n situaia n care coeficienii
sunt stabilii pe baza unor msurtori efectuate pe un numr de probe standard, cunoscute
precis prin analize chimice clasice sau prin cntrire, concentraiile Ci pot fi calculate, ntr-o a
doua etap, cu ajutorul intensitilor brute, Ii, respectiv Ij, determinate pe probele necunoscute.
n ultimul timp prin ptrunderea calculatoarelor pe scar larg, ecuaia preferat n
analizoarele moderne a devenit ecuaia lui Sherman (vezi anexa 2) care ia n considerare att
absorbia ct si intensificarea fluorescenei. O form simplificat a ecuaiei lui Sherman este
cea a lui LaChance i Trail care folosete coeficienii alfa determinai experimental cu ajutorul
unui set de probe etalon cunoscute:
Ci = R i 1 + ijC j
i j
(4)
unde Ri este intensitatea relativ (adic Ri=Ii/I0 cu Ii valoarea msurat pentru elementul i pe o
prob i I0 valoarea msurat pentru acelai element i, pur, Ci - concentraia elementului
pentru care se face etalonarea iar Cj - concentraia tuturor elementelor, astfel nct:
=1
(5)
Prezenta metod de analiz chimic este una din cele mai evoluate tehnici, folosit
astzi pe scar larg n industria metalurgic, industria cimentului, a silicailor, refractarelor
sau n cea minier (metalifer i nemetalifer). n cazul elementelor carbon i sulf se prefer
totui o analiz separat din cauza erorilor ce pot aprea cu frecven mai mare la cele dou
elemente dar i a concentraiei mici n care se gsesc acestea n aliajele metalice. Metoda
preferat pentru ultimele este combustia n oxigen urmat de detecia prin spectrofotometrie
n IR (la lungimi de und diferite) sau absorbia consecutiv celor dou elemente n soluii
apoase urmat de determinarea celor dou elemente prin titrri cu indicare instrumental de
exemplu prin metode coulometrice.
193
14
Aplicaii
194
ntrebri de verificare
195
scurgndu-se continuu (deci cu vitez constant) prin interstiiile fazei staionare, adeseori
poroase, poate provoca migrarea, cu viteze diferite, a celor n componeni ai amestecului de
separat de-a lungul coloanei. Amestecul supus separrii se introduce sub form de soluie la
nceputul coloanei, folosindu-se un dispozitiv de introducere a probei (de exemplu o microsering), i se afl iniial fixat ntr-o zon ngust de la nceputul coloanei. Splai de eluent, o
parte din componenii probei migreaz apoi prin coloan cu viteze diferite. Acest lucru se
datoreaz interaciunilor fizice specifice, dintre moleculele probei i faza staionar (desigur,
nu orice molecul poate migra pe orice faz staionar). Efectul, este numit retenie i aceasta
provoac o aa-numit migrare difereniat. Adic moleculele migreaz n grupuri, n fiecare
grup existnd doar molecule de acelai fel. Aceasta face posibil sesizarea componenilor, pe
rnd, la prsirea coloanei, de ctre un instrument, n grupurile respective - denumite uneori
zone. Instrumentul amintit este un analizor fizico-chimic, sensibil la mai muli (n mod ideal
la oricare) dintre componeni ce ies din coloan i care este plasat n eluent, imediat dup
ieirea din coloan. Acest analizor, denumit detector este capabil s dea un semnal
proporional cu masa sau cu concentraia soluiei de component n faza mobil. n consecin,
dispozitivul, "marcheaz" trecerea fiecreia din substanele ce formeaz iniial proba, similar
cu o fotocelul care nregistreaz trecerea concurenilor la sosire n atletism. Reprezentarea
grafic a semnalului detectorului n funcie de timp poart numele de cromatogram.
197
15
este un lichid aflat peste temperatura critic. n cadrul cromatografiei de lichide se mai face
distincie ntre cromatografia pe coloan deschis i cea pe coloan nchis Pe de alt parte,
n cadrul fiecreia dintre acestea, distingem mai multe variante.
n cadrul LC se disting, n funcie de mecanismele de separare:
Cromatografia de adsorbie, una dintre primele tehnici utilizate, veche de mai bine un
secol (vet, 1903), utilizat pentru separarea substanelor organice cu molecule de
dimensiuni mici i medii pe adsorbeni, ca silicagel i alumin, folosindu-se, ca faze
mobile, diferite amestecuri de solveni organici.
Cromatografia ionic (de schimb ionic), care se petrece pe o faz staionar solid,
poroas, format din materiale specifice - schimbtorii de ioni - substane cu o reea solid
afnat, de natur organic sau anorganic, pe care se gsesc grefate, prin procesul de
obinere, nite centre de schimb ionic. Cele mai rspndite sunt rinile schimbtoare de
ioni - organice - la care scheletul-suport este unul organic - un polimer poros. Pe aceste
centre are loc o reacie ionic sau o interaciune ntre substana din soluie (electrolit sau
neelectrolit) i funciunea legat chimic de suportul solid, numit reacie de schimb ionic.
Cromatografia de excluziune steric se desfoar pe faze staionare poroase dar cu
porozitatea selecionat astfel nct s corespund dimensiunilor moleculelor supuse
separrii. O parte dintre molecule intr prin pori, reuind s interacioneze cu suportul
solid, prin fore de adsorbie foarte slabe, iar altele sunt excluse deplasndu-se practic
nereinute odat cu faza mobil. Se obine astfel un soi de sit la scar molecular
separarea moleculelor fcndu-se n funcie de dimensiune. Tehnica se mai ntlnete i
sub denumirea de filtrare prin geluri sau permeaie prin geluri n funcie de natura apoas
sau organic a fazei mobile.
Cromatografia lichid-lichid (LLC), n care faza staionar este o faz lichid, nemiscibil
cu cea mobil i imobilizat pe un suport solid, ntr-o coloan. Aici suportul solid este, cel
puin principial, inert fa de componentele din prob. ntruct simpla impregnare a unui
suport poros cu un lichid permitea splarea acestuia n timp, s-a recurs la legarea pe cale
chimic a acestora de suport, obinndu-se nite faze cu totul specifice - faze staionare
legate chimic. Molecule organice de dimensiuni mici sunt, prin sintez, legate de suportul
poros, fenomenul de pierdere prin splare de ctre faza mobil, fiind practic anulat. Acest
198
tehnic este cea mai rspndit devenind aproape sinonim cu cromatografia de lichide.
Cromatografia pe coloan deschis sau cromatografia planar (PC), se refer la un grup
de tehnici nrudite cu cele din LC, care au toate n comun faptul c faza mobil circul
printr-un material poros dispus ntr-un plan i formnd un strat relativ subire, dar de
compoziie asemntoare cu cele menionate la cromatografia pe coloan. Se disting:
Cromatogafia pe hrtie, tehnic n care faza staionar este o hrtie poroas din celuloz
(iniial o hrtie de filtru) care este irigat de solvent prin fore capilare - o tehnic, azi, de
importn istoric.
Cromatografia pe strat subire (TLC), n care faza staionar pulverulent este fixat de
suportul plan (sticl, aluminiu, material plastic) cu un liant, formnd un strat subire (0.10.5mm) de asemenea irigat prin capilaritate.
Cromatografia pe strat subire de nalt performan (HPTLC), n care faza staionar are
granulaie extrem de fin ridicndu-se astfel eficiena separrilor dar i viteza acestora.
Toate acestea se caracterizeaz prin simplitate, accesibilitate i pre de cost cobort,
dar totodat prin performane ceva mai slabe dect cromatografia de lichide pe coloan sub
presiune ridicat (HPLC) varianta modern a LC.
n mod analog, n cazul cromatografiei de gaze (sau mai pretenios cromatografiei n
faz gazoas), denumit prescurtat GC se disting urmtoarele tehnici:
Cromatografia gaz-lichid n care faza staionar este un lichid nevolatil imobilizat pe un
suport solid. Aici suportul poate fi unul granular, poros, situat ntr-o coloan n aa-numita
cromatografie de gaze convenional sau chiar pe pereii coloanei, confecionat de
dimensiuni capilare, n cromatografia pe coloan capilar.
Cromatografia gaz-solid este analog cu cele discutate la cromatografia de adsorbie i la
cea de excluziune steric cu deosebirea c schimbarea gazului nu modific selectivitatea.
Faza staionar o constituie tot silicagelul sau alumina, respectiv sitele moleculare (nite
silicai naturali sau sintetici) respectiv granulele de carbon poros. Metoda este extrem de
important pentru separarea gazelor permanente (CO, CO2, O2, N2, gaze nobile etc.)
Din punct de vedere istoric, evoluia cromatografiei a cunoscut o suit de progrese,
care au adus-o din situaia iniial de metod de separare i purificare de laborator la o tehnic
de separare i analiz chimic cu o arie de aplicare aproape universal. Iniial rusul vet, a
introdus n 1903 cromatografia de lichide pe coloan (LC). Aceast metod a fost uitat mult
vreme i abia dup 1930, anul descoperirii cromatografiei n strat subire pe alumin, s-a
perfecionat metoda utiliznd coloana, o dat cu nevoile de separare i purificare a compuilor
organici naturali sau sintetici implicai n biochimie. n 1941 enlezii Martin i Synge
descoper cromatografia de repartiie pe hrtie, reuind s separe cu ajutorul unui amestec de
Chimie Analitic i Instrumental
199
15
solveni care irig o band de hrtie de filtru (coninnd o pictur de prob) aproape toi
aminoacizii, descoperire extrem de important pentru dezvoltarea ulterior a biochimiei. Doar
n 1952 aceiai A. J. P. Martin and R. L. M. Synge [102] au nlocuit faza mobil lichid cu un
gaz, realiznd pentru prima oar cromatografia de repartiie gaz-lichid. n aceast variant,
detecia a fost realizat fizico-chimic, n efluentul gazos, dup ieirea din coloan, reuind
astfel s mbunteasc marcant separrile. Din acest moment asistm la demarajul
extraordinar al acestor tehnici, devenite azi cteva din principalele mijloace de analiz n
chimia organic i biochimie, dar i n criminalistic, igien, controlul alimentelor, industria
metalurgic etc. Din 1968 Halazs, (profesor la Franckfurt/Main), a pus la punct LC folosind
un solvent sub presiune n calitate de faz mobil i detecie fizico-chimic n efluentul lichid,
acesta fiind nceputul dezvoltrii cromatografiei de lichide sub presiune nalt (200 atm). Din
1980 s-a reuit i obinerea unor separri analitice performante bazate pe schimb ionic - prin
introducerea eluenilor diluai i a supresorului ionic - datorate americanilor Hamisch i
Schmall, tehnic care de atunci a primit denumirea de cromatografie ionic (IC). Azi se
lucreaz nu numai cu cromatografe de laborator, analitice, ci i cromatografe de proces,
dedicate analizelor automate ale proceselor industriale sau cromatografe preparative, destinate
obinerii de substane pure n industria farmaceutic sau n biotehnologii.
[102] Cei doi au preimit premiul Nobel pentu chimie, vezi http://www.nobel.se/chemistry/laureates/1952/
200
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Oricare pic are, n cazul ideal, forma distribuiei normale Gauss. S considerm cea
mai simpl cromatogram posibil: cazul introducerii unui singur component, ntr-un gaz, C,
care conine urme de aer - aerul fiind un component inert. Aspectul acestei cromatograme este
cel prezentat n fig. 1. Pe axa absciselor s-a considerat timpul (sau volumul) de eluent scurs,
cu debit cunoscut, de la introducerea (injectarea) probei, iar pe cea a ordonatelor, semnalul
detectorului - n uniti arbitrare. Distingem urmtoarele elemente de baz:
Picurile cromatografice. n cazul prezentat n fig. 1, cele dou semnale sau vrfuri sunt
denumite picuri. Acestea sunt semnalele valorificabile n analiza calitativ i cantitativ n
toate metodele cromatografice. Primul pic, mai mic, corespunde unui component inert
(aerul de exemplu n CG) - care nu este reinut de loc - iar cel de-al doilea, notat cu C,
corespunde componentului (unic n cazul de fa) al probei considerate i este datorat
moleculelor care se distribuie pe parcursul migrrii prin coloan ntre faza mobil i cea
staionar i care, n consecin, ies mai trziu din coloan.
Timpul mort, tM - este timpul n care un component, complet nereinut de ctre faza
staionar, parcurge coloana i tuburile de legtur pn la detector. Acesta nu poate fi
zero. n cazul CG timpul mort, de exmplu, este egal cu timpul de retenie al aerului: tM = tR
(R = Retenie). Deci, cu alte cuvinte, reprezint timpul scurs de la injectarea (introducerea)
201
15
(1)
Timpul de retenie ajustat, tR'- introdus n cromatografie pentru a se putea compara timpii
msurai pe coloane diferite, n cazul aceluiai component - este dat de diferena:
tR' = tR - tM
(2)
tMFe, i reprezint volumul golurilor din coloan plus volumul tuburilor de legtur de la
coloan la detector.
[103] Simbolurile utilizate n continuare sunt cele recomandate de IUPAC - publicate n Pure&Appl. Chem.
65(4), 819, (1993)
202
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Aspectul unui pic dintr-o cromatogram ideal este acelai cu curba obinut prin
reprezentarea grafic a funciei de distribuie a erorilor (Gauss), a crei expresie, scris n
coordonate carteziene x,y este:
1
(x ) 2
1
x2
y(x, , ) =
exp(
) ; y(x, 0,1) =
exp( )
2 2
2
2
2
(3)
parte, coeficientul de distribuie K nu este constant la orice concentraie iar pe alt parte, mai
exist i diferene ntre viteza eluentului transversal prin coloan i anume n vecintatea
pereilor aceasta este practic zero pe cnd la mijloc este maxim.
203
15
Formele posibile pentru picuri depind de forma funciei CS = f(CM) adic de izoterma
de adsorbie (desigur mecanismul nu este ntotdeauna acesta). Cnd izoterma este liniar (I)
avem picuri simetrice. Cnd aceasta este convex (II) sau concav (III) avem picuri asimetrice
(fig. 2). Acest asimetrie, ntlnit relativ frecvent, se evalueaz cu un factor de asimetrie (sau
de trenaj), Ft. Acest factor se calculeaz prin raportul distanelor, de la dreapta y = xmax la cele
dou ramuri, msurat la 10% din nlime, adic:
Ft = b/a
n cazul izotermelor convexe Ft > 1 iar n cazul celor concave (III pe fig. 2) Ft < 1,
ultimele fiind extrem de rare.
204
coloan ale unui component i ale eluentului. Cum vitezele amintite se pot calcula din
raportul spaiului parcurs n unitatea de timp, lungimea coloanei fiind notat LCOL, avem
conform definiiei:
L col
o
t R = t M = Vn
=
Rf
L col t R V oR
tM
(4)
Coeficientul de distribuie, K (sau KD) este o mrime identic celei din extracie
(repartiia ntre faze) definit ntotdeauna prin raportul dintre concentraiile componentului n
chestiune din fazele staionar, CS, respectiv mobil, CM. Conform definiiei (dup Nernst):
K=
CS
CM
(5)
numrul de moli distribuii ntre fazele: staionar, , respectiv mobil. Numrul de moli din
faza staionar pot fi exprimai prin produsul CSVS iar din cea mobil CMVM unde C sau
notat concentraiile molare i cu VS respectiv VM s-au notat volumele fazelor - staionar
respectiv mobil - din coloan, volumul ultimei fiind egal numeric cu volumul mort al
coloanei. Ecuaia de definiie pentru k este aadar:
k=
CS.V S
C M.V M
(6)
n ultimul timp a primit i denumirea de factor de separare. Acest factor este legat de
timpul de retenie, respectiv de cel mort, printr-o ecuaie simpl:
tR = tM(1+k)
(7)
Deci, cu ct factorul de capacitate este mai mare coloana reine mai puternic un
component iar timpul de retenie crete. Pe de alt parte din ecuaia anterioar se poate vedea
(8)
ct valoarea acestuia este mai mare cu att poziia picurilor pe aceiai cromatogram este mai
Chimie Analitic i Instrumental
205
15
distanat - deci separarea pe coloana respectiv este mai net. S-a constatat c influena
variabilelor experimentale este cu mult mai redus dac se utilizeaz pentru exprimarea
reteniei aceast retenie relativ. Pentru calculul acesteia trebuie efectuat msurarea, att
pentru componentele probei ct i pentru o substan considerat etalon (sau standard) a
timpului (sau volumului) de retenie, n condiii absolut identice. De multe ori substana
etalon este parte a probei i nu este adugat intenionat. Retenia relativ se poate exprima
astfel:
2/1 = tR'/(tR')std = K2/K1
(9)
substane separate prin coloan se poate descompune teoretic ntr-o succesiune de deplasri
prin dreptul a n mici incinte din interiorul coloanei n care au loc echilibre perfecte ntre
fazele staionar, din incinte, i cea mobil. Similar cu distilarea pe coloane prevzute cu
talere, aceste mici incinte ideale au fost denumite talere teoretice. Lungimea poriunii dintr-o
coloan, ce corespunde unei asemenea incinte, pe parcursul creia se realizeaz un echilibru
termodinamic, se noteaz cu H i poart numele de nlime echivalent a unui taler teoretic.
Aceasta caracterizeaz performana coloanei i se poate calcula din raportul:
H = Lcol/N
(10)
unde cu LCOL s-a notat lungimea coloanei iar cu N numrul de talere teoretice. Cu ct valoarea
H este mai mare separarea este mai bun. Numrul n se poate calcula pe baza cromatogramei
obinute experimental din limea picului la baz, wb, care dup cum se vede din fig. 1, este
de 4 ori valoarea dispersiei curbei gaussiene care modeleaz matematic picul, ceea ce permite
scrierea ecuaiei:
wb = 4
(11)
(12)
N = 16tR2/wb
(13)
(14)
Se mai poate observa i c, cu ct valoarea n este mai mare, picurile sunt mai nguste
(w1/2 scade). Deci, cu ct numrul de talere este mai mare cu att vor "ncpea" mai multe
picuri pe aceeai cromatogram. ntruct se pot separa mai multe componente i separarea
picurilor, dou cte dou, va fi mai net se consider coloana mai eficient.
Observaie: mrimile tR i wb (respectiv w1/2) se vor exprima ntotdeauna n aceleai
uniti - deci numrul de telere teoretice, N, este adimensional; de regul ambele mrimi (tR i
wb) se exprim n mm, msurai direct de pe hrtia nregistratorului.
Cum n timpul mort, tM nu poate iei din coloan nici un component al amestecului
injectat, n cromatografie se mai utilizeaz o mrime: numrul efectiv de talere teoretice, Nef,
considerat un numr mai apropiat de realitate dect cellalt (N) tocmai pentru c nu se mai ia
n calcul timpul mort - practic timpul n care componentul nu se afl nc n coloan:
Nef = tR'2/2 = 16(tR-tM)2/wb = 5.54(tR-tM)2/w1/22
(15)
Din ecuaia (13) se poate scoate wb i prin nlocuire n (15) se poate apoi exprima Nef
funcie de numrul de talere teoretice, N:
Nef/N = (tR-tM)2/tR2
(16)
unde, nlocuind tR din (7) i exprimnd apoi Nef din (16), avem:
Nef = Nk2/(1+k)2
(17)
t R
t
= R
2( A + B) w b
(18)
unde tR este diferena dintre timpii de retenie ai componentelor B i A adic tR = tR,B - tR,A,
iar w1/2 reprezint limea medie a picurilor la baz, w1/2= (wA + wB)/2. Rezoluia mai poate
fi exprimat datorit nevoilor practice i n variantele:
RS =
t R,B - t R,A
0.5 ( w B + w A )
(19)
Pentru dou picuri alturate RS = 1 iar pentru dou picuri complet separate RS = 1.5
(fig. 3). Rezoluia egal cu unitatea reprezint o separare de 98% ntre cele dou picuri.
O alt expresie a rezoluiei se poate obine pe baza notaiilor:
tR = tM(kB - kA); = B = tR,B/(N)1/2 = tM(1+kB)/(N)1/2; kB/kA =
care nlocuite n expresia (19) duc (vezi anexa) la ecuaia:
Chimie Analitic i Instrumental
207
15
N -1 k B
R S =
4 1+ k B
(20)
Aceast exprimare este important pentru c reflect cei trei factori de care depinde
rezoluia prin cele trei paranteze (fig. 4), n ordine: prima - eficiena, a doua - selectivitatea, i
Fig. 4. Compromisul
realizat n orice separare
cromatografic ntre:
eficien - 1
vitez - 2
volumul probei - 3
Aceast ecuaie exprim contribuia diverilor factori la lrgirea zonei unui anumit
component, n timp ce acesta migreaz prin coloan cu o vitez medie v. Iniial creat ca
model matematic pentru GC, ecuaia poate fi generalizat pentru oricare tip de cromatografie,
dup cum s-a constatat ulterior. Aceasta conine expresia analitic a valorii nlimii
echivalente a talerului teoretic - H - n funcie de viteza liniar medie, v, a eluentului de-a
lungul coloanei. Cea mai simpl i totodat mai cunoscut expresie este cea descoperit iniial
de Van Deemter pentru cromatografia de gaze:
H = A + Bv + C/v
(21)
unde A, B i C sunt, pentru o coloan dat, nite constante. Dar aceste constante au n realitate
fiecare nite dependene funcionale ce in de natura fizic a fazelor staionar i mobil, de
diametrul i de natura umpluturii, dar i de condiiile de operare: temperatur, presiuni etc.
Graficul acestei ecuaii este o curb cu un minim (vezi fig. 5), adic o ramur a unei hiperbole
ce trece printr-un minim. Se observ c nlimea talerului, H, are un optim pentru o vitez
care se poate calcula. Anume, prin derivarea ecuaiei lui Van Deemter i egalarea cu zero a
rezultatului derivrii, se obine:
v opt =
C
B
(22)
Prin nlocuirea valorii v cu vopt n ecuaia iniial se obine optimul pentru H (adic
minimul):
H min = A + 2 BC
(23)
209
15
umpluturii, este practic constant ntr-o coloan. Termenul B este legat puternic de difuzia
longitudinal, deci mai ales de coeficientul de difuzie n gazul purttor - determinant, dar
constant ntr-un montaj instrumental dat - iar temenul C de transferul de mas, aadar de
cinetica procesului de fixare a componentului pe faza staionar, deci legat direct de natura
fazei staionare, respectiv de specia molecular care migreaz prin coloan.
Mrind viteza eluentului, n intenia de a grbi ieirea din coloan a componentului i
a scurta analiza, de cele mai multe ori stricm separarea n ansamblu prin lrgirea excesiv a
picurilor, deoarece echilibrul dintre CM i CS nu apuc s se realizeze, iar picul este splat de
eluent mai departe prin coloan. Din contr, micornd viteza prea mult, apare o lrgire
excesiv din cauza celor dou difuzii, mai ales a celei n faz gazoas, care de asemenea stric
separarea.
n cromatografia de lichide poriunile liniare cresctoare, de dup minim, au pantele
mai puin abrupte datorit difuziei n faz lichid cu mult mai lent n lichide dect n cazul
gazelor, de circa 1000 de ori. Astfel, contribuia primilor doi termeni din ecuaia lui Van
Deemter este mult diminuat i n general lrgirea zonei n LC are valori mai mici.
n cazul cromatografiei de gaze cu coloan capilar s-a demonstrat c eficiena
coloanei exprimat prin nlimea talerului, H, este influenat de factorul de capacitate (sau
de retenie) k precum i de raza coloanei capilare, r:
H min
1 + 6k + 11k 2
= r
3(1 + k) 2
(24)
210
ntrebri de verificare
211
Schia prezint concis doar componentele principale. Astfel gazul purttor (eluentul),
de exemplu hidrogenul sau heliul, prsete cilindrul sub presiune, 1, n care acesta se gsete
iniial i ptrunde n coloan, la o presiune de intrare, cu ceva peste cea atmosferic (1-3atm),
prin intermediul unui reductor 2. Apoi gazul se ramific (opional) prin dou conducte. O
parte intr n coloan, n mod continuu iar cealalt ramur, direct n detector. Coloana 4, se
Chimie Analitic i Instrumental
213
16
afl ntr-o etuv - termostat, 3, izolat termic i prevzut n exterior cu un dispozitiv pentru
introducerea probei (care de regul include i o microsering), notat S, etuv care mai este
Aceasta poate fi eliberat, prin intermediul unor ventile i regulatoare de presiune, din cilindri
de gaze presurizate, fie obinute din generatoare (cazul N2 sau H2) - direct n laborator. Gazul
nu trebuie s conin urme de ap, oxigen sau dioxid de carbon care pot prejudicia fazele
staionare. De aceea se mai intercaleaz filtre cu dublu rol: uscare, respectiv, reducerea
oxigenului, dispozitive situate imediat dup sursa de gaz. n cazuri excepionale se pot utiliza
i ali elueni cum ar fi CO2, Ne etc. Spre deosebire de cromatografia cu elueni lichizi, n GC
natura gazului are o importan minor asupra selectivitii separrii deoarece gazul,
cazul probelor care au volumele n domeniul 0.1-10l. Cu acestea, dup umplerea cu volumul
de prob necesar, apsnd pistonul, se injecteaz coninutul prin cauciucul siliconic sau
garnitura inelar a unui septum din dispozitivul de introducere a probei. Pentru gaze se
folosesc fie seringi ceva mai mari, de 0.5ml, fie nite dispozitive speciale numite ventile
pentru introducerea probei.
Pentru coloane capilare, care au debitele mult mai mici iar volumele introduse n
coloane deosebit de mici, introducerea cu o sering a probelor, direct, ar compromite coloana
definitiv. De aceea se folosesc nite dispozitive speciale cu ajutorul crora doar o mic
fraciune din prob, cunoscut, intr n coloan iar restul este evacuat n atmosfer.
Dispozitivele se numesc split/splitless iar fraciunea de prob introdus efectiv n coloan
reprezint 1/20 pn la 1/500 din volumul injectat cu seringa.
Incinta termostatat n care se afl coloana, numit etuv-termostat, are temperatura
reglabil ntr-un domeniu larg (40-450C) fiind foarte precis stabilizat (0.1C) i totodat
ventilat, pentru o egalizare rapid a temperaturii. La anumite cromatografe, se pot executa i
programe de temperatur, adic nclziri controlate ale coloanei, n timp, pe parcursul
efecturii analizei. Are loc n acest fel o volatilizare treptat a compuilor - la nceput ies cei
volatili care migreaz rapid i la urm, cei mai puin volatili care migreaz foarte lent mrind
mult durata analizei. Programele se stabilesc prin ncercri experimentale.
215
16
Detectorii sunt instrumentele analitice propriu zise din gaz cromatografe, avnd rolul
de a sesiza n mod continuu, rapid i cu o mare sensibilitate, componentele din proba supus
analizei. n corpul detectorului zonele cromatografice care ies separate din coloan, coninnd
de preferin moleculele unei singure substane, se transform n semnale electrice (picuri).
Pentru a se putea compara, ca performane, fiecare detector este caracterizat de nite mrimi
fizice: specificitate, sensibilitate, zgomot de fond, drift, limit de detecie, constant de timp,
reactivitate, efect asupra probei i altele, comune multor metode analitice. De asemenea, unii
detectori distrug proba iar alii o las nealterat, permind separarea fizic a acesteia. Despre
sensibilitate i limita de detecie am amintit n cursurile introductive cteva lucruri eseniale
valabile i aici. n orice gaz cromatograf trebuie s existe cel puin un detector universal care
s permit nregistrarea sigur a tuturor componenilor. n afar de acesta mai pot exista i ali
detectori specifici, care mresc sigurana analizei componenilor de interes practic, deoarece
sensibil, lucreaz la limita unde interfer zgomotul electronic cu cel dat de detector. Att
zgomotul de fond ct i driftul, de regul exprimat n variaia semnalului, timp de o or, sunt
prezentate schematic pe fig. 4. Se observ c zgomotul de fond const n perturbaii
minuscule ale liniei de baz avnd cauze multiple iar driftul este devierea liniei de baz ntrun timp dat (1 or) exprimat n unitile de msur uzuale ale semnalului nregistrat (mV, mA
etc).
liniar cu concentraia (sau alteori cu debitul masei de component) ce trece prin detector.
Acesta se msoar de la limita de detecie pn la nivelul superior de concentraie la care apar
abateri de la liniaritate de peste 5%. Domeniul dinamic liniar se stabilete experimental prin
216
din aceasta prin degradare, prin adsorbie sau prin reacii chimice.
Efectul aspra probei poate fi distructiv sau nedistructiv. n ultimul caz proba separat
poate fi izolat. De exemplu, FID este un detector distructiv pe cnd TCD este nedistructiv.
Detectorul bazat pe conductibilitate termic (catarometrul)
Principiul a fost cunoscut i utilizat pentru analizoare de gaze nc din secolul trecut
(XX). Catarometrul a rmas detectorul cel mai utilizat i n zilele noastre deoarece este
simplu, nedistructiv, universal, are stabilitate bun precum i un domeniu larg de liniaritate
(tabelul 1).
Funcionarea sa se bazeaz pe diferena dintre conductibilitatea termic dintre
component i eluentul gazos. Astfel fiecare gaz este caracterizat printr-o conductibilitate
termic constant i diferit, de la un gaz la altul. Pentru detecie se utilizeaz de regul un
montaj n punte Wheatstone. Curentul I, generat de sursa de tensiune Ui, se bifurc scurgndu[105] NPD reprezint prescurtarea (l.engl.) a denumirii: nitrogen and phosphorus detector deoarece acesta este
specific pentru aceste elementeleN i P. Se mai numete i detector cu ionizare termoalcalin.
[106] FPD = flame photometric detector (l. engl.)
Chimie Analitic i Instrumental
217
16
se prin cele dou brae ale punii. Tensiunea de ieire U0 depinde de diferena dintre R1 i R2.
Astfel se observ c dac R1 = R2 atunci U0 = 0. Rezistena este un filament metalic spiral
(asemntor cu cel din becurile electrice) izolat electric fa de incint, prin care circul gazul
purttor. Detectorul (fig. 5) are dou celule: una de msur, R1, creia i variaz rezistena n
funcie de componentul intrat i alta - numit celul de referin, R2, prin care trece doar
gazul purttor (a crei rezisten rmne constant). Volumul celulelor difer, fiind cuprins
ntre 2.5-100l. Cea mai ridicat conductivitate termic dintre toate gazele o au hidrogenul i
heliul. De aceea acest detector este preferat cnd gazul purttor este unul dintre acestea.
Catarometrul (TCD) este de altfel singurul detector capabil s analizeze gazele permanente:
N2, O2, CO, CO2, CH4 etc., motiv pentru care nu lipsete aproape din nici un gaz -
cromatograf.
Acesta este unul din cei mai folosii detectori, n special datorit sensibilitii sale
ridicate la compuii cu carbon, practic nelipsii din orice tip de gaz-cromatograf dedicat
analizei substanele organice. Dei distruge proba, a fost detectorul care a consacrat definitiv
cromatografia de gaze. Funcionarea sa are la baz modificarea conductibilitii electrice a
gazelor n prezena unor particule ncrcate (de regul molecule ionizate). Dac la presiunea i
temperatura ambiant un gaz aflat ntre doi conductori este un izolator foarte bun, n
momentul cnd ntre cei doi electrozi apar particule ncrcate electric, n urma deplasrii
acestora n cmpul electric creat, apare un curent electric. Ionizarea moleculelor probei este
intensificat de prezena unei flcri de hidrogen, care arde n aer ntr-o incint, flacr ce
atinge temperaturi ridicate (2000-2200C).
Cele mai slabe semnale, care nu pot servi unei analize chimice, le dau substanele
alctuite din moleculele covalente simple: N2, O2, CO, CO2, H2O, CS2, NH3, CCl4, SiCl4,
oxizi de azot, He i alte gaze rare. De aceea gazul purttor n cromatografia de gaze este N2,
He sau Ar, condiii n care detectorul d un semnal de baz minim, foarte stabil. Schia
corecie relativi, adic raportul dintre arie i unitatea de mas a unui compus de referin i
rspunsul, pentru unitatea de mas a speciei chimice analizate.
Detectorul cu captur de electroni
Gazul purttor este n acest caz azotul. La ptrunderea n detector, acesta este ionizat
de ctre o surs - radioactiv (sunt suficieni civa mCi furnizai de o surs coninnd 63Ni).
Gazul, trece apoi printre doi electrozi, ntre care se asigur o cdere de tensiune de o sut de
voli (fig. 7), de regul ntre un electrod central, pozitiv i corpul electrodului - negativ.
n lipsa oricrei molecule organice n gazul purttor, exist un curent de baz redus
datorat moleculelor de diazot (N2) - ionizate negativ. La apariia n detector a unei molecule
organice M, care conine elemente electronegative (ca Cl sau F) - cu mare afinitate pentru
Chimie Analitic i Instrumental
219
16
Ali detectori
Mai exist i ali detectori, de exemplu detectorul fotometric n IR (simplu sau bazat
pe transformata Fourier), detectorul cu flamfotometru destinat pentru detecia specific a
compuilor cu sulf i fosfor, detectorul bazat pe emisie atomic cu plasm cuplat inductiv
sau detectorul cu ionizare termoionic (termoalcalin) - NPD - bazat tot pe o flacr, dar la
care ntre flacr (cu hidrogen - aer) i arztor se introduce o pastil de sare alcalin, ceea ce
provoac o cretere a intensitii semnalului de 100 de ori. Ultimul este un detector specific
pentru azot i fosfor care este util, de exemplu, pentru analize de pesticide. Mai puin utilizai
sunt detectorii cu absorbie atomic sau cel cu chemiluminescen. Dar cea mai spectaculoas
intrare n domeniul detectorilor a realizat-o recent spectrograful de mas, care preia direct
efluentul coloanei i n urma unei ionizri, fragmentele intr n spectrograful de mas propriu
zis. Acest lucru a devenit posibil datorit calculatoarelor, care au permis prelucrarea
volumului uria de date care se obin pe aceast cale. Cuplajul denumit GC-MS este chiar mai
sensibil dect detectorul bazat pe fotoionizare n UV (vezi tabelul 1).
221
16
pstreaz geometria i tipurile de umplutur ale coloanelor capilare. Subiectul este deosebit de
vast i este tratat n cri de specialitate i chiar detaliat pe Internet la adresa:
http://gc.discussing.info/gs/e_columns/stationary_phase.html#GasSolid
Coloanele cu umplutur -primele coloane cunoscute n GC - sunt confecionate din
tuburi (oel, sticl sau alte materiale), avnd diametre cuprinse ntre 2-8 mm - cel mai frecvent
de 1/8 oli (3.18mm) sau oli (6.35mm) - i conin adsorbeni, site moleculare sau un suport
inert pe care se gsete depus sau legat chimic un film subire dintr-o faz staionar. Raportul
diametrelor coloanei i umpluturii trebuie s fie cuprins ntre 25 i 20. n ultimul timp au
aprut i coloane cu umplutur de 1/16 oli.
Umplutura coloanei const dintr-o anumit faz staionar - activ care se depune pe
granulele umpluturii inerte i poroase, n afara coloanei (dup dizolvarea acesteia ntr-un
solvent potrivit ales) prin amestecare urmnd apoi evaporarea solventului ntr-o etuv [108].
Doar apoi umplutura se introduce n coloan i coloana se monteaz n cromatograf, prin
intermediul unor racorduri filetate. Debitul gazului purttor la aceste coloane este cel mai
mare, fiind cuprins ntre 10 i 40mLmin-1. Astfel de coloane sunt din ce n ce mai puin
utilizate.
[108] n zilele noastre sunt disponibile comercial majoritatea coloanelor necesare n analizele de rutin.
222
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Suportul poros (i totodat inert) este format dintr-un material solid, elaborat
industrial, de form preferat sferic i cu o granulaie ct mai uniform (de exemplu 60-80
mesh sau 80-100 mesh [109]). n raport cu suportul poros, faza staionar constituie doar 325%. Cele mai rspndite sunt confecionate din pmnturi diatomitice (de ex. diversele tipuri
de Chromosorb) dar multe sunt fabricate din silice (de ex. Spherosil). Acestea se modific
chimic prin silanizare pentru a deveni inerte.
Coloanele capilare sunt, la rndul lor, de cel puin dou tipuri: cu faz staionar
depuse chiar pe peretele coloanei capilare (WCOT) sau cu faza staionar depus pe un
suport solid, poros, aderent, format n prealabil pe peretele acesteia (SCOT) [110]. Au
diametre 0.1-0.35mm i lungimi ntre 5-100m, separarea durnd ceva mai mult dect la cele
cu umplutur. Cu ct coloana este mai lung durata analizei crete. Coloanele capilare se
confecioneaz n ultimul timp mai ales din sticl de cuar. n exterior acestea sunt mbrcate
ntr-un polimer - poliamid - pentru a rezista mai bine la ocuri mecanice respectiv la
coroziune (n acelai scop se mai folosete aluminiul). Coloanele sunt bobinate pe suporturi
metalice avnd o form circular (fig. 10).
capilarei, grosimea acestuia variind ntre 0.05-5m. Faza staionar poate fi depus fizic sau
chiar legat chimic de grupele -OH ale silicei hidratate. Si aceste coloane sunt disponibile deja
comercial pentru majoritatea aplicaiilor curente. Eficacitatea unei astfel de coloane poate
atinge 150mii talere teoretice. nlimea echivalent a unui taler teoretic, H, n cazul acestor
tipuri de coloane, are o expresie deosebit de ecuaia lui Van Deemter i a fost descoperit de
Golay, anume:
H=
B
+ (CG + CL) v
v
(1)
[109] mesh - unitate anglosaxon de granulaie fiind numrul de ochiuri per inch ptrat.
[110] WCOT = wall coated open tubular (column) nseamn coloan deschis cu faza staionar depus pe
perete SCOT = support coated open tubular (column) nseamn coloan deschis acoperit cu suport(
prescurtri n l. engl.).
Chimie Analitic i Instrumental
223
16
unde termenul A lipsete iar CG este coeficientul de difuzie al speciei moleculare separate n
faza gazoas, CL, fiind acelai coeficient pentru faza lichid. n acest caz Hopt se calculeaz cu
ecuaia dat n seciunea Metode cromatografice - privire de ansamblu.
Coloanele 530m sau wide bore sunt confecionate tot din silice (SiO2) avnd lungimi
cuprinse ntre 5-50m. Le-am putea denumi coloane semicapilare deoarece pstreaz
caracteristicile coloanelor capilare dar dimensiunile nu mai sunt apropiate de dimensiunea
firelor de pr. Debitul prin aceste coloane atinge 15mLmin-1 (adic intr n domeniul celor cu
umplutur), dar au performane superioare acestora.
Fazele staionare sunt i ele de mai multe feluri: polare, de exemplu polietilenglicoli,
R: CH3 (metil)
(CH2)3CN (cianopropil)
O Si
(CH2)2CF3 (trifluoropropil)
R
HO CH2O H
n C6H5 (fenil)
n
Fig. 11. Cele dou tipuri principale de faze staionare lichide folosite pe scar larg n GC:
siliconice -stnga i polietilenglicolice - dreapta
Pentru separarea enantiomerilor (izomeri optici cu exact aceeai structur chimic) sau impus recent fazele staionare formate din ciclodextrine. Toate aceste faze au o
temperatur minim i una maxim de utilizare, deoarece n partea de jos a acestor limite,
echilibrele care au loc la retenie sunt deranjate, iar la partea superioar are loc un nceput de
degradare a fazei care deranjeaz detecia, respectiv uniformitatea separrii.
Fazele staionare solide sunt constituite din diferii adsorbeni: silicagel sau alumin
(dezactivate cu sruri minerale), sticle poroase, sau polimeri poroi iar n ultimul timp chiar
carbon poros. Acestea au diferite denumiri comerciale: Site moleculare, Porapak,
Carbopak, PoraPLOT etc i sunt folosite mai ales pentru separri de gaze permanente sau
compui foarte volatili H2O, hidrocarburi etc. Astfel de materiale se pot depune i pe pereii
interiori ai coloanelor capilare - coloane denumite n literatura internaional coloane PLOT
(adic coloane deschise cu suport poros = Porous Layer Open Tubular, l. engl.).
224
3 (p 2 -1)
j= . 3
2 (p -1)
(2)
n care cu p s-a simbolizat raportul presiunilor, iniial (pi) respectiv final (pf), adic p = pi/pf.
Cu ajutorul acestei mrimi semnale de retenie din diverse condiii experimentale se pot face
comparabile n analiza calitativ prin CG.
Volumul de retenie corectat, VR0 definit prin produsul:
VR0 = jVR
(3)
cderea de presiune:
VN = jVR'
(4)
Aceste volume sunt utilizate cu precdere n analiza calitativ fiind mai sigure dect
volumul de retenie simplu mai ales cnd nu se mai recurge la alte tehnici [111].
Volumul de retenie specific, Vg. Prin mrirea cantitii de faz lichid staionar, fie
prin utilizarea unei cantiti (grosimi) mai mari fie prin utilizarea unei coloane mai lungi,
crete volumul de retenie. Pentru a se lua n considerare i acest factor se definete volumul
de retenie specific (exprimat de regul n mL/g) cu ecuaia de definiie:
Vg = 273VN/(TcmL)
(5)
[111] Amintim c se practic, pentru o mai mare siguran, cuplajul GC cu spectrometria de mas.
Chimie Analitic i Instrumental
225
16
Dar pentru c toi aceti parametri depind, n mare msur, de o serie de condiii
experimentale ca temperatura, debitul gazului purttor, cantitatea de faz lichid etc, pentru
identificarea substanelor se recurge n ultimul timp la utilizarea indicilor de retenie Kovts.
Aceti indici, notai n continuare cu I, sunt practic independeni de factorii amintii. Astfel,
pentru orice substan de analizat calitativ se caut o pereche de n-alcani care dau picuri
situate ca timp de retenie unul nainte, altul dup substana amintit. Din cele trei valori tR'
msurate se calculeaz valorile I. Indicii de retenie Kovts exprim retenia relativ a unei
substane oarecare, fie cunoscut, fie necunoscut, raportat la cea a unor alcani normali,
luai drept substane de referin (sau etalon). Formula de calcul, propus de autorul metodei,
(6)
+ 100n
unde tR,X', tR,n' i tR,n+1' sunt timpii de retenie ajustai pentru substana necunoscut X
respectiv alcanii cu n respectiv n+1 atomi de carbon. Valoarea n se alege astfel ca tR,n' < tR,X' <
tR,n+1' adic, n aa fel ca timpul de retenie al substanei necunoscute s fie cuprins ntre timpii
de retenie ai celor doi alcani. De exemplu, benzenul are timpul de retenie cuprins ntre cel al
n-hexanului i al n-heptanului (ca i cum ar avea cam 6,5 atomi de carbon). Schimbnd
condiiile experimentale se schimb tR', respectiv VR', dar niciodat valoarea indicilor de
retenie I. Metoda se bazeaz pe faptul c practic nu exist substan chimic separat prin GC
creia s nu i se poat asocia o pereche de n-alcani care au timpul de retenie, unul mai mare
i altul mai mic dect substana respectiv. Pentru seria omoloag a alcanilor este respectat
ecuaia:
log(tR') = an + b
(7)
unde a i b sunt nite constante numerice gsite pe cale experimental, care sunt aceleai
pentru o coloan i condiii fizico-chimice date. Se observ c n formula valorii I, termenul b
se va reduce i factorul a se va simplific. Astfel, indicele Kovts, I, va depinde doar de
numrul aparent de atomi de carbon ai substanei respective - constant.
Experimental se procedeaz astfel: dup cteva ncercri preliminare se injecteaz
mpreun cei doi alcani, cu Cn respectiv Cn+1 mpreun cu substana de analizat, X iar dup
msurarea pe cromatogram a valorilor tR' pentru toate trei picurile componentelor
amestecului, prin nlocuirea acestora n formula precedent sau pe cale grafic, se obine
indicele Kovats, I (v. fig. 12).
226
unde K este o constant numeric. Aceast proprietate poate servi pentru construirea unei
curbe de etalonare fiind general valabil att n cazul GC ct i n celelalte tehnici
cromatografice. Se poate i aici aplica metoda adausului standard, mai ales la domenii liniare
largi. Pentru valori tR' mici, cnd picurile sunt i ascuite i nguste, se poate utiliza n locul
ariei nlimea sa - cu rezerva unei pierderi din precizia determinrii. Amintim n cele ce
urmeaz cteva practici de baz legate de analiza cantitativ folosind ariile picurilor.
Metoda factorului de rspuns
F=
C X/ CS
A X/ A S
(8)
227
16
pic oarecare i standardul intern este constant, indiferent de debitul gazului sau al altor
perturbaii uoare ale condiiilor experimentale, tocmai datorit asemnrii fizice dintre
substana etalon i prob. Analitic, concentraia necunoscut se calculeaz, n acest caz, n
funcie de standardul intern (pentru deducie vezi Anexa) i proba cunoscut:
C X,N =
A X,N A SI,S
C X,S
A X,S A SI,N
(9)
unde CX,N este concentraia substanei X n proba de analizat (necunoscut), CX,S concentraia substanei X, ce urmeaz a fi analizat, n proba etalon (cunoscut), AX,N - aria
picului substanei X n proba de analizat, ASI,N - aria picului corespunztoare standardului
intern din proba necunoscut, ASI,S - aria picului standardului intern n proba etalon.
Se observ c raportul ASI,N /ASI,S, apropiat de unu, corecteaz micile abateri care apar
la analiza probei necunoscute n timpul cromatografierii, n raport cu proba cunoscut, de
concentraie CX,S (denumit prob etalon i executat pe o alt cromatogram, separat). Ariile
ce intervin n raportul amintit se refer la aceeai cantitate din aceeai substan - standardul
intern - coninut att n proba necunoscut ct i n cea cunoscut.
Determinarea ariei picurilor
Determinarea ariei picurilor i.e. semnalul analitic al metodei - se poate realiza prin
mai multe procedee, multe dintre acestea mai mult de importan istoric:
1. Metoda triangulaiei bazat pe aproximarea picului cu un triunghi i calcularea ariei prin
nmulirea limii picului la jumtate din nlimea sa, w1/2, cu nlimea acestuia, h (picul
se consider gaussian).
2. Metoda planimetrrii, se bazeaz pe msurarea ariei propriu zise.
3. Metoda integratorului - utilizeaz un aparat, numit integrator, ce d un semnal
proporional cu aria de sub pic.
228
ntrebri de verificare
229
231
17
rezervoarele coninnd unul sau mai muli solveni pompa (sau pompele), alimenteaz
coloana cu eluent (de regul un amestec de doi sau mai muli solveni). n imediata vecintate
a coloanei se introduce proba, automat, prin intermediul unui ventil cu by pass [113]. n
coloana aflat ntr-o etuv termostat, are loc separarea propriu-zis. Efluentul coloanei intr
ntr-un detector de unde componentul, dac este separat complet, poate fi colectat i izolat, cu
ajutorul unui colector de fraciuni. Semnalul este nregistrat fie cu un nregistrator, fie direct
n memoria unui calculator. n esen, un cromatograf analitic HPLC are structura din fig. 2
unde nu s-a mai prezentat colectorul de fraciuni, interesant doar din punct de vedere
preparativ. Se poate observa asemnarea cu GC singura deosebire major constituind-o sursa
de eluent - pompa. n cele ce urmeaz se vor prezenta cele mai importante aspecte deoarece
volumul de informaii publicate este deosebit de amplu, un mare numr de date existnd chiar
pe reeaua Internet [114].
Solvent Pomp Injector Coloan Detector nregistrator
Fig. 2. Schema bloc a unui cromatograf HPLC
Pompa este considerat una dintre cele mai importante componente ale HPLC
deoarece permite realizarea unui debit constant al eluentului prin ntreg sistemul: injector,
coloan, detector mrind deosebit de mult viteza separrii. ntr-un cromatograf de lichide pot
exista una sau mai multe pompe, fiecare furniznd o presiune care poate atinge 20mii kPa
(cca. 200atm). Presiunea deosebit este necesar deoarece coloana are o umplutur de finee
mare i, n lipsa presiunii, debitul ar fi nepractic de mic.
Exist n uz dou tipuri principale de pompe, clasificate astfel n funcie de debit:
pompe cu presiune constant (i debit variabil) i pompe cu debit constant.
Pompele cu presiune constant sunt mai simple (a se citi ieftine) i nu prezint pulsaii
n funcionare (care nu ar permite obinerea unei linii de baz netede). Acestea, prezint
dezavantajul c debitul trebuie frecvent modificat pentru a se menine ct mai constant, ceea
ce la separri de durat pune probleme, deoarece prin obturarea coloanelor debitul se modific
continuu. Se nelege c orice modificare de debit (datorit viscozitii sau temperaturii
eluentului i a structurii umpluturii) afecteaz timpul de retenie i totodat semnalul
detectorilor, n majoritate sensibili la concentraie.
Pompele cu debit constant nu mai prezint dezavantajele de mai sus. De-a lungul
timpului s-au selecionat dou variante: pompele cu piston (alternative) i pompele de tip
sering (cu deplasare pozitiv). La primele, cele mai utilizate, micarea du-te-vino a
pistoanelor i a supapelor cu bil permit o funcionare indefinit dar presupun existena unor
atenuatoare de pulsaii - dispozitive care s elimine micile variaii de debit. Acestea constau
dintr-o alternan de mai multe rezistene, de exemplu tuburi subiri i capaciti - care pot fi
incinte cu perei elastici, fie chiar manometre.
Pompele cu presiune constant, asemntoare cu o sering dar avnd o capacitate mai
mare, pompeaz continuu pe toat durata separrii, pistonul deplasndu-se cu o vitez liniar
constant dar dup fiecare curs este necesar oprirea debitului i reumplerea cu solvent a
corpului pompei.
Dei solvenii utilizai se degazeaz pentru a se reduce efectele corozive ale
oxigenului, datorit presiunilor ridicate la care se lucreaz, coroziunea este totui deosebit.
De aceea aceste pompe (corpul, cilindrii, garniturile i supapele) se execut din materiale
rezistente la coroziune: safir, agat, teflon sau aliaje speciale.
233
17
n cazul HPLC injecia probei trebuie fcut ntr-un timp ct mai scurt, pentru a nu
deranja regimul dinamic al eluentului prin coloan i detector. Dificultatea provine de la
presiunea ridicat la care lucreaz coloana (20mii kPa). Sistemul cel mai utilizat n
cromatografele de lichide este ventilul cu 6 ci, numit i ventil de introducere a probei,
prevzut cu bucle interschimbabile (fig. 3).
Proba
(soluie)
Proba
(soluie)
Coloana
Coloana
Ieire
exterioar
Ieire
exterioar
Pompa
Pompa
Bucla
Bucla
Fig. 3. Ventilul pentru introducerea probei (cu 6 ci); lucreaz n dou etape:
A - alimentarea buclei cu proba; B - dup o rotire cu 60 n sensul acelor de ceasornic,
antrenarea probei din bucl n coloan
234
Coloanele n LC
Fig. 4. Aspectul coloanelor din LC: coloan analitic (stnga), semipreparativ (dreapta)
Din punctul de vedere al geometriei (fig. 4), aceste coloane sunt cilindrice, iar
dimensiunile depind, n primul rnd, de dimensiunea granulelor i porozitatea umpluturii.
Astfel diametrul coloanelor variaz ntre 0.3-5cm iar lungimea poate fi ntre 3-25cm. Pentru
scopuri preparative, n cazul unor componente necunoscute, se utilizeaz chiar diametre mai
mari.
Cu ct umplutura este mai fin, cu att coloana este mai scurt. Pentru a se reine
eventualele impuriti sau componeni care nu pot prsi coloana (fiind reinui practic
ireversibil) se folosesc adesea precoloane care, fiind de dimensiuni mai mici (acelai diametru
i lungimi de 0.4-1cm), pot fi nlocuite mai des, evitndu-se astfel scoaterea prematur din
funcie a coloanei principale. Pentru a nu fi antrenat faza staionar n afara coloanei, aceasta
este blocat la capete de dou discuri metalice, poroase, avnd diametrul porilor ntre 0.510m. De asemenea pentru a nu se lrgi prea mult prin coloan zona cromatografic (cu
diluarea ce are loc simultan), tot volumul mort ale acesteia (goluri n coloan, tubul de
aduciune de la injector, tubul de evacuare spre detector) trebuie redus la minim.
Se cunosc pn n prezent mai multe mecanisme de separare prin coloane, care depind
mult de fazele mobil i staionar. Mai exact, depind de natura fenomenului fizico-chimic pe
Chimie Analitic i Instrumental
235
17
care se bazeaz retenia difereniat i separarea. Metodele LC (HPLC) se pot clasifica, dup
mecanismele principale amintite, astfel:
cromatografie de adsorbie,
cromatografie de repartiie,
cromatografie ionic,
cromatografie de excluziune steric.
Fiecare dintre aceste variante este preferat n cazul unor grupuri de substane,
asemntoare structural (vezi fig. 7), neexistnd din pcate un mecanism universal.
Se disting dou moduri de realizare a cromatografiei de repartiie:
Cromatografie de repartiie direct (sau cu faze normale - clasic);
Cromatografia de repartiie cu faze inversate - metoda preferat n zilele noastre - pe care
se realizeaz cele mai numeroase separri.
n primul caz faza staionar este format dintr-un lichid polar iar faza mobil dintrun solvent organic nepolar iar n al doilea, situaia se inverseaz: lichidul imobil este nepolar
iar faza mobil este un amestec de solveni polari. De exemplu, una dintre cele mai rspndite
faze inversate este cea staionar - silicagel, iar cea mobil - un amestec ap, metanol,
acrilonitril (sau tetrahidrofuran). O separare reuit pe o astfel de faz este prezentat n fig. 5.
1. Izoproturon
14. Simazin
2. Profam
15. Bromacil
3. Propazin
16. Cianazin
4. Terbutilazin 17. Atrazin
5. Linuron
18. Carbaril
6. Propanil
Coloan: Supelcosil (SiO2)
7. Prometrin
LC-ABZ, 25x4,6cm;
8. Fenamifos
Granulaia: 5m, t = 40C;
9. Fenitrotion
Eluent: 10 pn la 90%
10. Cafein
acetonitril n ap 0.5%/min;
11. Metamitron
Detector: UV la 225nm;
12. Fenuron
Debit: 1mLmin-1;
13. Metoxuron
Fig. 5. Separarea unor pesticide prin HPLC
Cromatografia ionic (IC) are mai multe variante. Cea mai frecvent ntlnit astzi
folosete n calitate de faz mobil solveni apoi diluai de electrolii iar ca faz staionar
schimbtori de ioni. Metoda va fi descris ntr-un capitol separat datorit implicaiilor actuale
n analizele de ape legate de protecia mediului. O alt variant denumit cromatografie prin
perechi de ioni folosete faze staionare capabile s fixeze anumii ioni care fixeaz ioni de
semn contrar (perechi de ioni). Acest mecanism se prefer n cazul substanelor ionice sau
ionizabile.
236
Caracter Cromatografie
ionic (IC)
Ionic
cu perechi de ioni
Ap
cu faz invers
Neionic
cu faz polar legat
<2000
lichid-solid (CLS)
Polar
excluziune steric
Proba
Solveni organici
CLS
Nepolar IC
excluziune steric
Ap
Excluziune steric
> 2000
Schimb ionic
Solveni organici Interaciuni hidrofobe
Fig. 6. Tipurile de mecanisme de separare cunoscute n LC
237
17
Faza staionar
Silicagelul (SiO2) este considerat materialul cel mai important utilizat ca faz
staionar. Acesta a devenit, n ultimii 20 de ani, doar suportul adevratelor faze - fazele
chimic legate - ceea ce nu schimb importana sa. Silicagelul s-a obinut la nceput n form
granular, neregulat, apoi n form sferic (fig. 7).
O - Si
O - Si
O - Si
O - Si
O - Si
O - Si
O - Si
Fig. 8. Aspectul schematic al unei
Fig. 7. Aspectul granulelor de silicagel folosite granule sferice cu faz staionar
chimic legat pe suprafaa suportului
frecvent la umplerea coloanelor din HPLC
Indiferent de form, granulaia trebuie s fie uniform (se elimin partea fin) pentru
c astfel caracteristicile curgerii eluentului sunt mult mbuntite.
Obinerea silicagelului sferic se face plecnd de la soluii coninnd silicat de sodiu
dar i ali compui hidrolizabili ai siliciului (tetraclorur de siliciu, silicat de etil etc.). De la
acetia, printr-o reacie cu apa urmat de o pulverizare i apoi de o sinterizare, procese vizibile
pe fig. 9, se obin granule cu aspect sferic.
OH
2
HO
OH
Si
OH
1
SiO2 coloidal
(Sol)
Compui ai Si(IV):
Si(OEt)4],
SiCl4,
Na2SiO3.
3-10m
puternice i de aici apariia unor cozi ale picurilor. Silicagelul are o structur tridimensional
cu o reea de baz, tridimensional, format din legturi Si-O-Si iar pe suprafaa porilor sau
cea exterioar mai prezint grupe silanol, Si-OH. Punile de oxigen apar ntre atomii de
siliciu cu ocazia polimerizrii acidului silicic, Si(OH)4.
n ultimul timp a mai aprut un tip de faz staionar cu performane ridicate. Este
vorba de coloanele monolit, realizate din aceleai materii prime i printr-o tehnologie
asemntoare din punct de vedere chimic cu cea din fig. 9. Coloana este format direct n
tubul rigid (metalic), de unde i numele. Aceasta nu mai are granule dup cum se poate
observa din fig 10. Prin noua tehnologie, s-au obinut coloane cu performane superioare fa
de cele umplute cu granule.
H
Si
Si
Si
II
III
Exist trei tipuri de grupe silanol superficiale I- legate, II- reactive i III- libere (v. fig.
11) cu tria relativ I < III < II. n funcie de tehnologia de obinere difer i porozitatea
intern, suprafaa specific, rezistena la compresiune i polaritatea. Silicagelul este
considerat, n general, un material puternic polar.
Grupele funcionale de pe suprafa au un caracter acid (pKa pentru grupele silanol
este similar fenolului). Pentru a se reduce cozile picurilor pe care le dau centrele de adsorbie
puternice, silicagelul se poate dezactiva, de exemplu prin adaos controlat de ap (3-8% ap).
Cteva mrci de silicagel comercial sunt prezentate n tabelul 2.
Tabelul 2. Cteva dintre cele mai cunoscute tipuri de silicagel pentru HPLC
Diametrul Suprafaa
pH-ul n
Tipul
Marca
porilor
specific suspensie 10% particulelor
Zorbax 300 30
39
5.4
Sferice
Vydac TP
32
82
4.1
Sferice
Hypersil
12.5
149
8.2
Sferice
Spherisorb 8
190
7
Sferice
Polysil
6
245
6.5
Neregulate
LiChrosorb 10
297
6.7
Neregulate
Rosil
8
357
8.4
Sferice
Rsil
6
433
8.0
Neregulate
239
17
Se poate observa c suprafaa specific scade cu creterea diametrului porilor iar pHul acestora se situeaz n domeniul 5.4-8.4.
Ali adsorbeni mult mai puin utilizai sunt alumina, oxidul de zirconiu, crbunele
utilizare a unor faze staionare lichide depuse pe un suport poros solid - permeabil pentru
eluent (a fost preferat kieselgur-ul sau pmntul diatomitic - n esen tot SiO2 dar cu pori
mari i o suprafa mult mai mic.
Deoarece n toate aceste ncercri faza staionar era splat de pe suport de ctre
eluentul n micare i n felul acesta deranja funcionarea detectorului, s-a recurs la soluia
crerii unor faze care s fie fixate prin legturi chimice - mult mai puternice dect cele fizice.
Aspectul unei faze staionare chimic legate poate fi imaginat ca n fig. 8, adic catenele legate
alctuiesc o adevrat pdure de molecule care se comport fizic asemntor unui strat
subire, aderent la suport (imposibil de dizolvat) dar cu o valoare a factorului de capacitate k
mai favorabil.
Dac gruprile silanol Si-OH de pe suprafaa silicagelului sunt puse n situaia de a
reaciona cu anumii derivai organometalici, se poate realiza sinteza unor faze chimic legate.
Cele mai stabile legturi sunt cele care au la baz apariia structurilor legate prin intermediul
unei puni: Si-O-Si. Obinerea acestora se realizeaz prin reacii de condensare [115] la
care particip grupele silanol - superficiale, efectuate n prezena unor clorsilani. Un exemplu
este reacia:
SiOH + ClSi(CH3)2R -HCl Si-O-Si(CH3)2-R
unde cel mai frecvent R = C8H17 sau C18H37. Prin astfel de reacii (astzi se cunosc mai multe
variante) suprafaa silicagelului se acoper cu un strat monomolecular de dimetil-alchilsiloxan nepolar. Pentru se mri i mai mult stabilitatea s-a recurs la soluia legrii radicalului
de hidrocarbur R prin intermediul mai multor legturi cu suprafaa silicagelului.
Stratul de hidrocarbur grefat de suport se comport ca un strat foarte subire, uniform,
de lichid nepolar dar mult mai stabil. Aceste faze stau la baza cromatografiei cu faze
inversate. Polaritatea acestor faze se poate regla prin legarea n cadrul unor catene laterale ale
radicalului de hidrocarbur R, de exemplu a unor funciuni aminopropil, cianopropil, benzil,
crendu-se astfel o mare diversitate de faze staionare.
[115] Prin reacii de condensare se neleg procesele prin care se leag dou molecule mai mari, eliminndu-se o
molecul mic (HCl).
240
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Faza mobil
Faza mobil sau eluentul n LC nu reprezint un mediu inert ca gazul purttor din GC.
De aceea alegerea fazei mobile se face aici n perfect concordan cu faza staionar. Astfel
faza mobil difer destul de mult n funcie de tipul interaciunilor componentelor separate cu
faza staionar din coloan. Singurele caracteristici generale sunt urmtoarele: (1) faza
mobil trebuie s aib o viscozitate cobort, (2) aceasta trebuie s dizolve bine
componentele, (3) nu trebuie s afecteze funcionarea coloanei i (4) trebuie s permit
funcionarea detectorului.
Unii elueni provoac migrarea unui anumit component mai repede prin coloan. Se
spune c acetia au o trie relativ mai mare sau, altfel spus, au o putere de eluie mai
ridicat. Aceast denumire provine de la faptul c factorul de capacitate, k, este mai mare i
de aceea componentul migreaz mai repede. Dar totul depinde de trio-ul component - faz
mobil - faz staionar. Astfel, pe o faz staionar polar, folosind o faz mobil nepolar,
se vorbete de cromatografie de repartiie normal (sau cu faze directe). Din contr, pe o faz
staionar nepolar utilizndu-se o faz mobil polar se vorbete de cromatografie de
repartiie cu faze inverse (sau inversate). n acest ultim caz au devenit uzuale fazele mobile
formate din amestecuri metanol - ap care n cromatografia de repartiie sunt considerate
printre fazele mobile mai puin tari.
Tabelul 3. Cteva faze mobile (monocomponente) utilizate n cromatografia de repartiie
n ordinea triei lor relative n LC de repartiie cu faze normale
Faze normale
Solveni
Faze inversate
Hexan
Benzen
Triclormetan
Clorur de metilen
Eter etilic
Acetat de etil
Acetonitril
Metanol
Ap
Pe o faz staionar polar, amestecul metanol-ap face parte dintre cei mai tari elueni
cunoscui. n tabelul 3 se prezint civa dintre cei mai ntlnii solveni i ordinea n care
crete tria lor relativ, n cele dou tipuri de cromatografie de repartiie.
n cromatografia ionic (IC) se folosesc soluii diluate de electrolii ca: NaOH,
NaHCO3, HCl, iar n cea de excluziune steric solveni simpli - evident compatibili cu
polimerii, separai unii de alii dup dimensiuni.
O alt cale de mbuntire a separrilor existent n LC (cale inexistent n GC) este
folosirea gradienilor de eluie. De exemplu, n GC, prin modificarea eluentului gazos nu se
Chimie Analitic i Instrumental
241
17
constat nici o mbuntire a calitii separrii, n sensul mririi selectivitii. n HPLC, din
contr, solventul are o contribuie important n procesul de separare, dar nu trebuie neglijat
importana decisiv a cuplului faz mobil - faz staionar. Dei unii compui sunt reinui
slab prin coloan, ieind destul de repede, cei reinui puternic ies din coloan dup un timp
cteodat nepractic de lung, lucru care determin diluarea n eluent a componentul n urma
Concentraie
Timp
Fig. 12. Cteva din cele mai cunoscute forme de gradieni de faz mobil
242
Detectori
dintr-o coloan i care pot nregistra continuu substanele separate de ctre aceasta. Deci
detectorii constituie acea parte a instrumentaiei care permite s se observe modul cum
decurge separarea prin coloan fr a se vedea componenii propriu zii ci doar semnalul lor.
ntruct coloanele de separare performante au capaciti de ncrcare mici, sistemul de
detecie trebuie s fie unul foarte sensibil. Totodat, pentru c n LC volumul de prob este de
ordinul microlitrilor (8-10l), volumul detectorilor trebuie s fie de volum apropiat pentru a
se putea sesiza n mod continuu picul cromatografic.
n calitate de instrumente se poate utiliza, n principiu, oricare dispozitiv de analiz
chimic cunoscut, pentru probe lichide, precum i orice combinaii de instrumente fizice. De
exemplu, n ultimul timp, combinaia dintre un detector refractometric i unul bazat pe difuzia
luminii este extrem de eficace n analiza polimerilor n amestec cu monomeri sau oligomeri
dintr-un material. Exist chiar posibilitatea creterii sensibilitii deteciei printr-o reacie
chimic n urma adugrii, cu un debit controlat, a unui reactiv potrivit. Tehnica se numete
derivatizare i se poate practica chiar nainte de introducerea probei n coloan, dar i dup
Acest grup de detectori sunt cei mai folosii detectori pn n prezent, att n LC, ct i
n HPLC. Pentru a putea fi utilizai, compuii separai cromatografic trebuie s fie colorai adic s absoarb lumina pe domeniul de lungimi de und al detectorului. Pe de alt parte,
eluentul trebuie s fie practic transparent pentru acelai domeniu spectral.
Legea fizic pe baza creia funcioneaz aceti detectori a fost prezentat - este vorba
de legea Lambert-Beer (A = lC). Deci unitile vor fi uniti de absorban, adimensionale.
De aceea limita de detecie sau zgomotul de fond se prezint n cazul acestor detectori n
AUFS (prescurtare de la Absorbance Units Full Scale = uniti de absorban raportate la
ntreaga scal, l. engl.). Astfel n cadrul instrumentelor actuale sensibilitatea este de 0,001
AUFS cu zgomotul de fond de 1%.
Chimie Analitic i Instrumental
243
17
Lumin
Se pot distinge i n cazul acestei clase de detectori mai multe tipuri de detectori.
Detectorii monocromatici au fost primii utilizai, fiind mai ieftini deoarece lucreaz
doar la o lungime de und. Modelul cel mai rspndit se compune dintr-o surs luminoas cu
deuteriu sau cu vapori de mercur, un monocromator care separ un domeniu ngust (de ex.
linia 254nm a mercurului) i un detector. Schema bloc a unui astfel de detector este prezentat
n fig. 14.
Detectorii policromatici mai frecvent utilizai n cromatografele HPLC moderne
permit i selectarea lungimii de und la care se lucreaz, dar chiar pot nregistra electronic
absorbana celulei la mai multe lungimi de und simultan. Acest mod de lucru d o mai mare
siguran analizei, n sensul c permite stabilirea puritii, adic dac picul constituie un
semnal dat de o singur substan sau de un amestec (ceea ce se cunoate sub numele de
stabilirea puritii picului). Aceti detectori conin celula amintit montat ntr-un
spectrofotometru cu reea de diode.
SursMonocromatorCelulnregistrator
Fig. 14. Schema bloc a unui detector HPLC spectrofotometric
244
Detectori refractometrici
Detectorii refractometrici, au la baz legile refraciei luminii. Principiul de
funcionare al acestor detectori are la baz legea lui Fresnel - de transmitere a luminii prin
medii transparente avnd un indicele de refracie dat. Astfel, un fascicul luminos (mono sau
policomponent) trece printr-o celul cu dou compartimente unul coninnd doar eluentul pur
iar cellalt faza mobil care prsete coloana (fig. 15).
La coloan
Eluent
pur
Evacuare
Efluent plus
component
Diferena dintre indicii de refracie pentru soluiile aflate n cele dou compartimente
vor fi practic nule, atta timp ct din coloan iese doar eluentul pur, dar diferit n momentul
n care n eluent mai apare un component separat - antrenat de ctre eluent din coloan. n
momentul ieirii unui component are loc o deplasare a poziiei fascicolului emergent din
detector - deplasare care este proporional cu concentraia i sesizat de ctre detectorul D.
n cazul acestui tip de detector sunt posibile i picuri negative, ceea ce face necesar
aducerea liniei de baz la jumtatea scalei lucru care, pe lng sensibilitatea relativ cobort
(10-5molL-1), constituie un dezavantaj. Acest detector este universal, dar nu poate fi utilizat n
cromatografia cu gradieni deoarece, n acest caz, compoziia eluentului la intrarea n coloan
difer de cea de la ieire i se modific continuu, neexistnd o linie de baz. De asemenea
fenomenul este foarte sensibil la temperatur (0.0001C) fiind necesar termostatarea, att a
detectorului ct i a coloanei.
Detectorii conductometrici
245
17
este descris schematic n fig. 16. Tehnic este vorba de o celul miniaturizat cu totul analog
unei celule conductometrice.
Faz mobil
Pe lng cei amintii, mai rspndii, n practica analitic se mai ntlnesc i ali
detectori prezentai schematic n tabelul 4. Dintre acetia o meniune special trebuie fcut
pentru cei bazai pe spectrometria de mas i FT-IR [116], care au permis determinri
calitative uneori imposibil de realizat prin alte variante de detecie n lipsa etaloanelor
cunoscute.
Tabelul 4. Ali detectori utilizai n LC
Limita de
Detectori LC
Caracteristici
detecie [117]
Sensibilitate 10-10M
Este necesar uneori
Fluorimetrici
1-10pg
derivatizarea
Sensibilitate 10-10M
Electrochimici
10pg = 1ng
(Amperometrici)
Compui oxidabili sau reductibili
Bazai pe
Necesare coloane capilare
Spectrometria
100pg - 1ng
Necesar pulverizarea
de Mas (MS)
Pre de cost ridicat
FT-IR
1g
Pre de cost ridicat
Difuzia luminii
10g
Adecvai pentru macromolecule
Activitate optic 1ng
Pentru substane optic active
Doar pentru ioni sau compui
Electrozi ion
10ng
ionizabili
selectivi
Fotoionizare
1pg - 1ng
-
Disponibilitate
comercial
Da
Da
Da
Da
Da
Nu
Nu
Nu
Aceti detectori permit ca, pe baza unei baze de date format din spectre cunoscute, s
se obin compuii cei mai apropiai (3 dintre acetia), din toate substanele chimice
cunoscute, care ar putea fi prezeni n prob.
ntrebri de verificare
247
SO3- H+
CH2N+R3 HO-
cationii.
249
18
R-Na + H+
R-H + K+
R-K + H+
Pompnd un eluent prin coloan, de exemplu o soluie diluat de acid clorhidric, ionii
H+ din acid, fiind n concentraie mai mare, vor deplasa ionii fixai, prin echilibre ionice
similare spre o poriune inferioar:
R-Na + H+
R-H + Na+
R-K + H+
R-H + K+
iar acetia se vor putea fixa din nou, puin mai jos, pe alte centre de schimb din coloan.
Procesul se repet ionii migrnd de sus n jos prin coloan. Deoarece gruprile
funcionale -SO3- au o afinitate ceva mai mare pentru ionii de potasiu dect fa de cei de
sodiu, primul grup de ioni (sau prima zon) care va iei din coloan va fi cel format din ionii
de sodiu i abia dup un timp va iei grupul coninnd ionii de potasiu. Astfel se realizeaz
separarea celor doi ioni. Similar stau lucrurile cu amestecuri mai complicate, uneori fiind
necesare coloane mai lungi. ntruct cu ct diametrul granulelor este mai mare zonele sunt
mai largi i, totodat, separarea mai de durat iar granulele se deformeaz mecanic, n timp
mai uor, ulterior rina a fost aplicat sub form de pelicul subire pe un miez de sticl
sferic, eficacitatea separrii i fiabilitatea coloanelor crescnd foarte mult.
Fazele mobile n IC sunt simple - soluii apoase diluate de acizi sau baze i doar cnd
este necesar, se mai adaug o concentraie cobort de metanol pentru a se facilita dizolvarea
moleculelor puin ionizate n ap. Pentru separarea cationilor se utilizeaz ca faze staionare
cationii (schimtori de cationi) i drept elueni, soluii de acizi, iar pentru separarea bazelor se
folosesc anionii (schimbtori de anioni) i ca elueni soluii de baze, de exemplu, o soluie de
hidrogenocarbonat de sodiu. Structura acestora este de cele mai multe ori diferit de a
schimbtorilor de ioni obinuii (fig. 1) i va fi tratat mai detaliat n continuare.
250
Detecia
n 1975 (H. Small i colab.) iar iniial a constat dintr-o coloan-supresor, plasat n
continuarea celei de separare, cu rolul de a transforma eluentul (un acid sau o baz tare) n
ap. De exemplu, pentru eluentul amintit anterior - acidul clorhidric - coloana supresor este
umplut cu o rin schimbtoare de anioni, avnd o capacitate de schimb mare (de tipul celei
din fig. 1-dreapta) cu o formul general: R-OH. Prsind coloana de separare eluentul,
coninnd acid clorhidric diluat, va ptrunde n coloana supresor unde se va petrece reacia:
R-OH + (H+ + Cl-)
R-Cl + H2O
Apa fiind practic neionizat va permite detecia sensibil a hidroxizilor - total ionizai
- ce au aprut din zonele formate iniial din cele dou sruri. Schema unui cromatograf ionic
este reprezentat n fig. 2a iar n fig. 2b este redat distribuia concentraiilor speciilor ionice
la ieirea din prima coloan, n punctul A (fig. 2a). Pe aceeai figur este prezentat
conductan i la ieirea din supresorul ionic, n punctul B.
(a)
(b)
Fig. 2. Schema de principiu a cromatografiei ionice (IC) -(a) i a modului de aciune a
supresorului ionic -(b). Aici RH este coloana de separare iar ROH, coloana supresor
Chimie Analitic i Instrumental
251
18
252
Supresorul electrochimic
Supresorul electrochimic (sau autosupresorul) din cromatografele ionice recente, a
la canal
Eluent
la canal
Membran semipermeabil
Detector
a
Recirculare
+
Fig. 3. Amplasamentul supresorului electrochimic la ieirea din coloan
253
18
Aplicaii
Una din cele mai importante aplicaii este analiza speciilor anorganice, cum ar fi
analiza cationilor i anionilor din ape, soluii sau fluide biologice dar i pentru analiza unor
poluani (cum ar fi ionul NH4+ din apele naturale). Alte aplicaii imediate sunt analiza bilor
de galvanizare sau a lichidelor de natur apoas coninnd sruri: sucuri de fructe, fluide
industriale, alimente etc. Metoda permite i analiza unor specii organice polare cum ar fi
acizii sau aminele.
254
ntrebri de verificare
255
Poziia final a
frontului la eluie
Probe
Etalon
Linie de start
1 2 0
Fig. 1. Placa cromatografic i poziiile relative ale spoturilor
n aceast variant a cromatografiei de lichide, separarea nu mai are loc ntr-o coloan
nchis ci pe o faz staionar similar, granular (poroas) dispus ntr-un strat subire,
formnd un plan (fig. 1). Acest strat denumit subire, se realizeaz dintr-un adsorbent cu
grosimi cuprinse ntre 100-250m i poate fi simplu sau legat adeziv de un plan rigid, fiind pe
tot parcursul separrii n contact cu o faz gazoas - mai mult sau mai puin saturat cu vapori
de eluent. Primul caz a fost mult utilizat n trecut n cazul aa-numitei cromatografii pe hrtie
unde faza staionar consta dintr-o band de hrtie de filtru, confecionat din celuloz pur,
sau, extrem de rar, prin folosirea unor plci din materiale ceramice sinterizate poroase.
Cellalt caz mult mai utilizat (chiar n zilele noastre) face apel la straturi subiri realizate
dintr-un adsorbent pulverulent (silicagel, celuloz, alumin, poliamid sau derivate ale
acestora) dispuse n straturi subiri pe plci rigide din sticl sau, pe folii flexibile din aluminiu,
[118] Din l. englez
Chimie Analitic i Instrumental
257
19
poliester sau alte materiale inerte fa de sistemul pe care are loc separarea. Se mai poate
recurge i la straturi formate pe baghete de sticl sau tuburi din sticl.
Obinerea straturilor subiri se realiza la nceput n laborator, pornindu-se de la o
suspensie apoas a adsorbentului pulverulent (10-40m) mpreun cu un liant anorganic (de
exemplu ghips, SiO2-coloidal) sau organic (amidon, carboximetilceluloz), iar pentru aplicare
se foloseau nite dispozitive mecanice simple. Straturile subiri mai pot include i indicatori
de fluorescen care n lumin UV fac posibil vizualizarea spoturilor substanelor care absorb
n acest domeniu prin stingerea fluorescenei, adic prin apariia unor spoturi ntunecate pe
fond luminos. Straturile subiri pot fi achiziionate gata preparate de la firme productoare
specializate (Camag, Cole-Parmer etc.).
Aplicarea probei
Are loc prin coloana deschis, care acioneaz cu totul analog celei nchise (vezi LC),
are loc sub aciunea forelor capilare i provoac migrarea difereniat a componentelor
amestecului de separat. Acest lucru se realizeaz n urma simplei scufundri (manuale) a
plcii cromatografice n eluentul potrivit. Din acest moment, eluentul irignd prin capilaritate
stratul poros migreaz ascendent prin stratul subire, provocnd separarea. Timpul de separare
variaz ntre 3 i 60 min.
Nu este totui exclus utilizarea unor dispozitive mai sofisticate de alimentare cu
solveni (minipompe) - fcndu-se uneori apel chiar la gradieni de concentraie (v. par. 16.5
n cazul LC). Se poate de asemenea practica migrarea eluentului pe orizontal sau descendent.
Se poate elua o plac chiar de mai multe ori sau se poate evapora solventul n timpul migrrii,
n acest fel mrindu-se eficiena pe seama timpului de separare.
Pentru realizarea separrii (eluiei) se utilizeaz camere de developare. Cteva dintre
cele mai utilizate dintre acestea se prezint n fig. 3. Formele preferate sunt cele
258
N
S
Fig. 3. Cteva dintre cele mai uzuale
camere cromatografice n PC
Eluia are loc dup introducerea plcii n camera cromatografic, pn cnd amestecul
de solveni atinge o nlime final, fixat de obicei ntre 5 i 18 cm, sau un anumit timp
stabilit, n prealabil, prin ncercri preliminare. Solvenii utilizai se aleg n funcie de
proprietile de eluie ale substanelor supuse separrii (analizei). Natura acestora depinde nu
numai de substanele implicate dar i de mecanismul de separare propus, respectiv de faza
staionar avut la dispoziie.
Dup eluie, placa se scoate, se usuc i dac spoturile nu se vd, se trece la
vizualizarea acestora (operaie numit uneori revelare). Pentru aceasta, placa fie se scufund
ntr-un reactiv, fie se pulverizeaz cu acesta sau se introduce ntr-o atmosfer coninnd gaze
reactive i chiar ntr-o etuv, la cald, cnd spoturile devin vizibile n urma unor reacii chimice
(avnd un aspect apropiat celor din fig. 4).
259
19
Doar apoi se poate trece la etapa analizei propriu-zise. Reactivii de culoare pot fi
generali, ca de exemplu acidul sulfuric la cald (120C), care determin carbonizarea
majoritii substanelor organice, sau specifici, cnd acetia reacioneaz doar anumite
substane sau funciuni organice.
O alt variant de a face spoturile vizibile, preferat tot mai mult n ultimul timp, este
folosirea unor straturi subiri fluorescente (spre exemplu materialul pulverulent conine ZnS fluorescent). Prin examinarea cromatogramelor eluate i uscate n lumin UV, se vor observa
spoturi nchise la culoare sau colorate, pe fond fluorescent - luminos. Atunci cnd chiar
substanele separate sunt fluorescente nu mai este nevoie de fondul fluorescent i este
suficient o plac obinuit, observat n lumin UV, spoturile devenind luminoase pe un
fond ntunecat (fig. 4).
O variant i mai modern, foarte eficace de vizualizare, folosind tot lumin UV,
const n utilizarea unor plci cu straturi subiri coninnd amestecuri de luminofori. n acest
caz plcile au o culoare compus (de regul lumina emannd din trei substane luminescente
avnd culori diferite). Cum fiecare luminofor emite la o alt lungime de und, iar substanele
separate absorb diferit lumina, fiecare component de pe plac va avea, n consecin, o alt
culoare. n acest caz detecia este mai sigur pentru c nu difer doar poziia relativ a
spotului respectiv pe plac ci i culoarea.
260
chimic, alei prin ncercri preliminare. Pentru straturi subiri din silicagel (cele mai
utilizate) prezentm o list cu 10 solveni extrai din 8 grupe de selectivitate (propuse de
Snyder, un cercettor american care a clasificat solvenii organici n funcie de mai muli
parametri structurali i fizici), care difer ntre ele prin structura chimic: eter etilic (grupa I),
izopropanol i etanol (II), tetrahidrofuran (III), acid acetic (IV), diclormetan (V), acetat de etil
i dioxan (VI), toluen (VII) i cloroform (VIII). Hexanul este un solvent considerat complet
nepolar i este recomandat a fi introdus n amestecuri pentru aducerea spoturilor n domeniul
considerat optim, de Rf = 0.2-0.8 dac mai este necesar.
261
19
xi
x0
unde cu xI, respectiv cu x0, s-au notat distanele parcurse de componentul dat, respectiv de
frontul solventului, pn la oprirea cromatogramei. Toate mrimile calculate pentru o coloan
nchis au o mrime corespondent i n PC. De exemplu parametrul de retenie R devine Rf
(f de la front):
Rf =
t
x
v
1
=
= 0 =
x0
v0 t k + 1
unde v reprezint viteze de migrare, t - timpi de migrare iar k factorul de capacitate. De aici,
implicit:
k=
1
1
Rf
Comparndu-se valorile Rf ale spoturilor etaloanelor cu cele ale substanelor din proba
de analizat (lucru realizat de cele mai multe ori vizual) se spune c se face analiza calitativ.
Aceasta este cea mai util aplicaie a metodei PC. Se pot identifica pesticide din ape, sol dar i
alte substane pentru scopuri tiinifice i tehnice cu o sensibilitate mult mai bun dect n
eprubet. Desigur c sensibilitatea atins este inferioar celei din HPLC. De aceea, n
aplicaiile analitice de performan, cu toat simplitatea i preul de cost sczut, PC nu poate
nlocui ntotdeauna HPLC.
Tot n scopul realizrii analizei calitative se poate practica i cromatografia
bidimensional. n aceast variant (fig. 5), se utilizeaz o plac ptrat, iar spotul (unul
262
Eluia 1
Aplicare
Rotire
Solvent 1
Eluia 2
Aspect final
Solvent 2
Fig. 5. Modul de executare a cromatografiei n strat subire bidimensionale
Analiza cantitativ poate ncepe dup efectuarea separrii i vizualizrii sau prin
scanarea. Densitometria se poate realiza n lumin vizibil sau UV, n ultimul caz fiind
posibil i msurarea radiaiei de fluorescen. Semnalul msurat servete la construirea unei
curbe de etalonare din semnalele msurate pentru diferitele spoturi, coninnd cantiti
cresctoare de component, aplicate, alturi de proba necunoscut, pe aceeai plac. Se prefer
metoda curbei de etalonare n reflexie (adic prin msurarea reflectanei) deoarece domeniul
liniar al metodei este destul de ngust i adesea curba de etalonare este neliniar. Motivul
principal pentru care rezultatele analizei cantitative prin PC sunt inferioare HPLC sunt
neuniformitile stratului subire care contribuie n mod hotrtor la mrirea raportului
semnal/zgomot, notat S/N. Astfel, conform fig. 6, unde H este nlimea picului (semnalului)
analitului iar hn - limea domeniului n care variaz zgomotul de fond (intervalul 2).
S/N =
H
2H
=
h n /2 h n
hn
Chimie Analitic i Instrumental
Fig. 6. Ilustrarea
mrimilor care
afecteaz raportul
semnal/zgomot
263
19
O variant mai simpl dar mai laborioas de analiz cantitativ const n splarea
zonei corespunztoare analitului de pe suport ntr-un pahar, folosind un solvent adecvat i
apoi determinarea, cu o alt metod instrumental, a concentraiei soluiei rezultate.
Evaluarea cu ajutorul foto-densitometrelor este pn n prezent cea mai utilizat
metod. n aceste instrumente, placa cromatografic cu stratul pe ea, se deplaseaz odat cu
suportul (de regul n direcia developrii), prin faa fantelor sistemului optic de iluminare,
respectiv de msurare a intensitii luminii reflectate. Schema unui astfel de dispozitiv se
poate observa pe fig. 7.
F
O
D
P
MC
Hg
nlimi diferite (fig. 8b). Limita de detecie este pentru aceast metod de 250fg Se.
Reprezentarea grafic a nlimilor duce la curba de etalonare (fig. 8c).
500 y = 9.2941x
R2 = 0.9928
Cantitate Se, g
Intensitatea fluorescenei
400
300
200
100
0
0 10 20 30 40 50
Inaltime, mm
a
b
c
Fig. 8. (a) Aspectul unei densitograme a compusului fluorescent al seleniului DAN (1,2diaminonaftalin); (b) Densitograme rezultate din msurtorile de fluorescen ale
produsului derivatizrii seleniului din probe de ap cu 1,2-diaminonaftalin, n cantiti
cresctoare (1fg=10-12g); (c) Aspectul unei curbe de etalonare n PC
Metoda PC este simpl i ieftin dar, ca precizie i exactitate, este adesea inferioar
HPLC. n calitate de metod semicantitativ, PC este o metod competitiv i n lipsa unei
aparaturi performante (de exemplu HPLC) rmne uneori singura alternativ. O analiz
semicantitativ poate rspunde la ntrebarea: Este prezent specia X ntr-o concentraie mai
mare dect o concentraie limit, C? De foarte multe ori rspunsul la aceast ntrebare este
suficient n practica curent. Dar pentru monitorizarea automat a coninutului de poluani din
ape sau sol, pentru expertize sau pentru controlul alimentelor, doar metoda PC nu este
suficient.
265
19
ntrebri de verificare
266
h
2
(1)
unde I este numrul cuantic de spin (numit simplu spin) poate lua valorile I = 0, , 1.
Valoarea numrului cuantic de spin I d numrul de orientri (stri) ale momentului
magnetic al nucleului fa de o ax oarecare nI:
nI = 2I + 1
(2)
mI = I, I-1, ..., -I
(3)
h
2
(4)
Dintre elementele chimice, elemente cu numr cuantic de spin I = sunt 1H, 13C, 19F,
31
[120] Cerichelli Giorgio, Mancini Giovanna, Role of Counterions in the Solubilization of Benzene by
Cetyltrimethylammonium Aggregates. A Multinuclear NMR Investigation, Langmuir, p. 182-187, Volume
16, Issue 1, January 11, 2000.
[121] Luchetti Luciana, Mancini Giovanna, NMR Investigation on the Various Aggregates Formed by a Gemini
Chiral Surfactant, Langmuir, p. 161-165, Volume 16, Issue 1, January 11, 2000.
Chimie Analitic i Instrumental
267
20
h
2
(5)
-3.826
5.586
0.857
1.405
0.404
gI
-1.83108 2.68108 4.10107 6.73107 1.94107
Momentul magnetic se exprim adesea prin factorul nuclear gI (tabelul 5.1), corelat cu
raportul giromagnetic i magnetonul nuclear N prin relaia:
gI =
h
, N = 5.05110-27 JT-1
N 2
(6)
(7)
Valorile pozitive din tabelul 1 indic un moment magnetic paralel cu spinul iar
valorile negative indic c momentul magnetic i spinul sunt antiparaleli.
ntr-un cmp magnetic B exterior cele 2I+1 orientri ale nucleului au energii diferite,
date de:
EI = - zB = - gImINB
(8)
B
2
(9)
(10)
(11)
268
= L
se numete condiie de rezonan.
269
20
Deplasarea chimic
(13)
unde se numete constant de ecranare pentru nucleul studiat. De obicei este pozitiv, dar
poate fi i negativ. Ceea ce se manifest asupra nucleului Bloc este diferena dintre cmpul
aplicat i cmpul magnetic suplimentar:
Bloc = B + B = (1-)B
(14)
B
2
(15)
ceea ce face ca frecvena Larmor L s fie diferit pentru acelai tip de nuclee situate n
nconjurri diferite (dup cum se tie distribuia sarcinii electronice a atomului considerat
depinde puternic de electronegativitile elementelor i gruprilor direct nvecinate. Aceste
frecvene de rezonan diferite se exprim uzual prin mrimea numit deplasare chimic. Se
definete deplasarea chimic ca diferena dintre frecvena de rezonan a nucleului studiat i
un standard de referin. Standardul de referin pentru protoni 1H este rezonana protonilor
din tetrametilsilan, Si(CH3)4, notat TMS. Motivul acestei alegeri este c TMS se dizolv fr
reacie n multe lichide [122-124].
13
C se
folosete ca standard frecvena de rezonan a 13C din TMS [129], iar pentru 31P frecvena de
rezonan a 31P din H3PO4 85% soluie apoas [130].
[122] Gerritz Samuel W., Andrea M. Sefler, 2,5-Dimethylfuran (DMFu): An Internal Standard for the
"Traceless" Quantitation of Unknown Samples via 1H NMR, Journal of Combinatorial Chemistry, p. 3941, Volume 2, Issue 1, January 11, 2000.
[123] Shapiro Yury E., 1H NMR Self-Diffusion Study of Morphology and Structure of Polyvinyl Alcohol
Cryogels; American Society, JCIS, p. 453-465, Volume 212, Issue 2.
[124] Wild J. M.; Artifacts Introduced by Zero Order Phase Correction in Proton NMR Spectroscopy and a
Method of Elimination by Phase Filtering, American Society, JMRE, p. 430-436, Volume 137, Issue 2.
[125] Shao Chaoying, Miyazaki Yoshinobu, Matsuoka Shiro, Yoshimura Kazuhisa, Sakashita Hirofumi,
Complexation of Borate with Cross-Linked Polysaccharide Anion Exchanger: 11B NMR and Adsorption
Properties Studies, Macromolecules, p. 19-25., Volume 33, Issue 1, January 11, 2000.
[126] Sham Simon, Wu Gang, Solid-State 25Mg NMR Study of Inner-Sphere Mg2+ Binding Complexes, Inorganic
Chemistry, p. 4-5, Volume 39, Issue 1, January 10, 2000.
[127] Drew Mark, Orton Edward, Krolikowski Paul, Salvino Joseph M., Kumar N. Vasant, A Method for
Quantitation of Solid-Phase Synthesis Using 19F NMR Spectroscopy; Journal of Combinatorial Chemistry,
p. 8-9, Volume 2, Issue 1, January 11, 2000.
[128] Gaare Kristin, Effects of La Exchange on NaY and NaX Zeolites As Characterized by 29Si NMR, The
Journal of Physical Chemistry B, p. 48-54, Volume 101, Issue 1, January 2, 1997.
[129] Orendt Anita M., Facelli Julio C., Bai Shi, Rai Amarjit, Gossett Michele, Scott Lawrence T., BoerioGoates Juliana, Pugmire Ronald J., Grant David M., Carbon-13 Shift Tensors in Polycyclic Aromatic
270
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
definit astfel:
0
106
=
0
(16)
Un exemplu de spectru este redat n fig. 4, pentru etanol. Existena deplasrii chimice
justific apariia semnalelor n spectru. Atomii de hidrogen, avnd diferite ecranri electronice
Compounds. 8. A Low-Temperature NMR Study of Coronene and Corannulene, The Journal of Physical
Chemistry A, p. 149-155, Volume 104, Issue 1, January 13, 2000.
[130] Osegovic John P., Drago Russell S., Measurement of the Global Acidity of Solid Acids by 31P MAS NMR of
Chemisorbed Triethylphosphine Oxide, The Journal of Physical Chemistry B, p. 147-154, Volume 104,
Issue 1, January 13, 2000.
Chimie Analitic i Instrumental
271
20
pentru diferite poziii n molecul, furnizeaz semnale diferite. Nici protonii aceleiai grupri
nu sunt scutii de discriminare, dup cum se vede din spectru. n acest caz fiecare atom d cel
puin o linie n spectru, unii atomi producnd chiar dou linii.
Fig. 4. Spectrul 1H-RMN al etanolului cu atomii care furnizeaz semnalul n spectru ngroai
(17)
unde loc este contribuia electronilor atomului studiat, mol este contribuia grupelor de atomi
ce formeaz restul moleculei iar sol este contribuia moleculelor de solvent.
[131] Pfrommer Bernd G., Mauri Francesco, and Louie Steven G., NMR Chemical Shifts of Ice and Liquid
Water: The Effects of Condensation, Journal of the American Chemical Society, p. 123-129, Volume 122,
Issue 1, January 12, 2000.
272
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Structura fin
aplicat i este o aciune reciproc a celor dou nuclee, adic dac nucleul A scindeaz linia de
rezonan a nucleului B cu constanta de cuplaj JAB atunci i nucleul B scindeaz linia de
rezonan a nucleului A cu aceeai valoare absolut JAB.
Pentru a exprima constante de cuplaj ntre nuclee cu deplasri chimice semnificativ
diferite se folosesc litere deprtate n alfabet (de exemplu A i X) iar pentru constante de
cuplaj ntre nuclee cu deplasri chimice apropiate se folosesc litere apropiate n alfabet (de
exemplu A i B).
Fie un sistem AX pentru care spinul are aceeai valoare I(A) = I(X) = . Datorit
interaciunii spin-spin cele dou stri (+ i - ) vor da linii diferite n spectru pentru fiecare
nucleu (A i X). Aceste perechi de linii sunt centrate pe deplasarea chimic a fiecrui nucleu
(fig. 5).
Pentru un sistem AXn (AX2, AX3, ...) la care nucleele au acelai spin I(A) = I(X) =
scindarea este tot un dublet, deoarece grupul de nuclee echivalente nX rezoneaz ca un singur
nucleu. Diferena cu cazul ilustrat n fig. 5 este redat n fig. 6, i anume intensitatea
semnalului este de n ori mai mare dect n specia AX. n spectrul AX2 specia A va scinda n 3
semnale cu raportul IA:I'A:IA = 1:2:1. De fapt semnalul I'A este rezultatul suprapunerii a dou
semnale IA aa cum se poate observa din fig. 5.
Schema distribuiei intensitii semnalului n scindrile de cuplaj spin-spin respect
distribuia dat de triunghiul lui Pascal. Astfel, n nuclee echivalente cu spinul rezoneaz cu
Chimie Analitic i Instrumental
273
20
Fig. 6. Cuplaje spin-spin scindri i suprapuneri pentru semnalul lui A din AmXn
Formulele de calcul pentru seriile din fig. 6 pot fi obinute cu ajutorul MathCad cu
formulele: N0,0 = 1; n := 1,2..5; k := 0,1..4; Nn,k+1 = Nn-1,k + Nn-1,k+1 pentru I = i respectiv:
M0,0 = 1; n := 1,2..5; k := 0,1..8; Mn,k+2 = Mn-1,k + Mn-1,k+1 +Mn-1,k+2 pentru I = 1 cnd se obin
matricele:
1
0
0
N=
0
0
0
i
0
1
1
1
1
1
0
0
1
2
3
4
0
0
0
1
3
6
0
0
0
0
1
4
0
0
0
0
0
1
[132] Ylihautala Mika, Vaara Juha, Ingman Petri, Jokisaari Jukka, Diehl Peter, 14N and2H NMR Study of the
Mesophases of Cetyltrimethylammonium Bromide in Formamide, The Journal of Physical Chemistry B, p.
32-38, 101(1), 1997.
274
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Nuclee echivalente
Un grup de nuclee sunt echivalente chimic dac i numai dac: sunt legate printr-o
operaie de simetrie a moleculei; au aceleai deplasri chimice.
Nucleele sunt echivalente magnetic dac i numai dac: sunt echivalente chimic; au
interaciuni spin-spin identice cu oricare alte nuclee magnetice din molecul.
Diferena ntre echivalena chimic i echivalena magnetic este ilustrat de
moleculele CH2F2 i H2C=CF2. n ambele molecule protonii sunt echivaleni chimic. Totui,
n CH2F2 protonii sunt echivaleni magnetic. n H2C=CF2 protonii nu sunt echivaleni
magnetic (fig. 7).
F
H
C C
H
F
H
Fig. 7. Geometria moleculelor de CH2F2 i H2C=CF2
F
F C
Nucleele de
19
orientarea spinilor este cea prezentat n fig. 8 i simetria magnetic este anulat. Astfel,
nucleul de H se va afla cis fa de nucleul de F i nucleul de H va fi cis fa de nucleul
de F ceea ce va face ca scindarea semnalului nucleului de H s fie diferit de scindarea
semnalului nucleului de H.
Alt situaie este relativ la protonii din R-CH3 (fig. 8).
H
R C
H H
Fig. 8. Geometria gruprii R-CH3
Dei cele trei nuclee sunt diferite din punct de vedere magnetic, practic nu se va
nregistra nici o scindare n spectrul RMN datorit rotaiei rapide a grupei CH3 n jurul
legturii R-C, ceea ce va media diferenele.
275
20
[133] Schwartz J., A graduate description of pulse RMN (time domain), J. Chem. Edu., 65, 752, 1988.
[134] Schwartz J., A graduate description of pulse RMN (time domain), J. Chem. Edu., 65, 959, 1988.
[135] Wink J., Spin-net relaxation times in 1H-RMN spectroscopy, J. Chem. Edu., 66, 810, 1989.
[136] Sanders J. K. M., Hunter B. K., Modern NMR spectroscopy, Oxford University Press, 1987.
[137] King R. W., Williams K. R., Fourier transform in chemistry. Part 4. RMN: Bidimensional methods, J.
Chem. Edu., 67, A125, 1990.
[138] Haworth O., Special edition of RMN spectroscopy, Chemistry in Britain, 29, 589, 1993.
Chimie Analitic i Instrumental
277
20
n mod uzual tehnicile RMN se aplic n faz lichid, cnd proba este dizolvat ntr-un
solvent corespunztor. Exist situaii ns cnd dizolvarea poate fi un inconvenient major.
Astfel, multe specii sunt de interes n faz solid i este important de determinat structura i
dinamica lor n faz solid [139]. Polimerii sintetici sunt un astfel de caz, cnd din RMN n
faz solid se pot obine informaii asupra structurii moleculelor, conformaiei acestora i
micrilor diferitelor pri ale lanului [140].
Substane anorganice ca zeoliii folosii ca site moleculare i catalizatori selectivi pot
fi studiate cu ajutorul RMN n faz solid cnd se obin informaii de natur structural care
nu pot fi obinute din difracia de raze X [141]. Principala dificultate n aplicarea RMN n faz
solid este slaba rezoluie a semnalului probelor solide i prezena benzilor formate prin
suprapunerea a foarte multe linii. Faza solid n general nu permite rotaia molecular care s
absoarb energia transmis n puls (excepie fac cristalele plastice n care moleculele continu
s se rostogoleasc). Din acest motiv, timpii de relaxare spin-reea sunt foarte mari iar timpii
de relaxare spin-spin sunt foarte mici. Pentru c benzile sunt largi, realizarea saturrii necesit
puteri foarte mari de radiofrecven.
Comparativ, dac RMN n puls la lichide folosete surse de radiofrecven de civa
wai, RMN n puls pentru solide necesit puteri de civa kilowai [142].
[139] Fyfe Colin A., Lewis Andrew R., Investigation of the Viability of Solid-State NMR Distance
Determinations in Multiple Spin Systems of Unknown Structure, The Journal of Physical Chemistry B, p.
48-55, Volume 104, Issue 1, January 13, 2000.
[140] Fuchs Beate and Scheler Ulrich, Branching and Cross-Linking in Radiation-Modified
Poly(tetrafluoroethylene): A Solid-State NMR Investigation, Macromolecules, p. 120-124, Volume 33,
Issue 1, January 11, 2000.
[141] Ebsworth A. V., Rankin D. W. H., Cradock S., Structural methods of inorganic chemistry, Blackwell
Scientific, Oxford, 1992.
[142] Li Y., Wolters A. M., Malawey P. V., Sweedler J. V., and Webb A. G., Multiple Solenoidal Microcoil
Probes for High-Sensitivity, High-Throughput Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy, Analytical
Chemistry, p. 4815-4820, Volume 71, Issue 21, November 1, 1999.
278
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
(18)
unde ge este factorul electronic i are valoare de constant universal, ge = 2.00232, B este
magnetonul Bohr B = 9.2740210-24JT-1 iar ms este orientarea momentului magnetic al
electronului (numite stri de spin sau stri) i are valorile ms = . Starea cu ms = se
(19)
Dac o prob n cmp magnetic este expus unei radiaii electromagnetice, rezonana
va avea loc cnd h = E. Rezonana electronic de spin (RES) se aplic moleculelor ce
conin electroni impari [143] Se aplic o radiaie electromagnetic de frecven fix (radiaie
monocromatic) i se variaz intensitatea cmpului magnetic B.
Uzual se folosesc radiaii electromagnetice cu frecvena de 10GHz (1010Hz) i
cmpuri magnetice cu o intensitate de 0.3T. Pentru o radiaie cu frecvena = 1010Hz,
lungimea de und este = c/ = 3cm, i radiaia este n domeniul microundelor. Din acest
motiv, RES este o tehnic de microunde (fig. 11). Tehnicile de rezonan magnetic
prezentate necesit o aparatur sofisticat i condiii de lucru deosebite i din acest motiv n
sinteza i caracterizarea de noi compui deseori se efectueaz o analiz preliminar a
topologiei moleculare prin studii de corelaie [144].
[143] Subramanian S., Murugesan R., Devasahayam N., Cook J. A., Afeworki M., Pohida T., Tschudin R. G.,
Mitchell J. B., Krishna M. C., High-Speed Data Acquisition System and Receiver Configurations for
Time-Domain Radiofrequency Electron Paramagnetic Resonance Spectroscopy and Imaging, American
Society, JMRE, p. 379-388, Volume 137, Issue 2.
[144] Diudea Mircea, Gutman Ivan, Jntschi Lorentz, Molecular Topology, Nova Science, Huntington, New
York, 332 p., 2001, ISBN 1-56072-957-0, http://www.nexusworld.com/nova/1271.htm.
Chimie Analitic i Instrumental
279
Fie X o mulime de n valori x1, x2, , xn. Pentru calculul valorii medii, cei mai folosii
indicatori n practica prelucrrii statistice a datelor sunt urmtorii:
Media Aritmetic, AM(X), dat de:
n
AM(X) =
x
i =1
(1)
x1 + x 2
2
x
i =1
Xi > 0
exp(AM(ln(X))
(2)
x1 x 2
x
i =1
= 1/AM(1/X)
(3)
[145] http://www.emory.edu/CHEMISTRY/faculty/menger.html
[146] alea = zar n l. latin
Chimie Analitic i Instrumental
281
21
2
1 1
+
x1 x 2
EM(X) =
x
i =1
2
i
= AM(X 2 )
(4)
x12 + x 22
2
X n + X n 2, pentru n par
( )
( +1)
2
m(X) = 2
X n +1 , pentru n inpar
( 2 )
(5)
aici nsemnnd c X este ir ordonat ale valorilor xi adic valorile sunt aranjate prealabil
ntr-o ordine cresctoare ( permutare a irului de numere 1..n).
n general, M(X) semnific oricare dintre valoarile medii menionate (1-5).
Moda X reprezint valoarea din ir care respect condiia ca frecvena sa de apariie fi sa fie
maxim:
X = {X i |f i = sup{f j ,1 j n}}
(6)
(7)
fiind toate egale ntre ele doar pentru irul banal: X1 = ... = Xn.
Media aritmetic AM(X), armonic HM(X) i eulerian EM(X) sunt cazuri particulare
(p = 1, p = -1, i respectiv p = 2) al mediei putere (sau Hlder) PM(X):
1/ p
1 n
PM(X,p) = X i p
n i =1
(8)
Mediile artimetic AM(X), armonic HM(X) i geometric GM(X) sunt cunoscute sub
numele de mediile pitagorice, datorit proprietii acestora ilustrate de figura 1.
282
n fapt, n relaia (7) mai exist un termen (s-l numim termen central), i anume
media aritmetico-geometric AGM(X), definit recursiv de relaiile (9):
AGM(X,0) = ( AM(X), GM(X) );
AGM(X,k+1) = ( AM( AGM(X,k) ), GM( AGM(X,k) ) ), k 1;
(9)
AGM(X) = AGM(X,)
i cei doi termeni din definirea recursiv a AGM(X) converg unul spre cellalt i spre
valoarea limit AGM(X) cnd k.
Cu AGM(X), relaia (7) devine:
min(X) HM(X) GM(X) AGM(X) AM(X) EM(X) max(X)
(10)
(11)
unde funcia este extensia funciei (n) = (n-1)! la numere reale (numit forma integral
Euler), i anume acea funcie care respect relaia (x) = (x-1)(x-1):
(x) = t x 1e t dt
0
(12)
Eroarea
(13)
Aceasta poate fi negativ (cnd A>Xi), zero sau pozitiv. i n cazul n care variabila
este o valoare medie, se exprim eroarea absolut a acesteia (), analog:
= X -A
(14)
283
21
XA
A
(15)
unde cu X s-a o valoare msurat notat fie xi fie X . De exemplu, cnd X = 2A se poate vedea
c = 1. Pentru a se putea exprima raportul care exist ntre valoarea erorii relative () i cea
adevrat (A) n pri din 100 se recurge i la o exprimare procentual prin eroarea relativ
procentual notat (%), care este legat de prima prin: (%) = 100.
284
preciziei analizei chimice iar un numr prea mare de cifre ar da o imagine falsa asupra
rezultatului.
Prin definiie, numrul de cifre semnificative reprezint numrul de cifre dintr-un
numr, n afar de zerourile din faa sau de la coada numrului respectiv. De exemplu,
numrul 2.718 are 4 cifre semnificative iar 96.496 are 5 cifre semnificative. Dar, numrul
0.31910 are doar 4 cifre semnificative (deoarece primul i ultimul zero nu seconsidera
semnificative) sau numrul 0.000408 are trei cifre semnificative (zero dintre 4 i 8 nefiind n
faa sau la coada numrului respectiv se consider). Una dintre sursele de confuzie o
constituie adesea zerourile din coad. De aceea se prefer scrierea sub form exponenial
cnd se prezint mai clar numrul de cifre semnificative. De exemplu dac un numr rezultat
dintr-o msurtoare este scris:
n cazul adunrii i scderii exist o regul mai simpl, anume rezultatul trebuie s aib
acelai numr de cifre semnificative cu cel mai imprecis numr implicat n calcul.
De exemplu,
14.72 + 1.4331 - 0.0235 = 16.13
pentru c primul numr 14.72 este cel mai imprecis.
285
21
De exemplu dac o msurtoare are drept rezultat 52.3 uniti oarecare nseamn c
eroarea este de 0.1 uniti ceea ce ar corespunde unei erori relative de 0.1/52.3 adic de
0.00191. Dac intenionm s ridicm acest numr la ptrat se va obine eroarea relativ,
= 1.410.00191. Dar cum 52.32 = 2735.29, eroarea relativ calculat corespunde de fapt
unei erori absolute de
2735.250.00271 = 7.4 = 10 uniti
Aadar, limita preciziei acestei determinri este 10 iar rezultatul se va prezenta 2.74103.
Dar cum n practic acest mod de a proceda este incomod se poate renuna la aceast cale.
Dar se va ine cont c rezultatul trebuie s aib cel mult acelai numr de cifre
semnificative cu cele dou cifre supuse nmulirii. Sau i mai bine se poate urma regula de
rotunjire a rezultatului la acelai numr de cifre semnificative cu cea mai imprecis dintre
cantitile implicate n calcule.
Referitor la rotunjiri, dac dup ultima cifr semnificativ mai apare un numr mai
mare ca 5, aceasta se va rotunji prin adaus, dac aceasta este o cifr mai mic dect 5,
rotunjirea se face prin scdere. Cnd ultima cifra este exact 5 se execut rotunjirea n funcie
de cifra precedent acesteia. Dac precedenta este impar se rotunjete prin adaus iar dac
cifra precedent este par, prin scdere, pentru a se media efectele rotunjirilor.
286
Elemente de statistic
Prelucrarea datelor rezultate din msurtori prin analize instrumentale este foarte
strns legat de statistica matematic prin caracterul aleator [147] al acestora. Exist dou
ramuri ale statisticii aplicate, statistica descriptiv i statistica inductiv.
Statistica descriptiv este utilizat pentru descrierea naturii datelor experimentale.
Statistica inductiv este util n practic pentru ca datele nregistrate conform
statisticii descriptive s poat cpta un sens practic, anume o afirmaie, o prezicere sau o
decizie referitoare la a cestea. Deci, rezultatele se comunic n conformitate cu regulile
statisticii descriptive iar utiliznd statistica inductiv se interpreteaz n final rezultatele.
Prin natura msurtorilor instrumentale acestea implic apariia unor erori. Acestea se
deosebesc i prin implicaiile statistice ale acestora:
Erorile sistematice:
Indic faptul c metoda nu se poate aplica fr o prealabil corecie;
Sunt caracterizate prin aceea c erorile msurtorii au aceeai mrime i acelai sens.
Erorile ntmpltoare:
i au originea n limitele metode (performanele tehnice) care duc la o lips de precizie
a acestora;
[147] Caracter aleator se atribuie unui fenomen ntmpltor sau supus legilor hazardului.
[148] Se poate asocia msurtoarea instrumental care duce la un rezultat cu un eveniment aleator.
Chimie Analitic i Instrumental
287
21
6, %:
100
/6
5, %:
100
/6
Frecventa de aparitie
1, %:
100
/6
2, %:
100
/6
1-6:
100%
4, %:
100
/6
3, %:
100
/6
5
4
3
2
1
1
Fig. 1. Probabilitile de
apariie a unuia dintre
numerele de pe feele
unui zar cu 6 fee (1/6)
1.5
2.5
3.5
4.5
5.5
(x ) )
1
P ( x,, ) =
exp(
2 2
2
2
(16)
0.08
0.06
N(x,0,)
N( x , 0 , 5 )
0.04
x
0.02
15
10
0
x
10
15
Fig. 3. Aspectul unei distribuii normale Gauss N(x,0,5) - adic = 0 i = 5, graficul din
stnga i N(x,0,) cu -12 x 12 i 1 9 - adic = 0, graficul din dreapta)
288
x
i =1
; = 2 ; 2 =
(x
i =1
(17)
0.12
0.12
0.1
0.08
0.06
P ( x)
0.04
0.02
0
0
-3
-2 -1
12
16
20
24 g
24
3
Fig. 4. Aspectul distribuiei unui rezultat analitic x, cu media = 12g i abaterea standard
de = 4g; valoarea funciei pentru x= - punctele de inflexiune ale graficului acesteia
Se constat c valorile delimiteaz nite suprafee ale ariei de sub curb (v. fig. 4),
anume ariile corespunztoare:
289
21
se poate utiliza curba de distribuie normal pentru a se prezice ct de probabil are loc un
anumit eveniment;
aceast distribuie furnizeaz o metod util pentru controlul de calitate industrial, unde de
regul se ntlnesc seturi mari de date.
Cazul numrului redus de msurtori
Pentru caracterizarea unor seturi reduse de date se folosesc alte mrimi - media de
selecie, notat x , i dispersia de selecie, s2:
(x
n
x = x i /n , s 2 =
i =1
i =1
n 1
, s = s2, s2 = 2n/(n-1)
(18)
Proba de analizat este reprezentativ pentru ntreaga populaie? Cu alte cuvinte valorile se
distribuie n jurul mediei pur ntmpltor sau aceast distribuie este deviat - termen
utilizat de statistic pentru a indica un factor cu influen semnificativ (vezi Anexa V).
Dac am realizat o selecie nentmpltoare sau deviat din mulimea tuturor analizelor
posibile, diferenele observate afecteaz rezultatul semnificativ sau nu.
Pentru a se putea verifica statistic apariia unor valori sau rezultate deviate, n afara
mediei de selecie i a deviaiei standard de selecie menionate anterior, se mai utilizeaz:
numrul de grade de libertate df (in locul valorii n), abaterea standard a mediei de selecie
100 s x
s
sx
, CV = x , RSD =
(19)
x
x
n
*: Trebuie s acordm o atenie mare numrului de grade de libertate (df) a crui importan
este major n cazul seleciilor mici. Astfel, ng = n - (numrul de parametrii calculat din datele
seleciei). De exemplu, dac se fac 10 msurtori la calculul s2 se folosete un singur
parametru calculat din datele seleciei - media. Deci avem 10-1 = 9 grade de libertate, adic df
= 9. n cazul unei regresii bazat pe ecuaia y = ax + b unde a i b se calculeaz din datele
seleciei vom aplica acelai principiu, adic df = 10 - 2 = 8.
df = n-1*, s x =
ntreaga problem a lumii n care trim este aceea c nebunii i fanaticii sunt ntotdeauna att de siguri pe ei,
iar oamenii detepi att de plini de ndoieli
Bertrand Russell (1872 - 1970), filozof britanic
290
Una dintre numeroasele aplicaii practice ale statisticii matematice este verificarea
ipotezelor. S consideram o repartiie unidimensional cu densitatea de repartiie:
f(X, 1, 2, )
(20)
care depinde, n afar de variabila aleatoare X = {x1, x2, , xk}, de unul sau mai muli
parametrii constani, i. n anumite cazuri practice trebuie verificat dac parametrii repartiiei
cercetate (de exemplu msurtorile efectuate) au anumite valori ateptate. n ali termeni,
aceasta nseamn a verifica dac se respect o anumit distribuie, evident asupra creia neam fixat, sau dac se modific unul din parametrii i ai distribuiei (20) n urma unei
intervenii experimentale.
De exemplu, trebuie verificat dac rezultatele date de un anumit instrument de
monitorizare are o distribuie normal (sau de alt tip). n limbaj statistic, un astfel de test
recurge la verificarea ipotezei de zero - n general o afirmaie n care credem i pe care
sperm, dup caz, ca testul s o confirme sau sa o infirme. n cazul de fa aceasta se
formuleaz astfel: H0: parametrul 1 al repartiiei cercetate ia valoarea 0. Aceast ipoteza
are o singur alternativ, H1: parametrul 1 ia o valoare diferit de 0, fr ns a preciza ce
valoarea ia parametrul respectiv n realitate. De asemenea prin testul respective nu se poate
gsi ce alt distribuie s-ar potrivi cel mai bine pentru rezultatele experimentale obinute.
S-au un alt exemplu tipic este cel al unui cercettor interesat de faptul c viteza de
reacie a unui ofer depinde de consumul de alcool. n acest caz, notndu-se cu 1 timpul
mediu de rspuns la auzul unui semnal sonor, dup ce oferii au consumat alcool, iar cu 2
timpul mediu de rspuns n lipsa consumului de alcool, ipoteza de zero implic faptul c
parametrul 1-2 este zero iar formularea se face astfel:
H0: 1-2=0 (sau H0: 1=2) cu alternativa H1: 1-20
Ipoteza de zero este o ipoteza a lipsei diferenelor ntre parametrii caracteristici ai
populaiilor sau ntre mrimile comparate prin testare, care adesea se sper s fie infirmat.
Cuvntul de zero din denumirea ipotezei de zero simbolizeaz tocmai faptul c prin respectiva
ipotez se admite lipsa oricrei diferene. n cazul menionat mai sus, dac datele
experimentale vor indica o diferen destul de mare ntre cele dou medii, adic este adevrat
faptul c alcoolul are o influen asupra mediei vitezei de reacie, atunci ipoteza de zero poate
fi respins i, implicit, admis ipoteza alternativ, cea n care crede cercettorul, H1.
Observaie
Dac testul statistic se refer la unul dintre parametrii i ai legii de probabilitate f(X,
1, 2, ), atunci testul se numete parametric. Dac se refer la o lege de probabiliti f se
numete test de concordan.
Chimie Analitic i Instrumental
291
21
Testul t este unul dintre cele mai cunoscute i utilizate teste statistice bazat pe o
distribuie cunoscut n statistica matematic, distribuia t [149]. Una dintre aplicaii const n
compararea a dou medii.
Fie X o variabil aleatoare care const n rezultatele unei msurtori instrumentale
nemodificate (1) i modificate (2) asupra unei probe. S considerm c aceast msurtoare
urmeaz legea normal N(x, , ) n care ambii parametrii i sunt necunoscui. Ipoteza de
zero admis pentru aceast caracteristic este aceea c ambele metode duc la acelai rezultat
mediu, adic H0: m1 = m2 iar ipoteza alternativ H1: m1 m2, unde cu m1 respectiv m2, s-au
notat valorile medii obinute experimental n cazurile amintite.
Seleciile empirice (adic rezultatele concret msurate) n cele dou cazuri se vor nota:
S1={x1', x2', ..., xn'} i S2={x1", x2", ..., xm"} unde n poate s difere de m. Mediile valorilor
experimentale m1 i m2 i dispersiile de selecie s12 i s22 corespunztoare celor dou selecii
S1 i S2 se vor calcula astfel:
m1 = xi'/n; m2 = xi"/m; s12 = (n-1)-1(xi'-m1)2; s22 = (m-1)-1(xi"-m2)2;
(21)
pe care le considerm selecii din dispersii diferite - necunoscute. Testul t recurge la calculul
urmtoarei valori t care delimiteaz domeniul critic (pe baza datelor experimentale):
t exp =
m1 m 2
(22)
s12 s 22
n m
Dac texp < t,/2, unde reprezint numrul gradelor de libertate iar coeficientul de risc
(quantila) atunci se admite ipoteza H0. n caz contrar se accept ipoteza alternativ, H1
Precizri
s12 s 22
+
n m
(23)
[149] Vezi un manual didactic de statistic, de exemplu: Potra G. T., Probabiliti i Statistic Matematic.
Procese Stochastice, Transilvania Press, Cluj-Napoca, 2003, p.111.
292
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Valoarea - coeficientul de risc - se fixeaz n tehnic pe valoarea = 0.05 acceptabil n majoritatea cazurilor obinuite (deci, /2 = 0.025), care implic o probabilitate
procentual de a accepta o ipotez fals de 5%.
Dac dispersiile se consider egale, = n'+n"-2.
Numrul de determinri (n' si n") trebuie s fie mic, ntre 5-30 determinri. Valoarea
t,/2 se va scoate din tabele disponibile n majoritatea crilor specializate n statistic sau se
calculeaz folosind o aplicaie ce posed nucleu de calcul statistic (ca Excel). Se d mai jos o
poriune redus dintr-un astfel de tabel (tabelul 1).
Tabelul 20.1. Valori ale funciei de repartitie t (Student)
4
5
6
7
8
9
10
t,/2; = 0.05 2.776 2.571 2.447 2.365 2.306 2.262 2.228
Definiii
Quartila (sau cuartila) este una din cele 3 valori care mpart un set de date ordonat
strict n 4 pri egale, astfel nct fiecare parte s reprezinte o ptrime din populaie. Valorile
quatilelor aparin setului de date.
Astfel, prima quartil (notat Q1), quartila inferioar, taie superior cele mai mici 25%
dintre valorile irului de date, i se mai numete percentila 25; a doua quartil (notat Q2),
mediana, taie datele n dou, i se mai numete percentila 50; a treia quartil (notat Q3),
quartila superioar, taie inferior cele mai mari 25% dintre valorile irului de date (i taie
superior cele mai mici 75% dintre valorile irului de date), i se mai numete percentila 75.
Diferena dintre quartila superioar i quartila inferioar se numete domeniu interquartilic.
Quantila a k-a din m este acea valoare a lui X=x1...xn (xk) care corespunde frecvenei
cumulative k/m. Dac m = 4 atunci quantila se numete quartil iar dac m = 100 se numete
percentil.
Teste de eliminare a rezultatelor ndoielnice
Uneori, dup efectuarea unor msurtori, prin examinarea vizual a rezultatelor pare
evident c unul sau dou dintre rezultate se abat mult de la grupul de valori obinute i putem
fi tentai (pentru a obine un rezultat ct mai bun) s le eliminm. Dar pe ce baz (riguroas)
se poate face acest lucru? Privind lucrurile statistic, pentru eliminarea acestora, se poate
admite c probabilitile de apariie ale datelor ndoielnice sunt mai mari dect cele admise
teoretic. n fig. 5 se prezint o ilustrare a cazului probabilitii anormale pentru astfel de valori
ndoielnice.
293
21
0.12
0.12
Date ndoielnice
0.1
0.08
0.06
P ( x)
0.04
0.02
0
0
-3
-2 -1
12
16
20
24 g
24
3
(24)
n continuare, dac M > 4 punctul se respinge iar dac M 4 nu. Metoda amintit
(regula erorilor uriae) este un test statistic grosolan dar care se bazeaz de fapt pe distribuia
statistic t descris n cele ce urmeaz.
O a doua cale, mai riguroas, este aanumitul test Q (sau testul Dixon) pentru care se
presupune c se cunoate media i deviaia standard iar datele se consider distribuite
normal. Testul trebuie aplicat o singur dat pentru un rezultat ndoielnic considerat prea
mare (prin simpl inspecie vizual a datelor) i o singur dat pentru altul prea mic (fa de
tot ansamblul msurtorilor). Testul const n calculul parametrului Q, dup ecuaia:
Qexp = |Xa-Xb|/R
(25)
unde R este domeniul rezultatelor msurtorii (de exemplu, dup ce am aezat rezultatele n
ordinea cresctoare iar X1 este cel mai mic i Xn, cel mai mare, R = Xn-X1), Xa este rezultatul
suspect iar Xb este rezultatul cel mai apropiat de Xa (dar nesuspectat). Dup calculul Qexp
punctul se elimin cu o siguran de 90% dac valoarea Qexp este mai mare dect valoarea
corespunztoare din tabelul cu valori critice (tabelul 2).
Tabelul 2. Valori de decizie pentru testul Q (Dixon) corespunztoare intervalului de
ncredere cu probabilitatea (sigurana) de 90%*
n
3
4
5
6
7
8
9
10
Q
0.94
0.76
0.64
0.56
0.51
0.46
0.44
0.41
*Desigur, valorile din tabel se modific cu probabilitatea considerat dar cu ct sigurana
crete (95 sau 99%), cu att punctul se elimin mai rar.
294
Dac ntre caracteristicile Y (de ex. concentraia unui anumit component), X1, X2, ...,
Xn (de exemplu semnale) studiate simultan pentru un anumit tip de probe (din mediu, sau
materiale supuse analizei chimice) se constat c exist o legtur foarte strns, apropiat de
una funcional, se poate aplica analiza de regresie [150]. Aceasta permite aflarea unei ecuaii
de regresie - o funcie care nlesnete calculul uneia din caracteristicile amintite (de exemplu
concentraia uneia din specii pe baza celorlalte mrimi msurate) cu erori evaluabile. Cu ct
numrul de puncte (n spaiul multidimensional) este mai mare cu att mai mare va fi
ncrederea n ecuaia stabilit.
Din cauza erorilor ntmpltoare, care apar practic ntotdeauna, legtura dintre factorii
ce afecteaz semnalul analitic este una statistic (mai precis stochastic). De aceea, se
ncearc stabilirea prin procedee de interpolare a valorilor Y din distribuia Y(X1, X2, ..., Xp)
realizndu-se o apropiere de legtura funcional (ideal) de la cea statistic (real). Aadar
printr-o astfel de analiz se gsete un model matematic util n practic, aparent fr un suport
fenomenologic (un anumit model fizic). Totui, rezultatele cele mai bune se obin atunci cnd
se ajunge la o concordan perfect ntre modelul fizic considerat i cel matematic. De
(26)
295
21
sunt dependene liniarizabile i li se asociaz tot modelul liniar de regresie: y = az+b, unde
(27)
unde x, y sunt caracteristicile msurate de analist (adesea y este o concentraie a unui analit iar
x un semnal analitic), este caracteristica estimat de model pentru y, este eroarea relativ
iar b0 i b1 sunt coeficienii care se estimeaz cu ajutorul modelului. O tratare mai general a
metodelor de estimare a parametrilor este prezentat n anexe. n cele ce urmeaz ne vom
limita la cazul mai frecvent ntlnit adic la regresia liniar bidimensional (neponderat).
De la bun nceput trebuie amintit faptul c n acest caz se fac precizrile:
Erorile variabilei y nu depind de cele ale variabilei x (singura care este afectat de eroarea
experimental),
Toate probele etalon (standardele analitice) contribuie n mod egal la eroarea final dat de
analiza de regresie.
Se va nota n continuare:
i = yi - i; i2 = (yi - i)2
(28)
i2 = minim
(29)
este obiectivul regresiei liniare simple prin metoda celor mai mici ptrate.
Prin acest mod de tratare matematic a problemei se fac urmtoarele presupuneri
simplificatoare (fr de care modelul gsit i pierde valabilitatea):
erorile datorate regresiei provin exclusiv din erorile ntmpltoare care afecteaz semnalul
analitic msurat (y);
erorile ntmpltoare ale variabilei y sunt cam de acelai ordin de mrime i au o distribuie
normal;
[151] H. Nacu, L. Jntschi, T. Hodian, C. Cimpoiu and G. Cmpan, Some Applications of Statistics in
Analytical Chemistry, Rev. Anal. Chem., 18(6), 409-456 (1999).
296
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
(30)
(31)
(32)
n cazul de fa valorile medii M() sunt valori cunoscute, calculabile din irul de date
(x,y), iar b0 i b1 sunt variabile necunoscute, calculabile din impunerea (30).
Derivnd expresia (32) i folosind (30) se obine:
M( 2 )
M( 2 )
= b0-M(y)+b1M(x) = 0 =b1M(x2)-M(xy)+b0M(x) =
2b0
2b1
(33)
M(xy) M(x)M(y)
; b0 = M(y) - b1M(x)
M(x 2 ) M(y 2 )
(34)
297
21
Credei pe cei care caut adevrul; ndoii-v de cei care l-au gsit
Andre Gide (1869-1951)
Propagarea erorilor
(35)
va trebui calculat o nou eroare, pe care o notm y, care va fi funcie att de dimensiunile
erorilor argumentelor ct i de valorile argumentelor, adic:
y = y(1, 2, ... , m, x1, x2, ... , xm)
(36)
y
y
; err(y) = err(x i )
x i
x i
(37)
n acest caz se poate observa gsirea erorii rezultatului are la baz calculul derivatelor
pariale ale funciei y, din ec. (35), n raport cu toate variabilele acesteia i pe nmulirea
rezultatului derivatei cu valoarea erorii variabilei i corespunztoare. Suma acestor produse va
da chiar valoarea rezultatului.
S considerm n cele ce urmeaz cteva exemplificri prin cazuri mai des ntlnite n
practic.
Eroarea la adunare sau scdere
S considerm cazul sumei valorilor A i B, rezultatul fiind y. n acest caz pentru orice
calcul de forma y = A + B eroarea rezultatului va fi:
y = A+ B
(38)
(39)
(40)
10.01
= 0.0082
1215
n cazul unei diferene, mai concret n cazul citirii volumului unei msurtori de
reactiv cu biureta, unde se face o scdere ntre dou citiri - prima, cea iniial (1) i a doua,
final (2) - calculul se face, evident, identic (V = V1 - V2; V = V1 + V2).
Dac considerm un caz i mai complicat, de exemplu:
y = a + b - c, cu incertitudinile respective notate sy, sa, sb, sc
(41)
(42)
sy
a +bc
(43)
299
21
cazul unei diferene de volum mici. Dac avem, ntr-un prim caz, o eroare de citire de 0.02 ml
la un volum total de 40 ml, msurat prin diferen, nseamn c eroarea relativ a msurtorii
de volum este:
V =
Sau, cu alte cuvinte, n acest ultim caz se face o eroare de 10 ori mai mare. De aceea
trebuie evitate msurtorile care implic obinerea unor concentraii foarte mici chiar dac
sunt obinute prin diferene ale unor cifre mari. n cazurile monitorizrii poluanilor mediului
aflai, prin natura lor, n concentraii joase ne putem de aceea atepta la valori extrem de mari
ale erorilor.
Eroarea unui produs
S considerm cazul erorii aprute prin calculul unui produs: y = x1x2. Aici, eroarea
rezultatului se va calcula, n urma aplicrii ecuaiei (37):
y = 1x1 + 2x2
(44)
y
y
1 2
+
x1 x 2
(45)
Se poate observa c eroarea relativ n cazul unui produs va fi dat de suma erorilor
relative ale variabilelor.
Eroarea unui ct
i n cazul unei mpriri regula de mai sus rmne valabil. S considerm calculul
unei concentraii, C = m/V, unde m este masa si V volumul.
Considernd derivatele funciei C = C(m,V) = m/V:
m 1
m
m
= ;
= 2
V
m V V V V
300
(46)
i ntorcndu-ne la ecuaia (37) lund semnul + tot din considerarea cazului cel mai
nefavorabil [153] (sau aplicarea modului - mai corect):
C = m
1
m
+ V 2
V
V
(47)
C m V
=
+
C m V
(48)
Pentru cazul n care intervin att nmulirea ct i mprirea, anume y=a*b/c cu erorile
respective sa, sb, sc eroarea se va calcula:
2
s s s
sy = a + b + c
a b c
(49)
b
b
b
a + b a b = a a b ln(a) + b a b = a b ( a ln(a) + b )
a
a
b
a
(50)
Trecnd la dispersii:
b
b
s y = a b (s a ln(a) + s b ) = y(s a ln(a) + s b )
a
a
(51)
Eroarea relativ:
y =
sy
y
= s a ln(a) + s b
b
a
(52)
[153] n urma derivrii n raport cu variabila V, termenul al doilea ar avea semnul -. Considerand cazul cel mai
nefavorabil (erorile actioneaz n acelai sens) am scris semnul + n loc de -.
Chimie Analitic i Instrumental
301
Anexe
Anexe
Anexa 1: Ecuaia lui Bragg
Razele care interfer dup difracie, sunt prezentate pe fig. 1 cu notaiile 1 i 2. Raza
notat cu 3 pe aceeai figur este o construcie ajuttoare egal ca lungime cu raza 1 dar
deplasat astfel nct intersecia cu planul de atomi s se afle pe aceeai vertical cu raza
interseia razei 2 cu planul superior de atomi.
n felul acesta, dup cum se poate observa mai clar pe fig. 2, diferena de drum optic
dintre cele dou raze se poate afla ducnd verticale din punctul A pe razele incident i
emergent de pe planul al doilea de atomi (cu alte cuvinte trasnd segmentele AD i AB,
egale). Se poate remarca c diferena de drum este suma DC + CB. Triunghiurile ADC i
ABC fiind egale DC = CB.
2
1
3
3
D
d
CB CB
=
AC
d
303
22
Cnd o radiaie primar ptrunde prin suprafaa unei probe dintr-un material, are loc o
interaciune ntre aceasta i atomii din acel material. n final, radiaia incident este absorbit
dar, totodat, ia natere, aa cum s-a artat, o radiaie de fluorescen. Pe drumul su ctre
exterior radiaia de fluorescen, emis de ctre un anumit atom, ntlnete ali atomi (de
acelai fel sau strini) avnd loc tot attea interaciuni. Radiaia care intr n detector este
rezultatul tuturor acestor interaciuni. Absorbia radiaiei primare ct i absorbia sau
intensificarea celei de fluorescen poarta denumirea comun de efect de matrice. Asupra
acestei probleme, de loc simple, s-au aplecat de-a lungul timpului mai muli autori [154,155].
Ecuaia admis astzi drept cea mai adecvat poart numele de ecuaia lui Sherman [156].
Fr a prezenta deducia, considernd unghiurile de inciden (1), respective a celui sub care
prsete proba radiaia de fluorescen (2), cele prezentate pe fig. 3, expresia propus de
Sherman pentru intensitatea radiaiei de fluorescen este urmtoarea:
Ii =
Proba
C g (E i ,Ii )i (E)
S
i i
4sin1 (E) + (E i )
sin1 sin 2
(E) = Cii (E)
i
Ulterior Sherman a dezvoltat ntr-o alt lucrare [157] teoria a sa pentru a putea exprima
intensitatea radiaiei X emise dintr-o prob cu mai multe elemente, supuse unei iradieri cu o
surs de radiaie policromatic. Perfecionarea ulterioar teoriei lui Sherman de ctre
Sharaiwa i Fujino [158] a dus la o expresie mai general, cunoscut n literatura de
specialitate tot sub denumirea de ecuaia lui Sherman fiind folosit pentru etalonarea
majoritatii spectrometrelor de raze X moderne.
[154] von Hamos, L., Arkiv. Math. Astron. Fys. 31a, 25, 1945.
[155] Gillam, E., Heal, H.T., British Journal of Applied Physics, 3, p. 353-358, 1952.
[156] Sherman, J., ASTM Special Tech. Publ. No. 157, 1954.
[157] Sherman, J., Spectrochim. Acta. 7, 283, 1955.
[158] Shiraiwa, T., Fujino, N., Japanese Journal of Applied Physics, 5(10), p. 886-899, 1966.
304
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Anexe
Rezoluia poate fi scris ca un produs de trei factori, fiecare dintre acetia avnd n
componena lor o mrime fizic specific:
(1) eficiena coloanei - exprimat prin numrul de talere teoretice (N), (2) capacitatea
coloanei - exprimat prin factorul de capacitate (k) i
(3) selectivitatea coloanei - exprimat (pentru o pereche de substane) prin mrimea cu acelai
nume - selectivitatea notat .
Se pornete de la binecunoscuta relaie de definiie a rezoluiei pentru dou picuri
alturate, corespunztoare substanelor A i B, i se folosete tR = tM(1+k), cnd rezult
RS =
t R t R,B t R,A t M (k B k A )
=
=
w
4
4
(1)
(2)
t 2R,B
N=
(3)
2B
exprimat n funcie de picul al doilea (cazul cel mai nefavorabil) se poate scrie consecutiv:
=
2
B
t 2R,B
N
, =
t R,B
N
(4)
t M (1 + k B )
N
(5)
nlocuind n (1):
RS =
N kB kA
N kB kB kA
4 1+ kB
4 1+ kB
kB
(6)
cu scopul de a separa cei trei factori amintii la nceput. mprind apoi numrtorul i
numitorul celui de-al treilea factor la kA i nlocuind n expresia aprut raportul kB/kA cu
coeficientul de selectivitate , se obine ecuaia final:
RS =
N kB 1
4 1+ kB
(7)
adic ceea ce era de demonstrat. Primul factor depinde de eficiena coloanei, al doilea de
capacitatea coloanei iar ultimul de selectivitatea coloanei. Cu ct acetia vor fi mai mari
305
22
Se poate remarca faptul c influena factorului de capacitate pare redus. Acest lucru
este adevrat n cazul coloanelor gaz-cromatografice cu umplutur obinuit cnd k are valori
cuprinse ntre 5 i 100. n aceste condiii raportul k/(1+k) este foarte apropiat de 1 i ntradevr contribuia factorului de capacitate a coloanei asupra rezoluiei este neglijabil. Dar, la
coloanele capilare unde k ia valori cuprinse ntre 0.1 i 5 datorit micorrii accentuate a
volumului fazei staionare, efectul factorului de capacitate devine important. Acest efect este
mai clar observat de pe graficul din figura 4.
k/(1+k)
1
k
10
5
Fig. 4. Dependena raportului k/(1+k) din ecuaia rezoluiei RS n funcie de valoarea
factorului de capacitate (k)
Cu alte cuvinte, la coloanele capilare, valorile factorului de capacitate (k) coborte vor
determina diferene mult mai mari n rezoluii, fa de cazul valorilor k ridicate. Aadar, la
valori k mici (retenii reduse) separrile vor fi superioare datorit unor diferene mai
pronunate ntre rezoluii, lucru datorat i factorului de capacitate.
n rezumat rezoluia trebuie ntotdeauna privit ca o ecuaie de tipul:
Rezoluia ~ [Eficien][Capacitate][Selectivitate]
306
Anexe
Anumite substane pure, cunoscute, pot avea timpul de retenie foarte apropiat de cel
al substanei de analizat datorit unor interaciuni cu suportul asemntoare. Acestea pot fi
adesea utilizate n calitate de standard intern. Conform acestei variante se cromatografiaz
dou probe: prima, folosind proba necunoscut la care s-a adugat o cantitate fixat de
standard intern (fig. 5-stnga), i a doua, folosind o cantitate cunoscut din substana de
analizat la care s-a mai adugat aceeai concentraie cunoscut de standard intern (fig. 5dreapta). Se fac urmtoarele convenii de notare:
CX, E = concentraia cunoscut din substana X (substana de analizat) n proba etalon,
AX, E = aria msurat a picului corespunztor substanei X de concentraie cunoscut,
CS, E = concentraia standardului intern n ambele probe (identic),
AS, E = aria picului standardului intern n cazul probei etalon,
AS, N = aria picului standardului intern n cazul probei supuse analizei.
SEMNAL DETECTOR
SEMNAL DETECTOR
X, N
X, E
TIMP
TIMP
Fig. 5. Cele dou probe executate pentru o analiz prin metoda adausului standard a
substanei X; proba I (stnga) este obinut pe o prob necunoscute (X, N) iar proba II
(dreapta) este obinut folosind o prob etalon - cunoscut (X, E); n ambele cazuri este
prezent standardul intern, cunoscut, n aceeai cantitate
CS,N
AS,N
CX,N =
CS,N
AS,N
A X,N ,
CX,E
A X,E
CS,E
AS,E
CX,E =
CS,E
AS,E
A X,E
AS,E A X,N
C X,E
AS,N A X,E
307
22
Selecia deviat
Frecven
Frecven
ntreg ansamblul
femei
brbai
nlime
Selecia nedeviat
Fig. 6. Distribuia unei populaii statistice i aspectul Fig. 7. Un exemplu de deviaie este cel
introdus pur i simplu prin evaluarea
unei selecii nedeviate i a uneia deviate; se observ
c media unei selecii nedeviate este practic identic separat a nlimii femeilor i brbailor
fa de ansamblul populaiei
cu a ntregii populaii din care s-a fcut selecia
Un exemplu edificator n acest sens este nlimea oamenilor (v. fig. 7). Se tie c
nlimea populaiei umane are o valoare medie ntlnit cu o frecven maxim.
n practic apar selecii deviate datorit unui factor de influen. De exemplu n
analizele instrumentale apar deviaii n jurul limitei de detecie sau a valorilor ndoielnice n
jurul valorii medii.
Apariia deviaiilor nu este ntotdeauna un lucru nedorit. Acestea pot apare datorit
unei reale influene a unui factor (o dat prezent i alteori absent) asupra a dou submulimi
ale populaiei per ansamblu lucru care trebuie constatat experimental. Dar alteori deviaiile
pot aprea datorit unor luri incorect a probei (care devine nereprezentativ). i acest ultim
caz este bine s fie pus n eviden pentru o mai mare siguran.
308
Anexe
(8)
unde X,Y,B sunt vectorii coloan ai variabilei independente, variabilei dependente respectiv a
coeficienilor.
Au fost dezvoltate i alte metode de estimare a parametrilor, bazate pe alte funcii de
pierdere (sume de reziduuri) dup cum urmeaz:
1. R. Fisher, 1912, metoda verosimilitii maxime:
F(X, Y, B) = (1 exp((y y) 2 2) ) = (1 exp((b0 + b1x y) 2 2) )
(9)
(10)
(11)
y = bi x i
(12)
i =0
= bi x ij y j = min
j=1 i = 0
(13)
b k
p i i
b x j y j = 0, k = 0, p
j=1 i = 0
(14)
i =0
j=1
j=1
p
k = 0, p
(15)
dat de ecuaia:
B = CZ-1
(16)
[159] H. Nacu, L. Jntschi, T. Hodian, C. Cimpoiu and G. Cmpan, Some Applications of Statistics in
Analytical Chemistry, Rev. Anal. Chem., 18(6), 409-456 (1999).
Chimie Analitic i Instrumental
309
22
unde:
N
Z = (z ik ) 0i p = ( x kj x ij ) 0i p i CT = (c k )0 k p = ( x kj y j )0 k p
0 k p
j=1
0 k p
(17)
j=1
Mai concret, dac n urma unei determinri prin analiza spectral [160] dac avem p
probe, fiecare avnd cte r constitueni i determinm semnalele pe q canale (de exemplu
lungimi de und diferite), semnalele depinznd liniar de concentraii, vor duce la ecuaia:
R = CST+E
(18)
unde:
R - matricea semnalelor (rspunsurilor) pe canalele considerate n numr de q pentru fiecare
din cele p probe (dimensiune pq);
C - matricea concentraiilor celor r componeni n probe (dimensiune pr);
S - matricea sensibilitilor (dimensiune qr);
E - matricea erorilor - cu aceleai dimensiuni cu R (pq).
Deoarece n ultimul timp achiziia datelor se face n laboratoarele de analize aproape
exclusiv cu ajutorul calculatoarelor, pentru analiza chimic cantitativ metodele bazate pe
algebra liniar multidimensional i statistica multiliniar au devenit aplicaii curente.
Odat stabilii, coeficienii i erorile ce afecteaz rezultatele semnalelor pe baza
ecuaiilor de regresie, n analiza chimic se parcurge drumul invers, ecuaiile de regresie
devenind ecuaii de calibrare (corespondentul multidimensional al curbei de calibrare n dou
dimensiuni).
Tot ecuaii de regresie se obin i prin implementarea modelelor de decizie multiliniare
din domeniul inteligenei artificiale. Ecuaiile i modelele de regresie au cptat o utilizare
tot mai frecvent odat cu dezvoltarea instrumentaiei analitice computerizate. n acest
domeniu sunt nelipsite curbele de calibrare.
O noutate n analiza de regresie multiliniar (multifactorial) este analiza
componentelor principale. Dei aceasta se apropie mai mult de analiza factorial, se nrudete
foarte mult cu regresia multiliniar. Ca principiu al metodei, este o regresie liniar repetat de
un numr de ori egal cu numrul de componente principale considerat. La fiecare iteraie se
determin coeficienii componentei considerate avnd ca date de intrare XK: caracteristica
principal K, YK: reziduul provenit din iteraia pentru componenta principal (K-1) i ca date
de ieire YK+1 , reziduul provenit de la regresia YK dup XK i vectorul de coeficieni BK al
componentei principale K.
[160] D. Lorber; K. Faber and R. Kowalski, Anal. Chem., 1983, 55, 643
310
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Anexe
311
22
Mrime
Simbol
Valoare
Unitate de msur
2.99792458108
ms-1
sarcina elementar
1.60217710-19
As
constanta Faraday
F=NAe
9.6485104
Asmol-1
constanta Boltzmann
1.3806610-23
JK-1
R=NAk
8.31451
JK-1mol-1
constanta Planck
6.6260810-34
Js
NA
6.022141023
Mol-1
1.6605410-27
Kg
masa electronului
me
9.1093910-31
kg
masa protonului
mp
1.6726210-27
kg
masa neutronului
mn
1.6749310-27
kg
permitivitatea vidului
8.8541910-12
A2s2J-1m-1
permeabilitatea vidului
410-7
JA2s4m-1
raza Bohr
a0
5.2917710-11
=0e2c/2h
7.2973510-3
constanta Rydberg R
R=mee4/8h3c02
1.09737105
cm-1
acceleraia
standard
9.80665
ms-2
6.6725910-11
Nm2kg-2
constanta
Rydberg
gazelor
gravitaional
constanta gravitaional
312
ideale
Anexe
micri
tipul radiaiei
>1m
radio
rotaie
molecular
1m
microunde
1mm
10-3m
infrarou ndeprtat
vibraie
molecular
excitare
electronic
10-5m
10-6m = 1m
700nm
700-620nm
560-510nm
vizibil 450-400
10-7m
infrarou apropiat
rou
verde
Violet
ultraviolet
10-8m
Ultraviolet de vid
excitarea
miezului
electronic
10-9m = 1nm
10-10m = 1
raze X
10-11m
10-12m = 1pm
excitare
nuclear
Raze
10-12-10-13m
raze cosmice
<10-14m
313
22
Ac
1.1
Cl
Ir
2.2
Pb
1.9
Sr
Ag
1.9
Co
1.9
0.8
Pd
2.2
Ta
1.5
Al
1.5
Cr
1.6
La-Lu 1.0-1.2 Po
Tc
1.9
Ar
2.2
Cu
1.9
Li
Pt
2.2
Te
2.1
As
Cs
0.7
Mg
1.2
Ra
0.9
Th
1.3
At
2.2
Mn
1.5
Rb
0.8
Ti
1.5
Au
2.4
Fe
1.8
Mo
1.8
Re
1.9
Tl
1.8
Fr
0.7
Rh
2.2
1.4
Ba
0.9
Ga
1.6
Na
0.9
Ru
2.2
1.6
Be
1.5
Ge
1.8
Nb
1.6
2.5
1.7
Bi
1.9
2.1
Np-No 1.4-1.3 Sb
1.9
1.2
Br
2.8
Hf
1.3
3.5
Sc
1.3
Zn
1.6
2.5
Hg
1.9
Os
2.2
Se
2.4
Zr
1.4
Ca
2.5
2.1
Si
1.8
Cd
1.7
In
1.7
Pa
1.4
Sn
1.8
[163] ***, Oxford Paperback Encyclopedia, Oxford University Press, http://www.xrefer.com, /entry/214768
[164] ***, Wikipedia, The Free Enciclopedia, http://www.wikipedia.org, /wiki/Electronegativity
[165] http://www.phs.princeton.k12.oh.us/departments/science/ldusch/electronegativity.htm
[166] http://stjohns-chs.org/science/genchem/tables/electronegativities.html
[167] http://www.webelements.com/webelements/properties/text/image-flash/electroneg-allen.html
[168] http://www.ticalc.org/archives/files/fileinfo/190/19049.html
314
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Bibliografie
Bibliografie
1. *** Compendiu de Lucrri Practice: Metode fizico-chimice de analiz, Ed. Lumina,
Chiinu, 1993.
2. ***
Engineering
Statistics
Handbook,
disponibil
pe
Internet
la
site-ul:
http://www.itl.nist.gov.div989/handbook/
3. C. Luca, Al. Duca, Al. Crian, Chimie Analitic i Analiz Instrumental, EDP, Bucureti,
1983.
4. C. Pumnea, I. Dina, Fl. Sorescu, M. Dumitru i T. Niculescu, Tehnici Speciale de Analiz
Fizico-Chimic a Materialelor Metalice, Ed. Tehnic, Bucureti, 1988.
5. D.J. Pietrzyk, i C. W. Frank, Chimie Analitic, Ed. Tehnic, Bucureti, 1989.
6. E. Cordo, Analiz Instrumental, Univ. Babes-Bolyai, Cluj-Napoca, 1988.
7. E. Selin Lindgren, X-ray Fluorescence Analysis - Energy Dispersive, n Encyclopedia of
Analytical Chemistry Editor - Robert A. Meyers, John Wiley & Sons Ltd, Chichester.
ISBN 0-471-97670-9 - publicat i pe Internet.
8. F. Rouessac, A. Rouessac, Analyse Chimique, Methodes et techniques instrumentals
modernes, 3e edition, Masson, Paris, 1997.
9. G. Niac i O. Horovitz, Chimie-Fizic - ndrumtor pentru lucrri de laborator, lito.
Institutul Politehnic Cluj-Napoca, Cluj-Napoca, 1982.
10. H. Nacu, L. Jntschi, T. Hodian, C. Cimpoiu and G. Cmpan, Some Applications of
Statistics in Analytical Chemistry, Rev. Anal. Chem., 18(6), 409-456 (1999).
11. H. Nacu, Metode i Tehnici de Analiz Instrumental, Ed. U.T.PRES, Cluj-Napoca,
2003.
12. http://207.189.173.115/webdoc3.htg/Docs/00326405.pdf
13. L. Jntschi, Metrologia i monitorizarea mediului, Amici, Cluj-Napoca, 2003, 148 p.,
ISBN 973-85727-2-X.
14. L. Roman, M. Boji, R. Sndulescu, Validarea Metodelor de Analiz Instrumental, Ed.
Medical, Bucureti, 1998.
15. L. Tovissi i V. Vod, Metode Statistice, Ed. Stiinific i Enciclopedic, Bucureti, 1982.
16. Lupu, F. Grigorescu, L. Lupu, Analiza Instrumental n Metalurgie i Construcii de
Maini, Ed. Tehnic, Bucureti, 1986.
17. M. I. Baritz i P. Iordache, Msurarea i Metrologia Mrimilor Fizico-Chimice, Univ.
Transilvania Braov, 1995.
18. M. Medeleanu i M. Milea, ndrumtor de Lucrri: Metode Spectroscopice n Chimia
Organic, Universitatea Politehnica Timioara, 1998.
Chimie Analitic i Instrumental
315
23
316
Index
Index
- de cuvinte cheie -
Definiii
abatere standard a mediei de
selecie: 12
absorban: 99, 113
analiz fizico-chimic: 3
analiz semi-cantitativ: 265
capacitate de separare: 208, 305
coeficient de distribuie: 205
conductivitate echivalent: 66
conductivitate: 66
constante universale: 312
cuartil: 293
deplasare chimic: 271
domeniu interquatilic: 293
eficien: 208, 305
electronegativitate: 314
eroare: 283
exactitate: 11
factor de capacitate: 205
factor de corecie corespunztor
cderii de presiune: 225
factor de retenie: 205
factor de separare: 205
frecven Larmor: 270
indici Miller: 187
intensitatea undei
electromagnetice: 91
lime medie a picurilor la baz:
207, 305
limit de detecie: 14
mrimi cromatografice corectate:
225
median: 293, 282
medii: 281
nuclee echivalente: 273, 275
numr de cifre semnificative: 285
numr de talere teoretice: 206
numr de und: 113
numr efectiv de talere: 207, 305
obiectivul analizei: 10
percentil: 293
precizie: 12
quantil: 293
Chimie Analitic i Instrumental
quartil: 293
randamentul fluorescenei: 159
rapiditatea: 14
retenia relativ: 205
rezisten specific: 66
rezistivitate: 66
rezoluie: 207, 305
rotaie specific: 178
selectivitate: 12, 211, 309
sensibilitate: 13
serie electrochimic: 64
specificitate: 12
standarde analitice: 16
standarde de referin: 270
stoechiometrie: 19
structura fin: 273
substane standard de baz,
primar, secundar: 21
termogravimetrie: 86
timp de via al unei specii
moleculare excitate: 155
transmitan procentual: 113
transmitan: 113
ntrebri, probleme
a lumii n care trim: 291
analiza chimic de amestecuri
multicomponente prin IR: 126
analize cantitative prin
spectometria de fluorescen X:
189
conductibilitate electric a
substanelor: 66
cromatografie de afinitate: 237
de separare: 208
de verificare pentru examen: 23,
38, 53, 81, 90, 95, 112, 127,
139, 154, 166, 174, 180, 195,
211, 229, 247, 255, 266
efect de matrice: 304
electrod de calomel: 61
eantionare: 290, 308
folosire formazin: 173
informaie analitic: 3, 10
luare probe de ap: 35
pompe cu presiune constant: 237
317
cuvinte cheie
procedeu analitic: 10
speciale n absorbia atomic: 135
standard: 23
teorema Born - Oppenheimer: 115
tratare matematic date: 295
Legi, principii, relaii, ecuaii
adaos standard simplu i multiplu:
79
Bayes: 309
Boltzmann: 130
Born - Oppenheimer: 115
Bragg: 186, 303
concentraie procentual de analit:
50
conductivitate: 66
curent n funcie de timp n
poteniostatic: 71
Dixon: 294
echivalenilor: 50
eroare de picurare: 47
Euler: 283
Faraday: 71
Fisher: 295, 309
Fresnel: 244
Gauss: 288
Gladstone i Dale: 175
Golay: 223
Hooke: 116
Ilcovi: 75
Kirchhoff: 129
Kolmogorov: 309
LaChance i Trail: 193
Lambert-Beer: 101, 102
Larmor: 268
Lorenz-Lorenz: 176
Lucas-Tooth i Paine: 193
Maxwell: 176
Miller: 187
Morse: 117
Nernst: 58, 59, 62, 65
nivele energia de rotaie: 118
Ohm: 66
potenial de electrod: 60
potenial electrodul de sticl: 62
poteniostaticii: 71
proporii definite: 19
puls-polarografie: 76
Randles-Sevcik: 77
Rayleigh: 167
318
reacii stoechiometrice: 19
refracie: 175
retenie selectiv: 36
Sherman: 189, 304
van Deemter: 209, 214
Wald: 309
Walsh: 129
Noiuni introductive
polarografie: 73
spectrometria de absorbie n
infrarou: 113
baze fizice ale spectrometriei n
infrarou: 116
spectrometrie de emisie: 141
cromatografie de lichide de nalt
performan: 231
calculul mediilor: 281
calculul erorilor: 283
teoria erorilor: 285, 298
statistic: 287
teste statistice: 291
ecuaii de regresie: 294
Mrimi
abatere standard a mediei de
selecie: 290
abatere standard relativ: 290
cantitate de electricitate scurs
prin celul: 54
caracteristici unei coloane: 205
coeficient de variaie: 290
conductana soluiei din celul: 55
conductivitate echivalent: 66
constante universale: 312
cromatografice corectate: 225
cuant de energie: 92
deplasare chimic: 270
dispersie de selecie: 290
eroare relativ procentual: 284
eroare relativ: 284
fundamentale n cromatografie:
201
intensitate de curent prin celul:
55
Magnetonul lui Bohr: 275
medie de selecie: 290
numr de grade de libertate: 290
potenial de electrod: 55
putere calorific: 3
randamentul fluorescenei: 159
Horea Iustin NACU, Lorentz JNTSCHI
Index
cuvinte cheie
320
tratare cu acizi: 32
turbidimetrie: 170
vaporilor reci: 136
verificare a ipotezelor statistice:
291
voltametrie ciclic: 77
voltametrie de redizolvare
anodic: 78
voltametrie: 73
volumetrie: 45