Cuprins

Introducere
1. Caracteristica enzimelor
2. Proprietatile generale ale enzimelor
3. Nomenclatura si clasificarea enzimelor
3.1 Nomenclatura enzimelor
3.2 Clasificarea enzimelor
Concluzii
Bibliografie

Introducere

Mod Coala document. Semnat

Data

2
Proiect de an

Enzimele (din limba greac - zymosis - ferment) sunt proteine sau

proteide fr de care celule vii nu pot nfptui reac ii complexe ntr-un timp
scurt, la temperatura mediului nconjurtor. Ele sunt substan e care catalizeaz
reac iile biochimice din organism, avnd un rol esen ial n biosinteza i
degradarea substan elor din materia vie, ntlnindu-se n toate organismele
animale, vegetale i n microorganisme, mai fiind denumite din aceast cauz
biocatalizatori. Fr enzime, procesele biochimice s-ar desf ura cu viteze
foarte mici.
In organismele vii, mii de reactii chimice se desfasoara foarte rapid in
conditiile de presiune si temperatura ale acestuia. Toate aceste transformari
sunt mediate de enzime (denumite initial fermenti sau diastaze) , proteine
specializate sa catalizeze reactiile metabolice.
Substantele transformate in aceste reactii se caracterizeaza printr-o tendinta
limitata de reactie "in vitro" in aceleasi conditii cu cele din organism.
De exemplu, oxidarea glucozei in celule se realizeaza rapid, glucoza
fiind un compus ce inmagazineaza o mare cantitate de energie prezentand un
anumit potential termodinamic, desi in laborator, in aceleasi conditii ca cele
din organism, aceasta este stabila in prezenta oxigenului.
Astfel de procese, favorabile termodinamic, pot decurge cu viteze crescute
datorita actiunii catalitice a enzimelor.
Enzimele sunt fundamentale n toate procesele ce au loc n organism:
digestia alimentelor, procesele de obinere a energiei, mecanismele de aprare
i multe altele.
Pentru ca rezervele acestor substane s se menin constante, este
necesar s consumm alimente sntoase, nu devitalizate, cu aport adecvat de
elemente nutritive, preferabil provenite din culturi organice, care s ne
furnizeze elementele necesare pentru a forma enzime n cantiti adecvate i de
calitate optim.

1. Caracteristicile enzimelor
Mod Coala document. Semnat

Data

3
Proiect de an

Enzimele pot fi definite biocatalizatori care prezinta urmatoarele trasaturi

caracteristice:
1. Enzimele au o putere catalitica enorma accelerand viteza reactiilor cu pana
la 10 1 6 fata de viteza reactiei necatalizate. Aceasta capacitate depaseste puterea
oricarui catalizator folosit in sinteza organica. Enzimele au aceasta imensa
putere catalitica in solutii diluate, in conditii moderate de pH si temperatura.
Puterea catalitica poate fi definita ca raportul intre viteza reactiei catalizate
si viteza reactiei necatalizate enzimatic.
2. Enzimele nu se consuma si nu se transforma in reactiile catalizate.
3. Enzimele se caracterizeaza printr-o mare specificitate . Orice enzima este
foarte selectiva atat in ceea ce priveste substanta pe care o transforma
(substrat) cat si din punctul de vedere al reactiei catalizate.
E (enzima)

Transformarea S

P(produsi)

se desfasoara fara reactii secundare, astfel ca rezulta numai compusii doriti.

Prin aceasta actiune enzimele se deosebesc de catalizatorii din chimia
organica, reactiile desfasurate in absenta enzimelor avand randamente mai
scazute si fiind insotite de reactii secundare.
4. Enzimele scad energia de activare a moleculelor de substrat pe care le
transforma accelerand astfel viteza reactiei biochimice.
5. Capacitate de reglare . Reglarea activitatii enzimatice se realizeaza in
moduri diferite ce variaza de la controlul cantitatii de enzima sintetizate de
celula pana la modularea activitatii sale prin interactiuni reversibile cu
activatori si inhibitori metabolici. Activitatea variata a enzimelor poate fi pusa
pe seama capacitatii de adaptare structurala si functionala a proteinelor.
Enzimele contribuie astfel la coordonarea si reglarea proceselor metabolice.
7. Enzimele se gasesc in celule si actioneaza in cantitate foarte mica dar cu
efect semnificativ.
8. Enzimele pot cataliza reactiile in conditiile organismului, la temperatura de
aproximativ 37 o C, in conditii de in general neutru si la presiune atmosferica.

2. Proprietatile generale ale enzimelor

Toate enzimele cunoscute pn n prezent sunt substane de natur
proteic i ndeplinesc rol de catalizatori ai transformrilor biochimice din
Mod Coala document. Semnat

Data

4
Proiect de an

celula vie. Fiind biocatalizatori, enzimele prezint toate proprietile generale

ale catalizatorilor chimici:
- mresc viteza reaciilor chimice posibile din punct de vedere
termodinamic prin scderea energiei de activare i instalarea mai rapid a
strii de echilibru;
- activitatea catalitic se manifest la concentraii mici, mediul de
reacie coninnd concentraii relativ mari de substrat;
- la sfritul transformrii se regsesc n mediu nemodificai din punct
de vedere cantitativ i calitativ.
Fiind proteine, enzimele prezint toate proprietile fizico-chimice ale
acestor macromolecule. Din aceast cauz, metodele i tehnicile folosite n
biochimia proteinelor n general (separare, purificare, dozare etc.) se aplic i
n enzimologie. Datorit faptului c acioneaz n celula vie, enzimele mai
prezint o serie de proprieti ce difereniaz net cataliza enzimatic de cea
chimic. n primul rnd, eficiena catalitic a enzimelor este cu mult mai mare
comparativ cu cea a catalizatorilor chimici. Enzimele acioneaz n condiii
blnde de temperatur, pH, presiune osmotic etc., spre deosebire de
catalizatorii chimici care acioneaz n general, n condiii dure de reacie.
Cea mai important proprietate a enzimelor, total nentlnit n
cataliza chimic, o constituie nalta specificitate de aciune a acestora, ceea ce
nseamn c o enzim catalizeaz transformarea unui singur substrat i doar n
cazuri rare a unui grup restrns de substane nrudite structural. n funcie de
modul de manifestare, specificitatea de aciune a enzimelor poate fi de mai
multe tipuri: specificitate de reacie, de substrat, absolut de grup, relativ de
grup, stereospecificitate etc.
SPECIFICITATEA DE REACIE
Specificitatea de reacie este tipul de specificitate cel mai des ntlnit i
const n capacitatea enzimelor de a cataliza un anumit tip de reacie
biochimic. Aceast proprietate st la baza clasificrii enzimelor n ase clase
n funcie de tipul de reacie la care particip (vezi cap. II.2). Astfel, o
oxidoreductaz va cataliza un proces redox, o hidrolaz va scinda hidrolitic
substratul, iar o sintetaz va participa la o reacie n care se formeaz o nou
legtur covalent carbon carbon sau carbon heteroatom. O situaie aparte
se ntlnete n cazul proteazelor care prezint concomitent activitate
peptidazic, amidazic i esterazic. Aceste enzime catalizeaz ns reacii de
scindare hidrolitic a peptidelor, a polipeptidelor, amidelor i esterilor, aceste
reacii diferite avnd loc n acelai centru activ, dup acelai mecanism de
aciune.

SPECIFICITATEA DE SUBSTRAT
O alt proprietate a enzimelor care le difereniaz net de catalizatorii
chimici o constituie specificitatea de substrat care const n capacitatea de a
Mod Coala document. Semnat

Data

5
Proiect de an

cataliza transformarea unui singur substrat, fiind total indiferente fa de alte

substane, chiar dac sunt nrudite structural cu substratul. n procesul
catalitic, la formarea complexului enzim-substrat, enzima recunoate
conformaia structural a ntregii molecule de substrat, a unei grupri
funcionale din aceasta sau o anumit legtur chimic ce urmeaz a fi
scindat. Acest tip de specificitate este condiionat de complementaritatea
structural (spaial i/sau electronic) dintre molecula substratului i a
centrului activ al enzimei.
n funcie de mecanismul de formare a complexului enzim-substrat,
acest tip de specificitate poate fi de mai multe feluri: specificitate absolut de
substrat, specificitate relativ de substrat, stereospecificitate etc.
a) Specificitatea absolut de substrat este ntlnit la acele enzime ce
sunt capabile s recunoasc structura chimic a unei singure specii moleculare,
aceasta reprezentnd unicul substrat. De exemplu, ureaza prezint o
specificitate absolut de substrat, cataliznd reacia de scindare a ureei:

H2N C NH2

H2O

ureaza

CO2

2 NH3

O
Ureaza este ns total inactiv fa de alte substane asemntoare structural
cu ureea, sau chiar fa de derivaii ureei. Cercetri recente atest faptul c
ureaza ar putea totui cataliza i alte transformri, aceste aspecte nefiind ns
complet elucidate.
Exist un numr relativ mare de enzime implicate n reacii bimoleculare
care prezint specificitate absolut fa de un singur substrat sau fa de
ambele substrate. Exist, de asemenea, enzime care prezint grade diferite de
specificitate n funcie de sursa biologic din care au fost izolate.
b) Specificitatea relativ de substrat se ntlnete atunci cnd enzima
manifest specificitate fa de o anumit grup funcional din molecula
substratului, sau fa de anumite legturi chimice din structura acestuia, fiind
indiferent fa de restul moleculei.
Un exemplu elocvent n acest sens l reprezint fosfomonoesterazele .
Aceste enzime recunosc legtura fosfoesteric, cataliznd hidroliza esterilor
acidului ortofosforic cu alcoolii primari, secundari i ciclici, precum i unii
fosfoesteri ai glucidelor, mononucleotidelor . a.
c) Stereospecificitatea enzimelor se refer la capacitatea acestora de a
recunoate un anumit izomer geometric sau optic. Acest tip de specificitate
este foarte des ntlnit, dat fiind faptul c majoritatea compuilor bioorganici
conin atomi de carbon asimetrici, putnd deci exista sub forma celor doi
antipozi optici.
Cu mici excepii, enzimele recunosc doar unul din cei doi enantiomeri.
Aa se explic faptul c n organismele vii se ntlnesc cu precdere
monozaharidele aparinnd seriei D i respectiv L-aminoacizii.

Mod Coala document. Semnat

Data

6
Proiect de an

Exist situaii cnd o anumit enzim izolat dintr-o surs biologic este
activ fa de un anumit izomer optic, iar aceeai enzim izolat din alt surs
recunoate antipodul optic al acestuia. De exemplu lactat-dehidrogenaza din
muchi este activ fa de izomerul levogir al acidului lactic:

NAD+
COOH
HO C H
CH3

NADH+H+
COOH
C O
CH3

L.D.H.

L(+)lactat

piruvat

Aceeai enzim izolat din Lactobacillus plantarum catalizeaz oxidarea

acidului D(+)-lactic:
+

NAD

NADH+H

COOH
H C OH

COOH
C O

CH3

L.D.H

CH3

D(+)lactat

piruvat

Stereospecificitatea se manifest i n reaciile n care substratul are o

molecul simetric, iar produsul transformrii conine atomi de carbon chirali.
n asemenea cazuri se realizeaz aa numita sintez asimetric , adic se
formeaz ntotdeauna un singur izomer optic i nu amestecul racemic cum se
ntmpl n sinteza chimic organic. De exemplu, prin carboxilarea propionilCoA, care este o substan optic inactiv, se formeaz ntotdeauna metilmalonil-CoA optic activ:
CO2

ATP

ADP + Pi

CH3
CH2
C S CoA

CH3
propionil-CoA-carboxilaza

propionil-CoA

Mod Coala document. Semnat

H C COOH
C S CoA
metil-malonil-CoA

Data

7
Proiect de an

O clas special de enzime o constituie racemazele care acioneaz

asupra ambilor enantiomeri cu formare de amestecuri racemice. De exemplu
alanin-racemaza poate aciona att asupra L(+)-alaninei ct i D(-)-alaninei
formnd amestecul racemic D,L-alanin:

COOH
H2N C H
CH3
L (+) alanin

COOH
H C NH2
CH3
L () alanin

3. NOMENCLATURA I CLASIFICAREA ENZIMELOR

3.1 NOMENCLATURA ENZIMELOR
Din punct de vedere chimic, enzimele pot cataliza reacii cu un singur
substrat, respectiv cu dou sau chiar mai multe substrate. Nomenclatura
general a reaciilor enzimatice a fost conceput pentru a descrie un numr de
substrate i produi implicai n reaciile enzimatice, utiliznd prefixele latine
Mod Coala document. Semnat

Data

8
Proiect de an

uni, bi, tri .a.m.d. cu referire la una, dou, trei sau mai multe specii
moleculare. De exemplu, o reacie care utilizeaz dou substrate pentru a
produce doi produi este o reacie de tip bi bi , o reacie la care particip trei
substrate pentru a forma doi produi este o reacie de tip tri bi , .a.m.d.
(tabelul I).
Tabelul I
Tipuri de reacii enzimatice n funcie de numrul de substrate i produi de
reacie
Schema reaciei
Tipul reaciei
S P
Uni uni
S 1 + S 2 P
Bi uni
S 1 + S 2 P 1 + P 2
Bi bi
S 1 + S 2 + S 3 P 1 + P 2
Tri bi
Primele enzime descoperite au fost denumite dup criterii ntmpltoare, fiind
utilizat, cel mai adesea, adugarea sufixului aza la numele substratului a crei
transformare o catalizeaz ( ureaza, amilaza, proteaza etc.). Dup descoperirea
unui numr relativ mare de enzime, s-a observat c exist mai multe proteaze,
amilaze etc. Pe de alt parte, denumirile respective nu ddeau nici o informaie
asupra tipului de reacie, iar n unele cazuri ( tripsina, pepsina, ficina, catalaza
etc.) nici asupra naturii chimice a substratului.
Din aceste motive s-a impus ca o necesitate obiectiv introducerea unui
nou tip de nomenclatur a enzimelor. Acest lucru a fost realizat prima dat n
1964 cnd Comisia de Enzimologie a Uniunii Internaionale de Biochimie
(IUB) elaboreaz normele ce stau la baza nomenclaturii i clasificrii
enzimelor. Conform acestor norme denumirea enzimelor trebuie s reflecte
numele substratului supus transformrii sau numele produsului de reacie i
tipul de reacie catalizat de fiecare enzim n parte, urmate de sufixul aza.
De exemplu catalaza are denumirea sistemic H 2 O 2 :H 2 O 2 -oxidoreductaza ceea
ce nseamn c substratul reaciei este apa oxigenat care sufer o reacie de
oxidoreducere, o molecul de substrat reprezentnd donorul, iar cealalt
acceptorul de electroni. n mod similar celulaza are denumirea sistemic -1,4glucan-glucanohidrolaza , iar invertaza sau zaharaza se numete fructofuranozid-fructohidrolaza.
Pentru unele enzime se pot utiliza i denumirile triviale atunci cnd
acestea au intrat deja n uz, iar modificarea lor ar genera confuzii ( tripsina,
pepsina, renina etc.).
Denumirile uzuale se mai folosesc i atunci cnd denumirile sistemice
sunt prea lungi, iar utilizarea repetat a acestora ar fi deranjant din punct de
vedere stilistic. n asemenea cazuri ns trebuie menionat cel puin odat
denumirea tiinific nsoit de codul numeric al enzimei dup care se poate
folosi denumirea trivial.

Mod Coala document. Semnat

Data

9
Proiect de an

3.2 CLASIFICAREA ENZIMELOR

Odat cu creterea numrului de enzime descoperite i studiate sub
aspectele structurii lor chimice i mecanismului reaciei catalizate, a aprut
necesitatea unei clasificri tiinifice a acestora. Astzi este valabil
clasificarea propus n 1964 de ctre Comisia de Enzimologie a Uniunii
Internaionale de Biochimie care are la baz tipul i mecanismul reaciei
catalizate (fig. 2).

Mod Coala document. Semnat

Data

10
Proiect de an

Conform acestui criteriu, enzimele cunoscute pn n prezent se clasific n

ase clase principale, enzimele cuprinse ntr-o clas cataliznd acelai tip de
reacie:
1) oxidoreductazele - enzime ce catalizeaz reaciile de oxidoreducere ce
au loc n organismele vii;
2) transferazele - enzime ce catalizeaz reacii de transfer ale unor grupe
de atomi ce pot fi i grupe funcionale de la un substrat la altul, fr ca aceste
grupri s existe libere n timpul procesului;
3) hidrolazele - enzime ce catalizeaz scindarea diferitelor legturi
covalente din molecula substratului cu participarea moleculelor de ap;
4) liazele - enzime ce catalizeaz reacii de adiie a unor grupe de atomi
la molecula substratului sau clivarea acestor grupri cu rearanjarea ulterioar a
valenelor;
5) izomerazele - enzime care catalizeaz diferite reacii de izomerizare a
substratelor;
6) ligazele sau sintetazele - enzime ce catalizeaz formarea unor noi
legturi chimice carbon carbon sau carbon heteroatom, n majoritatea
cazurilor utilizndu-se energia stocat n legturile macroergice ale
moleculelor de ATP.
La rndul lor enzimele din fiecare clas se mpart n subclase i subsubclase,
n funcie de mecanismul de reacie, natura cofactorului, tipul de legtur
chimic din substrat asupra creia acioneaz etc. n cadrul fiecrei
subsubclase, enzimele sunt aranjate ntr-o anumit ordine, n special
cronologic (cartea cu nomenclatura enzimelor).
Conform acestei clasificri, fiecare enzim este caracterizat nu numai de o
denumire ci i de un cod specific format din patru cifre: prima cifr reprezint
clasa, a doua subclasa, a treia cifr arat subsubclasa, iar ultima cifr a codului
indic numrul de ordine din subsubclasa respectiv.
Acest cod este precedat de prescurtarea E.C. ( Enzyme Commission ). De
exemplu, denumirea corect i complet a catalazei este H 2 O 2 : H 2 O 2 oxidoreductaza (EC 1.11.1.6), iar cea a enzimei cu denumirea trivial
dihidroorotaza este L-5,6-dihidroorotat-amidohidrolaza (EC 3.5.2.3).

Caracterizarea clasei oxidoreductazelor

Din numrul total de enzime cunoscute pn n prezent, aproximativ 25
% sunt enzime ce catalizeaz diferite reacii de oxidare i reducere biologic,
aparinnd clasei oxidoreductazelor. Acestea sunt implicate, n principal, n
procesele de oxidare biologic i catalizeaz reacii bimoleculare:

Aox + Bred

Mod Coala document. Semnat

Ared + Box

Data

11
Proiect de an

Denumirea sistemic a oxidoreductazelor se alctuiete prin includerea

denumirii donorului i acceptorului de hidrogen urmate de termenul
oxidoreductaza (donor:acceptor-oxidoreductaza). Atunci cnd acceptorul de
hidrogen este oxigenul, se folosete termenul de oxidaz. De exemplu,
denumirea sistemic a alcooldehidrogenazei este alcool:NAD + - oxidoreductaza
(EC 1.1.1.1), catalaza are denumirea sistemic H 2 O 2 :H 2 O 2 -oxidoreduc-taza
(EC 1.11.1.6). n acelai timp, Uniunea Internaional de Biochimie permite i
utilizarea aa-numitelor denumiri de lucru prescurtate: alcooldehidrogenaza,
malat - dehidrogenaza etc.
+

NAD
COOH
H C OH
CH3

NADH+H

COOH
C O
L.D.H

D(+)lactat

CH3
piruvat

O enzim important din aceast clas este lactat - dehidrogenaza (Llactat:NAD + - oxidoreductaza EC 1.1.1.27) ce catalizeaz reacia de conversie a
acidului lactic n acid piruvic:
Aceast reacie este implicat n fermentaiile lactice precum i n procesul
anaerob de degradare a glucidelor prin glicoliz. Determinarea activitii
acestei enzime n snge este utilizat n practica medical pentru diagnosticul
infarctului de miocard, a hepatitei virale, a anemiei pernicioase etc.
Reaciile enzimatice catalizate de oxidoreductaze care posed n calitate de
coenzim NAD + sau NADP + sunt de obicei reacii reversibile i sunt cuplate cu
alte reacii de regenerare a coenzimei. n prima reacie coenzima, care are i
rol de cosubstrat, se reduce, iar n reacia cuplat (conjugat) se regenereaz
forma oxidat a coenzimei:
NAD

Gliceraldehid-3-fosfat

Acetaldehid

Alcool-dehidrogenaza

Gliceraldehidfosfatdehidrogenaza

Acid 1-3-difosfogliceric

NADH+H

Etanol

Aceste reacii conjugate prezint o deosebit importan pentru procesele

redox ce au loc n celulele vii deoarece permit refacerea continu a
acceptorilor de hidrogen.
Caracterizarea clasei transferazelor
n transformrile biochimice catalizate de enzimele aparinnd acestei
clase, are loc clivarea unei grupe de atomi R (ce poate fi i grupare

Mod Coala document. Semnat

Data

12
Proiect de an

funcional) din structura substratului A-R i fixarea acesteia pe cel de-al

doilea substrat:

A R + B

transferaz

A +

B R

Reaciile catalizate de transferaze sunt prin urmare reacii bimoleculare, n

care un substrat joac rol de donor, iar cellalt rol de acceptor al gruprii
transferate. Din aceast cauz, denumirea sistemic a acestor enzime este de
tipul donor:acceptor-transferaza .
Dintre enzimele cunoscute pn n prezent, aproximativ 30% sunt
transferaze. Din aceast clas de enzime fac parte, de exemplu
aminotransferazele , enzime ce catalizeaz reacia unui -aminoacid cu un cetoacid, conducnd la formarea unui nou aminoacid i a unui nou cetoacid.
Din punctul de vedere al mecanismului de reacie, aceast transformare poate
fi considerat ca fiind o dezaminare oxidativ a donorului (aminoacidul)
cuplat
cu
aminarea
reductiv
a
acceptorului
(cetoacidul)
iar
aminotransferazele ar putea fi considerate i ca oxidoreductaze:
COOH

H C NH 2

C=O

H C NH 2

COOH

C=O

Aminotransferaz

R1

-Aminoacid I

COOH

COOH

R2

-Cetoacid I

R2

-Aminoacid II

R1

-Cetoacid II

Caracterizarea clasei hidrolazelor

S R + H2O

S OH + R H

Aceast clas conine aproximativ 24 % din enzimele cunoscute pn n

prezent, enzime ce catalizeaz reacia de scindare a substratului cu participarea
apei:
Dei reaciile sunt reversibile, in vivo echilibrele sunt deplasate n sensul
hidrolizei, n timp ce procesele inverse au loc, de regul, pe alte ci
metabolice. Reacii hidrolitice se ntlnesc n aproape toate cile metabolice,
hidrolazele participnd att la metabolismul glucidelor, lipidelor i proteinelor,
ct i n metabolismul produilor secundari.
Clasificarea hidrolazelor n subclase i subsubclase se face n funcie de
natura legturii chimice ce urmeaz a fi scindat. Pentru hidrolazele implicate
n scindarea hidrolitic a diferitelor tipuri de esteri este intrat n uz
denumirea generic de esteraze. O esteraz foarte cunoscut este lipaza a crei

Mod Coala document. Semnat

Data

13
Proiect de an

denumire sistemic este triacilglicerol-acil-hidrolaza (EC 3.1.1.3) i care este

implicat n scindarea hidrolitic a triacilglicerolilor:

CH 2 O CO R1
lipaza
CH O CO R2 + 3 H 2O
CH 2 O CO R3
triacilglicerol

CH2 OH
CH OH
CH2 OH

R1 COOH
R2 COOH
R3 COOH
acizi grasi
,

glicerol

Spre deosebire de celelalte enzime, lipaza prezint o particularitate legat de

natura substratului asupra cruia acioneaz, mai exact a lipidelor care sunt
insolubile n ap. In vivo are loc mai nti o emulsionare a grsimilor (care n
cazul animalelor se realizeaz cu ajutorul bilei secretat de ficat) i n felul
acesta crete suprafaa de contact dintre faza liposolubil a substratului i cea
hidrosolubil a enzimei. Din aceast cauz, viteza iniial de reacie este
dependent de numrul de molecule enzimatice adsorbite la interfaz, fiind, n
general, mic. Ulterior, dup formarea primelor molecule de acizi grai, viteza
de reacie crete datorit emulsionrii mai rapide a substratului, moleculele de
acizi grai avnd zone cu proprieti hidrofobe i hidrofile (R-COO ).
Din aceeai clas fac parte cele dou fosfomonoesteraze (fosfataze ),
alcalin i acid cu denumirile sistemice ortofosfat-monoester-fosfohidrolaza
(pH optim alcalin) (EC 3.1.3.1) i respectiv ortofosfat-monoesterfosfohidrolaza (pH optim acid) (EC 3.1.3.2). Fosfataza alcalin catalizeaz
scindarea hidrolitic a esterilor acidului ortofosforic ai alcoolilor primari,
secundari i ciclici, fenolilor etc., dar nu i fosfodiesterii. Fosfataza acid
hidrolizeaz un mare numr de fosfomonoesteri, fosfoproteine i altele:

CH 2 OH

H2O

CH O PO 3H2
CH 2 OH

CH 2 OH
CH OH

fosfataz

H3PO4

CH 2 OH
Glicerol

- Glicerofosfat

Aceste dou enzime prezint o importan deosebit i din punct de vedere

medical, activitatea lor fiind determinat n snge n scopul diagnosticrii
litiazelor biliare i a diferitelor afeciuni hepatice, respectiv a unor boli ale
prostatei.
Un rol extrem de important n procesul complex de rennoire a proteinelor
structurale l joac o serie de proteinaze tisulare reunite sub numele de
catepsine. n prezent se cunosc mai multe catepsine notate cu majuscule ale
Mod Coala document. Semnat

Data

14
Proiect de an

alfabetului latin (A, B, C, D, E etc.) ce se deosebesc ntre ele dup

specificitatea de substrat, pH-ul optim de aciune i alte criterii.
O grup de enzime proteolitice extrem de intens studiat n ultima vreme o
reprezint caspazele (cysteinil aspartate cleaving proteases ), cisteinproteinase responsabile de distrugerea progresiv a celulei prin apoptoz.
Moartea celular programat este parte integrat a fiziologiei normale a unui
organism. Astfel, n cursul numeroaselor mitoze i diferenieri celulare care
permit crearea unui organism pornind de la stadiul de ou, este necesar
eliminarea celulelor inutile sau potenial periculoase. Acest fenomen de
eliminare selectiv a celulelor este mediat printr-un proces denumit apoptoz
(termenul provine de la grecescul , ce nseamn cderea
frunzelor ).
Noiunea de apoptoz a fost introdus n 1972 de ctre Kerr i et al.. pentru a
indica o form de moarte celular total diferit de necroz att din punct de
vedere morfologic ct i biochimic. Apoptoza se ntlnete la toate tipurile de
celule vegetale sau animale, uni- sau pluricelulare, pn la nivelul mamiferelor
superioare.
O dereglare de la moartea celular programat poate sta la originea
numeroaselor stri patologice; unele sunt legate de o inhibiie a apoptozei
(cancer, sindrom limfoproliferativ etc), n timp ce altele sunt asociate cu o
stimulare a acestui fenomen (SIDA, maladiile neurodegenerative, maladiile
auto-imune etc.).
n cursul apoptozei, celulele pun n eviden un mecanism de
sinucidere care se traduce prin numeroase schimbri morfologice: membranele
plasmatice se dezorganizeaz i exprim semnale pro-fagocitare alctuind
corpii apoptotici, cromatina se condenseaz nainte de a fi degradat ntr-un
profil caracteristic numit treptele scrii . Corpii apoptotici formai sunt apoi
rapid eliminai de ctre celulele adiacente. Aceast eliminare este primordial
deoarece ea nu permite lsarea nici unei urme n esutul unde survine apoptoza,
n particular, previnenind toate necrozele secundare care vor avea drept
consecin eliberarea aleatorie a coninutului celular i va permite astfel
limitarea stabilirii unei reacii inflamatorii.
Necroza i apoptoza. Necroza este considerat ca o moarte celular
dezordonat. n fapt n cursul necrozei celulele acumuleaz ap astfel nct
antreneaz liza membranei plasmatice. Aceast veritabil explozie celular
conduce la redetaarea n mediul nconjurtor a coninutului citoplasmatic.
Organitele vor avea, de asemenea, tendina de a se gonfla, iar ADN-ul nuclear
va fi degradat n manier aleatorie de endoglucanaze activate (mai ales
serin-proteinaze). n opoziie cu necroza, apoptoza este considerat ca o
moarte celular ordonat, acionnd n diferite faze. Mai nti celulele n
apoptoz vor fi izolate de alte celule (dispare contactul ntre celule).
Unul din punctele morfologice caracteristice al apoptozei este importana
condensrii simultane a nucleului i a citoplasmei ce induce o diminuare
semnificativ a volumului celular. Mitocondriile celulelor apoptotice vor suferi
Mod Coala document. Semnat

Data

15
Proiect de an

mai multe modificri majore, dintre acestea amintim detaarea citocromului c

n
citoplasm,
diminuarea
potenialului
membranar
i
modificarea
permeabilitii mitocondriale care permite deschiderea porilor specializai.
Nucleul se condenseaz, apoi cromatina este clivat n fragmente
regulate de aproximativ 180 pb. Membrana plasmatic va nmuguri i va
conduce la formarea corpilor apoptotici renchiznd o parte din citoplasm n
celul. n scopul de a facilita recunoaterea corpilor apoptotici prin fagocitoz,
celulele vor semnala starea lor apoptotic graie schimbrilor de localizare a
moleculelor de fosfatidilserin care trec de la o orientare citoplasmatic la una
extracelular. Moartea celular programat este un proces rapid cteva ore.
Unul din punctele majore ale apoptozei este integritatea membranei plasmatice
care nu este niciodat alterat n cursul procesului, ceea ce permite evitarea
deversrii coninutului celular i astfel, prevenirea tuturor deteriorrilor
esuturilor din jur. Totui, inflamarea nu este total absent n timpul apoptozei
(avnd n vedere externalizarea IL-1 i IL -18 n mediul nconjurtor) ns este
vorba de o inflamare regulat.
Caracterizarea clasei liazelor
Din aceast clas fac parte enzimele ce catalizeaz reacii de rupere a
unor legturi carbon-carbon sau carbon-heteroatom din molecula substratului,
fr participarea apei, cu rearanjarea ulterioar a valenelor. Pentru majoritatea
enzimelor din aceast clas, denumirea sistemic se face prin adugarea
termenului liaza la numele substratului asupra cruia acioneaz enzima
respectiv. Atunci cnd reacia invers este mai important din punct de vedere
metabolic, sau atunci cnd s-a demonstrat doar existena acesteia, se poate
utiliza i denumirea de sintaz (dar nu sintetaz). Pentru liazele ce catalizeaz
unele reacii particulare, sunt utilizate denumirile triviale: decarboxilaz,
aldolaz, dehidrataz etc.
Dintre enzimele cunoscute pn n prezent, liazele reprezint
aproximativ 13 %. mprirea liazelor n subclase se face n funcie de natura
legturii chimice pe care acestea o scindeaz. Astfel, subclasa 4.1. cuprinde
enzimele ce catalizeaz ruperea legturilor carbon-carbon: decarboxilazele
(4.1.1), aldehid-liazele (4.1.2), hidroxiacid-liazele (4.1.3) etc. n mod similar,
subclasa 4.2. conine carbon-oxigen-liazele , subclasa 4.3. - carbon-azotliazele .a.m.d.
O categorie important de enzime din aceast clas o reprezint
aldolazele , enzime ce catalizeaz diferite reacii de condensare aldolic.
Astfel, fructozo-difosfat-aldolaza , a crei denumire sistemic este D-fructozo
1 , 6 difosfat D gliceraldehid 3 fosfat - liaza (EC 4.1.2.13)
catalizeaz o reacie important a cii glicolitice i a fotosintezei:

Caracterizarea clasei izomerazelor

Mod Coala document. Semnat

Data

16
Proiect de an

Aceast clas reunete aproximativ 3% din enzimele cunoscute pn n

prezent, enzime ce catalizeaz diferite reacii de izomerizare. Procesul catalitic
propriu-zis const n inducerea unor rearanjri interne ale atomilor din
molecula substratului n urma crora au loc modificri geometrice sau
structurale. n funcie de tipul reaciei de izomerizare catalizat, izomerazele
pot fi mprite n racemaze, epimeraze, cis-trans-izomeraze, tautomeraze etc.
Este cunoscut faptul c marea majoritate a organismelor vii conin
monozaharidele aparinnd seriei D, respectiv L-aminoacizii. Deoarece unele
microorganisme conin i antipozii optici ai acestor compui, pentru acestea
racemazele joac un rol deosebit. Astfel, au fost descoperite i studiate alaninracemaza (EC 5.1.1.1), metionin-racemaza (EC 5.1.1.2), glutamat-racemaza
(EC 5.1.1.3) etc.
Dou izomeraze extrem de importante pentru participarea vitaminei A n
procesul vederii sunt retinal-izomeraza cu denumirea sistemic all-transretinal-11-cis-trans-izomeraza (EC 5.2.1.3) i respectiv retinol-izomeraza , sau
all-trans-retinol-11-cis-trans-izomeraza (EC 5.2.1.7) ce catalizeaz conversia
formei trans a retinalului n izomerul 11-cis i respectiv izomerul trans al
retinolului n forma 11-cis.
CH2 O
C O

H
H

CH2 OH

C O
C OH
CH2 O

dihidroxiacetonfosfat

D-gliceraldehidfosfat

O etap important a secvenei metabolice Embden-Meyerhof-Parnas o

constituie izomerizarea reversibil a celor dou trioze fosforilate rezultate prin
scindarea fructozo-1,6-difosfatului sub aciunea aldolazei. Sub aciunea triozofosfat-izomerazei are loc conversia permanent a dihidroxiaceton-fosfatului n
aldehida 3-fosfogliceric. Denumirea sistemic a enzimei este Dgliceraldehid-3-fosfat-cetol-izomeraza (EC 5.3.1.1).
Caracterizarea clasei ligazelor (sintetazelor)
Aceast clas cuprinde aproximativ 5% din enzimele cunoscute pn n
prezent, liazele cataliznd reacii de formare a unor noi legturi carbon-carbon
sau carbon-heteroatom. De regul, aceste reacii au loc cu consum de energie,
ele fiind cuplate cu reacii de hidroliz ale ATP-ului sau ale altor
nucleozidtrifosfai. Denumirea sistemic se face prin adugarea termenului
ligaza la numele substratului, sau a termenului sintetaza la numele produsului
de reacie.
O grup important de enzime ce fac parte din aceast clas o constituie
aminoacil-ARN t -sintetazele , enzime ce catalizeaz reaciile de activare ale
aminoacizilor din procesul de biosintez a proteinelor. Aceste enzime prezint
o nalt specificitate de substrat, existnd cte o sintetaz pentru fiecare
Mod Coala document. Semnat

Data

17
Proiect de an

aminoacid proteinogen: tirozil-ARN t -sintetaza sau L-tirozin-ARN t t y r -ligaza (EC

6.1.11), triptofan-ARN t -sintetaza cu denumirea sistemic L-triptofanil-ARN t t r p ligaza (EC 6.1.1.2), treonin-ARN t -sintetaza sau L-treonil-ARN t t h r - ligaza (EC
6.1.1.3) .a.m.d.
Formarea complexului aminoacil-ARN t este un proces complex ce se
realizeaz n dou etape catalizate de aceeai enzim. Procesul debuteaz prin
activarea aminoacidului cu ajutorul energiei din ATP:
PPi
ATP
O
H2NCHCOOH

E [H2NCHC ~ OAMP]
aminoacil-ARNt -sintetaza

R
aminoacid

R
aminoacil-AMP
(complex ES)

Se formeaz deci complexul hiperreactiv dintre enzim i dou din cele

trei substraturi, adic aminoacidul ce urmeaz a se activa i molecula de ATP.
Acest complex interacioneaz n etapa urmtoare cu cel de-al treilea substrat
care este ARN t ul specific aminoacidului activat:

ARN t

O
E [H2NCHC ~ OAMP]

Enzim

AMP

H2NCHC ~ ARN t

aminoacil-ARNt R
-sintetaza
3 STRUCTURA CHIMIC A ENZIMELOR
aminoacil-ARN t
aminoacil-AMP
(complex ES)
Toate enzimele cunoscute pn n prezent, fr excepie, sunt de natur
proteic. Din punct de vedere structural, enzimele pot fi clasificate n dou
mari grupe: enzime monocomponente i enzime bicomponente.
Enzimele monocomponente sunt holoproteine, ceea ce nseamn c
moleculele acestora sunt formate din una sau mai multe catene polipeptidice.
Enzimele bicomponente sunt heteroproteine (proteine complexe sau
proteine conjugate) i conin, n afar de componenta polipeptidic i o
component de alt natura, neproteic, numit cofactor enzimatic . Componenta
proteic a enzimelor bicomponente poart numele de apoenzim.
Legarea cofactorului de apoenzim se face n mod diferit. Atunci cnd
ntre cele dou componente iau natere legturi relativ slabe, necovalente,
cofactorul poart numele de coenzim, iar dac legarea se face puternic, prin
legturi covalente, componenta neproteic se numete grupare prostetic. Nu
se poate face o delimitare net ntre cele dou noiuni, deoarece se ntmpl
uneori ca acelai cofactor enzimatic s fie coenzim pentru unele enzime i
grupare prostetic pentru altele.
Pentru enzimele bicomponente, cofactorul enzimatic este implicat direct
n realizarea actului catalitic, n timp ce apoenzima este rspunztoare n
primul rnd de specificitatea de aciune. Acest aspect este ilustrat foarte
R

Mod Coala document. Semnat

Data

18
Proiect de an

sugestiv de Hugo Theorell , care arat: este fascinant s gndeti c natura

folosete coenzimele aa cum un dulgher utilizeaz uneltele sale. Dulgherul
poate folosi acelai fel de cuie i ciocane pentru a produce tot felul de lucruri.
Dulgherul ar corespunde proteinelor care pot face uz de una i aceeai
coenzim pentru o larg varietate de scopuri. De ceea, natura a fost n stare
s se limiteze ea nsi la folosirea unui numr mic de compui chimici pentru
funciile de coenzime .

Concluzii
Aceasta practica mi-a oferit posibilitatea de a studia mai profund
enzimologia si de a afla multe lucruri noi despre enzime.
Prin actiunea lor catalitica, enzimele fac posibila, in conditii compatibile
cu viata, realizarea unei intregi serii de reactii chimice, care in vitro nu se pot
realize decat in conditii foarte dure, improprii vietii celulare. Ca urmare, rolul
enzimelor este fundamental in procesele vietii. In lipsa enzimelor, majoritatea
covarsitoare a reactiilor chimice din organism nu s-ar produce si deci nu ar
putea exista procese metabolice si nici fenomene de viata.
Din punct de vedere chimic, enzimele sunt proteine sau proteide cu rol
functional foarte important, de natura coloidala, din care cauza ele au
insusirile substantelor proteice, fiind astfel influentate de conditiile de mediu.
Ele sunt produse numai de organismele vii si isi pot manifesta activitatea
enzimatica atat in interiorul, cat si in afara organismului .
Ca biocatalizatori, enzimele se caracterizeaza prin urmatoarele
proprietati generale: actioneaza in cantitati extrem de mici, dar manifesta o
activitate extrem de intensa; nu se consuma si nu se transforma in reactiile
catalizate; orienteaza si maresc viteza reactiilor biochimice, determinand
scaderea energiei de activitate a moleculelor de substrat asupra carora
Mod Coala document. Semnat

Data

19
Proiect de an

actioneaza; determina reactii extrem de rapide; se disting printr-o specificitate

de actiune; asigura coordonarea, reglarea si controlul proceselor biochimice la
la care participa.

1.
2.
3.
4.
5.

Bibliografie
D. C. Cojocaru Enzimilogie generala Iasi 2007
D. C. Cojocaru Enzimologie practica Iasi 2006
http://www.scribd.com/doc/
Julio Polaina,Andrew P. MacCabe Industrial enzymes: structure, function
and applications, Ed. SPRINGER
Iorga Enua, Campeanu Gh., Utilizarea enzimelor in panificatie

Mod Coala document. Semnat

Data

20
Proiect de an