Biochimie curs 5

Enzimele
Introducere
Enzimele sunt biocatalizatori specifici de natur proteic, care se prezint n
stare coloidal; sunt produi de organismele vii (vegetale, animale, microorganisme)
i i pot exercita aciunea att n celulele formatoare, ct i n afara acestora.
Sinteza enzimelor se face n toate celulele, nu numai n esuturi sau organe
specializate. n general, activitatea enzimelor se manifest n interiorul celulelor
formatoare, dar i pstreaz proprietatea i dac sunt scoase din acest mediu.
Enzimele, fiind catalizatori biologici, au caracterele generale ale
catalizatorilor:
modific viteza n reacii fr ca ele s se consume;
cantiti minime de enzime pot produce transformarea unei cantiti foarte
mari de substrat;
aciunea enzimelor este reversibil, ca i a catalizatorilor neenzimatici.
Endoenzimele sunt acele enzime care sunt produse i i desfoar
activitatea chiar n celulele n care sunt secretate.
Exoenzimele sunt enzimele care, dei secretate n celule, sunt eliminate n
lichidele din organism, exercitndu-i aciunea la acest nivel. Menionm enzimele
din tubul digestiv (enzimele salivare, din sucul gastric, intestinal i pancreatic), cele
din plasma sanguin etc.
Locul de aciune al celor mai multe enzime este n interiorul celulelor; unele
acioneaz ns i n afara acestora (de exemplu, o serie de enzime din plasma
sanguin ntre care i cele care asigur coagularea). Toate enzimele specifice unui tip
de celule sunt sintetizate chiar de acele celule; enzimele care acioneaz n afara
celulelor sunt sintetizate doar de anumite tipuri de celule (hepatice, renale etc.).
n organism exist enzime fie independent de existena substratului (enzime
constitutive), fie enzime care apar n celule numai dac exist un sistem i substratul
respectiv (enzime adaptative).
Substanele care rezult dintr-o reacie metabolic se numesc metabolii.
Noiunile de substrat i metabolit nu sunt prea distincte, cci una i aceeai
substan poate fi metabolit pentru o reacie, i substrat pentru o alt reacie. Pentru
transformrile catalizate de enzime se folosete denumirea de proces enzimatic.
Deoarece n celulele organismelor exist numeroase enzime care intervin n diferite
reacii (similare sau nu) care se produc n aceeai celul, totalitatea acestor enzime
formeaz un sistem enzimatic sau echipament enzimatic.
Cunotinele de enzimologie sunt extrem de utile n prezent pentru
interpretarea multor fenomene din biologia celular, genetic i alte tiine biologice.
Ingineria genetic se bazeaz aproape exclusiv pe aciunile specifice ale unor enzime.
Din punct de vedere medical, enzimologia contribuie astzi n msur
hotrtoare la cunoaterea cauzelor a numeroase boli, diagnosticul i urmrirea
evoluiei acestora, elaborarea pe baze tiinifice a medicamentelor i multe altele.

Biochimie curs 5

Specificitatea enzimelor
nalta specificitate este una dintre caracteristicile fundamentale ale enzimelor.
Consecine ale acestei specificiti deosebite sunt att evitarea formrii de produi
secundari n reacii, ct i, pe un plan mai general, existen nsi a cilor metabolice
(n sensul c succesiunea reaciilor, de exemplu ntr-un compartiment celular, este
impus de enzimele existente).
Modalitile de manifestare ale specificitii sunt diverse. Se pot considera
totui trei variante de baz: specificitatea de reacie, specificitatea de substrat i
specificitatea stereochimic.
Specificitatea de reacie
Specificitatea de reacie const n aceea c fiecare enzim catalizeaz numai
un singur tip particular de reacie (excepiile sunt foarte rare). Tipul particular se
ncadreaz n unul din cele ase tipuri fundamentale de reacii care au loc n lumea
vie: oxido-reducere, hidroliz, formare (scindare) de legturi covalente, izomerizare,
formare de legturi covalente utiliznd energia eliberat prin scindarea unor legturi
macroergice. Se va vedea mai departe n acest curs c n sistemul actual de clasificare
sunt ase clase de enzime, corespunztor celor ase tipuri fundamentale de reacii.
Specificitatea de substrat
Aceasta const n aria mai restrns sau mai larg de aciune a fiecrei enzime
cu o anumit specificitate de reacie. Ea poate fi:
absolut, dac enzima catalizeaz un anumit tip de reacie la un singur
substrat;
de grup, dac enzima catalizeaz acelai tip de reacie la dou sau la un numr
restrns de substrate;
specificitate larg, dac enzima catalizeaz acelai tip de reacie la un numr
foarte mare de substrate.
Specificitatea stereochimic
Majoritatea substratelor, chiar dintre cele mai simple, au atomi de carbon
asimetrici i deci se pot prezenta, raportat la glicerinaldehid, n configuraii absolute
de tip D sau L.
Stereospecificitatea const n aceea c, dup caz, enzima asigur
transformarea fie numai a substratului cu configuraie D, fie numai a substratului cu
configuraie L.
Stereospecificitile descrise, ca i altele, sunt consecine ale interaciei
substratelor cu enzimele corespunztoare la nivelul centrelor active ale acestora, aa
cum se va arta n continuare.

Biochimie curs 5

Structura enzimelor

Aspecte generale
Din studiul naturii chimice a ctorva mii de enzime cunoscute rezult c ele
sunt, cu foarte rare excepii, proteine sau heteroproteine. Excepiile, descoperite n
ultimii zece ani, sunt enzime cu structur de acizi ribonucleici, iar ribonucleaza P este
un complex protein - acid ribonucleic; activitatea enzimatic a acesteia din urm este
datorat acidului ribonucleic i nu proteinei. Una din teoriile formulate n legtur cu
existena acestor enzime are n vedere urmtoarele: pe scara evolutiv, acizii nucleici
au precedat proteinele i alturi de alte funcii ei au ndeplinit-o i pe aceea de enzime;
cnd s-au sintetizat proteinele, acizii nucleici i le-au ataat pe acestea dobndind
stabilitate i unele activiti crescute. Treptat ns, din motivele ce vor fi specificate,
proteinele au preluat funcia catalitic, ARN-ul fiind abandonat. De aceea, enzimele
cu structur de ARN, sau complexe ARN proteine, sunt considerate drept fosile
biochimice.
Structura proteic i heteroproteic a enzimelor este avantajoas din mai multe
motive: resturile de aminoacizi din proteine dispun de o mare varietate de grupri
funcionale care particip la legarea substratului, ct i la desfurarea catalizei; nici o
alt clas de compui din lumea vie nu are varietatea de monomeri i de grupri
funcionale pe care o au proteinele. n plus, enzimele sunt proteine globulare, ele au
deci structur secundar, teriar i deseori structur cuaternar. Structurile secundar
si mai ales cea teriar asigur posibiliti multiple de constituire a centrelor active,
zonele fierbini ale enzimelor, unde se desfoar reaciile. Deosebit de important
este existena la aprox. 10-20% dintre enzime a structurii cuaternare. Activitatea
acestor enzime poate fi reglat (crescut, sczut) prin diferii compui din mediu care
produc mici modificri ale structurii cuaternare. Asemenea reglaje apar i la unele
enzime care nu au structur cuaternar.

Enzime cu structur proteic

Enzime cu structur strict proteic sunt relativ puine. Dintre cele 6 clase mari
de enzime, mai ales hidrolazele sunt proteine pure; exemple sunt ribonucleaza,
chimotripsina i lizozimul. n cazul acestor enzime att legarea substratului, ct i
cataliza n sine se realizeaz de ctre gruprile funcionale ale resturilor de
aminoacizi.
Un exemplu l constituie aciunea catalitic a lizozimului, o enzim aflat n
mucusul nazal i n lacrimi. n prezena lizozimului are loc scindarea hidrolitic a
unor compui heterozidici care alctuiesc pereii multor celule bacteriene; odat
distrui aceti perei, celulele bacteriene mor. Fleming, care a descoperit aciunea
hidrolitic a lizozimului (n anul 1922), a avut un timp convingerea c acesta este un
antibiotic (compui de a cror existen era sigur). Ceva mai trziu, n anul 1929,
Fleming a descoperit un adevrat antibiotic, penicilina.

Biochimie curs 5
Enzime cu structur heteroproteic
Cele mai multe enzime au structur heteroproteic; ele sunt alctuite din
apoenzim (component proteic) i cofactor (component neproteic). Fiind
molecule organice, cationi i anioni (mai rar) ai elementelor, stabilitatea cofactorilor
la aciunea temperaturii este mai mare dect a apoenzimelor.
De regul, o enzim are un singur cofactor; exist totui i enzime cu doi
cofactori, diferii structural i funcional.
n privina terminologiei cofactorilor s-au fcut recent urmtoarele
recomandri (ele urmresc s elimine confuziile, destul de frecvente):
termenul cofactor se va utiliza pentru totalitatea compuilor neproteici din
structura heteroenzimelor;
termenul coenzim se va utiliza numai pentru componentele neproteice de
natur organic care se leag prin legturi foarte slabe de apoenzime (legturi
de hidrogen, ionice, hidrofobe etc.);
termenul grupare prostetic se va utiliza tot pentru cofactori de natur
organic, dar care se leag de apoenzime prin legturi puternice, inclusiv
covalente.
Numrul cofactorilor cunoscui este foarte mic n comparaie cu numrul
enzimelor cu structur heteroproteic. Faptul se explic prin aceea c un anumit
cofactor este capabil s se asocieze cu diferite apoenzime rezultnd astfel mai multe
heteroenzime. Mai ales o parte dintre coenzime i ioni au aceast proprietate.
Date ample privitoare la coenzime, care sunt derivai ai vitaminelor
hidrosolubile, se afl n cursul Vitamine i coenzime.
Dintre gruprile prostetice, hemul este ntlnit cel mai frecvent n diverse
enzime din organismul uman.
O regul general reieit din studiul unui mare numr de heteroenzime cu
cofactori organici este c specificitatea lor este determinat n totalitate de apoenzime,
n timp ce coenzimele sunt gruprile responsabile n cea mai mare parte de
transformarea chimic propriu-zis.
Cum s-a mai artat, cofactorii multor enzime sunt ioni metalici
(metaloenzime). Legturile dintre componentele proteice i ionii metalici sunt de tip
electrostatic. Stabilitatea complexelor este n funcie de numrul i intensitatea acestor
interaciuni.
Dac ionii metalici sunt disociai de apoenzim, enzima i pierde complet sau
i diminu activitatea; de regul disocierile sunt reversibile n sensul c ionul metalic
poate fi reintegrat n componenta proteic.
n reaciile catalizate de metaloenzime, ionii metalici ndeplinesc, de la caz la
caz, roluri variate:
stabilizeaz structura enzimei;
particip la legarea substratului;
induc unele modificri n conformaia enzimei, cu efect asupra vitezei de
reacie;
particip nemijlocit la cataliz, de exemplu n cazul multor reacii de oxidoreducere.
Sunt i enzime care necesit pentru cataliza simpla prezen a anumitor ioni,
cationi sau anioni; exemple sunt prezena Ca2+ pentru activitatea lipazelor i prezena
Cl- pentru activitatea amilazei salivare.

Biochimie curs 5

Sisteme (complexe) multienzimatice

Cercetrile din ultimele decenii au evideniat c n cazul unor ci metabolice
toate enzimele care catalizeaz reacii individuale (sau numai o parte din ele) sunt
asociate n form de complexe multienzimatice. n aceste complexe enzimele sunt
fixate prin legturi slabe, ntr-o ordine corespunztoare intrrii lor n aciune, pe o
protein, central care poate fi chiar una din enzime. Proteina central dispune de
un bra al crui rol este urmtorul: fixeaz substratul S 1 i l duce la enzima E1 care
l transform n P1; cum P1 este n acest caz S2, braul l preia i l duce la E 2 care l
transform n P2. La nivelul fiecrei enzime braul ndeplinete rol similar asigurnd
formarea produsului unic al tuturor enzimelor complexului. Avantajul este c braul
duce de fiecare dat S la E corespunztoare potrivindu-l cu mare exactitate pe centrul
activ, ceea ce asigur pe ansamblu o vitez mai mare dect cea corespunztoare
enzimelor neasociate.
Complexe multienzimatice bine cunoscute sunt acid gras-sintetaza i
complexul piruvat-dehidrogenaz a cror alctuire i mod de aciune sunt mai
complicate.

Izoenzime
O parte dintre enzimele care au i structur cuaternar se prezint sub mai
multe forme moleculare. Pentru o enzim dat, formele moleculare sub care ea apare
se numesc izoenzime. Toate izoenzimele unei enzime catalizeaz aceeai reacie;
difer doar viteza pe care fiecare o imprim reaciei unice.
Structural, izoenzimele unei enzime difer prin raportul n care sunt asociate
lanurile polipeptidice de baz (subunitile, monomerii), care, n acest caz sunt de cel
puin dou tipuri. n cazul lactatdehidrogenazei (LDH) cele dou lanuri de baz sunt
H (de la heart = inim) i M (de la muscle = muchi). Cele cinci izoenzime ale LDH
sunt tetrameri cu urmtoarele asocieri:
H4
(LDH1)

H3M
(LDH2)

H2M2
(LDH3)

HM3
(LDH4)

M4
(LDH5)

Cea mai mare parte a proprietilor fizico-chimice ale izoenzimelor unei

enzime date sunt foarte apropiate.
n esuturi, izoenzimele ndeplinesc importante roluri reglatorii fiind sigur
implicate i n morfogenez i diferenierea celular.

Biochimie curs 5

Centrul activ i mecanismul de aciune al enzimelor

S-a artat la nceputul acestui curs c n orice reacie catalizat enzimatic
formarea intermediar a complexului enzim-substrat este obligatorie:

Datele experimentale corelate cu aceea c, de regul, substratul este foarte mic

n raport cu enzima, au permis formularea concluziei c numai o zon restrns din
enzim particip la fixarea i transformarea chimic a lui S; aceast zon se numete
centrul activ al enzimei. Tot din studii experimentale a rezultat c majoritatea
enzimelor au un singur centru activ.
n legtur cu organizarea spaial a centrului activ al enzimelor (raportat la
structura substratului) s-au elaborat dou modele:

Modelul clasic (Emil Fischer) consider c potrivirea substratului cu centrul

activ al enzimei este analoag cu potrivirea lact-cheie. Acest model
presupune o rigiditate a structurii enzimei n zona centrului activ.

Modelul Koshland, numit centrul activ indus, presupune o flexibilitate a

zonei n care acesta se afl. n enzima liber centrul activ este preformat,
ceea ce nseamn c el are o configuraie spaial uor diferit de cea necesar
fixrii substratului. Substratul induce o modificare conformaional a zonei
centrului activ realizndu-se configuraia optim fixrii.

Biochimie curs 5

Cinetica enzimatic
Cinetica enzimatic studiaz viteza reaciilor catalizate de enzime n funcie de
variaia raportului concentraiilor enzimei i substratului ([E], [S]) i a influenelor
unor factori fizico-chimici, cum sunt: temperatura, pH-ul, inhibitorii etc.
Concepia unanim admis n enzimologie c formarea din substrat a
produsului de reacie implic obligatoriu existena complexului enzim-substrat (ES)
redat prin ecuaia:

a fost statuat n primul rnd n legtur cu cinetica reaciilor catalizate de enzime.

Influena pH-ului i temperaturii asupra activitii enzimelor
Enzimele produse de celule pentru cataliza reaciilor care au loc n interiorul
lor sau n afar (cazul enzimelor plasmatice, digestive) sunt adaptate condiiilor de
pH, temperatur i altor factori caracteristici locului de aciune.
Dac n organismul uman temperatura la care se desfoar toate reaciile
enzimatice este n mod curent constant (37C), atunci cnd se fac studii de cinetic
n vitro, temperatura poate fi variat n limite destul de largi.
Cnd se determin activitile unor enzime n scop diagnostic (de exemplu
activitatea enzimelor plasmatice), este obligatoriu ca aceasta s se fac la o
temperatur fix, n cazul celor mai multe dintre ele 37C.
Influena temperaturii asupra activitii enzimelor este foarte important n
criobiologie; un caz l constituie conservarea la temperaturi sczute a organelor n
vederea transplantului.
Viteza reaciilor enzimatice este influenat, de asemenea, de pH. Pentru
enzimele din organismul uman pH-ul optim de aciune este chiar pH-ul normal al
mediului n care ele i ndeplinesc funcia catalitic. Cum n majoritatea esuturilor
din organism pH-ul este n jur de 7 i enzimele au aciune optim n apropierea acestei
valori.
Un exemplu de aciune a pH-ului asupra enzimei l constituie inactivarea la
nivelul stomacului (pH 1-2) a amilazei salivare (pH optim 6,6-6,8) care este antrenat
cu alimentele din cavitatea bucal.

Biochimie curs 5
Influena concentraiei enzimei
Eficiena catalitic deosebit a enzimelor este responsabil de faptul c n
reaciile enzimatice ce au loc n vivo, concentraia substratului este mult superioar
concentraiei enzimei; exist totui unele situaii cnd regula nu se respect,
concentraia enzimei putnd fi chiar mai mare dect cea a substratului.
Asemenea msurtori de concentraii relative a enzimelor se efectueaz
sistematic n laboratoarele de analize medicale (mai ales asupra sngelui), deoarece
variaiile sunt corelate cu diferite stri patologice.
Influena concentraiei substratului
Concentraia majoritii enzimelor celulare este constant n timp; fac excepie
enzimele numite inductibile, precum i enzimele plasmatice nefuncionale a cror
concentraie crete sau scade n anumite stri patologice. n schimb, concentraia
substratelor celor mai multe enzime variaz destul de mult dup starea metabolic a
esutului i numeroi ali factori. De aceea dependena vitezei de reacie de
concentraia substratului constituie aspectul cel mai important al cineticii enzimatice.
Inhibiia activitii enzimelor
Activitatea multor enzime este inhibat de compui chimici diveri; n
sistemele vii asemenea compui pot fi de origine endogen (de exemplu diferii
metabolii) sau de origine exogen (cum sunt agenii toxici sau unele medicamente).
Inhibiia enzimelor poate fi reversibil i ireversibil, aceasta din urm
numindu-se i inactivare. n ambele cazuri inhibitorul se leag de enzim, dar n timp
ce n inhibiia ireversibil legtura enzim-inhibitor este puternic (covalent), n
inhibiia reversibil legtura este slab.
Se cunosc dou variante majore de inhibiie reversibil:
a) Inhibiia competitiv, produs de inhibitori care se leag tot la nivelul
centrului activ al enzimei, dar prin legturi slabe. n cazul prezenei simultane
n mediu (sau n celule) a substratului i inhibitorului, ntre acetia are loc o
competiie pentru fixarea pe enzim. La o capacitate egal de legare la nivelul
centrului activ a substratului i inhibitorului, enzima va fixa aceti competitori
n raport cu concentraiile lor. Inhibitorii competitivi sunt compui cu structur
apropiat de cea a substratului. Evenimentele care au loc pot fi reprezentate
simplificat:

Biochimie curs 5
n acest tip de inhibiie, partea din enzim aflat sub forma complexului EI
poate fi recuperat dac n mediu apare un exces de substrat (datorit
reversibilitii reaciei de formare a complexului EI).
Un numr de medicamente larg utilizate i datoreaz efectele faptului c sunt
inhibitori competitivi. De exemplu, sulfanilamida, cea mai simpl sulfamid,
este asemntoare structural cu acidul paraaminobenzoic (PABA) pe care l
poate nlocui n cursul sintezei acidului folic de ctre bacterii (vezi vitamine i
coenzime); cum acidul folic este indispensabil bacteriilor, acestea mor (la om
nu se ntmpl acest lucru, deoarece el ia din hran acidul folic).
n chimioterapia cancerului se utilizeaz analogi structurali ai bazelor purinice
i pirimidinice; ei inhib sinteza de acizi nucleici mpiedicnd diviziunea
celular care este mult mai rapid la tumori.

b) Inhibiia necompetitiv; n acest caz inhibitorul, a crui structur poate s

difere destul de mult de structura substratului, se leag prin legturi slabe n alt
loc dect centrul activ al enzimei. Afinitatea pentru substrat a enzimei pare a
nu fi modificat. Exist ns posibilitatea ca o parte din ES, ct i EI s
formeze complex ESI; transformarea lui S din acest complex n P este sczut
n raport cu transformarea lui S din ES. Inhibiia necompetitiv depinde numai
de concentraia inhibitorului (i de afinitatea enzimei pentru el), deoarece
substratul n exces nu l poate deplasa pe acesta.
Exemple sunt unele enzime care conin grupri SH n alte poziii dect centrul
activ. Aceste grupri pot fixa prin legturi slabe ioni ai unor metale grele cum
sunt Ag+ i Hg+ care diminu sau chiar anuleaz capacitatea enzimelor de a
transforma substratele n produi. Aa se explic efectul otrvitor al multor
metale grele.

Biochimie curs 5

Enzimele i patologia
n plasm se afl un numr foarte mare de enzime. Dependent de existena sau
inexistena la acest nivel a substratelor corespunztoare (n ali termeni dup cum
enzimele catalizeaz sau nu reacii n plasm), ele se mpart n:
a) Enzime
plasmatice
funcionale
cum
sunt:
lipoproteinlipaza,
pseudocolinesteraza, lecitin-colesterol aciltransferaza (LCAT), cele implicate
n coagulare i fibrinoliz i altele. n afeciuni grave ale ficatului, acesta este
incapabil s sintetizeze normal proteine, inclusiv enzime, astfel activitile lor
scad n raport cu valorile normale.
b) Enzime plasmatice nefuncionale: teoretic, oricare enzim celular trebuie s
fie prezent i n plasm; numrul celor identificate este ntr-adevr foarte
mare. Prezena lor n plasm se explic prin destrucia celular normal, dar i
prin permeabilizarea membranelor n cursul eforturilor fizice, scderea
resurselor pentru producerea de energie i altele. La persoanele sntoase
nivelul acestor enzime este aproape constant, el reprezentnd o stare staionar
ntre rata eliberrii din celule i inactivare. La cele mai multe dintre enzime
acest nivel constant este foarte sczut; ele au fost evideniate prin metode
extrem de sensibile, posibile de efectuat cu aparatur costisitoare. Cteva zeci
de enzime pot fi ns dozate n plasm cu suficient precizie utiliznd metode
relativ simple. Dintre acestea s-au selecionat un numr i mai restrns pentru
dozare n scop diagnostic; sunt enzime a cror concentraie (activitate) crete
foarte mult n cursul destruciilor masive ale celulelor productoare i
proporional cu gravitatea leziunilor la nivelul esuturilor din care aceste
enzime fac parte: inim, ficat, muchi scheletici i altele. Un element
important pentru ca enzimele plasmatice s aib valoare diagnostic, dar i de
urmrire a eficacitii tratamentului, este timpul n care activitatea lor devine
semnificativ crescut, respectiv sczut.

10

Biochimie curs 5
Se exemplific cu enzimele serice care se dozeaz n legtur cu infarctul de
miocard i afeciunile hepatice. n primul caz se dozeaz creatinkinaza (CK),
glutamic-oxaloacetic-transaminaza (GOT) i lactatdehidrogenaza (LDH). La toate
exist o cretere proporional ntre mrimea zonei infarctate i creterea activitii
serice. Dozarea creatinkinazei este totui mai util pentru diagnostic, deoarece chiar
dup 4-6 ore se remarc o cretere a activitii ei, iar maximul este atins dup 18 ore
(la GOT i LDH peste 24 ore). Situaia este diametral opus n ce privete durata de
revenire a activitii acestor enzime serice la valorile bazale (normale), de aceea
evoluia bolii se urmrete cel mai bine prin LDH.
Pentru diagnosticul afeciunilor hepatice se practic, alturi de alte investigaii
paraclinice, dozarea activitii a peste zece enzime plasmatice nefuncionale. Unele
reflect integritatea celular, altele sunt n legtur cu diverse procese metabolice,
altele redau capacitatea de sintez a proteinelor i acizilor nucleici i, n sfrit,
capacitatea de excreie. Este recomandat dozarea ntr-o anumit ordine (nivelele I, II,
III i IV); n prima instan, la nivelul I, se recomand dozarea GPT (glutamicpiruvic-transaminaza),
GLDH
(glutamatdehidrogenaza)
i
GT
(glutamiltranspeptidaza).
Deosebit de util pentru diagnostic ar fi s existe pentru fiecare esut o enzim
extrem de specific n ser. Un caz este fosfataza acid a crei cretere a activitii este
n legtur cu carcinomul de prostat. Pentru investigarea hepatic ar fi util dozarea
activitii sorbitoldehidrogenazei (SDH) i a ornitin-carbamil-transferazei (OCT), care
ns nu se practic curent din cauza unor dificulti tehnice.
Dificulti mari n investigarea paraclinic prin intermediul activitii
enzimelor serice apar, n primul rnd, din faptul c cele mai multe enzime plasmatice
nefuncionale a cror activitate se poate determina, au provenien multipl: LDH i
GOT provin din inim, muchi i ficat, CK din inim i muchii scheletici etc. O alt
dificultate este legat de inactivarea rapid n ser a unora dintre enzime.
Chiar i n cazurile complicate, prin diverse strategii, medicul i laboratorul de
biochimie pot obine totui rezultate foarte bune. Se menioneaz determinarea
simultan a mai multor enzime serice i calculul unor raporturi (de exemplu, raportul
De Rittis ntre GOT/GPT, care scade sub 1,3 n afeciuni hepatice), dozarea activitii
enzimelor pe esuturi (recoltate prin biopsie), mai rar practicat. De mare valoare sunt
determinrile activitilor izoenzimelor utiliznd n acest scop procedee de separare
(pe coloan, electroforetice) sau inhibarea cu anticorpi specifici a unora dintre
izoenzimele unei enzime date. Astfel predominana n ser a formelor LDH 1 i LDH2
este un indiciu foarte bun pentru infarct de miocard, n timp ce predominana formei
LDH5 indic afeciuni hepatice. n cazul CK, creterea n ser nu numai a activitii
totale, ci i a activitii izoenzimei de tip MB este indiciu sigur de infarct de miocard
(forma MB fiind de provenien aproape strict miocardic).
Activitatea multor enzime plasmatice nefuncionale se determin n relaie cu
bolile de metabolism (glucidic, lipidic i proteic).

11

Biochimie curs 5

Clasificarea i denumirea enzimelor

Primelor enzime descoperite li s-au atribuit diverse denumiri; n cele mai
multe cazuri numele enzimei s-a format din numele substratului prin adugarea
sufixului -az: ureaz pentru enzima ce catalizeaz hidroliza ureei la CO 2 i NH3,
arginaz pentru enzima care catalizeaz hidroliza argininei la ornitin i uree etc.
Altor enzime li s-au atribuit denumiri particulare fr legtur cu reacia catalizat:
pepsin, tripsin, chimotripsin.
Cnd numrul enzimelor cunoscute a devenit foarte mare i s-au acumulat date
despre structur, coenzime, mecanism de aciune etc., s-a impus att introducerea unei
clasificri raionale, ct i a unor denumiri bazate pe criterii chimice care s evite
confuziile. Acestea au fost elaborate, n anul 1961, de o comisie de enzimologie a
Uniunii Internaionale de Biochimie i Biologie Molecular (IUBMB) fiind n vigoare
i n prezent.
n sistemul de clasificare adoptat fiecare enzim este ncadrat ntr-o subclas
i, eventual, sub-subclas care aparine unei clase. Clasele, subclasele, sub-subclasele
i enzimele individuale se noteaz prin cifre desprite de puncte. Sunt ase clase de
enzime avnd n ordine numerele i cataliznd reaciile:
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Oxidoreductaze, catalizeaz reacii de oxido-reducere (redox);

Transferaze, catalizeaz transferuri de grupe ce conin carbon, azot sau fosfor;
Hidrolaze, catalizeaz scindri de legturi covalente cu participarea apei;
Liaze, catalizeaz ruperi ale legturilor C-C, C-S i C-N;
Izomeraze, catalizeaz toate tipurile de izomerizri, inclusiv racemizri;
Ligaze, catalizeaz formarea de legturi ntre carbon i O, S, N, cuplate cu
hidroliza legturilor macroergice.

Subclasele i sub-subclasele sunt stabilite dup tipul gruprii sau legturii care
se modific n cursul reaciei, dup natura coenzimei i alte particulariti.
Sistemul acesta de clasificare este deschis, orice enzim nou descoperit
putnd fi introdus ntr-o clas, subclas i sub-subclas.
Comisia a hotrt c se pot utiliza dou modaliti de denumire pentru enzime:
a) Numele recomandat: se pstreaz (sau se atribuie) denumiri cu sufixul az (glucozidaz, zaharaz, ureaz) sau se d denumirea dup aciunea
specific (lactatdehidrogenaz, adenilatciclaz); pentru unele enzime se
utilizeaz denumirile specifice (tripsina, pepsina).
b) Numele sistematic: acesta este corelat cu numele clasei, subclasei i subsubclasei; el cuprinde denumirea substratului (substratelor), tipul reaciei
catalizate, coenzima, eventual alte caracteristici. Astfel fiecare enzim are un
cod specific. Utilizarea numelui sistematic este obligatorie doar n situaiile
care reclam evitarea oricrei ambiguiti (tiprituri, congrese etc.). Curent se
utilizeaz denumirile recomandate.

12