Obiectivele:

1.

2.

3.
4.
5.
6.

7.

Noiune despre enzime, natura chimic i rolul biologic al

enzimelor. Diferena dintre aciunea enzimelor i catalizatorilor
nebiologici.
Dovezile naturii proteice a enzimelor. Structura enzimelor.
Proenzimele (zimogenii). Noiune despre centrul activ i centrul
alosteric al enzimelor.
Izoenzimele i rolul lor.
Cofactorii enzimelor. Coenzimele i ionii metalici. Funciile de
coenzime a vitaminelor i microelementelor.
Natura chimic (structura) vitaminelor B1, B2, B6, PP i rolul lor
ca coenzime.
Mecanismul de aciune al enzimelor. Centrul activ al enzimelor i
rolul lui n formarea i transformarea complecilor intermediari
dintre enzim i substrat. Rolul modificrilor conformaionale
reciproce ale moleculei enzimei i substratului la favorizarea
catalizei (reaciei).
Nomenclatura (denumirea) i clasificarea enzimelor.
Caracteristica general a claselor i subclaselor principale de
enzime. Numrul de cod al enzimei.

Enzimele
- cea mai imens i specializat clas de proteine,
care regleaz i coordoneaz decurgerea
armonioas a reaciilor chimice.
- reprezint catalizatori biologici, care mresc viteza
reaciei chimice i rezult la sfrit nemodificai
cantitativ i calitativ.
- acioneaz strict ntr-o anumit consecutivitate i
cu o anumit specificitate.
- energia substanelor reagente trece dintr-o form
n alta cu o eficacitate mare. Se acumulez n ATP
ce este utilizat n procesele vitale.

Enzimologietiina,
ce se ocup
cu studierea enzimelor

Enzimodiagnostica
- este determinarea

Enzimoterapia

- este utilizarea enzimelor,

activittii enzimelor,
care se pot modifica n
diferite patologii cu
scop de diagnoz.

extrase i purificate sau

sintetizate n laborator,
n tratamentul
diferitor patologii.

Particularitile comune
pentru E i catalizatori
nebiologici.

Ambii respec aceleai legi ale catalizei:

1. catalizeaz numai reaciile posibile din
punct de vedere termodinamic;
2. nu modific direcia reaciilor;
3. nu modific echilibrul reaciei dar conduc
la instalarea mai rapid a strii de
echilibru;
4. nu se consum n procesul reaciei, deci se
regsesc, din punct de vedere cantitativ i
calitativ, ntr-o stare chimic neschimbat,
putnd participa la un nou act catalitic.

Enzimele au particulariti prin care

se deosebesc de catalizatorii
nebiologici
1.Viteza reaciei enzimatice crete de milioane de ori. Ex:

Atomul de Fe posed
posibiliti peroxidazice 1 mg de Fe n componena catalazei poate nlocui o ton de Fe metalic.

2. Enzimele posed o nalt specificitate de aciune. Deci fiecare E

catalizeaz, un anumit tip de reacii sau transformarea unui anumit
S.
3. E.catalizeaz reaciile far formarea produselor intermediare adic
randamentul este de 100%.
4. Enzimele, reacioneaz n condiii blnde- parametri optimi de aciune
a enzimei - soluii apoase diluate, pH valorii fiziologice, t anumita i
presiune adecvat.
5. Activitatea E i de aici i viteza reaciilor sunt reglate.
6. E catalizeaz reaciile n ambele direcii
7. Viteza reaciei enzimatice este direct proporional cu cantitatea E
8. Exist o anumit dependen a vitezei reaciei enzimatice de
concentraia S.
Cu creterea concentraiei substratului are loc mrirea proporional a
vitezei reaciei Ajungnd la o concentraie maxim mai sus de care
viteza nu mai crete.

Natura chimic
Enzimele sint proteine i posed toate proprietile fizico-chimice,
specifice acestor macromolecule (solubilitate, propriet osmotice,
sarcin electric net, denaturare termic, reacii chimice .a.)

Activitatea lor e dependent de pstrarea structurii native a

proteinei.

Dovezile experimentale:
1. Sunt alctuite din AA
2. Prezena macromolecule.
3. n apa formeaz substane coloidale cu proprietdtile sale specifice
4. Prezintd electroliti amfoliti
s. Sunt termolabili i anume: distrugerea lanului polipeptidic prin
fierbere n soluii acide sau bazice (hidroliza) sau denaturarea lor.
6. Enzimele, fiind proteine sunt supuse aciunii altor E care scindeaz
proteinele Ex: Pepsina n mediu acid scindeaz amilaza.
7. Cel mai solid argument este c in condii de laborator din AA
au fost sintetizate: ribonucleaza scindeaz acizii nucleici
lizozima - ce distruge capsulele microorganismelor.

Enzimele pot fi :

Proteine simple sau conjugate.

Cele simple sint alctuite numai din AA
Cele conjugate sint asociate cu compui ce au mase
moleculare mici, dializabili i termostabili cofactor
Cind aceti compui organici sint strins legai n structura
enzimei poart denumirea de grupari prostetice: cind,
ins imbinarea lor este usor disociabil-poart denumirea
de coenzime.
Aceti biocatalizatori se numesc holoenzime, iar
componena proteic - apoenzima de care depinde
specificitatea.
Cofactori pot ti: cationii unor metale,
mai rar unii anioni,
substanele asemanatoare cu nucleotidele,
precum i vitaminele n forma lor activ.

Coenzimele
ndeplinesc diferite
roluri :

1. stabilizeaz conformaia activ a

moleculei
2. prezint veriga de legatur intre S i CA
prin legturi coordinative
3. coenzimele pot indeplini actul de
cataliz Ex: transportul electronilor.
Rolul ionilor este legat de prezena lor n
componenta E. Ex: Cu-citocromoxidaza
Substrat (S)- este substana asupra
creia actioneaz E.
P- produsul reactiei

Clasificarea
coenzimelor

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Co vitaminice
Tiaminice
Flavinice
Nicotinamidice
Piridoxinice
Folice
Cobamidice
Biotinice
lipoice

Co nevitaminice
(nucleotidice; metaloporfirinice,peptidice)

Structura enzimelor

Masa moleculara a E e de mii de ori

mai mare dect masa molecular a
substratului i deci E acioneaz nu
cu toat molecula dar cu o parte, un
anumit sector- acest loc de aciune
cu S se numete CA
CA - combinarea unical n spaiu i
n timp a anumitor resturi de AA
care asigur interaciunea cu S i
transformarea ulterioar a acestuia

Unele particulariti ale

centrului activ (CA):

Centrul activ este alctuit dintr-un "centru de legare" i un "centru

catalitic". Adic n centrul activ unele grupri (sau resturi ale
aminoacizilor) sint implicate n legarea substratului, altele
asigur cataliza propriuzis.
- CA ocup o parte relativ mic din volumul enzimei i majoritatea
restului de aminoacizi n molecula enzimei nu contacteaza cu
substratul.
- CA e o structura tridimensionala (nu e punct, linie, sau plan) - o
structur compus la formarea careia particip grupe ce aparin
diferitor resturi de aminoacizi, ce n secvena liniar se afl la
deprtare
- S relativ slab se leag cu E.
-CA are forma de "adncitur" sau "cavitate" (ant, dispictur),
unde nu-i acces la apa, cu excepia cnd apa este un reagent al
reaciei.
Fixarea specific e dependent de poziia bine determinat a
atomilor n CA. S intra n CA, dac e asemntor dup forma lui.

Centrul alosteric (Allo

stereos - alt loc) i
efectorii alosterici

Multe enzime n afar de centrul activ posed i

centrul alosteric sau centrul de reglare.
Substanele care se combin cu centrul
alosteric al enzimei i modific activitatea ei
poart denumirea de efectori alosterici
(inhibitori sau activatori). Sub aciunea
efectorilor se modific configuraia moleculei
enzimatice i simultan i conformaia CA ce la
rndul su posed proprietatea de a reaciona
cu substratul. Efectorii alosterici realizeaz prin
urmare reglarea metabolismului.

Ce e caracteristic pentru
enzimele alosterice:
au ca i toate enzimele centru catalitic, unde
se fixeaz i se modific S, dar mai au un alt
centru, pentru fixare a metabolitului reglator,
numit efector sau modulator.
b) moleculele E alosterice sint mai mari, mai
complexe i sint oligomere pare;
c)au cinetica lor - viteza reaciilor n dependen
de concentraia substratului are forma
sigmoldal, dar nu hiperbolica, cauzat de
urmrile interaciunii ntre protomeri ce leag
S n mod cooperativ (exemplu mioglobina i
hemoglobina).
a)

Enzime alosterice sunt :

a) homotrope, unde modulatorul i substratul

constitue aceiai substan.
Ex: Acumularea substratului activeaza viteza
reaciei catalizate de aceast enzim:
hexokinaza
(Glucoza + ATP > G-6-P + ADP)
(Alcoolul activeaza enzima ce il scindeaz alcooldehidrogenaza

b) heterotrope unde modulatorul

i substratul se deosebesc
dup structur. Pot fi mai muli
ce au aciune antipod.
Fiecare modulator i are
centrul su.

Natura chimic (structura)

vitaminei, PP i rolul ei
ca coenzim
Derivai ai vitaminei
PP (nicotinamida)
- (NAD sau NADP)

Rolul:
Particip n
reaciile de
oxidoreducere:

Natura chimic (structura)

vitaminei B1 i rolul ei ca
coenzim
Derivaii vitaminei
B1(tiamiana)- TPP
Rolul:
1. Decarboxilarea
oxidativ a
piruvatului
2. Decarboxilarea
oxidativ a
cetoglutaratului
3. Reacii de
transcetolare

Natura chimic (structura)

vitaminei B2 i rolul ei ca
coenzim,
Derivai ai vitaminei B2

(FMN sau FAD)

Rolul:
Particip n reaciile de
oxido-reducere:
- Dezaminarea AA
(aminoacidoxidaza)
- Degradarea aldehidelor
(aldehidDH)
- Degradarea purinelor
(xantinoxidaza)
- Ciclul Krebs (succinatDH)
- Oxidarea AG (dihidrolipoilDH

Natura chimic (structura)

vitaminei B6 i rolul ei ca
coenzim,
Derivai a vitaminei B6
(piridoxal,
piridoxamino)-PP
Rolul:
Transaminarea AA
Decarboxilarea AA
Transsulfurarea

Ionii de metale
cofactori ai E

E care n calitate de cofactori conin

metale metaloenzime
Metalele sunt fixate de apoenzim prin
legturi electrostatice la care particip
resturile de AA acizi (Asp, Glu) sau bazici
(Arg, Lyz, His)
Exemple: - citocromii, catalaza (Fe)
- Citocromoxidaza (Cu)
- Amilaza salivar (Cl)
- alcoolDH (Zn)

Mecanismul de aciune al
enzimelor
Pentru ca o reacie i aib loc e necesar ca moleculele de S i E s
contacteze ntre ele. ns nu fiecare molecul contactnd interacioneaz n
condiii obinuite.
Ex:Hrtia este n contact permanent cu 02 dar nu se aprinde decit dac,
nu o aprindem cu chibritul. Pot interaciona numai acele molecule la
care energia de activare energie exprimat n

calorii necesar pentru ca toate moleculele

unui mol de substan
la o temperatur
anumit sa ating starea de trunziie, ce
corespunde apixului barieirei energetice.

Pentru ca reacia s aib loc e necesar de trodus un exes de

energie sau de micorat bariera energetic. E accelereaz, viteza
reaciilor chimice (VRC) micornd barierul de activare i reacia
decurge dup alt mecanism, ce se caracterizeaz printr-o energie de
tranziie mult mai mic.


1.

Mecanismul de aciune al
enzimelor.

Procesul catalizei enzimatice poate fi divizat convenional n

trei stadii:
Difuzia S spre E i legarea cu CA al E (formarea complexului
ES). Prima etap de scurt durat depinde de concentraia Si
i de viteza lui de difuzie spre CA al E. Mecanismul interaciunii ntre S i E
este explicat prin dou concepte.

2.

3.

Transformarea complexului primar enzima-substrat n unul sau

cteva complexe activate, indicate n ecuaie prin ES* i ES**.
Aceast etap este cea mai lent i depinde de energia de
activare a reaciei chimice respective. La aceast etap are
loc dereglarea legturilor substratului, ruperea lor sau
formarea noilor legturi n urma interaciunii grupelor
catalitice ale enzimei.
Desprirea produselor reaciei de centrul activ al enzimei i
difuzia lor n mediul ambiant (complexul EP disociaz n E i
P).

Conceptul clasic "lact- elaborat n 1890 de ctrecheie

Emil Fier
- consider c potrivirea substratului cu centrul activ al

enzimei este analog cu potrivirea lact-cheie. Acest

model presupune o rigiditate a CA.
la prima etap a formrii acestui complex n rezultat se modif
structura S cptnd starea de tranziie dup care se transform
n P
E+S-- ES- E+P

Conceptul coencidenei inductive

coincidena forat (Kochland)

care presupure o flexibilitate

(modificare conformaional) a CA
ct i o modificare (extindere sau

comprimarea legturilor , e liberarea dipolilor

de ap de ce se atinge repede starea de
tranziie) a S.

Din punct de vedere termodinamic,

aezarea cea mai potrivit a S n
raport
cu E reduce la minimum
gradele de libertate n ce privete
micarea S, i micoreaz entropia,
ceea ce favorizeaz atingerea
uoar a strii de tranziie.
n enzima liber CA este
preformat (tensionat) ceea ce
nseamn c el are o configuraie
spaial uor diferit de cea
necesar fixrii S. Substratul induce
o modificare conformaional a CA,
care favorizeaz fixarea S.

Conceptul coencidenei inductive

coincidena forat (Kochland)

Proenzimele
(zimogenii).

Unele enzime (proteine) se sintetizeaz n forma neactiv de

precursor, care se activeaz n anumite condiii.
Exemplu:
1) enzimele digestiei: pepsinogenul, himotripsinogenul,
tripsinogenul, proelastaza, procarboxipeptidaza - scindeaza
proteinele in stomac ~i duoden.
2) coagularea singelui e determinat de cascada de reacii cu
activitate proteolitic;
3) hormonii proteici (insulina);
4) proteinele fibrilare (colagenul).
Unul din mecanismele de activare a proenzimelor este
proteoliza limitata.
Proteoliza limitata - este scindarea (nlturarea) unui sector al
catenei n rezultat enzima se restructureaz i se formeaz CA.

Importanla biologic a
prezenei formelor
neactive .
1. Protejaz de proteoliz
proteinele celulelor productoare
de E.
2. Este o forma de rezerv a E,
care rapid pot fi activate i
intervin n reacie.

Izoenzimele i rolul lor.

Izoenzmele.

Prezint forme moleculare de E_care apar ca

consecin de ordin genetic deosebindu-se
doar prin structura primar i mai mult prin
proprietile fizico-chimice. Ele catalizeaz
una i aceiai reacie. Se deosebesc prin
aceea c pot modifica direcia i viteza
transformrilor deoarece au afinitate diferit
fa de S.
LDH care transform piruvatul n lactat.
Izoenzimele prezint tetrameri de 2 tipuri Hheart inima i M musculus muchi.
Raportul dintre aceste catene este diferit in
fiecare izoenzima. La electroforeza se
separa 5 izoenzime: HHHH; HHHM; HHMM;
HMMM; MMMM;
Rolul acestor E consta n aceia c ele
faciliteaz adaptarea metabolismului n
diferite esuturi.
Ex: in miocard predomin HHHH aceasta
ezoenzima este inhibata de ctre piruvat
deaceea orienteaz oxidarea piruvatului pe
cale aeroba. Pe cind fracia M4 este activat
de catre piruvat i orienteaz transformarea
piruvatului pe cale anaerob spre lactat.

Clasificarea actual a
enzimelor.

Toate enzimele se mpart n ase clase, clasele n

subclase, subclasele n subsubclase, iar aici E i
are numrul su de ordin. Clasele, subclasele, subsubclasele i enzimele individuale se noteaz prin
cifre desprite de puncte. Ex: LDH - 1.1.1.27
Clasa reprezint tipul de reacie, catalizat de
enzime
Subclasa precizeaz aciunea E, deoarece indic
natura gruprii chimice a S, atacat de E
Subsubclasa precizeaz natura legturii S atacat
sau natura acceptorului care particip la reacii
Denumirea E denumirea S +tipul reaciei
catalizate +aza

Clasificarea enzimelor.
- catalizeaz reaciii de oxidoreducere;
-catalizeaz transferuri
grupelor funcionale de la un S
la altul (metil, amino, acil,);
-catalizeaz scindri de
legturi covalente cu
adiionarea apei ;
-catalizeaz ruperea leg. C-C,
C-S i C-N; fr adiionarea
apei, adiia la legturi duble
i reaciile inverse.

-catalizeaz toate tipurile de

transformri n cadrul uneia
i aceleai molecul ;
- catalizeaz formarea de legturi
ntre carbon i O, S, N, cuplate cu
hidroliza legturilor macroergice
(utilizarea ATP).

Nomenclatura
(denumirea)
Sunt cunoscute mai mult de 2500 enzime
fiecare E ii are denumirea de la denumirea
S n latin cu adiionarea terminaiei aza.
Amiloid -amilaza, ureaza.
S-au pstrat i denumirile vechi tradiionale
pepsina, tripsina.
Este utilizat pe larg denumirea sistematic
Denumirea S+ tipul reaciei (malat
DH;piruvat carboxilaza )

Proprietile generale
ale enzimelor

Obiectivele:
1. Proprietile generale ale enzimelor (termolabilitatea, specificitatea),
aciunea pH-ului asupra activitii enzimatice.
2. Activarea i inhibarea enzimelor:
a) mecanismele de activare (proteoliza parial, activarea alosteric,
autostructurarea cuaternar, fosforilarea i defosforilarea, reactivarea).
b) mecanismele de inhibiie (specific i nespecific, reversibil i
ireversibil, alosteric i competitiv).
3. Organizarea enzimelor n celul (ansamblurile enzimatice,
compartimentalizarea). Reglarea activitii enzimatice n celul
importana principiului de retroinhibitie.
4. Deosebirea privind componena enzimatic a organelor i esuturilor.
Enzimele organospecifice. Modificarea activitii enzimatice n diferite
afeciuni (enzimodiagnosticul).
5. Metodele de obinere i purificare ale enzimelor. Cromatografia de afinitate.
6. Utilizarea enzimelor n practica medical. ntrebuinarea enzimelor
imobilizate n medicin.
7. Unitile de activitate ale enzimelor.
8. Metodele de determinare a activitii enzimelor.

Termolabilitatea (-t)
Temperatura influeneaz pronunat
activitatea enzimei. La t joase E sunt
puin active.
Dac lum punctil de plecare 0
grade
s-a constatat ca majorarea t cu 10
grade dubleaza activitatea. Aa
continu pn la 40-50 grade.
Majorarea de mai departe duce la
micorarea activitii. La 100 grade
toate E organismului sunt inactive.
Unele E a microorganismelor
termofile sunt active la T 80 grade.
Creterea
vitezei reaciei odat cu
creterea t este nterpretat prin
prisma "energiei de activare". Pentru
fiecare enzim se poate stabili o t
optim la care viteza ajunge
valoarea maxima, mai departe viteza
scade din cauza distruciei enzimei,
denaturarea proteinei.

Specificitatea
- este capacitatea unei enzime de a selecta

dintr-un numr mare de S unul particular,

astfel instituie eficiena i ordine n metabolism
i prevene desfurarea lui haotic.
-este condiionat de complimentaritatea
conformaional i electrostatic ntre CA al E i S.

S1

S4
S2

Deci fiecare E catalizeaz un anumit tip de reacii

sau transformarea unui anumit S.

Specificitatea
1) Specificitatea de reacie: E-catalizeaz un anumit tip de
reacie ce st la baza clasificrii enzimelor: o hidroliza, o reacie
redox, formarea unei legturi, etc.
2) Enzimele cu o anumit specificitate de reac ie poate avea
specificitate de substrat relativ sau absolut:
a. specificitate
relativa - asigura transformarea unui grup de
substante inrudite chimic i se intlnete n diferite ipostaze :
- transforma un numar mare de substrate (proteazele):
chimotripsina - legatura peptidica, formata de COOH a Phe, Tyr,
Trp; tripsina - de COOH ai Lyz si Arg.
- transform mai puine substrate: alcooldehidrogenaza dehidrogenaza un grup de alcooli monohidroxilici, recunoscind
gruparea OH (specificitatea de grup)
- lipazele digestive specific recunosc pozitia legaturii
esterice intre glicerina i acizi grai:
b. specificitate absoluta. E recunoate un singur substrat
Anhidraza carbonica, Ureaza.
3) Stereospecificitatea de substrat i de reacie. 0 enzima poate
ataca numai un izomer D sau L.. Majoritatea biomoleculelor
poseda un atom de C asimetric i fiind chirali pot exista sub forma
celor 2 enantiomeri. Ex: Amilaza scindeaz legturile Alfa 1-4
glucozidice din amidon sau glicogen i nu influenteaz asupra

Aciunea pH asupra activitii

enzimatice

Fiecare enzim are un pH optim la care

ii manifest activitatea maximal.
In CA al E se afl grupri ionizabile,
acide sau bazice, acestea interacioneaz
direct cu ionii H+ si OH-, rezultatul fiind
creterea sau scderea gradului lor de
disociere, acionnd ca adevrai inhibitori
ai enzimelor (amilaza n sucul gastric). Ionii
H+ si OH- au un efect denaturant asupra
enzimelor - rup legturile, ce determin
structura teriar.
Majoritatea enzimelor celulare au pH-ul
optim n jurul pHului fiziologic de 7,4 cu
excepii ca hidrolazele acide lizozomale,
pentru care este n jur de 5 sau
monoaminooxidaza din membrana
mitocondriala externa, circa 10. La
enzimele digestive pH-lui optim este cel al
sediului lor de actiune: 1,5 2 al pepsinei,
7 al amilazei pancreatice, 8 al tripsinei, etc.
Deci mrind sau micorind pH-ul mediului,
se poate regla activitatea catalitica a
enzimelor. Dependena activitii
enzimatice de variaia pH-ului este deseori
descris de o curb n forma de clopot.

Mecanismele de activare
aE
Sunt: 1.
nespecifice: temperatura , iradierea
2.
specifice
Se activeaz la majorarea concentraiei S cnd este
insuficient
La majorarea cantitii E (crete numrul de molecule de
produs, n-tr-o unitate de timp)
La introducerea coenzimelor cnd sunt insuficiente
Introducerea ionilor metalelor Fe, Cu
Modificarea chimica sau covalent a E.
proteoliza limitata (pepsinogen - pepsin in HCI)
Activarea prin
efectori
alosterici
Autoasamblarea cuaternara .
Aici se mai refer i reactivarea dar noi ne vom opri la
mecanismele de inhibiie.

Reglarea covalent
(fosforilare-defosforilare)
Activitatea unor E se modific prin fosforilare. Fosforilarea
se face prin transferul unui rest fosfat de la ATP pe
gruprile hidroxil ale unor resturi de Ser, Tre; Tyr din
componena lor.

Reaciile de fosforilare snt catalizate de kinaze

specifice.

Este un proces reversibil

E-OH + ATP -------------- E-O-P +ADP
Defosforilarea are loc sub aciunea fosfotazei specifice
E-OP +H2O -------------- E-OH +H2PO3

unele enzime snt active n forma fosforilat Ex: glicogen

fosforilaza,
altele n forma defosforilat Ex:glicogen sintaza.

Proteoliz
limitat

Proteoliza limitata - este scindarea

(nlturarea) unui sector al catenei n
rezultat enzima se restructureaz i se
formeaz CA.
H+
Pepsinogen ------pepsin
-42AA

CA

EE

s
AlloM

Autostructurarea
cuaternar

Este caracteristic E ce posed structur

cuaternar
Fiecare protomer n parte nu posed
activitate enzimatic
La asamblarea lor se modific
conformaia fiecrui protomer i
corespunztor se modific i conformaia
CA, devenind astfel favorabil pentru
fixarea i transformarea S

Inhibiia activitii
enzimelor.

Deosebim:
inhibiiespecific
inhibiienespecific(T,pH,agenisiidenaturrii)
Inhibiiiastlabazaaciiuniisubstanielormedicamentoase,
agenilortoxici.
Inhibiiapoatefireversibiliireversibil.
Lainhibiiiaireversibilinhibitorulcovalentsefixeazde
enzimsauseleagattdeputernicnctdisociaiaareloc
foarteincet.
Exemple:Diizopropilfluorfosfatul(toxinaneuroparalitica)se
fixeazdeOHserineinCAaacetilholinesterazei(scindeaz
acetilcolina)cuformareaenzimeineactive.nrezultatse
menineefectulacetilcolineinpermanenceducelaparalicii
musculareimoarte..
Laoinhibiiiereversibilinhibitorisefixeazaslab,necovalent
de E

Inhibiie

alosteric - inhibitorul (efectorul) se leag n centrul

alosteric al enzimei, modificnd conformaia moleculei (structura teria
ce are ca consecin deformarea centrului activ.

E
S CA
CA E

M
Allos

Inhibitorul

se aseamn dup structur cu S i se fixeaz n CA al E,

mpedicnd fixarea i transformarea S.
Nu e posibil fixarea simultan a S i a I. E va fixa pe acel competitor care se a
concentraie mai mare.
inhibiia enzimei (SDH)cu malonat. SDH oxideaza succinatul in fumarat)
Malonatul inhiba aceasta E datorita asemanarii cu S.
Particularitatea principal a acestui tip de inhibiie este c poate fi nlturat c
adugarea n exes a S(succinat).

I i S se leag simultan cu E n locusuri diferite

Mrirea concentraiei de S nu micoreaza inhibiia.

Cei

mai de vaz inhibitori de acest tip n celulele vii sint produsele

intermediare
ale metabolismului, care reversibil se fixeaz la unele E reglatoare i
modific activitatea lor.

Retroinhibiie

Sistemele
polienzimatice
Fiecare celul a organismului conine setul su
specific de enzime. Unele se gsesc n toate celulele,
altele sunt prezente doar n anumite celule sau
anumite compartimente celulare. Funcia fiecrei
enzime, nu este izolat, ci strins legat de funcia
altor enzime. Astiel din enzime aparte se formeaza
sisteme polienzimatice sau conveiere.
Functia sistemelor polienzimatice depinde de
particularitatile de organizare a lor in celule.
Se cunosc urmatoarele tipuri de organizare a sistemelor
polienzimatice:
- funcional,
- structural-funcional i
- mixt.

Tipurile de organizare a
sistemelor polienzimatice:
Organizarea funcional - enzimele sunt asociate n sisteme polienzimatice, care
ndeplinesc o anumit funcie. Produsul reaciei prirmei enzime a lanului servete
drept substrat pentru enzima urmtoare etc.
Ex.de organizare funcional - enzimele glicolizei, unde toate E participante se gsesc
n stare solubil; Fiecare reacie este catalizat de enzime aparte. Drept verig de
legtura aici servesc metaboliii.
Organizarea structural-funcional consta n faptul ca enzimele formeaz sisteme
structurale cu o anumit funcie.
Ex.- complexul polienzimatic piruvatdehidrogenazic, constituit din cteva enzime, care
particip la oxidarea acidului piruvic, sau sintetaza acizilor grai constituit din apte
enzime legate structural, care n ansamblu ndeplinesc funcia de sinteza a acizilor
grasi.

Afar de complexele multienzimatice e posibila i o alt varianta de organizare

structural-funcional. Astfel enzimele se pot aranja n lan, fixindu-se de membrana
biologic. Ex.enzimele lanului respirator mitocondrial, care particip la transferul de
electroni i protoni i la generarea de energie.
Tipul mixt de organizare a sistemelor polienzimatice reprezint o mbinare a ambelor
tipuri de organizare, adic o parte din sistemul polienzimatic are organizare
structurala, iar cealalt parte - organizare funcional.

Ex.- ciclul Krebs, unde o parte din enzime sunt asociate n complex structural
(complexul 2-oxoglutaratdehidrogenazic), ar alt parte se leag funcional prin
metaboliii de legtur.

Deosebirea privind componena enzimatic a organelor i

esuturilor. Enzimele organospecifice. Modificarea
activitii enzimatice n diferite afeciuni
(enzimodiagnosticul).

Enzimele indicatorii sunt localizate

intracelular: n citoplasm (lactatdehidrogenaza,

aldolaza), n mitocondrii
glutamatdehidrogenaza), n lizosomi (glucoronidaza, fosfataza alcalin). Acestea
enzime n norm n plasm se gsesc n
concentraii foarte mici. La afeciunile celulare
activitatea acestor enzime n plasm este brusc
mrit.

Unitile de
activitate ale
Unitatea Internaional (U.I.)
enzimelor.
cantitatea de E care catalizeaz

cantitatea de E care catalizeaz

transformarea 1mol de S ntr-un
minut n condiii standard
Katal (kat) cantitatea de E care
asigur transformarea unui mol de S
ntr-o secund n condiii standard
(1U.I.=16,67 nkat)

Terapia cu enzime

Enzimele sunt ageni terapeutici unici ce produc efecte

importante i specifice.
Motivele care au limitat folosirea larg a enzimelor ca
medicaie sunt legate de natura proteic:
- distribuie redus n organism dependena de dimensiuni,
sarcina i de fenomenele de glicozilare (prin glicozilare
proteinele sunt recunoscute de receptori i fixate n anumite
locuri
- posibilitate mic de dirijare extrahepatic, ficatul avnd
tendin de a cptta i reine proteinele strine;
- inactivarea lor sub aciunea proteazelor digestive n cazul
administrarii orale, iar proteazele tisulare le scurteaza de
asemeni actiunea;
- potentialul lor antigenic, anticorpii formati pot genera reacii
de hipersensibilizare adesea grave i pot inactiva enzima.

Tehnici propuse pentru

optimizarea proprietilor
terapeutice ale enzimelor.
- prin N-acilare a fost crescut semiviata asparaginazei, folosit n
leucemie
- S-au incercat de asemeni metode de obinere a enzimelor imobilizate.
De ex. prin reticularea enzimei, ce conduce la agregate insolubile, prin
adsorbie pe polimeri sintetici ori prin ataare covalent, sau prin
incorporare ntr-un gel in cursul polimerizarii.

Aceste preparate catiga rezistena la enzimele proteolitice i sunt mai

putin imunoactive dar pot fi alterate proprietaisile farmacocinetice.
Asemenea avantaje au dovedit conjugatii cu polietilenglicol (PEG) ai
arginazei, ai glutaminasparaginazei sau ribonucleaza supusa reticularii,
enzime cu efect antitumoral. Un succes n terapia defectelor genetice a
fost imobilizarea enzimelor din ciclul ureogenetic pe un suport de
fibrina.

S-au propus noi forme farmaceutice prin incapsularea enzimelor in

lipozomi microsfere cu membrana bistratificata lipido proteica, in
hematii umane, in fantome eritrocitare sau in alti transportori celulari.
Noile forme obinute prezint un potenial de ntire tisular. De ex. in
cazul unor boli genetice cauzate de deficitul unor enzime lizozomale se
impune o terape de substitutie, enzima trebuind tintita direct in
lizozomi.

Metodele de determinare
activitii enzimelor.

Metodele de
determinare a
activitii enzimelor.

Unitile de activitate ale

enzimelor.