Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
TRGU-MURE
BACTERIOLOGIE GENERAL
- CURS
- 2005 -
Capitolul I
Cele mai multe microorganisme sunt utile, doar o parte fiind implicate n
patologie.
n medicin microorganismele sunt deosebit de importante avnd att efecte
benefice asupra organismului uman ct i efecte patogene, cauznd boli ale omului
i animalelor.
Disciplinele microbiologiei sunt la fel de variate ca i microorganismele.
Dup domeniul de activitate n care se aplic noiunile de microbiologie se
disting diferite ramuri aplicative ale acesteia: microbiologia solului, microbiologia
marin, microbiologia industrial, microbiologia agricol, microbiologia medical,
microbiologia veterinar etc.
Microbiologia medical se ocup cu studiul microorganismelor care au aciune
benefic sau dimpotriv, duntoare asupra organismului uman (micro = mic, bios =
via).
Unele discipline ale microbiologiei sunt fundamentale: protozoologia,
micologia, bacteriologia, virologia, genetica i taxonomia bacterian i mai nou
ingineria genetic.
n formarea medicului este indispensabil dobndirea cunotinelor de
microbiologie pentru c, indiferent de ramura medicinii pe care o va alege, se va lovi
de infecii care reprezint aproximativ din patologia uman. Cunotinele de
microbiologie vor ajuta la:
1.stabilirea diagnosticului etiologic al bolilor infecioase ;
2. alegerea tratamentului antiinfecios profilactic sau curativ, cel mai adecvat;
3. cunoaterea metodelor de profilaxie a bolilor infecioase.
Este foarte important ca medicul s raioneze microbiologic:
s cunoasc microorganismele care populeaz elementele ambientului ca
i biotopurile organismului uman;
s cunoasc modul de transmitere al microorganismelor;
s cunoasc urmrile contaminrii cu microorganisme n practica medical
i chirurgical;
s cunoasc rolul microorganismelor pentru sntate i boal;
s cunoasc etiopatogenia bolilor infecioase;
s acioneze n aa fel nct s previn contaminarea microbian a
pacientului, a personalului din spital sau a sa;
S tie recolta corect un produs patologic destinat examenului
bacteriologic;
S aib cunotine temeinice referitoare la terapia antimicrobian.
Capitolul II
ISTORICUL MICROBIOLOGIEI
Microbiologia reprezint studiul unor organisme vii dintre care o parte sunt
ntr-att de mici nct sunt vizibile doar la microscop. Unele microorganisme necesit o
mai bun mrire pentru a fi vzute, mrire care poate fi obinut doar cu ajutorul
microscopului electronic. Microorganismele studiate cuprind alge, fungi, bacterii, virusuri
i parazii.
Microorganismele sunt cele mai vechi, numeroase i diversificate forme de
via pe pmnt. Se afl n mediul nconjurtor, au rol n descompunerea materiei
organice i menin fertilitatea solulului. Majoritatea microorganismelor sunt utile i
numai o parte sunt implicate, n diferite grade, n patologie.
Microbiologia a avansat continuu, de la nivelul unei tiine relativ simple la un
nivel care a determinat nsemnate progrese n prevenirea, diagnosticul i tratamentul
bolilor. Numai n acest secol, datorit n mare parte aplicaiilor microbiologiei, sperana
de via a crescut semnificativ.
La nceputul secolului oamenii decedau datorit unor cauze infecioase
(rujeol, varicel, rubeol, variol, oreion, cium, tifos exantematic, tuberculoz,
sifilis, difterie etc) care astzi au o evoluie letal numai n anumite situaii (forme clinice
avansate, atipice, neglijate). Datorit microbiologiei, conservarea hranei, condiiile
sanitare etc. s-au mbuntit.
Pe de alt parte, microbiologia trebuie s fac fa provocrilor viitorului, dar
este sigur c anumite progrese n acest sens sunt deja realizate sau n curs de
realizare. Dezvoltarea "tehnologiei ADN" a nceput n 1973 i este bazat pe
cunotinele acumulate n cursul ultimilor 30 de ani de genetic microbian. Exist
azi posibilitatea inserrii de material genetic provenit de la oricare organism viu n
bacterii selecionate i adaptate astfel nct s poat realiza sarcini speciale, normale
la celula donatoare, ajungndu-se pn la posibilitatea ca tulpini de E.coli modificate
genetic s sintetizeze structuri de tipul anticorpilor.
tiina microbiologiei este esenial pentru sntate, pentru meninerea
sntii i prevenirea mbolnvirilor. Cunoaterea modului de transmitere a
microorganismelor reduce numrul cazurilor de "grip", cunoaterea sterilizrii,
dezinfeciei i antisepsiei permite evitarea infeciilor de spital, cunoaterea imunologiei
i imunopatologiei permite nelegerea interrelaiilor microorganism-gazd precum
importana procedurilor de imunizare.
4
Capitolul III
III.1. COCII
Sunt bacterii cu form sferic
cu diametre egale - Staphylococcus aureus;
cu diametre inegale
reniforme - Neisseria gonorrhoeae,
lanceolat - Streptococcus pneumoniae,
ovalar - Enterococcus faecalis.
n urma diviziunii cocii pot aprea n diferite configuraii spaiale caracteristice,
dup cum se divid pe unul, dou sau trei planuri.
micrococi - coci izolai - celulele rezultate din diviziune rmn
independente, neregulat rspndite;
diplococi - coci grupai cte doi - Streptococcus pneumoniae;
stafilococi coci aezai asemntor ciorchinilor de strugure cnd
diviziunea are loc n trei planuri neregulate;
streptococi coci n lanuri de lungimi variabile;
tetracoci - coci dispui simetric cte patru, datorit diviziunii n dou
planuri perpendiculare - Micrococcus tetragenus;
sarcina - coci aezai cte opt, grupai n cuburi sau pachete, datorit
diviziunii n cele trei planuri perpendiculare - Sarcina flava.
III.2. BACILII
Sunt bacterii cilindrice, a cror lungime este mai mare dect limea, n funcie
de raportul dintre cele dou axe existnd bacili scuri i subiri, scuri i groi, etc.
Forma bacililor este variat:
bastonae drepte, rectilinii - Bacillus anthracis,
uor ncurbate cu capete umflate - Corynebacterium diphtheriae,
ramificate - Mycobacterium tuberculosis.
Corpul bacteriilor poate fi deformat de prezena sporului, dac diametrul
transversal al acestuia este mai mare dect cel al corpului bacterian (genul
Clostridium).
Capetele bacililor pot fi
retezate - Bacillus anthracis
rotunjite Enterobacterii
ascuite - Fusobacterii.
n urma diviziunii bacilii se pot dispune ca
dispoziii neregulate Enterobacterii,
diplobacili - Klebsiella pneumoniae,
streptobacili - Bacillus anthracis,
aezri cu aspectul literelor T, Y, V, sau bee de chibrit mprtiate Corynebacterium diphtheriae.
10
Capitolul IV
11
14
caracterele genotipice ale formei vegetative din care provine. Structurile componente
ale sporului bacterian sunt codificate de gene represate n forma vegetativ a
bacteriei i derepresate n condiii defavorabile de mediu, cnd devin represate
genele vegetative. Prezena sporilor este un caracter constant la germenii din genul
Clostridium i un caracter facultativ la germenii din genul Bacillus.
Sporogeneza are loc n general n condiii nefavorabile formei vegetative, i
presupune apariia, n etape succesive, de modificri profunde n materialul nuclear,
citoplasm, compoziie chimic, structur, procesul esenial n cursul sporogenezei
fiind deshidratarea.
Materialul genetic este concentrat i mpreun cu apa legat, lipide, ioni de
magneziu, dipicolinat de calciu, este nconjurat de un strat protector: membrana
sporal, cortex sporal i nveliurile sporale.
In condiii favorabile are loc germinarea sporului: rehidratare, ruperea
membranelor i apariia unei singure forme vegetative, identic cu cea din care s-a
format anterior sporul.
Endosporul are forma ovalar sau sferic, poate fi aezat central, subterminal
i terminal n funcie de specia microbian iar dac diametrul sporului este mai mare
dect grosimea bacteriei, corpul bacterian se deformeaz. Pe baza acestor
caractere, bacilii sporulai, apar n general sub trei forme (fig.10):
a) - bacili cu sporul sferic, dispus central sau subterminal, mai mic dect celula
(Bacillus anthracis);
b) - bacili cu spor ovalar, mai mare dect diametrul transversal al celulei
bacteriene, aezat central (forme de fus, de brcu) sau subterminal (form de
rachet de tenis) (genul Clostridium);
c) - bacili cu spori terminali, sferici, cu dimensiuni mai mari dect celula,
asemntori cu un b de chibrit sau ac de gmlie (Clostridium tetani).
Sporul poate fi evideniat prin coloraii speciale. La coloraia Gram rmne
necolorat.
Sporul prezint o rezisten marcat fa de:
- uscciune
- cldur:
o umed - sporii speciei Bacillus anthracis sunt distrui n zece
minute la temperatura de fierbere a apei; unii spori de Clostridium botulinum suport
aceast temperatur timp de cteva ore: rezist 6 ore la 100 C, 2 ore la 105 C, 10'
la 120 C;
o uscat - este mai bine tolerat de sporii bacterieni, acetia fiind
distrui n 2-3 ore la 140 C n Poupinel;
- substane chimice: rezist la aciunea fenolului 5% timp de o
sptmn, la aciunea alcoolului mai multe sptmni.
17
Capitolul V
FIZIOLOGIA BACTERIAN
20
Nutrienii sunt substanele nutritive care sub form de soluie pot traversa
membrana citoplasmatic pentru a participa la reaciile metabolice specifice celulei
bacteriene.
Pentru nutriie bacteriile folosesc compuii din mediile naturale pe care i
transform n nutrieni prin:
- solvire minerale, CO2, O2;
- digestie extracelular prealabil, cu ajutorul unor hidrolaze se
formeaz aminoacizi din proteine, monozaharide din polizaharide, acizi grai i
glicerol din lipide etc.
Nutrienii ptrund n citoplasma celulei bacteriene traversnd membrana
citoplasmatic prin:
- difuziune simpl, pe baza diferenelor de concentraie;
- difuziune facilitat (prin proteine carrier), tot pe baza gradientului;
- transport activ, contragradient, cu consum de energie .
V.2.1.1.
Necesiti nutritive de baz
Elementele cu rol structural i funcional necesare majoritii bacteriilor sunt
carbonul, azotul, oxigenul i elemente minerale. Carbonul reprezint aproape
jumtate din greutatea uscat a bacteriei, azotul este necesar pentru sinteza
proteinelor iar oxigenul este prezent sub form de atomi n multe molecule biologice
(aminoacizi, nucleotide) i este necesar ca oxigen molecular pentru generarea
energiei n cadrul respiraiei aerobe a bacteriilor.
Elementele minerale sunt reprezentate de:
- Sulf prezent n unii aminoacizi, enzime, vitamine;
- Fosfor pentru sinteza acizilor nucleici, fosfolipidelor de membran;
- Fier, nichel, seleniu n compoziia unor enzime: citocromi,
peroxidaze;
- Sodiu, potasiu, magneziu, clor asigur echilibrul fizico-chimic al
celulei;
- Cobalt, cupru, mangan - activatori enzimatici.
n raport cu sursele folosite ca material de sintez (sursa de azot i carbon),
bacteriile se mpart n:
a) Bacteriile autotrofe, capabile s i sintetizeze metaboliii eseniali din
compuii anorganici, folosind CO2 ca surs de carbon i azotul atmosferic sau sruri
de amoniu ca surs de N. n funcie de energia utilizat pot fi fototrofe i chimiotrofe.
Sunt bacterii care triesc liber n natur, bacterii saprofite care triesc n sol, ap,
etc. avnd rol n circuitul materiei n natur.
b) Bacteriile heterotrofe, dependente de prezena unor compui organici,
utilizeaz surse organice de carbon, n special carbohidrai dar i proteine i lipide
ce servesc n acelai timp ca surse de energie, iar azotul poate fi att de natur
anorganic ct i organic. Prezint n totalitate un metabolism de tip chimiosintetic,
cu o mare diversitate de tipuri metabolice. Se disting urmtoarele tipuri principale:
b1. bacterii fixatoare de azot - folosesc surse organice de carbon i azot
molecular, atmosferic, triesc n sol, n simbioz cu plantele (genul Clostridium.);
b2. bacterii care folosesc carbon organic i azot din legturi anorganice
(E.coli);
b3. bacterii care folosesc att carbon ct i azot organic- majoritatea speciilor
saprofite i potenial patogene, prezente n cavitile naturale ale omului, precum i
speciile patogene pentru om.
21
23
Fermentaia
Este procesul de obinere a energiei n care att donorul ct i acceptorul de
electroni este de natur organic, n absena oxigenului acidul piruvic fiind convertit
la unul sau mai muli produi n funcie de specie. Cantitatea de ATP care se
formeaz este mic (2 molecule) (fig.13).
Dup modul de obinere a energiei bacteriile se pot clasifica n:
- strict aerobe folosesc exclusiv respiraia, nu se dezvolt n
absena oxigenului molecular (B. subtilis, B. anthracis, P. aeruginosa, M.
tuberculosis, etc.)
- strict anaerobe folosesc exclusiv fermentaia, oxigenul este toxic
pentru ele. Neavnd enzimele respiratorii (catalaz, peroxidaz etc.) se formeaz
peroxid de hidrogen care este toxic (genul Clostridium)
- aerobe - facultativ anaerobe pot obine energia att pe cale
oxidativ ct i fermentativ (E. coli, Staphylococcus, etc.);
- aerotolerante au metabolism fermentativ dar rmn viabile n
prezena oxigenului;
- microaerofile cresc numai n prezena unor cantiti reduse de
oxigen (spirochetele);
B2. Catabolismul lipidic i proteic
Producerea de energie din glicerol, acizi grai sau aminoacizi se face tot prin
ciclul Krebs.
C. Factorii de mediu care influeneaz metabolismul bacteriilor
C1. pH-ul majoritatea bacteriilor cultiv la pH aproximativ neutru (7,2 7,4),
condiiile de pH fiind oferite de mediul de cultur care pentru a neutraliza produii de
metabolism acizi conine fosfai, peptone, aminoacizi etc. Exist bacterii acidofile
care cultiv la pH acid (Lactobacillus) i bacterii bazofile care necesit un pH bazic
(Vibrio cholerae).
C2. presiunea osmotic este satisfcut de mediul de cultur. Bacteriile
patogene necesit o presiune identic cu cea din organismul uman. n mediile
hipotone cantitatea de ap care ptrunde n celul este controlat de peretele
bacterian. n mediile hipertone bacteria este supus plasmolizei. Bacteriile fr
perete bacterian sau cu perete deficitar sufer la orice modificare a presiunii
osmotice.
C3. temperatura majoritatea bacteriilor patogene pentru om cultiv la 37C.
n funcie de temperatura optim de dezvoltare bacteriile pot fi:
o psihrofile temperatura de 0 20C;
o mezofile - temperatura de 25 45C;
o termofile - temperatura de 50 70C.
C4. atmosfera n funcie de metabolismul bacterian se asigur prezena
oxigenului, absena oxigenului sau prezena diferitelor gaze inerte care favorizeaz
dezvoltarea speciei respective.
V.2.3. CRETEREA I MULTIPLICAREA BACTERIILOR
n urma nutriiei bacteriilor i a activitilor lor de metabolism are loc creterea
celulei bacteriene ca mrime i ca mas. ntruct creterea volumului celular
raportat la creterea suprafeei este mai mare la un moment dat se ajunge la un
punct critic ce impune restabilirea echilibrului optim ntre cele dou variabile. Acest
lucru se realizeaz prin diviziune binar, mecanismul de nmulire pentru majoritatea
25
bacteriilor. nmugurirea sau ramificarea este caracteristic unui numr foarte mic de
specii bacteriene.
Pentru c bacteriile sunt prea mici creterea este studiat la nivel de populaie
bacterian i nu la nivel de celul. Prin urmare cnd vorbim de creterea bacterian
facem referire la creterea numrului de celule ntr-o populaie bacterian i nu la
mrimea celulei bacteriene.
Pentru a vorbi despre creterea i multiplicarea bacterian folosim
urmtoarele noiuni:
- timp de generaie: timpul necesar dublrii populaiei bacteriene,
acesta fiind n medie 20 30 minute;
- rata de cretere: numrul de generaii n unitatea de timp;
- colonia bacterian: totalitatea bacteriilor rezultate din multiplicarea
unei singure celule bacteriene;
- cultura bacterian: totalitatea coloniilor de pe suprafaa mediului
solid;
o cultura mixt: format din mai multe tipuri de colonii (mai multe specii
bacteriene);
o cultura pur: format dintr-un singur tip de colonie (un singur germen).
- inocularea: depunerea unui produs biologic n cultura de celule, n
oul de gin embrionat, animale de laborator
- nsmnare: depunerea unui produs biologic pe / n mediu de
cultur.
Creterea bacterian este studiat pe medii de cultur optime pentru fiecare
specie n parte. n medii lichide celulele bacteriene sunt dispersate determinnd
modificri ale aspectului mediului: tulburare uniform, inel aderent de peretele
flaconului, pelicul la suprafaa mediului sau depozit. Pe medii de cultur solide
multiplicarea unei celule bacteriene formeaz colonia vizibil cu ochiul liber dup 18
24 de ore de la depunerea germenului pe mediu. O colonie bacterian provine
dintr-o celul bacterian sau din bacterii ataate (uniti formatoare de colonii =
UFC). n funcie de dimensiuni, contur, consisten, transparen, aspectul
suprafeei, pigment, aderena la mediu etc. coloniile bacteriene pot fi:
- colonii tip S (smooth) rotunde, bombate, suprafa neted, lucioase,
margini circulare, suspensioneaz omogen n ser fiziologic, produc tulburare n
mediul lichid, caracteristice bacteriilor patogene;
- colonii tip R (rough) margini neregulate, plate, suprafaa rugoas,
uscat, aderente de mediu, aglutineaz spontan n ser fiziologic, n mediul lichid
produc depozit cu supernatant clar, sunt caracteristice pentru germeni degradai, cu
modificri antigenice, de virulen. Exist trei specii bacteriene care fac excepie,
crescnd sub forma de colonii R pentru tulpini patogene: Mycobacterium
tuberculosis; Corynebacterium diphtheriae; Bacillus anthracis;
- colonii M (mucoid) foarte mari, lucioase, suprafaa neted, aspect
uleios, caracteristice pentru bacterii cu capsul;
- colonii untoase rotunde, bombate, margini regulate, suprafaa
neted, mate, consisten pstoas (cremoas), uneori pigmentate, caracteristice
pentru levuri;
- colonii pufoase: reea de filamente (hife) aeriene, caracteristice
fungilor filamentoi.
- fenomen de crare (invazie, migrare, roire): creterea se exprim printr-un
strat continuu, sub forma unor valuri succesive; fenomen caracteristic pentru Proteus spp.
26
Fig. 11.
Catabolismul glucozei prin
procesul de respiraie
glucoz
glicoliz
ATP
CO2
CO2
Ciclul
Krebs
lanul transferului
de electroni
ATP
ATP
H2O
glucoz
glicoliz
Acid piruvic
fermentaie
Clostridium
Enterobacter
acid butiric
+
butamol
+
izopropanol
+
aceton
+
CO2
etanol
+
acid lactic
+
acid formic
+
butandiol
+
acetoin
+
CO2
+
H2
Escherichia
etanol
+
acid lactic
+
acid acetic
+
acid succinic
+
CO2
+
H2
Lactobacillus
acid lactic
Propionibacterium
acid propionic
+
acid acetic
+
CO2
+
H2
27
Sursa de energie
Reacii de oxido-reducere
Lumin
Chimiotrofe
Fototrofe
Sursa de carbon
Sursa de carbon
Compui organici
CO 2
Compui organici
CO 2
chimioheterotrofe
chimioautotrofe
fotoheterotrofe
fotoautotrofe
O2
Non-O 2
Respiraie aerob
-
Compui
anorganici
Compui organici
Respiraie anaerob
Fermentaie
3
4
2
Punct de
autosterilizare
29
Capitolul VI
VI.1. DEFINIII
Septic infectat, contaminat cu germeni patogeni.
Aseptic (steril) lipsit de microbi patogeni sau nepatogeni.
Asepsie ansamblul de metode prin care se evit contaminarea unui substrat steril.
Sterilizare distrugerea sau ndeprtarea oricror forme de via, a tuturor
microorganismelor patogene sau nepatogene, forme vegetative sau sporulate de pe
o suprafa sau dintr-un substrat nensufleit.
Dezinfecie distrugerea formelor vegetative microbiene (mai rar a celor sporulate)
din sau de pe suprafaa unor substraturi nensufleite, cu ajutorul dezinfectantelor.
Dezinfectant substan chimic, toxic pentru esuturi vii, cu aciune microbicid,
ireversibil.
Antisepsie distrugerea sau ndeprtarea temporar a formelor vegetative
microbiene de pe substraturi vii (mucoase, tegumente, plgi), cu ajutorul
antisepticelor.
Antiseptic substan chimic, netoxic pentru esuturile vii, cu aciune reversibil,
bacteriostatic asupra microorganismelor.
Prezervare prevenirea multiplicrii unor microorganisme n produse farmaceutice,
vaccinuri, alimente etc.
31
32
VI.4. 6. ULTRASUNETELE
Au aciune microbicid prin aciune mecanic, sprgnd peretele celular acele
sunete care ating 16.000 cicli/sec. Utiliznd ultrasunete de diferite frecvene s-au
putut obine unii constitueni ai celulei bacteriene.
VI.4.7. FILTRAREA
Prin procesul de trecere a unui lichid sau gaz printr-un material poros, pot fi
reinute, mecanic sau electrostatic, cele mai multe dintre bacterii dac dimensiunea
porilor este de aproximativ 0,22 m. Filtrele cu dimensiunea porilor de 0,01 m pot
reine i virusurile mici aceste filtre avnd n mod real rol sterilizant al materialului
filtrat. Este o metod se sterilizare la rece aplicat soluiilor denaturabile termic.
VI.4. 8. LASERUL
Laserul (light amplification by stimulated emission of radiation) are efect
microbicid instantaneu.
33
35
lantibiotice tip A:
Sub comanda unor gene localizate cromozomal sau plasmidic, sunt sintetizate
la nivel ribozomal ca proteine precursoare inactive care, prin modificri enzimatice
sunt transformate n peptide active. Sunt produse de stafilococi, bacili Gram negativi
i lactococi, cele mai cunoscute lantibiotice fiind nisina (gene pe cromozomul celulei
bacteriene), subtilina, epidermina (gene pe plasmidul pTu32), gallidermina (produs
de Staphylococcus gallinarum cu plasmid Tu3928) . Nu se cunoate cu exactitate
modul de aciune al lantibioticelor.
Nisina are aciune inhibant asupra unor germeni Gram pozitivi
(Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus, Clostridium, Listeria) i inhib sporularea
germenilor din genul Bacillus i Clostridium, avnd aciune maxim la pH sub 5,5. Nu
are aciune asupra bacteriilor Gram negative, asupra fungilor i levurilor. Epidermina
produs de Staphylococcus epidermidis are aciune antimicrobian fa de
microorganisme patogene pentru piele: Streptococcus, Staphylococcus,
Propionibacterium acnes.
Sunt utilizate n industria alimentar i n medicin:
- nisina
conservant pentru vegetale, brnzeturi, carne, pete, buturi
alcoolice, vin etc.;
component al preparatelor cosmetice;
agent terapeutic cu aplicare local n infecii bacteriene n
medicina veterinar.
- epidermina
tratament n cazurile de acnee juvenil i eczeme la om
- gallidermina
n tratamentul foliculitelor, al impetogo-ului.
36
lantibiotice tip B
Cea mai cunoscut este lanthiopeptina care are aciune antiviral fa de
Herpes simplex virus.
VI.6.2. BACTERIOCINE
Sunt substane de natur proteic produse de unele tulpini bacteriene, cu
efect bactericid fa de tulpini din aceeai specie sau din specii nrudite. Se ataeaz
de peretele celular al bacteriilor sensibile i inhib unul sau mai multe procese
eseniale cum ar fi replicarea, transcripia, translaia sau etape ale metabolismului
energetic.
Producerea de bacteriocine este un mecanism prin care bacteriile ce
alctuiesc flora normal a unei nie ecologice fac fa competiiei fa de aceeai
nutrieni. Tulpinile productoare de bacteriocine sunt rezistente la aciunea propriilor
bacteriocine ceea ce permite utilizarea bacteriocinotipiei n identificarea unor
microorganisme.
Producerea bacteriocinelor este controlat de gene prezente pe plasmide
numite plasmide bacteriocinogene. Exemple de bacterii productoare de
bacteriocine: E.coli colicine; Serratia marcescina; Pseudomonas piocina etc.
VI.6.3. BACTERIOFAGUL
Este virusul care paraziteaz bacteriile. Are structur complex fiind alctuit
din (fig. 15):
capul fagului este alctuit dintr-o capsid cu simetrie icosaedric
ce adpostete n interior acidul nucleic (ADN dublu catenar sau ARN);
coada fagului cu simetrie helical este alctuit din urmtoarele
elemente: cilindrul axial nconjurat de teaca cozii, placa bazal cu croete de fixare i
fibrele cozii. Coada fagului este de natur proteic i are rol n adsorbia i
penetrarea n celula bacterian.
ntre bacteriofag i bacteria gazd se stabilesc dou tipuri de relaii:
a. de tip litic (ciclul litic; de tip productiv)
Are urmtoarele etape:
1. adsorbia: bacteriofagul are receptori strict specifici care recunosc
receptorii de pe suprafaa bacteriei. Ataarea de receptorii celulari se realizeaz
iniial prin fibrele cozii (fixare reversibil) i apoi prin croetele plcii bazale (fixare
ireversibil);
2. penetrarea: mureina din peretele bacterian este lizat de muramidaza
eliberat de fag. Teaca cozii fagului prin contractare antreneaz cilindrul axial prin
peretele bacteriei realiznd apoi injectarea acidului nucleic fagic n citoplasma
bacterian;
3. multiplicarea: la 4 minute dup ptrunderea ADN-ului fagic n citoplasma
bacteriei, ADN-ul bacterian este blocat funcia acestuia fiind preluat de acidul
nucleic al fagului. Acesta va coordona sinteza componentelor proprii fagului;
4. maturarea fagului
5. eliberarea fagului matur, virulent prin liza bacteriei.
Bacteriile care permit desfurarea ciclului litic se numesc bacterii
lizosensibile. Bacteriile care nu permit infecia cu un fag sunt bacterii lizorezistente,
37
38
Capitolul VII
GENETICA BACTERIAN
VII.1. DEFINIII
Genetica bacterian se ocup cu studiul ereditii i a variabilitii bacteriene.
Genom suma genelor unui organism;
Genotip totalitatea informaiei genetice a unui organism;
Fenotip totalitatea caracterelor observabile, produse de genotip n
interaciune cu mediul ambiant.
39
40
42
43
Capitolul VIII
VIII.1. DEFINIII
Aderen (ataare, adeziune) procesul prin care bacteria se leag de
suprafaa celulei int. Este principalul pas n iniierea procesului infecios.
Diseminare (invazie) procesul prin care microorganismul se rspndete de
la poarta de intrare n tot organismul.
Infecie multiplicarea unui agent infecios patogen n interiorul organismului,
chiar dac este nensoit de manifestri clinice de boal.
Microorganism nepatogen microrganism care face parte din flora normal,
care nu produce mbolnvire.
Microorganism patogen microorganism care ntotdeauna cauzeaz boal.
Microorganism potenial patogen (oportunist) microorganism capabil s
cauzeze mbolnvire doar atunci cnd este afectat sistemul de aprare al
macroorganismului.
Microorganism saprofit bacterii care triesc n natur, se stabilesc rar n
organism, au importan redus ca factori patogeni.
Patogenitate capacitatea unui microorganism de a a cauza boal prin
virulen sau toxigenitate.
Purttor asimptomatic persoan care adpostete microorganismul fr a
prezenta semne clinice de boal, care poate transmite microorganismul celor din jur.
44
45
46
e. eliminare
Microorganismul poate fi eliminat din organismul infectat pe tot parcursul bolii
sau doar n anumite etape de evoluie ale bolii prin intermediul excreiilor i secreiilor
eliminate de pacient: materii fecale, urin, sput, puroi etc.
Procesul
infecios
are
trei
macroorganismul, mediul nconjurtor.
verigi
principale:
microorganismul,
47
VIII.2.2.1.2. TOXIGENEZA
Germenii se multiplic la poarta de intrare unde elaboreaz toxine care produc
alterri celulare i tisulare la distan. Bacteriile produc 2 categorii de toxine: toxine
proteice (exotoxine) i toxine lipopolizaharidice (endotoxine).
Exotoxinele sunt produse fie de bacili Gram pozitivi, codificate de gene ale
profagilor (toxina difteric, toxina botulinic) sau codificate plasmidic (toxina tetanic,
toxina crbunoas). fie de bacili Gram negativi, codificate de gene cromozomale
(V.cholerae, Shigella dysenteriae tip 1, P.aeruginosa) sau plasmidic (unele tulpini de
E.coli). Exotoxinele pot fi citotoxine sau toxine A-B
Citotoxinele acioneaz asupra membranei celulelor eucariote.
Toxinele A-B sunt formate din 2 pri: polipeptidul A (active) (enzim, ADPriboziltransferaza) i una sau mai multe polipeptide B (bind) cu rol de liganzi.
Exotoxina se leag de receptorul specific celular, prin pinocitoz. Poriunea A ajunge
n citoplasm unde va ataca o anumit int molecular ceea ce face ca fiecare
exotoxin s aib aciune specific. Exotoxinele A-B au urmtoarele caracteristici:
- se desprind uor de bacteriile care le produc, difuznd n mediul
nconjurtor;
- pot fi obinute pe medii de cultur, pot fi separate prin filtrare;
- sunt proteine cu greutate molecular mare;
- sunt termolabile (excepie enterotoxinele) i sunt descompuse de enzimele
proteolitice;
- sunt antigene complete, puternice, anticorpii specifici formai fa de
exotoxine numindu-se antitoxine. Pentru c doza toxic este mai mic dect cea
imunogen, animalul de laborator moare intoxicat fr s produc anticorpi iar
pacientul care supravieuiete dup tetanos sau botulism rmne receptiv pentru c
nu se imunizeaz. Antitoxinele se formeaz n urma vaccinrii;
- pot fi transformate n anatoxine (toxoizi), netoxice, puternic antigenice,
sub aciunea concomitent a cldurii i a formolului. Se utilizeaz n profilaxia bolilor
produse de germenii respectivi i pentru hiperimunizarea animalelor de laborator n
scopul obinerii de seruri antitoxice. Anticorpii (antitoxine) aprui dup vaccinare cu
anatoxin neutralizeaz activitatea toxic prin cuplare specific cu toxina;
- au toxicitate foarte mare (DLM de ordinul ng/kg corp);
- efectul lor se instaleaz dup o perioad de incubaie;
48
bariere mucoase
Barierele mucoase sunt mai complexe dar mai puin eficiente dect
tegumentul. Prin mucoase pot ptrunde un numr destul de mare de bacterii n
organism. Barierele mucoase acioneaz ca:
- bariere mecanice prin epiteliile pavimentoase stratificate i variate epitelii
secretoare; prin secreiile care spal suprafeele;
- bariera glicoproteic mucusul care mpiedic aderarea bacteriilor de
substratul specific;
- bariera chimic prin secreiile care conin lactoferin i lizozim;
- bariera ecologic prin microbiota mucoaselor.
B. bariere i mecanisme nespecifice interne:
bariere mecanice
Sunt reprezentate de esutul conjunctiv dens care poate fi depit relativ uor
de bacteriile care elibereaz colagenaze.
bariera chimic
Este reprezentat de interferoni, de reactivii de faz acut i de sistemul
complement.
INTERFERONII
Sunt proteine cu greutate molecular mic, elaborate de celula infectat cu
virus, proteine care protejeaz de infecia viral celulele neinfectate (fig. 17).
Interferonii au aciune antiviral indirect:
- Interferonii eliberai de celula productoare se fixeaz pe receptorii
celulelor adiacente neinfectate. Ei induc sinteza unor proteine i enzime celulare care
blocheaz replicarea viral;
- Au aciune antiproliferativ prelungind timpul de generaie al celulelor
normale i tumorale;
- Interferonii care sunt citokine au i activitate de modulare a rspunsului
imun. Activeaz funciile citotoxice ale macrofagelor, celulelor NK i limfocitelor T
citotoxice. Intensific exprimarea unor antigene virale pe membrana citoplasmatic
favoriznd recunoaterea celulei int de ctre limfocitele T citotoxice.
Interferonii sunt produi de celulele tuturor vertebratelor. n mod normal
celulele nu produc interferoni dect atunci cnd sunt stimulate. Infecia viral este
inductoare de interferon, virusurile ARN fiind inductori mai puternici fa de virusurile
cu genom ADN. Producerea de interferon poate fi indus de asemenea de
stimularea mitogen sau de endotoxinele bacteriene.
Interferonii sunt activi numai fa de specia productoare (specificitate de
gazd) dar activitatea lor nu este virus specific. Ei inhib nu numai replicarea
virusului inductor ci i replicarea unei varieti de virusuri.
Interferonii sunt extrem de activi. Se estimeaz c sunt suficiente sub 50 de
molecule de interferon fixate per celul pentru a induce un status antiviral.
Mecanismul de aciune al interferonilor este puin cunoscut. Celula originar
infectat nu este protejat de interferonul pe care l produce.
Intervenia interferonului are rolul de a ntrzia replicarea viral i
generalizarea infeciei, permind dezvoltarea rspunsului imun. Producerea de
50
interferon este prima linie de aprare nespecific antiviral pentru c apare ntr-un
interval mai mic de 48 de ore de la infecie (ncepe la 4-5 ore de la infecie, atinge
nivel maxim la 20-50 ore dup care se oprete) determinnd scderea cantitii de
virus infectant nc nainte de apariia anticorpilor specifici (fig. 20). De asemenea
interferonul este activ i la persoanele cu agammaglobulinemie.
Fig. 20. Cinetica sintezei de interferon i anticorpi dup infecie viral
respiratorie (dup Stringfellow D. A.)
microorganism
Produs de
leucocite
Numr gene
codante
Ageni inductori
20 gene de pe
cromozomul 9
virus, ARN dc,
endotoxina
stabil
Stabilitate la pH
2,0
Receptori celulari
pt. interferon
Tip de interferon
fibroblati
limfocite T (CD4,CD8),
macrofage, celule NK
1 gen de pe
1 gen de pe cromozomul 12
cromozomul 9
virus
lectin, mitogeni, stimulare cu
Ag
stabil
labil
Proteine de membran,
distincte pt IFN , codate de
gene de pe cromozomul 6 i
21
51
bariera celular
52
ANTICORPI
Sunt efectorii moleculari principali ai sistemului imun umoral. Sunt acele
globuline specifice produse de organismul uman sau animal n urma stimulului unui
antigen. Au capacitatea de a recunoate i de a reaciona specific cu antigenul
respectiv.
Din punct de vedere chimic sunt -globuline care datorit provenienei i
funciei pe care o ndeplinesc sunt numite imunoglobuline (Ig). Exist 5 clase de Ig:
IgG, IgM, IgA, IgE, IgD. Se gsesc n concentraii mari n ser dar n general sunt
prezente i n saliv, lacrimi, lapte matern. n lichidul cefalo-rahidian i n urin sunt
prezente n cantiti mici.
n afara funciei de recunoatere a antigenului, anticorpii mai au o funcie
important: aceea de fixare a complementului atunci cnd fac parte din complexe
antigen-anticorp.
COMPLEMENTUL
Complementul, prezent n sngele tuturor vertebratelor este un complex
alctuit din 15 proteine plasmatice care este activat de complexul antigen-anticorp
determinnd anihilarea sau distrugerea antigenului (hemoliza, bacterioliza, citoliza
etc.).
La primul contact al organismului gazd cu antigenul se instaleaz rspunsul
imun primar n care IgM apar primele i predomin cantitativ.
Dinamica rspunsului imun primar este:
- perioad de laten 5-7 zile, uneori 2 sptmni n care nu se pot
evidenia anticorpi;
- perioad de cretere treptat a titrului de anticorpi, atingnd nivelul
maxim n 9-15 zile;
- perioad staionar de scurt durat n care cantitatea de anticorpi
se menine nemodificat;
- scdere rapid a cantitii de anticorpi pn la valori foarte joase (fig.
19).
La repetarea expunerii la antigen are loc rspunsul imun secundar. Celulele
cu memorie i comuteaz sinteza anticorpilor n clasa IgG care devine
predominant. Faza de inducie este mai scurt (2-3 zile), titrul anticorpilor (mai ales
54
IgG i IgA) crete rapid (4-6 zile) i la un nivel mult mai ridicat, persistnd timp mai
ndelungat dect n rspunsul imun primar. Descreterea se produce lent putndu-se
detecta anticorpi i dup luni sau ani de zile. n rspunsul secundar apar IgM dar
predomin net cantitativ IgG.
56
Capitolul IX
IX.1. DEFINIII
Infecie interaciunea dintre organismul gazd i microorganismul (bacterii,
fungi, protozoare, helmini, virusuri) care a depit barierele antimicrobiene primare;
Infecie inaparent interrelaia se rezum la rspunsul imun, agentul
infecios determin leziuni minime care nu perturb homeostazia organismului
gazd;
Boal infecioas interrelaia organism gazd-microorganism are ca urmare
leziuni importante cauzatoare de perturbri ale homeostaziei manifestate prin
simptome i semne de suferin.
IX.2. INFECIA
Dup proveniena agentului infecios infeciile pot fi:
- endogene determinate de microorganisme ale microbiotei proprii;
- exogene determinate de microorganisme provenite de la un rezervor de
infecie care a strbtut o cale de transmitere i a gsit o gazd receptiv.
Rezervorul de infecie este organismul care adpostete agentul infecios
asigurnd supravieuirea i/sau nmulirea acestuia. Rezervor de infecie poate fi:
- omul
o cu boli infecioase acute sau cronice;
o purttor asimptomatic de germeni patogeni.
- animalul domestic sau slbatic, bolnav sau purttor de germeni;
- mediul nconjurtor: apa (vibrioni, pseudomonade), solul (bacil tetanic,
pseudomonade), alimente (salmonella).
Transmiterea agentului infecios presupune existena unor etape:
- eliminarea agentului infecios din rezervor, eliminare realizat pe diferite ci
n funcie de natura microorganismului, prin secreii, excrete, exsudate, scuame etc;
- contaminarea elementelor de mediu care devin suporturi materiale ale
transmiterii. Modalitile de transmitere ale agentului infecios pot fi: directe (contact
sexual, srut, transplacentar, intrapartum) sau indirecte prin aer, ap, sol, mn
57
59
60
61
62
63
64
F.C., 1983)
Peritriche
Monotriche
Lofotriche
Amfitriche
Amfilofotriche
65
66
(dup
D.A.Stringfellow, 1980)
1.
celula
infectat
2. producere de
IFN
3.
eliberarea
IFN
4. aciune pe
alt celul
5.
proteine
sintez
de
antivirale
protective
67
Bibliografie selectiv
Buiuc D., Negu M.: Tratat de microbiologie clinic, Editura Medical, 1999
Buiuc D.: Microbiologie medical. Ghid pentru studiul i practica medicinei,
Ed. A VI-a, Editura Gr.T.Popa Iai, 2003
Popa M. I.: Microbiologie general i microbiologie special, Editura Concept
Publishing House, 1999
68
Cuprins
CAPITOLUL I....................................................................................................................................1
MICROBIOLOGIA DEFINIIE, OBIECT, SCOP ..................................................................................................... 2
CAPITOLUL II...................................................................................................................................4
ISTORICUL MICROBIOLOGIEI................................................................................................................................. 4
CAPITOLUL III..................................................................................................................................9
MORFOLOGIA CELULEI BACTERIENE .................................................................................................................. 9
III.1. COCII............................................................................................................................................................. 9
III.2. BACILII .......................................................................................................................................................... 9
III.3. FORMELE SPIRALATE .............................................................................................................................. 10
III. 4. DIMENSIUNEA BACTERIILOR.................................................................................................................. 10
III. 5. CLASIFICAREA BACTERIILOR................................................................................................................. 10
CAPITOLUL IV ...............................................................................................................................11
STRUCTURA CELULEI BACTERIENE................................................................................................................... 11
IV.1. ELEMENTE OBLIGATORII ALE CELULEI BACTERIENE ......................................................................... 12
IV.1.1. PERETELE BACTERIAN.................................................................................................................... 12
IV. 1. 2. MEMBRANA CITOPLASMATIC..................................................................................................... 14
IV.1.3. CITOPLASMA BACTERIAN............................................................................................................. 14
IV.1.4. MATERIALUL NUCLEAR ................................................................................................................... 15
IV.2. ELEMENTE FACULTATIVE ALE CELULEI BACTERIENE........................................................................ 15
IV.2.1. GLICOCALIXUL BACTERIAN ............................................................................................................ 15
IV.2.2. CILII SAU FLAGELII ........................................................................................................................... 15
IV.2.3. FIMBRIILE SAU PILII.......................................................................................................................... 16
IV.2.4. ENDOSPORUL BACTERIAN ............................................................................................................. 16
CAPITOLUL V ................................................................................................................................18
FIZIOLOGIA BACTERIAN..................................................................................................................................... 18
V.1. CONSTITUIA CHIMIC A BACTERIILOR................................................................................................. 18
V.2. NUTRIIA, METABOLISMUL I CRETEREA BACTERIAN ................................................................... 20
V.2.1. NUTRIIA BACTERIAN .................................................................................................................... 20
V.2.2. METABOLISMUL BACTERIAN ........................................................................................................... 23
V.2.3. CRETEREA I MULTIPLICAREA BACTERIILOR ............................................................................ 25
V.2.4. DINAMICA MULTIPLICRII BACTERIILOR........................................................................................ 28
CAPITOLUL VI ...............................................................................................................................30
69
CAPITOLUL IX ...............................................................................................................................57
INFECIE I BOAL INFECIOAS ...................................................................................................................... 57
IX.1. DEFINIII .................................................................................................................................................... 57
IX.2. INFECIA.................................................................................................................................................... 57
IX.3. BOALA INFECIOAS ............................................................................................................................... 58
70