Sunteți pe pagina 1din 70

UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE

TRGU-MURE

Dr. Felicia Toma


ef de lucrri

BACTERIOLOGIE GENERAL
- CURS

- 2005 -

Capitolul I

MICROBIOLOGIA DEFINIIE, OBIECT, SCOP

Ramura biologiei, ansamblul de discipline experimentale, care se ocup cu


studiul microorganismelor unicelulare, invizibile cu ochiul liber (ciuperci microscopice,
alge, bacterii, virusuri, protozoare) se numete microbiologie.
Microbiologia studiaz procesele fizice, chimice i biologice legate de
activitatea microorganismelor, pentru a putea folosi pe cele utile i pentru a
contracara procesele duntoare omului.
Rolul microorganismelor este foarte important pentru planeta noastr, Pasteur
spunnd c dac activitatea acestor fiine minuscule ar nceta, viaa nu ar fi posibil.
Microorganismele, cele mai vechi, mai numeroase i mai diversificate forme
de via de pe pmnt, au rol n descompunerea materiei organice, menin fertilitatea
solului.
Microorganismele realizeaz procesul de mineralizare a materiei organice,
avnd o contribuie esenial n circulaia materiei n natur, proces fr de care solul
ar srci n elemente biogene ducnd la dispariia vieii.
n mediul marin, microorganismele particip, prin trasformarea substanelor
din acest mediu, la circuitul elementelor biogene, la fenomenele geologice submarine
cauznd, din pcate i neajunsuri (boli ale petilor, aciunea corosiv, etc.).
Microorganismele au rol deosebit n formarea zcmintelor petroliere, de
crbuni, de salpetru, de sulf, n formarea minereurilor de fier.
Microorganismele sunt utilizate n diferite ramuri ale industriei.
n industria alimentar sunt utile la fabricarea alcoolului etilic, obinerea vinului,
a berii, n industria panificaiei, la producerea de acid acetic (oet), la prepararea
produselor lactate (lapte acru, iaurt, brnzeturi), obinerea murturilor.
Deosebit de util este, pentru industria medicamentelor, biosinteza microbian
a vitaminelor (B1 , B2, B12, C, A, D2) , biosinteza substanelor antibiotice, etc.
Agricultura modern utilizeaz din ce n ce mai mult cunotinele de
microbiologie.
Din pcate microorganismele cauzeaz multe neajunsuri prin procesele de
degradare microbian: degradarea documentelor de piatr, coroziunea microbian a
metalelor, descompunerea alimentelor, biodeteriorarea cauciucului, a maselor
plastice, a textilelor, a hrtiei, a diferitelor opere de art etc.

Cele mai multe microorganisme sunt utile, doar o parte fiind implicate n
patologie.
n medicin microorganismele sunt deosebit de importante avnd att efecte
benefice asupra organismului uman ct i efecte patogene, cauznd boli ale omului
i animalelor.
Disciplinele microbiologiei sunt la fel de variate ca i microorganismele.
Dup domeniul de activitate n care se aplic noiunile de microbiologie se
disting diferite ramuri aplicative ale acesteia: microbiologia solului, microbiologia
marin, microbiologia industrial, microbiologia agricol, microbiologia medical,
microbiologia veterinar etc.
Microbiologia medical se ocup cu studiul microorganismelor care au aciune
benefic sau dimpotriv, duntoare asupra organismului uman (micro = mic, bios =
via).
Unele discipline ale microbiologiei sunt fundamentale: protozoologia,
micologia, bacteriologia, virologia, genetica i taxonomia bacterian i mai nou
ingineria genetic.
n formarea medicului este indispensabil dobndirea cunotinelor de
microbiologie pentru c, indiferent de ramura medicinii pe care o va alege, se va lovi
de infecii care reprezint aproximativ din patologia uman. Cunotinele de
microbiologie vor ajuta la:
1.stabilirea diagnosticului etiologic al bolilor infecioase ;
2. alegerea tratamentului antiinfecios profilactic sau curativ, cel mai adecvat;
3. cunoaterea metodelor de profilaxie a bolilor infecioase.
Este foarte important ca medicul s raioneze microbiologic:
 s cunoasc microorganismele care populeaz elementele ambientului ca
i biotopurile organismului uman;
 s cunoasc modul de transmitere al microorganismelor;
 s cunoasc urmrile contaminrii cu microorganisme n practica medical
i chirurgical;
 s cunoasc rolul microorganismelor pentru sntate i boal;
 s cunoasc etiopatogenia bolilor infecioase;
 s acioneze n aa fel nct s previn contaminarea microbian a
pacientului, a personalului din spital sau a sa;
 S tie recolta corect un produs patologic destinat examenului
bacteriologic;
 S aib cunotine temeinice referitoare la terapia antimicrobian.

Capitolul II

ISTORICUL MICROBIOLOGIEI

Microbiologia reprezint studiul unor organisme vii dintre care o parte sunt
ntr-att de mici nct sunt vizibile doar la microscop. Unele microorganisme necesit o
mai bun mrire pentru a fi vzute, mrire care poate fi obinut doar cu ajutorul
microscopului electronic. Microorganismele studiate cuprind alge, fungi, bacterii, virusuri
i parazii.
Microorganismele sunt cele mai vechi, numeroase i diversificate forme de
via pe pmnt. Se afl n mediul nconjurtor, au rol n descompunerea materiei
organice i menin fertilitatea solulului. Majoritatea microorganismelor sunt utile i
numai o parte sunt implicate, n diferite grade, n patologie.
Microbiologia a avansat continuu, de la nivelul unei tiine relativ simple la un
nivel care a determinat nsemnate progrese n prevenirea, diagnosticul i tratamentul
bolilor. Numai n acest secol, datorit n mare parte aplicaiilor microbiologiei, sperana
de via a crescut semnificativ.
La nceputul secolului oamenii decedau datorit unor cauze infecioase
(rujeol, varicel, rubeol, variol, oreion, cium, tifos exantematic, tuberculoz,
sifilis, difterie etc) care astzi au o evoluie letal numai n anumite situaii (forme clinice
avansate, atipice, neglijate). Datorit microbiologiei, conservarea hranei, condiiile
sanitare etc. s-au mbuntit.
Pe de alt parte, microbiologia trebuie s fac fa provocrilor viitorului, dar
este sigur c anumite progrese n acest sens sunt deja realizate sau n curs de
realizare. Dezvoltarea "tehnologiei ADN" a nceput n 1973 i este bazat pe
cunotinele acumulate n cursul ultimilor 30 de ani de genetic microbian. Exist
azi posibilitatea inserrii de material genetic provenit de la oricare organism viu n
bacterii selecionate i adaptate astfel nct s poat realiza sarcini speciale, normale
la celula donatoare, ajungndu-se pn la posibilitatea ca tulpini de E.coli modificate
genetic s sintetizeze structuri de tipul anticorpilor.
tiina microbiologiei este esenial pentru sntate, pentru meninerea
sntii i prevenirea mbolnvirilor. Cunoaterea modului de transmitere a
microorganismelor reduce numrul cazurilor de "grip", cunoaterea sterilizrii,
dezinfeciei i antisepsiei permite evitarea infeciilor de spital, cunoaterea imunologiei
i imunopatologiei permite nelegerea interrelaiilor microorganism-gazd precum
importana procedurilor de imunizare.
4

Este evident c oricine lucreaz n domeniul sanitar ar putea nelege


principiile de baz ale microbiologiei, meninerea sntii i prevenirea bolii pentru a
nelege procedurile profilactice, adaptarea lor inteligent i antrenarea personalului
auxiliar (tehnicieni, surori, ngrijitori etc) n utilizarea unor proceduri corecte.
Studiul microbiologiei nu este dificil, n sensul c microbiologia este o tiin
foarte logic i n mod sigur una dintre cele mai fascinante.
Microorganismele au fost descoperite relativ tardiv, n 1680. Datorit
dimensiunilor mici, cunoaterea existenei lor a trebuit s atepte descoperirea
microscopului. Dei Zacharias Janssen este creditat a fi realizat primul microscop n
1590, prima persoan care a vzut i a descris microorganisme a fost Antony van
Leeuwenhoek (1632-1723), un vnztor irlandez de mruniuri care a vrut s
observe estura hainelor fine. Microscopul lui, pe care l-a construit singur, a constat
dintr-o lentil biconvex ntr-un cadru metalic, cu o mrire de pn la 270 de ori. Cu
aceste instrumente a examinat apa din bli, tartrul dentar, materiile fecale provenite
de la un pacient cu dizenterie etc. A fost mirat s observe n toate aceste substane,
mici organisme sferice n form de igar, spirale, unele aflate n micare rapid, pe
care le-a numit "animalicule". Desenele pe care le-a fcut probeaz c ceea ce a vzut
au fost bacterii, protozoare i alte microorganisme. Pe parcursul a 40 de ani, van
Leeuwenhoek a scris 125 de scrisori traduse n englez i predate Societii Regale
din Londra, n plus, 27 lucrri au fost publicate n Memoriile Academiei Franceze de
tiine. Universitatea din Utrecht pretinde c deine n muzeu unele dintre
microscoapele originale ale lui Leeuwenhoek.
Cu mult nainte de a se fi cunoscut faptul c microorganismele sunt cauza
bolilor transmisibile, se practicau metode de prevenire a bolii. De exemplu, n 1796
Edward Jenner a artat c variola ar putea fi prevenit prin vaccinare. Semmelweis a
avut contribuii importante n vederea rspndirii bolilor n materniti i spitale
utiliznd substane chimice "dezinfectante".
Totui, trebuie menionat c regulile i metodele noii tiine precum i
medicina preventiv sunt bazate pe activitatea de o via a doi oameni, Louis
Pasteur (1822-1895) i Robert Koch(1843-1910).
Chimistul francez Pasteur, faimos pentru descoperirea polarimetriei, a
demonstrat c fermentaia i putrefacia au fost cauzate de organisme vii i a notat
o asemnare ntre aceste procese i bolile infecioase, a luat n discuie stricarea
vinurilor i berii ca i "boli" ale acestor produse .
Pasteur a fost cel care a realizat un experiment prin care a artat c, att ct
era cunoscut pe baza datelor disponibile, organismele vii au luat natere numai din
organisme vii, i nu din materie moart. Dei problema "generrii spontane" a fost
aparent rezolvat n secolul al XIX-lea, ea a fost redeschis n secolul al XX-lea
ntr-un mod cu mult mai sofisticat sub numele "evoluiei chimice". Astzi, utiliznd
substane simple, de origine natural i gaze, vapori i arcuri electrice sub
temperatur i presiune crescut, microbiologii i chimitii pot sintetiza muli compui
compleci organici care au fost descoperii iniial doar n celulele vii.
Dup studiul fermentrii vinului, Pasteur a investigat o boal transmisibil la
viermii de mtase i ca rezultat a formulat teoria legat de implicarea germenilor n
producerea unor boli. Referitor la bolile oamenilor, a insistat ca bandajele s fie
curate i instrumentele din spital s fie fierte.
Joseph Lister (1827-1912), un chirurg englez, a aplicat descoperirile lui
Pasteur n chirurgie chiar nainte ca bacteriile care determin infeciile chirurgicale s
fi fost descoperite. Lucrrile lui Lister reprezint baza tehnicii chirurgicale aseptice din
ziua de azi.
5

n experimente ingenioase, Pasteur a protejat de antrax diferite ierbivore


prin vaccinarea cu un preparat extras din Bacillus anthracis.
"Tratamentul profilactic" al rabiei a fost dezvoltat prin injectarea de material
uscat din mduva spinrii de la animalele care au murit de rabie. Joseph Meister, un
bieel mucat de un cine turbat, a fost primul om a crui via a fost salvat prin
aceast metod i care nu s-a mbolnvit de hidrofobie (rabie) pentru c a fost protejat
de injeciile fcute de Pasteur. O jumtate de secol mai trziu, Joseph Meister, portar
la Institutul Pasteur, s-a sinucis atunci cnd i s-a ordonat de ctre soldaii germani s
deschid cripta lui Pasteur.
Ferdinand Cohn (1828-1898) a fost unul dintre cei mai renumii microbiologi
germani. El a extins cercetrile lui Pasteur n propriul laborator, unde a lucrat cu alge
i fungi. Cohn a devenit foarte interesat de bacteriologie i a scris una dintre primele
cri referitoare la bacterii. A clasificat bacteriile n genuri i specii. Cohn a
reprezentat un mare ajutor pentru Robert Koch, pe care 1-a ncurajat s publice
lucrrile sale asupra antraxului.
Cu 200 de ani naintea apariiei bacteriologiei, Robert Boyle a sugerat c
anumite boli sunt cauzate de aciunea organismelor vii.
Anatomistul Henle a sugerat c bolile infecioase ar putea fi determinate direct
de ctre microorganisme. Unul dintre studenii lui Henle a fost chiar Robert Koch,
care a devenit un medic faimos i a asigurat toate datele necesare pentru a
demonstra "teoria microbian a bolii".
Dezvoltarea metodelor pentru izolarea bacteriilor n cultura pur a fost printre
cele mai importante descoperiri ale tehnicilor microbiologice i a fost n mare parte
opera lui Robert Koch.
O cultur pur de microorganisme este una n care numai un singur tip de
organism crete n eprubetele test sau pe plci cu mediu de cultur.
n condiii naturale multe microorganisme din diferite specii exist n mod
obinuit n acelai mediu. Spre exemplu, n materiile fecale ale unui pacient cu febr
tifoid, bacilii tifici sunt "amestecai" cu bilioane de celule din alte specii de bacterii i
alte forme de microorganisme. n cadrul diagnosticului medical microbiologic este
important izolarea n cultur pur a germenilor patogeni.
n 1876 Koch a izolat n "cultur pur" bacteria care determin antraxul pornind
de la splina vitelor infectate i a fost capabil s infecteze oareci cu aceast cultur.
Implicat n cercetarea etiologiei exacte a bolilor infecioase, Koch a rezumat ceea ce
a considerat c reprezint datele eseniale pentru a demonstra c un microorganism
este cauza infeciei. Aceste date sunt cuprinse n patru postulate, denumite Postulatele
lui Koch, i anume:
1. Microorganismele care determin boala trebuie s poat fi identificate n
toate cazurile de boal n relaie patologic cu simptomele i leziunile pe care le
determin.
2. Microorganismul trebuie s poat fi izolat de la victimele bolii n cultur
pur: pentru studiul n laborator.
3. Cnd cultura este inoculat la un animal susceptibil, trebuie s reproduc
boala (sau, cum s-a notificat mai trziu, s induc apariia anticorpilor specifici la
noua gazd).
4. Microorganismul trebuie s poat fi izolat din nou n cultura pur din infecia
produs experimental.
Utiliznd aceste reguli precum i tehnici microbiologice, Koch a descoperit
bacilul tuberculos (bacilul Koch), bacilul holeric etc, precum i modul de transmitere a
numeroase alte boli.
6

Descoperirile menionate au reprezentat debutul bacteriologiei, micologiei,


virusologiei, parazitologiei i imunologiei ca tiine. n doar aproximativ 15 ani (dup
1880) au fost descoperite i izolate n cultur pur microorganisme implicate n multe
dintre bolile infecioase importante. Aceste descoperiri au fcut posibil stabilirea ca
entiti bine definite a medicinei preventive i respectiv a terapiei specifice (etiologice).
Ilia Mecinikov a evideniat modul natural de aprare a organismului fa de
agenii infecioi prin anumite celule care au proprieti fagocitare i a scris n 1901
primul tratat de imunologie.
La coala format de profesorul Victor Babe (1854-1926) i de profesorul Ion
Cantacuzino (1863-1934) s-au pregtit multe generaii de microbiologi, care au
contribuit activ la dezvoltarea microbiologici romneti.
Victor Babe a fost n acelai timp anatomopatolog i microbiolog. A fost att
elevul lui R.Koch ct i al lui L. Pasteur. A fost numit profesor la Budapesta la o
vrst foarte tnr. n anul 1885 public mpreun cu Cornil primul tratat de
bacteriologie din lume. A demonstrat importana introducerii tehnicilor microbiologice n
anatomopatologie.
Evideniaz proprietile neutralizante ale serurilor imune, descoper
corpusculii metacromatici ai bacilului difteric (Babes-Ernst), descoper o nou
metod de preparare a serului antidifteric etc. n 1888 este numit profesor de
anatomie patologic i bacteriologie la Facultatea de Medicin din Bucureti. Este
fondatorul Institutului "Victor Babe", unde prepar n 1889 vaccin antirabic, ara
noastr fiind a treia ar din lume care reuete s prepare acest vaccin.
Ion Cantacuzino a avut o personalitate cu totul deosebit, imposibil de cuprins
ntr-o trecere att de sumar prin istoricul microbiologiei. A studiat la Paris Filozofia i
Literele, tiinele Naturale i Medicina. Pregtirea n microbiologie a fcut-o n
laboratorul lui Ilia Mecinikov, la Paris. Este numit profesor la Facultatea de Medicin din
Bucureti n anul 1901 i reunete n jurul dnsului un mare numr de tineri medici,
care devin la rndul lor i creatori de coal (Al. Sltineanu, C. lonescu-Mihieti, M.
Ciuc, AL Ciuc, D. Danielopolu, D. Combiescu, N. Gh. Lupu, I. Blteanu, I. Nicolau,
Lidia i I. Mesrobeanu i muli alii).
coala astfel ntemeiat a avut o activitate cu rezultate excepionale pentru
tiina romneasc, pentru microbiologie i pentru sntatea public.
Una dintre cele mai mari realizri ale domniei sale a fost Institutul "Ion
Cantacuzino", fondat n anul 1921, centru de cercetare tiinific fundamental i
aplicativ, centru de nvmnt de specialitate, instituie care a preparat i prepar
seruri, vaccinuri i alte produse biologice utile n diagnosticul bolilor transmisibile.
Dup 1989, conducerea actual a reuit s reinclud Institutul n Reeaua
Internaional a Institutelor Pasteur i Institutelor Asociate.
n ciuda inerentelor probleme legate de tranziia societii romneti de astzi,
Institutul "Ion Cantacuzino continu tradiia naintailor i i menine poziia
important n cadrul instituiilor care se ocup de sntatea public la nivel naional i
internaional.
Dei asistena medical ntr-o anumit form a existat nc de la debutul vieii
umane pe pmnt, nceputurile nursingului profesional au fost realizate de ctre
Florence Nightingale (1820-1910), care a nceput munca sa cu mai bine de 140 de ani
n urm n cursul rzboiului din Crimeea (1854-1856).
Descoperirile ulterioare privind relaia dintre microorganisme i boal au
necesitat dezvoltarea unor proceduri de nursing mai complexe i mai rafinate dect
cele utilizate pentru "ngerii din Crimeea". Dezvoltarea chirurgiei aseptice (dup

descoperirile lui Lister) au deschis un cmp ntreg de tehnici operatorii aseptice i de


nursing profesional.
Descoperirea msurilor profilactice precum administrarea de vaccin variolic
(1796), de toxoizi i antitoxine (n difterie i tetanos), a serurilor imune (von Behring,
Frnkel i Kitasato, 1890), a vaccinurilor polio i rujeolos (Enders, Weller i
Robins,1949; Salk, 1954; Sabin i alii, 1954-1967), precum i utilizarea de gama
globuline pentru prevenirea pojarului rabiei, tusei convulsive etc. au fcut necesar
dezvoltarea de noi concepte i educaie n prepararea i administrarea acestor
substane.
Descoperirea unor teste de diagnostic n domeniul microbiologiei a necesitat o
pregtire microbiologic mai avansat a tehnologiei medicale, a medicilor,
asistentelor i a altor profesioniti ai sntii n metode pentru colectarea
specimenelor i raportarea descoperirilor de laborator specifice, astfel nct terapia
s demareze ct mai precoce.
Descoperirea de substane chimice specifice (de exemplu sulfonamide) i
substane antibiotice (de exemplu penicilina, streptomicina, tetraciclina,
cloramfenicolul) a contribuit la mbuntirea modului de abordare medical a
problematicii bolilor infecioase.
Descoperirea mijloacelor de transmitere a infeciilor a condus i la dezvoltarea
de metode eficace de prevenire a rspndirii bolilor, n 1895, sir Ronald Ross (18571932), medic militar n India, a demonstrat transmiterea agentului etiologic al malariei
prin intermediul narilor. Parazitul a fost vizualizat n eritrocitele umane n 1881 de
ctre Laveran, un chirurg al armatei franceze n Algeria. n 1900 a fost demonstrat
transmiterea virusului febrei galbene de ctre o specie particular de nari (Aedes
aegypti), n Cuba.
Procedurile chirurgicale moderne ar fi imposibile fr dezinfecie i sterilizare.
Industria laptelui, a conservelor, a hranei ambalate i congelate sunt dependente de
microbiologie. Sanitaia sistemelor de ap i tratarea apelor poluate sunt posibile
numai datorit cunotinelor acumulate prin microbiologie n cursul ultimului secol. In
multe moduri profesiunea medical i fiecare latur a ei este dependent de
cunoaterea, nelegerea i utilizarea informaiilor din microbiologie.
Mulumit eforturilor oamenilor de tiin, incidena anumitor boli microbiene a
sczut. Numai vigilena constant a tuturor membrilor comunitii medicale va putea
face ca aceast tendin a bolilor prevenibile s continue.
Microbiologul, medicul practician i asistenta medical trebuie s aplice
cunotinele de microbiologie n practica de zi cu zi. Dei pot fi nvate din rutin,
persoana cu adevrat profesionist nelege faptele tinifice i principiile de la baza
acestor tehnici.
Profesionistul tie de asemenea n ce mod ar trebui modificate aceste tehnici
pentru anumite tipuri de pacieni (de exemplu cei care sunt supui chirurgiei
cardiace), ce tehnici trebuie utilizate n slile de operaie, de ateptare i cree i
cum pot fi modificate n condiii de urgen (de exemplu rzboi sau alte calamiti) i
de ce pacienii, familiile i publicul trebuie informai de exemplu referitor la imunizri.
Un membru antrenat al echipei medicale, atunci cnd are noiunile necesare de
microbiologie, poate diferenia adevrul de interpretarea greit i dezinformarea
literaturii "medicale" scrise pentru publicul larg i poate recunoate erorile aprute n
mass media.
Orice persoan care lucreaz n domeniul sanitar va putea descoperi c foarte
rar poate fi identificat un act realizat n viaa cotidian n care nu se aplic cunotinele
microbiologice.
8

Capitolul III

MORFOLOGIA CELULEI BACTERIENE

Forma bacteriilor este codificat genetic ceea ce face ca polimorfismul


bacteriilor s fie limitat. Din acest motiv morfologia bacteriilor reprezint un important
criteriu taxonomic.
Bacteriile tinere, n condiii favorabile se prezint sub trei forme fundamentale:
a.) forma sferic (fig.1)
b.) forma cilindric (fig.2)
c.) forma ncurbat (spiralat) (fig.3)

III.1. COCII
Sunt bacterii cu form sferic
 cu diametre egale - Staphylococcus aureus;
 cu diametre inegale
 reniforme - Neisseria gonorrhoeae,
 lanceolat - Streptococcus pneumoniae,
 ovalar - Enterococcus faecalis.
n urma diviziunii cocii pot aprea n diferite configuraii spaiale caracteristice,
dup cum se divid pe unul, dou sau trei planuri.
 micrococi - coci izolai - celulele rezultate din diviziune rmn
independente, neregulat rspndite;
 diplococi - coci grupai cte doi - Streptococcus pneumoniae;
 stafilococi coci aezai asemntor ciorchinilor de strugure cnd
diviziunea are loc n trei planuri neregulate;
 streptococi coci n lanuri de lungimi variabile;
 tetracoci - coci dispui simetric cte patru, datorit diviziunii n dou
planuri perpendiculare - Micrococcus tetragenus;
 sarcina - coci aezai cte opt, grupai n cuburi sau pachete, datorit
diviziunii n cele trei planuri perpendiculare - Sarcina flava.

III.2. BACILII

Sunt bacterii cilindrice, a cror lungime este mai mare dect limea, n funcie
de raportul dintre cele dou axe existnd bacili scuri i subiri, scuri i groi, etc.
Forma bacililor este variat:
 bastonae drepte, rectilinii - Bacillus anthracis,
 uor ncurbate cu capete umflate - Corynebacterium diphtheriae,
 ramificate - Mycobacterium tuberculosis.
Corpul bacteriilor poate fi deformat de prezena sporului, dac diametrul
transversal al acestuia este mai mare dect cel al corpului bacterian (genul
Clostridium).
Capetele bacililor pot fi
 retezate - Bacillus anthracis
 rotunjite Enterobacterii
 ascuite - Fusobacterii.
n urma diviziunii bacilii se pot dispune ca
 dispoziii neregulate Enterobacterii,
 diplobacili - Klebsiella pneumoniae,
 streptobacili - Bacillus anthracis,
 aezri cu aspectul literelor T, Y, V, sau bee de chibrit mprtiate Corynebacterium diphtheriae.

III.3. FORMELE SPIRALATE


Au axul longitudinal ncurbat ntr-un singur plan (vibrionii) sau n mai multe
planuri (spirili, spirochete). Vibrionii sunt bacterii n form de virgul (Vibrio cholerae);
spirilii, n form de spiral, spire rigide; iar spirochetele sunt forme spiralate foarte
fine i flexibile, cu spire strnse i regulate (genul Treponema, Borrelia i Leptospira).
Pe lng cele trei forme fundamentale exist:
cocobacili - formele intermediare ntre coci i bacili;
mycoplasme -care n lipsa peretelui celular prezint un polimorfism marcat.

III. 4. DIMENSIUNEA BACTERIILOR


Dimensiunea bacteriilor variaz n funcie de specie, de condiiile de mediu, de
stadiul de dezvoltare a culturii bacteriene. n general dimensiunile bacteriilor sunt de
de ordinul micrometrilor
Cocii - diametrul ntre 0,5-2 m, n medie de 1 m;
Bacilii- lungime ntre 0,5 - 10 m / lime de 0,3 - 2 m.
Vibrionii - lungime ntre 1,5 - 3 m / 0,5 m grosime;
Spirochetele - lungime ntre 6 - 20 m / 0,15 - 0,5 m grosime.

III. 5. CLASIFICAREA BACTERIILOR


Se poate face n raport cu mai multe criterii:
 n raport cu peretele celular
o bacterii rigide cu perete celular dens
o bacterii flexibile cu perete celular subire
o bacterii fr perete celular
 dup form
o coci bacterii sferice sau ovalare:

10

 sferice stafilococ, streptococ


 ovalare enterococ
 lanceolate pneumococ
 reniforme gonococ, meningococ
o bacili bacterii n form de bastona:
 drept cu capete rotunjite enterobacterii
 drept cu capete retezate bacilul crbunos
 drept cu capete efilate fusobacterii
 drept cu capete umflate bacilul difteric
o cocobacili bacterii cu corpul scurt, gros Klebsiella spp.
o forme spiralate
 cu corpul ncurbat ntr-un singur plan vibrionul holeric
 cu corpul ncurbat n mai multe planuri: spirili, spirochete
 dup dispoziia spaial:
o n lanuri  streptococ
 streptobacil Bacillus anthracis
o n ciorchine stafilococ
o n diplo
 diplococ - pneumococ, gonococ, meningococ
 diplobacil Klebsiella spp.
o n palisade bacilul difteric

Capitolul IV

STRUCTURA CELULEI BACTERIENE

Celula bacterian este procariot avnd urmtoarele caracteristici:


 Capsula - adesea prezent
 Perete celular - cu structur complex
 Citoplasma - fr reticul endoplasmic, mitocondrii, lizozomi, are ribozomi
70S
 Membrana citoplasmatic - nu conine steroli
 Nucleul - nu prezint membran, are un singur cromozom circular,
absena mitozei

11

Celula bacterian are n componena ei dou tipuri de elemente structurale:


 elemente obligatorii, prezente la toate speciile bacteriene, fr de
care celula bacterian nu poate supravieui:
o peretele bacterian
o membrana citoplasmatic
o citoplasma
o nucleul
 elemente facultative care apar doar la unele specii i n anumite
condiii de mediu:
o cili
o fimbrii
o capsul
o spor

IV.1. ELEMENTE OBLIGATORII ALE CELULEI BACTERIENE


IV.1.1. PERETELE BACTERIAN
Peretele bacterian (membrana celular, membrana bacterian) este un nveli
rigid cu o grosime de 8 35 nm fiind alctuit din proteine, lipide, hidrai de carbon.
Este format din 2 componente:
- stratul bazal alctuit din peptidoglican (= mucocomplex = mucopeptid =
murein)
Componenta glicanic este dispus ca filamente liniare alctuite, prin
alternare, din acid N-acetil-muramic i N-acetil-glucozamin.
Aceste iruri paralele de filamente prezint la fiecare molecul de acid Nacetil-muramic o prelungire alctuit din uniti tetrapeptidice. Unitile tetrapeptidice
de pe filamentele nvecinate sunt legate ntre ele de uniti pentapeptidice.
Se formeaz astfel o reea tridimensional la bacteriile Gram-pozitive i
bidimensional la cele Gram-negative, n care compoziia fraciunilor peptidice
variaz la diferite bacterii (fig.4).
Peptidoglicanul este sensibil la aciunea lizozimului, se sintetizeaz deficitar n
prezena unor antibiotice (penicilina, bacitracina), este antigenic i are proprieti de
adjuvant imunologic.
- stratul structurilor speciale este alctuit din urmtoarele elemente: acizi
teichoici, membrana extern, lipoproteine, lipopolizaharide, ceruri.
n funcie de proporia pe care o au aceste dou componente (stratul bazal i
stratul structurilor speciale) n structura peretelui bacterian i de elementele
componente ale strucrurilor speciale, distingem:
Bacterii Gram-pozitive al cror perete este mai gros (15 30 nm), mai rigid
dar mai simplu ca structur (fig.5).
Peptidoglicanul, reprezentnd ntre 50 90% din grosimea peretelui celular,
are o structur tridimensional.
Structurile speciale (10 50% din grosimea peretelui bacterian) sunt
reprezentate de:
12

- acizi teichoici care stabilizeaz i ntresc peretele bacterian, creeaz


mediul ionic necesar enzimelor din membrana celular i sunt antigene majore. Acizii
teichoici sunt:
 acizi teichoici de perete legai covalent de reeaua de peptidoglican
 acizi teichoici de membran (lipoteichoici) legai prin fore ionice de
peptidoglican i covalent de glicolipidele membranei citoplasmatice.
- acizi teichuronici formai din acid uric i polizaharide neutre, sunt
antigene.
- lipoglicani (glicolipide) n cantitate mare la bacteriile Gram pozitive.
Bacterii Gram-negative, cu perete mai subire (8 12 nm), mai flexibil dar
mai complex ca structur. Peptidoglicanul, ca o reea bidimensional, reprezint 5
20% din grosimea peretelui bacterian, dispus fiind n profunzime (fig.5).
Urmeaz spaiul periplasmatic, cuprins ntre membrana citoplasmatic i
membrana extern, include peptidoglicanul, lipoproteinele i enzime implicate n
digestia extracelular sau n inactivarea unor antibiotice.
Structurile speciale sunt dispuse pe trei nivele, de la interior spre exterior:
a) lipoproteinele, prezente n spaiul periplasmatic, unesc membrana
extern, de care se leag prin polul hidrofob de peptidoglican de care se leag prin
polul hidrofil.
b) membrana extern, alctuit din dou rnduri de fosfolipide ntre care
sunt intercalate proteine (porine, proteine de transport, enzime)
c) lipopolizaharid (LPS) dispus pe suprafaa distal a membranei externe,
alctuit din: lipidul A, un miez polizaharidic care constituie antigenul R fiind i
activator al complementului pe cale alternativ, uniti zaharidice repetate care
constituie antigenul O al bacteriilor Gram negative.
Bacterii acido-alcoolo-rezistente:
Peptidoglicanul este dispus ntr-un singur strat subire de care sunt legate
glicolipide complexe.
Structurile speciale sunt reprezentate de:
- arabinogalactanul un polizaharid care acoper peptidoglicanul
avnd i caracteristici de endotoxin;
- acizii micolici sunt acizi grai cu caten lung ramificat, caracterul
de alcoolo-acido-rezisten fiind direct proporional cu lungimea acestei catene;
- micozidele sunt peptidoglicolipide i glicolipide.
Bacterii cu perete celular alterat:
Alterarea structurii peretelui bacterian poate aprea sub aciunea lizozimului, a
unor antibiotice, factori fizici etc. ducnd fie la moartea celulei fie la apariia unor
forme de involuie (forme L), protoplati, sferoplati.
PROTOPLAST: bacteria Gram-pozitiv fr perete bacterian; are nucleu,
citoplasm, membran citoplasmatic; n general neviabili; foarte greu adaptabili la
dezvoltare chiar n medii sintetice bine tamponate.
SFEROPLAST: bacteria cu perete defectuos sau incomplet sintetizat, parial
degradat; forme mai rezistente; uor reversibile n medii optime.
Peretele bacterian ndeplinete urmtorul rol:
 susine mecanic celula bacterian
 menine forma bacteriei
13








asigur protecia celulei bacteriene


intervine n procesele de osmoz i difuziune
este sediul unor antigene somatice
este sediul receptorilor specifici pentru bacteriofagi
particip la diviziunea bacteriei
imprim caracterele de tinctorialitate ale celulei bacteriene

IV. 1. 2. MEMBRANA CITOPLASMATIC


Membrana citoplasmatic, nvelete la exterior citoplasma avnd, n afar de
structura i funciile unei membrane biologice, particulariti proprii bacteriilor.
Are o grosime de 5 10 nm. Este alctuit dup modelul mozaicului fluid din
dou straturi de molecule fosfolipidice cu extremitile hidrofobe spre interior i cu
cele hidrofile spre exterior, ntre moleculele de fosfolipide se gsesc inserate
proteine. Nu conine steroli (fig.5).
Rolul membranei citoplasmatice:
 regleaz presiunea osmotic avnd capaciti de permeabilitate i
transport selective;
 controleaz procesele de difuzie pasiv
 controleaz procesele de difuzie catalizate enzimatic
 este unicul sediu al citocromilor i al enzimelor metabolismului
respirator implicate n transportul de electroni i n fosforilarea oxidativ;
 intervine n creterea i diviziunea bacteriei aceste fenomene fiind
posibile cnd 50% din membrana citoplasmic este semifluid;
 este locul de sintez al endotoxinelor
 este implicat n procese de biosintez:
a fosfolipidelor
a peretelui bacterian
a genomului bacterian.
IV.1.3. CITOPLASMA BACTERIAN
Este format din 80% ap, coninnd ntr-un sistem coloidal complex proteine,
glucide, lipide, i substane minerale. Conine o mare cantitate de ARN ceea ce
confer caracterul intens bazofil al celulelor tinere. Celula bacterian tnr are
citoplasma intens colorat, bazofil, omogen, clar, cu cantiti mari de ARN. n
celula btrn citoplasma are aspect granular.
Particulele citoplasmatice studiate sunt:
Ribozomii, au dimensiuni de 10 20 nm, form sferic, mrime n funcie de
concentraia ionilor de Mg+ i K+, dispui sub form de polisomi de-a lungul
moleculelor de ARNm pe care le citesc i le traduc. Au rol esenial n procesul de
biosintez proteic.
Incluziile citoplasmatice sunt formaiuni structurale inerte care apar la
sfritul perioadei de cretere activ, funcional fiind rezerve de nutrieni care se
depun. Pentru c au caracter de specie i pot fi vizualizate la microscopul optic sunt
utile n identificarea primar a unei bacterii, fiind caractere taxonomice primare. Sunt
constituite din:
 polimetafosfai, cunoscute sub denumirea de corpusculii BABEERNST sau granulaii metacromatice sau incluzii de volutin, prezente la genul
Corynebacterium;
 polizaharide: glicogen la genul Bacillus sau amidon la genul Neisseria;

14

 lipide: polimeri de acizi grai cu lan scurt la genul Bacillus, Clostridium,


Pseudomonas.
Vacuolele sunt formaiuni sferice care conin diferite substane n soluie
apoas, delimitate de o membran lipoproteic denumit tonoplast.
IV.1.4. MATERIALUL NUCLEAR
Nucleul bacterian nu este delimitat de o membran difereniat, (celul
procariot) fiind alctuit dintr-un singur cromozom haploid (un singur set de gene)
reprezentat de filamentul circular, dublu helicat de ADN. Masa nuclear vine n
contact direct cu citoplasma, este situat n partea central a celulei, conine ADN i
nu are nucleoli.
n structura ADN raportul bazelor variaz n funcie de specia bacterian,
acest raport fiind constant i caracteristic pentru o specie dat (G-C %). Diviziunea
nucleului precede diviziunea celulei replicarea cromozomului bacterian fcndu-se
printr-un mecanism semiconservativ.

IV.2. ELEMENTE FACULTATIVE ALE CELULEI BACTERIENE


IV.2.1. GLICOCALIXUL BACTERIAN
Unele bacterii au proprietatea de a sintetiza, n anumite condiii, polimeri
organici (n general polizaharide) care formeaz un nveli dispus distal peretelui
bacterian.
La unele bacterii glicocalixul are o structur lax, format din fibrile, se poate
separa de corpul bacterian prin centrifugare, este penetrat de particule colorate. n
acest caz vorbim despre microcapsul, substan capsular sau slime,
structur care poate fi evideniat doar prin metode chimice sau la microscopia
elecronic dup coloraia special cu rou ruteniu.
La alte bacterii glicocalixul este ataat intim de celula bacterian de care nu
poate fi separat prin centrifugare, are o structur dens care nu permite penetrarea
particulelor colorate. n aceste cazuri vorbim despre capsula bacterian. Aceasta
poate fi vizualizat la microscopul optic pe preparate colorate negativ.
Capsula are o grosime de 1-3 m. Compoziia chimic variaz n raport cu
specia. Bacteriile formeaz capsul mai ales n organismul uman i animal i n
condiii optime pe medii de cultur. Pe medii solide coloniile sunt lucioase, de
consisten mucoas, iar mediul lichid devine vscos.
Funciile glicocalixului bacterian:
 este factor de virulen mpiedicnd fagocitarea bacteriei i favoriznd
invazivitatea;
 barier protectoare fa de bacteriofagi, fa de unele antibiotice;
 rol de adezin permind prin fibrilele glicocalixului aderarea bacteriei
de substraturi specifice;
 conine substane cu specificitate antigenic de specie sau de tip care
permit difereierea serologic a speciilor sau tipurilor bacteriene.
IV.2.2. CILII SAU FLAGELII
Sunt structuri filamentoase reprezentnd organele de locomoie a bacteriilor,
producerea lor nefiind un caracter constant al speciei bacteriene. Producerea cililor
este inhibat de bil, carbol, ser imun etc.
15

Sunt formaiuni foarte subiri, fine, alungite, neramificate, flexibile i sinuoase,


cu lungime
variabil (5-15-75 m) (fig.7). Proteina flagelilor,
flagelina
(asemntoare miozinei) este antigen, antigenul H, cu specificitate de tip.
La microscopia electronic s-a evideniat structura fin a cilului (fig.8):
 Corpusculul bazal situat n citoplasm imediat sub membrana
citoplasmatic
alctuit dintr-un ax rigid i un set de inele:
- 2 inele la bacterii Gram-pozitive:
 discul M flotant n membrana citoplasmic
 discul P n stratul de peptidoglican
- 4 inele la bacterii Gram-negative:
 M, n membrana citoplasmatic;
 S, n spaiul periplasmatic;
 P, n stratul de peptidoglican;
 L, flotant n membrana extern.

 Crligul, poriune rigid, de articulaie;


 Filamentul flagelar, lung, sinuos.
Rolul cililor:
 n mobilitatea bacteriilor
 antigenic prin structura proteic antigenul H
 n clasificarea bacteriilor (fig.9):
 atriche fr cili
 monotriche un cil la o extremitate
 amfitriche - cte un cil la cele dou extremiti
 lofotriche - un mnunchi de cili la una sau la ambele
extremiti
 peritriche - cu cili dispui de-a lungul suprafeei
bacteriene.
IV.2.3. FIMBRIILE SAU PILII
Sunt organite filamentoase, rigide, mai scurte i mai subiri dect flagelii,
vizibile la microscopul electronic, fr a avea rol n mobilitatea bacteriei. Sunt
dispuse pericelular att la bacterii ciliate ct i la cele neciliate, de la una la cteva
sute per celul (fig.7, 8). Au fost evideniate cu precdere la bacteriile gram-negative
dei unele bacterii gram-pozitive pot prezenta i ele fimbrii de adeziune. Sunt
codificate plasmidic, sunt caractere de tulpin i nu au valoare taxonomic. Au
originea la nivelul membranei citoplasmatice, sunt formate din pilin i pot fi
clasificate astfel:
a) fimbrii comune 50-400/celul;
b) fimbrii de aderen, 10-30/celul, prin care bacteriile ader la receptorii
specifici de pe suprafaa membranelor mucoase declannd astfel procesul infecios;
c) pilii sexuali, 0-4/celul, sunt prezeni la unele bacterii gram-negative care au
plasmide conjugative, au structur tubular i joac rol n conjugarea bacterian, una
dintre modalitile de transfer genetic.
IV.2.4. ENDOSPORUL BACTERIAN
Este o formaiune endocelular, de rezisten (are o longevitate foarte mare10 ani), care permite unor specii bacteriene s supravieuiasc desicate n anumite
condiii defavorabile de mediu. Endosporul bacterian pstreaz n stare latent
16

caracterele genotipice ale formei vegetative din care provine. Structurile componente
ale sporului bacterian sunt codificate de gene represate n forma vegetativ a
bacteriei i derepresate n condiii defavorabile de mediu, cnd devin represate
genele vegetative. Prezena sporilor este un caracter constant la germenii din genul
Clostridium i un caracter facultativ la germenii din genul Bacillus.
Sporogeneza are loc n general n condiii nefavorabile formei vegetative, i
presupune apariia, n etape succesive, de modificri profunde n materialul nuclear,
citoplasm, compoziie chimic, structur, procesul esenial n cursul sporogenezei
fiind deshidratarea.
Materialul genetic este concentrat i mpreun cu apa legat, lipide, ioni de
magneziu, dipicolinat de calciu, este nconjurat de un strat protector: membrana
sporal, cortex sporal i nveliurile sporale.
In condiii favorabile are loc germinarea sporului: rehidratare, ruperea
membranelor i apariia unei singure forme vegetative, identic cu cea din care s-a
format anterior sporul.
Endosporul are forma ovalar sau sferic, poate fi aezat central, subterminal
i terminal n funcie de specia microbian iar dac diametrul sporului este mai mare
dect grosimea bacteriei, corpul bacterian se deformeaz. Pe baza acestor
caractere, bacilii sporulai, apar n general sub trei forme (fig.10):
a) - bacili cu sporul sferic, dispus central sau subterminal, mai mic dect celula
(Bacillus anthracis);
b) - bacili cu spor ovalar, mai mare dect diametrul transversal al celulei
bacteriene, aezat central (forme de fus, de brcu) sau subterminal (form de
rachet de tenis) (genul Clostridium);
c) - bacili cu spori terminali, sferici, cu dimensiuni mai mari dect celula,
asemntori cu un b de chibrit sau ac de gmlie (Clostridium tetani).
Sporul poate fi evideniat prin coloraii speciale. La coloraia Gram rmne
necolorat.
Sporul prezint o rezisten marcat fa de:
- uscciune
- cldur:
o umed - sporii speciei Bacillus anthracis sunt distrui n zece
minute la temperatura de fierbere a apei; unii spori de Clostridium botulinum suport
aceast temperatur timp de cteva ore: rezist 6 ore la 100 C, 2 ore la 105 C, 10'
la 120 C;
o uscat - este mai bine tolerat de sporii bacterieni, acetia fiind
distrui n 2-3 ore la 140 C n Poupinel;
- substane chimice: rezist la aciunea fenolului 5% timp de o
sptmn, la aciunea alcoolului mai multe sptmni.

17

Capitolul V

FIZIOLOGIA BACTERIAN

V.1. CONSTITUIA CHIMIC A BACTERIILOR


Compoziia chimic a celulei bacteriene este controlat genetic. Toate
procesele care au loc n celula bacterian sunt asociate cu importante transformri
chimice ale constituenilor si i de aceea cunoaterea compoziiei chimice a celulei
bacteriene contribuie la cunoaterea proceselor metabolice care confer bacteriei
marea sa putere de adaptare i capacitatea de supravieuire n cele mai vitrege
condiii de mediu.
V.1.1. Apa, reprezint 75 - 85% din greutatea umed a bacteriei. Exist ap
liber (mediu de dispersie), fie ap legat fizico-chimic cu diferite structuri. Sporii au
puin ap i aceea sub form de ap legat. Rol:
- mediu de dispersie;
- reactiv n reaciile metabolice;
- etap final a unor reacii oxidative.
V.1.2. Substanele minerale reprezint 2-30% din greutatea uscat a
bacteriei (P, K, Na, Ca, S, Cl, Fe, oligoelementele, Cu, Mg, Zn) i variaz cu specia,
vrsta culturii, compoziia chimic a mediului. Unele elemente intr n compoziia
diferitelor structuri i enzime avnd astfel un rol foarte important n viaa celulei
bacteriene:
- favorizeaz schimburile cu mediul;
- regleaz presiunea osmotic;
- stimuleaz creterea i funcia bacteriei;
- activeaz unele sisteme enzimatice;
- contribuie la reglarea pH-ului i a potenialului de oxido-reducere;
V.1.3. Glucidele reprezint 10-25% din greutatea uscat a celulei bacteriene
n raport cu specia, vrsta i condiiile de dezvoltare. n structura bacterian se pot
gsi glucide simple (mono i dizaharide) cu rol n metabolismul intermediar glucidic
precum i glucide complexe (polizaharide) care particip la realizarea structurii
peretelui celular i fac parte din capsula unor bacterii. Testele biochimice care
18

evideniaz utilizarea sau imposibilitatea utiliztii unui anumit zahar de ctre o


bacterie permit identificarea bacteriei respective.
V.1.4. Proteinele reprezint ntre 40-80% din greutatea uscat a bacteriei,
aproximativ jumtate din proteine funcionnd ca enizme restul avnd rol structural.
Proteinele pot fi:
- simple sau holoproteine (albumine, globuline, histone, etc.) cu rol n
metabolismul intermediar protidic;
- complexe, de exemplu heteroproteinele:
mucoproteine mucopolizaharidul de grup al
S.pneumoniae;
cromoproteine catalaze, peroxidaze, citocromi;
nucleoproteine acizii nucleici.
V.1.5. Lipidele reprezint 1-10% din greutatea uscat a bacteriilor (excepie
micobacteriile unde pot ajunge pn la 20 - 40%). Cantitatea de lipide variaz n
raport cu specia, vrsta culturii i compoziia mediului.
Lipidele bacteriene se pot gsi libere n vacuole, combinate sau fcnd parte
din structuri ale celulei bacteriene (perete, membran, mezozomi). Lipidele
bacteriene pot fi:
- fosfolipidele lipoidul Treponemei pallidum;
- lipidul A din structura lipopolizaharidului bacteriilor Gram negative;
- acizi grai, obinuii i speciali (acidul mycolic la Mycobacterii);
- ceruri la Mycobacterii
V.1.6.
Pigmenii
bacterieni,
prezeni
la
bacteriile
cromogene,
pigmentogeneza fiind dependent de specie i de condiiile de cultivare. Constituie
un criteriu important de identificare a unor specii bacteriene: Staphylococcus,
Pseudomonas, Sarcina.
Dup localizarea pigmentului bacteriile pot fi:
- cromofore, pigmentul rmne legat de citoplasm;
- paracromofore, pigmentul este prezent n perete sau n stratul
mucos (S.aureus);
- cromopare, pigmentul este difuzibil n mediu (Pseudomonas).
Dup natura lor chimic pigmenii pot fi:
- carotenoizi: Staphylococcus, Sarcina;
- chinoinici: Mycobacterium;
- fenazinici Pseudomonas etc.
Roluri:
-

protecie fa de radiaiile UV (pigmeni carotenoizi);


enzimatic
antibiotic (piocianina produs de P.aeruginosa fa de B.anthracis).

V.1.7. Enzimele bacteriene sunt elaborate sub control genetic, existnd


peste 2.000 de determinani genetici diferii, n producerea enzimelor intervenind i
mecanisme de control care pot modifica bagajul enzimatic dup necesitile bacteriei
i n funcie de variaiile mediului extern.
Dup locul de aciune, enzimele bacteriene se pot mpri n:
- enzime intracelulare sau endoenzime care rmn n celul;
19

- enzime ectocelulare situate n membrana citoplasmatic, reglnd


permeabilitatea selectiv (permeaze, translocaze);
- enzime extracelulare sau exoenzime, care sunt eliberate n mediu
(hidrolaze).
n raport cu reacia catalizat enzimele pot fi:
- hidrolaze (fosfataza, proteaza);
- transferaze (aminotransferaza);
- oxido-reductaze (catalaza, oxidaza, peroxidaza);
- izomeraze etc.
Dup modul de apariie distingem enzime:
- constitutive, care exist ntotdeauna n celul indiferent de natura
mediului;
- adaptative (inductibile), sintetizate de ctre bacterie numai ca
rspuns la anumii compui aprui n mediu (penicilinaza).
Pe lng importana inestimabil pe care o are n natur, agricultur, industrie,
medicin, etc. activitatea enzimatic a bacteriilor este foarte util i n taxonomia
bacterian.
V.1.8. Substane cu aciune antibiotic sunt produse de ctre unele bacterii:
- bacteriocine produse sub controlul plasmidic, cu efect asupra altor
bacterii receptive nrudite: colicinele elaborate de E.coli; megacina produs de
B.megaterium;
- antibiotice polipeptidice produse de unele specii de Bacillus:
polimixina produs de B.polymyxa; bacitracina produs de B. licheniformis.
V.1.9. Vitaminele bacteriene secretate de unele specii:
- tiamina (vitamina B1) sintetizat de E.coli, B.subtilis
- biotina produs de E.coli, B.anthracis
- vitamine de grup B, K sintetizate sub influena florei bacteriene
intestinale umane.
V.1.10. Factorii de cretere, sunt metabolii eseniali pe care bacteria nu-i
poate sintetiza dar care
sunt necesari, n cantiti mici, dezvoltrii
microorganismelor. Necesitatea n aceste substane variaz dup specia microbian.
Cantitatea mic necesar, demonstreaz c nu au rol plastic sau energetic n celul,
sunt doar biocatalizatori.

V.2. NUTRIIA, METABOLISMUL I CRETEREA BACTERIAN


V.2.1. NUTRIIA BACTERIAN
Prin nutriie bacterian se nelege suma proceselor metabolice care concur
la producerea de materiale convertibile n energie i n diferite componente celulare.
Cu alte cuvinte nutriia bacterian este procesul de asimilare de ctre bacterii a
substanelor nutritive din mediul extern, fie ele organice sau anorganice, necesare
metabolismului.

20

Nutrienii sunt substanele nutritive care sub form de soluie pot traversa
membrana citoplasmatic pentru a participa la reaciile metabolice specifice celulei
bacteriene.
Pentru nutriie bacteriile folosesc compuii din mediile naturale pe care i
transform n nutrieni prin:
- solvire minerale, CO2, O2;
- digestie extracelular prealabil, cu ajutorul unor hidrolaze se
formeaz aminoacizi din proteine, monozaharide din polizaharide, acizi grai i
glicerol din lipide etc.
Nutrienii ptrund n citoplasma celulei bacteriene traversnd membrana
citoplasmatic prin:
- difuziune simpl, pe baza diferenelor de concentraie;
- difuziune facilitat (prin proteine carrier), tot pe baza gradientului;
- transport activ, contragradient, cu consum de energie .
V.2.1.1.
Necesiti nutritive de baz
Elementele cu rol structural i funcional necesare majoritii bacteriilor sunt
carbonul, azotul, oxigenul i elemente minerale. Carbonul reprezint aproape
jumtate din greutatea uscat a bacteriei, azotul este necesar pentru sinteza
proteinelor iar oxigenul este prezent sub form de atomi n multe molecule biologice
(aminoacizi, nucleotide) i este necesar ca oxigen molecular pentru generarea
energiei n cadrul respiraiei aerobe a bacteriilor.
Elementele minerale sunt reprezentate de:
- Sulf prezent n unii aminoacizi, enzime, vitamine;
- Fosfor pentru sinteza acizilor nucleici, fosfolipidelor de membran;
- Fier, nichel, seleniu n compoziia unor enzime: citocromi,
peroxidaze;
- Sodiu, potasiu, magneziu, clor asigur echilibrul fizico-chimic al
celulei;
- Cobalt, cupru, mangan - activatori enzimatici.
n raport cu sursele folosite ca material de sintez (sursa de azot i carbon),
bacteriile se mpart n:
a) Bacteriile autotrofe, capabile s i sintetizeze metaboliii eseniali din
compuii anorganici, folosind CO2 ca surs de carbon i azotul atmosferic sau sruri
de amoniu ca surs de N. n funcie de energia utilizat pot fi fototrofe i chimiotrofe.
Sunt bacterii care triesc liber n natur, bacterii saprofite care triesc n sol, ap,
etc. avnd rol n circuitul materiei n natur.
b) Bacteriile heterotrofe, dependente de prezena unor compui organici,
utilizeaz surse organice de carbon, n special carbohidrai dar i proteine i lipide
ce servesc n acelai timp ca surse de energie, iar azotul poate fi att de natur
anorganic ct i organic. Prezint n totalitate un metabolism de tip chimiosintetic,
cu o mare diversitate de tipuri metabolice. Se disting urmtoarele tipuri principale:
b1. bacterii fixatoare de azot - folosesc surse organice de carbon i azot
molecular, atmosferic, triesc n sol, n simbioz cu plantele (genul Clostridium.);
b2. bacterii care folosesc carbon organic i azot din legturi anorganice
(E.coli);
b3. bacterii care folosesc att carbon ct i azot organic- majoritatea speciilor
saprofite i potenial patogene, prezente n cavitile naturale ale omului, precum i
speciile patogene pentru om.

21

c) Bacterii paratrofe - bacterii citoparazite, triesc numai n interiorul unei


celule vii; nu se cultiv pe medii artificiale (Rickettsia, Chlamydia, Mycobacterium
leprae).
V.2.1.2.
Factori de cretere
Unele bacterii sunt capabile s-i realizeze integral sinteza metaboliilor
eseniali utiliznd nutrienii prezeni n mediul lor de via. Mecanismele de sintez
sunt catalizate de enzime a cror sintez se afl sub control genetic. O astfel de
bacterie se numete prototrof.
Dac n cursul multiplicrii bacteriene apare o mutaie n urma creia nu se
mai sintetizeaz o enzim, secvena metabolic ce era catalizat de enzima
respectiv va fi blocat. Nu se va sintetiza un anumit metabolit esenial. Bacteria
mutant rezultat se numete auxotrof i va supravieui doar dac n mediu va fi
prezent metabolitul respectiv.
Bacteriile patogene, n urma adaptrii la viaa parazitar au devenit
dependente de numeroi metabolii eseniali pe care nu i mai pot sintetiza, unele
att de dependente nct nu pot fi cultivate in vitro.
Metaboliii eseniali pe care o bacterie nu mai poate s i sintetizeze i trebuie
oferii ca nutrieni preformai se numesc factori de cretere.
Aceti factori de cretere pot fi oferii de alt specie bacterian care
sintetizeaz factorul de cretere respectiv, fenomen cunoscut sub numele de
sintrofie. Un exemplu elocvent l constituie Haemophilus influenzae care crete
satelit n jurul coloniilor de S.aureus. Explicaia const n capacitatea stafilococului
auriu de a sintetiza factor V (NAD), metabolit necesar dezvoltrii tulpinilor de
Haemophilus influenzae.
Cunoaterea necesitilor nutritive ale bacteriilor face posibil cultivarea lor n
vederea izolrii din produsele patologice, a identificrii i studierii lor.
V.2.1.3.
Medii de cultur
Substratul nutritiv bogat n nutrieni i factori de cretere care satisface specia
bacterian ce urmeaz a fi cultivat se numete mediu de cultur.
Condiiile impuse mediilor de cultur:
- s fie nutritive;
- s fie sterile;
- s aib un ph neutru (7,2 7,4)
- s aib o anumit presiune osmotic;
- s asigure umiditate optim etc.
Mediile de cultur se pot clasifica dup foarte multe criterii.
Dup proveniena nutrienilor:
- medii naturale provin din produse de origine animal sau
vegetal: cord, creier, ficat, ou, cartof, soia etc.
- medii sintetice cu compoziie riguros controlat, includ
componente chimic pure.
Dup valoarea nutritiv a mediului:
- medii simple permit creterea germenilor nepretenioi, conin
numai ingrediente de baz;
22

- medii mbogite permit creterea bacteriilor pretenioase, conin


un plus de nutrieni asigurat prin adaos de snge, ser, plasm, ou, extract de levuri
etc.
Dup consisten:
- lichide permit cultivarea unui produs monobacterian; sunt utile
pentru studiul caracterelor biochimice
- medii semisolide conin o cantitate mic de agar, sunt utile pentru
meninerea n via a tulpinilor bacteriene, pentru studiul mobilitii bacteriilor sau
pentru studiul unor caractere biochimice;
- medii solide care permit fixarea bacteriilor n punctul de inoculare,
multiplicarea lor n acel punct determinnd apariia unui conglomerat vizibil cu ochiul
liber numit colonie. Mediile solide se obin prin:
coagularea termic a proteinelor din ser sau ou;
gelificare prin includerea n mediu a unui fitocoloid obinut
din alge marine numit agar. Acesta are urmtoarele proprieti:
o se lichefiaz la temperatura de fierbere a apei;
o se solidific la aprox. 42C;
o meine starea de soliditate a mediului la
temperaturi cuprinse ntre 0 - 80C;
o nu are aport nutritiv i nu este degradat n cursul
metabolismului bacterian.
Dup scopul utilizrii:
- medii de izolare
o uzuale pentru un numr mare de bacterii;
o selective conin substane inhibitorii pentru unele
bacterii favoriznd dezvoltarea preferenial a altora;
o de mbogire inhib selectiv flora de asociaie
favoriznd multiplicarea unei specii bacteriene
o difereniale conin un substrat pentru anumite
enzime, utilizarea substratului respectiv de ctre bacterie permind identificarea
bacteriei din culturi primare.
- medii de identificare conin substraturi pentru anumite enzime,
indicatori de pH, utilizai la ncadrarea bacteriei ntr-o unitate taxonomic.
- medii de conservare, medii de transport etc.
V.2.2. METABOLISMUL BACTERIAN
Reprezint totalitatea reaciilor biochimice care caracterizeaz cele dou
etape: anabolismul i catabolismul.
A. Anabolismul
Anabolismul este procesul de constituire a moleculelor complexe organice
structurale i funcionale ale celulei bacteriene. Aceste reacii de biosintez sunt
nsoite de consum de energie i sunt similare la diferite specii bacteriene.
A1. Biosinteza polizaharidelor din compui intermediari rezultai din
glicoliz i ciclul Krebs. Polizaharidele au rol plastic i energetic, polimeri de glucoz
(amidon, glicogen) stocnd energia pe termen lung.

23

A2. Biosinteza lipidelor din glicerol (provine dintr-un compus intermediar


rezultat n cursul glicolizei) i acizi grai. Grsimile sintetizate de bacterie sunt
utilizate la sinteza fosfolipidelor membranare, a peretelui celular specific bacteriilor
Gram negative.
A3. Biosinteza aminoacizilor i a proteinelor este diferit n funcie de
specia bacterian. Unele bacterii au echipament enzimatic ce le permite sinteza
tuturor aminoacizilor din intermediari ai catabolismului glucozei (E.coli). Alte bacterii
necesit prezena n mediu a unor aminoacizi preformai. Proteinele bacteriene
sintetizate sunt proteine structurale, enzime, toxine).
A4. Biosinteza purinelor i pirimidinelor din produi intermediari rezultai
din glicoliz i ciclul Krebs. Purinele i pirimidinele rezultate servesc la sinteza
acizilor nucleici.
B. Catabolismul
Catabolismul bacterian este procesul prin care sunt degradai compuii
organici cu structur complex n compui simpli, cu eliberare de energie.
n funcie de cile prin care bacteria obine energia, pe care apoi o conserv i
o utilizeaz n procesele de biosintez, bacteriile se mpart n (fig.14):
a)
bacterii fototrofe (photobacterii) folosesc energia luminoas,
triesc la lumin. Sunt bacterii saprofite;
b)
bacterii chimiotrofe (scotobacterii, bacterii chimiosintetizante)
folosesc energia din procesele de oxido-reducere catalizate enzimatic, triesc la
ntuneric. Sunt bacterii saprofite i patogene.
Reaciile de oxidoreducere presupun existena unui donor (surse de energie)
i a unui acceptor de electroni.
Donorul poate fi o substan anorganic (pentru bacterii chimiolitotrofe) sau
organic (pentru bacterii chimioorganotrofe). Bacteriile de interes medical aparin
ultimei grupe.
B1. Catabolismul hidrailor de carbon
Ca surse organice de energie sunt utilizate glucoza, aminoacizii, purinele,
pirimidinele, acizii grai. Dintre toate acestea cel mai frecvent este folosit glucoza
eliberarea de energie fcndu-se prin dou ci: respiraia i fermentaia.
Respiraia celular
Este procesul cel mai eficient de utilizare al carbohidrailor n care o serie de
molecule sunt oxidate, acceptorul final de electroni fiind o molecul anorganic
(fig.12):
- O2 n respiraia aerob;
- alt molecul anorganic, nu O2, (ionul nitrat, ionul sulfat)
respiraie anaerob.
n procesul de respiraie celular este generat ATP, etapele catabolismului
glucozei fiind: glicoliza (calea Embden-Meyerhof-Parnas sau ci alternative: calea
pentoz-fosfat, calea Entner-Doudoroff), ciclul Krebs i lanul transportului de
electroni.
n cursul respiraiei aerobe a procariotelor rezult 38 molecule de ATP: 34 din
lanul transportului de electroni i 4 din glicoliz i ciclul Krebs.
n respiraia anaerob cantitatea de ATP format este variabil, ntotdeauna
mai mic dect n respiraia aerob.
24

Fermentaia
Este procesul de obinere a energiei n care att donorul ct i acceptorul de
electroni este de natur organic, n absena oxigenului acidul piruvic fiind convertit
la unul sau mai muli produi n funcie de specie. Cantitatea de ATP care se
formeaz este mic (2 molecule) (fig.13).
Dup modul de obinere a energiei bacteriile se pot clasifica n:
- strict aerobe folosesc exclusiv respiraia, nu se dezvolt n
absena oxigenului molecular (B. subtilis, B. anthracis, P. aeruginosa, M.
tuberculosis, etc.)
- strict anaerobe folosesc exclusiv fermentaia, oxigenul este toxic
pentru ele. Neavnd enzimele respiratorii (catalaz, peroxidaz etc.) se formeaz
peroxid de hidrogen care este toxic (genul Clostridium)
- aerobe - facultativ anaerobe pot obine energia att pe cale
oxidativ ct i fermentativ (E. coli, Staphylococcus, etc.);
- aerotolerante au metabolism fermentativ dar rmn viabile n
prezena oxigenului;
- microaerofile cresc numai n prezena unor cantiti reduse de
oxigen (spirochetele);
B2. Catabolismul lipidic i proteic
Producerea de energie din glicerol, acizi grai sau aminoacizi se face tot prin
ciclul Krebs.
C. Factorii de mediu care influeneaz metabolismul bacteriilor
C1. pH-ul majoritatea bacteriilor cultiv la pH aproximativ neutru (7,2 7,4),
condiiile de pH fiind oferite de mediul de cultur care pentru a neutraliza produii de
metabolism acizi conine fosfai, peptone, aminoacizi etc. Exist bacterii acidofile
care cultiv la pH acid (Lactobacillus) i bacterii bazofile care necesit un pH bazic
(Vibrio cholerae).
C2. presiunea osmotic este satisfcut de mediul de cultur. Bacteriile
patogene necesit o presiune identic cu cea din organismul uman. n mediile
hipotone cantitatea de ap care ptrunde n celul este controlat de peretele
bacterian. n mediile hipertone bacteria este supus plasmolizei. Bacteriile fr
perete bacterian sau cu perete deficitar sufer la orice modificare a presiunii
osmotice.
C3. temperatura majoritatea bacteriilor patogene pentru om cultiv la 37C.
n funcie de temperatura optim de dezvoltare bacteriile pot fi:
o psihrofile temperatura de 0 20C;
o mezofile - temperatura de 25 45C;
o termofile - temperatura de 50 70C.
C4. atmosfera n funcie de metabolismul bacterian se asigur prezena
oxigenului, absena oxigenului sau prezena diferitelor gaze inerte care favorizeaz
dezvoltarea speciei respective.
V.2.3. CRETEREA I MULTIPLICAREA BACTERIILOR
n urma nutriiei bacteriilor i a activitilor lor de metabolism are loc creterea
celulei bacteriene ca mrime i ca mas. ntruct creterea volumului celular
raportat la creterea suprafeei este mai mare la un moment dat se ajunge la un
punct critic ce impune restabilirea echilibrului optim ntre cele dou variabile. Acest
lucru se realizeaz prin diviziune binar, mecanismul de nmulire pentru majoritatea

25

bacteriilor. nmugurirea sau ramificarea este caracteristic unui numr foarte mic de
specii bacteriene.
Pentru c bacteriile sunt prea mici creterea este studiat la nivel de populaie
bacterian i nu la nivel de celul. Prin urmare cnd vorbim de creterea bacterian
facem referire la creterea numrului de celule ntr-o populaie bacterian i nu la
mrimea celulei bacteriene.
Pentru a vorbi despre creterea i multiplicarea bacterian folosim
urmtoarele noiuni:
- timp de generaie: timpul necesar dublrii populaiei bacteriene,
acesta fiind n medie 20 30 minute;
- rata de cretere: numrul de generaii n unitatea de timp;
- colonia bacterian: totalitatea bacteriilor rezultate din multiplicarea
unei singure celule bacteriene;
- cultura bacterian: totalitatea coloniilor de pe suprafaa mediului
solid;
o cultura mixt: format din mai multe tipuri de colonii (mai multe specii
bacteriene);
o cultura pur: format dintr-un singur tip de colonie (un singur germen).
- inocularea: depunerea unui produs biologic n cultura de celule, n
oul de gin embrionat, animale de laborator
- nsmnare: depunerea unui produs biologic pe / n mediu de
cultur.
Creterea bacterian este studiat pe medii de cultur optime pentru fiecare
specie n parte. n medii lichide celulele bacteriene sunt dispersate determinnd
modificri ale aspectului mediului: tulburare uniform, inel aderent de peretele
flaconului, pelicul la suprafaa mediului sau depozit. Pe medii de cultur solide
multiplicarea unei celule bacteriene formeaz colonia vizibil cu ochiul liber dup 18
24 de ore de la depunerea germenului pe mediu. O colonie bacterian provine
dintr-o celul bacterian sau din bacterii ataate (uniti formatoare de colonii =
UFC). n funcie de dimensiuni, contur, consisten, transparen, aspectul
suprafeei, pigment, aderena la mediu etc. coloniile bacteriene pot fi:
- colonii tip S (smooth) rotunde, bombate, suprafa neted, lucioase,
margini circulare, suspensioneaz omogen n ser fiziologic, produc tulburare n
mediul lichid, caracteristice bacteriilor patogene;
- colonii tip R (rough) margini neregulate, plate, suprafaa rugoas,
uscat, aderente de mediu, aglutineaz spontan n ser fiziologic, n mediul lichid
produc depozit cu supernatant clar, sunt caracteristice pentru germeni degradai, cu
modificri antigenice, de virulen. Exist trei specii bacteriene care fac excepie,
crescnd sub forma de colonii R pentru tulpini patogene: Mycobacterium
tuberculosis; Corynebacterium diphtheriae; Bacillus anthracis;
- colonii M (mucoid) foarte mari, lucioase, suprafaa neted, aspect
uleios, caracteristice pentru bacterii cu capsul;
- colonii untoase rotunde, bombate, margini regulate, suprafaa
neted, mate, consisten pstoas (cremoas), uneori pigmentate, caracteristice
pentru levuri;
- colonii pufoase: reea de filamente (hife) aeriene, caracteristice
fungilor filamentoi.
- fenomen de crare (invazie, migrare, roire): creterea se exprim printr-un
strat continuu, sub forma unor valuri succesive; fenomen caracteristic pentru Proteus spp.

26

Fig. 11.
Catabolismul glucozei prin
procesul de respiraie

glucoz

glicoliz

Dup Cono R.J, Colom J.S.

ATP

CO2

CO2

Ciclul
Krebs

lanul transferului
de electroni

ATP

ATP

H2O
glucoz
glicoliz
Acid piruvic
fermentaie

Clostridium

Enterobacter

acid butiric
+
butamol
+
izopropanol
+
aceton
+
CO2

etanol
+
acid lactic
+
acid formic
+
butandiol
+
acetoin
+
CO2
+
H2

Escherichia

etanol
+
acid lactic
+
acid acetic
+
acid succinic
+
CO2
+
H2

Lactobacillus

acid lactic

Propionibacterium

acid propionic
+
acid acetic
+
CO2
+
H2

Fig. 12. Catabolismul glucozei prin fermentaie


Dup Cono R.J, Colom J.S.

27

Fig. 13. Clasificarea bacteriilor pe baza caracterelor de metabolism


Bacterii

Sursa de energie

Reacii de oxido-reducere

Lumin

Chimiotrofe

Fototrofe

Sursa de carbon

Sursa de carbon

Compui organici

CO 2

Compui organici

CO 2

chimioheterotrofe

chimioautotrofe

fotoheterotrofe

fotoautotrofe

Acceptor final de electroni

O2

Non-O 2

Respiraie aerob
-

Compui
anorganici

Compui organici

Respiraie anaerob

Fermentaie

V.2.4. DINAMICA MULTIPLICRII BACTERIILOR


nsmnate n mediu adecvat, incubate la 37 C, urm rite din or n or
bacteriile vor urma 4 faze caracteristice ale multiplicrii populaiei bacteriene:
a) Faza de laten (faza de lag): reprezint perioada de adaptare a
bacteriilor la condiiile de mediu, perioad n care numrul germenilor rmne
nemodificat sau scade. Bacteriile au un metabolism activ de sintez al enzimelor
ceea ce face ca celula bacterian s creasc n dimensiuni. n aceast faz bacteria
este foarte sensibil la ageni antibacterieni. Durata acestei faze este de aproximativ
2 ore, cuprins ntre momentul nsmnrii mediului i momentul n care bacteria
ncepe s se multiplice.
b) Faza de cretere logaritmic (faza exponenial): celulele bacteriene
ncep s se divid permanent, ritmic. Timpul de generaie n aceast faz este
caracteristic pentru o anumit specie: 10 minute pentru V. cholerae, 20-30 minute
pentru majoritatea bacteriilor patogene, 18 14 ore pentru M. tuberculosis. Numrul
bacteriilor crete n progresie geometric. Bacteriile aflate n faz exponenial au
toate caracteristicile speciei: afinitate tinctorial, proprieti biochimice i de
28

metabolism, structura antigenic, virulena i toxigeneza sunt tipice speciei


respective. Sunt sensibile la aciunea agenilor antibacterieni. Este etapa optim
pentru studierea bacteriilor sau pentru recoltarea lor n vederea preparrii de
vaccinuri i pentru testarea sensibilitii la antibiotice. Durata fazei este de 8-12 ore.
c) Faza staionar (faza de concentraie "M"): mediul de via devine mai
puin favorabil prin consumul substanelor nutritive, acumularea de metabolii toxici.
Numrul bacteriilor vii rmne constant prin:
- persistena bacteriilor vii, absena multiplicrii datorit epuizrii unui
nutrient din mediu (factor limitant al creterii);
- echilibru ntre bacteriile care mor i cele care iau natere prin diviziune
datorit acumulrii de catabolii toxici i a pH-ului mediului.
Bacteriile au morfologia caracteristic speciei dar sunt mai puin sensibile la
aciunea agenilor antibacterieni. n aceast faz realizm identificarea germenilor.
La speciile sporogene ncepe formarea sporilor. Durata acestei faze variaz n raport
cu specia i condiiile de cultur, de la o or la cteva zile, pentru unele bacterii
poate dura cteva sptmni.
c)
Faza de declin: substratul nutritiv srcete, metaboliii toxici
sunt n cantitate mare ceea ce face ca bacteriile moarte s depeasc progresiv
numrul celor vii, pn la autosterilizarea culturii. n aceast faz bacteriile prezint
modificri morfo-tinctoriale, ale caracterelor biochimice i de metabolism, de virulen
i toxigenez. Apar forme de involuie. La bacteriile sporulate fenomenul de
sporogenez devine foarte intens. Durata fazei depinde de specia microbian (N.
gonorrhoeae 2-3 zile, la M. tuberculosis 2-3 sptmni).
Cultivarea bacteriilor are ca scop:
- identificarea agentului etiologic al unei infecii pentru identificarea
bacteriilor se folosesc culturi n faza staionar, n vrst de 18 -24 de ore;
- determinarea farmacorezistenei microorganismelor izolate ca inocul
se folosesc culturi n medii lichide, aflate n faz logaritmic, dup 4 6 ore de
incubare, nsmnate pe medii solide nutritive adecvate;
- preparare de seruri i vaccinuri, pentru obinerea unor produse de
metabolism bacterian (vitamine, antibiotice etc) - se folosesc culturi continue: cultura
bacterian se menine n faz exponenial n permanen prin adugarea de mediu
proaspt culturii, n vase speciale, turbidistat sau chemostat.
Fig. 14. Curba multiplicrii bacteriilor n cultur discontinu

3
4
2
Punct de
autosterilizare

legend: 1 faza de laten; 2 faza exponenial; 3 faza staionar; 4 faza de


declin

29

Capitolul VI

ACIUNEA AGENILOR FIZICI, CHIMICI I BIOLOGICI


ASUPRA BACTERIILOR

VI.1. DEFINIII
Septic infectat, contaminat cu germeni patogeni.
Aseptic (steril) lipsit de microbi patogeni sau nepatogeni.
Asepsie ansamblul de metode prin care se evit contaminarea unui substrat steril.
Sterilizare distrugerea sau ndeprtarea oricror forme de via, a tuturor
microorganismelor patogene sau nepatogene, forme vegetative sau sporulate de pe
o suprafa sau dintr-un substrat nensufleit.
Dezinfecie distrugerea formelor vegetative microbiene (mai rar a celor sporulate)
din sau de pe suprafaa unor substraturi nensufleite, cu ajutorul dezinfectantelor.
Dezinfectant substan chimic, toxic pentru esuturi vii, cu aciune microbicid,
ireversibil.
Antisepsie distrugerea sau ndeprtarea temporar a formelor vegetative
microbiene de pe substraturi vii (mucoase, tegumente, plgi), cu ajutorul
antisepticelor.
Antiseptic substan chimic, netoxic pentru esuturile vii, cu aciune reversibil,
bacteriostatic asupra microorganismelor.
Prezervare prevenirea multiplicrii unor microorganisme n produse farmaceutice,
vaccinuri, alimente etc.

VI.2. EFECTE ANTIMICROBIENE ALE FACTORILOR FIZICI, CHIMICI,


BIOLOGICI
Prin efectele pe care le au asupra microorganismelor agenii fizici, chimici i
biologici au o foarte mare importan n controlul infeciei, fiind utilizai n sterilizare,
dezinfecie, antisepsie, prezervare. Efectele antibacteriene se pot traduce prin:
- efect microbicid fenomen ireversibil, de omorre a microorganismului
(bactericid, virulicid, fungicid, sporicid);
- efect microbistatic fenomen reversibil, de inhibare temporar a
multiplicrii (bacteriostatic, fungistatic).

VI.3. FACTORI CARE INFLUENEAZ EFECTUL ANTIMICROBIAN


AL FACTORILOR FIZICI, CHIMICI, BIOLOGICI
Agenii antimicrobieni i exercit aciunea dependent de intervenia unor
factori externi:
30

VI.3.1. concentraia microorganismelor la aceeai intensitate a agentului


antimicrobian, timpul de omorre crete proporional cu concentraia de
microorganisme asupra creia se acioneaz;
VI.3.2. gradul de rezisten al microorganismelor diferitele specii prezint
grade diferite de susceptibilitate la aciunea agenilor antibacterieni, chiar n cadrul
aceleiai specii existnd uneori diferene individuale de sensibilitate. De la cele mai
rezistente la cele mai puin rezistente putem enumera, n ordine: sporii bacterieni,
micobacteriile, virusurile fr nveli extern, bacteriile Gram negative, fungii, bacteriile
Gram pozitive, virusurile cu nveli extern.
VI.3.3. intensitatea agentului antibacterian cu ct intensitatea agentului
antibacterian (concentraia, presiunea, temperatura ridicat, etc) este mai mare
proporional timpul de aciune eficient al agentului antimicrobian este mai mic.
VI.3.4. influena mediului substanele organice, turbiditatea mediului,
duritatea apei, pH-ul mediului etc pot influena n sens pozitiv sau negativ aciunea
unui agent antibacterian.

VI.4. AGENI FIZICI


VI.4.1. CLDURA
VI.4.1. 1. definiii
o temperatura optim temperatura la care o specie bacterian
atinge cel mai nalt grad de multiplicare;
o temperatura minim de dezvoltare temperatura cea mai
sczut la care microorganismul se mai multiplic;
o temperatura maxim de dezvoltare - temperatura cea mai
ridicat la care microorganismul se mai multiplic;
n funcie de temperatura de dezvoltare bacteriile se mpart n:
- termofile temperatur optim 50 60C; unele se dezvolt i la 95C;
nu sunt patogene;
- mezofile - temperatur optim 30 37C; majoritatea bacteriilor; flora
saprofit i patogen a omului;
- psichrofile - temperatur optim 20C; unele se dezvolt i la 0C.
VI.4.1. 2. cldura umed este utilizat, n raport cu valoarea
temperaturii realizate, n dezinfecie sau n sterilizare. Are ca mecanism de aciune
coagularea proteinelor i degradarea enzimelor.
VI.4.1. 2. 1. temperaturi sub 100C sunt aplicate pentru formele
vegetative ale bacteriilor mezofile i psichrofile aflate n soluii apoase. Ca metode de
aplicare amintim:
o pasteurizarea expunere termic + refrigerare imediat;
o tindalizarea este sterilizare fracionat n care produsele sunt
meinute succesiv la 50 -100C i apoi la temperatura camerei (timp de 3-4 zile);
o dezinfecia prin vapori flueni de ap n vasul Koch sau
autoclav cu robinetul de vapori deschis.
VI.4.1. 2. 2. temperatura de 100C realizeaz doar dezinfecie, fiind
utilizat la decontaminarea apei, alimentelor, lenjeriei, instrumentarului etc. Se
folosesc fierbtoare nclzite electric sau la flacr.
VI.4.1. 2. 3. temperatura de peste 100C este tem peratura la care
se realizeaz sterilizarea. Se folosesc autoclave care folosesc vapori de ap sub
presiune: 0,5 atm - 115C; 1 atm - 121C; 2 atm - 1 34C.

31

VI.4.1. 3. cldura uscat are ca mecanism de aciune oxidarea sau


carbonizarea structurilor bacteriene. Se aplic sub form de:
VI.4.1.3.1. flambare metod de completare a sterilitii, metod de
asepsie;
VI.4.1.3.2. nclzire la incandescen pentru ansa sau acul de
platin;
VI.4.1.3.3. incinerare pentru materiale contaminate, reziduuri,
animale;
VI.4.1.3.4. sterilizare cu aer supranclzit se realizeaz n cuptorul
Pasteur (Poupinel; etuv) la 180C timp de 1 or , sau la 160C timp de 2 ore.
VI.4.2. FRIGUL
VI.4.2.1. refrigerarea temperaturi de 0 7 au efect bacteriostatic
asupra majoritii microorganismelor; unele bacterii mor (Neisseria meningitidis,
N.gonorhoeae, Haemophilus influenzae) altele se pot multiplica.
VI.4.2.2. congelarea dac este fcut lent, la temperaturi de (-20C)
favorizeaz formarea cristalelor de ap care lezeaz membrana citoplasmatic a
celulei bacteriene care va fi distrus (efect microbicid). Congelarea rapid la (-80C)
n bulion glicerinat duce la solidificarea amorf a apei intracelulare ceea ce face ca
celula microbian s rmn n via.
VI.4.2.3. ocul rece unele bacterii pot fi distruse prin scderea
brusc a temperaturii, de la 45C la 15C.
VI.4. 3. PRESIUNEA OSMOTIC
n medii hipotone are loc acumularea apei n celula bacterian care devine
turgescent, peretele bacterian sprgndu-se. n mediul hiperton bacteria pierde ap
(plasmoliza), fenomen cu efecte letale asupra bacteriei.
VI.4. 4. RADIAIILE
VI.4.1. radiaii neionizante radiaiile UV au efect microbicid, dar au
putere de penetrabilitate mic. Se pot folosi la dezinfecia aerului n ncperi, din
boxele de lucru sau la dezinfecia suprafeelor n laboratorul de microbiologie, ca o
metod complementar msurilor de curenie i dezinfecie chimic.
VI.4.2. radiaii ionizante corpusculare (, ) i electromagnetice (, X)
au efect microbicid, au mare putere de penetrare. Ionizarea compuilor celulari prin
expulzarea electronilor cauzeaz moartea microorganismelor. Aceast metod de
sterilizare se utilizeaz pentru medicamente, instrumentar confecionat din material
degradabil termic. Ca surse de radiaii gama sunt folosite cobaltul 60 sau cesiul 137.
VI.4. 5. DESICAREA
Rezistena bacteriilor la desicaie este variabil. Sporii bacterieni, sporii
fungici, chisturile protozoarelor rezist timp ndelungat la uscciune n timp ce
formele vegetative se distrug n cteva ore. Rezistena formelor vegetative la
desicaie crete n produsul patologic (materii fecale, sput, puroi), la temperaturi
sczute, n mediu proteic etc.
Asocierea a 2 factori fizici (frigul i desicaia) a dat natere unei metode de
pstrare timp ndelungat a microorganismelor liofilizarea. Metoda const n
congelarea rapid a suspensiei microbiene ntr-un mediu protector urmat de
uscarea rapid n vid i nfiolarea produsului obinut.

32

VI.4. 6. ULTRASUNETELE
Au aciune microbicid prin aciune mecanic, sprgnd peretele celular acele
sunete care ating 16.000 cicli/sec. Utiliznd ultrasunete de diferite frecvene s-au
putut obine unii constitueni ai celulei bacteriene.
VI.4.7. FILTRAREA
Prin procesul de trecere a unui lichid sau gaz printr-un material poros, pot fi
reinute, mecanic sau electrostatic, cele mai multe dintre bacterii dac dimensiunea
porilor este de aproximativ 0,22 m. Filtrele cu dimensiunea porilor de 0,01 m pot
reine i virusurile mici aceste filtre avnd n mod real rol sterilizant al materialului
filtrat. Este o metod se sterilizare la rece aplicat soluiilor denaturabile termic.
VI.4. 8. LASERUL
Laserul (light amplification by stimulated emission of radiation) are efect
microbicid instantaneu.

VI.5. AGENI CHIMICI


Pe lng substanele chimice necesare dezvoltrii i multiplicrii bacteriene,
exist o serie de alte substane chimice cu efect bacteriostatic sau bactericid. Aceste
substane sunt antibiotice, chimioterapice, antiseptice, dezinfectante.
VI.5.1. antiseptice i dezinfectante
Antisepticele i dezinfectantele sunt substane cu aciune antimicrobian
neselectiv, alternd deopotriv structuri i funcii comune microorganismelor i
macroorganismului.
Antisepticele pot fi utilizate pe tegumente i mucoase, dezinfectantele numai
pe suprafee i structuri inerte. Aceeai substan chimic, n raport cu concentraia,
poate fi antiseptic sau dezinfectant.
n funcie de mecanismul de aciune antisepticele i dezinfectantele se
clasific n substane care:
a. denatureaz proteinele (efect bactericid): acizi, baze, alcooli;
b. oxideaz gruprile chimice libere ale enzimelor: hipermanganat
de potasiu, peroxid de hidrogen, halogenii i derivaii lor;
c. blocheaz gruprile chimice libere ale enzimelor:
 sruri ale unor metale grele mercurocrom, azotat de Ag
 ageni alchilani glutaraldehida, formaldehida, oxid de
etilen
d. lezeaz membranele celulare:
 derivai fenolici crezoli, hexaclorofen
 biguanide clorhexidina
 detergeni
anionici spunuri, perlan etc.
cationici compui cuaternari de amoniu
e. altereaz acizii nucleici:
 derivai de acridin - rivanol
 colorani bazici violet de genian, albastru de metil,
fucsin bazic etc.
n funcie de aciunea antimicrobian pe care o au vorbim despre efect
antimicrobian:

33

a. de nivel nalt substane care distrug toate microorganismele cu


excepia unui numr redus de spori bacterieni, cu condiia timpului de contact de cel
puin 20 de minute peroxid de hidrogen stabilizat (6%), acid peracetic, hipoclorit de
sodiu (5%, 25%), glutaraldehida (2%), cloramina B (2%);
b. de nivel mediu substane care distrug virusuri, fungi, formele
vegetative bacteriene (inclusiv Mycobacterium tuberculosis) dar nu distrug endosporii
bacterieni i unele virusuri fr nveli extern (rhinovirus, enterovirus). Timpul de
contact este de 10 minute: fenoli, iodofori, alcooli, compui pe baz de clor etc;
c. de nivel sczut substane care distrug majoritatea formelor
vegetative bacteriene, unele virusuri, unii fungi dar nu distrug M.tuberculosis,
endosporii bacterieni i virusurile nude. Timpul de contact este de 10 minute:
clorhexidina, compui cuaternari de amoniu.
Aciunea antimicrobian a antisepticului sau dezinfectantului depinde de
concentraie, de timpul de contact i de prezena substanelor organice
VI.5.2. ageni sterilizani
Sunt substane chimice, cu bun penetrabilitate, care n incinte nchise etan,
n anumite concentraii, ntr-un timp de contact bine stabilit, n condiii stricte de
temperatur i umiditate au aciune microbicid. Se folosesc glutaraldehida 2%,
acidul peracetic, peroxidul de hidrogen stabilizat 6%. Atunci cnd nu exist alt mijloc
de sterilizare adecvat se folosete oxidul de etilen. Acest mijloc de sterilizare este
delicat, orice eroare de procedur ducnd fie la sterilizare ineficient fie la
accidentarea personalului care o realizeaz sau a pacientului la care se utilizeaz
materialul astfel sterilizat.
VI.5.3. ageni prezervani
Sunt substane chimice cu aciune bacteriostatic sau bactericid asupra
microorganismelor implicate n alterarea unor produse. Se folosesc pentru
conservarea alimentelor, medicamentelor, serurilor, vaccinurilor etc, n concetraiile
uzuale nefiind toxice pentru macroorganism: acid salicilic, acid benzoic, meriolat de
sodiu etc.
VI.5.4. antibiotice i chimioterapice
Sunt substane cu efect bactericid sau bacteriostatic, cu toxicitate selectiv,
obinute prin biosintez microbian (antibioticele) sau prin sintez chimic
(chimioterapicele).
VI.5.4.1. clasificare
Antibioticele i chimioterapicele pot fi clasificate n raport cu multe criterii:
a. dup modul de obinere se folosea termenul de antibiotic pentru
substanele obinute prin biosintez microbian i chimioterapic pentru cele obinute
prin sintez chimic. Astzi aceast grani a fost depit aproape toate
antimicrobienele fiind obinute, mai economic, sau mbuntite prin sintez chimic.
Este corect s se utilizeze termenul de antibiotic pentru toi agenii antimicrobieni
utilizai n terapie indiferent de modul lor de obinere, evitnd astfel i confuzia creat
de termenul de chimioterapic care desemneaz produse utilizate n tratamentul unor
afeciuni neoplazice.
b. dup categoria de microorganisme asupra crora acioneaz
exist antibiotice antibacteriene, antivirale, antifungice, antiparazitare.
c. dup structura chimic
34

d. dup efectul lor


d1. bacteriostatic oprete multiplicarea bacterian tetracicline,
cloramfenicol, eritromicina, sulfamide etc;
d2. bactericid distruge bacteriile: peniciline, cefalosporine, aminoglicozide,
etc.
e. dup mecanismul de aciune
e1. inhib sinteza peretelui bacterian: antibiotice beta-lactamice, glicopeptide,
izoniazida, etc; au efect bactericid;
e2. afecteaz funciile membranei citoplasmatice: polimixine, colistina,
nistatina, amfotericina B; au efect bactericid;
e3. perturb sinteza proteinelor celulare la nivelul ribozomilor: aminoglicozide,
tetracicline, macrolide, licosamide, acid fusidic, mupirocin etc;
e4. blocheaz sinteza acizilor nucleici: chinolone, rifampicina, metronidazol,
sulfamide, trimetoprim, chinolone etc.
f. dup spectrul de aciune
f1. cu spectru ngust:
o de tip penicilinic: active pe bacili Gram pozitivi, coci Gram pozitivi
i negativi (peniciline, macrolide, lincosanide etc);
o de tip streptomicinic: active pe bacili Gram negativi, coci Gram
pozitivi i negativi (aminoglicozide, polimixine etc.);
f2. cu spectru larg: active pe bacili Gram pozitivi i negativi, coci Gram pozitivi
i negativi, spirochete, leptospire, chlamydii, mycoplasme etc (cloramfenicol,
tetracicline).
VI.5.4.2. rezistena microbian la antibiotice
Este capacitatea microorganismelor de a supravieui i a se multiplica n
prezena antibioticului. Rezistena poate fi natural sau dobndit.
VI.5.4.2.1. Rezistena natural fa de un antibiotic este prezent la toi
membrii unei specii bacteriene, este determinat genetic.
VI.5.4.2.2. Rezistena dobndit fa de un antibiotic este achiziionat de o
subpopulaie a unei specii n anumite circumstane. Mecanismele implicate sunt
multiple:

scderea permeabilitii peretelui sau membranei citoplasmatice


pentru antibiotic;

producerea de ctre bacterie a unei enzime care inactiveaz


antibioticul (penicilinaza, codificat plasmidic);

amplificarea sintezei de acid paraaminobenzoic care anuleaz


prin diluare aciunea sulfamidelor etc.
Rezistena dobndit poate fi
a. cromozomial: apare n urma unei mutaii spontane rezultnd tulpini
rezistente numai la un anumit antibiotic sau familie de antibiotice. Mutaia
cromozomial afecteaz locusul ce controleaz sensibilitatea bacteriei fa de un
antibiotic, este definitiv i se transmite vertical descendenilor tulpinii respective.
Administrarea antibioticului respectiv va distruge populaia sensibil selectnd
mutanii rezisteni care vor deveni populaie dominant.
b. extracromozomial: este cea mai frecvent (90% din cazurile de
rezisten), realizndu-se prin plasmide, material plasmidic sau transpozoni.

35

Materialul genetic se transmite orizontal la toi membrii populaiei bacteriene prin


transducie, transformare, conjugare, transpoziie.
c. monovalent germenii sunt rezisteni fa de un singur antibiotic;
d. plurivalent rezistena la mai multe antibiotice, concomitent;
e. manifestat direct leag o anumit bacterie de un singur antibiotic;
f. manifestat ncruciat rezistena unei bacterii fa de mai multe
antibiotice cu structur sau cu mecanism de aciune asemntor;
g. dup ritmul de instalare
rapid (monostadial) de tip streptomicinic
intermediar de tip eritromicinic
lent (pluristadial) de tip penicilinic
foarte lent de tip vancomicin.

VI.6. AGENI BIOLOGICI


VI.6.1. LANTIBIOTICE
Sunt polipeptide policiclice cu aciune antimicrobian, plasate ntre antibiotice
i bacteriocine. Sunt sintetizate de bacterii gram pozitive: Staphylococcus,
Streptococcus, Streptomyces, Bacillus i au spectru de activitate nalt specific fa de
unele bacterii Gram pozitive.
Au fost descrise dou categorii de lantibiotice:

lantibiotice tip A:
Sub comanda unor gene localizate cromozomal sau plasmidic, sunt sintetizate
la nivel ribozomal ca proteine precursoare inactive care, prin modificri enzimatice
sunt transformate n peptide active. Sunt produse de stafilococi, bacili Gram negativi
i lactococi, cele mai cunoscute lantibiotice fiind nisina (gene pe cromozomul celulei
bacteriene), subtilina, epidermina (gene pe plasmidul pTu32), gallidermina (produs
de Staphylococcus gallinarum cu plasmid Tu3928) . Nu se cunoate cu exactitate
modul de aciune al lantibioticelor.
Nisina are aciune inhibant asupra unor germeni Gram pozitivi
(Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus, Clostridium, Listeria) i inhib sporularea
germenilor din genul Bacillus i Clostridium, avnd aciune maxim la pH sub 5,5. Nu
are aciune asupra bacteriilor Gram negative, asupra fungilor i levurilor. Epidermina
produs de Staphylococcus epidermidis are aciune antimicrobian fa de
microorganisme patogene pentru piele: Streptococcus, Staphylococcus,
Propionibacterium acnes.
Sunt utilizate n industria alimentar i n medicin:
- nisina
 conservant pentru vegetale, brnzeturi, carne, pete, buturi
alcoolice, vin etc.;
 component al preparatelor cosmetice;
 agent terapeutic cu aplicare local n infecii bacteriene n
medicina veterinar.
- epidermina
 tratament n cazurile de acnee juvenil i eczeme la om
- gallidermina
 n tratamentul foliculitelor, al impetogo-ului.

36


lantibiotice tip B
Cea mai cunoscut este lanthiopeptina care are aciune antiviral fa de
Herpes simplex virus.
VI.6.2. BACTERIOCINE
Sunt substane de natur proteic produse de unele tulpini bacteriene, cu
efect bactericid fa de tulpini din aceeai specie sau din specii nrudite. Se ataeaz
de peretele celular al bacteriilor sensibile i inhib unul sau mai multe procese
eseniale cum ar fi replicarea, transcripia, translaia sau etape ale metabolismului
energetic.
Producerea de bacteriocine este un mecanism prin care bacteriile ce
alctuiesc flora normal a unei nie ecologice fac fa competiiei fa de aceeai
nutrieni. Tulpinile productoare de bacteriocine sunt rezistente la aciunea propriilor
bacteriocine ceea ce permite utilizarea bacteriocinotipiei n identificarea unor
microorganisme.
Producerea bacteriocinelor este controlat de gene prezente pe plasmide
numite plasmide bacteriocinogene. Exemple de bacterii productoare de
bacteriocine: E.coli colicine; Serratia marcescina; Pseudomonas piocina etc.
VI.6.3. BACTERIOFAGUL
Este virusul care paraziteaz bacteriile. Are structur complex fiind alctuit
din (fig. 15):
 capul fagului este alctuit dintr-o capsid cu simetrie icosaedric
ce adpostete n interior acidul nucleic (ADN dublu catenar sau ARN);
 coada fagului cu simetrie helical este alctuit din urmtoarele
elemente: cilindrul axial nconjurat de teaca cozii, placa bazal cu croete de fixare i
fibrele cozii. Coada fagului este de natur proteic i are rol n adsorbia i
penetrarea n celula bacterian.
ntre bacteriofag i bacteria gazd se stabilesc dou tipuri de relaii:
a. de tip litic (ciclul litic; de tip productiv)
Are urmtoarele etape:
1. adsorbia: bacteriofagul are receptori strict specifici care recunosc
receptorii de pe suprafaa bacteriei. Ataarea de receptorii celulari se realizeaz
iniial prin fibrele cozii (fixare reversibil) i apoi prin croetele plcii bazale (fixare
ireversibil);
2. penetrarea: mureina din peretele bacterian este lizat de muramidaza
eliberat de fag. Teaca cozii fagului prin contractare antreneaz cilindrul axial prin
peretele bacteriei realiznd apoi injectarea acidului nucleic fagic n citoplasma
bacterian;
3. multiplicarea: la 4 minute dup ptrunderea ADN-ului fagic n citoplasma
bacteriei, ADN-ul bacterian este blocat funcia acestuia fiind preluat de acidul
nucleic al fagului. Acesta va coordona sinteza componentelor proprii fagului;
4. maturarea fagului
5. eliberarea fagului matur, virulent prin liza bacteriei.
Bacteriile care permit desfurarea ciclului litic se numesc bacterii
lizosensibile. Bacteriile care nu permit infecia cu un fag sunt bacterii lizorezistente,

37

aceast rezisten datorndu-se lipsei receptorilor specifici sau unei stri de


imunitate.
Fagii care evolueaz prin ciclu litic se numesc fagi viruleni i infecia cauzat
de ei are efect bacteriolitic.
Ciclul litic poate fi evideniat la nivelul culturilor bacteriene, cultura n mediul
lichid devenind limpede dup inoculare cu bacteriofag iar pe mediul solid nsmnat
uniform, inocularea fagului litic duce la apariia zonei clare de liz (plaj de liz).
b. de lizogenizare (de tip reductiv)
Are urmtoarele etape:
1. adsorbia: bacteriofagul are receptori strict specifici care recunosc
receptorii de pe suprafaa bacteriei. Ataarea de receptorii celulari se realizeaz
iniial prin fibrele cozii (fixare reversibil) i apoi prin croetele plcii bazale (fixare
ireversibil);
2. penetrarea: mureina din peretele bacterian este lizat de muramidaza
eliberat de fag. Teaca cozii fagului prin contractare antreneaz cilindrul axial prin
peretele bacteriei realiznd apoi injectarea acidului nucleic fagic n citoplasma
bacterian;
3. ADN-ul fagic poate evolua n 2 direcii:
se integreaz liniar n cromozomul bacteriei gazd ca episomi
replicndu-se sincron cu acesta;
se circularizeaz, se ataeaz de membrana citoplasmatic i se
replic sincron cu diviziunea bacteriei.
Un astfel de fag integrat se numete fag latent (profag, fag temperat) i are
capacitatea de a realiza o infecie persistent cu posibilitate de reactivare. Bacteria
care l adpostete este bacterie lizogen transmind descendenilor fagul latent. n
anumite circumstane profagul poate deveni virulent. Fagul care nu se reactiveaz,
persistnd indefinit n stare latent se numete fag defectiv.
Bacteria lizogen este imun la ali fagi omologi viruleni ai profagului pe care
l gzduiete.
Fenomenul de bacteriofagie are multiple aplicaii practice:
- fagul temperat are rol n reasortarea materialului genetic al bacteriilor
pentru c atunci cnd se desprinde de cromozomul bacterian antreneaz i gene ale
acestuia (inducie);
- fagul virulent asigur echilibrul ecologic n mediul natural de via al
bacteriilor;
- prezena fagilor n ape este indicator de poluare al acesteia;
- datorit specificitii relaiei fag-bacterie i a stabilitii n timp a
sensibilitii bacteriei fa de anumii fagi, lizotipia (sensibilitatea la un anumit tip
fagic) este una dintre cele mai fine metode de diagnostic bacteriologic i
epidemiologic;
- fagii sunt utili n ingineria genetic, n studii de biologie molecular;
- fagii pot fi utilizai ca tratament adjuvant n unele infecii (infecii urinare).

38

Capitolul VII

GENETICA BACTERIAN

VII.1. DEFINIII
Genetica bacterian se ocup cu studiul ereditii i a variabilitii bacteriene.
Genom suma genelor unui organism;
Genotip totalitatea informaiei genetice a unui organism;
Fenotip totalitatea caracterelor observabile, produse de genotip n
interaciune cu mediul ambiant.

VII.2. SUPORTUL EREDITII


Suportul material al ereditii este reprezentat de ADN care este depozitarul
informaiei genetice. Aceast informaie se traduce prin sinteza unor proteine i se
transmite descendenilor prin replicare i diviziune.
ADN-ul este format din uniti structurale alctuite dintr-o baz azotat
purinic (adenina, guanina) sau pirimidinic (timina, citozina), o pentoz
(dezoxiriboza) i acid fosforic. A fost identificat ca o macromolecul format din dou
catene polinucleotidice antiparalele i complementare, rsucite n dublu helix, unite
prin puni de hidrogen formate ntre bazele azotate opuse (adenin-timin; guanincitozin).
Transmiterea mesajului genetic se face prin dublarea cantitii de material
genetic i prin diviziune. Replicarea ADN const din sinteza, pe baz de
complementaritate, a unor noi molecule de ADN identice cu molecula parental i
identice ntre ele (replicare semiconservativ). n condiii normale, dac nu au loc
modificri genetice, toi descendenii unei bacterii vor fi identici cu bacteria parental
i identici ntre ei.
In vivo se pot replica numai acele molecule de ADN care au unitatea de
replicare independent replicon. Replicon este cromozomul i plasmidele
bacteriene, genomul bacteriofagilor etc. Repliconul este alctuit din:
- secven nucleotidic specific ce marcheaz nceperea replicrii;
- gene ce codific sinteza unor proteine specifice;
- secve nucleotidic semnal pentru terminarea replicrii.

39

Funciile ADN-ului ca material genetic:


depozitar al informaiei genetice;
rol n replicare;
rol n transcrierea i traducerea informaiei genetice;
rol n reglarea i controlul activitii celulare.

VII.3. ORGANIZAREA GENOMULUI BACTERIAN


n structura genomului bacterian intr dou categorii de determinani genetici:
- gene eseniale componente ale cromozomului unic bacterian;
- gene accesorii (extracromozomale) componente ale
 plasmidelor
 elementelor genetice transpozabile.
VII.3.1. PLASMIDELE
Plasmidele sunt elemente genetice extracromozomale care conin informaie
genetic neesenial pentru viaa bacteriei. Sunt alctuite din ADN dublucatenar,
cele mai multe sunt circulare, doar la puine bacterii printre care la Borrelia pot fi
liniare. Sunt capabile de replicare independent de cromozom (replicon). Exist dou
categorii de plasmide:
- unele care persist indefinit numai n stare autonom n citoplasm
(plasmida R, Col etc.)
- altele care exist alternativ n stare autonom n citoplasm sau
integrate n cromozomul bacterian se numesc episomi (factorul F, bacteriofag
temperat etc.)
Plasmidele aduc un plus de informaie genetic ce confer bacteriei caractere
suplimentare fa de bacteriile care nu posed aceste plasmide. Dup caracterele
fenotipice pe care le induc plasmidele pot fi clasificate n plasmide care:
- codific rezistena la ageni antibacterieni: factorii R, plasmid de
rezisten la UV etc.;
- codific sinteza unor ageni antibacterieni: factorul Col;
- prin elementele pe care le codific (hemolizine, enterotoxine, factori
de colonizare etc.) imprim caractere de patogenitate bacteriei: plasmidul Hly, Ent,
PAP etc.)
- codific enzime ale unor ci metabolice particulare;
- plasmide criptice al cror rol nu este cunoscut.
VII.3.1.1. Factorul F (factor de fertilitate, factor de sex)
Este o plasmid care codific structurile i enzimele necesare transferului de
ADN controlnd capacitatea unor bacterii de a aciona ca donatoare de material
genetic.
n funcie de prezena factorului F, de raportul acestuia cu cromozomul
bacterian, de modul n care factorul F faciliteaz transferul de material genetic,
bacteriile se pot clasifica n:
- bacterii F- - bacterii fr factor F, numite celule femele, acceptoare
de material genetic, au receptori pentru pilii sexuali;

40

- bacterii F+ - bacterii care au factor F n citoplasm, numite celule


mascule, capabile de a aciona ca donoare de material genetic, au pili sexuali;
- bacterii Hfr (high frequency of recombination) bacterii care au
factorul F integrat n cromozomul bacterian. Au o mare frecven de conjugare i
recombinare. Sunt donatoare de material genetic, fiind transferate i un numr
variabil de gene cromozomale, mai rar chiar i factorul F.
- bacterii F dein factor de fertilitate recombinant, adic plasmida
care a fost anterior integrat n cromozomul bacterian, s-a desprins ncorpornd n
structura sa unele gene cromozomale. Sunt bacterii donatoare de material genetic.
VII.3.1.2. Factorul R (plasmidul R)
Plasmidele de rezisten la antibiotice sunt alctuite din (fig.16):
- gene care codific fiecare rezistena la un antibiotic (1 8 gene),
numite i determinani de rezisten;
- gene care alctuiesc factorul de transfer al rezistenei (RTF), care
asigur capacitatea de replicare autonom i de transfer prin conjugare.
Cele 2 elemente componente se pot asocia sau pot exista independent.
Plasmida de rezisten confer bacteriei proprietatea de a fi rezistent fa de
1 pn la 8 antibiotice. Poate fi transferat de la o bacterie la alta prin conjugare
bacterian sau prin transducie mediat de fagi.
VII.3.1.3. Plasmidul Col
Este ntlnit la unele tulpini de E.coli crora le confer capacitatea de a
elabora substane cu aciune antibacterian numite colicine. Face parte din categoria
plasmidelor numite plasmide bacteriocinogene care codific producerea de
bacteriocine de ctre multe specii bacteriene. Sunt transferabile de la o tulpin la alta
prin transformare genetic, transducie fagic, conjugare.
Prezena plasmidului Col face populaia bacterian mai competitiv n lupta
pentru supravieuire fa de tulpinile bacteriene care nu au acest plasmid. n
majoritatea cazurilor colicinele produse sunt inactive pe tulpinile care conin plasmid
Col fenomen numit imunitate.

VII.3.2. ELEMENTE GENETICE TRANSPOZABILE


Sunt secvene specifice de ADN care i menin integritatea fizic, structural,
genetic, funcional n cursul translocaiei de la o poziie la alta pe acelai genom
sau pe genomuri diferite.
Elementele genetice transpozabile se mpart n 3 categorii:
VII.3.2.1. secvene de inserie
Singurul rol pe care l ndeplinesc secvenele de inserie este acela de a
asigura intercalarea unei secvene nucleotidice n lanul nucleotidic. Nu aduc
informaie genetic suplimentar ntruct nu conin nici o gen. n regiunile adiacente
situsului lor de legare pot apare modificri n expresia unor gene sau modificri ale
ratei de apariie a mutaiilor.
VII.3.2.2. transpozoni
41

Transpozonii poart gene care confer bacteriilor funcii noi: rezisten la


antibiotice, capacitatea de a sintetiza enzime, enterotoxine, factori de colonizare
intestinal, antigene de suprafa (K88).
VII.3.2.3. bacteriofagi

VII.4. MECANISMELE DE VARIABILITATE BACTERIAN


Variabilitatea bacterian presupune apariia, la un moment dat, a unor
modificri n caracterele celulei bacteriene sau a descendenilor si. Exist dou
variante de variabilitate: fenotipic i genotipic.
VII.4.1. VARIABILITATEA FENOTIPIC
Reprezint modificri morfologice sau fiziologice de tip adaptativ. n acest caz
genomul nu este afectat i modificrile aprute sunt reversibile i nu se transmit
descendenilor.
VII.4.2. VARIABILITATEA GENOTIPIC
Reprezint modificri aprute brusc, definitive ale materialului genetic
cromozomial sau extracromozomial. Variaia genotipic determin modificarea unuia
sau a mai multor caractere ale unei bacterii i se transmite descendenilor.
Mecanismele prin care apar variaiile genotipice sunt: mutaia sau transferul genetic
urmat de recombinare genetic.
VII.4.2.1 mutaia
Const n schimbri ale mesajului genetic aprute ca urmare a unor modificri
accidentale n secvena nucleotidic a unei gene. Mutaiile pot aprea prin substituii
la nivelul materialului genetic, inserii, inversii, deleii.
Mutaia spontan mutaia care apare n condiii de mediu obinuite fr a
se putea identifica intervenia unui factor.
Mutaia indus mutaia care se produce sub aciunea unor factori fizici
(raze UV, radiaii ionizante etc.) sau chimici (agenii alchilani, colorani etc.). Factorii
care induc mutaia se numesc ageni mutageni. Rata mutaiilor induse este mult mai
mare dect rata mutaiilor spontane.
Mutaia punctiform este alterat un singur nucleotid;
Mutaia extins sunt alterate mai multe nucleotide, afectnd secvene mai
mari ale uneia (monogenic) sau mai multor gene (mutaie poligenic).
Mutaie nainte afecteaz tulpina slbatic ducnd la pierderea unui
caracter metabolic esenial.
Mutaie regresiv afecteaz celula bacterian mutant. Const n
restabilirea secvenei nucleotidice originare ceea ce face ca bacteria s revin la
caracteristicile iniiale. Astfel de mutaii se mai numesc i retromutaii.
Mutaie supresoare cu toate c are loc o modificare a secvenei bazelor
nucleotidice gena afectat i exprim funcia pe care o exprima i anterior modificrii
suferite.

42

VII.4.2.2. transferul genetic


Transferul de material genetic de la o bacterie donor la o bacterie acceptoare
de material genetic se poate realiza prin transformare, transfer genetic mediat de
bacteriofagi sau conjugare. ADN-ul donat de celula F+ se numete exogenot iar
ADN-ul bacteriei receptoare se numete endogenot.
VII.4.2.2.1. transformarea
Este procesul prin care bacteria acceptoare dobndete un fragment de ADN
exogen care poate nlocui prin recombinare genetic o secven nucleotidic
omolog. Bacteria acceptoare dobndete astfel un caracter genetic nou.
VII.4.2.2.2. transfer genetic mediat de bacteriofagi
Se poate realiza prin:

conversia lizogenic apariia unui caracter nou la bacteriile care


adpostesc un profag;

transducie transferul unui fragment genetic cromozomal sau


extracromozomal de la o bacterie la alta prin intermediul unui bacteriofag. Fagul de
numete fag transductor iar celula bacterian acceptoare se numete transductant.
In cursul maturrii sale fagul intracelular poate ncorpora un segment din genomul
celulei bacteriene. Exist:
 transducie restrictiv (transducie specializat) fagul
transductor transfer un numr mic de gene aflate n imediata apropiere a situsului
de legare a profagului n cromozomul bacterian;
 transducie nerestrictiv (transducie generalizat)
oricare din genele cromozomului, indiferent de poziia lor, pot fi ncorporate
accidental n structura fagului matur care le poate transmite altor bacterii acceptoare.
Acest tip de transducie poate fi realizat de un numr mare de fagi neintegrai n
cromozomul bacterian atunci cnd intr n ciclul litic.
VII.4.2.2.3. conjugarea
Este procesul de transfer al materialului genetic cromozomial sau
extracromozomial prin intermediul unei legturi intercelulare numit pil de conjugare
sau punte de legtur. Acest pil este codificat de factorul F care trebuie s fie
prezent n celula bacterian donatoare. Alt condiie necesar pentru procesul de
conjugare este aceea ca att bacteria donoare ct i cea receptoare s posede
receptori de suprafa care s permit recunoaterea reciproc. Dup un numr de
ciocniri ntmpltoare, bacteriile F+ i F- formeaz perechi de recombinare ntre ele
formndu-se un canal de conjugare. Prin acest canal se transfer material genetic de
la celula mascul la celula femel. Materialul transferat poate fi apoi integrat parial
sau total n genomul celulei receptoare conferind acesteia noi caractere care se pot
sau nu manifesta.

43

Capitolul VIII

RELAIILE MICROORGANISM GAZD

VIII.1. DEFINIII
Aderen (ataare, adeziune) procesul prin care bacteria se leag de
suprafaa celulei int. Este principalul pas n iniierea procesului infecios.
Diseminare (invazie) procesul prin care microorganismul se rspndete de
la poarta de intrare n tot organismul.
Infecie multiplicarea unui agent infecios patogen n interiorul organismului,
chiar dac este nensoit de manifestri clinice de boal.
Microorganism nepatogen microrganism care face parte din flora normal,
care nu produce mbolnvire.
Microorganism patogen microorganism care ntotdeauna cauzeaz boal.
Microorganism potenial patogen (oportunist) microorganism capabil s
cauzeze mbolnvire doar atunci cnd este afectat sistemul de aprare al
macroorganismului.
Microorganism saprofit bacterii care triesc n natur, se stabilesc rar n
organism, au importan redus ca factori patogeni.
Patogenitate capacitatea unui microorganism de a a cauza boal prin
virulen sau toxigenitate.
Purttor asimptomatic persoan care adpostete microorganismul fr a
prezenta semne clinice de boal, care poate transmite microorganismul celor din jur.

44

VIII.2. PATOGENEZA INFECIEI BACTERIENE


Patogeneza infeciei bacteriene include iniierea procesului infecios i
mecanismele care duc la instalarea semnelor i simptomelor bolii infecioase.
Rezultatul interaciunii dintre bacterie i gazd depinde de capacitatea
microorganismului de a se stabili n macroorganism i de a cauza leziuni n ciuda
mecansimelor de aprare ale acestuia. Bacteria acioneaz prin capacitatea de
aderare la substratul specific, prin invazivitate, toxigenitate, abilitate de a se sustrage
rspunsului imun. Dac bacteria sau reaciile imune lezeaz suficient
macroorganismul apare boala infecioas manifest clinic.
VIII.2.1. AGENT ETIOLOGIC
Numim agent etiologic al unei infecii/boli acel microorganism care cauzeaz
boala.
Tegumentul, mucoasele, niele, cavitile organismului uman sunt populate cu
o flor microbian normal, abundent, care nu cauzeaz mbolnvire ci uneori
chiar aduce beneficii gazdei.
Alteori bacterii patogene sunt prezente n organism dar infecia rmne latent
sau subclinic, gazda fiind purttor asimptomatic de germen (Salmonella thyphi n
vezica biliar).
Este deci greu de apreciat c un anumit microorganism este responsabil de
apariia unei anumite boli infecioase.
n 1884 Robert Koch emitea postulatele sale conform crora un
microorganism poate fi considerat agent etiologic al bolii dac:
1. microorganismul este identificat la toate persoanele care manifest
boala respectiv i diseminarea lui n organism concord cu leziunile observate;
2. microorganismul poate fi cultivat in vitro;
3. cultura pur a microorganismului izolat, inoculat la animal
susceptibil reproduce boala;
4. microorganismul poate fi reizolat din leziunile aprute la animalul de
laborator.
Postulatele sunt i azi valabile cu adugirile corespunztoare descoperirilor
actuale din microbiologie. Astfel exist microorganisme care nu ndeplinesc
postulatele lui Koch i totui sunt ageni etiologici ai unor boli. Treponema pallidum,
agentul cauzal al sifilisului sau Mycobacterium leprae, agetul cauzal al leprei, nu pot
fi cultivai pe medii de cultur, Neisseria gonorrhoeae nu este patogen pentru
animal de laborator.
Ca anex a postulatelor se poate meniona rspunsul imun al gazdei prin
producere de anticorpi specifici. Astfel un criteriu important de diagnostic etiologic,
astzi, este creterea titrului de anticorpi specifici pe parcursul sau n convalescena
unor boli infecioase.
Genetica molecular a permis astzi studiul aprofundat al microorganismelor
i identificarea genelor care codific factorii de patogenitate ai unei tulpini bacteriene.
Rezultatele obinute au fost sintetizate de Falkow, n 1988, n aa-numitele
postulate moleculare ale lui Koch:
1. fenotipul sau caracteristicile investigate trebuie s fie asociate
tulpinilor patogene;

45

2. inactivarea specific a genelor codificante ale fenotipului patogen


trebuie s duc la scderea msurabil a patogenitii sau virulenei
microorganismului;
3. revenirea sau renlocuirea genelor mutante trebuie s restabileasc
patogenitatea tulpinii.
Analiza infeciei sau a bolii infecioase n concordan cu postulatele lui Koch
mparte microorganismele n patogene i nepatogene.
Unele specii bacteriene sunt considerate ca patogene prezena lor n
macoorganism fiind considerat anormal: M.tuberculosis, N.gonorrhoeae,
Treponema pallidum etc.
Alte specii fac parte din flora care populeaz biotopurile macroorganismului
alctuind aa-numita flor normal. Dintre componenii acesteia, unele specii pot,
n anumite condiii s cauzeze mbolnviri : E.coli, Klebsiella etc., germeni numii
condiionat patogeni sau germeni oportuniti.
VIII.2.2. PROCESUL INFECIOS
a. ptrunderea
Pentru a iniia infecia bacteria trebuie s ptrund n macroorganism i s se
stabileasc acolo. Poarta de intrare, cel mai frecvent, este tractul respirator, gastrointestinal, genito-urinar. Bacteriile mai pot ptrunde n organism prin tegumente i
mucoase lezate (mai rar prin cele intacte). Microorganismul patogen poate utiliza una
sau mai multe ci pentru a ptrunde, a se instala i a se multiplica n organismul
gazd.
b. aderarea la substratul specific
Dup ce au abordat poarta de intrare bacteriile trebuie s adere de substratul
specific, cel mai adesea de o celul epitelial. Aderarea este etapa obligatorie,
indispensabil iniierii procesului infecios. Dac bacteriile nu ader de suprafaa
celulei sau a esutului ele pot fi ndeprtate de mucus sau de alte fluide care spal
suprafaa esutului. Procesul de aderare este un proces complex n care au rol
important hidrofobicitatea i ncrctura electric a suprafeelor, prezena unor
molecule de legare specifice pe suprafaa bacteriei, existena receptorilor specifici pe
suprafaa celulei int.
c. multiplicarea bacterian
Dup localizarea bacteriei n focarul primar de infecie ncepe multiplicarea
bacterian i diseminarea germenilor n organism.
d. diseminarea
Rspndirea (diseminarea) bacteriilor n organism poate avea loc direct prin
esut (extindere local n suprafa, extindere n profunzime, extindere regional) sau
prin torentul sanguin.
Prezena bacteriilor tranzitoriu n snge, ca modalitate de diseminare a lor n
toate esuturile i organele sensibile la infecia cu bacteria respectiv, se numete
bacteriemie.
Prezena permanent a bacteriilor n torentul sanguin unde se vars
ncontinuu din focare septice primare i/sau secundare, nsoit de manifestri clinice
caracteristice se numete septicemie.

46

e. eliminare
Microorganismul poate fi eliminat din organismul infectat pe tot parcursul bolii
sau doar n anumite etape de evoluie ale bolii prin intermediul excreiilor i secreiilor
eliminate de pacient: materii fecale, urin, sput, puroi etc.
Procesul
infecios
are
trei
macroorganismul, mediul nconjurtor.

verigi

principale:

microorganismul,

VIII.2.2.1. Microorganismul - Factori de patogenitate ai bacteriilor


Patogenitatea este capacitatea unui microorganism de a declana n
organismul gazd fenomene morbide, patogene: modificri locale, modificri
generale, lezri ale unor funcii. Patogenitatea este un caracter de specie i este
determinat genetic. Microorganismele pot fi patogene prin virulen i / sau
toxigenitate.
VIII.2.2.1.1. VIRULENA
Reprezint gradul diferit de patogenitate al tulpinii microbiene agresoare i nu
al ntregii specii bacteriene i depinde de condiiile n care triete germenul.
Virulena poate fi cuantificat prin numrul de microorganisme necesare n condiii
standard pentru a cauza moartea a 50% dintr-un lot de animale de laborator (doza
letal 50%; DL50).
Factorii care condiioneaz virulena unei tulpini bacteriene sunt multiplicarea
i invazivitatea.
Germenii patogeni se multiplic la poarta de intrare i invadeaz organismul
prin propagare din aproape n aproape sau trecnd n circulaia sanguin caz n care
apar infecii la distan. Pentru a se putea realiza aceste evenimente bacteria trebuie
s adere de substratul specific i s reziste la reaciile de aprare nespecifice a
gazdei. Pentru aceasta bacteriile au dezvoltat o serie de factori somatici i factori
solubili care permit multiplicarea i invazivitatea germenilor.
-

factorii somatici bacterieni care asigur virulena bacteriei:


pili (fimbrii) de adeziune;
lectine proteine cu tropism pentru carbohidrai;
liganzi molecule care realizeaz legturi specifice cu molecule
complementare de la nivelul substratului;
glicocalix;
slime mediu vscos peribacterian care mediaz ataarea
nespecific a bacteriilor;
capsula rol antifagocitar, uneori rol n aderare
antigenul Vi de suprafa al unor bacili Gram negativi etc.

factori solubili bacterieni care asigur virulena bacteriei:


coagulaza liber sau legat la S.aureus;
leucocidina produs de S.aureus dup ce a fost fagocitat;
catalaza inhib sau inactiveaz radicalii activi de oxigen;
enzime litice:

47

colagenaza, fibrinolizina, hialuronidaza stafilococ,


streptococ
 hemolizine;
 lecitinaza clostridii;
 proteaze, DN-aze, RN-aze, lipaze etc.;
substane care inhib sau modific rspunsul imun:
 endotoxina crete sinteza de interleukin 1;
 IgA proteaza meningococ, gonococ;
 proteina A stafilococ; inhib opsonizarea;
 producerea superantigenelor S.aureus; molecule care pot
activa independent limfocitele T ceea ce poate determina att
anergie ct i hiperactivarea sistemului imun.

VIII.2.2.1.2. TOXIGENEZA
Germenii se multiplic la poarta de intrare unde elaboreaz toxine care produc
alterri celulare i tisulare la distan. Bacteriile produc 2 categorii de toxine: toxine
proteice (exotoxine) i toxine lipopolizaharidice (endotoxine).
Exotoxinele sunt produse fie de bacili Gram pozitivi, codificate de gene ale
profagilor (toxina difteric, toxina botulinic) sau codificate plasmidic (toxina tetanic,
toxina crbunoas). fie de bacili Gram negativi, codificate de gene cromozomale
(V.cholerae, Shigella dysenteriae tip 1, P.aeruginosa) sau plasmidic (unele tulpini de
E.coli). Exotoxinele pot fi citotoxine sau toxine A-B
Citotoxinele acioneaz asupra membranei celulelor eucariote.
Toxinele A-B sunt formate din 2 pri: polipeptidul A (active) (enzim, ADPriboziltransferaza) i una sau mai multe polipeptide B (bind) cu rol de liganzi.
Exotoxina se leag de receptorul specific celular, prin pinocitoz. Poriunea A ajunge
n citoplasm unde va ataca o anumit int molecular ceea ce face ca fiecare
exotoxin s aib aciune specific. Exotoxinele A-B au urmtoarele caracteristici:
- se desprind uor de bacteriile care le produc, difuznd n mediul
nconjurtor;
- pot fi obinute pe medii de cultur, pot fi separate prin filtrare;
- sunt proteine cu greutate molecular mare;
- sunt termolabile (excepie enterotoxinele) i sunt descompuse de enzimele
proteolitice;
- sunt antigene complete, puternice, anticorpii specifici formai fa de
exotoxine numindu-se antitoxine. Pentru c doza toxic este mai mic dect cea
imunogen, animalul de laborator moare intoxicat fr s produc anticorpi iar
pacientul care supravieuiete dup tetanos sau botulism rmne receptiv pentru c
nu se imunizeaz. Antitoxinele se formeaz n urma vaccinrii;
- pot fi transformate n anatoxine (toxoizi), netoxice, puternic antigenice,
sub aciunea concomitent a cldurii i a formolului. Se utilizeaz n profilaxia bolilor
produse de germenii respectivi i pentru hiperimunizarea animalelor de laborator n
scopul obinerii de seruri antitoxice. Anticorpii (antitoxine) aprui dup vaccinare cu
anatoxin neutralizeaz activitatea toxic prin cuplare specific cu toxina;
- au toxicitate foarte mare (DLM de ordinul ng/kg corp);
- efectul lor se instaleaz dup o perioad de incubaie;

48

- au efect specific, simptomele declanate fiind specifice pentru fiecare


toxin n parte. Specificitatea toxinelor A-B are dubl condiionare: specificitatea
exotoxinei pentru receptorul celular i specificitatea intei pentru ADP-riboz.
Endotoxinele sunt produse de bacterii Gram negative, codificate
cromozomal. Endotoxinele au urmtoarele caracteristici:
- sunt localizate pe membrana extern a bacteriilor Gram negative i sunt
eliberate dup liza acestora;
- nu pot fi obinute pe medii de cultur;
- sunt lipopolizaharide n compoziia lor fiind inclui acizi grai, un lipid A i
lanuri de polizaharide;
- sunt termostabile i nu sunt descompuse de enzimele proteolitice;
- sunt imunogene n anumite condiii dar anticorpii nu le neutralizeaz
complet efectele;
- nu pot fi transformate n anatoxine;
- au toxicitate moderat (DLM de ordinul g/kg corp);
- efectul lor se instaleaz imediat ce sunt eliberate;
- nu au efect specific, simptomele declanate fiind aceleai indiferent de
bacteria care le produce. Acioneaz prin stimularea eliberrii de citokine din
macrofage (interleukina 1, 6, 8). Citokinele mpreun cu factorul de necroz a
tumorilor i cu factorul de activare a plachetelor stimuleaz producerea de
prostaglandine i leucotriene. n funcie de cantitatea de endotoxine eliberat
pacientul va prezenta febr, leucopenie urmat de leucocitoz, hiperglicemie urmat
de hipoglicemie, diaree hemoragic secundar efectelor endotoxinei asupra
plachetelor saunguine i complementului. Dozele mari eliberate brusc n circulaie
determin colaps cardio-vascular cu coagulare intravascular diseminat simptome
care caracterizeaz ocul endotoxinic.
VIII.2.2.2. Macroorganismul - Factori de aprare ai gazdei
Organismul ncearc pe ci nespecifice sau specifice s-i mein
homeostazia, mpiedicnd aderarea microorganismelor de celulele sau esuturile
expuse, mpiedicnd colonizarea acestora, multiplicarea i diseminarea bacterian.
VIII.2.2.2.1. APRAREA NESPECIFIC
Mecanismele de aprare nespecific, nnscut s-au dezvoltat filogenetic i
sunt asigurate de factori constituionali cu care se nasc toi indivizii. Factorii
rezistenei nespecifice sunt:
A. bariere i mecanisme nespecifice externe:
 bariere tegumentare
Tegumentul este cea mai eficient barier mecanic i n acelai timp
ecologic i chimic prin:
- integritatea sa microorganismele nu ptrund prin tegumentul intact
(excepie leptospira);
- exfoliere - sunt ndeprtate microorganismele superficiale;
- microbiota rezident a tegumentului dominat de bacterii Gram pozitive
care produc lipoliza sebumului;
- pH-ul uor acid datorat lipolizei sebumului.
49

 bariere mucoase
Barierele mucoase sunt mai complexe dar mai puin eficiente dect
tegumentul. Prin mucoase pot ptrunde un numr destul de mare de bacterii n
organism. Barierele mucoase acioneaz ca:
- bariere mecanice prin epiteliile pavimentoase stratificate i variate epitelii
secretoare; prin secreiile care spal suprafeele;
- bariera glicoproteic mucusul care mpiedic aderarea bacteriilor de
substratul specific;
- bariera chimic prin secreiile care conin lactoferin i lizozim;
- bariera ecologic prin microbiota mucoaselor.
B. bariere i mecanisme nespecifice interne:
 bariere mecanice
Sunt reprezentate de esutul conjunctiv dens care poate fi depit relativ uor
de bacteriile care elibereaz colagenaze.
 bariera chimic
Este reprezentat de interferoni, de reactivii de faz acut i de sistemul
complement.

INTERFERONII
Sunt proteine cu greutate molecular mic, elaborate de celula infectat cu
virus, proteine care protejeaz de infecia viral celulele neinfectate (fig. 17).
Interferonii au aciune antiviral indirect:
- Interferonii eliberai de celula productoare se fixeaz pe receptorii
celulelor adiacente neinfectate. Ei induc sinteza unor proteine i enzime celulare care
blocheaz replicarea viral;
- Au aciune antiproliferativ prelungind timpul de generaie al celulelor
normale i tumorale;
- Interferonii care sunt citokine au i activitate de modulare a rspunsului
imun. Activeaz funciile citotoxice ale macrofagelor, celulelor NK i limfocitelor T
citotoxice. Intensific exprimarea unor antigene virale pe membrana citoplasmatic
favoriznd recunoaterea celulei int de ctre limfocitele T citotoxice.
Interferonii sunt produi de celulele tuturor vertebratelor. n mod normal
celulele nu produc interferoni dect atunci cnd sunt stimulate. Infecia viral este
inductoare de interferon, virusurile ARN fiind inductori mai puternici fa de virusurile
cu genom ADN. Producerea de interferon poate fi indus de asemenea de
stimularea mitogen sau de endotoxinele bacteriene.
Interferonii sunt activi numai fa de specia productoare (specificitate de
gazd) dar activitatea lor nu este virus specific. Ei inhib nu numai replicarea
virusului inductor ci i replicarea unei varieti de virusuri.
Interferonii sunt extrem de activi. Se estimeaz c sunt suficiente sub 50 de
molecule de interferon fixate per celul pentru a induce un status antiviral.
Mecanismul de aciune al interferonilor este puin cunoscut. Celula originar
infectat nu este protejat de interferonul pe care l produce.
Intervenia interferonului are rolul de a ntrzia replicarea viral i
generalizarea infeciei, permind dezvoltarea rspunsului imun. Producerea de
50

interferon este prima linie de aprare nespecific antiviral pentru c apare ntr-un
interval mai mic de 48 de ore de la infecie (ncepe la 4-5 ore de la infecie, atinge
nivel maxim la 20-50 ore dup care se oprete) determinnd scderea cantitii de
virus infectant nc nainte de apariia anticorpilor specifici (fig. 20). De asemenea
interferonul este activ i la persoanele cu agammaglobulinemie.
Fig. 20. Cinetica sintezei de interferon i anticorpi dup infecie viral
respiratorie (dup Stringfellow D. A.)

microorganism

Dup celulele care i sintetizeaz se cunosc interferoni , , a cror


caracteristici sunt redate n urmtorul tabel (tabel I ).
Tratamentul cu interferon s-a dovedit util n infecii virale severe: turbare, febr
hemoragic, encefalit herpetic, i n unele infecii virale persistente ca hepatita
cronic activ B, hepatita C, herpes-zoster.
Interferonul este util i n unele neoplazii umane: cancer renal, sarcom Kapoi
asociat cu SIDA, mielom, leucemie mieloid cronic etc.
Prin inginerie genetic, genele codante pentru interferoni , , din celulele
umane au fost clonate individual la E.coli i la levuri. Astfel n culturile acestora se
produc cantiti mari de interferon uman la preuri accesibile.
Tabel I. Caracteristicile interferonilor umani
Caracteristici

Produs de

leucocite

Numr gene
codante
Ageni inductori

20 gene de pe
cromozomul 9
virus, ARN dc,
endotoxina
stabil

Stabilitate la pH
2,0
Receptori celulari
pt. interferon

Tip de interferon

fibroblati
limfocite T (CD4,CD8),
macrofage, celule NK
1 gen de pe
1 gen de pe cromozomul 12
cromozomul 9
virus
lectin, mitogeni, stimulare cu
Ag
stabil
labil

Proteine de membran, comune pt IFN


, , codai de gene de pe cromozomul
21

Proteine de membran,
distincte pt IFN , codate de
gene de pe cromozomul 6 i
21

51

REACTIVI DE FAZ ACUT: Organismul supus unei agresiuni reacioneaz


prin sinteza i secreia crescut a unor proteine plasmatice: inhibitori de proteaze,
proteine ale sistemului complement
i ale coagulrii, proteina C reactiv,
protrombina, fibrinogenul, etc. Acestea mresc rezistena gazdei, limiteaz leziunile
tisulare i favorizeaz vindecarea.
SISTEMUL COMPLEMENT: constituent normal al plasmei i serului
mamiferelor, activat pe cale alternativ are un important rol antibacterian.


bariera celular

Asigur aprarea antibacterian prin fagocitoz i pinocitoz, include


sistemele fagocitare circulante: granulocitar i reticulo-endotelial. Sistemul fagocitar
constituie unul din mecanismele de baz ale aprrii organismului fa de infecie
prin fagocitoz. Fagocitele sunt de dou feluri: polimorfonucleare neutrofile
(microfage) prezente n snge i fagocite mononucleare (macrofage). Important
este aciunea celulelor natural killer NK ce au aciune citotoxic natural asupra
celulelor infectate cu virus i asupra celulelor tumorale.
Inflamaia acut instalat ca rspuns la la agresiunea bacterian reunete n
focarul infecios mediatorii inflamaiei (efectori ai complementului, factori vaso-activi,
factori chemotactici) care induc reacii vasculare i tisulare locale manifeste clinic prin
rubor, tumor, calor, dolor i functio lesa.
VIII.2.2.2.2. APRAREA SPECIFIC (IMUNITATEA)
S-a dezvoltat ontogenetic pe baza unei experiene antigenice individuale fiind
realizat prin efectori specifici anticorpii i limfocitele T specific sensibilizate.
Dup modul de apariie imunitatea se clasific n imunitate natural i
artificial care la rndul lor pot fi:
- imunitate natural dobndit pasiv prin transferul anticorpilor materni
transplacentar la ft (IgG) sau prin colostru (IgA);
- imunitate natural dobndit activ prin elaborare de anticorpi n cursul
infeciei naturale, la gazde imunocompetente;
- imunitate artificial dobndit pasiv prin inocularea de seruri imune specifice
n cadrul seroterapiei sau seroprofilaxiei bolilor infecto-contagioase;
- imunitate artificial dobndit activ prin sinteza de anticorpi n urma
administrrii de vaccinuri.
Imunitatea pasiv se instaleaz rapid dar este de scurt durat, anticorpii
tranferai fiind repede catabolizai.
Imunitatea activ se instaleaz relativ lent (zile, sptmni) pentru c
formarea de anticorpi presupune diferenieri i diviziuni celulare, dar este de durat.
Sistemul imunitar recunoate entitile strine (antigenele) dup
caracteristicile lor moleculare prin macromolecule libere (anticorpi) sau fixate pe
suprafaa unor celule (receptori pentru antigen).

52

Poriunea antigenului de care se leag anticorpul se numete grupare


determinant sau epitop. Anticorpul posed situs de combinare numit i paratop
sau receptor pentru antigen, complementar epitopului.
Rspunsul imun este asigurat de un sistem celular i unul umoral.
Sistemul celular asigur protecie fa de fungi, parazii, virusuri, bacterii
intracelulare. Este deservit de celule aparinnd sistemului limfoid: limfocite T care
posed receptori pentru antigen. Celulele T dau natere la celule efectoare cu funcii
diferite:
- limfocite T citotoxice elimin direct celulele strine;
- limfocite TD responsabile pentru hipersensibilitatea ntrziat;
- limfocite T ajuttoare ajut la diferenierea n plasmocite a
limfocitelor B;
- limfocite T supresoare elimin rspunsul imun;
- limfocite T amplificatoare determin diferenierea limfocitelor T n
limfocite T citotoxice.
Sistemul umoral asigur protecie fa de infeciile virale i bacteriene
extracelulare. Este deservit de componente prezente n snge i umori: limfocite B
care prin receptorii pentru antigen reunosc non-self-ul, se difereniaz n plasmocite
i iniiaz rspunsuri imune bazate pe elaborarea de anticorpi.
n afara celulelor efectoare B i T, primul contact cu antigenul determin
apariia celulelor cu memorie B i T. Acestea din urm au via lung (ani) i la
rentlnirea cu antigenul prolifereaz producnd rapid un numr mare de celule
efectoare B i T.
n afar de limfocite sistemul imun posed celule accesorii care au
capacitatea de a acumula substanele strine i de a le prezenta limfocitelor
(macrofage, monocite), de a ndeprta elementele strine atacate de sistemul imun
(polimorfonucleare) i de a media schimbri fiziologice (bazofile, mastocite).
ANTIGENE
Antigen este orice substan de natur endogen sau exogen capabil s
declaneze un rspuns imun mediat celular i / sau umoral. Antigenul are dou
proprieti:
- imunogenitate capacitatea de a provoca apariia anticorpilor sau a
celulelor antigen-reactive efectoare;
- specificitate capacitatea de a reaciona specific cu anticorpul sau cu
receptorul pentru antigen, complementar.
Un antigen este alctuit din dou componente:
- purttor (carrier) grupare care poart epitopul;
- grupare determinant (epitop) care reacioneaz cu anticorpul.
Gruprile determinante sunt structuri chimice cu dimensiuni moleculare mici i
se pot ataa artificial la o molecul purttor. Se numesc haptene. Haptenele au
specificitate dar nu au imunogenitate, cu alte cuvinte haptena este o molecul care
nu poate declana rspuns imun singur ci doar cnd este asociat cu o protein
purttor.
53

Numrul determinanilor antigenici este variabil aflndu-se n relaie de direct


proporionalitate cu greutatea molecular i volumul antigenului.
Orice modificare n structura gruprii determinante (chiar i schimbarea
orientrii) atrage dup sine modificarea specificitii.
Antigenele se pot clasifica n trei categorii:
- antigene sintetice formate din polipeptide obinute prin sintez;
- antigene artificiale haptene legate de macromolecule purttoare;
- antigene naturale produse de celule, reprezentate de proteine,
polizaharide, acizi nucleici, alte macromolecule etc. Multe antigene sunt componente
ale structurilor de nveli ale microorganismelor: capsula, lipopolizaharidul din
peretele bacteriilor Gram negative, glicoproteinele specifice ale membranei celulare
etc.

ANTICORPI
Sunt efectorii moleculari principali ai sistemului imun umoral. Sunt acele
globuline specifice produse de organismul uman sau animal n urma stimulului unui
antigen. Au capacitatea de a recunoate i de a reaciona specific cu antigenul
respectiv.
Din punct de vedere chimic sunt -globuline care datorit provenienei i
funciei pe care o ndeplinesc sunt numite imunoglobuline (Ig). Exist 5 clase de Ig:
IgG, IgM, IgA, IgE, IgD. Se gsesc n concentraii mari n ser dar n general sunt
prezente i n saliv, lacrimi, lapte matern. n lichidul cefalo-rahidian i n urin sunt
prezente n cantiti mici.
n afara funciei de recunoatere a antigenului, anticorpii mai au o funcie
important: aceea de fixare a complementului atunci cnd fac parte din complexe
antigen-anticorp.

COMPLEMENTUL
Complementul, prezent n sngele tuturor vertebratelor este un complex
alctuit din 15 proteine plasmatice care este activat de complexul antigen-anticorp
determinnd anihilarea sau distrugerea antigenului (hemoliza, bacterioliza, citoliza
etc.).
La primul contact al organismului gazd cu antigenul se instaleaz rspunsul
imun primar n care IgM apar primele i predomin cantitativ.
Dinamica rspunsului imun primar este:
- perioad de laten 5-7 zile, uneori 2 sptmni n care nu se pot
evidenia anticorpi;
- perioad de cretere treptat a titrului de anticorpi, atingnd nivelul
maxim n 9-15 zile;
- perioad staionar de scurt durat n care cantitatea de anticorpi
se menine nemodificat;
- scdere rapid a cantitii de anticorpi pn la valori foarte joase (fig.
19).
La repetarea expunerii la antigen are loc rspunsul imun secundar. Celulele
cu memorie i comuteaz sinteza anticorpilor n clasa IgG care devine
predominant. Faza de inducie este mai scurt (2-3 zile), titrul anticorpilor (mai ales
54

IgG i IgA) crete rapid (4-6 zile) i la un nivel mult mai ridicat, persistnd timp mai
ndelungat dect n rspunsul imun primar. Descreterea se produce lent putndu-se
detecta anticorpi i dup luni sau ani de zile. n rspunsul secundar apar IgM dar
predomin net cantitativ IgG.

Fig. 19. Rspuns imun primar i secundar (dup Ivanof)

MECANISMELE IMUNITII ANTIMICROBIENE


1. Bariera imun a mucoaselor
Este reprezentat de anticorpi tip IgA care formeaz un strat la interfaa
mucus-fluid luminal. Aceti anticorpi secretori fixeaz i neutralizeaz toxinele
microbiene precum i liganzii microbieni pentru receptorii epiteliali, mpiedicnd
aderarea antigenului de substratul specific. n acest fel microorganismele rmase la
suprafaa mucusului sunt distruse de enzime, de factori chimici sau de alte
mecanisme de aprare ale fiecrei mucoase.
Anticorpii de tip IgA se afl n saliv, lacrimi, mucoasa nazal, bronic,
intestinal etc., constituind un factor primordial n aprarea local.
2. Bariera imun a corionului mucoaselor i a dermului
Este reprezentat de sistemul IgE-mastocit. Aceast barier de aprare
caracterizat prin creterea nivelului de IgE (reagine) i prin acumularea mastocitelor
n corion i derm, este eficient fa de helminii care penetreaz mucoasele, fa de
cpue i fa de arahnite parazite. IgE produse n urma unui stimul antigenic se
leag de suprafaa unor celule mastocite, bazofile. Cu ocazia unei a doua
ptrunderi n organism a aceluiai antigen, el se va fixa de IgE legate de mastocite
care se degranuleaz. Sunt eliberate astfel histamine i o serie de mediatori care:
- cresc permeabilitatea vascular favoriznd accesul componentelor
plasmatice i celulare n focar;
- determin contracie intestinal favoriznd eliminarea parazitului;
- declaneaz pruritul, prin grataj parazitul fiind dislocat i ndeprtat
(scabie).
3. Bariera imun a mediului intern i a esuturilor
55

Este realizat prin:


a) Reacii de neutralizare controlate de anticorpi tip IgG1 care sunt specifici
rspunsului imun secundar i care pot traversa placenta. n aceste reacii antigenul
este reprezentat de toxine, produi extracelulari netoxici ai bacteriilor (hemolizine,
hialuronidaze etc.), virusuri.
b) Reacii de opsonizare, adic de acoperire cu anticorpi i / sau
complement pentru a fi fagocitate. Ca opsonine acioneaz n primul rnd IgG active,
n absena complementului. Anticorpii de tip IgM sunt opsonizani doar prin
capacitatea de a activa complementul.
Unele componente bacteriene de suprafa (lipopolizaharidul bacteriilor Gram
negative, acizii teichoici i peptidoglicanul bacteriilor Gram pozitive) pot determina
legarea i clivarea complementului n absena anticorpilor (pe cale alternativ),
opsonizarea realizndu-se numai prin C3.
c) Reacii bacteriolitice i citolitice controlate de anticorpii umorali au la
baz formarea complexului imun elementar. Pentru realizarea acestuia este
necesar unirea poziiilor de combinare ale anticorpului cu gruprile determinante ale
antigenului. Formarea complexului are loc la suprafaa moleculelor care nu se
distrug, deci viabilitatea bacteriilor nu este afectat. Legtura este reversibil, cele 2
molecule pstrndu-i proprietile iniiale dup separare.
Complexul imun elementar activeaz complementul care se fixeaz de acest
complex. n urma fixrii complementului antigenul este distrus: bacterioliz, viroliz,
citoliz etc.
n reaciile litice anticorpii de tip IgM sunt mult mai eficieni dect cei IgG.
d) Mecanismele imunitii celulare antibacteriene sunt eficiente n infeciile
cauzate de bacterii facultativ sau obligat intracelulare. Limfocitele T activate,
principalii efectori ai imunitii mediate celular, acioneaz prin intermediul
limfokinelor:
- factorul chemotactic realizeaz acumularea celulelor fagocitare la
nivelul focarului infecios;
- factorul de imobilizare i activare a macrofagelor menine
concentraia crescut de fagocite n focarul infecios i le activeaz;
- factorul mitogen sensibilizeaz i determin diferenierea limfocitelor
T i B acumulate n focarul infecios.

56

Capitolul IX

INFECIE I BOAL INFECIOAS

IX.1. DEFINIII
Infecie interaciunea dintre organismul gazd i microorganismul (bacterii,
fungi, protozoare, helmini, virusuri) care a depit barierele antimicrobiene primare;
Infecie inaparent interrelaia se rezum la rspunsul imun, agentul
infecios determin leziuni minime care nu perturb homeostazia organismului
gazd;
Boal infecioas interrelaia organism gazd-microorganism are ca urmare
leziuni importante cauzatoare de perturbri ale homeostaziei manifestate prin
simptome i semne de suferin.

IX.2. INFECIA
Dup proveniena agentului infecios infeciile pot fi:
- endogene determinate de microorganisme ale microbiotei proprii;
- exogene determinate de microorganisme provenite de la un rezervor de
infecie care a strbtut o cale de transmitere i a gsit o gazd receptiv.
Rezervorul de infecie este organismul care adpostete agentul infecios
asigurnd supravieuirea i/sau nmulirea acestuia. Rezervor de infecie poate fi:
- omul
o cu boli infecioase acute sau cronice;
o purttor asimptomatic de germeni patogeni.
- animalul domestic sau slbatic, bolnav sau purttor de germeni;
- mediul nconjurtor: apa (vibrioni, pseudomonade), solul (bacil tetanic,
pseudomonade), alimente (salmonella).
Transmiterea agentului infecios presupune existena unor etape:
- eliminarea agentului infecios din rezervor, eliminare realizat pe diferite ci
n funcie de natura microorganismului, prin secreii, excrete, exsudate, scuame etc;
- contaminarea elementelor de mediu care devin suporturi materiale ale
transmiterii. Modalitile de transmitere ale agentului infecios pot fi: directe (contact
sexual, srut, transplacentar, intrapartum) sau indirecte prin aer, ap, sol, mn

57

murdar, alimente, mute, roztoare, vectori biologici (nari, cpue, purici,


pduchi).
- poarta de intrare care difer n raport cu natura agentului infecios
Gazda receptiv este omul normoreactiv sau cu deficiene ale mecanismelor
de aprare.
O dat ptruns n organismul gazd, agentul infecios caut s se adapteze,
s gseasc esutul sau organul care s-i asigure condiii optime de dezvoltare. n
funcie de modul diseminrii microorganismului de la poarta de intrare n organismul
gazd avem:
1. infecie de suprafa determinat de ageni infecioi care se multiplic n
vecintatea porii de intrare. Din acest punct de vedere se definesc:
a. infecii localizate cnd microorganismul rmne cantonat la poarta de
intrare;
b. infecii care difuzeaz prin continuitate n suprafaa sau n
profunzimea dermului / corionului mucoaselor;
2. diseminare pe cale limfatic agentul infecios antrenat n curentul limfatic
determin limfangit, adenit satelit uneori cu abcedare;
3. diseminare pe cale sanguin cnd prezena agentului infecios n snge
poate fi definit ca:
- bacteriemie prezena tranzitorie a microorganismului n snge nsoit de
frison i febr trectoare;
- septicemie prezena aproape permanent a microorganismului n snge,
provenit din focarul infecios primar ca i din focarele metastatice unde se replic n
permanen. Este particularizat prin simptome caracteristice.
4. diseminare pe cale nervoas ntlnit n tetanos, rabie, exotoxinele bacilului
tetanic i a celui rabic propagndu-se spre sistemul nervos central pe calea nervilor
periferici.

IX.3. BOALA INFECIOAS


Etapele bolii infecioase sunt:
1. Incubaia este perioada n care microorganismul se adapteaz, este
prezent n cantitate prea mic pentru a determina modificri majore. Nu sunt
prezente semne sau simptome de boal dei pacientul poate constitui surs de
infecie pentru cei din jur. Durata perioadei de incubaie depinde de virulena
microorganismului i de doza infectant. Poate fi scurt (cteva ore, cteva zile) sau
mai lung (sptmni sau chiar ani de zile).
2. Perioada de debut (de invazie) este perioada n care reacia de aprare
a gazdei este minim. Se caracterizeaz prin semne i simptome necaracteristice:
frisoane, febr, cefalee, astenie, inapeten etc., manifestri care apar brusc sau
insidios.
58

3. Perioada de stare n care se instaleaz semne i simptome caracteristice


diferitelor boli infecioase.
4. Perioada terminal n care boala infecioas se poate vindeca, croniciza
sau pacientul decedeaz.
Boala infecioas poate avea evoluie:
- sporadic numr redus de cazuri fr legtur ntre ele;
- endemic prezena constant ntr-o ar sau regiune a unei boli infecioase;
- epidemic creterea brusc a frecvenei unei boli infecioase, cu filiaie ntre
cazuri, ntr-un teritoriu;
- pandemic manifestare endemic la scar internaional.

Figuri amintite n text

59

60

61

62

Fig. 4. Structura peptidoglicanului la bacteriile


Gram pozitive (A) i Gram negative (B) (dup D. Buiuc, 2003)

Fig. 6. Structura molecular a membranei


plasmatice modelul mozaicului fluid (dup G.Zarnea 1983)

63

Fig. 5. Structura peretelui bacteriilor Gram


pozitive si Gram negative

64

Fig. 7. Bacterie cu cili i fimbrii (dup J. Carnahan, C.Brinton)

Fig. 8. Structura cilului i a fimbriei

(dup Ingraham J.L., Maale O., Neidhardt

F.C., 1983)

Fig. 9. Tipuri de bacterii ciliate


Atriche

Peritriche

Monotriche

Lofotriche

Amfitriche

Amfilofotriche

65

Fig. 10. Tipuri de bacterii sporulate


- Spor central, sferic, mai mic dect corpul bacterian

- Spor central, ovalar, mai mare dect corpul bacterian

- Spor subterminal, ovalar, mai mare dect corpul


bacterian

- Spor terminal, sferic, mai mare dect corpul bacterian

Fig. 15. Bacteriofagul: A-fag normal; B-fag prezentnd contracia


tecii cozii; C-constituieni ai particulei fagice (dup G.Zarnea, 1970)

66

Fig. 16. Factorul de rezisten (dup Watanabe)

Fig. 17. Modaliti i situsuri de aciune ale interferonilor

(dup

D.A.Stringfellow, 1980)

1.

celula

infectat
2. producere de
IFN
3.

eliberarea

IFN
4. aciune pe
alt celul
5.
proteine

sintez

de

antivirale

protective

67

Bibliografie selectiv
Buiuc D., Negu M.: Tratat de microbiologie clinic, Editura Medical, 1999
Buiuc D.: Microbiologie medical. Ghid pentru studiul i practica medicinei,
Ed. A VI-a, Editura Gr.T.Popa Iai, 2003
Popa M. I.: Microbiologie general i microbiologie special, Editura Concept
Publishing House, 1999

68

Cuprins

CAPITOLUL I....................................................................................................................................1
MICROBIOLOGIA DEFINIIE, OBIECT, SCOP ..................................................................................................... 2

CAPITOLUL II...................................................................................................................................4
ISTORICUL MICROBIOLOGIEI................................................................................................................................. 4

CAPITOLUL III..................................................................................................................................9
MORFOLOGIA CELULEI BACTERIENE .................................................................................................................. 9
III.1. COCII............................................................................................................................................................. 9
III.2. BACILII .......................................................................................................................................................... 9
III.3. FORMELE SPIRALATE .............................................................................................................................. 10
III. 4. DIMENSIUNEA BACTERIILOR.................................................................................................................. 10
III. 5. CLASIFICAREA BACTERIILOR................................................................................................................. 10

CAPITOLUL IV ...............................................................................................................................11
STRUCTURA CELULEI BACTERIENE................................................................................................................... 11
IV.1. ELEMENTE OBLIGATORII ALE CELULEI BACTERIENE ......................................................................... 12
IV.1.1. PERETELE BACTERIAN.................................................................................................................... 12
IV. 1. 2. MEMBRANA CITOPLASMATIC..................................................................................................... 14
IV.1.3. CITOPLASMA BACTERIAN............................................................................................................. 14
IV.1.4. MATERIALUL NUCLEAR ................................................................................................................... 15
IV.2. ELEMENTE FACULTATIVE ALE CELULEI BACTERIENE........................................................................ 15
IV.2.1. GLICOCALIXUL BACTERIAN ............................................................................................................ 15
IV.2.2. CILII SAU FLAGELII ........................................................................................................................... 15
IV.2.3. FIMBRIILE SAU PILII.......................................................................................................................... 16
IV.2.4. ENDOSPORUL BACTERIAN ............................................................................................................. 16

CAPITOLUL V ................................................................................................................................18
FIZIOLOGIA BACTERIAN..................................................................................................................................... 18
V.1. CONSTITUIA CHIMIC A BACTERIILOR................................................................................................. 18
V.2. NUTRIIA, METABOLISMUL I CRETEREA BACTERIAN ................................................................... 20
V.2.1. NUTRIIA BACTERIAN .................................................................................................................... 20
V.2.2. METABOLISMUL BACTERIAN ........................................................................................................... 23
V.2.3. CRETEREA I MULTIPLICAREA BACTERIILOR ............................................................................ 25
V.2.4. DINAMICA MULTIPLICRII BACTERIILOR........................................................................................ 28

CAPITOLUL VI ...............................................................................................................................30

69

ACIUNEA AGENILOR FIZICI, CHIMICI I BIOLOGICI ASUPRA BACTERIILOR ............................................ 30


VI.1. DEFINIII .................................................................................................................................................... 30
VI.2. EFECTE ANTIMICROBIENE ALE FACTORILOR FIZICI, CHIMICI, BIOLOGICI....................................... 30
VI.3. FACTORI CARE INFLUENEAZ EFECTUL ANTIMICROBIAN AL FACTORILOR FIZICI, CHIMICI,
BIOLOGICI.......................................................................................................................................................................... 30
VI.4. AGENI FIZICI............................................................................................................................................ 31
VI.5. AGENI CHIMICI ........................................................................................................................................ 33
VI.6. AGENI BIOLOGICI ................................................................................................................................... 36
VI.6.1. LANTIBIOTICE ................................................................................................................................... 36
VI.6.2. BACTERIOCINE ................................................................................................................................. 37
VI.6.3. BACTERIOFAGUL.............................................................................................................................. 37

CAPITOLUL VII ..............................................................................................................................39


GENETICA BACTERIAN....................................................................................................................................... 39
VII.1. DEFINIII ................................................................................................................................................... 39
VII.2. SUPORTUL EREDITII........................................................................................................................... 39
VII.3. ORGANIZAREA GENOMULUI BACTERIAN............................................................................................. 40
VII.3.1. PLASMIDELE .................................................................................................................................... 40
VII.3.2. ELEMENTE GENETICE TRANSPOZABILE ..................................................................................... 41
VII.4. MECANISMELE DE VARIABILITATE BACTERIAN................................................................................ 42
VII.4.1. VARIABILITATEA FENOTIPIC........................................................................................................ 42
VII.4.2. VARIABILITATEA GENOTIPIC ....................................................................................................... 42

CAPITOLUL VIII .............................................................................................................................44


RELAIILE MICROORGANISM GAZD.............................................................................................................. 44
VIII.1. DEFINIII .................................................................................................................................................. 44
VIII.2. PATOGENEZA INFECIEI BACTERIENE ............................................................................................... 45
VIII.2.1. AGENT ETIOLOGIC ......................................................................................................................... 45
VIII.2.2. PROCESUL INFECIOS .................................................................................................................. 46

CAPITOLUL IX ...............................................................................................................................57
INFECIE I BOAL INFECIOAS ...................................................................................................................... 57
IX.1. DEFINIII .................................................................................................................................................... 57
IX.2. INFECIA.................................................................................................................................................... 57
IX.3. BOALA INFECIOAS ............................................................................................................................... 58

FIGURI AMINTITE N TEXT...........................................................................................................59


BIBLIOGRAFIE SELECTIV.........................................................................................................68
CUPRINS ........................................................................................................................................69

70

S-ar putea să vă placă și