UNITATEA DE NVARE 1

EVOLUIA CELULELOR DE LA PROCARIOTE LA

EUCARIOTE

Cuvinte cheie: procariote, eucariote, autoreplicare, autoconservare

Rezumat
O etap important n evoluia celulei a avut loc acum cca. 1,5
miliarde de ani i a constat n tranziia de la formele celulare mici, cu o
structur intern relativ simpl, numite procariote i care includ variate tipuri
de bacterii i algele verzi-albastre, la celule mari, mai complexe, numite
eucariote, care exist astzi la animalele superioare i la plante. n aceast
unitate este prezentat, prin comparaie, morfofiziologia celulelor procariote
i eucariote.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 1 or

Biologia celular (din limba greac: bios = via; logos = vorbire; cytos
= celul) este o ramur a biologiei care studiaz structura, funciile i legile
de desfurare a proceselor vitale din celule, unitile morfofiziologice din
care sunt alctuite organismele vii.
Organizarea biologic reprezint o ierarhie de niveluri, de la molecule
simple, la ansambluri moleculare i structuri subcelulare, ierarhie n care
celula este nivelul la care apare capacitatea de autoreplicare i
autoconservare.
Celulele sunt produse ale materiei vii, mediul fizico-chimic n care se
desfoar fenomenle vieii i sunt constituentele organismelor mono-, sau
pluricelulare. Se gsesc n echilibru dinamic cu mediul extracelular n care se
afl, iar prin adezivitate i agregare formeaz esuturile organismelor.
Apariia vieii s-a realizat n miliarde de ani, prin treceri de la
anorganic, la organic fr via i apoi la organic cu via. Primele substane
organice au aprut prin coacervare, coacervatele fiind complexe formate din
proteine, alte molecule organice, care prin schimbul permanent cu mediul i
repetarea reaciilor chimice, dobndesc proprietatea de autorenoire,
caracteristic lumii vii.
O etap important n evoluia celulei a avut loc acum cca. 1,5
miliarde de ani i a constat n tranziia de la formele celulare mici, cu o
structur intern relativ simpl, numite procariote i care includ variate tipuri
de bacterii i algele verzi-albastre, la celule mari, mai complexe, numite
eucariote, care exist astzi la animalele superioare i la plante.

1
 Celulele procariote

Bacteriile sunt cele mai simple organisme existente n mediul natural.

Ele sunt celule sferice sau alungite, cu dimensiuni de civa microni.
Frecvent, prezint un nveli protector numit perete celular sau capsul
(bogat n lipopolizaharide sau lipoproteine, acid mureinic, diaminopimelic i
acizi teocoici), sub care se afl membrana plasmatic. Membrana nconjoar
un singur compartiment citoplasmatic care conine ADN, ARN, proteine i
molecule mici. ADN-ul bacterian este reprezentat de o molecul de ADN
helicoidal, dispus circular, nelegat de histone i formeaz un corp cromatic
compact, numit i nucleoid.
n microscopia electronic, citoplasma acestor celule are aspect de
matrice, relativ omogen, ncrcat numai cu ribozomi liberi i lipsit de
organite vacuolare.
Principalele caracteristici ale celulei procariote sunt:
- proliferarea (se nmulesc rapid);
- plasticitatea (se adapteaz rapid la condiiile de mediu).
Bacteriile sunt n mod normal haploide i se pot replica prin fisiune
binar. Diviziunea celular este precedat de replicarea semiconservativ a
materialului genetic, respectiv a macromoleculei de ADN. n timpul diviziunii
nu se difereniaz fusul de diviziune. n condiii de via optime, o celul
bacterian se poate divide o dat la 20 min. Capacitatea de diviziune rapid
a populaiilor bacteriene permite adaptarea lor rapid la modificrile din
mediul ambiant. De exemplu, n condiii de laborator, bacteriile pot suferi
mutaii spontane i selecie natural n ceea ce privete utilizarea diferitelor
surse nutritive.

Fig. 1. Fisiunea binar reprezentare schematic

http://www.all-science-fair-
projects.com/science_fair_projects_encyclopedia/Binary_fissi
on

n natur, bacteriile triesc ntr-o varietate enorm de nie ecologice i

acestea corespund unei mari varieti biochimice. Ele au fost mprite n
2
funcie de poziia lor filogenetic n dou grupe: eubacterii sau bacteriile
propriu-zise i arhebacterii, un grup foarte vechi de bacterii anaerobe, care
triesc numai n anumite nie ecologice, n condiii deosebite de mediu,
similare cu cele existente pe Terra n primele etape ale apariiei i evoluiei
vieii. Din aceast categorie fac parte bacteriile metanogene, capabile s
realizeze n condiii anaerobe biosinteza metanului pornind de la CO 2, CO i
H2, bacteriile termoacidofile, care triesc la temperaturi ridicate i pH acid
(sub 2) i bacteriile halofile, care triesc n regiuni cu cantiti mari de sruri
(ex. Marea Moart etc.) (Raica, 2000, Alberts, B., i colab., 1983). Astfel,
exist specii de bacterii care pot utiliza, ca surs de hran molecule
organice de tipul zaharurilor, aminoacizilor, grsimilor, hidrocarburilor,
polipeptidelor i polizaharidelor. Altele sunt capabile de a obine atomii de
carbon din CO2, iar atomii de azot din N2.
Cu toate c sunt relativ simple din punct de vedere structural,
bacteriile sunt cele mai vechi organisme de pe pmnt i cele mai variate
tipuri de celule.
Reaciile chimice din celulele bacteriene sunt catalizate de sute de
enzime, care funcioneaz n lan, astfel c, produsul unei reacii devine
substrat pentru urmtoarea. Cnd viaa a aprut pe pmnt, probabil c
aceste reacii metabolice nu erau necesare. Celulele au putut s
supravieuiasc i s creasc pe baza moleculelor existente n mediul lor,
reprezentat de supa prebiotic. La epuizarea acestor resurse naturale,
celulele care au dezvoltat cel mai mare numr de enzime pentru biosinteza
moleculelor organice au ctigat un puternic avantaj evolutiv. n acest fel,
complexul enzimatic procesat de celul a crescut gradual, genernd cile
metabolice complexe din prezent.
Un rol important n metabolismul celulelor l ocup reaciile care
implic glucidele fosforilate, poziia central deinnd-o secvena de reacii
cunoscut sub denumirea de glicoliz, prin care glucoza poate fi degradat
n absena oxigenului (anaerob). Cea mai veche cale metabolic trebuia s
fie anaerob pentru c nu exista oxigen n atmosfera primitiv a pmntului.
Glicoliza se manifest n orice celul vie i conduce la formarea
adenozintrifosfatului, sau ATP, care este utilizat de toate celulele ca surs de
energie chimic.
La aceste reacii plasate central se conecteaz sute de alte reacii
chimice. Unele dintre acestea sunt responsabile pentru sinteza moleculelor
mici, iar altele sunt utilizate n serie pentru producerea sau sinteza polimerilor
mari specifici. Alte reacii sunt utilizate pentru degradarea complexelor
moleculare utilizate ca substane nutritive.
Un puternic avantaj evolutiv l-a constituit dobndirea abilitii acestor
organisme primitive de a utiliza atomii de carbon i azotul din CO 2 i N2
atmosferic, ca surs de hran. Cu toate c sunt foarte abundeni, CO 2 i N2
sunt ns foarte stabili. Din acest motiv este necesar o mare cantitate de
energie pentru conversia lor n molecule organice.
n cazul CO2, mecanismul care a rezolvat aceast problem a fost
fotosinteza, n care energia solar captat determin transformarea CO 2 n
compui organici.
Mai trziu (acum cca. 2000 milioane de ani), prin fotoliza apei, se
elibereaz O2 care se acumuleaz n atmosfera pmntului n cantitate din

3
ce n ce mai mare, ajungnd astzi s reprezinte cca. 21% din total.
Deoarece oxigenul este un compus foarte reactiv, care poate interaciona cu
majoritatea constituenilor citoplasmatici, iniial a fost probabil toxic pentru
primele organisme celulare (primitive), cum este astzi n bacteriile
anaerobe. n ciuda acestui aspect, aceast reactivitate constituie o surs de
energie chimic exploatat de ctre organisme n cursul evoluiei. Prin
utilizarea oxigenului, organismele au abilitatea de a oxida mult mai complet
moleculele nutritive. De exemplu, n prezena oxigenului, glucoza poate fi
degradat complet la CO2 i H2O, n timp ce n absena oxigenului, ea poate
fi descompus doar pn la acid lactic i etanol (produii finali ai glicolizei
anaerobe). Energia eliberat n oxidarea aerob a moleculelor nutritive
proces cunoscut sub denumirea de respiraie, este folosit pentru sinteza de
ATP.
Mediul bogat n oxigen, pe care nu l puteau utiliza, a constituit un
dezavantaj pentru organismele anaerobe. Totui, unele dintre celule au
supravieuit i au dobndit capacitatea de a respira (de a utiliza oxigenul), iar
altele s-au retras n nie ecologice n care oxigenul era absolut absent, unde
i-au continuat modul de via anaerob (ex. n noroaie descompuntoare,
care sunt i astzi locuite de bacterii anaerobe). Un al treilea grup de celule
anaerobe au descoperit o strategie de supravieuire mult mai ingenioas; ele
au intrat n asociere intim cu un tip celular aerob, trind cu acesta n
simbioz. Aceste celule au avut mari implicaii n dezvoltarea ulterioar a
vieii, iar simbioza lor cu celulele aerobe, constituie cea mai plauzibil
explicaie pentru originea celulelor de tip eucariot.

Celulele eucariote

Celulele eucariote, spre deosebire de procariote, posed nucleu (de la

grecescul carion = smbure), care conine aproape tot ADN-ul celular,
nvelit de o membran dubl, coninnd pori, formaiuni prin care are loc
comunicarea dintre citoplasm i interiorul nucleului. ADN-ul este combinat
cu proteinele bazice (histonele), implicate n plierea macromoleculei ntr-o
structur compact i complex care constituie cromozomii. Cromozomii sunt
n numr variabil n funcie de specie, numrul fiind acelai pentru indivizii din
aceiai specie. De asemenea, nucleul celulelor eucariote conine unul, doi,
sau mai muli nucleoli, organit implicat n sinteza ARN.
Citoplasma este sediul reaciilor metabolice i conine organitele
celulare. Un rol foarte important l dein mitocondriile. Ele sunt nvelite de o
membran dubl i au o compoziie chimic diferit de cea a nucleului.
Mitocondriile sunt organite universale ale celulelor eucariote, implicate n
transformarea energiei chimice a nutrienilor n ATP, n timp ce cloroplastele
sunt ntlnite numai n celulele eucariote capabile de fotosintez (celulele
plantelor). Se presupune c, att mitocondriile ct i cloroplastele sunt de
origine bacterian. Mitocondriile prezint foarte multe similariti cu celulele
procariote. De ex. au mrimea i aspectul similar cu cel al bacteriilor, conin
ADN de tip bacterian i se reproduc prin diviziune binar ca bacteriile. n
celulele eucariote, mitocondriile sunt responsabile pentru respiraia oxidativ.
n absena mitocondriilor, celulele animale i fungii devin celule anaerobe,

4
dependente numai de procesul ineficient i primitiv al glicolizei, ca surs de
energie.
Unele bacterii actuale sunt aerobe, deci pot respira, iar mecanismul
respiraiei lor este identic cu cel al mitocondriilor.
Se presupune c, celulele eucariote sunt descendenii unor celule
anaerobe primitive, care au supravieuit ntr-o atmosfer din ce n ce mai
bogat n oxigen, pentru c au ncorporat n interiorul lor o specie de bacterii
aerobe. Ele nu au digerat aceste bacterii, dimpotriv au intrat n simbioz cu
ele, folosindu-se de capacitatea lor de a consuma oxigen pentru a produce
energie.
Celulele eucariote au un volum de cca. 1000 de ori mai mare dect
celulele procariote i o cantitate de cca. 800 de ori mai mare de ADN dect o
bacterie. Deoarece materialele folosite pentru reaciile biosintetice care au
loc n interiorul celulei trebuie s strbat membrana plasmatic i deoarece
membrana nsi este sediul multor reacii importante, creterea volumului
celular impune i creterea suprafeei celulare. Aceasta este cauza datorit
creia celula eucariot, pentru a-i asigura o suprafa corespunztoare
volumului su, i-a suplimentat aria suprafeei prin invaginaii, prelungiri i
alte membrane.
Aceasta explic n parte, reeaua complex de membrane interne,
care reprezint o caracteristic de baz a celulei eucariote. Membranele
nvelesc nucleul, mitocondriile i cloroplastele (n celulele vegetale). Ele
formeaz un compartiment labirintic denumit reticul endoplasmatic, n care
sunt sintetizate lipidele i proteinele membranelor celulare, precum i
materialul destinat exportului celular. De asemenea, membranele formeaz
saci turtii, care constituie complexul Golgi, implicat n sinteza i exportul
diferitelor molecule organice (ex. complexul Golgi adaug zaharuri
proteinelor membranare, proteinelor lizozomiale i proteinelor secretoare).
Membranele nvelesc lizozomii, formaiuni care stocheaz enzime necesare
pentru digestia celular i previn aciunea lor distructiv asupra proteinelor i
acizilor nucleici proprii. n acelai mod, membranele delimiteaz peroxizomii,
organite n care peroxizii toxici sunt generai i degradai. De asemenea,
membranele formeaz vezicule, iar n plante vacuole. Toate aceste structuri
nvelite de membrane corespund unor compartimente interne distincte din
interiorul citoplasmei. ntr-o celul animal tipic, aceste compartimente
ocup jumtate din volumul celular. Restul compartimentului citoplasmatic,
care include ntotdeauna organite ne nvelite de membrane, este denumit
uzual citosol.
Membranele interne constituie bariere, care permit fiecrui tip de
organit s-i menin constant mediul ionic i pe cel enzimatic intern..
O alt caracteristic a celulei eucariote este aceea c prezint
citoschelet, o reea tridimensional care menine forma celulei, intervine n
micare i asigur dispunerea ntr-o ordine corespunztoare a organitelor.
Citoscheletul este alctuit din filamente proteice (filamente de actin;
filamente intermediare; microtubuli), cele mai importante fiind filamentele de
actin i microtubulii. Ambele genereaz micare n celule: de exemplu,
filamentele de actin particip la contracia muscular, n timp ce microtubulii
sunt elemente principale structurale i generatoare de for n cili i flageli

5
(proiecii lungi la suprafaa unor celule, care intervin n propulsie) (Alberts, B.,
i colab., 1983).
Filamentele de actin i microtubulii sunt de asemenea eseniale
pentru micrile interne care au loc n citoplasma tuturor celulelor eucariote.
De asemenea, microtubulii, sub forma fusului mitotic, sunt vitali pentru
distribuirea n mod egal a ADN-ului la cele dou celule fiice rezultate n urma
diviziunii celulare.
Diviziunea celulelor eucariote, somatice se realizeaz prin mitoz,
fenomen ciclic n cadrul cruia , dup replicarea ADN, cromozomii trec prin
etape succesive de spiralizare, despiralizare, clivare i repartiie egal a
materialului genetic n celulele fiice. Fenomenul se realizeaz prin
intermediul filamentelor fusului de diviziune, structuri specifice celulei
eucariote.

Fig. 2. Reprezentarea schematic a structurii celulei procariote (stnga) i a celulei

eucariote (dreapta) (http://www.thearticleweb.com/anatomy-of-cells/)

Concepte i noiuni de reinut

Celulele sunt produse ale materiei vii, mediul fizico-chimic n care

se desfoar fenomenle vieii i sunt constituentele organismelor
mono-, sau pluricelulare. Se gsesc n echilibru dinamic cu mediul
extracelular n care se afl iar, prin adezivitate i agregare, formeaz
esuturile organismelor.
O etap important n evoluia celulei a avut loc acum cca. 1,5
miliarde de ani i a constat n tranziia de la formele celulare mici, cu o
structur intern relativ simpl, numite procariote (ex. bacteriile i algele
verzi-albastre), la celule mari, mai complexe, numite eucariote, care exist
astzi la animalele superioare i la plante.
Bacteriile sunt cele mai simple organisme existente n mediul
natural. Ele sunt celule sferice sau alungite, cu dimensiuni de civa microni,
formate din nveli protector (perete celular sau capsul), sub care se afl
membrana plasmatic i citoplasma care conine ADN, ARN, proteine,
molecule mici i ribozomi liberi..
ADN-ul bacterian este reprezentat de o molecul de ADN
helicoidal, dispus circular, nelegat de histone i formeaz un corp
cromatic compact, numit i nucleoid.

6
 Principalele caracteristici ale celulei procariote sunt proliferarea
i plasticitatea.
Bacteriile sunt haploide i se pot replica prin fisiune binar.
Un rol important n metabolismul celulelor procariote l ocup
glicoliza anaerob, prin care glucoza poate fi degradat n absena
oxigenului (anaerob) i, prin care, celulele i obin energia (ATP).
Celulele eucariote, spre deosebire de procariote, posed nucleu,
care conine aproape tot ADN-ul celular.
Nucleul este nvelit de o membran dubl, coninnd pori, formaiuni
prin care are loc comunicarea dintre citoplasm i interiorul nucleului.
ADN-ul celulei eucariote este combinat cu proteine bazice (histone),
implicate n plierea macromoleculei ntr-o structur compact i complex
care constituie cromozomii.
Citoplasma celulei eucariote este sediul reaciilor metabolice i
conine organitele celulare. Un rol foarte important l dein mitocondriile,
implicate n transformarea energiei chimice a nutrienilor n ATP.
Celulele eucariote au un volum de cca. 1000 de ori mai mare
dect celulele procariote i o cantitate de cca. 800 de ori mai mare de
ADN dect o bacterie.
O alt caracteristic a celulei eucariote este aceea c prezint
citoschelet, o reea tridimensional care menine forma celulei, intervine
n micare i asigur dispunerea ntr-o ordine corespunztoare a
organitelor.
Diviziunea celulelor eucariote, somatice se realizeaz prin mitoz,
fenomen ciclic n cadrul cruia , dup replicarea ADN, cromozomii trec prin
etape succesive de spiralizare, despiralizare, clivare i repartiie egal a
materialului genetic n celulele fiice.

ntrebri de autoevaluare

1. Care sunt caracteristicile morfofunctionale ale celulelor procariote?

2. Care este mecanismul prin care celulele procariote isi obtin energia
sub forma de ATP?
3. Cum s-au adaptat bacteriile la atmofera din ce in ce mai bogata in
oxigen?
4. Care sunt caracteristicile morfofunctionale ale celulelor eucariote?
5. Ce rol au mitocondriile in celulele eucariote?
6. Care sunt modalitatile de diviziune a celulelor eucariote?

7
 UNITATEA DE NVARE 2

STAREA FIZICO-CHIMIC A CELULEI

Cuvinte cheie: vascozitate, pH, excitabilitate, contractibilitate,

motilitate, elemente chimice, substane organice, substane anorganice

Rezumat
Datele de microscopie (optic, electronic), ca i compoziia chimic,
relev unitatea de structur morfo-fizico-chimic a eucitelor, formate din
componente capabile s asigure funcii vitale, precum i diversitatea lumii vii.
Unitatea viului const n atomi, molecule, ap, substane organice i
anorganice. n aceast unitate sunt prezentate principalele caracteristici
fizice, dar i organizarea chimic a celulei, principalele substane anorganice
(apa i substanele minerale) i organice din structura celulei (glucide, lipide,
proteine, enzime, hormoni, amine biogene, vitamine, pigmeni), precum i
importana acestora la nivelul celulei i ntregului organism.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 1 or

Starea fizic

Fizico-chimic, celula este un complex molecular heterogen,

transparent, elastic, incolor i moale, cu vscozitate, refringen, greutate
specific i tensiune superficial mai mari dect ale apei, care coaguleaz
prin cldur i i schimb starea de agregare. Celula prezint
contractibilitate, excitabilitate, motilitate, pH-ul aproximativ neutru i RH-ul
situat ntre 14-20.
Structura submicroscopic relev c celula este un sistem complex,
alctuit din filamente proteice (coloizi), care prin ntretiere formeaz o reea
tridimensional - citoscheletul (mediul dispersat) hidrofil i insolubil, n
ochiurile cruia se dispun: apa, soluii moleculare diverse, electrolii i gaze
(mediul de dispersie).
Coloizii influeneaz constituenii mediului de dispersie, asupra
crora imprim micri de orientare i confer protoplasmei o stare de sol
sau gel, stri reversibile influenate de factori fizico-chimici, fiziologici sau
patologici.

8
 Organizarea chimic a celulei

Celulele conin aproximativ aceleai substane, n aceeai proporie,

ceea ce dovedete unitatea de structur chimic a materiei vii. n celul au
fost identificate cca. 60 din totalul elementelor nregistrate n tabelul
Mendeleev, care intr n constituia macromoleculelor organice, mprite n:
- elemente majore (biogene): C, H, O, N (reprezint pn la 99% din
greutatea unei celule), sunt reactive, dau numeroi compui cu apa i sunt
cele mai rspndite n natur; intr n structura moleculelor organice;
- elemente puin abundente: S, P, Cl, Na, K, Mg, Ca;
- oligoelemente: Fe, Cu, Co, Mn, I, F, Mb - indispensabile n reaciile
chimice, cu rol de: grup prostetic, cofactori enzimatici (activatori, moderatori,
inhibitori a reaciilor chimice), factori care previn sau produc endemii
biogeochimice la plante i animale.
S-a stabilit c, un organism uman de 70 de kg, conine aproximativ 40
de kg oxigen, 11 kg carbon, 6 kg hidrogen, 2 kg azot; 1 kg fosfor, 1 kg calciu.
Dac se face abstracie de ap, practic, toate moleculele unei celule
sunt compui ai carbonului. Atomii de carbon au capacitatea de a forma
molecule mari i pot realiza 4 legturi covalente puternice cu ali atomi,
genernd molecule nelimitat de mari i complexe.
Chimic, celula este un complex heterogen, format din: ap 70-90%;
alte substane anorganice 1%; proteine 15%; acizi nucleici 7%; glucide 3%;
lipide 1%.
Compuii chimici celulari sunt substane anorganice i organice, care
reprezint elementele de structur ale citomembranelor, organitelor
citoplasmatice, nucleului, sau rezerve ale citosolului, din care se edific
structurile celulare.

Substanele anorganice

Apa

Apa din organism este constituent a celulelor i mediilor

extracelulare. Coninutul celulelor n ap este influenat de vrst, tipul de
celul i activitatea acesteia. Astfel, n celulele tinere, cele care secret, cele
n diviziune, neuroni, coninutul n ap este mare (80-95%). n schimb, n
celulele cu metabolism redus (ex. celulele n repaus, mbtrnite,
osoase),coninutul este redus (ex. 30% n celula osoas).
n celul, apa exist sub form de:
- ap liber (reactiv), cu rol de solvent, mediu de dispersie, sediul
proceselor metabolice (95%);
- ap legat (de constituie, de rezerv), prin puni de hidrogen sau
prin fore electrice, de alte molecule celulare (proteine, lipide, glucide, ali
constitueni celulari), are putere de solubilizare redus i este mai puin
reactiv. Importana apei legate este deosebit, ea indic indirect gradul de
activitate metabolic. Cu ct cantitatea de ap legat este mai mare, cu att
schimburile cu mediul extracelular sunt mai intense.

9
 n organism, pe lng apa celular, exist i apa extracelular din
plasm, limf, matricea extracelular, lichidul cefalorahidian, din cavitile
seroase, secreiile digestive etc.
Apa din organism are dou surse:
- exogen (apa ingerat ca atare, sau cea din alimente);
- endogen (apa rezultat din reaciile metabolice).
Rolul apei n celul:
- formarea i descompunerea apei constituie o surs secundar n
generarea de energie celular;
- apa are rol de solvent, favoriznd disocierea electrolitic. Ea
constituie mediul de dispersie pentru sistemele coloidale celulare;
- apa asigur transportul i eliminarea produilor de elaborare, din
celul, n mediul extracelular;
- asigur micarea organitelor i a moleculelor n celule;
- este indispensabil metabolismului celular, ns nu este substratul
nsui al proceselor metabolice, deoarece extragerea apei din celul nu
suprim procesele vitale, ci numai le suspend, dovezi n acest sens fiind
desicarea sau conservarea celulelor la temperaturi joase.
- moleculele de ap, legate ntre ele prin puni de hidrogen, asigur
ecranarea termic, aprnd structurile celulare de distrugeri, prin eliberri
brute de cldur n reacii exoterme, produse de radiaii.

Compuii minerali

Compuii minerali se ntlnesc n organism sub form de:

- sruri (fosfai, carbonai, sulfai, cloruri, etc.) depozitate n oase i
umorile organice;
- n combinaie cu glucidele, lipidele, proteinele;
- sub form de ioni liberi (anioni-cationi) de: Na+, K+, Ca++, Mg++, PO4-
3
, SO4-2, CO3-, Cl-, Fe2-, n diferite compartimente sau subcompartimente
celulare (membran, citoplasm, nucleu, mitocondrii, ribozomi), ct i n
matricea extracelular.
Cationul majoritar din mediul extracelular este Na+, iar din mediul
intracelular este K+. Micarea celor doi ioni de pe o fa pe alta, determin
polaritatea electric a membranei celulare.
Anionii predominani n mediul extracelular sunt Cl- i HCO3-, iar n
mediul intracelular PO43-.
Concentraia ionilor n celule este meninut n limite strnse.
Depozitele se constituie n ontogeneza timpurie i sunt rezerve din care
esuturile se aprovizioneaz pe ntreaga ontogenez.
Calciul i magneziul sub form de cloruri, sau n stare ionizat, se
gsesc n plasm i substana intercelular, iar sub form de fosfai i
carbonai exist n esuturile cartilaginoase, osoase, musculare.
Ionul ca Ca2+ a fost identificat n citoscheletul membranei, mitocondrii,
ribozomi, iar ionul de Mg2+ n ribozomi, mitocondrii i nucleu, prezen care
justific importana lor n funcii vitale ca: energogeneza, sinteza de proteine,
meninerea integritii cromozomilor (friabili n absena calciului).

10
 Calciul este implicat i n adezivitatea constituenilor celulari,
agregarea celulelor, procesele de contracie i relaxare a muchilor.
Fosforul, n organism, exist sub form de fosfai. Cei mai muli dintre
fosfaii cu rol biologic sunt combinaii de fosfolipide, nucleotide, fosfoproteine.
Concentraia cea mai mare de fosfai exist n oase i cartilagii (85%).
Prin mecanisme tampon, fosfaii neutralizeaz pH-ul celulelor.
Fierul. n cantitate mare, ionii de fier au fost identificai n nucleul
celulelor tinere. n combinaii, este ntlnit n hemoglobin, mioglobin,
feritin, citocromi, citocromoxidaze, catalaze fiind implicat n transportul O 2 i
CO2; refacerea hemoglobinei, n respiraia celular.
Rolul compuilor minerali
Compuii minerali asigur buna funcionare a celulelor prin:
- meninerea echilibrului acido-bazic, a presiunii osmotice, a strii de
hidratare i pH-ului celulelor;
- ca i cofactori influeneaz activitatea enzimelor celulare;
- asigur polaritatea membranelor (Na+, K+), creterea i dezvoltarea
celulelor, diviziunea, funciile specifice ale mitocondriilor, ribozomilor (Ca 2+;
Mg2+) nucleului (Fe2-; Ca2+); integritatea cromozomilor (Ca2+);
- influeneaz excitabilitatea, contractilitatea i vscozitatea
citoplasmei;
- funcie biosintetic, prin aprovizionarea cu ioni anorganici n sinteza
moleculelor complexe (ex.: utilizarea ionilor de iod n sinteza hormonilor
tiroidieni).

Substanele organice

Substanele organice sunt reprezentate prin glucide, lipide, proteine, la

care se adaug acizii nucleici. Substanele organice sunt macromolecule
formate pe un schelet de carbon, n care acesta se combin cu oxigenul,
hidrogenul i azotul.
Macromolecula se formeaz prin polimerizarea unor uniti simple -
monomeri -, n uniti complexe - polimeri (de la grecescul mono = simplu;
i poli = multiplu). Condensarea are loc prin secvenializarea monomerilor
n procesul de biosintez.
n structura celulelor exist 3 tipuri de polimeri (macromolecule):
- proteinele - formate prin polimerizarea aminoacizilor;
- acizii nucleici - rezultai prin polimerizarea nucleotidelor;
- polizaharidele - formate prin asocierea monozaharidelor (glucide
simple).
Acizii nucleici i proteinele, fiind heterogene, sunt molecule
informaionale; polizaharidele fiind alctuite din molecule unice (glucoza), nu
sunt informaionale.
Macromolecula, dei are o anumit stabilitate, poate fi descompus de
enzime n micromolecule, cu eliminarea energiei depozitat n ele.

11
 Glucidele

Dup gradul de polimerizare, glucidele se clasific n: mono-, di- i

polizaharide.
Monozaharidele sunt glucide simple, molecule formate din C, H, O,
cu formula chimic (CH2O)n, n care n = 3,4,5,6 sau 7, existnd n acest caz,
dup numrul atomilor de carbon trioze, tetroze, pentoze, hexoze etc.
Monozaharidele cu rol deosebit n structura celulei sunt: D (-) riboza i
2 dezoxiriboza (pentoze), componente ale nucleotidelor acizilor nucleici i D-
glucoza (hexoz), cel mai important furnizor de energie n celul.
Glucoza este component a plasmei sangvine, unde se gsete ntr-o
concentraie constant, denumit glicemie. Este avantajoas ca surs de
energie pentru celul, deoarece:
- conine o mare cantitate de energie, pe care o elibereaz prin
oxidare (C6H12O6 + 6O2 6CO2+ 6H2O + energie);
- este solubil n ap, mai stabil dect pentozele, dar mai reactiv
dect alte monozaharide;
- prin polimerizare formeaz glicogenul.
Asemntoare din punct de vedere structural este fructoza, substan
cu rol important n mobilitatea spermiilor i n metabolismul lor energetic.
Polizaharidele sunt reprezentate de glicogen n celulele animale,
celuloza i amidonul n celulele vegetale.
Glicogenul (polimer al glucozei) reprezint o adaptare avantajoas
pentru depozitarea glucozei n celule. Molecula ramificat de glicogen
mpiedic difuziunea, nu creeaz presiune osmotic celular mare, permite
aciunea simultan a enzimelor la toate capetele ramificaiilor, dup caz
elibernd, sau concentrnd rapid glucoza.
Glicogenul exist n cantiti variabile n numeroase tipuri de celule,
variaii determinate de alimentaie, repausul sau activitatea celulelor,
influene hormonale, concentraia glucozei n snge. Cantiti mari de
glicogen sunt ntlnite n: hepatocite, condrocite, fibrele i celulele musculare,
leucocite i trombocite, epiderm, epiteliile genitale femele, epiteliul
placentei. Depozitarea glicogenului n diferitele tipuri de esuturi difer de la o
etap ontogenic la alta, n corelaie cu utilizarea acestuia ca surs de
energie n procesele de difereniere tisular, sau a celor specifice. Primul
organ de referin n ontogeneza depozitrii glicogenului este ficatul (cca.
10% din greutatea ficatului este reprezentat de glicogen), urmat de esutul
cartilaginos i esutul muscular, care rmn sursa major n depozitarea
glicogenului pe ntreaga ontogenez a individului.
Pentru celula animal, glicogenul constituie sursa major de energie.
Prin nlocuirea unei grupri funcionale existente (-OH), sau prin
introducerea unor substitueni n moleculele monoglucidelor, se pot obine
derivai ai acestora (componente ale polizaharidelor, glicoproteinelor,
glicolipidelor), ca de exemplu: acidul glucuronic (formeaz combinaii cu
alcoolii, anihilnd aciunea lor toxic i contribuie la eliminarea lor din
organism pe cale renal); glucozamina (intr n structura mucinelor i a
acidului hialuronic); galactozamina (particip la sinteza condroitinsulfailor din
cartilagii i a anumitor glicolipide).

12
 Glicozaminoglicanii sunt derivai aminai ai unor monozaharide
(glucozamina, galactozamina, acidul glucuronic) sau derivai cu resturi de
acid sulfuric esterificat, criteriu dup care se clasific n acizi i neutri.
Cei mai frecveni glicozaminoglicani cu structur acid sunt acizii
condroitin-sulfuric i mucoitin-sulfuric, acidul hialuronic, acidul sialic,
heparan-, dermatan- i keratan-sulfaii.
Glicozaminoglicanii cu structura acid sunt ntlnii n
polimorfonuclearele bazofile, mastocite, substana fundamental a esutului
conjunctiv, a tendoanelor, cartilagiilor, membranele bazale, matricea
extracelular, umoarea vitroas, piele, peretele vaselor etc. sau sunt
depozitai la suprafaa mucoaselor.
Datorit capacitii mari de hidratare, au rol de susinere, amortizare a
ocurilor, n metabolismul general al esuturilor. Prin polimerizare i
depolimerizare (n special acidul hialuronic) controleaz viteza de schimb
dintre celule i mediul extracelular, micornd sau mrind vscozitatea, poli-
i depolimerizarea fiind caracteristice acestor substane.
Secreia GAG, glico-i mucoproteinelor, a altor glucide conjugate, de
ctre celulele acinoase, caliciforme i mucoide este permanent i se
depune la suprafaa mucoaselor, formnd depozite cu rol multiplu n:
absorbie, schimb de gaze, protecia i imunitatea mucoaselor, adezivitatea
celulelor, formarea glicocalixului, a membranelor bazale, a receptorilor, a
componentelor din matricea extracelular; sunt medii de cultur pentru
saprofiii mucoaselor.

Lipidele

Lipidele sunt substane organice, rezultate prin combinarea acizilor

grai cu alcoolul, fiind solvabile numai n solveni organici.
Acizii grai prezint dou regiuni distincte: o coad nepolar,
hidrofob, reprezentat de lanul hidrocarbonat lung i care nu este foarte
reactiv chimic i un cap polar, hidrofil, reprezentat de gruparea carboxil,
reactiv (ex. CH3 (CH2)n COOH). Aceasta poate forma rapid esteri sau
amide.
Ei se deosebesc ntre ei prin lungimea catenei, prin numrul i poziia
dublelor legturi (ntre 0 i 3 legturi duble).
Cei mai rspndii sunt acizii grai monocarboxilici alifatici, cu caten
normal saturat sau nesaturat i cu numr par de atomi de carbon (4
26).
Din punct de vedere al structurii, lipidele se clasific n simple i
complexe.
Lipidele simple (molecule formate din C, H, O) sunt esteri ai
glicerolului sau sterolului cu acizii grai i sunt reprezentate prin: gliceride,
steride i ceride.
Gliceridele (trigliceridele) sunt formate dintr-o molecul de glicerol, la
care se leag prin legturi esterice la cele trei grupri hidroxil, cte un acid
gras. Datorit caracterului lor puternic hidrofob, trigliceridele formeaz n
celul picturi lipidice. Gliceridele sunt produi de rezerv celular sau
constituie cea mai mare parte a esutului gras (adipos), cu rol de rezerv

13
energetic a organismului. n funcie de necesitile energetice ale
organismului, stimulate hormonal, se produce hidroliza trigliceridelor din
celulele adipoase, iar acizii grai sunt eliberai n snge, fiind apoi utilizai de
celulele organismului pentru sinteza de energie.
Steridele reprezint grupa de lipide din care cel mai reprezentativ este
colesterolul. n stare liber, colesterolul a fost identificat n bil, piele, glanda
sebacee, glanda uropigean, plasm, glbenu, celulele corticosuprarenale
i cele ale glandei interstiiale, membrana celulei. Prin degradare, din steroli,
rezult acizii biliari i hormonii steroizi. Astfel, prin scindarea oxidativ a
colesterolului la CO2, rezult pregnenolonul, un produs intermediar comun n
sinteza hormonilor steroizi corticosuprarenalieni i sexuali.
Ceridele au fost identificate n secreiile insectelor, pe penele psrilor,
pe lna oilor (lanolina), pe frunzele plantelor, formnd un strat protector fa
de ap.
Lipidele simple se sintetizeaz sub aciunea enzimelor integrate n
membranele reticulului endoplasmatic neted. Dac produsul este reinut,
rmne n matricea citoplasmatic, contrar este eliminat prin lipoliz. Lipoliza
i lipogeneza sunt concomitente, desfurate sub aciunea lipazelor.
Lipidele complexe rezult din asocierea lipidelor simple cu o substan
organic sau anorganic. Sunt reprezentate de: fosfolipide, glicolipide,
sfingolipide.
Fosfolipidele sunt constituieni principali ai membranelor celulare i ai
unor formaiuni subcelulare. Principala clas a fosfolipidelor este
reprezentat de fosfogliceride, molecule n care, dou grupri hidroxil din
structura glicerolului sunt esterificate cu acizi grai, iar cea de-a treia este
esterificat cu acid fosforic. Prin esterificarea acidului fosforic cu o serie de
alcooli, rezult o serie de derivai ai fosfogliceridelor, cum sunt: fosfatidil-
etanolaminele, fosfatidil-colinele (lecitine), fosfatidil-serinele (serin-cefaline),
fosfatidil-glicerolii (ex. cardiolipina din structura membranelor mitocondriale).
Sfingolipidele sunt reprezentate de sfingomielina identificat n
structura tecii de mielin, inim, splin, rinichi, pulmon, stroma globulelor roii
la om i la animale.
Glicolipidele sunt reprezentate de glicolipide neutre (cerebrozide) i
glicolipide acide (gangliozide).
Glicolipidele neutre (cerebrozidele) au fost izolate, pentru prima dat,
din creier i conin o singur molecul de galactoz, mai rar glucoz.
Sulfatidele, derivai ai cerebrozidelor (prezint gruparea sulfat legat
de al treilea hidroxil din galactoz), particip la transportul cationilor prin
membrana celulelor i a fibrelor nervoase.
Gangliozidele sunt glicolipide care conin n lanurile oligozaharidice
una sau mai multe molecule de acid sialic, determinnd astfel o ncrctur
ionic negativ pe suprafaa celulelor. Sunt abundente n celulele scoarei
cerebrale.
n biologia celulelor, lipidele sunt importante prin rolul pe care l au n
formarea membranelor (barierelor) celulare (colesterolul, fosfolipidele,
gangliozidele), a depozitelor de rezerv cu rol energogenezic, sau constituite
n esutul adipos, ca substrat pentru formarea hormonilor steroizi (sexuali
corticosuprarenalieni) i a prostaglandinelor.

14
 Proteinele

Proteinele sunt substane cuaternare, macromoleculare, formate din

C, H, O, N.
Macromoleculele proteice rezult prin polimerizarea aminoacizilor.
Aminoacizii sunt acizi organici carboxilici n care cel puin un atom de carbon
este substituit cu o grupare amino (-NH2). Reacia de condensare a
aminoacizilor se realizeaz prin legturi peptidice (legarea covalent a unei
grupri amino- a unui aminoacid, cu o grupare carboxil a altui aminoacid) i
este nsoit de eliberarea a cte unei molecule de ap. O niruire liniar de
aminoacizi formeaz un polipeptid. Proteinele prezint o mare variabilitate i
reactivitate, conferite de aminoacizii din structur, diferii ntre ei (lungi, scuri,
polari), cu posibiliti infinite de a-i schimba sarcinile electrice, de a se uni
ntre ei i de a forma noi legturi i compui, din ce n ce mai complicai.
Legarea aminoacizilor n secvene extrem de variate, confer moleculelor
proteice, structuri tridimensionale.
Proteinele se deosebesc ntre ele prin tipul, proporia i ordinea n
care aminoacizii se succed n molecul. De aceea, moleculele proteice au
conformaii lineare (proteine fibroase), sau globulare, compacte.
Din punct de vedere chimic, proteinele sunt clasificate n simple i
complexe.
Proteinele simple (holoproteinele, cu molecula constituit din C, H,
O, N) sunt formate numai din aminoacizi. Sunt reprezentate de: albumine,
globuline, histone, protamine i scleroproteine.
Albuminele i globulinele, sintetizate n ficat, sunt proteine ale plasmei,
laptelui, albuului.
Histonele i protaminele sunt sintetizate n citoplasm, din care trec n
nucleu, unde se combin cu acidul dezoxiribonucleic (ADN), formnd
mpreun complexe dezoxiriboproteice (filamentele de cromatin;
microfilamentele cromozomilor), cu rol genetic.
Histonele sunt proteine cu caracter bazic, datorit coninutului ridicat
n arginin i lizin. Se cunosc 5 clase de histone: H 1; H2a; H2b; H3 i H4, care
se leag la ADN prin legturi electrostatice, histonele avnd sarcin pozitiv,
iar lanurile de ADN sarcin negativ. Sunt implicate n stabilizarea structurii
ADN-ului.
Protaminele au de asemenea un caracter bazic, datorit coninutului
ridicat n arginin, au rol structural, asigurnd structura compact a ADN-ului.
Scleroproteinele sunt proteine lineare filamentoase, cu rol de
susinere, protecie i rezisten mecanic. Din aceast grup fac parte
colagenul i elastina din esutul conjunctiv i matricea extracelular, fibrina
din plasma sngelui, cheratina din celulele epidermei, prului, penelor, actina
i miozina din esutul muscular i celulele nemusculare.
Proteinele complexe (heteroproteinele) sunt alctuite din aminoacizi
(proteine simple), de care se leag, mai puternic sau mai slab, componenta
neproteic (gruparea prostetic), reprezentat de o substan organic sau
anorganic, care mrete variabilitatea structural i funcional a proteinei.
n raport cu gruparea prostetic, heteroproteinele sunt clasificate n:
nucleoproteine, cromoproteine, glicoproteine, lipoproteine, fosfoproteine.

15
 Nucleoproteinele sunt formate din histone sau protamine i din acizi
nucleici, mpreun alctuind complexe (nucleohistone, nucleoprotamine).
Nucleoproteinele sunt solubile n soluii slabe de electrolii i sunt
componente universale ale materiei vii, ntlnite n structura tuturor tipurilor
de celule animale i vegetale, fagi, sperma psrilor i petilor.
Cromoproteinele (proteinele colorate) (de la grecescul chromos =
culoare) i datoreaz culoarea fie unui complex molecular proteic, fie unui
ion metalic (Cu, Fe2-) cu care sunt conjugate i permit absorbia radiaiilor din
spectrul luminos, determinnd apariia culorii.
Cromoproteinele cu funcii biologice sunt:
- hemoglobina, specific eritrocitelor, este implicat n legarea i
transportul O2 de la pulmoni la esuturi i a CO2 de la esuturi spre pulmoni;
- mioglobina (proteina hemic muscular), are afinitate pentru O2
mult mai mare dect hemoglobina, deoarece n esuturile musculare
presiunea parial a O2 este mult mai sczut;
- citocromi, ntlnii n mitocondriile i microzomii celulelor animale,
sunt implicai n respiraia celular, funcionnd ca transportori de electroni;
- catalaza i peroxidaza intervin n descompunerea peroxidului de
hidrogen din celulele animale i vegetale.
Glicoproteinele rezult prin asocierea proteinelor simple cu un glucid.
n funcie de legturile care se stabilesc ntre gruprile glucidice i
aminoacizii din lanul peptidic, exist:
- grupri glucidice N linkate, dac ele se leag la azotul amidic al
asparaginei (n imunoglobuline, hormoni);
- grupri glucidice O linkate, dac ele se leag prin intermediul
oxigenului din gruparea hidroxil a serinei sau treoninei (n mucine, colagen).
Lipoproteinele sunt proteine simple asociate cu un lipid. Componenta
proteic a lipoproteinelor este apolipoproteina. Au rol n transportul plasmatic
al lipidelor, vitaminelor liposolubile i steroizilor.
Fosfoproteinele sunt rezultate din asocierea unei proteine simple cu
acidul fosforic. Sunt bine reprezentate n celulele nervoase i cele sexuale,
intr n structura membranelor. De asemenea, sunt ntlnite n lapte
(cazeina), n vitelusul oului (vitelina).
Proteinele fiind, n general, substane cu rol plastic, constituie depozite
n puine celule i esuturi: hepatocite, esutul muscular, matricea
extracelular, plasm, vitelus, lapte.
Datorit specificitii caracteristice, proteinele ndeplinesc funcii
variate, specificitatea proteic constituind baza diferenierii dintre specii i
chiar ntre indivizii din aceiai specie.
Rolul proteinelor:
- proteinele asigur creterea i dezvoltarea organismelor, fiind
implicate direct n organizarea celular i subcelular, prin rol plastic i prin
controlul creterii i nmulirii celulelor;
- asigur transportul prin membran i depozitarea produilor
transportai (proteinele din structura membranelor);
- au rol n transportul plasmatic al medicamentelor, lipidelor, anionilor;
asigur transportul gazelor (O2, CO2) (hemoglobina i mioglobina);
- controleaz metabolismul hormonilor protidici i proteici, n structura
crora intr;

16
 - asigur meninerea constant a presiunii osmotice i a pH-ului
(albuminele);
- genereaz micarea n celulele musculare i cele nemusculare
(actina, miozina, tubulinele);
- intr n structura receptorilor i sunt molecule informaionale
(mesageri) n relaiile intercelulare realizate prin semnale chimice (rodopsina,
iodopsina, hormonii proteici i protidici);
- asigur protecia imun (anticorpii);
- au rol catalitic intervenind n diferite reacii chimice (protein-
enzimele).

Enzimele

Enzimele sunt produi de sintez celular, biocatalizatori universali,

care mediaz metabolismul citoplasmatic i pe cel nuclear, prin reaciile
chimice de sintez sau scindare, la temperaturi sczute, prin mecanisme
incomplet elucidate. Multe dintre enzime acioneaz numai n prezena
coenzimelor, substane care accelereaz cinetica reaciilor.
Enzimele au aciune reversibil, dubl specificitate (aciune, substrat)
i sensibilitate mare la variaiile de temperatur, pH, electrolii. Modific
viteza reaciei fr a se consuma. n celul pot fi dispersate n citosol,
adsorbite pe substraturile citoplasmatice sau nucleare, integrate n
citoschelet sau n diferite alte structuri celulare (de ex.: n membrana celulei,
n membranele i coninutul mitocondriei).
Dup locul n care acioneaz, se clasific n: exoenzime, care
acioneaz n afara celulelor care le-au produs (ex. enzimele acinilor
pancreatici i a celor salivari), endoenzime - cu aciune n celula
productoare.
Dup tipul de reacie i distribuia procentual, sunt grupate n ase
clase: oxidoreductaze (25%), transferaze (30%), hidrolaze (25%), liaze
(13%), izomeraze (3%) i sintetaze (ligaze) (5%).

Hormonii

Hormonii sunt produi elaborai de celulele specializate ale glandelor

endocrine, din care sunt eliberai n snge i transferai la distan de organul
formator sau n mediul extracelular, dac celulele secretoare sunt unice.
Chimic, sunt clasificai n: proteici, steroizi, glicoproteici.
Hormonii acioneaz electiv asupra organelor int, asupra ntregului
organism sau asupra celulelor vecine, prin modificarea permeabilitii
membranei celulare sau prin influenarea activitii enzimelor. Sunt
considerai mesageri chimici (reglatori, excitani, moderatori).
n afara hormonilor centrali, s-au depistat i hormoni locali (tisulari),
cum sunt de exemplu prostaglandinele.
Prostaglandinele sunt derivai ai acizilor grai cu 20 atomi de carbon.
Ele sunt eliberate continuu de celule unice, sau de grupe mici de celule, din
diverse esuturi. Nu se stocheaz, stimuleaz activitatea celulei din care

17
provin, a celulelor din vecintate sau pot aciona la distan, n asociaie cu
hormonii centrali, asupra unor celule int, efectul fiind mai complet.
De asemenea, din categoria hormonilor tisulari fac parte diferii factori
de cretere (ex. factorul de cretere al epiteliilor EGF, factorul de cretere
al nervilor NGF, limfokinele), o serie de substane cu rol n reglarea
volumului sanguin (ex. angiotensinele, bradikininele, renina etc.), reglatori ai
funciei de reproducie (ex. hormonii estrogeni i androgeni placentari,
feromonii).

Vitaminele

Vitaminele sunt cofactorii uneia, sau a unui grup de enzime, mpreun

cu care particip, n cantitate redus, la sinteze sau scindri moleculare.
Sunt sintetizate n ficat (hepatocite) din precursori introdui n organism prin
alimente.
Dup mediul n care se dizolv se clasific n: hidrosolubile (complexul
B; vitamina C) i liposolubile (vitaminele A, D, E, K, F).
Vitamina A, n condiii obinuite, exist n toate tipurile de celule.
Particip la procese de difereniere; n nucleoli, implicat n sinteza ARNr; n
hepatocite, implicat n funcii specifice; n condriosomi, implicat in
procesele energogenezice; n histiocite (n fagocitoz); n epiteliile
mucoaselor (asigur protecia i creterea celulelor); n neuronii cu conuri i
bastonae (n refacerea pigmenilor vizuali).
Vitaminele din complexul B. Vitamina B1 (thiamina) este ntlnit n
cantitate mare n neuroni, fibrele nervoase periferice (teaca de mielin), n
hepatocite, celulele musculare cardiace i scheletice participnd la procesele
energogenezice locale.
Vitamina B2 (riboflavina) a fost semnalat n coroid, piele, rinichi,
muchi, flora intestinal.
Vitamina B3 intr n compoziia a dou coenzime implicate n respiraia
celular: NAD (nicotinamidadenin-dinucleotida) i NADP (nicotinamidadenin-
dinucleotid-fosfat).
Vitamina B9 (acidul folic) este necesar n dezvoltarea sistemului
nervos, n procesul de eritropoiez, n sinteza nucleotidelor acizilor nucleici,
n metabolismul proteinelor i glucidelor.
Vitamina B12 (cyancobalamina) particip la procesul de rennoire
celular, la sinteza ADN-ului, maturizarea globulelor roii.
Vitamina B15 (acidul pangamic) este prezent n celulele hepatice i
are efect antioxidant.
Vitamina "C" (acidul ascorbic) este ntlnit n toate tipurile de celule
din esuturi i organe. Cu predilecie, a fost semnalat n epiteliile de nveli
i cptuire, epiteliile glandulare, epiteliul bursei Fabricius i al altor organe
hematopoetice, parenchimul glandei hipofize, al pancreasului, al ficatului,
leucocite, celulele esutului conjunctiv. Este un puternic oxidoreductor.
Acidul ascorbic este activ n procesele formative i regenerative ale celulelor
conjunctive, cicatrizarea plgilor, metabolismul fierului. Ca oxidoreductor,
are efecte benefice n unele forme de cancer (cancerul de colon) i este un

18
stimulant al activitii granulocitelor, n special al polimorfonuclearelor
neutrofile.
Vitamina D este semnalat n cantitate mare n ficat, esuturile petilor,
vitelus. Controleaz transportul ionilor de Ca2+ i PO43- prin membranele
celulare, acionnd ca regulator al nivelului acestor ioni n snge. De
asemenea, influeneaz metabolismul fosforului avnd rol esenial n
procesul de osificare, prin transformarea fosforului organic n fosfor
anorganic, favoriznd astfel formarea complexului fosfocalcic din oase.
Vitamina E (alfa-tocoferol-vitamina antisterilitii sau reproducerii).
Mrete fertilitatea att la femele, ct i la masculi, stimuleaz biosinteza
proteinelor i a acizilor nucleici, intervine n procesul de respiraie la nivelul
mitocondriei prin cuplarea oxidrilor celulare cu fosforilarea.
Vitamina K este implicat in sinteza factorilor de coagulare II, VII, IX,
X i a protrombinei de ctre celulele hepatice.
Carenele n vitamine diminu rezistena celulelor i provoac leziuni
grave n celule: anemii, inflamaii, degenerescene.

Aminele biogene

Aminele biogene sunt considerate mesageri locali, eliberai de celule

unice cu funcii endocrine, care acioneaz simultan cu mesagerii generali.
Sunt derivai ai unor acizi aminai, din care rezult prin decarboxilare.
Mediaz numeroase procese chimice celulare prin metilare, acetilare,
oxidare, conjugare. Cele mai cunoscute sunt:
- adrenalina i noradrenalina (catecolamine) sintetizate de celulele
medulosuprarenaliene. Au mai fost identificate i n SNC. ndeplinesc
multiple funcii:
- sunt mediatori chimici;
- regleaz tensiunea arterial;
- au rol n metabolismul i transportul grsimilor;
- influeneaz glicoliza i activeaz fosforilarea hepatic.
- serotonina (5 hidroxitriptonina) este prezent n celulele cromafine
din peretele gastro-intestinal, celulele epiteliului canalelor biliare i
pancreatice, epiteliul bursei Fabricius, timus (pesti,reptile), epiteliul prostatei,
uroteliu, n granulele mastocitelor i PMN bazofile. Este vasoconstrictor, n
toate ocaziile fiind asociat cu ATP-ul.
- dopamina - mediator chimic identificat n sistemul nervos;
- histamina este vasodilatator puternic, cu prezen semnalat n
plasm, granulaiile PMN bazofile i ale mastocitelor, n special n
mastocitele din mucoasa gastric la mamifer, asigurnd histaminemia
gastric n secreia i eliberarea HCl; n mastocitele din vecintatea
capilarelor, n corelaie cu rolul vasodilatator, ca i cele din derm.
n dinamica vascular, histamina i serotonina acioneaz antagonic.

19
 Pigmenii

Pigmenii sunt substane chimice variate, colorate natural, cu origine

endo- i exocelular. Sunt clasificai n: carotenoizi, cromolipoizi, melanici, cu
nucleu tetrapirolic.
Pigmenii carotenoizi sunt precursori ai vitaminelor A i E, prezeni n
celulele esutului adipos al cabalinelor (lipocromii), n structura iodopsinei i
rodopsinei, (carotenoproteine cu implicaii n chimia vederii), n celulele
corpului galben al ovarului de mamifer (luteina).
Pigmenii cromolipoizi, de culoare brun sau neagr, se ntlnesc la
mamifere n neuroni, hepatocite, celulele din subzona reticulat a
corticosuprarenalei, celulele Leydig, celulele miocardice. Din aceast grup
fac parte lipofuscinele, lipopigmeni derivai din precursori lipidici. Lipofuscina
este considerat pigmentul celular de uzur, cu aspectul unor granule de
culoare galben-brun, asociate cu lizozomii.
Pigmenii melanici, sub form de granule, sunt elaborai de
melanoblaste i melanofore, celulele pigmentare ale irisului, coroidei,
plexurile coroidiene i celulele retinei, melanocitele din derm. Melanoblastele
elaboreaz pigment n stadiul embrionar, iar melanoforele din derm pe
ntreaga perioad ontogenic a individului. Pigmentul melanic este infuzat
printr-un pseudopod de melanoforele din derm n celulele epidermei pe care
o coloreaz. De asemenea, coloreaz prul, penele, alte fanere. Rolul
pigmentului este de a proteja organismul prin absorbia radiaiilor,
declannd vasodilataia cutanat.
Pigmenii cu nucleu tetrazolic sunt ntlnii n: hemoglobin,
mioglobin, hemosiderin (evident n splenocite i n celulele SRH din
mduva hematogen).

Concepte i noiuni de reinut

Fizico-chimic, celula este un complex molecular heterogen,

transparent, elastic, incolor i moale, cu vscozitate, refringen, greutate
specific i tensiune superficial mai mari dect ale apei, care coaguleaz
prin cldur i i schimb starea de agregare. Celula prezint
contractibilitate, excitabilitate, motilitate i pH-ul aproximativ neutru.
n celul au fost identificate cca. 60 din totalul elementelor
nregistrate n tabelul Mendeleev, care intr n constituia
macromoleculelor organice. Acestea au fost mprite n: elemente majore
sau biogene (C, H, O, N), elemente puin abundente: S, P, Cl, Na, K, Mg, Ca
i oligoelemente: Fe, Cu, Co, Mn, I, F, Mb.
Coninutul celulelor n ap este influenat de vrst, tipul de
celul i activitatea acesteia. Astfel, n celulele tinere, cele care secret,
cele n diviziune, neuroni, coninutul n ap este mare (80-95%). n schimb, n
celulele cu metabolism redus (ex. celulele n repaus, mbtrnite,
osoase),coninutul este redus (ex. 30% n celula osoas).
Apa are rol de solvent, favoriznd disocierea electrolitic,
constituie mediul de dispersie pentru sistemele coloidale celulare;
asigur transportul i eliminarea produilor de elaborare, din celul, n
20
mediul extracelular; asigur micarea organitelor i a moleculelor n
celule; este indispensabil metabolismului celular.
Cationul majoritar din mediul extracelular este Na+, iar din mediul
intracelular este K+. Micarea celor doi ioni de pe o fa pe alta,
determin polaritatea electric a membranei celulare.
Compuii minerali asigur buna funcionare a celulelor prin:
meninerea echilibrului acido-bazic, a presiunii osmotice, a strii de hidratare
i pH-ului celulelor; ca i cofactori influeneaz activitatea enzimelor celulare;
asigur polaritatea membranelor (Na+, K+), creterea i dezvoltarea celulelor,
diviziunea, funciile specifice ale mitocondriilor, ribozomilor (Ca 2+; Mg2+)
nucleului (Fe2-; Ca2+); integritatea cromozomilor (Ca2+); influeneaz
excitabilitatea, contractilitatea i vscozitatea citoplasmei;
Substanele organice sunt reprezentate prin glucide, lipide,
proteine, la care se adaug acizii nucleici.
Monozaharidele cu rol deosebit n structura celulei sunt: D (-) riboza
i 2 dezoxiriboza (pentoze), componente ale nucleotidelor acizilor
nucleici i D-glucoza (hexoz), cel mai important furnizor de energie n
celul.
Glicogenul (polimer al glucozei) reprezint o adaptare avantajoas
pentru depozitarea glucozei n celule.

Glicogenul exist n cantiti variabile n numeroase tipuri de celule,

variaii determinate de alimentaie, repausul sau activitatea celulelor,
influene hormonale, concentraia glucozei n snge.
Lipidele sunt importante prin rolul pe care l au n formarea
membranelor celulare (colesterolul, fosfolipidele, gangliozidele), a
depozitelor de rezerv cu rol energogenezic, sau constituite n esut
adipos, ca substrat pentru formarea hormonilor steroizi (sexuali
corticosuprarenalieni) i a prostaglandinelor.
Macromoleculele proteice rezult prin polimerizarea
aminoacizilor.
Proteinele simple sunt formate numai din aminoacizi. Sunt
reprezentate de: albumine, globuline, histone, protamine i scleroproteine.
Proteinele complexe sunt alctuite proteine simple, de care se leag,
mai puternic sau mai slab, componenta neproteic (gruparea prostetic),
reprezentat printr-o substan organic sau anorganic, care mrete
variabilitatea structural i funcional a proteinei.

ntrebri de autoevaluare

1.Care sunt caracteristicile morfofunctionale ale celulelor procariote?

2.Care este mecanismul prin care celulele procariote isi obtin energia sub
forma de ATP?
3.Cum s-au adaptat bacteriile la atmofera din ce in ce mai bogata in oxigen?
4.Care sunt caracteristicile morfofunctionale ale celulelor eucariote?
5.Ce rol au mitocondriile in celulele eucariote?
6.Care sunt modalitatile de diviziune a celulelor eucariote?
21
 UNITATEA DE NVARE 3

SISTEMELE MEMBRANARE CELULARE. ORGANIZAREA

MORFOLOGIC I CHIMIC A MEMBRANELOR

Cuvinte cheie: glicolema, plasmalema, schelet membranar, bistrat

lipidic, proteine

Rezumat
Sistemul membranar celular este constituit din membrana celulei,
membrana nucleului i endomembranele care limiteaz cavitile polimorfe
ale organitelor vacuolare. Sistemul este ntregit de biomembranele cu funcii
de protecie precum i de cele cu funcii specifice: teaca de mielin; discurile
suprapuse ale celulelor cu conuri i bastonae, membranele bazale, bariera
digestiv, respiratorie, renal, hematoencefalic, sarcolema, placenta etc.
Baza morfologic a membranelor celulare o constituie plasmalema limitat
spre exterior de glicocalix, iar spre interior de scheletul membranar. Din
punct de vedere chimic, toate membranele biologice, incluznd membrana
plasmatic i endomembranele, au o structur general comun, fiind
constituite din proteine i lipide asamblate ntre ele prin legturi necovalente.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 2 ore

Toate tipurile de celule eucariote animale posed membrane

organizate morfochimic n formaiuni trilaminate lipoproteice, care, n
totalitatea lor, formeaz sistemul membranar celular, cu structur comun.
Conceptul de sistem membranar a fost enunat de Robertson (1970),
conform cruia membranele celulare sunt unitare prin structura trilaminat
lipoproteic. Sistemul membranar celular este constituit din: membrana
celulei, membrana nucleului i endomembranele care limiteaz cavitile
polimorfe ale organitelor vacuolare. Sistemul este ntregit de biomembranele
cu funcii de protecie precum i de cele cu funcii specifice: teaca de mielin;
discurile suprapuse ale celulelor cu conuri i bastonae, membranele bazale,
bariera digestiv, respiratorie, renal, hematoencefalic, sarcolema, placenta
etc.
Membranele compartimenteaz celula n citoplasm i nucleu, iar prin
organite, o compartimenteaz n teritorii cu funcii specifice, ca de ex: sinteza
de proteine de export i lipide (n reticulul endoplasmatic), sinteza de glucide
(n complexul Golgi), energogeneza (n mitocondrii), digestia celular (n
lizozomi). De asemenea, membranele controleaz fluxul de informaie ntre
celule i mediul extracelular, conin receptorii specifici pentru stimulii chimici
22
intra- i extracelulari, sufer modificri morfochimice provocate de factori
fiziologici sau patologici.
Toate membranele biologice, incluznd membrana plasmatic i
endomembranele, au o structur general comun: ele sunt constituite din
proteine i lipide asamblate ntre ele prin legturi necovalente.

Organizarea morfologic a membranelor

Periferia celulelor eucariote este acoperit cu o pelicul subire i

continu, care delimiteaz compartimentul citoplasmatic, controleaz
schimburile celulei cu mediul extracelular, se comport ca un sistem de
recepie-transducie, constituie substratul adezivitii i imunitii celulare.
Baza morfologic a membranelor celulare o constituie plasmalema. n
membrana celulei, aceasta este limitat spre exterior de glicocalix, iar spre
interior de scheletul membranar.
Unele dintre membrane sunt duble (ex. membrana nucleului,
membrana mitocondriilor, membranele unor lizozomi), iar altele sunt simple
(membrana reticulului endoplasmatic, complexului Golgi, a unor lizozomi).
Existena membranei celulare vegetale a fost semnalat n sec. XX de
Pffeifer i De Vries, iar a celulei animale, de Danielli (1940).
Infrastructura i structura leptonic a membranei celulare a fost
abordat n sec. XX prin utilizarea tehnicilor de vrf (msurtori de tensiune
interfacial, rezonana magnetic nuclear, rezonana electronic de spin,
criofracturarea etc.), pe baza crora s-au formulat mai multe modele de
organizare a membranei, modelul cel mai acceptat fiind cel n "mozaic
fluid"emis de Singer-Nicholson (1972) (fig. 3). Conform acestui model,
proteinele integrate n membran sunt implantate n stratul dublu lipidic, n
care se pot deplasa lateral, se pot roti n jurul axei longitudinale, sau pot
strbate stratul dublu lipidic de pe o fa pe alta.
Glicolema (glicocalixul sau stratul pufos) are aspectul unor filamente
lungi, orientate radiar pe versantul extern al plasmalemei, formate din
gruprile glucidice ale glicolipidelor i glicoproteinelor membranare, peste
care se suprapun glicozaminoglicanii i proteoglicanii secretai de celulele
matricei extracelulare, absorbii pe suprafaa ei. Glicolema lipsete la polul
bazal al celulelor epiteliale, fiind nlocuit cu membrana bazal. n schimb,
este foarte bine dezvoltat la suprafaa microvililor celulelor absorbante, la
suprafaa leucocitelor, celulelor Schwann, pe lamina extern a celulelor
musculare, celulelor conjunctive etc.
Monozaharidele frecvent ntlnite n structura glicoproteinelor i
glicolipidelor membranare sunt galactoza, manoza, glucoza, galactozamina
i acidul sialic. Resturile de acid sialic se afl la captul lanurilor
oligozaharidice i confer ncrctura ionic negativ a suprafeei celulelor
eucariote.
Glicolema ndeplinete urmtoarele funcii:
- asigur adezivitatea celulelor. Absena glicolemei reduce
permeabilitatea i creeaz rezisten electric mare, care faciliteaz
desprinderea celulelor din angrenaj;

23
 - confer individualitate i specificitate celulelor, deoarece
glicoproteinele sunt specifice nu numai speciei ci i tipului de celul. De
exemplu, grupele sangvine umane A, B, O, etc. sunt determinate de gruprile
glucidice terminale aflate pe glicoproteinele i glicolipidele din membrana
eritrocitelor;
- este depozit de cationi de Ca2+ pentru citoplasm i matricea
extracelular;
- conine gruprile glucidice ale receptorilor pentru hormoni,
neurotransmitori, toxine, medicamente;
- are funcii imunologice
Plasmalema este formaiunea trilaminat lipoproteic, constituit din
dou foie proteice extreme, mai subiri i mai dense la fluxul de electroni i o
foi mijlocie, mai groas, mai transparent la fluxul de electroni, format
dintr-un strat lipidic bimolecular. Stratul lipidic are structur amfipatic
(amfifil), n care moleculele de lipide se dispun pe dou rnduri, fiecare
molecul lipidic prezentnd un pol hidrofil - orientat spre proteine i un pol
hidrofob orientat spre polul hidrofob al moleculei de lipid congener. Aceast
structur asigur controlul selectiv al permeabilitii.
Scheletul membranei este constituit din microfilamente proteice, care
se ntretaie i formeaz o reea i din proteine globulare situate la punctele
de ntretiere, legturile i gradul de polimerizare fiind mediate de enzime
reglatoare.
Rolul scheletului membranar:
- confer flexibilitate i rezisten membranei celulare;
- are rol de ecran de recepie-transmisie al mesagerilor intracelulari.
Membrana celulei asigur: transportul transmembranar, adezivitatea,
imunitatea, recepia i manifest potenial electric de suprafa, cu sarcini (+)
pe faa extern i (-) pe faa intern.
Pentru asigurarea schimburilor permanente cu mediul i ndeplinirea
unor funcii speciale (ex: absorbie, micare etc.), suprafaa unor celule
prezint diferenieri structurale particulare, de tipul expansiunilor membrano-
citoplasmatice (vluri, membrane ondulante, pseudopode, cili, flageli,
tonofibrile), unele ordonate i permanente (cilii, flagelii, microvilii) iar altele
fr stabilitate.

Fig. 3. Reprezentarea schematic a structurii

moleculare a membranei celulare modelul n
mozaic fluid
(Mossiman, W. i colab., 1990)

24
 Organizarea chimic a membranelor celulare

Din punct de vedere chimic, membranele celulare sunt constituite n

principal din lipide i proteine, de care sunt ataate resturi glucidice.
Proporia de participare a compuilor chimici n structura diferitelor
membrane difer n funcie de rolul membranelor. Astfel, teaca de mielin,
care este prototipul de membran cu rol de barier, conine mai multe lipide
(cca. 75%) i mai puine proteine. Barierele cu funcii enzimatice
(mitocondriile, membranele bacteriilor) i cele care asigur funcii metabolice
complexe, conin mai multe proteine. n general, proporia lipidelor i a
proteinelor din structura membranelor este egal (50:50).

Lipidele

Principalele tipuri de lipide care intr n alctuirea membranei sunt

fosfolipidele, colesterolul i glicolipidele.
Toate cele trei categorii de lipide sunt molecule amfipatice sau
amfifile, avnd un cap (pol) hidrofil, polar i o coad hidrofob, nepolar (fig.
4a). Coada hidrofob este reprezentat de cele dou lanuri hidrocarbonate
ale acizilor grai. Aceast proprietate este extrem de important deoarece, n
mediu apos, asigur autoasamblarea moleculelor n structuri ordonate,
micelii, forma cea mai stabil fiind bistratul lipidic din structura membranelor
celulare.
Fosfolipidele sunt prezente n membrana celular, nucleolem i n
membrana organitelor vacuolare. Sunt reprezentate prin fosfogliceride i
sfingolipide.
Fosfogliceridele sunt constituite dintr-o molecul de glicerol, la care
dou grupri hidroxil sunt esterificate cu acizi grai, cu cca. 14-24 atomi de
carbon. Lanurile de acizi grai constituie poriunea hidrofob a moleculei
(nepolar), iar cea de-a 3-a grupare hidroxil a glicerolului, ocupat cu o
grupare chimic polar alctuit dintr-un rest de acid fosforic (fig.4a) la care
se poate lega colina, etanolamina, serina, inozitolul, alctuiete poriunea
hidrofil a moleculei. Rezult astfel fosfogliceride ca: fosfatidilcolina,
fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina, fosfatidilinozitolul (fig. 4b).
Sfingolipidele sunt reprezentate de sfingomielina din structura tecii de
mielin, avnd la baz sfingozina, un aminoalcool cu lan lung de atomi de
carbon de care se leag prin legtur amidic (-CO-NH) un acid gras
variabil. Spaial, sfingolipidele se aseamn cu fosfogliceridele, avnd o
grupare polar hidrofil i dou lanuri hidrocarbonate hidrofobe (fig. 4b).

25
 Fig. 4a. Reprezentarea schematic a unui fosfoglicerid

Fig. 4b. Principalele fosfolipide din membrana eritrocitelor umane

(Alberts, B. i colab., 1983)

Glicolipidele sunt ntlnite n membranele tuturor celulelor animale,

reprezentnd cca. 5% din totalul moleculelor lipidice ale monostratului lipidic
extern. La bacterii i plante, majoritatea glicolipidelor sunt derivate din
glicerol, n timp ce la animale, glicolipidele sunt derivate din sfingozin.
Astfel, ele au la baz tot structura sfingomielinei, dar n locul gruprii polare
prezint 1 15 radicali glucidici.
Dup tipul glucidelor din structura lor, glicolipidele sunt de dou tipuri:
glicolipide neutre i gangliozide.

26
 Glicolipidele neutre prezint n structura lor radicali glucidici neutri.
Dintre acestea, foarte cunoscut este galactocerebrozida, cu o structur
foarte simpl i care are numai galactoz n grupul su polar.
Galactocerebrozida este principalul glicolipid al mielinei, care formeaz teaca
axonilor neuronali. Mielina este constituit din straturi concentrice secretate
de glia Schwann i/sau oligodendroglia.
Gangliozidele sunt cele mai complexe glicolipide. Ele conin unul sau
mai multe resturi de acid sialic.
Gangliozidele sunt abundente n plasmalema neuronilor unde
reprezint aproximativ 6% din totalul lipidelor, dar sunt prezente i n alte
tipuri de membrane. Pn n prezent s-au identificat peste 30 de tipuri diferite
de gangliozide (ex. GM3, GM2, GM1, GD1; GT1, denumire care se refer la
numrul reziduurilor de acid sialic: mono-, di- sau tri-).
Glicolipide i glicoproteine umane importante sunt antigenele grupelor
sanguine.
Gangliozidele, prin acidul neuraminic (N acetil neuraminic; NANA),
sunt receptori de suprafa. Acidul neuraminic leag virusurile, bacteriile i
ionii i i transport intracelular. De exemplu, glicolipidul GM1 acioneaz ca
receptor pentru toxina bacterian a holerei. Legarea toxinei de acest
receptor, prezent pe suprafaa celulelor intestinale, determin creterea
intracelular a AMPc, ceea ce cauzeaz un masiv eflux de Na + i ap n
lumenul intestinal i n consecin diaree masiv. Cu toate c legarea
toxinelor bacteriene nu poate fi funcia normal a glicolipidelor, aceste
observaii sugereaz c ele pot avea rol de receptori i n semnalizarea
celular n condiii normale.
Colesterolul
Membrana plasmatic a celulelor eucariote conine o cantitate relativ
mare de colesterol, pn la cte o molecul pentru fiecare molecul de
fosfolipid. Ca i fosfolipidele, moleculele de colesterol sunt amfifile, polul
hidrofil fiind reprezentat de gruparea hidroxil a inelului sterolic, iar polul
hidrofob de lanul hidrocarbonat ataat la acest inel (fig. 5). Moleculele de
colesterol se dispun n bistratul lipidic printre moleculele fosfolipidice,
influennd fluiditatea membranei. Astfel, fiecare molecul de colesterol se
orienteaz n bistratul lipidic cu gruparea hidrofil n apropierea gruprii
polare a moleculelor fosfolipidice, iar inelul sterolic interacioneaz parial cu
lanurile de acizi grai, avnd tendina de a le imobiliza.
Prin aceast orientare, pe de o parte colesterolul mpiedic micarea
liber a poriunii externe a lanurilor de acizi grai din bistrat, iar pe de alt
parte ndeprteaz regiunile interne ale acestora i determin creterea
fluiditii bistratului n aceast zon.

27
 Fig. 5. Reprezentarea colesterolului: A. Formula chimic; B. Desen schematic,
C. interaciunea cu dou molecule fosfolipidice n monostrat
(Alberts, B. i colab., 1983)

Importana colesterolului n meninerea stabilitii mecanice a

membranei este sugerat de liniile celulare mutante animale, care nu sunt
capabile s sintetizeze colesterol. Asemenea celule se lizeaz rapid dac nu
se adaug colesterol n mediul lor de cultur. Colesterolul adugat este
ncorporat rapid n membrana plasmatic, stabiliznd astfel stratul bilipidic i
permite celulei s supravieuiasc.

Caracteristicile lipidelor membranare

Principalele caracteristici ale lipidelor membranare sunt:

autoasamblarea, fluiditatea i asimetria.
Datorit caracterului amfifil, moleculele lipidice manifest tendina de a
forma spontan bistraturi n mediu apos.
Experienele efectuate pe membrane artificiale relev c, n mediu
apos, moleculele lipidice se orienteaz n aa fel nct capetele lor hidrofile
s vin n contact cu apa. Astfel, ele pot forma micele sferice, cnd cozile lor
hidrofobe sunt orientate spre interior, sau pot forma bistraturi, n care cozile
hidrofobe sunt mpachetate ca un sandwich ntre polii hidrofili (fig. 6).

28
 Fig. 6. Reprezentarea moleculelor lipidice n mediu
apos (Alberts, B. i colab., 1983)

Autoasamblarea const n capacitatea fosfolipidelor i glicolipidelor de

a forma bistraturi n mediu apos.
Mai mult, bistraturile lipidice au tendina de a forma vezicule,
delimitnd spre interior compartimente apoase, implicate n procesele de
refacere i renoire a membranelor celulare. Datorit acestei proprieti s-au
putut obine membrane artificiale (bistraturi lipidice), care formeaz vezicule
sferice denumite liposomi, capsule farmacologice n care se pot ngloba
diferite substane cu efect terapeutic (ex. medicamente). Stabilitatea relativ
mare a membranei liposomale va proteja medicamentele de disiparea n
snge, urmnd ca ele s fie eliberate la int. Deoarece liposomii sunt
mrginii de o membran bistrat fosfolipidic, cu aceiai structur ca i a
membranelor biologice naturale, nu sunt toxici dac sunt administrai n
organism.
Fluiditatea este determinat n general de mobilitatea moleculelor
lipidice. Acestea prezint urmtoarele tipuri de micri:
1. Micri ale ntregii molecule(fig. 7):
a difuzie lateral n planul bistratului n care se afl. Lipidele i
schimb rapid locul cu moleculele nvecinate din acelai monostrat (de cca.
107ori / sec).
b. rotaie n jurul axului molecular; lanurile hidrocarbonice sunt
flexibile, cel mai mare grad de flexiune manifestndu-se spre centrul
bistratului, iar cel mai mic n zona adiacent grupului polar al capului hidrofil;
c. trecere dintr-un monostrat n altul (flip flop), micare care se
manifest foarte rar (cca. o dat la dou sptmni), sau chiar deloc.
2. Micrile din interiorul moleculei de fosfolipid (micri
intramoleculare):
a. Micrile de flexie ale atomilor de carbon din gruprile metilenice
CH2ale lanurilor de acizi grai (din ce n ce mai mobile spre centrul
bistratului lipidic i mai rigide spre gruparea polar);
b. Micrile atomilor din gruparea polar.
Gradul de fluiditate al membranei celulare este influenat de o serie de
factori ca:
gradul de saturare al acizilor grai: n membranele biologice exist o
mixtur de acizi grai saturai i nesaturai, care au rolul de a menine
fluiditatea la temperatura de 370C;
29
 lungimea lanurilor de carbon a acizilor grai: acizii grai cu lan lung
i nesaturat fac dificil mpachetarea strns a moleculelor n bistrat,
crescnd astfel fluiditatea;
- temperatur: la temperaturi mai mici dect temperatura de tranziie,
funciile membranelor sunt abolite datorit bistratului care trece din starea
lichid n starea de cristal rigid (gel);
coninutul n colesterol
Fluiditatea este o caracteristic important a membranelor, deoarece
bacteriile, drojdiile i alte organisme poikiloterme, a cror temperatur
fluctueaz o dat cu cea a mediului ambiant, i schimb compoziia n acizi
grai a membranelor lor plasmatice, astfel nct s menin o fluiditate relativ
constant.

Fig. 7. Diferitele tipuri de micri posibile

pentru moleculele fosfolipidice
din bistratul lipidic
(Alberts, B. i colab., 1983)

Asimetria (fig. 8) este determinat de compoziia lipidic diferit a

celor dou jumti ale bistratului. Astfel, n stratul extern predomin
moleculele lipidice care se termin n cholin ((CH3)3N+CH2CH2OH), lipidele
cu acizi grai saturai i glicolipidele. Acestea au un rol esenial n
determinarea asimetriei bistratului, datorit gruprilor glucidice expuse spre
faa extracelular a membranei, deci opus citosolului. Oligozaharidele din
structura gruprilor glucidice sunt de mai multe tipuri, iar poziia strategic pe
faa extern a celulei sugereaz posibila lor implicare n comunicrile
intercelulare i rolul de receptori.
n stratul intern predomin lipidele cu acizi grai nesaturai,
fosfolipidele care conin un grup amino primar terminal i cele ncrcate
negativ (ex. fosfatidilserina). n consecin, exist o diferen semnificativ de
sarcin electric ntre cele dou monostraturi.

Fig. 8. Reprezentarea schematic a asimetriei fosfolipidelor i glicolipidelor din

membrana eritrocitelor umane (Alberts, B. i colab., 1983)

Importana funcional a asimetriei rezid probabil n aceea c

determin orientarea proteinelor membranare, condiie esenial pentru
ndeplinirea funciilor acestora.

30
 Organizarea lipidelor membranare n stratul bimolecular condiioneaz
viteza de micare a diferitelor tipuri de molecule, n trecere prin membrane.
Astfel, unele substane trec foarte repede (alcoolul, gazele, eterul,
cloroformul), altele trec n lan (glucidele, acizii aminai, acizii grai), iar altele
sunt mpiedicate s treac (macromolecule de tipul proteinelor,
polizaharidelor, acizilor nucleici).

Proteinele membranare

Dei structura de baz a membranelor biologice o constituie lipidele,

majoritatea funciilor specifice sunt ndeplinite de proteine. Majoritatea
proteinelor membranare sunt enzime care asigur: schimbul permanent
dintre celule i mediu; permeabilitatea selectiv; difuziunea pasiv i
transportul activ. Enzimele reprezint substratul specificitii membranei
celulare. Ele pot fi distribuite total sau parial n membran, criteriu dup care
n membran exist zone active sau inactive. Prezena aceluiai tip de
enzim n acelai tip de membran, confer enzimei calitatea de marker n
identificarea chimic a membranei, important n studiul fragmentelor de
membran obinute prin ultracentrifugare difereniat, sau n studiul
preparatelor histoenzimologice. De asemenea, unele proteine membranare
ndeplinesc funcia de recepie celular, ele intrnd n structura receptorilor.
Enzimele i proteinele membranei sunt sintetizate fie n ribozomii liberi, fie n
cei ataai membranelor reticulului endoplasmatic.
n general, cantitatea i tipul proteinelor din structura membranei
reflect funciile acesteia. De exemplu, membrana mielinic, implicat n
izolarea axonilor neuronali, conine pn la cca. 25% proteine, membranele
implicate n convertirea energiei celulare (ex. membranele mitocondriilor i
cloroplastelor) au un coninut proteic de pn la 75%.
Mrimea moleculelor lipidice este foarte mic comparativ cu cea a
proteinelor astfel c, ntr-o membran n care proteinele sunt reprezentate n
proporie de 50%, exist cte o molecul proteic pentru fiecare 50 molecule
lipidice.
Proteinele membranare sunt clasificate din punct de vedere topografic
n:
- proteine periferice (extrinseci), ataate la exteriorul stratului bilipidic,
care interacioneaz cu gruprile polare prin fore slabe, electrostatice;
- proteine transmembranare (intrinseci sau integrale), care se inser
asimetric n stratul bilipidic prin interaciuni hidrofobe.
Aceste proteine transmembranare sunt amfipatice. Ele prezint regiuni
hidrofobe, care trec prin membran i interacioneaz cu cozile hidrofobe ale
moleculelor lipidice din interiorul bistratului i regiuni hidrofile, care sunt
expuse la ap pe ambele fee ale membranei.
Ca i fosfolipidele membranare i proteinele pot prezenta o serie de
micri n interiorul bistratului lipidic. Astfel, ele sunt capabile s se roteasc
n jurul unui ax perpendicular pe planul bistratului, s se deplaseze lateral
(difuzie lateral), ns nu sunt capabile s treac dintr-un monostrat n
cellalt (micare flip-flop). Coeficientul de difuzie lateral (D) al diferitelor
tipuri de proteine membranare este mult mai mic (cca. 5 x 10-9 cm2 / sec.

31
pn la 10-12 cm2 / sec.), n comparaie cu cel al fosfolipidelor (cca. 10 -8 cm2 /
sec.).

Fig.9. Reprezentarea schematic a proteinelor amfipatice

membranare inserate n stratul lipidic prin interaciuni
hidrofobe cu lanurile hidrocarbonice ale moleculelor
lipidice (Alberts, B. i colab., 1983)

Carbohidraii membranari

Toate celulele eucariote prezint pe suprafaa lor carbohidrai,

reprezentai n mare parte de lanurile laterale de oligozaharide, legate
covalent de proteinele membranare (glicoproteine) i ntr-o proporie mai
redus, legate de lipide (glicolipide). Proporia de participare a carbohidrailor
n structura membranelor variaz ntre 2 i 10%. La acestea se mai adaug
glicoproteinele i proteoglicanii secretai i adsorbii la suprafaa celulelor.
Dintre cele peste 100 de tipuri de monozaharide descoperite n natur, numai
9 tipuri se ntlnesc n structura glicoproteinelor i glicolipidelor membranare,
cele mai importante fiind: galactoza, manoza, fructoza, galactozamina,
glucozamina, glucoza i acidul sialic. Resturile de acid sialic se dispun la
captul terminal al lanurilor laterale de carbohidrai i confer ncrctura
electric negativ a suprafeei celulelor eucariote.Radicalii glucidici din
structura unor glicoproteine membranare sunt implicai n ancorarea i
orientarea proteinelor n membran i stabilizarea structurii acestora. De
asemenea, complexitatea oligozaharidelor din structura glicoproteinelor i
glicolipidelor, precum i aezarea lor n jumtatea extern a membranei
proieminnd la suprafaa celulei, sugereaz rolul lor n comunicrile
intercelulare i rolul de receptori.
Prezena glucidelor este semnalat n cantitate mare n membrana
celulei, unde constituie glicolema, iar n cantitate redus n membrana
reticulului endoplasmatic - faa luminal i n membrana nucleului - sub forma
glicoproteinelor.

Concepte i noiuni de reinut

Conceptul de sistem membranar a fost enunat de Robertson

(1970), conform cruia membranele celulare sunt unitare prin structura
trilaminat lipoproteic.
Sistemul membranar celular este constituit din: membrana celulei,
membrana nucleului i endomembranele care limiteaz cavitile polimorfe
ale organitelor vacuolare. Sistemul este ntregit de biomembranele cu funcii
de protecie precum i de cele cu funcii specifice: teaca de mielin; discurile

32
suprapuse ale celulelor cu conuri i bastonae, membranele bazale, bariera
digestiv, respiratorie, renal, hematoencefalic, sarcolema, placenta etc.
Baza morfologic a membranelor celulare o constituie plasmalema.
n membrana celulei, aceasta este limitat spre exterior de glicocalix, iar
spre interior de scheletul membranar.
Cel mai acceptat model de organizare al membranelor celulare este
modelul n "mozaic fluid"emis de Singer-Nicholson (1972). Conform acestui
model, proteinele integrate n membran sunt implantate n stratul dublu
lipidic, n care se pot deplasa lateral, se pot roti n jurul axei longitudinale,
sau pot strbate stratul dublu lipidic de pe o fa pe alta
Din punct de vedere chimic, membranele celulare sunt constituite n
principal din lipide i proteine, de care sunt ataate resturi glucidice.
Proporia de participare a compuilor chimici n structura diferitelor
membrane difer n funcie de rolul membranelor. n general, proporia
lipidelor i a proteinelor din structura membranelor este egal (50:50).
Principalele tipuri de lipide care intr n alctuirea membranei sunt
fosfolipidele, colesterolul i glicolipidele.
Toate cele trei categorii de lipide sunt molecule amfipatice sau
amfifile, avnd un cap (pol) hidrofil, polar i o coad hidrofob, nepolar.
Moleculele lipidice sunt aranjate ntr-un dublu strat continuu. Acest
strat bilipidic determin structura de baz a membranei i constituie o
barier relativ impermeabil pentru trecerea moleculelor hidrosolubile.
Moleculele proteice sunt nglobate n stratul bilipidic i mediaz
variatele funcii ale membranei. Ele sunt implicate n transportul specific al
moleculelor n sau din celul, catalizeaz reaciile asociate membranei,
realizeaz legturile structurale ntre citoscheletul celular i matricea
extracelular, au rol de receptori pentru recunoaterea i transducia
semnalelor chimice din mediul extracelular.
Toate membranele sunt structuri dinamice, fluide, deoarece multe
din moleculele lor lipidice i proteice au calitatea de a se deplasa n planul
membranei.
Membranele sunt, de asemenea, structuri asimetrice deoarece
compoziia n lipide i proteine a celor dou fee difer, reflectnd funciile
diferite efectuate pe cele dou suprafee.
Radicalii glucidici din structura unor glicoproteine membranare sunt
implicai n ancorarea i orientarea proteinelor n membran i stabilizarea
structurii acestora, n comunicrile intercelulare, dar au i rol de receptori.

ntrebri de autoevaluare

1. Descriei structura morfologic a membranelor celulare.

2. Care este cel mai acceptat model de organizare al
membranelor celulare?
3. Care este proporia de participare a lipidelor i proteinelor n
membran?
4. Care sunt principalele tipuri de molecule lipidice din structura
membranei celulare i ce caracteristici importante prezint acestea?
5. Cum sunt organizate proteinele membranare i care este
importana acestora n membran?
33
 UNITATEA DE NVARE 4

FUNCIA DE TRANSPORT A MEMBRANEI CELULARE

Cuvinte cheie: difuzie, proteine carrier, proteine canal, canale cu

poarta, ionofori, pompe ionice, ATP

Rezumat
Citomembranele, ca bariere interpuse ntre medii diferite, asigur
selectiv trecerile n ambele sensuri, permeabilitatea selectiv, permind
meninerea constant a mediului n compartimentele i subcompartimentele
celulei. Permeabilitatea se poate defini ca acea proprietate care permite
trecerea unor substane, fr distrugerea integritii membranei.
Transportul substanelor prin membranele celulare este grupat n:
transport direct sau cu ajutorul unor proteine de membran transportoare a
unor ioni sau a unor molecule mici de substane organice (ex. glucoza,
aminoacizii) i transport n mas realizat prin includerea n vezicule de
endocitoz generate de membrana celular, a unor macromolecule proteice
sau a altor molecule organice mari. n acest caz, transportul este nsoit de
distrugerea local i tranzitorie a integritii membranei (exo- i endocitoza).

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 3 ore

Transportul direct sau cu ajutorul unor proteine

Acest tip de transport poate fi:

- Transport pasiv, care se realizeaz fr consum de energie, de la un
gradient chimic sau electrochimic ridicat spre gradientul sczut i
- Transport activ, care se realizeaz mpotriva gradientului de
concentraie, utiliznd energia rezultat din hidroliza ATP ului sau energia
gradientelor chimice (sistemele antiport i simport) (incai, 1996).

Fig.10. Diferite tipuri de transport

membranar

34
 Transportul pasiv

Transportul pasiv se poate realiza prin difuzie simpl i facilitat.

a. Difuzia simpl. n acest tip de transport nu intervin proteine
membranare. El este limitat la gaze (N2, O2, CO2, NO), la molecule lipofile
(hormonii steroizi i tiroidieni, ureea, etanolul, glicerolul etc). Moleculele de
ap difuzeaz de asemenea foarte rapid prin bistratul lipidic, cu toate c nu
sunt solubile n lipide. Aceast rat de difuziune mare se presupune c s-ar
datora faptului c moleculele de ap sunt mici (18 da) i neutre electric.
b. Difuziunea facilitat se realizeaz prin:
- proteine cru i prin
- proteine canal.
Acest tip de transport este acceptat pentru trecerea unor molecule
solubile n ap ca: glucoza, nucleosidele, aminoacizii, ionii de H+, Na+, K+,
Ca2+ etc. Proteinele transportoare sunt capabile s preia anumite molecule
de pe o fa a membranei i s se deplaseze pe cealalt fa a acesteia
pentru a elibera molecula preluat (fig. 11a). Procesul prezint o specificitate
mare, fiecare protein transportoare permind transportul unui singur tip de
molecule, sau a unui grup foarte apropiat i se realizeaz cu o vitez mult
mai mare comparativ cu difuzia simpl.

Fig. 11 a. Reprezentarea schematic a

proteinelor carrier i a proteinelor canal
(Alberts, B., i colab., 1983)

Exemple de difuziune facilitat: transportul glucozei n hematii,

transportul aminoacizilor, transportul prin ionofori. Cel mai bine caracterizat
dintre transporturile pasive mediate este difuzia facilitat a glucozei n
eritrocitul uman.
Transportul glucozei n celule este specific, n transport fiind implicat
o protein-enzim denumit D glucozo-permeaza. Enzima leag glucoza pe
faa extern a membranei celulare i n acest fel i modific conformaia,
permind trecerea glucozei (ping-pong). Este interesant c glucoza, o dat
ptruns n celul, este fosforilat n glucozo-6 fosfat pe baza energiei
furnizat de ATP. n acest fel se menine concentraia sczut a formei libere
a glucozei, ceea ce permite intrarea sa continu n celul, forma fosforilat
nefiind capabil s prseasc celula. Aceasta va intra n ciclul glicolitic i
prin degradare va furniza energie (Tarba, C., 1996).

Fig.11b. Modelul ipotetic al

transportului facilitat al glucozei
(Alberts, B., i colab., 1983)

35
 Cercetri recente susin c n membrana celulelor exist proteine
transportoare care formeaz canale prin care pot trece att ionii, ct i
molecule diverse.
Proteinele canal sunt structuri proteice specializate, cu nalt
selectivitate, care strbat membrana pe toat grosimea ei i creeaz ci de
trecere pentru ioni (Na+, K+, Ca2+, Cl-) n ambele sensuri, n funcie de
gradientul electrochimic. Eficacitatea transportului prin canale este deosebit
de mare, capacitatea de transport a lor fiind de aproximativ 10 7 108
molecule/sec, iar viteza de transport a ionilor de 100 de ori mai mare
comparativ cu proteinele carrier.
n membrana plasmatic a tuturor celulelor animale, cele mai
frecvente sunt canalele de pierdere a ionilor de K +, implicate mpreun cu
pompa de Na+ - K+ n meninerea potenialului de membran.
Exist anumite proteine canal a cror deschidere tranzitorie este
realizat de aciunea unui anumit ligand, de o modificare a potenialului
electric, sau de un stimul mecanic. Ele se numesc canale cu poart. Astfel,
este cunoscut canalul pentru K+, care se deschide atunci cnd n citosol
crete concentraia n Ca2+. De asemenea, n neuroni, la nivelul sinapselor
exist canale pentru Na+ i K+, care se deschid sub aciunea acetilcolinei. n
funcie de modul n care este reglat deschiderea lor, canalele cu poart se
clasific n:
- canale cu poart comandate (operate) de voltaj (voltage gated
channels), a cror deschidere sau nchidere este realizat de o modificare a
potenialului de membran. n aceast categorie intr canalele de Na +, K+ i
Ca2+ din membrana axonal;
- canale cu poart comandate de un stimul mecanic (ex. factori fizici,
cum ar fi presiunea osmotic, factori mecanici). Astfel de receptori se gsesc
la nivelul polului apical al celulelor pseudosenzoriale din urechea intern,
sensibile la oscilaiile undelor sonore sau la deplasrile lente i de durat,
cauzate de gravitaie sau acceleraie; osmoreceptorii din creier;
- canale cu poart comandate de ligand, care rspund la diveri
stimuli chimici extracelulari (semnale chimice) ex. neurotransmitori,
hormoni etc sau intracelulari (ionii de Ca2+, nucleotide GMPc). Cel mai
cunoscut este receptorul pentru acetilcolin, care n urma legrii acestui
neurotransmitor, se deschide i permite trecerea cationilor monovaleni prin
membrana postsinaptic a jonciunii neuromusculare.
La nivelul jonciunii neuromusculare, impulsul nervos, care
provoac contracia muchiului, determin deschiderea a cel puin patru
canale diferite pe secund (fig 12).
Procesul este iniiat n momentul n care impulsul nervos determin
depolarizarea plasmalemei arborizaiei terminale a axonului, deschiznd
canalul pentru Ca2+ (cu comand de voltaj). Creterea concentraiei calciului
stimuleaz descrcarea veziculelor de acetilcolin.
Acetilcolina eliberat se leag de receptorul specific din plasmalema
celulei musculare, care este un canal cu poart cu comand de ligand,
permeabil pentru Na+ i K+ i care se deschide tranzitoriu, prin legarea
acetilcolinei. Acesta va permite difuziunea de Na + spre interior i de K+ spre
exterior, conform gradientelor de concentraie i, n consecin, depolarizarea
membranei celulei. Atunci cnd depolarizarea atinge -45 mV, ea

36
declaneaz deschiderea unui tip de canal secundar - canalul pentru Na+
dependent de voltaj ceea ce antreneaz o intrare suplimentar de Na + n
celul. Potenialul membranar este astfel adus la +50 mV i este potenialul
de aciune care se propag pe membrana post-sinaptic , deci pe ntreaga
suprafa a sarcolemei.
Potenialul de aciune generat determin deschiderea canalelor pentru
2+
Ca din membrana reticulului endoplasmatic al celulei musculare i, prin
urmare, ionii de calciu ajung n citosol, concentraia lor mare determinnd
interaciunea actinei cu miozina i deci contracia miofibrilelor.

Fig. 12. Jonciunea neuro-muscular

(http://scientopia.org/blogs/scicurious/2010/11/17/cure-your-aging-synapses-with-this-new-
diet-and-exercise-regimen/)

Proteinele canal asigur ns o permeabilitate selectiv, unii ioni

putnd trece, iar alii nu.
Gradientul de concentraie al ionilor i permeabilitatea selectiv a
membranelor creeaz o diferen de potenial ntre interiorul i exteriorul
celulei astfel c, la interior membranele celulare prezint sarcini negative
datorit abundenei anionilor, iar la exterior prezint sarcini pozitive prin
predominarea cationilor.
Gradientul ionic i potenialul electric al membranelor celulare este
esenial pentru multe fenomene biologice astfel c:
- variaia ionilor de Na+ i K+ n neuroni genereaz impulsul nervos;
- creterea concentraiei extracelulare a ionilor de Na+ faciliteaz
transportul unor aminoacizi n celule;
- creterea concentraiei intracelulare a Ca2+ determin contracia
muscular sau secreia de enzime n celulele exocrine (incai, 1997).
Transportul mediat de ionofori
Ionoforii sunt molecule mici, hidrofobe, care se dizolv n bistratul
lipidic i cresc permeabilitatea acestuia pentru ioni specifici. Majoritatea sunt
polipeptide din categoria antibioticelor, acionnd sub dou forme:
- crui ionici mobili;
- crui formatori de canale.
37
 Ambele tipuri acioneaz prin protejarea ionilor transportai astfel nct
acetia s poat traversa interiorul hidrofobic al bistratului lipidic. Deoarece
ele nu utilizeaz energie, permit micarea ionilor doar n sensul gradientului
de concentraie.
Cel mai cunoscut n acest sens este antibioticul valinomicina, care
este un exemplu de protein cru (cru ionic mobil). Ea este un polimer
(dodecapeptid) de forma unui inel, care crete permeabilitatea membranei
pentru K+. Inelul are un exterior hidrofobic (format din lanuri laterale de
valin), iar spre interior prezint 6 sau 8 atomi de oxigen. Astfel se constituie
valinomicina, care transport ionul de K+ n sensul gradientului de
concentraie, ea preia ionul de K+ de pe o parte a membranei, difuzeaz prin
bistrat i apoi l elibereaz pe cealalt fa.
Ionoforul A23187 este un alt exemplu de cru ionic mobil, ns
acesta crete permeabilitatea membranei la cationi bivaleni, ca de
exemplu Ca2+ i Mg2+.

Fig. 13. Reprezentarea schematic a moleculei de

valinomicin
(Alberts, B., i colab., 1983)

Gramicidina A este un ionofor formator de canal (protein canal

ionic). Ea este un peptid liniar, format din 15 aminoacizi, cu lanuri
hidrofobice laterale. Prin asocierea a dou astfel de molecule se formeaz
canalul transmembranar, care permite trecerea selectiv a cationilor
monovaleni i n primul rnd a protonilor (H+) n sensul gradientului de
concentraie.
Aceti dimeri sunt instabili, ei se formeaz i se disociaz constant
astfel c, timpul mediu n care un asemenea canal este deschis este de
aproximativ 1 sec. Avnd un gradient electrochimic mare, gramicidina A
poate transporta aproximativ 2 x 107cationi / canal deschis / sec., deci o
cantitate de cca. 1000 de ori mai mare dect cea pe care o poate transporta
o singur molecul cru mobil, n acelai timp.

Transportul activ

Transportul activ este de dou tipuri: primar i secundar.

Transportul activ primar se realizeaz cu ajutorul unor protein
enzime specifice membranare, care folosesc n transport energia rezultat
prin hidroliza ATP ului. Deoarece, pentru eliberarea energiei, proteinele
care realizeaz acest transport trebuie s fie capabile s scindeze molecula
de ATP n ADP i Pa (fosfat anorganic), ele se numesc ATP-aze sau pompe
ionice, cu o capacitate de transport activ de 102 104 molecule/sec.

38
 Transportul activ secundar utilizeaz energia gradientelor chimice
(ex. H+ sau Na+). Acest tip de transport funcioneaz pe sistemul co-transport
de tipul simport sau antiport.

Transportul activ primar

Dup originea i funcia lor, ATP-azele de transport se mpart n trei

clase principale, care cupleaz hidroliza ATP cu transportul ionilor mpotriva
gradientului electrochimic: ATP-aze de tip P, ATP-aze de tip F i de tip V
(vacuolare).
ATP azele de tip P sunt polipeptide transmembranare, care se
fosforileaz n timpul transportului. Prezint dou stri conformaionale
interschimbabile: una cu situsul de legare a ionului accesibil spre citoplasm
i care are mare afinitate pentru ATP, iar cealalt este forma fosforilat, cu
situsul de legare/eliberare expus spre exterior. Din aceast categorie fac
parte:
- Na+ - K+ - ATP aza (care transport ionii de Na+ spre exterior i
ionii de K+ spre interior, mpotriva gradientului de concentraie);
- H+ - K+ - ATP-aza din membrana apical a celulelor oxintice din
mucoasa gastric;
- Ca2+ - ATP aza din plasmalema celulelor (care transport Ca2+ n
afara celulei) i Ca2+ - ATP azele din membranele reticulului
endoplasmatic, care transport Ca2+ din citosol n interiorul organitului.
ATP azele de tip F sunt prezente n membrana bacteriilor, n
membrana intern a mitocondriilor i n membrana tilacoid a cloroplastelor,
avnd rol de sintez a ATP din ADP i fosfat (ATP sintetaze).
ATP azele de tip V (vacuolare) sunt prezente n diferite
compartimente interne de tipul vacuolelor, lizozomilor etc. i au rolul de a
realiza pH-ul necesar diferitelor aciuni enzimatice. Dei hidrolizeaz ATP-ul,
nu se fosforileaz n timpul transportului.
n ce privete mecanismul de transport al substanelor, se cunosc
trei sisteme de transport:
- sistemul uniport, n care proteinenzima membran transport un
singur tip de ion mpotriva gradientului de concentraie (ex. Ca 2+ - ATP aza;
H+ - ATP aza);
- sistemul antiport, n care proteinenzima de membran transport
dou tipuri de ioni mpotriva gradientului de concentraie, n sensuri diferite
(ex. Na+ - K+ - ATP aza; H+ - K+ - ATP - aza);
- sistemul simport, n care proteina transport dou substane n
acelai sens (ex. pompele protonice).

Fig. 14. Schema de funcionare a proteinelor

carrier uniporte, simporte i antiporte
(Alberts, B., i colab., 1983)

39
 ATP-azele din clasa P

Pompa de Na+ - K+ (Na+ - K+ - ATP aza)

Membrana plasmatic a tuturor celulelor este polarizat, valoarea

potenialului de membran fiind cuprins ntre 20 mV i 200 mV, n
funcie de tipul celulei i de specie. Faa extern a celulei este ncrcat
pozitiv, iar faa intern este ncrcat negativ.
Pentru majoritatea celulelor mamiferelor, concentraia intracelular a
+
K este de 120 160 nmoli, iar cea extracelular este de cca 4 nmoli; pentru
Na+ concentraia intracelular este de cca 10 nmoli, iar cea extracelular
este de cca. 150 nmoli. Aceste diferene de concentraie ionic sunt
meninute printr-o ATP-az a membranei plasmatice, care este pompa de
Na+ - K+. Ea opereaz dup un mecanism antiport pompnd activ ionii de
Na+ din interior spre exteriorul celulei, simultan cu introducerea ionilor de K +
n celul. Transportul ionilor de Na+ i K+ este ntotdeauna cuplat cu hidroliza
ATP, pentru transferul celor doi ioni mpotriva gradientului lor electrochimic
(transport activ primar).
Deoarece, prin hidroliza unei molecule de ATP, Na+ - K+ - ATP aza
scoate 3 ioni de Na+ i introduce 2 ioni de K+ asigurnd asimetria ionic, ea
este electrogen, ceea ce nseamn c tinde s genereze un potenial
electric de membran, crend interiorul negativ, iar exteriorul pozitiv.
Mecanismul de funcionare al ATP azei de Na+ - K+ este de tip ping-
pong, astfel c, ea pompeaz ionii ca urmare a unor schimbri
conformaionale ciclice. Astfel, legarea Na+ la situsul specific i legarea unui
radical fosfat obinut prin hidroliza ATP, induc schimbarea conformaional i
eliberarea Na+ la exterior.
n aceast conformaie devine activ situsul de legare a K+ din exterior,
ceea ce duce la pierderea gruprii fosfat. Pierderea fosfatului readuce
molecula la conformaia iniial i, n consecin, determin eliberarea K + n
interiorul celulei, iar ciclul rencepe. Este astfel verosimil faptul c ansamblul
hidroliz/fosforilare/defosorilare este necesar n transportul ionilor. Pentru
fiecare molecul de ATP hidrolizat se pompeaz spre exterior 3Na + i 2K+
spre interior. n acest fel, proteina asigur potenialul de membran,
eliminnd n afara celulei sarcini pozitive n exces. Na+-K+ - ATP-aza poate
scinda cca. 100 molecule de ATP / secund.

40
 Fig.15. Modelul schematic de funcionare al pompei de sodiu i potasiu

Gradientul de Na+/K+ generat de o parte i de alta a membranei este

esenial pentru funcionarea celulei. El este implicat n diverse funcii precum:
- reglarea pH-ului celular;
- reglarea volumului celular;
- transportul nutrimentelor de tipul glucozei i aminoacizilor;
- transmisia semnalelor n sistemul nervos (potenialul de aciune)

Pompa de H+ - K+ (H+ - K+ - ATP-aza)

Pompa de H+ - K+ intervine n reglarea pH-ului gastric i este similar

din punct de vedere structural cu Na+ - K+ - ATP-aza, funcionnd, ca i
aceasta, dup sistemul antiport. Ea este semnalat n membrana apical a
celulelor oxintice (parietale) din epiteliul mucoasei gastrice, celule care
secret HCl al sucului gastric. Se tie c, stomacul mamiferelor conine o
soluie de 0,1M acid clorhidric (H+Cl-) i c acest mediu acid denatureaz
proteinele ingerate, facilitnd digestia lor de ctre enzimele proteolitice, cum
este pepsina (activ la un pH acid). pH-ul mic din lumenul gastric (1,5) este
destinat de asemenea pentru eliminarea microorganismelor patogene care
intr n stomac o dat cu hrana. Aceast pomp genereaz un puternic
gradient de concentraie al protonilor: concentraia de H+ este de 106 ori mai
mare n lumenul stomacal dect n citosolul celulei. Hidroliza ATP-ului este
activat de ionii de H+ de pe faa citoplasmatic i de ionii de K+ de pe faa
luminal a membranei. Astfel, la hidroliza a 1 mol ATP, enzima export doi
ioni de H+ i introduce un ion de K+ n celul . Ieirea H+ este nsoit de
transportul pasiv al ionului de Cl- i are ca rezultat formarea HCl n lumenul
gastric i, prin urmare, realizarea unui pH-1, fa de pH-7 din citosol. ns,
prin ieirea H+, n celulele parietale crete concentraia n OH-, ceea ce ar

41
determina o alcalinizare accentuat a citosolului. Pentru a asigura pH ul
neutru, excesul de OH- se combin cu CO2, formnd HCO3-, anion care este
transportat extracelular prin membrana bazolateral, concomitent cu
ptrunderea Cl-, prin sistemul antiport Cl-HCO3-.

Fig. 16. Reprezentarea

schematic a mecanismului de
secreie a HCl de ctre celulele
oxintice din mucoasa gastric

Pompa de Ca2+ (Ca2+ - ATP aza)

Celulele animale menin o concentraie citosolic a calciului foarte

sczut (10-7 M), comparativ cu cea extracelular (10-3M). Ionii de Ca2+ sunt
implicai n cile de semnalizare care determin contracia muscular, n
exocitoz i n activarea diferitelor tipuri celulare n rspunsul lor la diferiii
stimuli externi (ex. limfocitele T).
n reglarea concentraiei Ca2+ intracelular liber intervin pe termen
scurt dou organite: mitocondria i RE. Aceste dou organite au ns o
capacitate limitat, astfel c, n acest proces intervine pompa de Ca 2+,
protein-enzim cu masa molecular de cca. 110 kDa situat n plasmalem
i are rolul de a expulza ionii de calciu n afara celulei meninnd n citosol o
concentraie mai sczut a acestora comparativ cu cea extracelular.
Ca2+-ATP-aza mai este localizat n membrana reticulului
sarcoplasmatic al celulelor musculare reprezentnd cca. 75 - 90% din
totalitatea proteinelor membranare ale acestui organit. Reticulul
sarcoplasmatic formeaz o reea de canale fine n celulele musculare i
reprezint un depozit intracelular de ioni de calciu. Astfel, Ca 2+-ATP-aza are
rolul de a transporta ionii de calciu din citosol n interiorul reticulului
endoplasmatic (n urma contraciei), fenomen necesar relaxrii fibrei i crerii
condiiilor pentru o nou contracie. n momentul n care un impuls nervos
depolarizeaz membrana celulei musculare, ionii de calciu sunt eliberai din
reticulul endoplasmatic n citosol, producnd contracia.
Fiecare molecul poate hidroliza pn la 10 molecule de ATP/sec.
pe faa sa citoplasmatic, iar pentru fiecare molecul de ATP hidrolizat, Ca 2+-
ATP-aza pompeaz doi ioni de calciu din citosol n interiorul reticulului
endoplasmatic, n prezena ionilor de Mg2+. Ca2+-ATP-aza este activat de
vitamina D, iar fluxul de calciu este activat de dou proteine: calseqestrina i
42
calmodulina (proteina cu afinitate de legare a Ca2+), proteine care servesc ca
rezervor intracelular de calciu.

ATP-azele din clasa F

Enzime similare celor dou ATP-aze descrise anterior exist n

membrana plasmatic a bacteriilor aerobe, n membrana intern a
mitocondriilor i n membrana cloroplastelor. Aceste ATP-aze funcioneaz
ns invers fa de ATP-azele obinuite. Astfel, n loc s hidrolizeze ATP-ul
pentru a transporta ioni (cum este cazul Na+-K+-ATP-azei, sau Ca2+-ATP-
azei), ele sintetizeaz ATP pornind de la ADP i fosfat, folosind ca surs de
energie gradientul de protoni (H+). Acest gradient este realizat de ctre lanul
transportor de electroni n timpul fosforilrii oxidative (n mitocondrii), n
timpul fotosintezei (n cloroplaste), sau de ctre pompa de H+ activat de
lumin (bacteriorodopsina, la Holobacterium). n toate aceste cazuri, enzima,
denumit ATP-sintetaza poate funciona n ambele direcii n funcie de
condiii: ea poate hidroliza ATP i astfel pompeaz H+ prin membran, sau
poate sintetiza ATP, fiind activat de fluxul de H+, care are loc n sensul
gradientului. ATP-sintetaza este responsabil de producerea celei mai mari
cantiti de ATP n celul.

ATP-azele din clasa V

Pompa protonic (H+ - ATP aza lizozomial)

n anumite sisteme celulare se remarc transportul ionilor prin

membran concomitent cu un transport de protoni, mecanism dependent de
ATP. H+ - ATP azele sunt abundente n membranele lizozomilor unde, prin
pomparea protonilor, au rolul de a menine n interiorul acestor organite un
pH acid (pH de cca. 4 4,5 - 5,5), n timp ce pH ul citosolului este de 7.
Meninerea gradientului de protoni de 100 de ori mai mare n lizozomi dect
n citosol, depinde de producia de ATP celular care pune n micare pompa
de protoni.
Lizozomii conin cca. 50 de enzime diferite, din care cele mai multe
sunt proteaze care acioneaz la un pH optim de 5,5. Rolul lor este de a
interveni n digestia celular normal i patologic. Astfel de ATP aze au
fost descrise i n plasmalema celulelor epiteliale care cptuesc vezica
urinar (la broasc), fiind implicate n acidifierea urinei.

Transportul activ secundar

n transportul activ secundar este utilizat energia gradientelor ionice,

generat prin hidroliza ATP. Transportul unei substane mpotriva
gradientului de concentraie este cuplat cu transportul altei substane, n
sensul gradientului de concentraie. Mecanismul const n faptul c energia
rezultat prin hidroliza ATP este utilizat pentru a genera un gradient crescut
de Na+ extracelular, gradient care este utilizat apoi ca surs de energie

43
pentru ptrunderea glucozei i a aminoacizilor n celule. Toate aceste
sisteme de transport funcioneaz ca i sisteme co-transport de tipul simport
sau antiport. n celula animal, ionul co-transportat n mod frecvent este Na+.

Transportul glucozei i al aminoacizilor cuplat cu influxul de Na+

(simport)

Proteina care intervine n transportul glucozei este abundent n

epiteliul tubului digestiv i al tubilor uriniferi din structura nefronilor. Ea
utilizeaz fora gradientului transmembranar al Na+ (realizat de ctre ATP-
aza de Na+/K+) pentru a determina transportul specific al glucozei n celul,
cu un raport de o molecul de glucoz pentru un ion de Na +. Astfel, att n
celula intestinal, ct i n cea renal, proteina transportoare (cru),
localizat n membrana microvililor de pe faa apical a membranei celulelor
absorbante intestinale (renale), leag glucoza i Na+ n locuri diferite.
Na+ tinde s intre n celul n sensul gradientului de concentraie i
antreneaz glucoza. Cu ct diferena dintre concentraia intracelular i cea
extracelular a Na+ este mai mare, cu att este mai mare i viteza de
transport a glucozei. n situaia n care concentraia Na + din mediul
extracelular este redus, transportul glucozei nceteaz.
Dei ultrafiltratul glomerular al rinichiului (urina primar) conine
glucoz n aproximativ aceiai concentraie cu cea din snge, urina definitiv
nu conine glucoz deoarece ea este reabsorbit n tubii uriniferi ai rinichiului
printr-un proces de transport activ.
Transportul aminoacizilor se realizeaz tot prin sisteme simport cu
+
Na , n membrana celulelor existnd cel puin 5 proteine cru diferite, cte
una pentru fiecare grup de aminoacizi nrudii structural.

Fig.17. Transportul transcelular al

glucozei i sodiului prin celulele
epiteliului intestinal. Transportul
aminoacizilor are loc prin acelai
mecanism

Concentrate n interiorul enterocitelor prin simport, glucoza i

aminoacizii sunt transportate pasiv n snge, prin membrana bazolateral, cu
ajutorul proteinelor de difuziune facilitat. Protein-enzima implicat n ieirea
glucozei din celul prin membrana bazo-lateral a acesteia este glucozo-
permeaza (GLUT1). Localizarea selectiv a celor dou tipuri de transportori
ai glucozei, la nivelul celor doi poli ai membranei enterocitelor, este esenial

44
n transportul transcelular i constituie un excelent exemplu de polaritate
structural i funcional celular. Concentraia intracelular a Na+ este
meninut sczut prin pomparea sa activ n snge, prin intermediul Na + -
K+ - ATP azei localizat tot n membrana bazolateral, ca i proteinele de
difuziune facilitat.
n membrana bacteriilor, cele mai multe sisteme de transport folosesc
n transportul glucidelor i aminoacizilor ca ion simportat H+.

Sistemul antiport de anioni (Cl- i HCO3-) din eritrocite

Sistemul antiport de anioni din eritrocite este o protein membranar

(proteina benzii 3), care transport n sens opus ioni de Cl- i HCO3-, proces
esenial pentru transportul CO2 generat la nivelul esuturilor ctre pulmoni,
unde acesta se elimin. Procesul este posibil deoarece permeabilitatea
membranei eritrocitelor la Cl- este de cca. 100000 de ori mai mare dect a
altor celule (fig. 18).
CO2 dup ce este eliberat de celulele esuturilor, difuzeaz n
capilarele sanguine tisulare i ptrunde n eritrocite, unde sub aciunea
anhidrazei carbonice, se transform n anionul bicarbonic (HCO3-), conform
reaciei:

CO2 + H2O H+ + HCO3-

Concomitent cu acest proces, hemoglobina elibereaz O2, n locul lui

fiind legat protonul (H+). Anionul HCO-3 este scos din eritrocite concomitent
cu ptrunderea Cl-, printr-un sistem antiport.
La nivelul capilarelor pulmonare, procesul are loc invers. HCO 3- intr
n eritrocite (prin schimb cu Cl-), unde se combin cu ionii de H+. n prezena
anhidrazei carbonice H2CO3 rezultat se desface n ap i bioxid de carbon
(H2O + CO2). Eliberarea protonilor de pe hemoglobin, permite acesteia s
lege o nou molecul de O2, iar CO2 difuzeaz n plasm.

Fig. 18. Sistemul antiport de anioni

din eritrocite
(Mixich, F., Ardelean, A., 2002)

45
 Sistemele antiport implicate n reglarea pH ului citoplasmatic

Concentraia n H+ determin aciditatea unei soluii, iar pH-ul (-log

+
[H ]) este unitatea utilizat pentru msurarea acesteia.
O condiie necesar creterii i diviziunii celulelor este ca valoarea pH
ului citosolic s fie meninut n limite restrnse (7,2 7,4). Meninerea
constant a acestor valori este foarte important deoarece, majoritatea
produilor care rezult din metabolismul glucozei sunt acizi. Metabolismul
anaerob al glucozei produce acid lactic, iar metabolismul aerob, CO2 care
este hidratat la acid carbonic (H2CO3). Aceti acizi slabi disociaz genernd
protoni (H+) care, prin acumulare n celul, produc scderea rapid a pH
ului. O concentraie stabil n ioni de H+ (protoni) nu se menine n citosol
dect dac n celul exist mecanisme de transport activ prin care sunt
eliminai protonii n exces n afara celulei.
Sistemul antiport Na+ - H+ deine o importan deosebit n
ndeprtarea excesului de protoni generai n metabolismul celulelor animale.
Intrarea unui ion de Na+ n sensul gradientului de concentraie este cuplat
cu exportul unui ion de H+, proces care determin rapid creterea pH ului,
refcndu-se valoarea normal. n consecin, proteina antiport Na+ - H+ are
rolul de a ridica valoarea pH ului , dac acesta a sczut sub limita normal.
n reglarea pH-ului citoplasmatic intervine ns i un al doilea sistem
antiport i anume sistemul HCO3- - Cl- care intervine n scderea pH ului,
dac acesta capt o valoare mai mare dect cea normal. n acest caz,
proteina transportoare, expulzeaz HCO3- din citosol, prin schimb cu Cl-.
Exportul HCO3- determin scderea pH ului. Proteina este activat printr-o
alcalinizare intracelular i este pus n micare de intrarea Cl- din spaiul
extracelular, n citosol, unde concentraia sa este mult mai mic (Mixich, F.,
1997).

Transportul transmembranar al macromoleculelor

Macromoleculele precum i formaiunile celulare simple de tipul

bacteriilor i virusurilor, nu pot ptrunde n celule cu ajutorul proteinelor
membranare de transport. De asemenea, celula produce o gam larg de
compui macromoleculari pe care i elimin la exterior. Transferul acestor
complexe macromoleculare este realizat ca urmare a formrii de vezicule
membranare, care au capacitatea de a fuziona sau de a se desprinde de
plasmalem.
Dup direcia n care are loc transportul, din interiorul celulei spre
exterior, din afara celulei spre interior sau traversarea celulei dintr-o parte n
alta, se disting mai multe tipuri de transport:
- endocitoza (micare din mediul extracelular n celul);
- exocitoza (micare din celul n mediul extracelular);
- transcitoza (prin traversarea celulei n bisens).
Veziculele sunt caviti polimorfe i polidimensionale, limitate de
membrane, care segreg materiale heterogene, solide sau lichide.

46
 Endocitoza

Endocitoza const n ptrunderea i nglobarea n citoplasm a unor

vezicule de transport din mediul extracelular, ncrcate cu substane solide
sau lichide, n scop trofic sau de aprare, criteriu de clasificare al endocitozei
n: fagocitoza (din lb. greac fagein = a mnca); pinocitoz (din lb. greac
pinein = a bea).
n ambele cazuri, substanele ptrund n celul nglobate n vezicule
desprinse din plasmalem, vezicule denumite endosomi (fagozomi,
pinozomi).
Particulele solide mari sunt nglobate numai de celule specializate
denumite fagocite, n timp ce macromoleculele n soluie pot fi preluate de
majoritatea celulelor.
Fagocitoza este o modalitate de hrnire a organismelor unicelulare
eucariote de tipul protozoarelor (ex. amoeba). La vertebrate, majoritatea
celulelor sunt incapabile s ingere eficient particule mari, aceast funcie
revenind numai fagocitelor, care formeaz sistemul reticuloendotelial.
La mamifere i om exist dou tipuri de fagocite: macrofagele (din
esuturi i snge) i polimorfonuclearele neutrofile, ambele avnd originea n
celulele stem din mduva hematogen. Aceste dou tipuri de fagocite au un
rol deosebit de important n procesele de aprare ale organismului, prin
nglobarea i distrugerea microorganismelor (bacterii, parazii, virusuri), care
invadeaz corpul, a celulelor mbtrnite, degenerate sau distruse, celulelor
maligne etc. Ca i n cazul protozoarelor, particulele sunt nglobate ntr-o
vezicul (fagozom) internalizat n citoplasm, care va fi supus aciunii
lizozomilor primari.
Fagocitoza se desfoar n mai multe faze:
- chemotactismul, care const n atragerea i deplasarea fagocitului
spre locul infeciei;
- recunoaterea i ataarea fagocitelor de particulele strine, prin
receptori specifici care recunosc liganzii;
- opsonizarea: n cazul bacteriilor are loc o interaciune ntre acestea
i opsonine (anticorpi i complement), care pregtesc bacteria s fie
fagocitat (de la grecescul opsonien = a pregti pentru mncare)
(Diculescu i colab., 1987);
- nglobarea de ctre fagocit a particulei strine ntr-o vezicul
internalizat n citoplasm, denumit fagozom. Pentru aceasta, fagocitul
emite pseudopode, care nconjoar particula i o introduc n celul prin
activarea elementelor citoscheletului membranar;
- digestia fagozomului de ctre lizozomii citoplasmatici, bogai n
hidrolaze acide. Astfel, dup fuziunea fagozomilor cu lizozomii primari se
formeaz lizozomii secundari, n care au loc procesele de digestie a
particulei ingerate. Pe lng setul normal de hidrolaze acide, lizozomii
macrofagelor conin o serie de alte enzime care genereaz H2O2 i
substane toxice cu efect bactericid.
O mare parte din substanele rezultate n urma digestiei de ctre
lizozomi (ex. aminoacizi, zaharuri, nucleotide) vor trece n citosol i vor fi
utilizate n diferite reacii metabolice. Substanele nedigerate sau neutilizabile
sunt eliminate din celul prin exocitoz.

47
 Pinocitoza este de dou tipuri: independent de receptori i
dependent de receptori.
Pinocitoza independent de receptori (endocitoza n faz fluid sau
constitutiv). Este ntlnit n majoritatea celulelor, prin acest proces
introducndu-se mari cantiti de macromolecule n soluie. Rata endocitozei
n faz fluid variaz conform tipului de celul, ns oricare ar fi rata, o mare
parte a membranei plasmatice este ingerat n acest proces.
Pinocitoza dependent de receptori
Este un mecanism selectiv, realizat cu ajutorul receptorilor din
plasmalem, care recunosc specific numai anumite macromolecule denumite
liganzi.
Un proces important care se realizeaz prin endocitoz mediat de
receptori este absorbia colesterolului n celulele animale. Absorbia
colesterolului furnizeaz celulelor o mare parte din colesterolul necesar
pentru sinteza membranar.
Datorit insolubilitii sale n lichide biologice, majoritatea
colesterolului este transportat n snge legat de o protein carrier, sub
forma unor complexe denumite lipoproteine cu densitate mic (LDL - low
density lipoproteins). Acestea sunt particule sferice, cu diametrul de cca. 22
nm, fiecare coninnd la interior un miez de aproximativ 1500 molecule de
colesterol esterificat cu acizi grai, nconjurate la exterior de un bistrat lipidic
asociat cu o singur molecul proteic mare, denumit proteina apo-B.
n momentul n care o celul animal necesit colesterol pentru
sinteza membranar sau pentru a produce hormoni steroizi (ex. celulele tecii
interne i celulele granuloasei foliculilor ovarieni; celulele corpului galben;
celulele interstiiale Leydig din structura testiculului) ea produce receptori
proteici LDL, care se dispun pe membrana plasmatic. Aceti receptori au ca
ligand proteina apo-B de pe suprafaa particulelor LDL. Prin urmare,
receptorii recunosc LDL-urile i ptrund n celule n vezicule desprinse din
membran, dup care sunt endocitate. Dup endocitare sau internalizare n
citoplasm, aceste vezicule fuzioneaz cu lizozomii primari se formeaz
lizozomii secundari. Proteina apo-B este degradat n aminoacizi, iar esterii
de colesterol sunt hidrolizai la colesterol liber, care trece n citosol, inhibnd
formarea receptorilor pentru LDL i sinteza colesterolului. Acizii grai rezultai
sunt utilizai pentru sinteza de noi fosfolipide.
Exist indivizi care posed gene mutante pentru producerea
receptorilor proteici LDL; ulterior, celulele acestora nu mai pot capta LDL din
snge astfel c, valorile mari ale colesterolului sanguin predispun aceti
indivizi la ateroscleroz prematur i muli dintre ei mor la vrst tnr prin
atac de cord. Anormalitatea poate implica fie absena receptorilor LDL, fie
producerea receptorilor, ns incapabili de a lega LDL. n acest caz,
complexele receptor-LDL nu pot fi internalizate n celul deoarece nu sunt
aglomerate n caveole nvelite, ci sunt distribuite uniform pe suprafaa

48
celular. Aceste aspecte demonstreaz direct importana caveolelor nvelite
n endocitoza mediat de receptori a colesterolului.

Exocitoza

Exocitoza este procesul prin care vezicule din citoplasm, care conin
diverse substane, fuzioneaz cu plasmalema i sunt eliminate n afara
celulei. Ea reprezint etapa final a unui proces iniiat n reticulul
endoplasmatic (RE), prin care, proteinele destinate secreiei sunt procesate
ntr-o serie de evenimente asociate membranei.

Transcitoza

Transcitoza este specific endoteliului capilar. Se realizeaz fie prin

vezicule independente, fie prin canale. Prin transcitoz sunt transportate
macromolecule dinspre faa luminal spre cea interstiial a vasului i n sens
invers. Astfel, se asigur schimburile dintre plasma sngelui i lichidul
interstiial.
n transcitoz, produii transportai prin vezicule nu fuzioneaz cu
lizozomii celulelor endoteliale.

Concepte i noiuni de reinut

Permeabilitatea se poate defini ca acea proprietate care permite

trecerea unor substane prin membrane celular, fr distrugerea integritii
structural a acesteia.
Transportul substanelor prin membranele celulare este grupat n:
transport direct sau cu ajutorul unor proteine de membran transportoare a
unor ioni sau a unor molecule mici de substane organice i transport n
mas, realizat prin includerea n vezicule generate de membrana celular, a
unor macromolecule proteice sau a altor molecule organice mari.
Transportul pasiv se realizeaz fr consum de energie, de la un
gradient chimic sau electrochimic ridicat spre gradientul sczut.
Transportul pasiv se realizeaz prin difuzie simpl i facilitat.
Transportul activ se realizeaz mpotriva gradientului de
concentraie, utiliznd energia rezultat din hidroliza ATP ului sau energia
gradientelor chimice.
Difuzia simpl se realizeaz fr intervenia unor proteine
membranare. Acest tip de transport este limitat la gaze (N2, O2, CO2, NO),
molecule lipofile (hormonii steroizi i tiroidieni, ureea, etanolul, glicerolul etc)
i ap.
Difuziunea facilitat se realizeaz prin intermediul proteinelor
cru i prin proteine canal i este acceptat pentru trecerea unor
molecule solubile n ap precum glucoza, nucleosidele, aminoacizii, ionii de
H+, Na+, K+, Ca2+ etc.

49
 Canalele cu poart sunt proteine canal a cror deschidere tranzitorie
este realizat de aciunea unui anumit ligand, de o modificare a potenialului
electric, sau de un stimul mecanic.
Transportul activ primar se realizeaz cu ajutorul unor protein
enzime specifice membranare, care folosesc n transport energia rezultat
prin hidroliza ATP ului. Deoarece, pentru eliberarea energiei, proteinele
care realizeaz acest transport trebuie s fie capabile s scindeze molecula
de ATP n ADP i Pa (fosfat anorganic), ele se numesc ATP-aze sau pompe
ionice.
Na+ - K+ - ATP aza este o ATP-az prezent n membranele
celulare, care funcioneaz dup sistemul antiport, astfel c transport ionii
de Na+ spre exterior i ionii de K+ spre interior, mpotriva gradientului de
concentraie, realiznd astfel potenialul membranar celular.
H+ - K+ - ATP-aza este semnalat n membrana apical a celulelor
oxintice (parietale) din epiteliul mucoasei gastrice, celule care secret HCl al
sucului gastric.
Ca2+ - ATP aza este prezent att n plasmalema celulelor, fiind
implicat n transportul ionilor de Ca2+ n afara celulei, dar i n membrana
reticulului endoplasmatic, cu rol n transportul ionilor de Ca2+ din citosol n
interiorul organitului.
ATP-aza F, denumit ATP-sintetaza, este ntlnit n membrana
mitocondrial intern i poate funciona n ambele direcii, n funcie de
condiii: ea poate hidroliza ATP i astfel pompeaz H+ prin membran, sau
poate sintetiza ATP, fiind activat de fluxul de H+, care are loc n sensul
gradientului. ATP-sintetaza este responsabil de producerea celei mai mari
cantiti de ATP n celul.
Proteinele care intervin n transportul glucozei i aminoacizilor sunt
abundente n epiteliul tubului digestiv i al tubilor uriniferi din structura
nefronilor. Ele utilizeaz fora gradientului transmembranar al Na + (realizat de
ctre ATP-aza de Na+/K+) pentru a determina transportul specific al glucozei
sau aminoacizilor n celul, cu un raport de o molecul de glucoz pentru un
ion de Na+.
Sistemul antiport de anioni (Cl- i HCO3-) din eritrocite este o
protein membranar (proteina benzii 3), care transport n sens opus ioni
de Cl- i HCO3-, proces esenial pentru transportul CO2 generat la nivelul
esuturilor ctre pulmoni, unde acesta se elimin.
Sistemul antiport Na+ - H+ deine o importan deosebit n
ndeprtarea excesului de protoni generai n metabolismul celulelor animale.
Intrarea unui ion de Na+ n sensul gradientului de concentraie este cuplat
cu exportul unui ion de H+, proces care determin rapid creterea pH ului,
refcndu-se valoarea normal. n consecin, proteina antiport Na+ - H+ are
rolul de a ridica valoarea pH ului , dac acesta a sczut sub limita normal.
Endocitoza const n ptrunderea i nglobarea n citoplasm a unor
vezicule de transport din mediul extracelular, ncrcate cu substane solide
sau lichide, n scop trofic sau de aprare, criteriu de clasificare al endocitozei
n: fagocitoza (din lb. greac fagein = a mnca); pinocitoz (din lb.
greac pinein = a bea).
La mamifere i om exist dou tipuri de fagocite: macrofagele i
polimorfonuclearele neutrofile. Aceste dou tipuri de fagocite au un rol
50
deosebit de important n procesele de aprare ale organismului, prin
nglobarea i distrugerea microorganismelor (bacterii, parazii, virusuri), care
invadeaz corpul, a celulelor mbtrnite, degenerate sau distruse, celulelor
maligne etc.
Pinocitoza independent de receptori este ntlnit n majoritatea
celulelor, prin acest proces introducndu-se mari cantiti de macromolecule
n soluie.
Exocitoza este etapa final a unui proces de secreie, proces prin
care, vezicule din citoplasm, care conin diverse substane, fuzioneaz cu
plasmalema i sunt eliminate n afara celulei.
Transcitoza este specific endoteliului capilar. Prin transcitoz sunt
transportate macromolecule dinspre faa luminal spre cea interstiial a
vasului i n sens invers. Astfel, se asigur schimburile dintre plasma
sngelui i lichidul interstiial.

ntrebri de autoevaluare

1. Clasificai i descriei transportul pasiv.

2. Cum se realizeaza i care sunt tipurile de transport activ?
3. Ce sunt canalele cu poart? Exemple.
4. Ce rol ndeplineste in celula Na+ - K+ - ATP aza?
5. Unde este localizat i ce rol ndeplinete pompa de H+ - K+ ?
6. Unde este localizata si ce rol indeplineste sistemul antiport de
anioni (Cl- i HCO3-) din eritrocite?
7. Care sunt principalele tipuri de fagocite ale organismelor superioare?.
Descriei etapele procesului de fagocitoz.
8. Ce este pinocitoza dependenta de receptori?

51
 UNITATEA DE NVARE 5

FUNCIA DE RECEPIE A MEMBRANEI CELULARE

Cuvinte cheie: mesager, receptor, proteina G, AMPc, Ca2+,

diacilglicerol, inozitoltrifosfat, adenilatciclaza, fosfolipaza C, protein-kinaze

Rezumat
n organismele multicelulare, celulele pot comunica ntre ele pe
distane foarte mari. Astfel, celulele semnalizatoare sintetizeaz i elibereaz
diferite substane sau semnale chimice (mesageri), care stabilesc contacte
cu receptorii celulelor int, inducnd n aceste celule rspunsuri specifice
(secreia, proliferarea, diferenierea, migrarea, moartea celular, etc).

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 2 ore

Mesagerii (liganzii)

Mesagerii sunt substane (semnale) chimice care intervin n

metabolismul celular, ei acionnd asupra unor receptori celulari specifici,
aflai n plasmalem, n citosol sau n membrana nuclear.
Comunicarea prin mesageri extracelulari necesit:
- sinteza i eliberarea mesagerului;
- transportul mesagerului la celula int;
- detectarea mesagerului (semnalului) de ctre un receptor specific i
cuplarea cu acesta;
- transducia i traducerea semnalului (mesajul captat de receptor este
transmis altor proteine intracelulare i apoi este tradus pentru a declana
rspunsul);
- declanarea rspunsului.
Moleculele recunoscute de celule pot fi de natur extrem de variat:
proteine, peptide, glicoproteine, unii aminoacizi, mesagerii lipidici (ex.
prostaglandinele...), nucleosidele, nucleotidele, moleculele odorante, fotonii,
ionii de Ca2+, steroizii etc.
Conform capacitii lor de a traversa, sau nu, membrana
plasmatic, mesagerii se clasific n:
- molecule hidrofile
- molecule hidrofobe

52
 Moleculele hidrofile se leag la receptorul membranar deoarece sunt
incapabile de a traversa membrana plasmatic pentru a declana rspunsul
celular. Legarea moleculei la receptorul specific este un fenomen dinamic
care induce o modificare a conformaiei tridimensionale a receptorului. El
este astfel activat i interacioneaz cu moleculele intracelulare care, la
rndul lor, iniiaz noi procese la nivelul proteinelor aa cum sunt
fosforilrile/defosforilrile. Acest ansamblu de evenimente spaio-temporale
definete o cale de transducie iniiat de un ligand i receptorul su.
Moleculele hidrofobe (hormonii steroizi i tiroidieni, acidul retinoic,
derivaii vitaminei D...) pot traversa cu uurin membrana plasmatic i se
leag la receptorul lor citosolic sau nuclear.
Monoxidul de azot este de asemenea un ligand care, cu toate c este
un gaz, poate difuza liber traversnd membrana plasmatic i se poate lega
la receptorul su citosolic (guanilat-ciclaza) sau la citocrom-oxidaza.
Conform distanei la care acioneaz, mesagerii sunt clasificai
n:
Mesagerii endocrini sunt reprezentai de hormoni, substane
eliberate de celulele sau glandele endocrine n plasma sanguin. Sunt
transportai la distan n organele (celulele) int asupra crora acioneaz.
Mesagerii paracrini acioneaz numai asupra celulelor adiacente,
care sunt n legtur direct cu celulele care i-a elaborat, sunt sintetizai de
celule specializate i sunt reprezentai prin mediatorii chimici locali (ex.
neurotransmitorii, histamina etc.) i prostaglandine. Aceast aciune se
datoreaz faptului c, dup ce au fost secretai, mediatorii sunt rapid distrui
sau sunt imobilizai n spaiile intercelulare de ctre elementele matricei
extracelulare.
Neurotransmitorii, sintetizai la nivelul sinapselor, sunt substane prin
care se realizeaz transmiterea influxului electric de la o celul nervoas la
alta, sau de la o celul nervoas la una efectoare.
Histamina este secretat de mastocite, celule autohtone ale esutului
conjunctiv. Aceste celule stocheaz histamina n vezicule secretorii mari i o
elibereaz rapid prin exocitoz n momentul n care sunt stimulate de diferite
infecii locale, sau de reacii imunologice. Histamina eliberat determin
dilataia local a vaselor sangvine i creterea permeabilitii peretelui lor,
facilitnd astfel accesul proteinelor serice (anticorpi, fraciuni de complement)
i al leucocitelor la locul leziunii, cu rol n rspunsul imun.
Prostaglandinele sunt derivai ai acidului arachidonic, care se
sintetizeaz n mod continuu n membranele celulelor din majoritatea
esuturilor, prin degradarea fosfolipidelor membranare, sub aciunea
lipazelor. Se cunosc cca. 16 tipuri de prostaglandine, mprite n 9 clase:
PGA; PGB; PGC.....PGI). Prin legare la receptorii specifici membranari,
prostaglandinele moduleaz rspunsul celulelor la aciunea altor hormoni,
dar au i efecte profunde celulare. Astfel, ele influeneaz contracia
musculaturii netede, agregarea plachetar, particip la rspunsul de durere
i la rspunsul inflamator, febr etc. De exemplu, unele prostaglandine sunt
sintetizate n cantiti mari la nivelul uterului i provoac contracia celulelor
musculare netede din miometru n timpul naterii. Datorit acestui efect sunt
utilizate ca ageni farmacologici pentru inducerea avortului.

53
 Unii mesageri paracrini pot avea att aciune paracrin, ct i
endocrin. De exemplu, testosteronul secretat de ctre celulele interstiiale
Leydig ale testiculului acioneaz att ca un mesager endocrin stimulnd o
serie de evenimente periferice (ex. creterea muscular), dar acioneaz i
ca mesager paracrin stimulnd spermatogeneza n tubii seminiferi adiaceni.
Mesagerii autocrini sunt substane care acioneaz chiar asupra
celulelor care i-a produs, sau asupra celulelor din imediata vecintate. Un
exemplu n acest sens l constituie factorii de cretere elaborai de celulele
tumorale, care acioneaz att asupra celulelor tumorale stimulnd creterea
necontrolat a lor, ct i asupra celulelor netumorale vecine, provocnd
dezvoltarea unei tumori. Semnalizarea autocrin este specific de asemenea
dezvoltrii precoce (n perioada embrionar). Cnd o celul a fost
direcionat spre o anumit cale de difereniere, ea poate s secrete semnale
autocrine, care accentueaz aceast direcie de dezvoltare. Astfel,
semnalizarea autocrin stimuleaz grupuri de celule identice s ia aceleai
decizii. Tot din categoria mesagerilor autocrini mai fac parte interleukinele
(IL) secretate de celulele sistemului imunitar, celula emitoare fiind, de
asemenea, celula int.
Mesagerii nu sunt metabolizai, nu au activitate enzimatic i nu
intervin direct n activitatea celulelor. Ei au rolul de a se lega i de a transmite
receptorului mesajul, receptorul sensibiliznd celula int asupra
evenimentelor din mediul n care ea se gsete.
Celulele endocrine, ca i neuronii, sunt nalt specializate n producerea
de semnale chimice, asigurnd reglarea funciilor tuturor esuturilor i
organelor prin produi i mecanisme similare. Hormonii acioneaz lent (de la
cteva minute, la cteva ore sau zile, n funcie de tipul de hormon), la o
concentraie foarte sczut, fiind diluai n plasm. Comparativ cu ei,
neurotransmitorii acioneaz mult mai rapid (cteva milisecunde), n
concentraii mai mari. De asemenea, n timp ce celulele endocrine trebuie s
utilizeze hormoni diferii pentru a comunica specific cu celulele lor int,
numeroase celule nervoase pot folosi acelai neurotransmitor pentru a
comunica specific cu diferite celule int. Comunicarea se realizeaz prin
sinapse, iar mecanismul const n transformarea semnalelor chimice n
impulsuri electrice.
Neurotransmitorii, majoritatea hormonilor i a mediatorilor chimici
sunt molecule solubile n ap (hidrosolubile). Hormonii steroizi i tiroidieni
sunt molecule insolubile n ap (liposolubile), fiind transportai n circulaia
sangvin prin legare de proteine carrier specifice. Aceast diferen de
solubilitate determin mecanismele diferite prin care cele dou clase de
molecule influeneaz celulele int. Astfel, moleculele hidrofile se leag de
receptorii proteici de pe suprafaa celulelor, n timp ce hormonii steroizi i
tiroidieni ptrund n celul, legndu-se de receptorii specifici
intracitoplasmatici.

54
 Receptorii

Receptorii sunt dispozitive chimice, de natur proteic, situate n

plasmalem, nucleolem sau citosol, criteriu dup care sunt clasificai n:
membranari, citoplasmatici, nucleari.
Receptorul are calitatea de a recunoate i de a se cupla cu
mesagerul, realizndu-se astfel interaciuni multiple ntre celulele care
secret mesagerii (liganzii) i celulele int care primesc mesajul, rezultnd
complexe receptor + ligand.
Recunoaterea i ataarea mesagerului declaneaz rspunsul celulei
int, manifestat n aceasta prin modificri de structur, modificri metabolice,
exprimarea funciilor specifice. Astfel, diferitele tipuri de celule rspund n
modaliti diferite la acelai ligand (mesager). Un exemplu n acest sens l
constituie acetilcolina, care stimuleaz contracia celulei musculare striate,
dar micoreaz rata i fora contraciei celulei musculare cardiace.
Rspunsul diferit al celor dou tipuri de celule la aciunea aceluiai mesager
(acetilcolina) se datoreaz diferenei structurale dintre receptorii specifici de
pe membrana lor plasmatic.
n unele tipuri de celule ns, complexele receptor + ligand diferite,
induc acelai rspuns celular. De exemplu, n celulele hepatice, att legarea
glucagonului la receptorii si, ct i legarea adrenalinei la receptorii specifici,
poate induce degradarea glicogenului i eliberarea glucozei n snge.

Clasificarea receptorilor n funcie de originea mesagerului (semnalului)

Dup originea mesagerului pe care l leag, se cunosc dou categorii

de receptori: pentru substane endogene i pentru substane exogene.

Receptorii pentru substane endogene

Din categoria substanelor endogene fac parte: neurotransmitorii,
hormonii, antigenele endogene, anticorpii, complementul etc.
a. Din categoria receptorilor pentru neurotransmitori fac parte:
receptorii pentru acetilcolin, adrenalin, noradrenalin, dopamin,
serotonin, heparin, histamin, glicin, acid gamma aminobutiric (GABA).
Aceti receptori sunt localizai n membrana postsinaptic a celulei nervoase,
musculare, sau a altor celule efectoare.
b. Receptorii pentru hormoni sunt localizai diferit n celul, n funcie
de tipul de hormoni: hidrofobi (sau liposolubili) i hidrofili (hidrosolubili).
Hormonii hidrofobi (liposolubili) sunt reprezentai prin hormonii steroizi
(cortizolul, hormonii sexuali) i hormonii tiroidieni. Hormonii steroizi sunt
molecule mici, derivate din colesterol i fiind insolubili n soluii apoase, sunt
transportai prin snge n stare legat cu proteine carrier (transportoare).
Dup eliberarea lor de ctre proteinele carrier, ei strbat membrana
plasmatic a celulei int prin difuziune simpl i interacioneaz cu receptorii
citosolici sau nucleari, care sunt proteine solubile localizate n citoplasm sau
n nucleoplasm. n acest fel, hormonii steroizi (i cei tiroidieni) sunt
translocai n citosol sau n nucleu, unde se leag la secvene reglatoare

55
specifice ale ADN, stimulnd sau inhibnd transcripia genelor adiacente
acestor regiuni.
Din categoria liganzilor pentru receptorii nucleari mai fac parte, pe
lng hormonii liposolubili ca hormonii steroizi (ex. testosteronul,
progesteronul, estrogenii, cortizolul), i derivaii vitaminelor A i D.
Hormonii steroizi au un efect de lung durat (ore sau zile) asupra
esuturilor, controlnd: secreia, contracia, metabolismul, creterea i
diferenierea celular, proliferarea celulelor; sunt cruii virusurilor.
Hormonii tiroidieni determin creterea vitezei metabolismului bazal,
diminuarea rezervelor de glucide i lipide i intensificarea metabolismului
proteinelor.
Hormonii hidrofili (peptidici, proteici, prostaglandinele, insulina,
glucagonul, hormonii anterohipofizari) nu ptrund n citoplasm. Ei se
cupleaz cu receptorii specifici din membran, transmind informaia celulei
int din aceast poziie de cuplaj de la suprafaa membranei. Astfel, ei
determin declanarea creterii sau descreterii concentraiei intracelulare a
mesagerilor de ordinul 2, cum ar fi: AMP-ciclic; Ca2+; 1,2 diacilglicerolul
(DAG) etc., mediind rspunsuri celulare de durat scurt.
c. Receptorii pentru antigene endogene, anticorpi, complement.
Receptorii pentru anticorpi au fost identificai n membrana limfocitelor
B, polimorfonuclearelor bazofile, mastocitelor, histiocitelor i monocitelor.
Anticorpii declaneaz rspunsul imun specific prin degranularea
polimorfonuclearelor bazofile i a mastocitelor, fagocitoz i pinocitoz n
monocite i histiocite.
Receptorii pentru complement au fost identificai n membrana
celulelor micro- i macrofage.
Complementul este un sistem enzimatic polipeptid proteic, care
stimuleaz micarea chemotactic a fagocitelor spre focarul de infecie.
Receptorii pentru alte substane endogene, de exemplu colesterol, au
fost identificai n membranele fibroblastelor, a celulelor endoteliale, celule
care capteaz i internalizeaz colesterolul.

Receptorii pentru substane exogene

Receptorii pentru substane exogene s-au difereniat ca rezultat al
contactului celulelor specializate n funcia de aprare cu antigenele, caracter
care s-a dobndit i s-a transmis genetic. n aceast categorie au fost
identificai:
- receptori pentru virusuri (microvirusuri, adenovirusuri, virusul
encefalitei infecioase);
- receptori pentru antigene "non self" (identificai n membranele
limfocitelor B);
- receptori pentru lectine (proteine animale sau vegetale ca de ex.
concavalina,fitohemaglutinina);
- receptori pentru droguri i toxine bacteriene (identificai numai n
membranele hepatocitelor).

56
 Clasificarea receptorilor in functie de mecanismul de transmitere a
semnalului

n funcie de mecanismul de transmitere a semnalului extracelular

spre interiorul celulei, receptorii membranari au fost clasificai n trei categorii:
receptori legai de canale ionice, legai de enzime i legai de proteina G.

Receptorii legai de canale ionice

Receptorii legai de canale ionice (canale ionice dependente de
neurotransmitori) aparin unei familii de proteine cu mai multe pasaje
transmembranare. Ei sunt localizai la nivelul jonciunilor sinaptice i
funcioneaz dup principiul canalelor ionice cu poart comandate de ligand.
Astfel, legarea ligandului (neurotransmitorului) determin deschiderea
temporar a canalului ionic, modificnd pentru timp scurt permeabilitatea
pentru ioni a membranei postsinaptice i n consecin modificarea
potenialului electric al membranei.

Receptorii cuplai la proteina G (RCPG) aparin unei familii mari de

proteine cu apte pasaje transmembranare.
n prezent se cunosc cca. 2000 de receptori, care recunosc o mare
varietate de stimuli precum: fotonii (receptorii celulelor cu conuri i cu
bastonae din structura retinei); ionii de Ca2+; stimulii senzoriali (molecule
odorante, gustative, feromoni); molecule mici endogene de tipul aminoacizilor
(acidul glutamic, acidul gamma amino-butiric), aminelor (acetilcolina,
adrenalina, dopamina, histamina, melatonina, serotonina), nucleosidelor
(adenosina), nucleotidelor (ADP, ATP), lipidelor (leucotriene, Platelet
Activating Factor, prostaglandine, tromboxanul A2), peptidelor endogene;
compui exogeni; compui implicai n reaciile sistemului imunitar
(chimiokine, anaphylatoxinele C3a i C5a ale complementului, peptidele N-
formilate chimiotactice); hormoni glicoproteici (hormonul tiroidostimulator-
TSH, hormonul luteinizant-LH, hormonul foliculostimulator-FSH, hormonul
gonadotrop corionic-HCG); proteaze (trombina).
Ei acioneaz indirect asupra unei proteine int legat de membrana
plasmatic, proteina ce poate fi o enzim (adenilatciclaza; fosfolipaza C), sau
un canal ionic (efectori). Astfel, dup cuplarea cu ligandul, aceti receptori
activeaz o molecul proteic membranar numit proteina trimeric
reglatoare sau proteina G (leag GTP), care mediaz activarea proteinei int
din membran (a treia protein), cu activitate catalitic. Proteina int activat
determin sinteza i apariia unor mesageri intracelulari secunzi (de ordinul
2), sau modific permeabilitatea pentru ioni a membranei plasmatice (dac
proteina int este un canal ionic). Acetia, printr-o succesiune de reacii,
modific comportamentul altor proteine din celul, influennd metabolismul
celulei.

Proteina G
Proteinele G aparin unei familii de proteine al cror mecanism de
semnalizare utilizeaz transformarea guanozin-difosfatului (GDP) n
guanozin-trifosfat (GTP), ca un schimb molecular, pentru a permite sau

57
inhiba reaciile biochimice din interiorul celulei. Proteina G se refer de
obicei la proteinele G heterotrimetrice asociate membranelor, cunoscute ca i
proteine G mari.
Proteina Gs este constituit din trei lanuri polipeptidice diferite: , i
. Lanul leag i hidrolizeaz GTP i activeaz adenilat-ciclaza, iar
lanurile i formeaz un complex strns (), care ancoreaz proteina Gs
pe faa citoplasmatic a membranei. n forma sa inactiv, proteina G s exist
ca heterotrimer (), cu o molecul de GDP legat de lanul . Proteina Gs
este activat prin legarea de un receptor cuplat cu un ligand. n aceast
stare, lanul schimb GDP cu GTP. Legarea GTP-ului determin disocierea
lanului de complexul , ceea ce i permite s lege o molecul de adenilat-
ciclaz, care este astfel activat pentru a produce AMPc. ns, prin legarea
adenilat-ciclazei este stimulat activitatea GTP-azic a lanului , astfel nct
GTP-ul legat este hidrolizat (n mai puin de 1 minut) n GDP + P, ceea ce
determin inactivarea lanului i a adenilat-ciclazei.
Proteinele G inhibitorii (Gi) sunt constituite din aceleai subuniti
ca i n cazul Gs, dar difer subunitatea . Astfel, la legarea ligandului de
receptor, lanul i al proteinei Gi leag GTP, n locul GDP. Aceasta determin
disocierea lanului de complexul , care, astfel eliberate, contribuie la
inhibarea adenilat-ciclazei i deci la scderea nivelului AMPc.

Fig. 19. Transducia unui semnal prin intermediul proteinei G: 1. n forma inactiv, proteina G
este un heterotrimer (), cu o molecul de GDP legat la lanul ; 2. Cuplarea receptorului
cu un ligand, activeaz proteina G: lanul schimb GDP cu GTP. 3. Legarea GTP
determin disocierea lanului de complexul , ceea ce i permite s lege o molecul de
adenilatciclaz; 4. Prin legarea adenilat-ciclazei este stimulat activitatea GTP-azic a
lanului , iar GTP este hidrolizat n GDP + P, ceea ce determin inactivarera lanului
(Ollivier, M. i colab., 1990)

Tipuri de efectori, inta proteinelor G

Proteina G funcioneaz ca intermediar, asigurnd comunicarea dintre

receptorii de pe suprafaa celular i efectorii membranari care genereaz n
citoplasm mesageri secunzi (fig.19). Astfel, cuplarea unui ligand extracelular
la un receptor legat de proteina G, activeaz o cascad de evenimente
membranare, care determin, n citosol, creterea sau scderea unor
mesageri secunzi, de tipul AMPc, Ca2+, IP3, DAG.

58
 Fig. 20. Proteina G, intermediar
ntre receptorii de pe suprafaa
celular i efectorii membranari
care genereaz n citoplasm
mesageri secunzi

Din categoria efectorilor membranari fac parte o serie de proteine cu

activitate catalitica cum sunt adenilat ciclaza (AC), fosfolipaza C, GMPc
fosfodiesteraza, precum si o serie de canale ionice.

Adenilat ciclaza

Adenilat ciclaza (AC) este o proteinenzim membranar, care pe faa

exoplasmatic prezint legturi receptoare pentru proteine, iar pe cea
citoplasmatic prezint un situs de legare a ATP-ului. Ea catalizeaz reacia
de formare a AMPc, activatorul protein kinazei A (PKA), care este capabil
de fosforilare i astfel, moduleaz activitatea numeroaselor substraturi
proteice.
Prin intermediul proteinei G (Gs sau Gi), adenilat-ciclaza poate fi
activat sau inhibat de ctre complexul ligand+receptor.
Acelai ligand poate determina fie creterea, fie scderea
concentraiei intracelulare a AMPc, n funcie de tipul de receptori de care se
leag. De exemplu, cnd receptorii sunt legai de o protein Gs,, rspunsul va
consta n creterea concentraiei AMPc, ca urmare a activrii
adenilatciclazei, iar cnd receptorii sunt legai de o protein G i (inhibitoare),
ei vor determina scderea nivelului AMPc, inhibnd activitatea
adenilatciclazei.
Dintre receptorii cuplai cu activitatea adenilat-ciclazei, foarte bine
studiai au fost receptorii adrenergici, care mediaz aciunile adrenalinei i
noradrenalinei (catecolamine produse de glandele medulosuprarenale).
n condiii de stres sau fric, cnd esuturile necesit cantiti crescute
de glucoz i acizi grai, glandele medulosuprarenale secret o cantitate
mare de adrenalin n snge. Adrenalina, prin legare de receptorii
adrenergici ai celulelor hepatice i adipoase, va determina glicogenoliza
(degradarea glicogenului n glucoz) n ficat i respectiv lipoliza (scindarea
trigliceridelor n acizi grai) n celulele adipoase. Glucoza i acizii grai sunt
eliberai rapid n snge i ajuni la esuturi vor fi utilizai ca surs n
furnizarea energiei (ATP).

Rolul AMPciclic n reglarea metabolismului celular

AMPc este un mesager de ordinul 2 (secundar), care traduce stimulii
celulari externi (ex. hormonii) n stimuli interni, influennd diferite procese
metabolice intracelulare.
59
 AMPc este sintetizat din ATP, de ctre adenilatciclaza (AC), ca
rspuns la semnalele extracelulare variate (hormoni, factori de cretere,
neurotransmitori) i este distrus rapid i continuu de ctre una sau mai
multe fosfodiesteraze AMPc, care hidrolizeaz AMPc n adenozin 5 ,
monofosfat (5AMP).
Pentru ca AMPc s funcioneze ca mesager secund intracelular,
concentraia sa trebuie s creasc sau s scad fa de concentraia
normal( 10-7), ca rspuns la semnalele extracelulare.
n celulele animale, AMPc modific activitatea unui grup specific de
enzime, ca urmare a activrii unei enzime dependent de AMPc, numit
protein-kinaza A (A-kinaza sau PKA).
Protein-kinazele transfer grupul fosfat terminal de pe ATP, la anumite
substraturi proteice, forma fosforilat a unor substraturi proteice fiind mai
activ dect forma nefosforilat.
Substraturile protein-kinazei A sunt numeroase i variate, incluznd
proteine ale citoscheletului, canale ionice, enzime implicate n metabolismul
glicogenului etc. Astfel, protein-kinazele dependente de AMPc declaneaz
numeroase procese metabolice n celule, cel mai cunoscut fiind cel al
sintezei i degradrii glicogenului, prin care se regleaz nivelul glucozei n
snge.
n organism, glicogenul (forma polimerizat a glucozei) formeaz
depozite ndeosebi n celulele hepatice i musculare. Prin degradarea
glicogenului rezult glucoza care trece n snge, fiind utilizat ca surs de
energie de ctre alte esuturi (glucoza eliberat din glicogenul hepatic), sau
direct n contracia muscular (glucoza eliberat din glicogenul celulelor
musculare; aceasta este rapid oxidat prin glicoliz i furnizeaz ATP pentru
contracia muscular).
Att sinteza, ct i degradarea glicogenului sunt procese reglate prin
adrenalina secretat de medulosuprarenal. AMPc mediaz ambele reacii.
n adipocite, adrenalina regleaz printr-o succesiune de reacii, sinteza
i degradarea trigliceridelor, forma de depozitare a acizilor grai. n acest
caz, receptorii -adrenergici de pe suprafaa celulelor adipoase sunt activai
prin legarea adrenalinei i vor determina creterea AMPc n citosol.
Pentru ca efectele AMPc s fie tranzitorii, celulele trebuie s fie
capabile s defosforileze proteinele care au fost fosforilate de A-kinaz.
Defosforilarea este catalizat de fosfoprotein-fosfataza specific.

Fosfolipaza C

Fosfolipaza C este o enzim membranar care catalizeaz reacia de

hidroliz a fosfolipidului fosfatidil inozitol 4,5 bifosfat (PIP2) n 1,4,5
inozitoltrifosfat (IP3) i 1,2 diacilglicerol (DAG), ambii funcionnd ca
mesageri secunzi, responsabili de activarea protein-kinazei C (PKC) i de
eliberarea calciului intracelular.
Inozitoltrifosfatul (IP3) difuzeaz n citosol i induce eliberarea Ca2+
din reticulul endoplasmatic, prin legarea sa de canalele de eliberare a Ca 2+
(dependente de IP3) din membrana acestui organit. Canalele sunt similare

60
structural cu canalele de eliberare a Ca2+ din reticulul sarcoplasmatic al
celulelor musculare, care, elibernd Ca2+, declaneaz contracia.
Diacilglicerolul (DAG) are rolul de a activa n citosol protein-kinaza
C, dependent de Ca2+. n mod normal, protein-kinaza C inactiv este o
protein solubil n citosol. n prezena ionilor de Ca 2+ ea se leag de
plasmalem, unde poate fi activat de diacilglicerol i fosfatidilserin.
Protein-kinaza C (C-kinaza; PKC) joac un rol important n procesele
de cretere i n metabolismul celular. Astfel, n unele celule, protein-kinaza
C fosforileaz un canal antiport membranar de Na+ i H+, care controleaz
pH-ul intracelular, avnd ca efect creterea pH-ului intracelular i care
iniiaz proliferarea celulelor.

GMPc fosfodiesteraza

GMPc fosfodiesteraza este o enzim specific celulelor cu bastonae

i cu conuri din structura retinei, care catalizeaz reacia de formare a GMPc
pornind de la GTP. Ea este activat de ctre transducinele Gt1 i Gt2.

Canalele ionice

Canalele ionice sunt in general canale de conducere a potasiului sau a

calciului, care i moduleaz activitatea prin unele subuniti ale clasei Gi.

Ionii de Ca2+ ca mesageri intracelulari secunzi

(de ordinul 2)

n citosolul celulelor animale este meninut n permanen o

concentraie foarte sczut a ionilor de Ca2+ (cca. 10-7M), comparativ cu
concentraia acestor ioni n mediul extracelular (cca. 10 -3M). Pentru
meninerea concentraiei sczute de calciu n citosol, intervine Ca2+-ATP-aza
din membrana plasmatic a celulelor, care utilizeaz energia rezultat prin
hidroliza ATP pentru a pompa Ca2+ din citosol la exteriorul celulei.
n celulele musculare, un rol important n meninerea concentraiei
sczute a calciului citosolic, l dein Ca2+-ATP-azele din membrana reticulului
sarcoplsmatic. Aceast ATP-az permite reticulului endoplasmatic s preia
activ cantiti mari de Ca2+, chiar dac concentraia Ca2+ n citosol este mic,
deci mpotriva gradientului de concentraie. Celulele musculare i nervoase
conin n membrana lor o pomp care cupleaz efluxul de Ca 2+ cu influxul
Na+.
Cnd un semnal deschide tranzitoriu canalele de Ca 2+ din aceste
membrane, ionii de Ca2+ ptrund n citosol determinnd o cretere brusc a
concentraiei locale i astfel sunt activate proteinele din celul, sensibile la
Ca2+. O cretere extrem de mic, cu doar 1 mM, a concentraiei ionilor de
calciu n citosol, induce o mare varietate de rspunsuri celulare, ca de
exemplu:

61
 - n celulele secretoare, cum sunt celulele ale insulelor Langerhans
din pancreas, care secret insulina, creterea concentraiei intracelulare a
Ca2+ declaneaz exocitoza veziculelor secretorii i eliberarea insulinei;
- n celulele musculare netede, creterea concentraiei Ca2+
declaneaz interaciunea actinei cu miozina, deci contracia;
- n celulele musculare striate i n cele hepatice, creterea
concentraiei Ca2+ activeaz degradarea glicogenului.
Numeroase cercetri au relevat prezena n toate celulele animale i
vegetale a unei proteine denumit calmodulina, care funcioneaz ca un
receptor intracelular de Ca2+ cu roluri multiple, ea mediind numeroase
procese reglate de Ca2+.
Mesagerii de ordinul 2 nu au numai rolul de a traduce semnalele
extracelulare n semnale intracelulare, dar realizeaz i o amplificare foarte
mare a semnalului iniial. Fiecare ligand care se leag de un receptor
activeaz mai multe molecule de protein G, deci mai multe molecule de
adenilat-ciclaz. Adenilat-ciclaza va determina conversia unui mai mare
numr de molecule de ATP n AMPc.

Alte tipuri de receptori cuplai la proteina G

Rodopsina
Din familia receptorilor legai de proteina G face parte i rodopsina sau
purpurul retinian, activat de lumin la nivelul ochiului, precum i receptorii
olfactivi ai vertebratelor (n acest caz, receptorii activeaz prin intermediul
proteinei G, canale ionice).
Retina, organ nervos membraniform, avascular, tunica intern a
globului ocular, este alctuit din zece straturi, din care importante sunt
celulele fotoreceptoare cu conuri i bastonae, celulele pigmentare i
neuronii stratului multipolar ganglionar, n care se concentreaz influxul
vizual.
Conurile i bastonaele sunt dendrite ale neuronilor receptori.
Bastonaele sunt responsabile de vederea nocturn i perceperea culorii
albastre, iar conurile sunt adaptate vederii diurne, perceperii culorilor verde,
rou, galben i a formelor obiectelor. Neuronii fotoreceptori sunt constituii
dintr-un corp (pericarion); un segment extern i o regiune sinaptic, care
stabilete relaii cu neuronii bipolari.
Aparatul de fototransducie din segmentul extern (conul, bastonaul)
conine discuri suprapuse. Fiecare disc este format dintr-un sac nchis, un fel
de vezicul sinaptic, care conine molecule lipoproteice fotosensibile:
rodopsina pentru celulele cu bastona; iodopsina pentru celulele cu conuri
(pigmeni vizuali). n fiecare segment intern exist aproximativ 1000 de
discuri.
Procesul vizual se realizeaz n trei etape principale:
- absorbia fotochimic a luminii de ctre pigment, acesta suferind o
modificare conformaional, fotonii determinnd izomerizarea 11-cis retinal n
trans-retinal. Izomerizarea 11cis-retinal, indus printr-un foton, antreneaz
activarea rodopsinei;

62
 - stimularea unui impuls nervos la modificarea conformaional a
pigmentului. Impulsul electric, preluat de nervul optic, ajunge la creier,
concretizndu-se n final n aparitia senzaiei de culoare;
- regenerarea pigmentului la starea iniial. Acest proces const n
transformarea trans-retinal n cis-retinal, sub aciunea enzimei retinal-
izomeraza. Recombinarea cis-retinalului cu orsina determin regenerarea
rodopsinei, receptor care poate relua un nou ciclu de perceptie.
Cuanta de lumin absorbit de rodopsin (iodopsin) conduce la
disocierea acesteia i, ca urmare, pigmentul se decoloreaz. Deoarece
pigmentul este localizat n membrana celulelor fotosensibile ale retinei, se
produce o depolarizare local a membranei i se genereaz un impuls
electric, transmis de-a lungul fibrei nervoase.
n transducia vizual, activarea receptorului este determinat deci de
un semnal luminos, lumina inducnd o scdere a concentraiei GMPc, i nu o
cretere a concentraiei acestuia.
n neurolema care limiteaz segmentul extern al celulei fotosensibile,
se afl canale de Na+- dependente de GMPc (guanozin monofosfat ciclic).
Aceste canale sunt meninute deschise la ntuneric, prin moleculele de GMPc
legate de ele i se nchid la lumin.Lumina induce scderea GMPc printr-o
hiperpolarizare, care inhib semnalizarea sinaptic, prin nchiderea canalelor
de Na+. Concomitent cu hiperpolarizarea membranei se reduce i ritmul
eliberrii neurotransmitorilor n fantele sinaptice. Deoarece
neurotransmitorul acioneaz inhibnd muli dintre neuronii postsinaptici
retinieni, contactul cu lumina dezinhib neuronii i deci i stimuleaz.

Receptorii olfactivi ai vertebratelor

Mecanismul olfaciei se bazeaz pe semnale chimice substane
odorante care, inspirate, sunt receptate de dendritele neuronilor bipolari.
Substanele odorante sunt solvite la suprafaa mucoasei, n secreiile
eliberate de acinii seroi.
Pe suprafaa membranelor celulelor olfactive exist sute de receptori
legai de proteina G. Omul poate distinge peste 10000 de mirosuri diferite,
care sunt detectate prin neuronii olfactivi. Aceste celule recunosc substanele
odorante prin intermediul unor receptori olfactivi specifici, legai de proteina
G, receptori care sunt dispui pe suprafaa cililor olfactivi ai fiecrei celule.
Dup legarea moleculelor odorante, receptorii olfactivi activeaz adenilat-
ciclaza sau fosfolipaza C, prin intermediul proteinelor G trimerice, ceea ce
determin creterea concentraiei AMPc (mesager de ordinul 2), sau
creterea concentraiei IP3 (dac este stimulat fosfolipaza C). Creterea
concentraiei AMPc va determina depolarizarea plasmalemei celulelor
olfactive prin deschiderea canalelor ionice dependente de AMPc, care permit
intrarea n celul a ionilor de Na+. Se iniiaz astfel un impuls nervos, care
ajunge la nervii centrali sub forma unui semnal electric. n cilii olfactivi, IP 3
provoac o intrare a Ca2+ extracelular, iar aceasta din urm va stimula
activitatea fosfodiesterazei i probabil a adenilat-ciclazei. Axonii neuronilor
bipolari transmit semnalul electric prin sinapsele pe care le stabilesc cu
neuronii mitrali din bulbul olfactiv, neuroni care formeaz segmentul de

63
conducere al analizorului; releul sinaptic se continu prin legturile neuronilor
mitrali cu celulele nervoase analizatoare din scoar.

Receptorii legai de enzime

Receptorii legai de enzime sunt n general proteine cu un singur pasaj

transmembranar, care prezint pe domeniul extracelular un situs de cuplare
cu ligandul, iar pe domeniul citoplasmatic prezint un situs enzimatic activ.
Majoritatea receptorilor din aceast categorie sunt protein-kinaze, sau sunt
asociai cu protein-kinazele care fosforileaz anumite grupuri de proteine din
celula int. Din aceast categorie fac parte receptorii guanilat-ciclazei.
Guanilat-ciclaza este o enzim solubil n citoplasm, care determin
creterea cantitii de GMPc (guanozin-monofosfat ciclic) sub influena
reaciilor n care sunt implicai inozitol-fosfaii.
GMPc, ca mediator intracelular, activeaz protein-kinazele specifice
(kinaze G), care fosforileaz proteine celulare. n acest caz, legtura ntre
cuplarea ligandului i activitatea ciclazic este direct, fr intervenia
proteinei G. Cel mai cunoscut receptor din aceast clas este receptorul
pentru factorul natriuretic atrial (FNA sau Atrial natriuretic peptides ANP).
Peptidele natriuretice atriale (ANP) sunt hormoni peptidici secretai de
miocardiocitele atriale, la creterea presiunii arteriale. Receptorii pentru ANP
sunt prezeni la nivelul celulelor renale i celulelor musculare netede din
pereii vaselor sanguine. ANP stimuleaz excreia Na+ i a apei la nivel renal
i induc relaxarea celulelor musculare netede din pereii vaselor sanguine,
ambele aspecte avnd ca efect reducerea presiunii sanguine.

Concepte i noiuni de reinut

Mesagerii sunt substane (semnale) chimice care intervin n

metabolismul celular, ei acionnd asupra unor receptori celulari specifici,
aflai n plasmalem, n citosol sau n membrana nuclear.
Moleculele hidrofile se leag la receptorul membranar deoarece sunt
incapabile de a traversa membrana plasmatic pentru a declana rspunsul
celular. Legarea moleculei la receptorul specific induce o modificare a
conformaiei tridimensionale a receptorului. El este astfel activat i
interacioneaz cu moleculele intracelulare care, la rndul lor, iniiaz noi
procese la nivelul proteinelor aa cum sunt fosforilrile/defosforilrile
Moleculele hidrofobe (hormonii steroizi i tiroidieni, acidul retinoic,
derivaii vitaminei D...) pot traversa cu uurin membrana plasmatic i se
leag la receptorul lor citosolic sau nuclear.
Conform distanei la care acioneaz, mesagerii sunt clasificai
n: mesageri endocrini (hormonii), mesageri paracrini (neurotransmitorii,
histamine, prostaglandinele), mesageri autocrini (factori de cretere).
Celulele endocrine, ca i neuronii, sunt nalt specializate n
producerea de semnale chimice, asigurnd reglarea funciilor tuturor
esuturilor i organelor prin produi i mecanisme similare

64
 Receptorii sunt dispozitive chimice, de natur proteic, situate n
plasmalem, nucleolem sau citosol, care au calitatea de a recunoate i de
a se cupla cu mesagerul, declannd rspunsul celulei int, manifestat n
aceasta prin modificri de structur, modificri metabolice, exprimarea
funciilor specifice.
Receptorii pentru substane endogene sunt receptorii pentru
neurotransmitori, hormoni, antigenele endogene, anticorpi, complement
etc.
Receptorii pentru substane endogene recunosc antigene
endogene, anticorpi, complement.
n funcie de mecanismul de transmitere a semnalului
extracelular spre interiorul celulei, receptorii membranari au fost clasificai
n trei categorii: receptori legai de canale ionice, legai de enzime i
legai de proteina G.
Receptorii legai de canale ionice sunt localizai la nivelul
jonciunilor sinaptice i funcioneaz dup principiul canalelor ionice cu
poart comandate de ligand.
Receptorii cuplai la proteina G (RCPG) sunt extrem de numeroi
(cca. 2000), recunosc o mare varietate de stimuli (ex. fotoni, molecule
odorante, gustative, feromoni, amine nucleoside, nucleotide, lipide, hormoni
glicoproteici etc.
Proteina G funcioneaz ca intermediar, asigurnd comunicarea
dintre receptorii de pe suprafaa celular i efectorii membranari (adenilat
ciclaza, fosfolipaza C, canale ionice) care genereaz n citoplasm mesageri
secunzi de tipul AMPc, Ca2+, IP3, DAG.
Mesagerii secunzi (sau de ordinul 2) nu au numai rolul de a traduce
semnalele extracelulare n semnale intracelulare, dar realizeaz i o
amplificare foarte mare a semnalului iniial.
AMPc este un mesager de ordinul 2, care traduce stimulii celulari
externi (ex. hormonii) n stimuli interni, influennd diferite procese
metabolice intracelulare. n celulele animale, AMPc modific activitatea unui
grup specific de enzime, ca urmare a activrii unei enzime dependent de
AMPc, numit protein-kinaza A (A-kinaza sau PKA).
Inozitoltrifosfatul (IP3) induce eliberarea Ca2+ din reticulul
endoplasmatic, prin legarea sa de canalele de eliberare a Ca 2+ (dependente
de IP3) din membrana acestui organit.
Diacilglicerolul (DAG) are rolul de a activa n citosol protein-kinaza
C, dependent de Ca2+.
n transducia vizual, activarea receptorului este determinat deci
de un semnal luminos, lumina inducnd o scdere a concentraiei GMPc, i
nu o cretere a concentraiei acestuia.
Neuronii olfactivi recunosc substanele odorante prin intermediul
unor receptori olfactivi specifici, legai de proteina G, receptori care sunt
dispui pe suprafaa cililor olfactivi ai fiecrei celule. Dup legarea
moleculelor odorante, receptorii olfactivi activeaz adenilat-ciclaza sau
fosfolipaza C, prin intermediul proteinelor G trimerice, ceea ce determin
creterea concentraiei AMPc (mesager de ordinul 2), sau creterea
concentraiei IP3 (dac este stimulat fosfolipaza C).

65
 ntrebri de autoevaluare
1. Cum se clasific mesagerii n funcie de distana la care acioneaz?
2. Cum se clasifica receptorii in functie de topografie si de originea
mesagerului?
3. Ce este si cum functioneaza proteina G?
4. Dati exemple de receptori cuplati la proteina G.
5. Care sunt tipurile de efectori, inta proteinelor G?
6. Cum functioneaza DAG si IP3 ca mesageri de ordinul 2 in celula?

66
 UNITATEA DE NVARE 6

FUNCIA DE ADEZIVITATE A MEMBRANEI CELULARE

Cuvinte cheie: jonciuni simple, desmozomi, jonciuni strnse,

jonciuni de comunicare, conexoni, conexine

Rezumat
Adezivitatea este proprietatea membranei celulare de a stabili relaii
cu celulele vecine sau cu celule aflate la distan. n aceast unitate este
prezentat structura i funciile ndeplinite de cele trei trei categorii de
jonciuni intercelulare: de ancorare ( jonciuni de adeziune celul celul i
celul matrice; jonciuni de tip desmozomi), de ocluzie (jonciunile strnse
sau impermeabile) i de comunicare (jonciunile permeabile sau gap i
sinapsele chimice).

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 2 ore

Adezivitatea este proprietatea membranei celulare de a stabili relaii

cu celulele vecine sau cu celule aflate la distan. Astfel, celulele de un
anumit tip se agreg ntr-un esut, pentru a coopera la ndeplinirea unei
funcii comune: contracie muscular, conducerea impulsurilor electrice,
absorbia intestinal, etc.
Contactele dintre celule implic cunoateri reciproce i se realizeaz
prin multiple mecanisme: ciment intercelular, jonciuni, fore Van der Walls,
ioni de Ca2+, puni de hidrogen, contacte prin mesaje chimice.
"Cimentarea" se realizeaz prin molecule proteice adezive, cum sunt:
fibronectina, uvomorulina, laminina etc., care ocup spaiul dintre
membranele a dou celule apropiate.
Proteinele adezive sunt secretate de celulele sanguine, epiteliale sau
conjunctive, ele alimentnd permanent spaiile intercelulare. Dispariia
celulelor furnizoare de proteine adezive, favorizeaz desprinderea celulelor
din angrenajul natural.
Jonciunile celulare sunt formaiuni de legtur ntre celulele vecine,
relativ stabile, cu excepia unor situaii fiziologice, cnd acestea se pot
desface i reface, permind treceri de produi sau chiar de celule (ex.:
leucopedeza sau diasteme epiteliale).
Se cunosc trei categorii de jonciuni: de ancorare, de ocluzie
(jonciunile strnse sau impermeabile), de comunicare (jonciunile permeabile
sau gap i sinapsele chimice).

67
 Jonciunile de ancorare

Jonciunile de ancorare menin celulele unite ntre ele, conferind

rezisten esuturilor supuse intens aciunii unor fore mecanice mari (ex:
miocard, miometru, celule epiteliale).
Jonctiunile de ancorare sau de aderen (AJ sau zonula adherens)
sunt complexe proteice care apar la punctele de contact celul-celul sau
celula matrice (fig. 21). Ele sunt formate din interaciuni ntre glicoproteinele
transmembranare de legare, proteinele adaptor intracelulare i citoschelet.
Glicoproteinele transmembranare de legare sau moleculele de
adeziune celular (CAMs cell adhesion molecules) prezint dou domenii:
-intracelular, care se leag la una sau mai multe proteine adaptor
intracelulare;
-extracelular, care interacioneaz, fie cu domeniul extracelular al
glicoproteinelor transmembranare din celula vecin, fie cu matricea
extracelular.
Moleculele de adeziune celular (CAMs) se mpart n patru familii
majore: cadherinele, superfamilia imunoglobulinelor (Ig), integrinele i
selectinele.
Proteinele adaptor intracelulare conecteaz glicoproteinele
transmembranare i, ntreg complexul joncional, la filamentele de actin sau
la filamentele intermediare din structura citoscheletului.
n funcie de tipul filamentelor proteice citoscheletale la care se leag
proteinele adaptor intracelulare, jonciunile de ancorare sau de aderen se
clasific n jonciuni de adeziune, care se caracterizeaz prin legarea
proteinelor adaptor la filamentele de actin ale citoscheletului i structuri de
tipul desmozomilor, n care proteinele adaptor se leag de filamentele
intermediare de keratin din structura citoscheletului (fig.).
Jonciunile de adeziune sunt de dou tipuri: jonciuni celul-celul i
jonciuni celul-matrice.

Fig. 21. Reprezentarea schematica a jonctiunilor de ancorare

Jonciunile de adeziune celul-celul

n epitelii, jonciunile de adezivitate au aspectul unor benzi care

nconjoar, ca un cordon, polul apical al celulelor, sunt dispuse imediat sub
jonciunile impermeabile (zonula occludens) i sunt caracterizate prin dou
68
membrane n apoziie, care sunt separate printr-un spaiu de cca. 20 nM. Ele
au fost numite benzi de aderen. Celulele epiteliale nvecinate au benzile de
aderen situate la acelai nivel, iar membranele lor interacioneaz prin
intermediul unor proteine cu afinitate pentru ionii de Ca2+, numite cadherine.

Fig. 22. Organizarea structural a

jonciunilor de adeziune
(www.wikidoc.org/index.php/Desmoso
me)

Jonciunile de adeziune celul - matrice

Jonciunile de adeziune celul-matrice conecteaz celulele i

filamentele lor de actin la matricea extracelular. Adezivitatea celulelor la
matrice, ca i la membrana bazal, este mediat de proteine matriceale ca
fibronectina, laminina i colagenul, crora le corespund receptori ai
suprafeelor celulare, reprezentai de sialoglicoproteine integrale ale
membranei.
Celulele din diferite esuturi prezint pe membran regiuni nalt
specializate numite plci de adeziune sau contacte focale, reprezentnd
puncte n care se termin reeaua de filamente de actin, prin intermediul
crora, celulele ader la moleculele matricei extracelulare.
Relaia dintre filamentele de actin din citoplasm i moleculele
matricei extracelulare este mediat de glicoproteine transmembranare, cu
funcie de receptori, de tipul integrinelor.

Fig. 23. Reprezentarea schematica a

jonctiunilor de adeziune celula matrice
(http://php.med.unsw.edu.au/cellbiology/index.php
?title=2009_Lecture_8)

69
 Desmozomii

Desmozomii sunt puncte de contact intercelulare care, ca i jonctiunile

adezive (AJ), au rol n stabilitatea mecanic a celulelor adiacente din diferite
esuturi, n special din epitelii. La formarea desmozomilor particip
membranele celulelor adiacente, aflate n apoziie, separate printr-un spaiu
intercelular de cca. 20-30 nm.
Structural, la nivelul desmozomilor se ntlnesc dou categorii de
complexe moleculare:
- glicoproteinele transmembranare de legare care, prin domeniul
lor extracelular se asociaz cu glicoproteinele transmembranare ale celulei
adiacente, iar prin domeniul intracelular se conecteaz la placa
citoplasmatic;
- placa citoplasmatic format din proteine adaptor sau de
ataare la filamentele intermediare ale citoscheletului.
Desmozomii conin dou glicoproteine transmembranare specializate,
membrii ai familiei cadherinelor, desmogleina i desmocollina, ale cror
domenii citosolice sunt distincte fa de cele ale cadherinelor clasice.
Domeniile citosolice ale cadherinelor desmosomale interacioneaz cu
proteinele adaptor. Aceste proteine adaptor, care formeaz plci
citoplasmatice groase (15 20 nm), situate pe faa intern a membranelor
celulelor adiacente, interacioneaz, la rndul lor, cu filamentele
intermediare. Astfel, desmosomii i jonciunile de adeziune sunt legate de
fibre citoscheletale diferite (fig.).
Domeniile extracelulare ale glicoproteinelor transmembranare
(desmogleina, desmocollina) interacioneaz cu cele ale celulei adiacente
realiznd astfel conexiunea plcilor de ataament din membranele celulelor
nvecinate.

Fig. 24. Organizarea

structurala a unui desmozom
(http://php.med.unsw.edu.au/cellbiol
ogy/index.php?title=2009_Lecture_8)

70
 Hemidesmozomii

Hemidesmozomii sunt structuri specializate care unesc plasmalema

bazal a celulelor epiteliale, cu membrana bazal, o structur special a
matricei extracelulare, dispus la interfaa dintre epiteliu i esutul conjunctiv.
Numrul lor este relativ acelai la toi indivizii, nefiind influenat de vrst, sex
sau regiunea anatomic.
n microscopia electronic, hemidesmozomii prezint urmatoarele
componente: placa intern (citoplasmatic); placa extern (membranar);
zona extracelular (subbazala densa).

Jonciunile impermeabile

Jonciunile impermeabile sau strnse (zonula occludens; tight

junctions) se realizeaz prin "sudarea" plasmalemelor a dou celule vecine,
spaiul intercelular fiind absent.
Ele sunt alctuite din 4 familii de proteine transmembranare:
ocludinele, claudinele, moleculele de adeziune joncional (JAM-uri) i
tricelulina. Ocludinele, claudinele i proteinele JAM formeaz o reea de
fibrile care nconjoar domeniul apical al celulelor epiteliale (sau domeniul
membranei laterale a celulelor endoteliale).
Proteinele transmembranare sunt legate, n poriunea intracelular, la
o plac citoplasmatic, care este format dintr-o reea scheletal i proteine
adaptor, componente de semnalizare i de legare la actina citoskeletului.
Poriunile extracelulare ale proteinelor transmembranare din celulele
adiacente anastomozeaz pentru a forma jonciuni strnse. Moleculele
proteice din irurile membranelor adiacente traverseaz spaiul intercelular,
alctuind legturi asemntoare dinilor unui fermoar. Astfel, aceast
structur realizeaz un fel de centur n poriunea apical a celulelor
epiteliale (de exemplu celulele epiteliului gastrointestinal, renal, al vezicii
urinare etc.) i nchide perfect spaiul intercelular.
Aceste jonciuni menin funcia de barier selectiv a epiteliilor,
limitnd difuzarea substanelor prin spaiul intercelular. Din acest motiv,
substanele alimentare nu pot trece n capilarele sanguine ale mucoasei
intestinului subire dect printr-un proces de transport transepitelial. Prin
acest mecanism trece de exemplu glucoza, care este pompat activ din
lumenul intestinal prin membrana apical a celulei absorbante, iar din celul,
glucoza trece n lichidul interstiial prin difuziune facilitat, mediat de
transportori situai n domeniul bazolateral al plasmalemei i apoi n snge.
Jonciunile strnse blocheaz difuziunea setului apical de proteine
transportoare spre polul bazal al celulei i invers, permind astfel trecerea
ntr-un singur sens a substanelor alimentare (ex. glucoza), dinspre polul
apical spre polul bazal al celulelor absorbante i totodat mpiedic
retrodifuziunea glucozei din spaiul subcelular n lumenul intestinal. Unele
cercetri au artat c jonciunile strnse pot fi distruse sub influena unor
factori fizici sau chimici i pot fi resintetizate cu uurin, deoarece ARNm
care codific proteinele implicate n formarea acestor jonciuni este foarte
stabil. De exemplu, jonciunile strnse i menin integritatea structural doar
n prezena concentraiei fiziologice a Ca2+ din spaiul intercelular. Dac n

71
mediul intercelular concentraia Ca2+ scade, jonciunea se dezintegreaz, iar
dac este readus la normal, ele se reagreg n maxim o or.

Fig. 25. Reprezentarea schematic a structurii jonciunilor strnse

(http://www.thefullwiki.org/Tight_junction)

Fig. 26. Reprezentarea schematica a componentelor transmembranare din

structura jonctiunilor stranse. Proteinele ZO 1 sau ZO 2 mediaza interactiunea
claudinelor sau ocludinelor la filamentele de actina din structura citoscheletului. Rolul altor
proteine scheletale (ZO-3/MAGI/MUP1) este mai putin clar. Proteinele ZO i cingulina pot
oferi o legtur direct cu actina citoscheletului. (Carien M Niessen, 2007)

72
 Jonciunile de comunicare (gap)

Jonciunile de comunicare sunt de dou tipuri: jonciuni gap

(permeabile; gap = gol; spaiu mic) i sinapsa.
Jonciunile de comunicare (gap) sunt cele mai rspndite jonciuni,
ntlnindu-se n majoritatea esuturilor.
La formarea jonciunii gap particip membranele celulelor alturate,
spaiul intercelular neobliterat i conexonii. Fiecare conexon este constituit
din 6 molecule proteice identice, numite conexine, care formeaz un
hexamer. Centrul structurii hexagonale formeaz un canal. Fiecare jonciune
gap este format din sute de conexoni. La constituirea jonciunii, conexonii
din membranele a dou celule adiacente vin n contact, realiznd canale de
comunicare ntre citoplasmele celulelor vecine.
Jonciunile gap mediaz comunicarea dintre celule deoarece permit
trecerea dintr-o celul n alta a ionilor, a moleculelor cu greutate mic (mai
mic de 1200 Da) (ex. aminoacizii, glucidele, nucleotidele, hormonii,
vitaminele), ns nu permit trecerea moleculelor cu greutate molecular mai
mare de 2000 Da (ex. macromolecule proteice, acizi nucleici) (fig.). Astfel,
ele realizeaz cuplarea electric i metabolic a celulelor vecine.
Jonciunile gap mediaz astfel procese vitale importante precum
propagarea impulsului nervos de la o celul la alta, reglarea creterii
celulare, dezvoltarea organelor etc. n plus, mutaiile care pot aprea la
nivelul proteinelor din structura jonciunilor gap sunt legate de diverse boli
genetice, inclusiv tulburrile sistemului nervos, surditate, cataract, defecte
ale inimii, i boli de piele.
Jonciunile gap sunt structuri dinamice, a cror permeabilitate este
determinat de concentraia citosolic a ionilor de Ca2+, de pH-ul citosolic,
valoarea potenialului de membran i de o serie de semnale chimice
extracelulare. Ele au un rol determinant n funcionarea normal a celulelor
asociate n tesuturi. Astfel, dac membrana unei celule epiteliale se rupe,
ionii de Ca2+ intr masiv n aceasta, determinnd creterea brusc a
concentraiei Ca2+ n citoplasma celulei lezate. Aceast acumulare masiv a
Ca2+ determin nchiderea conexonilor, evitnd astfel extinderea leziunii n
epiteliu.
Jonciunile gap sunt rspndite n esuturi i organe ca: ficat, rinichi,
glande salivare, glande endocrine, piele. De asemenea, ele se ntlnesc i
ntre celulele musculare ale miocardului, celule care sunt interconectate prin
astfel de jonciuni, precum i ntre celulele musculare ale pereilor intestinali
i vasculari, unde favorizeaz propagarea impulsurilor de la o celul la alta i
ca urmare, rspndirea undelor de contracie pe distane mari.
Sinapsa este o jonciune de comunicare contigu, realizat ntre doi
neuroni, o celul nervoas i una efectoare (de ex: ntre fibra nervoas i cea
muscular), ntre neuron i segmentul periferic receptor al analizorului, prin
care semnalele chimice de comunicare sunt transformate n semnale
electrice. Sinapsa este alctuit din componenta presinaptic (poriunea
terminal a prelungirii axonice a neuronului, care secret i elibereaz
neurotransmitorul n spaiul intersinaptic), componenta postsinaptic
(poriunea incipient a celui de al doilea neuron sau a organului efector) i
spaiul intersinaptic.

73
 Fig. 27. Reprezentarea schematica a jonctiunilor gap si a conexonilor

Fig. 28. Formarea canalelor joncionale gap hidrofilice prin interaciunea conexonilor
celulelor adiacente; la nivelul plcilor joncionale, distanta ntre membranele celulare este
mult mai mic (2,7 nm) comparativ cu cea din afara plcilor joncionale

Concepte i noiuni de reinut

Adezivitatea este proprietatea membranei celulare de a stabili relaii

cu celulele vecine sau cu celule aflate la distan.
Se cunosc trei categorii de jonciuni: de ancorare, de ocluzie
(jonciunile strnse sau impermeabile), de comunicare (jonciunile
permeabile sau gap i sinapsele chimice).
Jonciunile de ancorare menin celulele unite ntre ele, conferind
rezisten esuturilor supuse intens aciunii unor fore mecanice mari (ex:
miocard, miometru, celule epiteliale).
Ele sunt formate din interaciuni ntre glicoproteinele transmembranare
de legare, proteinele adaptor intracelulare i citoschelet.
Proteinele adaptor intracelulare conecteaz glicoproteinele
transmembranare i, ntreg complexul joncional, la filamentele de actin sau
la filamentele intermediare din structura citoscheletului.

74
 n funcie de tipul filamentelor proteice citoscheletale la care se
leag proteinele adaptor intracelulare, jonciunile de ancorare se
clasific n jonciuni de adeziune, care se caracterizeaz prin legarea
proteinelor adaptor la filamentele de actin ale citoscheletului i structuri de
tipul desmozomilor, n care proteinele adaptor se leag de filamentele
intermediare de keratin din structura citoscheletului.
Jonciunile de adeziune sunt de dou tipuri: jonciuni celul-celul
realizate prin participarea cadherinelor i jonciuni celul-matrice,
realizate prin intermediul receptorilor membranari integrinici.
Desmozomii sunt puncte de contact intercelulare care, ca i
jonctiunile adezive, au rol n stabilitatea mecanic a celulelor adiacente din
diferite esuturi, n special din epitelii.
Hemidesmozomii sunt structuri specializate care unesc plasmalema
bazal a celulelor epiteliale, cu membrana bazal, o structur special a
matricei extracelulare, dispus la interfaa dintre epiteliu i esutul conjunctiv.
Jonciunile impermeabile sau strnse (zonula occludens; tight
junctions) sunt alctuite din 4 familii de proteine transmembranare:
ocludinele, claudinele, moleculele de adeziune joncional (JAM-uri) i
tricelulina. Moleculele proteice din irurile membranelor adiacente
traverseaz spaiul intercelular, alctuind legturi asemntoare dinilor unui
fermoar care nchid perfect spaiul intercelular.
Jonciunile impermeabile menin funcia de barier selectiv a
epiteliilor, limitnd difuzarea substanelor prin spaiul intercellular. Sunt
specific epiteliului gastrointestinal, renal i al vezicii urinare.
Jonciunile de comunicare (gap) sunt cele mai rspndite jonciuni,
ntlnindu-se n majoritatea esuturilor.
La formarea jonciunii gap particip membranele celulelor alturate,
spaiul intercelular neobliterat i conexonii.
Fiecare conexon este constituit din 6 molecule proteice identice,
numite conexine, care formeaz un hexamer. Centrul structurii hexagonale
formeaz un canal. Fiecare jonciune gap este format din sute de conexoni.
La constituirea jonciunii, conexonii din membranele a dou celule adiacente
vin n contact, realiznd canale de comunicare ntre citoplasmele celulelor
vecine
Jonciunile gap mediaz astfel procese vitale importante precum
propagarea impulsului nervos de la o celul la alta, reglarea creterii
celulare, dezvoltarea organelor.

ntrebri de autoevaluare
1. Ce se intelege prin noiunea de adezivitate celular?
2. Descriei structura jonciunilor de ancorare.
3. De cte tipuri sunt jonciunile de adeziune i ce structur au acestea?
4. Ce importan au legturile realizate prin hemidesmozomi?
5. Care sunt tesuturile la nivelul carora predomina jonctiunile stranse sau
impermeabile si care sunt implicatiile biologice ale acestora?
6. Ce sunt conexonii?
7. Care este importana jonctiunilor gap intercelulare?

75
 UNITATEA DE NVARE 7

CITOPLASMA. ORGANIZAREA MORFOLOGIC,

COMPARTIMENTAREA I SUBCOMPARTIMENTAREA
CELULEI

Cuvinte cheie: citosol, citoschelet, actina, miozina, filamente

intermediare, microtubuli, motilitate

Rezumat
Celula eucariot, ca tot unitar, este format din dou compartimente:
citoplasm, nucleu, cu rol diferit, aflate n intercomunicare i intercondiionare
i separate ntre ele prin cisterna perinuclear. Compartimentele conin
structuri (subcompartimente) cu morfologie i funcii specifice - organitele
celulare (citoplasmatice, nucleare). Ca structur propriu-zis, celula este
format din matrice i din organite iar matricea, la rndul ei, este constituit
din citosol i citoschelet.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 2 ore

Citosolul

Citosolul este reprezentat pentru citoplasm de hialoplasm, iar pentru

nucleu de nucleoplasm, ocupnd aproximativ 55% din volumul total al
celulei. Citosolul conine ap, electrolii, proteine solubile sau specifice,
enzime, diferite molecule organice, coninut mai complex n hialoplasm, n
special n ceea ce privete proteinele i ionii, n corelaie cu funciile mai
numeroase ce revin membranei i citoplasmei: transportul transmembranar,
sinteze citoplasmatice de proteine, glucide, lipide, alte substane, scindri
moleculare i producere de energie.
Nucleoplasma conine ioni de Ca2+, Mg2+, Fe2-, enzime nucleare,
implicai n metabolismul nucleotidelor, n sintezele de ADN, ARN i n
meninerea integritii cromozomilor.
Citosolul prezint o mare elasticitate i stri de tranziie de la sol la gel
de mare importan.
n starea de sol, sistemul n ansamblu este fluid, caracterizat prin
micarea liber a moleculelor celor dou faze.
n starea de gel, prin creterea vscozitii, moleculele se leag i
formeaz o reea tridimensional (mediul dispersat), n ochiurile creia se
dispune apa i alte substane ale mediului de dispersie.
Tranziiile de la sol la gel sunt reversibile i sunt influenate pozitiv sau
negativ de factori exogeni sau endogeni ca de ex: diviziunea, pH-ul, viteza de
76
micare a moleculelor, temperatura, lumina, radiaiile, presiunea, toxinele
microbiene sau virale.
Rolul citosolului:
- conine rezerva molecular din care se edific filamentele proprii,
citoscheletul i organitele. n hialoplasm au fost identificate peste 1300 de
proteine clasificate n contractile i intermediare.
- nglobeaz organitele i este sediul incluziunilor nucleo-
citoplasmatice;
- este sediul metabolismului celular (citoplasmatic, nuclear): glicolizei,
glicogenezei, gliconeogenezei, biosintezei acizilor grai (lipogenez),lipoliz,
biosinteza nucleotidelor i a acizilor nucleici.

Citoscheletul

Citosolul tuturor celulelor eucariote este parcurs de o reea de fibre

proteice care asigur forma celulei, micarea celular i ancoreaz
organitele n situsuri bine definite. Aceast reea tridimensional, denumit
citoschelet, este alctuit din urmtoarele tipuri de filamente proteice, care se
ntretaie n toate direciile: filamente de actin (FA), filamente de miozin,
filamente intermediare (FI) i microtubuli (Mt). Citoscheletul este un sistem
dinamic deoarece se asambleaz i se dezasambleaz constant. Fiecare din
filamentele citoscheletului se formeaz prin polimerizarea unor subuniti
proteice identice, care se asambleaz spontan pe lungimea lanului. Prin
disocierea fibrelor, sunt eliberate subunitile lor la una sau alta din
extremitile lanului.

Filamentele de actin (microfilamentele)

Actina este proteina cea mai abundent a citoscheletului, fiind

prezent n toate tipurile de celule musculare (unde reprezint 20% din
proteinele celulare) i nemusculare, sub dou forme: globular (G) i
filamentoas (F).
Actina globular (G) este constituit dintr-o succesiune de cca. 375
aminoacizi, la care se ataeaz un cation de Mg2+ (care i stabilizeaz
conformaia), completat fie cu o molecul de ATP, fie cu o molecul de ADP.
Actina filamentoas (actina F) rezult prin polimerizarea actinei
globulare (G) (fig. 38) i const n dou lanuri rsucite n dublu helix ( -
helix).
Lanul - helix prezint polaritate diferit la cele dou extremiti (o
extremitate minus aproximativ inert i cu cretere lent i o extremitate plus
cu o cretere rapid). Fiecare capt al actinei F este capabil s se lege de
cte un cap al moleculei de miozin. Formarea filamentelor de actin este
nsoit de hidroliza ATP. Dup polimerizare, hidroliza ATP destabilizeaz
legturile dintre subunitile polimerului favoriznd astfel depolimerizarea.

77
 Fig. 29 Reprezentarea schematic a filamentelor de actin
(Roland, J. C., i colab., 1982)

Organizarea filamentelor de actin n celulele nemusculare i

musculare

n celulele nemusculare, filamentele de actin se ntlnesc fie izolate,

fie grupate n fascicule i/sau reele, n prelungirile celulare cu caracter
permanent (ex. microvilii) i nepermanent (ex. pseudopodele, lamelipodele,
membranele ondulante), la periferia celulelor (fibrele de stress), n inelele
contractile tranzitorii, la nivelul desmozomilor.
Exist dou tipuri de fascicule de actin, distincte structural i
funcional i care implic diferite proteine asociate:
- primul tip conine filamente de actin dispuse paralel, cu spaii
mici ntre ele, cu aceiai polaritate i legate ntre ele prin proteine de tipul
fimbrinei i vilinei (fig. 30,31). Se ntlnete n structura microvililor;
- al doilea tip este constituit din filamente mult mai distanate, cu
caliti contractile, legate ntre ele printr-o protein denumit - actinin (fig.
30); se ntlnete n constituia fibrelor de stress de la periferia celulelor, n
structura inelului tranzitoriu, care separ celula n dou la sfritul diviziunii,
precum i n structura desmozomilor.
Reelele sunt alctuite din filamente de actin distanate ntre ele,
dispuse n zig zag i care sunt legate ntre ele printr-o protein denumit
filamin (fig. 30). Intr n structura pseudopodelor si lamelipodelor.
Filamentele de actin ndeplinesc urmtoarele roluri:
- structural: ele constituie un suport mecanic care determin forma
celulei i a prelungirilor membrano-citoplasmatice cu caracter permanent (ex.
microvilii) sau cu caracter temporar (pseudopodele, lamelipodele, filopodele);
- dinamic: asigur micarea bazat pe sistemul actin miozin;
- coordoneaz tranziiile de la sol la gel ale citoplasmei, prin poli- i
depolimerizare, procese implicate n micarea leucocitelor i a fibroblastelor
pe un anumit suport, precum i n fagocitoz, prin emiteri i retracii
succesive de pseudopode;
- intervin in procesul de aderare a celulelor epiteliale la matricea
extracelulara sau la alte celule.
- constituie, mpreun cu filamentele de miozin, inelul contractil, care
separ cele dou celule fiice la sfritul diviziunii celulare. Acest proces este
cunoscut sub denumirea de citodierez;

78
 - intervin n transportul viral: virusul ptrunde n celul fie prin fuziunea
membranei lui cu membrana plasmatic, fie pe calea endocitozei
dependente de receptori. Pentru un numr mare de virusuri, etapele precoce
de transport ctre nucleul celulei, implic reeaua de filamente de actin, n
tip ce etapele finale implic microtubulii.

Fig. 30. Organizarea filamentelor de actina in fascicule si/sau retele

(www.sciencebio.com/FacBioCell/Cytosquelette/FBCMicrofilaments.htm)

Fig.31. Reprezentarea schematic a microvililor (Ollivier, M., i colab., 1990)

Miozina

Miozina este o protein cu activitate ATP azic manifestat n

prezena actinei. Ea convertete energia chimic acumulat n ATP n
energie mecanic, utilizat pentru modificarea formei celulare sau pentru a
induce micarea. Dei este prezent n aproape toate celulele nemusculare,
ea este preponderent concentrat n celulele musculare. Prin tehnici de
clonare a genelor i de secveniere a ADN, au fost identificate 10 familii de
gene ale miozinei. Sunt bine descrise trei tipuri de miozin: I, II i V.
Miozina II este implicat n contracia muscular, iar miozinele I i V n
interaciunile citoschelet membran, prin care se asigur transportul
veziculelor i organitelor nvelite n membrane.

79
 Molecula de miozin II (cea mai studiat) este format dintr-o coad i
un cap bilobat (fig. 32).
Coada este alctuit din dou lanuri grele (fiecare cu o greutate
molecular de 200000da) rsucite n spiral, iar capul bilobat este constituit
din capetele globulare ale lanurilor grele, la care sunt ataate dou perechi
de lanuri uoare cu afinitate pentru Ca2+ (o pereche cu greutatea molecular
de 20000da i alta cu greutatea molecular de 16000da). Capul bilobat
prezint situsuri de ataare att pentru filamentele de actin, ct i pentru
ATP i este generator al forei de micare, iar coada prezinta situsuri de
legare la alte cozi de miozin pentru a forma un filament.

Fig. 32. Reprezentarea schematic a moleculei de miozin II

(Alberts, B. i colab., 1990)

Spre deosebire de cele dou tipuri de miozin (I i V), n cazul

miozinei II, cozile se asambleaz n filamentele groase ale unui sarcomer din
fibra muscular striat. Deoarece, prin agregarea cozilor, capetele globulare
rmn la exterior, filamentele de miozin au o structur bipolar, cu o zon
nud la mijloc i cu dou zone groase la extremiti, care se vor lega cu
actina n timpul contraciei (fig 33).

Fig. 33. Schema filamentului de miozin n celulele musculare i agregarea

moleculelor de miozin n celulele nemusculare (Benga, Gh., 1985)

Dac n celulele nemusculare, filamentele de miozin rezult din

polimerizarea a 10 20 molecule de miozin i au caracter labil, n celulele
musculare filamentele de miozin sunt alctuite din aproximativ 500 molecule
de miozin i au o stabilitate mult mai mare. n miofibrile, filamentele groase
(de miozin) sunt dispuse paralel cu filamentele subiri (de actin). Aspectul

80
n seciune transversal este de reea hexagonal, un filament de miozin
fiind nconjurat de 6 filamente de actin.
Miozina prezint urmtoarele roluri:
- miozina II, mpreun cu fasciculele contractile de actin, particip
la formarea fibrelor de stres, situate de-a lungul membranelor celulare i a
centurilor de adeziune, prezente aproape de suprafaa apical a celulelor
epiteliale.
Fibrele de stres sunt formaiuni contractile tranzitorii, inserate n
membrana plasmatic, pe situsuri specializate, care prin intermediul
integrinelor, ataeaz celula la matricea extracelular (rol n adeziune).
Centurile de adeziune sunt uniti contractile de lung durat,
prezente n apropierea suprafeei apicale a celulelor epiteliale. Ele aparin
complexelor joncionale de la acest nivel i controleaz forma celulelor.
- miozina II mpreun cu filamentele de actin se agreg sub
membrana plasmatic, fiind implicat n susinerea acesteia;
- n telofaza mitozei, la ecuatorul celulei se acumuleaz filamente
de miozin II i actin, asamblate ntr-un inel contractil, al crui diametru
descrete treptat, determinnd apariia unui an adnc, care separ celula
iniial n dou celule fiice.
- miozina I (V) este implicat n deplasarea veziculelor
membranare (de endocitoz) de-a lungul filamentelor de actin.
- miozina II, mpreun cu actina, intervine n diferitele tipuri de
locomoie celular (ex. micarea ameboidal a leucocitelor i fibroblatilor).

Filamentele intermediare

Filamentele intermediare sunt caracteristice eucariotelor superioare.

Se numesc intermediare datorit diametrului lor de cca. 8 10 nm, mai mic
dect cel al microtubulilor (cca. 20 25 nm) i mai mare dect cel al
filamentelor de actin (cca. 7 nm).
Principala lor funcie este structural, de susinere mecanic a
celulelor i esuturilor. Astfel, ele conecteaz desmozomii din celulele
epiteliale stabiliznd epiteliul, constituie componentele majore ale pielii i
prului, constituie o reea care leag membranele Z, respectiv miofibrilele din
celulele musculare striate, asigur rezistena axonilor neuronali.
Subunitile filamentelor intermediare se asambleaz prin alturare n
structuri cu aspect de frnghie mpletit, aspect care confer filamentelor o
mare stabilitate. Astfel asamblate, filamentele intermediare rmn insolubile,
nu mai depolimerizeaz, indiferent de condiiile fiziologice.
O caracteristic a filamentelor intermediare este aceea c sunt
alctuite dintr-o varietate de proteine exprimate diferit de la un tip de celul la
altul i de la o specie la alta.
n celulele vertebratelor superioare au fost identificate pn n prezent
peste 50 de proteine aparinnd filamentelor intermediare, iar pe baza
asemnrii dintre secvenele lor de aminoacizi, au fost clasificate n ase
grupe:
Tipurile I i II corespund keratinelor, care copolimerizeaz i formeaz
filamentele.

81
 Filamentele de keratin (tonofilamentele) (fig.40) sunt caracteristice
epiteliilor i au rol structural, conferind rezistena epiteliilor la factorii
mecanici. n celulele epiteliale mature ale epidermei, filamentele de keratin
devin mai numeroase i se leag prin puni disulfidice, iar dup moartea
celulelor, vor genera stratul cornos, sau diferite producii cornoase (unghii,
pr, coarne).
Tipul III cuprinde vimentina, desmina, GFPA (Glial fibrillary acidic
protein) i periferina.
Filamentele de vimentin sunt ntlnite frecvent n celulele
mezenchimale, n fibroblaste, n celulele endoteliale ale vaselor de snge i
n leucocite. Ele vin n contact att cu membrana nuclear, ct i cu
desmozomii de pe suprafaa celulelor, astfel nct pot menine nucleul sau
alte organite celulare n poziii bine definite din celul. n celulele adipoase,
filamentele de vimentin se dispun n jurul incluziunilor lipidice,
mpiedicndu-le s fuzioneze att ntre ele, ct i cu membrana celular.
Filamentele de desmin (scheletin) sunt caracteristice fibrelor
musculare striate i miocitelor netede, cu excepia celor din peretele vaselor
de snge. Au rol n susinerea miofibrilelor, asigurnd stabilitatea
sarcomerului n timpul contraciei musculare.
Filamentele gliale sunt constituite din vimentin i o protein acid
fibrilar a fibrilelor gliale (GFAP). Se ntlnesc n celulele gliale ale esutului
nervos.
Periferina este prezent n majoritatea neuronilor derivai din crestele
neurale, n neuronii motori din mduva spinrii, n retin, nervul optic etc. Ea
este detectat n cursul dezvoltrii embrionare, cnd neuronii periferici i
motori au ajuns n poziia lor definitiv.
Tipul IV cuprinde neurofilamentele i internexina..
Neurofilamentele sunt specifice neuronilor, fiind formate prin
copolimerizarea celor trei proteine (NFL; NFM; NFH) cu greutate
molecular diferit. Ele constituie elementul citoscheletal major al
prelungirilor neuronale (dendrite, axoni) avnd rol de susinere pentru
acestea.
internexina se exprim n neuroni n stadiul precoce al dezvoltrii
acestora, naintea sintezei proteinelor care alctuiesc neurofilamentele.
Tipul V este constituit din laminele nucleare (A, B, C), care se
asambleaz ntr-o reea pe faa intern a nveliului nuclear, realiznd un
suport mecanic pentru nucleu.
Tipul VI cuprinde o singur protein, nestina, exprimat de timpuriu n
cursul dezvoltrii neuronilor, la celulele stem ale SNC.
Cunoaterea i identificarea tipurilor de proteine din constituia
filamentelor intermediare prin utilizarea anticorpilor monoclonali fluoresceni,
prezint o importan deosebit n identificarea originii tisulare a celulelor
tumorale. Astfel, datorit faptului c n cursul transformrilor maligne i a
dezvoltrii tumorilor, specificitatea de tip celular a filamentelor intermediare
se pstreaz, exist posibilitatea clasificrii tumorilor dup tipul specific de
filamente intermediare (ex. cele care i au originea n celulele epiteliale
conin keratin carcinoame, cele cu originea n celulele mezenchimale
conin vimentin sarcoame etc).

82
 Fig. 34. Filamente intermediare (Ollivier, M. i colab., 1990)

Fig. 35. Filamente intermediare (Ollivier, M. i colab., 1990)

Microtubulii

Microtubulii sunt structuri celulare lungi, cilindrice, cu diametrul de cca.

25 nm i lungimea de civa micrometri. Ei rezult n urma polimerizrii unor
molecule proteice globulare numite tubuline, cu greutatea molecular de cca.
50000 daltoni. Molecula de tubulin este un heterodimer constituit din dou
proteine globulare: i tubulina.
Asamblarea dimerilor de tubulin n structuri microtubulare se
realizeaz n urmatoarele etape:
- polimerizarea dimerilor de tubulin i (ncrcai cu GTP) i
formarea de protofilamente;
- asocierea lateral a unui numr de 13 protofilamente sub forma
unui cilindru i asamblarea unui microtubul (fig. 36) cu lungimea de civa
micrometri;
- elongarea microtubulului prin polimerizare, respectiv prin
adugarea heterodimerilor de tubulin la extremitatea (+) a acestuia. n
timpul elongrii, dup adugarea heterodimerului, GTP legat de tubulin
este hidrolizat la GDP.
Protofilamentele se pot asocia (fig. 36) n microtubuli dubli (ntlnii n
structura cililor i flagelilor) sau n microtubuli tripli (n structura centriolilor
sau a corpusculilor bazali) (fig. 38).
Un microtubul dublu este alctuit dintr-o subunitate A completa cu 13
protofilamente i o subunitate B incompleta, cu 10 11 protofilamente, care
fuzioneaz cu peretele subunitatii A. Microtubulul triplu prezint n plus
tubulul C, care fuzioneaz cu peretele tubulului B.
Procesul de asamblare (polimerizare) al tubulinelor este nsoit de
hidroliza GTP ului, n timp ce n asamblarea actinei intervine ATP ul.
83
 Fig. 36. Etapele formrii microtubulilor
(www.sciencebio.com/FacBioCell/Cytosquelette/FBCMicrofilaments.htm)

Polimerizarea i depolimerizarea microtubulilor sunt influenate de o

serie de factori cum sunt temperatura, concentraia heterodimerilor de
tubulin i concentraia ionilor de calciu. La temperatura de 37 0C, tubulina
formeaz microtubuli spontan, n prezena GTP, n timp ce, la temperatura
de 40C microtubulii depolimerizeaz n dimeri stabili de tubulin. Pentru
polimerizare ns, este necesar o concentraie corespunzatoare a ionilor de
calciu i a dimerilor de tubulin.
Microtubulii prezint polaritate, aceasta fiind determinat de
asamblarea cap la coad a heterodimerilor dintr-un protofilament. Astfel, la
un capt predomin procesul de asamblare a dimerilor sau polimerizare
(captul +), iar la cellalt capt (captul -) are loc dezasamblarea
(depolimerizarea). Procesele de poli- i depolimerizare care au loc la captul
+ se desfoar cu o vitez de cca. 2 ori mai mare dect la captul opus (-).
Astfel, n celule, creterea i descreterea microtubulilor se realizeaz la
captul +, nu la captul -.

Fig. 37. Microtubuli: simpli, dubli,

tripli
(Cruce, M. i colab., 1998)

In celulele animale, extremitile (-), puin dinamice, sunt ancorate la

nivelul unui centru de nucleaie i organizator al microtubulilor (MTOC -
84
microtubule organizing center), care cuprinde centriolii i respectiv
corpusculii bazali (n cazul microtubulilor din cili i flageli) (fig.38), pe cnd
extremitile (+) particip activ la dinamica spaial
polimerizare/depolimerizare.

Fig. 38. Orientarea microtubulilor spre MTOC (microtubule organizing center)

(Roland, J.C. i colab., 1982)

Microtubulii se pot ntlni liberi n citosol (microtubuli dinamici, cu

durat de via scurt) sau sub form de ansambluri de microtubuli (stabili)
prezeni n structura axonemei cililor i flagelilor, centriolilor, a fusului de
diviziune, sub membrana plasmatic a eritrocitelor sau a plachetelor, precum
i n structura axonilor neuronali. Stabilitatea microtubulilor variaz foarte
mult: microtubulii liberi din citosol i cei ai fusului de diviziune sunt structuri
labile comparativ cu cei din structura cililor, flagelilor i centriolilor. Astfel, n
mitoz, reeaua de microtubuli liberi caracteristici interfazei se
dezasambleaz, tubulina fiind utilizat pentru formarea fusului de diviziune.
La sfritul mitozei, procesele se deruleaz invers, n sensul c fusul se
dezasambleaz, refcndu-se reeaua de microtubuli liberi din citoplasm.
n interiorul unei celule, cinetica polimerizrii microtubulilor depinde de
efectele combinate ale unor proteine asociate microtubulilor sau MAPs
(MAP- microtubules associated proteins).
MAPs sunt subdivizate n dou grupe:
- proteinele MAP 1A, MAP1B, MAP2a, MAP2c, MAP4 i
proteinele tau;
- proteinele motorii de tipul kinesinei i dineinei.
Proteinele MAP1A i MAP1B sunt molecule filamentoase mari
prezente att n dendritele i axonul neuronilor ct i n alte tipuri de celule.
Proteinele MAP2 realizeaz puni fibroase ntre microtubulii prezeni n
dendritele neuronale i intervin n legarea microtubulilor la filamentele
intermediare, iar proteina MAP4 leag microtubulii din alte celule dect
neuronii, n timpul interfazei i mitozei.
Proteinele tau, localizate frecvent n axonii celulelor nervoase. n
maladia Altzheimer, n urma agregrii proteinelor tau normele cu cele
afectate, se produc degenerescene neurofibrilare care afecteaz transportul
axonal i implicit comunicrile intercelulare prin intermediul sinapselor.
Proteinele motorii de tipul kinezinelor i dineinelor sunt implicate n
transportul organitelor i veziculelor de-a lungul microtubulilor. Kinezinele se
deplaseaz ctre extremitatea (+) a microtubulilor realiznd un transport
anterograd, iar dineinele se deplaseaz ctre extremitatea (-) a microtubulilor
realiznd un transport retrograd. Cele dou tipuri de proteine motorii, ca i
85
miozina, utilizeaz energia derivat din hidroliza ATP pentru a se deplasa.
Ele sunt astfel ATP-aze capabile de a transforma energia chimic n energie
mecanic.

Fig. 39. Implicarea kinezinei i dineinei n transportul veziculelor de-a lungul

microtubulilor (www.sciencebio.com/FacBioCell/Cytosquelette/FBCMicrofilaments.htm)

Fig. 40. Reprezentarea schematic a deplasrii kinezinei i dineinei de-a lungul unui
microtubul (www.sciencebio.com/FacBioCell/Cytosquelette/FBCMicrofilaments.htm)

Utilizarea microtubulilor fusului mitotic ca int anti-canceroas

Unele substane de tipul alcaloizilor (colchicina, colcemidul, vincristina,

vinblastina) sunt implicate n blocarea asamblrii tubulinelor (efect
antimitotic).
Colchicina, un alcaloid vegetal extras din brndua de toamn
(Colchium autumnale), n concentraii mari determin depolarizarea
microtubulilor citoplasmatici (aciune inhibitorie asupra formrii fusului de
diviziune), iar n concentraii mici determin blocarea depolimerizrii
microtubulilor. Se produce astfel blocarea diviziunii celulelor n metafaz.
Datorit acestui efect, colchicina este utilizat n studiile citogenetice.
Colcemidul este un alcaloid nrudit cu colchicina, cu efect mitotic
similar.

86
 Vinblastina si vincristina, alcaloizi extrai din Vinca rosea, sunt primele
medicamente antimitotice identificate, care provoac malformaii ale fusului
mitotic (Wood, K.W., si colab., 2001). Ele au ca int subunitile ale
tubulinelor i depolimerizeaz microtubulii. Vinblastina i vincristina se
utilizeaz n mod curent la tratarea unor forme de cancer (cancer de
testicule, maladia Hodgkin, leucemia limfocitar).
Taxolul (substan extras din scoara de tis) stabilizeaz microtubulii
mpiedicnd depolimerizarea lor, ceea ce are ca rezultat blocarea diviziunilor
i ulterior moartea celulelor. n pofida succesului taxanilor n tratamentul
numeroaselor forme de cancer (cancer de sn, ovare i pulmoni), ei sunt, ca
i alte toxine ale tubulinelor, extrem de toxici, putnd aciona de asemenea
asupra celulelor non-canceroase n proliferare precum celulele
hematopoietice i cele din mucoase. Din aceste considerente, n ultimii ani,
obiectivul cercettorilor a fost de a discrimina celulele mitotice de cele aflate
in interfaz.
Rolul microtubulilor:
- determin forma celulei i a prelungirilor permanente ale acesteia
(cili, flageli, axoni, dendrite);
- reprezint suportul citoplasmatic implicat n transportul
intracelular al veziculelor i al particulelor proteice. Aceast funcie este
evident n transportul produilor de neurosecreie, precum i n transportul
granulelor de pigmeni dinspre centrul spre periferia melanoforelor
determinnd intensificarea culorii pielii. n acest proces intervin proteine
specifice, asociate microtubulilor (MAP), care au rol n deplasarea veziculelor
de-a lungul microtubulilor. Astfel, n transportul veziculelor neurosecretorii
dinspre corpul neuronal, spre terminaiile axonice (transport anterograd), este
implicat kinezina. n prezena ATP-ului, pe care l hidrolizeaz, kinezina se
deplaseaz de-a lungul microtubulului, de la captul su (-), la captul (+),
antrennd i deplasarea veziculei la care se afl legat
Transportul retrograd al veziculelor, dinspre captul (+), spre captul (-
) al microtubulilor, este realizat de o alt protein asociat acestora,
denumit proteina MAP1C (dineina citosolic);
- dinamic, participnd la micrile celulare care au la baz
mecanismul molecular microtubuli dinein (ex. micarea cililor i flagelilor,
diviziunea celular);

Concepte i noiuni de reinut

Citosolul ocupnd aproximativ 55% din volumul total al celulei i

conine ap, electrolii, proteine solubile sau specifice, enzime, diferite
molecule organice.
Citosolul nglobeaz organitele, este sediul incluziunilor nucleo-
citoplasmatice i reprezint sediul metabolismului celular
Citoscheletul este o reea tridimensional alctuit din filamente
proteice de actin (FA), filamente de miozin, filamente intermediare (FI) i
microtubuli (Mt), care asigur forma celulei, micarea celular i ancoreaz
organitele n situsuri bine definite.

87
 Actina este proteina cea mai abundent a citoscheletului, fiind
prezent n toate tipurile de celule musculare i nemusculare, sub dou
forme: globular (G) i filamentoas (F).
Actina filamentoas (actina F) rezult prin polimerizarea actinei
globulare (G) i const n dou lanuri rsucite n dublu helix ( - helix).
n celulele nemusculare, filamentele de actin se ntlnesc fie
izolate, fie grupate n fascicule i/sau reele, n prelungirile celulare cu
caracter permanent (ex. microvilii) i nepermanent (ex. pseudopodele,
lamelipodele, membranele ondulante), la periferia celulelor (fibrele de stress),
n inelele contractile tranzitorii, la nivelul desmozomilor.
Miozina este o protein cu activitate ATP azic manifestat n
prezena actinei. Ea convertete energia chimic acumulat n ATP n
energie mecanic, utilizat pentru modificarea formei celulare sau pentru a
induce micarea.
Miozina II este implicat n contracia muscular, iar miozinele I i
V n interaciunile citoschelet membran, prin care se asigur transportul
veziculelor i organitelor nvelite n membrane.
Capul bilobat al miozinei II prezint situsuri de ataare att pentru
filamentele de actin, ct i pentru ATP i este generator al forei de
micare, iar coada prezinta situsuri de legare la alte cozi de miozin
pentru a forma un filament.
n celulele musculare, filamentele de miozin sunt alctuite din
aproximativ 500 molecule de miozin i au o stabilitate mare.
n celulele nemusculare, filamentele de miozin rezult prin
polimerizarea a 10 20 molecule de miozin i au caracter labil.
Filamentele intermediare sunt caracteristice eucariotelor superioare.
Se numesc intermediare datorit diametrului lor de cca. 8 10 nm, mai mic
dect cel al microtubulilor (cca. 20 25 nm) i mai mare dect cel al
filamentelor de actin (cca. 7 nm).
Subunitile filamentelor intermediare se asambleaz prin alturare
n structuri cu aspect de frnghie mpletit, aspect care confer filamentelor o
mare stabilitate.
Microtubulii sunt structuri celulare lungi, cilindrice, care rezult n
urma polimerizrii unor molecule proteice globulare numite tubuline.
Molecula de tubulin este un heterodimer constituit din dou proteine
globulare: i tubulina.
Microtubulii pot fi simpli (n citoplasma celulelor), dubli (ntlnii n
structura cililor i flagelilor) sau tripli (n structura centriolilor sau a
corpusculilor bazali).
Un microtubul dublu este alctuit dintr-o subunitate A complet cu
13 protofilamente i o subunitate B incomplet, cu 10 11 protofilamente,
care fuzioneaz cu peretele subunitatii A. Microtubulul triplu prezint, n
plus, subunitatea C, care fuzioneaz cu peretele subunitii B.
Microtubulii liberi din citosol i cei ai fusului de diviziune sunt structuri
labile comparativ cu cei din structura cililor, flagelilor i centriolilor.
n interiorul unei celule, cinetica polimerizrii microtubulilor depinde de
efectele combinate ale unor proteine asociate microtubulilor sau MAPs
(MAP- microtubules associated proteins).

88
 ntrebri de autoevaluare
1. Din ce este alctuit citosolul si ce rol ndeplinete acesta n celul?
2. Care sunt funciile citoscheletului?
3. Descriei structura, organizarea i funciile filamentelor de actin.
4. Ce rol indeplinesc in celule miozinele I, II si V?
5. Ce structura are molecula de miozina II si specificati care dintre
componentele structurale ale acesteia presinta situsuri de atasare pentru
filamentele de actina si pentru ATP?
6. Care sunt caracteristicile structurale ale filamentelor intermediare?
7. Care sunt functiile indeplinite de microtubuli?

89
 UNITATEA DE NVARE 8

BAZELE MOLECULARE ALE MOTILITII CELULARE

Cuvinte cheie: contracie muscular, pseudopode, microvili,

microtubuli, dineina, cili, flageli

Rezumat
n acest capitol sunt descrise mecanismele micrilor celulare bazate
pe sistemul molecular actin-miozin (contracia muscular, micrile de tip
ameboidal realizate prin emiteri i retracii succesive de pleudopode,
micrile microvililor, curenii citoplasmatici) i micrile celulare bazate pe
sistemul molecular microtubuli-dinein (micrile cililor i flagelilor,
centrozomul).

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 3 ore

Motilitatea este un atribut de baz al celulelor, fr de care nu exist

via. Micrile biologice dispar n agonia i moartea celulei, etap n care se
manifest numai micarea brownian, fenomen fizic rezultat al bombardrii
particulelor citoplasmatice de molecule dizolvate.
Micrile celulare sunt extrem de variate, ns, n general, se pot
distinge urmtoarele tipuri:
1. Micri intracelulare:
a. bazate pe sistemul molecular actin miozin: contracia
muscular, curenii citoplasmatici,
b. bazate pe sistemul molecular microtubuli dinein: micrile din
diviziunea celular, curenii citoplasmatici, cicloza.
2. Micarea celular prin emitere de expansiuni membrano
citoplasmatice:
a. bazat pe sistemul molecular actin miozin: micarea
amoeboidal, micrile din microvili,
b. bazat pe sistemul molecular microtubuli dinein: micarea cililor
i flagelilor.

90
 Micrile care au la baz sistemul molecular actin-miozin

Contracia muscular

Contracia muscular este un tip de micare bazat pe sistemul

molecular actin miozin i aparine unor structuri specializate din muchii
striai, netezi i muchiul cardiac.
Esena contraciei musculare const n stabilirea unor puni
transversale ntre capetele globulare ale filamentelor groase de miozin i
monomerii filamentelor subiri de actin.
Fiecare cap globular al miozinei pete (alunec) n lungul
filamentului de actin, de pe un monomer pe altul, prin desfacerea progresiv
a unor puni i refacerea lor cu monomerul urmtor de actin realizndu-se
astfel contracia (fig. 33).
Deplasarea filamentului se realizeaz cu energie rezultat din hidroliza
ATP la ADP i fosfat anorganic (Pi).

Fig. 41. Sistemul molecular de micare actin-

miozin (Benga, Gh.,1985)

Relaxarea const n desfacerea simultan a tuturor punilor dintre

filamentele de actin i cele de miozin.
n cursul contraciei i al relaxrii muchiului striat, concentraia de
ATP se menine la un nivel constant, deoarece, pe msur ce este hidrolizat
(cu eliberare de energie), acesta se reface pe seama fosfocreatinei. Aceasta,
la rndul su, reface ATP-ul din ADP, prin intermediul fosfocreatin-kinazei.
Muchii striai (scheletici) sunt alctuii din fascicule de fibre cu
diametrul cuprins ntre 25 100 m i lungimea identic cu cea a muchiului
(de la civa mm, la civa cm)
Fibra muscular striat este constituit din: sarcolem (nveli celular),
sarcoplasma (matricea citoplasmatic), care nglobeaz incluziunile celulare,
organitele generale i miofibrilele; nuclei (dispui alternant sub sarcolem).
Miofibrilele sunt organite specializate n funcia de contracie, cu
diametrul de aproximativ 1-2 m, fiind dispuse paralel de-a lungul fibrei, de la
o extremitate la alta a ei. Ele sunt alctuite din uniti contractile cilindrice
denumite sarcomere, a cror lungime este de circa 2,5m. La ambele
extremiti, sarcomerele sunt nconjurate de tubii T, invaginri tuneliforme ale
sarcolemei, care ptrund transversal n fibra muscular (fig.42).

91
 Tubii T conduc potenialul de aciune de la suprafaa fibrei, n interiorul
acesteia, pn n vecintatea reticulului sarcoplasmatic (organit cu rol n
depozitarea ionilor de calciu n celula muscular), de unde se elibereaz
Ca2+, care declaneaz contracia.
Miofibrilele sunt alctuite dintr-o succesiune alternant de benzi
ntunecate i benzi clare.
Benzile ntunecate prezint o band central subire luminoas,
numit stria H, iar benzile clare I prezint central o band (disc, linie)
ntunecat, numit stria Z. ntre dou strii Z se delimiteaz sarcomerul,
unitatea contractil a miofibrilei. Fiecare sarcomer este constituit din dou
tipuri de proteine filamentoase care se ntreptrund central n zona benzii A:
filamente groase (cca. 15 nm n diametru) i filamente subiri (cca. 8 nm n
diametru).
Filamentele subiri sunt alctuite din trei proteine (fig. 41):
- actina (proteina contractil), care constituie miezul filamentului
subire;
- tropomiozina, un dimer ale crui subuniti formeaz -helixuri lungi,
care se asociaz cap la coad pentru a forma structuri cu aspect de
bastonae. Acestea se ataeaz la filamentul de actin i se dispun paralel
cu acesta (un heterodimer de tropomiozin vine n contact cu aproximativ 7
subuniti de actin). n stare de repaus, tropomiozina blocheaz
interaciunea dintre actin i miozin.
- complexul troponinic constituit din 3 proteine diferite:
- troponina T, care menine poziia tropomiozinei pe filamentele
de actin;
- troponina I, care inhib interaciunea actinei cu miozina, prin
blocarea activitii ATP-azice a capului miozinei;
- troponina C, care fixeaz ionii de calciu, modificnd prin
aceasta poziia troponinei.
Filamentele groase sunt constituite numai din miozin.
Benzile ntunecate A prezint central numai filamente groase de
miozin, iar la capete au intercalate i filamente subiri de actin, fiecare
filament de miozin fiind nconjurat de 6 filamente de actin.
Sarcomerul conine la capete filamente de actin, care se ntreptrund
parial cu filamente de miozin dispuse central.
Contracia muscular se realizeaz prin glisarea (alunecarea)
filamentelor groase de miozin n lungul filamentelor subiri de actin
(modelul filamentului glisant emis de Huxley n 1954), lungimea acestora
rmnnd constant. Glisarea are ca rezultat scurtarea lungimii sarcomerelor
(datorit scurtrii benzii I), iar suma scurtrii tuturor sarcomerelor duce la
scurtarea fibrei musculare.
Muchii scheletici sunt sub control voluntar i se contract fiecare
atunci cnd primesc stimuli nervoi prin excitarea nervului motor al
muchiului. Impulsul nervos genereaz un potenial de aciune, care se
propag n sarcolem i apoi, prin intermediul tubilor T, semnalul este
transmis receptorilor ryanodinici (RyR) din membrana cisternelor reticulului
sarcoplasmatic. Deschiderea receptorilor RyR la aciunea potenialului de
aciune, induce eliberarea masiv a calciului stocat, antrennd o cretere
important a concentraiei sale citoplasmatice.

92
 Creterea concentraiei Ca2+ citosolic determin modificarea
conformaiei proteinelor asociate filamentelor de actin (troponina,
tropomiozina) astfel nct s fac posibil interaciunea actinei cu miozina.
Fiecare filament gros prezint aproximativ 500 de capete de miozin i
fiecare dintre ele efectueaz cca. 5 cicluri/secund n cursul unei contracii
rapide, determinnd alunecarea filamentelor groase i subiri unele printre
altele, cu viteze de pn la 15m/sec. Mecanismul contraciei ia sfrit cnd
concentraia citosolic a ionilor de calciu scade la valoarea de repaus iar
situsurile calcice ale troponinei C sunt eliberate. Astfel, la ncetarea influxului
nervos, se deschide pompa de calciu (Ca2+-ATP-aza) din membrana
reticulului sarcoplasmatic, ionii de calciu din citosol sunt recaptai n lumenul
organitului, se desfac legturile dintre actin i miozin i se induce relaxarea
muscular.
Muchiul neted, ntlnit n structura peretelui organelor cavitare
(stomac, intestin, ci respiratorii, ci urinare, vase), este constituit din celule
fusiforme, mononucleate, cu extremitile ascuite, orientate paralel unele
fa de altele. Celula muscular neted prezint n citoplasm filamente
groase de miozin i subiri de actin, dispuse paralel cu axul lung al celulei.
Mecanismul contraciei celulei musculare netede este cel al plisrii,
sau al suprapunerii filamentelor groase de miozin peste cele subiri de
actin. Aceste filamente nu au aspect striat ca n cazul muchilor scheletici i
nici nu formeaz miofibrile. Att actina ct i miozina muchiului neted au o
structur diferit de cea a altor esuturi. Astfel, actina prezint o frecven
diferit a aminoacizilor fa de actina muchiului scheletic sau cardiac.
Miozina, dei se aseamn structural cu cea a muchiului scheletic, difer
totui de acesta din punct de vedere funcional prin:
- nivelul de activitate al ATP, care, chiar i n condiii optime, este
de 10 ori mai mic comparativ cu cel al miozinei din fibra muscular striat;
- miozina muchiului neted, asemntoare cu miozina celulelor
nemusculare, poate interaciona cu filamentele de actin determinnd
contracia, numai dac n prealabil este fosforilat. Cnd miozina este
defosforilat, nu interacioneaz cu actina iar muchiul se relaxeaz. Celulele
musculare netede se contract mai lent, ns sunt capabile s menin
tensiunea pentru o perioad mai lung, necesitnd un consum de ATP de
cca. 5 10 ori mai mic dect celula muchiului scheletic.

93
 Fig. 42. Reprezentarea schematic a fibrei musculare striate i a sarcomerului

Micarea ameboidal

Micarea ameboidal este specific protozoarelor (Amoeba proteus),

iar la metazoare i om, constituie forma de locomoie i fagocitoz, cu rol de
aprare, a leucocitelor. De asemenea, mai este specific fibroblastelor care,
prin acest mecanism, se deplaseaz la suprafaa rnilor, unde depun
colagen, cu rol n cicatrizare.
Micarea const n emiterea i retracia succesiv i continu a unor
prelungiri celulare denumite pseudopode. Acest proces implic treceri
succesive ale diferitelor regiuni din citoplasm din starea fluid de sol, n
starea vscoas de gel i invers.
La microscopul optic s-a observat c celulele care emit astfel de
pseudopode au citoplasma structurat n dou regiuni: o regiune central
(endoplasma), cu consisten de sol, bogat n organite i o regiune
periferic, situat imediat sub membran, cu consisten de gel i lipsit de
organite (ectoplasma). Ectoplasma reprezint stratul cortical al celulelor i
conine o reea tridimensional de microfilamente de actin legate ntre ele
printr-o protein denumit filamin. Aceasta confer citoplasmei proprieti
fizice de gel semisolid.
n timpul formrii pseudopodului, citoplasma fluid ptrunde n el, iar
n regiunea din vrful pseudopodului are loc gelificarea (prin polimerizri i
prin contracia actomiozinei), aderarea pseudopodului la substrat i trecerea
corpului celulei n direcia prelungirii, dup care pseudopodul se retract. n
timpul retraciei are loc tranziia de la gel la sol, fluidificarea fiind determinat
de depolimerizarea filamentelor de actin sub aciunea gelsolinei, n prezena
ionilor de Ca2+.

94
 Lamelipodele sunt prelungiri lite specifice fibroblastelor, celule
conjunctive care ader la substrat prin intermediul unei plci de ataare. La
nivelul plcilor de ataare, suprafaa celular vine n contact cu
componentele matricei extracelulare (ex. fibronectina) prin intermediul unor
proteine transmembranare (receptori membranari), cunoscute fiind
integrinele (receptori celulari pentru fibronectin). Astfel, deplasarea
fibroblastelor la suprafaa rnilor unde depun colagen i realizeaz
cicatrizarea, manifest preferenialitate fa de suprafee cu capacitate mare
de adezivitate. Viteza de naintare a fibroblastelor este apreciat la cca.
40/or.
Frecvent, emiterea prelungirilor i deplasarea celulelor se face n
direcia unui stimul chimic, iar micarea este denumit chemotactism. n
acest mod, protozoarele i gsesc sursa de hran, iar leucocitele se
ndreapt spre focarul de infecie. Rspunsul chemotactic are la baz aa-
numitele semnale chemotactice (ex. stimuli chimici eliberai din focarul de
infecie). Astfel, prin receptorii membranari, neutrofilele detecteaz
concentraiile foarte sczute de peptide N formilate derivate din proteinele
bacteriene.
Procesele de poli- i depolimerizare ale actinei au astfel un rol
important n emiterea i retracia pseudopodelor i a lamelipodelor i deci n
tranziiile gel sol ale citoplasmei.

Micrile microvililor

Microvilii sunt expansiuni digitiforme, permanente, cu lungimi de cca. 2

m, situai la polul apical al celulelor absorbante (enterocite, nefrocite, ovocit
etc.). Au rolul de a mri suprafaa de absorbie (ex. de cca. 25 de ori n
intestin) i de a mpinge elementele absorbite n interiorul celulelor prin
micri de contracie.

Fig. 43. Aspectul microvililor n microscopia optic

(Cotrutz, Carmen i colab., 1994)

Microvilii sunt delimitai la exterior de plasmalem i vin n contact

direct cu plasmalema celular. n axul fiecrui microvil exist 20 40
95
filamente de actin, cu rol structural, meninnd forma microvilului.
Filamentele de actin sunt legate ntre ele transversal prin dou tipuri de
proteine (fimbrina i vilina), care asigur orientarea paralel i
mpachetarea lor strns. Vilina ndeplinete aceast funcie numai la
concentraii mici ale ionilor de Ca2+. Toate filamentele de actin din structura
microvilului au aceiai polaritate, extremitatea plus (+) a acestora fiind fixat
ntr-o protein de acoperire (zona amorf), neidentificat structural pn n
prezent.
Filamentele de actin sunt conectate la faa intern a membranei
plasmatice prin intermediul unei proteine (proteina de 110 kda)
asemntoare miozinei I, asociat cu calmodulina (protein cu afinitate
pentru ionii de Ca2+). Ca i miozina I, proteina de 110 kda are activitate ATP-
azic atunci cnd se asociaz cu actina. La polul bazal, filamentele de actin
ale fasciculului se ancoreaz ntr-o reea terminal constituit din filamente
de actin i miozin i dintr-o protein fibroas denumit fodrina, care
acoper un strat de filamente intermediare.
Fodrina este implicat n realizarea legturilor dintre filamentele de
actin aparinnd microvililor nvecinai, ct i a filamentelor de actin cu
benzile de aderen situate sub jonciunile impermeabile ale enterocitelor.

Fig. 44. Aspectul microvililor n microscopia

electronic

Curenii citoplasmatici

Curenii citoplasmatici sunt micri intracelulare prin care are loc

deplasarea organitelor i a componentelor citoplasmatice n celul.
Mecanismul molecular al curenilor citoplasmatici se bazeaz n principal pe
interaciunea actin miozin. Anumite forme de cureni citoplasmatici, cum
ar fi transportul organitelor celulare i a veziculelor sinaptice din neuroni, au
la baz mecanismul microtubuli dinein. Micri de tipul interaciunii actinei
cu miozina se mai ntlnesc i n formarea inelului tranzitoriu care apare la
sfritul diviziunii celulare i duce la fragmentarea celulei iniiale n cele dou
celule fiice, precum i n cazul fibrelor de stres care apar la suprafaa
celulelor sub aciunea unor factori strini (incai, 1997).

96
 Micrile care au la baz sistemul molecular microtubuli-dinein

Unele tipuri de celule prezint prelungiri cu caracter permanent, n a

cror alctuire intr microtubulii. Aceste prelungiri sunt reprezentate de cili i
flageli, care au un mecanism molecular al motilitii identic.

Cilii i flagelii

Cilii sunt structuri lungi i subiri (cu diametrul de cca. 0,2) (fig.37),
care proemin deasupra suprafeei celulare. Sunt clasificai n: cili vibratili
(kinetocili) i cili rigizi (stereocili).
Cilii vibratili sunt specifici ciliatelor, epiteliului cilor respiratorii
extrapulmonare (trahee, bronhii) i cel al cilor genitale femele (tromp
uterin, uter). Fiecare cil execut micri de btaie-revenire, micri care se
realizeaz la unison. n timpul btii, cilul este ntins i exercit o for
maxim asupra fluidelor (de obicei mucus secretat la suprafaa epiteliilor, cu
particule adsorbite sau nglobate). Dup aceasta, urmeaz o micare mai
lent, de revenire a cilului la poziia iniial. Fiecare ciclu de btaie-revenire a
cilului dureaz cca. 0,1 - 0,2 secunde.

Fig. 45. Aspectul cililor vibratili n microscopia optic

(Cotrutz, Carmen i colab., 1990)

Cilul este format din: axonem - poriunea liber, corpuscul bazal i

rdcin, localizate n citoplasm (fig. 46).

97
 Fig. 46. Aspectul cililor vibratili n microscopia electronic
(Ollivier, M. i colab., 1990)

Axonema este cilindroform, nvelit de membrana celulei i are

lungimea de 5 - 6. La microscopul electronic, n seciune transversal prin
axonem, se observ c cilul este alctuit dintr-un ansamblu de microtubuli,
format din nou dublete periferice i doi microtubuli centrali.
Fiecare dublet periferic este alctuit dintr-o subunitate A - complet, cu
13 protofilamente i o subunitate B - incomplet, cu 10 11 protofilamente.
Subunitatea A a fiecrui dublet periferic prezint ataate dou brae (intern,
extern) de dinein (asemntoare unui clete), brae care ajung pn la
subunitatea B din dubletul vecin. Dubletele periferice nvecinate sunt
conectate ntre ele prin intermediul unei proteine fibrilare numit nexina.
Cei doi microtubuli centrali, notai cu C1 i C2, sunt alctuii fiecare din
13 protofilamente i sunt nconjurai de o structur fibroas, numit teaca
intern, implicat n reglarea btii cililor i flagelilor. Subunitatea A a fiecrui
dublet periferic se leag de microtubulii centrali prin molecule proteice
fibrilare spiele radiare. Ele se termin ntr-o poriune globular n
vecintatea tecii interne, care nconjoar cei doi microtubuli centrali i au
rolul de a menine ansamblul structural n timpul micrii.
Aranjamentul filamentelor tubulare sub forma a nou perechi de
microtubuli periferici i doi microtubuli centrali (9 + 2) este comun tuturor
cililor mobili.

98
 Fig. 47. Seciune transversal prin axonema cilului vibratil (M.E.)
(Cotrutz, Carmen i colab., 1990)

Corpusculul bazal are structura centriolului centrozomului (fig.46) i

constituie centrul coordonator al micrii cililor.
Rdcina este format din protofibrile, cu structur periodic
lipoproteic, format din alternane de discuri clare (lipide) i de discuri
ntunecate (proteine). Ancoreaz cilul n citoplasm, conduce intracelular
stimulii recepionai de axonem i are proprieti contractile.
Stereocilii (cilii rigizi) sunt specifici epiteliului epididimului. Prelungiri cu
structura identic stereocilului au fost identificate la polul apical al celulelor
din maculele, cristele i organul Corti din urechea intern, unele celule
anterohipofizare.

Fig. 48. Aspectul stereocililor n microscopia optic

(Cotrutz, Carmen i colab., 1990)

Axonema sterocilului este format numai din 9 dublete de microtubuli

periferici, subfibrila A fiind lipsit de brae. Lipsesc cei doi microtubuli centrali.
Astfel, formula de structur a stereocilului este 9+0.
Flagelul este organitul de micare al flagelatelor, iar la mamifere
formeaz coada spermiei. Structura flagelului este asemntoare cu aceea a
cililor vibratili, fiind organizat dup formula 9 + 2, dar n jurul axonemei se
gsete o coroan bogat de mitocondrii, care asigur ATP-ul necesar
micrii.
Mecanismul molecular al micrii cililor i flagelilor este acelai i este
bazat pe sistemul chimic microtubuli-dinein. Dineina este un complex
99
proteic care prezint o baz ataat la microtubul i trei capete globulare
care se proiecteaz pe subfibrila B a dubletului adiacent. Ea are activitate
ATP-azic. Astfel, energia rezultat prin scindarea ATP-ului produce
alunecarea dubletelor de microtubuli, unul n raport cu cellalt i ncovoierea
axonemei, prin atari-detari succesive ale capetelor globulare de dinein
de dubletul adiacent.
Diferitele tipuri de mutaii care afecteaz proteinele din structura cililor
i flagelilor se pot manifesta prin absena braelor de dinein, a proteinelor
care formeaz teaca central, sau spiele radiare i pot determina sterilitate
la masculi prin imobilitatea spermatozoizilor, sau diferite afeciuni respiratorii
i pulmonare deoarece cilii imobili nu pot ndeprta particulele strine
ptrunse n cile respiratorii o dat cu inspiraia. Acest complex de anomalii
poart denumirea de sindromul cililor imobili.
Indivizii care manifest sindromul cililor imobili, prezint i situs
inversus, adic o inversare topografic a localizrii organelor. Complexul de
anomalii care apare n acest caz, este cunoscut sub denumirea de sindrom
Kartagener.
Funciile cililor i flagelilor:
- cilii i flagelii asigur micarea ciliatelor, flagelatelor i deplasarea
spermiei;
- cilii vibratili realizeaz ndeprtarea sau tranzitul unor substane
aflate n suspensie la suprafaa epiteliilor respiratorii i genitale;
- au rol imunologic, ndeprtnd de pe suprafaa epiteliilor respiratorii
superfactantele ncrcate cu antigene;
- prin btaie la unison, cilii genitali femeli faciliteaz deplasarea
gameilor prin conductele genitale femele;
- stereocilii au rol trofic pentru spermatozoizii aflai n trecere prin
epididim, rol confirmat i de epididimitele bilaterale, soldate cu sterilitate prin
moartea spermatozoizilor;
- stereocilii recepioneaz, capteaz i internalizeaz stimulii n celule;
- cilii i flagelii prezint numeroase tactisme: fototactism,
galvanotactism, chimiotactism.
Centriolii i corpusculii bazali ai cililor i flagelilor sunt organite de
coordonare a motilitii i mai ales de asamblare a microtubulilor.
Microscopia elecronic relev c centriolii care formeaz centrozomul
i corpusculii bazali au aceiai structur, fiind ansambluri cilindrice(vezi capit
Citoscheletul Microtubulii), alctuite din 9 perechi de microtubuli tripli (A, B,
C), periferici, nvelii ntr-o substan dens i fr microtubuli centrali (9 + 0).
Tubulii A i B din structura corpusculilor bazali se continu n axonem, n
timp ce tubulul C se termin n zona de tranziie dintre corpusculul bazal i
axonem.
Centriolii coordoneaz motilitatea celular, n special n timpul
diviziunii celulare, iar corpusculii bazali coordoneaz micrile cililor i
flagelilor.
Ambele formaiuni au rol important n polimerizarea tubulinei i
formarea microtubulilor. Astfel, din rezerva de tubuline citoplasmatice,
centriolii induc formarea microtubulilor care formeaz filamentele fusului de
diviziune, iar corpusculii bazali determin formarea microtubulilor axonemei.

100
n acest fel se explic formarea i dispariia fusului de diviziune, sau
regenerarea unui flagel (incai, 1997).

Centrozomul (centrul celular)

Centrozomul este prezent n aproape toate tipurile de celule cu

excepia celor ultraspecializate ntr-o anumit direcie (ex. eritrocitele,
enterocitele, celulele musculare striate), care i-au pierdut capacitatea de
multiplicare. Majoritatea celulelor prezint un centrozom, dar exist i celule
cu doi sau mai muli centrozomi ( celulele diploide, plasmodiile).
Centrozomul manifest aspecte morfologice i citotopice variate n
funcie de faza ciclului celular.
La microscopul optic, n intercinez, centrozomul este situat n
apropierea nucleului i prezint doi corpusculi intens cromatici, denumii
centrioli, ovalari sau sferoidali, puternic colorai bazofil. Centriolii sunt
nglobai ntr-o mas de citoplasm palid-bazofil, centrosfera din care, n
mitoz, eman filamente radiare, asterul.

Fig. 49. Centrul celular ntr-un ovocit. C.

centrozom; S. centrosfer; A. aster
(Cotrutz, Carmen i colab., 1990)

Electronomicroscopic, centriolii au aspectul unor cilindri perpendiculari

unul pe altul, fiecare cu peretele format din 9 tubuli longitudinali, simpli, dubli
sau tripli, egal distanai ntre ei. La periferia tubulilor, exist dou iruri de
cte 9 sferule, care reprezint originea filamentelor lungi i scurte ale fusului
de diviziune. n timpul interfazei celula are o singur pereche de centrioli,
localizai n vecintatea nucleului. La nceputul diviziunii celulare (n profaz),
centriolii se duplic i fiecare dintre cele dou perechi migreaz la polii opui
ai celulei, de o parte i de alta a nucleului. Microtubulii, produi prin
polimerizarea tubulinelor citoplasmatice, vor forma ulterior, n jurul fiecrei
perechi de centrioli (care reprezint polii celulei), structuri radiare numite
asteri i un fus de diviziune

101
Fig. 50. maginea electronomicroscopic a centriolilor : 1. Triplet format din microtubulii
A, B, C; 2. Banda proteic ce unete microtubulii A i C aparinnd la dou triplete vecine
(Mossiman, W. i colab., 1990)

Funciile centrozomului:
- centrozomul reprezint o rezerv molecular de tubuline, angajate n
edificarea microtubulilor citoplasmei i cei ai citoscheletului;
- este organizatorul fusului de diviziune (aparatul acromatic) prin
polimerizarea i asamblarea tubulinei, filamentele fusului provenind din
molecule de proteine i ARN pericentriolare;
- genereaz cicloza, micarea intracitoplasmatic n vrtej, care
asigur deplasarea i amestecul moleculelor;
- asigur micrile locomotorii de tip ameboidal, micrile microvililor,
cililor, flagelilor;
- coordoneaz reorganizarea centrozomilor celor dou celule fiice
rezultate prin mitoz.

Concepte i noiuni de reinut

Motilitatea este un atribut de baz al celulelor, fr de care nu exist

via. Micrile biologice dispar n agonia i moartea celulei, etap n care se
manifest numai micarea brownian, fenomen fizic rezultat al bombardrii
particulelor citoplasmatice de molecule dizolvate.
Micarea celular bazat pe sistemul molecular actin miozin
include contracia muscular, micarea amoeboidal (micrile realizate prin
emiteri i retracii de pseudopode), micrile din microvili i curenii
citoplasmatici.
Micarea celular bazat pe sistemul molecular microtubuli -
dinein include micrile din timpul diviziunii celulare (formarea i
dezasamblarea filamentelor fusului de diviziune), micrile cililor i flagelilor,
precum i curenii citoplasmatici.

102
 Esena contraciei musculare const n stabilirea unor puni
transversale ntre capetele globulare ale filamentelor groase de miozin i
monomerii filamentelor subiri de actin.
Contracia fibrei muscular striate se realizeaz prin glisarea
(alunecarea) filamentelor groase de miozin n lungul filamentelor subiri de
actin (modelul filamentului glisant emis de Huxley n 1954), lungimea
acestora rmnnd constant.
Miozina muchiului neted, asemntoare cu miozina celulelor
nemusculare, poate interaciona cu filamentele de actin, determinnd
contracia, numai dac n prealabil este fosforilat.
Micarea ameboidal este specific protozoarelor (Amoeba proteus),
iar la metazoare i om, constituie forma de locomoie i fagocitoz, cu rol de
aprare, a leucocitelor.
Microvilii sunt expansiuni digitiforme, permanente, cu lungimi de cca.
2 m, situai la polul apical al celulelor absorbante (enterocite, nefrocite,
ovocit etc.). Au rolul de a mri suprafaa de absorbie (ex. de cca. 25 de ori n
intestin) i de a mpinge elementele absorbite n interiorul celulelor prin
micri de contracie.
Cilii vibratili sunt specifici ciliatelor, epiteliului cilor respiratorii
extrapulmonare (trahee, bronhii) i cel al cilor genitale femele (tromp
uterin, uter). Fiecare cil execut micri de btaie-revenire, micri care se
realizeaz la unison.
Axonema cilului este alctuit dintr-un ansamblu de microtubuli,
format din nou dublete periferice i doi microtubuli centrali.
Mecanismul micrii cililor vibratili se bazeaz pe atari i
detari succesive ale capetelor globulare de dinein de perechea de
microtubuli adiacent, process realizat cu consum de energie rezultat prin
scindarea ATP-ului.
Flagelul este organitul de micare al flagelatelor, iar la mamifere
formeaz coada spermiei. Structura flagelului este asemntoare cu aceea a
cililor vibratili, fiind organizat dup formula 9 + 2, dar n jurul axonemei se
gsete o coroan bogat de mitocondrii, care asigur ATP-ul necesar
micrii.
Centrozomul (centrul kinetic al celulei) este organitul citoplasmatic
care coordoneaz toate tipurile de micri celulare este prezent n aproape
toate tipurile de celule cu excepia celor ultraspecializate ntr-o anumit
direcie (ex. eritrocitele, enterocitele, celulele musculare striate), care i-au
pierdut capacitatea de multiplicare.

ntrebri de autoevaluare
1. Descriei miofibrila striat i mecanismul contraciei fibrei muscular striate.
2. Care este diferenta intre miozina muschiul neted si cea a muschiului
striat?
3. Specificati structura si functiile microvililor?
4. Care sunt celulele care prezinta la polul lor apical cili vibratili?
5. Descriei structura i mecanismul mirii cilului vibratil.
6. Care sunt celulele care se deplaseaza prin intermediul flagelului?

103
 UNITATEA DE NVARE 9

ORGANITELE CITOPLASMATICE. MITOCONDRIILE

Cuvinte cheie: mitocondrii, energogeneza, ATP, glicoliza anaeroba,

fosforilare oxidative

Rezumat
Organitele sunt diferenieri membranocitoplasmatice, care se
formeaz n perioada de evoluie a celulei spre maturizare, asigurnd n
celule funcii generale i funcii specifice (citoplasmatice, nucleare). Apariia
fiecrui tip de organit este precedat de concentrarea glicogenului n teritoriul
citoplasmatic de formare. Glicogenul, ca surs de energie, se consum n
procesul formator, dup care, n teritoriul respectiv (biochimic, histochimic)
este evident enzima marker pentru fiecare tip de organit. Maturitatea
funcional a citoplasmei i chiar a celulei corespunde ncheierii fazei de
difereniere a organitelor. Organitele citoplasmatice se clasific n: vacuolare
(mitocondria, complexul Golgi, reticulul endoplasmatic, lizozomii, peroxizomii)
i granulare (ribozomii, centrozomul, microzomii).

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 2 ore

Mitocondriile

Mitocondriile sunt organite universale de importan primordial pentru

metabolismul celular, datorit coninutului mare n enzime, avnd un rol
extrem de important att n viaa, ct i n moartea celular. Sunt prezente n
toate celulele animale, cu excepia eritrocitului matur. n aceste celule,
glicoliza constituie singura posibilitate de producere a ATP i de meninere a
integritii lor funcionale i structurale.
Dimensiunea mitocondriilor este de circa 0,2 - 2 n diametru i de 2 -
6 n lungime, iar numrul lor variaz ntre 300 - 2000 / celul, numrul i
mrimea fiind corelate cu gradul de difereniere celular, funcii, activitatea
metabolic, nivelul fosforilrii oxidative, ca i cu necesarul energetic al celulei
gazd. Numrul i dimensiunile sunt reduse n celulele cu metabolism redus
(adipocite, celule conjunctive) i este mare n celulele cu metabolism intens
(ex. hepatocite, spermie, celulele musculare cardiace). Volumul total al
mitocondriilor n majoritatea tipurilor de celule este de cca. 5 % din volumul
total al citoplasmei, n hepatocite i celulele musculare cardiace de cca. 30%
- 40%, iar n celulele cu conuri i cu bastonae din structura retinei, celule
fotoreceptoare, mitocondriile ocup un volum total de cca. 80%.

104
 n microscopia optic, mitocondriile au aspect de granule
(condriosomi), iruri de granule (condriomite), filamente (condrioconte),
morfologie care exprim forme foarte active, active sau mai puin active.
Microscopia electronic relev forma de caviti sferoidale sau ovalare
a mitocondriilor, limitate de membrane lipoproteice duble (extern, intern).

Fig.51. Aspectul granular al mitocondriilor n celulele

hepatice imagine n microscopia optic
(incai Mariana, 1997)

Membrana extern este mai subire i neted, alctuit din proteine

(60 %) i lipide (40 %). Este permeabil, iar sub aciunea curenilor
citoplasmatici se deformeaz prin invaginare.
Membrana intern este mai bogat n proteine i enzime (cca. 80%) i
conine numai 20% lipide. Este mai puin permeabil datorit coninutului
ridicat n cardiolipin (10%), un fosfolipid foarte hidrofob, care permite numai
trecerea moleculelor mici, fr sarcin electric (O2; H2O). Membrana intern
emite spre interiorul cavitii prelungiri denumite criste mitocondriale,
variabile ca morfologie, numr, orientare i dimensiuni, n raport cu tipul,
intensitatea metabolismului i necesitile energogenezice ale celulei.
Cristele pot avea aspect ramificat, penat, lobat, iar ca dispunere, pot fi
paralele, sau perpendiculare pe axul longitudinal al mitocondriei.

Fig. 52. Structura tridimensional a

mitocondriilor
(Mossiman,, W. i colab, 1990)

Investigaiile electronomicroscopice, efectuate de Fernandez Moran

(1964), relev alctuirea membranei interne i a cristelor din particule
elementare care se repet, considerate macromolecule care corespund
sistemului multienzimatic membranar mitocondrial. Fiecare particul este
format din trei piese: bazal, intermediar i buton terminal.
nveliul dublu membranar, delimiteaz dou compartimente, extern i
intern. Compartimentul mitocondrial extern are o densitate redus i conine
ioni de Ca2+. Cel intern, este mai voluminos i nglobeaz un coninut amorf,
cu densitate mare, denumit matricea mitocondrial. Aceasta este un complex
heterogen format din: proteine, enzime, vitamine (A, C, B), acizi nucleici
specifici (ARN, ADN), riboproteine, glicogen lipide, ioni de Ca2+, Mg2+, K+.
Mitocondria conine 2 -6 molecule de ADN specific, cu structur
circular, foarte asemntoare ADN -ului bacterian.
ADN-ul mitocondrial se replic independent de ADN-ul nuclear, iar
distribuia bazelor azotate este diferit de cea din nucleu, fapt care mpiedic

105
hibridarea celor dou forme. Acesta coordoneaz sinteza enzimelor
mitocondriale, codeaz ARN -ul specific i puine proteine specifice.
ARN-ul mitocondrial, activ sub controlul direct al ADN -lui mitocondrial,
are rol n geneza proteinelor specifice din membranele mitocondriale.
Proteinele mitocondriei sunt sintetizate fie n ribozomii mitocondriei, fie
n cei citoplasmatici, de unde apoi sunt transferate n matricea mitocondrial.
Asupra originii mitocondriilor, exist mai multe explicaii, dar
majoritatea autorilor consider n prezent c, la origine, mitocondriile sunt
procariote ancestrale (arhebacterii), care au intrat n simbioz cu alte
procariote (protobacterii), genernd celule eucariote primitive, care, n cursul
evoluiei, au dat natere eucariotelor actuale. Ele au capacitatea de replicare
prin diviziune, aceasta prezentnd similariti cu replicarea bacteriilor. Astfel
membranele mitocondriale (extern i intern) invagineaz, iar mitocondria
mam de divide n dou mitocondrii fiice (fig. 59).
Alte ipoteze:
- provin din membrana celular prin invaginarea acesteia;
- se formeaz n timpul diviziunii prin fragmentarea mitocondriilor
preexistente, fragmente care se mpart n mod egal celor dou celule fiice;
- se formeaz "de novo", tot n timpul diviziunii, dintr-o matrice
citoplasmatic pro-mitocondrogen.

Fig. 53. Aspectul mitocondriei n

diviziune

Funciile mitocondriilor
Mitocondriile au un rol central n viaa celular deoarece sunt implicate
n procese fundamentale precum:
- sinteza de energie i respiraia celular. n urma fosforilrii oxidative
se elibereaz energia coninut n molecule organice simple (oze, acizi grai,
a.a.), care este transformat n ATP, utilizat n procesele metabolice.
- homeostazia calciului (Ca2+);
- homeostazia fierului (Fe2+);
- producerea derivailor reactivi la oxigen (DRO);
- sinteza steroizilor.
- sinteza hemului;
- n termogenez;
- n apoptoz (moartea celular programat)
Ansamblul acestor procese vitale asigur funcionarea armonioas a
organismului, astfel c, disfunciile mitocondriilor pot conduce la alterri
funcionale ale esuturilor, pn la handicapuri majore.

106
 Fig. 54. Reprezentarea
schematic a funciilor
mitocondriei

Sinteza de energie i respiraia celular. Sisteme generatoare de

energie n celul

Toate procesele celulare se desfoar cu consum de energie pe care

eucariotele o obin pe diferite ci: sinteze macromoleculare, formarea i
descompunerea apei, metabolism.
Aceste surse genereaz ns energie insuficient pentru desfurarea
tuturor formelor de activitate celular. Celula obine cea mai mare parte de
energie, stocat sub form de ATP, prin dou sisteme: sistemul glicolizei
anaerobe i sistemul fosforilrii oxidative.
Sistemul glicolizei anaerobe este sursa unic de ATP n celulele
procariote (bacterii), care utilizeaz ca substrat energetic glucoza. El este
prezent i n celulele eucariote, care , fie preiau glucoza direct din plasm
sau lichidul interstiial, fie o formeaz prin gluconeogenez. Prin glicoliz se
elibereaz numai 5% din energia potenial a glucozei, restul rmne stocat
n piruvat. Toate enzimele implicate n glicoliz i majoritatea celor implicate
n gluconeogenez sunt proteine solubile, care funcioneaz ca uniti
independente n citosol.
Sistemul fosforilrii oxidative este specific celulelor eucariote
aerobe, care utilizeaz ca substrat piruvatul. Sistemul a aprut la trecerea de
la viaa anaerob la cea aerob (de la procariote la eucariote) i ncepe acolo
unde se termin glicoliza. Energia este eliberat din metabolii prin oxidare n
trepte i este convertit n ATP printr-un proces n care oxidarea i
fosforilarea sunt strns cuplate.
n celulele eucariote, fosforilarea oxidativ are loc n mitocondrie, cea
mai mare cantitate de ATP rezultnd n urma acestui proces.

107
 Fig. 55. Degradarea anaerob i aerob a glucozei (Cpria, Rodica, 2000)

n structura mitocondriei au fost identificate peste 200 de enzime i

proenzime, localizate att n membrane, ct i n matrice, aparinnd la trei
sisteme care intervin n fosforilarea oxidativ n trei trepte succesive:
- n prima treapt acioneaz un complex enzimatic din care fac parte:
piruvat - dehidrogenaza, enzimele oxidrii n trepte a acizilor grai i glutamat
- dehidrogenaza;
- n treapta a doua intervin enzimele ciclului acidului citric (ciclul
Krebs);
- n treapta a treia acioneaz enzimele lanului transportor de
electroni, localizate exclusiv n membrana intern.
Fosforilarea oxidativ desfurat n mitocondrie se realizeaz n
urmtoarele etape:
1a. Piruvatul, generat n citosol n urma procesului de glicoliz, este
transportat prin membrana mitocondrial n matricea mitocondrial, unde
este convertit de ctre piruvatdehidrogenaza n acetil-CoA i CO2;
1b. n cazul utilizrii acizilor grai, acetia trec din citosol n matricea
mitocondrial, unde intr n ciclul - oxidrii. Prin acest proces, catena
acizilor grai este degradat treptat, astfel c, la fiecare tur se rup doi atomi
de carbon de la captul carboxil i rezult o molecul de acetil-CoA. nainte
ns de a ptrunde n mitocondrie, acizii grai (furnizai celulei din snge, sau
produi n celul n urma hidrolizei triacilglicerolilor) sunt activai n
citoplasm. Activarea are loc n prezena enzimei acil-CoA-sintetaza i are ca
rezultat transformarea acizilor grai n acil-CoA, care va fi transportat prin
membrana mitocondrial (impermeabil pentru acil-CoA) prin intermediul
unei translocaze.
2. Acetil-CoA, rezultat din acizii grai sau din piruvat, intr n lanul de
reacii care constituie ciclul Krebs, pentru a fi oxidat n continuare.

108
 Fig.56. Ciclul Krebs
(Mixich, F., Ardelean, A., 2002)

Ciclul Krebs (ciclul acidului citric, ciclul acizilor tricarboxilici)

reprezint o cale comun de catabolism pentru acetil-CoA rezultat din
degradarea glucozei, acizilor grai, aminoacizilor, constituind calea final de
catabolism a componentelor nutritive. El este localizat n matricea
mitocondrial, n vecintatea lanului respirator, ale crui componente sunt
prezente n membrana mitocondrial intern. Ciclul Krebs are 8 etape i
ncepe cu sinteza citratului (cu 6 atomi de carbon) din acetil-CoA (produs cu
2 atomi de carbon) i oxaloacetat (produs al ciclului nsui, cu 4 atomi de
carbon).
Citratul este oxidat i decarboxilat ntr-o serie de 7 reacii, dnd
produi intermediari cu 4 i 5 atomi de C i genernd 2 molecule de CO 2
pentru fiecare parcurgere a ciclului. Astfel, la fiecare parcurgere a ciclului,
intr 2 atomi de C sub forma fragmentului acetil din acetil-CoA, iar 2 atomi de
C, prsesc ciclul, sub forma CO2.
Produsul final al ciclului Krebs oxaloacetatul este utilizat pentru a
resintetiza acidul citric i, cu aceast reacie, ciclul se reia (fig.56).
La fiecare parcurgere a ciclului, dehidrogenazele care oxideaz
intermediarii succesivi, reduc 3 molecule de NAD+ la NADH i o molecul de
FAD la FADH2. Forma redus a acestor coenzime cedeaz electronii lanului
transportor de electroni de pe membrana mitocondrial intern.
Toate enzimele care catalizeaz ciclul Krebs sunt proteine solubile ale
matricei mitocondriale, cu excepia succinatdehidrogenazei, care este o
protein integral a membranei mitocondriale interne.
(FAD = flavin adenin dinucleotid = grupul prostetic al
succinatdehidrogenazei).
3. n a treia etap acioneaz lanul mitocondrial transportor de
electroni (lanul respirator).
Lanul transportor de electroni (respirator) este definit prin totalitatea
enzimelor care particip la transferul echivalenilor reductori (atomi de H i
electroni) de la coenzimele reduse (NADH i FADH2), la oxigen. Enzimele
lanului respirator sunt dispuse pe membrana mitocondrial intern, iar
numrul lanurilor respiratorii variaz de la un tip de celula la alta (ex. n
109
mitocondriile celulelor musculare cardiace exist cca. 20000 lanuri
respiratorii).
Elementele lanului respirator sunt reprezentate de:
- NADH dehidrogenaza (NADH = nicotinamid-adenin-dinucleotid);
- Ubiquinona (coenzima Q);
- Citocromii: b, c, c1, a, a3.
Aceste componente, n general de natur proteic, (cu excepia
coenzimei Q, care este un lipid), sufer oxidri sau reduceri, prin adaosul sau
nlturarea electronilor.
Lanul transportor de electroni ncepe cu NADH dehidrogenaza (fig.
63), un complex enzimatic respirator, care ndeprteaz 2 electroni de pe
NADH i i transfer prin intermediul unei flavoproteine i a unei proteine cu
Fe i S, pe ubiquinon.
Ubiquinona este o molecul mic, liposolubil, preia electronii i i
transfer n flux continuu pe 5 citocromi (cit. b; c1; c; a i a3) la O2 (ultimul
acceptor din lan), care accept o pereche de H+ din mediul apos i formeaz
H2O.
Citocromii a i a3 formeaz mpreun citocromoxidaza, complex care
accept electronii de la citocromul c i i transfer la O2.
Lanul transportor de electroni face 3 bucle, trecnd nainte i napoi
prin membrana mitocondrial. Acest aranjament faciliteaz eliberarea a 6
protoni (H+), cte 2 n acelai timp, pentru fiecare pereche de electroni, care
se mic de-a lungul lanului. Se creeaz astfel un gradient de protoni (H+) i
un gradient electric al membranei mitocondriale interne, ca urmare a
pomprii protonilor pozitivi din matrice, care devine astfel negativ n raport cu
spaiul intermembranar. n acest mod, energia eliberat prin oxidarea NADH
i FADH2 este stocat n gradientul electrochimic al protonilor de pe feele
membranei interne. Deplasarea protonilor prin membrana intern (n sensul
gradientului de concentraie) se realizeaz prin punerea n micare a unei
enzime denumit ATP sintetaza.
ATP sintetaza este un complex proteic ce strbate membrana
mitocondrial intern (situat la nivelul particulelor elementare), prin care trec
protonii spre matricea mitocondrial, n sensul gradientului de concentraie.
Ea transform energia stocat n gradientul protonic, n energie chimic,
sintetiznd n matricea mitocondrial ATP din ADP i P i, printr-o reacie
cuplat cu influxul protonilor. Reacia prin care are loc sinteza de ATP este
urmtoarea:

ADP + Pi <=> ATP + H2O

Pentru fiecare pereche de electroni, care se mic pe ntreaga

lungime a lanului transportor de electroni, sunt sintetizate 3 molecule de
ATP.

110
 Fig. 57. Lanul transportor de electroni

Oxidarea complet a unei molecule de glucoz la CO2 i H2O

genereaz 36 molecule de ATP, din care 2 se obin n citoplasm prin
glicoliz, iar 34 n mitocondrie prin fosforilare oxidativ.

Fig. 58. Fosforilarea oxidativ n

mitocondrie (Tarba, C., 1996)

Influxul de substrat (piruvat, acizi grai) se realizeaz prin sisteme

specifice de transportori. Transportul piruvatului, ca i cel al P i se face printr-
un sistem simport, mpreun cu H+.
Efluxul de ATP produs de mitocondrie este cuplat cu influxul de ADP,
printr-un sistem transportor specific (antiport: ADP - ATP). Astfel ATP -ul se
poate sintetiza n mitocondrie, numai dac exist ADP n citoplasm i dac
celula folosete ATP -ul. Pentru fiecare molecul de ADP introdus, se
transport la exterior o molecul de ATP n sensul gradientului de
concentraie.
Gradientul electrochimic de protoni este utilizat i pentru transportul
ionilor de Ca2+ n matricea mitocondrial, ioni implicai n reglarea activitii
diferitelor enzime.
111
 Modificrile morfofiziologice ale organitului se desfoar ciclic,
alctuind ciclul "umflare - contracie", manifestat prin dou aspecte: aspectul
umflat i aspectul condensat.
Aspectul condensat se traduce morfologic prin volum restrns al
compartimentului intern, matrice dens, numr mare de criste.
Aspectul umflat se traduce prin volum crescut al compartimentului
intern, densitate redus a matricei, numr redus de criste.
Trecerea de la o stare la alta reprezint mecanismul prin care energia
chimic este transformat n energie mecanic.

Concepte i noiuni de reinut

Organitele sunt diferenieri membrano citoplasmatice, care se

formeaz n perioada de evoluie a celulei spre maturizare, asigurnd n
celule funcii generale i funcii specifice.
Mitocondriile sunt organite universale de importan primordial
pentru metabolismul celular, datorit coninutului mare n enzime, avnd un
rol extrem de important att n viaa, ct i n moartea celular.
n microscopia optic, mitocondriile au aspect de granule
(condriosomi), iruri de granule (condriomite), filamente (condrioconte),
morfologie care exprim forme foarte active, active sau mai puin active.
Microscopia electronic relev forma de caviti sferoidale sau
ovalare a mitocondriilor, limitate de membrane lipoproteice duble (extern,
intern).
Numrul i mrimea mitocondriilor sunt corelate cu gradul de
difereniere celular, funcii, activitatea metabolic, nivelul fosforilrii
oxidative, ca i cu necesarul energetic al celulei gazd.
Membrana intern emite spre interiorul cavitii prelungiri denumite
criste mitocondriale, variabile ca morfologie, numr, orientare i
dimensiuni, n raport cu tipul, intensitatea metabolismului i necesitile
energogenezice ale celulei.
nveliul dublu membranar, delimiteaz dou compartimente
mitocondriale, extern i intern. Compartimentul mitocondrial extern are o
densitate redus i conine ioni de Ca2+. Cel intern, este mai voluminos i
nglobeaz un coninut amorf, cu densitate mare, denumit matricea
mitocondrial.
Matricea mitocondrial conine proteine, enzime, vitamine (A, C, B),
acizi nucleici specifici (ARN, ADN), riboproteine, glicogen lipide, ioni de Ca2+,
Mg2+, K+, 2 -6 molecule de ADN specific, cu structur circular, foarte
asemntoare ADN -ului bacterian.
Mitocondriile au capacitatea de replicare prin diviziune, aceasta
prezentnd similariti cu replicarea bacteriilor.
Sistemul glicolizei anaerobe este sursa unic de ATP n celulele
procariote (bacterii), care utilizeaz ca substrat energetic glucoza. El este
prezent i n celulele eucariote, care , fie preiau glucoza direct din plasm
sau lichidul interstiial, fie o formeaz prin gluconeogenez. Prin glicoliz se
elibereaz numai 5% din energia potenial a glucozei, restul rmne stocat
n piruvat.
112
 Sistemul fosforilrii oxidative este specific celulelor eucariote
aerobe, care utilizeaz ca substrat piruvatul. Energia este eliberat din
metabolii prin oxidare n trepte i este convertit n ATP printr-un proces n
care oxidarea i fosforilarea sunt strns cuplate.
n celulele eucariote, fosforilarea oxidativ are loc n mitocondrie,
cea mai mare cantitate de ATP rezultnd n urma acestui proces.
n structura mitocondriei au fost identificate peste 200 de enzime
i proenzime, localizate att n membrane, ct i n matrice, aparinnd la
trei sisteme care intervin n fosforilarea oxidativ n trei trepte
succesive: n prima treapt acioneaz un complex enzimatic din care fac
parte piruvat - dehidrogenaza, enzimele oxidrii n trepte a acizilor grai
i glutamat - dehidrogenaza; n treapta a doua intervin enzimele ciclului
acidului citric (ciclul Krebs); n treapta a treia acioneaz enzimele
lanului transportor de electroni, localizate exclusiv n membrana intern.
ATP sintetaza este un complex proteic ce strbate membrana
mitocondrial intern, prin care trec protonii spre matricea mitocondrial, n
sensul gradientului de concentraie. Ea transform energia stocat n
gradientul protonic, n energie chimic, sintetiznd n matricea mitocondrial
ATP din ADP i Pi, printr-o reacie cuplat cu influxul protonilor.

ntrebri de autoevaluare

1. Descriei structura electronomicroscopic a mitocondriei.

2. Cte molecule de ADN mitocondrial exista in compartimentul
mitocondrial intern?
3. Care sunt principalele sisteme moleculare generatoare de energie n
celul?
4. Care sunt cele trei sisteme enzimatice care intervin in fosforilarea
oxidativa la nivel mitocondrial?
5. Care sunt etapele fosforilarii oxidative?
6. Unde este localizat lantul transportor de electroni?
7. Specificati ce este ATP sintetaza, unde este localizata si ce
implicatii are aceasta enzima in producerea de ATP?

113
 UNITATEA DE NVARE 10

ORGANITELE SECREIEI I DIGESTIEI CELULARE

(RETICULUL ENDOPLASMATIC, COMPLEXUL GOLGI,
RIBOZOMII, LIZOZOMII, PEROXIZOMII)

Cuvinte cheie: reticul endoplasmatic, ribozomi, complex Golgi,

lizozomi, peroxizomi

Rezumat
Organitele implicate n secreie sunt reticulul endoplasmatic i
complexul Golgi. Reticulul endoplasmatic are un rol central n biosinteza
macromoleculelor utilizate n construcia altor organite celulare. Astfel,
proteinele transmembranare, lipidele i complexele de carbohidrai din
reticulul endoplasmatic, complexul Golgi, lizozomi, membrana plasmatic,
sunt sintetizate iniial n reticulul endoplasmatic. Ribozomii sau granulele lui
Palade, prezeni att la procariote, ct i la eucariote, ontogenic sunt primele
organite care se difereniaz n celule, evoluie corelat cu decodificarea
informaiei genetice i cu sinteza proteinelor iar lizozomii i peroxizomii sunt
organite implicate n digestia celular normal i patologic.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 3 ore

Reticulul endoplasmatic

Studii de microscopie electronic, efectuate de Claude i Fullam,

Palade i Porter (1954), semnaleaz n celulele mamiferelor i plantelor,
prezena unui complex de caviti (tubuli, cisterne, vezicule), cu un coninut
specific i cu diametrul ntre 300 - 3000, limitate de membrane lipoproteice
(simple), cu grosimea de cca. 6 nm. Cavitile, prin fuziune, sunt organizate
ntr-o reea tridimensional, interpus ntre membrana nucleului i membrana
celulei, reea denumit reticul endoplasmatic, deoarece este mai dens n
regiunea fluid a citoplasmei. Microscopia optic, a relevat prezena
organitului n celulele specializate n sinteza de proteine, sub form unor
lame paralele (n celulele acinoase pancreatice), de granule mari sau blocuri
(corpii Berg n hepatocite, corpii tigroizi n neuroni).

114
 Fig. 59. Aspectul RER n: A. n celula acinoas
pancreatic; B: n neuroni M.O. 1. pol apical, 2.
RER (lame paralele); 3. nucleu; 4. pol bazal; 5.
corpusculi Nissl (Botrel, S., i colab., 1984)

n microscopia electronic se evideniaz dou varieti de reticul

endoplasmatic: reticul endoplasmatic rugos (RER), care prezint pe faa
citoplasmatic a membranei ataai ribozomi i reticul endoplasmatic neted
(REN), care nu prezint ribozomi.
Cele dou varieti difer considerabil prin form i funcii.
Reticulul endoplasmatic rugos (RER) este alctuit din cisterne, a cror
membran continu membrana extern a nveliului nuclear i are rol
esenial n sinteza proteinelor. Dei este prezent n toate celulele nucleate,
cu excepia spermiei, RER este mai bine reprezentat n celulele specializate
n sinteza de proteine (ex. celulele acinoase pancreatice, implicate n
secreia enzimelor digestive; plasmocitele, care secret imunoglobuline;
hepatocitele, la nivelul crora se sintetizeaz proteinele serice; fibroblastele
celule secretoare de proteine fibrilare; neuronii, implicai n sinteza
neurotransmitorilor) sau n sinteza membranelor (ex. ovocita, celulele cu
bastonae din retin).
Reticulul endoplasmatic neted (REN) este alctuit dintr-o reea de
tubuli fini, care se ntinde spre periferia celulei, n continuarea RER, pn la
citoscheletul membranei. Este bine reprezentat n celulele specializate n
metabolismul lipidelor (ex. hepatocitele, care reprezint locul principal al
sintezei particulelor lipoproteice destinate exportului).
Studiile efectuate pe microzomi relev structura membranelor
reticulului endoplasmatic, ele fiind alctuite din proteine i lipide n proporie
aproximativ egal.
Ribozomii ataai la RER sunt legai pe suprafaa membranei, n parte
datorit lanului polipeptidic n cretere, care este inserat n stratul lipidic pe
msur ce este sintetizat, iar pe de alt parte datorit interaciunii subunitii
mari a ribozomului cu proteine transmembranare specifice, cu rol de
receptor, denumite riboforine. Aceste glicoproteine specifice (riboforine) se
gsesc exclusiv n membrana RER, avnd rol n legarea ribozomilor.
Proteinele din membrana reticulului endoplasmatic sunt glicoproteine
care strbat complet stratul dublu lipidic, iar gruprile glucidice sunt situate
pe faa luminal (intern) a membranei, lumenul reticulului endoplasmatic
prezentnd asemnri cu spaiul extracelular.

115
 Lipidele din membrana R.E. sunt n majoritatea lor fosfolipide
(fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilinozitolul) cu acizi grai
nesaturai, care confer o mare fluiditate membranei.
Originea organitului este explicat prin urmtoarele ipoteze: provine
din componeni tubulari citoplasmatici disparai, care ulterior se unesc i
formeaz reeaua; se formeaz prin invaginarea membranei celulare, ipotez
argumentat de prezena glicoproteinelor i a sarcinilor electrice de
suprafa; organitul este considerat un sistem autonom, capabil s se
reproduc n timpul diviziunii celulare, prin aglomerarea membranelor la cei
doi poli ai celulei parentale i mprirea egal a acestora celor dou celule
fiice.

Funciile reticulului endoplasmatic

Funcii specifice reticulului endoplasmatic rugos

RER este angajat n sinteza i eliberarea proteinelor de export i a
proteinelor de membran, proces care comport urmtoarele etape:
- iniierea sintezei n ribozomii din apropierea RER, pe baza
codului transportat din nucleu la ribozomi, de ctre ARNm. Iniierea
determin agregarea ribozomilor n poliribozomi (uniti funcionale) i
ataarea poliribozomilor cu subunitatea mare de riboforin (proteina canal)
din membrana RER. Polipeptidul nou-format poate rmne n membrana
reticulului ca protein specific, poate fi transportat n membrana nucleului
prin difuziune, sau poate fi transferat prin vezicule de export, care se
desprind din membrana reticulului n complexul Golgi n care este prelucrat,
transformat n proteine de export i eliminat prin exocitoz;
- procesul se finalizeaz cu detaarea poliribozomilor de
membrana reticulului, disocierea acestora n subuniti i reciclarea lor.

Fig. 60.
Reprezentarea
schematic a
procesului de sintez
proteic la nivelul
reticulului
endoplasmatic rugos
(Gnter Blobel, 1999)

Majoritatea proteinelor sintetizate n RER i creeaz structura teriar

final trecnd printr-o serie de modificri, care au loc n lumenul organitului i
care constau n:
- formarea n interiorul moleculei a legturilor disulfidice (- S S -
). Punile disulfidice se constituie de obicei la proteinele de export (ex.
imunoglobulinele, insulina etc.) i la cele membranare. Proteinele de
structur, sintetizate la nivelul ribozomilor liberi, nu prezint puni disulfidice,
datorit unui mediu puternic reductor existent n citosol;
- modificarea unor radicali de aminoacizi (ex. hidroxilarea
radicalilor de prolin i lizin n diferitele tipuri de colagen). Lanurile
polipeptidice care intr n alctuirea moleculelor proteice trebuie asamblate
corect. Contrar, ele nu vor putea prsi RE, fiind acumulate i degradate n
116
lumenul organitului. De asemenea, secvena de aminoacizi din structura
lanurilor polipeptidice trebuie s fie corect, prevenindu-se astfel mutaiile cu
efecte dramatice;
- glicozilarea parial (n cazul glicoproteinelor) (adugarea de
grupri oligozaharidice la proteina format).
Glicoproteinele rezultate astfel n RE, sunt mpachetate n vezicule i
sunt transportate prin intermediul acestora la nivelul complexului Golgi, unde
procesul de glicozilare este continuat i ulterior, finalizat.

Funcii specifice reticulului endoplasmatic neted

1. Funcia de biosintez a lipidelor celulare. Varietatea neted a RE
este bine dezvoltat n celulele care sintetizeaz hormoni steroizi pornind de
la colesterol (ex. celulele foliculilor ovarieni, celulele corpului galben, celulele
corticosuprarenalei), n celulele specializate n metabolismul lipidelor (ex.
hepatocitele celule specializate n producerea particulelor lipoproteice de
export), n celulele absorbante din mucoasa intestinal.
2. REN din hepatocite este implicat n procesul de detoxifiere, att a
medicamentelor, ct i a componentelor nocive, care apar n metabolism.
Aceste reacii de detoxifiere sunt catalizate de enzime (ex. citocrom P450),
localizate n membrana REN.
3. REN din celulele musculare (reticulul sarcoplasmatic) este implicat
n sechestrarea ionilor de Ca2+ din citosol, constituind un depozit pentru
acetia. Protein-enzima principal din membrana acestui organit este Ca 2+-
ATP-aza, care pompeaz ionii de Ca2+ din citosol n lumenul REN,
determinnd relaxarea miofibrilelor i a fibrei musculare.
4. Funcia de biosintez a membranelor i organitelor celulare este
comun att RER, ct i REN.
n membranele RE se sintetizeaz proteinele i lipidele din structura
membranei plasmatice, membrana complexului Golgi i a lizozomilor i se
elaboreaz enzimele destinate altor organite celulare, cum sunt lizozomii i
peroxizomii.

Funcii comune reticulului endoplasmatic rugos i neted

1. Att RER, ct i REN ndeplinesc funcia de aparat circulator
intracitoplasmatic, asigurnd transportul substanelor prin canaliculii care
strbat toat citoplasma.
2. Prin membranele RER i REN se asigur transferul substanelor
ntre citoplasm i lumenul RE, transfer realizat att prin difuziune simpl, ct
i prin transport activ.
3. Ambele varieti au rol mecanic, constituind un suport pentru
organitele celulare.

Complexul Golgi

Complexul Golgi a fost evideniat de Camillo Golgi (1898) i este

foarte bine reprezentat n celulele secretorii, redus n celulele organismelor
inferioare, celulele musculare, celulele mbtrnite, dispare n celulele n
agonie i este absent n eritrocite.

117
 Imaginea organitului in microscopia optic pe preparate impregnate
argentic este fie de reea format din canaliculi, fie de dictiozomi (discuri sau
caviti sferoidale), ceea ce denot plasticitate, modificrile de form fiind n
relaie direct cu starea de activitate a celulei.

Fig. 61. Aspectul complexului Golgi n

microscopia optic
(Botrel, S., i colab., 1984)

Microscopia electronic relev structura policavitar heterogen,

organitul fiind format din microvezicule, tubuli (saci, cisterne), macrovezicule,
caviti limitate de membrane lipoproteice simple, cu un coninut heterogen.
Sacii golgieni variaz ca numr ntre 3 -11 - 30 n raport de specie,
tipul i funciile celulei, numrul fiind mare n celulele secretorii i mic n cele
cu metabolism redus. Sacii sunt uor curbai, cu poriunea mijlocie mai
ngust i extremitile mai dilatate, sunt paraleli i suprapui, manifestnd
polaritate funcional, fiecare sac prezentnd o fa cis (convex) i o fa
trans (concav).
Faa cis (convex, imatur) este orientat spre nucleu i RER i este
angajat n refacerea sacilor dup desprinderea macroveziculelor de la
extremitile acestora. Membrana care delimiteaz faa cis are o grosime de
cca. 6 nm, similar cu cea a RE.
Faa trans (concav) este orientat spre membrana celulei, zon n
care au fost identificate glico- i mucoproteine, GAG, activitate
polienzimatic. Membrana feei trans este asemntoare plasmalemei,
avnd grosimea de cca. 10 nm.
Sacii se formeaz prin asocierea macroveziculelor i comunic ntre ei
prin canale cu lumen ngust plasate n lungul suprafeei.
Microveziculele (vezicule de transfer) sunt caviti sferice mici (300 -
500 n diametru), cele mai multe provenind din pensarea capetelor RER,
altele se desprind din nucleolem sau din plasmalen, originea diferit
confirmnd coninutul heterogen transportat de acestea n saci. Membranele
microveziculelor fuzioneaz cu cele ale sacilor golgieni.
Macroveziculele sunt caviti sferice cu diametrul de aproximativ 2000-
6000 . Ele se formeaz prin dilatarea extremitilor sacilor, pe msura
acumulrii produilor finali, sintetizai n poriunea mijlocie a sacului.
Macroveziculele desprinse prin smulgere, migreaz spre membrana celulei,
cu care stabilesc contacte i i exociteaz produii. Ele reprezint aa
numitele vezicule de secreie, care conin proteine sintetizate n RE, maturate
n complexul Golgi i care vor fi exocitate.
Organitul nu este un simplu compartiment de trecere pentru
moleculele heterogene ci, acesta posed mecanisme speciale de formare
(proteoliz, glicozilare, sulfatare), rezultnd complexe moleculare ca de

118
 exemplu: proteine de secreie, protein-enzime, glicoproteine, glicolipide,
glicozamine i proteoglicani.

Fig. 62. Reprezentarea schematic a RE i

a complexului Golgi
(Mossiman, W. i colab. 1990)

Funciile complexului Golgi

1. Funcia de agregare, condensare i definitivare a sintezei de
proteine. Precursorii proteici sunt transportai prin microveziculele RER n
cisternele Golgi, n care, prin proteoliz, glicozilare i/sau sulfatare, se
condenseaz i sunt modificai rezultnd proteina specific, care este
mpachetat n macrovezicule de exocitoz.
Proteoliza const n scindarea unor poriuni din lanul polipeptidic (ex.
din proinsulin rezult insulina, din proalbumin albumina etc), proces care
are ca rezultat obinerea proteinelor de export.
Glicozilarea terminal a proteinelor. Proteinele sintetizate la nivelul
RER sufer n lumenul acestui organit o prim etap a procesului de
glicozilare, fenomen indispensabil funcionrii lor. Glicoproteinele rezultate
prsesc apoi RE i, ajunse n complexul Golgi, sunt parial ajustate de
glicozidazele golgiene.
Sulfatarea este procesul de transferare a gruprilor sulfat pe
glicoproteine, proteoglicani, glicolipide, proces catalizat de sulfotransferaze.
Prin aceste reacii, complexul Golgi are un rol important n sinteza
mucopolizaharidelor i gangliozidelor.
O protein nou-sintetizat necesit aproximativ 10 minute s treac de
la RE la complexul Golgi i cca. 30 60 minute, pentru a se deplasa prin
complexul Golgi, pn la destinaia final. Proteina specific rezultat va fi
mpachetat n macrovezicule capabile de a fuziona cu plasmalema, pentru a
putea fi exocitat n mediul extracelular, n momentul n care celula este
stimulat de un semnal specific (mesager).
2. Funcia de sintez a glucidelor.
3. Funcia de biogenez a lizozomilor.
4. Organitul este angajat i n unele procese patologice ca de
exemplu: formarea granulelor de melanin n stri tumorale.

119
 Fig. 63. Reprezentarea schematic a sintezei i transportului unei proteine secretorii
(Ollivier, M., i colab., 1990)

5. Funcia de formare i circulaie a membranelor. Complexul Golgi

primete vezicule din RE pe care le modific (att coninutul ct i
membrana) i apoi expediaz vezicule de secreie spre plasmalem unde,
prin exocitoz, membrana veziculei se adaug plasmalemei. Suprafaa
celulei rmne ns constant, deoarece prin endocitoz, din plasmalem se
desprind vezicule care readuc n celule componente ale membranei, pn la
sacii golgieni. n acest fel, celula refolosete componentele membranare i i
asigur o suprafa constant;
6. Funcia de generare a acrozomului n spermatozoizi. Complexul
Golgi se dispune supranuclear n spermatozoizi, formnd acrozomul care
elibereaz enzime litice ale membranei ovulului, permind cuplarea celor doi
gamei n timpul fecundaiei.

Ribozomii. Sinteza proteinelor

Ribozomii (granulele lui Palade) au fost pui n eviden de George

Palade, n 1954, prin studii electronomicroscopice. Sunt ntlnii att la
procariote, ct i la eucariote, ontogenic fiind primele organite care se
difereniaz n celule, evoluie corelat cu decodificarea informaiei genetice
i cu sinteza proteinelor
Numrul ribozomilor este variabil n raport cu tipul de celule, momentul
funcional i coninutul n ARN-celular. Dimensiunile sunt cuprinse ntre 15-30
nm. n celul, ribozomii exist sub dou forme:
1.- liberi:
- disociai n citoplasm (forma inactiv pentru sintezele proteice,
cnd cele dou subuniti sunt separate ntre ele i de ARNm);
agregai n uniti poliribozomiale (polizomi forma activ a
ribozomilor), formaiuni n care mai muli ribozomi pot fi legai pe aceiai
molecul de ARNm.
2.- ataai pe membrana RER i pe faa extern a nucleolemei.
Att n celulele procariote, ct i n cele eucariote, dei exist unele
diferene biochimice i de mrime, ribozomii sunt alctuii din dou subuniti
120
(subunitatea mic i subunitatea mare) inegale ca mrime i constante de
sedimentare.
Ribozomii procariotelor au constanta de sedimentare 70S.
Subunitatea mic are aspectul unui corpuscul alungit, marcat de un an
asimetric i are constanta de sedimentare de 30S (subunitatea 30S). Ea este
constituit dintr-o singur molecul de ARNr (16S) i 21 proteine ribozomale .
Subunitatea mare are aspect de brcu i un coeficient de sedimentare de
50S (subunitatea 50S). Ea este format din dou molecule de ARNr (5S;
23S) i aproximativ 31 de proteine ribozomale.
Ribozomii eucariotelor (constanta de sedimentare 80S) sunt constituii
dup acelai plan de organizare ca i cei ai procariotelor, dar au dimensiuni
mai mari. Subunitatea mic are un coeficient de sedimentare de 40S i este
alctuit dintr-o molecul de ARNr (18S) i 30 de proteine ribozomale.
Subunitatea mare are coeficientul de sedimentare de 60S, fiind alctuit din
3 molecule de ARNr (5S; 5,8S i 23S) i 50 proteine ribozomale.
Ribozomii eucariotelor aflai n mitocondrii i cloroplaste sunt foarte
asemntori ribozomilor bacterieni, avnd constanta de sedimentare tot de
70S.
Compuii chimici ai ribozomilor sunt proteinele i ARN-ul ribozomal
aproximativ egale cantitativ, lipide, ioni de Ca2+ i Mg2+. Lanurile de ARN ale
celor dou subuniti sunt entiti chimice cu constante de sedimentare i
numr de nucleotide diferit, secvenializarea nucleotidelor fiind diferit i n
subunitile ARN din ribozomii liberi fa de cei ataai membranelor.
Cele dou subuniti ale ribozomului se asambleaz n prezena unei
anumite concentraii de ioni de Mg2+ i se separ cnd scade concentraia n
Mg2+ sau cnd asupra lor acioneaz inhibitori ai sintezei proteice.
Formarea ribozomilor n celul este un proces de autoasamblare
dependent de informaia coninut n moleculele de ARN ribozomal. Procesul
de formare al ribozomilor ncepe n nucleu i este concomitent cu procesul
de transcriere al informaiei de pe gene multiple ale ADN, aparinnd poriunii
cromozomiale (pars cromozoma) a nucleolilor.
Pe lng rolul important pe care l are n autoasamblarea ribozomilor,
ARNr intervine i n procesul de recunoatere ribozom-ARNm-ARNt, putnd
forma perechi de baze complementare cu anumite secvene din ARNt i
ARNm.
O nsuire caracteristic a ribozomilor este aceea de a se grupa cte
4-50 pe molecula de ARNm, rezultnd poliribozomi, grupri di sau polimere,
forme active ale organitului. Fenomenul este reversibil, agregarea i
dezagregarea fiind direct dependente de concentraia ionilor de Mg 2+.
Numrul de ribozomi dintr-un polizom depinde de mrimea moleculei
proteice.

121
 Fig. 64. Reprezentarea schematic a poliribozomilor. Sinteza proteinelor ncepe cu
legarea ataarea subunitilor mici pe molecula de ARNm. Cnd polipeptidul este format
complet, ambele subuniti se disociaz de pe molecula de ARNm
(Alberts, B., i colab., 1983)

Sinteza proteinelor
Sinteza proteinelor este un proces complex, controlat de gene
nucleare, nucleul fiind sediul codului genetic al tuturor tipurilor de proteine
celulare. Ea reprezint ultima etap din lanul de evenimente, care transmit
informaia ereditar coninut n structura acizilor nucleici, la proteine
(enzime), principalele elemente ale activitii celulare.
n molecula de ADN este nscris ordinea de aezare (succesiune) a
aminoacizilor din lanurile polipeptidice, ordine care asigur specificitatea
proteinelor sintetizate la ribozomi. Secvena de aminoacizi a oricrei proteine
este indicat de secvena tripletelor de baze azotate (codoni) dintr-o anumit
regiune a ADN. Replicarea semiconservativ a ADN asigur transmiterea la
descendeni a posibilitilor de sintez a unor proteine identice. Secvenele
de baze azotate (informaia) din ADN sunt transcrise pe ARNm, care ajunge
n citoplasm (la locul sintezei proteice), unde se fixeaz pe ribozomi,
unindu-i ntr-un ir mai mare, sau mai mic de polizomi. Secvenele de codoni
din ARNm (transcrieri ale secvenelor de dezoxiribonucleotide din ADN)
alctuiesc mesajul genetic, care este citit i tradus n secvene de proteine la
nivelul ribozomilor. Aici se desfoar procesul complex al biosintezei
proteinelor, la care particip ARNm, ribozomii, aminoacizii activai prin legare
de ARNt i o serie de proteine solubile. Tot pe ADN sunt replicate i alte
dou clase de ARN: cele trei tipuri de ARN ribozomal (ARNr) i cel puin 20
de tipuri de ARN de transfer (ARNt).
Informaia copiat pe ARNm trebuie descifrat, rol ce revine ARNs (t)
n molecula cruia se afl cifrul prin care este citit planul de sintez al
proteinelor.
n cursul translaiei, molecula de ARNm este citit sub forma
secvenelor de cte 3 nucleotide (codoni), n direcia de cretere 5 `-3` a
moleculei de ARNm.
Aminoacizii i suportul energogenezei sunt oferite de matricea
citoplasmatic, n care sunt nglobai ribozomii.
122
 Aminoacizii nu se pot lega direct pe ARNm deoarece bazele purinice
i pirimidinice nu pot oferi locuri specifice de legare pentru cei 20 de
aminoacizi foarte diferii. n acest proces intervine o molecul adaptor ARNt
- , care leag specific cte un aminoacid, iar pe de alt parte se leag de
ARNm. Exist un mare numr de ARNt specifice pentru diferiii aminoacizi
din citoplasm, ns, indiferent de tipul de aminoacid transportat i de specie,
toate moleculele de ARNt au o structur asemntoare.
ARNs (t) este o molecul universal, format din 4 regiuni cu perechi
de baze complementare (tulpini) i 4 regiuni lipsite de baze complementare
(bucle) (fig.56). Formarea legturilor de hidrogen ntre perechile de baze
complementare determin plierea lanului polinucleotidic, ce se poate
prezenta sub forma unei frunze de trifoi cu patru foi. Una dintre bucle
prezint o secven de trei nucleotide (anticodonul) ce recunoate n mod
specific codonul de pe ARNm. n acest fel este adus la ribozom aminoacidul
codificat de codonul respectiv. Aminoacidul este legat de ARNt la captul 3
al lanului polinucleotidic.

Fig. 65. Structura spaial a moleculei

ARNt

Legarea aminoacidului de ARNs (t) este catalizat de aminoacil-

sintetaza, cu degajare de energie i utilizare n formarea legturilor
polinucleotidice.
Evenimentele de la nivel ribozomal pot fi mprite n 3 etape: iniierea,
elongarea, terminarea.
Dei mecanismul sintezei proteice pe unitatea 70S (procariot) i 80S
(eucariot) pare a fi similar, exist diferene semnificative, care vor fi
discutate pe parcurs.
Iniierea const, pe de o parte n asamblarea ribozomilor la molecula
de ARNm iar, pe de alt parte n recunoaterea primului codon (codonul
start) de pe molecula de ARNm, - codonul AUG - , de ctre o molecul de
ARNt iniiator. Acest ARNt-iniiator poart aminoacidul corespunztor
codonului start (AUG), aminoacid reprezentat prin metionin.
ARNt-iniiator se leag de subunitatea mic a ribozomilor n
citoplasm, nainte de asocierea ei cu ARNm, proces catalizat de o serie de
proteine denumite factori de iniiere (IF1 IF6). Factorii de iniiere au rolul de a
stabiliza complexul nou format (ARNt subunitatea mic ribozom).
Ribozomul este capabil s se lege la dou molecule de ARNt
simultan: una n poziia acceptor (A) i alta n poziia peptidil (P), poziii
dispuse de-a lungul subunitilor mare i mic a ribozomului (fig. 57).

123
 Poziia (situsul) peptidil (P) leag o molecul de ARNt la care se afl
ataat lanul polipeptidic n cretere. Poziia acceptor (A) ine legat o
molecul de ARNt, care aduce urmtorul aminoacid.
Molecula de ARNt a fiecrui situs prezint anticodonul, care este
complementar cu codonul corespunztor de pe molecula de ARNm.
Situsul de legare a ARNm este situat pe subunitatea mic a
ribozomului i asigur asocierea ARNm cu ribozomul n aa fel nct, 2
codoni succesivi de pe molecula de ARNm s fie dispui n dreptul situsurilor
A i P.
n momentul n care metionil ARNt-iniiator interacioneaz cu situsul
P (al subunitii mari a ribozomului), ribozomul devine funcional.
Elongarea (alungirea) ncepe n momentul n care, dou molecule
de ARNt stau alturi pe ribozom. Acest proces se desfoar n trei etape:
1. Prima etap const n legarea codon-direcionat a unei
molecule de aminoacil-ARNt la situsul A, situat pe aceiai subunitate mare a
ribozomului, lng situsul P (ocupat) (fig. 66).
2. Etapa a doua const n formarea legturii peptidice n care
gruparea amino a aminoacil ARNt-ului din situsul A se condenseaz rapid cu
gruparea carboxil a tARNmetiniiator n poziia P. Aceast reacie este
catalizat de peptidil-transferaza, o component integral a subunitii mari a
ribozomului.
3. n etapa a treia, noul peptidil-ARNt situat acum n situsul A, este
translocat n situsul P, prin micarea ribozomilor, exact cu un codon spre
captul 3` al moleculei de ARNm. Aceast etap solicit energie i se
realizeaz printr-o succesiune de schimbri conformaionale ale
componentelor ribozomale, induse prin hidroliza moleculei de GTP ataat.
n urma translocaiei noului peptidil-ARNt din situsul A n situsul P,
situsul A rmne liber, putnd astfel s lege un nou aminoacil-ARNt,
corespunztor codonului de pe ARNm.
Terminarea. Din totalul de 64 codoni ai moleculei de ARNm, 3 sunt
codoni stop (UAA, UAG, UGA), care termin procesul de translaie (fig. 68).
Aceti codoni stop nu sunt recunoscui de ARNt corespunztor, ci de
proteine specifice citoplasmatice, denumite factori de terminare. n prezena
lor, activitatea peptidil-transferazei este alterat, cauznd adiia unei
molecule de ap n locul aminoacizilor, la grupul amino liber (NH2) din situsul
P. Ca rezultat, carboxilul terminal (-COOH) al lanului polipeptidic n cretere
este detaat de pe molecula de ARNt, sinteza polipeptidului este ncheiat,
iar acesta este eliberat de pe ARNm.
Dup terminarea translaiei, proteina format din asamblarea
aminoacizilor se desprinde n citosol, ca urmare ARN-urile solubile se desfac
de pe ARNm, urmnd s fie reciclate n alte sinteze proteice. Cele dou
subuniti ale ribozomilor se desfac, deoarece ARNm, care le-a captat a fost
dezintegrat n nucleotide i servesc la formarea altor ribozomi n alte locuri
de sinteze proteice. Astfel, celulele eucariote dispun de posibilitatea de
reciclare a ribozomilor, din forma liber n cea ataat i invers. Sinteza
complet a unei proteine de mrime medie dureaz cca. 20 60 secunde.

124
 Fig. 66. Iniierea i nceperea
elongrii sintezei proteice. ARNt-
iniiator intr direct n poziia P de pe
ribozom, n timp ce toi ceilali
aminoacil-ARNt intr n poziia A i
sunt apoi translocai n poziia P

Fig. 67. Continuarea

elongrii polipeptidului. Legarea
codon-direcionat a unei molecule
de aminoacil-ARNt la situsul A,
situat pe aceiai subunitate mare a
ribozomului, lng situsul P
(ocupat)

Fig. 68. Terminarea procesului

de translaie la apariia
codonului stop, care nu este
recunoscut de ARNt

Sinteza proteic pe ribozomii procariotelor se desfoar de-a lungul

acelorai etape: iniiere, elongare, terminare, ca i la eucariote.
Codonul de iniiere este acelai AUG -, dar ARNt iniiator difer: N-
formilmetionina-ARNt n cazul procariotelor, spre deosebire de metionil-ARNt
n cazul eucariotelor.

Microzomii

Microsomii sunt particule submicroscopice izolate prin

ultracentrifugare difereniat. Nu sunt organite citoplasmatice propriu-zise ci,
sunt fragmente subcelulare heterogene: fraciuni RE, complex Golgi,
fragmente de plasmalem, nucleolem, mitocondrii sau ribozomi. Microsomii
constituie 15-20% din masa total a citoplasmei, manifestnd variaii
cantitative prin creteri numerice n cursul digestiei. Fraciunile microsomale

125
sunt bogate n riboproteine, 80-90% din ARNr-ul ribozomal citoplasmatic fiind
concentrat n microsomi. Ei mai conin: lipide, Fe2-, S, Cu i manifest o
variat activitate enzimatic, corespunztoare metabolismului substanelor
organice.

Digestia celular. organite, mecanisme i implicaii

Lizozomii (corpii litici)

Existena lizozomilor a fost semnalat (ntre anii 1951-1956), n

omogenatele ultracentrifugate de ficat i rinichi, fraciuni bogate n hidrolaze,
confirmate ulterior electronomicroscopic ca formaiuni subcelulare.
Studiile de microscopie electronic relev c lizozomii sunt organite
vacuolare sferice sau ovalare, delimitate de membrane lipo-proteice, prezeni
n toate tipurile de celule, cu excepia hematiilor adulte. n numr mare sunt
prezeni n hepatocite i macrofage (200/celul), avnd aspectul unor
vezicule cu diametrul cuprins ntre 0,25 i 1,5. Matricea lizozomial conine
un numr mare de enzime hidrolitice (peste 50 de tipuri), reprezentate de:
proteaze, nucleaze, glicozidaze, lipaze, fosfolipaze, fosfataze i sulfataze.
Acestea acioneaz pe substraturi diferite: glucide, lipide, proteine, acizi
nucleici (RN-aza; DN-aza)etc. Toate sunt hidrolaze acide, cu activitatea
optim la un pH acid, cuprins ntre 4 i 6 (n medie 5). Heterogenitatea
enzimatic este atribuit faptului c lizozomii, sub aciunea unor mecanisme
reglatoare i pot modifica activitatea enzimatic n funcie de necesitile
fiziologice. Pe lng multitudinea de protein-enzime, lizozomii conin i mici
cantiti de lipide, proteine de structur, iar n proporii foarte reduse:
glicolipide, acid hialuronic, flavine.
Majoritatea lizozomilor sunt limitai de membrane simple lipoproteice.
Exist i lizozomi cu membrane duble (lizozomii din nefrocite) precum i
lizozomi mbrcai (identificai) n macrofage, a cror suprafa prezint
spiculi radiari.
Membranele sunt bariere selective interpuse ntre enzimele
lizozomiale i hialoplasm, controlnd intrrile i ieirile din lizozomi i
asigurnd protecia celulei mpotriva aciunii nocive a propriilor lizozomi.
Integralitatea membranelor lizozomiale este influenat deseori de factori
fizici (temperaturi sczute, nghe-dezghe, radiaii ionizante etc.), chimici
(detergeni, vitamine: A, E, K) i biologici (toxine bacteriene etc.). Dac
membranele sunt rupte sub aciunea diferiilor factori, enzimele lizozomiale
difuzeaz n citoplasm i degradeaz celelalte organite, conducnd la
procese de autoliz celular.
Membranele lizozomilor conin o protein de transport (H+-ATP-aza),
care pompeaz ionii de hidrogen (H+) n interiorul lizozomilor, utiliznd
energia rezultat prin hidroliza ATP. n acest fel, se menine un pH acid (5)
n lumenul organitului.
Pe parcursul activitii lor, lizozomii trec prin mai multe etape marcate
de o heterogenitate structural:
- Lizozomii primari conin un set intact de enzime (nu au fost angajai
n digestia intracelular) i i au originea n complexul Golgi;

126
 - Lizozomii secundari (activi) sunt ncrcai cu diferite materiale de
incluzie. Ei rezult din fuzionarea lizozomilor primari cu diferite substane
endocitate, sau nefuncionale din celul;
- Lizozomii teriari (telolizozomi sau corpi reziduali) i-au epuizat
bagajul enzimatic; de acetia, celula se debaraseaz prin exocitoz.
Prin coninutul n hidrolaze heterogene, lizozomii sunt implicai n
digestia celular normal i patologic, aciunea lor digestiv fiind
sistematizat n trei direcii:
- heterofagie: digerarea unor particule strine ptrunse n celul;
- autofagie lizozomii acioneaz asupra propriilor constitueni celulari
devenii "non self", ca de exemplu organite mbtrnite, fragmente de
membrane, digerarea fusului de diviziune;
- crinofagia, care reprezint procesul de scindare al granulelor de
secreie celular pentru a putea traversa membrana prin difuziune.
Hetero-i autofagia se realizeaz n caviti de digestie numite
fagozomi sau pinozomi (heterofagozomi, autofagosomi, heteropinosomi,
autopinosomi). Fagozomii conin substane exogene (molecule, coloizi,
bacterii, virusuri, particule inerte) sau substane endogene (macromolecule,
citomembrane, ribozomi, mitocondrii mbtrnite).
Autofagia este intens n celulele indivizilor aflai n inaniie, ca un
mecanism de supravieuire, situaie n care celulele utilizeaz proprii produi
pe care i scindeaz prin hidroliz. Autofagia este un proces normal n
involuia unor esuturi (ex. degenerarea cozii la mormolocul de broasc),
fragmentarea membranei nucleare, dezagregarea nucleolului, liza fusului de
diviziune, involuia vestigiilor embrionare.
Funcia de aprare revine lizozomilor din macro- i microfage, alte
celule ale sistemului de aprare, rol demonstrat i prin aceea c, la nou-
nscui, fagocitele au capacitate litic mult diminuat prin numrul redus de
lizozomi, n comparaie cu fagocitele organismelor adulte, la care numrul de
lizozomi este mult mai mare, ca o consecin a contactului acestora cu
antigenele.
Crinofagia const n fagocitarea produilor de secreie elaborai de
celul, constituind un mecanism, prin care celula i controleaz att calitatea
ct i cantitatea substanelor secretate.
Aciunea de digestie a lizozomilor, normal i patologic, se
finalizeaz cu obinerea unor produi simpli (aminoacizi, monozaharide, acizi
grai, care trec prin membrana lizozomial n citoplasm, unde sunt reutilizai
n procesele de biosintez.
Lizozomii ndeplinesc urmtoarele funcii:
1. Funcia de aprare, care revine n special lizozomilor din
macrofage, polimorfonuclearele neutrofile etc.;
2. Funcia de renoire a celulelor (resturile celulare mbtrnite sunt
supuse aciunii lizozomilor din macrofage);
3. Controlul activitii de secreie celular (ntlnit n celulele exo i
endocrine, n care lizozomii finalizeaz cantitativ i calitativ produii de
secreie);
4. Reglarea metabolismului celular al colesterolului: LDL purttoare de
colesterol, se leag de receptorii specifici ai plasmalemei, sunt internalizate
n vezicule i apoi supuse aciunii lizozomilor. LDL sub aciunea lizozomilor,

127
elibereaz colesterol care difuzeaz n citosol, unde prin mecanism feed-
back sisteaz producia de colesterol.
Funciile lizozomilor pot fi afectate prin:
- blocare cu resturi nedigerabile (ex. acid uric, urai, silicai) n gut sau
n silicoz. Acetia se acumuleaz n lizozomi, iar prin lezarea membranei
elibereaz enzimele n citosol provocnd moartea celulei;
- afeciuni genetice prin mutante genice care blocheaz sinteza
enzimelor lizozomiale. Rezultatul este o acumulare intralizozomial masiv a
substratului enzimei care lipsete, fie ca o macromolecul intact, fie ca un
rest parial digerat. Astfel, se pot acumula lipide sau polizaharide nedigerate,
iar celula se umple cu astfel de componente, care i compromit funciile
normale. Cele mai afectate organe sunt ficatul, creierul, splina. Dei
acumularea produilor de stocare este lent i dureaz ani de zile, la un
moment dat boala poate deveni letal;
- aciunea microorganismelor patogene ca de ex: toxoplasma, listeriile,
bacilii TBC, leprei, brucelozei etc, care diminueaz heterofagia.
Dac coninutul lizozomilor este eliminat n afara celulelor prin
exocitoz , se produce necroza i moartea tisular datorit caracterului
distructiv al enzimelor, iar n cazul extensiei fenomenului, poate surveni
moartea individului prin septicemie.

Peroxizomii

Peroxizomii sunt organite celulare specializate n producerea i

descompunerea apei oxigenate. Ei reprezint o categorie special de
lizozomi, semnalai electronomicroscopic de Rhodin (1954) i studiai de De
Duve i colaboratorii (1957) ntr-o mare varietate de celule animale i
vegetale. Sunt numeroi n hepatocite, nefrocite, macrofage. Sunt caviti cu
diametrul de 0,15-1m, limitate de o singur membran, groas de
aproximativ 6 nm. n toate celulele mamiferelor au fost descrii prin metode
citochimice i citoenzimatice i microperoxizomi, cu diametrul de 0,2.
Matricea peroxizomilor este omogen, bogat n enzime, n special
catalaze, peroxidaze, uratoxidaze.
La unele specii i n unele celule, matricea nglobeaz un corp dens,
sau cristaloid (cristal format din uratoxidaz), absent n microperoxizomi,
ceea ce ar putea demonstra stadii diferite n evoluia organitului spre
maturizare sau aspecte fiziologice diferite. La specia uman acest cristaloid
apare numai n cazuri patologice.
n stri patologice (ex. n hepatitele virale), organitul se modific prin
creterea numrului i a diametrului.
Peroxizomii provin din REN sau din complexul Golgi prin nmugurire i
fisiune.Enzimele (uratoxidaza, catalaza) sunt sintetizate n citosol, de unde
sunt transferate n peroxizomii n curs de formare.
Principalul rol al peroxizomilor const n producerea i
descompunerea apei oxigenate, n generarea creia intervin flavinenzimele.
Mecanismul const n utilizarea oxigenului molecular, care se combin cu
atomii de hidrogen din substrat, dup reacia:

RH2 + O2 R + H2O2
128
 n distrugerea microorganismelor, apa oxigenat este utilizat de
celul n cantitate mic. Excesul de ap oxigenat este duntor celulei dnd
natere la radicali liberi foarte reactivi, care degradeaz proteinele i acizii
nucleici. El este convertit, prin aciunea catalazelor, n H2O, dup urmtoarea
reacie de oxidare:

2H2O2 2H2O + O2

Dac exist un aport suficient de donori de hidrogen, reacia va avea

loc astfel (reacie de peroxidare):

H2O2 + RH2 R + 2H2 O

Peroxizomii au rol important n detoxifierea celulelor prin aciunea

catalazei. Enzima, prin mecanisme specifice de convertire, oxideaz alcoolii,
fenolii, acidul formic, formaldehida, prevenind aciunea nociv a acestora
asupra celulelor. La consumatorii de alcool, aproape un sfert din acesta este
oxidat la acetaldehid n acest mod. n activitatea lor, peroxizomii consum
cca. 10% din oxigenul ficatului.
De asemenea prin oxidarea acizilor grai, peroxizomii formeaz acetil-
CoA, care, fie este transportat n mitocondrii intrnd n ciclul Krebs, fie este
utilizat n reacii de biosintez celular. Se estimeaz c cca. - din
totalul oxidrii acizilor grai are loc n peroxizomi, restul avnd loc n
mitocondrii.
Peroxizomii sunt implicai n diferite stri patologice. Astfel, absena
catalazei n peroxizomi, induce acatalasemia (maladie genetic) manifestat
prin diminuarea oxidrii acizilor grai cu lanuri lungi de atomi de carbon.
Absena peroxizomilor s-a remarcat n sindromul cerebro-hepato-renal
(sindromul Zellweger), manifestat la nou-nscui prin hipotonie, acumulare de
lipide n creier, hepatomegalie cu ciroz, chiti renali, anomalii ale
scheletului, soldate cu moartea individului ca i n tumorile cu cretere
rapid.
n hepatitele virale s-a remarcat creterea numeric i n dimensiuni a
peroxizomilor.
La plante au fost descrise dou tipuri de peroxizomi:
1. un tip prezent n frunze, unde catalizeaz reacia de fixare a
CO2 n carbohidrai, proces denumit fotorespiraie (deoarece celula vegetal
folosete O2 i elibereaz CO2);
2. al doilea tip este prezent n seminele germinate, unde servete
la convertirea acizilor grai (depozitai n semine) n zaharuri, utilizate pentru
producerea materialelor trofice necesare plantei tinere.
Deoarece convertirea acizilor grai se realizeaz printr-o serie de
reacii care formeaz ciclul glioxilat, aceti peroxizomi se numesc glioxizomi.
n ciclul glioxilat, dou molecule de acetilCoA rezultate prin degradarea
acizilor grai n peroxizomi, sunt utilizate pentru a genera acid succinic, care
prsete peroxizomii i este convertit n glucoz.

129
 Circulaia intracelular. Organite. Mecanisme

ntre celule i mediul extracelular, organitele citoplasmatice i

hialoplasma, ntre hialoplasm i nucleoplasm, exist o permanent
micare (circulaie), asigurat prin: reticulul endoplasmatic; vezicule de
transport n mas; formaiuni tubulare specifice. R.E. leag membrana
nucleului de membrana celulei, asigurnd relaii directe ntre nucleu i mediul
extracelular. Asigur circulaia intracelular a apei i electroliilor,
membranele R.E. comportndu-se ca microosmometre. Veziculele de
transport transport produi din matricea extracelular n celul prin
endocitoz; din celul n mediul extracelular prin exocitoz; din nucleu n
citoplasm, inclusiv material genetic; de la un organit la altul.

Concepte i noiuni de reinut

RER este mai bine reprezentat n celulele specializate n sinteza de

proteine (ex. celulele acinoase pancreatice, implicate n secreia enzimelor
digestive; plasmocitele, care secret imunoglobuline; hepatocitele, la nivelul
crora se sintetizeaz proteinele serice; fibroblastele celule secretoare de
proteine fibrilare; neuronii, implicai n sinteza neurotransmitorilor) sau n
sinteza membranelor (ex. ovocita, celulele cu bastonae din retin).
Reticulul endoplasmatic neted (REN) este alctuit dintr-o reea de
tubuli fini, care se ntinde spre periferia celulei, n continuarea RER, pn la
citoscheletul membranei. Este bine reprezentat n celulele specializate n
metabolismul lipidelor.
Majoritatea proteinelor sintetizate n RER i creeaz structura
teriar final trecnd printr-o serie de modificri, care au loc n lumenul
organitului i care constau n: formarea n interiorul moleculei a legturilor
disulfidice (- S S - ); modificarea unor radicali de aminoacizi (ex.
hidroxilarea radicalilor de prolin i lizin n diferitele tipuri de colagen);
glicozilarea parial (n cazul glicoproteinelor).
REN din hepatocite este implicat n procesul de detoxifiere, att a
medicamentelor, ct i a componentelor nocive, care apar n metabolism.
Complexul Golgi este format din microvezicule, tubuli (saci,
cisterne), macrovezicule, caviti limitate de membrane lipoproteice simple,
cu un coninut heterogen.
Complexul Golgi posed mecanisme speciale de formare (proteoliz,
glicozilare, sulfatare), rezultnd complexe moleculare ca de exemplu:
proteine de secreie, protein-enzime, glicoproteine, glicolipide, glicozamine i
proteoglicani.
Ribozomii (granulele lui Palade) au fost pui n eviden de George
Palade, n 1954, prin studii electronomicroscopice. Sunt ntlnii att la
procariote, ct i la eucariote, ontogenic fiind primele organite care se
difereniaz n celule, evoluie corelat cu decodificarea informaiei genetice
i cu sinteza proteinelor.
Att n celulele procariote, ct i n cele eucariote, dei exist
unele diferene biochimice i de mrime, ribozomii sunt alctuii din dou

130
 subuniti (subunitatea mic i subunitatea mare) inegale ca mrime i
constante de sedimentare.
O nsuire caracteristic a ribozomilor este aceea de a se grupa
cte 4-50 pe molecula de ARNm, rezultnd poliribozomi, care reprezint
forma activ a organitului.
Sinteza proteinelor este un proces complex, controlat de gene
nucleare, nucleul fiind sediul codului genetic al tuturor tipurilor de proteine
celulare.
Secvenele de baze azotate (informaia) din ADN sunt transcrise pe
ARNm, care ajunge n citoplasm, unde se fixeaz pe ribozomi, unindu-i ntr-
un ir mai mare, sau mai mic de polizomi. Secvenele de codoni din ARNm
alctuiesc mesajul genetic, care este citit i tradus n secvene de proteine la
nivelul ribozomilor.
Informaia copiat pe ARNm trebuie descifrat, rol ce revine ARNs
(t) n molecula cruia se afl cifrul prin care este citit planul de sintez al
proteinelor.
Din totalul de 64 codoni ai moleculei de ARNm, 3 sunt codoni
stop (UAA, UAG, UGA), care termin procesul de translaie (fig. 68). Aceti
codoni stop nu sunt recunoscui de ARNt corespunztor, ci de proteine
specifice citoplasmatice, denumite factori de terminare.
Matricea lizozomial conine un numr mare de enzime hidrolitice
(peste 50 de tipuri, cu activitate optim la un pH acid, cuprins ntre 4 i 6 (n
medie 5).
Prin coninutul n hidrolaze heterogene, lizozomii sunt implicai n
digestia celular normal i patologic, aciunea lor digestiv fiind
sistematizat n trei direcii: heterofagie, autofagie, crinofagie.
Peroxizomii sunt organite celulare specializate n producerea i
descompunerea apei oxigenate.

ntrebri de autoevaluare

1. Care sunt celulele implicate intens in sinteza proteinelor de export?

2. Care sunt celulele implicate in sinteza hormonilor steroizi?
3. Care sunt etapele sintezei proteice la nivelul reticulului endoplasmatic rugos?
4. Care sunt principalele modificari suferite de proteine n lumenul reticulului
endoplasmatic pentr ai crea structura teriar final?
5. Descriei structura i funciile complexului Golgi.
6. Care sunt principalele etape ale sintezei proteice la nivelul ribozomilor?
7. Descriei structura i funciile lizozomilor.

131
 UNITATEA DE NVARE 11

NUCLEUL

Cuvinte cheie: nveli nuclear, lamine nucleare, por, cromatina,

cromozomi, transcripie, translaie

Rezumat
n aceast unitate este descris nucleul, component caracteristic al
celulelor eucariote. Astfel, pe lng elemente de morfologie nuclear (numr,
volum, form, dimensiuni), este redat structura nveliului nuclear i cea a
complexului por, implicaiile nveliului nuclear n procesul diviziunii celulare,
dar i structura materialului genetic, respectiv cromatina i cromozomii,
precum i structura i funciile nucleolului.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 2 ore

Nucleul, component caracteristic celulelor eucariote cu excepia

eritrocitelor i trombocitelor de mamifer, s-a difereniat pe parcursul evoluiei
organismelor vii, n momentul trecerii de la viaa anaerob la cea aerob, ca
urmare a numeroaselor simbioze ntre celulele procariote existente i a
adaptrii acestora de a utiliza oxigenul. Prin simbioza eucariotelor, materialul
genetic a crescut cantitativ iar, ulterior, procesul s-a accelerat prin diferenieri
i evoluii rapide. Astfel, materialul genetic al eucariotelor s-a izolat de restul
citoplasmei printr-o membran proprie, dubl, care i asigur stabilitatea,
izolarea relativ de restul citoplasmei, asigurarea condiiilor corespunztoare
pentru ndeplinirea funciilor specifice (replicarea ADN i sinteza ARN). Rolul
nucleului rezult din dogma central a geneticii moleculare, conform creia,
informaia este transferat n direcia:
Transcripie Translaie
ADN ARN Proteine
Transcripia const n copierea selectiv a informaiei genetice de pe o
regiune specific a ADN-ului , reprezentat de o succesiune de baze azotate,
prin moleculele de ARNm. Ulterior, moleculele de ARMm sintetizate n
nucleu trec n citoplasm, unde constituie transmitorul mesajului genetic.
Translaia reprezint procesul de traducere a informaiei din secvena
nucleotidic ntr-o secven proteic, la nivelul complexului ARNm-ARNs-
aminoacizi. Procesul translaiei mesajului este legat de acela al parcurgerii
mesajului, adic al formrii lanului polipeptidic, n care secvenializarea
aminoacizilor se face conform matriei de pe ARNm, locul fiecrui aminoacid
fiind codificat de secvena nucleotidic din ARNm.

132
 Morfologia nucleului interfazic

Nucleul interfazic este constituit din: nveliul nuclear, carioplasma,

cromatina (cromozomii), nucleolul (-ii).
Numrul nucleilor. Majoritatea celulelor prezint un singur nucleu,
dar exist i celule binucleate (ex. cca. 10 % din celulele hepatice), sau
celule cu mai muli nuclei (ex. celulele musculare striate, esteoclastele,
megacariocitele). De asemenea, n unele cazuri patologice (ex. tumori) apar
celule gigante cu nuclei numeroi. Eritrocitele mamiferelor sunt, n schimb,
anucleate. La unii infuzori exist doi nuclei: macronucleul cu funcie
metabolic i micronucleul, implicat n funcia de reproducere.
Volumul nucleului este proporional cu cel al celulei, fiind cuprins
ntre 20 i 2000 3. El este influenat n mare msur de raportul
nucleocitoplasmatic (N/C). n majoritatea tipurilor de celule, raportul N/C este
n favoarea citoplasmei (1/7 1/10, cu limite extreme cuprinse ntre 1/2 -
1/20), ns exist i unele tipuri de celule cum sunt limfocitele, monocitele i
plasmocitele la care raportul N/C este n favoarea nucleului. Cnd raportul
N/C este modificat, prin mrirea volumului citoplasmei, nucleul intr n
diviziune. Raportul N/C variaz n funcie de alimentaie, de fosforilarea
oxidativ, de integritatea anabolismului, de factorii de cretere, factori care
mresc activitatea anabolic i, n consecin, volumul citoplasmei. La rndul
su, raportul nucleocitoplasmatic influeneaz ritmul diviziunilor celulare,
mbtrnirea i degenerarea fiziologic a celulelor. Dac raportul
nucleocitoplasmatic nu poate fi reechilibrat, funciile celulei nceteaz.
Raportul N/C poate fi dezechilibrat i n anumite stri patologice.
Astfel, celulele maligne prezint un nucleu hipertrofiat, cu modificri
semnificative ale cromatinei, aspecte importante n examenul citopatologic al
cancerului. De asemenea, volumul nucleului crete n intoxicaii, infecii
virale, n iradieri i n urma aciunii unor factori mutageni.
Forma nucleului este variabil n funcie de tipul de celul: n celulele
sferice nucleul este sferic, n celulele prismatice, cilindrice i fusiforme
nucleul este ovalar sau n form de bastona; n celulele pavimentoase
nucleul este turtit, iar n celulele adipoase si caliciforme, nucleul este turtit
sau lenticular, ca urmare a produilor de elaborare acumulai masiv n
citoplasm. n cazul leucocitelor polimorfonucleare nucleul este polilobat,
prezentand 2-5 lobi.
Poziia nucleului n celul este determinat de forma, activitatea
metabolic sau de ciclul secretor al celulei. n majoritatea celulelor nucleul
este situat central, dar poate fi aezat total excentric (n celulele adipoase,
fibrocitare, n celula caliciform, celulele acinoase mucoase) sau uor
excentric (n celulele prismatice).
Dimensiunile nucleului sunt foarte variate, ele fiind n general n
raport direct cu mrimea, activitatea metabolic i vrsta celulei. Celulele
tinere i cu metabolism intens au nucleul mai mare comparativ cu celulele
mbtrnite, la care metabolismul este diminuat.

133
 Fig.69. Reprezentarea schematic a nucleului
(Alberts, B. i colab., 1983)

Compoziia chimic a nucleului

Din punct de vedere chimic nucleul conine: acizi nucleici (ADN,

ARNm, ARNs; ARNr), proteine (histone, protamine), lipide (fosfolipide,
colesterol), ap (50-80%), enzime (glicolitice, enzime ale metabolismului
nucleotidelor-polimerazele, enzime cu activitate ribonucleazic), glicogen;
substane minerale (Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Zn-, Cu-, Fe2-).

nveliul nuclear

Studiile electronomicroscopice au evideniat c nucleul este separat

de restul citoplasmei printr-un complex de membrane care formeaz nveliul
nuclear, format din membrana nuclear intern, membrana nuclear
extern, spaiul perinuclear.
Membrana intern este ntrit spre nucleoplasm de o lam dens,
fin granular, denumit lamina densa. Aceasta are o structur fibroas, cu
aspect de reea alctuit, n mare parte, prin asamblarea spontan a trei
polipeptide majore, care stabilesc contacte cu proteinele specifice integrate
n bistratul lipidic al membranei nucleare interne. Lamina densa are un rol
important att n organizarea nveliului nuclear, ct i n susinerea
filamentelor de heterocromatin, care strbat lamina densa i iau contact cu
membrana extern. De asemenea, lamina nuclear este implicat n
fragmentarea i refacerea nveliului nuclear n timpul mitozei.
Spaiul perinuclear, cu grosimea cuprins ntre 200-700, prezint o
structur filamentoas i conine o mare cantitate de ioni de calciu.
Membrana nuclear extern se continu cu membrana reticulului
endoplasmatic i prezint ataai ribozomi. Cu alte cuvinte, spaiul
perinuclear comunic cu cavitile reticulului endoplasmatic i de aceea a
fost denumit i cisterna perinuclear.
Cele dou membrane sunt alctuite din proteine i lipide n raport de
2:1 i o mic cantitate de glucide. O protein frecvent ntlnit n membrana
nuclear este calmodulina, cu rol n reglarea funciilor vitale dependente de
ionii de calciu.
nveliul nuclear prezint din loc n loc orificii denumite pori.

134
 Fig. 70. Reprezentarea schematic a complexului por
(Alberts, B. i colab., 1983)

Cercetrile electronomicroscopice au artat c porii au o structur

complex, care justific utilizarea termenului de complex por. Porii au
diametrul extern de 1000 , iar cel intern de 600 . Marginile deschiderilor
porului (extern, intern) au aspect circular sau octogonal i sunt limitate de
8 granule, fiecare cu diametrul de 100 , dispuse radiar i simetric, denumite
anuli (pori cu anuli). Prin acest tip de pori trec substane cu greutate
molecular mic. n structura unor pori se remarc prezena unei granule
centrale, perforate la mijloc, avnd aspectul unei diafragme (pori cu
diafragm). Aceti pori asigur o selectivitate mai mare n trecerea
substanelor prin membrana nuclear. Un alt tip de pori prezint la intrare
sau la ieire cute ale nucleolemei, n form de vezicule (pori cu buzunrae),
considerai a fi calea principal de ieire a ARN-ului din nucleu.
n numeroase celule au fost observate, att n citoplasm, ct i n
nucleu, lamele anulare solitare sau n grmez, cu frecven mai mare n
celulele germinative (celulele sexuale) i n cele implicate n sinteza proteic,
inclusiv celulele tumorale. Lamelele anulare sunt formaiuni membranare, cu
structur asemntoare nveliului nuclear, fiind alctuite din dou
membrane unite la capete, strbtute din loc n loc de pori nucleari. Se
consider c ele ar reprezenta rezerva de nveli nuclear, cu rol n procesul
de mrire sau refacere a membranei nucleare. Lamelele anulare din
citoplasm sunt implicate n transportul ARNm n afara nucleului.
Numrul de pori nucleari este variabil, direct proporional cu activitatea
de sintez i intensitatea schimburilor dintre nucleu i citoplasm.
nveliul nuclear izoleaz procesele genetice (replicarea ADN i
sinteza ARN, repararea secvenelor alterate de ADN) de ribozomii
citoplasmatici, unde mesajul genetic este transcris n protein.
Membrana nuclear se dezagreg (se fragmenteaz) la sfritul
primei faze a diviziunii mitotice (profaza). n acest stadiu, cele trei proteine
laminare se fosforileaz intens, proces care se presupune c determin
dezasamblarea lor, rupnd astfel lamina nuclear. Fragmentele membranare
se dispun n jurul materialului genetic unde rmn pe tot parcursul mitozei.
La sfritul mitozei (n telofaz), fragmente ale membranei nucleare se
asociaz cu suprafaa cromozomilor individuali nchizndu-l parial pe fiecare
dintre ei, nainte de fuziune, pentru a reforma nveliul nuclear complet. n
timpul acestui proces se refac porii nucleari, iar proteinele laminare
defosforilate se reasociaz pentru a forma lamina nuclear (lamina densa).
135
Astfel, ciclul fosforilrii i defosforilrii proteinelor laminare n timpul fazei M
ar putea fi responsabil de iniierea ruperii nveliului nuclear n profaz i de
refacerea lui n telofaz.
O caracteristic important a membranei nucleare este
permeabilitatea selectiv, care pentru anumite substane este unidirecional
i ireversibil. Prin complexul por trec substane cu greutate molecular mic
(aminoacizi, monozaharide), sau macromolecule (proteine, enzime), numai
dac conin un semnal prin care sunt recunoscute n trecere prin complexul
por.

Acizii nucleici

Acizii nucleici sunt reprezentai de ADN i trei tipuri de ARN (ARNm;

ARNs; ARNr). Unitatea de structur a acizilor nucleici este nucleotida,
alctuit din: o baz azotat organic, un zahar, un radical fosforic.
Bazele azotate provin dintr-un nucleu comun, purina i pirimidina, care
sunt derivai ai benzenului. Purina este un heterobiciclu de 9 atomi, dintre
care 5 de carbon i 4 de azot, n timp ce pirimidina este alctuit dintr-un
heterociclu de 6 atomi, dintre care 4 atomi de carbon i 2 de azot. Bazele
azotate purinice, care intr n alctuirea acizilor nucleici sunt adenina (A) i
guanina (G), iar cele pirimidinice sunt citozina (C), uracilul (U) i timina (T).
Zaharurile care intr n structura acizilor nucleici sunt: dezoxiriboza (n
ADN) i riboza (n ARN). Ambele sunt pentoze alctuite din 5 atomi de
carbon.
Radicalul fosforic din structura acizilor nucleici prezint 3 grupri
hidroxilice (-OH) libere, din care dou pot fi esterificate. Prin legarea bazei
azotate cu un zahar se formeaz nucleosida, iar prin adugarea radicalului
fosforic rezult nucleotida, care este unitatea de baz a acizilor nucleici.
Studiile efectuate de Watson, Crick i Wilkins (1953) au demonstrat c
molecula de ADN este format din dou catene polinucleotidice, rsucite n
dublu helix (fig. 80). Cele dou catene paralele ale ADN-ului sunt legate ntre
ele prin legturi stabilite ntre o baz purinic i o baz pirimidinic
complementare. Legturile de hidrogen existente n molecula de ADN sunt
duble ntre adenin i timin (A=T) i triple ntre guanin i citozin (G C),
acest fenomen asigurnd complementaritatea celor dou catene. Alctuirea
din dou catene complementare a ADN-ului, i asigur acestuia o structur
regulat i i mrete stabilitatea.
Direcia legturilor fosfodiesterice este opus pe cele dou lanuri,
adic pe unul este 5-3, iar pe lanul pereche este 3-5. De aceea se
consider c cele dou lanuri sunt antiparalele.
Descifrarea structurii ADN-ului a explicat ereditatea. Dac cele dou
lanuri se despart prin ruperea legturilor de hidrogen dintre perechile de
baze, pe fiecare lan izolat se poate forma un lan nou, complementar celui
vechi. n acest fel, bazele azotate rmn desperecheate i capabile s
realizeze legturi de hidrogen. n momentul n care din mediul de reacie se
apropie un dezoxinucleozid trifosfat cu o baz complementar celei de pe
unul din lanurile desperecheate ale ADN matri (model), ntre cele dou
baze se formeaz legturi de hidrogen. Deci fiecare lan poate servi ca

136
matri pentru formarea unui lan complementar cu el nsui. Astfel are loc
replicarea ADN-ului i, deoarece molecula ADN-ului funcioneaz ca matri
pentru propria sa formare, procesul se numete replicare semiconservativ.

Fig. 71. Reprezentarea schematica a structurii macromoleculei de ADN

Acidul ribonucleic (ARN) este o macromolecul format din zeci

pn la cteva mii de ribonucleotide legate prin legturi 3-5 fosfodiesterice.
Difer de ADN prin urmtoarele: conine riboz n locul dezoxiribozei, conine
uracil n loc de timin, molecula este format dintr-un singur lan
polinucleotidic i se poate plia sub form de bucle n care ajung fa n fa
nucleotide complementare: A-U i G-C. Exist 3 tipuri de ARN:
- ARNm (mesager), care preia informaia genetic de pe ADN i o
trece n citoplasm;
- ARNr (ribozomal), care se sintetizeaz n nucleol i trece n
citoplasm unde intr n structura ribozomilor;
- ARNt(s) (de transfer sau solubil), care transport aminoacizii ntr-o
form activat la poliribozomi.
Structura diferitelor tipuri de ARN este n general monocatenar,
existnd i unele tipuri de ARNs, la care poriuni monocatenare alterneaz cu
poriuni bicatenare, ceea ce le confer aspectul unei frunze de trifoi.
Succesiunea (secvena) nucleotidelor determin n ADN codul
genetic specific, care asigur pstrarea, transmiterea i exprimarea
caracterelor ereditare i care, copiat de ARN, va determina biosinteza
proteinelor specifice celulare.
Informaia genetic din macromolecula de ADN este codificat n
ordinea succesiunii celor 4 tipuri de nucleotide (A, G, C, T) care, grupate n
triplete denumite codoni, realizeaz 64 de combinaii (43) prin care se
determin ordinea de succesiune a aminoacizilor n catenele polipeptidice.
Unui anumit triplet sau codon din macromolecula de ADN i corespunde un
anumit aminoacid din macromolecula proteic. Codul genetic este universal,
aceiai codoni determinnd aceiai aminoacizi la toate organismele vii.

137
 Gena este un segment din macromolecula de ADN, care cuprinde o
secven de codoni ce determin o anumit ordine de succesiune a
aminoacizilor n moleculele proteice.

Cromatina

Termenul de cromatin este utilizat pentru a defini existena

materialului genetic n interfaz. n timpul diviziunii, cromatina se
structureaz n cromozomi, puternic colorai.
La microscopul optic, in urma colorarilor cu coloranti bazici (ex.
hematoxilina, albastru tripan), cromatina are aspect de granule, filamente,
blocuri, cu poziie variabil n nucleu.
La microscopul electronic filamentele de cromatin au grosime
variabil, sunt spiralate i puternic condensate.
Din punct de vedere chimic, filamentele de cromatin sunt alctuite
din: ADN (30%); proteine histonice (40%); proteine nonhistonice (25%) i
ARN (5%).
Histonele sunt proteine bazice, relativ mici, cu o proporie foarte mare
de aminoacizi ncrcai pozitiv (lizin i arginin), ceea ce le permite s se
lege de gruprile fosfat cu sarcini negative ale ADN-ului. In functie de
continutul in lizina si arginina, histonele au fost clasificate in 5 tipuri: H1, H2A,
H2B, H3, H4, care se sintetizeaz n citoplasma celulelor eucariote numai n
faza S, de sintez, a ciclului celular i se mpart n dou grupe principale:
- primul grup cuprinde histonele nucleosomale, care sunt
proteine mici, responsabile pentru mpachetarea ADN-ului n nucleosomi.
Sunt reprezentate prin histonele: H2A, H2B, H3, H4, proteine foarte bine
conservate (de exemplu, s-au observat numai dou diferene n secvena de
aminoacizi a histonei H4, la mazre i vac).
- al doilea grup cuprinde histonele H1. Cu excepia miezului
central, secvenele de aminoacizi din structura H1, au fost mai puin
conservate n timpul evoluiei, fa de cele 4 histone nucleosomale.
Sinteza histonelor este n mare msur sincronizat cu replicarea
ADN, deoarece, experimental s-a dovedit c inhibarea sintezei histonelor
reprim replicarea ADN, n timp ce blocarea sintezei de ADN afecteaz
negativ sinteza histonelor.
Histonele sunt responsabile pentru mpachetarea moleculelor lungi de
ADN ntr-un nucleu de doar civa m n diametru.
Nonhistonele sunt heterogene structural, au o mare variabilitate n
funcie de specie, rol important n reglajul specific, difereniat al genelor i n
modificarea activitii genomului pe parcursul ciclului celular. Datorit
coninutului bogat n triptofan au caracter acid. Sunt sintetizate la ribozomi,
pe tot parcursul ciclului celular. Din grupul nonhistonelor fac parte ADN i
ARN - polimerazele, precum i enzimele care intervin n acetilarea, metilarea
i fosforilarea reversibil a nucleoproteinelor.
Electronomicroscopic, fibrele de cromatin sunt alctuite din uniti
asemntoare structural denumite nucleosomi. Nucleosomii sunt formaiuni
cilindrice, avnd diametrul de 100 i nlimea de cca. 50, alctuite din 8
molecule de histone dispuse n dou jumti simetrice, consolidate ntre ele

138
prin proteine de asamblare. n jurul octomerului histonic se nfoar ADN-ul,
sub forma a dou inele, care conin 146 perechi de nucleotide i care, se
continu de la un nucleosom la altul printr-un segment de ADN-linker ce
conine 20-30 perechi de nucleotide legate cu un tip diferit de histone.
Histona H1 este aezat lateral de nucleosom, legndu-se de ADN-
linker (internucleosomic) i are rol n spiralizarea fibrei de cromatin sub
forma unui solenoid. Fiecare spir a solenoidului conine 6-10 nucleosomi.
Acest dispozitiv structural spiralizat al fibrei de cromatin asigur
acomodarea ntregului genom, cu o lungime total exprimat n metri, la un
compartiment nuclear mic de civa microni.
Pe baza gradului de spiralizare i a afinitii tinctoriale, precum i pe
baza unor diferene de compoziie i activitate genic, au fost descrise dou
tipuri de cromatin: eucromatina i heterocromatina.
Eucromatina (cromatina adevrat) este slab spiralizat i
condensat, se coloreaz slab bazofil i este activ genetic, coninnd
secvene de ADN nerepetitiv, informaional. Se replic pe tot parcursul fazei
S (de sintez a ciclului celular).
Heterocromatina, este puternic condensat, se coloreaz puternic
bazofil, mai puin activ genetic deoarece conine mult ADN repetitiv i se
replic la sfritul fazei S a ciclului celular. Este de dou tipuri: constitutiv i
facultativ.
Heterocromatina constitutiv este condensat, colorat foarte
puternic, inactiv genetic, segmentele ei nefiind niciodat transcrise pe
ARNm. Este constant n interfaz.
Heterocromatina facultativ, dup tipul de cromozomi creia i
aparine poate fi: autosomal i gonosomal.
Heterocromatina facultativ autosomal este reprezentat de
segmentele hipercondensate ale cromozomilor autosomi. Este o cromatin
care se poate transcrie devenind eucromatin activ, motiv pentru care
mrimea i distribuia ei n autosomi se modific n timp, ilustrnd gradul de
activitate i specializare celular. Cnd celula intr ntr-un proces
degenerativ, majoritatea heterocromatinei facultative se condenseaz, stare
denumit picnoz.
Heterocromatina facultativ gonosomal (cromatina sexual,
cromatina Barr) este inactiv pe toat durata ciclului celular i este prezent
numai pe anumite segmente cromozomiale sau chiar pe cromozomi ntregi.
A fost descris de Barr i Bertram (1949) sub forma unui corpuscul intens
colorat bazofil, alipit de faa intern a membranei nucleare. Cromatina Barr
se ntlnete n nucleul celulelor somatice ale femelelor i apare ca urmare a
condensrii n interfaz, nc din perioada embrionar, a unuia din cei doi
cromozomi sexuali X. Numrul corpusculilor Barr este cu unul mai mic dect
numrul total de gonosomi X din celul (C.B. = n 1).
Frecvena corpusculului Barr variaz n limite largi, n funcie de tipul
de celul: 40-60% n celulele epiteliale bucale, 52-85% n celulele diferitelor
seciuni de esuturi, pn la 90% n celulele tiroidiene, 34-88% n culturi de
celule iniiate din diferite organe fetale (Gavril, L., i colab., 1989).

139
 Cromozomii

Cromozomii reprezint forma de organizare a materialului genetic n

timpul diviziunii celulare (gr. cromos = culoare, soma = corp).
n momentul declanrii diviziunii celulare, n profaz, fiecare filament
de cromatin se replic dup modelul semiconservativ i ca urmare are loc
dublarea cantitii de material genetic n nucleul celulei. Filamentele de
cromatin, dup replicare, rmn legate de copiile lor printr-o formaiune
denumit centromer. Cele dou macromolecule de ADN bicatenar cuplate se
numesc cromatide iar o singur caten a cuplului poart denumirea de
cromonem.
Dup replicare, cromonemele sufer un intens proces de spiralizare,
condensare i plicaturare, acoperindu-se de o matrice de proteine acide. n
acest fel, filamentele de cromatin se structureaz n cromozomi, formaiuni
de cca. 7000 de ori mai condensate dect filamentele iniiale i care astfel
uureaz i protejeaz distribuia materialului genetic la celulele fiice
rezultate n urma diviziunii. Spiralizarea i plicaturarea cromatinei se
desfoar constant, dup un anumit tipar i este reversibil, la sfritul
diviziunii realizndu-se despiralizarea i refacerea filamentelor de cromatin
(incai, 1997).
Dimensiunile cromozomilor variaz n limite relativ mari la diferitele
specii i chiar n interiorul acelorai celule: cca. 0,2-5-10-20 lungime (4-6-
cromozomii umani; 10-20 - la ceap).
Numrul cromozomilor variaz cu specia, totdeauna acelai pentru
aceeai specie. n celulele somatice exist un numr dublu de cromozomi
(2n), comparativ cu celulele sexuale, care sunt haploide (n).
La microscopul optic, cromozomii eucariotelor apar formai din dou
cromatide unite printr-un centromer.
Centromerul este o regiune genetic distinct a cromozomului prin
care acesta se ataeaz n mod reversibil de proteinele microtubulilor fusului
mitotic, prin intermediul crora se realizeaz orientarea i migrarea sa n
timpul diviziunii celulare. n timpul profazei trzii, n regiunea centromeric se
ataeaz o structur denumit kinetocor, care se cupleaz direct de
microtubulii fusului mitotic. Kinetocorul este un complex de proteine, iar
sinteza lui se realizeaz pe baza informaiei genetice ADN din regiunea
centromerului.

Fig. 72. Reprezentarea schematic a cromozomului

Cromozomii se coloreaz puternic bazofil, exceptnd centromerul care

nu se coloreaz i care d impresia unei trangulaii, numit constricie
primar.
n funcie de poziia centromerului, cromozomii se clasific n (Levan i
colab., 1964): metacentrici, cu centromerul situat median; submetacentrici cu
140
centromerul situat submedian; subtelocentrici, cu centromerul situat
subterminal; telocentrici (acrocentrici), cu centromerul situat terminal.
Extremitile cromatidelor sunt rotunjite i se numesc telomere, cu rol
n stabilitatea lor. Telomerele protejeaz partea terminal a ADN de
degradarea enzimatic i blocheaz posibilitatea de fuzionare a
cromozomilor cap la cap. Telomerul este alctuit dintr-o mic secven de
ADN, repetat ntr-un numr mare de copii, care se termin ntr-o secven
liber monocatenar. Acest ADN este cuplat cu proteine.
n general, cromozomii prezint un singur centromer. Exist ns, n
anumite anomalii, cromozomi cu doi sau mai muli centromeri, numii
cromozomi policentrici. De asemenea au fost semnalai i cromozomi, care
prezint una sau mai multe zone cromofobe sau constricii secundare
denumite alisterazone.
Cromozomii cu constricii secundare sunt denumii i organizatori
nucleolari, deoarece, n profaz, de acetia se ataeaz fragmente de
nucleoli. Segmentul terminal, izolat de restul cromozomului printr-o
constricie secundar, poart numele de satelit cromozomial.

Fig. 73. Reprezentarea cromozomilor n funcie de

poziia centromerului
(Mossiman, W. i colab., 1990)

Cromatidele prezint o structur heterogen, sub form de benzi,

determinat de tipul i cantitatea de ADN, de interaciunea ADN-ului cu
proteinele cromozomiale i de gradul de condensare al cromatinei.
Marcajul prin benzi (bandarea) a permis att identificarea precis a
tuturor perechilor de cromozomi umani, ct i cartarea cromozomial n
vederea depistrii tuturor anomaliilor de structur. Distribuia benzilor este
constant, precis i specific fiecrui cromozom, identic la toi indivizii
speciei. Studii de genetic molecular au stabilit c, ntre distribuia benzilor
i poziia genelor n cromozom, exist o strns corelaie.
Genele sunt plasate n cromozomi n anumite poziii precise,
totdeauna aceleai, denumite loci (sing. locus). De obicei, genele se prezint
sub form de pereche (gene alele), care determin dezvoltarea unor
caractere contrastante, una fiind dominant, iar cealalt recesiv. Genele
alele sunt situate n acelai locus pe cromozom. Pe fiecare cromozom exist
un numr diferit de gene; ele se transmit, de regul, mpreun, nlnuite la
descendeni, manifestnd fenomenul linkage (nlnuire genic). Pentru
localizarea genelor pe cromozomi exist diferite metode de colorare
difereniat a cromozomilor (metode de bandare), bazate pe diferenele de
structur molecular a diferitelor regiuni cromozomiale.

141
 Pe lng cromozomii cu structuri tipice, exist cromozomi uriai
(politenici), descoperii n celulele glandelor salivare la Drosophilla
melanogaster, pe traiectul crora au fost semnalate benzi mai umflate numite
"pufe", n care s-au remarcat fenomene intense de transcripie i respectiv o
cantitate mai crescut de ARNm.
La unele specii de psri, s-a evideniat existena cromozomilor pitici.
Un alt tip de cromozom l constituie cromozomul n perie de lamp, care
prezint numeroase bucle ataate de axul central, care reprezint segmente
de cromozomi despiralizate, n care se realizeaz o sintez masiv de
ARNm.
Caracterele morfologice ale cromozomilor: form, mrime, numr
constituie cariotipul, acelai pentru aceeai specie, iar reprezentarea
diagramatic pe baz de msurtori n ordine descrescnd a mrimei,
poart denumirea de idiogram.
Stabilirea cariotipului i idiogramei prezint importan n evidenierea
maladiilor genetice datorate anomaliilor numerice (monosomie, trisomie) sau
morfologice ale cromozomilor.
Speciile de vieuitoare cu determinism sexual au o pereche de
cromozomi, pe care sunt dispuse preponderent genele care determin
caracterele sexuale, numii heterocromozomi (gonosomi, cromozomi ai
sexului), n timp ce ceilali se numesc autosomi sau cromozomi somatici.
Majoritatea speciilor se caracterizeaz prin existena n celule a unui
set diploid de cromozomi. Exist ns i specii la care numrul de cromozomi
se abate de la setul diploid, fenomen cunoscut sub numele de poliploidie i
aneuploidie.
Poliploidia se caracterizeaz prin multiplicarea numrului de
cromozomi (3 n, 4 n, 5 n........... x n), iar aneuploidia fie prin prezena n
exces, fie prin lipsa anumitor cromozomi din genom, fr a afecta ntreg
complementul cromozomial.

Nucleolul (-ii)

Nucleolul este un component al nucleului interfazic, implicat n sinteza

ARNr. El este foarte evident n celulele care sintetizeaz proteine de
structur sau proteine metabolice, n celulele care cresc rapid i n cele
tumorale. Studiile efectuate pe preparate proaspete, la microscopul cu
contrast de faz, relev nucleolul de culoare glbuie, care-l delimiteaz net
de restul coninutului nuclear. n general, n celul se gsesc unul sau doi
nucleoli, de form sferic sau neregulat (n celulele mbtrnite).
Poziia nucleolului n nucleu este dependent de starea de activitate a
nucleului i a celulei. n general, nucleolul este situat central, dar au fost
semnalate o serie de micri de rotaie i translaie a nucleolilor spre
membrana nuclear, prin care se asigur trecerea n citoplasm a unor
cantiti importante de ARN, care intervin n biogeneza componentelor
majore ale ribozomilor.
Din punct de vedere chimic, nucleolii conin: ADN (3-18%), ARN (3-
13%), proteine (82-97%), enzime. Microscopia electronic relev alctuirea

142
nucleolilor din 4 pri: pars cromosoma; pars granulosa; pars filamentosa;
pars amorpha.
Pars cromosoma este reprezentat de un nveli format din filamente
de heterocromatin, care ptrund n interiorul nucleolului sub form de benzi,
alctuite din gene redundante, care codific ARN-urile ribozomale. Deoarece
servete ca matri pentru sinteza ARNr, ADN-ul nucleolar este denumit i
ADN ribozomal
Pars granulosa este reprezentat de granule constituite din
ribonucleoproteine i constituie structura predominant a nucleolilor.
Pars filamentosa este considerat forma precursoare a granulelor i
este alctuit din filamente de ARN.
Pars amorpha constituie matricea care nglobeaz primele trei pri.
Raportul dintre cele patru componente structurale ale nucleolilor
variaz n funcie de activitatea celulelor. n cursul ciclului celular, nucleolul
sufer modificri majore. Astfel, n timp ce celula se apropie de mitoz,
nucleolul se reduce ca mrime deoarece transcripia ADN ului ncetinete i
apoi dispare complet n prometafaz. ADN-ul ribozomal (genele redundante)
sunt nglobate n una, mai rar, n mai multe perechi de cromozomi
(cromozomi SAT), numii organizatori nucleolari. La sfritul mitozei, n
telofaz, nucleolii reapar, iniial de dimensiuni foarte mici, localizai n
regiunea ADN-ului ribozomal (genelor ribozomale). Acetia cresc n
dimensiuni, formnd un nucleol mare, tipic pentru celula aflat n interfaz.
Rolul nucleolului
n nucleol are loc procesul de asamblare a ARNr cu proteine
ribozomale, constituindu-se astfel ribozomii. Procesul de biosintez a ARNr
este reglat printr-un mecanism de feed-back, n care unitile ribozomiale
acioneaz ca inhibitori ai genelor responsabile de sinteza ARNr.
n momentul n care o parte din ribozomi i nceteaz funcia i sunt distrui,
procesul de biosintez a ARNr se reia, genernd noi ribozomi.

Concepte i noiuni de reinut

Nucleul, component caracteristic celulelor eucariote cu excepia

eritrocitelor i trombocitelor de mamifer, s-a difereniat n momentul trecerii
de la viaa anaerob la cea aerob, ca urmare a numeroaselor simbioze
ntre celulele procariote existente i a adaptrii acestora de a utiliza oxigenul.
Transcripia const n copierea selectiv a informaiei genetice de pe
o regiune specific a ADN-ului , reprezentat de o succesiune de baze
azotate, prin moleculele de ARNm. Ulterior, moleculele de ARMm sintetizate
n nucleu trec n citoplasm, unde constituie transmitorul mesajului genetic.
Translaia reprezint procesul de traducere a informaiei din secvena
nucleotidic ntr-o secven proteic, la nivelul complexului ARNm-ARNs-
aminoacizi.
Nucleul interfazic este constituit din: nveliul nuclear,
carioplasma, cromatina (cromozomii), nucleolul (-ii).
nveliul nuclear este format din membrana nuclear intern,
membrana nuclear extern i spaiul perinuclear.

143
 Membrana nuclear intern este ntrit spre nucleoplasm de
lamina densa, cu rol important att n organizarea nveliului nuclear, ct i
n susinerea filamentelor de heterocromatin, care strbat lamina densa i
iau contact cu membrana extern.
nveliul nuclear prezint din loc n loc orificii denumite pori, numrul
acestora fiind variabil, direct proporional cu activitatea de sintez i
intensitatea schimburilor dintre nucleu i citoplasm.
nveliul nuclear se dezagreg (se fragmenteaz) la sfritul
primei faze a diviziunii mitotice (profaza), datorit fosforilrii proteinelor
laminare. La sfritul mitozei (n telofaz), fragmente ale membranei
nucleare se asociaz cu suprafaa cromozomilor individuali nchizndu-l
parial pe fiecare dintre ei, nainte de fuziune, pentru a reforma nveliul
nuclear complet.
Acizii nucleici sunt reprezentai de ADN i trei tipuri de ARN
(ARNm; ARNs; ARNr).
Unitatea de structur a acizilor nucleici este nucleotida, alctuit
din: o baz azotat organic, un zahar, un radical fosforic.
Informaia genetic din macromolecula de ADN este codificat n
ordinea succesiunii celor 4 tipuri de nucleotide (A, G, C, T) care, grupate
n triplete denumite codoni, realizeaz 64 de combinaii (43) prin care se
determin ordinea de succesiune a aminoacizilor n catenele polipeptidice.
Gena este un segment din macromolecula de ADN, care cuprinde o
secven de codoni ce determin o anumit ordine de succesiune a
aminoacizilor n moleculele proteice.
Termenul de cromatin este utilizat pentru a defini existena
materialului genetic n interfaz. n timpul diviziunii, cromatina se
structureaz n cromozomi, puternic colorai.
Fibrele de cromatin sunt alctuite din uniti asemntoare structural
denumite nucleosomi. Nucleosomii sunt formaiuni cilindrice, alctuite din 8
molecule de histone dispuse n dou jumti simetrice, consolidate ntre ele
prin proteine de asamblare. n jurul octomerului histonic se nfoar ADN-ul,
sub forma a dou inele, care conin 146 perechi de nucleotide i care, se
continu de la un nucleosom la altul printr-un segment de ADN-linker ce
conine 20-30 perechi de nucleotide.
Numrul cromozomilor variaz cu specia, totdeauna acelai
pentru aceeai specie. n celulele somatice exist un numr dublu de
cromozomi (2n), comparativ cu celulele sexuale, care sunt haploide (n).
La microscopul optic, cromozomii eucariotelor apar formai din
dou cromatide unite printr-un centromer.
Genele sunt plasate n cromozomi n anumite poziii precise,
totdeauna aceleai, denumite loci (sing. locus). De obicei, genele se prezint
sub form de pereche (gene alele), care determin dezvoltarea unor
caractere contrastante, una fiind dominant, iar cealalt recesiv.
Caracterele morfologice ale cromozomilor: form, mrime, numr
constituie cariotipul, acelai pentru aceeai specie.
Nucleolul este un component al nucleului interfazic, implicat n
sinteza ARNr.

144
 ntrebri de autoevaluare

1. Descriei structura nveliului nuclear.

2. Descriei macromolec
3. Ce este un codon?ula de ADN.
4. Ce este o gen?
5. Descriei structura i tipurile de cromatin.
6. Ce sunt cromozomii?

145
 UNITATEA DE NVARE 12

REPRODUCEREA CELULAR. CICLUL CELULAR

Cuvinte cheie: ciclu celular, puncte de restricie, ADN, ARN,

proteinkinaze, cicline

Rezumat
Una din caracteristicile eseniale ale lumii vii este reproducerea
celular, proces prin care dintr-o celul iniial rezult dou celule fiice.
Diviziunea celular devine posibil numai dup ce a avut loc reproducerea
biochimic, att a substanelor nutritive i energetice, ct i a materialului
genetic. Reproducerea celulelor prin multiplicare, fenomen care asigur
continuitatea celulelor n timp, este un proces ciclic, repetitiv i constituie
ciclul celular.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 1 or

Ciclul celular

Reproducerea celulelor prin multiplicare, fenomen care asigur

continuitatea celulelor n timp, este un proces ciclic, repetitiv i constituie
ciclul celular.
Ciclul celular reprezint timpul scurs de la terminarea unei diviziuni din
care rezult noi celule, pn n momentul n care se ncheie i diviziunea
acestora, perioad echivalent cu dou interfaze i o metafaz.
Evenimentele majore ale ciclului celular sunt replicarea cromozomilor (ceea
ce presupune sinteza de ADN), separarea cromozomilor i distribuirea lor n
numr egal la cele dou celule fiice rezultate n urma procesului de
citokinez.
Ciclul celular se desfoar n 4 faze: G1, S, G2 i M.
Faza G1 este faza presintetic (engl. G-gap= gol), dintre sfritul
mitozei, pn la nceputul sintezei de ADN. n aceast faz, n celul se
sintetizeaz intens ARNm, proteine, enzime, se acumuleaz ATP, iar
numrul de organite celulare crete.
Faza S (engl. S = synthesis) este perioada de reduplicare a
materialului genetic (ADN i histone). Are loc sinteza de ARNr i, n paralel
cu aceasta, se continu sinteza de ARNm.
Faza G2 este faza postsintetic, dintre sfritul sintezei de ADN i
nceputul mitozei, perioad n care celula se pregtete pentru diviziune.
Astfel, n aceast faz, pe lng faptul c se continu sinteza ARN-ului i a

146
proteinelor, n celul se sintetizeaz n cantiti mari tubulinele, actina,
miozina, proteine necesare diviziunii celulare.
Faza M este faza n care se desfoar mitoza, n urma creia rezult
cele dou celule fiice.
Cnd celulele se divid n mod repetat, exist un interval de timp ntre
dou mitoze succesive, cunoscut sub numele de interfaz. Fazele G 1, S, G2,
desfurate n interfaz, sunt etape metabolice n care celula acumuleaz
ap, alte substane anorganice i organice i n care se sintetizeaz ADN,
ARN, aminoacizi, proteine, sinteza ARN-ului i a proteinelor nonhistonice
fiind permanent n interfaz. Cantitatea de ADN ns nu este constant
pentru ntreaga perioad a ciclului: variaz n G1, se dubleaz n faza S, este
constant n G2 si se reduce la jumtate n faza M.
Durata ciclului celular la eucariotele superioare variaz ntre 10-25 ore
n raport cu specia, tipul de celul, condiiile mediului ambiant, n acelai
esut de la o celul la alta, fazele fiind variabile ca durat. Astfel, pentru o
celul de mamifer cu durata ciclului de 16 ore, faza G 1 dureaz 5 ore (25-
50%), faza S dureaz 7 ore (35-40%), faza G2 - 3 ore (20-35%) faza i M - 1
or (10%).
Pentru un anumit tip de celul, durata cea mai variabil revine fazei G 1
n care celulele pot rmne ani de zile, iar cea mai stabil este faza S.
Celulele eucariotelor, primind semnale variate de la alte celule, se
comport diferit. Astfel, unele se difereniaz prin exprimarea unor caractere
fenotipice, altele se autodistrug prin moarte celular programat, iar altele i
replic materialul genetic i se divid. Momentul deciziei este faza G 1.
Diferenierea i apoptoza se realizeaz n aceast faz. n schimb, replicarea
ADN necesit trecerea de faza G1 i derularea fazelor S, G2 i M.
n embrion, ciclul celular se desfoar mult mai rapid (ex. n cca. 30
min. n celulele embrionare de Xenopus), fiind comprimate pn la eliminare
total fazele G1 i G2 i mult mai puin faza S.
n funcie de viteza cu care celulele parcurg ciclul celular, exist 3
tipuri de celule:
- celule care au pierdut capacitatea de a se divide, oprite n faza G 1,
ca de exemplu neuronii (timpuriu dup natere), adipocitele, celulele
musculare, spermatidele;
- celule care se divid rapid, n cca. 8 ore, ca de exemplu celulele
mduvei hematogene, epidermocitele, enterocitele;
- celule cu capacitate redus de multiplicare, ca de exemplu celulele
hepatice, celulele endocrine. Celulele din aceast categorie, n condiii
modificate se pot divide rapid. Astfel, de exemplu, hepatocitele care n mod
obinuit se divid la intervale de 100 de zile, n urma hepatectomiilor pariale
i modific ritmul mitotic i se divid rapid, n scopul regenerrii
parenchimului.
Pe baza datelor oferite de dinamica ciclului, se poate calcula indicele
mitotic, care reprezint raportul dintre celulele care se divid i cele care nu se
divid. Indicele mitotic este invers proporional cu durata medie a ciclului. Cu
ct celulele dintr-un esut au durata ciclului mai mare, cu att indicele mitotic
are o valoare mai redus i invers.
Dinamica ciclului celular este influenat de aciunea diferiilor factori
restrictivi, cum sunt: limitarea aportului de substane nutritive, schimbrile

147
drastice de temperatur, aciunea radiaiilor X, inhibitori ai sintezelor proteice
etc.
Sub aciunea acestor factori se pot creea puncte critice sau de
restricie R, care determin oprirea ciclului ntr-o anumit faz definitiv, sau
pe perioade mai lungi sau mai scurte. Astfel de puncte critice se pot instala la
trecerea din faza G1 n faza S i la trecerea din faza G2 n M. Dac
perioadele critice sunt depite, ciclul i continu evoluia, parcurgnd i
celelalte faze.
Depirea punctului critic dintre G1 i S depinde de acumularea n
citoplasm ntr-o anumit concentraie a proteinei U (engl. unstable), care
angajeaz celula n faza S, iniiind autoreplicarea ADN-ului.
Momentul restrictiv dintre G1 i S este mecanismul de supravieuire al
celulei aflat n condiii vitrege. Dac proteina este sintetizat n cantitate
mic, celula nu se divide, ea rmne viabil pe perioade lungi, chiar n
condiii de aport extrem de redus de nutrimente. De aceea, punctul de
restricie R constituie o perioad de repaus pentru celulele care n anumite
condiii i opresc diviziunea, acesta fiind stadiul G0 al ciclului celular.
O celul aflat n faza G0 are n general dimensiuni mai mici, iar
procesele de transcripie i translaie reprezint cca. 1/3 din cele
Pasajul de la faza G1 la faza S este decisiv, deoarece el angajeaz n
mod ireversibil celula n procesul care conduce la diviziunea sa normal sau
patologic. O dat luat decizia de replicare, celula devine refractar la
semnalele externe stimulatoare, pn la derularea complet a ciclului.
Momentul critic dintre G2 i M este produs de inhibiia sintezei
proteinelor, mpiedicnd intrarea celulelor n mitoz. Prin intervenia unei
protein-kinaze solubile dependent de cicline (cdk2 n asociere cu ciclina A i
B), activ spre sfritul fazei G2, sunt fosforilate proteinele laminei nucleare,
proces care faciliteaz dezasamblarea nucleolemei, sunt activate histonele
H1, condensnd cromozomii, punctul critic este depit, iar celula trece n
faza M.
Trecerea n faza M este determinat i de modificarea raportului
nucleocitoplasmatic (N/C), ca i de raportul nucleu/nucleol, n acest caz,
nucleul ne mai putnd coordona activitatea celulei.
Abilitatea celulei de a produce o copie exact a ei nsi, prin
diviziune, este o component esenial a vieii celulare. Acest proces trebuie
realizat cu mare fidelitate, astfel nct organismele s fie capabile s se
nmuleasc. Mecanismul molecular de control al ciclului celular utilizat de
celul are un nivel nalt de organizare i este relativ bine conservat n cursul
evoluiei speciilor.
Ciclul celular este submprit n dou subcicluri:
- subciclul reproducerii (cromozomial) aparine fazei S i se
desfoar n nucleu i citoplasm, prin autoreplicarea ADN-ului i a
histonelor. Autoreplicarea semiconservativ a ADN-ului dup mecanismul
descris de Watson i Crick, nu se realizeaz pe toat lungimea moleculei, ci
pe fragmente denumite repliconi. n procesul de replicare intervin enzime
care detorsioneaz (desfac i separ cele dou filamente de ADN) i enzime
ADN-polimeraze care realizeaz asamblarea nucleotidelor (ex. ADN-
polimeraza). Molecula de ADN rezult prin unirea repliconilor (cca. 1500

148
locuri sintetizate simultan), sub aciunea ligazelor. n citoplasm se
sintetizeaz histonele i are loc mpachetarea strns a nucleoproteinelor;
- subciclul creterii celulare este caracterizat prin sinteze metabolice
intense n scopul dublrii constituenilor celulari, astfel nct celula fiic
rezultat prin diviziune s posede seturi complete de organite i alte structuri.
n acest subciclu, moleculele de ARN sunt sintetizate continuu n interfaz,
iar histonele n mic msur n fazele S i G2. Enzimele care intervin n
procesele metabolice i n sinteza constituenilor membranari sunt sintetizate
n toate fazele ciclului.

Controlul ciclului celular

Pentru supravieuirea organismelor eucariote este indispensabil ca
diferitele faze ale ciclului celular s fie precis coordonate. Fazele trebuie s
se succead n ordine corect, iar o faz trebuie s fie complet nainte ca
cealalt faz s nceap. Erorile de coordonare pot conduce la alterari
cromozomiale. Cromozomi sau pri din cromozomi pot fi pierdui, rearanjai
sau distribuii inegal ntre cele dou celule fiice. Aceste tipuri de alterare
cromozomial sunt observate adesea la celulele canceroase.
Cele mai importante elemente implicate n controlul pasajului de la o
faz la alta a ciclului celular sunt enzimele, care modific activitatea unor
proteine prin reacii de fosforilare. Aceste enzime sunt numite protein-kinaze
dependente de cicline (cdk), deoarece activitatea lor este stimulat de
proteine reglatoare denumite cicline, cu care se asociaz formnd complexe
moleculare.
Ciclinele sunt molecule proteice formate i degradate n cursul ciclului
celular. Au fost numite cicline deoarece concentraia lor variaz periodic n
cursul ciclului celular, degradarea periodic a acestor proteine fiind un
mecanism important al controlului ciclului celular.
Ciclinele activeaz cdk i astfel particip la controlul trecerii dintr-un
stadiu n altul al ciclului celular. Pn n prezent s-au descoperit 8 cicline (de
la A la H).
Sinteza ciclinelor este condiionat de etapa ciclului celular, fiecare tip
de ciclin fiind sintetizat ntr-o anumit etap a ciclului celular n funcie de
nivelul de transcripie al ARNm i de intensitatea degradrii proteolitice a
ciclinelor.

Concepte i noiuni de reinut

Ciclul celular reprezint timpul scurs de la terminarea unei diviziuni din

care rezult noi celule, pn n momentul n care se ncheie i diviziunea
acestora, perioad echivalent cu dou interfaze i o metafaz.
Ciclul celular se desfoar n 4 faze: G1 (presintetic), S (faza de
sintez), G2 (faza postsintetic) i M (faza mitotic).
Durata ciclului celular la eucariotele superioare variaz ntre 10-25 ore
n raport cu specia, tipul de celul, condiiile mediului ambiant, n acelai
esut de la o celul la alta, fazele fiind variabile ca durat.

149
 Pe parcursul ciclului celular se pot instala dou puncte critice, i
anume, la trecerea din faza G1 n faza S i la trecerea din faza G2 n M. Dac
perioadele critice sunt depite, ciclul i continu evoluia, parcurgnd i
celelalte faze.
Depirea punctului critic dintre G1 i S depinde de acumularea n
citoplasm ntr-o anumit concentraie a proteinei U (engl. unstable), care
angajeaz celula n faza S, iniiind autoreplicarea ADN-ului.
Momentul restrictiv dintre G1 i S este mecanismul de supravieuire
al celulei aflat n condiii vitrege. Dac proteina este sintetizat n cantitate
mic, celula nu se divide, ea rmne viabil pe perioade lungi, chiar n
condiii de aport extrem de redus de nutrimente
Momentul critic dintre G2 i M este produs de inhibiia sintezei
proteinelor, mpiedicnd intrarea celulelor n mitoz. Prin intervenia unei
protein-kinaze solubile dependent de cicline (cdk2 n asociere cu ciclina A i
B), activ spre sfritul fazei G2, sunt fosforilate proteinele laminei nucleare,
proces care faciliteaz dezasamblarea nucleolemei, sunt activate histonele
H1, condensnd cromozomii, punctul critic este depit, iar celula trece n
faza M.
Cele mai importante elemente implicate n controlul pasajului de
la o faz la alta a ciclului celular sunt enzimele, care modific activitatea
unor proteine prin reacii de fosforilare. Aceste enzime sunt numite protein-
kinaze dependente de cicline (cdk), deoarece activitatea lor este stimulat
de proteine reglatoare denumite cicline, cu care se asociaz formnd
complexe moleculare.

ntrebri de autoevaluare

1. Ce este ciclul celular?

2. Care sunt fazele ciclului celular?
3. Care este faza ciclului celular cu durata cea mai lung?. Specificai ce
proces important are loc n aceast faz?
4. Cate puncte de restricie se pot crea n timpul ciclului celular, unde se
instaleaz i cum pot fi ele depite?
5. Ce sunt proteinkinazele dependente de cicline i ce rol au ele n
controlul ciclului celular?

150
 UNITATEA DE NVARE 13

REPRODUCEREA CELULAR. DIVIZIUNEA CELULAR

Cuvinte cheie: amitoza, strangulaie, clivaj, nmugurire, mitoza, placa

metafazica, meioza

Rezumat
Diviziunea celular constituie o nsuire att a organismelor
monocelulare, ct i a organismelor pluricelulare, vegetale i animale. Ea
asigur creterea i dezvoltarea organismelor, nlocuirea celulelor uzate,
mbtrnite sau moarte, regenerarea esuturilor i organelor. Dup
modificrile manifestate n celul i n special dup criteriul formrii sau nu a
fusului de diviziune, se cunosc urmtoarele tipuri de diviziuni: diviziunea
direct (amitoza) i diviziunea indirect, care este de dou tipuri: mitoza
(diviziunea tipic sau ecvaional), respectiv meioza (diviziunea alotipic sau
reducional).Caracteristica comun a acestor tipuri de diviziune este
dublarea cantitii de ADN.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 2 ore

Diviziunea celular

Diviziunea direct (amitoza)

Diviziunea direct se numete i amitoz deoarece pe parcursul ei nu

se formeaz fus de diviziune (gr. a = fr; mitos = filament). Se manifest
la majoritatea organismelor eucariote: protozoare, metazoare, plante, fiind
tipic pentru organismele unicelulare.
La organismele superioare (mamifere i om) diviziunea direct este
mai frecvent n celulele hepatice, celulele epiteliului uterin, celulele
glandelor endocrine, celulele foliculare ovariene i celulele tumorale.
Amitoza se realizeaz ntr-un timp foarte scurt, timp n care nu are loc
condensarea cromatinei, iar nveliul nuclear nu dispare.
Mecanismele prin care materialul genetic se mparte celulelor fiice
sunt:
- strangularea citoplasmei i a nucleului;
- clivajul (despicarea citoplasmei i a nucleului);
- nmugurirea (nucleul emite muguri pe care citoplasma i
nvelete i i izoleaz).

151
 Mitoza (gr. mitos = filament)

Mitoza a fost descoperit de W. Fleming n 1874. Este tipul de

diviziune caracteristic celulelor somatice (2n), cu dublarea prealabil i
repartizarea uniform a numrului de cromozomi la cele dou celule fiice.
Acestea au aceiai cantitate de material genetic (2n) ca i celula mam.
Pentru ca o celul s se divid cu succes trebuie s aib loc dou
procese:
1. cromozomii care se replic n timpul fazei S trebuie aliniai,
separai i deplasai la polii opui ai celulei;
2. citoplasma trebuie s se cliveze astfel nct s asigure fiecrei
celule fiice un set complet de cromozomi i de organite citoplasmatice
necesare.
Dei aceste procese, diviziunea nuclear (mitoza) i diviziunea
citoplasmatic (citokineza), sunt separabile experimental, ele au loc de obicei
ntr-o nlnuire ndeaproape astfel c citokineza ncepe spre finalul mitozei.
Morfologic, celula care se divide se caracterizeaz prin figura mitotic
format din:
- aparatul acromatic alctuit din centrozomi i filamentele fusului
de diviziune:
- aparatul cromatic constituit din cromozomi.
Funcia aparatului acromatic (fusului de diviziune) este aceea de a
asigura mprirea exact a cromozomilor replicai ntre cele dou celule fiice
rezultate n urma diviziunii.
Mitoza ocup cca. 10% din ciclul celular i se realizeaz n cca. 1 or
la majoritatea tipurilor celulare. Este alctuit din 4 faze succesive: profaza,
metafaza, anafaza i telofaza.
Profaza ocup cca. 50% din ntreaga durat a mitozei i se
caracterizeaz printr-o serie de modificri nucleo-citoplasmatice.
Modificrile din citoplasm:
- se formeaz cel de-al doilea centru celular prin asamblarea
tubulinelor citoplasmatice;
- cei doi centri celulari (centrozomi) migreaz spre cei doi poli ai
celulei;
- n jurul centrozomilor (formai din cte doi centrioli
perpendiculari) microtubulii, cu aspectul unor raze, alctuiesc un aster, cte
unul pentru fiecare pol al celulei;
- asterii constituie nceputul formrii fusului de diviziune, prin
polimerizarea tubulinelor ntre cei doi poli celulari.
Modificrile din nucleu
- cromatina (ca urmare a sintezei de ADN) se condenseaz i se
formeaz spiremul; la sfritul profazei, spiremul se fragmenteaz, iar prin
spiralizri i plicaturri masive apar cromozomii. Fiecare cromozom este
format din dou cromatide surori unite prin centromer. Ulterior, n timpul
profazei trzii, pe fiecare din cele dou fee opuse ale centromerului se
formeaz cte un cinetokor;
- nucleolul se fragmenteaz i se dezintegreaz (proces exprimat
morfologic prin micorarea n volum), iar genele redundante se integreaz n
cromozomi;

152
 ntre profaz i metafaz exist un stadiu intermediar scurt (10 20
min) denumit prometafaza. n acest stadiu, datorit creterii gradului de
hidratare, nucleul se hipertrofiaz, proces finalizat cu fragmentarea
membranei nucleare i amestecul coninutului nuclear cu cel citoplasmatic.
Cromozomii intens spiralizai migreaz i se dispun pe filamentele fusului de
diviziune.
Metafaza reprezint cca. 18% din durata mitozei. Cromozomii
spiralizai la maxim ajung la ecuatorul celulei formnd placa metafazic sau
ecuatorial; ei se dispun cu axul longitudinal perpendicular pe axul
filamentelor polare ale fusului de diviziune.
La sfritul metafazei, la nivelul fiecrui cromozom are loc clivarea
centromerului i separarea celor dou cromatide surori, cromozomii devenind
monocromatidici. Acesta este momentul n care numrul cromozomilor se
dubleaz.
Anafaza reprezint cca. 7% din timpul mitozei i const n migrarea
simultan a cromozomilor monocromatidici, jumtate spre un pol al celulei i
cealalt jumtate spre polul opus. La deplasarea cromozomilor contribuie pe
de o parte filamentele kinetocorice, care sunt atrase de centrioli, ca urmare a
captului lor (-), care depolimerizeaz i astfel se scurteaz. Pe de alt parte,
la deplasarea cromozomilor particip i filamentele polare care se alungesc
(polimerizeaz) prin adugarea de subuniti la capetele lor libere (+),
mpingnd cromatidele separate spre polii celulei. Viteza de deplasare a
cromozomilor este de cca. 1m/min.
Telofaza marcheaz sfritul diviziunii i este etapa de refacere a
celor doi nuclei, prin manifestri inverse celor din profaz i metafaz:
- cromozomii ajung la cei doi poli ai celulei;
- reconstituirea nveliului nuclear n jurul fiecrui grup de
cromozomi pentru a forma nucleii interfazici ai celor dou celule fiice;
- dup reasamblarea nveliului nuclear, sinteza ARN rencepe,
determinnd reapariia nucleolului;
- cromozomii se despiralizeaz, iar cromatina i reia conformaia
interfazic dispersat;
- dezagregarea fusului de diviziune sub aciunea lizozomilor;
- aglomerarea organitelor n ecuatorul celulei,
- ca urmare a dezagregrii fusului de diviziune i migrrii
cromozomilor, la ecutoarul celulei apare o vacuolizare a citoplasmei, urmat
de formarea unui inel tranzitoriu de actin. Contracia filamentelor de actin
i miozin dispuse la periferia regiunii ecuatoriale, determin clivarea
citoplasmei n ecuatorul celulei i apariia unei depresiuni, n care ptrunde
plasmalema i care va mpri celula n dou,
- clivarea citoplasmei la ecuatorul celulei, urmat de ptrunderea
plasmalemei n zona de clivaj, care va separa celula n dou celule fiice
(citodiereza; citokineza, gr. kinesis micare), mai mici dect celula mam,
ns cu aceiai structur ca i aceasta.
Structura fusului de diviziune i deplasarea cromozomilor
Cel de-al doilea centrozom care apare n profaz se formeaz prin
asamblare din tubulinele existente n citoplasm i nu prin replicarea
vechiului centrozom. Dup migrarea celor dou perechi de centrioli la polii
celulei, acetia vor declana procesul de polimerizare al tubulinelor din

153
citoplasm i formarea filamentelor fusului de diviziune ntre cei doi poli ai
celulei.
Fusul de diviziune este format din fibre constituite din microtubuli i
proteine asociate acestora. Un fus mediu conine aproximativ 10 8 molecule
de tubulin asamblate n microtubuli.
Fusul de diviziune este alctuit din dou categorii de fibre:
- fibre polare: sunt cele mai numeroase, se dispun ntre cei doi
poli ai celulei i se suprapun parial la ecuatorul celulei;
- fibre kinetocorice: sunt ataate cu un capt de kinetocorul
fiecrei cromatide, iar cellalt capt este ndreptat spre polul fusului de
diviziune. Ele sunt formate din microtubuli care se prind n mnunchiuri de
cele dou fee ale kinetocorului, servind la aezarea n poziie a
cromozomilor ntre filamentele polare la ecuatorul celulei i favoriznd apoi
deplasarea n anafaz a cromozomilor spre cei doi poli.
Kinetocorul este o structur de origine proteic, care apare la sfritul
profazei pe fiecare din cele dou fee opuse ale centromerului.

Meioza

Meioza (gr. meion = mai mic) reprezint diviziunea indirect

specific celulelor germinale diploide (ovocitul I, spermatocitul I), care are ca
rezultat formarea celulelor sexuale haploide (ovulul, spermia). Astfel, spre
deosebire de mitoz, n care dintr-o celul cu un set diploid de cromozomi
(2n) rezult dou celule tot cu 2n cromozomi, n meioz are loc reducerea la
a numrului de cromozomi, rezultnd celule haploide cu n cromozomi.
Formarea celulelor sexuale este precedat de dou diviziuni
succesive:
1. diviziunea reducional (meioza I);
2. diviziunea ecuaional (meioza II).
Ca rezultat al primei diviziuni, dintr-o celul diploid (2n) se obin
dou celule haploide (n) cu cromozomi bicromatidici.
Cea de-a doua diviziune este o mitoz propriu-zis, n care din dou
celule haploide (n) cu cromozomi bicromatidici, rezult 4 celule haploide (n)
cu cromozomi monocromatidici. ntre meioza I i meioza II poate exista o
scurt perioad de repaus (interfaza) n care nu se sintetizeaz ADN. Prin
urmare, materialul genetic (ADN) replicat o singur dat naintea primei
diviziuni, se va mpri de dou ori. Fiecare diviziune a meiozei se deruleaz
n patru faze profaza, metafaza, anafaza, telofaza).
Profaza I este divizat n 5 substadii: leptoten, zigoten, pachiten,
diploten, diachineza.
Meioza propriu-zis poate dura zile, luni i chiar ani de zile, n
funcie de specie. Durata cea mai lung dintre fazele meiozei o are profaza I,
care ocup 90% din timpul de desfurare al meiozei.
Stadiul leptoten (gr. leptos = fin; teino = a ntinde) se
caracterizeaz prin:
- creterea n volum a nucleului;
- sinteza i dublarea cantitii de ADN, pe baza substratului
molecular acumulat n celul din matricea extracelular;

154
 - condensarea cromatinei i diferenierea cromozomilor, care se
ataeaz cu ambele capete la nucleolem prin plci de ataare. Cromozomii
sunt bicromatidici i prezint n lungul lor, pe una din pri, o lam proteic
denumit ax.
Stadiul zigoten (gr. zigon = unire, mperechere) este relativ scurt i
se caracterizeaz prin apropierea cromozomilor omologi (matern i patern),
care se alipesc strns pe toat lungimea lor, la nivelul axelor proteice, proces
denumit sinaps sau conjugarea cromozomilor. n acest fel, genele alele de
pe cromozomii omologi se aaz fa n fa, rezultnd un cromozom
bivalent sau o tetrad, formaiune care cuprinde doi cromozomi omologi i
patru cromatide. n acest moment, garnitura cromozomial se reduce la
jumtate. Mecanismul conjugrii se bazeaz pe existena forelor de natur
electrostatic ntre cromatidele cromozomilor omologi, ca factor adjuvant
contribuind specificitatea de structur a genelor.
Stadiul pachiten (gr. pachis = gros) este un stadiu foarte lung, n
care se realizeaz o sinaps complet ntre cromozomii omologi i schimbul
de material genetic (de gene) ntre cromozomul matern i cel patern
(crossing over). Astfel, se realizeaz noi combinaii de gene, care vor fi
transmise generaiilor urmtoare, asigurndu-se astfel transmiterea
caracterelor fenotipice materne i paterne i variabilitatea speciilor.
Stadiul diploten. (gr. diploos = dublu). n acest stadiu, ntre
cromozomii omologi apare o respingere electrostatic, care determin
iniierea separrii cromozomilor omologi, accetia rmnnd legai la nivelul
chiasmelor (locurile n care s-a realizat crossing overul). Spre sfritul
diplotenului, nucleolul se reduce n dimensiuni.
Stadiul de diachinez (gr. de = prin; kinesis = micare) este
caracterizat prin: spiralizarea continu a cromozomilor, care se scurteaz i
se detaeaz de nucleolem; fiecare cromozom bivalent este alctuit din
patru cromatide, cromatidele surori fiind legate prin centromer, iar cele
nesurori prin chiasme; dispariia nucleolului; dezintegrarea membranei
nucleare; n citoplasm se formeaz fusul de diviziune.
Metafaza I. Cromozomii tetracromatidici se dispun la ecuatorul
celulei formnd placa ecuatorial sau metafazic. Spre sfritul metafazei,
ntre cromozomii tetradei are loc o respingere activ ceea ce determin
separarea celor doi membri constitueni. Fiecare cromozom bicromatidic,
separat de congener, se ataeaz cu centromerul de filamentele scurte ale
fusului de diviziune.
Anafaza I. Este faza n care, cromozomii omologi bicromatidici,
separai n dou seturi egale numeric, migreaz spre cei doi poli.
Telofaza I. n aceast faz, n celula mam se reorganizeaz doi
nuclei prin refacerea nucleolemei; nucleolii nu se refac, iar prin citodierez
rezult dou celule fiice (ovocitul II sau spermatocite II), fiecare dinre ele cu
garnitura haploid de cromozomi bicromatidici.
Dup o scurt interfaz, lipsit de refacerea nucleolului i de
dublarea cantitii de ADN, cele dou celule evolueaz spre o nou diviziune.
Cea de-a doua diviziune este de fapt o mitoz, n care cromatidele surori se
despart.
n profaza II are loc formarea fusului de diviziune i degradarea
membranei nucleare. n metafaza II cromozomii bicromatidici se dispun la

155
ecuatorul celulei formnd placa metafazic. Ei sunt fixai de filamentele
fusului de diviziune n regiunea centromerului. n anafaza II cromatidele
surori ale fiecrui cromozom se despart i migreaz spre cei doi poli ai
celulei.
n telofaza II cromozomii monocromatidici ajung la cei doi poli i vor
rezulta celulele sexuale cu un numr redus la jumtate de cromozomi (n), cu
un set unic de gene.

Concepte i noiuni de reinut

Amitoza se manifest la majoritatea organismelor eucariote:

protozoare, metazoare, plante, fiind tipic pentru organismele unicelulare. La
organismele superioare (mamifere i om) diviziunea direct este mai
frecvent n celulele hepatice, celulele epiteliului uterin, celulele glandelor
endocrine, celulele foliculare ovariene i celulele tumorale.
Amitoza se realizeaz ntr-un timp foarte scurt, timp n care nu are
loc condensarea cromatinei, iar nveliul nuclear nu dispare. De
asemenea, pe parcursul amitozei nu se formeaz fus de diviziune.
Mitoza este tipul de diviziune caracteristic celulelor somatice
(2n), cu dublarea prealabil i repartizarea uniform a numrului de
cromozomi la cele dou celule fiice. Acestea au aceiai cantitate de material
genetic (2n) ca i celula mam.
Morfologic, celula care se divide prin mitoz se caracterizeaz prin
figura mitotic format din aparatul acromatic (alctuit din centrozomi i
filamentele fusului de diviziune) i aparatul cromatic constituit din
cromozomi.
Funcia aparatului acromatic (fusului de diviziune) este aceea de a
asigura mprirea exact a cromozomilor replicai ntre cele dou
celule fiice rezultate n urma diviziunii.
La sfritul metafazei, la nivelul fiecrui cromozom are loc
clivarea centromerului i separarea celor dou cromatide surori,
cromozomii devenind monocromatidici. Acesta este momentul n care
numrul cromozomilor se dubleaz.
Meioza reprezint diviziunea indirect specific celulelor germinale
diploide (ovocitul I, spermatocitul I), care are ca rezultat formarea celulelor
sexuale haploide (ovulul, spermia).
n meioz are loc reducerea la jumtate a numrului de
cromozomi, rezultnd celule haploide cu n cromozomi.
Meioza propriu-zis poate dura zile, luni i chiar ani de zile, n funcie
de specie. Durata cea mai lung dintre fazele meiozei o are profaza I, care
ocup 90% din timpul de desfurare al meiozei.
n stadiul pachiten al profazei I a meiozei se realizeaz o sinaps
complet ntre cromozomii omologi i schimbul de material genetic (de gene)
ntre cromozomul matern i cel patern (crossing over). Astfel, se
realizeaz noi combinaii de gene, care vor fi transmise generaiilor
urmtoare, asigurndu-se astfel transmiterea caracterelor fenotipice materne
i paterne i variabilitatea speciilor.

156
 ntrebri de autoevaluare:

1. Ce este amitoza? Specificai mecanismele prin care materialul genetic se

distribuie celulelor fiice n timpul acestui proces.
2. Descriei fazele mitozei.
3. Ce este placa metafazic?
4. n ce moment al mitozei are loc dublarea numrului de cromozomi?
5. Descriei diviziunea meiotic.
6. Cum se numesc celulele care rezult n urma procesului meiotic i care
este garnitura cromozomial a acestora?
7. Ce este procesul de crossing-over?. Specificai stadiul profazei I n care
acesta se manifest?

157
 UNITATEA DE NVARE 14

MBTRNIREA I MOARTEA CELULELOR

Cuvinte cheie: mbtrnire, moarte, apoptoz, homeostazie, necroz

Rezumat
n aceast unitate este descries procesul de moarte celular, cu
referire n special la moartea celular programat genetic sau apoptoza.
Astfel, este prezentat morfologia i biochimia celulelor apoptotice, factorii
inductor i mecanismele moleculare prin care este declanat acest process.

Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 2 ore

Moartea celular este un biofenomen manifestat pe ntreaga

ontogenez a indivizilor. nc din stadiul embrionar mor celule, care sunt
nlocuite cu altele.
Intensitatea procesului este n corelaie direct cu durata de via i
cu stadiul lor ontogenic. Astfel, n ontogeneza celulelor exist urmtoarele
etape:
- perioada de difereniere i evoluie spre maturizare (perioada
tnr);
- perioada de activitate (adult);
- perioada de mbtrnire, urmat de agonie i moarte.
Durata de via a celulelor se ncadreaz n limite foarte largi. Astfel,
exist celule care triesc foarte puin: de ex. celulele absorbante care triesc
72 de ore i leucocitele care triesc 2-12 zile. Eritrocitele triesc 8-120 zile,
celulele conjunctive 2-3 ani, celulele nervoase 30 de ani (la om), iar
limfocitele mici i celulele musculare sunt nemuritoare (mor odat cu
organismul). De aceea, n organism, unele celule, n orice moment, sunt
nlocuite cu altele. Celulele moarte sunt fie fagocitate, fie distruse la
suprafaa mucoaselor.
Moartea celulelor nu este sinonim cu moartea ntregului organism,
care constituie un fenomen biologic ce const n ncetarea tuturor funciilor
vitale.
Procesele de mbtrnire i moarte sunt precedate de modificri
celulare funcionale i morfologice. Primele manifestri sunt de ordin fizico-
chimic. Acestea constau n alterarea echilibrului coloidal, perturbarea
capacitilor metabolice i de autorennoire prin alterarea sintezei acizilor
nucleici, a procesului de transcripie i translaie a ADN-ului. Ca urmare a
acestor fenomene se deregleaz sinteza proteinelor citoplasmatice i a
enzimelor, se acumuleaz proteinele insolubile n aciunea enzimelor, se

158
acidifiaz pH-ul. Acumularea i depunerea de glicogen, lipide, pigmeni de
uzur, ca urmare a scindrii moleculelor glicoproteice este consecina
predominrii laturii catabolice.
Modificrile morfologice se traduc prin hipertrofia celulei cauzat de
acumularea unei mari cantiti de ap, hipertrofia nucleului i a nucleolului,
urmate de atrofii i vacuolizri ale nucleului, nucleolului i ale citoplasmei,
acidifierea citoplasmei i ncrcarea acesteia cu incluziuni. n strile de
suferin ale celulelor numite necrobioze (nekros, gr. = moarte), cromatina se
concentreaz ntr-un singur bloc, nucleul se picnozeaz, fenomenul de
picnoz fiind urmat de cariorexis (fragmentarea nucleului) i de carioliz (liza
fragmentelor nucleare).
Cauzele morii celulare sunt multiple:
1. Programarea genetic a duratei de via n genotipul fiecrei
celule, care conduce la uzur i mbtrnire. De exemplu, s-a stabilit c n
cultura de celule, fibroblastele se divid exact de 50 de ori, dup care cultura
moare. Dac fibroblastele cultivate sunt luate de la persoane de diferite
vrste, numrul diviziunilor scade treptat cu vrsta.
2. Factorii care au drept consecin acumularea unor defecte
genetice (mutageni, cancerigeni, teratologici), modific structura ADN-ului
sau influeneaz etapele de transcripie i translaiei a informaiei genetice.
3. Aciunea factorilor fizici (radiaii, frig, cldur), a factorilor chimici
(substane toxice, narcotice etc.), agenilor mecanici (lovirea, strivirea,
neparea), factorilor fiziologici care sunt cei mai frecveni i factorilor
biologici: parazii, bacterii, virusuri, care provoac moartea celulelor prin
ptrundere direct sau eliberare de substane toxice.

Apoptoza
(moartea celulara programata)

Apoptoza (din gr. apo=din i ptosis=cadere) este una dintre

numeroasele tipuri de moarte celular programat, mecanism important att
n dezvoltarea, ct i n homeostazia structural a esuturilor adulte, pentru
ndeprtarea celulelor care nu mai sunt indispensabile, a celulelor infectate,
transformate sau distruse, prin activarea unui program de suicid intern. n
contrast cu necroza, care este o form de moarte celular rezultat n urma
unei rniri acute a celulei provocata de exemplu de ischemie, hipertermie
mentinuta, traume fizice sau chimice, apoptoza se desfsoar ntr-un proces
ordonat care ofer, n general, avantaje pe perioada ciclului de via al unui
organism. n general, apoptoza nu se extinde pe arii celulare mari ci se
desfoar relativ punctiform implicnd o celul, sau un numr mic de celule.
O caracteristic important a apoptozei este faptul c celulele moarte prin
acest proces sunt eliminate rapid prin recunoaterea i fagocitarea lor de
ctre macrofage, fr alterri ale celulelor vecine i fr producerea reaciilor
inflamatorii. ntr-un organism pluricelular exist o balan mitoz/apoptoz,
care conduce la o dezvoltare sau funcionare normal a acestuia. Astfel, cu
ct rata de diviziune este mai mare ntr-un esut, cu att procesul de
apoptoz cuprinde mai multe celule, avnd n vedere faptul c apoptoza
reprezint un proces opus mitozei.

159
 Exagerarea procesului cauzeaz tulburri manifestate prin pierderi
celulare, pe cnd insuficiena acestuia va determina o proliferare
necontrolat a celulelor, n spe tumorile cancerigene.
Apoptoza are loc pe parcursul dezvoltrii ontogenice a organismelor
(vertebrate, nevertebrate) i a fost prima dat descris de Gluckmann (1951),
apoi de Kerr (1965), fiind pe deplin recunoscut abia n ultima decad a sec.
XX (Manolescu i colab., 1997). Numrul de celule moarte prin apoptoz
este mai mic n cazul organelor constituite i infinit mai mare n cursul
dezvoltrii embrionare.

Rolul funcional al apoptozei

Motivul pentru care celulele trebuie sa moar este diferit de la un tip

celular la altul, ns, n general, se consider c exist dou motive diferite
pentru care o celul comite suicid:
1. Creterea i dezvoltarea esuturilor este asigurat de existena
unui echilibru ntre diviziunea celular i ncetarea creterii, ca urmare a
diferenierii, sau a morii celulare.
n timpul dezvoltrii organismelor, o fraciune celular trebuie s
moar, astfel s-a demontrat c apoptoza are loc:
- n cursul dezvoltrii normale a embrionului;
- n timpul resorbiei organelor la larve n timpul metamorfozei (ex.
resorbia cozii unui mormoloc la metamorfozarea sa n broasc);
- n momentul formrii degetelor membrelor prin ndeprtarea celulelor
din spaiul interdigital (Hammar i Mottet, 1971, citai de Manolescu i colab,
1997, Raaf, 1992);
- la formarea conexiunilor corecte (sinapselor) ntre neuroni, la nivelul
creierului, necesit eliminarea surplusului de celule prin apoptoz;
Apoptoza intervine de asemenea n remanierile tisulare. n context
normal, prin apoptoz se asigur meninerea ntre anumite limite, impuse de
necesitile fiziologice, a dimensiunilor i funciilor fiecrui component dintr-
un organism. Astfel, prin turn-overul celular, ea asigur homeostazia
organelor (Duke i colab., 1996, citat de Manolescu i colab., 1997).
Prin anumite calcule, s-a apreciat c, dac nu ar avea loc apoptoza,
mucoasa intestinului subire, n timpul vieii unui organism uman, ar realiza o
lungime de aproximativ 32 Km. Enterocitele mucoasei intestinale sunt
nlocuite de aproximativ 4500 ori, celulele epidermei de aproximativ 1000 de
ori, iar celulele conjunctive de 400 de ori (Manolescu i colab., 1997; incai,
1998).
Mduva osoas, care la specia uman reprezint aproximativ 1,5 Kg.,
ar produce o cantitate de cca. 3 tone de esut hematopoetic, n aceiai
perioad (Iversen, 1993, citat de Manolescu, 1997).
Apoptoza apare i n procesele involutive ale organismului. Acest
proces se manifest intens n regresia glandelor mamare i n atreziile
foliculare.
2. Distrugerea celulelor care reprezint o ameninare pentru
integritatea organismului, ca de exemplu:

160
 - celulele infectate cu virusuri. Una dintre metodele prin care
limfocitele T citotoxice (CTL) ucid celulele infectate cu virusuri este aceea de
a induce apoptoza;
- celulele sistemului imunitar. O dat cu descreterea rspunsurilor
imune, mediate celular, se realizeaz ndeprtarea prin apoptoz a unor
clone limfocitare (pentru a le preveni s atace constituenii corpului).
- celulele cu ADN distrus.
Distrugerea genomului propriu poate determina o celul s perturbe
dezvoltarea embrionar normal, determinnd defecte la natere, sau s
devin canceroas. Celulele rspund la distrugerea ADN ului prin secreia
intracelular a unui inductor puternic al apoptozei, reprezentat prin proteina
p53.
- celulele canceroase. Radiaiile ionizante i substanele chimice
utilizate n terapia cancerului, induc fenomenul de apoptoz n tumori, n
anumite limite de doz i concentraie (Raffo, 1995; Eastmen i colab., 1990,
citat de Manolescu i colab., 1997). La nivel celular, efectele radiaiilor sunt
foarte variate, ele determinnd ncetinirea sau blocarea proliferrii celulare,
pierderea capacitii de diviziune, nensoit de moartea celular.
n apoptoz, moartea afecteaz celule individuale, pe cnd n
necroz, moartea afecteaz un grup de celule.

Factorii inductori ai apoptozei

n esuturile mamiferelor, fenomenul de apoptoz poate fi reglat de

ctre hormonii steroidici i peptidici. Pentru supravieuire, majoritatea
celulelor trebuie s primeasc o serie de semnale pozitive, eliberate de ctre
alte celule (ex. factorii de cretere pentru neuroni, interleukina 2 (IL-2)
factor esenial pentru mitoza limfocitelor, factorul de cretere al fibroblastelor
(FGF), hormonii androgeni pentru celulele prostatei, testiculului, hormonii
estrogeni pentru celulele ovarului, endometrului etc.
Principala cauz care determin o celul s se sinucid este
retragerea semnalelor pozitive (necesare pentru supravieuirea celulei) i
primirea unor semnale negative care pot fi endogene (ex. nivelurile crescute
de oxidani), sau exogene (ex. radiaii ionizante, medicamente
chimioterapeutice, o serie de activatori ai morii, care includ factorul necrozei
tumorale TNF, limfotoxina sau factorul necrozei tumorale , ligandul fasL,
care se leag la receptorul celular de suprafa numit fas sau CD95).

Morfologia i biochimia celulelor apoptotice

Celulele care manifest fenomenul de apoptoz au de obicei o

morfologie caracteristic:
- se reduc n dimensiuni, ca urmare a condensrii citoplasmei
prin pierderea apei. Acest proces se manifest din raiunea de a diminua
concentraia de ioni intracelulari (Na+, K+), ca urmare a activrii canalelor
ionice si este precedat de cresterea citosolica a ionilor de calciu, care
activeaza lent o serie de enzime implicate in modificarile structurale din

161
timpul apoptozei. Aceste enzime includ o endonucleaza nucleara
dependenta de calciu care cliveaza ADN-ul si o transglutaminaza care
degradeaza proteinele citosolice;
- pierd contactul cu celulele nvecinate prin distrugerea
jonciunilor citoplasmatice;
- prezint pe suprafaa lor o serie de protuberane i invaginaii
membranare, fenomen datorat dezorganizrii citoscheletului i n particular a
filamentelor de actin i miozin. In acest proces intervine calpaina, o
proteaza calciu dependenta (Knight, C.R., si colab., 1991). Fenomenul de
cutare a membranei se realizeaza intr-o masura mult mai mare decat in
necroza si este cunoscut sub denumirea de zeioza;
- cromatina se compacteaz i apoi se fragmenteaz. n acest
proces intervine o endonucleaz calciu dependent de tip DNA-za I (Wyllie,
A.H., 1980; Cohen, J.J. si Duke, R.C., 1984), care cliveaz ADN-ul
internucleosomal, dnd natere la o serie de fragmente (oligonucleosomi)
formate din cca. 146 perechi de baze (corespunztoare lungimii ADN-ului
care nconjoar nucleosomii). In ultimii ani, a existat o controversa cu privire
la dimensiunile fragmentelor de ADN, produse pe parcursul apoptozei. Cu
toate acestea, clivarea cromatinei la fragmente nucleosomale nu are loc in
toate tipurile celulare si poate fi inhibata fara a bloca celelalte modificari ale
apoptozei (Jacobson, M.D., si colab., 1994; Schulze Osthoff, K., si colab.,
1994). De asemenea s-a observat ca fragmentarea internucleosomala de
ADN poate fi blocata de catre zinc, acest element fiind cunoscut ca inhibitor
al endonucleazelor Ca2+ si Mg2+ dependente (Giannakis, C., si colab., 1991;
Zalewski, P.D., si colab., 1993). Deoarece ADN-ul mitocondrial nu este
fragmentat, se pare ca prin procesul de clivare a ADN-ului nuclear se evita
transferul de material genetic, potential activ, celulelor vecine, dupa
fagocitarea corpilor apoptotici. Aspectul morfologic al cromatinei compactate
este de agregate semilunare dispuse pe fata interna a invelisului nuclear.
Odata cu compactarea cromatinei este alterata ultrastructura nucleara.
Astfel, lamina nucleara si reteaua de filamente intermediare implicata in
mentinerea integritatii invelisului nuclear si implicit in distributia porilor
nucleari sunt clivate proteolitic (Kaufmann, S.H., 1989; Ucker, D.S., si colab.,
1992; Lazebnik, Y.A., si colab., 1993). Modificarile nucleare sunt precedate
de reducerea potentialului transmembranar mitocondrial, necuplarea
transportului de electroni la sinteza ATP-ului si cresterea generarii de specii
reactive de oxigen (Petrusca Daniela Nicoleta, Popa Olivia Mihaela, Mester
L., 2002);
- n final, nucleul i citoplasma se fragmenteaz progresiv
(organitele i conserv structura) rezultnd corpii apoptotici;
- corpii apoptotici sunt recunoscui i fagocitai de catre fagocite
profesioniste precum macrofagele sau de catre fagocite amatoare de tipul
fibroblastelor, celulelor epiteliale si celulelor musculare netede din peretii
vaselor de sange.
Celulele muribunde descrise, aflate n ultimele stadii ale apoptozei,
afieaza semnale mnnc-m, precum fosfatidilserina (PS). Aceasta se
gsete n mod normal pe suprafaa citosolic a membranei plasmatice, in
structura monostratului lipidic intern dar, n timpul apoptozei, se redistribuie
pe faa extern a membranei celulare (Fadok, V.A., si colab., 1998). Celulele

162
fagocitare, precum macrofagele, prezint receptori specializai, care
recunosc fosfatidilserina (PS) i i realizeaz funcia de fagocitoz ntr-o
manier ordonat, fr s induc un rspuns inflamator. Din categoria
receptorilor macrofagici, cu rol in recunoasterea fosfatidilserinei, fac parte
CD68, CD14, anexinele, receptorii scavenger, beta2 glicoproteina I si gas-6.

Fig. 65. Morfologia celulei apoptotice: a celula normal; b r educerea n

volum a celulei ca urmare a condensrii citoplasmei; c cutarea membranei (zeioza); d
dispunerea cromatinei cu aspect de semilun pe faa intern a nveliului nuclear; e
compactarea nucleului; f fragmentarea nucleului; g formarea corpilor apoptotici
(Daniela Nicoleta Petruc i colab., 2002)

Biochimia celulelor apoptotice. Mecanismele moleculare ale apoptozei

Pn n prezent nu se cunoate cu certitudine dac factorii care induc

supravieuirea, creterea celular i apoptoza sunt specifici fiecrui esut al
aceluiai organism sau sunt identici pentru toate celulele organismului.
Att cile extrinseci, ct i cele intrinseci, au n comun activarea
efectorilor centrali ai apoptozei, un grup de proteaze numite caspaze, care
scindeaz att elementele structurale, ct i cele funcionale ale celulei,
conducnd la schimbrile morfologice menionate anterior.

Caspazele

Caspazele (Cisteinyl Aspartate specific Proteinase) aparin unui grup

de proteine, numite cistein-proteaze (datorit prezenei cisteinei n situsul
catalitic i a prezenei unei activiti de tip aspartazic), responsabile de
schimbrile morfologice observate n celulele aflate n apoptoz. Caspazele
sunt exprimate iniial ca precursori inactiv sau pro-caspaze (zimogeni) i
necesit, pentru activare, o proteoliz limitat la reziduurile interne de acid
aspartic.
Familia caspazelor cuprinde 14 membri, grupai n trei subfamilii,
avnd, ca i criteriu de difereniere, secvenele de aminoacizi i funciile
ndeplinite de acestea:
1. Subfamilia ICE (Interleukin 1 Converting Enzyme) conine
caspazele 1, 4, 5, 11, 12, 13 i 14. Aceste caspaze sunt implicate n
prelucrarea selectiv a unor citokine. Caspaza-1, prima caspaz purificat, a

163
fost identificat prin capacitatea ei de a cliva precursorul interleukinei IL-1 la
forma sa matur. Caspaza-11 este necesar pentru activarea caspazei-1.
Caspazele 4, 5, 12, 13, 14 sunt, n general, suspectate de a fi implicate n
procesarea citokinelor. Aceste caspaze au o secven de un aminoacizi (aa)
omoloag mai degrab caspazei-1 dect caspazelor implicate n apoptoz.
2. Subfamilia caspazelor 2 care conine caspazele iniiatoare ale
apoptozei (2, 8, 9, 10);
3. Subfamilia caspazelor 3 care conine caspazele efectoare ale
apoptozei, respectiv caspazele 3,6,7.
Unele dintre ele sunt implicate n apoptoza (caspazele 2, 3, 6, 7, 8, 9,
i 10), n timp ce altele sunt implicate n activarea citokinelor proinflamatorii
(caspazele 1, 4, 5, 11, 12, 13) sau n diferenierierea keratinocitelor (caspaza
14).
Caspazele pro-apoptotice pot fi mprite n caspaze iniiatoare (2, 8,
9, i 10) i caspaze executoare sau efectoare (3, 6, i 7), clasificare realizat
n funcie de prodomeniile lor i de rolul lor n apoptoz.
Caspazele iniiatoare sunt cele care iniiaz cascada proteolitic
Odat activate, caspazele iniiatoare dobndesc capacitatea de a cliva
i activa caspazele efectoare.
Caspazele efectoare sunt responsabile pentru cea mai mare parte a
clivajelor proteinelor cheie care cauzeaz modificrile morfologice tipice ale
celulelor aflate n apoptoz.
Dup activare, caspazele efectoare vor prelucra un subset de proteine
celulare, printr-un numr limitat de scindri.
Astfel, caspazele cliveaz o serie de proteine, inclusiv cele implicate n
sinteza ADN-ului, clivajul i repararea acestuia, , proteine implicate n
translaie, reglarea ciclului celular, proteine citoskeletale i de adeziune (ex.
citokeratine, vimentina, lamininele, actina, Gas 2, plectina), proteinkinaze i
fosfataze, proteine implicate n semnalizarea proteinei G, proteinele Bcl-2 i
multe altele.
Prin urmare, activarea proteazelor, n special a caspazelor, este o
etap important n faza de declanare a apoptozei, responsabil de oprirea
ciclului celular i a dezorganizrii citoscheletului, de modificarea stratului
dublu lipidic membranar i va constitui o preetap n activarea
endonucleazelor.
Inhibarea caspazelor este realizat, n mod normal, de ctre proteine
IAP (inhibitoare ale apoptozei). Atunci cnd o celul primete un stimul
apoptotic, activitatea IAP este inhibat, dup ce proteinele mitocondriale
SMAC (activatori mitocondriali secundari ai caspazelor) sunt eliberate n
citosol. SMAC se leaga de IAP, i astfel, inhibnd inhibitorii, mpiedic
aceste proteine s opreasc procesul apoptotic.

164
 Cile activrii procaspazelor

n general, exist dou ci prin care pot fi activate procaspazele:

- calea intrinsec, controlat de proteinele superfamiliei Bcl-2, implic
frecvent eliberarea citocromului c mitocondrial i a altor proteine
apoptogenice (ex. proteinele Smac/DIABLO, Omi/HtrA2, EndoG i AIF);
- calea extrinsec, care i are originea n activarea receptorilor morii
de la suprafaa celular.

Calea intrinsec

Moartea celular programat este un proces activ, care necesit un

mare consum de energie i, n care, un rol esenial l au mitocondriile.
Membrana mitocondrial este inta i locul de aciune al proteazelor pro- i
antiapoptotice din familia Bcl.

Familia de proteine Bcl-2

Familia de proteine Bcl-2 cuprinde cel puin 20 membrii, dintre care
unii promoveaz apoptoza (membrii proapoptotici), n timp ce alii suprim
aceast form de moarte celular (membrii antiapoptotici).
Membrii proapoptotici ai familiei Bcl-2, reprezentai prin proteinele
Bax, Bad, Bim i Bak, trec de la alte organite la mitocondrii, ca rspuns la
stimulii apoptotici, unde ncurajeaz eliberarea factorilor apoptogenici (ex.
citocromul c) din compartimentul mitochondrial extern, n citosol.
Membrii antiapoptotici ai familiei Bcl-2 (care inactiveaz proteinele
proapoptotice) sunt reprezentai prin proteinele Bcl-2 i Bcl-XL i susin
supravieuirea celulei prin pstrarea integritii membranei mitocondriale.
Aceste proteine, fie c sunt pro- sau antiapoptotice, formeaz pori
care perturb transportul ionic transmembranar, cu scderea potenialului
electric membranar mitocondrial i cu eliberarea citocromului c n citosol.
Membrii proapoptotici pot induce permeabilitatea membranei
mitocondriale, care are ca rezultat eliberarea proteinelor solubile
intermembranare, n timp ce membrii antiapoptotici cum ar fi Bcl-2 prezerv
integritatea mitocondrial i, prin urmare, blochez potenialul de eliberare a
acestor proteine.
Raportul dintre numrul de molecule proapoptotice i numrul de
molecule antiapoptotice controleaz permeabilitatea membranar i, n
acelai timp, angajeaz celula, sau nu, n apoptoz.
n situaii fiziologice normale, membrana interna a mitocondriilor
exprim pe suprafaa ei proteina Bcl-2, cuplat cu o molecul a proteinei
Apaf-1, prevenind astfel eliminarea citocromului c din mitocondrie.
La apariia unor semnale negative endogene, Bcl-2 elibereaz
proteina Apaf-1, ceea ce cauzeaz o scurgere a citocromului c din
165
mitocondrie n citoplasm. n acest mod, mitocondria are abilitatea de a
induce apoptoza.
Citocromul c, mpreun cu Apaf-1 i ATP formeaz un complex cu
pro-caspaza 9 conducnd la activarea caspazei 9 i a cascadei caspazei.
Activarea secvenial a unei caspaze de ctre o alta, induce o
cascad de reacii proteolitice, care au ca rezultat digestia proteinelor
structurale din citoplasm i degradarea ADN-ului cromozomal.
Fragmentele celulare rezultate (corpii apoptotici) vor fi recunoscute de
macrofage i ulterior fagocitate.

Calea extrinsec
(calea activrii procaspazelor 8 i 10 prin intermediul receptorilor
morii)

Receptorii morii sunt molecule proteice de pe suprafaa celulelor, care

transmit semnale apoptotice iniiate de liganzii specifici ai morii. Aceti
receptori pot activa o cascad caspazic n cteva secunde de la legarea
ligandului. Receptorii aparin superfamiliei genei factorului necrozei tumorale.
Semnalele morii celulare, de tipul ligandului Fas (FasL) i a factorului
necrozei tumorale (TNF) -2, pot fi, n special, recunoscute de receptorii lor
corespunztori, de tipul receptorului Fas sau TNF (TNFR) -1, din membrana
plasmatic.
Cuplarea unui activator letal complementar (semnal negativ
exogen) de tipul TNF (limfotoxina) i fasL cu un receptor specific membranar
declaneaz activarea n citoplasm a caspazei 8 care, asemntor
caspazei 9, iniiaz o cascad de reacii proteolitice, finalizate cu apariia
corpilor apoptotici.
Factorul necrozei tumorale (TNF) este o molecul intercelular din
categoria citokinelor, alctuit din 157 aminoacizi, a crei aciune principal
este distrugerea celulelor tumorale, dar reprezint i mediatorul extrinsec
major al apoptozei.
TNF se prezint sub dou forme: TNF i TNF.
TNF este secretat de macrofage i are efect citotoxic pe celulele
tumorale, iar TNF este secretat de limfocitele T helper avnd activitate
similar cu TNF, crescnd totodat activitatea macrofagelor i leucocitelor
polimorfonucleare neutrofile.
Membrana celular are doua tipuri de receptori specializai pentru
TNF: TNF-R1 i TNF-R2. Legarea TNF de TNF-R1, urmat de cuplarea n
poriunea intracitoplasmatic a receptorului de o serie de proteine adaptor,
activeaz n final enzimele efectorii ale apoptozei care sunt caspazele. TNF-
R2 are un efect apoptotic mai mare dect TNF-R1, ceea ce denot existena
unui sinergism n aciunea acestor receptori.

166
 Fas (Apo-1 sau CD95) este un alt receptor membranar pentru
semnalele apoptotice extrinseci i aparine suprafamiliei receptorilor pentru
TNF. Receptorii de tip Fas sunt repartizai variabil pe diferitele tipuri de
celule. Astfel, exist o serie de celule care exprim abundent receptorii Fas,
cum sunt timocitele, hepatocitele, miocardiocitele, celulele pulmonare,
celulele ovariene, celulele foielor embrionare.
Ligandul (FasL) pentru receptorul Fas este o protein
transmembranar, puternic citotoxic pentru celulele care exprim pe
suprafaa lor receptorul Fas.
Sistemul Fas/FasL are un rol important n trei cazuri de apoptoz
fiziologic: apoptoza limfocitelor T activate de la sfritul rspunsului imun
(FasL se gsete numai pe limfocitele T activate, n timp ce Fas se gsete
pe numeroase tipuri de celule); distrugerea celulelor int infectate viral sau a
celulelor tumorale de ctre limfocitele T citotoxice (CTL) i limfocitele natural
killer NK; distrugerea celulelor inflamatorii din teritoriile privilegiate imunologic
cum ar fi ochiul.
Interaciunile dintre Fas si FasL conduc la formarea complexului de
semnale inductoare de moarte (DISC), care conine proteinele asociate
domeniului morii Fas (FADD = Fas associated death domain) i caspazele
8, respectiv 10. n unele tipuri de celule (tipul I), caspaza 8 procesat
activeaz, prin domeniul su CARD (caspaze recruitment domain), n mod
direct, ali membri ai familiei caspazelor i declaneaz executarea
apoptozei, n timp ce, n alte tipuri de celule (tipul II), DISC iniiaz un inel de
feed-back care va induce o eliberare crescnd de factori pro-apoptotici din
mitocondrie i activarea amplificat a caspazei 8.
ncepnd cu activarea TNF-R1 i Fas, echilibrul dintre membrii pro-
apoptotici (Bax, Bak sau Bad) i anti-apoptotici (Bcl-XL si Bcl-2) ai familiei
Bcl-2 este compromis. Homodimeri ai moleculelor precum Bak i Bax sunt
necesari permeabilizrii membranei mitocondriale, pentru a elibera activatorii
caspazelor. Modul in care sunt controlate Bax i Bak n condiii normale, n
celulele care nu sufer procese apoptotice, nu este deplin neles. Dar s-a
artat c o protein a membranei mitocondriale externe, VDAC2,
interacioneaz cu Bak pentru a menine acest efector apoptotic, potenial
letal, sub control. Cnd se recepioneaz semnalul morii, produii cascadei
de activare, precum tBid, Bim sau Bad, nlocuiesc VDAC2, Bak i Bax sunt
activai, membrana mitocondrial extern devine permeabil deoarece
membrii familiei Bcl-2 au un domeniu care formeaz pori, rezultnd
eliberarea activatorilor caspazelor, adica citocromul c. O dat cu acesta sunt
eliberate ns i alte molecule precum SMAC sau AIF.
Odat cu eliberarea citocromului c, acesta se leag de Apaf-1 i ATP,
care se leag apoi de pro-caspaza 9, crend un complex multi-proteic numit
apoptozom. Apoptozomul scindeaza aceasta pro-caspaza, eliberand forma
activa a caspazei 9, care va activa la randul ei caspaza 3.
Intregul proces necesita energie si un mecanism celular nu foarte distrus.
Daca deteriorarea celulara se afla intre anumite limite, celula poate porni
procesele incipiente ale apoptozei si se poate continua cu necroza.

167
 Trebuie mentionat, totusi, ca acele cai apoptotice care au fost descrise
sumar se supun unor mecanisme de reglare, si ca nu exista o relatie 1:1 intre
receptionarea TNF sau FasL si executarea completa a caii apoptotice. Fas,
spre exemplu, a fost implicat intr-un mod aparent ironic in proliferarea
celulara, prin cai care nu sunt inca complet elucidate. De asemenea, atat
Fas, cat si TNF-R1, declanseaza evenimente care activeaza factorul de
transcriptie nucleara kappa-B (NF-B). Acest factor induce expresia genelor
implicate in diverse procese biologice, printre care cresterea celulara,
moartea celulara, dezvoltarea celulara si raspunsul imun.
Apoptoza i cancerul
n cancerogenez, apoptoza joac un rol important. Inducerea
apoptozei are ca rezultat moartea celulelor iniiate, preneoplazice sau
neoplazice, prevenind apariia bolii. n caz contrar, blocarea morii celulare
programate favorizeaz apariia i dezvoltarea malignitii (Manolescu i
colab., 1997).
Unele virusuri productoare de cancer folosesc subterfugii pentru a
preveni apoptoza celulelor, pe care le transform. Ele fac celula gazd mult
mai rezistent la apoptoz, permind celulei gazd s-i continuie
proliferarea, datorit faptului c produc o protein similar Bcl-2.
Unele leucemii -celulare i limfoame exprim niveluri ridicate de
Bcl-2, blocnd astfel semnalele apoptotice pe care le pot primi.
n cazul melanomului (cel mai periculos cancer al pielii), celulele
canceroase evit apoptoza prin inhibarea genei care codific Apaf-1;
Unele celule canceroase (pulmonare i de colon) secret n
cantitate mare o molecul solubil capcan, care se leag la fasL,
nepermindu-i acesteia s se lege la receptorul specific (fas). Astfel, celulele
citotoxice CTL nu pot ucide celulele canceroase prin mecanismul
prezentat anterior;
Alte celule canceroase exprim niveluri ridicate de fasL i pot ucide
celulele citotoxice CTL-urile;

Concepte i noiuni de reinut

Apoptoza este una dintre numeroasele tipuri de moarte celular

programat, mecanism important att n dezvoltarea, ct i n homeostazia
structural a esuturilor adulte, pentru ndeprtarea celulelor care nu mai sunt
indispensabile, a celulelor infectate, transformate sau distruse.
n general, apoptoza nu se extinde pe arii celulare mari ci se
desfoar relativ punctiform implicnd o celul, sau un numr mic de celule.
O caracteristic important a apoptozei este faptul c celulele moarte prin
acest proces sunt eliminate rapid prin recunoaterea i fagocitarea lor de
ctre macrofage, fr alterri ale celulelor vecine i fr producerea reaciilor
inflamatorii.
Principala cauz care determin o celul s se sinucid este
retragerea semnalelor pozitive (necesare pentru supravieuirea celulei) i
primirea unor semnale negative care pot fi endogene (ex. nivelurile crescute
de oxidani), sau exogene (ex. radiaii ionizante, medicamente
chimioterapeutice, o serie de activatori ai morii, care includ factorul necrozei

168
tumorale TNF, limfotoxina sau factorul necrozei tumorale , ligandul fasL,
care se leag la receptorul celular de suprafa numit fas sau CD95).
Celulele care manifest fenomenul de apoptoz au de obicei o
morfologie caracteristic (se reduc n dimensiuni, pierd contactul cu celulele
nvecinate, prezint pe suprafaa lor protuberane, cromatina se
condenseaz iar, n final, nucleul i citoplasma se fragmenteaz i constituie
corpii apoptotici.
Activarea proteazelor, n special a caspazelor, este o etap
important n faza de declanare a apoptozei, responsabil de oprirea
ciclului celular i a dezorganizrii citoscheletului, de modificarea stratului
dublu lipidic membranar i va constitui o preetap n activarea
endonucleazelor.
Caspazele pot fi activate prin urmtoarele ci: calea intrinsec,
controlat de proteinele superfamiliei Bcl-2, implic frecvent eliberarea
citocromului c mitocondrial i a altor proteine apoptogenice i calea
extrinsec, care i are originea n activarea receptorilor morii de la suprafaa
celular.

ntrebri de autoevaluare:

1. ntre ce limite se ncadreaz durata de via a celulelor?

2. Care sunt principalele modificri morfologice care se manifest n
celula aflat n necroz?
3. Care este rolul funcional al apoptozei?
4. Care este morfologia caracteristic a celulelor aflate n apoptoz?
5. Care sunt principalii factori inductori ai apoptozei?
6. Care sunt cele dou ci ale activrii caspazelor?

169
 BIBLIOGRAFIE

1. Alberts, B. et. al., Molecular Biology of the Cell, Garland Publish Inc.,
1983.
2. Alberts, B. et. al., Molecular Biology of the Cell,.Garland, New York,
1990.
3. Allen, T.R., Hunter, W.J., Agrawal, D.K., Morphologycal and
biochemical characterization and analysis of apoptosis. Journal of
Pharmalogical and Toxicological Methods, 37, pag. 215-218, 1997.
4. Alessi, D.R., Deak, M., Casamayor, A., Caudwell, F.B., Morrice, N.,
Norman, D.G., Gaffney, P., Reese, C.B., MacDougall C.N., Harbison, D.,
Ashworth, A., Bownes, M., 3-Phosphoinositide-dependent protein-kinase-1
(PDK1): structural and functional homology with the Drosophila DSTPK61
kinase. Curr.Biol.7, pag. 776-789, 1997.
5. Allgeier, A., Laugwitz, J., Van Sande J., Spicher K., Dumont, J.E.,
Multiple G-protein couppling of the dog thyrotropin receptor. Mol.Cell
Endocrinol. 127, pag. 81-90, 1994.
6. Andersen, S.S., Spindle assembly and the art of regulating
microtubule dynamics by MAP and Stathmin/Op18. Trends Cell Biol, 10, 261-
267, 2000.
7. Apteanu, V., Dragomirescu, Tatiana, Grigoroiu, G., Granulocitul
neutrofil, Ed. Medical, Bucureti, 1983.
8. Arnal, Isabelle, Sasson, Ingrid, Tournebize, Regis, Dynamique du
fuseau: vers une cible anti-cancereuse. Medicine Sciences, 12, pag. 1227-
1235, 2002.
9. Ashekenezi, A.V.I., Vishya, M., Dixit, A., Death receptor: signaling and
modulation. Science, 282, pag. 1305-1308, 1998.
10. Bahloul A, Chevreux G, Wells AL, et al. The unique insert in myosin
VI is a structural calcium-calmodulin binding site. Proc Natl Acad Sci USA
2004 ; 101 : 4787-92.
11. Belmont, L.D., Hyman, A.A., Sawin, K.E., Mitchison, T.J., Real-time
visualization of cell cycle-dependent changes in cytoplasmatic extracts. Cell,
62, pag. 579-589, 1990.
12. Belmont, L.D., Mitchison, T.J., Identification of a protein that interacts
with tubulin diimers and increases the catastrophe rate of microtubules. Cell,
84, pag. 623-631, 1996.
13. Bellemere Gaelle, Otto Von Stetten, Thierry Oddos, Un nouveau role
pour l aquaporine 3. Medicine Science, 21, pag. 24-26, 2005.
14. Benga, Gh., Biologie celular i molecular, d. Dacia, Cluj-Napoca,
1985.
15. Berridge, M.J., Cellular control through interactions between cyclic
nucleotides and calcium. Adv.Cyclic.Nucleotide.Protein phosphorylation.
Res.17, pag. 329-335, 1984.
16. Bockaert, J., Claeysen, C., Becamel, C., Pinochle S., Dumuis, A., G
protein coupled receptors: dominant players in cell-cell comunication.
Int.Rev.Cytol.212, pag. 63-132, 2002.
170
17. Botrel, S., Cotea, C., Gaboreanu, M., Histologie i Embriologie, Ed.
Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1982.
18. Buck, L., Axel, R., A novel multigene family may encode odorant
receptors: a moleculars basis for odor recognition. Cell 65, pag. 175-187,
1991.
19. Carlier, M.F., Role of nucleotide hydrolysis in the dynamics of actin
filaments and microtubules. Inr rev Cytol, 115, pag. 139-170, 1989.
20. Cassimeris, L., The oncoprotein 18/stathmin family of microtubule
destabilizers. Curr Opin Cell Biol, 14, pag. 18-24, 2002.
21. Cpria, Rodica, Biochimie animal, Ed. Mirton, Timioara, 2000.
22. Coman, N., Cornil, N., Embriologie veterinar, Ed. Romnia de
Mine, Bucureti, 1999.
23. Coureux PD, Wells AL, Mntrey J, et al. A structural state of the
myosin V motor without bound nucleotide. Nature 2003 ; 425 : 419-23.
24. Cruce, M., Cruce, Roxana, Mixich, F., Ardelean, A., Zaharia, Cornelia,
Citoscheletul i motilitatea celular, Ed., Aius, Craiova, 1998.
25. Cruce, M., Cruce, Roxana, Biologia molecular a semnalizrii celulare,
Ed. Aius, Craiova, 1995.
26. Cohen, J.J., Duke, R.C., J. Immunol., 132, pag. 38-42, 1984.
27. Cotrutz, Carmen, Kocsis , Maria, Ionescu, C.R., Lucrri practice de
biologie celular, Ed. Tehnica, Chiinu, 1994.
28. Cotrutz, Carmen, Cotrutz, C., Celulele entero-endocrine, Ed.
Apollonia, Iai, 1998.
29. Denning, M.F., Epidermal keratinocytes: regulation of multiple cell
phenotypes by multiple protein kinase C isoforms. Int J. Biochem. Cell Biol.,
36, pag. 1141-1146, 2004.
30. Desai, A., Mitchison, T., Microtubule polymerisation dynamics. Anuu
Rev Cell Dev Biol, 13, pag. 83-117, 1997.
31. Diculescu, I., Onicescu, Doina, Histologie medical, Ed. Medical,
Bucureti, 1987.
32. Dulac, C., Axel, R., Expression of candidate pheromone receptor
genes in vomeronasal neurons. Chem Senses 23, pag. 467-475, 1998.
33. Fadok, V.A., Bratton, D.l., Frasch, S.C., Warner, M.L., Henson, P.M.,
Cell Death Differ., 5, pag. 551-562, 1998.
34. Fernandez, L.M., Puett, D., Identification of amino acid residues in
transmembrane helices VI and VII of the lutropin-choriogonadotropin receptor
involved in signaling. Biochemistry 35, pag. 3986-3993, 1996.
35. Fodor, O., Biologie molecular i medicina modern, Ed. Medical,
Bucureti, 1969.
36. Frsinel, N., Verde, Doina, Biologie celular i molecular, Ed.
Mirton, Timioara, 1996.
37. Gavril, L., Lungeanu, Agripina, Rogoz, I., Citogenetic molecular i
evoluionist, Ed. tiinific i Enciclopedic, Bucureti, 1989.
38. Giannakis, C., Forbes, I.J., Zalewski, P.D., Biochem. Biophys.Res.
Commun., 181, pag. 915-920, 1991.
39. Gilbert, S.F., Developmental Biology. Fifth Edition. Sinauer.
Sunderland, MA., 1997.
40. Goulding, E.H., Ngai, J., Kramer, R.H., Colicos, S., Axel, R.,
Siegelbaum, S.A., Chess, A., Molecular cloning and single-channel
171
properties of the cyclic nucleotide-gated channel from catfish olfactory
neurons. Neuron 8, pag. 45-58, 1992.
41. Graham, W. Et. al. Mitotic disassembly of the mammalian Golgi
apparatus. Trend in Cell Biology, Vol. 5, No 11, ISSN 0962-8924.
42. Guchellar, H.J., Vermes, A., Haanen, C., Apoptosis: molecular
mecanism and implications for cancer chemotherapy. Pharm., World Sci.,
19(3), pag. 119-125, 1997.
43. Hafez, E.S.E., Human reproductive physiology, vol.5, Ann. Arbor.
Mich., Ann. Arbor. Science Pubs., 1978.
44. Harra, M., Ma T, Verkman, A.S., Selectively reduced glycerol in skin of
aquaporin-3 deficient mice may account for impaired skin hydration, elasticity
and barrier recovery. J.Biol.Chem., 277, pag. 46616-46621, 2002.
45. Heald, R., Walkzar, C.E., Microtubule based motor function in mitosis.
Curr. Opin. Struct. Biol., 9, pag. 268-274, 1999.
46. He, L., Orr, G.A., Horwitz, S.B., Novel molecules that interact with
microtubules and have functional activity similar to Taxol. Drug Discov.
Today, 6, pag. 1153-1164, 2001.
47. Herrada, G., Dulac, C., A novel family of putative pheromone
receptors in mammals with a topographically organized and sexually
dimorphic distribution. Cell 90, pag. 763-773, 1997)
48. Hendzel, M.J., Nishioka, W.K., Raymond, Y., Chromatin condensation
is not associated with apoptosis. Journal of Biological Chemistry, 273 (38),
pag. 24470-24480, 1998.
49. Haridas, V., Darnay, B.G., Natarajan, K., Overexpression of the p60
TNF receptor to TNF-dependent apoptosis. J. Of Immunology, 160 (7), pag.
3152-3162, 1980.
50. Ionescu-Varo, M., Biologie celular, Ed. Didactic i Pedagogic,
Bucureti, 1976.
51. Jacobson, M.D., Burne, J.F., Raff, M.C., Embo. J., 13, pag. 1899-
1910., 1994.
52. Ji, T.H., Grossmann, M., Ji, I., G-protein-coupled receptorss. I.
Diversity of receptor-ligand interactions. J.Biol.Chem. 273, pag. 17299-
17302, 1998.
53. Jordan, M.A., Wendell, K., Gardiner, S., Derry, W.B., Copp, H.,
Wilson, L., Mitotic block induced in HeLa cells by low concentrations of
paclitaxel (Taxol) results in abnormal mitotic exit and apoptotic cell death.
Cancer Res., 56, pag. 816-825, 1996.
54. Kaufmann, S.H., Cancer Res. , 49, 5870-5878, 1989.
55. Karki, S., Holzbaur, ELG., Cytoplasmatic dynein and dynactin in cell
division and intyracellular transport. Curr. Opin. Cell. Biol., 11, pag. 45-53,
1999.
56. Kaupmann, K., Huggel, K., Heid, J., Flor, P.J., Bischoff, S., Mickel, J.,
Mc Master, G., Angst, C., Bittiger, H., Froestl, W., Bettler, B., Expression
cloning of GABA (B) receptors uncovers similarity to metabotropic glutamate
receptors. Nature 386, pag. 239-346, 1997.
57. Kawasaki, H., Springett, G.M., Mochizuki, N., Toki, S., Nakaya, M.,
Matsuda, M., Housman, D.E., Graybiel, A.M., A family of cAMP-binding
proteins that directly activate Rap1. Science 282, pag. 2275-2279, 1998.

172
58. Kerr, J.F.R., Winterford, C.M., Harmon, B.V., Apoptosis; its
significance in cancer and cancer therapy. Cancer, 73 (8), 2013-2025, 1994.
59. Kerr, J.F.R., Searle, J., Harmon, B., Apoptosis in perspective on
mamalian cell death, Oxford Univ. Press., pag. 93-128, 1987.
60. Knight, C.R., Recs, R.C., Griffin, M., Biochim. Biophis., Acta, 1096,
pag. 312-318, 1991.
61. Lazebnik, Y.A., Cole, S., Cooke, A., Nelson, W.G., Earnshaw, C., J.
Cell Biology, 123, pag. 7-22, 1993.
62. Le Peuch, C., Doree, M., Le temps du cycle cellulaire. Med.Sci. 16,
pag. 461-468, 2000.
63. Labouesse, M., C. Elegans, les promesses d,un petit animal
intelligent, Small is beautiful, Med. Sci., 1994, 10, pag. 337-341.
64. Magnuson carina, Vaux, D.L., Signalling by CD95 and TNF receptors:
not only life and death. Imunology and Cell Biology, 77, pag. 41-46, 1999.
65. Manolescu, N., Alexianu, Marilena, Blceanu-Stolnici, C., Iosef,
Cristina, Voicule, N., Aspecte de patologie celular comparat, Ed. Ceres,
Bucureti, 1997.
66. Mitchison, T., Kirschner, M., Dynamic instability of microtubule growth.
Nature, 312, pag. 237-242, 1984.
67. Mixici F., Cruce, M., Ardelean, A., Toici Aftina, Berceanu Vduva, M.,
Vduva Delia Berceanu, Principii experimentale n biologia celular, Ed.
Sitech, Craiova, 1997.
68. Mixich, F., Biologie molecular, Ed. Sitech, Craiova, 1997.
69. Mixich, F., Ardelean, A., Biologie molecular, Ed. Medical
Universitar, Craiova, 2002.
70. Mossiman, W., Kohler, T., Zytologie, Histologie und mikroskopische
anatomie der haussaugetiere, Ed. Verlag Paul Parey, Berlin und Hamburg,
1990.
71. Murray, N.R., Fields, A.P., Phosphatidylglycerol is a physiologic
activator of nuclear protein kinase C. J. Biol. Chem., 273, pag. 11514-11520,
1998.
72. Natoli, G., Constanzo, A., Guido, F., Moretti, F., Levrero, M., Apoptotic
pathwais of TNF signaling. Biochemical Pharmacology, 56 (8), pag. 915-920,
1998.
73. Noh, D.Y., Shin, S.H., Rhee, S.G., Phosphoinositide-specific
phospholipase C and mitogenic signaling. Biochim. Biophys.Acta 1242, pag.
99-113, 1995.
74. Ohkura, H., Garcia, M.A., Toda, T., Dis1/TOG universal microtubule
adaptors: one MAP for all? J. Cell Sci, 114, pag. 3805-3812, 2001.
75. Olinescu, A., Elemente de imunologie comparat, Ed., Ceres,
Bucureti, 1988.
76. Ollivier, m., Gall, L., La cellula, Masson, Ed., 1990.
77. Pantaloni, C., Brabet, P., Bilanges, B., Dumuis, A., Houssami, S.,
Spengler, D., Bockaert, J, Journot, L., Alternative splicing in the N-terminal
extracellular domain of the pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide
(PACAP) receptor modulates receptor selectivity and relative potencies of
PACAP-27 and PACAP-38 in phospholipase C activation. J.Biol.Chem.271,
22146-22151.

173
78. Punescu, V., Tatu, C., Stnescu, Diana, Medrea, D., Imunologie,
Concepte fundamentale i aplicative, Ed. Helicon, Timioara, 1996
79. Pcal, N., Biologia reproducerii animalelor, Ed. Mirton, Timioara,
2000.
80. Pines, J., Cyclins and cyclin-dependent kianse : a biochemical view.
Biochem J, 308:679-711, 1995.
81. Raff, M.C., Social controls on cell survival and cell death. Nature 356.
397-400, 1992.
82. Raffo, A.J., Perlman, H., Chen, M.W., Day, M.L., Streitman, J.S.,
Buttyan, R., Overexpression of bcl-2 protects prostate cancer cells from
apoptosis in vitro and confers resistance to androgen depletion in vivo.
Cancer Res 55: 4438-4445, 1995.
83. Raica, P., Genetica general i uman, Ed. Humanitas, Bucureti,
1997.
84. Rafael, E., Carazo-Salas, Stfephane Brunet, Asemblage du fuseau de
division: le secret des chromosomes. Medicine Sciences, 18, pag. 1219-
1226, 2002.
85. Roland, J.C., Szollosi, A., Szollosi, D., Atlas de biologie cellulaire,
Masson, Ed., 1982.
86. Rosenfeld SS, Fordyce PM, Jefferson GM, et al. Stepping and
stretching : how kinesin uses internal strain to walk processively. J Biol Chem
2003 ; 278 : 18530-6.
87. Rustin, P., Munnich, A., Rottig, Agnes, Dix ans d exploration des
maladies mitochondriales: une collaboration modele entre chercheures et
cliniciens, Medicine sciences, nr. 37-44, Vol. 12, 1996.
88. Sablin, H.P., Kinesis and microtubules: their structures and motor
mechanisms. Curr. Opin. Cell. Biol. 12, pag. 35-41, 2000.
89. Savill, J., Fadok, V., Nature, pag. 784-788, 2000.
90. Schuyler, S.C., Pellman, D., Microtubule plus-end-tracking proteins:
the end is just the beginning. Cell, 105, pag. 261-267, 2001.
91. Sobel, A., Stathmin a relay phosphoprotein for multiple signal
transduction? Trends Biochem Sci, 16, pag. 301-305, 1991.
92. Sougrat, R., Norand, M., Gondran, C., Functional expression of AQP3
in human skin epidermis and reconstructed epidermis. J. Invest. Dermatol.,
118, pag. 678-685, 2002.
93. Steller, H., Mechanism and genes of cellular suicide. Science 267:
1445-1449, 1995.
94. Strader, C.D., Fong, T.M., Graziano, M.P., Tota, N.R., The family of G-
protein-coupled receptors. FASEB J. 9, pag. 745-754, 1995.
95. incai, Mariana, Biologie celular, Ed. Mirton, Timioara, 1996.
96. incai, Mariana, Biologie celular i molecular la animale, Ed. Mirton,
Timioara, 1997.
97. incai, Mariana, Biologie celular, Ed. Mirton, Timioara, 1998.
98. incai, Mariana, Marcu, A., Biologie tisular, Ed. Mirton, Timioara,
1993.
99. Tarba, C., Biomembrane, transport i energetica celular, Ed.
Academiei Romne, 1996.
100. Trumpp-Kallmeyer, S., Chini, B., Mouillac, B., Barberis, C., Hoflack, J.,
Hibert, M., Towards understanding the role of the first extracellular loop for
174
the binding of peptide hormones to G-protein coupled receptors. Pharm. Acta
Helv. 70, pag. 255-262, 1995.
101. Tma, V., erban, M., Cotru, Maria, Biochimie medical veterinar,
Ed. Didactic i Pedagocic, Bucureti, 1981.
102. Ucker, D.S., Mayer, J., Obermuller, P.S., J. Immunol., 149, pag. 1583-
1592, 1992
103. Ulrich, C.D., Holtmann, M., Miller, L.J., Secretin and vasoactive
intestinal peptide receptors: members of a unique family of G protein-coupled
receptors. Gastroenterology 114, pag. 382-397, 1998.
104. Vannuffel, P., Di Giambattista, Cocitto, C., The role of rRNA bases in
the interaction of peptidyltransferaze inhibitors with bacterial ribosomes. J.
Biol. Chem. 267, 1992b.White, K. Et. al. Genetic control of programmed cell
death in Drosophila. Science 264: 677-683, 1994.
105. Verde, F., Dogterom, M., Stelzer, E., Karsenti, E., Leibler, S., Control
of microtubule dynamics and leght by cyclin A and cyclin B-dependent
kinases in Xenopus egg extracts. J Cell Biol, 118, pag. 1097-108., 1992.
106. Walczak, C.E., Vernos, I., Mitchison, T.J., Karsenti, E., Heald, R., A
model for the proposed roles of different microtubule based motor proteins in
establishing spindle bipolarity. Curr Biol., 8, pag. 903-913, 1998.
107. Wordeman, L., Mitchison, T.J., Identification and partial
characterization of mitotic centromere-associated kinesin, a kinesin related
protein that associates with centromeres during mitosis. J. Cell Biol, 128,
pag. 95-104, 1995.
108. Wood, K.W., Cornwell, W.D., Jackson, J.R., Past and future spindle as
an oncology target. Curr. Opin. Pharmacol, 1, pag. 370-377, 2001.
109. Wyllie, A.H., Nature, 284, 555-556, 1980.
110. Zalewski, P.D., Forbes, I.J., Betts, W.H., Biochem.J., 296, pag. 403-
408, 1993.
111. Zheng, X., Bollinger Bollag, W., Aquaporin 3 colocates with
phospholipase D2 in caveolin-rich membrane microdomains and is
downregulated upon keratinocyte differentiation. J. Invest. Dermatol., 121,
pag. 1487-1495, 2003.
112. Yildiz A, Park H, Safer D, et al. Myosin VI steps via a hand-over-hand
mechanism with its lever arm undergoing fluctuations when attached to actin.
J Biol Chem 2004 ; 279 : 37223-6.
113. http//www.sciencebio.com/FacBioCell/Cytosquelette/FBCMicrofilament
s.htm
114. http//www.snv.jussieu.fr/vie/dossiers/contractionmuscle/contractmuscl
e.htm
115. http//www.sciencebio.com/FacBio/BioCell/Membrane/FBMR9.htm
116. http//www.sciencebio.com/FacBio/BioCell/Mito/FBMiS.htm
117. http//nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1999/press-
fr.html

175