Microscoape de ultimă

generație.
Eleva Iordan Laura
Clasa a IX a E
 Microscoape optice
Microscopul optic a fost un instrument standard atat in domeniul stiintei vietii, cat si in stiinta
materialelor pentru mai mult de un secol si jumatate. Pentru a utiliza acest instrument optic in mod
economic si eficient, va este util sa intelegeti elementele de baza ale opticii, in special componentele
esentiale, care fac parte din fiecare microscop.
Cum functioneza un microscop optic
Microscopul optic mareste un obiect in doua etape. In ambele etape se folosesc sisteme optice care
actioneaza ca lentile convergente. O sa va prezentam, in continuare, principiul dupa care functioneaza
un microscop.

Primul pas este de a pozitiona obiectul intre punctul de focalizare unic si cel dublu. Rezultatul este o
imagine reala marita. Aceste lentile microscopice (in realitate, un sistem optic este format din mai
multe lentile) se numeste obiectiv.

Apoi, un al doilea obiectiv este folosit pentru a ridica aceasta imagine exact in punctul focal din fata sa.
Ca rezultat, se genereaza un fascicul de raze paralele, dar nu o imagine reala. Acest element optic se
numeste ocular. Ochiul uman este capabil sa prelucreze acest fascicul paralel si sa genereze o imagine
pe retina sa.

In cele din urma, se ajunge la ceea ce se poate astepta de la un microscop: obiectele sa poata fi
observate la o scara marita cu detalii nedetectabile cu ochiul liber.
Un indiciu pentru o utilizare practica este ca ochiul sa fie plasat la o distanta scurta deasupra
microscopului. Tehnic vorbind, pupila ochiului nostru trebuie sa fie situata in acelasi loc ca si pupila de
iesire a microscopului. Aceasta lentila de iesire poate fi usor de vazut atunci cand intensitatea luminii
care vine de la iluminarea microscopului este crescuta. Acesta este locul ingust luminos, vizibil de
deasupra ocularului.

Pozitionarea corecta devine deosebit de importanta atunci cand vizualizarea se face cu ambii ochi, prin
intermediul unui tub binocular. Distanta dintre cele doua oculare trebuie sa fie ajustata pentru a se
potrivi cu precizie la distanta ochilor.

Cum putem fotografia imaginile microscopice create de un microscop optic?

Rezultatul unui microscop optic este un fascicul de raze paralele si, de aceea, in primul rand trebuie
produsa o imagine reala. Din fericire, camerele digitale compacte standard includ o lentila (denumita
obiectiv) la fel ca ochiul nostru. Acest obiectiv poate face fata obiectelor aflate la distante foarte mari.
Fotografii numesc aceasta distanta „infinita”. In alti termeni: razele acestor obiective ajung la noi intr-un
mod paralel.
Atunci cand se introduce un aparat foto compact in spatele ocularului de la microscop vom putea
fotografia prin microscop. Pentru a evita dezamagirea, trebuie sa tinem cont de faptul ca rezultatele
obtinute cu aceasta combinatie sunt foarte limitate. Acest lucru este cauzat de faptul ca proiectarea
optica a camerelor compacte nu au microscoape in minte. Mai multe tipuri de dimensiuni (diametre,
distante) limiteaza utilizarea practica. Prin urmare, pentru anumite aplicatii pot fi folosite camerele
digitale dedicate, concepute pentru conditiile speciale ale microscoapelor optice.
 NSOM
+Microscopia optică de scanare în câmp aproape (NSOM) sau microscopia
optică de scanare în câmpul apropiat (SNOM) este o tehnică de microscopie
pentru investigarea nanostructurii care rupe limita de rezoluție a câmpului
îndepărtat prin exploatarea proprietăților undelor evanescente. În SNOM,
lumina laser de excitație este focalizată printr-o deschidere cu un diametru
mai mic decât lungimea de undă de excitație, rezultând un câmp evanescent
(sau câmp aproape) pe partea îndepărtată a diafragmei. Când eșantionul
este scanat la o mică distanță sub diafragmă, rezoluția optică a luminii
transmise sau reflectate este limitată doar de diametrul diafragmei. În
special, s-au demonstrat rezoluția laterală de 20 nm și rezoluția verticală de
2-5 nm.

+Ca și în microscopia optică, mecanismul de contrast poate fi ușor adaptat

pentru a studia diferite proprietăți, cum ar fi indicele de refracție, structura Diagramă care ilustrează optica câmpului apropiat,
chimică și stresul local. Proprietățile dinamice pot fi, de asemenea, studiate la cu difracția luminii provenind de la sonda de fibră
o scară sub-lungime de undă folosind această tehnică. NSOM, care arată lungimea de undă a luminii și
câmpul apropiat.

+NSOM / SNOM este o formă de microscopie cu sondă de scanare.

Rezoluția minimă (d) pentru componenta optică este astfel limitată de dimensiunea
diafragmei sale și exprimată prin criteriul Rayleigh:

Aici, λ0 este lungimea de undă în vid; NA este diafragma numerică pentru componenta
optică (maxim 1,3-1,4 pentru obiectivele moderne cu un factor de mărire foarte mare).
Astfel, limita de rezoluție este de obicei în jurul valorii de λ0 / 2 pentru microscopia optică
convențională.

Acest tratament presupune doar lumina difractată în câmpul îndepărtat care se propagă fără
restricții. NSOM folosește câmpuri evanescente sau care nu se propagă, care există doar
lângă suprafața obiectului. Aceste câmpuri transportă informații spațiale de înaltă frecvență
despre obiect și au intensități care scad exponențial cu distanța față de obiect. Din această
cauză, detectorul trebuie plasat foarte aproape de eșantion în zona câmpului apropiat, de
obicei câțiva nanometri. Ca rezultat, microscopia în câmp apropiat rămâne în primul rând o
tehnică de inspecție a suprafeței. Detectorul este apoi rasterizat pe eșantion folosind o etapă
piezoelectrică. Scanarea se poate face fie la o înălțime constantă, fie cu înălțime reglată,
utilizând un mecanism de feedback.

Primul SEM al lui M. von Ardenne
SEM
+Microscop electronic cu scanare (SEM) este un tip de microscop electronic care produce
imagini ale unui eșantion prin scanarea suprafeței cu un fascicul focalizat de electroni.
Electronii interacționează cu atomi în eșantion, producând diverse semnale care conțin
informații despre suprafață topografie și compoziția probei. Fasciculul de electroni este
scanat într-un scanare raster model, iar poziția fasciculului este combinată cu intensitatea
semnalului detectat pentru a produce o imagine. În cel mai comun mod SEM, electroni
secundari emise de atomii excitați de fasciculul de electroni sunt detectați cu ajutorul unui
detector secundar de electroni (Detector Everhart-Thornley). Numărul de electroni
secundari care pot fi detectați și, astfel, intensitatea semnalului, depinde, printre altele, de
topografia specimenului. Unele SEM pot obține rezoluții mai mari de 1 nanometru.
+Eșantioanele sunt observate în vid ridicat într-un SEM convențional sau în condiții de vid
scăzut sau umede în presiune variabilă sau SEM de mediu și la o gamă largă de
temperaturi criogenice sau ridicate cu instrumente specializate.
+Principii și capacități
+Semnalele utilizate de un SEM pentru a produce o imagine rezultă din interacțiunile
fasciculului de electroni cu atomii la diferite adâncimi din eșantion. Sunt produse diferite
tipuri de semnale, inclusiv electroni secundari (SE), reflectat sau electroni împrăștiați înapoi
(ESB), raze X și lumină caracteristice (catodoluminescență) (CL), curentul absorbit (curentul
specimenului) și electronii transmiși. Detectoarele secundare de electroni sunt
echipamente standard în toate SEM-urile, dar este rar ca o singură mașină să aibă
detectoare pentru toate celelalte semnale posibile.
Electronii secundari au energii foarte mici de ordinul a 50 eV, ceea ce le limitează cale liberă medie în
materie solidă. În consecință, SE-urile pot scăpa doar din primii câțiva nanometri ai suprafeței unui
eșantion. Semnalul de la electronii secundari tinde să fie foarte localizat la punctul de impact al
fasciculului de electroni primari, făcând posibilă colectarea imaginilor suprafeței probei cu o rezoluție
mai mică de 1 nm. Electronii dispersați înapoi (ESB) sunt electroni cu fascicul care sunt reflectați din
eșantion de către împrăștiere elastică. Deoarece au o energie mult mai mare decât SE-urile, acestea apar
din locații mai adânci din specimen și, în consecință, rezoluția imaginilor ESB este mai mică decât
imaginile SE. Cu toate acestea, ESB sunt adesea utilizate în SEM analitice, împreună cu spectrele realizate
din razele X caracteristice, deoarece intensitatea semnalului ESB este puternic legată de numărul atomic
(Z) al specimenului. Imaginile ESB pot furniza informații despre distribuția, dar nu identitatea, a
diferitelor elemente din eșantion. În eșantioanele compuse în principal din elemente ușoare, cum ar fi
specimenele biologice, imaginea ESB poate imagina aur coloidal imuno-etichete cu un diametru de 5
sau 10 nm, care altfel ar fi dificil sau imposibil de detectat în imaginile electronice secundare.
Caracteristică Razele X. sunt emise atunci când fasciculul de electroni elimină un electron înveliș interior
din eșantion, provocând o electron cu energie superioară pentru a umple coaja și a elibera energie. Volumul interacțiunii electron-
Energia sau lungimea de undă a acestor raze X caracteristice pot fi măsurate prin Spectroscopie cu raze materie și tipurile de semnal
X cu dispersie energetică sau Spectroscopie cu raze X dispersivă în lungime de undă și utilizate pentru a generate
identifica și măsura abundența elementelor din eșantion și pentru a cartografia distribuția acestora.

Datorită fasciculului de electroni foarte îngust, micrografiile SEM au o mare adancimea terenului oferind
un aspect caracteristic tridimensional util pentru înțelegerea structurii suprafeței unui eșantion. Acest
lucru este exemplificat prin micrografia polenului prezentată mai sus. Este posibilă o gamă largă de
măriri, de la aproximativ 10 ori (aproximativ echivalent cu cel al unui obiectiv puternic de mână) până la
peste 500.000 de ori, de aproximativ 250 de ori limita de mărire a celor mai bune microscopii cu lumină.
 TEM/HRTEM
+Microscopia electronică cu transmisie de înaltă rezoluție este un mod imagistic al microscopilor
electronici cu transmisie specializată, care permite imagistica directă a structurii atomice a
probelor. Este un instrument puternic pentru a studia proprietățile materialelor la scară atomică,
cum ar fi semiconductorii, metalele, nanoparticulele și carbonul legat de sp2 (de exemplu, grafen,
nanotuburi C). În timp ce acest termen este adesea folosit și pentru a se referi la microscopia
electronică de transmisie cu scanare de înaltă rezoluție, în cea mai mare parte în modul câmp
întunecat inelar cu unghi înalt, acest articol descrie în principal imagistica unui obiect prin
înregistrarea distribuției bidimensionale a amplitudinii undei spațiale în planul imaginii în
analogie cu un microscop cu lumină „clasic”. Pentru dezambiguizare, tehnica este denumită
adesea microscopie electronică cu transmisie a contrastului de fază. În prezent, cea mai mare
rezoluție punctuală realizată în microscopia electronică cu transmisie a contrastului de fază este
de aproximativ 0,5 ångströms (0,050 nm). La aceste scări mici, atomii individuali ai unui cristal și
defectele acestuia pot fi rezolvate. Pentru cristalele tridimensionale, poate fi necesar să
combinați mai multe vederi, luate din unghiuri diferite, într-o hartă 3D. Această tehnică se
numește cristalografie electronică.

+Una dintre dificultățile cu microscopia electronică cu transmisie de înaltă rezoluție este aceea că
formarea imaginii se bazează pe contrastul de fază. În imagistica cu contrast de fază, contrastul
nu este interpretabil intuitiv, deoarece imaginea este influențată de aberații ale lentilelor
imagistice din microscop. Cele mai mari contribuții pentru instrumentele necorectate provin de
obicei din defocus și astigmatism. Acesta din urmă poate fi estimat din așa-numitul model de
inel Thon care apare în modulul transformatei Fourier al unei imagini a unui film subțire amorf.
Contrastul unei imagini de microscopie electronică cu transmisie de înaltă rezoluție apare din interferența din planul de
imagine al undei electronice cu ea însăși. Datorită incapacității noastre de a înregistra faza unei unde electronice, este
înregistrată doar amplitudinea în planul imaginii. Cu toate acestea, o mare parte din informațiile de structură ale
eșantionului sunt conținute în faza undei electronice. Pentru a-l detecta, aberațiile microscopului (cum ar fi defocusul)
trebuie să fie reglate într-un mod care să transforme faza undei la planul de ieșire al specimenului în amplitudini în
planul imaginii.

Interacțiunea undei electronice cu structura cristalografică a probei este complexă, dar se poate obține cu ușurință o
idee calitativă a interacțiunii. Fiecare electron imagistic interacționează independent cu proba. Deasupra eșantionului,
valul unui electron poate fi aproximat ca o undă plană incidentă pe suprafața eșantionului. Pe măsură ce pătrunde în
probă, este atras de potențialele atomice pozitive ale nucleelor ​atomice și se canalizează de-a lungul coloanelor
atomice ale rețelei cristalografice (modelul stării s ). În același timp, interacțiunea dintre unda electronică în diferite
coloane atomice duce la difracția lui Bragg. Descrierea exactă a împrăștierii dinamice a electronilor într-o probă care nu
satisface aproximarea obiectelor de fază slabă, care este aproape toate probele reale, rămâne în continuare sfântul
graal al microscopiei electronice. Cu toate acestea, fizica împrăștierii electronice și formarea imaginii microscopului
electronic sunt suficient de bine cunoscute pentru a permite simularea exactă a imaginilor microscopului electronic.

Ca rezultat al interacțiunii cu o probă cristalină, unda de ieșire a electronilor chiar sub eșantionul φe (x, u) în funcție de Imagini HREM simulate
coordonata spațială x este o suprapunere a unei unde plane și o multitudine de fascicule difractate cu planuri diferite pentru GaN [0001]
frecvențe spațiale u (frecvențele spațiale corespund unghiurilor de împrăștiere sau distanțelor razelor de la axa optică
într-un plan de difracție). Schimbarea de fază φe (x, u) în raport cu vârfurile de undă incidente la locația coloanelor
atomice. Unda de ieșire trece acum prin sistemul de imagistică al microscopului, unde suferă o schimbare de fază
suplimentară și interferează ca unda de imagine în planul de imagine (în cea mai mare parte un detector de pixeli
digitali ca o cameră CCD). Este important să ne dăm seama că imaginea înregistrată NU este o reprezentare directă a
structurii cristalografice a probelor. De exemplu, intensitatea ridicată poate indica sau nu prezența unei coloane
atomice în acea locație precisă (vezi simularea). Relația dintre unda de ieșire și unda de imagine este una foarte
neliniară și este o funcție a aberațiilor microscopului. Este descris de funcția de transfer al contrastului.
AFM
Microscopia forței atomice (AFM) sau microscopia forței de scanare (SFM) este un tip de microscopie cu
sondă de scanare (SPM) cu rezoluție foarte înaltă, cu rezoluție demonstrată în ordinea fracțiilor unui
nanometru, de peste 1000 de ori mai bună decât difracția optică -limită.
AFM are trei abilități majore: măsurarea forței, imagistica topografică și manipulare.

În măsurarea forței, AFM-urile pot fi utilizate pentru a măsura forțele dintre sondă și probă în funcție de
separarea reciprocă a acestora. Acest lucru poate fi aplicat pentru a efectua spectroscopia de forță,
pentru a măsura proprietățile mecanice ale probei, cum ar fi modulul Young al probei, o măsură a
rigidității.
Un AFM generează imagini prin
scanarea unui mic consolă pe
Pentru imagistică, reacția sondei la forțele pe care o impune proba poate fi utilizată pentru a forma o suprafața unui eșantion. Vârful
imagine a formei tridimensionale (topografie) a unei suprafețe a probei la o rezoluție ridicată. Acest ascuțit de la capătul consolului
lucru se realizează prin scanarea raster a poziției probei în raport cu vârful și înregistrarea înălțimii intră în contact cu suprafața,
sondei care corespunde unei interacțiuni constante probă-probă (pentru mai multe detalii, consultați îndoind consola și schimbând
secțiunea imagistică topografică în AFM). Topografia suprafeței este de obicei afișată ca un complot cantitatea de lumină laser
pseudocolor. Deși publicația inițială despre microscopia forței atomice de către Binnig, Quate și Gerber reflectată în fotodiodă. Înălțimea
în 1986 a speculat despre posibilitatea realizării rezoluției atomice, provocările experimentale profunde consolului este apoi reglată pentru
trebuiau depășite înainte ca rezoluția atomică a defectelor și a marginilor treptelor în condiții a restabili semnalul de răspuns,
ambientale (lichide) să fie demonstrată în 1993 de Ohnesorge și Binnig. Adevărata rezoluție atomică a
rezultând înălțimea măsurată în
suprafeței de siliciu 7x7 - imaginile atomice ale acestei suprafețe obținute de STM au convins
consolă care urmărește suprafața.
comunitatea științifică de rezoluția spațială spectaculoasă a microscopiei de scanare prin tunel - a
trebuit să aștepte puțin mai mult înainte de a fi arătată de Giessibl.