Lucrri practice-semestrul II Roxana Lazr

Dr. Med. Vet.

Demonstrarea rolului bilei in digestie

Bila este format de ctre hepatocite n ficat, cel mai mare organ unic al corpului. Bila: - este secretat de celulele parenchimatoase (hepatocite) n mod continuu; - se formeaz n canaliculele intercelulare hepatice, apoi ajunge n ductele biliare i n ductul hepatic; - n perioadele interdigesti!e bila este transportat prin ductul hepatic i cistic n !ezica biliar, unde se depoziteaz. "e aici bila este apoi eliminat intermitent n timpul digestiei prin canalul coledoc n intestin, datorit contrac#iei !eziculare i a rela$rii sfincterului %ddi. &unctia biligenetic a ficatului (de formare a bilei) rezult din deosebirile importante dintre compozi#ia plasmei i a bilei. 'lasma este filtrat la ni!elul !asului sinusoid prin porii mari ai endoteliului capilar, trec(nd astfel n spaiul Disse (spa#iul dintre peretele sinusoidului i hepatocitele n!ecinate). 'rintre celulele plate ale endoteliului se afl i celule )upffer, ce apar#in sistemului reticulohistiocitar. *epatocitul !ine n contact cu spa#iul "isse prin membrana bazolateral. +n hepatocit trec diferite substan#e con#inute n plasm, dar hepatocitul !a lipoproteine. "in hepatocit, unele substan#e ajung n bil, strbt(nd polul e$cretor reprezentat de canaliculul biliar. 'rin concentra#ia mare de acizi biliari (con#inu#i n bil) se creeaz un gradient osmotic fa!orabil pentru acumularea bilei. ,stfel se e$plica efectul coleretic al acizilor biliari: cu c(t cantitatea lor este mai mare cu at(t apare mai mult bil n canaliculi. -analiculii biliari intercelulari conflueaz i formeaz ductele biliare. "atorit unei reabsorb#ii de ap i de electroli#i, n ducte rm(ne bila n cantitate mai mic. -ircula#ia n ductele biliare are loc prin for#a hidrostatic i prin mi crile unor proteine contractile. i secreta n plasm produ i de sintez precum: albumin, fibrinogen,

Lucrri practice-semestrul II Roxana Lazr

Dr. Med. Vet.

Materiale necesare. bil de bou sau de porc, pahare Berzelius, eprubete, pipete gradate, p(lnie sticl, h(rtie filtru, ulei !egetal i diferi#i reacti!i chimici care !or fi men#iona#i la fiecare reac#ie efectuat. a). Evidenierea mucinei. +ntr-o eprubet se iau . ml bil i . ml ap distilat i se adaug c(te!a picturi de acid acetic glacial. ,pare un precipitat alb, filamentos de mucin. b). Srurile biliare. Reacia Pettenkecffer Principiul lucrrii. /rurile biliare n prezen#a zahrului i n prezen#a acidului sulfuric formeaz un compus numit o$imetil- furfurol. Te nic de lucru. /e pun ntr-o eprubet .-0ml bil diluat 1:1 cu ap distilat i se adaug 1-2ml zaharoz solu#ie 234 sau un cristal de zahr. /e nclin apoi eprubeta i pe pere#ii si se preling 5-0ml acid sulfuric concentrat, care a!(nd densitatea mai mare dec(t bila, cade la fundul eprubetei. 6a limita de separare dintre acidul sulfuric i bil se formeaz un inel intens colorat ro u- rubiniu, de o$imetil - furfurol. ,git(nd se coloreaz tot lichidul. Reacia !a" # $raft Principiul lucrrii. /rurile biliare scad tensiunea superficial a lichidelor n care se dizol!. Te nica de lucru. /e iau ntr-o eprubet . ml ap distilat peste care se presar floare de sulf (sulf sublimat). ,ceasta se men#ine la suprafa#a apei datorit tensiunii superficiale mari a acesteia. /e adaug c(te!a picturi de bil i se constat c floarea de sulf cade la fundul eprubetei, ca urmare a scderii tensiunii superficiale a apei produs de srurile biliare. %cinea bilei asupra grsimilor &lipidelor) Principiul lucrrii. /rurile biliare, prin scderea tensiunii superficiale, fa!orizeaz emulsionarea lipidelor. Te nica de lucru. /e pun ntr-o eprubet !olume egale de ulei !egetal i bil. /e astup eprubeta cu un dop i se agit. /e ob#ine o emulsie stabil de lipide timp de 13-17 min, cu

Lucrri practice-semestrul II Roxana Lazr

Dr. Med. Vet.

aspect lptos. -a martor ser!e te o eprubet n care s-a introdus ap n loc de bil (n acest caz lichidele se separ n dou faze). ,ceasta se e$plic prin faptul c srurile biliare coboar tensiunea superficial a sol!entului la o !aloare apropiat de cea a grsimii. "eoarece nu sunt diferen#e mari de tensiune superficial ntre cele dou lichide se formeaz o emulsie stabil. c). Pigmenii biliari Reacia 'melin Principiul lucrrii. Bila n prezen#a acidului azotic d reac#ii prin care se identific diferitele stadii intermediare de o$idare a bilirubinei n bili!erdin. Te nica de lucru. +ntr-o eprubet se introduc 5-.ml bil, apoi se toarn pe pere#ii epubetei nclinate sau se introduc n fundul epubetei 1-2ml acid azotic. 6a limita de separare a celor dou lichide apar inele colorate suprapuse, corespunztoare diferitelor stadii intermediare de o$idare a bilirubinei n bili!erdin. /uccesiunea inelelor colorate, de sus n jos este urmtoarea: !erde, albastru, !iolet i galben, corespunztor bili!erdinei, biliceaninei, bilifu$inei i coletelinei. Reacia 'melin# Rosbac /e umecteaz un fragment de h(rtie de filtru cu bil i lsm s cad n mijloc o pictur de acid azotic fumans. 8i n acest caz se constat apari#ia unor inele concentrice de diferite culori care din centru spre periferie sunt: galben, !iolet, albastru i !erde, corespunztor acelora i produ i intermediari de o$idare a bilirubinei n bili!erdin. Reacia Trousseau /e introduc 0 ml bil diluat 1:. ntr-o eprubet i se adaug prin prelingere tinctur de iod. 6a limita dintre cele dou lichide apare un inel !erde caracteristic bili!erdinei.