Lucrari Practice Fiziologie Vegetala (2008)

DISCIPLINA: FIZIOLOGIE VEGETAL
LUCRARE PRACTIC NR. 1

APA N MEDIU I N CELUL
Cuprins
1.
2.
3.
Importana strii de mobilitate a apei n mediu i n celul

Fore care rein apa n celul sau n mediu
Factori cu rol important n schimburile de ap dintre celule i mediu
1. IMPORTANA STRII DE MOBILITATE A APEI N MEDIU I N CELUL
Importana strii de mobilitate a apei n mediu i n celul poate fi pus n eviden asftel:
Importana strii de mobilitate a apei n mediu
Mod de lucru. Se pun n dou ldie, nalte de 5 cm, cte 10 Kg de sol: ntr-una nisip, iar n cealalt
argil. Se nsmneaz ambele soluri cu cariopse de ovz i se ud fiecare cu cte un litru de ap de
conduct.
1.
2.
3.
NTREBRI
Ce ai observat n cele dou ldie?
De ce nu germineaz cariopsele n argil?
Care este concluzia experimentului?
Importana strii de mobilitate a apei n celule

Mod de lucru. Se cntresc cte 100 g semine de mei i de fasole, care se introduc apoi n ap, unde
se in pn cnd masa lor crete cu 30g. n acest scop, seminele se scot periodic din ap, se tamponeaz cu
hrtie sugativ, pentru ndeprtarea apei de pe suprafaa lor i apoi se recntresc. Aceste operaii se repet
pn ce masa iniial a seminelor va crete cu 30g.
1.
2.
NTREBRI
De ce germineaz numai seminele de mei?
Care este concluzia experimentului?
Din experimentele prezentate n cele dou paragrafe de mai sus rezult c apa lichid poate fi
reinut, n celul sau n mediu, prin fore de retenie. Cunoaterea acestora este prima
problem ce necesit a fi elucidat n nelegerea schimburilor de ap ntre organismul vegetal
i mediu.
2. FORE CARE REIN APA N CELUL SAU N MEDIU
A. FORE DE NATUR FIZIC
a. Fore osmotice
Aceste fore sunt determinate de substanele dizolvate, a cror particule dispersate rein apa. Apa
reinut prin fore osmotice se numete ap osmotic (ap de dizolvare sau, impropriu, ap liber). Eliberarea
acestei forme de ap din esuturi, prin transpiraie, este cu att mai dificil, cu ct sucul vacuolar este mai
concentrat. Legturile contractate ntre moleculele de ap i cele ale substanelor dizolvate pot fi evideniate
uor prin urmtorul procedeu:
Pe talerul unei balane se aeaz cte o cutie Petri de acelai diametru i ntr-una se pune ap distilat,
iar n cealalt o soluie de zaharoz 10%. Se echilibreaz la nceputul experienei sistemul i se las n repaus.
Apa din soluia de zaharoz, fiind reinut prin fore osmotice, se evapor n cantitate mai mic, fapt ce duce,
dup un timp, la ruperea echilibrului balanei.
b. Forele de adsorbie
Apa poate fi fixat la suprafaa diverselor particule (ioni sau molecule) prin fore de adsorbie, care
sunt mai ales fore electrostatice, datorit strii dipolare a apei. Aceast fraciune a apei (apa de adsorbie sau
de hidratare) determin fenomenul de solvatare a particulelor coloidale i de electrostricie a ionilor minerali, prin
formarea n jurul lor a unui nveli dens de molecule de ap nedisociate. Numeroase substane din celule
confer suprafee enorme de adsorbie a apei (1 gram de celuloz ofer o suprafa de 16 cm2; 100 molecule
proteice adsorb aproximativ 4-56 molecule de ap). n cazul ionilor, nveliul lor apos este cu att mai gros cu
ct este mai mic raza i ncrctura electric a ionului respectiv.
Fig. 1. Ion de sodiu solvatat de molecule de

ap
Adsorbia iodului de ctre amidon

Materiale: eprubet, soluie amidon 1%, soluie Lugol (iod n iodur de potasiu), bec de gaz.
Mod de lucru. Se pun ntr-o eprubet 2-3 ml soluie de amidon i se adaug cteva picturi de soluie
Lugol. Dup agitare, soluia coloidal de amidon se coloreaz n albastru, datorit formrii iodurii de amidon.
Prin nclzirea eprubetei la flacr soluia se decoloreaz, iar prin rcire se coloreaz din nou n albastru.
Durata experienei: 10 minute.
Interpretare. Fenomenul de adsorbie a iodului din soluia Lugol pe suprafaa particulelor de
amidon este un fenomen fizic, nu o reacie chimic, fiind influenat de modificarea temperaturii
mediului de lucru.
c. Forele de imbibiie
Forele de imbibiie sunt determinate de mbibarea coloizilor hidrofili, ntruct acetia limiteaz
eliberarea apei din ei. Apa reinut pin aceste fore se numete ap de imbibiie. n celule se gsesc numeroi
coloizi hidrofili (proteine, mucilagii, celuloz etc.) care rein apa prin fore de imbibiie foarte puternice.
Evidenierea forele de imbibiie:
Mod de lucru. Se echilibreaz, pe talerele unei balane, o cutie Petri, ce conine ap distilat i una ce
conine vat mbibat cu ap. Dup un timp, echilibrul este rupt n favoarea ultimei cutii, deoarece
forele de imbibiie limiteaz evaporarea apei din vatr.
Interpretare. n cazul moleculelor coloidale mbibate puternic cu ap, forele de imbibiie sunt
mici, astfel c tensiunea vaporilor de ap este mare. Puterea de reinere a apei de ctre
micelele coloidale este foarte mare cnd acestea sunt puin mbibate cu ap.
d. Forele de coeziune molecular

Se evideniaz foarte simplu aplicnd una peste alta dou lame de sticl (lame port obiect utilizate n
microscopia fotonic) udate cu ap. Separarea lor necesit o oarecare traciune, n sensul glisrii acestora i
nu n sens diametral opus, deoarece ntre moleculele de ap exist fore mari de coeziune, care se opun
scindrii n dou a masei de ap dintre lamele. Nu se poate vorbi de ap de coeziune, deoarece atracia
molecular exist n toate formele de ap lichid.
e. Forele de capilaritate
Aceste fore sunt un efect al tensiunii superficiale i al forelor de adsorbie i de coeziune a
moleculelor de ap. Datorit acestora unele lichide (cele care umezesc pereii solizi) urc n tuburile
capilare, iar altele (cele care nu umezesc pereii solizi) coboar n tuburile capilare.
Cele mai multe lichide umezesc pereii solizi, fiind adsorbii puternic pe suprafaa acestora. Aa se
comport apa fa de sticl: atracia moleculelor apei fa de sticl este mai mare dect atracia dintre ele,
astfel c n preajma peretelui de sticl tensiunea superficial a apei scade mult, ceea face ca ea s se urce n
tuburile capilare la un nivel mai ridicat dect n vasul extern.
Unele lichide nu umezesc pereii solizi, neadsorbindu-se pe suprafaa acestora. Aa se comport
mercurul fa de sticl, sau apa fa de parafin: atracia dintre moleculele lichidului este mare, tensiunea
superficial sau energia de suprafa se manifest peste tot cu putere, astfel c lichidul se nconjoar n
ntregime la exterior de stratul su elastic. Ca urmare, lichidul nu se urc n tuburile capilare, ci nivelul su
se situeaz mai jos dect n vasul exterior.
n celule i n corpul plantelor exist numeroase spaii capilare (vacuole, spaii dintre micelele
coloidale ale membranelor i ale protoplasmei, elementele conductoare) n care forele de capilaritate rein
apa. Aceast fraciune a apei este apa de capilaritate.
Evidenierea forelor de capilaritate se realizeaz foarte simplu,
introducnd un tub capilar ntr-un vas cu ap i unul ntr-un vas cu mercur: apa,
udnd pereii capilarului, formeaz un menisc concav i hemisferic la
suprafa, care determin urcarea lichidului deasupra nivelului din vasul
exterior; la mercur meniscul este convex i n capilar nivelul lui se plaseaz mai jos dect
n vasul extern .
Fig. 2. Evidenierea forelor de capilaritate: a - apa, care
umezetepereii de sticl, urc n capilar deasupra nivelului
lichidului din vas, formnd un menisc concav; b -mercurul, care
nu umezete pereii de sticl, coboar n capilar la un nivel
inferior celui din vas, formnd un menisc convex (dup Boldor i
colab., 1983)
B. FORE DE NATUR CHIMIC

Forele legturilor chimice
Apa de constituie este legat chimic de unele molecule. Astfel, oxalatul de calciu Ca(COO)2 - poate
fi monohidratat, cnd cristalizeaz n rafide sau trihidratat, cnd formeaz macle sau ursini. Eliberarea apei
de constituie implic distrugerea moleculei care o conine.
Pentru evidenierea apei chimice legate, se pune ntr-o eprubet sau ntr-un balon de sticl cu gtul
lung, o cantitate de CaSO4 x 2H2O i se nclzete la un bec de gaz. Apa de constituie se va evapora
i condensa pe pereii eprubetei, n partea sa superioar sau pe gtul balonului.
3. FACTORI CU ROL IMPORTANT N SCHIMBURILE DE AP DINTRE CELULE I
MEDIU
Schimburile de ap dintre celule i mediu se realizeaz prin intervenia unor fenomene fizice, dintre
care un rol important au osmoza, imbibiia i electrosmoza.
3. 1. Osmoza i schimburile de ap ale celulei

Osmoza este fenomenul fizic de trecere a unui solvent printr-o membran
semipermeabil,
care separ dou soluii de concentraii diferite, sau o soluie de solventul pur.
REINEI!
Sensul micrii este de la soluia mai diluat ctre cea mai concentrat, datorit
energiei cinetice mai mari a particulelor de solvent, care impulsioneaz astfel trecerea
acestora prin membran. Denumirea fenomenului vine din limba greac de la
cuvntul osmos, care nseamn impulsie, ndemn. Trecerea solventului prin
membrana despritoare are loc pn la stabilirea unui echilibru de concentraii ntre cele dou
compartimente. Fiecare lichid are un potenial osmotic care se datoreaz loviturilor aplicate de particulele
sale pe pereii vasului, n micarea lor brownian.
Fenomenul de osmoz reprezint o cale fundamental de ptrundere apei n celul. El st la baza
conducerii i distribuiei apei n organismele vii, dei nu toate micrile de ptrundere sau de ieire apei din
celul se datoreaz forelor osmotice.
Osmoza poate fi studiat folosind membrane permeabile i, n special, membrane semipermeabile.
A. Osmoza prin membrane permeabile
Membranele permeabile (dializante) opresc particulele coloidale, ns pot fi strbtute de ap i de cea
mai mare parte dintre moleculele cristaloide (cu diametrul mai mic de 1 milimicron). Aceast trecere se
realizeaz, n cazul apei, prin osmoz, iar n cazul cristaloidelor prin difuziune, care reprezint, de fapt, o dializ.
Membranele permeabile se pot obine din: pergament, colodiu, celofan, vezic sau intestine de porc, branhii
de pete etc.
Difuziunea
Este fenomenul fizic prin care dou sau mai multe specii de
particule (ioni sau molecule) se amestec n cazul cnd vin n contact,
datorit micrilor lor cinetice. Sensul micrii este ntotdeauna de la
substana mai concentrat ctre cea mai diluat, chiar contra
gravitaiei, deoarece energia cinetic este mai mare n cazul
particulelor mai apropiate (mai dense).
Viteza de difuziune depinde de natura substanelor care
difuzeaz (mrimea moleculelor, concentraia soluiilor,
vscozitatea mediului) i de unii factori externi (temperatura).
Difuziunea este un fenomen care se manifest frecvent n
materia celular. Pe acest principiu are loc uniformizarea continu a coninutului hialoplasmei i a vacuolei
din fiecare celul.
Difuziunea descendent
Materiale: soluie de zaharoz 10 %, decoct din frunze de stejar, eprubete, stativ.
Mod de lucru: ntr-o eprubet se toarn o soluie de zaharoz 10 %, peste care se adaug, cu atenie,
prelingnd pe peretele eprubetei, un decoct din frunze de stejar, care conine tanoide de culoare brun. Se
obin astfel dou straturi distincte, de culori diferite, a cror limit se marcheaz cu un creion dermatograf
sau o hrtie gumat. Eprubeta se las n repaus ntr-un stativ i, cu timpul, se va putea constata c cele dou
soluii se amestec .
Fig. 3. Difuziunea descendent

dup gradientul de concentraie: 1soluie de tanin; 2-soluie de zaharoz
(dup Boldor i colab., 1983)
Difuziunea ascendent
Experiment 1
Materiale: eprubet cu rezervor lateral, cristale de permanganat de potasiu,

stativ
Mod de lucru. Se ia o eprubet ce se prelungete cu un rezervor lateral, se
umple cu ap, se d drumul n apa din ea unui cristal de permanganat de
potasiu (KMnO4) i se las n repaus, fixat la un stativ. Cristalul de KMnO4
se dizolv, iar moleculele sale se intercaleaz n toat masa apei, difuznd
ascendent.
Fig. 4. Difuziunea ascendent a permanganatului de
potasiu, mpotriva forei de gravitaie (dup Boldor i
colab., 1983)
Experiment 2
Materiale: soluie 20 % sulfat de cupru, ap distilat, pipete, eprubete.
Mod de lucru. ntr-o eprubet se introduc 5 ml H2O. Cu o pipet se iau 3 ml de CuSO4 i se introduce pipeta
pn la fundul eprubetei lsnd ca soluia de sulfat s curg ncet, nlocuind treptat apa din fundul
eprubetei. Se scoate apoi pipeta nchis i se observ c ntre cel dou medii exist o linie de demarcaie
distinct. Se las eprubeta n stativ timp de o or i se constat c linia de demarcaie dispare. Dup un timp
mai ndelungat coninutul eprubetei se uniformizeaz dnd un amestec omogen.
Moleculele soluiei concentrate de sulfat de cupru, cu o energie cinetic ridicat, difuzeaz printre
moleculele de ap. Sensul difuziei este de la mediul cu o concentraie mai mare spre mediul cu o
concentraie mai mic, pn la egalizarea concentraiilor, uneori chiar n sens ascendent, contrar legii
gravitaiei universale.
Difuziunea ritmic
Materiale: sol coloidal de gelatin cu bicromat de potasiu ( reactivul 33), soluie de AgNO3 20 %,
cutie Petri, pipete.
Mod de lucru. Se prepar un sol coloidal de gelatin cu bicromat de potasiu i se toarn ntr-o cutie
Petri, ntr-un strat de 2-3 cm grosime. Dup gelificare se adaug cu pipeta, n poriunea central a suprafeei
acesteia, 2-3 picturi dintr-o soluie de AgNO3 20 %. n urma adugrii acesteia apare imediat o coloraie
roie datorit formrii bicromatului de argint:
K2Cr2O7+2AgNO3
Ag2Cr2 O7
+ 2 KNO3
Se acoper cutia Petri cu capacul, cptuit n prealabil cu hrtie de filtru umectat i se aeaz la
ntuneric, pentru a evita reducerea la lumin a argintului. Dup un timp se constat c s-a modificat culoarea
picturilor adugate, din rou n galben, datorit trecerii bicromatului de argint n cromat de argint:
Ag2Cr2O7
Ag2CrO4
+ CrO3
Acesta, difuznd, formeaz cu gelatina un precipitat alb ce se depune succesiv, sub form de inele
concentrice, vizibile chiar cu ochiul liber.
Fig. 4. Difuziunea ritmic: a- vzut de sus,

puin lateral; b- vzut n seciune; 1Ag2CrO4; 2- inele concentrice formate prin
difuziunea argintului; 3- gel de gelatin cu K2
Cr2 O7 (dup Boldor i colab., 1983).
B. Osmoza prin membrane semipermeabile

Membranele cu semipermeabilitate strict nu pot fi strbtute dect de ctre moleculele de ap,
ntruct ele opresc toate particulele dizolvate (faza dispers), fie cristaloide sau coloide. Difuziunea sau
dializa particulelor (ioni sau molecule) este imposibil prin astfel de membrane.
Obinerea unei membrane semipermeabile prin procedeul Traube
Membranele semipermeabile artificiale sunt membrane coloidale de precipitare, obinute n urma
reaciilor chimice dintre dou substane minerale. Ele sunt de mai multe tipuri.
Materiale necesare: soluie 5 % de ferocianur de potasiu solvit n ap zaharat proaspt preparat,
soluie 5 % de sulfat de cupru, cristale de ferocianur de potasiu, sulfat de cupru, sulfat de zinc, sulfat de
aluminiu, azotat de cobalt, clorur de cobalt, eprubete, cristalizor.
Mod de lucru:
Experiment 1
ntr-o eprubet se introduc civa ml soluie sulfat de cupru

2% i se adaug cu grij, n masa lichidului, cu o pipet Pasteur, o
pictur de ferocianur de potasiu solvit n ap zaharat; pictura se
nconjoar imediat cu o membran de precipitare fragil, de
culoare maronie, de ferocianur cupric, lund aspectul unei celule
(fig. 5a). Proprietatea de semipermeabilitate strict a acestei
membrane se deduce din faptul c celula crete sub ochii
observatorului, ca urmare a intrrii apei, printr-un curent
endosmotic, fapt ce duce la mrirea volumului sucului celular. La
un moment dat membrana extrem de fragil cedeaz, cele dou
soluii vin din nou n contact i refac local o nou membran;
celula ia forme diferite, procesul continund pn la
uniformizarea concentraiilor celor dou soluii (aspectul de
celul cu membran dispare n timp, prin depunerea la fundul
eprubetei a ntregului material precipitat).
Fig. 5a - Celula lui Traube: 1soluie zaharat de K4 [Fe (CN6)];

2 -soluie de CuSo4 concentrat;
3- precipitat de Cu2 [Fe (CN)6 ]
cu aspect de membran; (dup
Boldor i colab., 1983)
Experiment 2
ntr-o eprubet se introduc civa ml soluie de ferocianur de potasiu 3% n care se introduce un cristal
de sulfat de cupru. Rezultatul este acelai, respectiv formarea membranei de precipitare semipermeabil de
ferocianur cupric, ntr-un proces care continu pn la consumarea cristalului (fig. 5b).
Fig. 5 b Celula lui Traube: 1- soluie de K4 [Fe (CN6)]

3%; 2 -soluie de CuSO4 concentrat; 3- precipitat de Cu2
[Fe (CN)6 ] cu aspect de membran; 4 cristal de Cu SO4
(dup Boldor i colab., 1983)
Experiment 3
ntr-un cristalizor cu soluie de ferocianur de potasiu se introduc, separat, cristale de sulfat de cupru,
sulfat de zinc, sulfat de nichel, azotat de cobalt, clorur de cobalt. n jurul tuturor cristalelor se formeaz
membrane ce delimiteaz celule de tip Traube cu diferite forme i culori, care dau imaginea unei grdini
minerale n miniatur (fig. 5c).
Fig. 5c - Grdina mineral: 1 - soluie de

ferocianur de potasiu; 2 - suc celular al
celulelor de tip Traube formate; 3 - celule de tip
Traube; 4 - cristale de sulfat de cupru, sulfat de
zinc, sulfat de nichel, azotat de cobalt, clorur de
cobalt etc. (dup Boldor i colab., 1983)

Interpretare. Prin toate procedeele utilizate s-au obinut membrane artificiale strict semipermeabile, de
tipul celor folosite n osmometre, imitnd plasmalema celular. Astfel de membrane nu se ntlnesc la celula
vegetal. Biomembranele se caracterizeaz prin aceea c sunt semipermeabile relativ selective, n sensul c
permit trecerea apei conform osmozei, dar totodat permit i trecerea selectiv a substanelor dizolvate, n
funcie de necesitile celulelor.
TEM DE VERIFICARE A CUNOTINELOR

1.
2.
3.
Definii urmtorii termeni: imbibiie, difuziune, osmoz.

Precizai rolul osmozei n schimburile de ap dintre plante i mediu.
Asociai corect termenii din cele dou coloane ( cifrele din coloana A cu literele
corespunztoare din coloana B).
A. Tip de difuziune
B. Reactivi
1.Ascendent
a. Sol coloidal de gelatin cu bicromat de potasiu + Ag NO3
2.Descendent
b. Cristal de KMnO4+H2O
3.Ritmic
c. Soluie de zaharoz 10 %+ decoct din frunze de stejar

STUDIUL CELULEI VEGETALE CA SISTEM OSMOTIC
Cuprins
1.
2.
3.
4.
5.
Consecina legilor osmozei

Substane osmotic active i osmotic inactive
Evidenierea turgescenei
Observarea turgescenei i a plasmolizei
Observarea deplasmolizei
1. CONSECINA LEGILOR OSMOZEI
REINEI!
n schimburile de ap dintre dou soluii separate printr-o membran

semipermeabil se pot ivi urmtoarele situaii:
- dac cele dou soluii au aceeai presiune osmotic, nu au loc schimburi de ap
ntre ele, soluiile fiind izotonice;
- dac cele dou soluii au presiuni osmotice diferite, schimburile de ap sunt
reglate de rezultanta dintre presiunile osmotice ale celor dou soluii, apa trecnd
din compartimentul cu presiune osmotic mai mic (mediu hipotonic) n
compartimentul cu presiune osmotic mai ridicat ( mediu hipertonic).
Schimburile de ap ntre medii de tonicitate diferit se pot evidenia i cu
ajutorul membranelor permeabile, folosind aa numitele celule ale lui J. Sachs.
HIPERTONIC
IZOTONIC
HIPOTONIC
vacuol
PLASMOLIZ
TURGESCEN
Materiale necesare
intestin de porc, soluii de Na Cl 20 %, 10 %, 5 %, cristalizoare, sfoar
Protocol experimental
Celulele lui Sachs se confecioneaz tind dintr-un intestin de porc 3 tuburi, lungi de circa 10 cm, care
se leag cu o sfoar la un capt. Dup aceast operaie, se introduce ntr-unul din tuburi o soluie de NaCl
20% i se leag apoi la cellalt capt, captnd n interior soluia. Se cltete apoi tubul cu ap i se introduce
ntr-un cristalizor care conine o soluie de NaCl 5 %. n al doilea tub se introduce, n acelai mod, o soluie
de NaCl 10 %, dup care se plaseaz tubul ntr-un cristalizor care conine tot o soluie de NaCl 10 %. n al
treilea se introduce o soluie de NaCl 5 % i apoi se plaseaz tubul ntr-un cristalizor n care se gsete o
soluie de NaCl 20 %.
NTREBARE
1. Ce fenomene au loc n cele trei cazuri? Argumentai rspunsurile.
2.
REINEI!
SUBSTANE OSMOTIC ACTIVE I OSMOTIC INACTIVE

n dependen de concentraia soluiei din mediul extern (hipotonic,
hipertonic, izotonic) fa de concentraia sucului vacuolar are loc un curent de
ap ntre celula vegetal i soluia extern, prin procese de endosmoz, exosmoz i
izoosmoz. Prin aceste procese, celula prezint stri de turgescen, plasmoliz i
deplasmoliz.
Caracterul osmotic al schimburilor de ap dintre celule i mediu const n
manifestarea fenomenelor de turgescen i plasmoliz, care depind direct de
tonicitatea mediului intern al celulei. Tonicitatea sucului vacuolar este n funcie de
prezena n el a aa-numitelor substane osmotic active.
Sucul vacuolar este o soluie apoas n care sunt dizolvate particule (ioni i
molecule) de substane minerale i de substane organice (glucide simple, acizi
organici, taninuri, glicozide, acizi aminici. etc.), care avnd dimensiuni mici, mresc
concentraia soluiei i ca urmare atrag apa. Acestea sunt substane osmotic
active.
Substanele organice cu molecul mare, precum amidonul i proteinele,
contribuie puin la concentrarea soluiei i nu atrag apa. Acestea sunt substane
osmotic inactive.
Material necesare
rdcini tuberizate de sfecl roie sau morcov, substane osmotic active (organice: zaharoz,
glucoz, fructoz, acid citric; minerale: clorur de sodiu, clorur de potasiu, azotat de potasiu),
substane osmotic inactive (amidon)
Se decapiteaz dou rdcini de sfecl sau de morcov, se excaveaz pe o adncime de circa 3 cm de la
nivelul suprafeei de seciune rezultat n urma decapitrii, dup care ntr-una din excavaii se introduce
amidon, iar n cealalt o substan osmotic activ. Se aeaz rdcinile n poziie vertical n cte un pahar
Berzelius i se acoper cu un clopot de sticl, pentru a le menine ntr-o atmosfer izolat timp de 24 ore.
NTREBARE
1. Ce observai n cele dou cazuri? Argumentai rspunsurile.
Fig. 1. Evidenierea substanelor

osmotic active i a substanelor
osmotic inactive: 1 - rdcina de
morcov n a crei excavaie s-a
introdus
amidon
rmne
neschimbat; 2 - rdcina n a crei
excavaie s-a introdus zaharoz
pierde ap: zaharoza extrage ap din
pereii rdcinii i se dizolv n
aceasta,
formnd
o
soluie
hiperconcentrat (dup Boldor i
colab. 1983)
3.
REINEI!
EVIDENIEREA TURGESCENEI
TURGESCENA este starea fiziologic normal a celulelor vegetale bine

aprovizionate cu ap, care ofer o mare rigiditate esuturilor, permind portul erect
al plantelor ierboase i portul caracteristic al frunzelor i ramurilor tinere de la
plantele lemnoase. Aceast stare se realizeaz prin schimburile permanente de ap
dintre celule i mediul exterior n fenomene osmotice, cu sens endosmotic.
n cazul cnd o celul vegetal vie se afl ntr-un mediu hipotonic, apa din
mediu ptrunde n ea printr-un curent endosmotic i celula i mrete volumul, ca
urmare a faptului c vacuola crete n volum i a faptului c pereii celulari se
extind uor.
Elasticitatea peretelui celular este ns redus, fapt ce face ca el s exercite o
contrapresiune din ce n ce mai mare asupra coninutului celular. Aceasta este
presiunea peretelui celular, care imprim celulei o stare de rigiditate, de tensiune,
care a primit denumirea de turgescen (de la cuvntul turgere, care n limba latin
nseamn a umfla).
Pe msur ce turgescena tinde ctre valoarea maxim, intrarea apei n
celul, datorit forei osmotice, se face din ce n ce mai ncet, pn se atinge un
echilibru, ca urmare a faptului c presiunea membranei scheletice asupra
coninutului celular devine egal, de sens invers. n momentul atingerii acestui
echilibru starea de turgescen devine maxim i micarea apei se oprete.
Materiale necesare
scap de Taraxacum officinale, frunze de elin, soluie de NaCl 20 %.
ACTIVITI
Realizai urmtoarele experimente (fig. 2) i notai ce ai observat:
1. Despicai, pe o oarecare distan, baza scapului sau a peiolului de elin n 4 fii.
2. Introducei baza acestui scap sau a peiolului ntr-un vas cu ap.
3. Scufundai baza acestui scap sau a peiolului ntr-o soluie hipertonic de Na Cl 20 %.
Fig. 2. Manifestarea turgescenei n

esuturile unui scap de ppdie: a - n aer;
b - n ap; c - n soluie hipertonic (dup
Boldor i colab. 1983)
NTREBARE
1. Cum interpretai sensul i gradul de curbare a celor 4 fii n cele 3 experimente?
4.
REINEI!
OBSERVAREA TURGESCENEI I A PLASMOLIZEI
PLASMOLIZA (fig. 2) este un fenomen citofiziologic de ieire treptat a apei

din celul, n special din vacuol, atunci cnd esutul este pus ntr-o soluie extern
hipertonic.
Prin contractarea protoplasmei i reducerea volumului celular are loc
desprinderea plasmalemei de peretele celulozic (mai rigid), fenomen care se
manifest prin treptele plasmolizei (incipient, concav i convex).
Plasmoliza se produce mai repede atunci cnd se utilizeaz un plasmolitic
mai puternic. De asemenea, durata de timp de la nceputul plasmolizei i pn la
plasmoliza convex este determinat de nsuirile fizice ale protoplasmei:
viscozitate, elasticitate etc.
Trebuie reinute cteva aspecte importante n legtur cu fenomenul
plasmolizei: n natur, nu se ntlnesc celule plasmolizate, dect n cazuri cu totul
excepionale; plasmoliza se produce numai la celulele vii, deoarece protoplasma
acestora joac rolul membranei semipermeabile.
Materiale necesare
bulb de ceap roie (ceap alb), lame, lamele, baghete, ac spatulat, brici, bisturiu, soluii 1M de
azotat de potasiu sau zaharoz, hrtie de filtru, microscop
Se efectueaz o seciune prin epiderma inferioar
a frunzei bulbului de ceap roie (alb).
Experiment 1. Seciunea se aeaz pe o lam ntro pictur de ap distilat. Preparatul se acoper
cu lamela i se examineaz la microscop cu
obiectivul mic.
Experiment 2. Se aeaz de o parte a lamelei o
fie de hrtie de filtru iar concomitent, pe
partea opus, se picur cu o baghet, soluie
concentrat de azotat de potasiu sau zaharoz.
NTREBARE
1. Ce ai observat n cele 2 experimente? Argumentai rspunsurile.
Fig. 2. Etapele plasmolizei (desen efectuat la microscopul optic): a plasmoliz incipient; b - plasmoliz concav; c plasmoliz convex (se
observ filamentele Hecht) (dup Boldor i colab. 1983)
TEM
Notai etapele plasmolizei corespunztoare figurilor numerotate mai jos.
5. OBSERVAREA DEPLASMOLIZEI
REINEI!
DEPLASMOLIZA revenirea celulei vegetale plasmolizate, la starea de turgescen, n

urma aprovizionrii cu ap.
Materiale necesare
bulb de ceap roie (ceap alb), lame, lamele, baghete, ac spatulat, brici, bisturiu, soluii 20 % de
zaharoz i de glicerol, hrtie de filtru, microscop.
Se provoac mai nti plasmoliza total a celulelor dintr-un fragment de epiderm de la frunzele
modificate ale bulbului de ceap, prin plasarea lui ntr-o pictur de soluie de zaharoz 20 %, care ptrunde
foarte greu n celule. Aducnd o bucat de hrtie de filtru la o margine a lamelei i picurnd lng latura
opus o pictur de glicerol 20 %, se provoac nlocuirea plasmoliticului de sub lamel.
Interpretare
ntruct moleculele de glicerol ptrund uor n celule, la microscop se va observa creterea treptat a
volumului vacuolelor (sau a protoplastului plasmolizat), ceea ce cu timpul duce la refacerea turgescenei
celulelor.
Fig 29. Evidenierea deplasmolizei

(schem):
1-plasmoliz
convex;
2deplasmoliz (celul tur-gescent) (dup
Pop i Suciu, 1973)

Rspundei la urmtoarele ntrebri:
1. Ce se nelege prin substane osmotic active i substane osmotic inactive?
Exemplificai fiecare tip.
2. Definii fenomenul de turgescen i indicai rolul acestuia n activitatea vital
celular i n viaa plantei?
3. Definii fenomenul de plasmoliz i indicai rolul acestuia.
4. Enumerai fazele plasmolizei.
5. Subliniai rspunsul corect:
Plasmoliza reprezint:
a. un indiciu al viabilitii celulelor;
b. stare de nesaturare a celulei cu ap;
c. stare n care toate procesele fiziologice decurg n la nivel optim.
Aezai n ordinea fireasc de desfurare urmtoarele fenomene: pasmoliza,
turgescena, deplasmoliza.

STUDIUL PTRUNDERII APEI N CELULA VEGETAL
Cuprins
1.
2.
Determinarea presiunii osmotice a sucului celular

Determinarea forei de suciune a celulelor vegetale
1. DETERMINAREA PRESIUNII OSMOTICE A SUCULUI CELULAR
REINEI!
n ptrunderea apei n celul, prin fenomenul osmotic, o pondere deosebit

revine presiunii osmotice a sucului celular numit i potenial osmotic celular,
presiune a crei valoare trebuie s fie mai ridicat dect a mediului, pentru a se
produce curentul endosmotic.
Presiunea osmotic reprezint fora cu care moleculele substanei dizolvate
apas asupra solventului sau diferena dintre presiunea de difuziune a apei pure i
presiunea de difuziune a apei dintr-o soluie.
Cunoaterea valorii presiunii osmotice are nu numai o importan teoretic, ci
i o importan practic ntruct ofer indicii asupra gradului de aprovizionare cu
ap a plantelor, a crui cunoatere este deosebit de important n cazul plantelor
agricole cultivate n condiii de irigare.
Pentru calculul presiunii osmotice se folosete formula:

P = R.T.C.i.
P = presiunea osmotic a soluiei care se determin;
R = constant ( 0,082);
T = temperatura absolut + temperatura la care se lucreaz;
C = concentraia soluiei a crei presiune osmotic se determin;
i = coeficientul izotonic.
Dac se determin, printr-o metod oarecare, concentraia sucului vacuolar,
aplicnd formula de mai sus, se poate stabili valoarea presiunii osmotice a sucului vacuolar,
exprimat n atmosfere.
Concentraia sucului vacuolar se poate determina fie direct cu ajutorul metodei
refractometrice, fie prin determinarea punctului de congelare indirect, prin metoda
crioscopic. De asemenea, sunt metode, ca de pild, metoda plasmolitic prin care se caut
soluia izotonic cu sucul celular i apoi se introduce valoarea concentraiei respective n
formul i prin calcul se afl presiunea osmotic a sucului vacuolar.
Determinarea concentraiei sucului celular prin metoda refractometric
Materiale necesare:
refractrometru, pres, mojar cu pistil, cuit, planet de lemn,
baghet, piset cu ap, cutii Petri, sticl de ceas, tifon, vat,
plante la care se face determinarea: cartof, mr, morcov.
Se extrage sucul celular, prin presare cu un clete special sau
prin mrunire, mojarare i apoi presare. Sucul celular astfel extras
se colecteaz pe o sticl de ceas i apoi se pune o pictur pe
prisma refractometrului. n funcie de refractometru, pe acesta se
poate citi direct concentraia sucului celular sau numai indicele de
refracie. Cunoscnd concentraia, valoarea acesteia se introduce n
formul i se calculeaz presiunea osmotic a sucului celular.
Durata experienei: 40 min.
pres tubular
pres de tip clete
2. DETERMINAREA FOREI DE SUCIUNE A CELULELOR VEGETALE
REINEI!
Fora de suciune (S) este fora real cu care celula absoarbe ap din mediul
nconjurtor la un moment dat.
Fora de suciune (S) este determinat de diferena existent la un moment dat
ntre presiunea osmotic i presiunea de turgescen T:
S=T
Determinarea forei de suciune prin procedeul refractometric (ARIHOVSCKI)
Principiul acestui procedeu const n stabilirea variaiilor concentraiei unor soluii n

care a stat materialul cercetat: dac materialul pierde ap n contact cu soluia, concentraia
i indicele de refracie al soluiei respective se diminueaz, iar n caz contrar crete.
Procedeul const deci n a gsi soluia care, n contact cu materialul vegetal, nu i-a
modificat valoarea indicelui de refracie sau a concentraiei. Concentraia ei este practic
egal cu cea sucului vacuolar din celulele esutului. Cunoscnd aceasta se poate calcula, n
atmosfere, deficitul presiunii de difuziune.
Materiale necesare:
soluie de zaharoz 1M, eprubete, pipete, stativ, frunze de Pelargonium, perforator de

dopuri.
Pentru determinare se introduc n 11 eprubete cte 10 ml dintr-unul din urmtoarele lichide: n
prima ap distilat, iar n celelalte soluii de zaharoz de 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9; 1M, dup modelul
prezentat n tabelul alturat.
Concentraia
Mod de pregtire
Se agit coninutul fiecrei eprubete din irul I
soluiilor de zaharoz
ml soluie de
ml ap distilat
de eprubete; se iau cte 2 ml de soluie din fiecare
pregtit (M)
zaharoz 1M
eprubet i se trec n alte 11 eprubete, obinndu-se
0
10
astfel a doua serie de diluii (irul II).
0,1
1
9
Se introduce apoi n fiecare eprubet din irul
0,2
2
8
0,3
3
7
II aceeai cantitate de material vegetal (cte 10 rondele
0,4
4
6
scoase cu un perforator de dopuri din frunze de
0,5
5
5
Pelargonium zonale sau aparinnd altor specii de
0,6
6
4
plante), materialul fiind lsat n contact cu respectivele
0,7
7
3
soluii timp de o or.
0,8
8
2
ntre timp se determin, cu ajutorul unui
0,9
9
1
1,0
10
refractometru, concentraia n zaharoz, exprimat n
procente de zaharoz, pentru fiecare soluie din irul I de eprubete; rezultatele se noteaz ntr-un tabel
ntocmit dup modelul prezentat n tabelul de mai jos.
Dup o or se determin, n acelai mod, concentraiile soluiilor din irul II de eprubete, notndu-le
de asemenea n tabel. Se va constata c unele concentraii se dilueaz deoarece au fost hipertonice, iar altele
se mresc pentru c au fost hipotonice; soluia n care nu se nregistreaz nici o variaie de concentraie este
considerat izotonic cu concentraia sucurilor vacuolare ale celulelor esutului foliar.
Concentraia
Valoarea forei de suciune a
soluiei de
materialului vegetal
analizat se
zaharoz
calculeaz cu ajutorul relaiei:
(M)
S= CRT
0
S = fora de suciune a
0,2
materialului vegetal (n atmosfere);
0,4
0,6
C = concentraia soluiei
0,8
izotonice ( n moli);
1,0
T = temperatura n scar
absolut (273 + temperatura de lucru din laborator, n 0 C.);
R = constanta gazelor perfecte (0,08207).
Concentraia
iniial
(%)
Concentraia
final
(%)
Diferena de
concentraie (%)
Determinarea forei de suciune prin procedeul curenilor (ARDAKOV)

Principiul acestui procedeu i modul de lucru sunt aceleai ca i n cazul
procedeului refractometric, cu deosebire c determinarea concentraiei soluiilor n care au
stat probele de esut se face prin compararea densitii lor cu densitatea soluiilor iniiale
corespunztoare din irul I de eprubete.
Materiale necesare:
11 eprubete, soluie de zaharoz 1M, stative, pipete Pasteur, cristale de
albastru de metilen, perforator de dopuri, frunze de Pelargonium zonale.
n soluiile din irul II de eprubete se introduc cteva cristale de albastru
de metilen, dup care se ia cu ajutorul unei pipete Pasteur o coloan de 10 -15
cm de lichid din prima eprubet cu material vegetal i, scufundnd-o cu vrful
pn la mijlocul coloanei de soluie din eprubeta corespunztoare din irul I, se
las o pictur n mijlocul coloanei de soluie i se urmrete sensul ei de
deplasare.
Concentraia
Se repet, n continuare, aceast operaie i cu celelalte eprubete
soluiei de
pentru a gsi soluia izotonic cu materialul vegetal. Pictura luat din
zaharoz
aceast soluie va rmne n soluia iniial corespunztoare din irul I de
(M)
eprubete n locul n care a fost depus. Spre deosebire de acest caz, n
soluiile hipotonice (care se concentreaz n urma schimbului osmotic cu
materialul vegetal i i mresc concentraia) avnd astefl o densitate mai
0
mare, pictura se va deplasa n jos, iar n cele hipertonice (care se dilueaz
0,1
i i micoreaz densitatea n urma schimbului osmotic cu materialul
0,2
vegetal), avnd asfel o densitate mai mic, pictura se va deplasa n sens
0,3
ascendent.
0,4
0,5
Se noteaz ntr-un tabel, dup modelul prezentat n tabelul
0,6
alturat, sensul de deplasare a picturilor.
0,7
Calcularea valorii forei de suciune se face cu ajutorul formulei
0,8
prezentate la experiena antrerioar. n cazul cnd nu se va gsi o soluie
0,9
izotonic, aproximarea valorii lui C din formula de calcul se va face
1,0
utiliznd media concentraiei celor dou soluii nvecinate n care pictura
s-a deplasat n sens descendent, respectiv n sens ascendent.
Durata experienei: 120 minute
1.
2.
3.
Sensul de
deplasare a
picturii
(ascendent,
staionar sau
descendent)

Ce reprezint presiunea osmotic i ce importan prezint cunoaterea valorii
acesteia?
Enumerai metodele utilizate pentru determinarea concentraiei sucului celular.
Ce este fora de suciune i cu ajutorul crei formule se poate calcula valoarea
acesteia?

STUDIUL PTRUNDERII APEI N CELULA VEGETAL
Cuprins
1.
2.
Imbibiia i schimburile de ap ale celulei

Absorbia apei de ctre plante
1. IMBIBIIA I SCHIMBURILE DE AP ALE CELULEI
REINEI!
Imbibiia este fenomenul fizic de ptrundere a apei n interiorul i printre

coloizii macromoleculari. Substanele mbibate cresc n volum i greutate, datorit
ptrunderii moleculelor de ap att n jurul micelelor coloidale, ct i n interiorul
acestora. Cu alte cuvinte se produc dou fenomene: unul de absorbie i altul de
adsorbie a moleculelor de ap de ctre micelele coloidale. Totodat, dac se adun
volumul coloidului uscat cu volumul lichidului care mbib, se constat o contracie
a volumului total, deoarece se produce o condensare a apei de imbibiie. Ca rezultat
al condensrii apei de imbibiie, se elibereaz, pe parcursul acestui proces, energie
caloric i energie mecanic. Energia mecanic rezult din ndeprtarea coloizilor unii
de alii, ca urmare a aezrii apei de imbibiie sub form de pelicule n jurul
particulelor coloidale mbibate. Paralel cu imbibiia, particulele devin tot mai
groase, iar corpul care se mbib i mrete volumul i greutatea.
Imbibiie este deci, un fenomen complex, care const nu numai ntr-o mrire
reversibil n volum i greutate a coloizilor, dar i ntr-o condensare a apei de imbibiie,
care pune n libertate cele dou tipuri de energie prezentate anterior.
Imbibiia prezint o importan deosebit n procesul germinrii seminelor, n
hidratarea seminelor lipsite de vacuole.
Determinarea gradului de imbibiie a seminelor
Principiu: Imbibiia seminelor depinde de natura chimic a substanelor de rezerv

depozitate n endosperm, la diferite grupe de plante (cereale, leguminoase, oleaginoase etc.)
Materiale necesare:
semine de cereale (ovz, gru, porumb), semine de leguminoase (mazre, fasole), cilindri gradai,
plci Petri, balan tehnic, hrtie de filtru.
Se cntresc cte 10 grame semine din diferite grupe de plante: porumb (la care predomin
substanele amidonoase) i mazre (cu coninut ridicat de substane proteice). Se determin volumul acestor
semine astfel: se pune ap ntr-un cilindru gradat, pn la o anumit diviziune i se introduc pe rnd
seminele de porumb, respectiv de mazre. Se noteaz nivelul apei dup adugarea fiecrui tip de semine.
Fcnd diferena dintre acest nivel i nivelul iniial, obinem volumul seminelor (separat, pentru fiecare lot
de lucru).
Seminele scoase din cilindru se pun la mbibat n vase cu ap, unde se in 24 ore.
Dup etapa de mbibare, se scot apoi din ap, se tamponeaz cu hrtie de filtru, pentru a ndeprta apa
adeziv i li se redetermin greutatea i volumul, dup procedeul descris anterior.
Interpretare
Prin raportarea datelor finale la cele iniiale, se calculeaz gradul de imbibiie a seminelor, exprimnd,
n procente, apa de imbibiie msurat gravimetric i volumetric.
Pentru fiecare tip de semine se aplic urmtoarele formule:
Iv =
Vf Vi
x100
Vi
unde: Iv = imbibiia volumetric;

Vi = volumul iniial al seminelor;
Vf =volumul final al seminelor.
Ig =
Gf Gi
x100
Gi
unde: Ig = imbibiia gravimetric;

Gi= greutatea iniial a seminelor;
Gf =greutatea final a seminelor.
Valorile obinute practic arat c n cazul seminelor cu amidon de rezerv (porumb, gru, sec etc.), cu
un ridicat coninut de amidon, gradul de imbibiie este aproximativ 30-40%, n timp ce la seminele
leguminoaselor (mazre, fasole, soia etc.) seminele au un coninut mare de substane proteice i un grad de
imbibiie foarte ridicat, pn la 90-120%, raportat la greutatea i volumul iniial.
2. ABSORBIA APEI DE CTRE PLANTE

n cursul ntregii lor viei plantele absorb continuu ap din substrat, mai ales cu ajutorul
sistemului lor radicular i ap n timpul precipitaiilor, din rou sau din cea cu ajutorul
organelor lor supraterane, ap ce este eliminat n proporie de circa 99% n procesul
transpiraiei i, n anumite condiii , prin gutaie.
Existena curentului continuu de ap ntre sistemul radicular i organele supraterane
reprezint o condiie esenial a activitii metabolice i deci a supravieuirii plantelor.
La plantele nevasculare de talie mic (criptogame unicelulare, talofite terestre, briofite
etc.) aparatul vegetativ absoarbe apa prin ntreaga sa suprafa, uneori prin rizoizi, sau prin
hialociste - celule acvifere moarte, ca la Sphagnum palustre). La plantele vasculare apar
rdcinile, organe de fixare i de absorbie, prevzute cu esuturi conductoare specializate.
Determinarea intensitii absorbiei apei de ctre plant
Materiale necesare:
potometru (dispozitiv sub forma unui tub curbat cu aspectul literei U, din sticl sau plastic), dop de
cauciuc, plant cu rdcin, parafin, ulei.
Potometrul (denumirea vine din limba greac de la cuvntul potos care nseamn a bea) se umple cu
ap (fiart i rcit pentru eliminarea gazelor) pn la refuz. Se alege o plant viguroas i cu rdcinile
intacte, care se introduc n potometru prin intermediul unui dop cu tietur lateral. Se fixeaz potometrul la
un stativ, se parafineaz dopul i se introduce o pictur de ulei n tubul gradat al potometrului pentru a
mpiedica evaporarea lichidului. Se noteaz nivelul iniial al apei n tubul gradat i dup o or se citete pe
tubul gradat cantitatea de ap absorbit de plant, exprimat n ml.
Determinarea intensitii absorbiei apei la o

plant crescut n cultur hidroponic: 1potometru; 2-dop de cauciuc perforat i tiat pe o
parte pentru fixarea tulpinii plantei; 3- clema
stativului; n- nivelul la care se retrage apa n tubul
gradat al potometrului, n urma absorbiei ei de
ctre plant prin sistemul radicular
Evidenierea zonei de absorbie radicular a apei

Materiale necesare: plantule, eprubete, ulei.
Protocol experimental: Pentru evidenierea rolului diferitelor zone ale rdcinii n absorbia
apei se aeaz plantule ce prezint o rdcini seminal lung, n cte o eprubet n
urmtoarele poziii ca n figurile de mai jos.
1- ap; 2 ulei.
1.
o plantul martor se plaseaz, fixnd-o, prin intermediul unui capac de carton prevzut cu un
orificiu corespunztor i cu tietur lateral, astfel ca s fie cu toat rdcina n ap;
2. o alt plantul se fixeaz cu rdcinia, astfel ca vrful ei i zona perilor absorbani s fie n ap, iar
celelalte zone n ulei;
3. a treia se aeaz cu vrful rdcinii n ap i cu zona perilor absorbani i cea situat deasupra ei n
ulei;
4. o plantul se aeaz cu rdcina curbat astfel ca vrful i partea ei superioar s stea n ulei, iar
zona perilor absorbani n ap;
5. a cincea plantul se aeaz astfel ca vrful rdcinii i zona perilor absorbani s stea n ulei, iar
restul rdciniei n ap;
Plantulele cu care se lucreaz trebuie s fie puin ofilite, pentru a fi nlturat rigiditatea esuturilor
datorit turgescenei celulelor, fapt ce permite realizarea poziiilor rdcinii, cerute de experiment. Dup un
interval de timp se va constata c plantula martor i cele la care zona perilor absorbani s-a aflat n ap
triesc, pstrndu-i aspectul normal, iar celelalte, care au avut zona pilifer n ulei, se ofilesc i pier.
Interpretare
Acest experiment nu trebuie s duc la concluzia c absorbia apei este nul n afara zonei pilifere, ci
doar c este insuficient pentru a asigura supravieuirea plantelor. n vrful rdcinii (la nivelul zonei
meristematice i zonei netede) absorbia apei este slab deoarece la acest nivel nu exist esuturi
conductoare capabile s vehiculeze apa. La acest nivel este absorbit doar apa necesar local, care servete
la hidratarea coloizilor neoformai i la sporirea volumului vacuolar n timpul cnd are loc alungirea
celulelor. n zona aspr ptrunderea apei este foarte slab, deoarece suberul sau suberoidul izoleaz
esuturile periferice vii de apa din sol. Suberul prezint crpturi ce pot juca rolul unor veritabile lenticele,
permeabile pentru ap i gaze.
Punerea n eviden a zonei de absorbie radicular

Materiale necesare: plantule de porumb sau de gru,
microscop, lame, lamele, soluie de rou neutru 0,1 % sau
albastru de metilen, pahare Berzelius.
Protocol experimental:
Plantulele de porumb sau de gru, cu sistem radicular
intact, se introduc cu rdcinile n pahare Berzelius care
conin soluii diluate de rou neutru sau albastru de metilen.
Dup o or se spal rdcinile cu ap i se observ
macroscopic, colorarea rdcinilor numai n zona perilor
absorbani i mai puin n zona aspr. Prin seciunile
longitudinale ale rdcinii n zona pilifer i observarea la
microscop cu obiectivul mic, se poate constata structura
intern a periorilor absorbani i zona de ptrundere n
rdcin a coloranilor absorbii din soluie.
Frunza 1
Coleoptil
Rdcini seminale
Plantul de 7 zile de Triticum aestivum
Interpretare
Experimentul demonstreaz c absorbia apei de ctre rdcinile plantelor superioare este localizat
n zona pilifer i parial n zona aspr unde suberul izoleaz esuturile externe ale rdcinii. Absorbia nu
are loc prin zona neted i piloriz deoarece lipsesc esuturile conductoare capilare de vehiculare a apei.
Evidenierea influenei soluiei externe asupra absorbiei apei prin rdcini
Plantele pot absorbi apa din sol numai cnd soluia solului este hipotonic fa de
sucul vacuolar al celulelor rdcinii.
Materiale necesare: plantule de mazre sau fasole,

eprubete, stativ. soluie saturat de clorur de sodiu,
microscop, lame i lamele.
Se iau plantule de mazre sau de fasole cu
rdcinile de 4-5 cm lungime. Una se introduce cu
rdcinia ntr-o eprubet cu ap de robinet, iar
cealalt se introduce ntr-o eprubet cu soluie 25 %
de clorur de sodiu .
Dup 30-40 minute se scot plantulele din
eprubete i se in n mn n poziie orizontal.
Interpretare
Axa epicotilar
Rdcin principal
Rdcini secundare
Plantul de 7 zile de Pisum sativum
Se constat c rdcinia inut n ap este rigid, turgescent, n timp ce rdcinia inut n soluia
concentrat de NaCl este flasc, pentru c i-a pierdut turgescena. n primul caz apa fiind hipotonic fa de
sucul vacuolar ptrunde n celule printr-un curent de endosmoz. n al doilea caz, soluia de clorur de
sodiu este hipertonic fa de sucul vacuolar i determin ieirea apei din celule printr-un curent de
exosmoz. Apoi se fac seciuni n zona periorilor absorbani, se trec pe o lam de sticl n cte o pictur din
lichidul respectiv i se observ la microscop c periorii rdcinii care au stat n ap sunt turgesceni, iar
periorii rdcinii care au stat n soluia saturat de NaCl sunt plasmolizai.
Experimentul demonstreaz c plantulele absorb ap cnd soluia solului este hipotonic fa de sucul
vacuolar al celulelor rdcinii.
Evidenierea absorbiei foliare
Frunzele sunt capabile s absoarb o parte din apa czut pe ele n timpul ploilor, apa de
condensare (din rou) , apa din cea, ba chiar i vaporii de ap din aer. Absorbia are loc mai
ales la nivelul cuticulei ( deci mai intens dect prin stomate), datorit forei de suciune a
celulelor epidermice. Aceast absorbie este rapid cnd cuticula este subire i discontinu i
lent n cazul cnd cuticula este groas.
Materiale necesare:
frunze de Hibiscus, Pelargonium, cristalizor cu ap, balan analitic sau de torsiune, vaselin
(parafin), hrtie de filtru, baghet de sticl.
Se detaeaz de plant o frunz cu cuticula subire (de Hibiscus sau de alt specie) care se las cteva
ore s se ofileasc puin, pentru a crea un deficit de ap n ea i a favoriza absorbia. Se parafineaz apoi
baza peiolului, scufundndu-l n parafin topit i apoi se cntrete frunza la o balan analitic sau de
torsiune . Dup cntrire se scufund frunza ntr-un cristalizor cu ap i dup o or se cntrete din nou,
dup ce apa de pe limb a fost ndeprtat printr-o tamponare uoar cu hrtie sugativ. Prin diferen se afl
cantitatea de ap absorbit, care se raporteaz fie la 100 g de substan proaspt, fie la unitatea de suprafa
(1dm2).
Pentru raportarea apei absorbite la 100 g substan proaspt se utilizeaz relaia :
a x 100
------m
n care:
a = cantitatea de ap absorbit (n grame);
m = masa iniial a frunzei ( n grame);
100 = coeficient pentru exprimare rezultatului n procente.
n cazul n care raportarea cantitii de ap absorbit se face la unitatea de suprafa a frunzei, se
determin, dup aflarea cantitii de ap absorbit n intervalul de timp dat, suprafaa acesteia prin diferite
metode i se utilizeaz relaia:
ax1
---S
n care:
a = cantitatea de ap absorbit ( n grame);
S = suprafaa frunzei ( n dm2);
1 = unitatea de suprafa la care se face raportarea (1 dm2).
Lucrnd cu specii vegetale care au celulele epidermice cu grade variate de cutinizare (Juglans, Begonia,
Peperomia) sau de cerificare (Brassica oleracea), se vor constata variaii n intensitatea absorbiei foliare, funcie
de permeabilitatea celulelor epidermice. De asemenea, experimentul se poate prelungi, cntrind frunzele la
diferite intervale de timp, pentru a urmri dinamica procesului de absorbie a apei.
Avnd la baz aceast proprietate de absorbie a frunzelor, s-a introdus sistemul de administrare
extraradicular a ngrmintelor minerale, sub form de soluii diluate, cu care se stropesc plantele de
cultur n cursul perioadei de vegetaie.

LUCRAREA PRACTIC NR. 5
STUDIUL CONDUCERII I A ELIMINRII APEI DIN CORPUL PLANTELOR
Cuprins
1.
2.
Conducerea apei prin vasele de lemn

Eliminarea apei de ctre plant
2.1. Transpiraia
2.2. Gutaia
1. CONDUCEREA APEI PRIN VASELE DE LEMN

Apa absorbit din mediu este condus n ntreaga plant, prin fiecare celul i prin fiecare organ.
Dac plantele se afl n condiii normale, pe msur ce apa absorbit este eliminat din corpul lor (n
proporie de pn la 90 %), noi cantiti de ap absorbit i iau locul, astfel nct, n stare de vegetaie sau de
via activ, prin organismul vegetal trece un curent continuu de ap.
La cormofite conducerea apei poate avea loc pe cale combinat, intra (prin interiorul celulelor) i extra protoplasmatic. Calea intraprotoplasmatic permite doar o conducere lent apei, dar asigur controlul
fiziologic asupra vitezei de absorbie apei, ct asupra naturii substanelor dizolvate absorbite. Calea
extraprotoplasmatic const n conducerea apei realizat prin imbibiie (pe suprafaa sau prin pereii
celulozici) i prin difuziune prin spaiul liber apos (prin meaturile existente ntre celule). Aceast conducere
extraprotoplasmatic este mai rapid i mai economic n sensul c reprezentnd o micare pasiv apei, nu
necesit un consum de energie din partea plantelor.
n afara acestor ci, la cormofite au aprut elemente specializate n conducerea apei pe distane mari.
Ele sunt reprezentate de vasele de lemn, care, fiind lipsite de un coninut viu, permit conducerea unui volum
mare de ap i cu vitez sporit: este translocaia sevei brute, care se interpune ntre conducerea orizontal
apei n parenchimurile radiculare i conducerea ei n sens orizontal n parenchimurile organelor
supraterane.
xilem
xilem
esut
lacunos
stomat
floem
xilem
vase de lemn
Rdcin secundar
peri absorbani
cortex
Ap i sruri minerale
Sistem radicular
xilem
floem
Evidenierea conducerii apei prin vasele de lemn
Experiment 1
Materiale necesare: flori albe ( ghiocel, lcrmioar etc.) sau tulpini de plantule etiolate (de fasole,
lupin etc), soluii colorate ( eosin 0,1% sau fucsin 0,1%), cristalizoare, bisturiu.
Se secioneaz sub o soluie colorat (eosin sau fucsin) pedunculul unei flori albe i, lsndu-l cu
baza n colorant, se constat dup un timp, c nervurile petalelor se coloreaz n rou, ceea ce demonstreaz
c apa colorat circul prin xilem. Se poate folosi i un fragment de tulpin etiolat care se introduce cu un
capt ntr-o soluie diluat a unui colorant i se suge soluia prin cellalt capt al fragmentului. n seciune
transversal prin acest fragment se vor putea observa, cu ochiul liber, o mulime de punctioare colorate,
care corespund fasciculelor conductoare lemnoase.
Experiment 2
Materiale necesare: frunz de liliacee sau de graminee, vas cu ap, bisturiu.
Se taie dintr-o frunz de liliacee (Aspidistra) sau de graminee (porumb) dou segmente
dreptunghiulare, cu laturile de 6/4 cm, astfel ca la unul nervurile s fie paralele cu latura mare, iar la cellalt
cu latura mic. Se introduc cu una din laturile mici ntr-un vas care conine un strat subire de ap i se las
n repaus. Dup un timp, se va constata c segmentul care nu are nervurile mplntate cu un capt n ap se
ofilete la extremitatea situat n aer, n timp ce cellalt rmne turgescent, fapt ce demonstreaz c apa
poate fi condus la distane mari prin vasele de lemn, n timp ce conducerea ei de la celul la celul se face
anevoios.
Experiment 3
Materiale necesare: pahar Berzelius, sticl de ceas, lup binocular, lame de ras, penset, soluii de
CuSo4 5 % i ferocianur de potasiu 5%, plantule de fasole sau lupin.
Plantulele secionate la baz sub ap se aeaz cu baza ntr-un phrel care conine puin soluie de
CuSO4, lsndu-se 30 minute. Dup ce se spal n ap, se fac seciuni transversale n tulpin, la diferite
nlimi. Aceste seciuni se pun pe o sticl de ceas n ferocianur de potasiu. Se va observa formarea
ferocianurii de cupru de culoare brun. Substana nou apare numai acolo unde ferocianura de potasiu a
ntlnit sulfatul de cupru, deci numai n vasele lemnoase unde sulfatul de cupru s-a ridicat odat cu apa. La
lupa binocular se poate observa foarte bine c numai vasele lemnoase se coloreaz n brun.
MECANISMELE CARE CONTRIBUIE LA ASCENSIUNEA SEVEI BRUTE

Urcarea apei prin esutul conductor lemnos este rezultanta unui ansamblu de fore interne (presiunea
radicular, fora de aspiraie a frunzelor, coeziunea, capilaritatea i imbibiia) care acioneaz difereniat, n funcie
de faza de vegetaie a plantelor i de evoluia factorilor externi.
Exist o legtur ntre intensitatea transpiraiei i presiunea sevei brute din vasele de lemn. Aceast
legtur rezult din faptul c n cazul unei transpiraii intense, micarea sevei se datorete aspiraiei
frunzelor (apelul foliar), care determin crearea unui deficit de presiune n vasele de lemn, care se situeaz la
o valoare inferioar presiunii atmosferice. Cnd transpiraia este slab sau nul, conducerea sevei are drept
cauz presiunea radicular (fora de mpingere a sevei de ctre celulele rdcinii), care determin n vasele
de lemn o presiune superioar presiunii atmosferice.
Deci, mecanismele principale care intervin n micarea sevei brute sunt fora de suciune a celulelor
din frunze sau apelul foliar (aspiraia foliar) i fora de mpingere a celulelor rdcinii sau presiunea
radicular.
Evidenierea rolului forei de aspiraie a frunzelor n ascensiunea sevei brute
Principiu: Dup apariia frunzelor, rolul principal n urcarea apei revine forei de aspiraie a
frunzelor, ca for motrice superioaar care funcioneaz permanent zi i noapte, din primvar
pn n toamn, datorit procesului de transpiraie la nivelul foliar.Transpiraia intens duce la
crearea unui deficit de presiune n vasele de lemn. Acest deficit de presiune se transmite prin
vasele de lemn din nervurile frunzelor, n lungul plantei, pn la nivelul ramificaiilor sistemului
radicular.
Materiale necesare: tub de sticl cu lungimea de 50-60 cm lrgit la un capt (asemntor cu cel utilizat
la confecionarea osmometrului de tip Dutrochet), stativ metalic, cristalizor cu mercur, ramuri de conifere cu
frunzi bogat (Thuja, Taxus).
Printr-un dop de cauciuc cu orificiu corespunztor i cu tietur lateral se trece
o ramur de conifere n aa fel ca frunzele s fie n partea superioar i se fixeaz dopul
la captul lrgit al tubului de sticl. Prin captul opus se umple tubul cu ap fiart i
rcit (pentru eliminarea gazelor dizolvate n ea). Dup umplewrea tubului pn la
refuz, se astup captul ngust al acestuia cu un deget i se introduce ntr-o cuv cu
mercur, dup care se fixeaz tubul la un stativ metalic. Dup un timp se constat c
mercurul ncepe s se ridice n poriunea ngust a tubului, ca urmare a faptului c apa
eliminat prin transpiraia ramurii este nlocuit cu apa din tub. n tubul ngust,
omolog cu un vas de lemn, se creaz un deficit de presiune (transmis de la nivelul
frunzelor prin ramur), care fiind mai mic dect presiunea atmosferic, determin
urcarea n tub a mercurului.
1- vas cu mercur; 2- ap fiart i rcit
Evidenierea rolului forelor de coeziune ale moleculelor de ap n transmiterea deficitului de

presiune n vasele de lemn (METODA ASKENASY)
Principiu: Forele de coeziune ale moleculelor de ap joac
un rol considerabil n ascensiunea sevei brute, n cazul existenei
unui deficit de presiune n vasele de lemn.
Materiale necesare: plnie prelungit printr-un tub de sticl, sativ
metalic, cristalizaor cu mercur, gips, ap fiart i rcit, hrtie de filtru.
n plnia de sticl tapetat cu hrtie de filtru se toarn o past
consistent de gips. Dup solidificarea gipsului se umple tubul pn la
refuz cu ap fiart i rcit (pentru a scoate gazele dizolvate n ea) i apoi,
astupnd cu un deget captul lui inferior, se introduce tubul cu baza ntr
o cuv cu mercur i se fixeaz la un stativ (fig. 1.63 raianu). Dup un timp
se constat faptul c mercurul urc n tub datorit evaporrii apei la
suprafaa gipsului iar apa evaporat se nlocuiete cu apa existent n
capilarele gipsului i n tubul de sticl.
1- gips; 2- ap fiart i rcit; 3- vas
cu mercur; b- detaliu din suprafaa
de evaporare
Interpretare
Att timp ct nlimea coloanei de mercur nu depete circa 760 mm (presiunea hidrostatistc de
atmosfer), modelul descris funcioneaz ca un tub Toricelli, n care urcarea mercurului se datorete
presiunii amosferice. Urcarea mercurului la nlimi care depesc valoarea corespunztoare presiunii
atmosferice (urcarea lui n poriunea h* din figura 1.63) se datorete coeziunii moleculelor de ap, care
permite coloanei de ap s nu se ntrerup. Coloana de ap este supus , de fapt , la dou fore : una
dirijat n jos (datorit greutii coloanei de mercur), iar cealalt dirijat n sus (datorit forelor de
capilaritate i de tensiune superficial). Coeziunea moleculelor de ap este indispensabil pentru
meninerea intact a coloanei de ap atunci cnd deficitul de presiune depete 1 atmosfer i n lipsa ei
coloana de ap s-ar rupe. n vasele de lemn forele de capilaritate i de tensiune superficial nu pot
interveni, deoarece elementele conductoare sunt pline cu sev brut, n ele neexistnd meniscuri.
Teoteric, atracia intermolecular a apei suport traciuni de pn la 14 000 de atmosfere, practic ns ele
sunt mult mai mici 200-300 de atmosfere).
2. ELIMINAREA APEI DE CTRE PLANT

2. 1. TRANSPIRAIA
Apa absorbit i vehiculat n plante este eliminat la nivelul organelor aeriene, n deosebi
prin frunze, fie sub form de vapori n procesul de transpiraie, fie sub form de picturi n
procesul de gutaie.
METODE CALITATIVE DE EVIDENTIERE A TRANSPIRATIEI
REINEI!
Eliminarea vaporilor de ap are loc mai ales prin ostiolele stomatelor i n mod
accesoriu prin traversarea cuticulei ; o mic parte a vaporilor de ap este eliminat i pe
la nivelul lenticelelor.Transpiraia prin stomate reprezint, n medie, 90% din
transpiraia total a plantelor. Stomatele se gsesc pe epiderma frunzelor i ale
tulpinilor nesuberificate. Ele sunt repartizate mai ales pe faa inferioar la frunzele care
stau n poziie orizontal (frunze hipostomatice), iar la frunzele cu port , +- vertical se
gsesc pe ambele fee ale acestora (frunze amfistomatice). n cazuri mai rare stomatele
se gsesc numai pe faa superioar a frunzelor:este cazul frunzelor natante de la
plantele acvatice, care sunt epistomatice.
PROCEDEUL HALES (CONDENSAREA PE UN PERETE RECE A VAPORILOR DE AP EMII)
Materiale necesare: ghiveci cu plante de Pelargonium, balon Erlenmeyer, dop de cauciuc prevzut cu
orificiu i cu tietur lateral,parafin, stativ metalic, inel metalic.
Se introduce ntr-un balon Erlenmeyer o ramur cu frunze, nedetaat de plant i se astup gura
balonului cu un dop de cauciuc prevzut cu dop i cu tietur lateral prin care trece ramura. La nevoie se
parafineaz dopul pentru a realiza o bun etanare i se aeaz apoi balonul n poziie convenabil pe inelul
unui stativ metalic. Dup un timp, vaporii de ap emii n urma transpiraiei frunzelor se condenseaz pe
pereii balonului.
PROCEDEUL STAHL (MODIFICAREA CULORII UNEI SUBSTANE SIMPATICE)

Aceast metod utilizeaz substanele simpatice, substane ce au proprietatea de a avea o
anumit culoare n stare hidratat i o alt culoare n stare anhidr.Astfel de substane sunt
srurile de cobalt ce prezint o culoare albastr n stare uscat i o culoare roz n stare umed.
Materiale necesare: ghivece cu plante de Pelargonium, Tradescania sau o alt specie, ptrele de
hrtie de filtru mbibate n soluie de clorur de cobalt 5 %, lamele, vaselin.
Se taie ptrate cu latura de 1cm dintr-o hrtie impregnat n prealabil cu o soluie de CoCl2 5 % i
uscat dup impregnare. Se fixeaz pe suprafaa unei frunze o astfel de hrtie, cu ajutorul unei lamele, ale
crei margini au fost unse n prealabil cu vaselin, pentru a realiza o bun etanare. Dup un timp de
constat c hrtia i schimb culoarea din albastr n roz.
Interpretare
Schimbarea culorii hrtiei simpatice se datoreaz faptului c, clorura de cobalt s-a hidratat cu
vaporii de apemii de frunz prin transpiraie. Dac se msoar cu cronometru timpul scurs de la
montarea experimentului pn la virarea culorii hrtiei n roz, se obine o oarecare idee asupra intensitii
transpiraiei.Acest procedeu simplu permite compararea pe teren, n condiii naturale, a intensitii
transpiraiei la frunze aparinnd la specii diferite, sau la plante din aceeai specie aflate n diferite
variante experimentale. De asemenea, cu ajutorul acestei metode se poate pune uor n eviden
deosebirea n intensitatea cu care transpir cele dou fee ale aceleiai frunze. n intervalul dintre
determinri hrtiile de filtru imbibate cu clorura de cobalt se in n exicator (conine CaCl2 care are
proprietatea de a absorbi vaporii de ap i de a regenera hrtia, fapt ce permite utilizarea ei de un
numr mare de ori).
METODE CANTITATIVE DE DETERMINARE A INTENSITII TRANSPIRAIEI

Exist diferite modaliti de raportare a intenstii transpiraiei:
Transpiraia propriu-zis se raporteaz fie la suprafa, fie la masa (proaspt sau uscat) a
materialului vegetal. n funcie de suprafa se exprim n grame ap/dm2/h, iar n funcie de
mas se exprim n mg ap/ g material vegetal /h.
n afar de aceste modaliti de raportare se mai utilizeaz i noiunea de transpiraie
relativ, care exprim raportul dintre transpiraia unei suprafee foliare i evaporarea unui strat de
ap cu aceeai suprafa, n condiii identice. Cunoaterea acestui raport permite s se deduc
dac exist sau nu o reglare a transpiraiei: dac intensitatea transpiraiei se modific, funcie de
factorii influeni, ca i fenomenul fizic de evaporare, nu exist nici o reglare fiziologic a acestui
proces i invers. n general, transpiraia relativ are o valoare cuprins ntre 0,1-0,5.
METODA CNTRIRILOR RAPIDE ( METODA DE MOMENT A LUI L.A. IVANOV)
Principiu. La frunze detaate de plant procesul fiziologic de transpiraie continu normal
nc 5 - 10 minute dup care urmeaz o deshidratare lent a esuturilor. Pentru a determina ritmul
transpiraiei la diferite specii vegetale se folosete o metod gravimetric, de mare precizie i rapid
de executat.
Materiale necesare: balan de torsiune, cronometru, bisturiu, plante.
Se detaeaz frunza de pe plant. Imediat se aeaz planta pe platanul balanei de torsiune, se noteaz
masa frunzei i se repet cntririle la intervale scurte de timp (1- 2-3 minute).Concomitent se poate lucra cu
balana de torsiune la mai multe specii vegetale, funcie de rapiditatea efecturii cntririlor.
Interpretare.Prima cntrire reprezint masa iniial a frunzei (mi), iar celelalte cntriri (mf) dau prin
diferen cantitile de ap eliminate de frunze prin transpiraie n intervalul de timp respectiv.Rezultatele
obinute se noteaz ntr-un tabel.
Intensitatea transpiraiei se calculeaz dup formula:
( mi- mf)
---------------------------,
Pxt
n care:
mi masa iniial a frunzei ( n grame);
mf = masa final (dup 1-2-3 minute) a frunzei (n grame);
60 = factor de raportare a intensitii transpiraiei la unitatea de timp (o or);
P = parametrul frunzei fa de care se face raportarea intensitii transpiraiei (masa ei iniial n
grame sau suprafaa ei n dm2);
t = durata determinrii (n minute).
2. 2. GUTAIA
Gutaia este procesul fiziologic de eliminare a apei sub form de picturi, ntr-o atmosfer ncrcat
cu vapori de ap. Gutaia are loc cnd transpiraia este redus sau nul, n timo ce absorbia radicular a
apei este intens. Gutaia suplinete transpiraia, permind urcarea sevei n plant, intervenind ca o
,,supap de siguran ,, care limiteaz turgescena esuturilor, fr ca s se ntrerup absorbia apei.
Eliminarea apei are loc prin hidatode sau stomate acvifere, n preajma crora se afl terminaiile vaselor
lemnoase.Este un fenomen rspndit n natur, fiind evideniat la peste 300 genuri de plante. Este foarte
intens la plantele ecuatoriale i tropicale de pdure. n regiunile noastre gutaia este redus i are loc
mai ales n timpul nopilor umede de var.
Evidenierea fenomenului de gutaie
Materiale necesare: ghiveci cu plante tinere (gru, orz, sau porumb de 8-10 zile), clopot de sticl,
cristalizor cu ap.
Se ud bine solul dintr-un ghiveci n care cresc plante tinere, dup care se acoper etan ghiveciul cu
un clopot de sticl, sub care se pune i un cristalizor cu ap, pentru a realiza o atmosfer intern bogat n
vapori de ap. Se ine ansamblul ntr-un loc ntunecos i clduros i se constat dup cteva ore, apariia n
vrful fiecri frunze a unei picturi de ap, care, mrindu-se, lunec n lungul frunzei, n locul ei aprnd
alta. Spre deosebire de apa de rou, apa gutat conine diferite substane dizolvate n ea, n special sruri
mineraale. Dac se evapor cteva picturi de ap de gutaie, luate pe o lam de microscopie, se obine un
reziduu albicios.

NUTRIIA MINERAL A PLANTELOR
Cuprins
1.
2.
Compoziia chimic a plantelor

Solul
2. 1. Proprietile solului n legtur cu apa
2. 2. Reacia solului
2. 3. Evidenierea elementelor minerale din sol
1. COMPOZIIA CHIMIC A PLANTELOR
REINEI!
Evidenierea elementelor minerale care intr n compoziia plantelor se poate

face prin analize chimice din cenu (utiliznd reacii de culoare, de precipitare, sub
form de cristale specifice observabile la microscop - cristaloscopice); metode
histochimice sau prin alte procedee.
1. 1. Metoda chimic (analiza chimic a cenuii)
REINEI!
Cenua, sau reziduul mineral rezultat dup calcinarea materialului vegetal,

prezint o compoziie chimic complex. Coninutul plantelor n cenu este
variabil cu specia, vrsta plantelor, organele supuse analizei, condiiile de mediu n
care au crescut plantele. Un coninut mare de cenu au leguminoasele i
buruienile. Frunzele plantelor conin pn la 50 % sruri minerale din substana
uscat. Rdcinile sunt mai srace n substane minerale dect organele supraterane
conin ntre 2-15 % sruri minerale din substana uscat; seminele conin ntre 1-8
% sruri minerale din substana uscat.
Determinarea alcalinitii cenuii

Elementele bazice se gsesc n plante fie sub form de sruri ale acizilor minerali (cloruri,
fosfai, sulfai etc.), fie sub form de sruri ce hidrolizeaz bazic, ale acizilor organici (citrai,
malai, oxalai, tartrai etc). Aceste sruri se transform prin incinerare simpl n carbonai.
Datorit prezenei carbonailor i fosfailor ce hidrolizeaz bazic, cenua are un caracter
alcalin, titrabil, care este cu att mai pronunat cu ct este mai bogat n carbonai.
Materiale necesare: cenu, soluie de HCl 0,1 n, NaOH 0,1 n, metil-oranj 0,1 %, ap oxigenat 30
%, balon Erlenmeyer (250 ml), biuret, pipete, baie de ap, hrtie de filtru, balan analitic.
ntr-un balon Erlenmeyer de 250 ml se introduc 0,5 - 1 g cenu, care a fost cntrit la balana
analitic. Se adaug peste ea 100 ml HCl 0,1 n dintr-o biuret i 2-3 picturi de ap oxigenat 30 %. Se
nclzete coninutul balonului 10 minute pe o baie de ap care fierbe i dup rcire se filtreaz coninutul
lui, splnd de 2 -3 ori balonul ct i hrtia de filtru. n filtrat se adaug 1-2 picturi de indicator, metil- oranj
0,1 % (care n mediu acid d o coloraie roie) i se titreaz cu o soluie de NaOH 0,1n excesul de acid pn la
apariia culorii portocalii. Determinarea se repet de dou ori i se face media valorilor obinute la titrare.
Alcalinitatea cenuii se calculeaz cu ajutorul formulei:
V*F
--------------------,
mc
n care:
V= volumul soluiei de NaOH folosit la titrare (media celor dou determinri, n ml);
F = factorul soluiei de NaOH 0,1 n;
mc = masa cenuii luat pentru determinare (n grame).
Rezultatul obinut este exprimat n ml NaOH la 1 gram de cenu.
Evidenierea elementelor minerale din cenu
Pentru a evidenia elementele minerale din cenua plantelor se pregtesc trei extracte de
cenu, dup cum urmeaz:
a) ntr-un pahar Erlenmeyer se amestec 3 g cenu cu
100 ml ap distilat, se
nclzete 2-3 minute la flacra unui bec de gaz, apoi se filtreaz coninutul prin hrtie de
filtru. Din extractul obinut se identific clorul i potasiul;
b) ntr-un pahar Erlenmeyer se amestec 3 g cenu cu 100 ml soluie de acid clorhidric 5 %, se
nclzete 5 minute la flacra unui bec de gaz, apoi se filtreaz coninutul prin hrtie de filtru.
Din extractul obinut se identific fierul, calciu, sulfaii precum i carbonaii;
c) ntr-un pahar Erlenmeyer se amestec 3 g cenu cu 100 ml soluie de acid azotic 5 %, se
nclzete 5 minute la flacra unui bec de gaz, apoi se filtreaz coninutul prin hrtie de filtru.
Din extractul obinut se identific fosforul.
Experiment 1
Evidenierea chimic a clorului
Materiale necesare: extract apos de cenu, eprubete, pipete, soluie de acid azotic 5 % (conentrat),
soluie de azotat de argint 3 %.
ntr-o eprubet se trateaz 3-5 ml extract apos de cenu cu cteva picturi de acid azotic 5 % i cteva
picturi de soluie de azotat de argint 3 %. n prezena clorului se formeaz un precipitat alb de clorur de argint,
conform reaciei:
KCl + Ag NO3 Ag Cl + KNO3
Experiment 2
Evidenierea microchimic a potasiului
Materiale necesare: extract apos de cenu, lame de microscopie, soluie de hexanitrocupriat de sodiu i plumb
(reactivul 22- Raianu), baghet, bec de gaz, microscop.
Pe o lam de microscopie se aeaz 1-2 picturi de extract apos i se evapor la flacra unui bec de gaz,
pn la uscare. Dup rcire se adaug o pictur de hexanitrocupriat de sodiu i plumb, n prezena cruia apar
cristale caracteristice de hexanitrocupriat de potasiu i plumb, colorate n verde albstruie nchis, al cror aspect,
vzute la microscop, este redat mai jos.
Cristale de hexanitrocupriat de potasiu i plumb
Experiment 3
Evidenierea fierului
Materiale necesare: extract clorhidric de cenu, soluie de ferocianur de potasiu 10 %, soluie de

sulfocianur de amoniu ( NH4 SCN) 5 %, eprubete, pipete.
a ) ntr-o eprubet se trec 2-3 ml de extract clorhidric de cenu care se trateaz cu cteva picturi dintr-o
soluie de ferocianur de potasiu 10 %. Se obine un precipitat de culoare albastr de ferocianur feric (albastru de
Berlin), conform reaciei:
4 Fe Cl
+ 3 K4 [Fe (CN)6 ]
Fe 4 [Fe (CN)6 ]3
+ 12 KCl
b) ntr-o eprubet se trec 5 ml de extract clorhidric i se trateaz cu 1- 2 ml soluie de sulfocianur de potasiu 5 %.

Se obine o coloraie rou - nchis, datorit formrii sulfocianurii ferice, conform reaciei:
Fe Cl3 + 3 KSCN
Fe (SCN )3
+ 3 KCl
Experiment 4
Evidenierea calciului
Materiale necesare: extract clorhidric de cenu, soluie de acid sulfuric 10 %, soluie de oxalat de
amoniu 5 %, pipete, eprubete.
ntr-o eprubet se iau 5 ml extract clorhidric i se trateaz cu 1-2 ml soluie de acid clorhidric 10 %. Se
formeaz cristale aciculare de ghips, conform reaciei:
Ca Cl2 + H2 SO4 Ca SO4 + 2HCl
Experiment 5
Evidenierea carbonailor
Materiale necesare: cenu, soluie de acid clorhidric 10 %,

soluie de hidroxid de bariu 2, balon Erlenmeyer, dop de cauciuc,
tub de sticl ndoit n unghi drept, eprubete, pipete, bec de gaz.
Se cntresc 2-3 grame de cenu, se introduc ntr-un balon
Erlenmeyer i se adaug 10-15 ml de acid clorhidric 10 % ( reactivul
nr. 7 Raianu). Se astup cu dop de cauciuc prin care trece un tub de
sticl ndoit astfel nct captul lui liber s poat fi introdus ntr-o
eprubet cu hidroxid de bariu. Se nclzete uor balonul timp de 1-2
minute la flacra unui bec de gaz. n urma reaciei carbonailor din
cenu cu HCl se produce n balon o efervescen, datorit punerii n libertate a CO2. Reaciile care au loc
sunt urmtoarele:
K2 CO3 +2HCl H2CO3 + 2 KCl
H2 CO3 CO2 + H2O
Dioxidul de carbon format va barbota n soluia de hidroxid de bariu din eprubet, n care se va observa o
tulbureal ca urmare a formrii carbonatului de bariu, conform reaciei:
CO2 + Ba(OH)2 BaCO3 + H2O
Dac n soluia de hidroxid de bariu se barboteaz o cantitate mai mare de dioxid de carbon, precipitatul
de carbonat de bariu format se va dizolva, rezultnd bicarbonatul de bariu dup reacia:
BaCO3 + H2O Ba(HCO3)2
Prin nclzire dioxidul de carbon se degaj i precipitatul de carbonat de bariu reapare n eprubet.
Experiment 6
Evidenierea chimic a sulfailor
Materiale necesare: extract clorhidric de cenu, soluie de clorur de bariu 5 %, soluie de acetat de
plumb 5 %, eprubete, pipete.
Se iau ntr-o eprubet 2-3 ml extract clorhidric i se adaug cteva picturi dintr-o soluie de acetat de
plumb 5 %. Se formeaz un precipitat alb cristalin de sulfat de plumb, conform reaciei:
K2 SO4 + (CH3- COO)2 Pb
Pb SO4 + 2 CH3COOK
1. 2. Alte procedeee de evideniere a elementelor chimice din corpul plantei
REINEI!
Experiment 1
n cenua plantelor nu se gsete azot deoarece la temperaturi ridicate, compuii

minerali ai azotului sunt descompui iar azotul se volatilizeaz sub form de oxizi,
amoniac sau chiar azot molecular. De aceea azotul (existent n corpul plantelor sub
form de azot nitric, azot amoniacal i azot amidic) se identific numai din esutul vegetal
proaspt sau uscat (din extracte apoase).
Evidenierea azotului nitric ( NO3 - )
Materiale necesare: plante cu coninut ridicat de nitrai (Begonia sp., Urtica dioica, Tradescania
virginica, Pelargonium sp.) soluie de difenilamin (react. 20 Raianu), soluie de brucin ( react. 15 raianu),
acid sulfuric concentrat, sticle de ceas, brici, pahare Erlenmeyer, pipete.
Seciunile prin tulpini sunt tratate cu picturi din soluia de difenilamin. Se constat apariia instantanee
a coloraiei albastru intens.
Interpretare
n prezena nitrailor din esuturi, difenilamina (incolor) se oxideaz i trece n tetrafenil hidrazin
(albastr). Intensitatea coloraiei n albastru depinde de coninutul de anioni NO3. Treptat, culoarea
albastr trece n negru datorit acidului sulfuric din compoziia reactivului care carbonizeaz
esuturile.
Acest test colorimetric se mai poate aplica la determinarea azotului nitric din peiolul de
castravei, morcov, mazre, pepene galben, sfecl, elin, tomate i vi-de-vie precum i din
limbul frunzelor mature de ridichi.
Experiment 2
Evidenierea azotului nitros ( NO2 -)
Materiale necesare: plante de Amaranthus retroflexus, acid sulfuric concentrat, iodur de potasiu
amidonat (pri egale de soluie KI 1 % i soluie de amidon 1 %), pahare Erlenmeyer, pipete, bec de gaz.
Se prepar un extract apos concentrat, prin fierberea n ap distilat a ctorva fragmente de tulpini de
Amaranthus retroflexus. Se iau ntr-o eprubet 5-6 ml extract apos; se adaug civa ml de acid sulfuric
concentrat i o cantitate dubl de iodur de potasiu amidonat (React.16 Raianu). n urma reaciilor chimice care
au loc ntre reactivi i anionul NO2 din esuturi se elibereaz iodul care coloreaz n albastru amidonul din
iodura de potasiu amidonat.
Interpretare
Cu ct coninutul de nitrii este mai mare, cu att culoarea albastr apare mai repede.
La un coninut srac n nitrii, coloraia albastr se obine dup 15- 30 minute. Eliberarea
iodului din iodura de potasiu amidonat se realizeaz conform reaciilor:
2KNO2 + H2 SO4 K2 SO4 + 2HNO2
2KI + H2SO4 K2SO4 +2HI
2HNO2 + 2HI
2NO + 2H2O + I2
Experiment 3
Evidenierea azotului amoniacal
Materiale necesare: rdcini de sfecl sau bulb de ceap, soluie de KOH sau NaOH 10 %, soluie de
fenolftalein 1 % (react. 21-raianu), reactiv Nessler (react. 31- Raianu), pahare Erlenmeyer cu dop de cauciuc
i tub recurbat, pipete, eprubete, bec de gaz.
a) ntr-un pahar Erlenmeyer se introduc 5 - 10 g fragmente de rdcin de sfecl sau bulb de ceap, tiate
mrunt. Se adaug 25 - 30 ml soluie de KOH sau NaOH 10%; se astup balonul cu un dop de cauciuc
strbtut de un tub de sticl al crui capt extern este introdus ntr-o eprubet care conine 10 -15 ml de ap
distilat i 1- 2 picturi de fenolftalein 1 % ca indicator. Se nclzete uor coninutul paharului la flacra
unui bec de gaz. n urma degajrii amoniacului pe seama srurilor de amoniu din celule, fenolftaleina se
coloreaz n rou, mai mult sau mai puin intens, n funcie de cantitatea de amoniac ce se degaj.
b) Dac n locul eprubetei cu fenolftalein se aeaz o eprubet cu reactiv Nessler diluat cu ap distilat se
obine un precipitat galben- portocaliu, a crui cantitate este n funcie de cantitatea de amoniac degajat.
2. SOLUL
REINEI!
Solul constituie un suport mecanic ce permite fixarea plantelor, dar n acelai timp
este o surs de sruri minerale, gaze i ap pentru ele.
Solul, natural sau modificat de om, se caracterizeaz printr-o compoziie organomineral complex. El apare constituit din trei categorii de substane, corespunztoare
celor trei stri de agregare ale materiei:
- substane solide, care constituie faza solid sau materia solid a solului ;
- apa ncrcat cu substane solubilizate i coloidal dispersate, care reprezint faza
lichid solului;
- aerul (cu coninut de azot, oxigen, dioxid de carbon, alte gaze, vapori de ap), care
formeaz faza gazoas solului.
Din cuprinsul acestui complex natural mai face parte i lumea vie (a mezofaunei i
microorganismelor), care este agentul principal al transformrilor ce au loc n sol.
Solul constituie o colectivitate statistic, format dintr-un numr infinit de uniti
statistice (probe de sol individuale), care difer ntre ele att la suprafa ct i n adncime.
Analizele solului se efectueaz pe probe de sol compuse, care provin din mai multe
probe de sol individuale, care se amestec n mod omogen. Numrul probelor de sol
individuale care se amestec este ales n funcie de variabilitatea terenului i de precizia
urmrit n cercetare. Analizele chimice ale solului pot fi efectuate pe probe proaspete, adic
cu umiditatea ce o au n momentul recoltrii, sau pe probe uscate la aer. Prin uscarea solului
se produc ns modificri care afecteaz rezultatul analizelor cantitative pentru unele
substane din compoziia lui.
Prelevarea probelor de sol i pregtirea lor pentru analiz

Probele de sol se ridic atunci cnd solul nu este prea umed. Dup ce terenul a fost delimitat n
uniti analitice, se stabilete numrul de probe pariale ce urmeaz a fi luate din fiecare unitate analitic
i numrul de probe medii, notndu-se pe plan i pe teren locurile de unde urmeaz a fi ridicate probele.
Din probele pariale se face o prob medie. Numrul probelor ce se ridic este n funcie de scopul
cercetrii i condiiile de relief , uniformitatea solului, expoziia, etc.
Probele de sol se iau cu un utilaj adecvat (sonde, cazmale); fiecare prob trebuie s aib acelai
volum i aceeai greutate. Probele pariale se iau pe adncimea de 0-20 cm pentru terenurile arabile i 110 cm pentru pajiti; pentru livezi se iau n plus i probe de la adncimea de 20-40 cm. Probele recoltate
se ambaleaz n sculei de pnz, plicuri de hrtie sau pungi de plastic i se eticheteaz.
Pentru uscare la aer probele se aeaz ntr-o ncpere nchis, curat i bine aerisit. Fiecare prob
de sol se aeaz pe o foaie de hrtie groas; se ntinde ntr-un strat de 2 cm grosime. Se las la uscat 5-10
zile n cazul solurilor uoare i 20-25 zile pentru solurile grele (cu coninut ridicat de humus); se
amestec din cnd n cnd. Din probele uscate la aer se ia pentru analiz cantitatea de sol necesar
recurgnd la procedeul sferturilor.
2. 1. Proprietile solului n legtur cu apa

Evidenierea apei din sol
Materiale necesare: sol, sit de 2mm, eprubete, balan tehnic, spatul, bec de gaz.
Se cerne printr-o sit de 2mm o cantitate de sol uscat la aer; se ia din proba cernut o cantitate de 2-3 g
i se introduce ntr-o eprubet. Se nclzete coninutul eprubetei la flacra mic a unui bec de gaz, innd
eprubeta n poziie nclinat. Dup 1-2 minute se va observa n apropierea gurii eprubetei (unde pereii
rmn mai reci), apariia unor picturi de ap care provin din sol.
Evidenierea aerului din sol

Materiale necesare: sol uscat la aer, cilindru gradat, spatul, baghet de sticl.
Se introduce ntr-un cilindru gradat de 100 ml, sol uscat la aer i cernut prin sita de 2 mm, pn la
diviziunea de 50 ml. Se toarn peste solul din cilindru 50 ml ap distilat, amestecnd n acest timp solul cu o
baghet de sticl. Apa va dezlocui aerul din sol, fapt ce duce la scderea nivelului ei n cilindru gradat.
Cantitatea de aer din solul cercetat va fi egal cu diferena (n ml) dintre diviziunea 100 de pe cilindru i
diviziunea la care se afl meniscul apei la sfritul experimentului.
Evidenierea permeabilitii solului
Prin permeabilitate se nelege proprietatea pe care o are solul de a lsa apa s se infiltreze
n profunzime.
Materiale necesare: tub Wolff, cilindru gradat, spatul, baghet de sticl, nisip, pietri.
Se introduce puin vat n poriunea n form de plnie a tubului; se umple apoi aceast poriune cu
nisip sau pietri i se introduce peste acest strat de sol pe o nlime de 16 cm. Dup efectuarea acestor
operaii se fixeaz tubul la un stativ i se toarn ap peste solul din el. Coloana de ap din tub trebuie s aib
permanent o nlime de 8 cm, ceea ce impune meninerea ei, pe ct posibil, la un nivel constant. Dup ce
spaiile lacunare din sol s-au umplut cu ap i aceasta ncepe s picure din tub, se colecteaz aceast ap ntrun cilindru de 50 ml. Se noteaz timpul n care se colecteaz 50 ml de ap i se calculeaz prin regula de trei
simpl, gradul de permeabilitate, care se exprim n ml ap pe or. Tubul Wolff poate fi nlocuit cu un tub de
sticl cu diametrul de 3-4 cm, terminat la un capt cu o plnie.
2. 2. Reacia solului
REINEI!
Soluia solului conine ap, substane dizolvate i meninute n soluie mpotriva

forei gravitaionale. Compoziia soluiei solului variaz considerabil n funcie de
speciile de plante, natura rocii mam, textura solului.
Reacia solului este dat de raportul existent ntre ionii de hidrogen ( H+) i cei de oxidril
(OH ) aflai n soluia solului. n funcie de raportul existent ntre aceti ioni, soluia
solului poate avea o reacie acid, neutr sau alcalin. Aceast reacie se exprim
convenional prin valorile de pH, ce reprezint cologaritmul concentraiei ionilor de
hidrogen. Valorile de pH cuprinse ntre 1-7 indic o reacie acid, ntre 7-14 o reacie
alcalin, iar valoarea 7 corespunde unei reacii neutre.
Determinarea pH solului cu ajutorul hrtiei indicator

Materiale necesare: sol, eprubete, dop de cauciuc, soluie salicilat de sodiu 5 %, cilindru gradat .
ntr-o eprubet se introduc 3-5 g sol mrunit i uscat la temperatura camerei peste care se adaug o
soluie de salicilat de sodiu 5 %, ntr-un volum dublu fa de volumul solului. Se astup eprubeta cu dop i se
agit coninutul acesteia timp de 1 minut. Se las n repaus 15 minute, pn ce suspensia se limpezete.
Lichidul limpede din eprubet ia o anumit culoare n raport cu reacia solului. Valoarea pH-ului
corespunztor culorii obinute se citete n tabelul urmtor.
Culoarea salicilatului de sodiu n funcie de pH-ul solului

Culoarea soluiei de salicilat
de sodiu
Rou- nchis
Rocat
Rocat- portocaliu
Reacia mediului
Valoarea pH-ului
Puternic acid
Acid
Moderat acid
3,5- 4,8
4,8- 5,5
5,5- 6,5
Slab acid
6,5- 6,8
Neutr
6,8-7,2
Slab alcalin
7,2-8
Galben curat
Moderat alcalin
8-8,4
Galben intens
Puternic alcalin
8,4
Portocaliu pn la incolor
Incolor
Incolor pn la galben
Determinarea pH ului solului cu ph - metru

Protocol experimental: Se pregtete un extract apos de sol. Se filtreaz; se iau ntr-o eprubet civa
ml filtrat; se introduce n filtrat electrodul unui pH - metru electronic. Se deschide aparatul i dup un
interval de timp se citete pe ecranul acestuia valoarea de pH afiat.
2. 3. Evidenierea elementelor minerale din sol

Evidenierea elementelor chimice din sol se face prin procedeele i cu reactivii menionai
la analiza cenuii vegetale. Pentru a evidenia elementele minerale din sol se pregtesc trei
extracte de sol, dup procedeul, descris la analiza cenuii.

STUDIUL FOTOSINTEZEI
Cuprins
1.
2.
3.
Metode de evideniere a fotosintezei

Metode de studiu a pigmenilor asimilatori
Metode de determinare a intensitii fotosintezei
cloroplast
tilacoizi
strom
membran
intern
granum
Fotosinteza este procesul fiziologic

prin
care
plantele
fotoautotrofe
i
sintetizeaz substanele organice cu:
- ajutorul luminii;
- participarea
pigmenilor
asimilatori;
- folosind ca materii prime
dioxidul de carbon, apa i
srurile minerale.
Termenul a fost introdus de W. Pfeffer
(1877) i provine de la cuvintele greceti fotos
= lumin i sintesis = combinare, sintez.
membran
extern
1.
METODE DE EVIDENIERE A FOTOSINTEZEI
Ecuaia general a fotosintezei:

lumin
CO2 + H2O
pigmeni asimilatori
substane organice + O2
(participarea srurilor minerale nu este menionat n ecuaie)
Demonstrarea necesitii prezenei factorilor absolut necesari pentru desfurarea acestui proces se
face astfel:
la plantele terestre amilofile, prin evidenierea n frunze a amidonului (produsul
fotosintezei cel mai uor de evideniat);
la plantele acvatice superioare submerse, prin evidenierea producerii de oxigen (sub
form de bule de gaz) pe care aceste organisme l degaj.
Evidenierea necesitii prezenei pigmenilor asimilatori

Materiale necesare: plante de Coleus - frunzele acestora prezint n zona central a limbului lor celule
bogate n pigmeni antocianici i sunt lipsite de pigmeni asimilatori, pahar Berzelius, alcool etilic (metilic),
sticl de ceas, bec de gaz, soluie Lugol, cristalizor.
- se detaeaz o frunz de pe plant (inut n prealabil cteva ore la lumin);
- se introduce ntr-un pahar Berzelius n care s-a pus ap aa nct s fie bine acoperit i se fierbe
pentru a extrage pigmenii antocianici;
- dup extragerea acestora se nlocuiete apa din pahar cu alcool etilic (metilic); se acoper
paharul cu o sticl de ceas pentru a evita aprinderea vaporilor de alcool i se fierbe frunza n
continuare (la flacr mic), pentru a extrage pigmenii asimilatori;
- dup extragerea pigmenilor asimilatori (indicat de culoarea albicioas a limbului) se scoate
frunza din pahar i se spal cu ap;
- - se introduce apoi frunza ntr-un cristalizor ce conine soluie Lugol;
- - dup 2-3 minute se scoate frunza din cristalizor, se spal cu ap; se etaleaz limbul pe o plac
de faian.
Interpretare
Se va constata c limbul se coloreaz n
albastru doar n acele zone (3 n fig. alturat) ale
sale care au prezentat pigmeni asimilatori ceea ce
demonstreaz faptul c substanele organice
(dintre care amidonul se evideniaz cel mai uor)
se sintetizeaz la lumin, doar n prezena
pigmenilor asimilatori.
a-frunz de Coleus cu pigmeni antocianici n zona central a limbului (1) i asimilatori nspre margine (2)
b- aceeai frunz dup extragerea din ea a pigmenilor asimilatori i efecuatrea probei cu iod
Demonstrarea necesitii prezenei luminii pentru desfurarea fotosintezei
Experiment 1
Materiale necesare: ghiveci cu plante de Pelargonium, fie de hrtie neagr, pahar Berzelius, alcool
etilic 96 % (alcool metilic), sticl de ceas, soluie Lugol, cristalizor, agrafe.
- se fixeaz cu ajutorul unor agrafe pe ambele fee ale unei frunze de Pelargonium nedetaat de pe
plant, o fie de hrtie neagr;
- se aeaz ghiveciul cu planta la ntuneric pentru ca frunzele s se goleasc de amidon, n urma
procesului de transport al asimilatelor n celelalte organe ale plantei;
- se expune ghiveciul cu planta pentru cteva ore la lumin i apoi se detaeaz frunza acoperit
parial cu hrtia neagr;
- se nltur hrtia de pe suprafaa frunzei, se introduce frunza ntr-un pahar Berzelius ce conine
alcool etilic 96 % ( alcool metilic);
- se fierbe coninutul paharului la flacr mic (paharul s fie acoperit cu o sticl de ceas) pn ce
frunza se decoloreaz complet (ca urmare a extragerii pigmenilor asimilatori);
- se scoate frunza din pahar, se spal cu ap i se introduce ntr-un cristalizor ce conine soluie Lugol
unde se las cu limbul complet imers timp de 2-3 minute;
- se scoate frunza din soluie, se spal cu ap i se aeaz pe o plac de faian, etalndu-i limbul.
Interpretare
Limbul frunzei se coloreaz n albastru doar n
zonele (3 n figur alturat) n care lumina a
ajuns pe suprafaa lui (zonele neacoperite de
hrtie neagr), zone n care n timpul
fotosintezei s-au sintetizat substane organice
(amidon + soluia Lugol d coloraia albastr).
a-frunz de Pelargonium acoperit pe ambele fee ale limbului cu o fie de hrtie neagr (1) i expus la
lumin (2- zone expuse la lumin)
b- aceeai frunz dup extragerea din ea a pigmenilor asimilatori i efecuatrea probei cu iod (3- zone
colorate n albastru, datorit acumulrii amidonului; 4- zon de culoare glbuie, lipsit de amidon, deoarece
a fost ferit de lumin)
Experiment 2
Materiale necesare: ramuri de la plante acvatice (Elodea, Myriophyllum, Ceratophyllum), eprubet,

baghet, stativ, bec electric.
- o ramur a unei plante acvatice (Elodea, Myriophyllum, Ceratophyllum), se secioneaz oblic la parte
bazal astfel ca s se obin un fragment de 6 - 1o cm lungime;
- se introduce fragmentul cu vrful n jos ntr-o eprubet umplut cu ap de conduct pn la refuz;
- se fixeaz ramura cu ajutorul unei baghete aa nct partea secionat s se gseasc sub nivelul
apei ct mai mult posibil i s nu ating pereii eprubetei;
- se fixeaz eprubeta cu ramura ntr-un stativ, la lumin natural sau la o distan de 20- 30 cm fa
de un bec electric;
Interpretare
Dup 2- 3 minute se va putea constata c prin partea

secionat a ramurii ncep s se degaje bule de gaz.
Eliminarea bulelor de gaz prin partea secionat a
ramurii se explic prin faptul c oxigenul (format n
timpul procesului de fotosintez) difuzeaz mai uor n
spaiile intercelulare ale frunzelor i de acolo n
aerenchimul ramurii i se degaj ca bule de gaz prin
partea secionat a ramurii (prin care aerenchimul
acesteia comunic n urma secionrii cu exteriorul). n
afar de oxigen, aceste bule de gaz conin azot uneori
chiar dioxid de carbon ce difuzeaz i sunt degajate la
nivelul seciunii mpreun cu oxigenul.
Evidenierea producerii de oxigen n timpul fotosintezei

Materiale necesare: plante acvatice superioare submerse (de preferin Elodea canadensis, n lipsa
acesteia se poate utiliza Ceratophyllum sau Myriophyllum), plnie de sticl, dou baghete de sticl, bec electric,
b de chibrit.
- se secioneaz oblic cteva ramuri de Elodea canadensis care se introduc ntr-o plnie de sticl, cu
partea secionat orientat spre gtul plniei;
- se introduce plnia ntr-un vas umplut cu ap, aeznd - o pe dou baghete de sticl, astfel ca
nivelul apei din vas s depeasc extremitatea gtului plniei;
- se aeaz pe gtul plniei o eprubet umplut cu ap aa nct s nu rmn n ea aer; n acest scop
se umple eprubeta cu ap pn la refuz, se astup cu degetul mare, se ntoarce cu gura n jos i, dup ce se ia
degetul de pe gura eprubetei se aeaz pe gtul plniei fr a o ridica deasupra nivelului apei din vas;
- se las instalaia astfel pregtit la lumin natural sau la cea furnizat de un bec electric.
Interpretare
Se va observa faptul c datorit desfurrii procesului de
fotosintez, ramurile degaj bule de gaz care se ridic prin gtul
plniei i se acumuleaz n eprubet, dezlocuind apa din
interiorul ei. Dup ce eprubeta s-a umplut cu gazul acumulat, ea
se ridic de pe gtul plniei fr a o scoate din ap, i se astup
gura cu degetul mare, se scoate din vasul cu ap, se ntoarce cu
gura n sus i se introduce repede n interiorul ei un b de chibrit
care n urma unei arderi ntrerupte are jratic. Se va constata c
bul de chibrit va rencepe s ard cu flacr vie, fapt ce
demonstreaz c gazul degajat de plante n cursul desfurrii
fotosintezei este oxigenul, deoarece acesta este singurul gaz
capabil s ntrein arderea.
1- bagehte de sticl care susin plnia cu scopul ca ramurile s se poat aproviziona cu dioxidul de
carbon existent sub form solvit din toat masa apei din vas
2. METODE DE STUDIU A PIGMENILOR ASIMILATORI
REINEI!
Organele plantelor fotoautotrofe, adaptate la ndeplinirea procesului de fotosintez,

conin un ansamblu de pigmeni asimilatori:
pigmeni clorofilieni (clorofila a i clorofila b, etc.);
pigmeni carotenoizi (caroteni i xantofile) ce nsoesc pigmenii
clorofilieni n celulele asimilatoare ale tuturor plantelor;
pigmenii ficobilini, se ntlnesc mpreun cu ali pigmeni la algele
albastre ( ficocianina) i la cele roii ( ficoeritrina).
Extragerea pigmenilor asimilatori
Cu excepia pigmenilor ficobilini, care sunt ataai de proteine solubile i pot fi extrai
prin introducerea n ap distilat a organismelor n care se gsesc, ceilali pigmenii asimilatori
(clorofilieni i cei carotenoizi) pot fi extrai din organismele vegetale cu ajutorul unor solveni
organici.
Extragerea acestor pigmeni se poate face la cald i la rece.
a) Experiment 1
Extragerea pigmenilor asimilatori la rece
Materiale necesare: frunze proaspete, mojar, aceton 85%, hrtie de filtru, pahar Erlenmeyer, plnie
de sticl.
-1-2 g frunze proaspete se mrunesc ntr-un mojar;
- se adaug puin nisip de cuar;
-se adaug o cantitate mic de aceton;
- se mojareaz bine frunzele;
-extractul obinut se filtreaz, se colecteaz ntr-un vas i se utilizeaz la evidenierea proprietilor
pigmenilor asimilatori.
Experiment 2
Extragerea pigmenilor asimilatori la cald
Materiale necesare: frunze proaspete, pahar Erlenmeyer, alcool etilic 96 % (alcool metilic 96%), bec de
gaz, sticl de ceas.
- 2-4 g frunze proaspete se mrunesc i se introduc ntr-un pahar Erlenmeyer;
- se adaug alcool etilic 96 % (alcool metilic 96%) pn se acoper complet frunzele;
- se fierbe coninutul paharului (paharul s fie acoperit cu o sticl de ceas) la flacr mic pn ce
materialul vegetal devine incolor;
- extractul obinut se filtreaz i poate fi utilizat la evidenierea proprietilor pigmenilor
asimilatori.
Evidenierea proprietilor pigmenilor asimilatori
Materiale necesare: extract de pigmeni asimilatori, spectroscop, eprubete, stative.

1) culoarea: n extract, clorofila a are culoare verde- albstrui; clorofila b verde glbui; carotina galben portocaliu iar xantofila - galben verzui;
2) solubilitatea: pigmenii asimilatori sunt insolubili n ap i sunt solubili n solveni organici
(alcool etilic, alcool metilic, alcool butilic, aceton, eter etilic, cloroform, sulfur de carbon);
3) dicroismul: proprietatea unor soluii de a avea n lumin direct o anumit culoare, iar prin
reflexie o alt culoare.
Pentru a observa acest fenomen se ia o eprubet cu un extract alcoolic de pigmeni
asimilatori i se privete eprubeta prin transparen, aeznd-o ntre observator i sursa de
lumin: extractul va avea o culoare verde. Privind apoi eprubeta lateral fa de sursa de
lumina (din partea din care vine sursa de lumin): extractul va apare de culoare roie. Acest
fenomen se datorete proprietilor pigmenilor asimilatori de absorbi radiaiile de lumin i
de a le transforma pe cele cu lungimi de und mic n radiaii roii (cu lungimi de und
mari). Fenomenul sugereaz nsuirea pigmenilor asimilatori de a capta energia luminoas
i de a o transforma n energie chimic nmagazinat n moleculele substanelor organice
sintetizate n procesul de fotosintez.
4) spectrele de absorbie ale pigmenilor asimilatori: pigmenii asimilatori au capacitatea de
absorbi selectiv radiaiile spectrului solar conform particularitilor lor de structur.
Se evideniaz aeznd o cuv cu extract alcoolic diluat de pigmeni asimilatori n faa
fantei unui spectroscop. Privind prin ocular se va observa c n spectroscop apar cel puin
dou benzi de absorbie: una n domeniul radiaiilor roii iar cealalt n domeniul radiaiilor
albastre - violet. n extractul concentrat, benzile de absorbie sunt mai late comparativ cu
extractul diluat. Pigmenii asimilatori absorb anumite radiaii din spectrul solar i, ca
rezultat, n locul radiaiilor absorbite apar benzi cu att mai nchise la culoare cu ct
absorbia lor este mai puternic.
Spectrele de absorbie ale extractelor alcoolice de pigmeni

asimilatori, n funcie de concentraia lor.
a- la extractele de concentraie slab
b- la extractele de concentraie mijlocie
c- la extractele cu concentraie mare
5) fotooxidarea clorofilelor:
n dou eprubete se introduc cte 5 ml extract alcoolic de pigmeni asimilatori, i se aeaz
una din eprubete la lumin, iar cealalt la ntuneric. Dup cteva zile se va putea constata c
extractul care a fost inut la lumin se brunific, iar cel din eprubeta inut la ntuneric i
pstreaz culoarea galben. Brunificarea se datorete oxidrii pigmenilor asimilatori sub
aciunea luminii. n frunzele bine aprovizionate cu ap, cu sruri minerale i cu dioxid de
carbon, decolorarea pigmenilor la lumin nu are loc, ei fiind protejai de pigmenii
carotenoizi i de substanele proteice din cloroplaste.
3. METODE DE DETERMINARE A INTENSITII FOTOSINTEZEI
Determinarea intensitii fotosintezei la plantele superioare submerse, dup cantitatea de oxigen
solvit n ap - metoda Winkler
Principiul metodei. Metoda se bazeaz pe determinarea cantitii de oxigen degajat n timpul fotosintezei
de plantele superioare submerse, introduse n recipiente de sticl cu volum cunoscut, prin diferena dintre
concentraia final i cea iniial de oxigen solvit, existent ntr-un volum de ap egal cu cel n care au stat plantele.
Dozarea oxigenului din ap are loc n urma adugrii unor cantiti determinate dintr-o soluie de
Mn Cl2 i KI n NaOH . n urma reaciilor se formeaz hidroxidul manganos (precipitat de culoare alb) :
MnCl2 + 2 NaOH = Mn (OH)2 + 2 NaCl
Hidroxidul manganos format se combin cu oxigenul dizolvat n ap, transformndu-se n
hidroxid manganic (precipitat de culoare brun):
4 Mn (OH)2 + O2 + 2 H2O = 4 Mn (OH)3
Hidroxidul manganic se dizolv prin adugarea unei cantiti de HCl concentrat i n prezena KI
se pune n libertate iodul
4 Mn (OH)3 + 12 HCl + 4 KI = 4 MnCl2 + 4 KCl. + 12 H2O + 2 I2
Iodul pus n libertate se titreaz cu tiosulfat de sodiu, n prezena unei soluii de amidon (clei de
amidon). Tiosulfatul de sodiu formeaz cu iodul tetrationatul de sodiu.
2 Na2S2O3 + I2 = Na2S4O6 + 2 NaI
Cunoscnd cantitatea de tiosulfat folosit la titrare i echivalentul n oxigen al acestuia se
calculeaz cantitatea de oxigen dizolvat n ap.
Materiale necesare: plante superioare submerse, pahare Erlenmeyer de volum cunoscut, pipete
gradate, biuret, soluie de KI n NaOH, soluie de MnCl2, HCl concentrat, soluie de Na2S2O3 0,01 N, clei de
amidon 0,2%, hrtie de filtru, a.
Pentru determinare se iau dou flacoane de acelai volum: unul = martor (M) i cellalt = cu proba (P)
care se umplu cu ap pn la refuz. n al doilea vas se introduc ramuri de plant avcatic submers a crei
intensitate a fotosintezei dorim s-o studiem. Pentru scoaterea ramurilor plantelor din flacon ct mai repede,
dup terminarea experienei, acestea se leag cu a al crui capt rmne afar.
Se astup flacoanele respective cu dopurile n aa fel nct s nu rmn bule de aer.
Flacoanele se aeaz la lumin (la lumina unei lmpi) timp de o or dup care se scot ramurile de
plant i se dozeaz oxigenul dizolvat n ambele flacoane, procednd astfel:
- se introduc cte 1 ml soluie de KI n NaOH i 1 ml soluie de MnCl2 avnd grij ca vrful
pipetei s ajung pn aproape de fundul flaconului.
- se adaug dopurile la flacoanele respective; se agit pentru ca hidroxidul manganos format
(precipitat de culoare alb) s vin n contact cu oxigenul dizolvat n ap;
- se las n repaus pn se depune precipitatul brun de hidroxid manganic ;
- dup depunerea precipitatului, introducem n fiecare flacon cte 3 ml HCl concentrat cu
ajutorul unei pipete, n aa fel nct s ajung deasupra precipitatului, punndu-se n acest timp iodul
n libertate;
- iodul pus n libertate se titreaz cu o soluie de tiosulfat de sodiu 0,01N astfel:
- se trece coninutul flaconului n care a fost planta ntr-un balon Erlenmayer, se spal
flaconul cu ap distilat, pe care o adugm tot n balon;
- se titreaz agitnd mereu lichidul, pn cnd se ajunge la culoarea galben deschis;
- se adaug cteva picturi de clei de amidon 0,2%; lichidul se coloreaz n albastru;
- se continu titrarea pn la incolor;
- se noteaz volumul soluiei de tiosulfat de sodiu folosit la titrare;
- se procedeaz la fel cu flaconul fr plant.
Modul de umplere a sticlelor prin sifonare

a- umplerea sticlei cu planta i a celei martor
b- umplerea sticlelor de dozare a oxigenului solvit n ap
Interpretare
Calculul rezultatelor
Cantitatea de oxigen dizolvat n apa din cele dou flacoane se calculeaz
n F 1000 0,056
V-2
n care:
n = volumul soluiei de tiosulfat folosit la titrare;
F = factorul soluiei de tiosulfat de sodiu;
V = volumul flaconului;
2 = volumul de ap dezlocuit prin introducerea soluiilor de MnCl2 i KI n NaOH;
0,056 = cantitatea de oxigen care corespunde la 1 ml tiosulfat de sodiu 0,01 N n cm3.
Dac dorim s exprimm cantitatea de oxigen n mg se nlocuiete 0,056 cm3 cu 0,08 mg.
Cantitatea de oxigen produs de plant n timpul determinrii se face prin diferena ntre cantitatea de
oxigen din proba de experien i cea din proba martor.
Pentru a calcula cantitatea de oxigen eliminat de 1g de plant ntr-un litru de ap timp de o or, se
cntrete planta , dup ce n prealabil s-a ndeprtat apa de pe ea cu o hrtie de filtru;
(A-B) 60
IF =
mt
n care:
A = cantitatea de oxigen dizolvat n vasul cu material vegetal (n g)
B = cantitatea de oxigen dizolvat n vasul cu material martor (n g)
60 = coeficient pentru raportarea IF la unitatea de timp (1h)
m = masa de material vegetal
t = timpul de expunere

STUDIUL FOTOSINTEZEI
Cuprins
1.
2.
Metode de determinare a intensitii fotosintezei

Metode de studiu ale influenei factorilor externi asupra fotosintezei
1. METODE DE DETERMINARE A INTENSITII FOTOSINTEZEI
Determinarea intensitii fotosintezei la plantele superioare submerse, dup cantitatea de
oxigen solvit n ap - metoda Winkler - a fost studiat n laboratorul nr. 7
Determinarea intensitii fotosintezei prin metoda manometric Warburg - se va studia la capitolul

Respiraie
Principiul metodei. Metoda se bazeaz pe stabilirea volumului de oxigen eliberat n cursul procesului de
fotosintez ntr-un sistem nchis, prin msurarea variaiilor de presiune, n condiii de volum constant,
temperatur constant i totodat n condiiile meninerii constante a concentraiei de dioxid de carbon,
cu ajutorul unei soluii tampon.
Determinarea intensitii fotosintezei prin metoda Ivanov - Kosovici dup cantitatea de dioxid
de carbon absorbit
Principiul metodei. Metoda se bazeaz pe determinarea cantitii de dioxid de carbon absorbit de
frunzele plantelor, dintr-un volum de aer cunoscut, n procesul de fotosintez. Drept camer de asimilaie
se utilizeaz un recipient de sticl nchis cu un dop pentru a-l izola de atmosfera nconjurtoare. Dioxidul
de carbon din aerul recipientelor rmas neabsorbit de plante n procesul de fotosintez este captat de o
soluie de hidroxid de bariu ; hidroxidul de bariu rmas necarbonatat se titreaz cu o soluie de acid
oxalic. Cantitatea de dioxid de carbon absorbit de plante n procesul fotosintezei se afl prin diferena
dintre cantitatea de acid oxalic folosit la titrare n recipientul cu proba i cea folosit la titrare n
recipientul martor.
Materiale necesare: frunze de la plante su perioare terestre; vase de sticl
(vase de reacie) reprezentate prin borcane pentru preparate anatomice cu o
capacitate de 300 cm3 , care se nchid cu dopuri de cauciuc lefuite astfel nct
la presare nchid acelai volum de aer. Dopurile acestor vase sunt strbtute
de cte un tub de sticl plin cu var sodat, nchis n repaus cu cte un plasture
(pentru a izola granulele de var sodat de contactul permanent cu dioxidul de
carbon din aer), care se ndeprteaz n momentul lucrului. Dopurile mai sunt
strbtute de cte un tub de sticl lung, la care este ataat,, n partea inferioar
un disc din material plastic perforat, cu diametrul ceva mai mic dect cel al
vasului iar n partea superioar este nchis, n repaus, cu un papuc de cauciuc
care se ndeprteaz numai n momentul introducerii reactivilor.
-
balan:
soluie de hidroxid de bariu 7%0;
soluie de acid oxalic 2,8636 %0;
soluie de fenolftalein 1% ;
pipete.
a- balonul cu frunza; b- balonul

martor; c- balonul cu frunza (n
varianata simplificat); d- balonul
martor (n varianta simplificat);
1- termometre; 2- baghete de
sticl
Pentru determinare se folosesc 3 vase de sticl de acelai volum: un vas este martor (fr material
vegetal i 2 vase sunt cu probe (cu material vegetal). n fiecare din cele dou vase de experien se introduce
cte o frunz proaspt detaat de pe plant i cntrit la balana analitic (1g material vegetal). Se nchid
vasele cu dopurile respective. Vasul martor nu se nchide cu dop. Cele 3 vase se aeaz la lumin timp de 30
minute pentru desfurarea fotosintezei. Dup acest interval de timp se introduc n fiecare din cele 3 vase de
reacie cte 10 ml soluie de hidroxid de bariu 7%0 i cte 2-3 picturi soluie de fenolftalein 1% (ca
indicator). Fenolftaleina d cu soluia de hidroxid de bariu o coloraie roie. Se acoper vasele cu dopurile
respective. Se agit uor hidroxidul de bariu timp de 15 minute, pentru a se capta toat cantitatea de dioxid
de carbon rmas n aerul din interiorul vaselor. Hidroxidul de bariu formeaz cu dioxidul de carbon
carbonatul de bariu , un precipitat de culoare alb. Datorit faptului c n timpul fotosintezei hidroxidul de
bariu a absorbit dioxid de carbon, n aerul din vasele n care a stat frunza rmne o cantitate mai mic de
dioxid de carbon i, n consecin, n aceste vase rmne o cantitate mai mic de hidroxid de bariu
necarbonatat dect n vasul martor.
Dup 15 minute, se titreaz hidroxidul de bariu rmas necarbonatat n cele 3 vase de reacie, cu o
soluie de acid oxalic 2,8636%0
Titrarea se consider terminat n momentul n care soluia din vase are o culoare roz- pal.
Se noteaz volumul de soluie de acid oxalic folosit la titrari (ml).
Calculul rezultatelor
Intensitatea fotosintezei se calculeaz dup formula:
IF =
(a-b) d 60
G T
n care:
a = volumul soluiei de acid oxalic folosit la titrarea hidroxidului de bariu rmas necarbonatat n
vasul de determinare a fotosintezei;
b = volumul soluiei de acid oxalic folosit la titrarea hidroxidului de bariu rmas necarbonatat n
vasul martor;
d = factorul soluiei de acid oxalic;
60 = factor de transformare a minutelor n ore, dac T este n minute;
G = greutatea materialului n grame;
T = timpul de expunere n minute.
2. METODE DE STUDIU ALE INFLUENEI FACTORILOR EXTERNI ASUPRA FOTOSINTEZEI
REINEI!
Fotosinteza este influenat de un numr mare de factori ai mediului extern,

dintre care unii au o aciune permanent sau periodic limitativ. Dintre factorii mediului
extern, fotosinteza este influenat puternic de lumin care intervine asupra acestui
proces fiziologic att prin intensitatea ei ct i prin compoziia sa spectral, de
concentraia dioxidului de carbon i de temperatur.
Influena intensitii luminii asupra fotosintezei
Lumina - sursa de energie utilizat de plantele fotoautotrofe n procesul de fotosintez,

declaneaz desfurarea acestui proces prin prezena ei, l influeneaz puternic prin intensitatea ei i-l
ntrerupe n absena ei.
Materiale necesare: ramuri de la plante acvatice submerse, lam de ras, eprubete, bec electric, stativ,
rigl gradat.
- se aleg 3-5 ramuri de plant acvatic, se secioneaz oblic cu o lam de ras (6-10 cm);
- se introduc cu vrful ntr-o eprubet cu ap avnd grij ca suprafaa lor de seciune s nu ating
pereii eprubetelor;
- se introduc eprubetele ntr-un stativ i se aeaz la lumina unui bec electric de 60 100 W la o
distan de 20 cm de acesta, lsndu-le n aceast poziie pn cnd ncep s degaje bule de oxigen;
- pentru experimentri se va alege o ramur care degaj un numr constant de bule, cuprins ntre 20 40/ minut, stabilit prin numrtori succesive;
- se aeaz eprubeta cu ramura aleas pentru determinri, ntr-un stativ la distane diferite fa de
sursa de lumin: 10cm; 20 cm; 40 cm; 60 cm; 80 cm;
- se numr bulele de gaz degajate de ramur / 1 minut, n fiecare caz , pn cnd numrul lor devine
constant (trei repetiii pentru fiecare variant);
- se noteaz acest numr;
- intensitatea fotosintezei se apreciaz prin numrul de bule de gaz degajate /1 minut;
- se trec datele obinute ntr-un tabel (ca cel de mai jos) i se reprezint grafic (pe abscis: distana fa
de surs; pe ordonat: intensitatea fotosintezei , exprimat n numr de bule de oxigen / minut).
Distana fa de sursa
de lumin
10 cm
20 cm
40 cm
60 cm
80 cm
Intensitatea fotosintezei (numr bule de

gaz / minut)
Interpretare
n cazul frunzei situat n apropierea sursei de lumin, se nregistreaz un maxim al
intensitii fotosintezei, n timp ce la intensitate luminoas redus, rata fotosintezei este
sczut.
Influena compoziiei spectrale a luminii asupra intensitii fotosintezei
REINEI!
Dintre radiaiile spectrului solar, plantele absorb anumite tipuri de radiaii n

conformitate cu spectrul de absorbie al pigmenilor asimilatori. n procesul de
fotosintez sunt active radiaiile care aparin spectrului luminos vizibil (ROGVAIV
rou, oranj, galben, verde, albastru, indigo i violet). Lungimea de und a acestor
radiaii este cuprins ntre 700 nm ( rou) i respectiv 400 nm (violet).
Principiul metodei : se bazeaz pe utilizarea unui set de soluii colorate care imit culorile
spectrului luminos vizibil i respectiv a metodei numrrii bulelor de gaz.
Materiale necesare: soluie de Cu SO4 2 % + soluie de violet de geniana 0, 05 % n proporie de 39: 1
(pentru domeniul radiaiilor violet albastre); soluie de NiNO3 (pentru domeniul radiaiilor verzi
portocalii); rou de metil (pentru domeniul radiaiilor roii); ramuri de Elodea canadensis, rigl, surs de
lumin.
- se utilizeaz o eprubet cu ap de robinet i un fragment dintr-o ramur de Elodea canadensis
pregtit dup modelul descris anterior;
- eprubeta cu planta submers se introduce n vasul cu soluie roie poziionat la distana de 20 cm
fa de sursa de lumin;
se ateapt un timp, pentru ca planta s se acomodeze noilor condiii (iar numrul de bule degajat s
devin constant), apoi se numr bulele de gaz degajate pe minut, n trei repetiii;
se scoate eprubeta din vas, se terge de soluie i se menine timp de 5 minute la lumina zilei, apoi se
introduce n urmtoarea soluie colorat; se procedeaz asemenea situaiei anterioare;
pentru fiecare soluie colorat n parte se vor efectua numrtori ale bulelor de gaz degajate / minut,
n trei repetiii;
se trec datele obinute ntr-un tabel i se reprezint grafic ( pe abscis: domeniul radiaiilor; pe
ordonat: intensitatea fotosintezei);
1- pahar Berzelius cu ap sau

soluii colorate; 2- eprubeta cu
ramura, fixat la un stativ
(sgeata arat direcia din care
vine lumina de la bec
Influena concentraiei dioxidului de carbon asupra fotosintezei
n condiiile din natur, dioxidul de carbon este un factor permanent limitant al fotosintezei din
cauza concentraiei lui (n atmosfer se gsete ntr-un procent de numai 0,03 %).
Materiale necesare: ramuri de la plante acvatice submerse, lam de ras, eprubete, bec electric, stativ,
rigl gradat, soluii de carbonat de sodiu 0,1 %; 0,5 %; 1 %;
Evidenierea influenei acestui parametru asupra fotosintezei se poate face innd totdeauna la aceeai
distan (20 sau 30 cm) fa de sursa de lumin (reprezentat de un bec electric de 60 - 100W) o ramur de
plant acvatic submers pregtit dup modelul descris anterior;
- ramura se introduce n soluii de carbonat acid de sodiu de concentraii diferite - substana este o bun
surs de dioxid de carbon deoarece prin disociere l elibereaz:
2 Na HCO3
CO2 + Na 2CO3 + H2O
- se folosesc succesiv soluii de carbonat de sodiu de concentraii: 0,1 %; 0,5 %; 1 %;

- se numr n fiecare caz bulele de gaz degajate / 1 minut pn cnd numrul lor devine constant;
- rezultatele se trec ntr-un tabel (ca n cel de mai jos) i se reprezint grafic.
Concentraia soluiei de
NaHCO3 ( %)
0,1
0,5
1
Intensitatea fotosintezei (numr bule de

gaz / minut)
Influena temperaturii asupra intensitii fotosintezei
Temperatura modific intensitatea fotosintezei prin influena pe care o manifest asupra reaciilor
caracteristice mecanismului acestui proces i prin aciunea sa asupra vscozitii celulelor asimilatoare.
Materiale necesare: ramuri de plant acvatic submers, pahar Berzelius, eprubete, termometru,
stativ.
- eprubeta cu ramura aleas aa nct s degaje n mod constant un numr de bule de gaz cuprins
ntre 20 - 40 / minut se introduce succesiv ntr-un pahar Berzelius (aezat la distana de 20 cm fa de sursa
de lumin) umplut cu ap la diferite temperaturi: 10, 20, 30, 40, 50 grade Celsius. Ramura i ntreaga coloan
de ap din eprubet trebuie s se afle sub nivelul apei din pahar;
- n timpul determinrilor se fixeaz eprubeta cu ramura la un stativ i se urmrete temperatura
apei din eprubet, controlnd-o periodic cu un termometru pn cnd aceasta a luat temperatura de lucru.
n acest moment se numr bulele de gaz degajate de ramur / minut, se noteaz ntr - un tabel i se
reprezint grafic;
- dac pe parcursul determinrilor se constat dereglri n degajarea de bule de ctre ramur,
ntreaga serie de determinri trebuie reluat cu o ramur nou. Continuarea determinrilor cu o alt ramur
nu este permis deoarece se obin rezultate eronate.
- rezultatele se trec ntr-un tabel (ca n cel de mai jos) i se reprezint grafic.
Temperatura (0 C)
Intensitatea fotosintezei (numr bule de gaz /

minut)
10
20
30
40
50

STUDIUL PRODUILOR PRIMARI DE METABOLISM AI PLANTELOR
Cuprins
Evidenierea glucidelor
1. Evidenierea monoglucidelor
2. Evidenierea diglucidelor
3. Hidroliza diglucidelor
4. Identificarea unor glucide solubile dintr-o soluie necunoscut
REINEI!
Metabolismul reprezint un ansamblu de transformri ale materiei i

energiei ce au loc n ntregul organism determinnd desfurarea activitii vitale.
Aceste transformri se realizeaz n numeroase etape, printr-o serie de reacii
intermediare, ce constituie metabolismul intermediar; orice substan care particip
la aceste transformri este un metabolit.
Metabolismul cuprinde dou laturi:
Anabolismul: cost n sinteza metaboliilor;
Catabolismul: const n degradarea metaboliilor.
Dup geneza i nsemntatea lor, metaboliii pot fi clasificai n: metabolii
primari i metabolii secundari.
PRODUII PRIMARI AI ANABOLISMULUI
Produii primari ai fotosintezei sunt glucidele solubile (fructoz, glucoz) din care ia
natere, prin procese complexe de metabolism, aproape toat materia organic n natur,
reprezentat prin diversitatea compuilor organici, simpli sau compleci, caracteristici fiecrei
specii vegetale.
EVIDENIEREA GLUCIDELOR
REINEI!
Numite i zaharuri sau hidrai de carbon, glucidele sunt substane organice

foarte rspndite (80 - 90 % din substana uscat a esuturilor vegetale), att libere
(pentozele i hexozele) ct i sub form de combinaii (glicoproteide, glicolipide,
glicozide, etc.).
Rolul lor fundamental este cel energetic, dar pot ndeplini i alte roluri
-plastic (celuloza, hemicelulozele, glicoproteinele, substanele pectice, caloza);
-de rezerv ( glucoza, amidonul, inulina, hemicelulozele);
-protector (gumele).
Riboza i dezoxiriboza sunt constituente eseniale ale celor dou nucleoproteide
(ADN i ARN) substane care dirijeaz ntregul metabolism.
Dup structura lor chimic, glucidele se pot grupa n: monoglucide, oligoglucide
i poliglucide.
1. EVIDENIEREA MONOGLUCIDELOR
Monoglucidele sunt combinaii polihidroxicarbonilice: polihidroxialdehide

polixidroxicetone; majoritatea conin o caten neramificat de atomi de carbon.
Cele mai rspndite i mai importante monoglucide sunt pentozele i hexozele.
sau
Evidenierea pentozelor
n frunzele plantelor se gsesc cantiti mici de pentoze libere, n schimb n proporie mare se
ntlnesc sub form de pentozani (poliglucide ce nsoesc celuloza), glicozizi, esteri i ca uniti
structurale ale acizilor nucleici, ct i ale unor enzime i vitamine. Cele mai importante sunt
urmtoarele: arabinoza, xiloza, riboza, ribuloza, dezoxiriboza.
Principiul metodei. Sub aciunea acizilor minerali concentrai i a cldurii, pentozanii trec n
pentoze care pierd 3 molecule de ap i trec n furfurol. Acesta, fiind volatil, d cu fenolii coloraii
caracteristice, datorit formrii unor compleci colorai.
-
Materiale necesare: rumegu de fag, HCl 25 %, acetat de anilin (anilin i acid acetic glacial 1:1),
fluoroglucin, eprubete, pipete, bec de gaz, hrtie de filtru.
Experiment 1
Se ia ntr-o eprubet puin rumegu de fag peste care se adaug HCl 25 % ( dou volume HCl : 1
volum rumegu). Se introduce n gura eprubetei o fie de hrtie de filtru mbibat n acetat de anilin i se
fierbe la flacr. Hrtia de filtru se coloreaz n rou-viiniu.
Interpretare. Pe parcursul reaciei se degaj vapori de furfurol care se fixeaz pe hrtia de filtru
colornd-o n rou- viiniu.
Durata experienei. 10 minute.
Experiment 2
Peste rumegu de lemn se adaug HCl 25% (dou volume HCl : 1 volum rumegu), se nclzete,
obinndu-se un extract de pentoze. Peste civa ml de extract se adaug un vrf spatul de floroglucin i se
fierbe la flacr. Apare n curnd o coloraie roz ce trece n galben-roz, apoi n rou aprins i se stabilizeaz
la o culoare maroniu nchis.
Interpretare: Apariia culorii maroniu nchis dovedete reacia caracteristic dintre pentoze i
floroglucin. Hexozele dau cu floroglucina o coloraie caramel, fr etape intermediare.
Evidenierea hexozelor
Hexozele se gsesc n plante att libere, ct i sub form de oligoglucide, poliglucide, glicozizi, esteri i ali
derivai. n natur se ntlnesc n primul rnd aldohexoze (glucoza, galactoza, manoza) i cetohexoze
(fructoza). Mai rspndite i mai importante sunt glucoza i fructoza.
Modul de extragere. Glucoza i fructoza pot fi puse n eviden n diferite fructe (mere, pere, struguri,
prune, portocale, stafide, etc.), n bulbi ( ceap, usturoi, etc.), n tuberculii de Dahlia sp., n rdcini (morcov,
elin, etc), n semine de graminee germinate (n vrst de 5-6 zile) precum i n ramurile unor arbori (alun,
fag, paltin, stejar, mr, etc.) .
Materialul vegetal, bine mrunit, se fierbe cteva minute cu ap (se folosesc circa 100 ml de ap la 20
g de material vegetal). Extractul se decanteaz sau se filtreaz i se folosete la identificarea hexozelor.
Se recomand efectuarea n paralel de experiene comparative utiliznd soluii pure de glucoz i
fructoz 3-4 %.
Reacii comune aldozelor i cetozelor

Monoglucidele fiind oxidabile, posed proprieti reductoare.
a) REACIA FEHLING
Principiul metodei: gruprile carbonilice (aldehidic, respectiv cetonic) reduc Cu 2+ din
complexul cupric al reactivului Fehling la Cu (din oxidul cupros) n timp ce ele se oxideaz la acizi
gluconici. Oxidul cupros format se prezint sub forma unui precipitat rou crmiziu.
Materiale necesare: extract vegetal i / sau soluie pur, bulb de ceap, reactiv Fehling (Reactivul 8Raianu), eprubete, pipete, stative pentru eprubete, bec de gaz.
Se iau ntr-o eprubet civa ml (5 ml) din soluia de analizat i se adaug 1-2 ml de reactiv Fehling. Se
fierbe la flacr, agitnd continuu. Funcie de proporia monoglucidelor existente n soluia analizat se
formeaz un precipitat de oxid cupros (rou trecnd prin galben) ce se depune pe fundul eprubetei.
Reacia Fehling se poate obine i pe preparate histochimice, fiind utilizat pentru identificarea
glucidelor reductoare la acest nivel.
Se trateaz o seciune dintr-o frunz modificat din bulbul de ceap cu o pictur de reactiv Fehling;
se nclzete la flacr. Se observ la microscop sau cu ochiul liber, granule roii de Cu2O.
Reacia Fehling este pozitiv pentru toate glucidele reductoare.
b) REACIA MOLISCH
Principiul metodei: sub aciunea acidului sulfuric concentrat hexozele trec n hidroximetilfurfurol,
care d cu fenolii (timol i alfa naftol) compui colorai.
Materiale necesare: extract vegetal i / sau soluie pur, H2SO4 concentrat, soluie alcoolic de alfa
naftol 10 %, timol, eprubete, pipete, stative pentru eprubete.
Se iau ntr-o eprubet civa ml. de extract vegetal (soluie pur) peste care se adaug 5-6 picturi
alfa naftol !0 % i se agit. Se nclin eprubeta i se preling ncet pe perei 12 ml. H2SO4 conc. La limita de
separare se formeaz un inel violet care cu timpul devine rou; utiliznd timol i procednd n acelai mod
se formeaz un inel rou rubiniu.
Reacia Molish este o reacie general pentru glucide.
c)
REDUCEREA ACIDULUI PICRIC
N ACID PICRAMIC
Principiul metodei: metoda se bazeaz pe proprietatea monoglucidelor de a reduce acidul

picric n acid picramic.
Materiale necesare: extract vegetal i / soluie pur , soluie acid picric 2 %, soluie Na OH 20 %,
eprubete, pipete, stative, bec de gaz.
Se iau civa ml. (4 -5 ml) de soluie de analizat ntr-o eprubet, peste care se adaug cteva picturi
de soluie Na OH 20 % i 2 3 picturi de soluie de acid picric 2 %. Se fierbe coninutul eprubetei cu atenie
la flacra becului de gaz. Acidul picric se reduce la acid picramic , de culoare roie.
d) REDUCEREA AZOTATULUI DE BISMUT
N BISMUT METALIC
Principiul metodei: se bazeaz pe proprietatea reductoare a monoglucidelor de a reduce

azotatul de bismut la bismut metalic.
Materiale necesare: extract vegetal i / soluie pur, azotat de bismut cristalizat, soluie de NaOH 20
%, spatul, eprubete, pipete, stative, bec de gaz.
Se iau ntr-o eprubet 4-5 ml. soluie de analizat i se adaug 3-4 picturi de soluie NaOH 20 % i un
vrf de spatul de cristale de azotat de bismut. Se fierbe coninutul eprubetei la flacra unui bec de gaz.
Se observ c azotatul de bismut este redus la bismut metalic de culoare neagr, ce se depune pe
fundul eprubetei.
e) REACIA DE CARAMELIZARE
Principiul metodei: sub aciunea bazelor slabe i la temperaturi ridicate monoglucidele
formeaz produi de condensare de tipul rinilor aldehidice.
Materiale necesare: extract vegetal i / soluie pur, soluie de NaOH 20% sau de KOH 20 %,
eprubete, pipete, stative, bec de gaz.
Se iau ntr-o eprubet civa ml. soluie de analizat, peste care se adaug 1-2 ml. soluie de NaOH 20%
sau de KOH 20 % i se nclzete coninutul eprubetei la flacra unui bec de gaz.
Se observ c, n funcie de concentraia glucidelor din soluia analizat se dezvolt o culoare brun,
brun-glbuie sau galben a acesteia.
Prin acidularea soluiei se degaj un puternic miros caracteristic de caramel.
f) REACIA BARFOED
Principiul metodei: n mediu aproape neutru ( pH = 5 7) i sub aciunea cldurii
monoglucidele reduc Cu2+ din reactivul Barfoed la Cu+ ce se depune sub forma Cu2O (oxid cupros)
precipitat roucrmiziu.
Materiale necesare: extract vegetal i / soluie pur, reactiv Barfoed ( R. 6 Raianu), eprubete, pipete,
stative, bec de gaz.
Se iau ntr-o eprubet 4 -5 ml. soluie de analizat la care se adaug cteva picturi de reactiv Barfoed.
Se fierbe coninutul eprubetei la flacra unui bec de gaz i se observ apariia unui precipitat roucrmiziu de oxid cupros ( Cu2 O) ce se depune pe fundul eprubetei.
Interpretare: reacia Barfoed este specific pentru monoglucide; reactivul Barfoed nu intr n reacie
cu diglucidele reductoare care conin o legtur glicozidic de tip 1-4 alfa ( ca maltoza) dar este redus
energic de ctre monoglucide i de ctre diglucidele ce conin o legtur glicozidic 1-6 alfa ( ca
melibioza).
Reacii de difereniere a aldozelor de cetoze

a ) REACIA SELIVANOV
Principiul metodei: sub aciunea acidului clorhidric i a temperaturii, cetozele ( fructoza)
trec n hidroximetilfurfurol care formeaz cu rezorcina un produs colorat de condensare.
Reacia este caracteristic pentru cetoze; aldozele nu dau sau o dau mai slab i mai ales n
prezena HCl concentrat, dup o fierbere ndelungat.
Materiale necesare: extract vegetal (n special din pere, stafide, tuberculi de Dahlia sp.) i / sau
soluie pur de fructoz, soluie HCl 25% ( R. 27 Raianu), rezorcin pulbere, eprubete, pipete, stativ, bec de
gaz.
Se iau ntr-o eprubet 4-5 ml. soluie de analizat la care se adaug cteva picturi soluie HCl 25 % i
un vrf de spatul de rezorcin pulbere. Se agit coninutul i se fierbe uor la flacra unui bec de gaz.
Se constat apariia unei coloraii rou de cirea, de intensiti diferite, n funcie de concentraia
cetozelor din soluia analizat.
b) REACIA CU ACID SULFURIC
Materiale necesare: extract vegetal (n special din pere, stafide, tuberculi de Dahlia sp.), i / sau
soluie pur de fructoz, H2SO4 concentrat, eprubete, pipete, stative.
Se iau ntr-o eprubet 4 -5 ml. soluie de analizat peste care se adaug cu atenie, prelingnd pe pereii
eprubetei nclinate 1-1,5 ml. H2SO4 concentrat. La limita de separare dintre straturi se formeaz un inel de
culoare brun. Glucoza i n general aldozele nu dau aceast reacie sau o dau foarte slab.
2. EVIDENIEREA DIGLUCIDELOR
Diglucidele (dizaharidele) sunt constituite din dou molecule de monoglucide identice sau
diferite legate ntre ele prin legturi eterice, formate n urma eliminrii unei molecule de ap. Ele
sunt cele mai importante i mai rspndite diglucide din regnul vegetal, gsindu-se aproape n
toate plantele. Sub form de glicozizi se gsesc n pigmenii florilor alturi de monoglucide.
n funcie de natura gruprii hidroxilice care particip la eliminarea moleculei de ap se
disting dou tipuri de diglucide, reductoare i nereductoare. Dac la formarea moleculei de ap
particip gruprile reductoare (aldehidice sau cetonice) din monoglucidele respective, atunci se
formeaz un diglucid nereductor; dac una din gruprile reductoare rmne liber, se formeaz
un diglucid reductor.
DIGLUCIDE REDUCTOARE
Din grupa diglucidelor reductoare menionm:
- lactoza (zahrul din lapte) este mai puin rspndit la plantele superioare (prezent n unele fructe
tropicale, n staminele de Forsythia suspensa);
- melibioza: n cantitate mic n exudatele unor plante, n smburii de Coryllus avellana, boabele de
cafea, etc.;
- geniobioza: prezent n rdcinile de Geniana lutea;
- celobioza: se gsete frecvent n stare policondensat n celuloz dar i n stare liber n seva unor
arbori;
- maltoza (zahrul de mal) prezent n cantiti mici n multe plante, dar n cantiti apreciabile n
seminele germinate de orz.
Pentru evidenierea diglucidelor reductoare se folosete extract de maltoz iar pentru comparaie
soluie 2-3 % de maltoz pur.
Modul de extragere. Germinaii de orz, de 3 - 4 zile, se usuc la aer, apoi se macin sau se mojareaz
obinndu-se fina de mal. ntr-un pahar Berzelius ( Erlenmeyer) se iau 10 g fin de mal i 30 ml ap
distilat dup care se nclzete la 300 C timp de 15 minute. Dup 15 minute de rcire lent se filtreaz iar
filtratul obinut se utilizeaz la efectuarea urmtoarelor reacii:
a) Reacia Fehling ( vezi monoglucide)
Este pozitiv.
b) Reacia Selivanov ( vezi monoglucide)
Este negativ ( deoarece maltoza este format din dou molecule de D - glucoz, reacia fiind specific
pentru cetoze).
c) Reacia Barfoed ( vezi monoglucide)
Este negativ (deoarece reacia Barfoed este specific pentru monoglucide).
Durata experienei : 45 minute.
DIGLUCIDE NEREDUCTOARE
Grupa diglucidelor nereductoare cuprinde:
- trehaloza, prezent n ciuperci precum i n unele plante superioare;
-zaharoza, rspndit n cantiti variabile n numeroase organe vegetale ( fructe, semine, frunze).
Bogate n zaharoz sunt : rdcina sfeclei de zahr ( 14-20 %), tulpinile trestiei de zahr i sorg zaharat ( 1425 %) precum i cocenii de porumb.
Pentru evidenierea diglucidelor nereductoare se folosete extract de zaharoz i soluie 1-2% de
zaharoz pur.
Modul de extragere: 20-30 g rztur de sfecl alb se mojareaz cu cca 50 ml ap cald ( 600C); se las
n repaus 20-30 minute i apoi se filtreaz. Se obine un extract de zaharoz care se folosete la efectuarea
urmtoarelor reacii:
a) Reacia Fehling ( vezi monoglucide)
Este negativ.
b) Reacia Selivanov (vezi monoglucide)
Este negativ.
c) Reacia Barfoed ( vezi monoglucide)
Este negativ.
Pentru a dovedi c extractul conine glucide se face o reacie care nu se bazeaz pe proprietile
reductoare ale zaharurilor, cum este reacia Molisch (vezi monoglucide); ea este pozitiv. Aceast reacie
este un test pentru toate glucidele chiar i pentru cele asociate cu proteinele.
3. HIDROLIZA DIGLUCIDELOR
Principiul metodei: sub aciunea acizilor sau a enzimelor specifice i n mediu slab acid,
diglucidele hidrolizeaz n monoglucidele componente. n cazul zaharozei, procesul acesta se mai
numete i invertire fiindc se inverseaz direcia puterii rotatorii a soluiei. Amestecul rezultat din
hidroliz (invertire), format din glucoz i fructoz n cantiti echivalente, se numete zahr
invertit. Rotaia specific a zaharozei este :
[ alfa ] D 20, = + 66,5 0, iar dup inversiune [alfa]D 200 = - 21,90.
4. IDENTIFICAREA UNOR GLUCIDE SOLUBILE DINTR-O SOLUIE NECUNOSCUT

Cu ajutorul unor reacii de evideniere se pot identifica dintr-un extract vegetal (sau amestec de soluii
pure), cele mai importante mono i diglucide. Datele se trec ntr-un tabel sintetic n care reaciile care dau
coloraiile specifice se trec cu semnul (+), cele care nu dau, cu semnul (-).
Identificarea unor glucide solubile dintr-o soluie necunoscut

Reaciile
Molish
+
+
+
+
Fehling
+
+
+
-
Glucidul
Selivanov
+
-
Barfoed
+
+
-
Glucoz
Fructoz
Maltoz
Zaharoz

LABORATOR 10
Cuprins
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Evidenierea celulozei
Evidenierea ligninei
Evidenierea amidonului
Evidenierea inulinei
Evidenierea gumelor i mucilagiilor
Evidenierea hemicelulozelor
REINEI!
Poliglucidele sunt substane macromoleculare formate dintr-un numr mare de

resturi de monoglucide sau derivai de monoglucide legate ntre ele prin legturi
glicozidice. Poliglucidele reprezint pn la 80 % din substana uscat a plantelor,
avnd n principal, rol structural i de rezerv.
1. EVIDENIEREA CELULOZEI
Celuloza este cea mai rspndit poliglucid i totodat substana organic care apare n
cantitatea cea mai mare n natur.
Component principal al pereilor celulari, celuloza se gsete n amestec cu alte substane
precum lignine, hemiceluloze, pectine, rini, lipide, sruri, etc. Vata, hrtia de filtru i pnza
purificat pot fi considerate ca celuloz pur. Celuloza este un poliglucid compus din molecule de
beta- glucoz, mai precis din uniti de celobioz.
-
Principiul metodei: celuloza fixeaz printr-un proces de adsorbie polar coloranii acizi; cu iodul are
loc un proces de adsorbie fizic. Acizii tari determin gonflarea fibrelor de celuloz urmat de hidroliza
acestora.
Materiale necesare: vata obinuit (perii seminelor de bumbac), soluie diluat de rou de Congo,
soluie Lugol, soluie de H2 SO4 75% ( R. 27- Raianu), reactiv Fehling, reactiv Barfoed, H2 SO4 conc., soluie
alcoolic de alfa naftol, soluie de HCl 25%, soluie de rezorcin 10% , soluie NaOH 20%, pahare
Erlenmeyer, eprubete, hrtie indicatoare de pH, bec de gaz, microscop.
Experiena 1:
ntr-o sticl de ceas cu soluie foarte diluat de rou de Congo se introduce puin vat. Dup 5-10 minute
de umectare firele de vat se coloreaz n rou, culoare ce se menine i dup splare cu ap datorit
procesului de adsorbie polar.
Experiena 2:
ntr-o sticl de ceas cu soluie Lugol se introduce puin vat. Dup cteva minute de umectare se obine
o coloraie brun care dispare repede n urma unei splri cu ap.
Experiena 3:
Cteva fire de vat colorat n brun cu soluie Lugol se aeaz pe o lam de sticl i se adaug o pictur
de soluie de H2 SO4 75% pe o parte a lor. Se observ la microscop umflarea i colorarea n albastru a fibrelor
de celuloz ca urmare a degradrii celulozei n amiloid (prima etap a descompunerii) (fig. 1).
Fig. 1. Umflarea fibrelor de celuloz. a-fire de vat tratate cu

Lugol; b- fire tratate cu Lugol i acid sulfuric.
Experiena 4:
ntr-o eprubet se dizolv puin vat n 5 ml de H2SO4 75% . Lichidul obinut se rstoarn cu
precauie ntr-un pahar Erlenmeyer ce conine 25 ml ap i se fierbe ncet 20-30 minute, apoi se rcete.
Soluia obinut prin hidroliz se utilizeaz pentru efectuarea principalelor reacii de evideniere a
monoglucidelor. ( vezi tabelul de mai jos).
Interpretare: prin hidroliz celuloza se descompune n glucoz.
Glucidul
Reaciile
Molish
+
+
Fehling
+
+
Selivanov
+
Barfoed
+
+
Glucoz
Fructoz
2. EVIDENIEREA LIGNINEI
Lignina este rspndit, ndeosebi, n pereii ngroai ai vaselor i ai parenchimurilor lemnoase,
precum i n fibrele lemnoase, n sclerenchimuri i uneori, n membranele esuturilor protectoare.
Compoziia ei chimic difer dup specie i este nsoit ntotdeauna de poliglucide.
Principiul metodei: . Lignina se coloreaz caracteristic cu numeroi reactivi organici i anorganici.
Materiale necesare: achii de brad, hrtie de calitate inferioar, soluie alcoolic 1 % de floroglucin,
soluie clorhidrat de anilin ( 1cm3 anilin +1cm3 HCl conc.+ 8 cm3 ap distilat), soluie alcoolic 5% de
resorcin, HCl conc., soluie 25 % H2SO4, pipete.
Experiment 1
Reacia cu floroglucina ( R. Weisner Hohnel)
Se picur cteva picturi de floroglucin pe o achie de brad sau pe o bucat de hrtie de calitate
inferioar, peste care se adaug imediat 1-2 picturi de HCl conc. sau H2 SO4. Apare imediat o coloraie
rou- violet ( rou-viiniu).
Reacia cu clorhidratul de anilin ( R. Runge)
Experiment 2
Pe o achie de brad (hrtie de calitate inferioar) se las s cad o pictur de soluie de clorhidrat de
anilin. Dup cteva secunde apare o coloraie galben- aurie. Hrtia de scris de bun calitate (lipsit de
lemn) sau hrtia de filtru nu dau aceast reacie.
Experiment 3
Reacia cu resorcina
Pe o achie de brad (hrtie de calitate inferioar) se picur o pictur de soluie alcoolic 5% de resorcin i
o pictur de HCl conc. Apare o coloraie violet.
Durata experienelor: 30 minute.
2. EVIDENIEREA AMIDONULUI
Amidonul este un homopoliglucid cu masa molecular ridicat, format prin condensarea a n resturi
de glucopiranoz.
Este principala poliglucid de rezerv a plantelor (se acumuleaz n semine, tuberculi, rizomi,
bulbi), negsindu-se niciodat sub forma sa tipic la bacterii, ciuperci i animale.
Forma, mrimea i structura granulelor de amidon prezint variaii caracteristice fiecrei specii.
Identificarea amidonului n tuberculii de cartof
Principiul metodei. Prezena amidonului n diferite organe vegetale precum i n produsele lactate
falsificate cu fin sau amidon se pune n eviden prin reacia cu iod din soluia Lugol.
Materiale necesare: tubercul de cartof curat, se trece pe rztoare iar pasta obinut se strecoar prin
tifon ntr-un pahar Berzelius.
Lsat n repaus cteva minute, filtratul depune un sediment de culoare alb. Se decanteaz lichidul din
stratul superior iar sedimentul se spal de cteva ori cu ap, agitnd de fiecare dat cu o baghet de sticl i
lsnd n repaus pentru separarea distinct a dou straturi. Sedimentul obinut se trece ntr-o eprubet ce
conine 10 ml ap la fierbere .Prin amestecare energic se obine cleiul de amidon. Dup rcire, se adaug
cteva picturi de soluie Lugol care coloreaz n albastru ntregul coninut al eprubetei. Prin renclzire sau
la adaosul unor substane chimice ( alcool etilic, hidroxid de sodiu, azotat de argint, taninuri) reacia se
dovedete reversibil iar culoarea dispare.
Interpretare. Reacia amidonului cu iodul are la baza ei o adsorbie reversibil a iodului de ctre
amidon. Dac acest echilibru coloidal este deranjat de un factor exterior (nclzire) iodul se elibereaz i
culoarea dispare. n urma rcirii are loc din nou fenomenul de adsorbie i reapare culoarea caracteristic.
Separarea amidonului n amiloz i amilopectin
Principiul metodei: granula de amidon este format dintr-un nveli extern format din amilopectin
(76-80 % din total) i partea intern format din amiloz (20- 24 % din total). Aceste componente se pot
separa pe baza solubilitii diferite n ap.
Materiale necesare: amidon, soluie Lugol, ap distilat, pahare Erlenmeyer, eprubete, pipete, baie de
ap, termometru, stativ pentru eprubete.
Se cntrete 1 g amidon care se pune ntr-un pahar Erlenmeyer cu 25 ml ap distilat. Se nclzete
amestecul timp de 10 minute la temperatura de 70o C pe o baie de ap. Imediat se toarn coninutul n dou
eprubete dup o agitare prealabil. Se las eprubetele pe stativ aproximativ 10 minute i se constat
separarea a dou straturi distincte: stratul superior transparent i cel inferior opac.
Interpretare: stratul superior este transparent i conine amiloz, solubil n ap la 70o C iar stratul
inferior este opac i conine amilopectin, insolubil n ap. Dac n una din eprubete se adaug 1-2
picturi soluie Lugol imediat dup turnarea n paharul Erlenmeyer, se constat colorarea distinct a
celor dou straturi: n prezena iodului amiloza se coloreaz n albastru iar amilopectina n violet.
Hidroliza amidonului
Principiul metodei: sub aciunea acizilor minerali diluai i a enzimelor specifice, molecula mare a
amidonului se scindeaz n fragmente din ce n ce mai mici dextrine - care dau coloraii diferite cu apa
iodat (reactivul Lugol).
1. Hidroliza acid a amidonului: are loc pn la glucoz.
Materiale necesare: amidon, KI, iod metalic, HCl conc., reactiv Fehling, reactiv Barfoed, soluie de HCl
25%, resorcin 10%, eprubete, stativ pentru eprubete, pahare Erlenmeyer, bec de gaz.
ntr-un vas Erlenmeyer de 100ml se introduce 1 g amidon peste care se adaug 30 ml ap distilat,
obinndu-se prin agitare o suspensie omogen. ntr-un alt vas Erlenmeyer de 100ml se fierb circa 20 ml ap
distilat. Cnd ap d n clocot se toarn suspensia de amidon i se ia vasul de pe foc.
Se prepar concomitent o soluie Lugol diluat dup cum urmeaz: se dizolv n 300 ml ap distilat 2
g KI i 1g iod metalic, iar din soluia obinut se trec 3 ml n 100 ml ap distilat.
Aceast soluie se repartizeaz n cantiti egale n 20-25 eprubete.
Soluiei de amidon preparate anterior i se adaug 5 ml HCl concentrat i se nclzete ncet, pe o sit
de azbest la flacr. n timpul nclzirii se scot probe de cte 1ml din soluia pe cale de hidroliz, la intervale
de 2-3 minute, fiecare, introducndu-le n eprubetele cu soluie Lugol diluat. n eprubete se obine o gam
de coloraii corespunztoare diferitelor faze de hidroliz a amidonului:
Albastru
amidon
Violet
amiloid
Violet-rou
amilodextrin
Rou
eritrodextrin
Culoarea iodului
acrodextrin
Culoarea iodului
maltodextrin
Culoarea iodului
maltoz
Culoarea iodului
alfa- D- glucoz
Se scot mai multe probe pentru a surprinde toate fazele de hidroliz a amidonului. Dac modificarea
culorii se face prea repede, se slbete nclzirea. Cnd s-a ajuns la acrodextrin se nclzete mai puternic
timp de 15 - 20 minute pn ce acrodextrina trece n maltoz i n final n glucoz.
Cnd coloraia nu mai variaz, deci cnd s-a terminat hidroliza, se efectueaz reaciile Fehling, Barfoed
i Selivanov; cnd primele dou reacii devin pozitive, aceasta indic faptul c fostul clei de amidon este
hidrolizat ntr-o soluie de glucoz; reacia Selivanov rmne negativ.
Durata experienei: o or.
2. Hidroliza enzimatic a amidonului
Este realizat de complexul enzimatic amilaza (diastaza) - care catalizeaz hidroliza legturilor alfa 1,4
glicozidice din poliglucide. Amilaza are mare rspndire n regnul vegetal, gsindu-se n special n
seminele germinate ale cerealelor, n tuberculii de cartof, n drojdii, n ciuperci, bacterii. Complexul este
format din dou tipuri de amilaze: alfa- amilaza i beta amilaza. Sub aciunea beta amilazei, amiloza este total
transformat n maltoz, n timp ce amilopectina, sub aciunea aceleiai enzime trece n dextrine i puin
maltoz, deoarece beta-amilaza nu acioneaz asupra legturilor alfa - 1,6 glicozidice din ramificaii; aciunea
alfa - amilazei este puin cunoscut. Sub aciunea complexului amilaz asupra amidonului rezult maltoz i
puin glucoz.
Dat fiind faptul c enzimele acioneaz n organismele vii, n condiii fiziologic normale, ele posed
unele caracteristici aparte comparativ cu restul catalizatorilor chimici:
- acioneaz n condiii blnde, fiziologic normale de pH, temperatur, presiune, for ionic, etc.;
- prezint o mare specificitate de aciune i de substrat.
Materiale necesare: amidon, semine de orz germinate (fin de mal) sau fin de leguminoase, ap
bidistilat, ap distilat, reactiv Fehling, reactiv Barfoed, soluie de HCl 25 %, resorcin 10%, centrifug,
eprubete de centrifug, eprubete, hrtie de filtru, termometru, baie de ap, soluie Lugol, baghete de sticl.
Experiment 1
a) Se mojareaz ntr-un mojar circa 20 g semine de orz germinate de 3-5 zile sau 100 g fin de mal, se
adaug 50 ml ap nclzit la 35oC i se las pe mas 30 minute pentru extragere agitnd din cnd n cnd. Se
filtreaz apoi soluia obinut prin vat i apoi prin hrtie de filtru.
b) Se folosesc 0,1 - 0,5 g fin de leguminoase care se extrag cu 5ml H2O bidistilat rcit la 4oC. Extracia
se face timp de 30-60 minute prin agitare cu intermiten (10 minute repaus, 1 minut agitare), la temperatura
camerei. Reziduul insolubil se separ de extractul enzimatic prin centrifugare la 3000 turaii ( 15 minute).
Se prepar o soluie de amidon ca n cazul hidrolizei acide a amidonului i se mparte n 3 pri:
- la o parte de soluie (10 ml) se adaug 5 ml soluie de amilaz i se fierbe;
- a doua parte (10 ml) se nclzete la 40-50oC i se adaug apoi 5 ml din soluia de amilaz;
- la a treia parte (10 ml) se adaug amilaz (5 ml) i se menine la temperatura camerei.
Din soluii se iau prize la intervale de timp de cte 2-3 minute (ca n experimentul anterior)
obinndu-se n cazul fermentului activ o scar colorimetric ce indic stadiile de degradare ale amidonului.
n cazul fermentului inactivat prin cldur se obine numai coloraia albastr nchis, specific reaciei dintre
amidon i iod.
Cnd hidroliza s-a terminat (coloraia eprubetei rmne galben deschis) se efectueaz reaciile Fehling,
Barfoed i Selivanov.
Va fi pozitiv numai reacia Fehling deoarece prin hidroliz enzimatic cu extract de mal se ajunge
aproape numai la maltoz. Uneori este pozitiv i reacia Barfoed deoarece malul poate conine alturi de
amilaz i puin maltaz care hidrolizeaz maltoza la glucoz.
n prima eprubet (n care amilaza a fost distrus prin fierbere) hidroliza enzimatic nu are loc
(apare culoarea albastr specific).
n a doua eprubet (nclzit la 40-50o C) are loc hidroliza treptat a amidonului vizibil prin apariia
scrii colorimetrice.
n a treia eprubet (meninut la temperatura camerei) hidroliza decurge foarte lent, demonstrnd
rolul temperaturii optime asupra activitii amilazei.
Durata experienei: 3 ore.
Experiment 2
Se taie un tubercul de cartof germinat, astfel ca seciunea s treac prin mai multe ochiuri ; se spal
suprafaa tiat i se picur pe ea soluie Lugol diluat.
n jurul ochiurilor coloraia albastr nu apare deoarece amidonul din zon a fost hidrolizat pentru
nevoile respiratorii ale mugurilor.
Experiment 3
Se evideniaz reacia de amiloliz (hidroliz a amidonului) sub aciunea amilazei salivare.

Materiale necesare: saliv diluat: se cltete gura cu ap distilat dup care se ine n gur un volum
de 25-50 ml ap distilat timp de 1-2 minute, amestecnd-o cu saliva. Se evacueaz ntr-un pahar i se
filtreaz ntr-o eprubet; soluie Lugol ( 20 g KI i 12,,7 g iod metalic n 100ml ap distilat); soluie amidon
1%; soluie NaOH 10 %.
Mod de lucru: Se pipeteaz n dou eprubete cte 5 ml soluie de amidon. n prima eprubet ( proba )
se adaug 3 ml saliv diluat iar n a doua ( controlul) se pipeteaz 3 ml ap distilat. Se agit i se pune la
termostat la 37oC timp de 30 minute. Apoi se scot probele din termostat i se pun cte 1-5 picturi n
alveolele unei plcue de porelan n care, n prealabil s-a pus cte o pictur de soluie Lugol.
n alveola martor apare o coloraie albastr iar n alveola n care s-a pipetat proba se observ o
coloraie roie - brun dac amidonul este parial hidrolizat sau rmne coloraia specific iodului (galben)
dac hidroliza este naintat.
Corodarea granulei de amidon n timpul germinaiei
Principiul metodei: prin activitatea amilazei din endospermul seminelor de cereale ncepe corodarea
granulelor de amidon, care prin adncire treptat fragmenteaz granula n dextrine.
Materiale necesare: semine germinate de gru, ac spatulat, lam de sticl, lamel, microscop.
Protocol experimental: Cu un ac spatulat se scoate o cantitate mic de endosperm din smna de
gru germinat, ct mai aproape de embrion i se face un preparat microscopic pe lama de sticl, ntr-o
pictur de ap. Se constat c o parte din granulele de amidon prezint coroziuni la exterior, de forme
diferite ( X, Y, T, I).
Interpretare: Corodrile externe care apar pe granula de amidon sunt rezultatul activitii
hidrolitice a amilazei. Prin adncirea treptat a acestor coroziuni are loc ruperea grunciorului de amidon
n dextrine, procesul de degradare continund pn la nivelul moleculelor de diglucide (maltoz) i
monoglucide (glucoz).
Rolul amilazei difuzate din seminele germinate asupra hidrolizei amidonului
Principiul metodei: n endospermul seminelor n curs de germinare, cantitatea de enzime hidrolizate
crete rapid, determinnd degradarea amidonului n glucide simple solubile, care sunt utilizate de embrion,
n formare.
Materiale necesare: gelatin, amidon, semine de orz germinate, vase Petri, bisturiu.
Se prepar un amestec omogen de gelatin 10 % + amidon 2 % care se toarn n vase Petri, unde se las
s se solidifice. Se secioneaz longitudinal seminele de orz germinate, care dup umectare, se aeaz cu
partea secionat pe placa de gelatin. Dup 30 minute se scot seminele i se toarn pe suprafaa plcii 3-5
ml soluie Lugol diluat. Se constat c ntreaga suprafa se coloreaz n albastru, cu excepia zonelor n
care au fost aezate seminele germinate.
Interpretare: De pe suprafeele secionate ale seminelor geminate difuzeaz enzima amilaza care
hidrolizeaz amidonul din zonele de contact ale plcii de gelatin.
3. EVIDENIEREA INULINEI
Inulina este substana de rezerv caracteristic plantelor din familiile Compositae, Campanulaceae,
Genianaceae. Se acumuleaz n receptaculul de Scolymus (anghinare), tuberculii de Helianthus tuberosus
(topinambur), rdcinile tuberizate de Dahlia (gherghin), etc. La aceste plante, inulina nlocuiete amidonul
nu numai n esuturile de rezerv, ci i n frunze, n cursul fotosintezei. Inulina nu este un fructozan pur, ea
coninnd cca. 3 % glucoz; este uor solubil n ap fierbinte i precipit la rece.
Evidenierea inulinei
Se mrunesc rdcini tuberizate de Dahlia sau de Taraxacum, care se fierb n ap 10 minute; se
decanteaz, obinndu-se o soluie de inulin. Cu aceast soluie se efectueaz urmtoarele reacii:
a) Fehling, Barfoed i Selivanov, care fiind negative, arat c inulina este un zahr complex,
nereductor;
b) Se iau ntr-o eprubet 3 cm3 din soluia de inulin peste care se adaug 1cm3 de alcool etilic
96 % ; poliglucidul precipit ncet sub form de fulgi albi;
c) Molish este pozitiv. Reacia poate fi efectuat i pe esuturi din rdcinile de Dahlia sp.:
picurnd soluie alcoolic de alfa naftol sau de timol i deasupra picturi de H2 SO4 concentrat, apare
coloraia violet i, respectiv, rou.
Se fac seciuni ct mai fine prin rdcina de Dahlia sp. inut n alcool etilic 80 % timp de 2 sptmni
(sau 8 - 10 zile). Se trec seciunile pe o lam de sticl, ntr-o pictur de ap i se acoper cu lamela. Se
observ la microscop apariia unor cristale fine, incolore, caracteristice de inulin.
Hidroliza inulinei
Principiu: soluia de inulin supus hidrolizei reduce reactivul Fehling i d reacia Selivanov.
Materiale necesare: soluie de inulin, HCl 25 % ( conc.), NaOH 25 %, reactiv Fehling, reactiv
Barfoed, resorcin 10 %, hrtie de turnesol, eprubete, bec de gaz.
Protocol experimental: ntr-o eprubet se iau 10 ml de soluie de inulin i 1 ml de HCl 25 % ( conc.).
Dup o fierbere de cteva minute, hidroliza acid descompune inulina n molecule de fructoz. Soluia se
neutralizeaz cu Na OH 25 % n prezena hrtiei de turnesol. Se efectueaz reaciile Fehling, Barfoed,
Selivanov care, fiind pozitive, arat c inulina s-a degradat n fructoz.
Durata experienei: 30minute.
4. EVIDENIEREA GUMELOR I MUCILAGIILOR
Aceste dou glucide sunt nrudite structural fiind alctuite din cteva monoglucide (hexoze, pentoze,
dup natura gumei) ntre care se mai pot gsi unul sau doi acizi uronici.
Mucilagiile sunt hetero - i homoglucide neutre cu structur mai simpl dect gumele.
Gumele sunt secreii vscoase, care apar, sub forma unei mase sticloase prin vtmarea suberului de
la multe plante lemnoase.
Mucilagiile sunt produse ale metabolismului normal, servind ca substane de rezerv i ca substrat ce
reine apa, mai ales n esuturile plantelor suculente. Gumele i mucilagiile se mbib puternic cu apa, dnd
soluii vscoase.
Evidenierea gumelor
Se face de obicei, prin proba furfurolului care pune n eviden prezena pentozelor:
a) peste puin clei de copac, luat ntr-o eprubet, se adaug HCl 18 % i se fierbe .
- se introduce n gura eprubetei o fie de hrtie de filtru mbibat n acetat de anilin care se coloreaz
n rou.
Guma +
HCl pentoze 3 H2 O furfurol + acetat de anilin ( coloraie roie).
b) pentru evidenierea hexozelor din gume:

- se ia puin clei de copac ntr-o eprubet, se adaug civa cm3 H2O i 1 cm3 HCl concentrat. Se
fierbe, se decanteaz iar cu soluia obinut se execut reaciile Fehling, Barfoed (dup neutralizare
prealabil) i Selivanov. Primele dou reacii sunt pozitive iar a treia este negativ.
Evidenierea mucilagiilor
Mucilagiile se coloreaz prin adsorbie polar cu colorani bazici (electropozitivi).
Se iau n dou eprubete semine de in, a cror test este bogat n mucilagii, i n una, se adaug
soluie de rou de Congo, iar n cealalt soluie de albastru de metilen. Dup aproximativ o or , seminele
se spal, dar colorantul rmne n stare de adsorbie.
4. EVIDENIEREA HEMICELULOZELOR
Hemicelulozele se deosebesc de celuloz att prin constituia chimic, ct i prin rolul lor n celul.
Sunt poliglucide care particip n constituia membranelor scheletice, ns pot fi hidrolizate ulterior n
monoglucide, reprezentnd deci n fapt, o materie de rezerv.
Acumularea hemicelulozelor n membranele sheletice duce la ngroarea puternic a acestora, nct
esuturile devin dure; cnd sunt hidrolizate, sub aciunea hemicelulazelor, esuturile se nmoaie progresiv,
hemicelulozele prnd c se topesc. Se gsesc n parenchimurile lemnoase, dar mai ales n albumenul
palmierilor i n cotiledoanele unor leguminoase (Gleditschia, Lupinus, etc.)
Evidenierea hemicelulozelor
Se observ paralel, la microscop seciuni subiri prin cotiledonul seminei de lupin (ricin) germinat i
negerminat. Seminele se trateaz cu o pictur de iod n iodur de potasiu iar apoi cu o pictur de acid
sulfuric concentrat.
Se compar grosimea i conturul membranelor celulare ngroate; cu ct germinaia este mai avansat,
grosimea pereilor celulari se reduce i conturul apare mai sinuos.
Hemiceluloza apare sub form de ngrori regulate ale membranelor scheletice, colorat n albastru.

Cuprins
1. Evidenierea proteinelor
2. Evidenierea lipidelor
3. Determinarea aciditii totale
4. Evidenierea vitaminei C
1. EVIDENIEREA PROTEINELOR
REINEI!
Proteinele reprezint substana fundamental a vieii, caracterizndu-se printr-o

nalt specificitate, fapt ce confer o individualitate biochimic fiecrui individ, plant
sau animal. Ele au rol de baz n organismul viu, ndeplinind diverse prestaii morfofiziologice:
- rol structural, arhitectural i de reglare a ptrunderii diferitelor substane n
interiorul celulei i a organitelor sale (mpreun cu lipidele, glucidele, acizii nucleici);
- rol catalitic, prin proteinele-enzime;
- rol de aprare, prin imunitatea pe care o ofer organismului propriu;
- rol de transport pentru unele substane importante pentru desfurarea vieii;
- rol de rezerv, uneori.
Evidenierea proteinelor se realizeaz prin :
a. reacii de precipitare (reversibile i ireversibile);
b. reacii de culoare.
Nici una din cele dou tipuri de reacii nefiind specifice se cere ca la identificarea proteinelor, s se
foloseasc ambele tipuri de reacii.
Evidenierea proteinelor prin reacii de precipitare

Diversele proteine pot fi precipitate prin :
- unele sruri neutre (soluie saturat de (NH4 )2 SO4; K2 Cr2 O7 10 %);
- alcool etilic 96 %, aceton sau eter;
- srurile unor metale grele ( acetat de Pb 0,5 %, Cu SO4 1%, Ag NO3 3 %, clorur
mercuric 0,5 %);
- acizi anorganici concentrai (HCl, H2SO4, HNO3) care, la limita de separare cu soluia
proteic, dau un inel de precipitare alb ( inelul lui Heller); prin agitare atent precipitatul
format se dizolv n cazul acizilor sulfuric i clorhidric.
- reactivul Esbach;
- unii acizi organici (mai ales ac. triclor acetic 3 %, ac sulfosalicilic 20 %).
Prepararea unei soluii de protein
ntr-un pahar Erlenmeyer se introduc 10 g fin de leguminoase i 50 ml NaCl 5 %, se agit din cnd
n cnd timp de o or, apoi se filtreaz prin hrtie cutat. Dac soluia nu este limpede, se repet filtrarea.
Substanele proteice pot fi precipitate din soluiile lor n mod reversibil i ireversibil.
Pentru precipitarea reversibil se folosesc ca aditivi la soluia brut proteic sulfatul de amoniu, alcool
etilic, aceton, eter.
Experiment 1
Se iau n dou eprubete cte 2 ml soluie proteic n NaCl i un volum egal de alcool, respectiv
aceton. n alte dou eprubete se iau cte 2ml soluie albumin, cteva cristale de NaCl i un volum egal de
alcool, respectiv aceton. Eprubetele se agit puternic. Proteinele precipit imediat, sub form de fulgi albi n
probele tratate cu aceton, iar n cele tratate cu alcool, dup 5-10 minute.
Jumtatea suspensiei din eprubete se trece n alte eprubete n care se dilueaz cu ap distilat; se
observ dizolvarea precipitatelor anterior formate.
Precipitarea ireversibil a proteinelor se poate realiza cu ajutorul srurilor metalelor grele, acizilor
anorganici, acizilor organici i prin nclzire.
Experiment 2
Se iau n 4 eprubete cte 2-3 ml soluie de albumin sau de globulin. n prima eprubet se adaug
pictur acetat de plumb 0,5 %, n a doua Cu SO4 1 %, n a treia Ag NO3 3 % i n a patra clorur mercuric 0,
5% . Se observ formarea instantanee a precipitatelor n toate eprubetele. Adugnd un surplus de acetat de
plumb, respectiv de CuSo4 n eprubetele 1 i respectiv 2 se produce dizolvarea precipitatului format iniial.
Evidenierea proteinelor prin reacii de culoare

a) REACIA BIURETULUI
Principiul metodei. Este reacia cea mai important a proteinelor.
Ea este condiionat de prezena legturilor peptidice ( - CO- NH-) astfel c ea este pozitiv pentru
toate moleculele proteice, ncepnd cu tripeptidele. Numele vine de la compusul biuret ( NH CONH2CONH2) care provine din dou molecule de uree prin eliminarea unei molecule de NH3 i care d i el
aceeai reacie de culoare.
ntr-o eprubet se iau 3-4 ml soluie proteic. Se alcalinizeaz cu cteva picturi de Na OH 20 % ( KOH
20 %). Se adaug 4 - 5 picturi de CuSo4 1 %. Apare o coloraie violet. Dac coloraia nu apare se nclzete
coninutul eprubetei la flacra unui bec de gaz.
b) REACIA XANTOPROTEIC
Principiul metodei. Aceast reacie este caracteristic pentru aminoacizii aromatici (fenilalanina,
tirozina). Acetia se gsesc n aproape toate proteinele. Sub aciunea HNO3 conc. se formeaz nitroderivaii
nucleelor aromatice din aminoacizii respectivi care sunt de culoare galben ( xantos = galben).
Se iau ntr-o eprubet civa ml soluie proteic, peste care se adaug cteva picturi de HNO3 conc. Se
nclzete uor. Apare o coloraie galben; adugnd dup rcire NaOH 20 % ( KOH 20 %) coloraia trece
n portocaliu.
Reacia se poate face i cu cotiledoane de mazre, fasole, lupin mbibate i mrunite. Acestea devin
galbene prin fierbere n HNO3 concentrat.
c) REACIA SULFULUI
Principiul metodei. este pozitiv n cazul aminoacizilor cu sulf ( cisteina, cistina, metionina), care n
mediu alcalin i la cldur, elibereaz sulful sub form de H2S; acesta cu o sare de plumb, formeaz un
precipitat negru de sulfur de plumb.
ntr-o eprubet se iau civa ml de soluie proteic, peste care se adaug cteva picturi de acetat de
plumb 0,5 % i cteva picturi de NaOH 20 %. Se fierbe la flacr. Apare un precipitat negru de PbS.
Pb( COO-CH3)2 + 2 NaOH
Pb (OH)2 + 2 Na COO- CH3

Pb S + 2 H2O
Pb (OH)2 + H2S
Reacia este pozitiv i n cazul n care soluia proteic este nlocuit cu semine de fasole mbibate i
mrunite. n acest caz se procedeaz astfel: la 1 ml acetat de plumb 0,5 % luat ntr-o eprubet, se adaug
pictur cu pictur NaOH 20 % pn cnd precipitatul alb de hidroxid de plumb format se redizolv n
excesul de baz. Se adaug semine de fasole mbibate i mrunite. Coninutul eprubetei se fierbe. Apare un
precipitat negru de sulfur de plumb.(PbS).
d) REACIA MOLISH
Evideniaz glicoproteinele.
ntr-o eprubet se iau civa ml soluie proteic peste care se adaug 5-6 picturi de alfa naftol. Se
agit coninutul eprubetei. Se nclin eprubeta i se prelinge ncet pe perei 1-2 ml H2SO4 concentrat. La
limita de separare se formeaz un inel de culoare violet.
Extragerea i evidenierea proteinelor simple

Proteinele simple sunt formate numai din aminoacizi i funcie de solubilitatea lor n diferii solveni
se mpart n :
-albumine;
-globuline;
-gluteline;
-prolamine.
Extragerea i evidenierea albuminelor

Albuminele sunt solubile n ap, n soluii saline diluate n acizi i hidroxiacizi diluai. Au caracter
acid, cuaguleaz cu electroliii la cald i precipit n soluie saturat de (NH4)2 SO4
Se gsesc n toate organismele vegetale (spuma alb care apare n timpul fierberii legumelor i
fructelor este dat de albumine, care ieind din celule, cuaguleaz i se ridic la suprafa), dar mai
cunoscute sunt cele din unele semine: legumelina (soia, mazre, linte, etc.), leucozina (gru, orz, secar), ricina
(ricin).
Rztura unui cartof, curat de suber, se introduce ntr-.un pahar cu 100 ml ap distilat i se agit,
din cnd n cnd, timp de cca 30 minute; se filtreaz prin filtru cutat, iar filtratul se mparte n dou:
- o parte se nclzete, cnd albumina cuaguleaz; se filtreaz, apoi se ridic albumina, cu un
ac spatulat, de pe hrtia de filtru i se redizolv n puin ap, dup care se face reacia biuretului dup
procedeul descris anterior;
- cealalt parte din filtrat se mparte n dou eprubete: n prima se precipit o soluie
saturat de (NH4)2 SO4 iar n a doua se face reacia sulfului (peste soluia de albumin se adaug cteva
picturi de Pb(COO-CH3)2 0,5 % i cteva picturi de NaOH 20 %; se fierbe la flacr pn la apariia
precipitatului negru de PbS).
Extragerea i evidenierea globulinelor

Globulinele sunt greu solubile sau insolubile n ap, dar se dizolv n soluii diluate de sruri neutre
(NaCl, KCl) de baze i de acizi; precipit n soluie de (NH4)2SO4 saturat i n soluiile proteice diluate cu
ap. Sunt foarte rspndite n plante (alctuiesc cea mai mare parte din proteinele seminelor de
leguminoase i oleaginoase), mai cunoscute fiind cele din seminele de cnep (edestina), fasole verde
(faseolina), soia (glicinina), mazre (vicilina), lupin (conglutina). Globulinele vegetale au un caracter mai acid
dect albuminele vegetale, datorit coninutului mai mare de acid aspartic i glutamic. n cazul n care
globulinele se extrag din semine oleaginoase (cnep, dovleac) se recomand extragerea prealabil a
grsimilor existente n aceste semine prin tratare cu solveni organici (eter, eter de petrol, benzin,
tetraclorur de carbon).
ntr-un pahar Erlenmeyer se introduce puin fin de cnep, peste care se adaug, de 5 ori volumul,
soluie de NaCl 5%, agitndu-se din cnd n cnd, timp de 30 minute; se filtreaz i peste filtrat se adaug
cteva picturi de HCl conc., cnd edestina precipit. Se filtreaz i se spal edestina de pe hrtia de filtru,
prin pisetare cu ap distilat, pn cnd apa de splare nu mai d reacia clorului (cu AgNO3). Se ridic apoi
edestina ( cu un ac spatulat) i se trece ntr-o eprubet, unde se dizolv n ap i cteva picturi de HCl 5%;
soluia se mparte n dou. Cu prima parte se efectueaz reacia biuretului iar partea a doua se precipit cu
NaCl 30 %.
Evidenierea globulinelor din seminele de lupin ( conglutina)
ntr-un flacon se introduc 5-10 g fin din semine de lupin sau fasole, se amestec cu 50 ml soluie
cald ( 40-50oC) de NaCl 5 %. Se agit din timp n timp, pe parcursul a 1-2 ore. Se filtreaz repetat, pentru a
obine un lichid limpede. Se adaug acid acetic pictur cu pictur (n exces de acid acetic se dizolv
conglutina), pn la precipitarea conglutinei. Se filtreaz soluia iar precipitatul format se recupereaz de pe
hrtia de filtru i se spal cu ap distilat. Cu precipitatul splat se evideniaz prezena globulinelor prin
reacii de culoare.
Extragerea i evidenierea prolaminelor i glutelinelor

Prolaminele sunt caracteristice seminelor de graminee. Sunt insolubile n ap, avnd o solubilitate
optim n alcool etilic 60- 80 %. Au caracter acid datorit coninutului ridicat de acid glutamic i prolin; sunt
srace n lizin i triptofan, din care cauz valoarea nutritiv a prolaminelor este mic. Mai cunoscute sunt:
gliadina (gru, secar), hordeina (orz), zeina (porumb), avenina ( ovz).
Glutelinele sunt insolubile n ap, n soluii saline i n alcool etilic, avnd o solubilitate optim n
soluii diluate de baze ( 0,2-2,0 %). Mai cunoscute sunt: glutenina (gru), orizenina ( orez), glutelina ( orz).
Gliadina i glutenina formeaz glutenul (protein cleioas) care confer finii de gru proprieti de
panificaie (plasticitate i elasticitate aluatului).
Din 10 g fin de gru, orz sau ovz se face un aluat tare, care se strnge ntr-o bucat de tifon i se
spal sub un jet de ap de canal (prin frmntare ntre degete), pn cnd apa de splare nu mai are aspect
lptos: tot amidonul a fost ndeprtat, rmnnd o substan elastic - glutenul. Componentele sale proteice
se pot separa datorit solubilitii lor diferite. Glutenul se rupe n bucele care se introduc ntr-o eprubet;
se adaug alcool etilic 70 % i se agit bine cca 10 minute. Se obine o soluie alcoolic de gliadin, care se
decanteaz n 3 eprubete:
- n prima eprubet se face reacia biuretului care este pozitiv;
- n a doua se picur alcool n exces, cnd gliadina precipit;
- n a treia se adaug ap, cnd gliadina de asemenea precipit.
Ceea ce rmne n eprubet dup decantarea soluiei alcoolice de gliadin, reprezint

glutenina. Se toarn peste ea soluie de NaOH 2 %, se agit bine i se las s se limpezeasc. Soluia obinut
se mparte n dou:
- cu o parte se execut reacia biuretului care este pozitiv;
- peste cealalt parte se adaug acid acetic 1%, pictur cu pictur, pn la punctul
izoelectric, cnd glutenina precipit.
2. EVIDENIEREA LIPIDELOR
REINEI!
Lipidele constituie o grup de esteri naturali, larg rspndite n regnul vegetal.

Lipidele se gsesc n protoplasma i n sucul celular, de asemenea n pereii celulari, iar
n cantitate mai mare sunt depozitate n anumite organe vegetale, cum sunt seminele i
cteodat pulpa i coaja fructelor.
Dup structura lor, lipidele vegetale se clasific n dou familii:
- lipide simple (gliceride, steride, ceride);
- lipide complexe (glicolipide, fosfolipide, etc.).
O caracteristic general a lipidelor este insolubilitatea lor n ap i soluii saline
i solubilitatea n solveni organici (cloroform, eter, eter de petrol, aceton, benzen,
toluen, tetraclorura de carbon, etc.). Cele mai rspndite lipide simple sunt gliceridele,
triesteri ai glicerinei cu acizi grai saturai (palmitic, stearic care predomin n grsimile
vegetale) i nesaturai (oleic, linoleic, ce predomin n uleiurile vegetale).
n organele vegetale, gliceridele sunt ntotdeauna n amestec cu alte substane
precum: acizi grai liberi, pigmeni, steride, uleiuri volatile, vitamine, combinaii
organice cu sulf, etc.
Evidenierea gliceridelor
Principiul metodei. evidenierea gliceridelor se bazeaz pe proprietile fizice (solubilitate) i chimice
(capacitatea de a se colora cu diveri colorani, saponificare, halogenare) ale acestora.
Materiale necesare: ulei vegetal, semine de ricin ( dovleac, floarea soarelui),eter etilic, cloroform,
aceton, soluie alcoolic 0,5% Sudan III, soluie 10% de NaOH, soluie de iod cu clorur mercuric (R:
Raianu), eprubete, pipete, capsul de porelan, sticle de ceas, bisturiu, baghete de sticl, bec de gaz.
Experiena 1. Se las s cad o pictur de ulei vegetal pe suprafaa unei buci de hrtie. Se observ
apariia unei pete caracteristice, translucide i persistente.
Experiena 2. Se iau n dou eprubete cte 2-3 ml ulei vegetal la care se adaug n prima eprubet 1-2
ml solvent organic nepolar ( eter, cloroform, benzen, etc.) iar n a doua eprubet 1ml ap i se agit. Se
constat dizolvarea uleiului vegetal n solveni organici ( n eprubeta I) i formarea unei emulsii cu apa ( n
eprubeta II). Pe o seciune efectuat prin smna de ricin ( floarea soarelui, dovleac) se las s cad o
pictur de soluie alcoolic 0,5% de Sudan III. Se obine o coloraie roie- portocalie.
Experiena 3. Aceeai coloraie roie- portocalie se obine dac se amestec cteva picturi de ulei
vegetal cu cteva picturi de soluie alcoolic 0,5 % Sudan III, luate ntr-o sticl de ceas.
Experiena 4. ntr-o capsul de porelan se nclzesc timp de 20-30 minute, amestecnd bine cu o
baghet de sticl, 14-15 ml ulei vegetal i 19-20 ml soluie de NaOH 10 %. Se adaug puin ap i se agit
puternic.
Se obine o soluie de spun, cu aspect de spum ce prezint o mare putere de udare datorit tensiunii
superficiale sczute. Plasnd pentru comparaie un fir de a de bumbac pe suprafaa unei ape curate i pe
suprafaa unei soluii de spun se constat faptul c n primul caz aa plutete mai mult timp fiindc nu se
ud iar n al doilea caz se ud repede i se scufund.
Interpretare: La cald i n prezena alcalilor puternici, gliceridele se descompun n glicerin i

srurile acizilor grai respectivi care se numesc spunuri.
Experiena 5. ntr-o eprubet se iau 3-4 ml cloroform i 1-2ml ulei vegetal, se agit i se adaug pictur
cu pictur dintr-o soluie de iod cu clorur mercuric. Se agit puternic coninutul eprubetei i se observ
decolorarea soluiei.
Interpretare. Datorit prezenei dublelor legturi n molecula acizilor grai nesaturai , gliceridele
ce conin asemenea acizi se halogeneaz n contact cu halogeni; fiecare dubl legtur adiionnd 2 atomi
de halogen (iod). In consecin o glicerid fixeaz o cantitate cu att mai mare de halogen (iod) cu ct
caracterul ei este mai nesaturat.
Durata experienelor: 60 minute.
3. DETERMINAREA ACIDITII TOTALE

REINEI!
Acizii organici sunt combinaii carboxilice, cu rspndire larg n natur, avnd o mare
stabilitate, datorit faptului c reprezint produii finali ai multor reacii de oxidare. Se
clasific n 3 grupe:
acizi monocarboxilici saturai
acizi di- i policarboxilici saturai
acizi nesaturai
Determinarea aciditii totale

Separarea acizilor organici este complicat, mai lesnicioas este determinarea aciditii totale.
Materialul vegetal mrunit ( 15-35 g ) mpreun cu 100 - 150 ml ap distilat (ntr-un balon
Erlenmeyer de 250 ml) se nclzete timp de 30 minute pe o baie de ap. Dup rcire se filtreaz ntr-un
balon cotat de 250 cm3 i se aduce la semn cu ap distilat. Din flacon se iau 25 ml ntr-un pahar Berzelius, se
adaug 2-3 picturi de soluie 1 % de fenolftalein i se titreaz cu o soluie de Na OH 0,1 n pn la virarea
culorii n roz pal persistent.
La lmi, portocale, diferite bace, aciditatea total se exprim n procente de acid citric; la mere, pere,
diverse drupe, aciditatea total se exprim n procente de acid malic.
1cm3 Na OH 0,1 no,oo64 acid citric deshidratat
1cm3 Na OH 0,1no,oo67 acid malic deshidratat
Calcul
a . F. c . 0,0064 (0,0067). 100
AT = ---------------------------------------G
unde:
AT= aciditate total;
a= nr. de cm3 soluie Na OH 0,1 n consumai la titrare;
c= coeficient de diluie ( dac din 250 cm3 extract s-au titrat 25 cm3 atunci
c = 10);
F = factorul soluie de Na OH 0,1 n ( F = 0,950);
G = masa probei luat n lucru (g);
100 = coeficient de transformare n procente.
4. EVIDENIEREA VITAMINEI C
REINEI!
Vitaminele sunt substane oligodinamice cu aciune reglatoare a funciilor

celulare, asemnndu-se prin aceasta, cu enzimele i hormonii; sinteza lor este un
atribut al organismelor vegetale. Vitaminele aparin la diferite clase de substane,
neexistnd ntre ele nici o nrudire structural; deoarece numai unele vitamine conin
azot, numele pe care-l poart este impropriu. Unele vitamine sunt hidrosolubile, altele
liposolubile i, n general, sunt termostabile.
Evidenierea vitaminei C (acidul ascorbic)

Vitamina C sau acidul L (+) ascorbic este cea mai rspndit vitamin din natur. Se gsete n toate
plantele, iar n cantitate mai mare se afl n fructele citrice ( lmi, portocale), ctin alb, mcee, coarne,
mere, frunze, legume proaspete, etc. Se gsete att n stare liber ct i asociat cu proteinele, formnd un
complex protein - acid ascorbic, numit ascorbinogen.
Este o substan cristalin alb, solubil n ap i are un gust acrior. n stare solid este destul de
stabil, n soluii apoase n schimb este foarte sensibil la oxidare i nclzire.
Principiul metodei Evidenierea i dozarea vitaminei C se bazeaz pe proprietatea ei reductoare.
Materiale necesare: frunze de conifere (frunze de ptrunjel, lobod, urzici, fructe de mce, de ardei),
soluie de HCl 2%, soluie de acid tricloracetic 2-5 %, soluie saturat de fericianur de potasiu proaspt
preparat ( 33g / 100ml), soluie de clorur feric 5 %, nisip de cuar, mojar, eprubete, pipete, hrtie de filtru,
rztoare de sticl, cuit inoxidabil
Pentru extragerea vitaminei C din plante se folosesc acizi diluai deoarece stabilitatea vitaminei C n
soluiile acide este relativ mare.
Materialul de examinat mrunit (mrunirea materialului se face pe o rztoare de sticl sau cu un
cuit inoxidabil) se mojareaz cu o soluie de HCl 2 % i nisip de cuar. Se filtreaz printr-un filtru cutat sau
prin vat. Se iau ntr-o eprubet 4-5 ml de filtrat la care se adaug o pictur soluie saturat de fericianur
de K proaspt preparat i o pictur de soluie de clorur feric 5 %. Se obine o coloraie albastr sau
verzuie.
Interpretare: n prezena acidului ascorbic fericianura de K - K3 [ Fe (CN) 6] - se reduce la
ferocianur de K - K4 [Fe (CN) 6] - i formeaz cu ionii de Fe3+, ferocianura feroferic (albastru de
Berlin).

STUDIUL PRODUILOR SECUNDARI DE METABOLISM AI PLANTELOR
RESPIRAIA PLANTELOR
Cuprins
1.
2.
Evidenierea produilor secundari de metabolism ai plantelor

1. 1. Evidenierea alcalozilor
1. 2. Evidenierea heterozidelor
1. 3. Evidenierea taninurilor
Respiraia plantelor
2. 1. Metode calitative de studiu a respiraiei aerobe
2. 2. Metode cantitative de determinare a respiraiei
2. 3. Evidenierea enzimelor de respiraie
1. EVIDENIEREA PRODUILOR SECUNDARI DE METABOLISM AI PLANTELOR
REINEI!
Produii secundari de metabolism ai plantelor constituie un grup foarte eterogen,

prin natura lor chimic, reapartiia sistematic, anatomic i rolul presupus. Ei se
caracterizeaz prin:
repartiia sistematic negeneralizat i foarte neregulat;
repartiia anatomic adesea foarte localizat;
rolul metabolic obscur;
Cea mai mare parte dintre produii secundari pot avea un oarecare rol biologic, ns
pe plan fiziologic sunt aparent inutili i considerai, deseori, ca deeuri. Foarte adesea ei nu
sunt eliminai n exterior, ci acumulai n vacuole, n lumenul canalelor i pungilor
secretoare sau ntre cuticul i membrana scheletic; alii sunt eliminai la exterior, dar asta
nu nseamn, numaidect c sunt inutili sau toxici. n aparen inutili pentru plant, ei
prezint un foarte mare interes pentru om, avnd ntrebuinri farmacodinamice i
industriale.
1. 1. Evidenierea alcaloizilor
Alcaloizii sunt substane organice azotate, n general ciclice, unde azotul este
ncorporat, adesea, ntr-un nucleu heterociclic, avnd propriti bazice foarte pronunate de unde
i numele; sunt precipitai de un numr de reactivi caracteristici (taninuri, ap iodat, clorur mercuric, etc,).
Alcaloizii nu sunt sintetizai n organismul animal i nici de alge i muchi ; se gsesc rar la ciuperci,
ferigi i gimnosperme. n cantiti mari se gsesc la plantele superioare; n special la familii alcaloidifere
(Solanaceae, Papaveraceae, Rubiaceae, etc.). Rareori o specie conine un singur alcaloid, de obicei se
ntlnesc mai muli cu o structur asemntoare.
Exist o corelaie ntre sinteza alcaloizilor i metabolismul proteic, particular al plantelor
alcaloidifere, fie n rdcin, fie n frunze. n mod obinuit ei sunt dizolvai n vacuole, unde datorit
proprietilor lor bazice, formeaz sruri cu diveri acizi, dar pot fi prezente n toate organele plantei, fie c
s-au format sau au migrat acolo. Dei alcaloizii apar nainte de toate ca deeuri li se pot atribui i
urmtoarele roluri: stimularea fotosintezei; aciune hormonal; funcie protectoare contra virusurilor,
ciupercilor, insectelor i mamiferelor ierbivore.
Evidenierea nicotinei
Nicotina este sintetizat n rdcini i transportat, mai ales prin xilem, n frunze, unde se
acumuleaz sub form de sruri cu acizii citric, malic, reprezentnd pn la 2 % din greutatea uscat la
Nicotiana tabacum i circa 8 % la Nicotiana rustica. Este un lichid uleios, incolor, cu miros ptrunztor i
foarte toxic; oxidat capt culoare brun. Este un derivat al piridinei.
Materiale necesare: frunz de tutun, (tutun dintr-o igar), reactiv Wagner, pahar Erlenmeyer,
plnie, frtie de filtru, pipete, ap distilat, bec de gaz.
Modul de lucru: tutunul dintr-o igar se nclzete cu 10-15 cm ap distilat; se filtreaz. Peste
civa ml de filtrat se adaug 1-2 ml reactiv Wagner (iod n iodur de potasiu) i se omogenizeaz coninutul
vasului. Se formeaz un precipitat brun- rocat, care se dizolv prin nclzire.
Evidenierea solaninei
Solanina se gsete n plantele tinere de cartof, n lstari i n tuberculii ncolii (mai ales n vrfurile
lstarilor i n jurul ochiurilor). Molecula prezint scheletul colesterolului, astfel c solanina este nrudit cu
steriodele.
Materiale necesare: tuberculi de cartof, acid sulfuric concentrat, pipete.
Modul de lucru: Pe o felie de cartof se aeaz cteva picturi de acid sulfuric concentrat. Apare o
coloraie roie, mai ales la periferie (aproape de suber). Dup cteva minute culoarea devine violet.
1. 2. Evidenierea heterozidelor (glucozide, glicozide)

Heteroziodele sunt derivai cu funcie de acetali ai monoglucidelor (D- glucoza, L- ramnoza)
care conin i un component agluconic, ce poate avea o structur complicat.
Se gsesc n frunze, petale, semine i de multe ori n scaora arborilor.
De obicei sunt cristalizate, au gust amar, de multe ori toxice, sau cu activitate fiziologic specific,
sunt rezistente la aciunea bazelor, dar se hidrolizeaz cu acizi.
Sunt sintetizate ziua n frunze dar i n cursul nopii, n organele bine aprovizionate cu glucide.
Semnificaia biologic a condensrii glucidelor cu un aglicon nu este elucidat; toi agliconii care prezint
nuclei fenolici sunt toxici n stare liber, nct condensarea lor cu un glucid permite diminuarea toxicitii.
Heterozidele au adesea o toxicitate foarte ridicat pentru speciile care nu le sintetizeaz.
n privina funciei de rezerv a heterozidelor exist argumente pro i contra. Cu siguran ns, n
cazul cuplului favon- antocianidin, are un rol n procesele de oxido-reducere; flavonii i antocianii,
filtrnd lumina i oprind unele radiaii, intervin n toate procesele fiziologice sensibile la radiaiile solare:
fotosinteza, transpiraia, fototropismele, nclzirea esuturilor, germinaia, creterea.
Pigmenii mai sus menionai au rol n atragerea insectelor polenizatoare i a frugivorelor care
contribuie la diseminarea unor semine. Heterozidele cianogenetice au rol de aprare contra ierbivorelor.
Clasificarea heterozidelor, ca i evidenerea lor, se bazeaz pe gruparea agluconic.
Evidenierea heterozidelor cianogenetice

La hidroliz, heterozidele cianogenetice elibereaz acid cianhidric (de unde i numele). Cel mai
rspndit este amigdalozidul, care se gsete n smburii prunoaselor, din care se extrage cu eter. Prin
hidroliz cu acizi diluai se desface n dou molecule de D- glucoz, una de benzaldehid i una de acid
cianhidric.
Aceeai produi de hidroliz se obin i cu beta - glucozidaza (din complexul proteic enzimatic
numit emulsin, care nsoete totdeauna amigdalozidul din smburii de prunoase). La o aciune blnd,
beta glucozidaza scindeaz numai un rest de glucoz i d heterozida prunasina (identificat n coaja
cireului slbatic).
Materiale necesare: smburi de prunoase, mojar, hrtie periodat, Na2 Co3 10 %, eprubete, dop de
cauciuc, stativ pentru eprubete.
Modul de lucru: Se sparg ntr-un mojar smburi de prunoase, se adaug cteva picturide ap i se
face un cocolo, care se introduce ntr-o eprubet. Se introduce apoi n eprubet o hrtie de filtru periiodat
(hrtia se mbib cu acid picric 1 %, se usuc i se pstreaz ntr-un plic ; la ntrebuinare se tamponeaz cu
vat mbibat ntr-o soluie de Na2 Co3 10 % i se introduce umed n eprubet), se astup cu un dop i se
las n repaus; emulsina vine n contact cu glucozidul i CN- eliberat fiind volatil, ajunge la hrtie i modific
culoarea acidului picric, din galben n crmiziu.
Evidenierea heterozidelor flavonice i antocianice

n afar de nucleoside (heterozide purinice i pirimidinice), acestea sunt heterozidele cele mai
importante prin frecvena i abundena lor n plante. Numeroase plante i datoresc culoarea frunzelor
(varieti de fag, alun etc. cu frunze rou-nchis), a fructelor (bacele de lemn cinesc), a rdcinilor (sfecla
roie) i mai ales a florilor, acestor heterozide, care sunt localizate n vacuolele celulelor epidermice sau a
parenchimurilor; de aceea heterozidele se mai numesc pigmeni flavonici i pigmeni antocianici.
Coloraiile lor nu trebuie confundate cu cele datorate pigmenilor carotenoizi, insolubili n vacuole i
localizai, cel mai adesea n cromoplaste.
Evidenierea pigmenilor flavonici din esuturi fr clorofil
Pigmenii flavonici ca grupare agluconic un compus derivat din flavoni: oxiflavona, oxiflavonol,
etc. Se pot extrage cu ap, ap acidulat, acid tricloracetic, aceton, alcool etilic, cristaliznd sub form de ace
grupate n tufe. Cu srurile de fier se coloreaz n verde, verde - oliv, verde - brun; cu alcalii n galben intens,
galben - lmie, galben - verde, galben - portocaliu; cu Au Cl3 n violet. Reduc acidul osmic i azotatul de
argint; glucidul pe care-l conin este de obicei D - glucoza sau alt hexoz sau pentoz. Dau culoare galben
esutului vegetal.
Materiale necesare: cutie Petri, sticl de ceas, NH4 OH conc., HCl conc., flori cu petale albe.
Modul de lucru: ntr-o cutie Petri se aeaz flori sau petale albe i o sticl de ceas cu NH4 OH conc.;
apoi se acoper cu capacul: petalele devin galbene, ca urmare a formrii unor sruri cu flavonozidele din
sucurile celulare. Trecnd aceste petale ntr-o atmosfer cu acid ele se decoloreaz.
Evidenierea pigmenilor flavonici din extracte
Materiale necesare: flori albe, petale galbene, rdcini i frunze de Taraxacum officinalis, mere
galbene, frunze verzi de Viola odorata, mojar, aceton, acid tricloracetic 8 %, eprubete, bec de gaz, plnie,
frtie de filtru, pipete, NaOH conc., HCl, FeCl3, FeSO4 1-5 %, acetat de plumb 10 %, reactiv Fehling, stativ
pentru eprubete.
Modul de lucru: din materialul vegetal se prepar un extract la cald (prin fierbere n ap, sau acid
triclor acetic, timp de 5 -10 minute). Extractul se filtreaz iar filtratul obinut este utilizat pentru efectuarea
unor reacii chimice de evideniere a pigmenilor flavonici.
a) peste 3 - 4 ml extract se adaug cteva picturi de NaOH conc.; apare o coloraie galben, sau galben
- portocalie; neutraliznd cu HCl soluia se decoloreaz.
b). peste 3 - 4 ml extract se adaug cteva picturi de FeCl3 sau FeSO4 1-5 % ; apare o coloraie verde,
verde - oliv, artnd caracterul fenolic al flavonilor;
c) peste 3 - 4 ml extract se adaug cteva picturi de acetat de plumb10 % ; se obine un precipitat
floconos galben sau galben - portocaliu. Aceast reacie este foarte caracteristic pentru pigmenii
flavonici;
d) prin fierbere cu acid clorhidric 5 % se elibereaz glucidul, nct reacia Fehling devine pozitiv dup
neutralizarea soluiei.
Evidenierea pigmenilor antocianici din extracte
Pigmenii antocianici sunt pigmeni albatri, roii, violei, abundeni mai ales n flori. Agliconul este
antocianidina, care are o structur foarte apropiat de flavonoli, din care deriv prin reducere. Exist foarte
numeroase antocianidine, cele mai rspndite fiind pelargonidinele din Pelargonium sp., cianidinele din
corolele de Centaurea cyanus i delfinidinele din corolele de Delphinium sp. Antocianidinele variaz n
culoare funcie de pH-ul sucului vacuolar: albastru n pH alcalin, rou n pH acid i pH neutru.
Schimbarea culorii dup pH-ul mediului:
Materiale necesare: rdcin de sfecl roie, varz roie, flori cu petale roii, flori cu petale albastre,
acid acetic diluat, NH4 OH diluat, acetat de plumb 10 %, FeCl310 %, eprubete, pipete, plci Petri, bec de gaz.
Modul de lucru:
- ntr-o atmosfer cu vapori de HCl se introduc cteva petale roii i albastre; cele roii rmn roii iar
cele albastre devin roii;
- ntr-o atmosfer cu vapori de amoniac petalele roii devin albastre, cele albastre devin verzi i cu
timpul se nglbenesc, datorit pigmenilor flavonici supranumerari;
- se prepar un extract din sfecl roie i unul din varz roie, prin fierbere n ap: cel din sfecl este
rou, cel din varz este albastru;
- se iau n dou eprubete civa ml din extractele apoase; se adaug cteva picturi de acetat de
plumb 10 %; se obin precipitate colorate n albastru, verde, rou sau violet;
- se iau ntr-o eprubet civa ml de extract apos; se adaug 1-2 picturi de FeCl310 %; se obine o
coloraie nchis ca i n cazul taninurilor, fapt ce arat o nrudire cu acestea prin caracterul
fenolic.
Evidenierea heterozidelor fenolice

Heterozidele fenolice au ca grupare agliconic un nucleu fenolic. Se ntlnesc n numr mare n
natur, cu excepia glicozidei fenolului simplu.
Evidenierea salicinei
Salicina se ntlnete n frunzele i coaja de salcie i este D - glucozida alcoolului salicilic (saligenina).
Modul de lucru: O ramur de salcie (Salix alba) se taie transversal foarte oblic, iar suprafaa de
seciune, precum i suprafaa intern a suberului se pensuleaz cu H2SO4 70 %, cu ajutorul unei baghete.
Peste 5-10 minute, suprafaa pensulat se coloreaz n rou - violet, culoare caracteristic salicinei.
Evidenierea coniferinei
Descoperit la conifere i apoi la sparanghel, coniferina a fost identificat ulterior i la alte specii. Este
glicozida alcoolului coniferilic, fiind prezent n toate esuturile lignificate; prezena ei indic indirect
prezena ligninei.
Modul de lucru: Pe o achie de brad se adaug 1- 2 picturi de reactiv Hohnel (fenol + KClO3) i 1 2
picturi de HCl conc.; apare o coloraie verde - albstruie
Evidenierea siringinei
Siringina se gsete n suberul ramurilor de liliac, n tulpina de iasomie, avnd ca grupare agliconic
alcoolul siringenina. Suprafaa intern a suberului de la o ramur de liliac se trateaz cu 1-2 picturi de
H2SO4 70 %; apare o coloraie verde.
Evidenierea heterozidelor cumarinice

Heterozidele cumarinice au ca grupare agliconic cumarina, lactona acidului cumarinic, care are un
miros plcut de fn proaspt, fiind principalul odoriferant la o serie de plante, cum ar fi sulfina.
Evidenierea aesculinei
Aesculina se gsete n suberul tnr la castanul slbatic i se pune n eviden prin bicromismul su.
Modul de lucru: se prepar un extract de aesculin, prin fierberea scoarei de castan n ap; extractul
prezint culoare glbuie n lumin direct i albstruie n lumin reflectat. Bicromismul se intensific n
prezena NH4 OH conc. i dispare n prezena ctorva picturi de HCl conc.
Din scoara de frasin poate fi identificat cu aceeai metod fraxina. Acest glicozid prezint o
fluorescen verde ce se poate observa un timp mai ndelungat deoarece scoara frasinului conine mai
puine taninuri.
1. 3. Evidenierea taninurilor
Taninurile sunt substane fenolice de natur variat, cu foarte numeroi hidroxili, ceea ce le confer
proprieti reductoare remarcabile. Nu conin azot n molecula lor. Sunt formate din glucoz i acid galic.
Cu srurile de fier dau precipitate nchise la culoare (negre, brune, albastru nchis), iar cu proteinele dau
complexe insolubile, imputrescibile i foarte rezistente.
Taninurile se ntlnesc la majoritatea plantelor (n frunze, scoar, fruct) n cantiti variabile. Se
extrag din ritidoma de stejar.
n celule se gsesc n stare de coloid (n sucul vacuolar), sub form de granule (n citoplasm);
adesea reprezint agliconul unor heterozide sau se combin cu mucilagiile, gumele sau cu celuloza. Uneori
sunt localizate n celule speciale (idioblaste, tanifere), prezente n parenchimuri, cum este cazul la mce.
Materiale necesare: ritidom de stejar, nuc, castane slbatice, FeCl3 10 %, acetat de plumb 10 %,
K2Cr2O7 - soluie diluat, eprubete, pipete, stativ pentru eprubete.
Modul de lucru:
Se prepar un extract apos (prin fierbere timp de 10 minute) folosind unul din materialele mai sus
enumerate. Cu extractul obinut se efectueaz reacii de culoare ( vezi tabelul de mai jos).
Nr.
eprubet
1.
Volumul de extract
Volumul de reactiv
Civa ml (3-4 ml)
Cteva picturi FeCl3 10 %
2.
Civa ml (3-4 ml)
3.
Civa ml (3-4 ml)
Cteva picturi acetat de

plumb
Cteva picturi K2Cr2O7 soluie diluat
Coloraia obinut
Verde - brun, funcie
de concentraia
taninului
Precipitat alb
Precipitat brun
2. RESPIRAIA PLANTELOR
Respiraia este procesul fiziologic de degradare oxidativ a substanelor organice sintetizate n
fotosintez, n care se elibereaz energia necesar desfurrii proceselor vitale. Respiraia se realizeaz n
fiecare celul la nivelul hialoplasmei i a condriozomilor, iar la exterior se manifest sub forma unui schimb de
gaze: absorbie de oxigen molecular din aer i eliminare de dioxid de carbon :
Ecuaia general a respiraiei
C6 H12 O6 + 6 O2 CO2 + 6 H2 O + 674 Kcal.
2. 1. Metode calitative de studiu a respiraiei aerobe

Aceste metode se bazeaz pe evidenierea schimbului de gaze caracteristic respiraiei.
METODA MOLLIARD
Principiul metodei se bazeaz pe crearea unui deficit de presiune ntr-un recipient nchis, ca urmare
a schimbului gazos respirator, n care oxigenul este absorbit de seminele n curs de germinaie iar dioxidul
de carbon degajat este captat de un hidroxid.
Materiale necesare: tub de sticl alungit i lrgit la un capt ( tip osmometru Dutrochet), stativ,
vas cu mercur, capsul sau fiol de sticl, dop de cauciuc prevzut cu orificiu, tub de cauciuc cu clem,
semine germinate, soluie de KOH 30 %.
Modul de lucru. Se introduc ntr-un osmometru Dutrochet semine aflate n curs de germinaie, se
acoper cu un dop strbtut de un tub de cauciuc prevzut cu o clem. Se fixeaz osmometru la un stativ ,
astfel ca tubul lui s fie scufundat ntr-un vas cu mercur. Dup fixare se deschide clema de la captul
tubului de cauciuc, se atrn de crligul de pe partea inferioar a dopului un vas mic n care s-a pus n
prealabil o soluie de KOH 30 %, dup care se astup osmometrul cu dopul , lsnd clema deschis pentru
a uniformiza presiunea din interior cu cea extern. Se nchide apoi bine clema i dup un interval de timp,
n funcie de intensitatea respiraiei materialului vegetal, se va putea constata c mercurul se va urca n
tubul osmometrului.
Interpretare. Mercurul se urc n tub deoarece dioxidul de carbon degajat de semine fiind
fixat de ctre hidroxid , nu mai compenseaz sub raportul presiunii oxigenul absorbit n respiraie,
astfel c presiunea intern scade n raport cu exteriorul . Cu timpul se va constata c nlimea coloanei
de mercur atinge circa 152 mm i va rmne constant , deoarece n acest moment coloana va
reprezenta 1/5 din presiunea atmosferic normal , ceea ce denot faptul c ntreaga cantitate de oxigen
din incint a fost consumat. Aceast nlime a coloanei de mercur se datorete faptului c oxigenul se
gsete n aer n concentraia de 20, 95 %, concentraie care reprezint aproximativ 1/5 din
compoziia aerului i din valoarea presiunii atmosferice standard.
METODA BAZAT PE
UTILIZAREA LEUCODERIVAILOR
Principiu metodei const n utilizarea leucoderivailor, substane ce pot oscila ntre o form oxidat
colorat i una redus incolor, fapt ce permite folosirea lor pentru evidenierea prezenei sau absenei
oxigenului ntr-un mediu apos.
Materiale necesare: eprubete, stativ, soluie diluat de albastru de metilen (indigocarmin), ramuri de
plante acvatice submerse (Elodea, Myriophyllium, Ceratophyllum), ulei.
Modul de lucru. Se introduce ntr-o eprubet ce conine o soluie diluat de albastru de metilen sau
de indigocarmin, o ramur a unei plante superioare submerse ; se toarn deasupra un strat de ulei, pentru a
izola soluia din eprubet de atmosfera nconjurtoare i se aeaz eprubeta la ntuneric. Se va constata, dup
un timp, c soluia din eprubet se decoloreaz deoarece oxigenul din mediul apos a fost consumat de
ramur n respiraie. Dac se trece eprubeta la lumin, soluia din ea se decoloreaz deoarece n aceste
condiii ramura degaj oxigen n fotosintez.
2. 2. Metode cantitative de determinare a respiraiei

Intensitatea respiraiei se exprim prin cantitatea de CO2 eliminat sau de O2 absorbit (n mg sau cm3) de
ctre unitatea de mas a materialului vegetal proaspt sau uscat (care este gramul), n unitatea de timp (care
este ora). Este de preferat raportarea intensitii respiraiei la unitatea de mas a materialului vegetal uscat,
deoarece coninutul de ap din corpul plantelor variaz mult, att n cursul zilei ct i sezonier.
ntruct volumul de CO2 eliminat nu este ntotdeauna egal cu volumul de O2 absorbit, rezultatele
determinrilor bazate pe evaluarea cantitii de CO2 produs sau pe evaluarea cantitii de O2 consumat n
respiraie, nu sunt obligatoriu identice.
Raportarea cea mai corect a intensitii respiraiei, care se folosete ns mai rar, se face la azotul
proteic existent n esuturile sau organele utilizate la determinri, adic numai la partea activ a celulelor,
fr substanele inerte ( lignin, celuloz, amidon, uleiuri, etc.), procesul fiind exprimat n
mg sau cm 3 CO2 sau O2 / g N proteic / h
Determinarea intensitii respiraiei la plantele terestre

Metoda de teren
Determinarea se face dup metoda prezentat la studierea intensitii fotosintezei, cu deosebirea c
vasul cu planta se vor ine la ntuneric. n aceste condiii, la sfritul determinrii, cantitatea de dioxid ce
carbon din incinta vasului va fi mai mare n vasul cu planta.
Intensitatea respiraiei se calculeaz dup formula:
(a-b) d 60
IR =
G T
n care:
a = volumul soluiei de acid oxalic folosit la titrarea hidroxidului de bariu rmas necarbonatat n
vasul martor;
b = volumul soluiei de acid oxalic folosit la titrarea hidroxidului de bariu rmas necarbonatat n
vasul de determinare a respiraiei;
d = factorul soluiei de acid oxalic;
60 = factor de transformare a minutelor n ore, dac T este n minute;
G = greutatea materialului n grame;
T = timpul de expunere n minute.
Metoda manometric Warburg
Pentru determinare se pregtete instalaia conform procedeului descris la studiul intensitii
fotosintezei; determinarea se face respectnd succesiunea operaiilor prezentate la paragraful respectiv, cu
urmtoarele deosebiri:
- n vasul de reacie, care va fi cuplat la manometrul ce va constitui garnitura vas de reaciemanometru de experien, se introduce materialul vegetal , cntrit n prealabil cu precizie, n jurul
phrelului central , n care se introduce apoi un volum de 0,3 ml soluie de KOH 30 % i n care se
mplnt un fitil de hrtie de filtru pliat , cu dimensiunile de 2/2 cm, pentru a mri suprafaa de
contact dintre hidrat i CO2 rezultat din respiraia materialului vegetal;
- n cazul n care materialul vegetal este reprezentat prin fragmente de organe sau de esuturi
clorofiliene, dup ataarea vasului de reacie la manometrul corespunztor , se mbrac vasul de
reacie ntr-un scule de pnz neagr, pentru a mpiedica ptrunderea luminii n el;
nu se pune n funciune sistemul de iluminare a bii termostat. n timpul determinrii, ntruct
absorbia oxigenului nu este compensat prin eliminarea dioxidului de carbon, care este fixat de
hidrat, n garnitura de experien are loc o scdere a presiunii din vasul de reacie, fapt ce determin
urcarea lichidului manometric n braul nchis al manometrului i coborrea lui n braul deschis al
acestuia. Intensitatea respiraiei se calculeaz dup formula dat la studiul intensitii fotosintezei.
2. 3. Evidenierea enzimelor de respiraie

Enzimele de respiraie fac parte din clasa oxidoreductazelor i catalizeaz reaciile de oxidare i
reducere care au loc n celule. Majoritatea oxidrilor biologice se realizeaz prin dehidrogenare, transportul
hidrogenilor de la substrat (care se oxideaz - AH2 ) la acceptor (care se reduce B) fcndu-se prin
activitatea dehidrogenazelor:
AH2 + B A + BH2
n funcie de natura acceptorului de hidrogen, dehidrogenazele pot fi:
- aerobe, care transport hidrogenul de la substratul care se oxideaz direct la oxigen;
- anaerobe, care transport hidrogenul la ali acceptori, dar nu la oxigen.
Evidenierea dehidrogenazelor anaerobe ( reductaze)

Dehidrogenazele anaerobe din drojdia de bere
Materiale necesare: eprubete, drojdie de bere, soluie de albastru de metilen 1 %, ulei.
Modul de lucru. Se introduce, n trei eprubete ce conin o soluie de albastru de metilen 1 % cte o
granul de drojdie de bere, de mrimea unui bob de mazre. Se agit bine coninutul primei eprubete i se
va constata c albastru de metilen este redus total i trece, ntr-un interval de timp scurt, n leucoderivatul
incolor.
Eprubeta a doua se aeaz n stativ , fr a o agita. Se va constata c soluia se decoloreaz doar la baza
eprubetei i rmne colorat n partea ei superioar, deoarece albastrul de metilen se oxideaz neenzimatic,
spontan, cu oxigenul atmosferic. Coninutul celei de a treia eprubete se izoleaz de aer, turnnd deasupra
lui un strat de ulei. Lsnd eprubeta n stativ, se va constata c albastrul de metilen se decoloreaz total, ns
ntr-un timp mai ndelungat.
Evidenierea dehidrogenazelor aerobe ( oxidaze)

Oxidazele sunt enzime aerobe care catalizeaz reaciile de oxidoreducere cu ajutorul oxigenului
molecular din atmosfer sau cu oxigenul peroxizilor. Oxidazele transport hidrogenul luat de la substratul
donor i l trec numai pe oxigenul acceptor, rezultnd ap sau ap oxigenat.
oxidaze
AH2 + O2
A + H2O
AH2 + O2
oxidaze
A + H2O2
Principiul metodei. Prezena dehidrogenazelor aerobe se evideniaz, de obicei, cu acid alfa- guaiaconic,
care se gsete n rina de guaiac i care, prin hidrogenare, trece n forma oxidat, de culoare albastr.
Reacia nu are loc n lipsa oxigenului atmosferic.
Materiale necesare: tubercul de cartof, fructe ( mere, pere, prune), soluie alcoolic 1 % de rin de
guaiac.
Modul de lucru. Se adaug peste o felie tiat dintr-un tubercul de cartof o pictur de tinctur de
guaiac. Se va constata c apare o coloraie albastr, datorit oxidrii (dehidrogenrii) acidului guaiaconic de
ctre oxidaze. Dac se aeaz o pictur de tinctur de guaiac pe o felie de tubercul de cartof, care a fost
fiart n prealabil, coloraia nu apare, deoarece prin fierbere au fost distruse enzimele. Aceleai rezultate se
pot obine i cu extracte apoase din rztur de fructe ( mere, pere, prune) sau de tuberculi de cartof, peste
care se adaug cteva picturi de tinctur de guaiac.
Evidenierea oxidazelor directe

Aceste enzime sunt oxidoreductaze transportoare de electroni, care catalizeaz reacii de tipul:
O2
4e-
2O 2-
2H2O
Evidenerea peroxidazei
Peroxidaza catalizeaz transferul atomilor de hidrogen de la diferii donatori (fenoli, amine,
aldehide, flavone, tirozin, citocrom c, acid uric, rezorcin,etc.) la apa oxigenat, dup ecuaia:
AH2 + H2O2
2H2O + O2
Principiul metodei. Evidenierea peroxidazelor se face cu ajutorul unor substane care, prin oxidare,
dau produi colorai.
Experiment 1
Materiale necesare: tinctur de guaiac, ap oxigenat 3 %, rdcin de hrean, bisturiu, plac Petri,
pipete.
Modul de lucru. Se picur pe o rondel extras dintr-o rdcin de hrean, puin tinctur de guaiac.
Se va constata c nu apare nici o coloraie. Dac se adaug apoi peste ea o pictur de ap oxigenat 3 %,
apare coloraia albastr a formei oxidate a acidului alfa- guaiaconic.
Se poate folosi i un filtrat din rdcin de hrean triturat, peste care se adaug cteva picturi de tinctur de
guaiac i de ap oxigenat.
Experiment 2
Materiale necesare: soluie de pirogalol 2 %, ap oxigenat 3 %, rdcin de hrean, pahare

Erlenmeyer, bec de gaz, plnii de sticl, hrtie de filtru, eprubete, pipete.
Modul de lucru. Se adaug peste 2-3 ml de filtrat, obinut dintr-o rdcin de hrean triturat, circa
0,5 ml de soluie de pirogalol 2 % i cteva picturi de ap oxigenat 3 %.
Coninutul eprubetei se coloreaz n galben portocaliu, iar dup un timp vor aprea la suprafaa lichidului
picturi portocalii de purpurogalin, care este produsul final al oxidrii pirogalolului.
Evidenierea catalazei
Catalaza descompune apa oxigenat rezultat n celulele vii sub aciunea enzimelor flavinice, care
transfer hidrogenul direct oxigenului molecular. Rolul ei este foarte important, deoarece apa oxigenat este
un oxidant puternic i deci duntor structurilor vii. n reaciile catalizate de aceast enzim particip dou
molecule de ap oxigenat, dintr care una este donor de hidrogen , iar cealalt acceptor:
H2O2 + H2O2 = 2 H2O + O2
Modul de lucru: Pentru evideniere se aeaz, ntr-o pictur de ap oxigenat 3 % pe o lam de
microscopie dou frunze de Elodea canadensis, dintre care una fiart n prealabil. Urmrind preparatul la
microscop, cu un obiectiv mic, se va observa o degajare energic de gaz din frunza vie. Acest gaz este
oxigenul ce se degaj din apa oxigenat ptruns n frunz i care a fost descompus de enzim.
Evidenierea catecoloxidazei
Cunoscut mai ales sub numele de tirozinaz, catecoloxidaza este o monofenoloxidaz ce conine
cupru i catalizeaz oxidarea aerob a o- difenolilor, trifenolior, a substanelor tanante i n special a
tirozinazei. Sub aciunea catecoloxidazei are loc convertirea tirozinei n dihidroxifenilalanin (DOPA), care ,
la rndul ei, este oxidat cu formare de dopachinon. n continuare reaciile decurg spontan, n absena
enzimelor, ajungndu-se la melanine (pigmeni bruni):
n celulele vegetale catecoloxidaza are i rolul de a oxida, cu ajutorul oxigenului, hidrogenii scoi de
dehidrogenaze din diferite substane i care au fost transferai chinonelor, care trec astfel n polifenoli.
Acetia sunt oxidai de ctre catecoloxidaz i n acest mod se formeaz n plante un lan respirator
secundar, fr citocromi:
Modul de lucru: Dac se secioneaz un tubercul de cartof sau un mr i se las la aer suprafaa de
seciune se brunific dup un timp. Dac se adaug pe suprafaa de seciune puin soluie de tirozin,
coloraia apare mai repede i mai intens, deoarece se formeaz melanine n urma activitii catecoloxidazei.
10

Cuprins
1. Fermentaiile
2. Germinaia seminelor
3. Creterea plantelor
4. Micrile plantelor
1. FERMENTAIILE
REINEI!
Fermentaiile sunt realizate de anumite grupe de microorganisme i

reprezint un ansamblu de procese prin care are loc degradarea unor substane
organice, cu producere de energie care este necesar pentru desfurarea vieii lor.
La plantele superioare procesul de fermentaie se produce n condiii de
insuficien sau de lips de oxigen.
Fermentaiile la microorganisme
Aceste fermentaii constau ntr-o serie de procese biochimice, cu ajutorul crora unele microorganisme i
procur energia de care au nevoie.
Ceea ce caracterizeaz fermentaiile este disproporia mare care exist ntre cantitatea de substrat
transformat i energia rezultat n urma procesului. Drojdia de bere transform n alcool, n 24 ore, o
cantitate de glucoz de 600- 800 ori mai mare dect greutatea sa. Rezult c pentru nevoile energetice,
microorganismele trebuie s consume, n general, de cca de 30 ori mai mult substrat n timpul vieii anaerobe
dect n timpul vieii aerobe.
Evidenierea fermentaiei alcoolice

Fermentaia alcoolic este realizat de levuri, de unele ciuperci din familia Mucoraceae i de unele
bacterii. n practic se folosesc n special drojdiile (Sacharomyces elipsoideus, S.cerevisiae) care pot suporta o
concentraie a alcoolului de 14-16 % n timp ce celelalte microorganisme, care pot realiza aceast fermentaie,
nu pot suporta dect o concentraie de 2-3 % alcool. Microorganismele amintite respir aerob n prezena
oxigenului, iar n lipsa lui produc alcool etilic, cu eliberarea unei cantiti mici de energie, conform reaciei:
C6 H12 O6 2 C2 H5OH + 2 CO2
Pentru evidenierea fermentaiei alcoolice, se efectueaz urmtoarele experiene:
Experiment 1
Materiale necesare: eprubete cu rezervor lateral, stativ, baie de ap, termometru, soluie de
zaharoz 10 %, drojdie de bere, pastile de NaOH, soluie de NaOH 10 %.
Modul de lucru. Se introduce n dou eprubete cu rezervor lateral o soluie de zaharoz 10 % astfel
ca s nlocuiasc tot aerul din extremitatea lor superioar. Se introduce n soluia din ele o cantitate mic de
drojdie de bere.
Dup un timp, se constat c n extremitatea superioar a eprubetelor se acumuleaz un gaz care
dezlocuiete un volum corespunztor de soluie din ele.
Acest proces poate fi grbit, introducnd partea inferioar a eprubetelor ntr-o baie de ap la
temperatura de 30- 35 0 C.
Pentru a evidenia faptul c gazul produs este dioxidul de carbon, se introduc n una din eprubete
pastile de NaOH, astfel ca dup dizolvare s se realizeze o concentraie de circa 30 % a substanei. Agitnd
uor eprubeta, n plan vertical, se va constata c gazul acumulat n extremitatea ei superioar este nlocuit
de soluie, ca urmare a faptului c CO2 este absorbit de ctre hidroxidul aflat n soluie, conform reaciei:
CO2 + 2 Na OH Na2 CO3 + H2 O
Prezena alcoolului se evideniaz prin reacia acestuia cu iodul: dup ce soluia din cea de a doua
eprubet a fermentat bine, se introduce n ea puin soluie de NaOH 10 %, se nclzete la circa 60 0 C i apoi
se introduc n rezervorul eprubetei cteva cristale de iod; se formeaz un precipitat fin, galben, de iodoform,
care are un miros caracteristic.
Experiment 2
Materiale necesare: balon Erlenmeyer , soluie de zaharoz 10 %, drojdie de bere, soluie de Ba

(OH) 1 %, soluie de fenolftalein 1 %, eprubete, baie de ap, termometru, tub de sticl ndoit de dou ori n
unghi drept.
Modul de lucru. Se introduce ntr-un balon Erlenmeyer o soluie de zaharoz 10 %, peste care se
adaug puin drojdie de bere, se introduce balonul ntr-o baie de ap la temperatura de 30-35 0 C, dup
care se astup cu un dop strbtut de un tub de sticl ndoit de dou ori n unghi drept. Extremitatea liber a
tubului de sticl se introduce apoi ntr-o eprubet care conine o soluie de Ba(OH)2 1 %.Dioxidul de carbon
produs n cursul fermentaiei, degajndu-se sub form de bule n soluia din eprubet, n urma acumulrii
lui n balonul Erlenmeyer, va acidifica soluia din eprubet, ca urmare a faptului c se va combina cu
hidroxidul, conform reaciei:
Ba (OH) 2 + CO2 Ba CO3 + H2O
n urma acestei reacii, prin consumarea hidroxidului soluia se decoloreaz, deoarece fenolftaleina
este incolor n mediu acid.
Evidenierea alcoolului rezultat n urma acestei fermentaii se face dup procedeul prezentat la
experiena 1.
Evidenierea fermentaiei butirice

Aceast fermentaie este realizat de ctre bacterii strict anaerobe i facultativ anaerobe, care se
dezvolt bine la temperatura de 35- 40 0 C. Ele se gsesc pe cereale, n pmnt, n lapte, brnzeturi etc. i
atac toate zaharurile simple, precum i polizaharidele superioare ( exceptnd celuloza), transformndu-le n
acid butiric, conform reaciei:
C6H12 O6 CH3 (CH2)2- COOH + 2 H2
Bacterii rspunztoare de fermentaia butiric: Bacillus amylobacter, Clostridium pasteurianum etc.
Evidenierea acestei fermentaii i a acidului butiric rezultat se realizeaz prin urmtoarele
experiene:
Experiment 1
Materiale necesare: cutie Petri, semine de fasole, termostat.

Modul de lucru. ntr-o cutie Petri se aeaz cteva semine de fasole care se acoper cu ap. Se
acoper cutia Petri cu capacul i se introduce ntr-un termostat la temperatura de 40 0 C. Dup cteva zile se
va putea constata apariia unei fermentaii intense, care se manifest prin spumegarea apei i transformarea
seminelor de fasole ntr-o mas amorf. Ridicnd capacul cutiei Petri i apropiind de ea un chibrit aprins, se
produce o mic explozie, provocat de hidrogenul rezultat din fermentaie, care ia foc. Mirosul neplcut care
se degaj din cutia Petri este caracteristic acidului butiric.
Experiment 2
Materiale necesare: lichid de fermentaie, alcool etilic concentrat, acid sulfuric concentrat.
Modul de lucru: Se iau civa ml de lichid de fermentaie, la care se adaug 0,5 ml alcool etilic
concentrat i 10 ml de acid sulfuric concentrat. Acidul butiric trece n ester butil-etilic care are un miros
caracteristic.
Experiment 3
Materiale necesare: extract de fermentaie, soluie de Ca(OH)2, soluie de FeCl3 1%, eprubete, bec de
gaz.
Modul de lucru: ntr-o eprubet se iau 5 ml extract de fermentaie butiric; se neutralizeaz cu o
soluie de Ca(OH)2 i se adaug 2 ml soluie 1 % de FeCl3. Dup nclzire, coninutul eprubetei se coloreaz
n cafeniu; aceast coloraie este caracteristic reaciei dintre srurile butirice i Fe 3+ din clorura de fier.
Evidenierea fermentaiei lactice

Este un proces anaerob, datorat activitii enzimatice a unor bacterii, ca: Lactobacilus casei, L.
bulgaricus, Streptococcus lactis etc. Speciile enumerate provoac fermentaia laptelui, scindnd n primul rnd
molecula de lactoz n glucoz i galactoz, apoi pe aceasta n cte dou molecule de acid lactic.
n prepararea murturilor, zaharurile din materialele puse la murat sufer, de asemenea o
fermentaie lactic provocat n cazul verzei de Bacterium brassicae, iar n cazul castraveilor, de Bacterium
cucumeris fermentati.
n laborator este uor de urmrit fermentaia laptelui. ntr-un balon Erlenmeyer se pune lapte pn
la 2/3 din volumul su, se astup cu un dop de vat i se las la termostat la 20-25 0 C. Are loc o fermentaie
lactic n urma creia rezult acid lactic. Cazeina care se gsete n lapte sub form coloidal i combinat cu
calciul, cedeaz acidului lactic calciul i formeaz un cuagul n care se gsesc i celelalte albumine, globuline,
lactoza, srurile. Totodat se separ un lichid de cuagulare, zerul care conine ap, o parte din sruri i din
substanele organice solubile, printre care acidul lactic.
Lactoza din lapte, de obicei, nu fermenteaz complet, datorit faptului c acumularea de acid lactic
inhib activitatea bacteriilor lactice. Dac se neutralizeaz acidul lactic, adugnd n balon de la nceput
CaCo3 se formeaz lactat de calciu care nu mpiedic activitatea bacteriilor i fermentaia lactozei este
complet. n acest caz se va observa o degajare de gaz, care ns nu rezult din fermentaie, ci este degajat n
urma reaciei dintre CaCO3 i acidul lactic.
Acidul lactic n fermentatele n care nu s-a adugat CaCO3 se pune n eviden prin urmtoarea
reacie:
Se scutur balonul cu laptele fermentat iar amestecul omogen obinut se filtreaz.
Se iau aproximativ 10 ml filtrat peste care se adaug 1 ml H2SO4 10 %, se nclzete la fierbere i se
adaug cteva picturi de KMnO4 2 %. Acidul lactic trece aproape total n aldehid acetic, ce se pune uor
n eviden.
Se astup gura eprubetei cu o hrtie de filtru mbibat cu o soluie de azotat de Ag amoniacal.
nclzind eprubeta, aldehida acetic se evapor i nnegrete hrtia de filtru, deoarece se pune n eviden
Ag metalic. Reacia este caracteristic aldehidelor i reprezint de fapt reacia Tollens folosit pentru
evidenierea aldozelor.
Fermentaiile la plantele superioare

n mod normal, la plantele superioare nu se produc procese de fermentaie. Totui n condiii de
aeraie insuficient, organele plantelor pot realiza fermentaii. n cele mai multe cazuri poate avea loc o
fermentaie alcoolic (n cazul fructelor supramaturate banane, pere, mere, roii, struguri etc. care
dobndesc un miros de alcool) i uneori o fermentaie lactic ( la tuberculii de cartof).
Evidenierea schimbului de gaze din cursul fermentaiei la plantele superioare

Materiale necesare: rdcini de sfecl (rdcini de morcov ori alte organe bogate n glucide), vas de
sticl, dop de cauciuc cu dou orificii strbtut de dou tuburi de sticl, clem, soluie colorat ( albastru de
metilen).
Modul de lucru: Se introduc rdcini de morcov sau sfecl, ori alte organe bogate n glucide ( fructe)
ntr-un vas care se nchide cu un dop strbtut de dou tuburi: un tub manometric n care se pune n
prealabil puin soluie colorat ce servete ca lichid manometric i un tub de sticl scurt, prelungit la
exterior cu un tub de cauciuc prevzut cu o clem, care servete la echilibrarea presiunii interne cu cea
extern n momentul nchiderii borcanului. Se nchide clema i, urmrind nivelul lichidului manometric, se
va constata n scurt timp c are loc o rarefiere a atmosferei interne, evideniat printr-o ridicare uoar a
lichidului manometric n ramura dinspre borcan a acestuia.
Interpretare. Aceasta se datoreaz faptului c n timpul respiraiei materialul vegetal consum
oxigen, iar dioxidul de carbon produs se dizolv n esuturi n sucul vacuolar al celulelor. Dup ce
concentraia oxigenului din atmosfera intern scade sub 5 %, esuturile ncep s fermenteze i presiunea
din vas crete puternic, stabilindu-se dup un timp la o valoare cu mult deasupra presiunii atmosferice
(fig. ). Aceasta se datoreaz faptului c esuturile s-au saturat cu CO2 i elimin n cursul fermentaiei
cantiti mari din acest gaz. n cursul procesului n materialul vegetal se acumuleaz alcool etilic, a
crui prezen poate fi sesizat dup mirosul su caracteristic.
Evidenierea fermentaiei la semine

Materiale necesare: semine, cuv cu mercur, tub de sticl, stativ.
Modul de lucru: Se umple pn la refuz cu mercur un tub de sticl, lung de circa 30 cm i nchis la
un capt, care inndu-l astupat cu un deget, se rstoarn cu gura ntr-o cuv cu mercur, avnd grij s nu
ptrund n el nici o bul de gaz i se fixeaz la un stativ. Prin captul scufundat n mercur se introduc n tub
cteva semine de fasole sau de la alt specie, splate n prealabil, care prin diferena de densitate se ridic
pn la extremitatea superioar a tubului. Dup ctva timp mercurul va ncepe s coboare n interiorul
tubului.
Interpretare. Acest fapt se datoreaz degajrii CO2 de ctre esuturi. ntruct condiiile n care
se gsesc seminele sunt strict anaerobe, se produce un proces de fermentaie, care s-a numit respiraie
intramolecular.
Pentru a demonstra c n timpul acestui proces de fermentaie se produce CO2, se introduc n tub
cteva pastile de KOH, umezite n prealabil. Dioxidul ce carbon produs va fi fixat sub form de K2CO3,
conform reaciei:
CO2 + 2 KOH K2CO3 + H2O
i, ca rezultat, mercurul se ridic n tub, ocupnd din nou tot spaiul din care a fost dezlocuit
anterior.
Producerea de alcool n timpul acestui proces de fermentaie poate fi decelat dup mirosul su
caracteristic, pe care l imprim i seminelor.
2. GERMINAIA SEMINELOR
Prin germinaie se nelege totalitatea proceselor morfologice,
fiziologice i biochimice de trecere a embrionului din smn de la starea de
via latent (de repaus) la starea de via activ.
Smna uscat conine 12- 14 % ap i se afl n stare de repaus.
Repausul ei este suprimat numai dup ce se produc o serie de modificri
interne. Ea nu poate germina dect dup ce este matur, adic dup ce au
avut loc o serie de fenomene morfologice (dezvoltarea embrionului i a
endospermului) i fiziologice (acumularea unor unor substane de rezerv,
deshidraterea).
Capacitatea de germinare a seminelor nu este constant. Imediat dup recoltare este sczut sau
chiar nul i crete n cursul perioadei de postmaturaie, dup care, n funcie de particularitile de specie,
scade iar, n funcie de vrsta lor.
Evidenierea factorilor externi necesari germinaiei

Pentru a putea germina, seminele au nevoie de prezena unor factori ai mediului extern, la valori
convenabile. Un rol deosebit de important revine apei, oxigenului din aer i temperaturii mediului. n afara
acestor factori, seminele unor specii mai au nevoie i de prezena luminii.
Evidenierea necesitii prezenei n mediu a apei, aerului i a unei temperaturi convenabile
pentru germinaia seminelor
Necesitatea prezenei n mediu a celor trei factori menionai mai sus poate fi evideniat prin proba
celor trei semine de fasole, imaginat de ctre I. Small.
Principiu procedeului const n fixarea pe un suport de lemn sau pe o baghet de sticl a trei semine
de fasole i aezarea suportului ntr-un pahar Berzelius cu ap , n aa fel nct la fiecare din cele trei boabe
s le lipseasc unul sau mai muli factori necesari germinaiei.
Materiale necesare: semine de fasole, pahare Berzelius, suporturi de lemn sau baghete de sticl.
Modul de lucru. Pe un suport de lemn sau o baghet de sticl, cu lungimea de 20 cm se fixeaz trei
semine de fasole astfel: cte o smn la capetele suportului i una la mijlocul acestuia. Se aeaz suportul
ntr-un pahar Berzelius, n care se pune ap fiart i rcit (deci degazat ) astfel ca bobul din mijloc s fie
scufundat pe jumtate n ap. Experimentul se monteaz n dou variante, dintre care una se pstreaz, timp
de dou sptmni, ntr-un loc cald i luminos, iar cealalt ntr-un loc rece (eventual la frigider).
Interpretare. Se va constata c la varianta inut la cldur smna din aer nu germineaz, dei a
dispus de aer i de o temperatur convenabil, pentru c i-a lipsit apa. Smna din ap, care s- a aflat n
condiii de umiditate i temperatur suficiente, s-a mbibat, ns dup consumarea rezervelor de aer
germinaia nu areloc datorit lipsei oxigenului. Smna din mijloc, care a avut la dispoziie toate
condiiile externe necesare germinrii, germineaz i formeaz o plantul. La varianta inut la rece se
constat c nu germineaz nici una din semine, datorit lipsei unei temperaturi convenabile pentru
desfurarea acestui proces.
Demonstrarea necesitii oxigenului n procesul de germinaie

Pentru a demonstra c n procesul de germinaie seminele au nevoie de oxigen se iau dou vase cu o
capaciate de circa 250 cm3, astupate cu dopuri de cauciuc i se atrn n ele, cu cte o srm, de dopuri, cte
un ghem de vat umed rostogolit n prealabil n semine de Lipidium sativum sau de lucern. n primul vas
se toarn, nainte de introducerea ghemului de vat, cte 50 ml de ap, pentru a pstra n mediu o
umiditate optim, iar n al doilea se toarn o cantitate identic de soluie alcalin de pirogalol (reactivul 30),
care este un absorbant ideal al oxigenului. Dup 5-7 zile se constat c n vasul n care s-a adugat ap i care
conine oxigen, seminele au germinat i plantulele ies din ghemul de vat, n timp ce n vasul lipsit de
oxigen germinarea seminelor nu are loc.
Influena factorilor interni asupra germinaiei
Pentru a putea germina, seminele unor specii de plante au nevoie s parcurg o anumit perioad de
repaus. Acest repaus se poate datora strii fiziologice a embrionului, care are nevoie de o perioad de
postmaturare, sau este determinat de impermeabilitatea tegumentului seminal pentru ap i gaze, sau de
prezena unor substane inhibitoare n esuturi.
Substane inhibitoare ale germinrii
Evidenierea substanelor cu aciune inhibitoare asupra germinaiei se poate face prin urmtoarele
experimente:
1.
Substane inhibitoare din carnea fructului

Materiale necesare: semine de creson , mutar sau de lucern, fructe (mr, par, roie, lmie), plci
Petri, hrtie de filtru.
Modul de lucru. Se pun la germinat n dou cutii Petri cte 30 de semine n dou variante :
- V1 pe hrtie umed de filtru ;
- V2 - pe o felie de fruct aezat peste hrtia de filtru.
Se acoper cutiile Petri i se las la loc cald, meninndu-se pe ct posibil umiditatea constant timp de
14 zile, dup care se numr i se calculeaz procentajul seminelor germinate n fiecare variant. Rezultatele
obinute se consemneaz ntr-un tabel ntocmit dup modelul prezentat n tabelul de mai jos.
Influena substanelor inhibitoare din carnea fructelor asupra germinaiei seminelor
Condiii de germinare
Numrul seminelor
Numrul seminelor
Procentul seminelor
puse la germinat
germinate
germinate
Pe hrtie de filtru
umectat cu ap
Pe felii de fruct
2.
Substane inhibitoare din sucul de fructe.

Se prepar suc de fructe i i se determin pH-ul cu hrtie indicator universal. Dup aceast operaie se
pun la germinat n trei cutii Petri semine aparinnd speciilor mai sus menionate, n urmtoarele variante
- V1 pe hrtie de filtru umectat cu ap de conduct;
- V2 - pe hrtie de filtru umectat cu ap de conduct creia i s-a adugat n prealabil o
cantitatea corespunztoare de H2SO4 diluat, pentru a o aduce la acelai pH cu cel al sucului de
fructe;
- V3 pe hrtie de filtru umectat cu suc de fructe.
Urmrind numrul de semine germinate, dup 7- 14 zile se va putea constata inhibarea germinaiei
seminelor n prezena sucului de fructe, datorit prezenei n el a acizilor organici (malic, tartric, citric).
3.
Substane inhibitoare din endosperm.

Se iau 30 de semine de mr, mbibate n ap de conduct la 20 grade C, timp de dou zile, se
repartizeaz n trei loturi de cte 10 semine i se pun la germinat, n trei cutii Petri, pe hrtie de filtru
umectat cu ap de conduct, n trei variante:
- V1 semine intacte;
- V2 semine crora li s-a ndeprtat tegumentul seminal , cu ajutorul unui ac spatulat, fr s li
se lezeze embrionul i lsnd intact endospermul ;
- V3 semine crora li s-a ndeprtat tegumentul seminal i endospermul, reprezentate prin
embrioni izolai.
Seminele astfel pregtite se trec n cutii Petri, pe hrtie de filtru umectat cu ap de conduct.
Dup o anumit perioad de timp se va putea constata c n V1 nu germineaz nici o smn, n V2

procentajul seminelor germinate este redus i procesul puin avansat, iar n V3 seminele germineaz n
procent mare i plantulele au radicula lung i cotiledoanele nverzite. Rezultatele obinute se noteaz ntrun tabel ntocmit dup modelul prezentat n tabelul urmtor.
Influena substanelor inhibitoare din endosperm asupra germinrii seminelor de mr
Varianta
Numrul seminelor
puse la germinat
Numrul seminelor
germinate
Procentul seminelor
germinate
Procedee de stimulare a germinrii seminelor

n practic, pentru ntreruperea repausului seminelor, se aplic o serie ntreag de procedee de
stimulare a germinaiei. La seminele cu tegumentul impermeabil germinarea poate fi stimulat prin tratarea
lor cu aldehid acetic sau cu acid sulfuric. La alte specii de plante germinarea seminelor poate fi stimulat
prin tratarea lor cu cldur sau, dup caz, cu temperaturi sczute.
Stimularea germinaiei seminelor prin scarificarea tegumentului

Principiu metodei. Prin scarificarea tegumentului seminal se rupe o parte din tegumentul
impermeabil pentru a uura ptrunderea la embrion a apei i oxigenului.
Materiale necesare: semine de sulfin, lucern, plci Petri cptuite cu glasspapier, acid sulfuric
concentrat.
Modul de lucru. Seminele se mpart n trei loturi:
- lotul 1 : se pune la germinat cu tegumentul intact;
- lotul 2 se scarific tegumentul seminal nainte de a trece la germinaie folosind metoda
mecanic de frecare a seminelor ntre dou plci cptuite cu glasspapier;
- lotul 3 se scarific tegumentul pe cale chimic prin imersarea seminelor timp de cteva
minute n acid sulfuric concentrat i apoi splare cu ap. Dup meninerea seminelor la
germinat timp de 24 de ore se compar procentul seminelor germinate n cele 3 loturi.
Interpretare: Seminele unor specii din familia Leguminosae i Malvaceae prezint un tegument
tare, impermeabil pentru ap i oxigen ceea ce mpiedic procesele de imbibiie i de germinaie. Prin
scarificarea pe cale mecanic sau chimic se subiaz tegumentul seminal dnd posibilitatea declanrii
germinaiei seminelor.
3. CRETEREA PLANTELOR
Creterea reprezint un ansamblu de procese
care se soldeaz cu o mrire ireversibil a
dimensiunilor i masei uscate a plantelor. Desfurarea
procesului de cretere este asigurat la plantele
superioare de prezena esuturilor meristematice, care
formeaz n permanen celule noi, ce i continu apoi
creterea prin alungire, mrindu-i volumul pn cnd
ajung la dimensiunile caracteristice maturitii.
Stabilirea zonei de cretere a organelor vegetative ale plantelor
Organele plantelor nu cresc n mod egal pe toat ntinderea lor. Ele prezint trei zone distincte:
zona creterii meristematice, zona creterii prin ntindere i zona de difereniere.
Zona creterii meristematice se rennoiete mereu ca urmare a faptului c celulele se divid n
permanen. Celulele rezultate n urma acestui proces trec continuu n zona creterii prin ntindere, care este
sediul celei mai intense creteri a lor n volum. n zona de difereniere celulele ajung la maturitate i i
nceteaz creterea.
Stabilirea zonei de cretere la rdcini
Materiale necesare: semine germinate de bob, fasole sau mazre, marker, camer umed, hrtie de
filtru.
Modul de lucru. Se folosesc camere umede realizate dintr-un cilindru de sticl nchis cu un dop de
plut avnd n interior un strat de ap de 2-3 cm grosime. Pentru asigurarea unei umiditii
corespunztoare, este recomandabil ca pereii cilindrului s se cptueasc parial cu hrtie de filtru,
ncepnd de la poriunea lui bazal. La semine germinate de mazre, fasole sau bob, cu rdcina dreapt de
1-2 cm, se marcheaz rdcina prin semne echidistante cu tu, la distane de 1mm, ncepnd de la vrf pe o
lungime de 1 cm. Dup marcare, se aeaz plantulele (avnd rdcinia nfurat n vat umectat) n
camera umed, prin suspendare de dopul de plut, cu ajutorul unor ace cu gmlie. Camerele umede se trec
la ntuneric la temperatura camerei.
Dup 24 de ore se msoar rdcina, folosind rigla gradat sau hrtie milimetric, stabilind lungimea
segmentelor cuprinse ntre liniile marcate cu tu pe rdcin.
Rezultatele se trec ntr-un tabel i se reprezint grafic nscriind pe abscis numrul segmentelor iar pe
ordonat lungimea fiecruia n mm. Se observ c primul segment nu a crescut, al doilea pn la al cincilea
segment au crescut cel mai mult, iar restul segmentelor au crescut din ce n ce mai puin.
Interpretare. Zona de cretere a rdcinii este limitat la primul cm de la vrf i se ntinde pe o
distan de numai civa mm de la vrf, avnd o poziie subterminal. Prin diferena dintre lungimea
iniial i cea final a fiecrui segment se calculeaz viteza de cretere a rdcinii n decurs de 24 de ore.
Stabilirea zonei de cretere la tulpinile nearticulate

Materiale necesare: ghivece cu plantule de floarea soarelui, bob, fasole, mazre, marker, rigl gradat.
Modul de lucru. Se folosesc plantule cu lungimi de 4 5 (10-15 ) cm la care se execut marcri cu tu
pe tulpin, prin semne echidistante la 2 mm pe toat lungimea. Se in plantulele timp de 48 de ore, la lumin,
i la temperatura camerei ( 20-25 0C), dup care se msoar dimensiunile diviziunilor trasate cu tu. Se
constat o alungire mai intens la n partea superioar a tulpinii .
Interpretare. Zona de cretere a tulpinii nearticulate este situat pe o lungime de de civa cm, mult
mai mare dect la rdcin i are o poziie subterminal, la civa mm pn la civa cm fa de vrf.
Stabilirea zonei de cretere la frunze

Materiale necesare: plantule de porumb i de fasole, marker, rigl gradat.
Modul de lucru. Se folosesc plantule de porumb crora li se marcheaz nervura frunzelor cu tu prin
semne echidistanate la 2 mm, pe toat lungimea acestora. Dup 24 de ore se constat c semnele trase cu
tu s-au distanat numai la baza limbului iar n rest au rmas nemodificate.
n paralel, se folosesc plantule de fasole cu frunze tinere, nedetaate de plant, care se marcheaz cu
tu prin linii longitudinale i transversale, la distane de 2mm, paralel i perpendicular pe nervura median.
Dup dou sptmni, cnd frunzele ajung la mrimea normal, se observ c ptratele delimitate prin
marcare cu tu se deformeaz i i mresc suprafeele n mod difereniat. Liniile paralele se distaneaz mai
mult n partea bazal i lateral a limbului.
Interpretare. Limbul frunzelor prezint n stadiile tinere o cretere apical, care se stinge curnd
i n locul ei ncepe s predomine creterea n suprafa i printr-o zon intercalar, apropiat de baz.
La monocotiledonate creterea limbului frunzei devine bazal, iar la dicotiledonate bazal i lateral.
4. Micrile plantelor
Excitabilitatea i micarea, care sunt nsuiri eseniale ale materiei vii, se manifest i la plante.
Micrile plantelor se mpart n micri pasive i micri active.
Micrile pasive sunt favorizate de prezena unor adaptri care permit plantelor ntregi, sau
anumitor organe ale acestora, s fie deplasate de ageni fizici sau biologici dintr-un loc n altul.
Micrile active sunt efectuate de plante cu propria lor energie. Indiferent de nivelul structurilor la
care se manifest (n interiorul celulelor sau la organele plantelor), micrile active pot fi autonome sau induse.
Micrile autonome sunt efectuate sub influena unor factori interni, proprii organismelor. La
plantele superioare aceste micri sunt cunoscute sub denumirea de nutaii.
Micrile induse sunt produse de direcia de aciune sau de variaiile de intensitate ale unor factori
ai mediului extern. Micrile induse executate de organele plantelor fixate se numesc tropisme, iar cele
executate de organele acestor plante sub aciunea variaiei de intensitate a unor factori ai mediului extern
poart denumirea de nastii.
Micrile intracelulare
La nivel celular se manifest att micri autonome ct i micri induse. Dintre aceste micri, cel
mai uor se pot pune n eviden micrile de cicloz, dinez sau curenii citoplasmatici i micrile
cloroplastelor.
Evidenierea curenilor citoplasmatici

Materiale necesare: ramuri de Elodea canadensis, lame, lamele, microscop.
Modul de lucru. Se detaeaz o frunz de pe o ramur de Elodea canadensis; se aeaz n ap ntre
lam i lamel i se las pentru cteva minute n apropierea unui bec electric aprins, avnd grij s nu se
usuce preparatul. Se examineaz la microscop. Se va putea observa c n interiorul celulelor (care au o
singur vacuol mare, central) cloroplastele se deplaseaz ntr-un singur sens, n apropierea pereilor
celulari. Aceast micare a cloroplastelor este imprimat de curenii citoplasmatici, care le antreneaz n
sensul deplasrii citoplasmei.
Micrile induse ale organelor plantelor

Micrile induse, efectuate de organele plantelor, sunt micri provocate fie de anizotropia mediului
extern - tropisme -, fie de variaiile de intensitate ale unor factori ai acestuia nastii -.
A. Tropismele
Sunt micri de curbur ale organelor plantelor, induse de direcia de aciune a unor excitani din
mediul extern. Ele se clasific dup natura excitantului: fototropismul, geotropismul i chemotropismul cu o
variant a sa, hidrotropismul.
Evidenierea fototropismului
Atunci cnd plantele sunt iluminate unilateral, organele lor supraterane execut micri, realizate
prin variaii de cretere, orientndu-se n mod specific n raport cu direcia din care vine lumina.
Micrile fototropice i cauzele care le provoac pot fi puse n eviden prin urmtoarele
experimente:
Materiale necesare: ghivece cu plante de mucat.
Modul de lucru. Se aeaz o plant tnr de mucat, cultivat ntr-un ghiveci, n dreptul unei
ferestre. Dup un timp se va putea constata c vrful tulpinii ei se ndreapt, printr-o micare de curbur,
spre direcia din care vine lumina, iar limbul frunzelor se orienteaz astfel nct suprafaa lor s fie
perpendicular pe direcia razelor de lumin . Aceast orientare a limbului foliar este o consecin a
ortofototropismului pozitiv al peiolurilor lor, care se orienteaz spre direcia din care vine lumina i paralel
cu aceasta.
Evidenierea rolului determinant al luminii n micrile fototropice

Materiale necesare: ghivece cu plantule de gru, clinostat.
Modul de lucru. Se seamn n dou ghivece, cu pmntul bine udat, cariopse de gru. Dup
rsrirea plantelor, moment pn la care ghivecele se in la ntuneric, unul din ghivece se aeaz n dreptul
unei ferestre, iar cellalt se fixeaz pe un clinostat cu ax vertical, alturi de primul. Punnd n funciune
clinostatul, dup 2-3 zile se va putea constata c plantulele care au fost supuse unei micri constante de
rotaie pe clinostat, astfel ca s fie iluminate periodic pe toate feele lor, cresc drept n sus. Plantele aezate
lng fereastr execut o micare de curbur, ndreptndu-se spre direcia din care vine lumina
Evidenierea geotropismului
Prin geotropism se neleg micrile de curbur ale organelor plantelor, determinate de aciunea
forei de gravitaie. Punerea n eviden a acestor micri i reliefarea rolului forei de gravitaie n
declanarea lor, se face prin urmtoarele experimente.
Materiale necesare: plantule de bob sau de porumb, dopuri de plut, ace cu gmlie, cristalizoare, clopot de
sticl.
Modul de lucru. Se fixeaz pe un dop de plut, cu ajutorul unor ace cu gmlie, dou plantule de
bob (Vicia faba) sau de porumb (Zea mays), astfel ca una s fie cu rdcinia orientat vertical n jos i tulpinia
vertical n sus, iar cealalt s fie cu aceste organe n poziie orizontal. Se aeaz dopul ntr-un cristalizor cu
ap. Se acoper cu un clopot de sticl, pentru a asigura plantulelor o atmosfer umed i se las plantulele la
ntuneric. Dup 1-2 zile se va putea constata c plantula care a fost aezat cu organele axilare n poziie
orizontal, acestea au nceput s se curbeze, printr-o micare de cretere, rdcinia n jos i tulpinia n sus.
Interpretare. Aceast micare , pozitiv ortogeotrop la rdcini i negativ ortogeotrop la
tulpini, se realizeaz sub efectul forei de gravitaie: faa dinspre pmnt a rdciniei se alungete mai
puin dect partea opus i, ca rezultat, vrful ei se ndreapt n jos; la tulpini are loc o cretere mai
intens a laturii sale dinspre pmnt i, ca urmare, vrful ei se ndreapt n sus.
Evidenierea rolului determinant al forei de gravitaie n micrile geotrope

Materiale necesare: ghivece cu plantule de gru, clinostat.
Modul de lucru. Se pun la germinat, n dou ghivece cu pmnt bine udat, cariopse de gru i se
las ghivecele la ntuneric. Dup rsrirea plantelor se aeaz unul din ghivece n poziie orizontal (martor),
iar cellalt se fixeaz pe un clinostat cu ax orizontal. Punnd n funciune clinostatul, dup 2-3 zile, se va
putea observa c plantele din ghiveciul aezat n poziie orizontal i au ndreptat tulpinile n sus, n timp ce
cele de pe clinostat au continuat s creasc n direcie orizontal fr s execute nici o micare de curbur.
10
Interpretare. Prin micarea imprimat de clinostat, plantulele au fost supuse succesiv aciunii
forei de gravitaie pe toate feele lor, ceea ce a anulat aciunea unidirecional a forei de gravitaie i
declanarea micrii geotropice de curbur.
Evidenierea chemotropismului
Este o micare de orientare a organelor plantelor provocat de concentraia inegal a unor substane
din mediul extern, factorul chimic acioneaz unilateral determinnd o reacie pozitiv la doze optime i o
reacie negativ la doze toxice.
Materiale necesare: vase de sticl, soluie de gelatin 6-8 %, soluie de (NH4)2HPO4 2%, soluie de
NaCl 1-2,5 %, plantule de mazre sau de lupin.
Modul de lucru. Se toarn n dou vase de sticl ( cu nlimea de 12 cm i diametrul de 15 cm) o
soluie fierbinte de gelatin 6-8 %, dup ce n prealabil s-a fixat n ele, n poziie vertical, n mijlocul lor, cte
o eprubet mare susinut de clema unui stativ. Dup ce soluia de gelatin s-a solidificat, se pune ap
fierbinte n eprubete, ca s se poat scoate uor din vase, fr a rupe gelul din ele. n acest mod, n locul
eprubetelor rmne n mijlocul masei de gelatin o scobitur. n golul rmas se introduce n primul vas o
soluie de (NH4)2HPO4 2%, iar n cel de-al doilea o soluie de NaCl 1-2,5%, ambele preparate n ap distilat.
n jurul scobiturilor din masa de gel se nfig rdcinile a cte 2 plantule de mazre sau lupin, astfel ca ele s
fie n poziie perfect vertical. Dup fixarea plantelor, se aeaz vasele ntr-un cristalizor cu ap, care se
acoper cu un clopot de sticl, pentru a asigura plantelor o atmosfer umed i se las la ntuneric. Dup
cteva zile se va putea observa c sub influena fosfatului rdcinile s-au curbat ctre scobitura central a
vasului , din care difuzeaz substana, manifestnd un chemotropism pozitiv (fig..) , iar sub efectul clorurii
de sodiu s-au ndreptat, prin cretere, spre peretele vasului, manifestnd un chemotropism negativ.
Evidenierea hidrotropismului
Este micarea orientat de cretere a organelor plantelor provocat de repartizarea neuniform a

umiditii n mediul extern. Rdcinile plantelor prezint un hidrotropism accentuat avnd zona de
percepere a diferenei de umiditate situat la vrf, iar zona de reacie n subzona auxezis caracterizat prin
alungirea celulelor.
Materiale necesare: ghiveci cu perforaii , plantule de porumb, clopot de sticl.
Modul de lucru. Pentru evidenierea acestor micri , se fac n partea superioar a unui ghiveci
cteva perforaii cu diametrul de 0,5 cm, dup care se umple ghiveciul cu rumegu umed de lemn , se
mbrac cu hrtie de filtru i se aeaz pe o farfurie cu ap. Se sdesc apoi n el plantule de porumb, cu
rdcini drepte, de circa 2 cm lungime, astfel ca vrfurile lor s ias prin perforaiile fcute pe marginea
ghiveciului i s atrne vertical. Se acoper ghiveciul cu un clopot de sticl i se aeaz la ntuneric. Dup
cteva zile se va putea constata c rdcinile s-au curbat ctre peretele ghiveciului, ca urmare a faptului c n
aceast zon umiditatea este mai mare.
11
B. Nastiile
Nastiile sunt micri realizate prin variaii de cretere sau de turgescen, provocate de modificarea
intensitii sau valorii unor factori ai mediului extern, care acioneaz ns uniform pe toate feele organelor
plantelor. Pe lng aceste micri, la unele plante se produc i micri nastice provocate de ocuri mecanice.
Evidenierea termonastiilor
Micrile termonastice se datoresc variaiilor de temperatur ale mediului nconjurtor.
Materiale necesare: flori de lalea, pahare Erlenmeyer cu ap rece i cald, termometru.
Modul de lucru. Dac se ia o floare nchis i se introduce ntr-un vas cu ap la temperatura de 25-30 0
C, se va constata c ea se va deschide ntr-un interval de timp de 5-10 minute. Dac se trece apoi aceast
floare ntr-un vas cu ap rece ( la temperatura de 5-8 0 C), ea se va nchide.
Interpretare. Aceste micri se datoresc unor variaii de cretere. Piesele nveliurilor florale cresc
mai repede pe faa intern n cazul cnd condiiile favorizeaz deschiderea florilor, iar la nchidere cresc
mai intens pe faa lor extern.
Evidenierea fotonastiilor
Sunt micri nastice provocate de variaia intensitii luminii .

Materiale necesare: ghivece cu plante de Bellis perenis i Taraxacum officinale.
Modul de lucru. Dac se cultiv aceste plante n ghivece i se in la lumin, se va constata c
inflorescenele lor se deschid. Dac se trec ghivecele la ntuneric, inflorescenele lor se nchid.
Interpretare. Aceste micri se realizeaz, ca i cele termonastice prin variaii de cretere a celulelor
pe cele dou fee ale nveliurilor florale.
Evidenierea nictinastiilor
Sunt micri nastice prin care se modific poziia frunzelor n funcie de alternana zi-noapte. n
natur, fenomenul de nictinastii este cunoscut sub denumirea de somn al plantelor. ntruct aceast
alternan provoac variaii diurne ale intensitii luminii, de la valoarea maxim ziua pn la cele minime
noaptea i variaii n acelai sens ale temperaturii, este foarte greu de decelat dac aceste micri se execut
ca rezultat al variaiilor intensitii luminii, sau ale temperaturii. La unele plante, n realizarea acestor
micri predomin termonastia, iar la altele fotonastia.
Materiale necesare: diferite specii de plante.
Modul de lucru. Speciile de plante se urmresc n diferite momente din zi. Se constat c n afar de
flori, dintre care unele se deschid dimineaa i se nchid seara ( Tulipa, Crocus), iar altele se deschid doar n
timpul nopii (Nicotiana alata, Mirabilis jalapa ), aceste micri sunt caracteristice i pentru frunzele diferitelor
specii de plante.
La trifoi odat cu lsarea ntunericului, cele dou foliole laterale se apropie una de alta cu faa
superioar a limbului, iar foliola terminal se apleac peste ele. La fasole foliolele se apropie, seara, ntre ele
cu faa inferioar a limbului. La Mimosa pudica, odat cu lsarea serii foliolele frunzelor se apropie ntre ele,
cu faa superioar, peiolurile principale se apleac, iar cele secundare se apropie ntre ele.
12
Evidenierea seismonastiilor
Sunt micri neorientate, provocate de excitaii mecanice externe care determin modificri n
turgescena celulelor.
Ele se manifest la Mimosa pudica, Oxalis acetosella i la Berberis vulgaris. Aceste micri pot fi puse n
eviden n modul urmtor:
Experiment 1
Materiale necesare: ghivece cu plante de Mimosa pudica.

Modul de lucru. La Mimosa pudica, dac se zguduie ghiveciul cu planta, inut pn atunci sub un
clopot de sticl, se va constata c dup excitaie peiolurile principale ale frunzelor se apleac brusc, cele
secundare se apleac i ele, iar foliolele se ridic n sus i se alipesc cu feele lor superioare, planta lund
poziia caracteristic pe care o are n timpul nopii. Dup un interval de timp de 10-15 minute, planta revine
la poziia normal, pe care o are n timpul zilei.
Planta reacioneaz i la excitaii de intensiti mai mici, micarea producndu-se n funcie de
intensitatea excitaiei. n cazul cnd se atinge uor o foliol, excitaia se transmite i la foliola opus, astfel
nct ele se alipesc prin feele lor superioare; dac excitaia este mai puternic, ea se transmite i la cteva
foliole vecine, att spre vrful ct i spre baza peiolului secundar respectiv. n cazul cnd se intervine cu un
excitant puternic, prlind o frunz cu ajutorul flcrii unui chibrit, excitaia se transmite pe rnd celorlalte
foliole, peiolurilor secundare i peiolului principal al frunzei , iar de aici, prin tulpin, la frunzele situate
deasupra i sub frunza a crei foliol a fost supus agentului termic.
Interpretare. Aceste micri seismonastice se produc prin variaii de turgescen, la nivelul
pulvinulelor existente la baza peiolurilor principale, peiolurilor secundare i a celor de la baza foliolelor.
Experiment 2
Materiale necesare: plante de Oxalis acetosella

Modul de lucru . La Oxalis acetosella, prin lovirea plantei, frunzele i schimb poziia. Pentru
evidenierea acestei micri, se sdesc cteva plante n ghivece sau pahare Berzelius, umplute cu pmnt i
se pstreaz la lumin difuz. n aceste condiii foliolele plantelor sunt aezate n acelai plan. Dac se
lovete de mai multe ori, cu un b, o plant n poriunea de la baza foliolelor, unde sunt situate i
pulvinulele, se va constata c foliolele ei se ndoaie pe nervura median i se apleac.
Experiment 3
Materiale necesare: ramuri cu flori de Berberis vulgaris.

Modul de lucru. La Berberis vulgaris ( dracil) micri seismonastice se produc la nivelul staminelor.
Pentru evidenierea acestor micri este suficient s se ating cu un ac partea intern de la baza filamentului
staminal. Se va constata c stamina efectueaz instantaneu o micare seismonastic spre centrul florii, antera
aplicndu-se pe stigmat. Aceste micri, care favorizeaz polenizarea, ntruct sunt provocate de insectele
care, cutnd nectarul, ating zona sensibil de la baza filamentelor staminale, se pot provoca i prin
zguduirea florilor, ceea ce n condiiile naturale se ntmpl n cazul cnd bate vntul.
13

Lucrari Practice Fiziologie Vegetala (2008)

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Lucrari Practice Fiziologie Vegetala (2008)

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

DISCIPLINA: FIZIOLOGIE VEGETAL

LUCRARE PRACTIC NR. 1

Importana strii de mobilitate a apei n mediu i n celul

Importana strii de mobilitate a apei n celule

Fig. 1. Ion de sodiu solvatat de molecule de

Adsorbia iodului de ctre amidon

d. Forele de coeziune molecular

B. FORE DE NATUR CHIMIC

3. 1. Osmoza i schimburile de ap ale celulei

Fig. 3. Difuziunea descendent

Materiale: eprubet cu rezervor lateral, cristale de permanganat de potasiu,

Fig. 4. Difuziunea ritmic: a- vzut de sus,

B. Osmoza prin membrane semipermeabile

ntr-o eprubet se introduc civa ml soluie sulfat de cupru

Fig. 5a - Celula lui Traube: 1soluie zaharat de K4 [Fe (CN6)];

Fig. 5 b Celula lui Traube: 1- soluie de K4 [Fe (CN6)]

Fig. 5c - Grdina mineral: 1 - soluie de

Durata experienei: 20 minute.

TEM DE VERIFICARE A CUNOTINELOR

Definii urmtorii termeni: imbibiie, difuziune, osmoz.

DISCIPLINA: FIZIOLOGIE VEGETAL

Consecina legilor osmozei

n schimburile de ap dintre dou soluii separate printr-o membran

SUBSTANE OSMOTIC ACTIVE I OSMOTIC INACTIVE

Fig. 1. Evidenierea substanelor

TURGESCENA este starea fiziologic normal a celulelor vegetale bine

Fig. 2. Manifestarea turgescenei n

OBSERVAREA TURGESCENEI I A PLASMOLIZEI

PLASMOLIZA (fig. 2) este un fenomen citofiziologic de ieire treptat a apei

DEPLASMOLIZA revenirea celulei vegetale plasmolizate, la starea de turgescen, n

Fig 29. Evidenierea deplasmolizei

TEM DE VERIFICARE A CUNOTINELOR

DISCIPLINA: FIZIOLOGIE VEGETAL

Determinarea presiunii osmotice a sucului celular

n ptrunderea apei n celul, prin fenomenul osmotic, o pondere deosebit

Pentru calculul presiunii osmotice se folosete formula:

pres de tip clete

2. DETERMINAREA FOREI DE SUCIUNE A CELULELOR VEGETALE

Determinarea forei de suciune prin procedeul refractometric (ARIHOVSCKI)

Principiul acestui procedeu const n stabilirea variaiilor concentraiei unor soluii n

soluie de zaharoz 1M, eprubete, pipete, stativ, frunze de Pelargonium, perforator de

Determinarea forei de suciune prin procedeul curenilor (ARDAKOV)

TEM DE VERIFICARE A CUNOTINELOR

DISCIPLINA: FIZIOLOGIE VEGETAL

Imbibiia i schimburile de ap ale celulei

Imbibiia este fenomenul fizic de ptrundere a apei n interiorul i printre

Determinarea gradului de imbibiie a seminelor

Principiu: Imbibiia seminelor depinde de natura chimic a substanelor de rezerv

unde: Iv = imbibiia volumetric;

unde: Ig = imbibiia gravimetric;

2. ABSORBIA APEI DE CTRE PLANTE

Determinarea intensitii absorbiei apei la o

Evidenierea zonei de absorbie radicular a apei

Punerea n eviden a zonei de absorbie radicular

Plantul de 7 zile de Triticum aestivum

Materiale necesare: plantule de mazre sau fasole,

Plantul de 7 zile de Pisum sativum

Evidenierea absorbiei foliare

DISCIPLINA: FIZIOLOGIE VEGETAL

Conducerea apei prin vasele de lemn

1. CONDUCEREA APEI PRIN VASELE DE LEMN

Evidenierea conducerii apei prin vasele de lemn

MECANISMELE CARE CONTRIBUIE LA ASCENSIUNEA SEVEI BRUTE

Evidenierea rolului forelor de coeziune ale moleculelor de ap n transmiterea deficitului de