Patogenitate = capacitatea unui agent pathogen de a genera un proces infectios.

Conditii : - patrundere si localizare in tesuturi - inmultire si producere de toxine INVADARE - inducerea unui raspuns imun si blocarea mecanismelor de aparare a gazdei - producerea de leziuni Calitativ Virulenta = capacitatea unui agent patogen de a produce leziuni tisulare Conditii: - infectiozitate - invazivitate - toxigenitate Cantitativ Factori de virulenta 1. 2. 3. 4. Moleculele ce mediaza virulenta sunt: Adezinele = mediaza aderarea celulelor bacteriene Invazinele = permit bacteriei sa intre in celula Agresinele = favorizeaza raspandirea infectiei Impedinele = inhiba mecanisemele de aparare ale gazdei modulinele = induc sinteza citokinelor - bacteriile patogene prezinta gene specifice de patogenitate insule de patogenitate

Etapele colonizarii 1. aderenta celulelor bacteriene = etapa lag = se realizeaza pe baza receptorilor adezine proteice fimbrii (gram - ) - neproteice polizaharide ( gram si + ) 2. formarea microcoloniilor = faza logaritmica 3. crestere, acumulare de biomasa = faza stationara 4. detasare = faza de declin Biofilm bacteriile se ataseaza reversibil -> ireversibil -> formeaza microcolonii -> biofilm -> detasarea se produce prin moartea celulei de la baza -> ciclu se poate relua prin eliberarea celulei fiice sau atasarea biofilmului la alt substrat - diseminarea agregatilor bacterieni Biofilmele rezista antibioticelor datorita - permeabilitatii scazute a matricei biofilmului - distrugerea antibioticelor de catre enzimele bacteriene - eliminarea antibioticelor prin pompele de eflux

Biofilmele sunt distruse asftel : se aduna fagocitele dar acestea sunt incapabile de fagocitoza -> elimina insa enzime ce lizeaza tesutul biofilmului, dar elibereaza celulele patogene poate insemna diseminare. Sideroforii - inmultirea bacteriilor depinde de capacitatea de a se hrani si necesita prezenta Fe 2+ prezenta in diferite celule. - Lipsa partiala de fier are efect bacteriostatic, lipsa totala = moarte - Bacteriile obtin Fe prin siderofori care sunt agenti chelatori de Fe ce se bat cu proteinele gazdei pentru Fe. Au in alcaturirea lor grupari catechol care leaga Fe extracelular. Fe3+ e transf in Fe2+, e solubilizat si intra in celula bacteriana iar sideroforul ramane la suprafata - Xenosiderofori = fura fierul de la alte bacterii Agresivitatea= capacitatea agentilor patogeni de a depasi prin mecanisme specifice barierele epiteliale, de a patrunde in tesuturi, de a se inmulti si a produce efecte patologice = mediata de invazine = functie de agresivitate flagelii - filbrii = bacteria patrunde -> evita mecanismele de aparare ale gazdei prin prezentarea antigenilor asociate cu molecule CMH. Toxicogeneza = capacitatea bacteriilor de a elibera toxine - exotoxine = proteine cu actiune enzimatica - endotoxine = lipopolizaharide Clasificarea toxinelor I. Dupa localizare 1.intracitoplasmatica (gram +/-); sunt eliberate prin ruperea peretelui in faza de crestere - 2. toxinele din PC (gram -)=endotoxine = structura chimica LPS (glico-lipopeptide) = eliberate prin dezagregarea PC -3.exotoxinele (gram+) - V. Cholerae - se gasesc in mediu iar eliberarea lor nu inseamna ruperea celulei si nu se acumuleaza in celula. - 4. toxine intra si extracelulare II. dupa structura chimica 1. proteice - 2. LPS lipopolizaharide/ lipo-glico-peptidice III. dupa tropism neurotoxine - cardiotoxine - enterotoxine IV. pantrope

Sisteme de secretie a proteinelor la bacterii Tipul I necesita existenta a 3-4 proteine care formeaza TOSS transmembranar prin care se deplaseaza proteinele secretate Tipul II folosit in secretia factoriilor de virulenta TISS trasatura esentiala este injectarea proteinelor efectoare Tipul III folosit pentru transport prin membrana interna in spatiul periplasmic Tipul IV elibereaza toxine prin autotransport se formeaza TFSS un por prin care trece toxina. Tipul V transporta din bacterie in bacterie sau din bacterie in cel EK. Patrunderea toxinelor in celule Endotoxina patrunde in celula prin endocitoza, pinocitoza, transport direct prin membrana citoplasmatica. Endotoxinele se clasifica in: - cu conformatie AB- formatoare de pori - cu domeniu RTX degradeaza IgA - termostabile actioneaza asupra citoscheletului gazdei. Listeria actoveaza guanilat ciclaza Toxine formatoare de pori : - citolizine - streptolizine - thiol-activate (cu receptor colesterol) Toxine RTX hemolizina A E.Coli => sunt citotoxice pentru celule nucleate Toxine cu activ ADP-ribozilata - au structura de tip A B - B leaga molec si mediaza patrunderea - A are efect toxic Toxine proteolitice - catalizeaza hidroliza legaturilor peptidice ale prot - clasif in 4 grupe serin proteaze - cistein proteaze - aspartan proteaze - metaloproteaze Reglarea F.V se face prin: - sisteme cu 2 componente - sisteme fr + inrudite - fam de activatori ai transcrierii ARAC - moficarea topologiei molec - factor alternativ sigma - modificari epigenetice ale ADN - propr metabolice particulare

Evolutia bacteriilor patogene - pentru a supravietui au realizat : I. Mutatii punctiforme II. Rearanjari genomice III. Transfer orizontal de gene I. M.P. pot aparea la nivelul promotor - gene structurale - gene reglatoare - extremitatile 5 a genelor de virulenta II. deletii - inversii recombinari specifice in sit - rearanjari ADN III. TOG det - microevolutie = aparitia unor variante noi - macroevolutie = aparitia unor specii noi Mecanisme de evitare a mec de aparare a gazdei - variatia de faza - variatia antigenica Principala caracteristica a raspunsului adaptativ la o infectie este memoria imunologica Rolul citokinelor pastreaza homeostazia TNF alfa - factor de necroza efect proinflamat TGF factor de crestere a cel inhiba diviziunea celulelor epiteliale IL-1, IL-2 stimuleaza ficatul sa sintetizeze prot de faza acuta - induc sinteza molec de aderenta intracelulara IL-4, 10, 12, 13, TGF beta inhiba proc inflamator la toate genurile Afinitate gram Tip morfologic, +/- prezenta pori Fact virulenta Statut de patogen oportunist Diagnostic de lab, medii de insamantat, teste in diferentiere, care bacterii necesita medii speciale, care nu se cultiva (fungi = fungigrama)

Patogenitatea (lb. greac pathos boal, suferin; lb. limba francez gnique) ptrunderea i localizarea n esuturile gazdei; multiplicarea i producerea de toxine/invadarea gazdei; inducerea unui rspuns imun i rezistena la mecanismele de aprare ale gazdei; producerea leziunilor specifice.

Caracter calitativ de specie. Caracter cantitativ, de tulpina: infeciozitate (sau capacitatea de colonizare); agresivitate (sau invazivitate); toxigenitate.

Virulena (lb. latin virulentus = otrvitor)

Toxigeneza Grupa I - toxinele proteice intracitoplasmatice ale bacteriilor Gram negative, eliberate dup ruperea mecanic, enzimatic, prin autoliza nveliurilor sau prin extracie chimic. Sunt sintetizate de B. pertussis, Sh dysenteriae (neurotoxina), Y. pestis.

Grupa a - toxinele lipopolizaharidice sau glico-lipo-peptidice (endotoxine), componente structurale ale peretelui celular Gram negativ. Cele mai tipice endotoxine se gsesc la enterobacterii. Grupa a III-a exotoxinele proteice propriu-zise, produse de V. cholerae, Cl. tetani, C. diphteriae.

Grupa a IV-a toxinele proteice cu localizare intra- i extracelular, n cursul fazei logaritmice de cretere: toxinele produse de Cl. tetani, Cl. botulinum, Cl. oedematiens, Cl. sordelii. Din punctul de vedere exclusiv al compoziiei chimice, se disting: 1)Toxine proteice - exotoxinele produse de bacteriile Gram pozitive i de toxinele proteice intracelulare ale unor bacterii Gram negative: B. pertussis, Y. pestis, Sh. dysenteriae (neurotoxina). 2) Toxinele glico-lipo-polipeptidice, corespunztoare endotoxinelor. In raport cu tropismul lor se disting neurotoxine, enterotoxine, cardiotoxine, cu efecte limitate la esutul respectiv sau toxine pantrope, cu efecte asupra multor categorii de esuturi. Alte mecanisme de actiune Proteoliza serin-proteaze

cistein-proteaze (tiol-proteaze) aspartat-proteaze

Metaloproteaze (Zn). Reglarea expresiei FV sistemele de reglare cu 2 componente ;

familia de activatori ai transcrierii Ara C / Lys R proteine cu motive helix-turn-helix, legate la secvene specifice de ADN n amonte/aval de genele reglate i transcrise (ex. Vir F (S. flexneri), reglatorul proteinelor Yops (Yersinia), Exoenzimele A i exoenzima S la P. aeruginosa/ spv Salmonella; sistemul Fur i sistemele de reglare nrudite - (feric uptake regulator)- protein care leag ADN n prezena Fe cu represia tuturor genelor situate n aval; modificarea topologiei moleculei ADN - histon-like - exprimarea unor: factori de invazie la Salmonella typhimurium, a pililor la Neisseria sp., formarea corpilor elementari la Chlamydia trachomati ;

factorul alternativ - expresia factorilor de virulen la Salmonella sau B. bronchiseptica.; modificri epigenetice ale ADN- metilarea post-replicativ Citozina (EK) adenina (PK)variatia de faza

proprieti metabolice particulare (metabolizarea acidului sialic, sinteza acidului sialic). Evoluia bacteriilor patogene strategii evolutive bazate pe diversitatea genetic

mutaii punctiforme (deleii), rearanjri genomice (reversibile sau ireversibile), transferul orizontal de gene (TOG) localizate pe elemente genice mobile (plasmide, fagi, insule de patogenitate). TOG

microevoluie (apariia rapid a noilor variante, n termen de zile/sptmni (insulele de patogenitate - inserii / deleii specifice de sit care genereaz rezistena la antibiotice), asigur diseminarea genelor codificatoare pentru factori de virulen (adezine, toxine, capsul, invazine, rezistena la antibiotice). macroevoluie (stabilizarea noilor genotipuri prin mutaii pato-adaptative i apariia variantelor total noi, generarea noilor specii, emergena noilor genuri bacteriene). Mutaiile punctiforme :

regiunii promotor (de exemplu, variaia de faz sau antigenic la meningococ, Mycoplasma, E. coli); extremitilor 5 ale genelor de virulen; genelor reglatoare (factorul alternativ ); genelor structurale mutaii pato-adaptative care permit unei bacterii s devin mai bine adaptat la o anumit ni. Evenimentele de recombinare specific de sit (deleii, inversii, amplificare genic, rearanjri ale ADN bacterian mediate de secvene de inserie): variaie antigenic (sinteza pililor la Neisseria gonorrhoeae, capsulei la Streptococcus pneumoniae) apariia unor noi mecanisme de rezisten (rezistena la penicilin la Streptoccocus pneumoniae). Boala Perioada de incubaie

Patogen

Tractul Staphylococcus pneumoniae Pneumonia pneumococic Variabil respi rator M. tuberculosis TBC Variabil Bordetella pertussis Virusul influenza Tusea convulsiv Gripa 12-30 zile 18-36 h 11-14 zile 2-3 spt.

Virusul rujeolei Rujeola (Morbillivirus) Virusul rubeolei Rubeola (Rubivirus) Virusul Epstein-Barr (Lymphocryptovirus)

Mononucleoza infecioas 2-6 spt.

Varicella zoster (Varicellavirus) Histoplasma capsulatum Tractul Shigella gastr Brucella ointest S. enteritidis inal S. tyhphimurium S. cholerasuis S. typhi Virusul hepatitei A Paramyxovirus Trichinella spiralis Neisseria gonorrheae Treponema pallidum Chlamydia trachomatis HSV 2 HIV Candida Clostridium perfringens Clostridium tetani Ricketssia ricketssii Virusul hepatitei B (Hepadnavirus) Virusul rabic (Lyssavirus) Plasmodium malariae

Varicela Histoplasmoza Dizenteria bacilar

14-16 zile 5-18 zile 1-2 zile

Bruceloza/febr ondulant 6-14 zile Salmoneloze 7-22 h

Febra tifoid Hepatita acut A Mumps Trichineloz Gonoree Sifilis Uretrit negonococic Herpes SIDA Candidoz Gangren gazoas Tetanus Febra Munilor Stncoi Hepatita B

14 zile 15-50 zile 2-3 spt. 2-28 zile 3-8 zile 9-90 zile 1-3 spt. 4-10 zile 10 ani

1-5 zile 3-21 zile 3-21 zile 6 spt.-6 luni

Rabia Malaria

10 zile-1 an 2 spt.

Rolul citokinelor n procesul patologic infecios Proteine sau glicoproteine, secretate de orice celul a organismului, cu excepia eritrocitelor, care se leag i activeaz o varietate de celule, participand la pstrarea homeostaziei mediului intern, prin aciune la nivel local.

TNF (factorul de necroz tisular) -efecte proinflamatorii, dar are o slab activitate citotoxic (necrotic);

TGF (factorul de cretere al celulelor T) - inhibitor al diviziunii celulelor epiteliale. Citokinele proinflamatorii, IL-1, IL-6, TNF:

stimuleaz sinteza proteinelor de faz acut., cu rol de opsonine i favorizeaz fagocitoza; induc sinteza moleculelor de aderen intercelular interactioneaza cu beta-integrinele de pe suprafata leucocitelor - determin ncetinirea deplasrii i fenomenul de rostogolire pe suprafaa endoteliului, n focarul inflamator, oprirea leucocitelor circulante i trecerea n esutul conjunctiv (diapedez). Leucocitele circulante exprim constitutiv 2-integrine, n conformaie nefuncional. 2integrinele pot fi activate sub aciunea unor factori chimiotactici (IL-8). Se crede c bacteriile comensale induc sinteza unor citochine inhibitorii ale reaciei inflamatorii. Rspuns imun exagerat alogenic tranzitorie Alergii Autoantigene (HLA) Ac facilitatori, autoanticorpi - neutralizani; - opsonizani (C, FcR); - Citotoxici

Citokinele antiinflamatorii inhib procesul inflamator: IL-4, IL-10, IL-12, IL-13, TGF .

R.I. protector Imunitate strict adaptativ:

Ac protectori:

R.I.:

- T4 TH1 (macrofage)/TH2 HSR (Ac) - T8 - citotoxic Celule autoreactive

Citokine: IFN, TNF, IL-2

TNF, IL-1 oc septic imediat de LPS

COCI PIOGENI DE IMPORTAN MEDICAL Fam. Micrococcaceae COCI PIOGENI Coci Gram-pozitivi piogeni (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes i Str. pneumoniae) infecii supurative circa 1/3 din totalul infeciilor bacteriene umane (amigdalite, pneumonii, toxiinfecii alimentare, infecii cutanate, ocuri toxice severe)

Coci Gram-negativi piogeni : N. gonorrhoeae i N. meningitidis Pigmentogeneza- tulpinile patogene- pigment carotenoid galben-citrin Virulenta particulariti biochimice ce favorizeaz supravieuirea n macrofage:

pigmentogeneza, producerea catalazei; fosfataza acid (determin scderea pH n focarul de infecie);

mecanisme de evitare a rspunsului imun al gazdei:

proteina A; coagulaze libere (complex echimolar cu protrombina, stafilotrombina, care determin

coagularea plasmei, localizarea infeciei i blocarea traficului factorilor bactericizi) i legate (clumping factor).

factori antifagocitari: microcapsula, proteina A.

S. aureus S. aureus -patogen oportunist. Factori predispozani :

deficiene de opsonizare (hipogamaglobulinemie) leziuni ale pielii (arsuri, eczeme, incizii chirurgicale) prezena de corpi strini (catetere intravenoase, dispozitive protetice) infecii virale (gripa)
boli cronice (boli maligne, boli cardiace, SIDA, diabetul mellitus, alcoolism)

abuzul de droguri intravenoase, SIDA. Etapele patogenezei Colonizarea- adezine

Internalizarea

celule epiteliale, fibroblaste, osteoblaste i celule endoteliale;

multiplicare intracelulara; si VCAM-1) i a factorului tisular. Toxigeneza Aderena molecule MSCRAMMs (microbial surface components recognizing adhesive matrix molecules),=receptine asociate suprafeei celulare.

Induce expresia de IL (IL-1, IL-6, si IL-8), a moleculelor de adeziune celular (ICAM-1

Invazia si diseminarea sistemic

MSCRAMMs sunt ataate covalent la peptidoglicanul peretelui celula liganzii - molecule de elastin, colagen, laminin, fibrinogen, fibronectin. proteina A proteinele de legare a fibronectinei (FnBPs: FnbpA i FnbpB) factorii clumping ClfA i ClfB proteina de legare a colagenului
proteina de legare a sialoproteinei osului (Bpb)

receptine secretate /molecule de aderen secretate (Secretable Expanded Repertoire Adhesive Molecules - SERAMs)

ancorate necovalent la suprafaa celulei gazd: proteina extracelular de legare a fibrinogenului (extracellular fibrinogen
binding protein, Efb)

Eap (extracellular adherence protein)- molecula analoag cu CMH clasa II (Map)

) are rol n internalizarea S. aureus n celule epiteliale i fibroblaste intervine n modularea rspunsului imun la infecie prin inhibiia
recrutrii neutrofilelor i prin inhibarea rspunsului de hipersensibilitate de tip intrziat

interfer cu funcia celulelor T, conducnd la boli cronice ca artrita sau osteomielita potenial inhibitor al angiogenezei.

Emp (extracellular matrix binding protein) coagulaza.

Fimbrii, microcapsula Invazia invazine: stafilokinaza sau fibrinolizina (factor de difuzie); complex echimolar cu plasminogenul activarea plasminei (serin proteaza) legarea defensinelor hialuronidaza; colagenaze; leucocidinele; proteaze; lipaze, lecitinaze; nucleaze beta-lactamaze;

Toxinogeneza HEMOLIZINELE (alfa, beta- gama, delta)

alfa-toxina (o hemolizin) acioneaz asupra membranei celulelor eucariote, prin efectul degradativ asupra sfingomielinei i este toxic pentru mai multe tipuri de celule, inclusiv eritrocite; determin hemoliza de tip beta; are aciune citotoxic selectiv asupra celulelor musculare netede din pereii vaselor sangvine determinnd vasoconstricie, ceea ce duce la ischemie i necroza tisular;

lizeaz prin oc osmotic plachetele i macrofagele, care prezint receptori pentru toxina;

edem pulmonar, tulburari respiratorii dermonecrotic

neurotoxic, determinnd distrugerea tecii de mielin

stimuleaza aderena neutrofilelor la celulele endoteliale Stimuleaza eliberarea de mediatori inflamatori: fosfolipaza A2, prostaglandina I2,
factorul de activare a plachetelor, leucotriena B4 i oxidul nitric (artrita septica)

-toxina, o sfingomielinaz, determin hemoliza cald-rece (zona de liz este neclar

dup incubare la 37C, dar se clarific la periferie, dup meninerea 24 ore la frigider);

gammahemolizina toxina sinergohimenotropica delta-hemolizina (deltatoxina, delta-lizina)

liza eritrocitelor umane, de oaie, de iepure, precum i a diferitelor structuri subcelulare:

organite legate de membran, sferoplati, protoplati, neutrofilelor, limfocitelor, trombocitelor i macrofagelor, dermonecrotic

90% dintre izolatele dermonecrotice produc leucocidina (toxin formatoare de pori)- infectii supurative; toxine exfoliative: A i B, epidermolitice

produc descuamarea epiteliului tegumentar i sindromul de piele oprit, datorit

dizolvrii matricei mucopolizaharidice a epidermei (necroliza epidermal toxic, eritem scarlatiniform i impetigo (bube dulci)

Sunt superantigene;

toxina sindromului de oc toxic superantigen; Enterotoxine 17 (SEASEE i SEGSEQ) superantigene, cu numeroase variante antigenice,

intoxicaiile alimentare;
S. epidermidis

foliculit, pneumonie, toxiinfecii alimentare, septicemie, osteomielit, sindromul de oc

toxic, infecii ale plgilor chirurgicale, sindromul pielii oprite asemntor febrei scarlatinoase, infecii asociate dispozitivelor cardiovasculare i ortopedice. S. saprophyticus

reprezint a doua cauz a infeciilor de tract urinar la femeia tnr dup E. coli.
Factori de virulenta- adezine Proteina M molecul major de suprafa > 150 de serotipuri

proiecii fibrilare pe suprafaa peretelui celular

dou clase structurale majore de proteine M, clasa I i II. rol n patogeneza febrei reumatice ntlnit i la streptococii de grup C si G

Rol in invazie
Substana T

termosensibil i acid-labil, obinut dup tratamentul proteolitic al streptococilor i inactivarea proteinei M, permite diferenierea unor streptococi prin aglutinare cu seruri specifice;

Proteina R Substana P Proteine de legare a fibronectinei sfbI

Rol in invazie
Toxine i enzime, > 20 de tipuri

Streptokinaza (fibrinolizina) transform plasminogenul n plasmin, o enzim proteolitic ce diger fibrina i alte proteine, imonogen, utilizat n tratamentul emboliilor purlmonare, coronariene i trombozelor venoase; streptokinaza a fost asociat cu patogeneza glomerulonefritei poststreptococice acute, probabil datorit capacitii de a se lega la membrana bazal glomerular i de a activa plasminogenul, genernd astfel nefritele. Streptodornaza depolimerizeaz ADN.

Amestecuri de streptodornaze i streptokinase sunt utilizate pentru lichefierea exudatelor i facilitarea ptrunderii antibioticelor i a drenrii puroiului i esuturilor necrozate. Anticorpii anti DN-az apar n infeciile cutanate streptococice (> 100 uniti).

Hialuronidaza

 specificitate antigenic pentru fiecare tulpin bacterian i induce sinteza anticorpilor

specifici;

exotoxinele streptococice eritrogene sau pirogene superantigene

au omologie de secven cu enterotoxinele stafilococice A i C.

Exotoxina eritrogen (toxina pirogen) are 3 variante distincte antigenic: A, B, C. Exotoxina A este produs de streptococii de grup A, lizogenizai cu un fag; exotoxina este asociat cu febra scarlatinoas. Difosfopiridin-nucleotidaza lizeaz leucocitele;

Hemolizine: Evitarea efectorilor imunitari ai gazdei Capsula din acid hialuronic rol antifagocitar

implicat n aderena de epiteliul faringelui, deoarece leag CD44 de pe celulele

epiteliale.

Proteina M

Legarea fibrinogenului i a factorului H de activare a complementului si blocheaz calea

alternativ de activare a complementului, reducerea fagocitozei streptococilor de ctre polimorfonucleare.

Diseminarea n esuturilor gazdei este mediat de o serie de enzime extracelulare:

Streptokinaze Exotoxine Proteinaza streptococic sau exotoxina B - cistein-proteaz extracelular

produs de toi streptococii de grup A efect toxic asupra macrofagelor

Peptidaza C5a este o enzim proteolitic (endopeptidaz), localizat pe suprafaa streptococilor de grup A. inactiveaz chemotaxia i componenta C5a.

Proteina M inhib activarea cii alternative i apoi peptidaza streptococic C5a

Inhibitorul streptococic al lizei mediate de complement inhib, in vitro, formarea complexului de atac al membranei.

Rspunsul gazdei la infecia streptococic const n sinteza anticorpilor protectori anti-proteina M, inhibitori ai aderenei ai streptococilor de grup A, la celulele epiteliale

Complicatii tardive, non-supurative

Glomerulonefrita acut poststreptococic la copii i adolesceni (raportul cazurilor de mbolnvire biei/fete este de 2:1) la indivizii peste 40 de ani cu condiii predispozante.

perioada de laten ntre infecia streptococic i apariia glomerulonefritei -1-4

sptmni titrul crescut al anticorpilor anti-DN-az B sau antihialuronidaz c and urmeaz piodermitei sau infeciilor dermice, perioada de laten este de 3-6 sptmni, iar titrul ASLO este n general sczut.

 dupp infeciile faringiene, perioada de laten poate fi de 1-2 sptmni, iar titrul ASLO
poate fi ridicat. Atacurile recurente ale glomerulonefritei nu provoac de obicei sechele, n general leziunile rinichiului, la copii, neavnd caracter permanent.

Febra reumatic sechel tardiv a faringitei produse de streptococii de grup A. inflamaii ale articulaiilor (artrita), ale inimii (cardite), ale SNC (chorea Sydenham), ale tegumentului (eritema marginatum i /sau noduli subcutani).

Serul pacienilor cu febr reumatic conine anticorpi specifici fa de acest grup de

antigene ce prezinta omologie cu antigene din tes. Cardiac (miozina, tropomiozina i keratina, ADN, N-acetil glucozamina).

Artrita reactiv streptococic este nepurulent i apare dup infecia cu streptococi de grup A. Deficiente neurologice.

tulburri neuropsihice autoimune pedriatice asociate cu infecii streptococice (PANDAS).

Pacienii cu PANDAS exprim markerul D8/17 Infecia streptococic induce creterea titrului de anticorpi serici fa de numeroase antigene: anti-DN-az, anti-hialuronidaz, anti-streptokinaz, anti-protein M. Cei mai importani din punct de vedere practic sunt anticorpii anti-SLO (ASLO).

Streptococcus agalactiae grup Lancefield B beta-hemolitic CAMP pozitiv component la microbiotei vaginale la 5-25% dintre femei. Infecia nou-nscutului : septicemie fulminant sau la meningit

Streptococii de grup C i G formeaz pe geloz snge colonii asemntoare cu cele de Str. Pyogenes rezideni ai microbiotei orofaringiene faringite, sinuzite, bacteriemii i endocardite

Streptococcus pneumoniae Coci Gram pozitivi, n form de lance, n perechi sau n lanuri scurte, -hemolitici microbiota normal (540%) bronit, pneumonie, sinuzit, otit, bacteriemie, meningit. Capsula polizaharidic face posibil identificarea cu antiser specific.

Str. pneumoniae este cea mai frecvent cauz a pneumoniei bacteriene comunitare si a doua cauz a meningitei bacteriene i otitei medii la copii, dup H. influenzae. Polizaharidul asociat peretelui celular (PsaA) - acid teichoic

conine resturi de fosforil-colin, legat de peptidoglican prin acidul N-acetilmuramic. Resturile de fosforil-colin sunt sensibile la amidaza N-acetilmuramic-Lalanin/autolizin, care produce liza culturii n faza staionar (schimbarea morfologiei culturii cu invaginarea centrului coloniei).

Acidul lipoteichoic sau antigenul Forssman

conine fosforil-colin, prin intermediul creia Str. pneumoniae ader la receptorii de colin, ubiquitari pe suprafaa celulelor animale (receptorul pentru PAF- factorul activator al plachetelor i proteina C-reactiv). Inhibitor al autolizinei,

IgA1 Proteaza neuraminidaza si hialuronat-liaza implicate n aderena pneumococului de celulele epiteliale i endoteliale.

CpbA complement binding protein)

Pneumolizina protein intracelular formarea porilor transmembranari

stimuleaz eliberarea citokinelor proinflamatorii (TNF i IL-1) de ctre monocite, inhib micarea cililor celulelor epiteliului respirator, lizeaz celulele epiteliale ale tractului respirator superior i alveolare inhib migrarea neutrofilelor i activitatea lor bactericid inhib proliferarea clonelor de limfocite i sinteza Ac activeaz calea clasic a complementului inhiba activarea complementului

Proteina A (PspA)

Vaccin 23-valent (serotipurile 1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F i 33F) A redus cu 80-90% frecvena infeciilor invazive

Ali streptococi, componeni ai microbiotei normale, determin procese patologice numai dac ajung n localizri neobinuite (valvele cardiace). g. Enterococcus coci intestinali Gram pozitivi, facultativ anaerobi, cu aspect ovoid, grupai n lanuri scurte, perechi sau celule izolate

cresc n medii cu 6,5% NaCl, pH 9,6, ntre 10-45o, supravieuiesc 30 minute la 60o C. cuprinde 17 specii, izolate n clinic : faecalis, faecium (specii n general imobile), caseliflavus, gallinarum (specii mobile), avium, durans, malodoratus. infecii umane purulente. Enterococcus faecalis produce 80-90% din totalul infeciilor enterococice, infeciile abdominale purulente, aprute consecutiv unor leziuni ale tractului digestiv. nfecii ale tractului urinar, ale sngelui, ale endocardului, ale tractului biliar, ale rnilor provocate de arsuri i ale mijloacelor de protezare (catetere intravasculare). Enterococii pot infecta SNC, plmnii, esuturile moi, sinusurile paranazale, urechea medie i intern, ochiul i, mai rar, esutul periodontal. enterococii ader la celulele epiteliale ale mucoasei colonului, sunt endocitai de celulele epiteliale sau de leucocitele intraepiteliale, transportate prin limf la ganglionii limfatici mezenterici, prolifereaz i disemineaz pe cale sanguin la distan.

Alti streptococci g. Peptostreptococcus sp. cresc numai n anaerobioz sau microaerobioz i uneori produc hemolizine. Sunt membri ai microbiotei cavitii orale, a tractului respirator superior, a tractului

genital feminin, a colonului. Se poate izola din infeciile anaerobe mixte: rni, endometrit postpartum.

g.Globicatella, cu o singur specie sanguis, este nrudit filogenetic de Aerococcus si se aseamn cu enterococii, dar sunt sensibili la vancomicin. Este izolat de la pacieni cu bacteriemie, infecii tract urinar, meningit. g. Lactococcus cu mai multe specii i subspecii, reunete coci apartinand serogrupului Lancefield N, homofermentativi, asemntor cu enterococii dar nu se devolt[ la 45 grade C. Responsabili de bacteriemii, infecii de tract urinar (cistite), endocardit subacut, pneumonii, infecii cutanate, apendicite, abcese cerebrale. g. Leuconostoc cu mai multe specii, cuprinde cocobacili homofermentativi, asemntori din punct de vedere al caracterelor de colonie cu streptococii viridans, izolati din infecii parodontotice, de cateter, bacteriemii, septicemii la gazde imunodeprimate, meningite cu evoluie grav cauzat de rezistena intrinsec la vancomicin g. Streptococcus milleri poate produce infecii supurative, abcese cerebrale, infecii ORL, cutanate, genitale, pleuropulmonare. g. Ali streptococi orali sunt ageni principali ai endocarditelor infecioase. Streptococii de grup D grupati in specia S. bovis produce adesea infecii abdominale n cazul neoplaziilor de colon. g. Vagococcus cuprinde lactococi mobili, de grup N izolati in cazuri rare de la pacieni cu bacteriemii, peritonite. Se prezint sub form de coci n perechi sau tetrade, catalazo negativi. g. Gemella cuprinde 2 specii, se prezint sub form de coci n perechi, tetrade, grmezi sau lanuri scurte, Gram-variabili, izolai din cazuri clinice de bacteriemii la bolnavi cu endocardit, meningite, si din lichidul sinovial al bolnavilor cu artrite. g. Helcoccocus produce infecii ale plagilor, ulcere cutanate i mastite, infecii de chist sebaceu, infecii supraadugate ale rnilor. g. Pedioccocus produce supuraii abdominale, saliv, scaun, urin, bacteriemii, septicemii, abcese abdominale, abcese hepatice, endocardite, peritonite, infecii de cateter. g. Tetragenococcus cuprinde tulpini care nu au fost izolate la om. Sunt coci grupai n perechi sau tetrade cu aciune catalazic slab. g. Aerococcus produce bacteriemii la bolnavi cu endocardite, infecii de tract urinar, lichid sinovial la pacienii cu artrit septic, meningite.

g. Alloiococcus produce otite, bacteriemii. Streptococi defectivi Genurile Abiotrophia i Granulicatella

auxotrofe pentru vitamina B6 si cistein produce cromofori; sunt PYR (+); au aspect pleomorf, Gram variabili, pseudo-bacilari, izolai sau rar n lanuri.

endocardite; sinuzite; afeciuni paradontotice; osteomielite; abcese cerebrale; meningite; endoftalmite Coci Gram-negativi piogeni Familia Neisseriaceae - coci Gram-negativi, strict aerobi: Neisseria, Kingella, Eikenella, Simonsiella i Alysella

Cretere pe mediu Thayer-Martin modificat (cu Glucoza vancomicin, colistin, amfotericin), mediu Martin-Lewis sau N. gonorrhoeae N. meningitidis N. lactamica N. sicca N. subflava N. mucosa N. flavescens N. cinerea N. polysaccharea N. elongata + + + + + + + + + + /w

Maltoza

Lactoza

Zaharoza sau DN-za fructoza + + +

+ + + + + + -

+ -

M. catarrhalis g. Neisseria N. gonorhoeae (gonococ) (agentul gonococozei, blenoragiei sau gonoreei, cu complicaii grave la femei), cu o prevalen mare in populaie, dar rareori produce infecii letale;

- N. meningitidis (meningococ) (agentul meningitei cerebrospinale), cu o prevalen sczut, dar infeciile netratate sunt adeseori letale Colonii (1-5 mm) sunt transparente sau opace, convexe, mucoide, nepigmentate i nehemolitice. Neisseria flavescens, Neisseria subflava, i Neisseria lactamica produc un pigment galben. Neisseria sicca formeaz colonii opace, fine, rugoase.

M. catarrhalis poate forma colonii opace nepigmentate sau roz-gri Oxidaza-pozitive Virulenta Pili- adezine LPS

PilE

capsula cu efect antifagocitar la N. meningitidis proteaze care cliveaz IgA Proteina major fimbrial Proteina din membrana extern Aderen Invazie

P.II (Opa)

P.I (Por)

Porina din membrana extern

Prevenirea formrii de fagolizosomi i/sau reduc cascada oxidativ

Inducerea unui rspuns inflamator prin eliberarea TNF LOS confer rezisten la aciunea bactericid a serului, poate utiliza acidul N-acetil neuraminic pentru a-i sializa propriul LOS microcapsule

P.III (Rmp)

Proteina din membrana extern

Blocheaz activitatea bactericid a anticorpilor antiP.I i LOS

Tbp1 and Tbp2 Lbp

Receptori de transferin Receptori de lactoferin

Preluarea Fe Preluarea Fe

N. meningitides saprobiont pe mucoasa tractului respirator superior uman (omul este singura gazd natural pentru aceste microorganisme patogene)

13 serogrupuri (serogrupul B are omologie fa de un polizaharid prezent la nivelul creierului) Serogrupurile A, C, Y i W 135 intr n componena vaccinului fa de meningita Alte genuri si specii Neisseria lactamica

Meningococii saprobioni sunt totdeauna necapsulai, dar au apendice piliare cei invazivi sunt capsulai i piliai

specie rezident a mucoasei nazo-faringiene la 340% dintre indivizi, n special copii rareori implicat n etiologia proceselor infecioase
Moraxella catarrhalis anterior Branhamella / Neisseria catarrhalis

microbiota normal a tractului respirator superior la 4050% dintre copiii colari produce bronite, pneumonii, sinuzite, otite medii i conjunctivite, infecii la pacienii imunodeprimai.
mjoritatea tulpinilor -productoare de beta-lactamaz. zaharurilor i prin producerea de Dnaz. poduce butirat-esteraz, caracter care st la baza unui test rapid, fluorimetric de identificare.

M catarrhalis se poate diferenia de celelalte neisserii prin absena fermentrii

Kingella denitrificans (diplococi/icocobacili/bacili Gram-negativi) poate fi izolat pe mediile folosite pentru cultivarea N. gonorrhoeae, profilul biochimic fiind de asemenea similar, iar la nivel serologic, pot aprea reacii ncruciate ntre cele dou specii.

Coloniile de K. denitrificans sunt mai mici, netede. Criteriul de difereniere este reprezentat de reacia negativ pentru catalaz i reacia pozitiv pentru reducerea nitrailor. Bacili Gram negativi de importanta medicala Bacili Gram-negativi fermentativi BGNF- Fam. Enterobacteriaceae

bacili Gram-negativi, nesporulai, mobili cu flageli peritrihi sau imobili, fr exigene nutritive, aerobi, facultativ anaerobi, fermenteaz numeroase glucide, adeseori cu formare de gaze, sunt pozitive pentru catalaz (cu excepia Shygella dysenteriae, serotip 1), oxidaz-negative, reduc NO3 la NO2. necapsulate (excep. Klebsiella) ~30 de genuri i 110 specii, majoritatea comensale specii patogene (diaree, gastroenterite, enterite, dizenterie, adenite mezenterice, febra septicemic).

Escherichia coli -infecii ale tractului intestinal, urinar, meningita neonatal; Shigella dysenteriae- dizenteria bacilare; Salmonella enteritidis -toxiinfecii alimentare, gastroenterite; Salmonella typhi -febra tifoid; Proteus, saprobiont pe materia organic n descompunere; Yersinia pestis- ciuma bubonice; Klebsiella sp., Citrobacter sp., Serratia sp.; Erwinia - fitopatogen.

Antigenitatea Antigenul O- polizaharidul regiunii externe a LPS secvene glucidice repetitive termo- i alcoolo-rezistent se evideniaz prin reacia de aglutinare confera specificitate de grup

serul imun anti-O de E. coli reacioneaz ncruciat cu Providencia, Klebsiella,

Salmonella.

Antigenul K extern n raport cu antigenul O (inhib aglutinarea bacterian cu anticorpi specifici antiO).

La Klebsiella, Escherichia polizaharidic La alte genuri - proteic

Antigenul H -proteina flagelar, denaturat de cldur i de alcool. Gruparea taxonomic Salmonella typhi Shigella disenteriae Yersinia pestis Salmonella sp. Shigella sp. Yersinia sp. Semnificaia etiologic Cert Categoria de patogenitate Inalt patogene

Patogene

Cert

Condiionat patogene

Ocazional patogene

Citrobacter Semnificativ n prelevatele Enterobacter necontaminate (LCR, numai din Escherichia (alte localizri dect cea intestinal caviti nchise). sau urinar) Klebsiella Proteus Morganella Providencia Serratia Cedeceea Hafnia Kluyvera Pantoea Tatumella

Specii care fermenteaz rapid lactoza (24h) Escherichia coli: luciu metalic pe medii difereniale (EMB), mobil, colonii cu profil plat, nevscoase Enterobacter aerogenes: colonii cu profil nalt, fr luciu metalic, adesea mobil, creterea mai vscoas Klebsiella pneumoniae: imobil, colonii foarte vscoase, mucoide Specii care fermenteaz tardiv lactoza (48-72 h) Edwardsiella, Serratia, Providencia, Erwinia Specii care nu fermenteaz lactoza Shigella sp.: imobil, nu produce gaz din fermentarea glucozei; Salmonella sp.: mobil; acid i adesea produce gaz din fermentarea glucozei; Proteus: "swarming" pe agar; hidrolizeaz rapid urea, miros de amoniac.

g. Escherichia BGNF LP Escherichia coli Sensibila la aciunea antisepticelor uzuale: fenol, sublimat, cloramina, la aciunea unor colorani (verde brilliant, verde malachit, clorura de litiu, srurile de seleniu, teluritul de potasiu, tetrationatul), la aciunea bacteriofagilor.
E. coli - cea mai abundent n coninutul intestinului gros; ~1% din totalul populaiei bacteriene crete anaerob i aerob timp de generaie de 40-80 min in stratul de mucus ce acoper epiteliul intestinal

patogen oportunist Patologie enterite grave mai ales la sugar, copil i la adultul vulnerabil;

ptrunderea, autoselecia i proliferarea tulpinilor enteropatogene (EPEC, ETEC) n

intestinul subire (jejun i/sau ileon), urmat de invadarea mucoasei. infecii extraintestinale contamineaz zone ale organismului sterile n mod natural (ITU, infecii pulmonare, meningite, infectarea plgilor, septicemii-bacteriemii).

 E. coli -> 90% din totalul ITU (uretrocistite, cistite, nefrite i pielonefrite) +/bacteriemie.

invazia mucoasei destins prin staz progresia ascendent a infeciei, In rinichi - zona medular. Tulpinile nefropatogene de E. coli produc hemolizin Pielonefrita (infecia epiteliului tubilor renali) este produs de tulpinile cu pili P, care se leag de moleculele P de grup sanguin de pe membrana celulelor epiteliale ale tubilor renali.

La persoanele cu disfuncii imunitare, septicemia poate fi secundar ITU i se datoreaz trecerii E. coli n snge.

80% dintre tulpinile de E. coli posed Ag K1, asemntor polizaharidului

meningococului de tip B. Patogenitatea si virulent factori de virulen asociai peretlui celular (factori de aderen i colonizare antigenic, antigenele capsulare, antigenul somatic O) FV solubili (hemolizinele, enterotoxinele, siderofori).

Adezine -se deosebesc prin capacitatea de hemaglutinare, morfologie, antigenitate i specificitate de receptori. Codificate plasmidial Dup natura chimic:

Antigene K de natura polizaharidic (K1); cea mai comun cauz a faringitei bacteriene la copii. antigenele L, A i B Antigene K de natura proteic (K88, K99);

K88 -aglutinarea hematiilor de cobai K99- aglutinarea hematiilor de cal

Toxigeneza Endotoxina A Hemolizinele LPS >170 serogrupe ale Ag O de E. coli. Serogrupul O55 este adeseori asociat cu infeciile umane. Antigenul H >50 de variante serologice Fimbrii diferite din punct de vedere antigenic de Ag O, H sau K.

codificate plasmidial , filtrabil, antigenic; , legat de corpul bacterian, nefiltrabil, neantigenic

Enterotoxine: - enterotoxina termolabil (LT) ~ toxina holeric; ADP-ribozilarea Adenilat-ciclazei

adjuvant

-enterotoxina termostabil (ST), neantigenica; ADP ribozilarea guanilat-ciclazei Citotoxine: SLT- verotoxina

Diaree inflamatorie

E.coli ETEC EIEC EPEC EHEC EAEC DAEC UPEC SEC

Boala Diaree cholera-like Diaree apoas, dizenterie Diaree apoas Colit hemoragic, hemoragic uremic Diaree apoas, mucoas Diaree persistent ITU Sepsis, meningit

Factori de virulen LT, ST, (CFA/I, CFA/II, CFA/III) Ipas, sisteme de secreie de tip III (Mxi i Spa), VirG/IcsA sindromEsp, sisteme de secreie de tip III (Sep i Esc), intimin, Tir i BFP Factori EPEC, toxin Shiga like, enterohemolizin, serinproteaza AAF, EAST-1, Pet, Pic, hemolizin Fimbrii F1845 i AIDA-I Pili de tip I, pili de tip P, adezine afimbriale (Afa), hemolizine, CNF-1 Capsul, pili de tip I, adezine S-fimbriale, invazine IbeA i IbeB

Salmonella Salmoneloza: gastroenterit, bacteriemie, febr enteric (enterocolit), infecii focale

spectru larg de gazd (S. enterica typhimurium, S. enteridis, S. Choleraesuis)

Restrictive

S. arizone (la reptile) < 10 serotipuri din cele > 2500 produc majoritatea infeciilor:

S. enterica typhi (aproape exclusiv la om) S. pullorum (la psri) S. dublin (la bovine)

S. typhmurium, S. enteridis, S. heidelberg, S. newport, S. paratyphi A (serogrup A), S.

paratyphi B (serogrup B), S. choleraesuis (serogrup C), S. typhi(serogrup D) hibridizare ADN-ADN

toate tulpinile de Salmonella aparin unei singure specii- S. enterica, cu 7 subspecii

(grupe evolutive) si peste 2500 de variante serologice (antigenice).

denumirea corect:S. enterica, ssp. enterica serotip typhimurium (prescurtat S.

typhimurium).

BGN, oxidaza negativi, catalaza-pozitivi, glc+, gaz+, lac-, cit+, LDC+, H2S+, urePatogenitatea si virulenta Factorii majori de virulen: Endotoxinele confer specificitatea serologic
exotoxinele termolabile partial ~ E. coli fimbriile. mediaz contactul i aderena celulelor bacteriene cu celulele epiteliale.

fimbrii de tip 1 (Fim), fimbrii codificate de plasmide (PE) fimbrii polare lungi (LP) fimbrii subiri spiralate (curli).

Patogeneza: Traversarea barierei epiteliului intestinal, n special la nivelul celulelor M, care acoper plcile Peyer.

Transferul bacteriilor endocitate celulelor subiacente (macrofage i neutrofile) prin

transcitoz. Prelucrarea antigenelor n celulele dendritice i n macrofagele subepiteliale Prezentate limfocitelor locale sau sunt transferate celulelor interdigitate i prezentate celulelor T interfoliculare. n scaun Bacteriile se acumuleaz i se multiplic masiv n ficat, splin, mduva osoas, toate bogate n celule fagocitare Insuficiena funcional a organelor infectate, septicemia i moartea la 4-6 zile dup infecie.

Salmonella se multiplic n esutul limfoid asociat mucoasei intestinale i este eliminat

Patologie Sindromul febrei tifoide Incubaie de 10-14 zile febra, starea de ru general, durere de cap, bradicardie, mialgie Hepato so splnomegalie hiperplazia i necroza esutului limfoid din plcile Peyer, hepatita, necroza focal a ficatului, inflamaia vezicii biliare, a plmnului hemoragia intestinal i perforaia. Mortalitatea -de 10-15%, dar tratamentul cu antibiotice reduce rata mortalitii la mai puin de 1%. Bacteriile se izoleaza din hemocultura Enterocolita inflamaia mucoasei intestinului subire i gros +/- bacteriemia. Bacteria se izoleaza din scaun

Febrele enterice (tifoparatifoidice) Antroponoze

evoluie febril, caracteristic, cu durata variabil, -S. typhi (febra tifoid), S. paratyphi A, S. paratyphi B i S. paratyphi C (febre paratifoidice). Perioada de incubaie de 6-48 de ore dureri de cap i abdominale, diaree (uneori sanguinolent i bogat mucilaginoas), varsaturi. Soc endotoxic Febrele enterice confer o imunitate de lung durat care persist n majoritatea cazurilor, toat viaa. Manifestrile encefalitice ale febrei enterice -5% din totalul cazurilor.

DMI 105106 celule bacteriene

Gastroenterita (Salmonella netifoid = NTS) imunitatea este de scurt durat

 Septicemia -complicaie a unei toxiinfecii alimentare Purtatori cronici (8-20 sapt)

Shigella

BGN, imobili, oxidaza negativi, catalaza-pozitivi (excep. Sh. dysenteriae tip1), glc+, gaz, lac-, cit-, LDC-, H2S-. Caractere diferentiale intre subgrupuri- indol, manita, ramnoza, dulcita Factori de virulent Ag somatic lipopolizaharidic O, termostabil.

Sh. dysenteriae (subgrupul serologic A) Sh. flexneri (subgrupul B) Sh. boydii (subgrupul C) Sh. sonnei (subgrupul D) (2/3 din cazuri)

La tulpinile de Sh. dysenteriae i Sh. boydii neaglutinabile -material capsular Exotoxina termolabil (toxina Shiga)

gm 50-1000 kDa difuzeaz extracelular,

leziuni locale hemoragice care duc la sngerri i secreii mucoase masive. 2 subuniti: A (enzimatic) i B (de legare) 1:5 Efect citotoxic: inactiveaz ireversibil subunitatea ribosomal 60S necroza celulelor prin inhibarea sintezei proteinelor efect enterotoxic: toxina Shiga blocheaz absorbia electroliilor, glucozei i a aminoacizilor din lumenul intestinal, adernd la receptori ai enterocitelor intestinului subire.

Efect neurotoxic: febra i crampele abdominale

Patogeneza Sh. Flexneri traverseaz stratul celulelor epiteliale, fiind nglobat de celulele M i eliberat prin transcitoz ntr-o pung intraepitelial macrofagele rezidente din esutul limfoid asociat mucoaselor, fagociteaz i degradeaz materiale strine.

Celulele bacteriene rezist n interiorul macrofagului prin liza fagosomului i prin inducerea apoptozei celulare. IL-1, care recruteaz PMN i duce la infiltrarea masiv a esutului infectat.i IL-18, care activeaz celulele NK i stimuleaz sinteza IFN gama Sh. flexneri eliberat din macrofage, ader prin adezine tip invazine (invasion plasmid antigens =Ipa; surface presentation antigens =Spa; membrane excretion proteins = Mxi; virulence proteins =Vir) i invadeaz polul laterobazal al enterocitelor Dup ce sunt internalizate, celulele scap din endosom prin intermediul proteinelor Ipa, componente ale complexului de transport de tip III, care transfer n celula gazd moleculele efectoare ale activrii programului apoptozei se deplaseaz prin polimerizarea orientat a actinei i se disemineaz n celulele adiacente, evitnd astfel contactul cu efectorii imunitari Invazia celulelor epiteliale stimuleaz rspunsul inflamator, cu recrutarea masiv a neutrofilelor n focarul infecios., distrugerea sever a epiteliului mucoasei perturb absorbia apei, a nutrienilor i a electroliilor

Diareea apoas, sanguinolent i mucilaginoas Procesul infecios autolimitativ Bacteriile intracelulare Fenotipul "organelle-like movement" (Olm) care permite celulei bacteriene s alunece de-a lungul filamentelor de actin n celula infectat,

fenotipul Ics (intracellular spreading) permite bacteriilor s se disemineze i s infecteze

alte celule. Produsul genei icsA -polimerizarea actinei la polii enterocitului i apariia unei protruzii sau cilindri de actin.

Invazia intracelular -microabcese ale mucoasei n intestinul gros, urmat de degradarea epiteliului i inflamaia laminei propria, descuamarea, ulceraii ale mucoasei, sngerare i formarea unei pseudomembrane pe aria ulcerat, alctuit din fibrin, leucocite, resturi celulare i bacterii. Dup autoliz, celulele de Shigella elibereaz LPS, cu efect iritant asupra mucoasei. Mecanismul molecular al inducerii diareii nu este cunoscut Persoanele infectate cu S. flexneri i cu anumite predispoziii genetice (HLA-B27) pot dezvolta sindromul Reiter (dureri articulare, iritaii oculare, disurie), care poate dura luni pn la ani de zile i poate genera artrita cronic greu de tratat.

Toate tulpinile virulente de Sh. flexneri posed o plasmid de virulen de dimensiuni mari (230 kb) denumit plasmid de invazie, Alte enterobacterii cu potential pathogen Citrobacter freundii

LAC+, ONPG+, H2S+, LDC-.

patogen oportunist infecii urinare, septicemii, suprainfecii ale tractului respirator. nu are potential enteropatogen grupul de enterobacterii VP pozitive patogeni oportuniti (I.C.U., urologie, reanimare) multirezistente la antibiotice.

Enterobacter, Hafnia, Serratia (KEHS)

g. Klebsiella este imobil, cu colonii foarte mucoase, fermenteaz un numr mare de glucide, posed ca factori de virulen antigenul capsular K (77 tipuri diferite) cu rol antifagocitar i protector fa de aciunea letal a serului. Serotipurile capsulare K1 i K6 sunt potenial patogene.

K. pneumoniae- pneumonii grave, mastite la bovine, abcese la maimue, infecii

generalizate, cu mortalitate crescut la lemurieni; la cai, sperma este contaminata cu serotipurile K1, K2, K7, K30 care pot produce la femele metrite, avorturi.

K. ozaenae (antigenul K3) -infecii ale tractului respirator, adeseori cu tendin de

cronicizare;

K. rhinoscleromatis -rinite cronice K. pneumoniae i K. oxytoca produc >10% din infeciile nosocomiale (infecii supurative,
urinare, respiratorii, biliare, mai ales la imunodeprimai (neoplazici, ari, cirotici, diabetici, btrni, nou-nscui preamatur). nu sunt enteropatogene

Genul Enterobacter -9 specii. Enterobacter aerogenes nu este enteropatogen, poate produce infecii ale tractului respirator i genito-urinar, este prezent n snge, puroi, excepional n LCR.

 Enterobacter gergoviae este multirezistent la antibiotice, izolat din expectoraii, snge. Enterobacter cloacae patogen oportunist, izolat din urin, expectoraii, lichid pleural,
rar din snge i LCR.

g. Serratia marcescens/liquefaciens este multirezistent la antibiotice; produce hemolizine, proteaze, siderofori, nu este enteropatogen, este patogen oportunist, apare n infecii urinare sau respiratorii, diferite supuraii, ci biliare, septicemii. Grupul Proteus Morganella Providencia

TDA+, FAD+.
Structurile implicate in virulen

OMP implicate n aderen, mitogene pentru limfocitele B; fimbrii, cu rol n aderena la esutul epitelial: MR/P, MR/K-like, prin care ader la capsula glomerular; ATF (ambient temperature fimbriae), UCA (uroepithelial cell adhesion) fimbriile de tip 1 similare celor de E. coli i fimbrii de tip P; flageli cu rol n ascensiunea infeciilor urinare; ureaz, Ag. H foarte variabil, OMP lpH, inductor al formrii calculilor; lgA-proteaze; TDA proteine cu -cetoacizi ce acioneaz ca siderofori. infecii urinare (ureaz = factor de patogenitate), plgi suprainfectate, septicemii, meningite purulente neonatale.

g. Proteus larg rspndit n mediul nconjurtor microbiota normal aTGI. a treia cauz a ITU, n special a celor nosocomiale. localizare extraintestinal.

P. vulgaris -infecii pulmonare, ITU, bacteriemie numai atunci cnd dobndete o Proteus mirabilis i P. penneri -izolate mult mai frecvent din coproculturile pacienilor
cu tulburri diareice

P. mirabilis -bacteriemii, osteomielite, meningoencefalite neonatale, artrite reumatoide P. penneri -bacteriemie la pacienti imunodeprimati .
Tulpinile P. mirabilis indol-negative sunt, n general, mai sensibile la antibiotice dect cele indolpozitive (P. vulgaris, P. penneri i P. hauseri). P. Penneri- mai rezistent la penicilin dect P. vulgaris, patternul de sensibilitate ~Morganella morganii. Providencia sp. ITU i chiar septicemii. izolate din urin, sput, snge, exudate faringiene i din plgi.

P. stuartii a fost identificat ca agent patogen pentru pacienii cu catetere urinare din
sanatorii.

21 % dintre infeciile tractului urinar se datoreaz P. mirabilis, P. stuartii. P. rettgeri - infecii nosocomiale, dar cu o inciden mult mai mic.

Teoretic, toate speciile de Morganella, Providencia, Proteus vulgaris, Proteus penneri sunt capabile s produc - lactamaze inductibile care hidrolizeaz penicilinele i cefalosporinele primare i de spectru larg. g. Morganella M. morganii -patogen oportunist, Diareea cltorilor, la pacieni cu afeciuni gastrointestinale, septicemii neonatale, abcese cerebrale, tubo-ovariene, corioamniotite, piomiozite i meningite la indivizi imunocompromii.

Edwardsiella specia tarda este productoare de H2S, nu este comensal al tractului digestiv (rezervorul este reprezentat de reptile i peti), caractere biochimice similare cu Salmonella, dar produce indol i are profil diferit de fermentare a zaharurilor. n zonele tropicale, este enteropatogen, izolat n mod excepional din snge, urin, LCR la imunodeprimai.

Levinea (Citrobacter) malonatica/ (C.) amalonatica (us) reunete tulpini diferite de E. coli, Citrobacter freundii, Kluyvera Cit+, LDC-, lac- sau pozitiv tardiv.

Este patogen oportunist i produce septicemii, meningite neonatale cu rat mare de

mortalitate, infecii urinare i bronhopulmonare.

L. amalonatica -diaree la nou-nscui. Uneori prezint asemnri antigenice cu Shigella, dar nu sunt enteroinvazive.
Kluyvera este rareori izolat n clinic: sunt celule mobile, ONPG+, VP-, Ind+. La om sunt izolate din expectoraii, urin, bil, scaune, snge, puroi, sunt considerate patogeni oportuniti.

Buttiauxella este asemntoare cu Kluyvera, dar diferit genetic, ind-, LDC-, Sac-. Patogenitatea este similar cu cea de la Kluyvera. Bacili Gram negativi nonfermentativi oportuniti Strict aerobi (care nu fermenteaz glucoza i alte zaharuri, dar le degradeaz pe cale oxidativ) c

cca. 20 de genuri i cteva zeci de specii etiologia infeciilor oportuniste i nosocomiale. larg rspndii n sol i ape, la animale i pe plante, n special n habitatele umede. Morfologia

bacili Gram negativi scuri i groi (trapezoizi) (Acinetobacter) - bacili lungi i fini (Ps.
aeruginosa), imobili sau mobili. multiple capaciti nutritionale: metabolizeaz substraturi foarte diverse,

Virulena

creterea pe medii foarte selective (Drigalski, cetrimid) sau minimale (ap, glucoz (NH4)2, -SO4, oligoelemente). Pot supravieui n ap bidistilat, soluie de heparin, soluie de substane antiseptice i dezinfectante. Pot fi transmise clonal prin intermediul aparaturii medicale.

adezine, toxine, capacitatea de a forma biofilme , multirezistena natural sau dobndit

la numeroase antibiotice,

Familia Pseudomonadaceae grupul pseudomonadelor: genul Pseudomonas cu 256 de specii, mprite n 4 grupe metabolice trei specii de Pseudomonas sunt patogene pentru om.

 genul Xanthomonas,
Ps. aeruginosa, patogen oportunist care determin infecii, uneori fatale, la persoanele cu deficiene ale sistemelor de aprare +

Alcaligenes xylosoxydans, Burkholderia cepacia, Chryseobacterium meningosepticum, Ochrobactrum antrhropi, Pseudomonas fluorescens, Ralstonia pickettii, Acinobacter bowmannii, Stenotrophomonas maltophilia g. Pseudomonas bacterie ubicuitar, n sol, pe suprafaa materiei vegetale, n apele dulci i marine.

se pot dezvolta la temperaturi sczute (psichrofilie) sau ridicate (42oC) i contamineaz produsele alimentare sau farmaceutice conservate la rece. uneori se poate izola din microbiota intestinal a omului i animalelor. Strict aerob, crete n absena O2, numai n prezenta NO3 Ps. aeruginosa cel mai important agent nosocomial

trei tipuri de colonii:R, S: cu aspect de ou prjit /mucoide (alginat). Coloniile netede i mucoide -rol important n colonizare i virulen.
Factor de virulen Exopolizaharide mucoide (alginat)- polimeri manuronic i glucuronic Activitate biologic Aderen la epiteliu acid Barier mpotriva fagocitelor i antibioticelor Inhib legarea anticorpilor i a complementului

de

Proteaze Leziuni tisulare elastaza, proteaza alcalin (colagenaza) i Slbirea jonciunilor celulelor epiteliale Degradarea fibronectinei (expunerea receptorilor)- aderenta oportunista keratite, fibrinolizina Clivarea anticorpilor Inactivarea 1-antitripsinei, componentelor complementului i citochinelor Clivarea receptorilor C3b de pe suprafata neutrofilelor Stimuleaz secreia de mucus

Exotoxina A (ETA)

Citotoxic prin inhibarea sintezei proteinelor~toxina difterica (blocarea EF-2) Toxic pentru macrofage Mitogen pentru celulele T Inhib proliferarea granulocitelor i macrofagelor Determinant antigenic pe suprafaa celulei Proprieti endotoxice mai slabe dect LPS a altor specii Gram negative Inhib micarea cililor Toxici pentru alte specii bacteriene i celulele umane Stimuleaz metabolismul oxidativ al neutrofilelor Inhib proliferarea limfocitelor Piochelina- siderofor Hemoliz Lezarea esuturilor Distrugerea surfactantului Aderen la epiteliu Lezarea esutului Pierderea integritii epiteliului

Lipopolizaharide

Pigmeni: piocianina (piochelina-deriv.), 1-hidroxifenazina, pioverdina

Fosfolipaza C

Fimbrii (pili de tip IV) Lipaza Histamina

Exoenzima S Leucocidina (Citotoxina)

Aderena la epiteliu Citotoxic - ADP-ribozilant Citotoxic pentru neutrofile i limfocite

Patologie pacienii spitalizai (hematologie, reanimare, urologie, imunodeprimai), dup mai multe cure de antibiotice.

poarta de intrare : translocaia digestiv la bolnavii aplazici; focare de infecie digestive; dispozitive intravasculare sau urinare;

leziuni tegumentare sau ale mucoaselor (arsuri, rni, plgi chirurgicale).

Infeciile respiratorii apar aproape n exclusivitate la indivizii cu leziuni ale epiteliului tractului respirator inferior (boli cronice pulmonare i n insuficiena cardiac congestiv) sau imunocompromii (neutropenii, chimioterapie). Infecia tractului respirator inferior la bolnavii cu fibroz chistic -tulpini mucoide stratul de alginat mpiedic legarea anticorpilor la determinanii antigenici ai suprafeei celulei Tulpinile mucoide sunt mai rezistente la fagocitza non-opsonic; alginatul este o barier mecanic pentru antibioticele aminiglicozidice;

alginatul mrete gradul de aderen al tulpinilor mucoide de celulele epiteliale ale tractului pulmonar alginatul nu inhib sinteza anticorpilor specifici, dar pare s inhibe IMC.

Ps. aeruginosa mucoid nu produce septicemie, Bacteriemii la pacienii imunocompromii, majoritatea nosocomiale (25% din totalul bacteriemiilor dobndite n spitale) Meningite i abcese cerebrale Otite externe , incl. otita nottorului. La diabetici produce otita invaziv Infecii devastatoare ale ochiului keratite bacteriene oftalmia neonatala Infeciile oaselor i articulaiilor osteomielite cronice Osteocondrite Infeciile tractului urinar (12% din infeciile urinare nosocomiale) leziuni la indivizii imunocompromii la nivelul oricrui segment al tractului gastrointestinal de la orofarige la rect

etiologia infeciilor perirectale, diareii la copii, gastroenteritelor tipice i enterocolitelor necrozante.

Infecii ale pielii (incl. foliculite i acneea vulgaris) Endocardita Ps. mallei

parazit adevrat la cal- rpciug. se poate transmite la om.

Pseudomonas (Burkholderia) pseudomallei bacil aerob Gram negativ, imobil, saprobiont n sol, ap, orezrii, materia vegetal.

Crete la 42o, oxideaz glucoza, lactoza etc patogen oportunist, un contaminant al rnilori agentul meloidozei, o boal tropical, fatal la om i la alte mamifere domestice.

Meloidoza este o infecie pulmonar. La cabaline Ps. pseudomallei -morva, transmisibil la om.

La cal, infecia implic plmnul, dar este o infecie sistemic, cu leziuni subcutanate ulcerative i adenopatie. La om infecia poate evolua fatal i ncepe cu ulceraii tegumentare sau ale mucoaselor, adenopatie i septicemie.

Burkholderia cepacia Complexul Burckholderia caepacia (Bcc) cuprinde 9 specii cu distribuie ubiquitar pacienii cu fibroz chistic pot fi purttori asimptomatici sau infecia poate evolua cu deteriorarea progresiv a esutului pulmonar n cteva luni sau foarte rapid, cu apariia pneumoniei necrozante i a bacteriemiei. A fost demostrat transmiterea bacteriei ntre pacienii cu fibroz chistic. Virulena este multifactorial:

aderena la celulele epiteliale ale gazdei i la mucin prin intermediul pililor producerea de proteaze, hemolizine LPS cu toxicitate ridicat i cu o structur unic care i confer rezisten la fagocitoz elaborarea de melanin care protejeaz celulele bacteriene de sistemele microbicide dependente de oxigen potenialul parazitism intracelular infecia cu Ps.aeruginosa favorizeaz colonizarea ulterioar cu Burckholderia caepacia.

Stenotrophomonas maltophilia specie ubiquitar colonii verde-lavand sau gri oxidazo-negativ lizin-decarboxilaz pozitiv.

agent al infeciilor nosocomiale de tract respirator, urinar, infecii ale plgilor sau bacteriemii asociate dispozitivelor protetice Genuri i specii Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas fluorescens Pseudomonas putida

Grupuri i subgrupuri de omologie stabilite pe baza analizei ARNr I Specii fluorescente

Specii nefluorescente II

Pseudomonas stutzeri Pseudomonas mendocina Burkholderia pseudomallei

Burkholderia mallei Burkholderia cepacia Ralstonia pickettii III Comamonas sp. Acidovorax sp. I V Brevundimonas sp. Stenotrophomonas maltophilia

Genul Acinetobacter BGNF, saprofite n sol, ap, ap menajer i hran, comensale ale tegumentului personalului medical i pacienilor

patogeni nosocomiali importani, mai ales n unitile de terapie intensiv. bacili Gram negativi, n faz logaritmic de cretere, devenind cocoidali, i grupai n diplo sau n lanuri de lungimi variabile, n faz staionar Tulpini capsulate Strict aerobi, oxid-, cat+ Microbiota tegumentului (25%) septicemie, 3-5% din pneumoniile nosocomiale, VAP, endocardite, meningite, infecii cutanate, de plag chirurgical, infecii cutanate, oculare i infecii de tract urinar) frecvent rezistent la majoritatea antibioticelor utilizate pentru tratamentul infeciilor nosocomiale (inclusiv carbapenemi). virulena tulpinilor implicate n diferite infecii, i anume:

1) prezena capsulei polizaharidice format din L ramnoza, D glucoza, acid D glucuronic, D manoza 2) aderena la celulele epiteliale mediat de fimbrii i/sau polizaharide capsulare 3) producia de lipaze

4) toxicitatea componentelor polizaharidice ale peretelui celular i prezena lipidului A. Alte specii de bacterii Gram-negative g. Actinobacillus

Actinobacillus actinomycetemcomitans cocobacil Gram-negativ cu cretere lent adesea asociat cu actinomicozele. boala periodontala la adolesceni, endocardite, abcese, osteomielita sensibil la tetraciclin, cloramfenicol, penicilin G, ampicilin i eritromicin
g. Achromobacter, Alcaligenes, Ochrobactrum bacili Gram-negativi, oxidaz-pozitivi, cu mobilitate de tip peritrih spre deosebire de pseudomonade, care prezint mobilitate de tip polar.

utilizeaz citratul ca surs de C, produc ureaz i dgradeaz glucoza n aerobioz i anaerobioz izolai din microbiota normal, echipamente de ventilaie i sisteme de dializ, iar ocazional din snge, urin, LCR, plgi, abcese.

Ochrobactrum anthropi -izolat din bacteriemii asociate dispozitivelor intravasculare contaminant produsele biologice Capnocytophaga Specii rezidente ale microbiotei normale

cretere lent, capnofile, Gram-negative, fusiforme sau filamentoase facultativ anaerobe, care necesit CO2 pentru cretere mobilitate prin alunecare Hemolitice produce o substan care modific activitatea PMNN

bacteriemii i infecii sistemice cu evoluie grav, n special la pacienii imunodeprimai Chromobacterium violaceum bacil Gram-negativ asemntor cu pseudomonadele produce un pigment violet In zonele subtropicale

abcese, diaree, infecii septice, n urma contaminrii pe cale intestinal sau prin esutul cutanat lezat.

Eikenella corrodens

bacil Gram-negativ, de dimensiuni mici, fastidios, capnofil, constituent al microbiotei cavitii orale i intestinale (4070% ) formeaz colonii invaginate n agar oxidazo-pozitiv nu fermenteaz zaharurile adesea asociat cu streptococii n infeciile mixte cu contaminare oral bacili Gram-negativi, lungi, fini, oxidazo-pozitivi, imobili, proteolitici i slab fermentativi formeaz colonii cu pigment galben, specific izolat din puroaie superficiale, conducte i echipamente medicale expuse la o surs de ap contaminat i nesterilizate. Ocazional pot coloniza tractul respirator superior i rareori poate cauza meningit (specia Chryseobacterium meningosepticum). Speciile acestui gen sunt n general multirezistente la antibiotice

Chryseobacterium

Grupul Kingella 3 specii Kingella kingae. bacili Grma-negativi, cu forme cocobacilare sau de diplococi, hemolitice pe geloz snge microbiota orala

ocazional infecii osoase, articulare i ale tendoanelor

n urma diseminrii n snge prin microhemoragiile consecutive periajului dentar.

Bordetella B. pertussis

patogen exclusiv la om

infecii ale tractului respirator- tusea convulsiv.

B. parapertussis entitate clinic asemntoare. B. avium

infecioas pentru curci

Bordetella bronchiseptica (Bordetella bronchicanis) infecioas pentru iepuri i cini, ocazional poate infecta omul

noi specii

infecii respiratorii i bacteriemii, n special la pacienii imunodeprimai.

B. pertussis

B. hinzii

bacteriemie si infecii de tract respirator

B. holmseii bacteriemie la pacienii imunodeprimai B. trematum, care produce infecii de plag i otite medii.

Virulenta Adezine

cocobacil Gram negativ, strict aerob, capsulat, fastidios. albastru de toluidin - granule metacromatice bipolare. catalaz i oxidaz pozitive. metabolizeaz glucoza fr producere de gaze, lactoza i o serie de aminoacizi. tulpinile virulente sunt hemolitice. bulion sintetic Stainer-Scholte i geloz snge Bordet-Gengou, incubate n aerobioz, la 35 - 37C

hemaglutinine filamentoase (FHA) fimbriil pertactina (PRN) -OMP Toxine: toxina pertussis (PT), toxina adenilat ciclaz (ACT), citotoxina traheal (TCT), toxina dermonecrotic (DNT). Toxina pertussis leucocitoz, eliberarea histaminei din mastocite, stimulez secreia insulinei, are activitate mitogenic. structur clasic de tip AB.

(ADP)-ribozilarea unui grup de proteine reglatoare ale sintezei guaninei.

Toxina adenilat ciclaz (ACT) activat de o calmodulin. creterea nivelului AMPc n celula gazd.

In vitro- hemolitic.a ACT face parte din familia toxinelor RTX (repeats in toxin) (secvene nonamerice repetate de aminoacizi, la captul C al moleculei).

Citotoxina traheal

acidul anhidromuramic, legat cu un fragment dizaharid-tetrapeptid peptidoglicanic, eliberat de celulele bacteriene n faza de cretere. inhib sinteza ADN n celulele ciliate ale traheii, produce extruzia celulelor ciliate din epiteliul cilor respiratorii superioare, mrete frecvena celulelor cu deficit numeric al cililor i este toxic pentru alte celule epiteliale.

Toxina dermonecrotic (DNT) vasoconstricie i necroz dup injectarea subdermic la oarece. Lipopolizaharidul (LPS) produce leziuni ale celulelor epiteliale ale tractului respirator superior i este imunogen.

Imunitatea consecutiv infeciei previne colonizarea epiteliului tractului respirator, iar imunitatea postvaccinare este protectoare fa de efectele toxinelor. Mecanisme de evaziune a sistemului imunitar al gazdei

Antigenele B. pertussis sunt imunosupresoare. Citotoxina traheal lizeaz celulele ciliate ale tractului respirator superior Toxina adenilat ciclaz i toxina pertussis inhib funcia celulelor limfoide, prin inducerea unor nivele intracelulare crescute de AMPc. Cele dou toxine acioneaz sinergic la nivelul epiteliului respirator i reduc capacitatea de migrare chimiotactic i fagocitar a PMN, a monocitelor sanguine, a macrofagelor alveolare i a limfocitelor. variaia antigenic a fimbriilor - B. pertussis pot s afimbriate sau s poarte unul sau dou tipuri de fimbrii.

operonul bvg (bordetella virulence genes) sau vir, - mecanism de reglare cu dou componente Sursa de infecie

Infectie localizata: bacteria nu trece n snge, dar produce toxine cu efect necrotic. Epiteliul se infiltreaz cu PMN. Perioada de incubaie este de 2 sptmni. Fazele clinice faza cataral dureaz 7-21 de zile

pacientul n stadiul cataral timpuriu al bolii contagiozitate mare. copiii sub 5 ani sunt mai sensibili, inciden semnificativ i la aduli. Transmitere pe cale respiratorie aderarea rapida la celulele epiteliale ale traheii i bronhiilor multiplicare interferent cu micarea cililor.

faza de stare (sau paroxistic) - 2-4 sptmni, marcat de tuse violent i inspiraie zgomotoas caracteristic acestei maladii, poate fi nsoit de cianoz, limfocitoza (16000-30000/L), vom, epuizare caectic sever i moarte; faza de convalescen, cu episoade de tuse a cror frecven scade progresiv, dureaz 3-4 sptmni. Mecanismul major de protecie a organismului uman fa de infecia cu B. pertussis este sinteza anticorpilor neutralizani. Titrul anticorpilor specifici fa de toxina pertussis, hemaglutinina filamentoas, pertactin i fimbrii, se coreleaz cu un nivel crescut de protecie fat de infecie. Dac se produce, infecia secundar este uoar.

Vaccinul folosit pe scar larg, din anii 50 celule virulente omorte de B. pertussis, administrate n asociaie cu anatoxinele difteric i tetanic (vaccinul DiTePer). Vaccinarea ncepe la vrsta de 2 luni, n 3 doze repetate, urmate de dou rapeluri la 4-6 ani. Vaccinul reduce incidena infeciei, dar este reactogen (produce efecte locale): durere local, eritem, edem, febr la 30-70% dintre cei vaccinai.

g. Haemophilus Fam. Pasteurellaceae bacterii Gram negative, pleomorfe (n produsele patologice - LCR, expectoraii- sunt prezeni cocobacili Gram-negativi pn la forme alungite)

cresc pe medii mbogite cu snge parial degradat (geloz chocolat), de unde i denumirea actual, de Haemophylus influenzae.

H. influenzae infecteaz mucoasa tractului respirator superior la copii i aduli Infectii invazive (infecii meningeale, epiglotite, pneumonii, artrite, pericardite, celulite), n special la copii. infeciile comunitare n sfera ORL la adult i copil i n suprainfeciile bronhopulmonare la adult tulpini capsulate infecii genitale i neonatale cu posibil evoluie septicemic. sunt reprezentate mai ales de meningite (cauza cea mai frecvent la copiii sub 5 ani nevaccinai), Necesit

Specii H. influenzae (H aegyptius) H. parainfluenzae H. ducreyi H. haemolyticus H. parahaemolyticus H. aphrophilus H. paraphrophilus

X + + + -

V + + + + +

Hemoliza + + -

H. paraphrophaemolyticus H. segnis

+ +

+ -

Antigenitate - molecule glucidice, lipidice

LPS i polizaharidul capsular (polimer de riboz-ribitol-fosfat) Capsula Inhib aciunea fagocitelor i protejeaz celula de liz mediat de complementului.

Polizaharidul capsular prezint o accentuat variaie: 6 grupe serologice (a f). Virulena cea mai ridicat - serogrupul b, urmat de a, e i f. Tulpinile necapsulate (NTHi) slab virulente sau avirulente:

heterogenitatea greutii moleculare a proteinelor membranei externe (OMP) i a antigenitii lor; heterogenitatea antigenic a lipooligozaharidelor (LOS) metodele geneticii moleculare (tipizare electroforetic, RFLP, PCR).

microbiota normal a tractului respirator superior,

LPS

Rata portajului de H. influenzae este de pn la 80%, iar pentru H. influenzae b, agentul meningitei, pneumoniei, artritei septice, este de pn la 4%. Anticorpii fa de polizaharidul capsular de tip b sunt protectori (3 luni i 3 ani susceptibilitate maxina) variante biochimice ale LPS- modificri ale secvenei resturilor glucidice n regiunea central a oligozaharidului LPS. lipooligozaharidul (LOS) form secretat, ct i legat de celule LOS - stimularea secreiei de ctre monocite, a citochinelor activatoare ale procesului inflamator. LOS are efecte toxice i produce leziuni pulmonare. Forma solubil a LOS, termostabil, inhib micarea cililor i induce rspunsul inflamator: Recrutarea PMN, inflamaia general a esutului, cu creterea nivelului transferinei, factorului activator al plachetelor, lactoferinei).

Lactoferina, prezent n granulele PMN i n secreiile mucoase, se leag de componenta lipidic a LOS, efectul fiind staza bacterian i liza. Legarea LOS de lactoferin scade capacitatea bacteriilor de a stimula PMN.

Mecanisme ale evaziunii aprrii gazdei

3 Ig proteaze la tulp capsulate, 1 la cele NTHi cliveaz IgA1 in regiunea balama Invazia celulelor epiteliale

NTHi invadeaz celulele endoteliale i rmn n interiorul vacuolelor de endocitoz, legate de membran pentru o perioad lung, fr efect citopatic vizibil.

Variaia antigenic a proteinelor membranei externe i a LOS n infectiile invazive capsula - rol determinant prin protejarea fa de fagocitoz i fa de aciunea litic a complementului.
Starea septicemic dup colonizarea iniial a mucoase translocaia prin mucoas multiplicarea n esutul conjunctiv diseminarea n vasele mici de snge bacteria se poate multiplica n snge. Tratamentul

penicilin sau cefalosporine de generaia a treia (n cazul tulpinilor rezistente prin producerea de -lactamaz sau PLP modificate).

Detecia de beta-lactamaz este indicat la tulpinile izolate din cazuri clinice severe (meningit i /sau bacteriemie) (CLSI, 2009). Tulpinile productore de beta-lactamaz trebuie raportate rezistente pentru toate celelalte beta-lactamice, inclusiv pentru asocierile cu inhibitori, indiferent de rezultatele obinute in vitro. mediu HTM (Haemophilus Test Medium) (agar Muller Hinton cu factori de cretere X i V si extract de drojdii). Pentru izolatele din LCR se raporteaz ampicilina (care se utilizeaz pentru predicia sensibilitii la amoxicilin), o cefalosporin de generaia a III-a, cloramfenicol i meropenem. Cefalosporinele orale, tetraciclinele i asocierile cu acid clavulanic pot fi utilizate empiric pentru tratamentul afeciunilor respiratorii.

Testarea sensibilitii la antibiotice

H. ducreyi transmis prin contact sexual

produce ancrul moale (cancroidul), un ulcer dureros al organelor genitale externe, similar din punct de vedere al aspectului leziunilor cu ancrul sifilitic. Diagnostic diferenial fa de infecia viral cu herpes simplex i fa de limfogranulomatoza veneric Izolare

recoltarea cu tamponul de la baza leziunii ulceroase i nsmnarea direct pe mediul de cultur (geloz chocolat cu 1% IsoVitaleX i vancomicin, incubata la 33 0C. bacili dispui n bancuri de peti este revelator. Tratament cu ceftriaxon administrat parenteral sau oral cu biseptol sau eritromicin, timp de 2 sptmni.

Haemophilus aegyptius

bacilul Koch-Weeks sau H. influenzae biotype III sau H. influenzae biogrup aegyptius, conjunctivite extrem de contagioase i febra puerperala braziliana (febr, erupii cutanate, oc i sfrit letal).

Haemophilus aphrophilus microbiota normala orofaringiana

etiologia endocarditelor i pneumoniilor. Se aseamn cu Actinobacillus (Haemophilus) actinomycetemcomitans.

Haemophilus haemolyticus hemolitic pe geloz snge microbiota tractului respirator

infecii uoare la copii.

Haemophilus parainfluenzae rezident al mucoasei tractului respirator

Legionella

ocazional asociat cu endocardite i uretrite. H suis se aseamn bacteriologic cu H influenzae apariia complicaiilor post viroz respiratorie la porc

bacili Gram negativi, nesporulai, neacidorezisteni, necapsulai, alungii, facultativ intracelulari, cu habitat hidric i hidro-teluric ape dulci, soluri umede, larg rspndit n natur i n reelele de distribuie a apei inhalarea aerosolilor contaminai catalaza-pozitivi rezervoarele poteniale toate elementele constitutive sau anexele sistemelor care conin o surs de ap stagnant (conducte de rcire a aerului, instalaii de meninere a umiditii, rezervoare de ap, piscine, fntni, echipamentele din staiunile termale). Exist 46 de specii i 64 de serogrupuri.

patologia uman - Legionella pneumophila

legioneloza, cu 3 forme clinice distincte: boala legionarilor, febra Pontiac i forme extrapulmonare: hematologice, cardiace, musculare, digestive, retinite, sinuzite.

Crete pe medii complexe- BCYE (buffered charcoal-yeast extract agar) cu alfa-ketoglutarat +/antibiotice, la pH 6.9, temperatura de 35 C i 90% umiditate, dup 3 zile de incubare.

Coloniile care apar dup 24 de ore nu sunt Legionella. Colonii cu aspect pleomorf, i pot fi transparente sau iridescente, roz sau bleu Pe frotiuri din prudse patologice colorate Gram nu se evid bacilii (IF) Tratament de elecie eritromicina sau rifampicin.

Dup contactul iniial, Legionella: declaneaz creterea ratei metabolice a fagocitului (neutrofile i monocite).

blocheaz activarea fagocitelor:

o fosfataz care blocheaz producerea intermediarilor reactivi ai O2 (n special O2-), de ctre neutrofilele infectate. Fosfataza blocheaz formarea mesagerilor secundari i astfel semnalul activator nu se propag; o citotoxin.

Inhibiia activitii fagocitelor este produs de celulele bacteriene vii sau omorte!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! supravieuirea i multiplicarea

o protein a suprafeei Mip (proteina care favorizeaz invazia monocitelor) fosfolipaza C- aciune citolitic pe celulele inflamatorii i pe esutul pulmonar protein- kinaza LPS proteina major a membranei externe, proteina de oc termic i o hemolizin, denumit legiolizina. Aminopeptidaze- hidroliza peptidelor intracelulare ale gazdei.

L. pneumophila trebuie s fie opsonizat cu anticorpi specifici i cu proteinele complementului derivate prin activarea pe calea clasic, pentru a fi ingerat de neutrofile. L. pneumophila ingerata de neutrofilele umane, de monocite i de macrofagele alveolare, prin mecanismul fagocitozei clasice sau spiralate (coiling phagocytosis): un pseudopod al fagocitului se spiralizeaz n jurul bacteriei, pe msur ce celula este internalizat. Bacteria fagocitat se gsete n centrul unei spirale mari, care nu fuzioneaz cu lizosomii monocitului. Legionella -patogen oportunist

Infecteaz femeile n timpul sarcinii, nou nscuii, persoanele vrstnice, imunocompromise (pacienii SIDA) sau debilitate.

Foarte frecvent asociat cu malignitatea (leucemii, limfoame, sarcoame), cu chimioterapia antineoplazic sau imunosupresoare (la persoanele cu transplant sau tratate corticosteroizi), cu hepatita cronic (ciroz sau alcoolism), cu insuficiena renal, cu diabetul sau cu lupusul sistemic diseminat, bronita cronic, emfizemul, fumatul

Legioneloza - pneumonie acut purulent, caracterizat prin alveole ncrcate cu polimorfonucleare neutrofile, macrofage, fibrin i eritrocite.

Incubatie 2-10 zile debut: sindrom pseudogripal cu febr, tuse seac, cefalee, mialgii, anorexie. stare: febr ridicat, dispnee i tuse posibil expectorant, uneori diaree i alte semne nespecifice.

~85% din cazurile de legioneloz - L. pneumophila (serogrupul 1 si 6). Leucocitoclazie

Bacterii spiralate Fam. Vibrionaceae :

Vibrio, Photobacterium, Aeromonas i Plesiomonas

G. Vibrio- bacili Gram- negativi, drepi sau curbai, nesporulai, necapsulai, mobili , facultativ anaerobi, fermenteaz glucoza fr producere de gaz, oxidazo-pozitivi. sensibili la aciunea 2,4diamino-6,7-diizopropil pteridina (agentul vibriostatic 0/129). V. cholerae determin holera (serogrupurile O:1 i O:139) sau diaree asemntoare holerei (serogrupuri non O:1), gastroenterite, infecii ale esuturilor moi; V. mimicus produce diaree ,,cholera-like;

V. parahemolyticus determin gastroenterita, toxiinfecii alimentare, infecii ale esuturilor moi; V. fluvialis, V. holissae, V. furnissi determin diaree; V. alginolyticus produce infecii ale esuturilor moi; V. vulnificus infecii, septicemii la alcoolici, la bolnavii cu hepatite cronice.

Factori de virulenta- toxina holerica Toxinele accesorii. toxine care mrete permeabilitatea mucoasei intestinului subire, acionnd asupra structurii jonciunilor intercelulare, toxina zonula occludens (ZOT). toxina holerica accesorie (ACE). Genele zot i ace sunt localizate n ,,caseta de virulen (regiune genomic mobil, datorit secvenelor repetate invers localizate la ambele capete, sau la o singur extremitate), alturi de genele ctx. Ali factori de virulen implicai n patogeneza vibrionului holeric Enzimele metabolismului lipidic Enzimele metabolismului proteic Cazeinaza i gelatinaza Mucinaza Producerea indolului Lysin- i Arg- dihidrolaza(ADH) Hidroliza esculinei DNA-zele Hemolizinele Factorul slime

Campilobacterii Campylobacteriile (lb. greac kampylos + bakteria = bacil ncurbat) sunt considerate, alturi de salmonele, cei mai importani ageni etiologici ai gastroenteritelor bacteriene la om (FAO/WHO,

2009; EFSA, 2010). Campylobacteriozele sunt zoonoze care au ca principal surs alimentele de origine animal, 22 specii, cu 10 subspecii i 3 biovariante, ncadrate n 3 mari grupe: grupa termofililor, grupa fetus i grupa anaerobilor. C. jejuni i C. coli sunt considerate cele mai importante specii pentru sntatea public,

enterite acute
Bacteriile din genul Campylobacter se caracterizeaz prin polimorfism morfologic. Sunt bacili Gram-negativi nesporulai, ncurbai, n form de S, virgul, pescru n zbor sau spiralai, mobili

Factori de virulen Mobilitatea

Aderena la celulele epiteliului mucoasei intestinale

proteine extramembranare (CadF, JlpA, CapA) i periplasmice (Peb1, Cj1496c

Capacitatea invaziv

Campylobacter invasion antigens - Cia), siderofori

Sinteza de toxine LPS

cytolethal distending toxin (blocarea in G2) Complicaile postinfecioase autoimune: sindromul Guillain-Barr (GBS - inflamaia i demielinizarea nervilor periferici care are consecin paralizie muscular flasc ascendent, progresiv, acut, tulburri de percepie senzorial) sindromul Miller Fisher (MFS oftalmoplegie, lipsa reflexelor i incoordonare) eritem nodos artrite reactive
Familia Helicobacteraceae G. Helicobacter i Wolinella Spirochete Spirochetele ((gr. spira = spir; chaete =fir de pr) grup heterogen de bacterii Gram-negative, chemoheterotrofe, spiralate, fine, mobile, distincte din punct de vedere morfologic, filogenetic i al tipului de mobilitate, grupate n dou familii:

familia Spirochaetaceae care include organisme spiralate, mari, libere, rspndite mai ales n mediul acvatic Treponema, Leptospira i Borrelia.

familia Treponemataceae, ce cuprinde spirochetele de interes clinic, aparinmd genurilor

Borrelia Organitul de mobilitate este reprezentat de filamente axiale sau endoflageli cuprini ntr-o teac periplasmic situat ntre teaca extern i protoplast

produce infecii recurente (infecii ale cror simptome se succed la diferite intervale de timp legate de durata ciclului de multiplicare bacterian), cunoscute n clinic sub denumirea de boala Lyme. 3 subspecii de Borelia: B. burgdorferi, B. afzelii i B. garinii. Boala Lyme, transmis de cpue, cu manifestrile clinice specifice agentului patogen este produs de B. burgdorferi. B. burgdorferi este transmis la om, de cpuele ixodide (Ixodes ricinus). Proteinele majore ale membranei externe (A, B, C, D, E, F) asigur variabilitatea antigenic a agentului patogen.

Structurile genetice sunt neobinuite: cromosomul este linear (910725 pb), iar plasmidele, n numr de 21 sunt att lineare (12), ct i circulare (9). Borrelia poate fi cultivat pe mediu artificial, din snge, lichid cefalorahidian i din lichidul sinovial, dar mai ales din leziunile tegumentare de eritema migrans (EM). Borrelia se multiplic lent, timpul de generaie fiind de 8-15 ore pentru B. burgdorferi i de circa 26 ore pentru B. recurentis. Boala Lyme: in perioadele febrile, care corespund unui ciclu de multiplicare, Borrelia se gsete n snge, de unde lipsete n perioadele afebrile. Maladia se caracterizeaz prin leziuni tegumentare n expansiune denumite eritema migrans i oboseal, dureri de cap, artralgie, mialgie, febr, rigiditate a gtului. Diseminarea spirochetei din leziunile tegumentare poate s produc : meningit, blocaj atrioventricular cardiac etc. Maladia Lyme cronic este caracterizat prin artrit, nevrit, cardit, care pot persista luni sau ani de zile dup infecie.

Patogeneza T . pallidum este foarte invaziv:

In vivo, T. pallidum penetreaz jonciunile celulelor epiteliale ale mucoasei genitale, progresnd prin micarea n tirbuon , uurat de eliberarea hialuronidazei. T. pallidum traverseaz celulele epiteliale i ajunge repede n snge i n esuturile profunde. I n celulele dermului induce sinteza metaloproteinazei-1 care degradeaz componentele matricei (MMP-1). La situsul infeciei este activat rspunsul inflamator. Pe suprafaa celulelor endoteliale este indus expresia moleculelor de aderen: ICAM-1, VCAM-1 i selectina E. Reacia inflamatorie este srac n neutrofile. Neutrofilele lizeaz agentul patogen pe care l fagociteaz. T. pallidum este nglobat de celulele dendritice (CD), localizate n derm, n mucoasa rectal, n esutul cardiac (situsuri poteniale ale infeciei). CD stimulate elibereaz citochine proinflamatorii: IL-1, IL-6, IL-12, TNF.

Leptospira Leptospirele sunt spirochete lungi, fine, flexibile, spiralate helicoidal, cu turele de spir strnse. Capetele celulei sunt rotunjite i ambele sau numai unul se curbeaz i formeaz structuri de forma unui crlig, cu rol n perforarea esuturilor. Sunt mobile, cu micri n tirbuon Leptospirele au dou tipuri de micare: de translaie (contracie i rsucire, cu deplasare) i micarea de flexie-extensie (fr deplasare).

Leptospirele sunt obligat aerobe, temperatura optim de dezvoltare fiind 28-30o. Sunt pozitive pentru testele catalazei i oxidazei. Leptospirele cresc pe medii simple, semisolide cu adaus de ser, n condiii de aerobioz (sunt microaerofile). Dou specii: L. interogans, cu 8 genospecii, n care sunt incluse toate tulpinile patogene; L. biflexa cuprinde tulpinile saprobionte izolate din mediul extern. 23 serogrupuri subdivizate i mai mult de 220 serovaruri.

Antropozoonoze Brucella bacterie obligat-parazit a organismului uman i animal, cu localizare intracelular

cocobacil, cu frecvente forme bacilare, aerob, imobil, nesporulat B. melitensis - caprine; B. suis porcine; B. abortus cornute; B. canis cine. cultivate pe medii sintetice, care conin sange, aminoacizi, vitamine, glucoz i sruri. metabolizeaz glucoza, fr acidifierea mediului catalaza i oxidaza +, H2S+, reduc nitraii la nitrii. la om, bruceloza este o boal profesional, ntlnit la agricultori, crectori de animale, veterinari, personalul abatoarelor. Poarta de intrare pe cale limfatic ganglionii regionali, ductul toracic i torentul sanguin n esuturile parenhimatoase fagocitat de macrofagele rezidente

formarea granuloamelor rezultatul proliferrii mononuclearelor i fibrozei =celule gigante n care se gsete agentul bacterian. Zona central se necrozeaz, reeaua de fibre periferice se dezorganizeaz i agentul infecios este eliberat

Patologie leziuni (supurative sau nesupurative) granuloame (cazeoase = necrotice sau necazeoase)

reacie de hipersensibilitate ntrziat la brucelin (un amestec de proteine secretate de celulele bacteriene). rspunsul imun la endotoxin poate s amplifice efectele patologice ale infeciei. esutul placentar i membranele fetale ale cornutelor, porcinelor, ovinelor, caprinelor sunt bogate n eritritol = factor de cretere pentru Brucella tropism marcat pentru localizarea n sfera genital. avortul La om, bruceloza (febra ondulant, insular sau febra de Malta) incubaie de de 1-6 sptmni faz acut cu stare de ru general, febr i bacteriemie infecieicronice, cu localizare n mai multe esuturi i extins pe o perioad de civa ani. Brucella se izoleaz cu cea mai mare frecven din snge i din mduva osoas. Coloniile sunt mici, nehemolitice. Diagnosticul serologic

reacia de aglutinare cu antigen Brucella standard, omort, fenolizat. Titrul aglutinant

mai mare de 80 uniti este indiciul unei infecii active. Francisella tularensis (Tulare = localitate din California) bacterie facultativ intracelular, de form cocobacilar, Gram negativ, oxidazonegativ, imobil, parazit n rezervorul animalelor slbatice contactul direct cu animalul sau cu esuturile infectate, prin ingestia alimentelor i a apei infectate sau prin inhalarea aerosolilor boal profesional la vntori, buctari, agricultori, pdurari etc Patogenitate

 DMI-50 de celule- agent infecios de clas A Formele clinice variaz n funcie de poarta de intrare n organism; pseudogripale; ulcero-ganglionare brachiale cu extensie subclavicular; faringo-ganglionare cu adenopatie; oculare sindrom Parinaud cu adenopatie; cutanate eritem polimorf; febrile sau tifoide; meningeene; Tularemia pulmonara grava. Incubaia este scurt, debutul brusc, cu febr ridicat, frisoane, cefalee, astenie, tuse, mialgie, dureri abdominale, diaree.

Nu exist transmitere interuman, iar la om maladia este rareori mortal.

Virulenta infecteaz macrofagele blocheaz fuziunea fagolisosomal distruge fagosomii prolifereaz rapid i induc apoptoza celulei gazd Factorii de virulen pilii de tip IV hemolizine (NLyA~Pseudomonas aeruginosa (HlyA) fosfolipaze C (AcpA). proteine ABC (ATP binding cassette) implicate n secreia factorilor de virulen distrugerea fagosomulu i proliferarea intracelular este dependent de prezena unei proteine de 23-kD (IglC) localizat pe o insul de patogenitate. Yersinia bacterie Gram negativ, bacili pleomorfi cu coloratie bipolara microaerofil, facultativ anaerob catalaza +, oxidaza Rezervor natural: Animalele Pot produce maladii infecioase umane:

Y. pestis

Y. pestis agentul plgii umane; Y. pseudotuberculosis; Y. enterocolitica agentul unei boli diareice la om.

Crete facultativ anaerob pe medii bacteriologice, suplimentate cu snge sau cu alte lichide biologice, la 30oC Y. pestis este agentul plgii (ciuma bubonic), infecteaz roztoarele i poate fi transferat la om prin neptura puricelui. Y. enterocolitica i Y. pseudotuberculosis produc simptome patologice asemntoare la roztoare. La om Y. enterocolitica produce o diversitate de manifestri gastrointestinale, iar Y. pseudotuberculosis poate produce o gastroenterit autolimitat. Ambele ptrund n organism pe cale oral i traverseaz bariera intestinal prin celulele M care acoper foliculii limfoizi pe toat lungimea intestinului.

Factori de virulen Yops (Yersinia outer proteins) SSTT Efect antifagocitar este mediat de sistemul de secreie de tip III

proteinele de virulen Yop P/J, H, E, O i T sunt injectate n citosolul celulei int, sistemul de secreie de tip III= injectisom defosforilare rapid a proteinelor care poart resturi de tirozin fosforilate n citosolul macrofagului, a cror activitate ar fi necesar pentru fagocitoz efecte citotoxice n celulele -Yop E. Yop E produce modificri ample ale citoscheletului, care culmineaz cu ruperea microfilamentelor de actin.

Pasteurella patogene pentru animale (septicemie hemoragica) pot produce infecii variate la om (infectii de plaga) cocobacili Gram negativi, imobili, aerobi, facultativ anaerobi, cu aspect bipolar pe frotiurile colorate, pozitivi pentru testele catalazei i oxidazei BGP de importanta medicala Familia Bacillaceae

bacili sporulai g. Bacillus g. Clostridium. B. anthracis -antraxul la ierbivore i accidental la om, agent important al bioterorismului; B. cereus -intoxicaie alimentar i infecii oculare sau cu alte localizri; C. tetani - tetanosul; C. botulinum -botulismul; C. perfingens -agentul gangrenei gazoase C. difficile- agentul colitei pseudomembranoase.

Bacillus anthracis B. anthracis Necesar de tiamin pentru cretere Hemoliz* Capsul polipeptidic** Liz mediat de bacteriofagul gamma*** Mobilitate Cretere pe mediu hidrat de cloral (2,2,2-tricloro-1,1-etandiol) String test Virulena + + + + B. cereus i B. thuringiensis + + + -

La om, sporii ptrund prin leziunile tegumentare (antrax cutanat), rareori prin membranele mucoase (antrax gastrointestinal) sau prin inhalare (antrax pulmonar). Sporii germineaz la locul de ptrundere i induc apariia unui edem gelatinos i congestie. Bacilii se disemineaz pe cale limfatic i sanguin, se multiplic n snge. Celulele capsulate sunt virulente i induc antraxul clinic Factori de virulena :

un polipeptid (poli--D acid glutamic) din structura capsulei, care-l protejeaz de

fagocite;

o toxin alctuit din 3 componente proteice: antigenul protector (PA), factorul letal
(LF) i factorul edematos (EF).

Antigenul protector

Complexele PA + LF sau PA + EF sunt internalizate prin mecanismul endocitozei mediate de receptor sub forma complexelor heptamerice. Dup acidifierea endosomului, subunitile LF i EF sunt eliberate n citosol.

EF i LF au rolul componentei active (A), iar componenta PA are rolul de legare de receptorul membranar (B). Antigenul protector pare s formeze canale pentru trecerea ionilor prin membrana celulei eucariote. Factorul edematos -o adenilat-ciclaz, dependent de Ca2+. Factorul letal - o metaloproteaz dependent de Ca i de Zn. Complexul LF i PA determin leziunile tisulare, ocul sistemic i moartea, mediate de nivelele nalte de citochine. Rspunsul imun anti PA este protector.

B. cereus Bacili mari, imobili, sporulati, aerobi, Gram pozitivi, cu capetele n unghi drept, aezati n lanuri lungi.

Se dezvolt n alimente, unde secret o enterotoxin i produce intoxicaia alimentar. emetic, asociat cu consumul orezuluii diareic, produs de consumul crnii asociat cu diaree masiv. Enterotoxina poate fi sintetizat nu numai n alimente, dar i n lumenul intestinal. Determinanii virulenei la Bacillus cereus: 3 fosfolipaze C (lecitinaza, fosfatidil-colin hidrolaza, fosfatidilinozitol-hidrolaza), hemolitice; sfingomielinaza, hemolitic;

hemolizina I (cereolizina), o citolozin termolabil, activat de sulf -produce

microperforaii membranare, care perturb controlul echilibrului ionic. n snge, hemolizina I este inactivat de colesterol, ceea ce limiteaz efectele patologice n infeciile naturale;

hemolizina II, alctuit din dou subuniti (cea care mediaz legarea i cea activ, cu
efecte necrotice asupra enterocitelor,. Activitatea sa nu este neutralizat de colesterol;

 hemolizina III, denumit factorul emetic, este o protein sau un grup de proteine cu gr.
mol. mic, foarte stabile la cldur, la aciunea proteazelor i la variaia pH. Este un dodecadepsipeptid*. g. Clostridium C. perfringens C.septicum C. novyi C. difficille C. tetani C.botulinum

Lecitinaza Spor

+ subterminal

subterminal

+ central

Subterminal

subterminal

terminal

Mobilitate Beta hemoliz

+ +

+ +

+ -

+ +

+ +

Fermentarea glucozei Reducerea nitrailor nitrii la

Virulenta exotoxine de o mare diversitate structural, cu proprieti imunogene proprii. 8 tipuri de tulpini de C. botulinum 5 tipuri de tulpini de C. perfringens

enzime: colagenaze, proteaze, DN-aze, neuraminidaze neurotoxine: toxina tetanic (produs de C. tetani), toxina botulinic (produs de C. botulinum); enterotoxine: enterotoxina (eliberat de C. perfringens tulpini de tip A) produce intoxicaia alimentar acut la om; tulpinile iota i de C. perfringens produc enterotoxemie la oi, viei, miei i cobai; C. sordelii produce o toxin hemoragic, asociat cu diaree la viei i oi; histotoxine sau toxine citolitice produse de unele tulpini de C. perfringens, agenii gangrenei gazoase i ai celulitei anaerobe; citotoxine (toxine ce acioneaz asupra citoscheletului), produse de C. difficile: toxinele A i B ce produc colita sau diareea asociate cu antibioticele la om sau tulburri diareice la animale. Toxinele care altereaz citoscheletul produc ruperea actinei F (filamentoase) n celulele sensibile. toxina A de C. difficile este o enterotoxin puternic.

Clostridii histolitice - contaminri simple

- celulita anaerob - mionecroza clostridian (gangrena gazoas). C. perfringens

4 toxine letale majore (, , , (iota):5 tipuri toxigene: A, B, C, D, E 9 toxine minore (antigene solubile) , (hemolizin), k (colagenaza), (proteaz), ,
(DN-aza), , eta i neuraminidaza (sialidaza, crete vscozitatea sngelui i favorizeaz tromboza capilar). Enterotoxina poate cauza intoxicaii alimentare produce creterea permeabilitii capilarelor, vasodilataie i creterea motilitii intestinale.

Toxina o fosfolipaz C (o lecitinaz dependent de Ca),

metaloproteaz cu Zn, de 53 kDa, produce o hemoliz incomplet pe agar-snge. liza leucocitelor, hipotensiune i bradicardie

In vivo, -toxina produce hemoliza intravascular, agregare plachetar, leziuni capilare,

Este factorul major al mionecrozei (gangrena gazoas).

Toxina- toxin letal major produs de tulpinile B i C de C. perfringens. leziunile enteritei necrotice la pacienii cu un nivel sczut al dietei proteice. Toxina-

produs de tulpinile de tip B i D, ca protoxina creterea permeabilitii peretelui intestinal, cu creterea nglobrii toxinei, care
acioneaz sistemic ca o toxin letal. Dup intrarea n circulaie produce hiperemie renal, edem pulmonar, exces de lichid pericardic.

Toxina iota sintetizat de tulpinile E de C. perfringens izolate din intestinul de viel cu semnele enteritei i ale intoxicaiei generale.

alctuit din dou proteine, distincte biologic i imunologic (iota-a i iota-b). Activitatea toxic este produs de amestecul celor dou proteine. Asupra actine globulare a muchilor striai i actinei nemusculare - ADP-ribozilate. Este dermonecrotic i letal pentru oarece. Enterotoxemia este produs de enterotoxine, -toxin i toxina . C. histolyticum produce cel puin 5 toxine-enzime: - -toxina necrozant i letal produce moartea animalelor n 24 de ore de la injecia intramuscular. Tegumentul i muchii adiaceni zonei injectate sunt complet lizate; - -toxina are efecte colagenazice. Este o metaloproteaz care cliveaz colagenul nativ tripluhelix i gelatina. Pe baza proprietilor fizice s-au identificat 7 variante de colagenaze; - -toxina, o proteaz activat de gruparea tiol, ce diger gelatina, cazeina, dar este inactiv fa de colagen; - -toxina, o enzim proteolitic cu actvitate elastazic, inactivat reversibil n prezena agenilor reductori; - -toxina, o hemolizin labil la O2, asemntoare serologic cu cele produse de alte clostridii. C. difficile Agentul colitei pseudomembranoase(PMC) post-tratament cu antibiotice C. difficile este toxigen enterotoxin (toxina A de 400-600 kDa) citotoxin (toxina B de 360-500 kDa). Toxina A se leag de gangliozidul GM1 al bordurii n perie a enterocitului i este la fel de activ ca i toxina holeric. T oxina B are aciune predominant citotoxic i este mai puternic dect toxina A. Diagnosticul infeciei cu C. difficile -detectarea uneia sau ambelor toxine n scaun i prin observarea endoscopic a pseudomembranelor sau a microabceselor mucoasei colonului la pacienii cu diaree post tratament cu antibiotice, n special cu ampicilin i clindamicin.

Coci anaerobi Penicilina

Gram-pozitivi Coci Gram-negativi anaerobi Bacili Gram-negativi anaerobi Bacili Gram-pozitivi anaerobi cefalosporine Penicilina cefalosporine vancomicin sparfloxacin Penicilina Penicilina, metronidazol,clindamicin, cefoxitin (amoxicilin ticarcilina i se recomand (majoritatea cefalosporine, lincomicin, vancomicin,

clindamicin vancomicin cloramfenicol

clindamicinLa tulpinile producatoare deeritromicin, imipenempenicilinaza: cloramfenicol, imipenem, lactamaze clavulanat, sulbactam,

clindamicin,rifampicin, sparfloxacin

combinatii cu inhibitori de beta ampicilina

clavulanat). Nu se folosesc ciprofloxacinaNu sunt i metronidazolul aminoglicozidele,

eficienteNu

metroniodazolul

cotrimoxazolul, cefalosporinelebacililor sunt rezisteni). de generatia III a, chinolonele i monobactamii Listeria

6 specii

 L. monocytogenes i L. ivanovii sunt implicate n patologia uman i respectiv animal bacil scurt (asemntor ca morfologie cu Corynebacterium), uneori grupat n lanuri
scurte, Gram pozitiv, cu forme cocobacilare, facultativ anaerob, nesporulat, necapsulat, pozitiv pentru catalaz, ce crete uor pe geloz nutritiv, iar pe agar-snge produce hemoliz complet de tip . Psichrofile

-10% dintre adulii sntoi pot fi purttori de Listeria n intestin

L. monocytogenes este un patogen oportunist. Risc ridicat de infecie: nou-nscui, gravide, persoanele imunocompromise i debilitate (cu maligniti, supuse chimioterapiei sau terapiei imunosupresoare, cu ciroz sau alcoolism, cu insuficien renal, diabet sau lupus) i vrstnicii de peste 60 de ani, la care poate provoca infecii severe (septicemie i meningit). mortalitatea la aceste grupe de risc este de 30-40%. Tropism ridicat pentru SNC si placenta Factori de virulent internalina Inl A

proteina Act A (inductoare a polimerizrii actinei) P60 declanseaza endocitoza Listeriolizina O factor major al virulenei esenial pentru creterea intracelular a bacteriei hemolizin (Hly). Nu este toxic pentru organismul animal, dar lizeaz eritrocitele, elibernd cantitatea de Fe necesar bacteriei. Colesterolul inhib ireversibil activitatea citolitic a acestei familii de toxine-enzime. Dou tipuri de fosfolipaz C (plc A i plc B)

Erysipelothrix rusiopathiae bacil Gram pozitiv colonii mici transparente, strlucitoare Se decoloreaz uor i uneori apare ca fiind Gram negativ.

produce H2S /se deosebete de L. monocytogenes. Catalaza, oxidaza i indol negative. Este betahemolitic La om, leziuni de culoare violacee la degete, caracterizate prin edem i durere, nesupurative Tratament cu Penicilina G

Corynebacterium speciile de Corynebacterium: specii patogene pentru om i animale; specii patogene pentru plante; specii nepatogene. C. diphteriae este agentul cauzal al difteriei (boala eradicata)- toxemie produsa de toxina difterica degenerarea parenchimatoas i depozitarea lipidelor n ficat, necroza muchiului cardiac, a ficatului, rinichiului, corticosuprarenalelor, uneori cu hemoragii ample. n stadiile primare, toxina favorizeaz invazivitatea prin distrugerea celulelor epiteliale i a celulelor inflamatorii fagocitare C. Minutisimum - dermatoz a pielii C. mycetoides -ulcerele tropicale la om C. urealyticum este agent al infeciilor urinare. C. ulcerans - faringit exudativ sau ulcere ale tegumentului minii la om; C. ovis poate determina limfadenita granulomatoas acut sau pneumopatii cu eozinofile la om.

Actinomicete Bacili Gram pozitivi

acido-alcoolo-rezistenti - g. Mycobacterium; reacie uor pozitiv -n g. Nocardia, negativi pentru acido-alcoolo-rezisten aparin g. Streptomyces i Actinomadura.
Nocardia -aerobe, Gram pozitive, pozitive pentru testul catalazei i acidorezistente, produc ureaz i hidrolizeaz parafina. In substrat, filamentele se ramific, iar cele aeriene se fragmenteaz i formeaz cocobacili. Nocardia este un agent patogen oportunist N. asteroides - infecie pulmonar cronic (purulenta), cu posibil diseminare la creier i tegument. Pentru diagnostic -frotiuri din sput, puroi, LCR sau chiar din materialul biopsiei Actinomicetomul - infecie cu progresie lent, distructiv, nedureroas, care se iniiaz n esutul conjunctiv al dermului i se disemineaz prin continuitate n esuturile adiacente Produs de bacterii filamentoase ramificate: Nocardia asteroides, N. brasiliensis, Actinomadura. Actinomyces israelii i A. naeslundii componente minore ale microbiotei orale i a tractului digestiv Procese infecioase cronice, supurative, granulomatoasen zonele traumatizate ale mucoaselor.

In granulomul infecios se gsesc i alte bacterii din microbiota oral: Actinobacillus

actinomycetemcomitans, Haemophilus aphrophilus, Eikenela corodens, Capnocytophaga etc.

A. israelii este facultativ anaerob i crete n atmosfer cu CO2. Diagnostic

se examineaz puroiul din leziunile granulomatoase pentru prezena structurilor granulare. Granulele sunt tari, lobulate, alctuite din macrofage i alte componente tisulare, filamente bacteriene mciucate corineforme i mici concreiuni de sulf elementar, formate prin oxidarea H2S rezultat din metabolismul aminoacizilor cu sulf.

Mycobacterium tuberculosis BAAR, obligat aerobi in vivo infecteaz esuturile cu o presiune parial crescut a O2. Conin o cantitate mare de lipide, glicolipide i ceruri, care le confer caracterul hidrofob al suprafeei celulare, precum i acidorezisten sau rezisten la dezinfectanii simpli si supravieuirea speciilor parazite n monocit. Timpul de generaie este mai mare de 20 de ore.

Speciile de interes clinic: M. tuberculosis, M. leprae i M. avium intracellulare (M. avium complex =MAC). Leziunile infeciei cu M. tuberculosis:

tipul exudativ, reacie inflamatorie acuta, cu edem, PMN, monocite, n jurul bacililor tuberculoi pulmonari. tipul productiv,

formarea granulomului cronic. format din 3 zone:

zona central, cu celule mari, multinucleate, de origine monocitar, cu bacili tuberculoi; o zon intermediar, cu celule epitelioide, adeseori orientate radiar; o zon periferic, cu limfocite, monocite, fibroblaste i fibre de colagen

Evoluia granulomului tuberculos Granuloamele care conin bacili de M. tuberculosis rmn latente pentru zeci de ani, la circa 90% dintre cei aproximativ 2 miliarde de indivizi cu infecie latent, dar fr manifestri clinice. 10%, celulele centrale ale granulomului se lizeaz

Din lipsa O2, proliferarea bacililor tuberculoi, aciunea TNF i a limfocitelor Tc. Dup liza celulelor centrale ale granulomului, se formeaz granuloame cazeoase (de
consistena cheagului de cazein), favorabile dezvoltrii celulelor de M. tuberculosis. Dup ruperea peretelui fibros, bacilii se disemineaz prin contiguitate n esutul adiacent, pe cale sanguin, n alte organe sau pe cale aerian, la ali indivizi. particularitate a tuberculozei i rareori sau chiar absent n celelalte granuloame, imune sau neimune

Distrugerea esutului granulomatos, ce duce la cazeificare i cavitaie, este o

M. avium complex (MAC) =M. intracellulare (MAI)

ste cel mai comun agent nfecios oportunist la pacienii imunocompromii (SIDA), dup
ce numrul limfocitelor TCD4 scade sub 100/L.

Temperatura optim de cretere este de 41o. Mac este ubicvitar n mediile naturale: s-a
izolat din sol, ape, alimente, animale, inclusiv de la psri.

M. leprae a fost descris de Hansen (1873) lepra leproid, cu evoluie grav, asociat cu leziuni teumentare nodulare multiple, un numr enorm de bacili de M. leprae n granuloamele lepromatoase (peste 1010/g de esut) i implicare sistemic a nervilor. Testul la lepromin este negativ sau slab pozitiv.

Proliferarea bacililor produce leziuni tegumentare distribuite difuz sau localizate n

noduli. Granuloamele sunt formate din macrofage inactive, gigante, provenite prin fuziune, ncrcate cu bacili. Lipsete infiltratul limfocitar, ceea ce dovedete absena IMC. Tegumentul este infiltrat cu celule T supresoare. S-a demonstrat anergia celulelor T, cu specificitate fa de antigenele bacilului leprozei. lepra tuberculoid cu evoluie favorabil, neprogresiv

granuloame tegumentare bine organizate, n care macrofagele sunt difereniate n celule

epitelioide, celule gigante Langhans active, care omoar i diger bacilii de M. leprae. I

nfiltratul limfocitar al granulomului este intens, cu predominana limfocitelor TCD4, care

secret IFN . Interferonul activeaz macrofagele din focar, devenind capabile s inhibe creterea i diviziunea celulelor de M leprae. La periferia granulomului se gsesc limfocite TCD8. Testul la lepromin este pozitiv, iar IMC este funcional. Leziunile nervilor se datoreaz proliferrii bacililor i rspunsului IMC, n situsuri adiacent e filetelor nervoase. Infecia se transmite, probabil, datorit contactului prelungit al copilului mic, cu persoanele care elimin un numr mare de bacili.

Bacterii intracelulare protecia fa de bacteriile intracelulare este mediat de celulele T infeciile produse de bacteriile intracelulare sunt nsoite de reacia de hipersensibilitate ntrziat reaciile tisulare anti-bacterii intracelulare sunt granulomatoase. Att reaciile protectoare, ct i patologia sunt cauzate de granuloame. Ruperea granulomului favorizeaz diseminarea agentului patogen i extinderea leziunilor bacteriile intracelulare exprim puin sau deloc potenial toxic, pentru celula gazd, iar patologia este consecina activrii rspunsului imun, mediat n primul rnd, de limfocitele T bacteriile intracelulare coexist perioade lungi cu celula gazd. ntre infecia persistent i imunitatea protectoare se dezvolt un echilibru, rezultatul fiind o perioad lung de incubaie i un proces infecios cronic. Infecia este distinct de procesul patologic..

Chlamidii bacterii Gram negative, parazite obligat cu localizare intracelular, la o larg varietate de gazde.

Speciile infecioase pentru om sunt: Chl. psittaci, Chl. trachomatis (biovar lymphogranuloma venereum - LGV i trachoma) i Chl. pneumoniae. nu produc ATP, dar au pstrat principalele activiti metabolice: glicoliza, respiraia, biosinteza pentozelor. Preiau din celula gazd vitamine, nutrieni, diferii cofactori , precursori . C. psittaci e parazit n special la psri i mamifere neumane, dar pot fi infectate vertebratele cu snge rece, nevetebratele sau chiar omul. C. trachomatis este parazit la oarece i la om. La mamifere i la psri, ambele specii produc infecii ale conjunctivei oculare, tractului urogenital i respirator, ale tractului digestiv i probabil cu alte localizri. S-au identificat 2 tipuri celulare chlamidiale: corpul elementar

corpul reticulat Patologie C. trachomatis biovar trachoma infecteaz numai celulele epiteliale squamoase columnare ale conjunctivei, tractului genital i tractului respirator. Chl. trachomatis. Trachoma este o maladie ocular, o cheratoconjunctivit cronic, ce debuteaz cu inflamaia acut a conjunctivei i corneii i progreseaz la desprinderea corneei i orbire. n ariile endemice, infecia are loc n copilrie, iar consecina pe termen lung trachoma - se instaleaz lent. La brbai, Chl. trachomatis produce uretrit negonococic, la femei infeciile inaparente ale trompelor determin infertilitatea

Chl. pneumoniae p infecii acute ale tractului respirator (faringite, bronite, penoumonii) sau complicaii tardive (astm, rinit alergic, afeciuni cardiace, scleroz multipl, Alzheimer)

Rickettsii bacterii parazite obligat intracelulare, Gram negative, aerobe, de dimensiuni mici, pleomorfe, cu afinitate sczut pentru colorani. metoda Gracian (folosete colorant Giemsa) sau Gimenez (cu fuxin bazic 0,4% i verde malachit

Rickettsiile se multiplic n special n celulele vii cu rat metabolic sczut, care au ncetat s se multiplice (cresc mai bine la 32o C). Multiplicarea este stimulat de sulfonamide. Multiplicarea rickettsiilor este, n cele mai multe cazuri, citoplasmatic, dar cele care produc procese infecioase din grupul febrelor ptate se multiplic att n citoplasma, ct i n nucleul celulei gazd Adera la celulele gazdei (ex. Endotelii) Vasculita

erupia peteial tegumentar (ncepe pe trunchi i continu pe membre), starea de

confuzie mental, ocul terminal

grupul rickettsiilor tifos epidemic, endemic i grupul febrei ptate. *R.rickettssii Febra ptat a Munilor Stncoi Roztoare, cini, cpue Cpue Muctur

Specia R. prowazekii R. typhi Boala Tifos epidemic Tifos endemic Rezervor Uman Roztoare Vector Pduchi Purici Cale de eliminare din Fecale Fecale vector Coxiella burnetii (agentul febrei Q - query fever) cocobacil Gram-negativ, intracelular~rickettsiile

spre deosebire de ricketsii, Coxiella este rezistent la cldur (60o timp de 30 min),
uscciune i lumin solar (triete luni de zilele n fecalele uscate sau n lapte), ceea ce uureaz transmiterea de la o gazd la alta i poate fi cultivat pe medii artificiale

Coxiella este sensibil la doxicilin i tetraciclin. g. Ehrlichia bacterii Gram negative mici (0,5 m), parazii obligat intracelulari. Infecteaz leucocitele circulante, se multiplic n vacuolele fagocitare i formeaz aglomerri cu aspect de morul.
La om, E. chaffensis produce infecia monocitelor, iar E. ewingii infecteaz granulocitele. simptome nespecifice: febr, frisoane, mialgie, ru general, senzaia de vom, anorexie, pierdere n greutate. Diagnosticul infeciei cu Ehrlichia se bazeaz pe observarea microscopic a morulei n leucocitele infectate.

Micoplasme Cele mai mici organisme care triesc liber n mediile naturale

Absena peretelui celular.- Mollicutes (n limba latin = piele moale). peste 150 de specii de micoplasme, dintre care 15 de la om. pleomorfe, datorit absenei peretelui rigid: sunt delimitate de o membran trilaminar, ce conine steroli. Micoplasmele cresc pe medii inerte ce conin lipoproteine i steroli: Habitatul primar al micoplasmelor umane i animale este suprafaa mucoaselor tractului respirator, urogenital, digestiv, conjunctiva ocular, glandele mamare i articulaiile. M. genitalium este organismul cu cel mai mic genom (de dou ori mai mare dect al virusurilor pox) La om s-au izolat: M. Hominis, M. salivarium, M. orale, M. fermentans, M. pneumoniae, M. genitalium, M. urealiticum etc.

Manifest, n general, specificitate de organ i de esut: M. pneumoniae populeaz preferenial tractul respirator, dar s-a izolat din tractul genital, iar M. genitalium s-a gsit n primul rnd n tractul urogenital, dar i n tractul respirator.

Patologie M. Pneumoniae pneumonia n special la copii i la tinerii pn la vrsta de 20 de ani, asimptomatic, pn la pneumonie sever. Infecia induce sinteza hemaglutininelor la rece pentru eritrocitele de grup 0, la 50% dintre pacieni.

Ureaplasma urealyticum i Mycoplasma hominis patogeni ai tractului genital ageni etiologici ai uretritei negonococice, bolii inflamatorii pelvice, cervicale, orhitei, epididimitei, care secundar pot duce la sterilitate. La animale, micoplasmele produc pleuropneumonia, o boal contagioas, uneori letal a bovinelor. Infecia este transmis pe cale aerian. Agalactia oilor i caprinelor este o infecie generalizat, cu leziuni locale n tegument, ochi, articulaii, uger, scrot. La femele infecia produce atrofia glandelor mamare. Porcul, cinele, roztoarele poart micoplasme care produc infecii pleurale, peritoneale, articulare, respiratorii. Micoplasmele infecioase pentru psri sunt transmise pe vertical, prin ou

Virulenta Adezine

citotoxicitate direct prin stresul oxidativ (radicalul superoxid i H2O2) pe care-l genereaz i prin competiia pentru nutrieni. Micoplasmele exprim un pleomorfism extrem i o variaie antigenic accentuat, consecin a plasticitii fenotipice*. Unele micoplasme produc hemolizine. Micoplasmele au efect imunomodulator accentuat: imunosupresia, stimularea policlonal a limfocitelor T i B, inducia sintezei citochinelor, stimularea efectului citotoxic al macrofagelor, al celulelor NK i al celulelor Tc;

stimuleaz expresia receptorilor celulari i activarea cascadei complementului.

Efectul imunosupresor este consecina epuizrii argininei. Micoplasmele au sistemul enzimatic al arginin-dihidrolazei. Epuizarea argininei, un aminoacid esenial, poate induce efecte imunosupresoare multiple. Stimuleaza citochinele IL-10, IL-13 i TGF-, care favorizeaz evaziunea micoplasmelor n raport cu factorii protectori ai gazdei, deoarece inhib funcia fagocitelor, inhib sinteza citochinelor proinflamatorii i proliferarea limfocitelor T. IL-10 este o citochin inhibitorie a rspunsului imun, sintetizat n special de limfocitele Th-2 i de macrofage i ntr-o msur mai mic de alte celule imunitare. IL-10 inhib activitatea celulelor prezentatoare de antigen (CPA), inhib sinteza citochinelor proinflamatorii (IL-1, TNF-, IFN-), stimuleaz diferenierea limfocitelor B n celule productoare de IgG4 (anticorpi citofili). stimuleaz celulele seriei monocit-macrofag s secrete citochine proinflamatorii, care produc rspuns inflamator local i sistemic.

Infecia cu micoplasme poate produce maladia articular acut i cronic, asemntoare cu artropatiile inflamatorii, inclusiv cu artrita reumatismal.

DIAGNOSTICUL PRINCIPALELOR GRUPE DE MICROORGANISME DE INTERES CLINIC EXUDATUL FARINGIAN Examinare functie de solicitare. S.pyogenes cultivare pe geloza-sange (agar Columbia baza), agar sange cristal violet, in atm. de CO2. Se inteapa cadranul de insamantare cu ansa, pentru prinderea tulpinilor de S. pyogenes producatoare exclusiv de streptolizina oxigen labila. -citirea finala se face la 48 ore -cultura pozitiva: - test la Bacitracina (40mg) -pozitiv pentru S. pyogenes - negativ necesita latexaglutinare pentru celelalte grupe de Streptococi(C, G etc) NU se recomanda frotiu. NU se efectueaza antibiograma.

C.diphteriae :recoltarea si prelucrarea pentru o astfel de investigatie sr va face NUMAI in caz de

suspiciune - frotiu: coloratie speciala - cultura medii speciale:m.Tinsdale, m. Loffler, cu crestere rapida in circa 14 ore. -diagnosticul final; testul Eleck Fusospirili : idem C diphteriae. Diagnostic rapid: frotiu extemporaneu. NU se face recoltare pe tampon in vederea insamantarii( diagnostic exclusiv de lama) N. gonorrhoeae, N. meningitidis frotiu pentru diagnostic, din leziunile caracteristice=fara valoare! - cultura medii selective( germeni fastidiosi) - controlul coloniilor (oxidaza poz.)+frotiu cultura Arcanobacterium haemolyticum -poate cauza faringite acute, mai ales cu angina, la adultul tanar; -cultiva pe medii selective cu adaos de antibiotice sau selective prin concentratie finala de 3,5% NaCl, in atmosfera de CO2 -citirea finala: la 48 ore. -sunt bacili Gram pozitivi, tip coryneformi, catalaza - , beta hemolitici;

-este obisnuit sensibil la peniciline, cefalosporine, macrolide si vancomicina, dar constant rezistent la Biseptol Examenul de rutina al EXUDATULUI FARINGIAN presupune: - identificarea streptococilor beta hemolitici; - Identificarea portajului cu S. aureus si S.pneumoniae; - Identificarea colonizarilor cu levuri si bacili Gram negativi (raportarea se face in functie de semnele clinice, abundenta culturii si statusul imun al pacientului). MEDIUL SABOURAUD - levuri tip CANDIDA Flora orofaringiana (aspect normal) - Geloza sange PSEUDOMONAS AERUGINOSA( Piocianic) pe geloza lactozata( CLED) PSEUDOMONAS AERUGINOSA( Piocianic) pe geloza sange. Urocultura - KLEBSIELLA PNEUMONIAE pe CLED la 24 ore Urocultura - Geloza lactozata(AABTL) - Klebsiella pneumoniae-dispersie la 48 ore( mediul revireaza din galben in verde) PUROIUL (ABCESE, FLEGMOANE, PLAGI, SUPURATII) Varietatea situsurilor anatomice afectate implica o mare varietate de agenti etiologici, in special bacterii si fungi.Recoltarea pe tampon nu este indicata decat in cazul plagilor cutanate superficiale. Insamantarea se face pe un mediu lactozat(CLED), pe geloza sange si pe mediu Sabouraud pentru fungi.Daca se suspicioneaza o infectie anaeroba, laboratorul trebuie anuntat . Este obligatoriu frotiul Gram din produs patologic! MEDII DE CULTURA TEHNICI DE INSAMANTARE SI DE INOCULARE A MICROORGANISMELOR

Studiul unui microorganism n scopul identificrii i descrierii lui presupune recoltarea acestuia,
din diferite produse patologice, urmat de nsmnarea sa pe un mediu de cultur adecvat.

Mediul de cultivare reprezint un substrat nutritiv, de complexitate diferit, care favorizeaz

creterea i dezvoltarea microorganismelor n condiii artificiale, de laborator.

Compoziia unui mediu de cultur este foarte divers i depinde de exigenele nutritive ale
microorganismului care urmeaz a fi cultivat. Indiferent de compoziia chimic i de gradul de complexitate, mediile de cultur trebuie sa ndeplineasc urmtoarele cerine minime, obligatorii: S asigure cantiti optime de hidratare i substane nutritive necesare creterii i multiplicrii microorganismelor;

S asigure sursa de carbon i energie (compui organici polizaharide, proteine, lipide

anorganice);

S conin sruri minerale, cu rol n meninerea echilibrului ionic al celulei (Na+, K+, Ca2+, Mg2+,
Mn, Fe2+, Co2+);

S asigure factori de cretere necesari pentru dezvoltarea unor microorganisme cu exigene de

cretere sau a unor mutante auxotrofe (purine, pirimidine, aminoacizi, vitamine etc.)

S asigure sursa de azot necesar biosintezei acizilor nucleici i proteinelor (compui organici:
proteine, peptone, aminoacizi sau anorganici - azotai, azotii);

S ofere un pH optim pentru dezvoltarea microorganismelor: n general microorganismele se

dezvolt optim la pH neutru = 7.2-7.4, cu unele excepii: Vibrio cholerae se dezvolta la un pH optim alcalin (pH=9.0-9.2), n timp ce levurile i mucegaiurile prefer un pH acid (pH=5-6);

 S ofere condiii de aerare corespunztoare tipului de metabolism respirator al

microorganismului care urmeaz a fi cultivat;

S fie steril i repartizat n recipiente sterile.

Clasificarea mediilor de cultur se realizeaz n funcie de mai multe criterii, care se suprapun parial, datorit complexitii i diversitii lor chimice: - dup consisten: medii lichide;

medii solide (solidificate cu ajutorul agenilor de solidificare, dintre care cel mai utilizat este agarul- polizaharid extras din alge marine, care la 100oC se prezinta n stare lichida, iar prin rcire se solidific; agarul nu are valoare nutritiv, nefiind metabolizat de ctre microorganisme, i de aceea nu modific pH-ul i compoziia mediului);

medii semisolide (ex. mediu OMS, mediu cu gelatina); medii deshidratate (produse de diferite firme, comercializate si utilizate dup rehidratare si
sterilizare). - dup provenien: medii naturale lichide: must de mal, lapte; solidificate: cartof glicerinat medii sintetice, care au o compoziie chimic bine definit i nu conin nici un produs natural ca sursa de factori de cretere (in compozitia lor intra soluii minerale, soluii de zaharuri, aminoacizi).

medii artificiale sunt medii cu compoziie chimic semidefinit, care conin o baz natural
lichide: bulion, ap peptonat; solidificate: geloz, gelatin; (principalele ingrediente naturale utilizate la obinerea mediilor de cultur sunt: carnea, utilizat la obinerea bulionului de carne, a extractului de carne, a unor peptone bacteriologice rezultate n urma hidrolizei enzimatice (pepton pepsic, pepton tripsic, pepton pancreatic, pepton papainic, polipepton) sau acide (pepton clorhidric de cazein); sngele; serul; lichidul de ascit; bila de bou; gelatina; glbenuul de ou; albuul de ou coagulat; laptele; agarul. dup complexitate i scopul utilizrii: medii uzuale simple, folosite pentru cultivarea unui numr mare de microorganisme (ex. bulion simplu, agar nutritiv);

medii speciale (sunt medii cu grade diferite de complexitate care permit creterea preferenial a
anumitor specii dintr-un amestec heterogen de microorganisme dintr-o prob sau evidenierea anumitor caractere particulare de metabolism ale microorganismului cultivat), care se mpart n: - medii selective conin unul sau mai muli ageni inhibitori reprezentai de colorani, antibiotice, sruri biliare care pot limita sau inhiba multiplicarea anumitor specii de microorganisme dintr-o prob cu ncrctur microbian mixt (mediu agar sange cristal violet, mediu MacConkey, Chapman); - medii de mbogire care prin compoziia lor ofer condiii prefereniale de cretere pentru anumite specii bacteriene, care se vor multiplica mai rapid dect microorganismele asociate (bulion selenit, apa peptonata alcalina); medii difereniale care, prin compoziia lor, evideniaz anumite particularitai metabolice, utile n identificarea unei anumite specii de microorganisme (vezi Evidenierea caracterelor biochimice ale microorganismelor):CLED,AABTL,IM,McC,SS medii de conservare sau de ntreinere care asigur supravieuirea microorganismelor n laborator pe o anumit perioada de timp (ex. mediu OMS).

medii de transport care asigur supravieuirea tulpinilor microbiene n proba recoltat pn n

momentul nsmnrii (ex. mediu Cary-Blair, Stuart, Amies,)

 GELOZA MULLER HINTON - Stafilococ alb si stafilococ auriu ; Staphylococcus aureus

(auriu), epidermidis (alb) si citrin (galben). (testul de pigmentogeneza)

GELOZA SANGE - Stafilococ auriu hemolitic

GELOZA LACTOZATA - Bacili Gram negativi fermentativi (sus) si nonfermentativi (jos).