Totalizarea nr.

3
TEMA1:

PROCESUL INFECIOS. METODA BIOLOGIC DE DIAGNOSTIC

1. Notiuni de infectie, proces infectios si boala infectioasa. Particularitatile bolii infectioase. Factorii
implicati in procesul infectios.
INFECIA totalitatea proceselor biologice care se produc n ma/o n urma penetrrii mi/o patogene sau potenial patogene (PP).
PROCESUL INFECIOS interaciunea dintre mi/o i ma/o n diverse condiii ale mediului ambiant. Manifestarea lui poate fi
inaparent / asimptomatic (stare de portaj sntos, eliminarea rapid a mi/o) sau simptomatic.
Boala INFECIOAS manifestarea suprem a procesului infecios diferite simptome efectele metaboliilor microbieni (toxine,
enzime, etc) sau de reacia imun a gazdei la prezena bacteriei.
Particularitile bolii infecioase
1. provocata de ageni patogeni
2. Contagiozitate (capacitatea de a se transmite de la o surs la o persoan receptiv)
3. Specificitate (un agent provoac o infecie, ex.: Clostridium tetani este agentul tetanosului, etc.)
4. Evoluie clinic stadial; Imunitate la reinfecie (durat variabil)
Apariia maladiei depinde de multipli factori, n special de capacitatea agentului cauzal de a provoca maladia i de gradul de
rezisten al gazdei la aceast invazie
Factorii implicati in prcesul infectios
Factori structurali (somatici)
Adezine - fimbriile, glicocalixul, proteine de adeziune ale peretelui celular. Asigur aderarea bacteriilor la receptorii de pe
suprafaa celulelor-int sau la proteine matriciale extracelulare (colagen, fibronectin, laminin, elastin, etc)
Proteine ale sistemelor de secreie (tipuri I-IV)
Capsula antifagocitar, anti-complement Ag K
Antigenul O - antifagocitar
Peptidoglicanul (adeziune, agresie tisular)
Acizii teichoici/lipoteichoici (adeziune, toxicitate)
Proteina A la stafilococi (aciune antifagocitar prin fixarea Fc a IgG)
Proteina M la streptococi (adeziune, antifagocitar)

2.ROLUL MICROORGANISMULUI N PROCESUL INFECIOS. PATOGENITATEA I

VIRULENA.Unitatile de virulenta.Aprecierea.
Relaiile dintre mi/o i ma/o gazd: Comensalism (flora bucal, intestinal, etc); Parazitism (prezena mi/o este nociv pentru
ma/o). Orice mi/o parazit capabil s provoace o infecie (condiii adecvate) este considerat patogen.
Exist 2 tipuri de mi/o patogene:
Obligat (cert) patogene, care infecteaz persoane imunocompetente cu doze mici
Potenial patogene (oportuniste), care pot cauza infecie numai cu doze mari sau la persoane imunocompromise (deseori fac
parte din flora normal a organismului)
Mi/o patogene pot fi gzduite uneori fr a provoca maladia, astfel de persoane sunt numite purttori sntoi de germeni.
Microorganismele patogene se caracterizeaz prin:
Patogenitate capacitatea unei bacterii de a declana infecia. Este un caracter de specie determinat genetic (cromozom,
plasmide, bacteriofagi). n cadrul unei specii patogene pot exista tulpini cu manifestare variat a patogenitii de la
absena total pn la foarte nalt.
Virulen gradul de patogenitate al unei tulpini (msur cantitativ a patogenitii). Se apreciaz prin infectarea
animalelor de laborator cu cantiti diferite de mi/o.
Unitile de virulen:
DLM numrul de bacterii necesar pentru a ucide 80% din animalele infectate
DL50 50% letalitate
DCL 100% letalitate
DI50/DI provoac boala la 50% / 80% animale
Modificarea virulenei:
Amplificarea prin transfer i recombinare genetic, condiii optime pentru cretere
Reducerea (atenuarea) prin meninerea bacteriilor n condiii nefavorabile (t, factori chimici, etc), mutaii

3.Factorii de patogenitate ai bacteriior: structurali, enzimele de patogenitate, toxinele si

caracteristica lor.
Factorii de patogenitate ai bacteriilor
Factori structurali (somatici)
Adezine - fimbriile, glicocalixul, proteine de adeziune ale peretelui celular. Asigur aderarea bacteriilor la receptorii de pe
suprafaa celulelor-int sau la proteine matriciale extracelulare (colagen, fibronectin, laminin, elastin, etc)
Proteine ale sistemelor de secreie (tipuri I-IV)
Capsula antifagocitar, anti-complement Ag K
Antigenul O - antifagocitar
Peptidoglicanul (adeziune, agresie tisular)
Acizii teichoici/lipoteichoici (adeziune, toxicitate)
Proteina A la stafilococi (aciune antifagocitar prin fixarea Fc a IgG)
Proteina M la streptococi (adeziune, antifagocitar)
Enzime de patogenitate (responsabile de persisten, diseminare i producerea leziunilor)
Plasmocoagulaza (formarea trombilor septici-efect antifagocitar, propagare n organism)
Fibrinolizina (eliberarea bacteriilor din trombi)
Hialuronidaza (diseminare, leziuni tisulare)
Colagenaza (identic)
Neuraminidaza (lichefierea mucusului)
Proteaze (ex.: distrugerea Ig A secretorii)
Dezaminaze
Decarboxilaze
Fosfataze, etc
Toxine bacteriene (responsabile de leziuni): Exotoxine (proteice, secretate n mediul extracelular); Endotoxine (LPZ, legate de
celula bacterian)
Moduline i invazine: Injectate la suprafaa sau direct n interiorul celulei-int; Induc penetrarea (internalizarea) i propagarea
bacterian. Se ntlnesc la Yersinia, Shigella, Salmonella, Escherichia
Ali factori ce asigur persistena mi/o: Variaii antigenice; Mimicria antigenic
Toxinele:
Caracteristica exotoxinelor:
Proteine produse de bacterii G+/G Pot fi secretate n mediul extern, eliberate n spaiul periplasmic sau fixate pe suprafaa celulei
Termolabile (excepie enterotoxina stafilococic i TS (toxina termostabil) a E. coli)
Hidrosolubile i acioneaz la distan
Efectul se instaleaz dup o perioad de incubaie
Manifest tropism (specificitate de aciune)
Toxicitate nalt (DLM de ordinul ng/kg)
Exotoxinele sunt imunogene (induc sinteza anticorpilor - antitoxine)
Antitoxinele neutralizeaz activitatea exotoxinei (faza de fixare pe receptorii celulari)
Exotoxinele tratate cu formol 0,4% i meninute la 39-40C timp de 3-4 sptmni se transform n anatoxine. Ele sunt lipsite de
toxicitate dar pstreaz imunogenitatea (utilizate n calitate de vaccin).
Suportul genetic al exotoxinelor: cromozom (dizenteric), plasmide (toxina antraxului, toxina tetanic), profagi (toxina difteric,
botulinic).
Tipurile de exotoxine:
Toxine citolitice. Deregleaz membranele celulare prin aciune enzimatic (fosfolipaza /lecitinaza, sfingomielinaza) sau prin
formarea porilor (streptolizina O, -toxina/hemolizina S.aureus, leucocidina)
Toxine citotoxice, de tip A-B (acioneaz n interiorul celulei). Ex.: toxina difteric, botulinic, tetanic, holeric, etc
Au structur bipartit: fracia polipeptidic B (cell binding) este responsabil de legarea de receptorii specifici din membrana
celulei-int, fracia polipeptidic A (active) ptrunde n celul (prin endocitoz sau translocare) i determin activitatea toxic.
Fiecare citotoxin acioneaz strict specific: toxina difteric inhib sinteza proteinelor, toxina botulinic i tetanic
neurotoxine, inhib eliberarea neurotransmitorilor, toxina holeric i pertusic activeaz adenilat-ciclaza membranar, etc

Obinerea exotoxinelor bacteriene

Cultivarea tulpinii toxigene n mediu lichid
Filtrarea culturii pentru separarea toxinei
Purificarea toxinei
Concentrarea toxinei
Determinarea activitii toxinei (se msoar in uniti de floculare Lf )
Caracteristica endotoxinelor:
Complexe LPZ din peretele celular G- (cel mai toxic component este lipidul A).
Este eliberat n urma lizei bacteriilor (sub influena sistemului imun al gazdei sau a unor AB).
Termostabil
Ne-imunogen
Nu poate fi transformat n anatoxin
DLM de ordinul mg/kg
Efectul se manifest imediat
Determin efecte generale, indiferent de provenien
Mecanismul de aciune al endotoxinei : LPZ induce secreia unor substane biologic active (citokine pro-inflamatoare: IL-1, IL-6,
IL-8, IL-12, TNF-a) de ctre macrofage i alte celule. Iniial LPZ se leag de o protein seric (LPS-binding protein) acest
complex interacioneaz cu CD 14 de pe membrana macrofagului. Exist i molecule solubile de CD 14, astfel endotoxina poate
s acioneze asupra altor celule, de ex.: celulele epiteliale. Un alt receptor macrofagic poate interaciona cu LPZ receptorul tolllike (TLR4).
n doze mari citokinele pot provoca ocul endotoxinic (septic), comun pentru toate bacteriile G-:
Febr (eliberarea pirogenilor IL-1, TNF de ctre celulele care au captat endotoxina)
Leucopenie, urmat de leucocitoz
Tulburri de coagulare (activarea factorului XII formarea fibrinei i obstrucia capilarelor sanguine coagulare
intravenoas diseminat)
Hemoragii (consumarea factorilor de coagulare) n diverse organe (rinichi, suprarenale, plmni, creier)
Vazodilatare, urmat de colaps vascular (sechestrarea periferic a sngelui, hipovolemie, acidoz metabolic, scderea
brusc a presiunii sanguine)
n consecin au loc leziuni hemoragice i necroz n diverse organe (rinichi, suprarenale, plmni, creier...).
Pronosticul este foarte sever.

4. Rolul factorilor de patogenitate in evolutia procesului infectios.

Pentru a produce o infecie , bacteriile necesit factori de patogenitate:
1.Infeciozitate = proprietatea unui germen de a ptrunde ntr-un organism receptivu n r e s e
m u l t i p l i c . U n e l e b a c t e r i i a u p u t e r e i n v a z i v m a r e 9 p a t r u n d r a p i d n circulaia sanguin ) ali
germeni rmn cantonai la poarta de intrare acionnd prinexo i endo toxine.
2.Multiplicarea = proprietatea bacteriilor de a se nmuli;
3 . P a t o g e n i t a t e a = c a p a c i t a t e a u n u i g e r m e n d e a d e c l a n o b o a l n o r g a n i s m u l g a z d ; patogenitatea
variaz prin acelai germen;
4.Virulena = proprietatea unor tulpini aparinnd microorganismelor patogene de a ptrunde i a se multiplica ntrun organism susceptibil, provocnd boala;
5.Toxigeneza = proprietate unor bacterii de a elimina toxine. Exist 2 tipuri de toxine ;
exotoxine = proteine secretate de bacterii i care difuznd n esuturi i
f i i n d antigene, deterimin apariia de anticorpi,
endotoxine = complexe de fosfolipide , p o l i z a h a r i d e i p r o t e i n e l e g a t e d e p e r e t e l e b a c t e r i i l o r
g r a m n e g a t i v e , d e c a r e s u n t eliberai prin moarte bacteriilor. Sunt mai puin puternicifa de exotoxine
, efectulfarmacodinamic fiind uniform 9 pot produce oc, febr, leucopenie, icter, diaree i fiind slab
antigenic nu determin anticorpi ).

5. Dinamica evoluiei bolii infecioase

I. Perioada de incubaie (de la penetrarea mi/o pn la apariia primelor simptome). Durata variabil (ore ani), ea oscileaz ntre
cteva ore (n holer , toxicoinfecii,pest) pn la cteva luni i chiar ani , (n lepr).Durata perioadei de incuba ie depinde de
imunitatea general i specific al organismului uman, de reactivitatea lui, de sensibilizarea, de influen a factorilor nocivi din
mediul extern, de condiiile sociale i de de doza i virulen a agentului patogen. Microbul se adapteaz, se multiplic, produce
toxine, enzime, etc. Infecia poate fi urmat de mbolnvire dac organismul nu e n stare s reziste infec iei.
II. Perioada de invazie (prodromal, de debut). Apar primele semne clinice, nespecifice (febr, frison, inapeten, astenie, etc), cu
exceia rujeolei (macule roii pe mucoasa bucal, pete Filatov) i variolei ( erup ii pe fa i membre). Durata 2-3 zile.
III. Perioada de stare (a manifestrilor clinice specifice). Durata variabil.Procesul infec ios atinge cumina ia. Cele mai tipice
simptome ale bolii infecioase sunt febra , inflamaia, afectarea SNC i SNV , dereglri func ionale i organice n sistemul
cardiovascular , respirator , digestiv, excretor, modificri cutanate sub forma de erup ii .
IV. Perioada terminal (convalescen i vindecare, sau cronicizare, sau stare de portaj, sau deces) n caz de evolu ie favorabil
ea trece n stadiul de reconvalescen n care uneori boala se termin prin criz-scderea brusc a temperaturii , traspira ii
,colaps vascular; alteori prin liz-reducerea treptat a febrei i stingerea fenomenelor morbide. Perioada de reconvalescen
variaz. Vindecarea nu e n toate cazurile asociat debarasrii de agentul cauzal . Infec ia se poate finisa cu recidive,complica ii,
infecii secundare sau deces.
Ptrunderea i rspndirea microbilor n organism
Sursa de infecie: omul bolnav, reconvalescent, purttor sntos (infecii antroponoze) sau animalele (infecii
zooantroponoze)
Mecanismele de transmitere
1. Prin contact (direct, indirect)
2. Fecal-oral (alimentar, hidric, etc)
3. Aerogen (aer-praf, aer-picturi)
4. Transmisiv (prin intermediul vectorilor)
5. Vertical (transplacentar)
Microbii penetreaz prin tegument, mucoase sau direct n snge (pori de intrare). Un microb poate avea una sau mai
multe pori de intrare.
Doza infecioas ex.: dizenterie 102 mi/o, febr tifoid 105 , holer 109 .
La poarta de intrare bacteria ader la celule (adeziunea) i se multiplic local (colonizarea), formnd focarul primar de
infecie.
Infecia poate rmne localizat sau poate s se rspndeasc (invazia) pe cale limfatic, sanguin, pe calea nervilor
sau prin continuitate (din aproape n aproape).
n esutul afectat mi/o se multiplic i provoac leziuni direct prin intermediul enzimelor sau toxinelor sau indirect, via
mecanisme imune.
Mi/o se elimin cu diferite secrete sau excrete ale ma/o, prin care are loc contaminarea altor gazde sau obiecte
Pe parcursul procesului infecios bacteriile pot ptrunde din focarul primar n singe , ca apoi s se rspndeasc prin tot
organismul. Aceast stare se numete bateriemie, iar n cazul virozelor viremie.
Septicemie bacteriile invadeaz numeroase organe i esuturi ale organismului ( antrax, pest, etc.) . Se caracterizeaz prin
fenomene de inflamaie i de generen celular , exteriorizeaz acela i tablou clinic indifferent de specia agentului causal

Septicopioemia procesul septic nsoit de formarea unor focare purulente .

Toxinemie condiionat de bacteriile toxigene .

6. Criteriile de apreciere a rolului etiologic a agentului cauzal (postulatele lui Koch)

1. Bacteria trebuie s fie prezent la toate persoanele bolnave
2. Bacteria trebuie s fie izolat de la bolnav i meninut n cultur pur
3. Cultura pur inoculat la un voluntar sau la un animal experimental trebuie s reproduc simptomele bolii
4. Aceeai bacterie trebuie s fie reizolat de la voluntarul sau animalul infectat
Actualmente se insist pe genomul bacterian (prezena genelor de patogenitate)

7. Formele de manifestare a infeciei (infecia acut, cronic ,secundar, endogen, reinfec ie,
suprainfecie, recidiv).
Infecia acut debut inopinat i evoluie erelativ scurt ( gripa , rujeola , scarlatina, tifos exantematic , etc.). Infec iile virale sunt
nsoite de acumularea vurusurilor i moartea celulelor invadate .
Infecia cronic evoluia ndelungat cu persistena agentului n cellule , esuturi , organe (febra palustr, turbeculoza, lepra ,
sifilusu , bruceloza, etc.)
Infecia secundar organismul care a suportat o infeie devine mai sensibil fa de mbolnvire cu alte afec iuni (dup o grip se
instaleaz o inflamaie pulmonar , dup o variol o infece stafilococic ) .
Infecie endogen (autoinfeciile) apar n urma ativizrii microorganismilor proprii : microflora pielii , mucoaselor , tubului
digestive , cilor respiratorii , cilor urinare , conjunctivelor ochilor ; de pe urma tulburrilor echilibrului mediului intern al
macroorganismului. De exemplu : hipotermia microflorei cilor respiratorii superioare provoac diferite procese inflamatorii ; n
caz de rcire menstruaie , regim alimentar inadecvat se activeaz virusului herpesului . Din autoinfec ii fac parte rinofaringita ,
angina , apendicita , conjunctivita , otita , colicistita , ect.
Reinfecie o infecie repetat cu aceea specie de microorganisme ce a provocat afec iunea ce s-a terminat prin
reconvalescen ( sifilis , etc. )
Suprainfecie o reinfectare a organismului , la care boala de fond nu a ajuns la reconvalescen .
Recidiva o revenire a simptomelor aceleiai afeciuni . Se atest n caz de nivelul sczut al activit ii imunologice a organismului
n perioada de boal i reconvalescen (tifos abdominal , febr tifoind recurent , etc.)
Persistena microorganismelor
Persistena se caracterizeaz prin existena ndelungat a agentului patogen n organismul omului ( virusul hepatitei B ,
herpesului , rubeolei , etc.). De pe urma persisten ei ndelungate a virusurilor se elaboreaz anticorpi contra anumitor agen i cu
care omul se reinfecteaz sau se infecteaz multiplu fr a face boal . Persisten a duce la : variabilitatea tulpinilor de angen i ,
forme grave de mblonvire a SNC . Persistena ine de insuficien a imunit ii .
Factori ce asigur persistena mi/o:
-

Variaii antigenice (sinteza succesiv a unui numr mare de diferite variante ale moleculelor sau structurilor de suprafa,
pentru a se proteja de rspunsul imun al gazdei)

Mimicria antigenic
Stare de purttor de germeni patogeni

Starea de purttor de se consider ca o form a toleran ei imunologice a organismului , este o form de corela ie dintre agentul
patogen i marcroorganismul fr manifestare a bolii . Se instaleaz la organismele cu nivel sczut al imunit ii postinfec ioase .
Purttorii de angeni sunt tratai prin administrarea preparatelor ce stimuleaz elaborarea imunit ii . Starea de puurttor cu o

durat de pn la 3 luni se coonsider acut iar de durat mai lung cronic .( tifos abdominal , febre paratifoide , dezinterie ,
holera , meningita, scarlatina , etc. )

.8.

Rolul mediului ambiant i soial n infecie

Rolul mediului ambiant i social n infecie (condiiile economice, condiiile de via, catastrofe ecologice sau naturale,
progresul n igiena public, etc).
Maladii sociale: tuberculoza, pediculoza (tifosul exantematic), sifilisul, legioneloza, etc.
Rolul macroorganismului n procesul infecios. Rezistena nespecific a ma/o. Pentru meninerea coerenei
celulelor i esuturilor i pstrarea integritii sale ma/o pune n joc 2 categorii de procese aprute succesiv n cursul
evoluiei:
- Imunitatea (rezistena) natural, nnscut, nespecific dezvoltat filogenetic, asigurat de factori constituionali.
Rspuns maxim imediat, nespecific, antigen-independent. Asigur protecie contra microorganismelor n general.
- Imunitatea achiziionat, dobandita, specific s-a dezvoltat ontogenetic, antigen-dependent i antigen-specific
(contra unui mi/o particular), rspuns maxim peste cteva zile de la agresie, se caracterizeaz prin memorie imunologic.
Declanarea procesului infecios depinde de : reactivitatea organismului uman , de cantitatea i calitatea agen ilor
patogeni , de prezena materiilor necesare agentului pathogen , de starea imunitii, de influena ambianii i factorilor
sociali . n funcie de coraporturi acestor factori procesul infec ios se poate solda cu moartea agentului patogen , cu
moartea gazdei sau instituirea unor relaii de adaptare mutual ntre gazd i parazit . Reactivitatea organismului uman ,
capacitatea lui imunobiologic de a inactiva mi-o patogen se afl n func ie direct de ambian de condi iile ecologice i
sociale de caracterul muncii i alimentrii , de starea sanitaro igienic , etc.
Menstruaia , sarcina i naterea duc la mrirea sensibilit ii organismului femeii la bolile infec ioase
Subalimentaia duce la acutizarea tuberculozei , dezinteriei etc. Deficitul de proteine , glucide, lipide duce la diminuarea
sintezezi aticorpilor . Hipovitaminoza duce la inhibiia fagcitozei , apari ia cataractei , dezvoltarea leziunilor cutanate ,
afeciunilor streptococice , etc. Surmenajul fizic i intelectual duce la slbirea mecanismelor de aprare contra multor boli
infecioase . Hipertermia duce la slbirea org i scderea imunit ii . Rcirea contribuie la apari ia pneumoniilor i altor
boli . Factorii nocivi fizici , chimici, biologici de poluare a mediului ambiant submineaz sistemele de protec ie a
organismului . Radiaiile ionizante reduc capacitatea de protec ie a mucoaselor a sngelui a sistemului limfoido
macrofagic . Condiiile sanitaro-igienice proaste de munc i trai duc la afec iunea cilor respiratorii , afec iuni alergice ,
afeciuni ale pielii , etc.

9. Infecia experimental , etapele i importana practic

Se foolosesc : oarecele , cobaiul , iepurele. Metoda biologic de examinare const n infectarea animalelor pentru
obinerea (izolarea) culturilor de microorganisme , agen i cauzali ai bolilor cu studierea ulterioar a patogenit ii i
virulenii lor . Pregtirea animalelor ctre infectare include urmtoarele etape :
1. Alegerea animalelor animale se aleg , animale sntoase cu blana neted i lucioase , active , cu alimenta ie bun ,
de aceeai vrst , sex i greutate .
2. Marcarea animalelor mici ( oarecelor , obolanilor ) colorarea diverelor sectoare ale blnii sau prin aplicarea
semnelor de marcare la urechi . Pregtirea locului de inoculare se tunde prul apoi pielea se spal apoi se
dezinfecteaz cu alcool i tinctur de iod
3. Fixarea animalelor cu dispozitive speciale , masde fixare , cutii.
4.Instrumentele necesare pentru inocularea animalelor ( seringi demontate , ace , pensete .a.) se fierb 30 min .
Materialul patologic sau suspensia de microorganisme snt prelevate n sering.
Metodele de inoculare (depinde de tropismul agentului fa de anumite esuturi ale organismului )
Incocularea per os se efectueaz prin adugarea materialului de infecie n alimente sau ap potabil
Infectarea subcutanat la iepuri i cobai pe spate i abdomen 3.0 5.0 ml la oareci pe spate sau rdcina cozei 0.5 ml
. Se folosete pentru testarea toxinelor .
Injectarea intracutanat tegumentul depilat splat cu ap i uns cu glicerin se injecteaz cu 0.1-0.2 ml de produs. Se
folosete pentru testarea toxinelor dermonecrotice sau edematogene i testarea sensibilizrilor .
Inocularea percutan cu vrful unui bisturiu se fac zgreturi n piele pn la apari ia limfei fr a provoca sngerri ,
materialul de examinat se fricioneaz cu o baghet de sticl n pielea intact sau scarificat.
Injectarea intraperitoneal 1 ml la oareci i civa ml la cubai , n regiunea inferioar din stnga a abdomenului.

Injectarea intravenoas . La iepurai se puncioneaz vena marginala urechii , 2-5 ml . La oareci se punc ioneaz una
din cele patru vene ale cozii - 0,5 ml
Injectarea intramuscular . La cobai n masa muscular a coapsei , la iepura i n muschii cefei
Inoculri oculare n sacul conjunctial sau intracornean
Injectarea intracerebral craniul se puncioneaz la jumtatea distanei dintre unghiul extern al ochiului i inser ia
pavilionului urechii , acul ptrunde 3-6 mm , 0,03 ml
5. Supravegherea animalelor inoculate : se nregistreaz starea general , respira ia, temperatura , greutatea , tulburri
nervoase , leziuni la locul de inoculare . Examenul unor prelevate intravitan , de ex. Snge , examen anatomopatologice i
microbiologice , necroptice .
Tehnica necropsiei - sacrificarea prin ruperea mduvei spinale n regiunea cervical , prin comprimarea puternic i
brusc a gtului la oareci i cobai , prin embolizarea venoas la iepura i , prin metode chimice : cloroform , amital sodic.
Animalele sunt necropsiate dup maxim o or dup sacrificare :
1. Fixarea animalului pe o planet de lemn
2. Dezinfectarea animalului
3. Se face o incizie tegumentar submentopubioan i care se prelunge te spre rdcina fiecrui membru , se decoleaz
pielea .
4. Se inspecteaz esutul celular subcutanat , masele musculare , ganglionii limfatici .
5. se deschide cavitatea peritoneal i cavitatea toracic
6.Se puncioneaz cordul pentru hemocultur
7.se prelev pentru examinare splina , ficatul , rinichii , plmnii
8. Se examineaz macroscopic , se nsemneaz pe medii adecvate i se efectueaz amprente pentru microscopie
9. se incinereaz animalul
10. Se dezinfecteaz instrumentarul