Sunteți pe pagina 1din 18

Tema 9

1.Notiune de infectie,proces infectios si boala


infectioasa.Particularitatile bolii infectioase
INFECIAtotalitatea proceselor biologice care se produc n macroorganisme n
urma penetrrii microorganismelor patogene sau potenial patogene
PROCESUL INFECIOSinteraciunea dintre microorganisme i macroorganisme n
diverse condiii ale mediului ambiant. Manifestarea lui poate fi inaparent/
asimptomatic sau simptomatic.
BOALA INFECIOASmanifestarea suprem a procesului infecios, se
caracterizeaz prin diferite simptome, determinate de efectele metaboliilor
microbieni (toxine, enzime, etc) sau de reacia imun a gazdei la prezena bacteriei.
Particularitatile bolii infectioase:
1.Sunt provocate de ageni patogeni
1 2.Contagiozitate (capacitatea de a se transmite de la o surs la o persoan
receptiv)
2 3.Specificitate (un agent provoac o infecie, ex.: Clostridium tetanieste
agentul tetanosului)
3 4.Evoluie clinic stadial
4 5.Imunitate la reinfecie(durat variabil)

2.Rolul microorganismului in procesul


infectios.Patogenitatea si virulenta.Unitatile de virulenta
Relaiile dintre microorganism i macroorganism gazd:
1.Comensalism(flora bucal, intestinal, etc)
2.Parazitism (prezena mi/o este nociv pentru ma/o)
Orice microorganism parazit capabil s provoace o infecie este considerat
patogen
Exist 2 tipuri de microorganisme patogene:
1.Obligat patogene, care infecteaz persoane imunocompetente cu doze mici
2.Potenial patogene, care pot cauza infecie numai cu doze mari sau la persoane
imunocompromise (deseori fac parte din flora normal a organismului)
Microorganismele patogene pot fi gzduite uneori fr a provoca maladia, astfel de
persoane sunt numite purttori sntoi de germeni

Microorganismele patogene se caracterizeaz prin:


1 Patogenitatecapacitatea unei bacterii de a declana infecia. Este un
caracter de specie determinat genetic (cromozom, plasmide,
bacteriofagi).
Virulengradul de patogenitate alunei tulpini(msur cantitativ a
patogenitii). Se apreciaz prin infectarea animalelor de laborator cu
cantiti diferite de mi/o.
1 Unitile de virulen:
2
3
4
5
1
2

-DLMnumrul de bacterii necesar pentru a ucide 80% din animalele infectate


-DL5050% letalitate
-DCL 100% letalitate
-DI50/DIprovoac boala la 50%/ 80%animale
Modificarea virulenei:
-Amplificarea prin transfer i recombinare genetic, condiii optime pentru
cretere
-Reducerea(atenuarea) prin meninerea bacteriilor n condiii nefavorabile (t,
factori chimici)

3.Factorii patogenitatii: structurali,enzimele de


patogenitate,toxinele
Factorii de patogenitate ai bacteriilor:
I.Factori structurali (somatici)
1.Adezine - glicocalixul, proteine de adeziune ale peretelui celular.
1 2.Proteine ale sistemelor de secreie
2 3.Capsulaantifagocitar
3 4.Antigenul O-antifagocitar
4 5.Peptidoglicanul(adeziune, agresie tisular)
5 6.Acizii teichoici/lipoteichoici(adeziune, toxicitate)
6 7.Proteina A la stafilococi
7 8.Proteina M la streptococi
II. Enzime de patogenitate
1 -Plasmocoagulaza
2 -Fibrinolizina
3 -Hialuronidaza
4 -Colagenaza
5 -Neuraminidaza
6 -Proteaze
7 -Dezaminaze
8 -Decarboxilaze
9 -Fosfataze, etc
III. Toxine bacteriene (responsabile de leziuni)
-Exotoxine(proteice, secretate n mediul extracelular)
-Endotoxine(LPZ, legate de celula bacterian)

4.Toxinele microbiene si caracteristica lor.Obtinerea.


Toxine microbiene (responsabile de leziuni)
-Exotoxine(proteice, secretate n mediul extracelular)
-Endotoxine(LPZ, legate de celula bacterian)
Caracteristica exotoxinelor:
1 -Proteine produse de bacterii G+/G2 -Pot fi secretate n mediul extern, eliberate n spaiul periplasmic sau fixate
pe suprafaa celulei
3 -Termolabile (excepie enterotoxina stafilococic i toxina termostabil
4 -Hidrosolubile i acioneaz la distan
5 -Efectul se instaleaz dup o perioad de incubaie
6 -Manifest tropism (specificitate de aciune)
-Toxicitate nalt
1 -Exotoxinele sunt imunogene
Tipurile de exotoxine:
I.Toxine citolitice
Deregleaz membranele celulare prin aciune enzimatic (fosfolipaza /lecitinaza,
sfingomielinaza) sau prin formarea porilor (streptolizina )
II.Toxine citotoxice, de tip A-B (acioneaz n interiorul celulei). Ex.: toxina
difteric, botulinic, tetanic, holeric, etc
Obinerea exotoxinelor bacteriene
1 -Cultivarea tulpinii toxigene n mediu lichid
2 -Filtrarea culturii pentru separarea toxinei
3 -Purificarea toxinei
4 -Concentrarea toxinei
5 -Determinarea activitii toxinei

Caracteristica endotoxinelor:
-Reprezint complexe LPZ din peretele celular G-(cel mai toxic component
este lipidul A).
1 -Este eliberat n urma lizei bacteriilor
2 -Termostabil
3 -Ne-imunogen
4 -Nu poate fi transformat n anatoxin
5 -Efectul se manifest imediat
6 -Determin efecte generale, indiferent de provenien

5.Patrunderea si raspindirea microorganismelor in


microorganism
Sursa de infecie: omulbolnav, reconvalescent, purttor sntos (infecii
antroponoze) sau animalele (infecii zooantroponoze)

Mecanismele de transmitere
1.
2.
3.
4.

Prin contact (direct, indirect)


Fecal-oral (alimentar, hidric, etc)
Aerogen (aer-praf, aer-picturi)
Transmisiv(prin intermediul vectorilor)
1 Microbii penetreaz prin tegument, mucoase sau direct n snge .
2 La poarta de intrare bacteria ader la celule i se multiplic local , formnd
focarul primar de infecie. Infecia poate rmne localizat sau poate s se
rspndeasc pe cale limfatic, sanguin, pe calea nervilor. n esutul
afectat microorganismele se multiplic i provoac leziuni direct prin
intermediul enzimelor sau toxinelor .
3 Microorganismele se elimin cu diferite secrete sau excrete ale
macroorganismelor, prin care are loc contaminarea altor gazde sau obiecte.

6.Dinamica evoluarii bolii infectioase


Dinamica evoluiei bolii infecioase
I. Perioada de incubaie(de la penetrarea microorganismelor pn la apariia
primelor simptome). Durata variabil (ore ani). Microbul se adapteaz, se
multiplic, produce toxine, enzime, etc.
II. Perioada de invazie (de debut).Apar primele semne clinice, nespecifice (febr,
frison, inapeten, astenie, etc). Durata 2-3 zile.
III. Perioada de stare(a manifestrilor clinice specifice). Durata variabil.
IV. Perioada terminal(convalescen i vindecare, sau cronicizare sau deces)

7.Criteriile de apreciere a rolului etiologic al agentului


causal.
Criteriile de apreciere a rolului etiologic al agentului cauzal n survenirea
infeciilor specifice :
1 1.Bacteria trebuie s fie prezent la toate persoanele bolnave
2 2.Bacteria trebuie s fie izolat de la bolnav i meninut n cultur pur
3 3.Cultura pur inoculat la un voluntar sau la un animal experimental trebuie
s reproduc simptomele bolii
4 4.Aceeai bacterie trebuie s fie reizolat de la voluntarul sau animalul
infectat

8.Formele infectiei.Persistenta microorganismelor.

Dupa pozitia pe care o au fata de organismul respectiv, agentii patogeni se subdivid in trei categorii:

paraziti obligatorii; traiesc si se multiplica numai in organism, ei nu pot trai in afara organismului decit o perioada
foarte scurta;

paraziti conditionati (epifiti); traiesc in mod obisnuit pe tegumente si mucoase, fara a produce tulburari generale
cit timp organismul isi pastreaza integritatea anatomica si functionala;

paraziti facultativi; se gasesc in mediul ambiant si ajung accidental in organism, unde pot dezvolta procese
patologice.

9.Rolul mediului ambiant si social in infectie


1

Rolul mediului ambiant i social n infecie(condiiile economice, condiiile de


via, catastrofe ecologice sau naturale, progresul n igiena public, etc).
2 Maladii sociale: tuberculoza, pediculoza (tifosul exantematic), sifilisul, etc.
Modificindu-se actiunea factorilor de mediu in sens favorabil sau defavorabil,
rezistenta organismului la infectii creste sau scade. Actiunea nefavorabila a
mediului are efecte mai pronuntate asupra rezistentei organismelor tinere.
Vorbind despre rolul factorilor climatici in evolutia epizootiilor, se deosebesc:

elemente extraterestre; radiatia solara totala, radiatia luminoasa, durata zilei;


elemente meteorice ale aerului, solului si apei, temperatura , presiunea atmosferica,
nebulozitate, vint, precipitatii, umiditatea atmosferica, etc.
elemente telurice; radiatii emise de pamint, emanatiile radioactive, praful etc.

10.Rezistenta nespecifica a macroorganismului.Factori


nespecifici: de bariera,celulari,umorali.Rolul florei normale
in rezistenta nespecifica.
Pentru meninerea coerenei celulelor i esuturilor i pstrarea integritii sale
macroorganismele pune n joc 2 categorii de procese aprute succesiv n cursul
evoluiei:
-Rezistena nespecific, nnscut dezvoltat filogenetic, asigurat de factori
constituionali. Rspuns maxim imediat, nespecific, antigen-independent
-Imunitatea (rezistena specific)s-a dezvoltat ontogenetic, antigendependent i antigen-specific, rspuns maxim peste cteva zile de la agresie, se
caracterizeaz prin memorie imunologic.
Rezistena nespecific
Rezistena nespecific este asigurat de factori tisulari (de barier), factori celulari
i umorali.
1.Factori tisulari (de barier)
1 -Tegumentul(barier mecanic -integritatea, descuamarea stratului cornos;
barier biologic -flora normal, chimic -pH acid al tegumentului)
2 -Mucoasele(barier mecanic -integritatea, micarea cililor, scurgerea
secretelor; chimic -secreiile digestive, pH acid al urinei; biologic -flora
normal; barier enzimaticenzimele din secreiile mucoaselor, ex.:
lizozimul, lactoferina)
2.Factori celulari
-Reacia inflamatoare. mpiedic multiplicarea i rspndirea microbilor i asigur
distrugerea lor.

3.Factori umorali

Reactivi de faz acutorganismul supus unei agresiuni reacioneaz prin sinteza


i secreia crescut a unor proteine plasmatice: inhibitori de proteaze, proteine ale
sistemului complement i ale coagulrii, proteina C reactiv, protrombina,
fibrinogenul, etc. Acestea mresc rezistena gazdei, limiteaz leziunile tisulare si
favorizeaz vindecarea
1 Complementulreprezint un sistem complex de proteine termolabile
solubile i membranare. Se ntlnesc n plasma sangvin, limf i exsudate.
Nu se detecteaz n saliv, lacrimi, urin, transsudate.

11.Celulele fagocitare.Fagocitoza.Determinarea activitatii


fagocitilor si a indicelui fagocitar.Rolul fagocitozei in
imunitate.Determinarea lizozimului in saliva,ser
Celulele fagocitare (fagocitele)
1 -Leucocitele PMN
2 Macrofagele (monociten snge, macrofage fixecel. Kupffer, macrofage
alveolare, osteoclaste, microglia, macrofage din splin i ganglioni limfatici).
1 Pentru a interveni, fagocitele trebuie s recunoasc bacteriile ca
particule strine.
2 Exist molecule solubile i membranare care pot recunoate
componente bacteriene:
3 1.Solubile-lectinele care se pot lega de manoza din peretele celular
bacterian; proteine plasmatice ce leag LPS bacterian
4 2.Membranarepe macrofage exist receptori de manoz. TLR pot
recunoate diferite molecule bacteriene: LPZ, peptidoglicanul,
lipoproteine, acizi lipoteichoici, flagelina.
Ali receptori: receptori pentru Fc al IgG, pentru complement (CR1, CR3, CR4),
pentru interferon, limfokine, lectine, fibronectin, .a.
1 -Fagocitoza(component al reaciei inflamatoare). Asigur captarea i
distrugerea substanelor strine, inclusiv a mi/o, celulelor infectate, celulelor
tumorale.
Lizozinul este o substanta cu proprietati de enzima, avind o actiune litica asupra bacterilor
saprofite (Flemming); intirzie dezvoltarea multor bacterii, gasindu-se in cantitate mai mare in
lacrimi, cartilaje, urina, ser sanguine. Substanta bactericida prezenta in saliva, indicata ulterior
ca lizozim, a facut obiectul multor cercetari. S-a stabilit ca saliva prelevata de la om dimineata
are putere bactericida mai ridicata decit aceea recoltata in alte momente ale zilei.

Tema 10
1)Notiunea de imunitate,organele centrale si periferice ale sistemului
inmun.Celulele imunocompetente.Complexul MHC

noiunea de imunitate definete starea de rezisten a organismului fa de un


agent patogen infecios, n situaia n care sunt ndeplinite condiiile pentru
apariia unei maladii infecioase
Organele centrale (primare) ale SI mduva osoas i timusul la vertebrate
(ficatul n perioada embrionar), bursa Fabricius la psri. Apar primele n timpul
vieii embrionare.
Organele periferice (secundare) ale SI - Ganglionii limfatici; splina;
Formaiunile limfoide ale mucoaselor digestive i respiratorii, esutul limfoid asociat
tegumentului
CELULELE SISTEMULUI IMUN : limfocite, celule prezentatoare de Ag(CPA), celule
efectoare
Complexul MHC

Moleculele MHC reprezint un ansamblu unic de glicoproteine exprimate pe


suprafaa celulelor organismului, care sunt veritabili markeri / antigene de identitate
ai fiecrui individ.
2) tipuri de imunitate.imunitate ereditara si dobindita,umorala si celulara.
Tipuri Imunitate :ereditara si dobindita
Ereditar Poate fi absolut sau relativ.
Dobndit poate fi a)activa : naturala(postinfectioasa) si artificial ( in urma
vaccinarii) b) pasiva: naturala( transplacentara,prin laptele matern) si
aritificiala( administrarea Ac/seruri immune sau limfocite)
Imunitate umoral, exercitat prin anticorpi (Ac, Ig), produse de limfocitele B. Se
secreta in sange si lichide biologice, neutralizeaza si elimina microbii extracelulari si
toxinele lor.
Imunitate celular, eficienta in eliminarea parazitilor intracelulari sau a celulelor
tumorale. Este exercitat prin intermediul limfocitelor T (citotoxicitate directa,
activarea macrofagelor, celulelor NK, secreia citokinelor)
3)Antigenele si caracteristica lor.Antigene complete si
incomplete.Izoantigene.Autoantigene
ANTIGENE substane strine (non-self) de natur endo- sau exogen capabile s
declaneze un rspuns imun (umoral, celular, toleran imunologic, memorie
imunologic, paralizie imunologic).
Proprietile de baz ale Ag: Imunogenitatea capacitatea Ag de a fi
recunoscut ca strin i de a induce rspuns imun specific ;Antigenitatea
(specificitatea) capacitatea Ag de a interaciona specific cu Ac sau cu receptorul
pentru Ag complementar al limfocitelor sensibilizate
Ag complete sunt antigene care poseda imunogenitatea si antigenitatea.
Antigenele incomplete (haptenele) posed antigenitate dar sunt lipsite de
imunogenitate.
Izoantigene: sunt antigene de grup, specifice doar unei pri a popula iei, de ex. antigenele
grupelor sanguine (Rh, A, B).
Autoantigene: antigenele proprii de histocompatibilitate, care sub aciunea unor factori
fizici, chimici sau biologici, se modifica in autoantigene generatoare ale conflictelor autoimune;
4)Structura antigenica a celulei bacteriene si a virusurilor.
Structura antigenic a celulei bacteriene
I.
Ag structurale (Ag O/R somatice, LPZ, termostabile; Ag H flagelar, proteic,
termolabil; Ag K capsular, termovariabil; Ag F fimbrial)
II. Ag solubile (enzime de
patogenitate, exotoxine)
Antigene virale: proteine/GP de invelis, nucleoproteine, enzime

5. Anticorpii (imunoglobulinele), structura lor. Clasele de


imunoglobuline. Functiile lor biologice. Anticorpii completi
si incompleti.
Anticorpii sunt molecule de natur proteic produse n limfocite, capabile s recunoasc o particul strina
de organism, denumit antigen, i s declaneze o reac ie imunologic, care are ca rezultat ndeprtarea
respectivei particule.

UNITATEA STRUCTURALA a anticorpilor este monomerul. Un monomer este


constituit din 2 lanuri glicoproteice identice uoare L (Light) i 2 catene grele H
(Heavy), legate ntre ele prin puni disulfidice.
Se disting 5 clase de Ig: Ig G, Ig A, Ig M, Ig D, Ig E
Ig G Sunt unicele Ig capabile s traverseze bariera placentar. Manifest
activitate opsonizant, antibacterian, antitoxic, antiviral
Ig A Asigur protecia mucoaselor, blocnd ataarea bacteriilor i virusurilor de
receptorii mucoaselor.
Ig M au rol in aprecierea stadiului unei infectii.
Ig D particip la eliminarea limfocitelor B care produc autoAnticorpi
Ig E Eficiente n afeciuni parazitare

Anticorpi incompleti- Anticorpii, de obicei IgG, care, n timp ce se leaga la

antigenele prezente pe suprafata celulelor roii din snge sau bacterii, nu provoac
aglutinare.
Anticorpi completi- Anticorpii, care, n timp ce se leaga la antigenele prezente
pe suprafata celulelor roii din snge sau bacterii, provoac aglutinare.

6. Raspunsul imun. Elementele implicate in raspunsul


imun. Interactiunea dintre T si B limfocite si
macrofagi(CPA) in raspunsul imun. Consecintele
raspunsului imun.
Raspunsul imun este un proces complex ce are loc n organele limfoide secundare i
prevede implicarea mai multor cellule, cum ar fi limfocite T, B, i a unor substane
solubile(citochine).
ntlnirea Ag cu CPA, T-, B-limfocite. Are loc n organele limfoide secundare, dupa
care are loc recunoasterea specifica a Ag, asigurata de limfocitele B si T. Apoi
urmeaza Activarea, proliferarea i diferenierea T sau B limfocitelor n celule
efectoare i celule B sau T memorie, pentru ca la urma sa se realizeze efectul de
neutralizare.
Consecinele unui rspuns imun:
- Imunitate (umoral, celular)
- Hipersensibilitate
- Toleranta imunologica
- Memorie imunologica
- Paralizie imunologic

7.Raspunsul imun de tip umoral si de tip celular.


Raspunsul imun primar si secundar. Memoria imunologica.
Toleranta imunologica. Paralizia imunologica
Raspunsul imun umoral

Raspunsul imun umoral consta in producerea de Ac specifici si intervine in:


Distrugerea bacteriilor extracelulare
Neutralizarea virusilor
Inhibarea toxinelorD
El asigura eliminarea Ag exogene si se caracterizeaza prin productia crescuta de Ig
specifice pentru Ag (epitopii) care au declansat generarea de Ig.
RASPUNSUL IMUN CELULAR
Rolul sau este de a elimina microbii care pot supravieui n vacuole fagocitare sau n
citoplasma celulelor infectate. Acest tip de imunitate este asigurat de limfocitele T
Rspunsul umoral primar la primul contact cu Ag, coontine 4 faze:
I faz de laten dureaz 4-7 zile, pn la apariia primilor Ac. In acest timp are
loc recunoaterea, degradarea Ag, diferenierea T,B limfocitelor
II faz logaritmic Titrul Ac crete, atingnd max n a 10-15 zi. Iniial are loc
producerea Ig M, peste 4-5 zile - IgG sau alte izotipuri de Ig
III faz de producere maxim a Ac Durata variaz n funcie de Ag
IV faz de diminuare a titrului de Ac (declin) n cazul Ag proteice dureaza
sptmni,
Rspunsul umoral secundar are loc la un contact repetat cu acelai Ag
Este asigurat de LB-memorie .Este caracterizat printr-o perioad de laten scurt
(ore) ,Ascensiune rapid a titrului Ac . Are o afinitate crescut a Ac fa de Ag si
Produce anticorpi Ig G.
Memoria imunologica este capacitatea sistemului imun de a elabora raspuns
mai rapid, mai intens si mai eficace la intalniri repetate cu acelasi Ag.

Toleranta imunologica este absenta raspunsului imun la antigene proprii. Este

determinata de inactivarea si eliminarea limfocitelor autoreactive in procesul de


maturizare a limfocitelor T si B.
Paralizie imunologica acel moment cind sistemul imun nu mai poate elabora un
raspuns imun, din cauza anumitor factori.

8. Particularitatile imunitatii in infectiile bacteriene,


virale. Imunitatea antitoxica, antitumorala si transplant
Particularitati:

- Celulele specifice ale sistemului imunitar poart pe suprafaa lor un numr mare
de receptori membranari
- Capacitatea de a rspunde la toate antigenele pe care virtual le poate ntlni n
natur
- Memoria imunologic
-Aparare contra infectiilor
-Recunoasterea tesuturilor si proteinelor straine si raspunsul la ele
- Protectie contra tumorilor
Imunitatea antitoxica este capacitatea specifica a organismului de a se apara
de agresorii toxici.

Imunitate antitumorala este capacitatea specifica a organismului de a se


apara de factorii agresori ce pot duce la tumori.

Tema 11
1) Metoda serologica de diagnostic.Esenta.Seroidentificarea si
serodiagnosticul.Mecanismul reactiilor antigen-anticorp in vitro.
Met.serologica au ca scop punerea in evidenta a anticorpilor specifici
indreptati impotriva unui agresor microbian/viral,astfel demonstram
presenta/existenta unei infectii.
I Seroidentificare: Detectarea i dozarea Antigenului cu ajutorul Anticorpilor
specifici cunoscui.
Pot fi utilizate dou surse de Ac: Ac monoclonali, absolut omogeni, dar care
recunosc doar un singur epitop, i Ac policlonali, ce se conin n seruri
imune(antiseruri), care permit legturi de
aviditate nalt cu Ag.
II. Serodiagnostic: Detectarea i titrarea Ac din serul bolnavilor (component
necunoscut) fa de un Ag specific cunoscut (coninut n diagnosticuri).Unele
reacii Ag-Ac se manifest direct i pot fi observate de
experimentator:aglutinarea,liza (hemoliz, bacterioliz, etc).
Mecanismul reactiilor Ag-Ac in vitro:
Reacia Ag-Ac este determinat de interaciunea specific dintre epitopii
Antigenului i paratopii Anticorpilor. n acest proces intervin patru tipuri de
legturi: legturi de hidrogen, legturi electrostatice,forele Van der Waals i
legturi hidrofobe.Interactiunea Ag-Ac are loc in 2 etape:
I. Faza specific: are loc interaciunea dintre Ag i Ac specific
corespunztor.Este un fenomen rapid, invizibil, comun pentru toate reaciile
Ag-Ac. Decurge la temperatura de 37 C, n prezena unui electrolit (sol.
fiziologic).
II. Faza nespecific, vizibil a uniunii Ag-Ac,se manifest prin precipitare,
aglutinare,
liz, etc - fenomene determinate de anumite condiii (valena Ac,
dimensiunile Ag, etc).
2)Reactia de aglutinare:Princiupiul,mecanismul,componentele
reactiei.Tehnica de efectuare.Analiza si interpretarea rezultatelor.

Aglutinarea-este o reactie antigen-anticorp de agregare, n care antigenul


este reprezentat de cellule /fragmente de celule bacteriene n suspensie
(antigen particulat). Sub aciunea
anticorpilor specifici, complexele imune antigen-anticorp formeaz reele
tridimensionale n
prezenta unor electrolii din mediu i n anumite condiii de temperatura i
pH, constituind aggregate vizibile. Reactia de aglutinare se foloseste n
identificarea unor bacterii pe baza proprietilor antigenice, ct i pentru
evidenierea anticorpilor aglutinani din serul de bolnav.
Tehnici de efectuare a reaciei de aglutinare:
1. Aglutinarea pe lama. Se folosete preponderent n diagnosticul direct
bacteriologic ,
pentru identificarea rapid pe baza proprietilor antigenice a unor tulpini
izolate din produsul
patologic i mai puin n diagnosticul indirect serologic.
Aglutinarea pe lama d relaii de ordin calitativ, evideniind o coresponden
ntre serul
imun folosit i antigenul de identificat. Este o reacie de orientare i se
continu cu o reacie de
aglutinare n tuburi pentru confirmare. Reactia pe lama Se amesteca o
picatura de ser si o picatura de suspensie bacteriana (Ag). Lectura se face la
microscop sau cu ochiul liber. In
caz de reactie pozitiva apar conglomerate,iar lichidul se clarifica;in caz de
reactie negativa,
lichidul ramane tulbure.
2. Aglutinarea n tuburi se efectueaz de obicei n 6 eprubete n care se
realizeaz diluii
crescnde din serul imun standard sau din serul de cercetat.In aglutinarea
bacterian,exist dou tipuri principale de aglutinare: aglutinare O i
H.Reacia de aglutinare n tuburi se folosete n dou scopuri principale :
pentru identificarea unui microorganism (antigen) izolat dintr-o infecie i n
diagnosticul serologic al unei infecii pentru evidenierea anticorpilor din serul
de bolnav fa de un antigen standard.Cele mai importante reacii de
aglutinare folosite n diagnosticul serologic al bolilor infecioase sunt:reacia
Widal, n febra tifoid i febrele paratifoide, reacia Wright n bruceloz i
reacia Weil-Felix n tifosul exantematic . In eprubeta se amesteca serul si Ag
figurate (hematii,bacterii).Reactia pozitiva se manifesta prin formarea unui
sediment cu aspect de umbrela inversata la fundul tuburilor (peste 20-24
ore). Celulele neaglutinate se sedimenteaza la fundul tuburilor sub forma de
buton sau inel (reactie
negativa). Lectura se face cu ochiul liber sau folosind oglinda concava a
microscopului.
3)Reactia de precipitare. Principiul,mecanismul,componentele
reactiei.Tehnica de efectuare.Analiza si interpretarea rezultatelor.
este o reacie antigen-anticorp de agregare, n care antigenul este reprezentat de
macromolecule
n soluie coloidal. Punerea n contact a antigenului cu anticorpul corespunztor
duce la formarea unor
complexe antigen-anticorp care precipit atunci cand elementele ce particip n
reacie se gsesc n proporie optim.
Tipuri de reacii de precipitare:
1. Reacia de precipitare inelar
- se folosete n diagnosticul bolilor infecioase - reacia Vincent-Bellot i Ascoli
- n industria alimentar pentru a diferenia originea crnii sau a produselor de
carne date n comer

- n medicina legal pentru a identifica originea petelor de snge (specia de la care


provin)
2. Reacia de floculare
- este o reacie n care precipitarea apare prin amestecul antigenului cu serul imun
sub form de flocoane. Aceast reacie se utilizeaz n principal pentru titrarea
toxinelor microbiene i a serurilor antitoxice pornindu-se de la observaia c
flocularea apare prima dat n eprubeta n care exist proporie optim de antigen
i anticorp .
n diagnosticul sifilisului
3. Precipitarea n gel
utilizeaz gel de agar sau agaroz ca mediu n care unul sau ambele elemente care
intr n reacie (antigen i anticorp) difuzeaz.
- difuzia simpl (difuzeaz numai unul din reactani, cellalt gsindu-se nglobat n
mediul
de difuzie)
- difuzia dubl n care ambii reactani difuzeaz i formeaz linii de precipitare la
locul de
ntalnire
- difuzia n camp electric
- imunoelectroforeza (IEF) este o metod care asociaz principiul
electroforezei (EF) cu principiul difuziunii n gel
- contraimunelectroforeza
4) Reactiile de liza.Reactia de fixare a complementului RFC.
- este o reacie antigen-anticorp cu participarea complementului. Evidenierea
reaciei se face utiliznd sistemul hemolitic.
Componentele reaciilor de liz:
- Ag (celule bacteriene, hematii, etc)
- Ac (lizine - IgG i IgM)
- Complement ser proaspt de cobai sau ser de cobai liofilizat
Principiul reaciei: complexele Ag-Ac formate fixeaz Complementul i-l activeaz
pe cale clasic, provocnd hemoliza.Intensitatea hemolizei se apreciaz vizual (++
++) sau
prin msurarea densitii optice a hemoglobinei eliberate.Utilizarea practic a RHL:
pentru dozarea C, precum i n montarea reaciei de fixare a complementului.
REACIA DE FIXARE A COMPLEMENTULUI (RFC)
Este o reacie complex, constituit din 2 sisteme Ag-Ac i cu participarea C. n
RFC particip Ig capabile s fixeze C IgM i IgG. RFC se utilizeaz n diagnosticul
virozelor, infeciilor bacteriene, etc
Toate componentele RFC sunt utilizate n acelai volum fiind titrate n prealabil
pentru aprecierea dozelor de lucru.
Reacia se efectueaz n 2 etape utiliznd 2 sisteme.
I etap Sistemul de baz este constituit din Ag1 (diagnosticuri sau Ag
necunoscute), Ac1
(serul bolnavului sau serul imun) i complement n doza de lucru. Amestecul este
incubat 1h la 37 C sau meninut 16-18 ore la 4 C. Dac Ac se combin cu Ag
omolog va avea loc i fixarea C (efect frecvent invizibil).
II etap la sistemul de baz se adaug sistemul indicator (hemolitic), constituit din
hematii de berbec
(Ag2) combinate cu Ac specifici serul hemolitic (Ac2). Peste 1h incubare la 37 C
reacia este

terminat.Evaluarea rezultatelor dac complementul a fost fixat de primul sistem


Ag-Ac hemoliza nu se observ (rezultat pozitiv). Dac Ag1 nu corespunde cu
Ac1,complementul rmne disponibil pentru fixare pe sistemul indicator Ag2-Ac2,
provocnd hemoliza (rezultat negativ).

5) Reaciile de neutralizare a toxinelor i virusurilor(n vivo, n


vitro). Principiul, mecanismul i componentele reaciei. Tehnica de
efectuare. Analiza i interpretarea rezultatelor.
Aceast reacie depinde de capacitatea serului antitoxic specific s
neutralizeze exotoxina. Pentru aceast reacie este necesar ca materialul de
examinat n care se presupune prezena exotoxinei s se amestece cu ser
antitoxic, se pstreaz n termostat , iar apoi se introduc la animale.
Animalelor de control crora li se injecteaz filtratul materialului de
examinat neprelucrat cu ser. n cazul cnd are loc neutralizarea exotoxinei de
ctre serul antitoxic, animalele date supravieuiesc.
NB: n cazul unor boli infecioase de dezvolt o hipersensibilitate a
organismului fa de agenii patogeni i produsele lor metabolice, pe acest
fapt se bazeaz i probele alergice folosite n diagnosticul diferitor tipuri
deinfecii. Probele alergice pot fi n vivo sau vitro.
NB.n vivo- probele cutanate se fac direct la bolnav i se evideniaz alergia
de tip imediat i ntrziat. Alergenii se administreaz intracutanat n volum de
0,1 ml n regiunea median pesuprafaa antebraului. Peste 24 de ore se
citesc rezultatele. Alergenii neinfecioi se administreaz
intradermal,aplicativ pe piele sau percutan prin scarificare.
n vitro-se bazeaz procesele nu n organismul uman, dar n eprubet. n
prezent sunt elaborate teste dedeterminare a sensibilitii bazate pe
reaciile T i B ale limfocitelor, acestea reprezint reaciile de inhibare a
migraiei diferitor componente din snge. Pe lam se pun 4 picturi de snge
examinat, n una din picturi se adaug 2 picturi de mediu, iar n celelalte
cte o pictur de mediu i una de antigen examinat. Toate picturile se
amestec i se umpl capilarele de sticl care la un capt se sudeaz i sunt
centrifugate timp de 5 min.la 1000 rot/min. Astfel celulele sangvine se
depun n coloan dreapt, se sudeaz i captul opus i se introduc n cutia
Petri i apoi n termostat timp de 24 ore, temperatura de 37 C . Rezultatele
se citesc la microscop i se determin procentul de inhibiie dup formula:
nlimea coloanei de contrul- nlimea coloanei n experien/ nlimea
coloanei n experien * 100%
6) Reacii cu elemente marcate: teste imunoenzimatice,
radioimunodozarea, imunofluorescena, electrochemluminiscena.
Componentele. Tehnica de efectuare. Analiza i interpretarea
rezultatelor.
Reaciile serologice cu marcani sunt folosite pe larg n ultima perioad,
ntruct ne permit s obinem rezultate rapide, se remarc prin sensibilitate
deosebit i seaplic n special pentru diagnosticul expres al infeciilor
virotice i bacteriene.
Reacia imunoenzimatic- se bazeaz pe folosirea ca marcant al anticorpilor
a enzimelor capabile de a distruge un substrat cu formarea produselor de
colorare. Cele mai folosite enzime sunt peroxidaza, fosfataza alcalin.

Modificarea reaciei imunoenzimatice pe faz solid const n sorbia


antigenului sau anticorpului pe un oarecare material solid plus adaugarea
altor ingrediente a reaciei. Astfel anticorpii sau antigenii absorbii i menin
pe un termen lung specificitatea imunologic i capacitatea deinteraciune n
reaciile serologice.Reacia imunoenzimatic se caracterizeaz prin
sensibilitatea nalt i rapiditatea decitire a rezultatelor.
Radioimunodozarea- n acest caz antigenele sau anticorpii sunt marcai cu
izotopi radioactivi, este necesar aparatura radiometric special. Exist mai
multe metode ,dar cel mai des se folosete modificarea pe exponent solid.
Anticorpii sau antigenul se absorb pe exponent solid , precum suprafeele
plastinelor de godeuri, perle etc. i astfel i pstreaz mult timp capacitatea
de a reaciona n reaciile serologice. Radioimunodozarea se efectueaz pe
exponent solid prin trei metode: metoda concurent, inversat i indirect.
Imunofluorescena-are la baz folosirea fluoresceinizotiocianata( F.I.T.C) sau
a altor fluorocromi, chimic conjugai cu anticorpii.Anticorpii marcai i
pstreaz specificitatea imunologic i reacioneaz strict cu anumite
antigene. Complexele antigenelor cu anticorpii marcai se observ foarte
bine n microscopul luminiscent galben-verzui.Reacia
imunofluorescent( Coons) poate fi efectuat direct- prin folosirea serurilor
imunofluorescente fa de fiecare antigen studiat; indirect-folosirea a 2
antiseruri diferite; anticomplementar- se folosete atunci cnd complexul
antigen-anticorp este n stare de a fixa complementul, ultimele 2 au ca scop
folosirea unui singur ser luminiscent pentru studierea diferitor antigene,
ceea ce simplic reacia.
Testele electrochemiluminiscenta se bazeaza pe utilizarea unui complex
,care genereaza lumina electrochimic in legatura cu un ciclu de reactie
oxido-reducator. Avantajul initierii electrice a reactiei chemiluminiscente este
ca intreaga reactie poate fi precis controlata. Sunt disponibile trei principii
ale metodei:- principiul sandwich: initial proba pacientului este mixata cu
anticorpii cuplati cu biotina si anticorpii marcati cu Ruteniu conjugat.principiul competitiv: initial sunt mixate specimenul de analizat si antigenii
cuplat cu biotina; dupa prima incubare se adauga anticorpii conjugati cu
complexul de Ruteniu- principiul bridging este similar principiului
sandwich, dar este destinat deteciei de Anticorpi si include Antigenul
biotinilat si Antigenul marcat cu Ru.
7) Metode de tipizare molecular. Reacia de polimerizare n lan
(PCR-polimerase chain reaction), Multiplex PCR, Real time PCR,
masspectrometria. Principiile, mecanismele. Analiza i interpretarea
rezultatelor.
Reacia de polimerizare n lan PCR (polimerase chain reaction) are la baza o
tehnologie n vitro care imit capacitatea naturala de replicare a ADN i care
consta n generarea rapid a unor copii multiple a unei secvene
nucleotidice int (ADN sau ARN) dintr-o gen de interes sau un patogen
specific; produsul amplificat PCR este apoi detectat prin diverse metode.
Numarul de copii ale secventei int crete exponential cu fiecare ciclu de
amplificare, deoarece fiecare secven nucleotidic nou sintetizat
constituie o matri pentru o nou copie. Produsul PCR care reprezint o
copie a ADN/ARN inta original este denumit amplicon. Aceasta metod
permite detectarea cu specificitate foarte mare a unor concentraii foarte
sczute ale secvenei int.Reactia PCR se desfasoara in 3 etape:
1. Denaturarea 2. Hibridizarea primerilor3. Elongatia:

Reacie n lan a polimerazei Multiplex (Multiplex PCR) este o


modificare de reacie n lan a polimerazei, n scopul de a detecta rapid
eliminarile sau suprapunerile intr-o gena mare. Acest proces amplific
mostre de ADN genomic folosind mai multe primeri.
Real time PCR-este o tehnica de laborator n biologie moleculara
bazate pe reacia n lan a polimerazei (PCR), care este utilizat pentru
a amplifica i simultan detecta sau cuantifica o molecul de ADN
int.Procedura urmeaz principiul general al reaciei n lan a
polimerazei; cheia este faptul c ADN-ul amplificat este detectat ca
reacia progresiva n "timp real".
Masspectrometria- este o tehnic de analiz fizic pentru detectarea i
identificarea moleculelor de interes prin msurarea masei lor i
caracterizarea structurii lor chimic. Principiul su const n separarea
moleculelor de faza ncrcat cu gaz (ioni), pe baza raportului lor mas
/ sarcin (m / z)

Tema :12
1. Imunizarea artificiala active i pasiv
Imunizarea - procesul de inducere activ sau de conferire temporar de imunitate, prin administrarea diferitelor produse
imunobiologice.
Imunizare artificiala activa = stimularea organismului de a produce un raspuns imun prin administrarea unor Ag microbiene
(vaccinuri)
Imunizare artificiala pasiv = bazat pe ntroducerea n organism a unor preparate ce conin Ac specifici (seruri imune, Ig,
gamma-globuline)
2. Vaccinuri i clasificarea + Calendar
http://biblioteca.regielive.ro/cursuri/medicina/imunizarea-286693.html
Vaccinuri - produse biologice cu proprieti de imunogen, constituite din microorganisme vii sau inactivate, din componentele
lor sau din toxine modificate.
Fiind administrate induc o imunitate artificial activ IAA - (umoral, celular, mixt) fr s provoace efecte nocive.
Vaccinarea primar (de baz) confer organismului memorie imunologic.
Vaccinrile de rapel (revaccinarea) se utilizeaz pentru stimularea unui rspuns imun secundar, mai rapid si mai intens
Imunoprofilaxia o metod specific de prevenire colectiv sau individual a maladiilor infecioase, ce are la baz crearea
imunitii artificiale specifice.
Imunoterapia metode specifice de tratament prin intermediul vaccinurilor, serurilor imune.
Clasificarea vaccinurilor:
T R A D I I O N A L E (clasice) - Corpusculare (vii atenuate, inactivate) ; Subunitare (vaccinuri chimice, anatoxinele).
D E P E R S P E C T I V Sintetice, Ribosomale, Anti-adezive, Recombinante, Hibride, Nucleotidice.

3. Vaccin viu, inactivat, chimice, anatoxine.


1.Vaccinurile vii atenuate tulpini de bacterii sau virusuri vii cu virulena redus, dar cu capacitate imunogen pstrat.
Cile de obinere:
A. Selecia tulpinilor naturale cu virulena redus Vaccinul E (contra tifosului exantematic);
Vaccinul EV (antipestos);
Vaccinul Brucella N19 (antibrucelos).
B. Utilizarea mi/o nrudite genetic, avirulente pentru specia uman - (ex.: virusul vacciniei utilizat n profilaxia variolei)
C. Atenuarea dirijat a virulenei prin:
Factori fizici (cultivarea la t neadecvate vaccinul anti-antrax (42 C), vaccinul anti-pestos (16 C))
Cultivarea n prezena unor compui chimici nefavorabili (ex.: BCG obinut de Calmette i Guerin prin cultivarea
tulpinii de Mycobacterium bovis timp de 13 ani pe medii cu bil)
Prin factori biologici pasaje multiple pe animale sau pe culturi celulare (Pasteur a efectuat 133 pasaje a suspensiei de
creier de la cine turbat intracerebral iepurilor, obinnd un virus atenuat)
- Prin inginerie genetica (inactivarea genelor de patogenitate - mutaii la nivelul genelor de patogenitate)
Avantajele vaccinurilor vii:
Imunogenitate nalt, o inoculare unic induce imunitate solid i de lung durat;
Se administreaz pe cale natural (intranazal, per os, percutan, etc);
Induce imunitate local i general
Dezavantaje:
Complicaii postvaccinale (accidente alergice, efect teratogen);
Revenirea la forma virulent cu riscul bolii infecioase induse (ex.: poliomielit paralitic, etc);
Pericol de inducere a maladiei la persoane cu imunodeficiene (BCG-ita, etc);
Multiple contraindicaii;
Durat de pstrare limitat.
2.Vaccinurile inactivate (omorte) constau din culturi bacteriene sau virale nalt virulente inactivate prin cldur (60 C 1 or),
prin ageni chimici (formaldehid, fenol, aceton), radiaii, ultrasunet.
Exemple de vaccinuri inactivate: anti-tifoidic, anti-dizenteric, anti-choleric, anti-pertusic, anti-stafilococic, anti-gripal, antipoliomielitic, etc.
Avantaje : Exclud riscul infeciei post-vaccinale; Stabile la pstrare.
Dezavantaje:
Imunogenitate redus (sunt necesare inoculri repetate);
Durat limitat a imunitii 6 12 luni;
Eficacitate variabil; Necesitatea unei concentraii mari de Ag;
Administrarea prin injecii (stimuleaz slab sau deloc imunitatea local).
Obtinere:
1. Se izoleaza din prelevatul d ela bolnav bacteria cu semnificatie clinica
2. Se obtine cultura pura si se identifica bacteria izolata
3. Se replica abundant cultura pe geloza nutritive si geloza sange si peste noapte la 37 grade.
4. Se extrage cu pipeta Pasteur in solutie salina izotona fara a include impuritatile, Se ajusteaza densitate.
5. Se inactiveaza suspensia in baie de apa 60 grade o ora.

6.
7.

Se controleaza sterilitatea prin replicare in bulion 4 zile 37 grade, apoi se insamanteaza pe placa.
Se adauga fenol pt conservative. Si se elibereaza strict aseptic cu numele pacientului varsta etc.

3.Vaccinurile subunitare (acelulare, chimice) constau din componente antigenice majore, capabile s induc un rspuns imun
protector, extrase prin diferite metode din celulele bacteriene (digestie enzimatic, hidroliz cu acidul tricloracetic, etc).
Ex.: vaccinul anti-pneumococic, anti-meningococic, anti-hemofilus (conin polizaharide capsulare)
Anatoxinele sunt vaccinuri subunitare obinute din exotoxine bacteriene.
Etapele de obinere a anatoxinelor:
1. Cultivarea tulpinii toxigene n mediu lichid
2. Separarea exotoxinei prin filtrare
3. Tratarea cu formol 0,3-0,4 % timp de 3-4 sptmni la 39-40 C. Toxinele pierd toxicitatea, dar i pstreaz
capacitatea imunogen
4. Purificarea anatoxinei (salinizare cu sruri de amoniu, precipitare cu alcool...)
5. Concentrarea
6. Determinarea puterii anatoxinei n RN (floculare) cu seruri antitoxice specifice
7. Anatoxinele se utilizeaz n profilaxia specific a infeciilor cauzate de mi/o toxigene stimulnd producerea
antitoxinelor.
Exemple de anatoxine: difteric, tetanic, gangrenoas, botulinic, holeric, stafilococic, etc.
Avantajele vaccinurilor subunitare: sunt lipsite de efecte secundare; stabilitate la pstrare
Dezavantaje: Imunogenitate redus; Necesitatea inoculrilor repetate
Pentru sporirea imunogenitii vaccinurilor inactivate i subunitare se utilizeaz substane speciale adjuvani (minerali,
biologici)
I.
Adjuvanii minerali (hidroxidul de Al, fosfatul de Ca, emulsii uleioase) genereaz o reacie inflamatoare care reine
eliminarea Ag i favorizeaz prezentarea lui limfocitelor T
II.
Adjuvanii biologici (unele bacterii: Bordetella pertussis, Corynebacterium parvum, Mycobacterium tuberculosis, sau
componente bacteriene ex. ribosomi bacterieni ) induc expresia moleculelor de co-stimulare pe suprafata CPA,
stimuland aceste celule sa secrete citokine care vor activa limfocitele T.
4. Autovaccin
Autovaccinul - suspensie inactivata preparata din tulpina microbian izolat de la un bolnav i inoculat aceluiai bolnav pentru
stimularea imunitii specifice, formarea Ac
Indicat pacienilor care sufer de procese cronice: stafilodermii, streptodermii, candidoze, dizenterie cronica.
Pacienii hipo- i agama-globulinemici necesit administrri repetate sau cronice de Ac.
Ig obinuite se administreaz intramuscular, pe cale i/venos exist : gamavenin, sandoglobin.

5. Vaccin de Perspectiv
Vaccinuri sintetice: se obin prin sinteza polipeptidelor ce reprezint epitopii liniari (ex.: toxina choleric, virusul
poliomielitic). Sunt lipsite de efecte secundare.

Dezavantaje: dificil de identificat epitopii, imunogenitate foarte redus.


Vaccinuri ribosomale (Ag adsorbite pe ribosomi din tulpina de Mycobacterium bovis din vaccinul BCG)
Vaccinuri anti-adezive (din fimbrii sau mucopolizaharide de adeziune). Administrate pe mucoase stimuleaz imunitatea
local (sIg A)
Ex.: vaccinul antidizenteric, antipertusic
Vaccinuri recombinante (vaccinuri moleculare, sub-unitare): gene ce codific polipeptide imunogene sunt integrate prin
intermediul unor vectori (plasmide, fagi moderai) n cromosomul unor levuri, bacterii sau celule animale, care vor produce
polipeptidul vaccinant (ex.: vaccinul anti-hepatit B, anti-gripal)
Vaccinuri hibride constituite din vectori infecioi recombinani. Se obin prin inseria unor gene ce codific Ag vaccinante
(epitopi) n genomul unui vector viral sau bacterian, care ulterior se inoculeaz la persoanele imunizate.
Vectorii nu sunt patogeni, dar sunt capabili s se multiplice un timp ndelungat n organism, inducnd un rspuns imun mixt
(umoral si celular) contra produsului genei inserate i contra vectorului.
Ex.: vaccinuri contra hepatitei B, rujeolei, infeciei herpetice tip1 (vectori virusul vacciniei, adenovirusuri).
Vaccinuri nucleotidice Imunizarea genetic, bazat pe utilizarea ADN microbian.
Consta in imunizarea persoanelor cu ADN ce codeaza un Ag microbian inserat intr-o plasmida bacteriana.
Plasmida este captata de CPA ale gazdei si Ag este produs in interiorul CPA cu stimularea ulterioara a limf T si inducerea
imunitatii celulare.
Gena ce codific Ag vaccinant este introdusa n unele celule ale organismului (ex.: celule musculare).
Administrarea se face i/m sau prin bombardarea cu particule a tegumentului. ADN patrunde in celula musculara care va
sintetiza ulterior Ag. Se induce un rspuns imun umoral i celular puternic si de lunga durata.
Se afl n testare vaccinuri contra HIV i gripei, contra hepatitei B.
Avantaje: ieftine, eficace, lipsite de riscuri post-vaccinale
Temeri: mutaii oncogene, rspuns imun anti-ADN

6. Seruri imune. Clasificare


Serurile imune sunt preparate biologice ce conin Ac specifici fa de diferii ageni patogeni i produse ale acestora.
Dup provenien exist:
1.
Seruri imune omologe De la convalesceni;
De la voluntari imunizai activ (seruri hiperimune, specifice);
Din sngele donatorilor i snge placentar (seruri standarde, normale)
Avantajele serurilor omologe:
Nu provoac sensibilizarea organismului
Asigur o protecie de durat maxim (aprox. 30 zile)
Dezavantaje:
Pericolul transmiterii virusurilor hepatice, HIV, etc
Titruri variabile de Ac
Volum limitat

2.
Seruri imune heterologe, obinute prin hiperimunizarea animalelor (cai, cmile, lame)
Avantaje: titru dozat de Ac, lipsa pericolului de infectare cu HIV, virusuri hepatice, etc
Dezavantaje:
Sunt eliminate mai rapid (aprox. 7 zile)
Coninnd proteine strine, produc sensibilizarea organismului
Dup modul de aciune se disting:
1. Seruri antibacteriene (anti-meningococic, anti-antrax), ridic sensibilitatea bacteriilor la aciunea fagocitelor i
complementului. Se dozeaz n ml (seruri netitrate)
2. Seruri antivirale (ex.: ser anti-rabic). Neutralizeaz infeciozitatea virusurilor.
3.Seruri antitoxice (anti-difteric, anti-tetanic, anti-botulinic, etc). Neutralizeaz exotoxinele bacteriene (blocheaz
fixarea de receptorii celulari). Activitatea lor este apreciat prin titrare i msurat n UA (UI).
4. Seruri mixte (ex.: antigangrenos)

7.Seruri Antitoxice Antibacteriene


Serurile antibacteriene i antivirale se aplic contra unei serii de boli sub form de globuline i imunoglobuline (gamaglobuline): contra antraxului, pestei, variolei, rabiei, rujeolei, poliomielitei, hepatitei A, scarlatinei etc.
Serurile antitoxice sunt utilizate contra difteriei, botulismului, tetanusului, contra infeciei anaerobe, antidotul catre veninul
de arpe.

Imunoglobulinele din sngele uman se folosesc n scopuri profilactice contra rujeolei, poliomielitei, tusei convulsive,
hepatitei A, parotiditei epidemice, varicelei, scarlatinei, variolei i altor infecii.
Serurile imune native conin pe lng Ig i alte proteine ale sngelui (albumine) responsabile de reacii alergice.
Serurile imune purificate i concentrate sunt lipsite de albumine, care sunt eliminate prin procedee speciale (precipitare cu
sulfat de amoniu, prin digestie enzimatic, electroforez)
Imunoglobulinele (gamma-globulinele). Se obin din seruri omologe rafinate prin procedee care extrag numai gammaglobulinele i realizeaz o concentraie a Ig de 15-20 ori fa de serul nativ.
Ig normale sunt extrase din amestecuri de plasm de la sute-mii de donatori sau snge placentar. Se utilizeaz n seroprofilaxia
rujeolei, hepatitei A i n terapia pacienilor cu deficit umoral primar.
Ig hiperimune (specifice) se obin din seruri de convalesceni sau ale persoanelor imunizate (Ig anti-antrax, Ig antileptospirozic)
8. Modul de administrare, reactiile adverse si prevenirea lor.
Modul de administrare
Serurile imune omologe, Ig se administreaz n doz unic fr precauii
Serurile heterologe, administrate parenteral, pot provoca reacii adverse (reacii anafilactice, boala serului, febr).
Cauza: albuminele se comport ca un alergen
Combaterea reaciilor serice:
1. Utilizarea serurilor imune purificate i concentrate
2. Utilizarea Ig (gamma-globulinelor)
3. Anamneza pentru recunoaterea unei eventuale stri de sensibilizare
4. Efectuarea testrii pentru depistarea sensibilitii la serul heterolog. n acest scop se utilizeaz testul intradermic cu 0,1
ml din diluia 1:100 a serului prescris.
N.B! Dac testul este negativ (peste 20-30 minute reacie local pn la 9 mm) se ntroduce subcutan a doua doz de 0,1-0,5 ml
de ser nediluat. Peste 30-60 minute n lipsa reaciei se recurge la ntroducerea ntregii doze curative.
Dac testul este pozitiv (reacie local peste 10 mm) exist pericolul reaciilor alergice. n acest caz se recurge la metoda de
desensibilizare acut, propus de Besredca. Ea const n administrarea repetat, la interval de 20 min., a dozelor crescnde din
serul respectiv, la nceput diluat 1:100 subcutan, trecndu-se treptat la ser nediluat intramuscular.
Mecanismul: la ntroducerea dozelor mici de ser se evit acumularea cantitilor mari de substane biologic-active (histamin,
serotonin, bradikinin, etc), responsabile de declanarea anafilaxiei.
n caz de necesitate administrarea serului va fi nsoit de administrarea preparatelor anti-histaminice sau serul va fi
administrat sub narcoz (scoaterea din funcie a scoarei cerebrale).
9. Hipersensibilitatea
Hipersensibilitatea de tip imediat sau anafilactic mediat prin Ac de tip IgE
celulele efectoare: mastocitele, bazofilele, eozinofilele
necesit cel puin un contact sensibilizant anterior cu alergenul rspuns imun primar
contactele ulterioare cu alergenul sensibilizant rs imun secundar - desfurat n dou etape: faza precoce/ tardiv
Hipersensibilitatea de tip tardiv mediat prin limfocite T cu producere de leziuni tisulare importante

mediat de Ac de tip IgG sau IgM ndreptate mpotriva antigenelor de pe suprafaa celulelor somatice sau mpotriva
unor proteine ce intr n componena esutului conjunctiv

Ag pot fi de natur: endogen (proprii organismului)


exogen - haptene care se ataeaz suprafeelor membranare (ex. medicamente)

Ag membranare sunt recunoscute de ctre macrofage sau celule dendritice " internalizarea i procesarea Ag "
prezentarea ctre limfocite B " sintez de IgG sau IgM

Ig se leag de Ag de pe suprafaa celulelor individului " atacarea i distrugerea celulelor prin trei mecanisme
Activarea complementului formarea complexului de atac al membranei, care determin formarea unor canale
membranare " liza celular
Citotoxicitate mediat celular anticorp-dependent celulele citotoxice (celule NK), care prezint receptori Fc se leag
de regiunea Fc a Ac fixai pe diferite celule " liza celular
Anticorpi anti-receptor care se leag de receptorii sau moleculele fiziologice de suprafa ale celor mai importante celule
pot activa sau inhiba funciile normale ale acestora, fr activarea complementului
10. Alergeni microbieni
Alergenul - substanta antigenica (din afara organismului) capabila sa produca o reactie de hipersensibilitate din partea sistemului
imunitar;
Tehnici de testare cutanata:
-Tehnica prick-testului (test prin intepatura) modificata - se pune cate o picatura de alergen si din solutia martor pe antebrat
(flexori) si se introduce acul pentru prick-test, tinut paralel cu pielea, cu varful in picatura de alergen (sau control) in stratul
superficial al pielii, ridicand-o putin pe aceasta si apoi retragindu-1 (se repeta pentru fiecare alergen); se sterge apoi excesul de
alergen.
Identifica alergii la polen, mucegai, par de animale de companie, acarieni de praf si alimente
-Tehnica testului intradermic se efectueaza cu o seringa de tuberculina, introducandu-se strict intradermic 0,010,02 ml/alergen
(numai cei specificati a se putea efectua intradermic). Alergia la veninul de insecte sau penicilina.
-Patch test (test epicutanat) -alergenul este aplicat pe un plasture, care este apoi aplicat pe piele. Acest test este de obicei efectuat
pentru identificarea substantelor care provoaca dermatita de contact (latex, medicamente, parfumuri, conservanti, vopsele de par,
metale si rasini)

Citirea testelor se face dupa 1020 minute; eritemul si papula formate se apreciaza dupa un sistem standard.