Antioxidantii

UNIVERSITATEA BABE-BOLYAI
FACULTATEA DE CHIMIE I INGINERIE CHIMIC
ANALIZA UNOR ANTIOXIDANI UTILIZAI N COSMETIC

PRIN METODE CROMATOGRAFICE
REZUMATUL TEZEI DE DOCTORAT
CONDUCTOR TIINIFIC
DOCTORAND
PROF. UNIV. DR. TEODOR HODIAN
ANCA-MARIA JUNCAN
BASc., MSc., M.Pharm., MIM
Cluj-Napoca
-2011-
Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice
Cuprins
I. Introducere.....................................
PARTEA I
CONSIDERAII TEORETICE
II. Antioxidani n cosmetic....................................
II.1 Definiie...............................................
II.2 Clasificarea antioxidanilor......................................................
II.3 Consideraii pentru utilizarea antioxidanilor n formulrile cosmetice.................
II.3.1 Alegerea antioxidanilor n formulrile cosmetice...................................
II.3.2 Aplicaii n cosmetic: Concepte i formulri..............................................
II.4 Modul de aciune a antioxidanilor................................................................
II.4.1 Rncezirea i factorii care afecteaz rncezirea..........................................
II.4.2 Mecanismul de aciune al antioxidanilor..........................................
III. Metode de extracie a antioxidanilor utilizai n cosmetic................................
III.1 Extracia direct a antioxidanilor fr saponificarea grsimilor............
III.1.1 Extracia cu solveni organici...............................................
III.1.2 Extracia pe faz solid............................................
III.1.3 Extracia cu fluide n stare supercritic.......................................
III.2 Extracia Antioxidanilor dup saponificarea grsimilor.........................
IV. Metode de analiz a antioxidanilor utilizai n cosmetic...........................
IV.1 Analiza antioxidanilor prin cromatografie de gaze (GC)..................................
IV.1.1 Metode de analiz gaz cromatografice a antioxidanilor sintetici
utilizai n cosmetic...............................................................................................
IV.1.2 Metode de analiz gaz cromatografice a antioxidanilor naturali
utilizai n cosmetic...........................................................................................
IV.2 Analiza antioxidanilor prin cromatografie de lichide (LC).................................
IV.2.1 Analiza antioxidanilor utilizai n cosmetic prin cromatografie
pe strat subire.........................................................................................................
IV.2.1.1 Analiza antioxidanilor naturali prin TLC...................................
IV.2.1.2 Analiza antioxidanilor sintetici prin TLC...................................
IV.2.2 Analiza antioxidanilor utilizai n cosmetic prin cromatografie
de lichide de nalt performan (HPLC)................................................................
IV.2.2.1 Analiza antioxidanilor naturali prin HPLC..................................
IV.2.2.2 Analiza antioxidanilor sintetici prin HPLC..................................
1
2
2
5
6
6
9
10
12
14
15
15
16
17
18
19
21
22
23
29
30
30
33
33
34
37
PARTEA a II-a
CONTRIBUII ORIGINALE
V. Aplicarea metodei spectrometrice FTIR (ATR) pentru caracterizarea
unor produse cosmetice de tip anti-aging i a ingredientelor active cu
potenial antioxidant....................................................................................................
V.1 Materiale i metode...............................................................................................
V.1.1 Materiale.......................................................................................................
V.1.2 Metode..........................................................................................................
V.1.2.1 Analiza spectrometric FTIR..........................................................
V.1.2.2 Determinarea aciunii antioxidante prin metoda DPPH.................
V.1.2.3 Utilizarea metodei FTIR.
V.2 Rezultate i discuii................................................................................................
-2-
42
46
46
48
48
48
49
50
V.2.1 Date de referin privind compoziia cremelor i spectrele FTIR

specifice unor produse uleioase..............................................................................
V.2.2 Caracterizarea principalelor categorii de componente (ingrediente)
de tip emolient, emulgator, antioxidant prin spectrometrie FTIR.........................
V.2.3 Caracterizarea componentelor active hidrofile.............................................
V.2.4 Caracterizarea cremelor prin spectre FTIR generice i zone de
fingerprint..............................................................................................................
V.2.5 Activitatea antioxidant a cremelor investigate............................................
V.3 Concluzii................................................................................................................
VI. Analiza prin metode cromatografice a unor antioxidani sintetici i naturali
utilizai n produse cosmetice.....................................................................................
VI.1 Analiza prin cromatografie de gaze a antioxidanilor sintetici i naturali
din produse cosmetice..........................................................................................
VI.1.1 Determinarea simultan a antioxidanilor sintetici i naturali din
formulri cosmetice anti-aging prin extracie cu etanol urmat de analiza
GC-FID..................................................................................................................
formulri cosmetice anti-aging prin extracie cu amestec de solvent
organic acetonitril:metanol urmat de analiza GC-FID.........................................
VI.1.3 Determinarea simultan a antioxidanilor sintetici i naturali dintr-o
formulare cosmetic anti-aging prin prepararea probei cu metanol i
extracie cu diclormetan urmat de analiza GC-FID.............................................
VI.1.4 Determinarea simultan a antioxidanilor sintetici i naturali dintr-o
formulare cosmetic anti-aging prin prepararea probei cu amestec de
solvent organic i extracie cu diclormetan urmat de analiza GC-FID...............
formulri cosmetice anti-aging dup saponificarea grsimilor i extracie
cu amestec de hexan:acetat de etil urmat de analiza GC-FID.............................
formulri cosmetice anti-aging prin extracie cu metanol urmat de
analiza GC-FID.....................................................................................................
VI.2 Analiza alfa tocoferol acetatului dintr-o formulare cosmetic de tip antiaging conservat cu adititivi multifuncionali prin cromatografie de gaze
cuplat cu FID.............................................................................................................
VI.3 Analiza prin cromatografie de lichide de nalt performan a antioxidanilor
sintetici i naturali din produse cosmetice............................................................
formulri cosmetice anti-aging prin diluie cu amestec de solvent
organic acetonitril:metanol urmat de analiza HPLC/UV.....................................
formulri cosmetice anti-aging prin extracie cu metanol urmat de
analiza HPLC/UV..................................................................................................
VI.3.3 Determinarea simultan a antioxidanilor sintetici i naturali
dintr-o formulare cosmetic anti-aging prin diluie cu amestec de
tetrahidrofuran:metanol urmat de analiza HPLC/UV..........................................
VII. Concluzii finale..........................................................................................................
VIII. Bibliografie...............................................................................................................
ANEXE
-3-
50
54
60
62
64
65
67
74
74
88
100
107
114
123
138
149
149
162
171
180
188
CUVINTE CHEIE:
Produse cosmetice
Compui antioxidani
Analiza FTIR (ATR)
Cromatografie de gaze cu detecie cu ionizare n flacr (GC-FID)
Cromatografie de lichide de nalt performan cu detector UV-VIS (HPLC-UV/VIS)
-4-
I.
Introducere
O definiie ampl a produselor cosmetice include toate substanele i mijloace sau procedee
folosite n oricare mod, pentru a mbunti aspectul corpului uman [1].

n mometul de fa pe pia se gsesc produse, care nu numai cur, protejeaz i
hidrateaz, dar care i nnoiesc, refac i ntineresc epiderma. La ora actual maximul de atenie
este acordat utilizrii n formulrile cosmetice a vitaminelor i a antioxidanilor. Exist o
multitudine de studii a cror rezultate sugereaz beneficiul adus de aceti compui n industria
cosmetic [6].
n ultimii ani, piaa produselor cosmetice s-a mbogit cu numeroase produse de ngrijire a
pielii, care sunt evideniate n primul rnd prin prisma efectelor i aciunii antioxidante a acestora.
Aceste produse, care conin substane cu activitate antiradicalic, au fost create n primul rnd
pentru a satisface cererea unor produse n scopul tratamentelor i preveniei efectelor de fotombtrnire [6]. Utilizarea topic a acestora este perceput a fi foarte benefic; cnd aceste produse
sunt aplicate pe suprafaa pielii, compuii antioxidani se concentreaz nti n stratul cornos, care
este esutul cel mai expus stresului oxidativ. n cele mai multe produse din aceast categorie
caracterul i capacitatea antioxidant este dat, nu doar de o singur substan activ, ci de o
asociere de principii active diferite.
Vitaminele i antioxidanii sunt foarte rspndii ca i ingredieni primari n formulrile
cosmetice. Exist cercetri tiinifice semnificative referitoare la aceste produse cosmetice
bioactive, care sugereaz un beneficiu clar al consumatorului. Pentru ca orice ingredient s fie
benefic, acesta trebuie s fie stabil n etapele de producie, depozitare i utilizare, s nu fie toxic
pentru consumatori i s prezinte activitate biologic, dup aplicarea pe suprafaa cutanat.
Cercetrile de pia indic o mare popularitate i o satisfacie aparent a consumatorilor vis-a-vis de
produsele care conin antioxidani i vitamine. Piaa produselor cosmetice ofer consumatorului
multe produse care conin n formulare componente active hidro- sau liposolubile, folosite pentru
protejarea pielii mpotriva stimulilor oxidani. Prin acest mecanism, produsele ar trebui s previn
foto-mbtrnirea i s menin pielea ntr-o condiie corespunztoare din punct de vedere cosmetic.
O diversitate de substane cu structur chimic mai mult sau mai puin complexe au fost
identificate ca avnd aciune antiradicalic i au fost introduse pe pia pentru formularea de
produse anti-ageing [9].
Antioxidanii din clasa celor sintetici, ca butilhidroxitoluen (BHT), butilhidroxianisol
(BHA), sau antioxidanii naturali, ca tocoferolii (Vitamina E), sunt defini ca orice substane care
inhib sau ntrzie o schimbare oxidativ, cnd concentraia acestora este mai sczut dect cea a
substanei cosmetice, care este oxidat [10].
Antioxidanii sintetici sunt aditivi cosmetici recunoscui, dar dispoziii i reguli
-5-
internaionale tind s fondeze i s stabileasc din ce n ce mai multe restricii privind utilizarea
acestora i se observ cu uurin preferinele consumatorilor de a evita aditivi sintetici, n favoarea
celor naturali.
Cercetarea n domeniul cosmetologiei s-a ndreptat din ce n ce mai mult ctre procesele care
duc la degradarea anatomico-funcional a pielii, identificat ca mbtrnirea acesteia. n paralel sau evaluat toate msurile posibile de contracarare a acestor efecte. Un interes deosebit n acest sens
a fost generat de studiul substanelor capabile s previn degradarea epidermei prin aciunea
radicalilor liberi: aceste substane sunt definite ca antioxidani [11].
Interaciunea dintre antioxidani i radicalii liberi din piele prezint un interes deosebit, din
cauza faptului c acetia au un rol semnificativ n prevenirea mbtrnirii pielii [12].
Antioxidanii care conin n structur o grupare fenolic joac un rol important n cosmetice,
produse farmaceutice i alimente. Acetia sunt clasificai n dou categorii, i anume: antioxidani
naturali, care sunt reprezentai n special de tocoferoli i antioxidani sintetici, cum ar fi 2,6-di-tertbutil-p-hidroxitoluenul (BHT), tert-butil-4-hidroxianisolul (BHA), propil, octil si dodecil galat, tertbutilhidrochinona (TBHQ) i acidul nordihidroguaiaretic (NDGA) [15].
Unii dintre antioxidanii sintetici utilizai n formulrile cosmetice, ca de exemplu butilhidroxi-anisol (BHA) sau butil-hidroxi-toluen (BHT) sunt carcinogeni [174, 175], astfel nct
utilizarea extensiv a acestor ingrediente n cosmetice poate reprezenta un potenial risc al sntii
[125]. BHA este considerat a fi utilizat corespunztor i sigur n produse cosmetice, dac
concentraia total a acestuia n formularea produsului nu depete limita de 0.02% din coninutul
total de grsimi i uleiuri, incluznd coninutul de uleiuri volatile din formulare.
Studii pe termen ndelungat au demonstrat c utilizarea unor antioxidani sintetici n
produsele cosmetice poate duce la un potenial risc asupra sntii, asociat cu ingestia acestora
[139]. Un caz particular n acest sens poate fi reprezentat de categoria de produse cosmetice
decorative, cum sunt rujurile.
Produsele cosmetice de tip anti-mbtrnire reprezint o clas de produse cosmetice, care
conin o compoziie complex de materii prime. Determinarea antioxidanilor din produsele
cosmetice de tip anti-aging este adesea dificil, datorit complexitii matricii produsului, prin
urmare o atenie deosebit trebuie alocat dezvoltrii procedurilor i metodelor de extracie
adecvate i evaluarea fiabil a valorilor medii de recuperare. Procedura utilizat pentru extracia
antioxidanilor din matricea de produs cosmetic depinde de natura produsului i de asemena de
caracteristicile tehnicii analitice care este utilizat pentru determinarea substanei active. Din
aceast cauz este necesar s se dezvolte metode de analiz noi i eficiente pentru monitorizarea
antioxidanilor ntr-un mod corespunztor i pentru determinarea i utilizarea acestora n industria
cosmetic.
-6-
Lucrarea de fa contureaz rolul i importana antioxidanilor n cosmetologie i totodat i

propune s mbunteasc unele metode de analiz a acestor compui n produse cosmetice de tip
anti-aging. Scopul studiului de fa a fost implementarea unor metode rapide de determinare a
antioxidanilor sintetici i naturali din produse cosmetice. n acelai timp s-a realizat formularea
unei creme originale, propriu dezvoltate i analiza acesteia prin metodele cromatografice propuse.
-7-
PARTEA I
CONSIDERAII TEORETICE
II.
Antioxidani n cosmetic
II.1 Definiie
Antioxidantii sunt compui organici, care adugai la grsimi naturale i alimentare ntrzie
oxidarea, deteriorarea i rncezirea. Muli dintre acetia sunt compui fenolici substituii
(butilhidroxianisolul, di-ter-butil-para-cresol i propil-galatul).
Concentraia maxim de antioxidani, aprobat de ctre FDA ( Food and Drug
Administration) este 0. 02%-0.05% [16].
II.2 Clasificarea antioxidanilor

Antioxidanii se pot clasifica dup natura acestora n antioxidani naturali i sintetici.
Antioxidanii se mai pot mpri n dou clase, dup funcia principal a acestoa i anume n:
antioxidani propriu-zii, care acioneaz prin ruperea catenei de radical liber i care sunt distrui n
timpul perioadei de inducie i antioxidani sinergici, care n general au efect propriu sczut, dar
amplific aciunea antioxidanilor propriu-zii i prezint n egal msur i alte funcii [4].
II.3 Consideraii pentru utilizarea antioxidanilor n formulrile cosmetice

Abordarea cea mai adecvat pentru alegerea unui conservant sau antioxidant a unei
formulri cosmetice este ns empiric. Aceasta nu nseamn ns c multe publicaii tiinifice
referitoare la subiectul antioxidanilor nu i au locul n selecia acestora [24]. n acest sens, datele
din literatur servesc doar ca i ghid n stabilirea unor teste pentru formulrile cosmetice ce urmeaz
a utiliza conservani.
II.3.1 Alegerea antioxidanilor n formulrile cosmetice
Bohem i Williams [25] au subliniat faptul c, pe lng activitatea antioxidant, substana ar
trebui s posede anumite proprieati fizice si fiziologice, dac se presupune ultilizarea acestuia n
practica cosmetic, farmaceutic sau alimentar:
ar trebui s fie pe ct posibil neutr n reacie;
ar trebui s fie uor solubil n substrat;
trebuie s fie sigur din punct de vedere farmacologic i s nu s nu prezinte toxicitate pentru
esuturile animale.
Spre deosebire de utilizarea antioxidanilor i conservanilor n preparate farmaceutice i
alimente, aceti compui pot fi utilizai n preparate cosmetice, cu meniunea c antioxidantul
-8-
trebuie s efectueze inocuitate dermatologic i s nu prezinte efecte primare de iritare i

sensibilitate. Pielea este adesea sensibil n afront cu aceste substane. Un caz particular este cazul
rujurilor, n care se presupune o precauie deosebit n alegerea unui compus antioxidant adecvat,
datorit faptului c acest produs ar putea a fi ingerarat.
III.3.2 Aplicaii n cosmetic: concepte i formulri
Vitaminele pot fi utilizate n formulrile tuturor produselor cosmetice. Vitamina A (Retinyl
Palmitate), C (Acid Ascorbic) i E (Tocopherol sau Tocopheryl Acetate) sunt cei mai populari
antioxidani folosii n produsele de ngrijire a pielii. Sunt de asemenea utilizai n aceste formulri
i ingredieni cosmetici naturali, bogai n antioxidani. Unii dintre acetia includ ceaiul verde,
extractul de mcee, uleiul de migdale, uleiul de smburi de struguri, precum i minerale, ca
seleniul i zincul. Cei mai utilizai antioxidani n formulrile cosmetice sunt redai n Figura 3.
n creme i loiuni, mai precis n produsele autobronzante, produse pentru protecie solar i
uleiuri de corp, domeniul de dozare a vitaminei E poate fi i ncepnd cu 25% [26].
II.4 Modul de aciune a antioxidanilor

Produsele cosmetice care conin grsimi i uleiuri, n special cele cu inciden mare a
legturilor nesaturate au tendina unei deteriorri oxidative. Compoziia grsimii sau uleiului
afecteaz gradul i uurina cu care are loc acest proces [28]. Dac exist dou sau mai multe
legturi duble, sau un sistem conjugat de legturi nesaturate, atunci oxidarea va avea loc mai
repede. Aproape toate uleiurile, ct i acizii grai a acestora, sunt expuse la degradare oxidativ,
deoarece conin componente cu dou sau mai multe legturi nesaturate.
Antioxidanii sunt adugai grsimilor i uleiurilor n cantiti infime, datorita costului
ridicat pe de o parte i a reglementrilor n vigoare pe de alt parte. Motivul principal ns este
inversia, respectiv utilizarea n exces a unui antioxidant va avea un efect invers, de promovare a
oxidrii. Antioxidanii ofer o cale alternativ pentru oxidare, care nu implic substratul, ca, de
exemplu grsimile sau uleiurile. Agentul antioxidant nu funcioneaz pe o durata nelimitat; acesta
este distrus n timpul procesului.
II.4.2 Mecanismul de aciune al antioxidanilor
Dac privim inhibarea oxidrii lipidelor, antioxidanii se mpart n dou categorii:
antioxidani care rup catenele (chain-breaking antioxidants) i cei care previn oxidarea (preventive
antioxidants) [31]. Antioxidanii care rup catenele sunt substane care inhib etapa de propagare,
acetia ntrerupnd lanurile de autooxidare. Aceast perioad de inhibiie puternic a oxidrii
lipidelor este denumit perioada de inducie. Antioxidanii care previn oxidarea funcioneaz prin
-9-
Figura 3: Antioxidani utilizai n produse cosmetice

scderea ratei autooxidrii, prin inhibarea ratei reaciilor de iniiere a acestor procese oxidative. Alte
mecanisme pentru antioxidanii preventivi sunt fixarea de oxigen i reducerea hidroperoxizilor [33].
O parte din aceti compui pot aciona ca i ageni sinergici cu antioxidanii care rup catenele.
Agenii sinergici sunt definii ca fiind compui care nu au activitate antioxidant sau posed una
foarte scazut, dar care pot potena efectul antioxidanilor care acioneaz asupra
catenelor.
Antioxidanii pot avea efecte multiple, date de mecanismul lor de funcionare i de aceea pot fi
dificil de interpretat. Mai mult, efectul antioxidant al unui compus se poate schimba n pro-oxidant
sub anumite condiii de reacie sau concentraie.
Autooxidarea poate fi delimitat n trei etape individuale, dup modelul unei reacii n lan
cu radical liber: iniierea, propagarea i ntreruperea [34, 35] (Tabelul 4):
- 10 -
Tabelul 4: Mecanismul de aciune al antioxidanilor
n cadrul etapei iniiale, un radical alchil (R) se formeaz de la un acid gras nesaturat (RH)-reacia
(1). Odat format, un radical alchil (R) reacioneaz foarte rapid cu oxigenul de la un radical
peroxil (ROO)-reacia (2). A doua etap a propagrii, care este de fapt i determinant de vitezreacia (3), const n modificarea unui radical peroxid (ROO), pentru a genera un hiperoxid
(ROOH) i alt radical (R). Propagarea pailor poate fi mai complicat dect un simplu transfer i
poate conine etape adiionale. Reaciile se ncheie atunci cnd radicalii reacioneaz ntre ei i
formeaz produi stabili, incapabili de a propaga reaciile n lan- reaciile (4)-(6).
III.
Metode de extracie a antioxidanilor utilizai n cosmetic

Datorit faptului c antioxidanii utilizai n produsele cosmetice sunt prini n matricea de
produs cosmetic, extracia acestora din aceast matrice este dificil, depinznd n mare msur i de
natura probei, care poate fi solid sau lichid. Pe de alt parte faza de extracie mai depinde i de
tehnica prin care aceti compui urmeaz a fi analizai- spectrofotometric, electrochimic sau
cromatografic.
Etapa de pregtire a probei n vederea determinrii prin metode cromatografice a
antioxidanilor din produsele cosmetice este necesar att pentru extracia analiilor dintr-o matrice
solid ct i pentru preconcentrarea lor . Mai multe abordri au fost dezvoltate n acest scop, apoi
aplicate pentru determinarea antioxidanilor i vitaminelor din diferite tipuri de probe, printre care
extracia cu solveni organici, extracia pe faz solid i extracia cu fluide n stare supercritic [38].
n ceea ce privete extracia antioxidanilor din matricea n care acetia se afl exist dou
abordri majore:
extracia direct a antioxidanilor fr saponificarea grsimilor

extracia antioxidanilor dup saponificarea grsimilor
IV.
Metode de analiz a antioxidanilor utilizai n cosmetic

n general, utilizarea antioxidanilor n produsele cosmetice se face n mod combinat,
asocierea mai multor antioxidani ducnd la o cretere a puterii antioxidative a acestora din urm. n
acelai timp, acest lucru ngreuneaz procedeele de determinare a acestora datorit interferenelor ce
- 11 -
pot aprea i care duc n final la erori n rezultatele finale.

Metodele de analiz a antioxidanilor sunt multiple i depind de cele mai multe ori de
dotarea material a laboratoarelor de analiz, precum i de sensibilitatea ce se dorete a fi atins
prin analiz. Cele mai importante metode de analiz a antioxidanilor utilizai n cosmetic sunt:
metodele spectrofotometrice
metodele electrochimice
metodele cromatografice
Metodele cromatografice de toate tipurile, ca de exemplu cromatografia pe strat subire [91],

cromatografie de lichide [93-95] i de gaze [44] au fost aplicate n acest sens.
Cele mai utilizate metode cromatografice de analiz ale antioxidanilor sunt:
-
Cromatografia de Gaze
Cromatografia de Lichide pe Strat Subire
Cromatografia de Lichide de nalt Performan.
- 12 -
PARTEA a II-a
CONTRIBUII ORIGINALE
V. Aplicarea metodei spectrometrice FTIR (ATR) pentru caracterizarea unor
produse cosmetice de tip anti-aging i a ingredientelor active cu potenial
antioxidant
Identificarea i cuantificarea ingredientelor active din produsele cosmetice, de ngrijire
corporal i a prului se dovedesc deseori a fi provocatoare pentru chimitii analiti. Adesea
ingredientele active sunt prezente n concentraii sczute, iar formulrile cosmetice au compoziii
complexe. Formularea tipic a unei creme (sistem de emulsie de tip ap/ulei) conine materii prime
cosmetice ca ap demineralizat, glicerin, acid stearic, uleiuri minerale, trietanolamin, carbomeri
i este conservat cu parabeni i antioxidani, de cele mai multe ori acetia fiind ntlnii n amestec
n formulrile cosmetice [140].
n primul rnd, pentru ca o formulare cosmetic s ndeplineasc toate cerinele de
complexitate este necesar ca aceasta s aib toate ingredientele adecvate (care includ emulsii,
emolieni, materii prime hidratante, conservani, compoziie de parfumare, colorani) i de a include
n formulare ingrediente active (filtre UV, extracte botanice sau animale), necesare pentru a susine
efectele declarate ale produsului [143]. Ingredientele care fac obiectul unei formulri cosmetice pot
fi clasificate generic n trei categorii: substane cu caracter lipofilic- uleiuri, grsimi, tocoferoli
(vitamina E), conservani sintetici cu efect antioxidant, emulgatori- alcooli grai de tip C16-C18,
uleiuri siliconice i compui hidrofilici, cum ar fi glicerina, un emolient ntlnit preponderent n
formulrile cosmetice. Echilibrul hidrofi/lipofil i ponderea emulgatorilor determin stabilitatea
unei formulri cosmetice.
Antioxidanii de tip conservant sunt capabili de a inhiba reaciile produse de speciile reactive
de oxigen, evitnd astfel oxidarea i rncezirea materilor prime folosite n mod obinuit pentru
formularea cosmeticelor- uleiuri, grsimi, ceruri, tensioactivi, compoziii de parfumare etc..
Avnd n vedere importana vitaminei E pentru protecia epidermei din punct de vedere al
prejudiciilor oxidative, precum i necesitatea unei evaluri corecte a activitii antioxidante n
formulri cosmetice, este de mare interes determinarea activitii antioxidante a tocoferolilor sau a
formulrilor topice care conin aceste ingrediente, prin msurarea capabilitiilor de donori de H
[145].
Analiza spectrometric n infrarou, n general, i varianta sa optimizat (cu Transformant
Fourier) FTIR permite evidenierea amprentei specifice pe baza gruprilor funcionale, precum i
a unor modificri chimice care au loc n timpul procesului de oxidare. Metoda FTIR poate permite
analiza calitativ i cantitativ a compoziiei chimice a emulsilor, loiunilor, produselor de ngrijire
- 13 -
a prului i a altor categorii de produse cosmetice [146]. FTIR este una dintre cele mai utilizate
metode pentru a identifica compoziia chimic i pentru a elucida structura compuilor chimici i a
fost introdus ca metod pentru identificarea compuilor din Farmacopeele mai multor ri. Datorit
fingerprint-ului i aplicabilitii extinse pentru o gam larg de probe, FTIR joac un rol important
pentru analiza n domeniul farmaceutic i a industriei cosmetice [148].
Scopul metodei dezvoltate este reprezentat de studiul amprentelor specifice FTIR (ATR)
pentru caracterizarea a trei tipuri de creme cosmetice grase sau semigrase i identificarea markerilor
specifici de recunoatere a ingredientelor active. Potenialul antioxidant al acetatului de tocoferol i
al conservantului BHA existente, introduse uzual n creme sau n mod controlat, la concentraii
cunoscute, ntr-o crem standard a fost evaluat prin metoda DPPH [157].
V.1 MATERIALE I METODE

V.1.1 Materiale
S-au utilizat trei tipuri de creme cosmetice obinute de la un furnizor local, denumite specific
n funcie de efectele acestora: Crem Gras Antirid Contur Ochi, Crem Semigras Lift Intensiv
Hidratant i Crem Gras Lift Restructurant.
V.1.2 Metode
V.1.2.2 Determinarea aciunii antioxidante prin metoda DPPH
S-a evaluat activitatea antioxidant a unor ingrediente din creme, prin dou tipuri de
msurtori: prin introducerea n mod controlat a unor concentraii cunoscute de acetat de alfatocoferol (-TA) i a conservantului butil-hidroxi-anisol (BHA) (experiment A) i prin msurarea
direct a aciunii antioxidante a acestora, la concentraiile uzuale introduse n cele trei creme
investigate (experiment B).
Experiment A. Activitatea antioxidant a acetatului de alfa-tocoferol si a conservantului butilhidroxi-anisol (BHA) a fost testat pe o crem cu compoziie de tip Lift Intensiv Hidratant, n care
s-au introdus n mod controlat concentraii diferite de acetat de alfa-tocoferol i/sau BHA.
Tabelul 9 reprezint concentraiile C0-C6 de acetat de alfa-tocoferol i/sau BHA, introduse
n mod controlat n crema Semigras Lift Intensiv Hidratant, pentru a evalua activitatea
antioxidant prin metoda DPPH.
Experiment B. Activitatea antioxidant a fost determinat la cremele 1-3, care aveau n prealabil o
concentraie declarat de 0,5% -TA i 0,05% BHA.
- 14 -
Tabelul 9: Concentraiile de -TA i BHA introduse n mod controlat n

Cr. Semigras Lift Intensiv Hidratant pentru a determina activitatea antioxidant
Cr. Semigras Lift Intensiv Hidratant
Concentraie
(%)
C0
C1
C2
C3
C4
C5
C6
-Tocoferol acetat
BHA
0,1%
0,2%
0,5%
0,5%
0,1%
0,05%
0,05%
0,05%
V.1.2.3 Utilizarea metodei FTIR

Pe baza datelor obinute din spectrometria FTIR, utiliznd absorbanele la anumite
frecvene, s-au calculat indicii de nesaturare, de peroxidare i de carbonil [146, 158, 159],
considernd formulele:
Indicele de nesaturare (raportat la banda de absorbie C=CH at 3006 cm1):
A3006
A3006 + A2921 + A2851
(V.1)
Indicele carbonil (raportat la banda de absorbie C=O at 1746 cm1):

A1746
Ai
(V.2)
unde: Ai reprezint suma arilor dintre 1800 i 650 cm-1.

Indicele de peroxidare (lrgirea benzii 3460-3480 cm-1).
V.2 REZULTATE I DISCUII

V.2.1 Date de referin privind compoziia cremelor i spectrele FTIR specifice unor
produse uleioase.
Figura 9 prezint comparativ compoziia celor trei tipuri de creme investigate. Se
constat c acestea difer prin ponderea diferit ntre componentele lipofilice i hidrofilice.
Dac crema Gras Antirid Contur Ochi are n compoziie acid stearic, alcool cetilic i
octildodecanol i glicerin, extract de castravete i fosfat de cetil potasiu, componente polare,
Crem Semigras Lift Intensiv Hidratant este mai bogat n componente nepolare (gliceril
stearat, ulei avocado, ulei de soia, Ceteareth 20), n echilibru cu glicerina i extractul de
castravete. n schimb, Crema Gras Lift Restructurant are mai puin ulei de soia i alcool
cetilic, fiind mai bogat n Ceteareth 20 i unt de cacao.
Pentru a interpreta adecvat amprenta FTIR specific a acestor creme, s-a luat ca reper
- 15 -
spectrul FTIR specific produselor uleioase, cu evidenierea frecvenelor specifice gruprilor

funcionale i a zonelor de recunoatere (fingerprint) (Figura 10).
Pe baza acestui spectru s-au identificat zonele specifice de frecvene (I-IV) care se pot
atribui unor grupri funcionale din ingrediente i creme (Tabelul 10).
Tabelul 10: Identificarea zonelor de frecven specifice unor uleiuri i emulsii (creme) i
atribuirea lor
Zona de frecven
(cm -1)
Zona IV
< 1000
Zona III
1100 - 1800
Frecvene carcateristice
721
921
954
995
- C = C trans
- C = C cis
1743
COOH
1718
C=R
|
OR
1643
1465
1379
1111
1109
1165
1205
1043
Zona II
2270 - 2400
Zona I
> 2800
Atribuire
(cm -1)
2358
2331
2850
2916
2954
Compui cu legturi
duble conjugate: acizi
grai polinesaturai,
carotenoide
Tocoferoli
Esteri
Acizi grai liberi
Aldehide i cetone
(arome)
-CH2-CH3
Grsimi saturate
- O-CH2
-C-O
C- OR
C=O
CH
(C = C) cis
Glicerin
CO2
Acizi grai naturali
Colesterol sau
fitosteroli
Lanuri polienice
Pe baza acestor indicaii s-au caracterizat spectrele specifice componentelor din

cremele investigate i anume emolienii naturali, emolieni sintetici, a emulgatorilor i a
antioxidanilor.
- 16 -
Figura 9: Reprezentarea grafic a compoziiei cremelor utilizate n studiu
- 17 -
Figura 10: Spectrul FTIR specific produselor uleioase, cu evidenierea frecvenelor specifice gruprilor funcionale i a
zonei de fingerprint
- 18 -
V.2.4 Caracterizarea cremelor prin spectre FTIR generice i zone de fingerprint.

Figura 16 reprezint amprentele specifice FTIR (ATR) ale cremelor investigate.
Figura prezint comparativ spectrul FTIR al cremelor cu -TA (a), spectrul general cu
marcarea celor patru zone specifice (I-IV) (b) i detalii privind zona de fingerprint IV (c).
1,0
I
IV
Absorbance a.u.
II
Cr. grasa antirid
III
contur ochi
0,5
Cr.grasa lift
restructuranta
Cr.semigrasa lift
intensiv hidratanta
0,0
3500
3000
2500
2000
1500
1000
-1
W avenumber (cm )
b
Cr.grasa antirid contur ochi
Cr.grasa lift restructuranta
Cr.semigrasa lift intensiv hidratanta
Absorbance a.u.
0,2
0,1
0,0
1300
1250
1200
1150
1100
1050
1000
950
900
850
800
-1
Wavenumber (cm )
c
Figura 16: Amprentele specifice FTIR (ATR) ale cremelor investigate: a-Amprenta
specific FTIR a cremelor comparativ cu acetatul de tocoferol (-TA ); b- Reprezentarea
spectrului FTIR (ATR) specific celor trei creme, cu marcarea zonelor specifice I-IV; cEvidenierea zonei de fingerprint (zona IV), comparativ la cele trei tipuri de creme
Toate cele trei creme au un spectru FTIR asemntor, fiind foarte greu a fi
difereniate, deosebirile de compoziie prezentate n Figura 9 fiind prea mici pentru a se
remarca deosebiri n absorbii IR. n zona de fingerprint IV (Figura 16 c) se evideniaz totui
intensiti mai mari n zona de frecven 1150-1200 cm-1 (esteri i grsimi) pentru crema
Crema Semigras Lift Intensiv Hidratant i respectiv n zona 800-1000 cm-1 pentru Crema
- 19 -
Gras Antirid Contur Ochi (mai bogat n compui polari).

Tabelul 16 include frecvenele specifice i intensitatea semnalelor la cele trei tipuri de creme.
Tabelul 16: Frecvenele specifice i intensitatea semnalelor la cele trei tipuri de creme
Zon de
frecven
-1
(cm )
Cr. Gras Antirid Contur

Ochi
IV
Numrul de
und
920
993
1043
1078
1109
1165
1205
1247
1261
1379
Intensitatea
0,331
0,0662
0,1674
0,0968
0,0824
0,0327
0,038
0,0468
0,0544
0,0299
1465
1701
2331
2358
2848
2916
2954
Cr. Semigras Lift Intensiv

Hidratant
Cr. Gras Lift Restructurant
0,0648
0,0234
Numrul de
und
921
995
1043
1080
1111
1168
1201
1257
1286
1379
**1419
1465
1718
Intensitatea
0,0218
0,0623
0,1815
0,1043
0,1027
0,0826
0,0571
0,068
0,0389
0,0353
0,03
0,0725
0,0147
Numrul de
und
921
995
1043
1080
1109
1170
1203
1246
1259
1379
***1417
1465
1718
Intensitatea
0,021
0,063
0,1699
0,1025
0,0955
0,0464
0,0433
0,0508
0,0569
0,0351
0,0297
0,0771
0,0137
0,0993
0,1521
0,182
0,2633
0,0712
**1743
2331
2358
2850
2916
2954
0,0286
0,1011
0,1586
0,1606
0,2372
0,0732
***1743
2331
2358
2850
2916
2956
0,0171
0,0864
0,1349
0,1891
0,2891
0,1086
III
II
Se remarc doar dou tipuri de frecvente specifice, marcate **, respectiv ***, la cremele
Crema Semigras Lift Intensiv Hidratant si Crema Gras Lift Restructurant.
V.2.5 Activitatea antioxidant a cremelor investigate.
Prin metoda DPPH nu s-a putut pune n eviden activitatea antioxidant a celor doi
compui analizai. Rezultatul obinut este confirmat i de alte studii care relev faptul c
acetatul de tocoferol, dei este mai stabil dect tocoferolul, nu are activitate antioxidant [142,
145, 160, 161] utilizat individual n produse cosmetice, acesta fiind un antioxidant sinergic.
Tabelul 17 red valorile indicilor de nesaturare (IN)
i a celor carbonil (IC),
considernd valorile absorbiilor msurate la diferite frecvene IR (descrise la Materiale si

Metode).
S-a constatat c cele trei creme au n general valori apropiate pentru IN i IC, totui
Crema Gras Antirid Contur Ochi are un IN mai mare, n timp ce Crema Semigras Lift
Intensiv Hidratant are un IC mai mare. Lipsa benzii de peroxidare indic stabilitatea
oxidativ a acestor creme.
- 20 -
Tabelul 17: Indicii de Nesaturare si Indicii Carbonil pentru cremele studiate

IN
IC

Ochi
0,3631
= 0,3761
0,3631 + 0,3707 + 0,2315
0,1621
= 0,1107
0,1008 + 1,3627

Hidratant
0,3401
= 0,3581
0,3401 + 0,3801 + 0,2295
0,1956
= 0,1320
0,0942 + 1,3875
Crem Gras Lift

Restructurant
0,3447
= 0,3347
0,3447 + 0,4296 + 0,2553
0,1854
= 0,1272
0,0972 + 1,3594
V.3 CONCLUZII
Utilizarea spectrometriei FTIR a permis evidenierea amprentei specifice a celor trei
tipuri de creme investigate precum i a ingredientelor din aceste produse cosmetice, n funcie
de rolul lor n amestec.
Astfel, comparnd compoziia diferit a cremelor, n funcie de raportul ntre
ingredientele lipofile/hidrofile, ntre ingrediente de tip emolient-emulgator, antioxidant, i
ingrediente active (extract castravete, acetat de tocoferol) s-au constatat:
1. similitudini privind forma spectrelor FTIR ntre diferii emolieni naturali, cu
evidenierea totui, a unor frecvene specifice i markeri de recunoatere, mai ales
pentru uleiul de soia.
2. asemnri ale amprentelor FTIR ntre emulgatorii de tip stearat i emulgatorii de tip
cetearil.
3. deosebiri nete ntre acrilai i respectiv stearat i Ceteareth.
4. deosebiri semnificative ntre emolienii sintetici, Dimethicone i Octildodecanol.
5. identificarea deosebirilor dintre antioxidanii naturali (n cazul de fa acetatul de tocoferol) i cei sintetici (BHA) i evidenierea markerilor (frecvene i semnale)
specifici.
6. evidenierea principilor active (arome) din extract de castravete i a amprentei sale n
propilenglicol comparativ cu glicerina- ambele ingrediente fiind hidrofile.
n cazul cremelor, aspectul spectrului FTIR este similar, cu evidenierea unor deosebiri
n intensiatea unor benzi, identificate n zonele 1150-1200 i 800-1000 cm-1.
n concluzie, datele obinute pe analiza ingredientelor sunt foarte utile i constituie o
baz de date pentru identificarea individual a acestora sau pe categorii de componente. n
cazul cremelor cu compoziie complex, mai ales cnd acestea difer prin procente mici ntre
componentele polare i nepolare, este greu a evidenia markerii de recunoatere prin metoda
- 21 -
FTIR (ATR). Datele obinute prin analiza FTIR necesit a fi corelate cu metode
cromatografice (HPLC sau GC) n scopul de a valida determinarea componentelor individuale
n formulri cosmetice.
Aciunea antioxidant a cremelor prin adaosuri de molecule cu potenial antioxidant
pare a fi o problem complex ce impune studii ulterioare. Chiar dac molecule precum BHA
sau -tocoferol acetat, luate individual, au aciune antioxidant (prin metoda DPPH), n
amestecuri complexe cu lipide, mai ales cnd concentraia lor este sub 1%, aciunea
antioxidant nu mai poate fi sesizat prin msurtori uzuale. Metode cu sensibilitate mai
nalt, precum rezonana electronic de spin (RES) ar putea da, probabil, informaii
suplimentare privind potenialul antioxidant al unor amestecuri complexe, aa cum sunt
cremele cosmetice.
- 22 -
VI. Analiza prin metode cromatografice a unor antioxidani sintetici i

naturali utilizai n produse cosmetice
Formulrile cosmetice conin amestecuri multiple de materii prime, substane active i
conservani care aparin unor clase chimice diferite, caracterizate prin diferite grupri
funcionale [143]. Prin urmare, sunt necesare metode de analiz multicomponente; n acest
sens, tehnicile cromatografice de analiz sunt cele mai frecvent utilizate pentru determinarea
antioxidanilor i conservanilor din produsele cosmetice.
Pentru analizele bazate pe tehnici cromatografice de lichide sau de gaze, pregtirea
probelor, n funcie de natura i complexitatea matricei, utilizeaz fie operaii simple de diluie
cu solveni sau amestecuri de solveni adecvai, fie operaii mai complexe pentru extragerea
analitului din matricea solid. De multe ori este neces i o etap suplimentar de purificare,
folosind extracia pe faz solid. Pregtirea probelor este necesar i n cazul determinrii
conservanilor i antioxidanilor din matrici complexe sau din probe heterogene, n care sunt
posibile probleme de interferen. Cea mai la ndemn metod pentru prelucrarea probelor
din formulri cosmetice de tip ulei n ap este diluia i omogenizarea probei, sonicare sau
centrifugare i filtrare.
Metodele utilizate pentru extracia conservanilor i antioxidanilor din produsele
cosmetice depind n primul rnd de natura produselor cosmetice- emulsii, creme, ampoane
etc. i de asemenea de caracteristicile tehnicilor analitice care se utilizeaz pentru
determinarea substanelor active. Procedurile descrise n literatura de specialitate au fost
grupate n funcie de produsul cosmetic analizat i prezentate dup categoriile de produse
cosmetice clasificate n Anexa I din Directiva EU privind produsele cosmetice (Directiva
76/768/CEE a Consiliului UE) [163] (Figura 17):
Figura 17: Procentajul procedeurilor analitice n funcie de categoriile de produse

cosmetice
- 23 -
Matricea produselor cosmetice este complex, formulrile cosmetice conin un numr

ridicat de ingrediente i adesea analiza acestor produse necesit prelucrri ale probelor
(solubilizare, purificare i/sau preconcentrare). Dizolvarea probelor poate fi efectuat folosind
substane chimice adecvate i/sau solveni organici, proces asistat de un tratament fizic
complementar cum ar fi nclzire sau expunerea la radiaii cu ultrasunete sau microunde.
Uneori procedura de analiz necesit o etap de prelucrare/preconcentrare a analiilor de
interes, ca de exemplu extracia pe faz solid sau extracia cu lichide (Figura 18).
Figura 18: Frecvana relativ de pretratare/preconcentrare a analiilor

n unele cazuri analiii necesit transformarea n compui cu caracteristici analitice
mai bune pentru tehnica de analiz utilizat, de exemplu prin intermediul derivatizrii.
Cromatografia de gaze necesit transformarea analiilor slab volatili n derivai volatili. Alte
reacii, cum ar fi reacia de saponificare pot fi aplicate pentru prelucrarea probelor (Figura
19).
Figura 19: Frecvena relativ a reacilor chimice a analiilor supui analizei

cromatografice
Referinele din literatur privind analiza produselor cosmetice au fost clasificate n
cinci grupe n funcie de analiza utilizat (Figura 20) i anume, tehnici cromatografice i
tehnici conexe, cum ar fi electroforeza (69%), spectroscopia molecular (15%), msurtori
electrochimice (8%), spectroscopia atomic (5%) i altele (3%) [143].
- 24 -
Figura 20: Procentajul tehnicilor analitice utilizate n metodele raportate pentru

analiza produselor cosmetice
Metodele oficiale de analiz aprobate de diferite legislaii nu sunt suficiente pentru a
efectua controlul analitic necesar a produselor cosmetice. Dezvoltarea i validarea unor noi
metode analitice pentru produsele de ngrijire este nc un domeniu n curs de dezvoltare,
cercetrile n domeniul chimiei analitice aducnd mbuntiri la fezabilitatea controlului
calitii cosmeticelor [173].
Utilizarea antioxidanilor n produsele cosmetice i de ngrijire se poate face, fie
individual, fie n amestec, puterea de antioxidare crescnd atunci cnd acetia se folosesc n
amestec. Unul dintre cei mai utilizai antioxidani sintetici utilizai n formulrile cosmetice
este BHA (3-tert-butil-4-hidroxi anisol), iar din clasa antioxidanilor naturali -TA (alfa
tocoferol acetat) este adesea ntlnit n formulrile de tip anti-aging. Structura chimic a celor
doi antioxidani, cel sintetic i cel natural este prezentat n Figura 21:
Figura 21: Structura BHA i -TA

Studiul de fa contureaz rolul i importana antioxidanilor n formulrile cosmetice
i i propune totodat s mbunteasc unele metode de analiz a acestor compui din
categoria de produse cosmetice de tip anti-aging. S-au vizat dou aspecte ale analizei:
pregtirea probei, care s-a efectuat prin extracia cu diverse sisteme de solveni, extracia pe
faz solid i saponificare i analiza propriu-zis, care s-a realizat fie prin GC-FID, fie prin
HPLC-UV, urmrindu-se determinarea condiiilor optime de analiz. Analizele s-au efectuat
pe probe sintetice (formulri de creme de tip anti-aging fortificate cu diverse cantiti de BHA
- 25 -
la nivel de concentraie de 0,05% i -TA la nivel de concentraie de 0,5%), pe creme

disponibile comercial i pe formularea original, propriu dezvoltat.
VI.1 Analiza prin cromatografie de gaze a antioxidanilor sintetici i naturali din produse
cosmetice
Antioxidanii folosii n studiu i prezentai n Tabelul 18 sunt disponibili comercial:
Tabelul 18: Lista antioxidanilor studiai
Lista antioxidanilor i conservanilor studiai
Denumirea chimic
Formul
Productor
3-tert-butil-4-hidroxi anisol
BHA
JAN DEKKER Nederland B.V.
Tocoferol Acetat
-TA
BASF
Condiii pentru determinrile cromatografice

Analizele cromatografice au fost efectuate pe un gaz cromatograf Shimadzu 2010
Model echipat cu detector FID. n sistem s-a folosit o coloan capilar din silice fuzibil DB5, 30m x 0,25 mm ID, cu o faz staionar de 5% difenil- 95% dimetilpolisiloxan, cu
grosimea de 0,25 m. Temperatura cuptorului a fost meninut la 120C timp de 5 minute, iar
apoi mrit cu o vitez de 10C/min pn la 310C unde a fost meninut timp de 10 min..
Parametrii detectorului au fost meninui la 320C, cu debite de N2-30 mL/min. i H2-40
mL/min. i aer 200mL/min.. Temperatura de injecie a fost de 350C. S-au analizat cantiti
de cte un 1 l din soluiile standard i soluiile de prob, folosind condiiile descrise mai sus.
VI.1.1 Determinarea simultan a antioxidanilor sintetici i naturali din formulri

cosmetice anti-aging prin extracie cu etanol urmat de analiza GC-FID
Pentru determinarea simultan a antioxidanilor naturali i sintetici- -tocoferol acetat,
respectiv BHA n trei formulri cosmetice de tip oil in water (o/w), a fost dezvoltat o
metod cromatografic de gaze, utiliznd tehnica GC-FID. O procedur simpl de extracie cu
etanol a fost necesar, iar separarea celor doi compui a fost obinut n condiiile
cromatografice utilizate [178].
S-a obinut o separare bun a standardelor de antioxidani, cu caracteristici de retenie
de tR,BHA=8,073 i tR,-TA=23,301, prin condiiile cromatografice utilizate. Figura 22 prezint
cromatograma unei soluii standard a celor doi antioxidani studiai.
- 26 -
Figura 22: Cromatograma GC a unui standard de BHA i -TA utiliznd metodele de

prelucrare a probei i condiiile cromatografice descrise
Dreptele de calibrare pentru BHA i -TA au fost construite pentru intervalul de
concentraii de interes i sunt prezentate n Figura 23A pentru BHA, respectiv n Figura 23B
pentru -TA:
Calibration Curve
ID#:1 Name: BHA
y = 2614,443610x + 863,027994
R2 = 0,999578
y = 1981.403307x + 1349.037917
2
R = 0.999915
Calibration Curve
700000
2500000
ID#:2 Name: aTA
600000
2000000
500000
1500000
Area
Area
400000
300000
1000000
200000
500000
100000
0
0
50
100
150
200
250
300
Conc. (mg/L)
200
400
600
800
1000
1200
Conc. (mg/L)
Figura 23A: Curba de calibrare a BHA
Figura 23B: Curba de calibrare a -TA
Valorile limitei de detecie obinut prin metoda de analiz propus au fost de 0,131 mg/L
pentru BHA, respectiv 0,383 mg/L pentru -TA i valori ale limitei de determinare de 0,396
mg/L pentru BHA, respectiv 1,160 mg/L pentru -TA.
Trei probe de creme anti-aging- Crem Gras Antirid Contur Ochi, Crem Semigras
Lift Intensiv Hidratant i Crem Gras Lift Restructurant- au fost preparate n laborator.
- 27 -
Blank-ului de crem i s-au adugat controlat cantiti de 0,05 % BHA i 0,5 % -TA. Analiza
probelor a fost efectuat n triplicat pentru toate cele trei creme luate n studiu, pentru a
permite calculul deviaiei standard (DS) i a deviaiei standard relative (DSR) ca i msur a
repetabilitii cromatografice.
Trei mostre din probe comerciale ale cremelor luate n studiu, ce au coninut
combinaii ale antioxidanilor descrii, au fost analizate i -TA i respectiv BHA au fost
identificai, comparnd timpii de retenie a peak-urilor observate, cu cele obinute pentru
soluiile standard.
Cromatograma unei Creme Gras Antirid Contur Ochi este prezentat n Figura 24.
Cromatograma unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant i a unei Creme Gras Lift
Restructurant este prezentat n Figura 25, respective Figura 26:
Figura 24: Cromatograma GC a unei Creme

Gras Antirid Contur Ochi
Figura 25: Cromatograma GC a

unei Creme Semigras Lift
Intensiv Hidratant
Figura 26: Cromatograma GC a unei Creme Gras Lift Restructurant

Concentraiile determinate ale antioxidanilor analizai n trei probe de creme de tip
anti-aging- Crem Gras Antirid Contur Ochi, Crem Semigras Lift Intensiv Hidratant i
- 28 -
Crem Gras Lift Restructurant determinate prin metoda de analiza GC-FID, gradul de
recuperare a acestora, precum i concentraia antioxidanilor determinai n probe comerciale
sunt prezentate n Tabelul 25:
Tabelul 25: Valorile concentraiilor antioxidanilor n probele de crem analizate
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Proba analizat
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie DS Prob
comercial
(g/100g)
Concentraie
declarat
(g/100g)
BHA
-TA
BHA
-TA
BHA
-TA
BHA
-TA
Crem Gras Antirid

Contur Ochi
0,0447 0,003
0,4241
0,002
89,4
84,8
0,0413
0,002
0,4391
0,002
0,05
0,5
Crem Semigras Lift

Intensiv Hidratant
0,0468 0,002
0,4414
0,003
93,6
88,3
0,0438
0,002
0,4663
0,003
0,05
0,5
Crem Gras Lift

Restructurant
0,0470 0,001
0,4159
0,004
94,0
83,2
0,0406
0,002
0,4284
0,003
0,05
0,5
n=3
Metoda a permis o determinare simultan, simpl, rapid i exact, precum i
confirmarea prezenei a BHA i -TA n produsele anti-aging, formulri cosmetice ce conin
un numr ridicat si variat de ingrediente cosmetice. Rezultatele obinute demonstreaz c
metoda propus pentru analiza antioxidanilor cu un grad mare de interferen, din produsele
cosmetice este adecvat.
Datorit asemnrilor gruprilor funcionale ale tocoferolilor i antioxidanilor
sintetici s-a decis investigarea prin aceleai metode a acestor grupe de antioxidani. Obiectivul
acestui studiu a fost determinarea cantitativ simultan a alfa tocoferol acetatului i a 3-tertbutil-4-hidroxi-anisolului din formulri cosmetice prin analiza GC cuplat cu detector FID.

cosmetice anti-aging prin extracie cu amestec de solvent organic acetonitril:metanol
urmat de analiza GC-FID
Pentru determinarea simultan a antioxidanilor naturali i sintetici- -tocoferol
acetat, respectiv BHA n trei formulri cosmetice de tip o/w, a fost dezvoltat o metod
cromatografic de gaze, utiliznd tehnica GC-FID. O procedur simpl de extracie cu
- 29 -
amestec organic metanol:acetonitril a fost necesar, iar separarea celor doi compui a fost
obinut n condiiile cromatografice utilizate [182].
O separare bun a standardelor de antioxidani, cu caracteristici de retenie de tR,BHA=
10.118 i tR,-TA= 26.074 s-a obinut prin condiiile cromatografice utilizate.
Figura 29 prezint cromatograma unei soluii standard a celor doi antioxidani studiai:

concentraii de interes i sunt prezentate n Figura 30A pentru BHA, respectiv Figura 30B
pentru -TA:
y = 1804.350061x - 209537.822762
R2 = 0.999215
Calibration Curve
ID#:1 Name: aTA
y = 2729.463957x + 1343.461207
Calibration Curve
ID#:1 Name: BHA
R = 0.999307
1800000
1600000.0
1600000
1400000.0
1400000
1200000.0
1200000
1000000.0
Area
Area
1000000
800000.0
800000
600000.0
600000
400000.0
400000
200000.0
200000
0.0
100
200
300
400
500
600
200
400
600
800
1000
1200
Conc. (mg/L)
Conc. (mg/L)
Figura 30B: Curba de calibrar a -TA
Valorile limitei de detecie obinut prin metoda de analiz propus au fost de 0,136 mg/L
pentru BHA, respectiv 1,237 mg/L pentru -TA i valori ale limitei de determinare de 0,413
- 30 -
mg/L pentru BHA, respectiv 3,749 mg/L pentru -TA.

Lift Intensiv Hidratant i Crem Gras Lift Restructurant- au fost preparate n laborator. Sa adugat controlat n creme cantiti de 0,05 % BHA i 0,5 % -TA.
soluiile standard.
Cromatograma unei Creme Gras Antirid Contur Ochi este prezentat n Figura 31.
Figura 31: Cromatograma GC a unei Creme Gras Antirid Contur Ochi

Cromatograma unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant i a unei Creme Gras
Lift Restructurant este prezentat n Figura 32, respective Figura 33:
Figura 32: Cromatograma GC a unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant
- 31 -
Figura 33: Cromatograma GC a unei Creme Gras Lift Restructurant

Crem Gras Lift Restructurant determinate prin metoda de analiza GC-FID, gradul de
sunt prezentate n Tabelul 32:
Proba analizat
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie DS Prob
comercial
(g/100g)
Concentraie
declarat
(g/100g)
BHA
-TA
BHA
-TA
BHA
-TA
BHA
-TA
Crem Gras Antirid

Contur Ochi
0,0455 0,002
0,4846
0,012
90,9
96,9
0,0595
0,008
0,4819
0,002
0,05
0,5
Crem Semigras Lift

Intensiv Hidratant
0,0467 0.001
0,4408
0,007
93,3
88,2
0,0491
0,003
0,5348
0,001
0,05
0,5
Crem Gras Lift

Restructurant
0,0456 0.001
0,4663
0.006
91,3
93,3
0,0478
0,001
0,5368
0,002
0,05
0,5
n=3
- 32 -

cosmetice este adecvat. Concentraiile de antioxidani determinate din produsele anti-aging
au fost n conformitate cu cele declarate de productor.
VI.1.3 Determinarea simultan a antioxidanilor sintetici i naturali dintr-o formulare

cosmetic anti-aging prin prepararea probei cu metanol i extracie cu diclormetan
urmat de analiza GC-FID
respectiv BHA dintr-o formulare cosmetic de tip o/w, a fost dezvoltat o metod
diclormetan a fost necesar, iar separarea celor doi compui a fost obinut n condiiile
cromatografice utilizate.
de tR,BHA=10,118 i tR,-TA=26,074, prin condiiile cromatografice utilizate. Cromatograma
unei soluii standard a celor doi antioxidani studiai este prezentat n Figura 29.
pentru -TA. Liniaritatea obinut a fost satisfctoare i a prezentat un coeficient de corelaie
de 0.999307 pentru BHA i 0.999215 pentru -TA pentru metoda de analiz dezvoltat.
Valorile limitei de detecie obinut prin metoda de analiz propus au fost de 0,136
mg/L pentru BHA, respectiv 1,237 mg/L pentru -TA i valori ale limitei de determinare de
0,413 mg/L pentru BHA, respectiv 3,749 mg/L pentru -TA.
O prob de Crem Gras Antirid Contur Ochi a fost preparat n laborator i prin
adaos controlat de 0,05 % BHA i 0,5 % -TA s-a determinat gradul de recuperare din prob.
Mostra de prob comercial a cremei luat n studiu, ce a coninut combinaii ale
antioxidanilor descrii, a fost analizat i -TA i respectiv BHA au fost identificai,
comparnd timpii de retenie a peak-urilor observate, cu cele obinute pentru soluiile
standard. Figura 36B reprezint cromatograma mrit a acestei probe, pentru evidenirea
eluiei compuilor antioxidani.
Concentraiile determinate ale antioxidanilor analizai n proba de crem de tip antiaging- Crem Gras Antirid Contur Ochi determinate prin metoda de analiza GC-FID, gradul
de recuperare a acestora, precum i concentraia antioxidanilor determinai n probe
- 33 -
comerciale sunt prezentate n Tabelul 36.
Figura 36B: Cromatograma GC mrit a unei Creme Gras Antirid Contur Ochi
Tabelul 36: Valorile concentraiilor antioxidanilor n probela de crem analizat
Proba
analizat
Crem Gras
Antirid
Contur Ochi
n=3
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie DS Prob
comercial
(g/100g)
Concentraie
declarat
(g/100g)
BHA
-TA
BHA
-TA
BHA
-TA
BHA
-TA
0,01490,002
0,49770,0004
29,8
99,5
0,01460,001
0,59670,001
0,05
0,5

confirmarea prezenei a BHA i -TA n produsul anti-aging. Rezultatele obinute pentru
antioxidantul natural -TA din produsul cosmetic analizat, demonstreaz c metoda propus
pentru analiza antioxidanilor naturali cu un grad mare de interferen, din produsele
cosmetice este adecvat. Prin metoda aplicat s-a obinut ns un grad foarte mic de
recuperare pentru determinarea antioxidantulului sintetic BHA n crema analizat.
cosmetic anti-aging prin prepararea probei cu amestec de solvent organic i extracie
cu diclormetan urmat de analiza GC-FID
A fost dezvoltat o metod cromatografic de gaze, utiliznd tehnica GC-FID pentru
determinarea simultan a antioxidanilor naturali i sintetici- -tocoferol acetat, respectiv
- 34 -
BHA ntr-o formulare cosmetic de tip o/w. A fost necesar o procedur de extracie cu
diclormetan, iar separarea celor doi compui a fost obinut n condiiile cromatografice
utilizate [183].
concentraii de interes i sunt prezentate n Figura 30A, respectiv Figura 30B. Liniaritatea
obinut a fost satisfctoare i a prezentat un coeficient de corelaie de 0.999307 pentru BHA
i de 0.999215 pentru -TA pentru metoda de analiz dezvoltat. Valorile limitei de detecie
obinut prin metoda de analiz propus au fost de 0,136 mg/L pentru BHA, respectiv 1,237
mg/L pentru -TA i valori ale limitei de determinare de 0,413 mg/L pentru BHA, respectiv
3,749 mg/L pentru -TA.
Proba de crem anti-aging, a fost preparat n laborator i prin adaos controlat de 0,05
BHA i 0,5 % -TA s-a determinat gradul de recuperare din prob. Antioxidantul sintetic a
eluat cu o form i nlime a peak-ului nesatisfctoare, care nu permite cuantificarea BHA
prin metoda dezvoltat din produsul cosmetic luat n studiu. Gradul de recuperare a fost
calculat pentru -TA din crema luat n studiu.
Proba comercial luat n studiu, ce a coninut combinaii ale antioxidanilor descrii,
a fost analizat i -TA i respectiv BHA au fost identificai, comparnd timpii de retenie a
peak-urilor observate, cu cele obinute pentru soluiile standard. Figura 39B reprezint
cromatograma mrit a acestei probe, pentru evidenirea eluiei antioxidantului natural -TA :
Figura 39B: Cromatograma GC mrit a unei Creme Gras Antirid Contur Ochi
- 35 -
Concentraiile obinute ale antioxidantului natural analizat n proba de crem de tip

anti-aging- Crem Gras Antirid Contur Ochi determinat prin metoda de analiza GC-FID,
gradul de recuperare a acestuia, precum i concentraia antioxidantului -TA determinat n
probe comerciale sunt prezentate n Tabelul 40:
Proba analizat
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie DS
Prob comercial
(g/100g)
Concentraie
declarat
(g/100g)
0,43600,02
87,2
0,68710,001
0,5
Crem Gras Antirid

Contur Ochi
n=3
Metoda a permis o determinare simpl, rapid i exact, precum i confirmarea

prezenei a BHA i -TA n produsul anti-aging.
BHA a eluat cu o form i nlime a peak-ului nesatisfctoare, care nu permite
cuantificarea BHA prin metoda dezvoltat din produsul cosmetic luat n studiu. Concentraia
foarte sczut obinut n cazul antioxidantului sintetic, nu permite ca acest compus s poat
fi determinat din punct de vedere cantitativ prin metoda aplicat.
Metoda descris anterior poate fi aplicat cu succes pentru determinarea calitativ i
cantitativ a antioxidanilor, n special a -TA n formulrile cosmetice. Cantitatea de
antioxidant natural determinat din produsului cosmetic s-a ncadrat n limita concentraiei
declarate de productor.

cosmetice anti-aging dup saponificarea grsimilor i extracie cu amestec de
hexan:acetat de etil urmat de analiza GC-FID
A fost dezvoltat o metod cromatografic de gaze, utiliznd tehnica GC-FID pentru
determinarea simultan a antioxidanilor naturali i sintetici- -tocoferol acetat, respectiv
BHA din trei formulri cosmetice de tip o/w. A fost efectuat saponioficarea grsimilor,
urmat de o procedur de extracie cu un amestec de hexan:acetat de etil, iar separarea celor
doi compui a fost obinut n condiiile cromatografice utilizate.
- 36 -
concentraii de interes i sunt prezentate n Figura 30A, respectiv Figura 30B. Liniaritatea
obinut a fost satisfctoare i a prezentat un coeficient de corelaie de 0.999307 pentru BHA
i de 0.999215 pentru -TA pentru metoda de analiz dezvoltat. Valorile limitei de detecie
obinut prin metoda de analiz propus au fost de 0,136 mg/L pentru BHA, respectiv 1,237
mg/L pentru -TA i valori ale limitei de determinare de 0,413 mg/L pentru BHA, respectiv
3,749 mg/L pentru -TA.
Probe de Crem Gras Antirid Contur Ochi, Crem Semigras Lift Intensiv
Hidratant i Crem Gras Lift Restructurant au fost preparate n laborator i prin adaos
controlat de 0,05 BHA i 0,5 % -TA. Antioxidantul sintetic a eluat cu o form i nlime a
peak-ului nesatisfctoare, care nu permite cuantificarea BHA prin metoda dezvoltat din
produsul cosmetic luat n studiu. Gradul de recuperare a fost calculat pentru -TA din crema
luat n studiu.
Probele comerciale luate n studiu, ce au coninut combinaii ale antioxidanilor
descrii, au fost analizate i -TA i respectiv BHA au fost identificai, comparnd timpii de
retenie a peak-urilor observate, cu cele obinute pentru soluiile standard.
Cromatogramele Cremei Gras Antirid Contur Ochi, Cremei Semigras Lift Intensiv
Hidratant i Cremei Gras Lift Restructurant sunt prezentate n Figura 41A, respectiv
Figura 41B i Figura 41C, reprezentnd cromatogramele mrite ale probelor, pentru
evidenierea eluiei antioxidantului natural -TA :
Figura 41A: Cromatograma GC mrit a unei Creme Gras Antirid Contur Ochi
Concentraiile obinute pentru antioxidantului natural analizat din probele de crem de
tip anti-aging- Crem Gras Antirid Contur Ochi, Cremei Semigras Lift Intensiv Hidratant
i Cremei Gras Lift Restructurant determinat prin metoda de analiza GC-FID, gradul de
recuperare a acestuia, precum i concentraia antioxidantului -TA determinat n probe
- 37 -
comerciale sunt prezentate n Tabelul 44.
Figura 41B: Cromatograma GC mrit a unei Creme Semigras Lift Intensiv

Hidratant
Figura 41C: Cromatograma GC mrit a unei Creme Gras Lift Restructurant

Tabelul 44: Valorile concentraiilor -TA n probele de crem analizate
Proba analizat
Crem Gras Antirid
Contur Ochi
Crem Semigras Lift
Intensiv Hidratant
Crem Gras Lift
Restructurant
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie
declarat
(g/100g)
66,9
Concentraie
DS Prob
comercial
(g/100g)
0,31000,002
0,33450,001
0,33670,001
67,3
0,34280,002
0,5
0,32680,003
65,4
0,36400,001
0,5
0,5
n=3
Concentraia foarte sczut obinut n cazul antioxidantului sintetic, nu permite ca
acest compus s poat fi determinat din punct de vedere cantitativ prin metoda aplicat.
- 38 -
Concentraiile -TA determinate n probele de formulri cosmetice elaborate n laborator, ct

i pentru cremele comerciale au fost relativ sczute prin metoda dezvoltat. Rezultatele
obinute confirm faptul c aceti compui trebuie izolai de matricea lipidic printr-o metod
de prelucrare premergtoare analizei propriu-zise, dar totodat saponificarea sau extracia
probelor de creme aduce de multe ori pierderi de analit n analiza antioxidanilor din probe de
produs cosmetic.

cosmetice anti-aging prin extracie cu metanol urmat de analiza GC-FID
respectiv BHA din dou
formulri cosmetice de tip o/w, a fost dezvoltat o metod

metanol a fost necesar, iar separarea celor doi compui a fost obinut n condiiile
de tR,BHA=10.108 i tR,-TA=26.101 prin condiiile cromatografice utilizate. Figura 43 prezint

pentru -TA. Valorile limitei de detecie obinut prin metoda de analiz propus au fost de
0,238 mg/L pentru BHA, respectiv 0,726 mg/L pentru -TA i valori ale limitei de
- 39 -
determinare de 0,721 mg/L pentru BHA, respectiv 2,199 mg/L pentru -TA.
y = 2367.720856x - 288.377290
R2 = 0.999350
350000
1400000
300000
1200000
250000
1000000
200000
y = 1456.849099x - 7618.494687
R2 = 0.999366
Calibration Curve
ID#: 2 Name: aTA
1600000
Area
Area
Calibration Curve
ID#: 1 Name: BHA
400000
800000
150000
600000
100000
400000
50000
200000
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200
Conc. (mg/L)
400
600
800
1000
1200
Conc. (mg/L)
Dou probe de creme anti-aging- Crem Gras Antirid Contur Ochi i Crem
Semigras Lift Intensiv Hidratant - au fost preparate n laborator. Blank-ului de crem i s-au
adugat controlat cantiti de 0,05 % BHA i 0,5 % -TA. Picul cromatografic corespunzator
este distorsionat, nu prezinta o forma corespunzatoare, ceea ce duce la imposibilitatea
determinarii cantitative din produsul cosmetic luat n studiu prin metoda dezvoltat. Gradul de
recuperare a fost calculat pentru -TA din fiecare crem n parte.
Dou mostre din probe comerciale ale cremelor luate n studiu, ce au coninut
soluiile standard.
Cromatograma unei Creme Gras Antirid Contur Ochi este prezentat n Figura 45:
Figura 45: Cromatograma GC a unei Creme Gras Antirid Contur Ochi
- 40 -
Cromatograma unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant este prezentat n

Figura 46:
Figura 46: Cromatograma GC a unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant

Concentraiile determinate ale -TA analizat n dou probe de creme de tip anti-agingCrem Gras Antirid Contur Ochi i Crem Semigras Lift Intensiv Hidratant determinate
prin metoda de analiza GC-FID, gradul de recuperare a acestora, precum i concentraia
antioxidanilor determinai n probe comerciale sunt prezentate n Tabelul 51.
Tabelul 51: Valorile concentraiilor -TA n probele de crem analizate
Proba analizat
Crem Gras
Antirid Contur Ochi
Crem Semigras
Lift Intensiv
Hidratant
Concentraie
DS
Prob
(g/100g)
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie DS
Prob comercial
(g/100g)
Concentraie
declarat
(g/100g)
0,46250,002
92,5
0,46190,002
0,5
0,41310,002
82,6
0,32680,001
0,5
n=3
Antioxidantul sintetic BHA a eluat cu o form i nlime a peak-ului nesatisfctoare,
care nu permite cuantificarea acestuia prin metoda dezvoltat din produsul cosmetic luat n
studiu. Concentraia foarte sczut obinut n cazul antioxidantului sintetic, nu permite ca
acest compus s poat fi determinat din punct de vedere calitativ prin metoda aplicat.
Metoda descris anterior poate fi aplicat cu succes pentru determinarea calitativ i
cantitativ a -TA n formulrile cosmetice. Cantitatea de antioxidant natural determinat din
produsele cosmetice s-au ncadrat n limita concentraiei declarate de productor.
- 41 -
CONCLUZII
Avnd n vedere c n produsele cosmetice se utilizez att antioxidani naturali i
sintetici, ideal ar fi identificarea, respectiv cuantificarea simultan a acestora.
n general, cei mai utilizai antioxidani n majoritatea formulrilor cosmetice sunt
antioxidantul sintetic BHA i cel natural -T, n forma acetat a acestuia -TA, cu
concentraii de 0,05%, respectiv 0,5%.
S-au dezvoltat diferite metode de pregtire a probelor de crem, att pentru probe
sintetice, obinute prin impregnare pn la un nivel de concentraie de 0,05% BHA i 0,5% TA, ct i probe de produse cosmetice disponibile comercial, acestea fiind analizate prin
cromatografie GC cuplat cu FID. Cea mai adecvat metod s-a dovedit a fi diluia probelor
de crem analizat cu amestec de solvent organic acetonitril:metanol prin sonicare, filtrare i
determinarea simultan a antioxidanilor prin GC. Figura 48A, respectiv Figura 48B prezint
concentraia de antioxidant natural i sintetic regsit n probele de crem analizate, precum i
cea determinat n probe comerciale de produs cosmetic prin GC-FID.
Concentraia -TA determinat n probe de crem
0.8000
Cr. Gras Antirid

Contur Ochi
Concentraie (g/100g)
0.7000
Prob Cr. Gras

Antirid Contur Ochi
0.6000
Cr. Semigras Lift

Intensiv Hidratant
0.5000
Prob Cr. Semigras

Lift Intensiv
Hidratant
0.4000
Cr. Gras Lift

Restructurant
0.3000
Prob Cr. Gras Lift

Restructurant
0.2000
0.1000
0.0000
I
II
III
IV
VI
Prob
Figura 48A: Concentraia -TA regsit n probele de crem analizate, prin GCFID
Concentraia BHA determinat n probe de crem
0.0700
Cr. Gras Antirid
Contur Ochi
0.0600
Prob Cr. Gras Antirid

Contur Ochi
0.0500
Cr. Semigras Lif t

Intensiv Hidratant
Prob Cr. Semigras

Lif t Intensiv Hidratant
0.0400
Cr. Gras Lif t

Restructurant
0.0300
Prob Cr. Gras Lif t

Restructurant
0.0200
0.0100
0.0000
I
II
III
IV
Prob
Figura 48B: Concentraia BHA regsit n probele de crem analizate, prin GCFID
- 42 -
I.2 Analiza alfa tocoferol acetatului dintr-o formulare cosmetic de tip anti-aging
conservat cu adititivi multifuncionali prin cromatografie de gaze cuplat cu FID
Pentru determinarea antioxidantului natural -tocoferol acetat dintr-o formulare
cosmetic de tip anti-aging, propriu dezvoltat i conservat cu aditivi multifuncionali, a fost
aplicat o metod cromatografic de gaze, utiliznd tehnica GC-FID. O procedur simpl de
extracie cu amestec de solvent organic metanol:acetonitril (50:50 v/v) a fost necesar, iar
separarea compusului a fost obinut n condiiile cromatografice utilizate.
Antioxidantul folosit n acest studiu i prezentat n Tabelul 53 este disponibil
comercial:
Tabelul 53: Denumirea INCI a antioxidantului studiat
Denumirea comercial
Dermofeel E 74 A
INCI
Tocopheryl Acetate;
Helianthus annuus
(sunflower) seed oil
Productor
Dr. Straetmans GmbH
Formularea cosmetic
n formularea cosmetic dezvoltat i analizat, -TA este coninut ntr-un amestec cu
ulei de floarea soarelui, materia prim care ncorporeaz antioxidantul natural fiind cunoscut
sub denumirea comercial de Dermofeel E 74 A. Concentraia de -TA declarat de furnizor
este > 73,5 % -TA n ulei de floarea soarelui. Formularea cosmetic dezvoltat i procedeul
de fabricaie sunt prezentate n Figura 50.
Figura 51 prezint cromatograma unei soluii standard a antioxidantului studiat.
Figura 51: Cromatograma GC a unui standard de -TA
- 43 -
Figura 50: Formularea Cosmetic i procedeul de fabricaie pentru produsul dezvoltat

Dreapta de calibrare pentru -TA a fost construit pentru intervalul de concentraii de
interes i este prezentat n Figura 52:
Calibration Curve
y = 3162.625449x - 4818.150848
R2 = 0.999891
ID#: 1 Name: aTA

3500000
3000000
2500000
Area
2000000
1500000
1000000
500000
0
0
200
400
600
800
1000
1200
Conc. (mg/L)
Figura 52: Curba de calibrare a -TA

Valoarea limitei de detecie pentru antioxidantul natural, obinut prin metoda de
- 44 -
analiz propus a fost de 0,044 mg/L i o valoare a limitei de determinare de 0,134 mg/L.
Crema luat n studiu, ce conine antioxidantul natural, a fost analizat i -TA a fost
identificat, comparnd timpul de retenie a peak-ului observat, cu cele obinute pentru soluiile
standard. Cromatograma unei Creme Gras Antirid Contur Ochi este prezentat n Figura 53:
Figura 53: Cromatograma GC a Cremei Anti Aging Light Day Cream

Tabelul 58: Valorile concentraiilor antioxidanilor n probele de crem
Anti Aging Light Day Cream
Proba analizat
Anti Aging Light Day Cream
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie
declarat
(g/100g)
0,3537 0,002
94,3
0,375
n=3
CONCLUZII
A fost dezvoltat formularea unei creme de tip anti-aging, conservat alternativ cu
aditivi multifuncionali.
Metoda a permis o determinare simpl, rapid i exact, precum i confirmarea
prezenei -TA n produsul anti-aging studiat, formulare cosmetic ce conine un numr
ridicat si variat de ingrediente cosmetice. Rezultatele obinute demonstreaz c metoda
propus pentru analiza antioxidanilor cu un grad mare de interferen, din produsele
- 45 -
VI.3 Analiza antioxidanilor sintetici i naturali din produse cosmetice prin cromatografie
de lichide de nalt performan
Antioxidanii folosii n studiu i prezentai n Tabelul 18 sunt disponibili comercial.
Condiii pentru determinrile cromatografice
Analizele cromatografice s-au efectuate pe un sistem cromatografic Agillent 1100
Series echipat cu pomp cuaternar, degazificator, sistem de termostatare a coloanei
cromatografice, autosampler i detector UV/VIS. Separarea s-a efectuat pe o coloan
cromatografic Eclipse XDB-C18 (4,6mm Id x 250mm (5m)). Compoziia fazei mobile a
fost acetonitril:metanol (25:75 v/v). Debitul a fost de 1,5 mL/min., iar detecia a avut loc la
280 nm. Procesul a avut loc la temperatura ambiant.

cosmetice anti-aging prin diluie cu amestec de solvent organic acetonitril:metanol
urmat de analiza HPLC/UV
respectiv BHA n trei formulri cosmetice de tip anti-aging, a fost dezvoltat o metod
cromatografic de lichide, utiliznd tehnica RP-HPLC-UV. O procedur simpl de diluie cu
un amestec organic metanol:acetonitril i sonicarea probei a fost necesar, iar separarea celor
doi compui a fost obinut n condiiile cromatografice utilizate.
1.849 i tR,-TA= 13.767 s-a obinut prin condiiile cromatografice utilizate
Figura 56 prezint cromatograma unei soluii standard a celor doi antioxidani studiai:
Figura 56: Cromatograma HPLC a unui standard de BHA i -TA utiliznd condiiile
cromatografice descrise
- 46 -

pentru -TA:
3000
y = 2.778829x + 66.510873
R2 = 0.999520
Calibration Curv e
a-TA
y = 9.885411x + 11.278142
R2 = 0.999936
Calibration Curve
BHA
3500
3000
2500
2500
2000
Area
Area
2000
1500
1500
1000
1000
500
500
0
0
50
100
150
200
250
300
0
0
200
400
600
800
1000
1200
Conc. (mg/L)
Conc. (mg/L)
Valorile limitei de detecie obinut prin metoda de analiz propus au fost de 0,666
mg/L pentru BHA, respectiv 0,532 mg/L pentru -TA i valori ale limitei de determinare de
2,019 mg/L pentru BHA, respectiv 1,613 mg/L pentru -TA.
Lift Intensiv Hidratant i Crem Gras Lift Restructurant- au fost preparate n laborator. Sau adugat controlat n creme cantiti de 0,05 % BHA i 0,5 % -TA. Analiza probelor a fost
efectuat n triplicat pentru toate cele trei creme luate n studiu, pentru a permite calculul
deviaiei standard (DS) i a deviaiei standard relative (DSR) ca msur a repetabilitii
cromatografice.
soluiile standard. Cromatograma unei Creme Gras Antirid Contur Ochi este prezentat n
Figura 58.
Crem Gras Lift Restructurant determinate prin metoda de analiza HPLC/UV, gradul de
sunt prezentate n Tabelul 66.
- 47 -
Figura 58: Cromatograma HPLC a unei Creme Gras Antirid Contur Ochi
Cromatograma unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant i a unei Creme Gras
Lift Restructurant este prezentat n Figura 59, respectiv Figura 60:
Figura 59: Cromatograma HPLC a unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant
Figura 60: Cromatograma HPLC a unei Creme Gras Lift Restructurant

- 48 -
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Proba
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie DS
Prob comercial
(g/100g)
Concentraie
declarat
(g/100g)
analizat
Crem Gras
Antirid Contur
Ochi
Crem
Semigras Lift
Intensiv
Hidratant
Crem Gras
Lift
Restructurant
BHA
-TA
BHA
-TA
BHA
-TA
BHA
-TA
0,04990,0008
0,26050,0012
99,7
52,1
0,06060,0011
0,14190,0008
0,05
0,5
0,04540,0012
0,25030,0007
90,8
50,1
0,05020,0014
0,16750,0003
0,05
0,5
0,05220,0005
0,25300,0005
104,4
50,6
0,06580,0006
0,21730,0008
0,05
0,5
n=3
cosmetice anti-aging prin extracie cu metanol urmat de analiza HPLC/UV
respectiv BHA n dou formulri cosmetice de tip anti-aging (Crem Semigras Lift Intensiv
Hidratant i Crem Gras Lift Restructurant), a fost dezvoltat o metod cromatografic
de lichide, utiliznd tehnica RP-HPLC-UV. O procedur simpl de extracie cu solvent
organic a fost necesar, iar separarea celor doi compui a fost obinut n condiiile
1.849 i tR,-TA= 13.767 s-a obinut prin condiiile cromatografice utilizate. Figura 54 prezint
Dou probe de creme anti-aging- Crem Semigras Lift Intensiv Hidratant i Crem
Gras Lift Restructurant- au fost preparate n laborator. S-au adugat controlat n creme
cantiti de 0,05 % BHA i 0,5 % -TA.
Dou mostre din probe comerciale ale cremelor luate n studiu, ce au coninut
- 49 -
soluiile standard. Cromatograma unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant i a unei
Creme Gras Lift Restructurant este prezentat n Figura 63, respectiv Figura 64:
Figura 63: Cromatograma HPLC a unei Creme Semigras Lift Intensiv Hidratant
Figura 64: Cromatograma HPLC a unei Creme Gras Lift Restructurant

Concentraiile determinate ale antioxidanilor analizai n dou probe de creme de tip
anti-aging- Crem Semigras Lift Intensiv Hidratant i Crem Gras Lift Restructurant
determinate prin metoda de analiza HPLC/UV, gradul de recuperare a acestora, precum i
concentraia antioxidanilor determinai n probe comerciale sunt prezentate n Tabelul 70.
confirmarea prezenei a BHA i -TA n produsele anti-aging. S-au obinut grade de
recuperare bune pentru antioxidantul sintetic BHA, cu valori >80,9%, dar concentraiile
obinute pentru acest compus n probele de crem studiate au fost mai mici dect cele
declarate de ctre productor. n schimb, pentru antioxidantul natural s-au obinut grade de
recuperare bune, cu valori de 102% -TA pentru Crema Semigras Lift Intensiv Hidratant i
- 50 -
108,1% -TA pentru Crema Gras Lift Restructurant prin metoda aplicat i determinare
prin HPLC/UV.
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Proba
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie DS
Prob comercial
(g/100g)
Concentraie
declarat
(g/100g)
BHA -TA
BHA
-TA
BHA
-TA
0,0262
0,001
0,4880
0,002
0,05
0,5
0,0249
0,001
0,9112
0,0005
0,05
0,5
analizat
BHA
-TA
Crem
Semigras Lift
Intensiv
Hidratant
0,0421
0,001
0,5102
0,001
84,3
Crem Gras
Lift
Restructurant
0,0405
0,001
0,5404
0,001
80,9
102,0
108,1
n=3
cosmetic anti-aging prin diluie cu amestec de tetrahidrofuran:metanol urmat de
analiza HPLC/UV
respectiv BHA ntr-o formulare cosmetic de tip anti-aging (Crem Gras Antirid Contur
Ochi), a fost dezvoltat o metod cromatografic de lichide, utiliznd tehnica RP-HPLC-UV.
O procedur simpl de diluie cu amestec de solvent organic i sonicarea probei a fost
necesar. Doar separarea antioxidantului natural -TA a fost obinut prin condiiile
1.849 i tR,-TA= 13.767 s-a obinut prin condiiile cromatografice utilizate. Figura 54 prezint
O prob de crem anti-aging- Crem Gras Antirid Contur Ochi- a fost preparat n
laborator. S-a adugat controlat n creme cantiti de 0,05 % BHA i 0,5 % -TA.
O prob comercial a cremei luate n studiu, ce a coninut combinaii ale
antioxidanilor descrii, a fost analizat i doar antioxidantul natural -TA a fost identificat,
comparnd timpul de retenie a peak-ului observat, cu cele obinute pentru soluiile standard.
Cromatograma unei Crem Gras Antirid Contur Ochi este prezentat n Figura 67:
- 51 -
Figura 67: Cromatograma HPLC a unei Creme Gras Antirid Contur Ochi
Concentraiile determinate ale antioxidantului natural analizat ntr-o prob de crem de
tip anti-aging- Crem Gras Antirid Contur Ochi determinat prin metoda de analiza
HPLC/UV descris anterior, gradul de recuperare a acestuia, precum i concentraia
antioxidantului determinat ntr-o prob comercial sunt prezentate n Tabelul 74:
Proba analizat
Crem Gras
Antirid Contur
Ochi
Concentraie DS
Prob
(g/100g)
Grad de
recuperare
(%)
Concentraie DS
Prob comercial
(g/100g)
Concentraie
declarat
(g/100g)
0,42210,001
84,4
0,34540,001
0,5
n=3
Metoda a permis o determinare, simpl, rapid i exact, precum i confirmarea

prezenei doar a antioxidantului natural -TA n produsul anti-aging. S-a obinut un grad de
recuperare bun de 84,4% pentru -TA din Crem Gras Antirid Contur Ochi prin metoda
aplicat i determinare prin HPLC/UV. Concentraia de -TA a fost n conformitate cu cea
declarat de productor pentru produsul studiat, prin metoda de analiza descris.
CONCLUZII
S-au dezvoltat diferite metode de pregtire a probelor de crem, att pentru probe
sintetice, obinute prin impregnare pn la un nivel de concentraie de 0,05% BHA i 0,5% TA, ct i probe de produse cosmetice disponibile comercial, n vederea analizelor HPLC
cuplat cu detector UV. Toate metodele de determinare prin aceast tehnic s-au dovedit a
putea fi aplicate pentru determinarea antioxidanilor sintetici i naturali din produse
cosmetice. Totui, prin metoda n care s-a aplicat diluia probei cu THF:metanol i
determinare HPLC, antioxidantul sintetic nu a putut fi detectat. Aceat metod a permis doar
determinarea calitativ a antioxidantului natural -TA n produsul anti-aging.
- 52 -
Figura 69A, respectiv Figura 69B prezint concentraia de antioxidant natural i

sintetic regsit n probele de crem analizate, precum i cea determinat n probe comerciale
de produs cosmetic prin HPLC/UV:
Concentraia -TA determinat n probe de crem
Cr. Gras Antirid

Contur Ochi
0.9
Prob Cr. Gras

Antirid Contur Ochi
0.8
Cr. Semigras Lift

Intensiv Hidratant
0.7
Prob Cr.
Semigras Lift
Intensiv Hidratant
Cr. Gras Lif t
Restructurant
0.6
0.5
Prob Cr. Gras

Lif t Restructurant
0.4
0.3
0.2
0.1
0
I
II
III
Prob
Figura 69A: Concentraia -TA regsit n probele de crem analizate, prin

HPLC-UV
Concentraia BHA determinat n probe de crem
0.070

Ochi
0.060
Prob Cr. Gras Antirid

Contur Ochi
0.050

Hidratant
0.040
Prob Cr. Semigras Lift

Intensiv Hidratant
0.030
Cr. Gras Lift

Restructurant
0.020
Prob Cr. Gras Lift

Restructurant
0.010
0.000
I
II
III
Prob
Figura 69B: Concentraia BHA regsit n probele de crem analizate, prin

HPLC-UV
- 53 -
VII. Concluzii finale

Utilizarea compuilor antioxidani n amestec n formulrile cosmetice, face ca
determinarea acestor compui din produsele cosmetice s fie destul de dificil, pe de o parte
datorit multitudinii compuilor utilizai ca i antioxidani, iar pe de alt parte a diversitii de
produse cosmetice prezente pe pia. Acestea ar putea fi cauza necesitii dezvoltrii de
metode de analiz performante, care s poat stabili cu exactitate i precizie ridicat tipul i
cantitatea de antioxidani prezeni n produsele cosmetice.
Studiul de fa contureaz rolul i importana antioxidanilor n formulrile cosmetice
i i propune totodat s mbunteasc unele metode de analiz a acestor compui din
categoria de produse cosmetice de tip anti-aging, produse care conin o compoziie complex
de materii prime.
Potenialul antioxidant al acetatului de tocoferol i al conservantului BHA existente,
introduse uzual n creme sau n mod controlat, la concentraii cunoscute, ntr-o crem standard
a fost evaluat prin metoda DPPH. Aciunea antioxidant a cremelor prin adaosuri de molecule
cu potenial antioxidant se pare a fi o problem complex ce impune studii ulterioare. Chiar
dac molecule precum BHA sau -tocoferol acetat, luate individual, cu aciune antioxidant
(prin metoda DPPH), n amestecuri complexe cu lipide, mai ales cnd concentraia lor este
sub 1%, aciunea antioxidant nu mai poate fi sesizat prin msurtori uzuale.
Utilizarea spectrometriei FTIR (ATR) a permis evidenierea amprentei specifice a
celor trei tipuri de creme cosmetice grase sau semigrase investigate precum i identificarea
markerilor specifici de recunoatere a ingredientelor active din aceste produse cosmetice, n
funcie de rolul acestora n amestec.
n cazul cremelor cu compoziie complex, mai ales cnd acestea difer prin procente
mici ntre componentele polare i nepolare, este greu a evidenia markerii de recunoatere prin
metoda FTIR (ATR). Datele obinute prin analiza FTIR necesit a fi corelate cu metode
cromatografice (HPLC sau GC) n scopul de a valida determinarea componentelor individuale
n formulri cosmetice.
Pentru determinarea simultan a antioxidantului sintetic BHA i a celui natural (-TA)
din produse cosmetice de tip anti-aging s-au utilizat metoda cromatografic de gaze cu
detector FID i cromatografia de nalt performan cu detector UV, dup ce s-au optimizat
condiiile, astfel nct s se obin o separare ct mai bun a compuilor de interes. S-au
dezvoltat i s-au ncercat metode de pregtire a probelor de produs cosmetic, ct mai simple i
care s prezinte un grad de recuperare ct mai ridicat a compuilor.
Produsele cosmetice de tip anti-mbtrnire reprezint o clas de produse cosmetice,
- 54 -
care conin o compoziie complex de materii prime. Determinarea antioxidanilor din

produsele cosmetice de tip anti-aging este adesea dificil, datorit complexitii matricii
produsului, prin urmare o atenie deosebit trebuie alocat dezvoltrii procedurilor i
metodelor de extracie adecvate i evaluarea fiabil a valorilor medii de recuperare. Procedura
utilizat pentru extracia antioxidanilor din matricea de produs cosmetic depinde de natura
produsului i de asemena de caracteristicile tehnicii analitice care este utilizat pentru
determinarea substanei active.
S-au dezvoltat diferite metode de pregtire a probelor acestea fiind analizate prin
cromatografie GC cuplat cu FID. Cea mai adecvat metod s-a dovedit a fi diluia probelor
de crem analizat cu amestec de solvent organic acetonitril:metanol prin sonicare, filtrare i
determinarea simultan a antioxidanilor prin GC.
Pentru determinarea acetatului de alfa tocoferol dintr-o formulare anti-aging proprie
dezvoltat i conservat alternativ cu aditivi multifuncionali (Anti Aging Light Day Cream) sa folosit o metod de extracie cu amestec de solvent organic methanol:acetonitril, urmat de
separare cromatografic cuplat cu detector FID. n formularea cosmetic analizat -TA
apare ntr-un amestec cu ulei de floarea soarelui. Concentraia de -TA declarat de furnizor
este >73,5 % -TA n ulei de floarea soarelui, fapt confirmat prin analiza GC. Metoda a
permis o determinare simpl, rapid i exact, precum i confirmarea prezenei -TA n
produsul anti-aging dezvoltat i studiat.
Determinarea simultan a BHA i -TA din produse cosmetice prin metoda RPHPLC-UV s-a efectuat utiliznd diluia probei prin sonicare cu amestec de solvent organic
acetonitril:metanol n prima metod dezvoltat i diluie cu THF:metanol n cea de-a doua. n
alt metod de determinare prin HPLC-UV s-a utilizat extracia pe faz solid iniial analizei
cromatografice. Toate metodele de determinare prin aceast tehnic s-au dovedit a putea fi
aplicate pentru determinarea antioxidanilor sintetici i naturali din produse cosmetice.
- 55 -
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
[1] Fhrer H., Dragoco Report, 1970, April, 79.
[4] Schlossman M. L., The Chemistry and Manufactures of Cosmetics, Allured Publishing
Corporation, 2000, 9.
[6] Lupo M. P., Clinics in Dermatology, 19, 2001, 467-473.
[9] Andreassi M., Andreassi L., J. Cosmetic Dermatol., 2, 2004, 153-160.
[10] Cadenas E., Packer L., Handbook of Antioxidants, Marcel Dekker Inc., 2nd Edition, 2002,
1-5.
[11] Tebbe B., Skin Pharmacol. Appl. Skin Physiol., 14, 2001, 296-302.
[12] Lademann J., Gehse S., Patzelt A., Schanzer S., Sterry W., Darvin M. E., SFW J., 9,
2008, 3.
[15] Gonzalez M., Ballesteros E., Gallego M., Valcarcel M., Anal. Chim. Acta, 359, 1998,
47-55.
[16] Gessner G. H., The Condensed Chemical Dictionary, Eight Edition, Reinhold Publishing
Corporation, Encyclopedia of Chemistry, 1971, 71-72.
[24] Baran R., Maibach H. I., Textbook of Cosmetic Dermatology, 2nd Ed., London: MartinDunitz, 1998, 121-128.
[25] Boehm M., Williams J., J. Pharm., 232, 1943, 292.
[26] Juncan A. M., Hodian T., Rev. Soc. Rom. Chim. Cosmet. , 7, 3, 2007, 42-46.
[28] Dugan H. R., Butyl hydroxyanisole as an antioxidant for animal fats, J. Am. Oil
Chemists Society, 1989, 49.
[31] Niki E., Antioxidants in Relation to Lipid Peroxidation, Chem. Phys. Lipids, 44, 1987,
227- 233.
[33] Frankel E. N., Meyer A. S., J. Sci. Agric., 80, 2000, 1925-1941.
[34] Porter N. A., Caldwell S. E., Mills K. A., Mechanisms of Free Radical Oxidation of
Unsturated Lipids, Lipids, 30, 1995, 277-290.
[35] Yanishlieva- Maslorova V., Inhibiting Oxidation, In: Antioxidants in Food Practical
Applications, Woodhead Publishing Ltd., Cambridge, 2001, 22.
[38] Luque- Garcia J. L., Luque de Castro M. D., J. Chromatogr. A, 935, 2001, 3-11.
[44] Kmostak S., Kurtz D. A., J. AOAC Int., 76, 1993, 735.
[91] Guldborg M., J. Anal. Chem., 309, 1981, 117.
[93] King W. P., Kissinger J., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 63, 1980, 137.
[94] Ivanovic D., Medenica M., Chromatographia, 40, 1995, 652.
- 56 -
[95] Bianchin L., Colivicchi M. A., Dellacorte L., J. Chromatogr., 694, 1997, 359.
[125] Tsai T. F., Lee M. R., Chromatographia, 67, 5-6, 2008, 425-431.
[139] Maw-Rong L., Chueh-Yu L., Zu-Guang L., Tzu-Feng T., J. Chromatogr. A, 1120,
2006, 244-251.
[140] Sabo M., Gross J., Rosenberg I. E., J. Soc. Cosmet. Chem., 35, 1984, 273-281.
[142] Jung K., Sacher M., Blume G., Janssen F., Herrling Th., SFW-Journal, 133, 2007, 2.
[143] Salvador A., Chisvert A., Actives for Skin-Care Products. Actives for Personal Hygiene
and Other Toiletry Products. Actives with Specific Claims. Analytical Methods, in Analysis
of Cosmetic Products, Elsevier, 2007, 364-380.
[145] Di Mambro V. A., Azzolini A. E. C. S., Valim Y. M. L., Fonseca M. J. V., Int. J.
Pharm., 262, 2003, 93-99.
[146] Masmoudi H., Y. Le Dreau Y., P. Piccerelle P., Kister J., Int. J. Pharm., 289, 2005,
117-131.
[148] Liu H., Sun S., Lv G., Chan K., Spectrochim. Acta A, 64, 2006, 321-326.
[157] Juncan A. M., Fetea F., Socaciu C., EEMJ (Environmental Engineering and
Management Journal), 2011 (accepred for publication).
[158] Guillen M. D., Cabo N., J. Sci. Food Agric., 80, 2000, 2028-2036.
[159] Dubois J. Van de Voort F. R., Sedman J., Ismail A.A., Ramaswamy H. R., JAOCS, 73,
1996, 787-794.
[160] Graf R., Beck T., Rudolph T., Jung K., Herrling T., Pflcker F., SFW-Journal, 134,
2008, 52-60.
[161] Fuchs J., Free Radic. Biol. Med., 25, 1998, 848-873.
[163] European Commission, The rules governing cosmetic products in the European Union,
vol. 1: Cosmetics legislation, ANNEX I, European Commission, Bruxelles, 1999.
[173] Juncan A. M., Hodian T., Horga C. E., Muntean N., Mitan M., Rev. Soc. Rom. Chim.
Cosmet., 10, 2, 2010, 8-10.
[174] Ito N., Hirose M., Fukushima S., Shirai T., Tatematsu M., Food Chem. Toxicol., 1986,
24, 10-11, 1071.
[175] Hirose M., Takesada Y., Tanaka H., Tamano S., Kato T., Shirai T., Carcinogenesis,
1997, 19, 1, 207.
[178] Juncan A. M., Horga C. E., Hodian T., Studia Universitatis, Chemia, 2011 (accepted
for publication).
[182] Juncan A. M., Lung C., Horga C. E., LV, 2, STUDIA UBB. PHYSICA, 2010, 85-94.
[183] Juncan A. M., Hodian T., 62, 4, Rev. Chim., 2011, 415-419.
- 57 -

Antioxidantii

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Antioxidantii

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

UNIVERSITATEA BABE-BOLYAI

FACULTATEA DE CHIMIE I INGINERIE CHIMIC

ANALIZA UNOR ANTIOXIDANI UTILIZAI N COSMETIC

PROF. UNIV. DR. TEODOR HODIAN

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

V.2.1 Date de referin privind compoziia cremelor i spectrele FTIR

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

folosite n oricare mod, pentru a mbunti aspectul corpului uman [1].

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Lucrarea de fa contureaz rolul i importana antioxidanilor n cosmetologie i totodat i

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

II.2 Clasificarea antioxidanilor

II.3 Consideraii pentru utilizarea antioxidanilor n formulrile cosmetice

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

trebuie s efectueze inocuitate dermatologic i s nu prezinte efecte primare de iritare i

II.4 Modul de aciune a antioxidanilor

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Figura 3: Antioxidani utilizai n produse cosmetice

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Tabelul 4: Mecanismul de aciune al antioxidanilor

Metode de extracie a antioxidanilor utilizai n cosmetic

extracia direct a antioxidanilor fr saponificarea grsimilor

Metode de analiz a antioxidanilor utilizai n cosmetic

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

pot aprea i care duc n final la erori n rezultatele finale.

Metodele cromatografice de toate tipurile, ca de exemplu cromatografia pe strat subire [91],

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

V.1 MATERIALE I METODE

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Tabelul 9: Concentraiile de -TA i BHA introduse n mod controlat n

V.1.2.3 Utilizarea metodei FTIR

Indicele carbonil (raportat la banda de absorbie C=O at 1746 cm1):

unde: Ai reprezint suma arilor dintre 1800 i 650 cm-1.

V.2 REZULTATE I DISCUII

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

spectrul FTIR specific produselor uleioase, cu evidenierea frecvenelor specifice gruprilor

Pe baza acestor indicaii s-au caracterizat spectrele specifice componentelor din

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Figura 9: Reprezentarea grafic a compoziiei cremelor utilizate n studiu

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

V.2.4 Caracterizarea cremelor prin spectre FTIR generice i zone de fingerprint.

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Gras Antirid Contur Ochi (mai bogat n compui polari).

Cr. Gras Antirid Contur

Cr. Semigras Lift Intensiv

Cr. Gras Lift Restructurant

i a celor carbonil (IC),

considernd valorile absorbiilor msurate la diferite frecvene IR (descrise la Materiale si

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Tabelul 17: Indicii de Nesaturare si Indicii Carbonil pentru cremele studiate

Cr. Gras Antirid Contur

Cr. Semigras Lift Intensiv

Crem Gras Lift

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

VI. Analiza prin metode cromatografice a unor antioxidani sintetici i

Figura 17: Procentajul procedeurilor analitice n funcie de categoriile de produse

Analiza unor Antioxidani utilizai n Cosmetic prin Metode Cromatografice

Matricea produselor cosmetice este complex, formulrile cosmetice conin un numr