LUCRAREA NR.

STUDIUL MICROSCOPULUI

Tema lucrrii:
1) Etalonarea micrometrului ocular.
2) Msurarea dimensiunilor unui obiect mic.
3) Determinarea aperturii numerice.
4) Determinarea grosismentului microscopului prin metoda lui Hooke.

Aparate:
Microscop Zeiss, obiective (6, 20), oculare (7X, 25X), micrometru obiectiv,
micrometru ocular, scal gradat, lamp de microscopie, camer clar, cilindrii metalici.

58
Consideraii teoretice:
Microscopul este un instrument optic care d o imagine mult mrit a unui
obiect, permind astfel distingerea detaliilor care nu sunt vizibile cu ochiul liber. Din
punct de vedere optic, microscopul este o asociaie de dou sisteme centrate, obiectivul
un sistem convergent cu distan focal mic (civa milimetrii) i ocularul de asemenea
un sistem convergent cu distana focal mare (civa centimetrii) (Fig. 6.1).

L' L"

B1
f F1'' f
F2''
A1 F1' O F2' A2 O

B2

B3()

Fig. 6.1 Schema optic a microscopului

Se consider pentru simplitate att obiectivul L' ct i ocularul L" ca fiind

lentile subiri. Obiectivul d o imagine A2B2 real, mrit i rsturnat a unui mic obiect
A1B1 aezat ntre focarul obiectivului i dublul distanei lui focale (mai aproape de
focar). Ocularul este aezat n aa fel nct imaginea dat de obiectiv s se formeze ntre
ocular i focarul ocularului. n felul acesta ocularul funcioneaz ca o lup i d o
imagine virtual mrit i rsturnat A3B3 fa de obiectul A1B1. Pentru a vedea clar
imaginea A3B3, adic pentru a pune la punct microscopul, se deplaseaz ansamblul
format din obiectiv i ocular n raport cu obiectul A1B1, pn cnd imaginea final se
formeaz ntre punctul proximum i punctul remotum al ochiului. n cazul unui ochi
normal, care vede la infinit fr acomodare, deplasarea microscopului se face n aa fel
nct imaginea A2B2 dat de obiectiv s se formeze n focarul obiect al ocularului F1.
Apertura numeric
Puterea de separare a unui microscop este dat de relaia:
1,22
= (6.2)
2n sin u
Produsul nsin u se numete apertur numeric, 2u este unghiul sub care se vede
din centrul obiectului diametrul pupilei de intrare (care coincide cu suprafaa lentilei

59
frontale a obiectivului), iar n reprezint indicele de refracie al mediului care se gsete
ntre obiect i lentila frontal a obiectivului (Fig. 6.2).

2u
O

Fig. 6.2 Determinarea aperturii numerice

Grosismentul (sau mrirea unghiular) a microscopului se poate exprima n

funcie de distanele focale f i f a celor dou lentile prin relaia:
d
G= (6.1)
f ' f ''
unde d este distana minim de vedere clar (d = 25 cm), iar = F2F1 i are valoarea
16 cm.
Un microscop este format dintr-un tub de metal fixat pe un suport la
extremitile cruia se pot adapta o serie de obiective i oculare. Ocularul intr cu o
uoar frecare la partea superioar a tubului, iar obiectivul este adus n direcia axei prin
nurubarea direct la extremitatea de jos a tubului. Obiectul se aeaz pe msua
microscopului care este prevzut cu o deschidere pentru trecerea luminii. Sub msu
se gsete sistemul de iluminare compus dintr-o oglind sferic i un condensor.
Condensorul ilumineaz obiectul de studiat i formeaz n planul obiectului o imagine
real a sursei. Reglarea fluxului luminos care intr n condensator se face cu ajutorul
unei diafragme iris. Obiectivul unui microscop este format dintr-un sistem de lentile
fixate ntr-o montur metalic (de ex. obiectivul Amici este format dintr-o lentil
frontal plan-convex, puternic bombat i din 2-3 acromate).
Ca obiective acromatice se folosesc oculare negative de tip Huygens.
Pentru msurtori de dimensiuni n cmpul imaginii, se folosesc oculare speciale
la care lentila ochiului este reglabil. Ocularul este prevzut cu un suport, pe care se
aeaz micrometrul ocular.
Micrometrul ocular este un disc de sticl prevzut cu o gradaie. El se introduce
n tubul ocularului, n planul diafragmei de cmp.
Micrometrul obiectiv este o lam plan paralel de sticl prevzut cu o gradaie
liniar fin (n cazul nostru 0,01 mm), care se aeaz n planul obiectului.

60
 Camera clar este un dispozitiv care permite observarea simultan a unei
gradaii micrometrice vzute prin microscop i a unei gradaii milimetrice vzut direct
cu ochiul liber.

ocularul
microscopului

scal
gradat de
mas

Fig. 6.3 Schema optic a camerei clare

Camera clar este format din dou prisme cu reflexie total, aezate n aa fel nct s
privim obiectul (gradaia milimetric) n direcia de observare prin microscop (fig.6.3).

Mersul lucrrii:

1) Etalonarea micrometrului ocular

Se privete prin ocularul 7x (n care se gsete micrometrul ocular) o suprafa
luminat i se rotete lentila ochiului, meninnd lentila de cmp fix, pn cnd se vede
clar gradaia micrometrului ocular. Se introduce apoi ocularul n tubul microscopului.
Se aeaz micrometrul obiectiv pe msua microscopului i se regleaz
microscopul pn cnd se vd clar gradaiile micrometrului obiectiv.
Se rotete ocularul pn cnd diviziunile micrometrului ocular sunt paralele cu
cele ale micrometrului obiectiv. Se determin cte diviziuni de pe micrometrul ocular M
coincid cu un numr ntreg de diviziuni de pe micrometrul obiectiv N. Valoarea unei
diviziuni de pe micrometrul ocular va fi:
N
A= (mm) (6.3)
100 M
n relaia de (6.3) factorul "100" a aprut datorit faptului c micrometrul obiectiv
este gradat n sutimi de milimetri.

61
 Determinrile se fac pentru fiecare obiectiv (6 i 20), iar citirile se repet de cel
puin trei ori pentru fiecare combinaie ocular - obiectiv.
Rezultatele experimentale i calculele se trec n tabelul 6.1.
Tabelul 6.1
Nr.obiectiv N M A A A A
0,01 mm div mm/div mm/div mm/div mm/div
Rezultatele obinute pot fi sintetizate cu ajutorul relaiei: A = A A (mm).

2) Determinarea dimensiunii liniare a unui mic obiect

Micrometrul obiectiv se inltur de pe msua microscopului i se aeaz un
obiect a crui dimensiune liniar vrem s o determinm (de ex. grosimea unui fir de
pr). Acesta se aeaz ntre dou lame de sticl plan paralele.
Se regleaz microscopul pn cnd imaginea firului de pr este clar. Se rotete
ocularul astfel ca diviziunile acestuia s fie perpendiculare pe firul de pr.
Se determin grosimea firului de pr (n diviziuni) cu ajutorul micrometrului
ocular. Fie N1 numrul acestor diviziuni.
Grosimea firului de pr este dat de relaia:
D = N1 (n mm)
n relaia de mai sus, pentru A se folosete valoarea medie determinat la
etalonare, corespunztoare fiecrui obiectiv.
Se fac cel puin trei determinri pentru pentru fiecare obiectiv (6 i 20).
Rezultatele experimentale se trec n tabelul 6.2.
Tabelul 6.2
D
Nr.obiectiv N1 D D D D
D
mm/div mm/div mm mm mm mm %

Rezultatele obinute pot fi sintetizate cu ajutorul relaiei: D = D D (mm).

3) Determinarea aperturii numerice a unui obiectiv

Se aeaz pe platina microscopului sub obiectiv, o foaie de hrtie milimetric i
deasupra ei un cilindru metalic de nlime h, care are pe suprafaa superioar, nite
zgrieturi (fig.6.4).

62
 O
Cilindru
h

A B
Hrtie milimetric

fig. 6.4.
Se ilumineaz razant faa superioar a cilindrului. Se regleaz microscopul astfel
nct zgrieturile s se vad clar.
n felul acesta planul n care se afl obiectul este tocmai suprafaa superioar a
cilindrului.
Se ndeprteaz cilindrul i se scoate ocularul, fr a mai deplasa tubul
microscopului. Se determin diametrul cmpului vizual AB prin numrarea ptrelelor
care se vd prin tubul microscopului.
Tangenta unghiului u din expresia aperturii numerice se calculeaz cu relaia:
AB 1
tg u = (6.4)
2 h
Se fac cel puin 3 determinri pentru fiecare obiectiv (6 i 20).
Pentru fiecare obiectiv se calculeaz unghiul de apertur ( u )i apertura
numeric ( n sin u ). Menionm c ntre obiect i obiectivul este aer.
Rezultatele experimentale i calculele se trec n tabelul 6.3
Tabelul 6.3
Nr. obiectiv AB=d h tg u u u n sin u
mm mm grade grade

4) Determinarea grosismentului microscopului prin metoda lui Hooke.

Pe msua microscopului se fixeaz micrometrul obiectiv.
Lumina de la lampa de microscopie se concentreaz cu ajutorul oglinzii i a
condensorului pe centrul micrometrului obiectiv.

63
 Se regleaz imaginea microscopului deplasnd tubul pn cnd se vd clar
diviziunile micrometrului obiectiv. Reglarea se face mai nti cu ajutorul urubului de
reglaj grosier i apoi cu ajutorul urubului micrometric de reglaj fin.
Observaie: La obiectivele de mrimi mari se lucreaz numai cu urubul
micrometric. Pentru a nu sparge preparatul se coboar cu grij tubul microscopului pn
cnd obiectivul se afl n imediata apropiere a preparatului. Apoi se privete prin ocular
i se ridic ncet tubul microscopului pn cnd imaginea este clar.
n faa microscopului, la distana minim de vedere clar, se aeaz rigla
milimetric n poziie orizontal, astfel nct diviziunile de pe micrometrul obiectiv s
fie paralele cu cele ale riglei gradate.
Se aeaz camera clar pe tubul microscopului n aa fel ca s se vad prin
orificiul ei imaginea micrometrului obiectiv. Se deplaseaz rigla milimetric pn cnd
ochiul vede simultan imaginea micrometrului obiectiv i cea a riglei milimetrice.
Fluxul de lumin se regleaz cu ajutorul diafragmei iris a condensorului pn
cnd cele dou imagini au aproximativ aceeai iluminare.
Se observ cte diviziuni q de pe rigla milimetric coincid cu un numr ntreg de
diviziuni p din imaginea micrometrului obiectiv.
Dac p sutimi de milimetri sunt acoperii de q milimetri de pe rigla milimetric,
grosismentul microscopului va fi dat de relaia:
100q
G= (6.5)
p
Se fac cel puin 3 determinri pentru fiecare combinaie obiectiv ocular (20-7;
20-25).
Rezultatele experimentale i calculele se trec n tabelul 6.4.
G
Tabelul 6.4
G
G
Nr. obiectiv Nr. ocular p q G G G G
G
0,01mm mm %

Rezultatele obinute pot fi sintetizate cu ajutorul relaiei: G = G G

64