PORUMB PE BAZĂ DE ANDROSTERILITATE (cms – forma maternă) ŞI RESTAURARE A FERTILITĂŢII (forma paternă restauratoare de fertilitate a polenului - Rf) Producerea de sămânţă hibridă la porumb pe bază de androsterilitate şi restaurare a fertilităţii polenului se realizează la HS forme parentale, la HS, HD și HT comerciali după următoarele formule: HIBRIZI SIMPLI – FORME PARENTALE: (Acms x Bnr) – HS mamă (steril); (Crf x Drf ) – HS tată restaurator de fertilitate. HIBRIZI COMERCIALI Hibrid simplu fertil (HS): (Acms x Brf ); Hibrid dublu fertil (HD): (Acms x Bnr) x (Crf x Drf ); Hibrid triliniar fertil (HT): (Acms x Bnr) x Crf; Liniile implicate în producerea seminței hibride de porumb pe baza de androsterilitate citoplasmatică sunt: Acms – linia androsterilă - se folosește ca formă mamă în realizarea hibrizilor; ANR sau AF - analogul fertil - se folosește ca polenizator al liniei androsterile Acms pentru înmulțirea acesteia; BNR - linia fertilă dar nerestauratoare de fertilitate – se folosește ca formă tată pentru crearea HS androsterili utilizați apoi ca formă mamă pentru obținerea HD sau HT; CRF și DRF - linii restauratoare de fertilitate – se folosesc ca formă tată pentru obținerea de hibrizi comerciali fertili. Androsterilitatea citoplasmatică este determinată de factorii citoplasmatici, care se comportă dominant.
Acest fenomen condiţionat genetic, prezintă un deosebit
interes pentru obţinerea de sămânţă hibridă, deoarece se evită operaţiunea de castrare a plantelor de pe rândurile mamă, care necesită un volum mare de muncă.
În literatura de specialitate sunt citate peste 100 de
tipuri de androsterilitate, care au fost descoperite în diferite provenienţe de porumb din zone ecologice foarte deosebite cum ar fi: Brazilia, Italia, Mexic, România, Turcia, S.U.A., Polonia. Tipurile de androsterilitate citoplasmatică sunt clasificate astfel:
- grupul T (androsterilitate de tip „Texas”), cu surse
de androsterilitate relativ stabile, dar toate susceptibile la rasa T de Helminthosporium maydis;
- grupul C, care include sursele El Salvador (ES) şi
Sursa Parana (PR) din Brazilia;
- grupul S, cel mai divers în privinţa stabilităţii
androsterilităţii în diferite condiţii şi a felului cum reacţionează genele de restaurare a fertilităţii Androsterilitatea de tip T a fost exploatată extensiv de amelioratori în producerea de sămânţă hibridă F1, deoarece asigura eliminarea autofecundării plantelor din genitorul utilizat ca linie maternă în câmpurile de hibridare controlate.
Sterilitatea masculină citoplasmatică de tip
T, a fost utilizată atât în scopuri comerciale, cât şi în cercetări genetice, iar celelalte tipuri: C şi S au fost folosite pe scară mai redusă. ETAP E 1. 1. Alegerea Alegerea plantelor plantelor tipice tipice şi şi testarea testarea liniilor liniilor consangvinizate consangvinizate A. PRODUCEREA SEMINŢEI BAZĂ nerestauratoare nerestauratoare de fertilitate (NR) de fertilitate (NR) şi şi aa celor celor restauratoare restauratoare de de 1. Alegerea fertilitate plantelor fertilitate (Rf) (Rf) cu liniiletipice cu liniile partenere partenere şi androsterile testarea liniilor androsterile (CMS);consangvinizate (CMS); nerestauratoare de fertilitate (NR) şi a celor restauratoare de 2. Controlul hibrizilor Controlul (Rf) 2. fertilitate hibrizilor obţinuţi obţinuţi în în urma urma testării testării liniilor liniilor NR NR Rf; Rf; cu liniile partenere androsterile (CMS); 3. 3. Menţinerea Menţinerea purităţii purităţii genetice genetice şi şi înmulţirea înmulţirea sub sub izolator izolator aa LC LC 2. Controlul hibrizilor obţinuţi în urma testării liniilor NR Rf; androsterile androsterile (CMS) (CMS) nerestauratoare nerestauratoare de de fertilitate fertilitate (NR) (NR) şi şi aa celor celor restauratoarepurităţii 3. Menţinerea restauratoare de genetice de fertilitate fertilitate şi înmulţirea aa polenului polenului (Rf); (Rf); sub izolator a LC androsterile (CMS) nerestauratoare de fertilitate (NR) şi a celor 4. Înmulţirea Înmulţirea pe descendenţe pe de descendenţe a LC CMS, NR NR şişi Rf; 4. restauratoare fertilitate aa LC CMS, (Rf); polenului Rf; 45. 5. Înmulţirea Înmulţirea izolată izolată în în spaţiu spaţiu aa LC LC CMS, CMS, NR NR şi şi Rf; Rf; 4. Înmulţirea pe descendenţe a LC CMS, NR şi Rf; 56. Producerea de de hibrizi simpli simpliaforme parentale – CMS CMS şi şi Rf 6. Înmulţirea 5. Producereaizolată hibrizi în spaţiu forme LC CMS, NR şi –Rf; parentale Rf 6. Producerea de hibrizi simpli forme parentale – CMS şi Rf B. PRODUCEREA SEMINŢEI HIBRIDE CERTIFICATĂ DIN HS, HD ŞI HT CU FORMA MATERNĂ CMS ŞI FORMA PATERNĂ Rf Schema de producere a seminţei hibride de porumb cu forma maternă androsterilă (CMS) şi cu forma paternă restauratoare de fertilitate a polenului (Rf) 1. ALEGEREA PLANTELOR TIPICE ŞI TESTAREA LINIILOR CMS, NR ŞI RF
Fiecare linie sau formă este însămânţată cu sămânţa din sursa
amelioratorului. În vegetaţie: - se fac observaţii cu privire la uniformitatea plantelor, eliminându-se plantele netipice; - în timpul înfloritului se efectuează un control asupra fiecărui panicul în parte. La liniile CMS se verifică dacă toate paniculele sunt androsterile, iar la liniile NR şi Rf se verifică dacă paniculele sunt androfertile, eliminându-se plantele cu panicule necorespunzătoare. În acest câmp se execută testări cu linia Acms (androsterilă) pentru a verifica dacă linia Bnr nu restaurează fertilitatea liniei Acms şi dacă liniile la liniile NR şi Rf se verifică dacă paniculele sunt androfertile, eliminându-se plantele cu panicule necorespunzătoare. În acest câmp se execută testări cu linia Acms (androsterilă) pentru a verifica dacă linia Bnr nu restaurează fertilitatea liniei Acms şi dacă liniile Crf şi Drf restaurează complet fertilitatea liniei Acms. Concomitent cu testarea se autopolenizează plantele aparţinând liniilor Bnr, Crf, Drf, iar linia Acms se polenizează cu analogul fertil (Anr) după metoda plantă cu plantă. Plantele polenizate se numerotează şi se recoltează individual. 2. CONTROLUL HIBRIZILOR OBŢINUŢI ÎN URMA TESTĂRII CU LINIA Acms
În câmpul de control se folosește pentru semănat sămânța provenită
de la știuleții rezultați din hibridarea de verificare. Metoda de semănat – un știulete pe un rând. Descendențele care au avut forma paternă nerestauratoare (Bnr) trebuie să fie androsterile, iar cele cu liniile paterne restauratoare (CRF și DRF) trebuie să fie androfertile, descendențele necorespunzătoare fiind eliminate. Se vor reține și înmulți numai știuleții plantelor care au dat rezultate corespunzătoare în urma testărilor, ei reprezentând sursa de semințe pentru multiplicările ulterioare. 3. MENŢINEREA PURITĂŢII GENETICE ŞI ÎNMULŢIREA SUB IZOLATOR (ISI) A LINIILOR CMS ,NR, RF
Din ştiuleţii reţinuţi în urma testării acestor linii se iau circa
100 seminţe din fiecare ştiulete pentru însămânţat în câmpul de ISI după metoda un ştiulete pe un rând. Linia ACMS se seamănă în rânduri egale cu linia analog fertilă ANR, alternând cele două forme pentru a uşura polenizarea, care se face după metoda rând cu rând (descendenţa ştiuletelui 1 de la ACMS se polenizează cu descendenţa ştiuletelui 1 de la ANR). Liniile BNR, CRf şi DRf se autopolenizează. Lucrări: - purificarea biologică; - controlul fiecărui panicul în parte pentru a verifica dacă liniile ACMS au toate paniculele androsterile, eliminându-se descendenţele cu panicule androfertile împreună cu perechea analog fertilă ANR. - la liniile cu citoplasmă C şi S se impune un control prelungit cu 5-10 zile după apariţia stigmatelor pentru a verifica dacă apare fenomenul late break (apariţia întârziată a anterelor), şi dacă anterele care apar eliberează polen sau nu. - la liniile NR, Rf se urmăreşte androfertilitatea paniculelor şi se elimină descendenţele parţial fertile sau androsterile, dacă apar. Recoltarea se face pe fiecare rând separat. După analiza tipicităţii şi a sănătăţii ştiuleţii se batozează pe descendenţe. Sămânâa obţinută în acest câmp reprezintă sămânţa amelioratorului pentru liniile CMS, NR şi Rf. 4. CÂMPUL DE ÎNMULŢIRE IZOLAT ÎN SPAŢIU Se foloseşte Se folosește sămânța sămânţa obţinută obținută în câmpul în câmpul anterior, anterior, asigurându- asigurându-se spațiul deseizolare spaţiuldedemin. izolare 400de mmin. față 400 m loturi de alte faţă dedealte loturi de pb. porumb. Linia androsterilă Linia androsterilă se seamănăse seamănă intercalat intercalat cu analogul cu analogul fertil înfertil benzi,înla o benzi, de paritate la o4:2 paritate 4:2 (4 (4 r. linia rânduri linie androsterilă : 2 androsterilă: r. linia analog2 fertilă) rând analog sau 2:1; fertil) 2:2; 4:4, sau 2:1; 2:2; în funcție 4:4 în funcţie de bogăția în polendeabogăţia în polen liniei analog a analogului fertilă. fertil. Lucrări: - purificări biologice; - controlul androsterilităţii în toată perioada înfloritului (şi după înflorit 5-10 zile la liniile cu citoplasmă C şi S), pentru a identifica şi elimina plantele androfertile înainte ca acestea să elibereze polen. Androsterilitatea paniculelor să fie maximă. Recoltarea ştiuleţilor se face separat forma androsterilă faţă de analogul fertil, recoltându-se mai întâi analogul fertil. Sămânţa obţinută – PB. 5. PRODUCEREA DE HIBRIZI SIMPLI - FORME PARENTALE
Organizarea lotului de hibridare simplă se face în funcţie de
tipul de hibrid care trebuie să fie obţinut. Pentru hibrizii simpli forma mamă (pentru hibrizi dubli), ca linie mamă se utilizează linia androsterilă, iar ca formă tată o linie androfetrtilă nerestauratoare de fertilitate. Forma mamă nu se castrează. Hibridul care se va obţine va fi androsteril. Pentru a obţine hibrizi simpli forma tată (pentru hibrizi dubli) se vor încrucişa două linii restauratoare de fertilitate. Dintre acestea, cea care va fi folosită ca mamă se va castra manual. Acesta va fi fertil şi restaurator de fertilitate. Pentru a obţine un hibrid simplu comercial ca formă mamă se va folosi o linie androsterilă, iar ca formă tată o linie restauratoare de fertilitate. Hibridul va fi androfertil. Lotul de hibridare dublă. Organizarea lotului de hibridare se va face utilizând ca formă mamă un hibrid simplu androsteril, iar ca formă tată un hibrid simplu restaurator de fertilitate. Hibrid simplu fertil (HS): (Acms x BRf ); Hibrid dublu fertil (HD): (Acms x Bnr) x (CRf x DRf ); Hibrid triliniar fertil (HT): (Acms x Bnr) x CRf;