Receptori ai Limfocitelor T

Populatii limfocitare
 Obiective

• Limfocite:
– Origine
– Caracteristici morfologice
– Tipuri majore
• Receptori limfocitari
– TCR
– CD4/8
– De adeziune
– Pentru citokine
ORGANIZARE & FUNCTIONARE SI

3
 CELULELE SISTEMULUI IMUN:
LEUCOCITELE
L Eritroida CSHP L. Trombocitoida

Linia Mieloida Linia Limfoida

Limfocite
Granulocite Monocite
NK L
CD 20% 80%

•Eozinofile Monocite MФ
•Bazofile
•Neutrofile L.T L.B
(PMN)
GRANULARE AGRANULARE
INNASCUTA ADAPTATIVA
 CELULELE SISTEMULUI IMUN:
LEUCOCITELE-Formula leucocitară
Neutrofile 50-70%
45-80% 2000-8000/mmc

Limfocite 25-45 (55)% 1500-4000/mmc

Eozinofile 0-4 (7)% 0-400 (700)/mmc

Bazofile 0-1 (2)% 0-100 (200)/mmc

 Limfocite: caracteristici morfologice
MO

9-15 μ
6-9μ

Limfocite Mici Limfocite Mari (LGL)

1. Ф = 6-9μ
1. Ф = 9-15 μ
2. Nucleu: mare, limfocitoid
2. Nucleu: mare ,limfocitoid
3. Citoplasma: redusa, perferica
3. Citoplasma: redusa, perferica
4. Durata de viata: ↑ (ani)
4. Tipuri: →NK
5. Tipuri: B/T* (*CAM)
5. Functie NK: citotoxica-
6. Functie: RIU /RIC
apararea antivirala (RII &RIAd)
 Tipuri majore de

Limfocite T
1.Limfocitele mici
• Celule B: CD19 ⁺

• Celule T : CD3⁺:
– T Helper: CD4 ⁺
– T Citotoxice: CD8⁺
– Tsupresoare (reg):

2. Limfocitele Mari (LGL)

• Celule NK:

CD16⁺, CD56⁺, CD3-

 Cluster of Differentiation (CD)
Ø Ac Mo:
1. Investigare: Ac monoclonali specifici (AcMo)
2. Identificare

Ø CD = NUMAR desemnat pe baza recunoasterii

specifice →

Ø Nomenclatura CD: evita denumirile multiple pt

aceeasi molecula
– 1st International Workshop and Conference on
Human Leukocyte Differentiation Antigens (HLDA, 1982)
 Limfocitele T:
RECEPTORI
I. Recunoastere antigenica:
1. TCR (-CD3, ξ): recunosc [DA-MHC]
2. CD4/CD8: recunoasc MHC

II. Rol accesor in activarea LT:

– CD28, CD45, CD40L, etc

III. Rol in adeziunea celulara

CD2, LFA1 (CD11a/CD18)

IV. Receptori (molecule) de interactiune celulara

― CK, CC
I.Receptorii de recunoastere Ag:
LTh

TCR
CD4
DAg

MHC II

APC

Recunoastere ASOCIATIVA:
―Non-self: epitop → TCR
―Self: MHC (α1,α2/3 /α1β1/₂) → TCR/CD4/8
I. Receptorii de recunoastere Ag:
Situs de recunoastere Ag
1. TCR: structura Lant α Lant β
N-
– Lant α: 45 kDa (cromozom 14)
– Lant β:40kDa (cromozom 7)
Vα Vβ
TCR: Domenii:
ØIntra-citoplasmatic: 5-12 aa Cα Cβ
ØTrans-membranar: 22-25 aa; ++
ØExtra-membranar::
Zona balama
++
D intra
citoplasm C-
subdomenii: ~100-110 aa
1. N-term: domenii Variabile: α, β → TCR
SITUSUL DE RECUNOASTERE Ag.
2. C-term: domenii Constante: Cα, Cβ
I. Receptorii de recunoastere Ag:

1. TCR: structura N- N-

Situs de CDR1
recunoastere Ag Vα Vβ
CDR2

CDR3

Structura SRAg
= legaturi SS
Contacte punctiforme:
—Plicaturare →protuzioneaza→ C- C-
—Secventa de aa (8-15)
CDR: complementary determining regions→
•CDR₁ x2
•CDR₂ x2 =PARATOP
•CDR₃ x2
 I. Receptorii de recunoastere Ag:

1. TCR: structura
Situs de APC
recunoastere Ag: MHC (II)

Vα
Vβ
Functionare SRAg:
DAg

• CDR1 & CDR2→ CDR1

domenii polimorfe ale MHC
• CDR 3 → epitop CDR2
CDR3

LT

=> recunoastere Ag asociativa intra-receptoriala

I. Receptorii de recunoastere Ag:

1. TCR: structura -Situs de recunoastere Ag:

 I. Receptorii de recunoastere Ag:
CD3 (- ξ ξ) :
Structura
CD3: (Ig-like)
Ø Lanturi: γδε
• Domenii:
– Ex-cel
– Tmb:Asp (–)
– In-citopl (44-81aa); ITAM – – + – – + – –
• Gene: cromozom 11

Ø Lanturi ξ* :
• Domenii:
– extracelular scurt-9aa
– transmb: Asp (-)
– lung-113aa; ITAM
• Gene: cromozom 1 Immunoreceptor Tyrosine-based
• Legate 2SS de CD45, ZAP-70 Activation Motif (ITAM)

Functional: complex [TCR-CD3]

 Limfocitele T:
Markeri de suprafata
I. Recunoastere antigenica:
dubla & asociativa
1. [TCR -CD3, ξ]
2. CD4/CD8 = CO-RECEPTORI

II. Rol accesor in activarea

limfocitelorT:
– CD28, CD45, CD40L, etc

III. Rol in adeziunea celulara

– CD2, LFA1 (CD11a/CD18)

IV. Receptori de interactiune celulara

― CK, CC
 I. Receptorii de recunoastere Ag:

2. CD4 & CD8: structura

Ø CD4→LTH
― GP transmembranara (60kDa)
― Structura: Ig-like MONOMERICA
― Domenii:
― Ex-mb (N’): 4 subdom →MHC II (α2, β₂)
― Transmb (hidrofob)
― Intracitoplasm –lunga ( ~38 aa) →
Ø CD8 →LTC/s
― GP transmembranara (72kDa)
― Structura 2 lanturi Ig-like: α, β →
― Domenii:
― extramb (N’) →MHC I (α₃)
― transmb hidrofobica
― coada citopl lunga (~25 aa) → fosforilaza PTK: LcK p56
 I. Receptorii de recunoastere Ag:

2. CD4 & CD-functie:

co-receptori CD4/
CD8
recunoastere [Dag-MHC]

Ø CD4→LTH:
― Recunoastere →MHC II (α2, β2)
― Semnalizare intracel: PTK:LcK
Ø CD8 →LTC
― Recunoastere→MHC I (α3 )
― Semnalizare intracel PTK: LcK

=>
1. ↑sensbilitatea LT fata de [epi-MHC] x100
2. Faciliteaza transducerea semnalului
Remember!
APC
Recunoasterea Ag= ASOCIATIVA
CD4/
CD8 TCR
TCR-CD3 & CD4/CD8→
1. recunoastere Ag asociativa dubla →
– Intra-receptoriala:
• TCR → CDR3 (x 2)→ Ag
• TCR →CDR 1,2 ( x2) → MHC II
LT
– Inter-receptoriala:
• TCR (CDR)→ MHC (x2)
• CD4/CD8→ MHC (x1)
2. recunoastere Ag restrictionata (MHC)
Ag membranare x3 categ
CD4/CD8 – rol in activarea LT
 complex [TCR-CD3]:
Semnalizarea intracelulara

― Semnal activator →
― +kinaze →
― ℗ Tyr (ITAM)→
― + cai semnalizare
intracitoplasmatice
 Limfocitele T:
RECEPTORI
I. Recunoastere antigenica:
1. TCR (CD3, ξ)
2. CD4/CD8

II. Rol accesor in activarea

limfocitelorT:
– CD28,CD45, CD40L, etc

III. Rol in adeziunea celulara

– CD2, LFA1 (CD11a/CD18)

IV. Receptori pt citokine:

― Familii de receptori: tip I, II, TNF, IL-1, etc
 II. Receptori cu rol accesor
in activarea limfocitelorT CD45
(Co-stimulatori)

1. CD45
― Localizare: leucocite (10%supraf)
― Structura: GM 180-240kDa/6 izoforme:
― LT naïve: CD45 RA (>20O kDa)
― LT memorie: CD45 RO (180 kDa)
— Rol: stabileste legaturi cu ζ ζ
→PTP→p56 Lck, p59Fyn, ZAP-70
Transducerea semnalelor
ACTIVATOARE→

MATURIZARE FUNCTIONALA A LT
 II. Receptori cu rol accesor
in activarea limfocitelorT
(Co-stimulatori)

2. CD28
(activator)
― Localizare: ~0%→80% LT(LTc50%)
― Structura: GP, homodimer
— ex-cel : ~Ig→ recunoastere B7
(CD80)
— in-cel : → transducere semnal
— Rol: cooperare celulara LT-APC
— Stimuli activatori → +CK

ACTIVARE LT
 II. Receptori cu rol accesor
in activarea limfocitelorT

3. CTLA-4/CD152
(inhibitor)
―Localizare:
―T activate
―Treg

―Structura: GP tmb Cytotoxic T-Lymphocyte-

Associated protein 4
— ex-cel : → rec B7 (CD80)
— in-cel : → transducere semnal

―Rol: cooperarea cel APC-LT

— semnale inhibitorii →
↓raspunsul LT

INHIBARE LT
 II. Receptori cu rol accesor
in activarea limfocitelorT

4. CD40L /CD154
(Stimulator indirect)

― Localizare: LT activate
― Structura: GP tmb (fam TNF)
― ex-cel : → recunoastere CD40 (APC)
― in-cel: transduce semnal activator
― Rol: cooperare celulara LT-APC
(Bucla de amplificare a)

APC: +B7,↑IL2

AMPLIFICAREA INDIRECTA A ACTIVARII LT (H)

 Limfocitele T:
RECEPTORI
I. Recunoastere antigenica:
1. TCR (CD3, ξ)
2. CD4/CD8

II. Rol accesor in activarea

limfocitelorT:
– CD28, CD45, CD40L, etc

III. Rol in adeziunea celulara

– CD2, LFA1 (CD11a/CD18)

IV. Receptori pt citokine:

― Familii de receptori: tip I, II, TNF, IL-1, etc
 III. Rol in adeziunea celulara

1. CD2
— Localizare:
— Toate LT (in special, LT naïve)

— Structura: GP tmb
— ex-cel (2 subdom): CD58 /Lymphocyte
Function-associated Antigen
— in-cel: lung (126aa)

— Rol: Adeziunea LT-APC Lymphocyte Function-

associated Ag- 3
— Stabilizare TCR-MHC
— Transductor celular →
Activarea LT

CD2 – CD58 = cuplu de adeziune de linia I

 III. Rol in adeziunea celulara

2. LFA-1
(CD11a/CD18)
— Localizare:
— LT mature (LT cu memorie*)
— Cel: LB, Mo, MФ

— Structura: heterodimer
— lanturi: α (CD11a) & β (CD18)
— ex-mb (Ig-like) → ICAM (1,2,3)
— in-cel: transductor

— Rol: Adeziunea LT-APC →

LFA1-ICAM : Cuplu de adeziune de linia a II-a

 III. Receptorii cu rol in adeziunea celulara

Functii

1. Stabilirea contacte
intime intercelulare
CD2 – CD58
LFA1-ICAM

2. Favorizarea
3. Stabilizarea
contactelor TCR-MHC

SINAPSA IMUNOLOGICA - etape

 Tipuri si fenotipuri
majore de Limfocite

1.Limfocitele mici
• Celule B: CD19 ⁺
• Celule T : CD3⁺
• T Helper: CD4 CD28⁺
• T Citotoxice: CD8⁺ CD28⁺
• Tsupresoare : CD8+
• T reg: CD4+CD28-
 Limfocitele T:
Markeri de suprafata
I. Recunoastere antigenica:
1. TCR (CD3, ξ)
2. CD4/CD8

II. Rol accesor in activarea

limfocitelorT:
– CD28, CD45, CD40L, etc

III. Rol in adeziunea celulara

– CD2, LFA1 (CD11a/CD18)

IV. Receptori de interactiune celulara

― CK, CC
IV. Receptori pentru CK
Sfarsit