Biologie molecular Transcripia i processingul S.

Capcelea

Transcripia i processingul
1. Transcripia
1.1 Principiile transcripiei
1.2 Unitatea transcripional
1.2.1 Particularitile unitii de transcripie de clasa I
1.2.2 Particularitile unitii de transcripie de clasa II
1.2.3 Particularitile unitii de transcripie de clasa III
1.2.4 Particularitile unitii de transcripie din ADNul mitocondrial
1.3 Etaplele transcripiei
1.4 Aparatul de transcripie
Activarea ARN-polimerazei I
Activarea ARN-polimerazei II
Activarea ARN polimerazei III
1.5 Produsul transcripiei
2. Modificri Co- i Posttranscripionale ale moleculelor de ARN
2.1 Processingul ARNm
2.1.1 CAParea
2.1.2 Polyadenilarea
2.1.3 Splicingul ARNm
2.1.4 Rolul medical al splicingului
2.1.5 Editarea ARN
2.2 Processingul ARNt
2.3 Processing-ul ARNr

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

Transcripia i processing-ul
2. Transcripia
Transcripia reprezint prima etap crucial n expresia genelor; este procesul de
copiere a IG codificate n ADN prin sinteza unor molecule de ARN necesare pentru sinteza
proteinelor.
1.1 Principiile transcripiei
a) Transcripia se realizeaz matricial
una din cele dou catene polinucleotidice de
ADN servete model pentru sinteza unei catene
de ARN; catena codogen este netranscris, iar
catena anticodogen servete matri n timpul
transcripiei;
b) Se
desfoar
dup
principiul
complementaritii catena sintetizat de
ARN este complementar matriei i, astfel,
identic catenei codogene (cu excepia: T din
ADN este nlocuit cu U n ARN)
c) Transcriia se realizeaz antiparalel
catena matri de ADN este citit n direcia
3'5', iar sinteza catenei de ARN se
desfoar n direcia 5'3';

d) Transcripia
se
realizeaz
unidirecionat fiecare gen are o
secven semnal SIT+1 de la care ncepe
transcripia de la 3' la 5' spre semnalul

Figura 1.

terminatorului.

1.2 Unitatea transcripional

Transcripia se efectueaz selectiv i necesit semnal de iniiere i de terminare.

Transcripia se realizeaz ca rspuns la stimuli fiziologici i de mediu. n timpul transcripiei
se sintetizeaz diferite tipuri de ARN (m, t, r, micro). Unitatea de transcriie reprezint
segmentul de ADN ce conine secvene specifice ce asigur:
recunoaterea unui anumit tip de gen i iniierea transcripiei promotorul;
structura preARNului secvena codant;
terminarea transcripiei terminatorul;
modularea ratei i vitezei de transcripie enhanceri / silenceri, specifici doar
pentru genele de clasa II.

Figura 2. Organizarea general a unitii de transcripie

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

Figura 3.Particularitile unitilor de transcripie ale genelor nucleare

1.2.1 Particularitile unitii de transcripie de clasa I

Genele de clasa I codific ARNr 18S, 5,8S si 28S ce asigur biogeneza ribozomilor
80S pentru sinteza proteinelor. Unitatea de transcripie a genelor de clasa I include:

Promotor partial transcris (-45+20) cu +1;

Gena ARNr18S;
Spacier necodant;

Gena ARNr5,8S;
Spacier necodant;

Gena ARNr28S;

Terminator.
1.2.2 Particularitile unitii de transcripie de clasa II
Genele de clasa II sunt gene structurale nucleare ce codific proteine ce asigur
structura i funcia celulei date. Sunt numeroase (circa 30 000 perechi gene) i extrem de
heterogene, unele cu expresie continu genele housee keeping, altele cu expresie
dependent de esut sau perioad ontogenetic. La general, unitatea de transcripie de clasa II
include o singur gen structural i cuprinde urmatoarele secvene:

Enhancer / Silencer;

Promotor (ex: .-120GC.-80..CATT-30..TATA), netranscris;

+1, secventa lider

Exon/intron/exon/intron..exon

Terminator cu situs polyA;

Enhancer / Silencer distali

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

1.2.3 Particularitile unitii de transcripie de clasa III

Genele de clasa III codific pentru sinteza ARNr 5S component al subunitii
ribozomale 60S; codific molecule de ARNt i unele variante de microARN, n special
ARNsn din componea RNP U6 al spliceosomei. Aceste gene sunt transcrise de ARN
polimeraza III, fac parte din categoria genelor house keeping cu activitate permanent n
celul i sunt prezente n genom n mai multe copii - de la 300 pn la 3000 de copii.
Genele ARNr 5S au urmatoarele particulariti:
o Promotor cu elemnete reglatoare interne (boxa A+50+60 i boxa C
+80+90), transcris;
o Gena ARNr 5S ;
o Terminator.
Genele ARNt au urmatoarele particulariti:
o Promotor cu elemnete reglatoare interne (Boxa A+10+20 i boxa B
+50+60), transcris;
o Gena ARNt;
o Terminator

1.2.4 Particularitile unitii de transcripie din ADNul mitocondrial

Genele mitocondriale sunt organizate n
dou uniti de tansripie antisens - una pe catena
grea H i a doua pe catena uoar L. Transcripia
este realizat de o ARN-polimeraz mitocondrial
importat din citozol.
Catena H conine:
Promotor, 12 gene structurale, 2 gene ARNr
separate cu 14 gene ARNt, terminator;
Catena L conine:
Promotor, 1 gena structural, 8 gene ARNt,
terminator.
Figura 4. ADNul mitocondrial cu dou
uniti de transcripie H i L.

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

1.3 Etapele transcripiei

Transcripia se desfoar n trei etape:
Iniierea implic Recunoaterea promotorului;
Identificarea +1;
Activarea ARN-polimerazei;
Denaturarea local a ADNului;
Identificarea catenei matri 3'5';
Elongarea reprezint
Alunecarea ARN-polimerazei de-a
lungul catenei matri 3'5';
Polimerizarea NTPurilor
complementare matriei ntr-o molecul
de ARN 5'3';
Alungirea ARNului;
Terminarea Recunoaterea secvenei terminator;
Disocierea ADN, ARN-polimeraz i
ARN sintetizat.
Figura 5.

Fiecare eveniment necesit interaciunea corect a factorilor proteici de transcripie

(specifici fiecrei clase de gene) cu secvene specifice ale genei transcrise. Etapa decisiv n
transcripie este iniierea, care are ca sarcin s identifice corect gena, n special pentru
transcripia genelor structurale de clasa II (v amintim c sunt gene esut specifice,
dependente de perioada ontogenetic sau activate n anumite condiii de mediu).

Figura 6. Principalele elemente ce caracterizez iniierea i elongarea transcripiei.

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

2.4 Aparatul de transcripie

La transcripie particip trei componente de baz:

ADNul cu secvenele reglatoare ale iniierii, elongrii i terminrii procesului, care
difer de la gen la gen;
ARN-polimeraza enzima care realizeaz sinteza ARNului copia complementar a
catenei 3'5' a segmentului de ADN;
4 tipuri de NTPuri ATP, GTP, CTP i UTP, monomeri ai moleculei de ARN
sintetizate.
Figura 7. Domeniile ARN-polimerazei.
ARN-polimeraza este o enzim ADN
dependent, multifuncional, format din 1012 subuniti i conine numeroase domenii
funcionale ce:
- denatureaz ADNul;
- citete matria de ADN;
- selecteaz NTPuri complementare;
- polimerizeaz nucleotidele n direcia
5'3',
- alunec de-a lungul matriei,
sintetiznd o caten de ARN.

n celula uman funcioneaz trei ARN polimeraze diferite n nucleu i o ARN

polimeraz n mitocondrii. ARN polimeraza I sintetizeaz numai preARNr, ARN polimeraza
II sintetizeaz preARNm i unele molecule mici de ARN nuclear care particip la splicingul
ARNm, iar ARN polimeraza III sintetizeaz ARNt, ARNr 5S i multe alte molecule relativ
scurte i stabile de ARN.
Tabel 1 Caracteristica ARN - polimerazelor eucariote
Unitatea de
transcripie

Produsul transcripiei

Inhibat de amanitin (toxin din

Gene ARNr 18S,

5,8S i 28S
Gena structural

preARNr 45S

preARNm
preARNsn
preARNr
preARNt
preARNsn, sc, si,
ARN policistronic

+++

ciupercile de pdure)

ARN polimeraza I
ARN polimeraza II
ARN polimeraza III
ARN polimeraza mt

Gen ARNr 5S
Gen ARNt
Gene microARN
Gene ARNr, ARNt i
structurale

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

ARN polimerazele eucariote (I, II sau III) nu interacioneaz cu promotorul.

Promotorul fiecrei categorii de gene este recunoscut de factori proteici de iniiere a
transcripiei care induc ataarea ARN polimerazei corespunztoare, declanarea procesului de
transcripie i sinteza unui ARN.

Figura 8. Factorii proteici de transcripie ce interacioneaz cu boxele promotorului i activeaz

ARN polimeraza corespunztoare.

Activarea ARN-polimerazei I ntr-un complex de iniiere a transcriiei (PIC) la

genele ARNr ncepe proximal prin:
- Ataarea UBF (upstream binding factor) la secvenele proximale promotorului - UCEs
(upstream control elements);
- Recrutarea factorului de iniiere SL-1 ce conine TBP (TATA-box-binding protein);
- Alipirea a cel puin 5 factori de asociere la boxa TATA (TAFs);
- Complexul UBF-SL1 recruteaz ARN polimeraza I n complexul de iniiere.

Activarea ARN-polimerazei II se desfoar n urmatoarele etape:

TBP asociaz la boxa TATA a promotorului, TBP este component al TFIID;
TFIID este un complex multi proteic format prin asocierea TBP i TAF II (10-12
subuniti esut specifice), unele modific histonele, unele poziioneaz corect factorii
generali de transcripie;
TFIIA i TFIIB interacioneaz cu TBP;
TFIIB recruteaz ARN polimeraza II i TFIIF cu poziionarea ARN polimerazei II lng
+1 (SIT);
TFIIH mediaz denaturarea local a ADN i determin formarea unui complex deschis
stabilizat de TFIIE;
Factorii de transcripie se leag la Enhanceri activatorii transcripiei.

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

Figura 9. Etapele formrii complexului de iniiere a transcripiei genelor de clasa

II activarea ARN-polimerazei II

Figura 10. Rolul enhancerului n iniierea transcripiei

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

Activarea ARN polimerazei III se realizeaz diferit dac se transcriu gene ARNt
sau gene ARNr 5S sau gene micro ARN. Analizm primele dou variante:
-

Pentru iniierea transcripiei genelor ARNt:

o Recunoaterea boxelor A i B ale secvenelor de control intern de ctre TFIII C i
TFIII B;
o TFIII B recruteaz ARN-polimeraza III;
Pentru iniierea transcripiei genelor ARNr 5S:
o Boxele A i C ale promotorului sunt recunoscute de TFIII A, TFII C i TFIII B;
o TFIII B recruteaz ARN-polimeraza III.
Tabel 2. Caracteristica comparativ a aparatului de transcripie a genelor eucariote
nucleare:
Aparatul de
transcripie a
genelor de clasa I

Aparatul de transcripie
a genelor de clasa II

Aparatul de
transcripie a genelor
de clasa III

Unitatea de
transcripie

Promotor
Gene ARNr 18S, 5,8S i
28S separate prin spacieri
Terminator

Promotor
Gena ARNr5S sau ARNt
Terminator

Enzim
Uniti de
polimerizare
Factori de transcripie
generali
Factori de transcripie
esut specifici

ARN polimeraza I

Promotor
Exoni/introni
Terminator cu situs PolyA
Enhanceri
Silenceri
ARN polimeraza II

ATP, GTP, UTP, CTP

ATP, GTP, UTP, CTP

ATP, GTP, UTP, CTP

UBF, SL1

TFIID, TFIIA, TFIIB, TFIIF,

TFIIH, TFIIE

TFIIIA, TFIIIB, TFIIIC

Factori de transcripie
inductibili

HNF3 specific pentru hepatocit

MyoD specific pentru miocite
Oct-1, Oct-2 pentru limfocite B
NF1 specific pentru neuroni
Etc.
HIF-1 - Hypoxia-inductibil
factor
ER estrogen receptor
PR progesteron receptor
GR glucocorticoid receptor
TP Tyroid hormone receptor

ARN polimeraza III

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

1.5 Produsul transcripiei

Transcripii primari sunt reprerezentai de molecule de ARN cu diferit secven
nucleotidic i lungime precursori ai ARNm (preARNm); precursori ai ARNr (preARNr
45S, preARNr 5S); precursori ai ARNt (preARNt) i precursori ai micro ARN (preARNsn,
preARNsno, preARNmi, preARNsi). n timpul i dup transcripie preARN sufer o serie de
modificri ce determin forma lor funcional, stabilitatea, rezistena la aciunea
exonucleazelor, interaciunea specific cu exportinele nucleare (majoritatea moleculelor de
ARN sintetizate n nucleu funcioneaz n citoplazm).

Figura 11. Produii transcripiei genelor nucleare

10

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

2. Modificri Co- i Posttranscripionale ale moleculelor de ARN

2.1 Processing-ul ARNm
Produsul
transcripiei
genelor
structurale nucleare este preARNm
ce conine att secvene codante de
protein, ct i secvene necodante.
n timpul processingului preARNm
este supus urmatoarelor procese:
CAPare;
Polyadenilare;
Splicing;
Editare.

Figura 12. Etapele processing-ului ARNm

2.1.1 CAParea prelucrarea captului 5' al ARN prin adugarea unui GTP ntr-o
legatur nespecific 5'ppp5' de ctre Guanilat transferaza. n plus Guanina adugat i primele
dou nucleotide sunt metilate. CAPul este adugat dup iniierea transcripiei, cnd sunt
polimerizate primele 20-30 ribonucleotide.

Figura 13. CAP-area captului 5' al ARNm

CAPul are urmtoarele funcii:

Protecia captului 5 ' al ARNm de exonucleaze;
Recunoaterea ARNm de ctre factorii de iniiere a translaiei, pentru a fi fixat pe
subunitatea 40S a ribozomului.
2.1.2 Polyadenilarea reprezint procesul de modificare a captului 3' al preARNm.
Semnalul de poliadenilare este reprezentat de
secvena
AAUAAA
din
regiunea
terminatorului.
Complexul
enzimatic
responsabil de poliadenilare recunoate
situsul polyA, componenta endonucleazic
cliveaz preARNm la 11-30 nucleotide distal
AAUAAA, iar polyA-polimeraza adaug 25250 de ribonucleotide cu Adenin (25-250
ATPuri).
Secvena polyA este important
pentru:
Figura 14. Poliadenilarea ARNm
stabilizarea captului 3' al ARNm;
interaciunea cu receptorii porului nuclear n timpul exportului ARNm.
11

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

2.1.3 Splicing-ul ARNm

Majoritatea genelor structurale nucleare conin secvene codante exoni i secvene
necodante introni care dup transcripie se regsesc n preARNm. n timpul splicingului
intronii sunt nlturai i sunt unii specific exonii ntr-un ARNm matur. Splicingul este
realizat de un complex RNPsn numit spliceosom - compus din ARNsn U1,U2,U4,U5 i U6
+ 60 proteine. Splicingul este reglat de secvenele consens ale intronului.
Fiecare intron este delimitat de exoni
prin
dubletele
5'GU.AG3'.
5'GU.al intronului este definit ca situs
donor de splicing, iar .AG3' situs
acceptor. Deoarece intronul este eliminat n
forma unui lasou, n interiorul intronului
mai aproape de 3' se regsete i o Adenin
(A- situsul buclei) cu rol de fixare a
captului 5' al intronului pentru formarea
lasoului caracteristic.

Figura 15. Splicingul

Splicingul este realizat n mai multe etape, de ctre spliceosom, dup principiul
complementaritii
(ARNsn
din
componena ribozimelor U1-U6 conin
secvene
complementare
anumitor
secvene din introni), programat
necesitilor celulare.
(a)
U1 se fixeaz la 5'GU al
intronului; U2 se fixeaz la A situsul
buclei;
(b)
Trimerul U5/U4/U6 se fixseaz
la U1 i U2; U5 identific AG3' al
intronului; Se cliveaz captul 5' al
intronului i U2/U6 asigur formarea
lasoului.
(c)
Clivarea 3' al intronului, unirea
exonilor ntr-un ARNm matur, iar
intronul este eliberat i supus degradrii.
Figura 16. Aparatul de splicing

12

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

90% dintre genele umane codificatoare de proteine i transcripii acestor gene au o

structur mozaic prin alternarea exonilor i intronilor. n timpul procesing-ului dintr-un
preARNm se pot forma diferite variante de ARNm i n final diverse izoforme ale proteinelor
codificate de aceiai gen. Procesul de eliminare difereniat a intronilor i combinare diferit
a exonilor poart denumirea de splicing alternativ. Splicing-ul alternativ este dependent de
reglarea expresiei genelor n anumite condiii (esut, perioad ontogenetic, sex, etc.). Genele
pot avea situsuri alternative de splicing (unele localizate la grania exon/intron, altele n exon
sau intron), recunoscute de factorii esut specifici reglatori ai recunoaterii i nlturrii
intronilor, foarte probabil programate prin modificri epigenetice ale ADNului genic,
modificri posttranslaionale ale proteinelor implicate n splicing.

Figura 17. Diferite variante de splicing al preARNm i sinteza diferitor

izoforme de proteine codificate de aceiai gen.

Tipuri de splicing:
(a) Splicing constitutiv se nltur toi intronii i exonii sunt unii n ordinea nscris n
gen;
(b) Splicing prin omiterea unor exoni;
(c) Splicing prin utilizarea unor situsuri de splicing alternative;
(d) Splicing prin omiterea unor introni.
Unele gene conin promotori altenativi sau cteva situsuri PolyA.
Datorit splicingului alternativ pe baza uneia i aceleai gene se pot obine diferite
izoforme ale proteinei (exemplul 1) sau diferite proteine cu funcii diferite (exemplul 2).

13

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

Exemplul I . Splicingul alternativ al ARNm pentru tropomiozin n celulele

muchilor striai i netezi. Gena Tropomiozinei i preARNm conine 14 exoni dintre care:
Exonii 3,11 i 12 specifici tropomiozinei muchilor scheletici;
Exonii 2 i 14 specifici tropomiozinei muchilor netezi;
Exonii 1, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 i 13 se regsesc n ambele tipuri de tropomiozin;

Figura 18. Gena Tropomiozinei i splicingul alternativ

Exemplul II. Splicing-ul alternativ al transcriptului genei Calcitoninei n celulele C

ale tiroidei i n celulele hipotalamusului.
n celulele C ale tiroidei se obine hormonul Calcitonina care regleaz homeostazia Ca
n ser, este un potenial
vasodilatator i hipotensiv.
n
celulele
hipotalamusului
prin
splicing alternativ se obine
CGRP (Calcitonin GeneRelated Peptid) care este un
neuropeptid
cu
efect
vazodilatator a diferitor vase
craniene, coronariene i
sistemice; poate transmite
durerea i este implicat n
patogenia migrenei.

Figura 19. Gena Calcitoninei i splicingul alternativ

14

Exonii A, B, C, D
sunt comuni si pentru
Calcitonin i pentru CGRP,
iar urmtorii doi exoni sunt
selectai difereniat n cele
dou tipuri de celule. n
plus, gena CT are dou
situsuri
alternative
de
poliadenilare.

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

2.1.4 Rolul medical al splicingului:

Sunt descrise patru clase de defecte ale splicing-ului pre-ARNm:

Figura 20. Defecte de splicing

A. Mutaii n unul din situsurile de splicing constitutiv - rezultatul este formarea

unui ARNm nenatural, sinteza unui polipeptid modificat, trunchiat i inactiv din
punct de vedere funcional.
a. defectul de splicing al ARNm pentru beta-globin, ca rezultat al mutaiei n
situsul de splicing al genei HBB. n consecin se produce o protein
aberant responsabil de beta-talasemie.
b. Defectul n situsul de splicing 5 ' n gena GH-1 (hormonului de cretere)
determin deficiena familial a hormonului de cretere de tip II ( o form
de nanism familial);
B. Mutaii n unul din situsurile de splicing alternativ, ce rezult prin pierderea
capacitii de a produce diferite izoforme ale proteinei, de regul, cu specificitate
de anumit esut.
a. Defectul de splicing n gena WT-1 determin sindromul Frasier manifestat
prin agenezie renal i gonadal. Gena WT-1 codific un factor de
transcripie pentru genele responsabile de morfogeneza glomerulilor renali
i gonadelor (ovarelor i testiculelor)
15

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

C. Defecte ale factorilor responsabili de splicing U1-U6:

a. Deficiena U4/6 i U5 determn ineficiena processingului ARNm
sintetizat pe baza genelor responsabile de diferenierea i supravieuirea
celulelor retinei. Defectele acestora se manifest prin Retinita pigmentoas
ce se caracterizeaz prin degenerarea progresiv a retinei i treptat
pierderea total a vederei.
b. Deficiena U1,U2 i U5 determin atrofia muscular spinal, cu pierderea
progresiv a neuronilor motorii pentru spinali cu denervarea muchilor
scheletici i n consecin atrofia i paralizia muchilor voluntari.
c. Alt exemplu este Lupus eritematosus, la baza patogenetic a cruia este
mecanismul de producere a autoanticorpilor contra snRNPU1 i contra
altor proteine proprii.
D. Defecte ale factorilor reglatori ai splicing-ului alternativ:
a. Distrofia miotonic este determinat de defecte n reglarea splicing-ului
pre-ARNului obinut prin transcripia genei CNBP sau ZNF9 (CCHC-type
zinc finger, nucleic acid binding protein). Gena CNBP este expresat n
celulele muchiului cardiac i scheletal. O form aberant a proteinei
codificate determin hiperexcitabilitatea muchilor scheletici (miotonie),
slbiciuni musculare progresive, defecte de conductibilitate a inimii,
cataract, disfuncii ale musculaturei netede, atrofie testicular.

16

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

2.1.5 Editarea ARN

Un alt mecanism de reglare a expresiei genelor n diferite esuturi este editarea ARN.
Aceasta implic modificarea secvenei nucleotidice din regiunea codant a ARNm:
1. Dezaminarea Adeninei rezultnd Inosina, recunoscut n timpul decodificrii
ARNm ca Guanin (sistemul A n I) );
2. Dezaminarea Citozinei cu transformarea n Uracil (sistemul C n U).
Prima informaie despre editarea C n U s-a referit la ARNm pentru Apolipoproteina
B (apoB). Editarea implic schimbarea codonului CAA n codonul UAA codon STOP
translaional ce determin
terminarea
prematur
a
sintezei proteinei.
ARNm obinut n hepatocite
nu se supune editrii i
proteina apoB are o lungime
complet
de
4536
aminoacizi numit apoB100. ApoB-100 se gsete
doar n particulele VLDL
produse i secretate de
celulele ficatului.

Figura 21. Editarea ARNm pentru ApoB

n enterocite ARNm este supus editrii i astfel se sintetizeaz o proteina apoB mai scurt,
2152 de aminoacizi apoB-48. Aceast apoB-48 este gsit doar n lipoproteinele produse
de enterocite i secretate n sistemul limfatic.
ARNm pentru receptorii serotoninici are 5 situsuri de editare din A n I, ce explic
polimorfismul receptorilor serotoninici, funciile fiziologice diverse ale receptorului
serotoninic n comportament sau reflecia simurilor, mecanisme diferite ale patologiei
mentale, rspunsul diferit la factorii de stress, reacia diferit la preparatele antidepresante,
etc.
Semnificaia medical a editrii ARN uman este demonstrat pe asocieri cu numeroase
boli neurologice incliznd depresia sinucidal, epilepsia, schizophrenia, scleroza
amiotrofic lateral, etc.

17

Biologie molecular Transcripia i processingul S.Capcelea

2.2 Processingul ARNt:

Produsul transcripiei preARNt conine la captele 5 i 3 secvene nucleotidice adionale,
iar unele gene ARNt pot conine un intron. Procesing-ul ARNt include urmatoarele etape:

Figura 22. Processingul ARNt (la drojdii)

nlturarea secvenelor adiionale de la capetele 5' i 3' de ctre ribozima RNazaP;

Splicing-ul inlturarea intronului din regiunea buclei anticodon;
Adugarea la captul 3' al ARNt a secvenei CCA;
Modificarea unor baze azotate apariia a 10 baze modificate (D, T, I, ):
a. Metilarea Adeninei mA; Guaninei mG;
b. Reducerea Uracilului DHU;
c. Transversia Uracilului ;
d. Dezaminarea Adeninei I.
ARNt matur este asociat cu proteine specifice pentru a fi exportat n citozol.
1.
2.
3.
4.

2.3 Processing-ul ARNr

n rezultatul transcripiei genelor ARNr se formeaz preARNr 45S i preARNr 5S.
Pre ARNr 45S interacioneaz specific cu ARNsno care regleaz clivarea i maturizarea
ARNr 18S, 5,8S i 28S.

Figura 22. Particularitile expresiei genelor ARNr.

Principalele evenimente controlate de ribozimele ARNsno sunt: (a) metilarea

ribozelor; (b) transformarea U n ; (c) clivarea preARNr, nlturarea segvenelor necodante
cu formarea ARNr matur; (d) Asocierea ARNr18S cu 33 proteine ribozomale, importate din
citoplasm, cu formarea RNP 40S subunitatea mic a ribozomului; (e) Asocierea ARNr
5,8S, 28S i 5S cu 49 proteine ribozomale i formarea RNP 60S subunitatea mare a
ribozomului.
18