CROMATINA

SEXUALĂ

Obiect: Genetică
Profesor: Daraba Oana-Maria
Student: Matcovschii Iulian
Anul II MD , Gr.III
CROMATINA SEXUALĂ
 Cromatina sexuală este un cromocentru special cu
particularităţi morfologice bine definite care ne ajuta la
stabilirea sexului genetic. 
 Din cauza ca are morfologie distincta in celule provenite de la
persoane de sex diferit (la femei crt X si la barbati crt Y)
cromatina sexuala este o forma de heterocromatina facultativa.
 In momentul fecundării gameţilor se stabileste sexul genetic
şi reprezintă configuraţia cromosomilor sexuali ai zigotului şi
implicit a fiecărei celule somatice a unui individ. 
 El este în mod normal:  XX pentru femeie; si respectiv XY
pentru bărbat. 
 Doar această configuraţie gonosomică asigură o sexualizare
normală.
 Cromatina sexuala la barbat si la femeie
 XX pentru femeie; si respectiv XY pentru bărbat. 
1. CROMATINA X
 - Cromatina X este un cromocentru, vizibil, în mod normal, în nucleii
interfazici ai celulelor aparţinând sexului feminin si rezultă prin
heterocromatinizarea unuia dintre cei doi cromosomi X.

- In anul 1961, Mary Lyon a explicat originea si semnificatia cromatinei

X prin cele trei postulate:
- postulatul 1 - cromatina X rezultă prin inactivarea si
heterocromatinizarea unuia din cei doi cromosomi X la femeie;
- postulatul 2 - inactivarea cromosomului X matern sau cromosomului
X patern se face la întâmplare şi independent în celule diferite.
- postulatul 3 - inactivarea este precoce (până în ziua 16 de viaţă
intrauterină) şi definitivă (toată viaţa);

- Metode de studiu
- Tehnicile uzuale de studiu folosesc frotiul din celulele mucoasei
bucale (testul Barr) şi frotiul din sânge periferic;
STUDIUL CROMATINEI X IN FROTIUL DE MUCOASA
BUCALA

Tehnica efectuarii frotiului

- Recoltarea - cu o lama de sticla rodata se racleaza (razuieste) fata
interna a obrazului la adulti iar la copii buza inferioara.Nu se
foloseste recoltarea superficiala deoarece contine o cantitate mare de
celule descuamate.Cea de-a doua recoltare se foloseste intinzandu-se
un frotiu celular gros pe o lama de microscop
- Fixarea frotiului - se efectueaza cu ameste de fixator, cu o durata de
30 minute - 12 ore
- Rehidratarea - constituita din patru bai succesive a 5 minute fiecare -
alcool 70 grade, alcool 50 grade, apa distilata I, apa distilata II
- Hidroliza - nu este obligatorie dar se efectueaza cu acid clorhidric
(HCL)
- Colorarea - se face cu fuxina bazica - colorant CARR
- Examinarea frotiului se face la microscopul cu imersie
 Morfologia corpuscului Barr
- condensat şi intens colorat bazofil (corpuscul BARR);
- este situat cel mai adesea periferic, lipit de faţa internă a
membranei nucleare (intranuclear);
- când este situat central trebuie diferenţiat de nucleol (rotund
şi mai mare, brun-cărămiziu în coloraţia cu verde de metil
pironină) şi de cromocentri nespecifici (mai mici sau mai mari
cu formă neregulată).
- forma: ovalară, plan convexă, discoidală sau triunghiulară;
- mărime medie: 1 micron (± 0,3);
Frecventa:
- in mod teoretic este de 100%, iar practic aproximativ 30 40%.
- Această frecvenţă reală se datoreaza: - excluderii
corpusculilor situaţi central; - calităţilor improprii ale unor
nuclei din celulele superficiale sau profunde, defecte de
colorare; - existenţei reale a celulelor cromatin - negative:
cromosomul X inactiv nu se condensează din cauza unor
condiţii metabolice generale sau celulare; - alte cauze: vârsta,
ciclu ovarian, boli, tratamente.

- Interpretarea
- Nr. corpusculi BARR = nr. cromosomi X 1
CORPUSCUL BARR
 STUDIUL CROMATINEI X IN FROTIUL
DE SANGE PERIFERIC

 - Tehnica: se evidenţiază în nucleul polimorfonuclearelor neutrofile pe

frotiuri colorate cu soluţie MAY - GRUNWALD - GIEMSA.

- aspectul cromatinei:
- apendici nucleari de tip A au formă de "băţ de tobă" (drum stick) şi
prezintă un cap ovalar sau rotund legat printr-un filament subţire de unul
din lobii nucleului PMN; -
- apendici nucleari de tip B sau noduli sesili prezintă aceeaşi mărime şi
formă ca şi apendicii nucleari de tip A dar sunt legaţi direct la nucleu printr-
o bază largă de implantare.
- culoare: intens bazofilă, iar marimea este de 1.5 microni

- Frecventa - normal la femeie: 1/38 PMN (1/6 -1/98 PMN). PMN -

polimorfonuclear

- Interpretarea 
- Nr apendici nucleari = nr cromosomi X - 1
2. CROMATINA Y
 - Originea -  aspectul interfazic al celor 2/3 distale ale braţului q al
cromosomului Y;

- Morfologie 
- este folosita quinacrina pentru colorarea si evidentierea crs Y -
corpuscul intens fluorescent (corpuscul F), ce este vizibil în nucleul
interfazic;
- mărime 0,25 microni;
- este situat liber sau lipit de membrana nucleară;

- frecvenţa:
- diferită în diferite ţesuturi ale sexului masculin: * 70 80% în
fibroblaşti; * 45% în spermatozoizi;
- corpusculul F este prezent exclusiv la bărbat într un singur exemplar;
poate fi prezent în două exemplare la persoanele cu cariotip 47,XYY.

- Interpretare
INDICATII SI LIMITE - VALOAREA PRACTICA A
TESUTULUI CROMATINEI SEXUALA
 - Indicatii
- prenatal - prin punctie amniotica se extrag celule ce permite stabilirea sexului
genetic al fatului in anomaliile gonosomale recesive (precum hemofilie sau
miopatie Duchenne) in cazul in care femeia este purtatoare a genei anormale
- la naştere - în cazul ambiguităţii sexuale la nou născuţii cu testicul nepalpabil.
si pentru precizarea sexului genetic şi punerea în concordanţă cu sexul civil;
- mai târziu: în diferite anomalii de sexualizare: - pentru precizarea sexului
genetic; - diagnosticul disgeneziilor gonadice orhitice sau ovariene - anomalii
de număr şi structură a cromosomilor sexuali.
- în medicina legală şi criminalistică: pentru precizarea provenienţei feminine
sau masculine a unor fragmente de ţesuturi, pete de sânge, fire de păr.

- Limite
- este un test subiectiv ce nu poate depista toate mozaicurile şi nici anomaliile
autosomilor;
- în multe situaţii, pentru rigurozitate necesită efectuarea cariotipului.